BG107806A - Състав, включващ камптотецинови и стилбенови производни, за лечение на рак - Google Patents

Description

Състав, включващ камптотецинови и стилбенови производни за лечение на рак [001] Това описание се основава на изгодата от приоритета на US основни патентни описания No. 60/243 341, заявено на 27. 10. 2000; 60/245 582, заявено на 06. 11.2000; и 60/250 138, заявено на 01.

12. 2000.

[002] Настоящето изобретение се отнася до терапевтични комбинации, включващи ефективно количество от камптотецин (СРТ11) с ефективно количество от стилбеново производно, като комбретастатин, за лечение на рак.

[003] Изобретението се отнася до лечението на рак, по- специално плътни тумори, по- специално, жизнеспособни едри ракови клетки и колоректален рак, в асоциация на камптотецинови производни и други противоракови лекарствени средства и приложението на такива асоции за подобряване на лечението.

[004] По- специално, изобретението се отнася до противотуморни лечения с асоциации на иринотекан (СРТ-11); Campto® ) и стилбеново производно, като комбретастатин.

[005] Колоректалният рак е водеща причина за заболяване и смъртност с около 300 000 нови случаи и 200 000 смърти в Европа и USA всяка година (Виж Р. Boyle, Some Recent Developments in the Epidemiology of Colorectal Cancer, pages 19- 34 in Management of Colorectal Cancer, Bleiberg H., Rougier P., Wilke H. J., eds, (Martin Dunitz, London 1998); and Midgley R. S., Kerr D. J., Systemic Adjuvant Chemoterapy for Colorectal Cancer, pages 126- 127 in Management of Colorectal Cancer, Bleiberg H., Rougier P., Wilke H. J., eds, (Martin Dunitz, London 1998).

• · · · ·

03/379/02/ПБ • · · · · · • · · • · · · · • · ♦ · ······· · · * · · [006] Макар около петдесет процента’от пациентите да са лекувани само оперативно, другата половина евентуално умира в резултат от метастази, което включва приблизително 25% от пациентите, при които има доказателство за метастази към времето на диагностициране.

[007] Европейски патент ЕР 137 145, включен в литературната справка, описва камптотецинови производни от формулата:

където, в частност, Ri е водород, халоген или алкил, X е хлорен атом или NR2R3 , където R₂ и R₃ които могат да бъдат еднакви или различни, може да представляват водороден атом, един незадължително заместен алкилов радикал, въглеродно или хетеро ядро, които са незадължително заместени, или алкилови радикали (незадължително заместени) формиращи, с азотният атом към който са прикрепени, хетероцикъл незадължително съдържащ друг хетероатом, избрен от 0, S и/или NR₄, R₄ като е водороден атом или алкилов радикал и в който групата Х-СО-О е локализирана в позиця 9, 10 или 11 в ядро А.

[008] Тези каптотрецинови производни са противоракови средства, които инхибират топоизомераза I, сред които иринотекан или СРТ-11, в който Х-СО-О- е [4-(1-пиперидино-1-пиперидино]

03/379/02/ПБ ft · · · · ft ft *··*· * · · · * карбонилокси, е активен принцип, който’е особено ефективен при

лечението на твърди тумори, и по- специално, колоректален рак.

[008] Европейско патентно описание ЕР 74 256 описва също други каптотецинови производни, къито са също посочени като противоракови средства, по- специално, производни на структурни аналози на структурата, дадена по- горе и в която Х-СО-О е заместена с радикал -X’-R’, за който X’ е 0 или S и R’ е водороден атом или алкилов или ацилов радикал.

[010] Описани са също и други камптотецинови производни, например, в патенти или патентни описания ЕР 56 692, ЕР 88 642, ЕР 296 612, ЕР 321 122, ЕР 325 247, ЕР 540 099, ЕР 737 686, WO 90/03 169, WO 96/37496, WO 96/38146, WO 96/38449, WO 97/00876, US 7 104 894, JP 57 116,015, JP 57 116, 074, JP 59 005,188, JP 60 019, 790, JP 01 249,777, JP 01 246,287 и JP 91 12070 или Cane. Res., 38(1997) Abst. 1526 или 95 (San Diego- 12-16 April), Cancer Res., 55(3):603-609 (1995) AFMC Int. Med. Chem. Symp. (1997) Abst. PB-56 (Seoul- 27 July1 August).

[011] Камптотециновите производни обикновено се прилагат инжекционно, по- специално интравенозно под формата на стерилен разтвор или емулсия. Камптотециновите производни, обаче, могат също да бъдат прилагани орално, под формата на твърди или течни състави.

[012] Камптотецина е цитотоксичен алкалоид, който притежава силни анти- туморни активности. Обаче, докато камптотециновите производни се считат за някои от най-мощните антитуморни вещества за колоректален рак, приложението на тези вещества може да бъде подобрено условията на клинични третирания чрез асоцииране с други антитуморни средства.

03/379/02/ПБ •· ···· «· ···· • · · · · · • ···· · · · ······· *М* * ’ * · · [013] Понастоящем е установено, че “комбинацията на камптотециново производно със стилбеново производно е специално ефективно за лечение на много твърди тумори, включително колоректален рак. Сред ефективните стилбенови производни е комбретастатин А-4, и производно на това съединение, което може да бъде наречен просто комбретастатин. И двете съединения проявяват силна активност като инхибитори на митозата, цитотоксичност, и инхибират тубулиновата полимеризация.

[014] Комбретастатин А-4 има следната формула:

Комбретастатина от това изобретение има следната формула:

ОСН₃

Тези комбретастатини са разтворими във вода и могат да бъдат използвани под формата на сол, например хидрохлорид, ацетат, фосфат, метансулфонат и други подобни.

03/379/02/ПБ • · · ·

Т · ····· ·· ₄ • · · · · ···· _ф ······· *<·*·,«· * ·· · [015] Производството на стилбенови производни, включително комбретастатин А-4, който може да бъде под формата на фармацевтично приемливи соли, хидрати и солвати, и производството на орален и/или парентерален фармацевтичен състав, съдържащ посоченото по- горе съединение, неговите инертни фармацевтично приемливи носител(и) и/или разтворител(и), са описани в US патент № 5 525 632. този патент и US патент № 5 674 906 описват, че стилбеновите производни, включително комбретастатина, когато е използван самостоятелно, имат ниска токсичност и карциностатични ефекти in vivo.

[016] Наскоро е установено, че комбинацията от камптотецин и комбрестатин значително редуцира развиването на туморния обем, което би могло да бъде предсказано от прилагане на всяко съединение самостоятелно върху заразени с тумор животни. Фактически, последователната комбинация на СРТ-11, производно на камптотецина, и стилбеновото производно, комбретастатин, е поактивна при ниска доза в сравнение с по- високата нетоксична доза от всяко отделно средство за лечението на рак, по- специално при аденокарцинома на дебелото черво. Виж Таблица IV infra.

[017] Ефективността на комбинацията може да бъде демонстрирана чрез определяне на нейния терапевтичен синергизъм. Една комбинация манифестира терапевтичен синергизъм, ако има терапевтичен супериор една спрямо друга от съставките, използвани при тяхната оптимална доза (Т. Н. Corbett et al., Cancer treatment Reports, 66, 1187 (1982)).

[018] Ефективността на една комбинация може да бъде демонстрирана също чрез сравняване на максималната толерирана доза от комбинацията с максималната толерирана доза от всяка от отделните съставки в даденото изследване. Тази ефективност може

03/379/02/ПБ да ··♦ ···· · · · · · · · бъде количествено определена, например чрез 1од₁₀ на мъртвите клетки, което се определя по следната формула:

юд₁₀ на умъртвените клетки = Т- С(дни)/ 3.32 х T_d където Т-С представлява времето на нарастване на клетките, което е средното време в дни за туморите от третираната група (Т) за достигане на предетерминираната стойност (1д например) и туморите от контролната група (С) за достигане на същата стойност, и T_d представлява времето в дни, необходимо за удвояване обема на © туморите в контролната група. (Т.Н. Corbett et al., Cancer, 40,

2660.2680 91977); F. M. Shabel et al., Cancer Drug Development, Part B, methods in Cancer Research, 17, 3-51, New York, Academic Press Inc. (1979)). Един продукт е считан за активен, ако юд₁₀ на умъртвените клетки е по-голям ат или равен на 0.7. Един продукт е считан за активен, ако юд₁₀ на умъртвените клетки е по- висок от 2.8.

[019] В настоящето изобретение, стилбеново производно, като комбретастатин, в количество достатъчно да инхибира туморната пролиферация, може да бъде използвано с камптотециново производно, като СРТ-11, и приложено на бозайници, при © необходимост от лечение, облегчаване и предотвратяване, поспециално на човек, страдащ от пролиферация на туморни клетки, за инхибиране на растежа на туморните клетки.

[020] Инхибирането пролиферацията на туморните клетки означава инхибиране на онези туморни клетки, чувствителни на терапия, включително прилагане на ефективно количество комбрестатин и ефективно количество от СРТ-11 на човешко същество, страдащо от пролиферация на туморни клетки. В един приемлив случай, това прилагане подтиска пролиферацията на

03/379/02/ПБ • · · · :·:··· ·· .

• · ····· ·· · ······· *..*·,,· ·_>β· туморни клетки или намаляване измеримия размер на туморите. В един оптимален случай, тумора претърпява пълна регресия.

[021] Както е описано по- горе, няма специални ограничения за метода на приложение на антитуморните средства от настоящето изобретение върху лекуваните бозайници. Те могат да бъдат прилагани орално или парентерално, по интравенозен, субкутанен или интрамускулен начин. За пълна ефективност, парентералното прилагане на комбретастатин, напр. интравенозно или субкутанно, чрез инфузия и др. се предпочита. По метода на приложение на фармацевтичния препарат съгласно настоящето изобретение, ф комбретастатина може да бъде прилаган субкутанно с СРТ-11 или вторият може да бъде приложен последователно в оптимален порядък. Практически, метода и последователността на приложение варират в зависимост от индивидуалното получаване на комбретастатина, индивидуалното получаване на СРТ-11, индивидуалните туморни клетки, които са лекувани, и лекуваните индивидуални гостоприемници. Оптималния метод и последователност на приложение на комбретастатина и СРТ-11 може да бъде избран от специалиста в областта с използването на рутинните техники и информацията, съдържаща се в настоящето • изобретение.

[022] Едно ефективно инхибиращо туморната пролиферация количество от комбретастатина и камптотесина означава лечебна единица, инхибираща пролиферацията на туморни клетки, чувствителни на прилагане на човек, страдащ от пролиферация на туморни клетки. Практически желаната лечебна единица варира в зависимост от индивидуалните дозиращи форми на използвания комбретастатин, използваните индивидуални дозиращи форми на СРТ-11, индивидуалните туморни клетки, които се лекуват и

03/379/02/ПБ • · · · • · ·· ···· ♦ · · · • · · · · · • · · · ···· • · · · · ·· ··· · · ·· подлаганите на лечение индивидуални гостоприемници. Оптималната лечебна единица за конкретните условия може да бъде избрана от специалиста в областта с добавяне на лечебни тест единици и информацията, съдържаща се в настоящето описание.

[023] Антитуморното средство от настоящето изобретение е фармацевтичен препарат, включващ най- малко комбретастатина и

камптотесиновото съединение както е описано по- горе, катодвете активни инградиенти могат да бъдат включени като смес във фармацевтичен препарат. Обаче, двата активни инградиента в настоящето изобретение може дъ бъдат включени поотделно във фармацевтични препарати, които да бъдат използвани последователно и в комбинация. Отбелязва се, че такъв фармацевтичен препарат, съдържащ други средства (трети и четвърти медикамент и т. н.) както и други авнтитуморни средства, може естествено да бъдат обхванати от настоящето изобретение, доколкото ефективните инградиенти, използвани в настоящето изобретение се съдържат във фармацевтичния препарат. Нещо повече, възможно е в антитуморното средство от настоящето изобретение да се съдържат и носители, разтворители и други вещества, фармацевтично приемливи за кото и да е от фармацевтичните препарати от изобретението (самостоятелен фармацевтичен препарат, съдържащ както инградиентите от настоящето изобретение, така и отделни фармацевтични препарати, всеки от които съдържа един или два от инградиентите за приложение в комбинация).

[024] Подходящи фармацевтично приемливи носители и разтворители, известни на специалиста в областта, могат да бъдат използвани като подходящи в антитуморното средство(а) от настоящето изобретение. Антитуморното средство от настоящето

03/379/02/ПБ ···· ·· ···· • · · · • · ···· · · ·

J· ·· · ···· изобретение може да бъде приложено ’по” подходящ начин

парентерално, както е описано по- горе. В този случай, антитуморното средство(а) се приготвя в една интравенозна инфузия или инжекция, заедно с фармацевтично приемливи носители по различни методи, известни на специалиста в областта. За предпочитане, фармацевтичното средство се произвежда по рутинна техника в, напр. дозиращи единиците форми и под формата на изсушена чрез охлаждане смес от два ефективни инградиента, и се изготвя във вода или друга подходяща течна инфузия при прилагането.

[025] Двадесет до 116.5 mg от комбрестатина, за предпочитане 36 до 60 mg., и 144 до 400 mg от СРТ-11, за предпочитане 240 до 400 mg от СРТ-11, могат да бъдат комбинирани във всяка доза от фармацевтичния препарат съгласно настоящето изобретение. Физиологичната фармацевтична стойност на фармацевтичния състав, използван като инжекционна или инфузионна течност е подходящо приведен по съдържанието на буфер, добре известен в областта.

[026] Настоящето изобретение е обяснено в подробности посредством предпочитаните негови варианти на изпълнение. Следва да се обясни, че те са дадени само като примери и не се предполага да ограничат изобретението.

Противотуморен ефект и тестове за безопасност [027] Ефекта на комбинацията на СРТ-11 и комбретастатин се оценява на мишка, носеща аденокарцинома на дебелото черво С51. СРТ-11 се дава орално два до пет дни орално, четири пъти дневно, при различни нива на дозата. Комбретастатина е прилага интравенозно, два пъти дневно, два до пет дни. В случаите когато се използват комбинации, три различни дози СРТ-11 се прилагат орално

03/379/02/ПБ • · ···· ·· • ·♦· • · ····· · • · · · · ··· ·*· ···· * * * » · · · два пъти дневно два до пет дни и три различни дози комбретастатин се прилагат интравенозно два пъти дневно два до пет дни.

[028] Резултатите, получени по време на изследването на отделни средства СРТ-11 и комбретастатин и едновременната комбинация СРТ-11/комбретастатин са дадени по- долу на Таблица I.

Таблица I

Комбретастатин (IV) в комбинация с СРТ-11 (орално)

Комбретастатин	СРТ-11	Log™ Умъртвени клетки	Д. Черво 51 PR1
Самостоятелни средства
-	400	1.1	-
116.5	-	1.3	5/5
Едновременна комбинация 51.5	180	1.1	3/5

Размер на тумора 400-500 mg; Td= 2.4 d

Схема: СРТ-11 4 х/дневно; Комбретастатин 2 х/ дневно за 1-5 дни

Частичен Отговор (PR¹) - Брой на тестваните мишки, които имат понижаване обема на тумора най- малко 50%; т.е., от 5 тествани мишки, 5 имат най- малко частичен отговор.

[029] Таблица 1 илюстрира ефектите на комбретастатина и СРТ11 като отделни средства, давани в техните най- високи нетоксични дози. Тя също показва, че когато противотуморните средства се дават

03/379/02/ПБ

............ .. ..

едновременно, степента на излекуване се повишава при понижени дози (45% от най- високата нетоксична доза на отделното средство). Така, ефективно лечение може да бъде давано при редуцирана токсичност.

[030] Таблица II илюстрира последователното прилагане на комбретастатин, последвано от СРТ-11.

Таблица II

Последователно комбиниране на Комбретастатин (IV) с СРТ-11 (орално)

Комбретастатина се прилага най- напред

Комбретастатин	СРТ-11	Log10 Умъртвени клетки	Д. Черво 51 PR1
60	400	Токсичен	-
	240	1.7	5/5
	144	1.5	5/5
36	400	Токсичен	-
	240	1.4	5/5
21.6	400	1.4	5/5
	240	1.4	4/5

Комбретастатин- HNTD = 116.5 mg/kg/ инжекция- доза mg/kg/% от HNTD; 60 (51%); 36(31%); 21.6 (18%). Тези дози самостоятелно не индуцират регресия.

[031] Когато комбретастатина се прилага първи, найефективната последователна комбинация е 60 mg/kg от

03/379/02/ПБ • · · · ·· ···· «.

• * · · · ·· • · · · · · фф • ·· · ···ф • ···· ·· ···* фф· _ww комбретастатина (51% HNTD), последвано от 240 mg/kg СРТ-11 (60%

HNTD), последвано от 240 mg/kg СРТ-11 (60% HNTD). Тази комбинация води до Log₁₀ на умъртвените клетки от 1.7 и частична регресия на тумор 51 на дебелото черво във всичките 5 тествани мишки. Комбинацията поради това е терапевтичен супериор и за

двете самостоятелно прилагани средства в техните оптимални дози.

[032] Докато комбретастатина, при 51% и 31% от неговите найвисоки нетоксични дози, последвани от най- високата нетоксична доза на СРТ-11 (400 mg/) е токсичен за тестваните животни, само 18% от комбретастатина в комбинация с най- високата нетоксична доза на СРТ-11 води до Log₁₀ на умъртвените клетки от 1.4 и частичен отговор във всичките 5 тествани мишки. Този Log₁₀ на умъртвените клетки е повисок от Log₁₀ на умъртвените клетки на всяко средство съответно и показва терапевтичната ефективност на тази комбинация.

[033] Изненадващо, когато се прилагат 18% комбретастатин, последвано от СРТ-11 при 60% от най- високата токсична доза, логаритъма на умъртвените клетки остава същия (1.4) и показва забележима ефективност.

[034] Таблица III по- долу показва, че последователното прилагане на СРТ-11 най- напред при неговата най- висока нетоксична доза (400 mg/kg) последвано от 36 mg/kg комбретастатин (31% от най- високата нетоксична доза) води до получаване на 1од₁₀ на умъртвените клетки от 1.9. Отново, юд₁₀ на клетките, умъртвени от най- високата нетоксична доза както на СРТ-11, така и на комбретастатина като самостоятелни средства, е 1.1 и 1.3, съответно, което показва че тази комбинация на СРТ-11, последвано от комбретастатин е синергитична.

03/379/02/ПБ

• ··· ·< ···· • · ·· •·· · ·· • · · ·· • · · ·* ··· · · ··

Таблица III

Последователна комбинация с комбретастатин (IV) и СРТ-11 (орално)

СРТ-11 се прилага най- напред

Комбретастатин	СРТ-11	Logw Умъртвени клетки	Д. Черво 51 PR2
60	400	Токсична
36		1.9	5/5
60	240	Токсична	-
36		1.4	5/5

²Частичен отговор- няма тествана мишка, която да показва понижение в обема на тумора до най- малко 50%.

[035] Комбретастатин, приложен интравенозно, и СРТ-11, приложен орално, се тестват в няколко различни схеми както е докладвано на Таблица IV. Когато е използван като самостоятелно средство, комбретастатина се прилага два пъти дневно за пет последователни дни. Когато СРТ-11 се прилага самостоятелно, той се дава веднъж дневно за четири последователни дни.

[036] Когато се прилага последователно, се използват две схеми. Когато комбретастатина се дава най- напред, той се прилага в ден 1, последвано от прилагане на СРТ-11 веднъж дневно в дните 2-5. Когато СРТ-11 е първото съединение, давано в последователността, то се прилага веднъж дневно в дните 1-4, последвано от комбретастатина в ден 5.

03/379/02/ПБ ·· ··♦· • « · · ··

Таблица IV

Комбиниране на комбретастатин (IV) с СРТ-11 (орално) при найвисоката нетоксична доза

Комбретастатин	СРТ-11	Logio Умъртвени клетки	Д. Черво 51 PR2
Самостоятелно прилагани средства
-	400	1.1	-
116.5	-	1.3	5/5
Едновременно комбиниране
51.5	180	1.1	3/5
Последователно, комбретастатин 1-и
60	240	1.7	5/5
Последователно, СРТ- 11 1-ви
36.0	400	1.9	5/5

²Частичен отговор- няма тествана мишка, която да показва понижение в обема на тумора до най- малко 50%.

[037] Таблица IV по- долу показва, че последователното прилагане на комбретастатин и СРТ-11 в какъвто и да е ред е по същество по- ефективно от която и да е от комбинациите, използвани самостоятелно или в последователна комбинация. Може да се види, че последователното комбиниране на СРТ-11/ комбретастатин е синергистично ефективно спрямо аденокарцинома на дебелото черво. Нещо повече, комбинацията на СРТ-11/ комбретастатин е повече

03/379/02/ПБ • · ···· • « ефективна при по- ниска доза от най- високата нетоксична доза от който и да е СРТ-11 или кобретастатин самостоятелно.

[038] Тези тестове показват, че комбретастатина и СРТ-11 могат да бъдат прилагани по различни начини така че да се получи максималната ефективност от съединенията, когато са използвани в комбинация. Като резултат, изобретението не се ограничава до съставите, получени чрез физично асоцииране на лекарствата, но също включва и онези, които позволяват отделно прилагане, което може да бъде едновременно или последователно.

Claims (8)

ПРЕТЕНЦИИ

1. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че включва камтотецин, или негово производно в комбинация със стилбеново производно.

2. Състав съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че стилбеновото производно е комбретастатин.

03/379/02/ПБ

3. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че включва ефективно количество от СРТ-11 в комбинация с ефективно количество комбретастатин за лечение на твърди тумори, като посоченият комбретастатин има следната формула:

4. Състав съгласно претенция 3, характеризиращ се с това, че посоченият твърд тумор е аденокарцинома на дебелото черво.

5. Синергистичен терапевтичен фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че включва ефективно количество от СРТ11 в комбинация с ефективно количество от комбретастатина от претенция 3 за лечение на твърди тумори.

6. Метод за лечение на твърди тумори, характеризиращ се с това, че включва последователно прилагане на ефективно количество от СРТ-11 в комбинация с ефективно количество комбретастатин, съгласно претенция 3.

7. Метод съгласно претенция 6, характеризиращ се с това, че дозата на СРТ-11 включва от около 180 до около 400 mg/kg и дозата комбретастатин включва около 36 mg/kg до 60 mg/kg.

© 8. Метод съгласно претенция 7, характеризиращ се с това, че комбинацията включва ниво на дозата от 240 mg/kg СРТ-11 и 60 mg/kg комбретастатин.