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Glucoside obtenu à partie de la Scille maritime rouge et prooédé (le préparation de ce glucoside. on naît depuis longtemps que la variété rouge de la Scille maritime (Soilla maritima) est un poison pour les rongeurs, en. particulier pour les rats et les souris. Aux concentrations utilisées, les principes actifs de la Soille rouge sont pratiquement inoffensifs pour d'autres animaux. C'est en raison de cette propriété que ces principes présentent un si grand intérêt dans la lutte contre les rongeurs nuisibles.
Comme la teneur des produits en principes actifs toxiques pour le rat, varie énormément et dépend de plusieurs facteurs (provenance, époque de la récolte, conservation, etc.); Inefficacité des extraits bruts ou des préparations sèches n'est donc pas certaine.
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Pour concentrer le principe raticide, on a
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proposé différents procédés mais ils ne permettent pas d'obtenir un produit homogène. On stest adressé pour extraire le principe actif aux solvants suivants: l'acétone
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(F*R*Wintoni Journeof Pharmaaology and exp. Therap.3lf 123 (1927 le mélange alcool-acide acétique (I*A*Danzel; Annales d'Hygiène 1935, 677 - 701), l'eau, l'alcool méthyli- que, l'aloool aqueux (D.Ms.nn, Seifensieder Ztg. 63 721 (1936); 64t 25ôt !?2ç (1937); Franz.
P.807, 994 du 11.6.1936, àm*Po 195&977 du 29*5,,1931)i. mais le produit obtenu était mélangé à d'antres substances inertes. Des opérations de purification plus poussée de ces extraits ont, été décrites par F.H.J. Picard (Dissertation Utreoh 1936); l'auteur a
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soumis les extraits aaéùoniqueR au traitement par le plomb et chauffé le résidn sec à 105 - 1100 pour détruire les glucosides cardio-actifs. Pour finir, le principe actif fut adsorbé par du charbon activé.
D'autres aoetears, Fo.T*LeblaiLe et G,Oo Lee (Journ.Of the amerioan phaimaaeut.Association 28,151 (1939)) extraient par l'alcool à 80% l'oignon pulvérisé et retirent les substances toxiques de leur so-
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lution aqueuse par u e,r.JtQ1\ animal,
Or la Demanderesse a inventé un procédé qui permet d'isoler de la Seille maritime rouge un glucoside cristallisé, inconnu jusqu'ici et très toxique pour les rongenrs.
Pour obtenir ce glucoside, les extraits de Soille , rouge préparés par des procédés connus et qui doivent con-
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tenir le glucoside sous sa forme initiale, c'est-à-dire inaltérée, sont à leur tour extraits en présence d'eatt pary ; des solvants organiques non miscibles à l'eau ou par un mélange de ces solvants de préférence additionnas d'un alaoal contenant au moins 4 atomes de carbone.
Le nouveau procédé, qui est rationnel au point de vue technique, est fondé sur l'observation que seule
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une petite quantité de produit actif dat extractible de sa solution aqueuse par des solvanta organiques non miscibles à l'eau. Le raticide peut par contre être facilement extrait quantitativement après addition d'une quantité même faible d'un aloool contenant au moins 4 atomes de carbone ,
Ce procédé permet d'isoler de la Seille maritime rouge un glucoside cristallisé jusqu'ici inconnu, qui constitue le principe actif toxique spécifique pour les rate et autres rongeurs. Grâce à ce procédé, il devient possible de préparer des produits contenant les doses désirées de poison mêlées à d'autres ingrédients néoessai- res pour allécher les rongeurs.
Pour extraire le raticide de la Seille maritime d'une façon si possible quantitative et avec un minimum de substances étrangères, les alcools très concentrés; comme l'éthanol ou le méthanol, sont particulièrement appropriés, L'extraction par l'alcool éthylique absolu de la plante bien séchée et finement moulue permet d'obtenir une substance qui constitue un bon produit de départ pour les manipulations suivantes. Cette extraction peut se faire aussi bien à ohaud qu'à froid.
Les extraits ainsi préparés contiennent encore beaucoup de matières colorantes et d'impuretés qui entravent plus tard l'obtention du raticide à l'état cristallisé. Les résidus fortement colorés en rouge, obtenus par concentration des extraits.'sont avec avantage dissous dans l'eau et soumis, selon le procédé habituel, au traitement plombique Les matières co- lorantes sont précipitées. Le filtrat aqueux, limpide; légèrement coloré en vert jaune', contient la totalité du ratioide.
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On le traite alors, selon le procédé objet de cette demandât par des solvants organiques non miscibles à l'ean. Entrent en ligne (le compta comme solvants les hydrocarbures aoyoliques, cycliques ou aromatiques, leurs dérivés halogénés et nitrés, ensuite les éthers, éthers- sels et alcools contenant au moins 4 atomes de carbone.
Les hydrocarbures halogènes,(par exemple le chloroforme, le chlorure de méthylème, le tétrachlorure de carbone) conviennent particulièrement à la séparation du ratioide des solutions aqueuses* Quant aux alcools favorisant ltextxaotion; on accorde la préférence aux alcools butyliques, amyliques, héxyliques, benzylique, le cyclo-héxanol, etc.. et surtout à ceux dont le point d'ébul- lition est peu élevé.
Pour procéder aux extractions, la purification préalable par les métaux lourda n'est pas indispensable.
Les impuretés comme les graisses, les huiles, les produits de dégradation de couleur jaune, qui sont déjà solubles sans autre dans les dissolvants des graisses, sont éven- tuellement éliminés au cours des opérations précédentes par le chloroforme, l'éther ou l'éther de pétrole.
Quand on agite une solution aqueuse, obtenu partir de la Soille rouge, et contenant le raticide, avec du chloroforme additionné par exemple de 15 à 20% ou davantage d'alcool butylique, le raticide et les glucosi- des cardiaques de la Seille maritime, caractérisée par la réaction colorée de Liebermann, passent quantitative- ment dans le chloroforme. Le résidu obtenu par évapora- tion de la liqueur d'extraction chloroforme-alcool bu- tylique contient le ratioide qui est maintenant déjà. fortement concentré.
En général le glucoside ne se laisse pas séparer par cristallisation de ce mélange de substan- ces Il faut procéder à une extraction sélective pour
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éliminer les glucosides cardiaques présenta. Le résidu est dissous ou mis en suspension dans l'eau, et extrait avec un solvant non miscible à l'eauµ de préférence du chloroforme auquel on a aj outê jusqu'à 5% d'un alcool non miscible à 11 eau, l'alcool butylique par exemple; les autres corps restent dans la solution aqueuse.
Le produit est maintenant non seulement cône entrée mais encore débarrassé des substances entravant la cristalli- sation, au point que le glucoside cristallise par tritu- ration du résidu dévaporation avec du méthanol et un peu d'eau.
Une séparation des autres corps, suffisante pour permettre la cristallisation, est aussi obtenue par extraction directe de la solution aqueuse brute initiale au moyen de chloroforme auquel on a ajouté jusque 5% d'alcool butylique. Mais les produits obtenus sont moins purs et les rendements moins élevés.
Les extractions des solutions aqueuses au moyen de solvants organiques non miscibles à l'ear et additionnés d'alcools miscibles à l'eau. n'on pas le même pouvoir séparateur. A partir des solutions brutes, on peut bien obtenir une certaine accumulation du gluoosi- de dans la phase non aqueuse'. maia la séparation est très incomplète.
Le glucoside peut être obtenu à l'état pur par recristallisation, par exemple dans le méthanol aqueux, du produit brut cristallisé.
Le nouveau glucoside cristallisa dans le mélange alcool méthylique-eau. (1:2) en prismes inclinés ayant la forme de toit. Il est facilement soluble dans les alcools inférieurs, moins facilement dans l'acétone et difficilement dans les autres solvants.
La réaction @
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colorée de Liebermann obtenue en ajoutant, à une solution de la substance dans l'anhydride acétique, quelques gouttes d'acide sulfurique concentré, donne une coloration virant du violet au bleu, puis au bleu vert. La. réaction. de Legal au. nitro-prussiate de soude est négative, La. substance séchée sous un vide poussé, fond avec décompo- aition et ooloration en jaune à 168 - 1700 (oorr.). Le nouveau glucoside, en solution dans l'alcool méthylique dévie le plan de la lumière polarisée à gauche:
20 )oU . = - 59 ( c = 1). Il contient, oomme sucre,
D. une molécule de glucose.
L'analyse élémentaire, la déter- mination de l'équivalent par titrage avec les alcalins qui rompent le cycle lactone et éliminent un groupe aoyle, et la détermination de la teneur en sucre conduisent à la formule générale: C32H46O12, L'acétylation totale per- met de fixer 4 groupes acétyliques et donne naissance à un composé cristallisé qui répond à la formule C40H54O16 0 Ce dérivé aoétylé, dont le point de fusion est net, fond à 199 (oorr. ) sans décomposition. Son pouvoir rotatoire dans l'alcool méthylique est de : [[alpha]]20 = - 49
D (c = 1).
La dose léthale absolue pour les rats, c'est-à- dire la dose qui fait périr tous les animaux d'expérience, est de 1,6 mgr. par kg. pour les mâles et de 0,5 mgr. par kg. pour les femelles. Les chiffres correspondant pour le produit acétylé sont plus élevés, soit 5 mgr. par kg. pour les mâles et 2,5 mgr. par kg pour les femelles. Ce nouveau gluooside doit trouver emploi comme poison violent pour les rongeurs (rats, souris,etc.).
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Voici un exemple de préparation du nouveau gluooside: 100 kg. de Seille rouge fraîche coupés en tranches, sont sèches dans un courant d'air chaud (environ
60 ) et finement moulus. Pour extraire la poudre sèche (environ 20 kg.) on la brasse longuement à trois reprises avec chaque fois 50 litres dialcool absolu. Les extraits réunis rouge fonce sont évaporés à sec sous vide à basse température. Le résida, qui pèse environ 1,2 kg., est repris par 50 litres d'eau et mélangé à une suspension d'hydroxyde de plomb (environ 400 à 500 gr.), fraîchement préparée et lavée jusqu'à réaction neutre.
Après filtra- tion, la solution aqueuse limpide, légèrement colorée, est concentrée dans le vide jusquà 5 à 10 litres et extraite à cinq reprises, avec chaque fois 2 litres de chloroforme additionnés de 20% d'alcool n-butylique. Le .résida, d'extraction obtenu, par évaporation dans le vide des fractions réunies, pèse 50 à 80 gr. Le produit est légèrement coloré en jaune clair et donne une réaction de
Liebermaun bleu-verte intense. On le reprend par 2 litres d'eau qui contiennent souvent une partie de la substance en suspension. L'extraction par un litre de chloroforme élimine les substances jaunes huileuses, qui 'sont jetées.
D'autre part la saturation de la solution aqueuse par le chloroforme amène la précipitation dune grande partie des substances primitivement dissoutes. On ne tient pas on compte de ce phénomène et/extrait la solution aqueuse à
8 ou 10 reprises avec un litre de chloroforma chaque fois auquel 5% d'alcool butylique sont ajoutés. Le ratici- de passe entièrement dans la solution chloroforme-alcool butylique, les glucosides cardio-actifs restant dans la solution aqueuse.
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Le résidu de l'évaporation dans le vide des fractions réunies chloroforme-alcool butylique pèse de 10 à 50 gr. selon la teneur en glucoside de la matière première. Il est repria par la plus petite quantité possible d'alcool méthylique. et on ajoute prudemment de l'eau jusqu'à apparition à peine per- ceptible d'un léger trouble, On laisse reposer et la cristal- lisation du nouveau glucoside s'amorce quelque temps après. première Le rendement, variable avec la matière /utilisée, eat de 3 à 20 gr. La substance après purification par recristallisation dans l'alcool méthylique aqueux possède les propriétés décri- tes plus haut.
Il est bien évident que l'exemple qui précède n'est pas limitatif et qne l'on peut apporter des modifications de détail an procédé décrit sans sortir pour cela du cadre de l'invention.
REVENDICATIONS
1.Procédé de préparation d'un glucoside de la Saille maritime rouge, ce procédé consistant à prendra comme matière première les extraits de Seille maritime ronge préparés selon les méthodes connues et contenant ce glucoside sous forme inaltérée et à séparer le glucoside en présence d'eau, par des solvants organiques non miscibles à l'eau ou par un mélange de ces solvants de préférence additionnés d'un alcool conte** nant au moins 4 atomes de carbone.