Procédé de préparation de nouvelles pénicillines
La présente invention a pour objet un procédé de préparation de nouvelles pénicillines très actives contre certaines espèces de bactéries. Parmi ces nouvelles pénicillines, il en est qui sont actives contre des bactéries résistantes à la benzylpénicilline et à d'autres pénicillines connues et qui peuvent tre administrées par voie orale et qui sont stables en milieu acide.
Ces nouvelles pénicillines sont celles de formule
EMI1.1
ainsi que leurs sels non toxiques. Dans cette formule,
X représente un groupe carboxyle ou un ester ou un amide non toxique de celui-ci, et R un radical hétérocyclique divalent de formule
EMI1.2
dans laquelle Y représente un atome d'azote ou le groupe = CH-.
Les sels non toxiques peuvent tre des sels inorganiques, comme le sel d'ammonium ou les sels d'amines non toxiques telles que la dibenzylamine, la N, N'-dibenzyléthylènediamine, la triéthylamine, la N-benzyl-p-phényl-éthylamine et d'autres amines qui ont été employées précédemment pour former des sels de la benzylpénicilline.
Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que l'on fait réagir de 1'acide 6-amino-pénicillanique avec un agent acylant qui dérive d'un acide de formule
EMI1.3
Parmi les agents acylants utilisables, on peut citer le chlorure d'acide, le bromure d'acide, l'anhydride d'acide, l'anhydride d'acide cyclique, les anhydrides mixtes avec d'autres acides, par exemple avec l'acide éthoxyformique, et un mélange de l'acide carboxylique avec un carbodiimide, comme le 1,3 dicyclohexyl-carbodiimide.
Il n'est cependant pas possible de faire réagir l'acide 6-amino-pénicillanique avec le chlorure d'un acide de formule III ci-dessus dans laquelle X est un groupe carboxyle, ou avec le bromure d'acide ou l'anhydride d'acide correspondant, car ces halogé- nures et anhydrides d'acide comportant un groupe o-carboxyle libre ne sont pas accessibles.
L'agent acylant utilisé pour la préparation des pénicillines de formule I dépend dans une certaine mesure de la nature du groupe X. Les pénicillines dans lesquelles X est un groupe carboxyle peuvent tre préparées en acylant l'acide 6-amino-pénicil- lanique avec l'anhydride cyclique approprié.
La réac- tion peut tre effectuée dans un solvant organique inerte, par exemple le diméthylformamide, et de préférence également en présence d'un excès d'une amine tertiaire, par exemple la triéthylamine. Il est avantageux d'ajouter l'anhydride cyclique à une so lution ou suspension refroidie et agitée d'acide 6amino-pénicillanique dans du diméthylformamide et de la triéthylamine. On peut opérer en milieu anhydre ou en présence d'une faible quantité d'eau.
Ainsi, il convient d'employer l'azéotrope aqueux de la triéthylamine (90 /o en poids de base) que l'on trouve dans le commerce. Les pénicillines de formule I ci-dessus dans laquelle X est un groupe car boxyle sont préparées de préférence par la méthode utilisant l'anhydride cyclique lorsque l'on dispose d'acide 6-amino-pénicillanique solide, et non pas d'une solution aqueuse de celui-ci.
Une autre manière de mettre en ceuvre le procédé selon l'invention dans le cas où X représente un groupe carboxyle consiste à traiter un sel acide ou neutre de l'acide o-dicarboxylique hétérocyclique approprié, par exemple le sel de sodium, de potassium ou de triéthylamine, par un dhloroformiate d'alcoyle tel que le chloroformiate d'éthyle, puis de faire réagir le produit avec l'acide 6-amino-pénicillanique, de préférence sous forme d'un sel neutre tel que le sel de sodium, de potassium ou de triéthylamine.
Un mode d'exécution approprié consiste à traiter une solution du sel de l'acide o-dicarboxylique hétéro- cyclique dans un solvant miscible à 1'eau, par exemple tétrahydrofuranne, acétone ou dioxane, par du chloroformiate d'éthyle. Après avoir agité pendant environ 1 h, on verse la solution, tout en agitant, dans une solution aqueuse du sel de l'acide 6-amino pénicillanique.
Depréférence, onfait réagir un sel acide de l'acide o-dicarboxylique hétérocyclique avec une quantité équimoléculaire de chloroformiate d'éthyle, puis avec une quantité équimoléculaire du sel d'acide 6-amino-pénicillanique. On peut également faire réagir un sel neutre de l'acide o-dicarboxylique hétérocy- clique approprié avec deux fois la quantité équimoléculaire, par exemple, de chloroformiate d'éthyle, puis avec deux fois la quantité équimoléculaire du sel d'acide 6-amino-pénicillanique, mais les produits sont moins purs que ceux préparés par le mode d'exé- cution préféré.
Par chromatographie sur papier, on peut constater la présence d'éthoxypénicilline comme impureté, alors que les produits préparés par le mode d'exécution préféré n'en contiennent pas. La réaction du sel acide de l'acide o-dicarboxylique hétérocycli- que avec une quantité équimoléculaire de chloroformiate d'éthyle et une quantité équimoléculaire du sel d'acide 6-amino-pénicillanique peut s'effectuer avec formation intermédiaire de l'anhydride mixte de l'acide hétérocyclique et de l'acide éthoxyformique ou l'anhydride cyclique de l'acide hétérocyclique peut participer à la réaction.
Les nouvelles pénicillines qui comportent un reste d'ester ou d'amide non toxique relié au noyau hétéro- cyclique peuvent tre préparées en faisant réagir l'acide 6-amino-pénicillanique avec un anhydride mixte d'un semi-amide ou d'un semi-ester de l'acide o-dicarboxylique hétérocyclique approprié. Les anhydrides mixtes des acides alcoxyformiques peuvent convenir. Ces derniers peuvent tre préparés par réaction du semi-ester ou du semi-amide avec un chloroformiate d'alcoyle, comme le ohlorofonniate d'éthyle. Ce réactif peut tre utilisé d'une manière très semblable à celle décrite ci-dessus au sujet de la préparation des o-carboxy-pénicillines de formule I.
Ainsi, on peut traiter une solution du sel de triéthylamine du semi-ester ou du semi-amide dans un solvant miscible à 1'eau, par exemple tétrahydrofuranne, acétone ou dioxane, par du chloroformiate d'éthyle, pour former l'anhydride mixte du semi-dérivé et de l'acide éthoxyformique. La solution d'anhydride mixte est ensuite ajoutée à une solution aqueuse agitée d'acide 6-amino-pénicillanique, ou de préfé- rence d'un sel neutre de ce dernier, tel que le sel de sodium, de potassium ou de triéthylamine. Le sel de triéthylamine du semi-ester ou du semi-amide convient très bien, mais d'autres sels, comme les sels de sodium et de potassium, conviennent également.
On peut également effectuer l'acylation en employant un Chlorure d'acide du semi-ester ou du semi-amide à la place de l'anhydride mixte men tionné ci-dessus. Ainsi, on peut ajouter une solution du chlorure d'acide du semi-dérivé dans un solvant miscible à 1'eau à une solution aqueuse d'un sel de l'acide 6-amino-pénicillanique. Pour toutes les acylations décrites ci-dessus, une température de réaction d'environ 0o-100 C s'est avérée appropriée.
Les nouvelles pénicillines peuvent tre isolées par les techniques connues, en intercalant des traitements de purification si nécessaire. Les pénicillines peuvent tre isolées comme telles ou elles peuvent tre transformées en les sels désirés de manière connue. Les nouvelles pénicillines peuvent tre préparées à partir d'une liqueur de fermentation ou d'un concentré de cette dernière, contenant de l'acide 6amino-pénicillanique en concentration voulue.
Les pénicillines de formule I dans laquelle Y est un groupe = CH-sont obtenues sous forme d'un mélange de deux isomères dans lesquels les positions du groupe X et du groupe adjacent d'acide 6-car bamoyl-pénicillanilque sont inversées. Les deux isomères sont doués d'activité antibactérienne et le mélange peut tre employé en thérapeutique.
Les pénicillines de formule I sont très actives contre les bactéries. Elles peuvent tre employées en thérapeutique humaine et animale, spécialement pour traiter les maladies causées par les bactéries Grampositives. Un grand nombre de ces pénicillines sont stables en présence d'acides et peuvent tre administrées par voie buccale.
Beaucoup de ces pénicillines sont résistantes à la pénicillinase produite par des bactéries telles que les souches de staphylocoque doré résistantes à la benzylpénicilline. Les composés pré férés résistent aussi bien aux acides qu'à la pénicil- linase et sont des composés de grande valeur pour combattre les bactéries, en particulier les staphylocoques, qui sont résistantes aux pénicillines con nues, notamment à la benzylpénicilline. La 3-car boxy-quinoxalin-2-ylpénicilline est un composé pré féré et son sel disodique est un sel préféré.
L'activité in vitro des nouvelles pénicillines contre vingt souches de staphylocoque doré présentant diverses sensibilités à la benzylpénicilline a été déterminée comme suit : Les concentrations inhibitrices minimum approximatives ont été déterminées au moyen d'une série de dilutions triples dans du gélose nutritif, le benzylpénicillinate de sodium étant employé comme témoin dans chaque expérience. Les résultats pour trois de ces souches : A, B et C (type phage 80/81), qui sont respectivement sensible, mo dérément résistante et très résistante à la benzylpéni- cilline, sont donnés dans le tableau I.
L'activité in vivo (chez la souris) de certaines de ces pénicillines contre la souche C très résistante a été déterminée. Le composé expérimenté a été administré, par voie orale ou sous-cutanée, à des groupes de cinq à dix animaux préalablement infectés par injection intrapéritonéale de la souche C. Les doses efficaces moyennes approximatives (DE50) ont été déterminées pour les nouveaux composés et pour la benzylpénieilline dans les mmes conditions, et elles figurent dans le tableau I.
On peut voir que les nouvelles pénicillines sont beaucoup plus actives que la benzylpénicilline contre les souches très résistantes et ont une activité utile contre les souches sensibles. Les résultats montrent que l'activité in vivo des o-carboxy-pénicillines de formule I n'est pas détruite lorsque le groupe o-carboxyle est transformé en ester ou en amide.
Pour évaluer la stabilité dans les acides, on a déterminé les < demi-vies dans l'acide de certaines des nouvelles pénicillines en les faisant séjourner dans de l'éthanol aqueux au pH 1,2 et à la température de 37O C. Les résultats sont inclus dans le tableau I, et on peut voir que les stabilités dans l'acide des nouvelles pénicillines se comparent favorablement à celle de la phénoxyméthylpénicilline (160 mn) et dé- passent fortement celle de la benzylpénicilline 3 1/2 mn).
Tableau 1
Pénicilline Concentration Demi-vie DE, 50 (mg/kg
inhibitrice dans orale (0) ou
minimum in vitro l'acide sous-cutanée (S. C.)
( [tg/ml) (mn) Souche C
Souche
ABC
Benzyl > 100 (O)
(sel de sodium) 0,01 33 > 500 3,5 > 100 (S. C.) 3-carboxy-quinoxalin-2-yl 2,0 (S. C.)
(sel disodique) 0,4 0,4 0,4 267 35 (O) 3-carboxy-quinolé-2-yl
+ isomère 2,3 25 (O)
(sel de dibenzylamine) 0,4 0,4 0,4 180 < 8 (S. C.) 3-benzyloxycarbonyl
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 0,4 0,4 1,2-2,0 (S. C.) 3-méthoxycarbonyl
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 0,12 0,4 1,2 540 2,5 (S.
C.) 3-éthoxycarbonyl-
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 0,4 0,4 1,2 315 3,0 (S. C.) 3-n-propoxycarbonyl-
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 0,12 0,4 1,2 455 6,0 (S. C.) 3-isopropoxycarbonyl-
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 1,2 1,2 11, 1 810 6,0 (S.
C.) 3-butoxycarbonyl-
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 0,4 0,4 3,7-3-n-décycloxycarbonyl
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 11, 1 33, 3 100-
Pénicilline Concentration Demi-vie DE50 (mg/kg
inhibitrice dans orale (0) ou
minimum in vitro l'acide sous-cutanée (S. C.)
(. g/ml) ! (mn) Souche C
Souche
ABC 3-diéthylaminoéthoxy-
carbonyl-quinoxalin-2-yl
(sel de potassium). 0,4 1,2 3,7-
3-cyclohexyloxycarbonyl-
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium). 3,7 3,7 100 168 16,0 (S. C.)
3-phénoxycarbonyl quinoxalin-2-yl
(sel de potassium). 0,4 0,4 1,2 255 3,0 (S.
C.)
3-carbamoyl
quinoxalin-2-yl 33 (O)
(sel de potassium) 0,4 3,7 100-2, 0 (S. C.)
3-diéthylcarbamoyl quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 1,2 3,7 100-5, 0 (S. C.) 3-n-propylcarbamoyl-
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 0,4 1,2 > 100-10, 0 (S. C.) 3-pipéridinocarbonyl-
quinoxalin-2-yl
(sel de potassium). 0,4 1,2 33-10, 0 (S. C.) 3-anilinocarbonylquinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 1,2 3,7 > 100-10, 0 (S. C.) 3- [ (N-méthyl-anilino)-carbonyl]- quinoxalin-2-yl
(sel de potassium) 0,4 1,2 11, 1-6, 0 (S.
C.)
La résistance d'échantillons purs de deux des
nouvelles pénicillines et de la benzylpénicilline à
l'hydrolyse par la pénicillinase staphylococcique liée
aux cellules à 370 C et au pH 7,0 a été déterminée manométriquement par la méthode de Pollock [Bri-
tish Journal of Experimental Pathology 33,587
(1955)] légèrement modifiée. Les résultats suivants
ont été obtenus.
Tableau 11
Pénicilline Hydrolyse, exprimée en
pourcents de celle de la benzylpénicilline 3-carboxy-quinoxalin-2-yl < 0, 5/o 3-carboxy-quinolé-2-yl < 0, 51O/o
(mélange avec l'isomère 2-carboxy-quinolé-3-yl)
Bien que de nombreuses pénicillines de formule I soient absorbées par le tractus intestinal des animaux, par exemple du chien et de certaines espèces
de rongeurs, l'absorption par le tractus intestinal
de l'homme de certaines d'entre elles, par exemple
de la 3-carboxy-quinoxalin-2-yl-pénicilline, est très
lente. Ces composés sont par conséquent intéressants
pour le traitement des infections intestinales hu
maines, par exemple de l'entérocolite staphylococ
cique.
Pour le traitement général, ces pénicillines peuvent bien entendu tre administrées par voie parentérale, par exemple sous-cutanée ou intramuscu- laire.
La 3-carboxy-quinoxalin-2-yl-pénicilline s'est avé- rée particulièrement approprée pour le traitement de la mastite bovine, pour laquelle elle est de préfé- rence administrée en injection intramammaire. Les préparations préférées assurent une libération rapide de l'agent actif dans la mamelle malade, en dévelop- pant une forte concentration initiale de la pénicil- line suivie d'élimination rapide de l'antibiotique. La dispersabilité de l'agent actif est particulièrement importante dans le traitement de la mastite chronique ou sub-clinique, où il est vraisemblable que des facteurs mécaniques, par exemple de la fibrose, dimi nuent l'accessibilité des organismes pathogènes.
Ces conditions peuvent tre remplies en administrant les nouvelles pénicillines dans une base oléagineuse anhydre en association avec un agent tensio-actif approprié. Ces compositions peuvent contenir enoutre des pénicillines connues, par exemple de la benzylpéni- cilline.
Les nouvelles pénicillines peuvent tre sous forme de sels de bases inorganiques ou organiques non toxiques. Ces bases sont bien connues dans l'art de la préparation des sels d'antibiotiques acides. Les nouvelles pénicillines peuvent tre associées à d'au- tres antibiotiques tels que la benzylpénicilline. Les formes pharmaceutiques peuvent consister en pilulles, losanges, solutions ou suspensions.
Exemple 1 :
On ajoute 0,83 g (0,00416 mole) d'anhydride quinoxaline-2,3-dicarboxylique au cours de 2mn à une suspension de 0,896 g (0,00416 mole) d'acide 6amino-pénicillanique dans 2,5 ml de diméthylform- amide et 1,75 ml de triéthylamine, préalablement agitée pendant 2 h à 00 C. On continue à agiter à 0 C pendant 35 mn, on filtre la masse semi-solide et on lave le résidu avec de l'acétone sèche et de l'éther sec. On obtient ainsi le sel de bis-triéthylamine monohydrate de la 3-carboxy-quinoxalin-2-yl-pénicilline, p. f. 135-1370C (déc.) [a] 2D dans l'eau + 1420C (c = 0,376).
(Trouvé : C = 56,3 ; H = 7,4 ; S = 5,1 ; N = 13,4 If,, O = 3,3. Calculé pour CsNcOS : C = 56, 6 ; H = 7,55 ; S = ;
N = 13,2 ; HO =2, 8"'/.).
L'anhydride de l'acide 6,7-diméthyl-quinoxaline2,3-dicarboxylique peut tre transformé de manière semblable en le sel de bis triéthylamine de la 3 carboxy-6, 7-diméthyl-quinoxalin-2-yl-pénicilline, p. f.
178 C (déc.). Un dosage colorimétrique au moyen d'hydroxylamine contre un étalon de benzylpénicil- line a indiqué une pureté d'environ 94'"/o.
Exemple 2 :
On fait réagir 1,29 g (0,01 mole) d'anhydride quinoléine-2, 3-dicarboxylique avec 2,16 g (0,01 mole) d'acide 6-amino-pénicillanique dans 15 ml de dimé thylformamide et 4,2 ml de triéthylamine, en procé- dant comme décrit dans l'exemple 1. Par addition de 50 ml d'éther sec, on précipite une huile que l'on sépare et dissout dans 10 ml d'eau. On lave cette solution aqueuse avec 20 ml d'éther, on la refroidit et on l'acidule à pH 2 en la secouant en présence d'une nouvelle portion d'éther (30 ml).
On lave l'ex- trait éthéré avec deux fois 30 ml d'eau, on le sèche sur du sulfate de magnésium et on lui ajoute de la benzylamine jusqu'à ce que le pH atteigne 8,0. On filtre le précipité jaune clair, on le lave avec 20 ml d'éther sec et on le sèche sous vide sur du pentoxyde de phosphore.
On obtient ainsi un mélange isomère des sels de dibenzylamine de la 3-carboxy-quinolé-2-yl-pénicil- line et de la 2-carboxy-quinolé-3-yl-pénicilline, p. f.
154-157o C (déc.), [a] 2D dans l'eau + 141 C = 0,5). (Trouvé : C = 63,6 ; H = 5,6 ; n = 10,8. Calculé pour C\33H3UN, OGS : C = 63,0 ; H = 5,55 ; N = 11, 1 o/o).
Exemple 3 :
Dans un ballon de 21, on agite 440ml de diméthylformamide et 96 ml de l'azéotrope aqueux de la triéthylamine redistillé (p. éb. 760C, 909/o en poids de base) et on refroidit le mélange à 0-30 C.
On ajoute 43,2 g (0,2 mole) d'acide 6-amino-pénicil- lanique et on agite le mélange pendant 15 mn. On ajoute 40 g (0,2 mole) d'an ! hydride quinoxaline-2, 3dicarboxylique par portions, au cours de 2 h, et on continue à agiter à 0-3 C pendant encore 2 h, durant lesquelles le produit commence à précipiter. On ajoute 1320 ml d'acétone en agitant et on laisse reposer le mélange jusqu'au lendemain à 0-30 C. On filtre le produit, on le lave à l'acétone et on le sèche sous vide à 350 C.
On obtient ainsi le sel de bistriéthylamine monchydraté de la 3-carboxy-quinoxa lin-2-yl-pénicilline, p. f. 135-137 C (déc.)) [a] 2D=
+1380 (dans l'eau). Un dosage colorimétrique au moyen d'hydroxylamine contre un étalon de benzylpénicilline a indiqué une pureté de 110 ID/o.
Le sel disodique de cette pénicilline peut tre obtenu de la manière suivante :
On dissout 67 g du sel de bis-triéthylamine dans 200 ml d'eau distillée, on traite la solution au noir et on la filtre. On ajoute sous agitation 270 ml d'une solution saturée d'acétate de sodium, ce qui pro voque la précipitation du sel disodique. Après avoir agité pendant environ 30 mn, on filtre le produit, on l'essore autant que possible et on le lave avec de l'alcool absolu. Ensuite, on agite énergiquement le produit dans de l'alcool absolu, on le recueille sur un filtre, on l'agite à nouveau dans de l'acétone sèche, on filtre et on le lave finalement avec de l'acétone sèche. On sèche le produit sous vide à 35O C.
On obtient ainsi le sel disodique dihydraté de la 3 carboxy-quinoxalin-2-yl-pénicilline, p. f. 253-2540 C (déc.) [a] 2D + 1750 (dans l'eau).
Exemple 4 :
On ajoute sous agitation 0,7 ml (0,005 mole) de triéthylamine à une solution de 1,09 g (0,005 mole) d'acide quinoxaline-2, 3-dicarboxylique dans 50 ml de tétrahydrofuranne sec. On refroidit la solution à 00 C, on ajoute goutte à goutte 0,5 ml (0,005 mole) de chloroformiate d'éthyle et on continue à agiter à 0O C pendant 1 h. Après avoir refroidi à-300 C, on filtre le mélange pour séparer le chlorhydrate de triéthylamine et on ajoute le filtrat à une solution aqueuse de 6-amino-pénicillanate de potassium (préparée à partir de 1,08 g [0,005 mole] d'acide 6 amino-pénicillanique et 4,5 ml d'une solution 1,11 N d'hydroxyde de potassium [0,005 équivalent]).
On agite le mélange pendant 1 Va h tout en le laissant revenir à la température ordinaire. On évapore le solvant à environ 300 C/3 mm, et on chasse les dernières traces d'eau par distillation azéotropique avec 2,0 ml de n-butanol dans les mmes conditions. On sèche le résidu solide jaune sous vide, obtenant ainsi du 3-carboxy-quinoxalin-2-yl-pénicillanate de potassium. Un dosage colorimétrique au moyen d'hydroxylamine contre un étalon de benzylpénicilline a indique une pureté de 90'o/o.
Exemple 5 :
On prépare une solution de 6-amino-pénicillanate de sodium à partir de 1,4 g d'acide 6-aminopénicilla- nique, 2,5 g de bicarbonate de sodium, 25 ml d'eau et 5 ml d'acétone et on la refroidit à 0O C. A la solution agitée de 6-amino-pénicillanate de sodium, on ajoute goutte à goutte une solution de chlorure de 3-benzyl oxycarbonyl-quinoxaline-2-carbonyle (préparée en chauffant à reflux 2 g d'acide 3-benzyl-oxycarbonyl- quinoxaline-2-carboxylique avec 1,5 ml de chlorure de thionyle pendant 30 mn et en évaporant l'excès de chlorure de thionyle sous vide) dans 10 ml d'acé- tone sèche, en un laps de temps de 10 mn,
puis on maintient la température à 00 C pendant encore 5 mn.
On ajoute 5 ml de méthylisobutylcétone et on agite le mélange pendant encore 15 mn, durant lesquelles le mélange revient à la température ordinaire. On abandonne la couche organique, on recouvre la phase aqueuse de 50 ml d'éther et on l'acidule avec de l'acide chlorhydrique 2 N. On lave l'extrait éthéré avec 10 ml d'eau, on le sèche sur du sulfate de ma gnésium et on l'évapore sous pression réduite à la température ordinaire jusqu'à ce que son volume soit réduit à environ 10 ml. Par refroidissement à 0O C, on obtient un précipité blanc de 3-benzyloxycarbonyl-quinoxalin-2-yl-pénicilline, p. f. 167-170o C (déc.).
(Trouvé : C = 59,6 ; H = 4,4 ; N = 11, 3 s/o. Calculé pour C-HNlO, lS : C = 59,3 ; H = 4,35 ; N = 11,05 )/o).
Exemple 6 :
On ajoute goutte à goutte 0,5 ml de chlorofor- miate d'éthyle à une solution agitée de 1,23 g d'acide 3-é-hoxycarbonyl-quinoxaline-2-carboxylique et de 0,7 ml de triéthylamine dans 50 ml de tétrahydro- furanne sec à 00 C.
Après avoir agité à 00 C pendant 1 h, on refroidit le mélange à-300 C et on le filtre pour séparer le chlorhydrate de triéthylamine. On ajoute le filtrat à une solution aqueuse agitée de 6 amino-pénicillanate de potasisum (préparée à partir de 1, 08 g d'acide 6-amino-pénicillanique et de 4,5 ml d'une solution 1,11 N d'hydroxyde de potassium). On continue à agiter pendant 1 Il2 h, durant lesquelles on laisse revenir la solution à la température ordinaire.
On évapore le solvant à environ 300 C/3 mm et on chasse les dernières traces d'eau par distillation azéotropique avec 2,0 ml de n-butanol dans les mmes conditions. On sèche le résidu solide blanc sous vide et on obtient la 3-éthoxycarbonyl-quinoxa- lin-2-yl-pénicilline potassique brute, p. f. 210-215o C (déc.), pureté (dosage à Ilydroxylamine) environ 86 /o.
Cette méthode peut tre employée pour transformer d'autres semi-esters et des semi-amides de l'acide quinoxaline-2, 3-dicarboxylique en les sels de potassium des esters et amides suivants de la 3-carb oxy-quinoxalin-2-yl-pénicilline :
p. f., O C /o de pureté
(dé.) (dosage à
l'hydroxylamine)
Esters n-propyl-200-210 73 iso-propyl-205-210 100 butyl-150-160 71 n-décyl-230-235 73 P-diéthylamino-éthyl-200-210 94 cyclohexyl-155-156- phényl-205-210 78 benzyl-130-135 100
Amides amino-180-190 56 diéthylamino-210-215 75 n-propylamino-140-150 41 pipéridino-200-210 97 anilino-205-210 50
N-méthyl-anilino-193-199 95
Exemple 7 :
On transforme 1,16 g d'acide 3-méthoxycarbonylquinoxalin-2-carboxylique en son sel de triéthyl- amine, puis on fait réagir ce dernier avec du 6 amino-pénicillanate de potassium par la méthode dé- crite dans 1'exemple 6. Au lieu d'évaporer le solvant, on ajoute encore 20 ml d'eau et 50 ml d'éther et on secoue bien le mélange. On sépare la phase aqueuse, on la recouvre de 30 ml d'éther, on refroidit avec de la glace et on acidule avec de l'acide chlorhydrique 2 N en secouant énergiquement.
On lave l'extrait éthéré avec trois fois 30 ml d'eau puis on l'extrait avec une solution de 0,5 g de bicarbonate de sodium dans 20 ml d'eau. On abandonne la couche éthérée et on ajoute 20 ml de mé thylisobutylcétone à la phase aqueuse, que l'on refroidit ensuite avec de la glace et que l'on acidule avec de l'acide chlorhydrique 2 N en secouant éner- giquement. On sépare la couche organique, on la lave avec quatre fois 20 ml d'eau, on la sèche sur du sulfate de magnésium et on la traite par une solution de 2-éthyl-hexanoate de potassium dans de la méthylisobutylcétone (6,7 10/o poids/volume) jusqu'à ce que la solution ne se trouble pas davantage.
On recueille le précipité blanc, on le lave à l'éther sec et on le sèche sous vide sur du pentoxyde de phos phore. On obtient ainsi la 3-méthoxycarbonyl-quin- oxalin-2-yl-pénicilline, p. f. 210-220 C (déc.), pureté (dosage à l'hydroxylamine) environ 95"/o.
Les spectres d'absorption dans l'infrarouge de toutes les pénicillines préparées dans les sept exemples précédents sont caractéristiques d'un système à cycle 6-lactame.