AT505028B1 - Neuer antikörper gegen ein retrovirales epitop - Google Patents
Neuer antikörper gegen ein retrovirales epitop Download PDFInfo
- Publication number
- AT505028B1 AT505028B1 AT1602008A AT1602008A AT505028B1 AT 505028 B1 AT505028 B1 AT 505028B1 AT 1602008 A AT1602008 A AT 1602008A AT 1602008 A AT1602008 A AT 1602008A AT 505028 B1 AT505028 B1 AT 505028B1
- Authority
- AT
- Austria
- Prior art keywords
- antibody
- mab
- treatment
- melanoma
- tumor
- Prior art date
Links
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 title description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 43
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 39
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 25
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 21
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 15
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 12
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 11
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims description 9
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 9
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 claims description 8
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 7
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 7
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 claims description 4
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 claims description 4
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 4
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 4
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003053 toxin Substances 0.000 claims description 2
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 claims description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 claims 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 claims 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 10
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 8
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 7
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 206010004950 Birth mark Diseases 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 5
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 208000035250 cutaneous malignant susceptibility to 1 melanoma Diseases 0.000 description 4
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 4
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 4
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 3
- 208000000453 Skin Neoplasms Diseases 0.000 description 3
- 208000024770 Thyroid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 201000005296 lung carcinoma Diseases 0.000 description 3
- 201000002510 thyroid cancer Diseases 0.000 description 3
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N Haematoxylin Chemical compound C12=CC(O)=C(O)C=C2CC2(O)C1C1=CC=C(O)C(O)=C1OC2 WZUVPPKBWHMQCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 208000033781 Thyroid carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 201000010989 colorectal carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 2
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 201000000849 skin cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 208000013077 thyroid gland carcinoma Diseases 0.000 description 2
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 108091093088 Amplicon Proteins 0.000 description 1
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 1
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 1
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 101710094648 Coat protein Proteins 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 102100021181 Golgi phosphoprotein 3 Human genes 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 241000192019 Human endogenous retrovirus K Species 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 101710125418 Major capsid protein Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 101710175625 Maltose/maltodextrin-binding periplasmic protein Proteins 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101710141454 Nucleoprotein Proteins 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061902 Pancreatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- 101710083689 Probable capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000012891 Ringer solution Substances 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000029918 bioluminescence Effects 0.000 description 1
- 238000005415 bioluminescence Methods 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000012303 cytoplasmic staining Methods 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000799 fluorescence microscopy Methods 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000005917 in vivo anti-tumor Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000571 inhibitory effect on melanoma Effects 0.000 description 1
- 201000002313 intestinal cancer Diseases 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 230000037125 natural defense Effects 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 102000013415 peroxidase activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 238000002600 positron emission tomography Methods 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020615 rectal carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 108091005703 transmembrane proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000035160 transmembrane proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/08—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses
- C07K16/10—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from viruses from RNA viruses
- C07K16/1036—Retroviridae, e.g. leukemia viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2740/00—Reverse transcribing RNA viruses
- C12N2740/00011—Details
- C12N2740/10011—Retroviridae
- C12N2740/10022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Description
2 AT 505 028 B1
Die vorliegende Erfindung stellt eine Hybridomzelllinie und einen monoklonalen Antikörper der von der Hybridomzelle hergestellt wird, zur Verfügung, der spezifisch an ein Epitop einer trans-membranen Region des Melanom-assoziierten endogenen Retrovirus bindet. Der Antikörper ist besonders nützlich für die Behandlung und Diagnose von Krebs.
Weiters umfasst die vorliegende Erfindung diagnostische Kits für den Nachweis von Krebszellen, im Besonderen von Melanomzellen und Verfahren für die Krebsdiagnose unter Verwendung des Antikörpers.
Krebs ist die allgemeine Bezeichnung für mehr als 100 medizinische Zustände die unkontrolliertes und gefährliches Zellwachstum beinhalten. Krebs der Haut, der Harnblase, der Brust, des Darms, der Lunge und des Pankreas werden mit der größten Häufigkeit diagnostiziert und werden als allgemeiner Krebs bezeichnet.
Melanom ist ein Krebs der Haut, bis zu 30% der Patienten werden systemische Metastasen entwickeln und die Mehrheit wird sterben (Kirkwood et al.). Klassische Verfahren zur Behandlung von Melanom beinhalten Chirurgie, Bestrahlung und Chemotherapie. Hautkrebs ist eine Erkrankung, die sich langsam entwickelt und die durch Beobachtung von Läsionen, die das Potential haben, krebsartig zu werden, mittels Routinescreening vermieden werden kann. Dabei gibt es trotzdem eine Grenze im Hinblick auf den Aufwand an Zeit, Geld oder Unbequemlichkeit welcher ein im Prinzip gesunder Patient für Routinescreening-Verfahren auf sich nehmen will. Daher muss der Test in der Lage sein, verlässlich gefährliche Tumore zu identifizieren und gefährliche Tumore von gutartigen Muttermalen (pigmentierte Zellen) rasch, günstig und sicher zu unterscheiden.
In Muster et al. (Cancer Res., 2003, 63(24): 8735) wurde eine neue Gruppe von Melanomassoziierten Antigenen vorgestellt, MERV (Melanom-assoziiertes endogenes Retrovirus) - ein endogenes Retrovirus mit hoher Homologie zu HERV-K.
Monoklonale Antikörper haben ein großes Potential in der Krebstherapie da sie an Tumorantigene mit hoher Selektivität binden können und zytotoxische Aktivitäten zu den Krebszellen führen können. Auch nackte Antikörper können als natürliche Verteidigungsmechanismen verwendet werden, wie Antikörper-abhängige Zytotoxizität (ADCC) oder Komplement-abhängige Zytotoxizität (CDC) gegen die Tumorzellen.
Der Grad des Erfolgs bei Diagnosen und Therapien bei Verwendung monoklonaler Antikörper hängt von vielen Faktoren ab, aber ein wichtiger Faktor ist die eingeschränkte Expression des Antigens, das durch den Antikörper gegen die Tumorzellen erkannt wird. Ebenfalls sehr wichtig ist der Umfang der Kreuzreaktivität des Antikörpers mit anderen molekularen Strukturen und normalen Geweben. Daher würde der ideale Antikörper nur an Antigene binden, die auf Tumorzellen exprimiert werden und nicht an irgendwelche normale Zellen. Da die meisten, wenn nicht alle tumorassoziierten Antigene sowohl auf normalen Zellen als auch auf Tumorzellen exprimiert werden, war das Problem in der Technik, Antikörper gegen Antigene zu entwickeln, die zu einem wesentlich höheren Grad auf Tumorzellen exprimiert werden als auf normalen Zellen.
Das wird besonders für die Diagnose von Melanomzellen aus Biopsieproben benötigt.
Im Hinblick auf die Schwierigkeiten, Krebs in einem frühen Stadium nachzuweisen und den Erhalt falsch positiver Resultate besonders bei der Diagnose von Melanomzellen zu vermeiden, existiert ein weit anerkannter Bedarf nach spezifischen Antikörpern um pathologische Hautkonditionen und im besonderen frühe Krebsvorläufer zu identifizieren.
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, einen Antikörper zur Verfügung zu stellen, der die oben genannten Bedürfnisse befriedigt. 3 AT 505 028 B1
Die Erfinder haben einen monoklonalen Antikörper entwickelt, der selektiv an ein retrovirales Epitop eines endogenen Retrovirus, bevorzugt an die transmembrane Region des Melanomassoziierten endogenen Retrovirus (MERV) bindet. Es wurde erfolgreich gezeigt, dass dieser Antikörper bösartige Melanomzellen nachweisen kann.
Im Besonderen wird der Antikörper der Erfindung durch eine als anti-MBP-TM Klon 33-8-7 beim DSMZ in Deutschland am 16. Jänner 2008 hinterlegte Hybridomzelllinie hergestellt (Hinterlegungsnummer DSM ACC2879). Weiters werden auch diagnostische Kits enthaltend den erfinderischen Antikörper und Verfahren zum Nachweis von Melanomzellen durch die Erfindung zur Verfügung gestellt.
Figuren
Figur 1: Reaktivität des mAb TM 33-8-7 mit synthetischen Peptiden, gemessen durch ELISA. Schwarze Balken: mAb 33-8-7; graue Balken: Maus IgG Isotyp-Kontrolle.
Figur 2: Die Anti-Tumor Aktivität des mAb TM 33-8-7 gegen Transplantate der transmembranen MERV -Domäne in vivo. Die Entwicklung des Tumorvolumens (mm3) während der Behandlung (3 Tage pro Woche, 4 Wochen gesamt) wird gezeigt. Die Behandlung beginnt sofort (Tag 1) nach der Tumorzellinjektion (Tag 0). Weiße Balken: PBS Kontrollgruppe; schraffierte Balken: mAb TM 33-8-7 Gruppe.
Figur 3: Anti-Tumor Aktivität des mAb TM 33-8-7 gegen Transplantate der transmembranen MERV Region in vivo. Die Entwicklung des Tumorvolumens (mm3) während der Behandlung (3 Tage pro Woche, 4 Wochen gesamt) wird gezeigt. Die Behandlung beginnt bei einem Tumorvolumen von 40 mm3. Weiße Balken: PBS Kontrollgruppe; schraffierte Balken: mAb TM 33-8-7 Gruppe.
Die Erfindung stellt eine Hybridomzelllinie zur Verfügung, die als anti-MBP-TM Klon 33-8-7 gemäß dem Budapester Vertrag bei der DSMZ (Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH) am 16. Jänner 2008 hinterlegt wurde (Hinterlegungsnummer DSM ACC2879), sowie einen monoklonalen Antikörper, der durch die Hybridomzelllinie hergestellt wird. Gemäß der Erfindung sind auch Mutanten, Derivate oder Fragmente des Antikörpers mit umfasst. Bevorzugt umfasst das Antikörperderivat mindestens Teile des Fab Fragments, bevorzugt zusammen mit mindestens Teilen des F(ab)2 Fragments und/oder Teilen der Gelenksregion und/oder des Fc Teils eines lambda oder kappa Antikörpers. Beispielsweise sind die Antikörpermoleküle intakte Immunglobulinmoleküle und jene Teile eines Immunglobulinmoleküls die das Paratop enthalten, inklusive jener Teile die als Fab, F(ab)2 and F(v) bekannt sind.
Gemäß der Erfindung bindet der Antikörper spezifisch an die transmembrane Region eines endogenen Retrovirus, bevorzugt an das Epitop enthaltend die Aminosäuresequenz HRFQLQCDWNTSDFCITPQIY oder an eine Variante oder ein Fragment davon, mit mindestens 80% Aminosäureidentität, bevorzugt mindestens 90% Aminosäureidentität, bevorzugt mindestens 95% Aminosäureidentität.
Der Antikörper gemäß der Erfindung kann auch für die Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung für die Behandlung oder Diagnose einer Krebserkrankung, bevorzugt einer Melanomerkrankung in einem Tier, vorzugsweise einem Menschen verwendet werden.
Gemäß einer besonderen Ausführungsform kann der Antikörper an eine zytotoxische Verbindung gebunden werden oder an eine Markierung, um selektiv in vivo Krebszellen zu töten oder nachweisen zu können.
Die zytotoxische Verbindung kann zum Beispiel ein Radioisotop sein, ein Medikament oder ein Toxin. Um Einsicht in therapeutische Eingriffe in lebenden Mäusen oder Menschen zu erhalten, 4 AT 505 028 B1 können Techniken wie Bioluminiszenz Abbildung (BLI), Fluoreszenz Abbildung oder Positronen Emissions-Tomographie (PET) unter Verwendung des entsprechenden mAb angewendet werden.
Alternativ wird ein diagnostischer Kit für die Detektion von Melanomzellen zur Verfügung gestellt, umfassend mindestens ein Behältnis das mindestens einen Antikörper gemäß der Erfindung enthält.
Der Nachweis von Krebs, im Besonderen von Melanom bleibt eine schwierige Herausforderung in der chirurgischen Pathologie, teilweise wegen seiner histologischen Variabilität, der Zyto-morphologie, Architektur und stromalen Komponenten. Derzeit erhältlichen Biomarker die auf die Unterstützung der Diagnose gerichtet sind, fehlt die Sensitivität und Spezifität.
Die Erfindung umfasst auch ein Verfahren zur Krebsdiagnose, insbesondere der Melanomdiagnose unter Verwendung des Antikörpers, umfassend die Schritte des Inkontaktbringens der Probe von möglichem Krebsursprung, bevorzugt von Melanomursprung mit dem Antikörper, was zu einer Antikörper-Antigen-Reaktion zwischen der Probe und dem Antikörper führt und Detektieren und wahlweises Quantifizieren der Antikörper-Antigen Reaktion, wobei die Antigen-Antikörper Bindung auf das Vorhandensein von Krebszellen hinweist.
In einer alternativen Ausführungsform ist der Antikörper auf einer Oberfläche gebunden.
Die vorangegangene Beschreibung wird durch die Bezugnahme auf die folgenden Beispiele vollkommen verstanden. Diese Beispiele sind dennoch lediglich beispielhaft für Verfahren zur Durchführung einer oder mehrere Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung und sollten nicht als limitierend auf den Umfang der Erfindung gelesen werden.
Beispiele:
Material and Methoden
Expression und Reinigung der rekombinanten transmembranen Region von MERV (TM)
Die Ectodomäne der transmembranen Domäne des MERV (Aminosäuren_488-586) wurde wie bereits beschrieben amplifiziert. (Buscher et al, Melanoma Res 16:223-34. 2006). Die amplifi-zeirte DNA wies 100% Sequenzähnlichkeit mit der publizierten MERV Sequenz auf (NCBI Zugangsnummer DQ058016). Das Amplikon wurde in den pMal Vektor (New England Biolabs) kloniert und and in E. coli transfomiert. Das exprimierte transmembrane Protein wurde N-terminal mit einem 42kDa Maltose-Bindungsprotein fusioniert (MBP2) mit einer Amylase-Chromatographiesäule gereinigt. Das exprimierte rekombinante Protein umfasst etwa 55kDa. (MBP-Protein: 42 KDa, TM-Protein: 13 kDa). Puffer: 20 mM Tris/HCI, 200 mM NaCI, 1 mM EDTA, 10 mM Maltose.
Antikörper
Ein monoklonaler Antikörper der die transmembrane MERV Domäne erkennt, wurde durch Immunisieren von weiblichen Balb/c Mäusen mit der Ektodomäne des transmembranen MERV Proteins (BioGenes GmbH, Berlin, Deutschland) hergestellt. Die Hybridome wurden auf Basis der Reaktivität des Überstands gegen das Peptid im ELISA und von Immunfluoreszenz Versuchen unter Verwendung von Melanomzelllinien selektiert. Der am meisten reaktive und spezifische Hybridom anti-MBP-TM Klon 33-8-7 (hinterlegt bei der DSMZ am 16. Jänner 2008, Hinterlegungsnummer, DSM ACC2879) wurde zur Herstellung des monoklonalen Antikörpers TM 33-8-7 (BioGenes GmbH, Berlin, Deutschland) verwendet. Isotypisierung wurde unter Verwendung des "Mouse Monoclonal Antibody Isotyping kits" (Roche, Basel, Schweiz) gemäß den Herstellervorschriften durchgeführt. Der Isotyp des mAb TM 33-8-7 war lgG2ak. Ein gereinigter Maus- 5 AT 505 028 B1 lgG2ak (BD Pharmingen, San Diego, CA) wurde als Isotypen-Kontrolle verwendet.
Maligne Melanomqewebs-Reihe:
Immunhistochemische Paraffinstudien wurden auf konventionellen Formalin-fixierten Schnitten durchgeführt (Maligne Melanomgewebs-Reihe # ME801, US Biomax, USA) enthaltend 80 verschiedene Melanomgewebsschnitte pro Träger (Die Gewebsspezifität wurde mit anti-S100 Antikörpern mittels Standard IHC) und auf Gewebsproben, gesammelt in der Abteilung für Dermatologie, Medizinische Universität Wien bestätigt. Insgesamt wurde die Gewebsfärbung auf 160 primären Melanomgeweben, 76 Melanom-Metastasen und 192 dermalen Muttermalen durchgeführt.
Nach Entparaffinieren in Xylen und nachfolgender Wässerung in abgestuften Alkoholen, wurde die Epitop-Wiedergewinnung durch über Nacht Behandlung in einer Antigen-Wiedergewinnungslösung (DAKO, Heidelberg, Deutschland) bei 80°C durchgeführt. Endogene Peroxidase wurde durch Inkubation mit 3% H202 unterdrückt. Die Träger wurden mit primären Antikörpern für 3 Stunden bei 37°C inkubiert. Der Nachweis erfolgte mittels Ziege-anti-Maus HRP-konjugiertem sekundären Antikörper, 1:25 verdünnt für 30 Minuten bei Raumtemperatur. Als Substrat wurde AEC Chromogen (DAKO, Deutschland) für 5-10 Minuten verwendet und die Gegenfärbung erfolgte durch Verwendung von Mayer's Hämatoxylin für 20 Sekunden, gefolgt vom Waschen mit Leitungswasser für 2-5 Minuten. Zuletzt wurden die Träger mit Aquatex (Merck) fixiert. Für Negativkontrollen wurde der primäre Antikörper ersetzt durch einen Maus-Isotyp bei einer gleichen Konzentration wie der verwendete primäre Antikörper. Als zweite Negativkontrolle wurden Gewebsschnitte enthaltend normales benachbartes Gewebe gleichzeitig auf den Gewebsreihen inkludiert.
Gewebsreihe anderer Karzinome:
Imunhistochemische Paraffinstudien wurden wie oben beschrieben durchgeführt. Folgende kommerziell erhältliche Gewebsreihen wurden verwendet: # C01002: Kolon and Rektum-Karzinome und normale Gewebsreihe # LC1004: Lungenkarzinom-Gewebsreihe # CR803: Multiple (Gebärmutterhals) zervikale Epithelkrebsgewebsreihe # TH208: Gewebs-Mikroreihe aus Schilddrüsenkrebs
Epitopkartieruna MERV-TM-abgeleitete Peptide für die Epitop-Kartierung wurden von Iris Biotech GmbH, Deutschland synthetisiert. Die Reinheit dieser Peptide wurde durch HPLC und MS nachgewiesen. Die Peptide wurden mit Dimethylsulfoxid auf eine Endkonzentration von 3 mg/ml verdünnt 96-Napf Mikrotiterplatten (Nunc, Rochester, NY) wurden mit 0,25 pg/Napf eines jeden Peptids über Nacht beschichtet und mit 2% Rinderserumalbumin in PBS enthaltend 0,1% v/v Tween 20 blockiert. Die Platten wurden dann gewaschen und mit Antikörper inkubiert. Antikörperbindung wurde mit Alkaline-Phosphatase konjugiertem Ziege-anti-Maus IgG Antikörper (Tropix, Bedford, MA) nachgewiesen. Nach einer Stunde wurden die Platten gewaschen und p-Nitrophenylphosphat-Substrat (Sigma Aldrich) wurde zugegeben. Die Absorption wurde bei 405nm gemessen. Jede Probe wurde in dreifacher Ausfertigung für jedes Peptid gemessen. Die Mittelwerte der dreifachen Ausfertigungen wurden berechnet und ein endgültiges ELISA Signal für jede Probe festgelegt.
In vivo Antitumor-Aktivität
Pathogen-freie männliche und weibliche nu/nu Mäuse wurden von Charles River Laboratories, Sulzfeld, Deutschland erworben und nach Zufall 2 Versuchsgruppen von sechs Mäusen (Die 6 AT 505 028 B1
Behandlung erfolgt sofort nach Tumorzellinokulation) und zwei Gruppen von zehn Mäusen zugeteilt (die Behandlung beginnt bei einer Tumorgröße von of 40 mm5). Den Mäusen wurden subkutan 7x10Λ6 humane Melanomzellen (518 A2) suspendiert in Matrigel (BD Biosciences, San Jose, CA) und PBS in die linke Schulter injiziert. Die Mäuse wurden 3 Mal pro Woche mit monoklonalem Antikörper TM 33-8-7 sofort nach Tumorzellverabreichung behandelt oder wenn die Tumore ein Volumen von 40 mm3 erreicht hatten. Die Kontrollgruppe erhielt nur eine Ringerlösung. Sobald die Tumoren sichtbar waren, wurde die Tumorgröße alle zwei bis drei Tage unter Verwendung eines Messtasters gemessen [Volumen= (Breite2 x Länge) x 0.52].
Ergebnisse:
Maligne Melanom-Gewebsreihe
Der monoklonale Antikörper TM 33-8-7 erwies sich als am meisten sensitiv und spezifisch unter allen getesteten anti-TM monoklonalen Antikörpern. Gewebsreihen-Färbung wurde auf 160 primären Melanomgeweben, 76 Melanom-Metastasen und 192 dermalen Muttermalen durchgeführt.
Die Ergebnisse auf Muttermalen, Tumorgeweben und Metastasengeweben sind in Tabelle 1 dargestellt.
Tabelle 1: Zusammenfassung der Immunhistochemie auf melanozytischen Läsionen unter Verwendung von mAb TM 33-8-7.
Probentyp Zahl der Proben Negativ Positiv Primäre Melanome 160 31 (19%) 129 (81%) Melanom-Metastasen 76 12 (16%) 64 (84%) Dermale Muttermale 192 185 (96%) 7 (4%)
Tabelle 1 zeigt drei verschiedene Probentypen und die entsprechende Anzahl von getesteten Proben sowie die Ergebnisse der Färbung: "negativ" bedeutet keine nachweisbare Färbung und "positiv" bedeutet Färbung.
Eine Färbung der MERV transmembranen Domäne erscheint als rotbraunes zytoplasmatisches Färbungsmuster. Färbung der MERV transmembranen Domäne war in 129 (81%) von 160 Fällen von primärem Melanom, und in 64 (84%) von 76 Melanom-Metastasen. Nur 7/192 (4%) Fälle von dermalen Muttermalen waren reaktiv.
Um die Spezifität der Färbung zu garantieren, etablierten wir einen Wettbewerbsassay durch vorheriges Absorbieren von anti-TM Antikörper 33-8-7 mit etwa 10 molarem Überschuss seines Zielproteins. Nach Präinkubation über Nacht bei 4°C zeigten die Antikörper keine Reaktivität gegen das Ziel im ELISA. Inkubation des anti-TM-Antikörpers 33-8-7 mit rekombinantem TM Protein führte zu einem stark reduzierten Färbemuster. Diese Daten weisen deutlich auf die spezifische Reaktivität des monoklonalen Antikörpers mit dem MERV Hüllproteinfragment in Melanomzellen hin.
Gewebsreihen anderer Tumore:
Der monoklonale Antikörper TM 33-8-7 detektierte auch andere Tumore wie Colonkarzinom & Colorektumkarzinom, Lungenkarzinom, Zervixkarzinom sowie Schilddrüsenkarzinom (Tabelle 2) 7 AT 505 028 B1
Tabelle 2: Zusammenfassung der Immunhistochemie verschiedener Tumoren unter Verwendung von mAb TM 33-8-7 positiv getestete maligne Gewebe / Gesamtzahl an malignen Geweben positiv getestete benigne Gewebe / Gesamtzahl an benignen Geweben Colonkarzinom & Colorektumkarzinom 9/36 0/19 Lungenkarzinom 25/90 1/8 Zervixkarzinom 20/70 0/5 Schilddrüsenkarzinom 66/180 0/27
Das Ergebnis weist darauf hin, dass mAb TM 33-8-7 auch mit anderen Karzinomen als Melanomen reaktiv ist.
Epitopkartierung
Um festzustellen, ob der monoklonale Antikörper TM 33-8-7 alle immundominanten Regionen erkennt, wurden die Peptide entlang der transmembranen MERV Domäne synthetisiert und mittels ELISA Screening getestet. In einer ersten Screeningrunde wurden 8 Peptide innerhalb der transmembranen Region basierend auf bioinformatischer Berechnung synthetisiert. Nur ein Peptid innerhalb der immunsuppressiven Domäne erschien positiv. Basierend darauf wurden 26 überlappende Peptide synthetisiert, welche die gesamte immunsuppressive Domäne umfassen und auf ihre Reaktivität mit mAb TM 33-8-7 getestet.
Figur 1 zeigt die Reaktivität des mAb TM 33-8-7 mit synthetischen Peptiden, gemessen durch ELISA. Schwarze Balken: mAb 33-8-7; graue Balken: Maus IgG Isotyp-Kontrollgruppe. 7 forlaufende überlappende Peptide (C2: HRFQLQCDWNTSDFC, D2: RFQLQCDWNTSDFCI, E2: FQLQCDWNTSDFCIT, F2: QLQCDWNTSDFCITP, G2: LQCDWNTSDFCITPQ, H2: QCDWNTSDFCITPQI, A3: CDWNTSDFCITPQIY) zeigten eine starke Reaktivität mit mAb TM 33-8-7, was ein deutliches Anzeichen war, dass die Kernsequenz des Epitops mit der Aminosäuresequenz HRFQLQCDWNTSDFCITPQIY korrespondiert.
Unter Anwendung eines Students t-Tests zum Vergleich für die Verteilung von Hintergrund und Signalwerten wurde ein Wert der Signifikanz von of p < 0.000001 erreicht.
Basierend auf den gegebenen experimentellen Daten wird das Kernepitop des gegebenen Antikörpers durch die überlappenden Peptide C2, D2, E2, F2, G2, H2, A3 umfasst.
Evaluierung des inhibitorischen Effekts eines mAb TM 33-8-7 auf die Tumorentwicklung in nackten Mäusen
Das Ziel der Mausstudie war, den monoklonalen Antikörper TM 33-8-7 auf seinen inhibitorischen Effekt auf die Melanom-Tumorentwicklung nach i.t. Verabreichung zu evaluieren. Nu/nu Mäuse sind ein Standardtiermodell für die Induktion von humanen Tumorzellen und multiplen in vivo Behandlungsstrategien in der Krebsforschung. Basierend auf ihrer angeborenen NK-Zellaktivität, erlaubten uns nu/nu Mäuse die induzierte Antikörper-abhängige zelluläre Zytotoxizität durch mAB in vivo zu studieren.
Das Inokulieren des Tumors erfolgte unter Verwendung von 7x106 Zellen/Maus der Melanom-
Claims (11)
- 8 AT 505 028 B1 zelllinie 518 A2 s.c. in die rechte Schulterblattregion. Es wurden zwei Gruppen mit 6 Mäusen/Gruppe 3 Mal pro Woche (insgesamt 4 Wochen) sofort nach Tumorzellinokulation behandelt. Die Behandlung erfolgte i.v. mit 15 mg/kg Körpergewicht mAb TM 33-8-7 versus PBS. Die Tumore wurden während der mAb TM 33-8-7 Behandlung in einem stabilen Zustand gehalten (340 mm3 nach Endbehandlung), während sich die Tumore in der Kontrollgruppe auf bis zu 1207 mm3 ausdehnten, was auf einen therapeutischen Effekt der mAb TM 33-8-7 Behandlung hinweist (Figur 2). Figur 2: Die Anti-Tumor Aktivität des mAb TM 33-8-7 gegen Transplantate der transmembranen MERV -Domäne in vivo. Die Behandlung beginnt sofort (Tag 1) nach der Tumorzellinjektion (Tag 0). Weiße Balken: PBS Kontrollgruppe; schraffierte Balken: mAb TM 33-8-7 Gruppe. 2 Gruppen von Mäusen von 10 Mäusen/Gruppe wurden 3 Mal pro Woche (4 Wochen insgesamt) bei einer Tumorgröße von 40 mm3 behandelt. Die Behandlung erfolgte i.v. mit 10 mg/kg Körpergewicht mAb TM 33-8-7 versus PBS Die Tumorgröße erreichte ungefähr 40 mm3. 4 Wochen nach der Tumorzellinokulation. In der Kontrollgruppe erreichten die Tumoren eine Durchschnittsgröße von 4943 mm3 nach der Behandlungsdauer. In der behandelten Gruppe wurde das Tumorwachstum auf eine durchsschnittliche große von 1858 mm3 reduziert (Figur 3) Figur 3 zeigt die Anti-Tumor Aktivität des mAb TM 33-8-7 gegen Transplantate der transmembranen MERV Region in vivo. Die Behandlung begann bei einem Tumorvolumen von 40 mm3. Weiße Balken: PBS Kontrollgruppe; schraffierte Balken: mAb TM 33-8-7 Gruppe. Patentansprüche: 1. Eine Hybridomzelllinie hinterlegt als anti-MBP-TM Klon 33-8-7 bei der DSMZ am 16. Jänner 2008, Hinterlegungsnummer DSM ACC2879.
- 2. Ein monoklonaler Antikörper hergestellt durch die Hybridomzelllinie gemäß Anspruch 1.
- 3. Ein Antikörper gemäß Anspruch 2 dadurch charakterisiert, dass er spezifisch an ein Epitop eines endogenen Retrovirus, bevorzugt eines Melanom-assoziierten endogenen Retrovirus bindet.
- 4. Ein Antikörper gemäß einem der Ansprüche 2 oder 3 dadurch charakterisiert, dass der Antikörper gegen ein Peptid mit der Aminosäuresequenz HRFQLQCDWNTSDFCITPQIY oder ein Derivat davon mit mindestens 80% Aminosäureidentität, bevorzugt mindestens 90% Aminosäureidentität, mehr bevorzugt mindestens 95% Aminosäureidentität gerichtet ist.
- 5. Antikörper gemäß einem der Ansprüche 2 bis 4, dadurch charakterisiert, dass die Antikörper an eine zytotoxischen Komponente gebunden sind oder an eine Markierung die eine selektive Bindung an Krebszellen ermöglicht, sodass die Krebszellen getötet oder nachgewiesen werden können.
- 6. Antikörper gemäß Anspruch 5 dadurch charakterisiert, dass die zytotoxische Komponente ein Radioisotop, ein Medikament oder ein Toxin ist.
- 7. Verwendung eines Antikörpers gemäß einem der Ansprüche 2 bis 6 für die Herstellung einer pharmazeutischen Zusammensetzung für die Behandlung oder Diagnose einer Krebserkrankung, bevorzugt einer Melanomerkrankung in einem Tier.
- 8. Diagnostischer Kit für den Nachweis von Krebszellen, bevorzugt von Melanomzellen, 9 AT 505 028 B1 wobei dieser Kit mindestens ein Behältnis enthaltend mindestens einen Antikörper gemäß einem der Ansprüche 2 bis 6 enthält.
- 9. Verfahren zur Melanomdiagnose unter Verwendung eines Antikörpers gemäß einem der Ansprüche 2 bis 6 umfassend die Schritte a. in Kontaktbringen der Probe von möglichem Krebs, bevorzugt von Melanomursprung mit dem Antikörper, was zu einer Antikörper-Antigen Reaktion zwischen der Probe und dem Antikörper führt, und b. Nachweisen und möglicherweise Quantifizieren der Antikörper-Antigenreaktion, wobei die Antigen-Antikörper Bindung auf das Vorhandensein von Krebszellen hinweist.
- 10. Verfahren nach Anspruch 9 wobei der Antikörper auf einer Oberfläche gebunden ist.
- 11. Ein Verfahren zur Bestimmung der Konzentration oder des Vorhandenseins von Krebszellen in vitro unter Verwendung des Antikörpers nach einem der Ansprüche 2 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass der Antikörper assoziiert ist mit einer Markierung, wobei das Verfahren das Exponieren von Zellen in einer Testprobe auf die Antikörper umfasst und der Nachweis des Umfangs der Bindung durch Nachweis der Markierung erfolgt. Hiezu 3 Blatt Zeichnungen
Priority Applications (8)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT1602008A AT505028B1 (de) | 2008-02-01 | 2008-02-01 | Neuer antikörper gegen ein retrovirales epitop |
| CA002685049A CA2685049A1 (en) | 2007-05-24 | 2008-05-23 | Antibodies useful for therapy and diagnosis of cancer |
| PCT/EP2008/056359 WO2008142157A1 (en) | 2007-05-24 | 2008-05-23 | Antibodies useful for therapy and diagnosis of cancer |
| NZ581416A NZ581416A (en) | 2007-05-24 | 2008-05-23 | Antibodies useful for therapy and diagnosis of melanoma |
| EA200901590A EA200901590A1 (ru) | 2007-05-24 | 2008-05-23 | Антитела, применяемые в терапии и диагностике рака |
| EP08759960.1A EP2160406B1 (de) | 2007-05-24 | 2008-05-23 | Zur therapie und diagnose von krebs geeignete antikörper |
| AU2008252935A AU2008252935B2 (en) | 2007-05-24 | 2008-05-23 | Antibodies useful for therapy and diagnosis of cancer |
| US12/601,780 US8541553B2 (en) | 2007-05-24 | 2008-05-23 | Antibodies specific for the melanoma-associated endogenous retrovirus (MERV) envelope glycoprotein |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT1602008A AT505028B1 (de) | 2008-02-01 | 2008-02-01 | Neuer antikörper gegen ein retrovirales epitop |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| AT505028B1 true AT505028B1 (de) | 2008-10-15 |
| AT505028A4 AT505028A4 (de) | 2008-10-15 |
Family
ID=39830290
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| AT1602008A AT505028B1 (de) | 2007-05-24 | 2008-02-01 | Neuer antikörper gegen ein retrovirales epitop |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| AT (1) | AT505028B1 (de) |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003029460A1 (en) * | 2001-09-27 | 2003-04-10 | Greenhills Biotechnology Research Development Trade Gmbh | Polynucleotide fragments of an infectious human endogenous retrovirus |
| AT502292A2 (de) * | 2005-05-11 | 2007-02-15 | Greenhills Biotechnology Res D | Melanomdiagnose |
-
2008
- 2008-02-01 AT AT1602008A patent/AT505028B1/de not_active IP Right Cessation
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2003029460A1 (en) * | 2001-09-27 | 2003-04-10 | Greenhills Biotechnology Research Development Trade Gmbh | Polynucleotide fragments of an infectious human endogenous retrovirus |
| AT502292A2 (de) * | 2005-05-11 | 2007-02-15 | Greenhills Biotechnology Res D | Melanomdiagnose |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| BÜSCHER K, TREFZER U, HOFMANN M, STERRY W, KURTH R, DENNER J. ''EXPRESSION OF HUMAN ENDOGENOUS RETROVIRUS K IN MELANOMAS AND MELANOMA CELL LINES.'' CANCER RES. 2005, MAY 15;65(10):4172-80. * |
| MUSTER T, ET AL. ''AN ENDOGENOUS RETROVIRUS DERIVED FROM HUMAN MELANOMA CELLS'' CANCER RES. 2003; 63(24): 8735-41 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AT505028A4 (de) | 2008-10-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE60226036T9 (de) | ANTIKÖRPER, DER DAS GM1-GANGLIOSID-GEBUNDENE AMYLOID-b-PROTEIN ERKENNT, UND DNA, DIE FÜR DIESEN ANTIKÖRPER CODIERT | |
| DE102005029845B4 (de) | Verfahren zur Diagnose von rheumatischen Erkrankungen | |
| DE60025008T2 (de) | Bestimmung von adrenomedullin-bindenden proteinen | |
| CN101670105A (zh) | 螯合淀粉样蛋白β肽的人源化抗体 | |
| CN101573382A (zh) | 针对人抗苗勒激素ⅱ型受体（amhr-ⅱ）的单克隆抗体 | |
| DE69738331T2 (de) | Therapeutische anwendungen von laminin und von proteinfragmenten die von laminin abgeleitet sind | |
| JP5522717B2 (ja) | アトピー性皮膚炎の検出方法および予防・治療剤のスクリーニング方法 | |
| EP1789803A2 (de) | Bestimmung von felinem and caninem probnp | |
| DE60316106T2 (de) | Gemeinsamer lymphatischer endothel- und gefässendothel-rezeptor-1 (clever-1) und seine verwendung | |
| DE69628336T2 (de) | Behandlung und diagnose helicobacter pylori infektionen | |
| DE69932926T2 (de) | Gen kodierend für labyrinthin, einen krebsmarker | |
| DE07725949T1 (de) | Monoklonale anti-annexin-a3-antikörper zum nachweis von prostatakrebs | |
| WO2020221466A1 (de) | Biologische bindemoleküle | |
| DE60030141T2 (de) | Isolierte mhc-klasse ii-bindende peptide, und deren verwendung | |
| AT505028B1 (de) | Neuer antikörper gegen ein retrovirales epitop | |
| DE102010024636B4 (de) | Antikörper, insbesondere für die Diagnostik | |
| WO2007012449A1 (de) | Frizzled 9 als tumormarker | |
| DE19617940A1 (de) | Nebenhoden-spezifisches Rezeptorprotein und dessen Verwendung | |
| WO2003011907A2 (de) | Rezeptor, dessen verwendung sowie mausantikörper | |
| EP0537489B1 (de) | Monoklonale Antikörper gegen tumorassoziierte Antigene, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung | |
| EP2160406B1 (de) | Zur therapie und diagnose von krebs geeignete antikörper | |
| AT505003B1 (de) | Antikörper verwendbar für die therapie und diagnose von krebs | |
| DE3915344A1 (de) | Serumdiagnose-verfahren | |
| DE69737570T2 (de) | Agentien zur präsymptomatischen Detektion, Prävention und Behandlung von Brustkrebs in Menschen | |
| DE10351627B4 (de) | Modulation der Angiogenese durch Bartonella henselae |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC | Change of the owner |
Owner name: BAXTER HEALTHCARE SA, CH Effective date: 20131008 |
|
| MM01 | Lapse because of not paying annual fees |
Effective date: 20140201 |