WO2024019499A1 - 골관절염 예방 또는 치료용 약학 조성물 - Google Patents
골관절염 예방 또는 치료용 약학 조성물 Download PDFInfo
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Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/02—Algae
- A61K36/04—Rhodophycota or rhodophyta (red algae), e.g. Porphyra
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
Definitions
- the present invention relates to pharmaceutical compositions and health functional foods for preventing or treating osteoarthritis.
- Osteoarthritis is a representative degenerative disease caused by aging, causing inflammation, pain and stress in joints. Osteoarthritis, which causes pain due to the wear and tear of the cartilage in the knee due to aging or excessive use of the knee joint, is a representative disease in which older people seek orthopedics. Knee pain naturally reduces the amount of activity and narrows the radius of life, significantly lowering the quality of life. .
- osteoarthritis affects 13.9% of adults over 25 years of age and 33.6% of adults over 65 years of age (12.4 million people), and pathological symptoms include localized loss of articular cartilage in synovial joints. It is characterized by bone hypertrophy and thickening of the joint capsule. The cause of osteoarthritis is thought to involve complex interactions between cells and soluble mediators such as cytokines, growth factors, inflammatory mediators, metalloproteinases (MMPs), and chondrodegradative enzymes.
- MMPs metalloproteinases
- the primary drugs are symptomatic non-steroidal antiinflammatory drugs (NSAIDs), ranging from the classic anti-inflammatory high-dose aspirin to the latest generation, which can cause gastrointestinal disorders and gastrointestinal bleeding when taken for a long time. , liver damage, and side effects in the heart and blood vessels have been reported.
- NSAIDs non-steroidal antiinflammatory drugs
- the purpose of the present invention is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating osteoarthritis.
- the purpose of the present invention is to provide a health functional food for preventing or improving osteoarthritis.
- a pharmaceutical composition for preventing or treating osteoarthritis containing graphite extract 1.
- the pharmaceutical composition for preventing or treating osteoarthritis according to 1 above wherein the extract is an extract of water, C1 to C4 alcohol, or a mixed solvent thereof.
- the health functional food for preventing or improving osteoarthritis according to item 4 above, wherein the extract is an extract of water, C1 to C4 alcohol, or a mixed solvent thereof.
- the pharmaceutical composition and health functional food of the present invention have an anti-inflammatory effect on cartilage cells.
- the pharmaceutical composition and health functional food of the present invention have a cartilage protection effect.
- the pharmaceutical composition and health functional food of the present invention have the effect of inhibiting the expression of cartilage matrix degrading enzymes.
- the pharmaceutical composition and health functional food of the present invention have the effect of promoting the expression of cartilage matrix components decomposed by inflammation.
- Figure 1 shows the results of MTT assay, which is an evaluation of the toxic effect of graphite alcohol extract on RC (Rat Chondrocyte) cells.
- Figure 2 shows the results of Nitric Oxide assay on RC (Rat Chondrocyte) cells of graphite alcohol extract.
- Figure 3 is data showing the chondroprotective effect of graphite alcohol extract on RC (Rat Chondrocyte) cells, showing the catabolic enzymes ADAMTS-4, ADAMTS-5, MMP-1, MMP-3, and MMP-13 that decompose cartilage matrix. This is the result of analyzing the expression of .
- Figure 4 is data showing the cartilage protective effect of graphite alcohol extract on RC (Rat Chondrocyte) cells, and is the result of analyzing the expression of collagen type II, a component of cartilage matrix.
- the present invention relates to a pharmaceutical composition and health functional food for preventing or treating osteoarthritis, and can exhibit an anti-inflammatory effect on osteoarthritis by containing graphite extract.
- the red algae Campylaephora hypnaeoides
- the red algae is a filamentous seaweed belonging to the order of silk plants, the family Silapaceae. It is branched in a diagonal manner and attaches itself to other seaweeds living in the lower or subtidal zone, especially capsularia, with a sickle-shaped hook at the apex. It is an epiphytic marine algae that lives in It is widely used as a raw material for agar, edible food, and food additives.
- the extraction solvent can be used without limitation as long as it is a known extraction solvent.
- it may be water, C1 to C4 alcohol, or a mixed solvent thereof, and preferably ethanol, but is not limited thereto.
- the extraction method can be used without limitation as long as it is a known extraction method.
- the extraction method may be hot water extraction, ultrasonic extraction, cold extraction, distillation extraction, or reflux cooling extraction, but is not limited thereto.
- Extract refers to a substance separated by a solvent from a liquid mixture or solid mixture.
- Extracts may be in solution, concentrate or powder form.
- Prevention means any action that inhibits or delays the onset of osteoarthritis by administering a composition and/or health functional food.
- Treatment or “improvement” means any action that improves or beneficially changes the symptoms of a metabolic disease by administering the composition and/or health functional food.
- Menone with ordinary knowledge in the technical field to which this hospital belongs will be able to know the exact criteria for diseases for which our composition is effective and determine the degree of improvement, improvement, and treatment by referring to the data presented by the Korean Medical Association, etc. .
- the composition of the present invention may include a pharmaceutically acceptable carrier.
- the pharmaceutically acceptable carrier is a pharmaceutically acceptable substance, composition, such as a liquid or solid filler, diluent, excipient, or solvent that serves to transport the active ingredient from one organ or part of the body to another organ or part of the body. Or it means a vehicle.
- the composition of the present invention can be prepared as a pharmaceutical by adding one or more pharmaceutically acceptable carriers along with the graphite extract.
- 'pharmaceutically acceptable' refers to something that is physiologically acceptable and does not usually cause allergic reactions or similar reactions when administered to humans.
- the carrier includes, but is not limited to, saline, buffered saline, water, glycerol, and ethanol, and any suitable agent known in the art can be used.
- composition of the present invention can be administered orally or parenterally.
- the term “administration” means introducing the pharmaceutical composition of the present invention to the subject by any appropriate method.
- Parenteral administration methods include, but are not limited to, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intranasal, enteral, topical, sublingual, or rectal administration. It can be.
- preparations for parenteral administration they can be formulated in the form of injections, creams, lotions, external ointments, oils, moisturizers, gels, aerosols, and nasal inhalants by methods known in the art.
- the composition of the present invention is formulated into powder, granules, tablets, pills, sugar-coated tablets, capsules, solutions, gels, syrups, slurries, suspensions, etc. using methods known in the art. It can be.
- oral preparations can be prepared by combining the active ingredient with solid excipients, grinding them, adding suitable auxiliaries, and processing them into a granule mixture to obtain tablets or dragees.
- excipients examples include sugars including lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol and maltitol, starches including corn starch, wheat starch, rice starch and potato starch, cellulose, Fillers such as celluloses including methyl cellulose, sodium carboxymethylcellulose and hydroxypropylmethyl-cellulose, gelatin, polyvinylpyrrolidone, etc. may be included. Additionally, in some cases, cross-linked polyvinylpyrrolidone, agar, alginic acid, or sodium alginate may be added as a disintegrant. Furthermore, the composition of the present invention may further include anti-coagulants, lubricants, wetting agents, fragrances, emulsifiers and preservatives.
- the total daily amount of the preparation of the present invention suitable for use can be determined by the treating physician within the scope of sound medical judgment.
- the specific therapeutically effective amount for a specific subject depends on the type and degree of response to be achieved, the specific composition, including whether other agents are used as the case may be, the subject's age, weight, general health, gender and diet, and time of administration. , it is desirable to apply it differently depending on various factors including the route of administration, secretion rate of the composition, treatment period, drugs used together or simultaneously with the specific composition, and similar factors well known in the medical field. Accordingly, the preferred dosage of the composition of the present invention can be determined in consideration of the above-described matters and can be appropriately selected by a person skilled in the art.
- composition of the present invention can be used alone for the prevention or treatment of osteoarthritis, or in combination with methods using surgery, hormone therapy, drug therapy, and biological response regulators.
- the subject to which the composition of the present invention can be applied can be any animal that can develop such a disease, and the animals include humans and primates, as well as livestock such as cows, pigs, sheep, horses, dogs and cats.
- the present invention provides a health functional food for preventing or improving osteoarthritis containing graphite extract.
- the above health functional food helps improve bone joint pain, improve bone joint function, reduce bone joint inflammation and swelling, and prevent or improve osteoarthritis.
- the extraction solvent or extraction method of the extract is the same as described above.
- the health functional food of the present invention includes beverages containing the above extracts (including alcoholic beverages), fruits and their processed foods (e.g. canned fruit, canned food, jam, malade, etc.), fish, meat and their processed foods (e.g. : Ham, sausage corn beef, etc.), breads and noodles (e.g. udon, buckwheat noodles, ramen, spaghetti, macaroni, etc.), fruit juice, various drinks, cookies, taffy, dairy products (e.g. butter, cheese, etc.), edible vegetable oil. , margarine, vegetable protein, retort food, frozen food, various seasonings (e.g. soybean paste, soy sauce, sauce, etc.).
- fruits and their processed foods e.g. canned fruit, canned food, jam, malade, etc.
- fish e.g. : Ham, sausage corn beef, etc.
- breads and noodles e.g. udon, buckwheat noodles, ramen, spaghetti, macaroni, etc.
- fruit juice
- the health functional food of the present invention may be formulated into tablets, pills, powders, granules, powders, capsules, liquid formulations, etc. They may be formulated further including one or more of carriers, diluents, excipients, and additives.
- Additives that may be further included in the health functional food of the present invention include natural carbohydrates, flavors, nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors (synthetic flavors, natural flavors, etc.), colorants, fillers (cheese, chocolate) etc.), pactic acid and its salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, antioxidants, glycerin, alcohol, carbonating agents and one or more ingredients selected from the group consisting of pulp. You can use it.
- the health functional food of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic and natural flavors, colorants and thickening agents (cheese, chocolate, etc.), pectic acid and its salts, and alginic acid. and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonating agents used in carbonated beverages, etc.
- the health functional food of the present invention may contain pulp for the production of natural fruit juice and vegetable drinks. These ingredients can be used independently or in combination.
- carriers, excipients, diluents and additives include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, erythritol, starch, gum acacia, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, microcrystalline.
- the content of the health functional food of the present invention as an active ingredient in the above-described formulation can be appropriately adjusted depending on the form and purpose of use, user condition, type and severity of symptoms, etc., and is preferably 0.001 to 99.9% by weight based on the weight of solid content. It may be 0.01 to 50% by weight, but is not limited thereto.
- Rat Chondrocytes were initially cultured from the knee joints of rats around 5 days after birth. It was seeded at 1 ⁇ 10 6 cell/mL in a 12-well plate. After overnight, the graphite alcohol extract was treated with 0, 250, 500, 1000, and 2000 ⁇ g/mL, respectively, and reacted for 24 hours. MTT solution (5 mg/mL) was added at 100 ⁇ L per mL and allowed to react for an additional 4 hours. The formed formazan was dissolved in DMSO and then the absorbance was measured at 590 nm ( Figure 1).
- the cell viability calculation formula is as follows:
- RC cells were seeded at 1 ⁇ 10 6 cell/mL in a 12-well plate. After overnight, the graphite alcohol extract was pretreated with 0, 125, 250, and 500 ⁇ g/mL for 1 hour, and then treated with 2 ng/mL of IL-1 ⁇ and reacted for 24 hours. After removing the reaction solution, 100 ⁇ L of media and 100 ⁇ L of Griess reagent were mixed and absorbance was measured at 540 nm. After creating a standard calibration curve with NaNO 3 , the concentration of nitrate accumulated in the culture medium was measured ( Figure 2).
- RC cells were seeded at 1 ⁇ 10 6 cell/mL in a 12-well plate. After overnight, the graphite alcohol extract was treated with 0, 125, 250, and 500 ⁇ g/mL for 1 hour, and then treated with 2 ⁇ g/mL of IL-1b and reacted for 24 hours. After removing the reaction solution, total protein was extracted and quantified using protein extraction buffer. After performing western blot with the same amount of protein, primary antibodies were attached to each to analyze its expression (Figure 3).
- RC cells were seeded at 1 ⁇ 10 6 cell/mL in a 12-well plate. After overnight, the graphite alcohol extract was treated with 0, 125, 250, and 500 ⁇ g/mL for 1 hour, and then treated with 2 ⁇ g/mL of IL-1b and reacted for 24 hours. After removing the reaction solution, total protein was extracted and quantified using protein extraction buffer. After performing western blot with the same amount of protein, primary antibodies were attached to each to analyze its expression (Figure 4).
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Abstract
본 발명은 석묵 추출물을 포함하는 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품을 제공한다. 본 발명의 조성물은 연골세포에 독성을 가지지 않으며, 항염증 효과가 있다. 본 발명의 조성물은 연골기질분해효소들(ADAMTS-4,5, MMP-1,3,13)의 발현을 억제시키고 염증으로 분해된 연골기질 구성 물질(collagen typeⅡ)의 발현을 촉진시켜 연골을 보호하는 효과가 우수하다.
Description
본 발명은 골관절염 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품에 관한 것이다.
골관절염(Osteoarthritis: OA)은 노화로 인한 대표적인 퇴행성 질환으로서, 관절에 염증과 통증 스트레스를 유발한다. 무릎 속 연골의 노화나 무리한 무릎 관절 사용으로 인해 닳아 없어져 통증이 발생하는 골관절염은 노년층이 정형외과를 찾는 대표적인 질환으로, 무릎 통증 때문에 자연스럽게 활동량이 줄어들고 생활반경도 좁아지기 때문에 삶의 질을 현저히 떨어뜨린다.
미국의 질병관리본부에 따르면 골관절염은 25세 이상 성인의 13.9% 및 65세 이상 성인의 33.6%(12.4 백만명)에 영향을 주고, 병리학적 증상은 윤활막 관절(synovial joints)에서 관절 연골 소실의 국소적인 부위를 특징으로 하며, 이는 뼈의 비대(hypertrophy) 및 관절 캡슐(joint capsule)의 비후(thickening)와 연관된다. 골관절염의 원인은 세포와 사이토카인, 성장인자, 염증매개자, 메탈로프로티나아제(MMPs), 및 연골분해성(chondrodegradative) 효소와 같은 수용성 매개자들과의 복합 상호작용을 포함하는 것으로 생각된다.
골관절염의 치료법으로 일차 약제는 대증 작용에 의한 비스테로이드성 항염증제(non-steroidal antiinflammatory drugs: NSAIDs)이고, 고전적인 항염증제인 고용량 아스피린에서부터 최신 세대에 이르기까지, 장기적으로 복용하게 될 경우 위장 장애, 위장관 출혈, 간 손상, 심장 및 혈관에서 부작용을 수반하는 것으로 보고되었다.
따라서, 기존 골관절염 치료 약물의 부작용 문제로 인하여 부작용 위험이 적은 약물 개발에 대한 수요가 높으며, 천연물 유래 약물이 상기한 부작용 문제에 대한 우려를 해소시킬 수 있는 유망한 후보로 여겨지고 있다.
이에, 다양한 천연물 유래 소재들이 제시되고 있으나, 현재까지 골관절염 개선용으로 개발된 건강기능식품 소재들의 효능에 대해서는 충분하지 못한 것으로 인식되고 있어, 여전히 향상된 효능의 천연물 유래 소재 개발이 요구되고 있다.
본 발명은 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공하는 것을 목적으로 한다.
1. 석묵 추출물을 포함하는 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
2. 위 1에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 알코올 또는 이들의 혼합용매 추출물인, 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
3. 위 1에 있어서, 상기 추출물은 열수 추출, 초음파 추출, 냉침 추출, 증류 추출 또는 환류 냉각 추출물인, 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
4. 석묵 추출물을 포함하는 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
5. 위 4에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 알코올 또는 이들의 혼합용매 추출물인, 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
6. 위 4에 있어서, 상기 추출물은 열수 추출, 초음파 추출, 냉침 추출, 증류 추출 또는 환류 냉각 추출물인, 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
본 발명 약학 조성물 및 건강기능식품은 연골세포에 항염증 효과가 있다.
본 발명 약학 조성물 및 건강기능식품은 연골보호효과가 있다.
본 발명 약학 조성물 및 건강기능식품은 연골기질분해효소들의 발현을 억제시키는 효과가 있다.
본 발명 약학 조성물 및 건강기능식품은 염증으로 분해된 연골기질 구성성분의 발현을 촉진시키는 효과가 있다.
도 1은 석묵 주정추출물의 RC(Rat Chondrocyte) 세포에 대한 독성효능 평가인 MTT assay 결과를 나타낸 자료이다.
도 2는 석묵 주정추출물의 RC(Rat Chondrocyte) 세포에 대한 Nitric Oxide assay 결과를 나타낸 자료이다.
도 3은 RC(Rat Chondrocyte) 세포에 대한 석묵 주정추출물의 연골보호효과를 보여주는 자료로, 연골 기질을 분해하는 이화효소인 ADAMTS-4, ADAMTS-5, MMP-1, MMP-3, MMP-13에 대한 발현을 분석한 결과이다.
도 4는 RC(Rat Chondrocyte) 세포에 대한 석묵 주정추출물의 연골보호효과를 보여주는 자료로, 연골기질을 구성요소인 collagen typeⅡ의 발현을 분석한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명은 골관절염 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 건강기능식품에 관한 것으로, 석묵 추출물을 포함함으로써, 골관절염에 대한 항염증 효과를 나타낼 수 있다.
홍조류 석묵(Campylaephora hypnaeoides)은 비단 풀목(目) 비단풀과 (科)에 속하는 사상형 해조류로 차상분지하며 정단부에 있는 낫 모양의 갈고리로 조간대 하부나 조하대에 서식하는 다른 해조류, 특히 모자반류에 부착하여 서식하는 착생해조류이다. 한천의 원료, 식용, 식품첨가물로 다양하게 활용되고 있다.
추출용매는 공지의 추출용매라면 제한 없이 사용 가능하다. 예를 들어 물, C1 내지 C4 알코올 또는 이들의 혼합용매가 될 수 있고, 바람직하게는 에탄올이 될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
추출방법은 공지의 추출방법이라면 제한 없이 사용 가능하다. 예를 들어 열수 추출, 초음파 추출, 냉침 추출, 증류 추출, 또는 환류 냉각 추출 등의 추출방법일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
"추출물(extract)"은 액체 혼합물 또는 고체 혼합물로부터 용매에 의해 분리된 물질을 말한다.
추출물은 용액, 농축물 또는 분말 상태일 수 있다.
"예방"이란 조성물 및/또는 건강기능식품의 투여로 골관절염 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
"치료" 또는 "개선"이란 본원 조성물 및/또는 건강기능식품의 투여로 대사 질환의 증세를 호전시키거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다. 본원이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면, 대한의학협회 등에서 제시된 자료를 참조하여 본원의 조성물이 효과가 있는 질환의 정확한 기준을 알고, 개선, 향상 및 치료된 정도를 판단할 수 있을 것이다.
본 발명의 조성물에는 약학적으로 허용 가능한 담체가 포함될 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체는 신체의 한 기관 또는 부분으로부터 신체의 다른 기관 또는 부분으로 활성 성분을 수송하는 역할을 하는 액체 또는 고체 충진제, 희석제, 부형제 또는 용매와 같은 약제학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 운반체(vehicle)를 의미한다. 본 발명의 조성물은 석묵 추출물과 함께 추가로 약학적으로 허용되는 1종 이상의 담체를 첨가하여 약제로 제조할 수 있다. 상기에서 '약학적으로 허용 가능한'이란 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 것을 말한다. 상기 담체로는 식염수, 완충 식염수, 물, 글리세롤 및 에탄올 등이 있으나 이에 한정되지 않으며, 당해 기술 분야에 알려진 적합한 제제를 모두 사용 가능하다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 비경구 투여될 수 있다.
본 발명에서 용어, "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 투여 대상에게 본 발명의 약제학적 조성물을 도입하는 것을 의미한다.
비경구적인 투여방법으로는 이에 한정되지는 않으나, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장내 투여일 수 있다.
비경구 투여용 제제의 경우에는 주사제, 크림제, 로션제, 외용연고제, 오일제, 보습제, 겔제, 에어로졸 및 비강 흡입제의 형태로 당업계에 공지된 방법으로 제형화할 수 있다.
경구 투여용 제제의 경우에 본 발명의 조성물은 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽 제, 슬러리제, 현탁액 등으로 당업계에 공지된 방법을 이용하여 제형화될 수 있다. 예를 들어, 경구용 제제는 활성성분을 고체 부형제와 배합한 다음 이를 분쇄하고 적합한 보조제를 첨가한 후 과립 혼합물로 가공함으로써 정제 또는 당의정제를 수득할 수 있다. 적합한 부형제의 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨 및 말티톨 등을 포함하는 당류와 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분 및 감자 전분 등을 포함하는 전분류, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오즈 및 하이드록시프로필메틸-셀 룰로즈 등을 포함하는 셀룰로즈류, 젤라틴, 폴리비닐피롤리돈 등과 같은 충전제가 포함될 수 있다. 또한, 경우에 따라 가교결합 폴리비닐피롤리돈, 한천, 알긴산 또는 나트륨 알기네이트 등을 붕해제로 첨가할 수 있다. 나 아가, 본 발명의 조성물은 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제 및 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 제제는 적합한 총 1일 사용량은 올바른 의학적 판단범위 내에서 처치의에 의해 결정될 수 있다. 특정 대상에 대한 구체적인 치료적 유효량은 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 경우에 따라 다른 제제가 사용되 는지의 여부를 비롯한 구체적 조성물, 대상의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 구체적 조성물과 함께 사용되거나 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자 와 의약 분야에 잘 알려진 유사 인자에 따라 다르게 적용하는 것이 바람직하다. 따라서, 본 발명의 조성물의 바람직한 투여량은 전술한 사항을 고려하여 결정할 수 있으며, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
본 발명의 조성물은 골관절염의 예방 또는 치료를 위하여 단독으로 사용하거나, 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물이 적용될 수 있는 대상은 이러한 질환이 발생할 수 있는 임의의 동물일 수 있으며, 상기 동물 은 인간 및 영장류뿐만 아니라, 소, 돼지, 양, 말, 개 및 고양이 등의 가축을 포함한다.
또한, 본 발명은 석묵 추출물을 포함하는 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품을 제공한다.
상기 건강기능식품은 골관절 통증 개선, 골관절 기능 개선, 골관절 염증 부종의 감소, 및 골관절염 예방 또는 개선에 도움이 된다.
상기 추출물의 추출용매 또는 추출방법에 대해서는 상기 설명과 같다.
본 발명의 건강기능식품은 상기 추출물을 포함한 음료 (알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품 (예: 과일통 조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품 (예: 햄, 소시지콘비이프 등), 빵류 및 면류 (예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게티, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품 (예: 버터, 치즈 등), 식용식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등일 수 있다.
또한, 본 발명의 건강기능식품은 정제, 환제, 산제, 과립제, 분말제, 캡슐제, 액제 제형 등으로 제형화된 것일 수도 있다. 이들은 담체, 희석제, 부형제 및 첨가제 중 하나 이상을 더 포함하여 제형화될 수 있다.
본 발명의 건강기능식품에 더 포함될 수 있는 첨가제로는, 천연 탄수화물, 향미제, 영양제, 비타민, 광물(전해질), 풍미제(합성 풍미제, 천연 풍미제 등), 착색제, 충진제(치즈, 초콜렛 등), 팩트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH조절제, 안정화제, 방부제, 산화 방지제, 글리세린, 알콜, 탄산화 제 및 과육으로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 성분을 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품은 천연 과일 쥬스 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
담체, 부형제, 희석제 및 첨가제의 구체적인 예로는 락토즈, 덱스트로즈, 슈크로즈, 솔비톨, 만니톨, 에리스리 톨, 전분, 아카시아 고무, 인산칼슘, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 미세결정성 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 메틸셀룰로즈, 물, 설탕시럽, 메틸셀룰로즈, 메틸 하이드록시 벤조에이트, 프로필하이드록시 벤조에이트, 활석, 스테아트산 마그네슘, 미네랄 오일 및 이들의 혼합물 등을 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상술한 제형 내 유효성분으로서의 본 발명의 건강기능식품의 함량은 사용 형태 및 목적, 사용자 상태, 증상의 종류 및 경중 등에 의하여 적절하게 조절할 수 있으며, 고형분 중량 기준으로 0.001 내지 99.9 중량%, 바람직하게는 0.01 내지 50 중량%일 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다.
제조예: 석물 추출물의 제조
원물 대비 20배수의 30%주정을 첨가한 후 90℃도에서 2시간 추출 수행 후 여과지로 용질과 용매를 분리, 이 후 회전감압농축기로 용매를 증발시키고 동결건조하였다. 실험수행을 위해 추출분말을 DW에 100mg/mL로 용해시킨 후 필터하여 실험에 이용하였다.
실시예: 석묵 추출물의 골관절염 치료 및 개선 효과 확인
1. 석묵 주정추출물의 연골세포 독성효능 평가(MTT assay)
생후 5일경 랫트의 무릎 관절에서 연골세포(Rat Chondrocytes, RC) 초대배양하였다. 12-well plate에 1×106 cell/mL로 seeding하였다. overnight 후 석묵 주정추출물을 각 0, 250, 500, 1000, 2000 μg/mL로 처리하여 24시간 반응시켰다. MTT solution (5mg/mL)을 mL당 100μL씩 첨가 후 4시간 추가 반응시켰다. 형성된 formazan을 DMSO를 넣어 용해한 후 590nm에서 흡광도 측정하였다(도 1).
세포 생존율 계산식은 하기 수학식 1과 같다.
[수학식 1]
실험 결과 석묵 주정추출물이 RC 세포에 독성이 없음을 확인할 수 있었다.
2. 석묵 주정추출물의 연골세포 항염증 평가(Nitric Oxide assay)
RC세포를 12-well plate에 1×106 cell/mL로 seeding하였다. overnight 후 석묵 주정추출물을 각 0, 125, 250, 500 μg/mL로 1시간 전처리한 후 IL-1β 2 ng/mL를 처리하여 24시간 반응시켰다. 반응액 제거 후, media 100μL와 Griess reagent 100 μL를 혼합하여 540nm에서 흡광도 측정하였다. NaNO3로 표준검량선 작성 후 배양액 내에 축적된 질산염 농도 측정하였다(도 2).
축적된 질산염 양이 적을수록 염증이 억제되었다고 간주되며, 실험 결과 석묵 주정추출물이 RC 세포에 항염증효과가 있음을 확인할 수 있었다.
3. 석묵 주정추출물의 연골보호효과 확인(Anti-catabolic activity)
RC세포를 12-well plate에 1×106 cell/mL로 seeding하였다. overnight 후 석묵 주정추출물을 각 0, 125, 250, 500 μg/mL로 1시간 처리한 후 IL-1b 2 μg/mL를 처리하여 24시간 반응시켰다. 반응액 제거 후, protein extraction buffer를 이용하여 total protein을 추출 및 정량하였다. 동량의 단백질로 western blot을 수행 후 각각 일차 항체를 부착하여 그 발현을 분석하였다(도 3).
연골기질을 분해하는 이화효소들의 발현이 적을수록 연골기질의 분해가 억제되어 연골 보호효과가 있다고 간주되며, 실험 결과 석묵 주정추출물이 연골기질을 분해하는 대표적인 이화효소(ADAMTS-4,5, MMP-1,3,13)들의 발현을 억제시킴으로써 연골보호효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
4. 석묵 주정추출물의 연골보호효과 확인(Chondroprotective effect)
RC세포를 12-well plate에 1×106 cell/mL로 seeding하였다. overnight 후 석묵 주정추출물을 각 0, 125, 250, 500 μg/mL로 1시간 처리한 후 IL-1b 2 μg/mL를 처리하여 24시간 반응시켰다. 반응액 제거 후, protein extraction buffer를 이용하여 total protein을 추출 및 정량하였다. 동량의 단백질로 western blot을 수행 후 각각 일차 항체를 부착하여 그 발현을 분석하였다(도 4).
염증에 의해 분해된 연골기질을 구성하는 물질들의 발현이 회복될수록 연골보호효과가 있다고 간주되며, 실험 결과 석묵 주정추출물이 연골기질을 구성하는 대표적인 구성성분(collagen typeⅡ)의 발현을 회복시킴으로써 연골보호효과가 있는 것을 확인할 수 있었다.
Claims (6)
- 석묵 추출물을 포함하는 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 알코올 또는 이들의 혼합용매 추출물인, 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 청구항 1에 있어서, 상기 추출물은 열수 추출, 초음파 추출, 냉침 추출, 증류 추출 또는 환류 냉각 추출물인, 골관절염의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
- 석묵 추출물을 포함하는 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
- 청구항 4에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4 알코올 또는 이들의 혼합용매 추출물인, 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
- 청구항 4에 있어서, 상기 추출물은 열수 추출, 초음파 추출, 냉침 추출, 증류 추출 또는 환류 냉각 추출물인, 골관절염의 예방 또는 개선용 건강기능식품.
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MURAKAMI SHIGERU, HIRAZAWA CHIHIRO, YOSHIKAWA RINA, MIZUTANI TOSHIKI, OHYA TAKUMA, MA NING, IKEMORI TAKAHIKO, ITO TAKASHI, MATSUZA: "Edible red seaweed Campylaephora hypnaeoides J. Agardh alleviates obesity and related metabolic disorders in mice by suppressing oxidative stress and inflammatory response", NUTRITION & METABOLISM, BIOMED CENTRAL. LONDON, GB, vol. 19, no. 1, 1 December 2022 (2022-12-01), GB , pages 4, XP093130729, ISSN: 1743-7075, DOI: 10.1186/s12986-021-00633-5 * |
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