Perfectionnements aux antibiotiques et à leur préparation, La présente invention est relative à des perfectionnements aux antibiotiques de la série de la céphalosporine,
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ont conduit au développement d'un certain nombre de dérivés de ces derniers, possédant une activité à large spectre en
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dérivés connus jusqu'à ce jour est la substance qui s'appelle
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tivité à large spectre soient également intéressants.
Malheureusement, ces antibiotiques du type céphalosporine à large spectre ne sont pas actifs contre certains organismes importants gram négatif et, en particulier des souches d'organismes Aerobacter et Proteus. Des recherches ont montré que certains organismes du type Proteus. par exemple Pr. vul-
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type "coliforme", par exemple, du genre Aerobacter. Enterobacter. Klebsiella, Hafnia et Citrobacter produisent des enzymes qui ouvrent le noyau lactame à 4 chaînons des antibiotiques et les inactivent. Il faut comprendre que certains bactériologues décrivent les organismes Enterobacter comme étant des organismes Aerobacter' La demanderesse a utilisé le terme "Enterobactet" pour décrire des organismes non-motiles et le terme "Aerobacter" pour décrire des organismes motiles (voir "Manual for Identifi-cation of Médical Bacteria "Cowan and Steel, 1965, Cambridge Univeraity Press, England). La confirmation de ceci a été obtenue par des mesures de résonance magnétique protonique et/ou de spectres ultra-violets des composée inactivés. Il apparaît par conséquent que les antibiotiques ne sont pas capables de tuer les organismes en raison de l'action plus
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nue pas seulement la zone eff icace d'activité des antibiotiques mais réduit également l'efficacité des antibiotiques lorsqu'il y a infection simultanée par un organisme sensible
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Il résulte des recherches effectuées par la demanderesse que divers antibiotiques de type céphalosporine sont
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susmentionnées, bien qu'ils aient en général une importance moindre en tant qu'antibiotiques (en ce sens qu'ils possèdent un spectre étroit et/ou une activité d'un degré peu élevé).
La demanderesse a également constaté que des membres choisis de tels antibiotiques résistants à la p-lactamase, lorsqu'ils sont combinés aux antibiotiques à large spectre susmentionnée,
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si bien qu'ils rendent les antibiotiques à large spectre efficaces contre des organismes producteurs de p-lactamase. Ceci élève le spectre et/ou le degré d'activité des antibiotiques
à large spectre sans pour autant amoindrir leurs deux avantages principaux et importants, à savoir leur inertie relative à la pencillinase staphylococcique et leur utilité pour traiter des patients hypersensibles à la pénicilline. On a constaté, non sans surprise.,que les antibiotiques du type céphaloephorine qui sont considérablement moins susceptibles d'être dégradés
<EMI ID=9.1> contre les organismes responsables de la production des lactamases.
La présente invention a par conséquent pour objet une composition antibiotique caractérisée en ce qu'elle est constituée par (A) un antibiotique du type céphalosporine
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produite par l'organisme appelé Proteus morgani et (B) un
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tion par ladite p-lactamase, si bien que ledit antibiotique
à large spectre est protégé contre une telle dégradation et que son spectre et/ou son degré d'activité en sont améliorés.
Quant au fait de savoir si un antibiotique du type céphalosporine résistant à la P-lactamase convient pour être utilisé dans la composition selon la présente invention, ceet-ci peut être déterminé par des expériences in vitro effectuées de la manière décrite dans la suite du présent mémoire.
L'expression "antibiotique à large spectre" est uti-. lisée dans le présent mémoire dans son sens généralement ac-
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palement les organismes S. aureus (gram positif) et E. coli et Pr. mirabilis (gram négatif).
Comme antibiotiques résistants à la P-lactamase particulièrement efficaces (B) on peut citer des composés de formule:
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ou un sel de ceux-ci avec des cations non-toxique, par exemple, le sodium ou le potassium, formule dans laquelle R est
(i) un groupe aromatique carbocyclique (de préférence un groupe phényle) contenant au moins un substituant dans une position ertho, (ii) un groupe 3-aryl-5-méthyl-isoxazol-4-yle ou (iii)
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te ou le groupe azide.
L'expression "position orthe" indique une position dans le groupe immédiatement adjacente au point d'attache du groupe aromatique au groupe carbonamido dans la formule T.
D'autres composés de formule I qui peuvent être utilisés, sont ceux dans lesquels R est un groupe 3-aryl-5-mé-
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2-pyridyle ou un groupe bis-(thién-2-yl)méthyle.
L'invention englobe en tant que nouveaux composés, les composés de la formule générale suivante:
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ainsi que les sels de ces composés avec des cations non-toxiques, par exemple, le sodium ou le potassium, formule dans
<EMI ID=17.1> par un groupe alkyl inférieur thio en au moine une position ortho, phényle substitué par un groupe aralkyl inférieur
<EMI ID=18.1>
, rieur phényle, 2,4,6-trialkoxy inférieur phényle, 3-aryl-5-
<EMI ID=19.1>
<EMI ID=20.1>
est un groupe hydrocarbure bivalent, 1-acéto-
<EMI ID=21.1>
Le terme "inférieur" tel qu'utilisé dans le présent mémoire à propos des groupes alkyle, aralkyle, alkylthio, aralkylthio et alkoxy, indique que la partie alkyle de ces groupes contient de 1 à 6 et, de préférence, de 1 à 4 atomes de carbone.
L'antibiotique du type céphalosporine (A) est de préférence un composé répondant à la formule générale suivante:
<EMI ID=22.1>
<EMI ID=23.1>
thyle et R5 est un groupe acétate ou, noua forme de bétalne avec le groupe carboxyle adjacent, Py+ (où Py est un radical N-pyridyle ou N-pyridyle substitué, par exemple, nicotinamido
<EMI ID=24.1>
décrits dans les brevets britanniques n[deg.] 1 038 563 et 1 030 630. Il est particulièrement préférable d'utiliser le composé qui fait l'objet du brevet britannique n[deg.] 1 028 563 et que l'on appelle communément céphaloridine et dont le nom systématique <EMI ID=25.1>
préféré. D'autres composés de ce type que l'on peut utiliser, sont des composés qui répondent à la formule suivante:
<EMI ID=26.1>
dans laquelle R4 est choisi parmi les radicaux carbamoyle, alkyle inférieur, hydroxy, hydroxyméthyle, carboxy, earboalkoxy, alkyl inférieur carbamoyle, cyano, etc.
D'autres antibiotiques du type céphalosporine (A) de formule III que l'on peut aussi utiliser, sont la céphalothine, à savoir l'acide 3-acétoxyméthyl-7-(2'-thiénylacé-
<EMI ID=27.1>
boxylique ("céphaloglycine") décrit et revendiqué dans le brevet britannique n[deg.] 985 747.
Lorsque le groupe R dans le composé de formule R est un groupe phényle ortho-substitué, celui-ci peut être un groupe phényle mono-ortho-substitué dans lequel le aubetituant ortho est, par exemple, un groupe alkyle inférieur, aralkyle inférieur, alkyl inférieur thio, aralkyl inférieur thio, alkoxy inférieur ou un halogène, par exemple, du chlore,
<EMI ID=28.1> préférence à la structure suivante:
<EMI ID=29.1>
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rents, sont chacun des groupes alkyle inférieur, alkoxy infé-
<EMI ID=31.1>
atome d'hydrogène ou possède n'importe laquelle des significa- tions attribuées à Q et Q . Certains des composés forment
l'objet des brevets britanniques n[deg.] 951 481 et 953 696, Le
groupe R peut également être un radical a-naphtyle et ce
composé (R2 - acétate) est décrit dans le brevet des EtatsUnis d'Amérique n[deg.] 3 216 999.
Lorsque le groupe R<3> dans la formule II est un grou-
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4-ylméthyle, le groupe aryle peut, par exemple, être un radical phényle ou phényle substitué par un halogène, par exemple, du chlore ou du brome.
Le groupe alkyle 1,1-bisubstitué peut répondre à la formule suivante:
<EMI ID=33.1>
<EMI ID=34.1>
amino, amino substitué, hydroxy,alkyl inférieur thio, ou forment ensemble avec l'atome de carbone auquel ils
<EMI ID=35.1>
que contenant de l'oxygène, du soufre ou de l'azote.
Le groupe peut par conséquent être un groupe répondant à la structure suivante:
<EMI ID=36.1>
où Ar est un groupe aromatique et Z est un groupe hydro-
<EMI ID=37.1>
égal à 2, 3 ou 4, ou le groupe
<EMI ID=38.1>
<EMI ID=39.1>
Les composés des formules I et II peuvent être préparés par condensation d'un composé de formule!
<EMI ID=40.1>
<EMI ID=41.1>
la condensation du composé ainsi obtenu, si on le désire, avec un azide de métal alcalin, si l'on désire obtenir un composé dans lequel R<2> représente un groupe azide et si un composé de départ dans lequel R<2> est un groupe acétate est utilisé;
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métal alcalin pour obtenir un' composé dans lequel R2 est un groupe azide, suivie par l'élimination du groupe ester en position 4, si on le désire.
Des agents acylants de l'acide R COOH et R<3>COOH peuvent être n'importe quel agent acylant qui donne la chaine latérale voulue, par exemple, le chlorure ou bromure d'acide correspondant, un anhydride mixte dérivé de l'acide et un haloformiate d'alkyle ou l'acide libre en présence d'un carbodiimide. L'acylation est effectuée de manière appropriée dans un milieu aqueux ou dans un solvant organique convenable et, de préférence, en présence d'un agent liant les acides.
La réaction avec les azides de métaux alcalins peut être effectuée de la manière décrite dans le brevet britannique
<EMI ID=43.1>
Des combinaisons de (A) et de (B) qui sont particu- lièrement préférées sont les suivantes: (1) la céphaloridine et
<EMI ID=44.1>
4-carboxylique (ou le sel de potassium ou de sodium de celui-ci);
(2) la céphaloridine et l'acide 3-acétoxyméthyl-7-(2',4',6'triméthylbenzamido)-ceph-3-em-4-carboxylique (ou le sel de sodium ou de potassium de celui-ci) (3) la céphaloridine et <EMI ID=45.1>
ceph-3-em-4-carboxylique (ou le sel de sodium ou de potassium de celui-ci),
Les composés (A) et (B) peuvent être utilisés
en un rapport pondéral compris entre environ 95:5 et environ 5;95 d'une manière correspondante, par exemple, on peut les utiliser dans un rapport pondéral de 80:20 à 20:80. De pré-
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port pondéral allant d'environ 2:1 à environ 1:2 respectivement et, de préférence, dans un rapport d'environ 1:1. Il faut noter que même de petites quantités de composé (B) exercent un degré de protection pour le composé (A).
Les composés (A) et (B) peuvent être incorporés l'un à l'autre sous forme d'un mélange pour l'admisnistration simultanée de ceux-ci. Ainsi, si le composé (A) est normalement administré par la voie parentérale, comme c'est le cas avec la céphaloridine, les composés (A) et (B) peuvent être préparés sous forme d'un mélange sec auquel on peut ajouter de l'eau apyrogène stérile avant l'utilisation, de manière à former une solution aqueuse de la concentration voulue.
<EMI ID=47.1>
composés (A) et (B) simultanément et, si on le désire, ces composés peuvent être administrés séparément, par exemple, le composé (A) peut être administré puis on peut administrer le composé (B) ou bien on peut d'abord administrer le composé (B) et ensuite le composé (A).
En général, les doses des compositions en médecine humaine pour des adultes sont d'au moins 200 mg de composé (A) avec une quantité appropriée de composé (B) par dose, administrée, par exemple, quatre fois par jour,
Les compositions pour l'injection peuvent se présenter sous la forme d'une poudre pour la reconstitution avec un véhicule convenable, par exemple, de l'eau apyrogène, stérile ou bien elles peuvent également se présenter sous forme de solutions, de suspensions ou d'émulsions avec des véhicules aqueux ou non-aqueux et peuvent contenir des véhicules et des excipients connus dans la technique pour faciliter la formulation, tels que des agents de mise en suspension, des stabilisants, des dispersants, des solubilisants et des émuJsionnants. Comme exemples de véhicules convenables, on peut citer la solution physiologique, les huiles parentéralement acceptables et les esters huileux,
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les solvants miscibles à l'eau tels que le propylène glycol. Les agents de mise en suspension peuvent être, par exemple, le sorbitol ou la carboxyméthylcellulose pour des préparations aqueuses ou bien du stéarate d'aluminium sous forme de gel pour des véhicules huileux. Des agents de stabilisation appropriés englobent les'agents séquestrants, tels que l'édétate de sodium; des agents tamponneurs de pH, tels que le. phosphate hydrogéné disodique et le phosphate bihydrogéné sodique; des antioxydants et des agents de conservation, tels que le sulfite de sodium et le formaldéhyde-sulfoxy-
<EMI ID=49.1> on peut choisir, par exemple, divers agents tensio-actifa
de manière à obtenir des émulsions eau-dans-huile ou huiledans-eau, par exemple, le dioléate de pentaérythritol, l'oléate de propylène glycol, le monostéarate de sorbitol ou des matières colloïdales, telles que la gomme d'acacia et la gélatine.
Les compositions, lorsque cela se révèle approprié, peuvent se présenter sous une forme convenant à 4- 'absorption par le tractus gastrointestinal. Des comprimés et des capsules pour l'administration orale peuvent se présenter sous la forme de doses unitaires ou posologiques et peuvent contenir des excipients classiques, tels que des agents liants, par exemple, le sirop, la gomme d'acacia, la gélatine, le sorbi-
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le phosphate de.calcium, le sorbitol ou la glycine; des lubrifiants, par exemple, le stéarate de magnésium, le talc, le polyéthylène glycol, la silice; des agents de désintégration, par exemple, l'amidon de pommes-de terre ou des agents mouillants acceptables, tels que le lauryl sulfate de sodium. Les comprimés peuvent être enrobés par des procédés bien connus dans la technique. Des préparations liquides orales peuvent
se présenter sous la forme d'élixirs, de sirops, d'émulsions, de solutions, de suspensions aqueuses ou huileuses, etc. ou bien elles peuvent se présenter sous la forme d'un produit sec pour la reconstitution avec de l'eau ou tout autre véhicule convenable avant l'utilisation. De telles préparations liquides peuvent contenir des additifs classiques, tels que des agents de mise en suspension, par exemple, le sirop de sorbitol, la méthylcellulose, le glucose/sirop de sucre,
<EMI ID=51.1> lulose, le stéarate d'aluminium en gel ou des graisses <EMI ID=52.1>
exemple, la lécithine, le mono-oléate de sorbitan ou la gomme d'acacia; des véhicules non aqueux qui peuvent inclure des huiles commestibles, par exemple, l'huile d'amande, l'huile de coprah fractionnée, des esters huileux, le propylène glycol ou l'alcool éthylique; des agents de conser-
<EMI ID=53.1>
propyle ou de l'acide sorbiqut. Des suppositoires contiendront évidemment des bases classiques pour suppositoires,
par exemple, du beurre de cacao ou tout autre glycéride.
La composition peut également être préparée sous
des formes convenant à l'absorption à travers les membranes
des muqueuses du nez et de la gorge ou des tissus bronchiques
et peuvent par conséquent prendre la forme de poudres ou de.
<EMI ID=54.1> liquides à pulvériser ou à inhaler, des pastilles, des collutoires etc. Pour des médications pour les yeux ou les oreilles, les préparations peuvent se présenter sous la forme de capsules individuelles, sous la forme liquide ou semi-solide, ou bien elles peuvent être utilisées sous forme de gouttes, etc. Des compositions pour applications topiques, peuvent être préparées dans des bases hydrophobes ou hydrophiles, telles
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badigeonner, des poudres, etc.
En médecine vétérinaire, les compositions peuvent,. par exemple, être formulées sous forme de préparations intramammaires (cérats vétérinaires) dans des bases à libération rapide de la matière active ou dans des bases à action prolongée de la matière active.
Les compositions selon la présente invention pour l'usage en médecine humaine ou vétérinaire peuvent contenir . des ingrédients actifs supplémentaires, par exemple, d'autres antibiotiques.
La composition peut être présentée sous forme d'un emballage à deux récipients, un récipient contenant le composé (A) et l'autre récipient contenant le composé
(B).
On donne ci-dessous, à titre d'exemples seule-
ment, des procédés pour essayer ou titrer la susceptibili-
té des antibiotiques du type céphalosporine à large spectre aux p-lactamases et des procédés pour choisir les anti-
<EMI ID=56.1>
P-lactamase.
On enlève des cellules de cultures de 48 heures par centrifugation et ces cellules sont remises en suspension dans un bouillon nutritif frais jusqu'à 1/10e du vo-
<EMI ID=57.1>
pensions sont diluées avec du bouillon nutritif en doublant chaque fois la dilution et à chaque dilution on ajoute un volume égal de substrat antibiotique, si bien que chaque tube contient 4 ml de suspension et 250 pg/ml de substrat ,
<EMI ID=58.1>
tique résiduel est évalué par une large plaque (30,48 x 30,48 cm) de bio-essai. Du tube possédant la quantité la plus proche de 125 �g/ml de substrat résiduel (c'est-à-dire une inactivation de 500), on calcule la dilution cellulaire requise pour détruire les 125 �g/ml en deux heures. Pour faciliter la comparaison entre les activités de plusieurs organismes contre un substrat, ou d'un organisme contre plusieurs substrats, cette dilution cellulaire est multipliée par 125 et les résultats sont exprimés sous forme de quantité théorique de composé qu'un ml de suspension cellulaire original détruit en l'espace de 2 heures. Ce procédé de titration de l'inactivation antibiotique a été utilisé selon les connaissances de la demanderesse pour étudier des cellules vivantes subissant
la division cellulaire à des concentrations en antibiotiques suffisamment basses que pour être trouvées dans le corps.
Dans le tableau qui suit on donne l'essai in vltro de la protection donnée à la céphaloridine (87/4) contre l'attaque de P-lactamase en utilisant divers composés (B) de céphalosporine en tant que protecteurs. Les composés (B) sont testés en ce qui concerne leur sensibilité aux �-lactamases
<EMI ID=59.1>
isolé par le Dr. P.C. Fleming de The Research Institute, The Hospital for sick Children, Toronto, Canada.
La céphaloridine a été testée en parallèle et les
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ridine détruite (exprimée en �g détruits par 1 ml de suspension de cellules d'un organisme) divisée par la quantité de composé analogue détruite. Après cela, des mélanges de 250
<EMI ID=61.1>
sont testés pour déterminer si la présence du composé analogue peut protéger la céphaloridine de la destruction par les P-lactamases des mêmes organismes. Dans ce cas, les résultats sont exprimés sous forme de quantité de céphaloridine détruite, divisée par la quantité de céphaloridine détruite en présence du composé analogue. Ainsi, plus grand est le nombre donné dans le tableau, plus stable est la substance d'essai
<EMI ID=62.1>
qu'il y a résistance totale. Les composés (B) sont désignés par rapport à la formule (1) susmentionnée.
<EMI ID=63.1>
<EMI ID=64.1>
<EMI ID=65.1>
L'action bactéricide de la céphaloridine seule
<EMI ID=66.1>
morgani sont montrées dans les tableaux 2A et 2B. Les tableaux indiquent la quantité de croissance ou le pourcentage d'organismes tués à diverses périodes lorsque l'orga-
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et des substances protectrices séparément, et lorsque cet organisme E. cloacae est exposé à l'action de la céphaloridine et des substances protectrices combinées, à raison de
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2,6-dichlorophényle et 2,4,6-triméthoxyphényle combinés. La concentration inhibitrice minimale de céphaloridine contre l'organisme Pr. morgani NCTC 235 peut varier entre
500 �g/ml et 62 �g/ml.
<EMI ID=69.1>
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<EMI ID=71.1>
<EMI ID=72.1>
<EMI ID=73.1>
<EMI ID=74.1>
Le tableau 3 donne une autre série de résultats calculés sur la mime base que le tableau 1 mais en utilisant différents composés.
<EMI ID=75.1>
L'invention sera à présent illustrée par les exem-
<EMI ID=76.1>
Composition 1.
Milieu/cérat vétérinaire à action prolongée.
<EMI ID=77.1>
1.- Chauler la cire d'abeilles et l'huile d'arachide ensemble de manière à obtenir une solution et faire passer à travers un tamis en acier inoxydable,
<EMI ID=78.1>
3.- Fermer le récipient de manière à exclure les micro-organismes et maintenir à 150[deg.]C tout en agitant pendant 1 heure.
4.- Refroidir rapidement et agiter jusqu'à la température ambiante.
5.- Introduire les antibiotiques dans un mortier stérile et
-les broyer avec un peu de véhicule de manière à obtenir une pâte lisse.
6.- Ajouter lentement et davantage de base jusqu'à obtenir
le poids voulu tout en continuant à travailler le produit dans le mortier.
7.- Le produit est ensuite raffiné avec un agitateur Silverson
à pouvoir de cisaillement élevé et on le fait ensuite passer à travers un broyeur à colloïdes en acier inoxydable avant de l'introduire de manière aseptique dans des tubes stériles.
Composition 2.
Cerat vétérinaire à libération rapide du médicament.
<EMI ID=79.1>
Méthode.
<EMI ID=80.1>
ble de manière à obtenir une solution et tamiser celle-ci à travers un tamis en acier inoxydable.
2.- Ajouter le Tween 80.
<EMI ID=81.1>
re.
4.- Refroidir rapidement tout en agitant jusqu'à la température ambiante.
5.- Ensuite procéder comme pour la composition 1. Composition 3.
Injection.
Un mélange de poudres sèches stériles de
<EMI ID=82.1>
auquel on ajoute 2,0 ml d'eau stérile avant l'injection.
Méthode.
<EMI ID=83.1>
2.- Mélanger.
3.- Introduire de manière aceptique dans des fioles stériles.
On décrira dans la suite du présent mémoire la préparation des nouveaux composés de la présente invention. Les exemples qui suivent ne sont donnés qu'à des fins illustratives.
Sauf spécification contraire, les spectres ultraviolets sont des spectres pour des solutions dans un tampon au phosphate 0, 1 M à pH de 6,0; les points de fusion ont été déterminés sur un microscope A platine chaude de lotler et les rotations optiques sont données pour des solutions à environ 1 % dans du dioxanne.
EXEMPLE 1.
<EMI ID=84.1>
(préparé à partir d'a-chlorobenzaldoxime) est saponifié de manière à donner de l'acide 5-méthyl-3-phénylisoxazole-4-carbo-
<EMI ID=85.1>
de l'éthanol.
De l'acide 5-méthyl-3-phénylisoxazole-4-earboxylique
<EMI ID=86.1>
avec un excès de chlorure de thionyle (25 ml) pendant deux heures et le chlorure de thionyle est chassé par ébullition sous pression réduite de manière à donner le chlorure d'acide sous forme d'une huile. Cette huile est dissoute dans de l'acétone sèche (25 ml) et ajoutée à une solution agitée re-
<EMI ID=87.1>
l'agitation et le refroidissement sont poursuivis pendant
1 heure, après quoi on laisse le mélange réactionnel se réchauffer jusqu'à la température ambiante en l'espace de 1 heure. Après cela, on chasse l'acétone sous pression réduite et le résidu aqueux est lavé avec de l'éther diéthylique (2 x 50 ml) acidifié jusqu'à pH de 1,5 et extrait avec de l'acétate d'éthyle (2 x 75 ml). L'extrait à l'acétate d'éthyle brut est lavé avec de l'eau, séché et djstillé jusqu'à siccité sous pression réduite de manière à former un solide (6,0 g) qui est repréci-
<EMI ID=88.1>
Rf système butanol - 0,73.
EXEMPLE 2.
<EMI ID=89.1>
xazole-4'-carbonamido)-ceph-3-em-4-carboxylique (1,0 g, 2,2 m. mole; est dissous dans de l'eau (25 ml) et du bicarbonate de
<EMI ID=90.1>
sé sous pression réduite, de l'azide sodique (0,29 g, 4,4 m. mole^ est ajouté et la solution est chauffée dans un récipient
<EMI ID=91.1>
di, est lavé avec de l'acétate d'éthyle (3 x 20 ml) acidifié jusqu'à pH 1,5 et extrait avec de l'acétate d'éthyle (3 x 25 ml); l'extrait brut est lavé avec de l'eau, séché et distillé jus-
<EMI ID=92.1>
est dissous dans de l'acétate d'éthyle (50 ml), et soumis à une séparation en utilisant un tampon au phosphate à pH 5 et de l'acétate d'éthyle de manière à <EMI ID=93.1>
0,81.
<EMI ID=94.1>
ajoutée à une solution agitée d'acide 3-acétoxyméthyl-7-aminoceph-3-em-carboxylique dans de l'eau (200 ml) et de l'acétone
<EMI ID=95.1>
50 m.moles). Après 15 minutes, le reste de la solution de chlorure d'acide est ajoutée et le mélange réactionnel est agité pendant 30 minutes supplémentaires. L'acétone est chas-
<EMI ID=96.1>
à deux reprises avec de l'acétate d'éthyle. La solution aqueuse ainsi obtenue est acidifiée avec de l'acide chlorhydrique 2 N et extraite à trois reprises avec de l'acétate d'éthyle
(100 ml). Les extraits réunis lavés et séchés sont évaporés de manière à donner une mousse jaune (9,6 g). Ce produit dans
<EMI ID=97.1>
lisé dans un mélange d'acétone, d'éther et d'eau est analysé de manière à obtenir les résultats suivants:
<EMI ID=98.1>
tant une solution aqueuse par de l'azide sodique de la manière décrite dans le brevet britannique n[deg.] 1 012 943 donne le 3-azi-
<EMI ID=99.1>
méthylisoxazol-4yl carbonyle et (A) de l'acide 3-acétoxyméthyl7-amino-ceph-3-em-4-carboxylique et (B) de l'acide 7-amino-3azidométhylceph-3-em-4-carboxylique, on obtient (A) du 3-acé-
<EMI ID=100.1> <EMI ID=101.1>
De l'acide 5-méthyl-3-phénylisoxazole-4-carboxylique
(10,16 g, 50 mmoles) est chauffé au reflux dans du chlorure
de thionyle (90 ml) pendant 2heures. L'excès de chlorurede
thionyle est chassé sous vide de manière à donner du chlorure
de 5-méthyl-3-phénylisoxazole-4-carbonyle (9,2 g, 84 %) sous
forme d'un solide jaune pâle fondant à environ la température
i ambiante.
1 Le chlorured'acide (2,37 g, 10,8 mmoles) dans du
dioxane (25 ml) est lentement ajouté à une solution éthérée
de diazométhane (37,5 mmoles) préparée A partir de nitrosométhylurée et titrée par réaction avec un excès d'acide p-ni- trobenzolque) refroidie à 0-2[deg.]C. L'addition demande 2 heures,
après quoi la solution est admise à se réchauffer jusqu'à la température ambiante en l'espace d' une nuit. L'excès de diazo- méthane est encore présent. Le mélange réactionnel est évaporé
<EMI ID=102.1>
<EMI ID=103.1>
dans de l'eau (50 ml) contenant du thiosulfate de sodium
(0,94 g, 6 mmoles) et du carbonate de sodium (1,58 g, 14,8 mmo-
<EMI ID=104.1>
pendant 0,5 heure. Le.mélange est refroidi, dilué avec de l'eau
(100 ml), acidifié avec de l'acide nitrique 2N et extrait dans de l'acétate d'éthyle (4 x 75 ml). La couche organique est filtrée à travers du kieselguhr, lavée à deux reprises avec
de l'eau et ensuite avec une solution saturée de carbonate hydrogéné de sodium (75 ml). La plus grande partie de la teinte demeure dans la couche à l'acétate d'éthyle qui est lavée à
deux reprises avec de l'eau. Les couches aqueuses réunies sont acidifiées avec de l'acide chlorhydrique 2N, de manière à donner un précipité blanc qui est extrait 4 l'aide d'acétate d'éthyle (3 x 75 ml). La couche organique lavée séchée est évaporée de manière à donner une gomme jaune. (3,7 g, 81 %).
Des essais pour cristalliser la gomme n'ont pas
donné de résultat, mais après un repos d'environ 3 semaines,
une certaine solidification s'est opérée et la recristallisation dans un mélange d'acétate d'éthyle et d'éther de pétro-
<EMI ID=105.1>
<EMI ID=106.1>
moment auquel le spectre ultra-violet d'un échantillon dilué de manière convenable du mélange réactionnel indique l'absence
de la diazocétone (pas de maximum à 288 na). La suspension noire est clarifiée par filtration à travers du kieselguhr; le filtrat orange est évaporé jusqu'à obtenir une huile orange.
Une solution de cette huile dans de l'acétate d'éthyle (200 ml) est lavée successivement avec du carbonate hydrogéné de sodium saturé (3 x 100 ml), de l'eau (2 x 100 ml), de la saumure (100 ml) séchée et évaporée jusqu'à obtenir une huile (20,4 g). La dis-
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Cet ester (14,3 g, 58 mmoles) est saponifié en traitant une solution éthanolique (120 ml) avec de l'hydroxyde de potassium (6,0 g) dans de l'eau (20 ml) à la température ambiante pendant 1,5 heure. L'évaporation de la solution de teinte vin profond donne une huile rouge-brune qui est secouée avec
de l'eau (100 ml) et lavée avec de l'éther (4 x 100 ml). La couche aqueuse est recouverte d'acétate d'éthyle (100 ml) et
le pH du mélange est amené à 2 avec de l'acide chlorhydrique concentré. La couche aqueuse est ensuite extraite avec de l'acétate d'éthyle (3 x 100 ml). Les extraits organiques réunis sont re-lavés avec de l'eau et de la saumure, séchés et évaporés de manière à donner une huile jaune qui se solidifie (12 g) lorsqu'elle est ensemencée par une trace de l'acide requis obtenu de la manière susindiquée. La cristallisation
<EMI ID=108.1>
centration des liqueurs mères donne une seconde récolte
(2,2 g) de matière moins pure.
<EMI ID=109.1>
L'acide de (b) (2,8 g, 12,8 mmoles) est chauffé au reflux dans du chlorure de thionyle (25 ml) pendant 1 heure. L'excès de réactif est chassé par évaporation de manière à donner le chlorure d'acide sous forme d'une huile rougeâtre,
(2,94 g).
Le chlorure d'acide dont la quantité est croit-on de
12,5 mmoles) est dissous dans de l'acétone sèche (20 ml).Une fraction de cette solution est ajoutée goutte à goutte à une
<EMI ID=110.1>
(2,72 g, 10 "moles) dans un mélange d'acétone (.100 ml) et d'eau (100 ml) contenant du carbonate hydrogéné de sodium
(2,1 g, 25 mmoles). Dès que l'addition est terminée, le mélange réactionnel est agité pendant 15 minutes et le reste
de la solution au chlorure d'acide (5 ml) est ajouté. Le mélange réactionnel est enlevé du bain de refroidissement
et on l'agite à la température ambiante pendant 20 minutes. Le pH (5,2) est ajusté à 7,0 et l'on extrait ensuite à deux reprises avec de l'acétate d'éthyle de manière à enlever les produits neutres. La couche aqueuse est recouverte d'acétate d'éthyle .(150 ml) et acidifiée avec de l'acide chlorhydrique 2N; on effectue ensuite une extraction supplémentaire avec <EMI ID=111.1>
sont lavés avec de l'eau, séchée et évaporés de manière
à donner un solide (2,42 g, 51 %) qui est recristallisé dans de l'acétat e d'éthyle pour donner le composé indiqué
<EMI ID=112.1>
les liqueurs mères.
EXEMPLE 8.
<EMI ID=113.1>
acétamido)-ceph-3-em-4-carboxyliQue.
Une solution d'acide 7-amino-3-azidométhylceph-3. eu-4-carboxylique (5,1 g, 20 mmoles) dans de l'acétone (150 ml) et de l'eau (150 ml) contenant du carbonate hydrogéné de
<EMI ID=114.1>
goutte à goutte par une fraction (9 ml) d'une solution du chlorure d'acide (7,57 g, 25 mmoles) dans de l'acétone
(12 ml). Après agitation pendant 15 minutes le reste de la solution de chlorure d'acide est ajouté et le mélange orange est agité à la température ambiante pendant 1 heure. Le mélange réactionnel est travaillé comme décrit plus haut de
<EMI ID=115.1>
et 3,3 g, respectivement) dans de l'acétate d'éthyle. Ces produits sont traités séparément par de l'éther de manière
à enlever la chaîne latérale acide résiduelle et l'on obtient ainsi un produit total de 6,4 g, 70 % du composé indi-
<EMI ID=116.1> <EMI ID=117.1>
Du chlorure de 3-{2'-chlorophényl)-5-méthylisoxazol4-ylcarbonyle (6,96 g, 27,2 mmoles) dans du dioxane (50 ml) est lentement ajoutée à une solution de diazométhane (0,1 mole)
<EMI ID=118.1>
à se réchauffer jusqu'à la température ambiante jusqu'au lendemain. L'évaporation donne une huile jaune solvatée (7,9 g),
<EMI ID=119.1>
La diazocétone brute (9,12 g, environ 31,6 mmoles) est dissoute dans de l'éthanol sec et chaud (200 ml) et la so-
<EMI ID=120.1>
dans de l'eau, puis centrifugation de l'oxyde d'argent, lavage avec 3 fractions d�éthanol et mise en suspension dans
<EMI ID=121.1>
catalyseur, ce dégagement s'arrête rapidement et l'on ajoute davantage de catalyseur à des intervalles de 1/2 heure pendant 5 heures, puis à des intervalles de 1 heure pendant 7 heures en chauffant au reflux. Au cours de cette réaction, des spectres ultraviolets sont effectués sur des échantillons filtrés
<EMI ID=122.1>
réactionnel; l'absorption à 287 nm due à la diazocétone <EMI ID=123.1>
Un échantillon du mélange réactionnel évaporé et exami...
<EMI ID=124.1>
est retraité par des additions fréquentes d'oxyde d'argent frais au reflux jusqu'à ce qu'il ne se dégage plus d'azote.
(3 heures). Les spectres ultraviolet et infrarouge d'un
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tence d'une trace de diazocétone résiduelle. L'entièreté du mélange réactionnel est filtrée à travers du kieselguhr, le filtrat orange est évaporé jusqu'à siccité sous vide. L'huile brune ainsi obtenue dans de l'acétate d'éthyle (50 al)
<EMI ID=126.1>
porée de manière à donner l'ester éthylique sous forme d'une huile brune qui est séchée sous vide et utilisée sans autre purification (8,02 g, 91 %).
L'ester éthylique brut (8 g, 28,8 mmoles) est dissous dans de l'éthanol (60 ml) traité par une solution d'hydroxyde de potassium (3 g, environ 45 moles) dans de l'eau de manière à donner une solution rouge profond qui est conservée à la température ambiante pendant 1,5 heure. Le mélange est alors évaporé et l'huile rouge-brune est secouée avec de
<EMI ID=127.1>
ensuite extraite par de l'éther (2 x 100 ml); l'évaporation
des extraits éthérés réunis et séchés donne une huile jaune orange (0,88 g).
La couche aqueuse a été recouverte d'acétate d'éthyle (100 ml) et acidifiée jusauu'à pH de 1,5 avec de l'acide chlorhydrique concentré. La couche aqueuse a été ensuite extraite avec de l'acétate d'éthyle (2 x 50 ml). Les extraits rouge <EMI ID=128.1>
et évaporés jusqu'à donner une gpmme brun foncé. Cette matière est purifiée par trois triturations successives avec du pétrole (P.F. 40-60[deg.]C) (100 ml) contenant de l'éther
(10 � v/v) jusqu'à donner l'acide indiqué dans le titre sous forme d'un solide cristallin jaune clair (4,54 g, 63 %), P.F.
98-99[deg.]C résonance magnétique protonique (D20 avec du carbonate acide de sodium) montre des pics à 2,50 (aromatique,
<EMI ID=129.1>
exige: C - 57,1 %; H - 4,0 %; N - 5,5 %; Cl - 14,1 %. Une seconde récolte (0,63 g) a été obtenue sous forme de feuillets
<EMI ID=130.1>
ylacétique (2,2 g, 8,7 mmoles) est chauffé jusqu'au reflux avec du chlorure de thionyle (25 ml) pendant 1,5 heure. Le solvant est évaporé et l'huile résiduelle est conservée à la température ambiante sous vide poussé pendant 2 heures. Le chlorure d'acide brut (2,45 g) est dissous dans de l'acétone
(3 ml). Une fraction (2,5 ml) de cette solution est ajoutée à une solution refroidie (10[deg.]Ci et agitée d'acide 7-aminocaphalosporanique (1,9 g, 7 mmoles) dans de l'eau (50 ml)
et de l'acétone (50 ml) contenant du carbonate hydrogéné
de sodium (1,47 g, 17,5 amoles). Le mélange est agité pendant
15 minutes et le reste du chlorure d'acide est ajouté. Un solide est précipité à ce moment et le mélange est agité pendant 1,75 heure àla température ambiante. Le pH (5,2) est ajusté à 7,0 avec une solution de carbonate hydrogéné de sodium et le mélange est évaporé de manière à chasser l'acétone.
Les produite neutres sont extraits par de l'acétate d'éthyle (3 x 50 ml) et la couche aqueuse est acidifiée avec de
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La chromatographie sur papier ainsi que l'analyse infrarouge et l'analyse de la résonance magnétique protonique indiquent une contamination par l'acide de départ. Le produit brut est chauffé au reflux avec de l'éther (200 ml) pendant 15 minutes; la filtration donne un solide (2,8 g) exempt de cette contamination. La recristalisation dans de l'acétate d'éthyle donne
<EMI ID=132.1>
De l'acide 7-amino-3-azidométhylceph-3-em-4-carboxylique (2,55 g, 10 mmolea) est dissous dans de l'acétone
(50 ml) et de l'eau (50 ml) contenant du carbonate hydrogéné
<EMI ID=133.1>
tion brun clair est agitée pendant 15 minutes et on ajoute ensuite le reste de la solution de chlorure d'acide;
Le mélange est agité à la température ambiante pendant 1 heure
<EMI ID=134.1>
Une certaine partie de solide, insoluble dans les deux couches est séparée par centrifugation, la couche aqueuse est ensuite extraite dans de l'acétate d'éthyle, les extraits réunis sont lavés avec de l'eau et évaporés de manière à donner un solide (1,63 g). Le produit est porté à l'ébul-
<EMI ID=135.1>
est décanté et le solide gommeux est dissous dans de l'acétone (20 ml), filtré et le filtrat est traité par de l'eau
(50 ml) tout en chauffant. La solution claire laisse dépo-
<EMI ID=136.1>
sont recueillis et séchés sous vide sur du pentoxyde de phosphore de manière à donner le composé indiqué dans le ti-
<EMI ID=137.1>
(0,24 et 0,037 g) sont obtenues à partir des liqueurs mères et une quatrième récolte (0,4 g) est obtenue partir de l'extrait éthéré ce qui amène le rendement total à 20 %.
EXEMPLE 11.
<EMI ID=138.1>
isoxazole-4-carbony3c(6,57 g, 22,4 mmoles)dans du dioxane sec (25 ml) est ajouté à une solution agitée de diazométhane (62 moles) dans de l'éther (186 ml) tout en refroidis-
<EMI ID=139.1>
à se réchauffer jusqu'à la température ambiante et on la laisse ensuite au repos jusqu'au lendemain. Les solvants sont
<EMI ID=140.1> <EMI ID=141.1>
aliquote (0,1 ml de cette solution est diluée jusqu'à 100 ml avec de l'éthanol absolu et les spectres ultraviolets
<EMI ID=142.1>
dans de l'éthanol sec (10 ml), Le flacon est agité et après quelques minutes on observe un dégagement d'azote. Une autre partie aliquote d'oxyde d'argent est ajoutée et le mélange
<EMI ID=143.1>
que le dégagement de gaz a cessé. Une troisième fraction de suspension d'oxyde d'argent est ensuite ajoutée tout en agitant. Après une durée totale de 1 heure, une partie aliquote est diluée et soumise à une analyse afin d'obtenir un spectre
<EMI ID=144.1>
densité optique 0,79). Le procédé est répété, les additions
de suspension d'oxyde d'argent étant réalisées à des intervalles de 30 minutes. Après 3 heures, une partie aliquote diluée indique une densité optique de 0,22 à 280 nm, celle-ci diminue jusqu'à 0,08 (note: au cours de la dernière heure,
le mélange réactionnel est chauffé au reflux). Le mélange re-
<EMI ID=145.1>
jusqu'à former une huile jaune foncé qui est dissoute dans de l'acétate d'éthyle et lavée successivement avec une solution saturée de bicarbonate de sodium et de l'eau. L'extrait séché est évaporé de manière à donner de l'ester éthyli-
<EMI ID=146.1>
L'ester éthylique (4,6 g) est dissous dans de l'éthanol sec (50 ml) et une solution d'hydroxyde de potassium (2 g) dans de l'eau (6 ml) est ajoutée. La solution rouge-foncé est laissée au repos à la température ambiante pendant 1,5 heure; un solide jaune se dépose sur les côtés du flacon au cours de cette période. Le mélange réactionnel
<EMI ID=147.1>
l'eau (100 ml) et extraite dans de l'éther (3 x 50 ml). L'évaporation des extraits en question donne une huile jaune
(0,8? 9)qui n'est pas examinée davantage. La couche aqueuse rouge est recouverte d'acétate d'éthyle et acidifiée à l'aide d'acide chlorhydrique concentré jusqu'à un pH de 1,6. Les couches sont séparées et la couche aqueuse est ensuite extraite avec de l'acétate d'éthyle (2 x 50 ml). Les extraits réunis sont lavés avec de l'eau, séchés et évaporés de manière à donner un solide brun (3,07 g). La cristallisation dans de l'éthanol aqueux donne deux récoltes de cristaux (0,97 g, P.F.
<EMI ID=148.1>
La première récolte est recristallisée dans de l'acétone aqueuse de manière à donner le composé indiqué dans le titre
<EMI ID=149.1>
<EMI ID=150.1> reflux avec du chlorure de thionyle (25 ml) pendant 1,5 heure et évaporé de manière à donner le chlorure d'acide
<EMI ID=151.1>
goutte à une solution agitée refroidie (10*C) d'acide 7amino-céphalosporanique (1,57 g, 5,8 mmoles) dans de l'eau
(50 ml) contenant du carbonate hydrogéné de sodium (1,32 g,
15,7 mmoles). Le mélange est agité pendant 15 minutes après quoi le reste de la solution de chlorure d'acide est ajouté et l'agitation est poursuivie pendant 1,75 heure à la température ambiante. Le pH est ajusté à 7,0 avec de l'acétate d'éthyle (3 x 50 ml). La couche aqueuse sous acétate d'éthy-
<EMI ID=152.1>
de chlorhydrique 2N et une certaine partie d'acide 7-aminocéphalosporanique (0,24 g) est séparée par filtration. La couche aqueuse est ensuite extraite dans de l'acétate d'éthyle et les extraits sont réunis, lavés avec de l'eau, séchés et évaporés jusqu'à donner un solide orange (0,79 g). Ce produit (0,70 g) dans de l'acétate d'éthyle (30 ml) est traité par de l'éthyl hexanoate de sodium dans du butan-1-ol
(5 ml, solution à 10 % v/v) de manière à donner un solide gélatineux jaune pâle qui est recueilli et séché de manière à
<EMI ID=153.1>
carboxylate de sodium.
EXEMPLE 12.
<EMI ID=154.1>
haut. Le traitement permet la récupération de l'azide de départ (0,39 g) et d'un solide soluble dans l'acétate d'éthyle
<EMI ID=155.1>
sante. Le produit est dissous dans de l'acétate d'éthyle
(200 ml) et traité par du 2-éthyl hexanoate de sodium dans du
<EMI ID=156.1>
la chromatographie.
EXEMPLE 13.
Acide 3-acétoxyméthyl-7-(o-benzylmercapto-benzamido)ceph-3-em4-carboxylique. '
L'acide thiosalicylique est benzylé et transformé en
<EMI ID=157.1>
est mis en réaction avec de l'acide 3-acétoxyméthyl-7-amino-ceph3-em-4-carboxylique (3,0 g, 11,1 mmoles) d'une manière analogue à celle décrite dans l'exemple 1 pour donner le composé
<EMI ID=158.1>
d'éthyle 0,56.
EXEMPLE 14.
<EMI ID=159.1>
0,1 mole) dans du tétrahydrofurane sec (130 ml) à -30[deg.]C, sous atmosphère d'azote, est agitée et traitée par deux équivalents de n-butyl lithium dans de l'éther (100 ml) en l'espace de
<EMI ID=160.1>
supplémentaires puis il est refroidi à -70[deg.]C et traité à cette température avec un courant rapide d'anhydride carbonique sec, exempt d'oxygène pendant 2 heures. Le mélange réactionnel
<EMI ID=161.1>
de l'eau glacée (300 ml), séparé et la phase aqueuse est lavée avec de l'éther. La phase organique et les liqueurs de lavage à l'éther sont extraites par du carbonate hydrogéné de sodium à 3 % (100 ml) et la partie aqueuse réunie est acidifiée jusqu'à un pH de 2,5 sous éther (150 ml). La partie aqueuse est reextraite avec de l'éther (100 ml) et l'extrait réuni est lavé avec de l'eau (100 ml), séché et concentré sous vide
<EMI ID=162.1>
qui est cristallisé dans du benzène-éther (2 : 1) de manière <EMI ID=163.1>
Du 2-carboxy-2-phényl-1,3-dithiane (4,81 g, 20 mmoles), du benzène (20 ml) et du chlorure de thionyle (2,9 ml,
40 mmoles) sont chauffés ensemble au reflux pendant 1 heure. La matière volatile est chassée sous pression réduite, ce qui donne un produit solide qui est cristallisé dans du pétrole léger (P.E. 60-80?) de manière à donner du 2-chlorocarbonyl-
<EMI ID=164.1>
xylique (2,55 g, 10 mmoles) est dissous dans une solution de carbonate hydrogéné de sodium (2,1 g, 25 mmoles) dans de
<EMI ID=165.1>
agitée est refroidie jusqu'à 0-5[deg.]C et traitée par une solution de 2-chlorocarbonyl-2-phényl-1,3-dithiane (2,58 g, 10 mmoles) dans de l'acétone (16 ml) en l'espace de 2 minutes. Le mélange est agité à 0-5[deg.]C pendant 15 minutes et on ajoute ensuite une quantité supplémentaire de chlorure d'acide (0,65 g, 2,5 mmoles) dans de l'acétone (4 ml). Le mélange réactionnel est admis A revenir à la température ambiante en l'espace de 1 heure, puis il est filtré et concentré sous vide de manière à éliminer la plus grande partie de l'acétone. La solution
<EMI ID=166.1>
<EMI ID=167.1>
dépose sous forme d'un solide blanc (3,1 g, 62 %), La récris-
<EMI ID=168.1>
un pH de 2,0, suivie par une extraction à l'acétate d'éthyle donne, après lavage et de l'extrait avec de l'eau (50 al), séchage et évaporation sous vide, l'acide libre du composé indiqué dans le titre sous forme d'une mousse jaune brute.
(<1>,5 g, 31 %).
EXEMPLE 16, <EMI ID=169.1>
flux dans un séparateur d'eau de Dean-Stark pendant 18 heures. Le benzène est chassé par distillation et la solution ainsi obtenue est versée dans de l'eau (200 al), séparée, et lavée successivement avec du carbonate de sodium en solution aqueuse
<EMI ID=170.1>
<EMI ID=171.1>
lane (16,0 g, 63 mmoles) dans une solution d'hydroxyde de potas- sium alcoolique aqueuse 0,5N (1 ; 1) (200 ml) sous atmosphère d'azote est agitée à la température ambiante pendant 1 heure et ensuite au reflux pendant 1 heure supplémentaire. L'éthanol est chassé de la solution ainsi obtenue sous vide et le résidu
aqueux est dilué avec de l'eau (100 ml) et lavé avec de l'éther
(2 x 50 ml). La solution aqueuse est acidifiée jusqu'à un pH
de 3,0 sous éther (100 ml) et la partie aqueuse est re-extraite avec de l'é�her (2 x 50 ml). L'évaporation de l'extrait séché
sous vide donne du 2-carboxy-2-phényl-1,3-dithiolane qui cristallise dans du benzène-éther sous forme d'aiguilles, (11,8 g,
<EMI ID=172.1>
40 mmoles) sont chauffés ensemble au reflux pendant 1 heure. La matière volatile est chassée sous pression réduite de manière
à donner un solide rose qui cristallise dans du pétrole léger
<EMI ID=173.1> <EMI ID=174.1>
hydrogéné de sodium (2,1 g, 25 moles) dans de l'eau (40 ni} et de l'acétone (30 ml) est ajoutée. A cette solution agitée à
<EMI ID=175.1>
Le mélange est agité à 0-5*C pendant 15 minutes, puis on ajoute une quantité supplémentaire du chlorure d'acide (0,61 g, 2,5 maoles) dans de l'acétone (4 ml). Le mélange réactionnel est admis à revenir à la température ambiante en l'espace de 1 heure et le produit solide est recueilli (3,4 g, 70 %). La concen-
<EMI ID=176.1>
EXEMPLE 17.
<EMI ID=177.1>
dans un séparateur d'eau de Dean-Stark pendant 17 heures. La solution refroidie est versée dans de l'eau (75 ml) et la couche organique est séparée, lavée avec du carbonate hydrogéné de sodium en solution aqueuse saturée (50 ml) et séchée. L'élimination du solvant sous vide donne un solide blanc qui cristallise dans du pétrole léger-éther de manière à donner l'ester indiqué dans le titre (3,78 g, 85 %) sous forme de prismes P.F. 116-116,5'C, <EMI ID=178.1>
sous atmosphère d'azote est amenée lentement au reflux. Après
30 minutes, le mélange réactionnel, qui a pris une teinte bleu profond, est refroidi jusqu'à 0-5[deg.]C après quoi le sel de sodium brut du composé indiqué dans le titre se dépose sous forme d'un
<EMI ID=179.1>
forme (100 ml) et acidifiée jusqu'à un pH de 2,5 sous éther
(100 ml). La partie aqueuse est re-extraite avec de l'éther
(2 x 50 ml) et les extraits réunis sont lavés avec de l'eau
(50 ml), séchés et concentrés sous vide de manière à donner un
<EMI ID=180.1> matière est recristallisée de manière à donner un échantillon
<EMI ID=181.1> .(0,72 ml, 10 mmoles) sont chauffés ensemble reflux pendant 1 heure. Le benzène et l'excès de chlorure de thionyle sont chassés sous vide de manière à donner un solide brun pâle qui cristallise <EMI ID=182.1>
(0,66 g, 2,58 mmoles) est dissous dans une solution de carbonate hydrogéné de sodium (0,54 g, 6,44 mmoles) dans de l'eau (10 ml) et de l'acétone (10 ml) est ajoutée. A la solution agitée à
<EMI ID=183.1>
2-phénylbenz(e)-1,3-dithiépène (0,90 g, 2,58 assoies) dans de l'acétone (25 ml) en l'espace de 2 minutes. Le mélange est agité à 0-5*C pendant 15 minutes, puis on ajoute une quantité supplémentaire du chlorure d'acide (0,20 g, 0,6 mmoles) dans de l'acétone (10 ml). Le mélange réactionnel est admis à revenir
à la température ambiante en l'espace de 1/2 heure et il est ensuite concentré sous pression réduite, filtré, dilué avec de l'eau (300 ml) et lavé avec de l'acétate d'éthyle (100 ml).
La fraction aqueuse est acidifiée jusqu'à un pH de 2,5 sous acétate d'éthyle (100 ml), séparée et re-extraite avec de l'acétate d'éthyle supplémentaire (2 x 50 ml). L'extrait organique est lavé avec de l'eau (50 ml), séché et le solvant est
<EMI ID=184.1>
<EMI ID=185.1>
<EMI ID=186.1>
tone (3 ml). Le composé indiqué dans le titre est précipité à partir de cette solution par addition d'un excès d'éther, sous
<EMI ID=187.1>
dans un réfrigérateur avec de l'eau, (150 ml). Le semi-solide incolore est extrait par de l'éther (2 x 250 ml, 1 x 100 ml). Les extraits éthérés sont lavés avec de l'eau (3 x 50 ml), sèches sur du sulfate de magnésium et évaporés sous vide. Le semi-solide résiduel (10,18 g) est chauffé avec de l'eau (50 ml), refroidi jusqu'à la température ambiante et agité vigoureusement pendant plusieurs heures; après avoir été réfrigéré pendant 1 1/2 heure, le produit cristallin brut (8,92 g) est recueilli et séché sous vide. Une fraction (1,03 g) est cristal- <EMI ID=188.1>
dride dans le spectre infra-rouge; une seconde récolte cris fil! talline (384 mg) exempte de bandes anhydride dans la région infra-rouge est obtenue par concentration des liqueurs. La recristallisation de la seconde récolte donne l'acide DL-2phényl-2-aeétoxypropionique, sous forme d'aiguilles-amas
<EMI ID=189.1>
Une solution d'acide DL-2-phényl-2-acétoxypropionique
(7,83 g, 0,0376 mole) dans du benzène sec (50 ml) est traitée par du chlorure de thionyle (7,8 ml) et le mélange est chauffé au reflux pendant 1 1/4 heure. La matière volatile est chassée sous pression réduite et le produit est distillé de manière à donner du chlorure de DL-2-phényl-2-acétoxypropionyle sous forme
<EMI ID=190.1>
<EMI ID=191.1>
carboxylique (5,00 g, 0,0196 mole) dans de l'acétate d'éthyle bouillant (200 ml) est traitée par du chlorure de DL-2-phényl-2acétoxypropionyle (4,49 g, 0,198 mole) et le mélange est chauffé au reflux pendant 1 heure. La matière solide (3,4 g) est séparée par filtration du mélange réactionnel refroidi et le filtrat est traité par de l'aniline (5,36 ml) et maintenu au repos pendant 1 heure. Le mélange est extrait par une solution de carbonate hydrogéné de sodium à 3 % (3 x 100 ml), les extraits aqueux réunis sont lavés avec de l'acétate d'éthyle (3 x 100 ml) et sont ensuite acidités jusqu'à un pH de 1,5, tout en agitant, sous acétate d'éthyle (100 ml) en utilisant de l'acide chlorhydrique 2N.
La phase aqueuse est ensuite extraite avec de l'acétate d'éthyle (2 x 100 ml) lés extraits organiques réunis sont lavés avec de l'eau (2 x 50 ml) agités avec du charbon de bois, séchés sur du sulfate de magnésium et évaporés sous vide à la température ambiante pour donner une mousse jaune (5,17 g).
Une partie (3,32 g) de cette fraction acide est dissoute dans du chloroforme (15 ml) et la solution est versée dans du pé-
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solide précipité (2,60 g) est recueilli, lavé avec du pétrole
et séché sous vide. Cette matière est reprécipitée dans du chloroforme (15 ml) avec de l'éther di-isopropylique (75 ml)
de manière à donner un solide jaune pâle amorphe (756 mg) qui. est le dérivé de céphalosporine indiqué dans le titre contaminé par un peu d'acide DL-2-phényl-2-acétoxypropionique et de l'éther di-isopropylique, contamination qui est révélée par la chromatographie sur papier et la spectroscopie de résonance magnéti-
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et de chloroforme (15 ml, séché en faisant passer à travers de l'alumine WOELM baaique de qualité 1) et le mélange est chauffé
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brun clair. Cette matière est dissoute dans de l'acétate d'éthyle (45 ml), séchée en faisant passer sur de l'alumine WOELM
neutre de qualité 1) et du chlorure de 2,4,6-triméthylbenzoyle
(1,0 g) est ajouté. La solution est portée à l'ébullition au reflux pendant 1 heure, refroidie et traitée par de 1' aniline de manière à neutraliser l'excès de chlorure d'acide. Après 1 heure, le mélange est extrait par une solution à 3 % de bicarbonate de sodium. Cet extrait est lavé avec de l'acétate d'éthyle et il
est ensuite acidifié jusqu'à un pH de 1,5 avec de l'acide chlorhydrique concentré, en présence d'acétate d'éthyle. La couche aqueuse est séparée et extraite avec de l'acétate d'éthyle. Les extraits à l'acétate d'éthyle réunis sont lavée avec de l'eau et ils soit ensuite séchés sur du sulfate de magnésium. Le solvant est chassé sous vide et la mousse jaune ainsi obtenue est dissoute dans de <EMI ID=196.1>
boxylate de sodium,
En utilisant le procédé général de l'exemple 19,
<EMI ID=197.1> EXEMPLE 21.
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de sodium.
En utilisant le procède général de l'exemple 19,
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carboxylate de sodium.
En utilisant le procédé général de l'exemple 19," de
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par passage à travers une colonne d'alumine, par traitement au charbon de bois dans de l'acétate d'éthyle et par précipitation dans une solution dans du diméthylformamide, cette matière
<EMI ID=201.1> EXEMPLE 23.
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est chauffé au reflux pendant 15 minutes avec du chlorure de thionyle (2,2 ml). La solution bleu profond est évaporée et
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de l'acétate d'éthyle chauffé au reflux pendant 1 heure. Le mélange refroidi est filtré et traité par de l'aniline (5 ml). Après 10 minutes, le mélange pourpre est extrait par du carbo-
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de l'aeétate d'éthyle. Le composé indiqué dans le titre (3,56 g) est séparé dans du pétrole léger. Le sel de sodium.est séparé
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Ce composé est préparé d'une manière analogue à celle
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7-aminocephalosporanique (5,0 g). Elle possède les propriétés
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