<Desc/Clms Page number 1>
Glucoside obtenu à partie de la Scille maritime rouge et prooédé (le préparation de ce glucoside. on naît depuis longtemps que la variété rouge de la Scille maritime (Soilla maritima) est un poison pour les rongeurs, en. particulier pour les rats et les souris. Aux concentrations utilisées, les principes actifs de la Soille rouge sont pratiquement inoffensifs pour d'autres animaux. C'est en raison de cette propriété que ces principes présentent un si grand intérêt dans la lutte contre les rongeurs nuisibles.
Comme la teneur des produits en principes actifs toxiques pour le rat, varie énormément et dépend de plusieurs facteurs (provenance, époque de la récolte, conservation, etc.); Inefficacité des extraits bruts ou des préparations sèches n'est donc pas certaine.
<Desc/Clms Page number 2>
Pour concentrer le principe raticide, on a
EMI2.1
proposé différents procédés mais ils ne permettent pas d'obtenir un produit homogène. On stest adressé pour extraire le principe actif aux solvants suivants: l'acétone
EMI2.2
(F*R*Wintoni Journeof Pharmaaology and exp. Therap.3lf 123 (1927 le mélange alcool-acide acétique (I*A*Danzel; Annales d'Hygiène 1935, 677 - 701), l'eau, l'alcool méthyli- que, l'aloool aqueux (D.Ms.nn, Seifensieder Ztg. 63 721 (1936); 64t 25ôt !?2ç (1937); Franz.
P.807, 994 du 11.6.1936, àm*Po 195&977 du 29*5,,1931)i. mais le produit obtenu était mélangé à d'antres substances inertes. Des opérations de purification plus poussée de ces extraits ont, été décrites par F.H.J. Picard (Dissertation Utreoh 1936); l'auteur a
EMI2.3
soumis les extraits aaéùoniqueR au traitement par le plomb et chauffé le résidn sec à 105 - 1100 pour détruire les glucosides cardio-actifs. Pour finir, le principe actif fut adsorbé par du charbon activé.
D'autres aoetears, Fo.T*LeblaiLe et G,Oo Lee (Journ.Of the amerioan phaimaaeut.Association 28,151 (1939)) extraient par l'alcool à 80% l'oignon pulvérisé et retirent les substances toxiques de leur so-
EMI2.4
lution aqueuse par u e,r.JtQ1\ animal,
Or la Demanderesse a inventé un procédé qui permet d'isoler de la Seille maritime rouge un glucoside cristallisé, inconnu jusqu'ici et très toxique pour les rongenrs.
Pour obtenir ce glucoside, les extraits de Soille , rouge préparés par des procédés connus et qui doivent con-
EMI2.5
tenir le glucoside sous sa forme initiale, c'est-à-dire inaltérée, sont à leur tour extraits en présence d'eatt pary ; des solvants organiques non miscibles à l'eau ou par un mélange de ces solvants de préférence additionnas d'un alaoal contenant au moins 4 atomes de carbone.
Le nouveau procédé, qui est rationnel au point de vue technique, est fondé sur l'observation que seule
<Desc/Clms Page number 3>
une petite quantité de produit actif dat extractible de sa solution aqueuse par des solvanta organiques non miscibles à l'eau. Le raticide peut par contre être facilement extrait quantitativement après addition d'une quantité même faible d'un aloool contenant au moins 4 atomes de carbone ,
Ce procédé permet d'isoler de la Seille maritime rouge un glucoside cristallisé jusqu'ici inconnu, qui constitue le principe actif toxique spécifique pour les rate et autres rongeurs. Grâce à ce procédé, il devient possible de préparer des produits contenant les doses désirées de poison mêlées à d'autres ingrédients néoessai- res pour allécher les rongeurs.
Pour extraire le raticide de la Seille maritime d'une façon si possible quantitative et avec un minimum de substances étrangères, les alcools très concentrés; comme l'éthanol ou le méthanol, sont particulièrement appropriés, L'extraction par l'alcool éthylique absolu de la plante bien séchée et finement moulue permet d'obtenir une substance qui constitue un bon produit de départ pour les manipulations suivantes. Cette extraction peut se faire aussi bien à ohaud qu'à froid.
Les extraits ainsi préparés contiennent encore beaucoup de matières colorantes et d'impuretés qui entravent plus tard l'obtention du raticide à l'état cristallisé. Les résidus fortement colorés en rouge, obtenus par concentration des extraits.'sont avec avantage dissous dans l'eau et soumis, selon le procédé habituel, au traitement plombique Les matières co- lorantes sont précipitées. Le filtrat aqueux, limpide; légèrement coloré en vert jaune', contient la totalité du ratioide.
<Desc/Clms Page number 4>
On le traite alors, selon le procédé objet de cette demandât par des solvants organiques non miscibles à l'ean. Entrent en ligne (le compta comme solvants les hydrocarbures aoyoliques, cycliques ou aromatiques, leurs dérivés halogénés et nitrés, ensuite les éthers, éthers- sels et alcools contenant au moins 4 atomes de carbone.
Les hydrocarbures halogènes,(par exemple le chloroforme, le chlorure de méthylème, le tétrachlorure de carbone) conviennent particulièrement à la séparation du ratioide des solutions aqueuses* Quant aux alcools favorisant ltextxaotion; on accorde la préférence aux alcools butyliques, amyliques, héxyliques, benzylique, le cyclo-héxanol, etc.. et surtout à ceux dont le point d'ébul- lition est peu élevé.
Pour procéder aux extractions, la purification préalable par les métaux lourda n'est pas indispensable.
Les impuretés comme les graisses, les huiles, les produits de dégradation de couleur jaune, qui sont déjà solubles sans autre dans les dissolvants des graisses, sont éven- tuellement éliminés au cours des opérations précédentes par le chloroforme, l'éther ou l'éther de pétrole.
Quand on agite une solution aqueuse, obtenu partir de la Soille rouge, et contenant le raticide, avec du chloroforme additionné par exemple de 15 à 20% ou davantage d'alcool butylique, le raticide et les glucosi- des cardiaques de la Seille maritime, caractérisée par la réaction colorée de Liebermann, passent quantitative- ment dans le chloroforme. Le résidu obtenu par évapora- tion de la liqueur d'extraction chloroforme-alcool bu- tylique contient le ratioide qui est maintenant déjà. fortement concentré.
En général le glucoside ne se laisse pas séparer par cristallisation de ce mélange de substan- ces Il faut procéder à une extraction sélective pour
<Desc/Clms Page number 5>
éliminer les glucosides cardiaques présenta. Le résidu est dissous ou mis en suspension dans l'eau, et extrait avec un solvant non miscible à l'eauµ de préférence du chloroforme auquel on a aj outê jusqu'à 5% d'un alcool non miscible à 11 eau, l'alcool butylique par exemple; les autres corps restent dans la solution aqueuse.
Le produit est maintenant non seulement cône entrée mais encore débarrassé des substances entravant la cristalli- sation, au point que le glucoside cristallise par tritu- ration du résidu dévaporation avec du méthanol et un peu d'eau.
Une séparation des autres corps, suffisante pour permettre la cristallisation, est aussi obtenue par extraction directe de la solution aqueuse brute initiale au moyen de chloroforme auquel on a ajouté jusque 5% d'alcool butylique. Mais les produits obtenus sont moins purs et les rendements moins élevés.
Les extractions des solutions aqueuses au moyen de solvants organiques non miscibles à l'ear et additionnés d'alcools miscibles à l'eau. n'on pas le même pouvoir séparateur. A partir des solutions brutes, on peut bien obtenir une certaine accumulation du gluoosi- de dans la phase non aqueuse'. maia la séparation est très incomplète.
Le glucoside peut être obtenu à l'état pur par recristallisation, par exemple dans le méthanol aqueux, du produit brut cristallisé.
Le nouveau glucoside cristallisa dans le mélange alcool méthylique-eau. (1:2) en prismes inclinés ayant la forme de toit. Il est facilement soluble dans les alcools inférieurs, moins facilement dans l'acétone et difficilement dans les autres solvants.
La réaction @
<Desc/Clms Page number 6>
colorée de Liebermann obtenue en ajoutant, à une solution de la substance dans l'anhydride acétique, quelques gouttes d'acide sulfurique concentré, donne une coloration virant du violet au bleu, puis au bleu vert. La. réaction. de Legal au. nitro-prussiate de soude est négative, La. substance séchée sous un vide poussé, fond avec décompo- aition et ooloration en jaune à 168 - 1700 (oorr.). Le nouveau glucoside, en solution dans l'alcool méthylique dévie le plan de la lumière polarisée à gauche:
20 )oU . = - 59 ( c = 1). Il contient, oomme sucre,
D. une molécule de glucose.
L'analyse élémentaire, la déter- mination de l'équivalent par titrage avec les alcalins qui rompent le cycle lactone et éliminent un groupe aoyle, et la détermination de la teneur en sucre conduisent à la formule générale: C32H46O12, L'acétylation totale per- met de fixer 4 groupes acétyliques et donne naissance à un composé cristallisé qui répond à la formule C40H54O16 0 Ce dérivé aoétylé, dont le point de fusion est net, fond à 199 (oorr. ) sans décomposition. Son pouvoir rotatoire dans l'alcool méthylique est de : [[alpha]]20 = - 49
D (c = 1).
La dose léthale absolue pour les rats, c'est-à- dire la dose qui fait périr tous les animaux d'expérience, est de 1,6 mgr. par kg. pour les mâles et de 0,5 mgr. par kg. pour les femelles. Les chiffres correspondant pour le produit acétylé sont plus élevés, soit 5 mgr. par kg. pour les mâles et 2,5 mgr. par kg pour les femelles. Ce nouveau gluooside doit trouver emploi comme poison violent pour les rongeurs (rats, souris,etc.).
@
<Desc/Clms Page number 7>
Voici un exemple de préparation du nouveau gluooside: 100 kg. de Seille rouge fraîche coupés en tranches, sont sèches dans un courant d'air chaud (environ
60 ) et finement moulus. Pour extraire la poudre sèche (environ 20 kg.) on la brasse longuement à trois reprises avec chaque fois 50 litres dialcool absolu. Les extraits réunis rouge fonce sont évaporés à sec sous vide à basse température. Le résida, qui pèse environ 1,2 kg., est repris par 50 litres d'eau et mélangé à une suspension d'hydroxyde de plomb (environ 400 à 500 gr.), fraîchement préparée et lavée jusqu'à réaction neutre.
Après filtra- tion, la solution aqueuse limpide, légèrement colorée, est concentrée dans le vide jusquà 5 à 10 litres et extraite à cinq reprises, avec chaque fois 2 litres de chloroforme additionnés de 20% d'alcool n-butylique. Le .résida, d'extraction obtenu, par évaporation dans le vide des fractions réunies, pèse 50 à 80 gr. Le produit est légèrement coloré en jaune clair et donne une réaction de
Liebermaun bleu-verte intense. On le reprend par 2 litres d'eau qui contiennent souvent une partie de la substance en suspension. L'extraction par un litre de chloroforme élimine les substances jaunes huileuses, qui 'sont jetées.
D'autre part la saturation de la solution aqueuse par le chloroforme amène la précipitation dune grande partie des substances primitivement dissoutes. On ne tient pas on compte de ce phénomène et/extrait la solution aqueuse à
8 ou 10 reprises avec un litre de chloroforma chaque fois auquel 5% d'alcool butylique sont ajoutés. Le ratici- de passe entièrement dans la solution chloroforme-alcool butylique, les glucosides cardio-actifs restant dans la solution aqueuse.
@
<Desc/Clms Page number 8>
Le résidu de l'évaporation dans le vide des fractions réunies chloroforme-alcool butylique pèse de 10 à 50 gr. selon la teneur en glucoside de la matière première. Il est repria par la plus petite quantité possible d'alcool méthylique. et on ajoute prudemment de l'eau jusqu'à apparition à peine per- ceptible d'un léger trouble, On laisse reposer et la cristal- lisation du nouveau glucoside s'amorce quelque temps après. première Le rendement, variable avec la matière /utilisée, eat de 3 à 20 gr. La substance après purification par recristallisation dans l'alcool méthylique aqueux possède les propriétés décri- tes plus haut.
Il est bien évident que l'exemple qui précède n'est pas limitatif et qne l'on peut apporter des modifications de détail an procédé décrit sans sortir pour cela du cadre de l'invention.
REVENDICATIONS
1.Procédé de préparation d'un glucoside de la Saille maritime rouge, ce procédé consistant à prendra comme matière première les extraits de Seille maritime ronge préparés selon les méthodes connues et contenant ce glucoside sous forme inaltérée et à séparer le glucoside en présence d'eau, par des solvants organiques non miscibles à l'eau ou par un mélange de ces solvants de préférence additionnés d'un alcool conte** nant au moins 4 atomes de carbone.
<Desc / Clms Page number 1>
Glucoside obtained from the red sea scilla and process (the preparation of this glucoside. The red variety of the sea scilla (Soilla maritima) has long been born to be a poison for rodents, in particular for rats and mice At the concentrations used, the active ingredients of Red Soille are practically harmless to other animals and it is because of this property that these principles are of such great interest in the control of harmful rodents.
As the content of the products in active ingredients toxic for the rat, varies enormously and depends on several factors (origin, time of harvest, conservation, etc.); The ineffectiveness of crude extracts or dry preparations is therefore not certain.
<Desc / Clms Page number 2>
To concentrate the rat poison principle, we have
EMI2.1
proposed different processes but they do not make it possible to obtain a homogeneous product. To extract the active principle, we are sent to the following solvents: acetone
EMI2.2
(F * R * Wintoni Journeof Pharmaaology and exp. Therap.3lf 123 (1927 the alcohol-acetic acid mixture (I * A * Danzel; Annales d'Hygiène 1935, 677 - 701), water, methyl alcohol that, the aqueous alool (D.Ms.nn, Seifensieder Ztg. 63 721 (1936); 64t 25ôt!? 2ç (1937); Franz.
P.807, 994 of 11.6.1936, at m * Po 195 & 977 of 29 * 5,, 1931) i. but the product obtained was mixed with other inert substances. Further purification operations of these extracts have been described by F.H.J. Picard (Utreoh Dissertation 1936); the author has
EMI2.3
subjected the aaéùonic extracts to the treatment with lead and heated the dry residue to 105 - 1100 to destroy the cardioactive glucosides. Finally, the active principle was adsorbed by activated carbon.
Other aoetears, Fo.T * LeblaiLe and G, Oo Lee (Journ.Of the amerioan phaimaaeut.Association 28,151 (1939)) extract with 80% alcohol the pulverized onion and remove the toxic substances from their soil.
EMI2.4
aqueous lution by u e, r.JtQ1 \ animal,
Now, the Applicant has invented a process which makes it possible to isolate from red maritime Seille a crystallized glucoside, hitherto unknown and very toxic to gnaws.
To obtain this glucoside, the extracts of Soille, rouge prepared by known methods and which must
EMI2.5
holding the glucoside in its initial form, that is to say unaltered, are in turn extracted in the presence of eat pary; organic solvents immiscible with water or by a mixture of these solvents, preferably with the addition of an alaoal containing at least 4 carbon atoms.
The new process, which is technically rational, is based on the observation that only
<Desc / Clms Page number 3>
a small quantity of active product which can be extracted from its aqueous solution with organic solvents which are immiscible with water. Rat poison can, on the other hand, be easily extracted quantitatively after adding even a small amount of an aloool containing at least 4 carbon atoms,
This process makes it possible to isolate from the maritime red Seille a crystallized glucoside hitherto unknown, which constitutes the active ingredient specific to spleen and other rodents. Thanks to this process, it becomes possible to prepare products containing the desired doses of poison mixed with other neo-test ingredients to tempt rodents.
To extract rat poison from maritime Seille in a quantitative way if possible and with a minimum of foreign substances, very concentrated alcohols; such as ethanol or methanol, are particularly suitable. Extraction with absolute ethyl alcohol of the well-dried and finely ground plant makes it possible to obtain a substance which constitutes a good starting product for the following manipulations. This extraction can be done both hot and cold.
The extracts thus prepared still contain a lot of coloring matter and impurities which later hinder the obtaining of rat poison in the crystallized state. Residues strongly colored in red, obtained by concentrating the extracts, are advantageously dissolved in water and subjected, according to the usual process, to the lead treatment. The coloring matters are precipitated. The aqueous filtrate, clear; slightly colored yellow green ', contains all of the ratioide.
<Desc / Clms Page number 4>
It is then treated, according to the process which is the subject of this application, with organic solvents which are immiscible with water. Enter in line (counted as solvents aoyolic, cyclic or aromatic hydrocarbons, their halogenated and nitrated derivatives, then ethers, ethers-salts and alcohols containing at least 4 carbon atoms.
Halogenated hydrocarbons (for example chloroform, methylem chloride, carbon tetrachloride) are particularly suitable for the separation of the ratioide from aqueous solutions. As for alcohols promoting ltextxaotion; Preference is given to butyl, amyl, hexyl, benzyl, cyclohexanol, etc. alcohols, and especially those with a low boiling point.
To proceed with the extractions, prior purification with the lourda metals is not essential.
Impurities such as fats, oils, degradation products of yellow color, which are already soluble without other in the grease solvents, are possibly removed during the previous operations by chloroform, ether or ether of oil.
When an aqueous solution, obtained from Red Soille, and containing rat poison, is stirred with chloroform added, for example, from 15 to 20% or more butyl alcohol, rat poison and the cardiac glycosides of Maritime Seille, characterized by the color Liebermann reaction, pass quantitatively into chloroform. The residue obtained by evaporating the chloroform-butyl alcohol extraction liquor contains the ratioide which is now already there. highly concentrated.
In general, the glucoside does not allow itself to be separated by crystallization from this mixture of substances. A selective extraction must be carried out in order to
<Desc / Clms Page number 5>
eliminate cardiac glycosides presented. The residue is dissolved or suspended in water, and extracted with a water-immiscible solvent, preferably chloroform, to which up to 5% of a water-immiscible alcohol has been added. butyl alcohol for example; the other bodies remain in the aqueous solution.
The product is now not only cone entered but also freed from substances hindering crystallization, to the point that the glucoside crystallizes by triturating the evaporation residue with methanol and a little water.
A separation from the other bodies, sufficient to allow crystallization, is also obtained by direct extraction of the initial crude aqueous solution by means of chloroform to which up to 5% butyl alcohol has been added. But the products obtained are less pure and the yields lower.
Extractions from aqueous solutions using organic solvents immiscible with water and added with water-miscible alcohols. we do not have the same separating power. From the crude solutions some accumulation of the gluoside in the non-aqueous phase may well be obtained. but the separation is very incomplete.
The glucoside can be obtained in the pure state by recrystallization, for example from aqueous methanol, of the crystallized crude product.
The new glucoside crystallized in the methyl alcohol-water mixture. (1: 2) in inclined prisms having the shape of a roof. It is easily soluble in lower alcohols, less easily in acetone and difficult in other solvents.
The reaction @
<Desc / Clms Page number 6>
Liebermann's stain obtained by adding a few drops of concentrated sulfuric acid to a solution of the substance in acetic anhydride, gives a color changing from violet to blue, then to green blue. The reaction. from Legal to. Soda nitro-prussiate is negative. The substance, dried under high vacuum, melts with decomposition and ooloration to yellow at 168-1700 (oorr.). The new glucoside, in solution in methyl alcohol deflects the plane of left-polarized light:
20) or. = - 59 (c = 1). It contains, like sugar,
D. a glucose molecule.
Elemental analysis, the determination of the equivalent by titration with the alkalis which break the lactone ring and eliminate an aoyl group, and the determination of the sugar content lead to the general formula: C32H46O12, Total acetylation per - sets to fix 4 acetyl groups and gives rise to a crystalline compound which corresponds to the formula C40H54O16 0 This aoetyl derivative, whose melting point is clear, melts at 199 (oorr.) without decomposition. Its optical rotation in methyl alcohol is: [[alpha]] 20 = - 49
D (c = 1).
The absolute lethal dose for rats, that is to say the dose which kills all experimental animals, is 1.6 mg. per kg. for males and 0.5 mgr. per kg. for females. The corresponding figures for the acetylated product are higher, ie 5 mgr. per kg. for males and 2.5 mgr. per kg for females. This new gluooside must find use as a violent poison for rodents (rats, mice, etc.).
@
<Desc / Clms Page number 7>
Here is an example of the preparation of the new gluooside: 100 kg. of fresh red Seille cut into slices, are dried in a current of hot air (approximately
60) and finely ground. To extract the dry powder (approximately 20 kg.) It is stirred for a long time three times with each time 50 liters of absolute alcohol. The combined dark red extracts are evaporated to dryness under vacuum at low temperature. The residue, which weighs approximately 1.2 kg., Is taken up in 50 liters of water and mixed with a suspension of lead hydroxide (approximately 400 to 500 g.), Freshly prepared and washed until neutral reaction.
After filtration, the clear, slightly colored aqueous solution is concentrated in vacuo to 5 to 10 liters and extracted five times, each time with 2 liters of chloroform plus 20% n-butyl alcohol. The .resida, extraction obtained by evaporation in a vacuum of the combined fractions, weighs 50 to 80 g. The product is slightly colored light yellow and gives a reaction of
Intense blue-green Liebermaun. It is taken up in 2 liters of water which often contain part of the substance in suspension. The extraction with one liter of chloroform removes the oily yellow substances, which are discarded.
On the other hand, the saturation of the aqueous solution with chloroform leads to the precipitation of a large part of the substances originally dissolved. This phenomenon is not taken into account and the aqueous solution is extracted
8 or 10 times with a liter of chloroforma each time to which 5% butyl alcohol is added. The raticid passes entirely into the chloroform-butyl alcohol solution, the cardioactive glucosides remaining in the aqueous solution.
@
<Desc / Clms Page number 8>
The residue from vacuum evaporation of the combined chloroform-butyl alcohol fractions weighs 10 to 50 g. according to the glucoside content of the raw material. It is removed with the smallest possible quantity of methyl alcohol. and water is added cautiously until a slight cloudiness appears hardly perceptible. It is allowed to stand and crystallization of the new glucoside begins some time later. raw The yield, variable with the material / used, is from 3 to 20 gr. The substance after purification by recrystallization from aqueous methyl alcohol has the properties described above.
It is obvious that the preceding example is not limiting and that it is possible to make detailed modifications to the method described without thereby departing from the scope of the invention.
CLAIMS
1.Process for preparing a glucoside from the red sea bream, this process consisting in taking as raw material the extracts of maritime Seille gnaw prepared according to known methods and containing this glucoside in unaltered form and in separating the glucoside in the presence of water, by organic solvents immiscible with water or by a mixture of these solvents, preferably with the addition of an alcohol containing at least 4 carbon atoms.