WO2023284651A1 - N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺类化合物及其应用 - Google Patents

N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺类化合物及其应用 Download PDF

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WO2023284651A1
WO2023284651A1 PCT/CN2022/104706 CN2022104706W WO2023284651A1 WO 2023284651 A1 WO2023284651 A1 WO 2023284651A1 CN 2022104706 W CN2022104706 W CN 2022104706W WO 2023284651 A1 WO2023284651 A1 WO 2023284651A1
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吴凌云
孙建军
赵乐乐
陈曙辉
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南京明德新药研发有限公司
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    • A61K31/166—Amides, e.g. hydroxamic acids having aromatic rings, e.g. colchicine, atenolol, progabide having the carbon of a carboxamide group directly attached to the aromatic ring, e.g. procainamide, procarbazine, metoclopramide, labetalol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • C07C233/44—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by amino groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by a carbon atom of a six-membered aromatic ring having the carbon atom of the carboxamide group bound to a carbon atom of an unsaturated carbon skeleton

Definitions

  • the present invention relates to a class of N-(2-aminophenyl)benzamide compounds and applications thereof, in particular to compounds represented by formula (I) and pharmaceutically acceptable salts thereof.
  • Epigenetics means that the DNA sequence does not change but the gene expression undergoes heritable changes, that is, the genotype does not change but the phenotype changes, and this change can be stably inherited during cell proliferation[Berger S L, Kouzarides T, Shiekhattar R, et al. An operational definition of epigenetics. Genes & development, 2009, 23(7): 781-783.].
  • the regulatory mechanism of epigenetics includes DNA methylation, histone modification, chromatin remodeling and non-coding RNA [Holliday R. Epigenetics: a historical overview. Epigenetics, 2006, 1(2): 76-80.].
  • histone post-translational modifications are an important link in epigenetic regulation, mainly including histone acetylation, methylation, phosphorylation, ubiquitination, ubiquitination, and glycosylation. , ADP ribosylation, carbonylation, etc. [Walsh G, Jefferis R. Post-translational modifications in the context of therapeutic proteins. Nature biotechnology, 2006, 24(10): 1241-1252.].
  • Histone acetylation regulation is coordinated by histone acetyl transferases (histone acetyl transferases, HATs) and histone deacetylases (histone deacetylases, HDACs).
  • HATs catalyze the transfer of acetyl groups to histone lysine side chains; HDACs, in contrast to HATs, participate in transcriptional regulation by removing the acetyl group of histone lysine ⁇ -amino groups.
  • HDACs include 18 subtypes, which can be divided into four classes: class I includes HDAC1, HDAC2, HDAC3, and HDAC8 subtypes; class IIa includes HDAC4, HDAC5, HDAC7, and HDAC9 subtypes; class IIb includes HDAC6 and HDAC10; class IV HDAC11 includes There are catalytic sites for class I and class II HDACs; class III HDACs are nicotinamide adenosine (NAD + )-dependent sirtunis family of sirtunis (SIRT1-7), which cannot be inhibited by inhibitors of class I and class II HDACs Inhibition [Bolden J E, Peart M J, Johnstone R W. Anticancer activities of histone deacetylase inhibitors. Nature reviews Drug discovery, 2006,5(9):769-784.].
  • NAD + nicotinamide adenosine
  • SIRT1-7 sirtunis family of sirtunis
  • HDAC1 is overexpressed in some prostate, gastric, colon, and breast cancer cases; HDAC2 is overexpressed in some colorectal, head and neck, and gastric cancers; HDAC3 is overexpressed in some colon cancers and HDAC6 is overexpressed in some breast cancer cases . Therefore, the development of HDAC inhibitors is of great significance for tumor therapy.
  • HDAC inhibitors There are currently 5 HDAC inhibitors on the market, 3 of which are in Phase III clinical research, and 13 are in Phase II clinical research. These research results show that targeting HDACs as an epigenetic treatment can withstand clinical verification, and the development of HDAC inhibitors as anti-tumor drugs has broad application prospects.
  • Lysine specific demethylase 1 (LSD1, also known as KDM1A) is the first reported histone lysine demethylase, by regulating the methylation of histone lysine It is widely involved in transcriptional regulation, affecting many physiological processes such as cell proliferation and differentiation, and pluripotency of embryonic stem cells. [Yujiang Shi, Fei Lan, Caitlin Matson et al., Cell, 2004, 941–953] [Daniel P. Mould, Alison E. McGonagle, Daniel H.
  • LSD1 is aberrantly expressed in many different types of tumors.
  • LSD1 is highly expressed in acute myeloid leukemia (AML) subtypes and is an important factor for maintaining the potential of leukemia stem cells (LSC).
  • AML acute myeloid leukemia
  • LSC leukemia stem cells
  • LSD1 is highly expressed in a variety of solid tumors such as lung cancer, breast cancer, prostate cancer, liver cancer and pancreatic cancer, and is closely related to poor prognosis of tumors.
  • LSD1 inhibits the expression of cadherin, which is closely related to tumor invasion and epithelial-mesenchymal transition (EMT) [Hosseini A, Minucci S. Epigenomics, 2017, 9, 1123-1142.].
  • EMT epithelial-mesenchymal transition
  • LSD1 inhibitors currently have no drugs approved for marketing, and 8 drugs are in the clinical research stage, mainly for the treatment of hematological tumors, small cell lung cancer, and Ewing's sarcoma.
  • 8 drugs are in the clinical research stage, mainly for the treatment of hematological tumors, small cell lung cancer, and Ewing's sarcoma.
  • this field still needs candidate compounds with better activity and better pharmacokinetic parameters to advance to clinical trials to meet the therapeutic needs.
  • HDAC1/2 and LSD1 together constitute the transcription complex NuRD or CoREST, which play a regulatory role in deacetylation and demethylation [Laugesen, A. & Helin, K. Chromatin repressive complexes in stem cells, development, and cancer. Cell Stem. Cell 14, 735–751 (2014).]. Therefore, the development of HDAC/LSD1 dual inhibitors with synergistic mechanism of action is expected to become an epigenetic regulation drug with high efficiency and low toxicity.
  • the present invention provides a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof,
  • T 1 , T 2 , T 3 and T 4 are each independently CH or N;
  • T 5 is CH or N
  • T6 is CH or N
  • D 1 is a single bond, -CH 2 - or -CH 2 -CH 2 -,;
  • D 2 is -CH 2 -, -CH 2 -CH 2 -, -CH 2 -CH 2 -CH 2 -, -O-CH 2 -CH 2 - or -S-CH 2 -CH 2 -;
  • L 11 is a single bond or -CH 2 -, and L 11 is connected to a ring atom on ring A;
  • L 12 is a single bond, -O- or -NH-;
  • R 11 , R 12 , R 13 and R 14 are independently H, F, Cl, Br, I, C 1-3 alkyl, C 1-3 alkoxy, phenyl or 5-6 membered heteroaryl , wherein the C 1-3 alkyl, C 1-3 alkoxy, phenyl and 5-6 membered heteroaryl are independently optionally substituted by 1, 2 or 3 R a ;
  • R 2 are independently H, F, Cl, Br, I, CN, COOH, OH, NH 2 , C 1-3 alkyl or C 1-3 alkoxy, wherein the C 1-3 alkyl and C 1-3 alkoxy groups are independently optionally substituted by 1, 2 or 3 R b ;
  • R 4 is H, COOH, C 1-6 alkyl, C 3-6 cycloalkyl, 3-6 membered heterocycloalkyl, 5-6 membered heteroaryl or phenyl, wherein the C 1-6 alkane Base, C 3-6 cycloalkyl, 3-6 membered heterocycloalkyl, 5-6 membered heteroaryl and phenyl are independently optionally substituted by 1, 2 or 3 R c ;
  • R 5 are independently H or C 1-3 alkyl
  • two R5s connected to the same C atom form a C 3-6 membered cycloalkyl group together with the C atom to which they are connected;
  • R 6 are independently H or C 1-3 alkyl
  • R a and R b are independently F, Cl, Br, I, OH or NH 2 ;
  • R c are independently F, Cl, Br, I, CN, COOH, C 1-3 alkyl or C 1-3 alkoxy, wherein the C 1-3 alkyl and C 1-3 alkoxy each independently optionally substituted by 1, 2 or 3 R;
  • R are independently F, Cl, Br, I, OH or NH 2 ;
  • n 1, 2, 3 or 4;
  • T 1 and T 2 are independently CH or N, and other variables are as defined in the present invention.
  • T 3 and T 4 are independently CH or N, and other variables are as defined in the present invention.
  • D 1 is a single bond or -CH 2 , and other variables are as defined in the present invention.
  • the above-mentioned D 2 is -CH 2 -, -CH 2 -CH 2 -, -CH 2 -CH 2 -CH 2 - or -O-CH 2 -CH 2 -, and other variables are as in the present invention defined.
  • R b are each independently F, and other variables are as defined in the present invention.
  • R c are independently F, Cl, Br, I, CN, COOH, CH 3 , CF 3 , or -OCH3 , other variables are as defined herein.
  • R 11 , R 12 , R 13 and R 14 are each independently H, F, Cl, Br or I, and other variables are as defined in the present invention.
  • R 11 , R 13 and R 14 are each independently H, and other variables are as defined in the present invention.
  • R 12 is H or F, and other variables are as defined in the present invention.
  • R 2 are independently H, F, Cl, Br, I, CN, COOH, OH, NH 2 , -OCH 3 , -CF 3 , -OCHF 2 or -OCF 3 , other Variables are as defined herein.
  • R 2 are independently H, F, Cl, CN, -OCH 3 , -CF 3 , -OCHF 2 or -OCF 3 , and other variables are as defined in the present invention.
  • R 3 is H
  • Other variables are as defined herein.
  • R 4 is H, COOH, C 1-6 alkyl, C 3-6 cycloalkyl, 3-6 membered heterocycloalkyl, 6 membered heteroaryl or phenyl, wherein all The C 1-6 alkyl, C 3-6 cycloalkyl, 3-6 membered heterocycloalkyl, 6 membered heteroaryl and phenyl are independently optionally substituted by 1, 2 or 3 R c , Other variables are as defined herein.
  • R 4 is H, COOH, CH 3 , Wherein said CH 3 , are each independently optionally substituted by 1, 2 or 3 R c , other variables are as defined in the present invention.
  • R 4 is H, COOH, CH 3 , Wherein said CH 3 , are each independently optionally substituted by 1, 2 or 3 R c , other variables are as defined in the present invention.
  • R 4 is H, COOH, CH 3 , CF 3 , Other variables are as defined herein.
  • R 4 is H, COOH, CH 3 , CF 3 , Other variables are as defined herein.
  • R 4 is H, COOH, CH 3 , CF 3 , Other variables are as defined herein.
  • R 5 are independently H or CH 3 , and other variables are as defined in the present invention.
  • R 6 are independently H or CH 3 , and other variables are as defined in the present invention.
  • m, T 1 , T 2 , T 3 , T 4 , T 5 , T 6 , D 1 , D 2 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 2 , R 3 , R 4 , L 1 and L2 are as defined in the present invention.
  • m, T 1 , T 2 , T 3 , T 4 , T 6 , D 2 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 2 , R 3 , R 4 , L 1 and L 2 are as in the present invention defined.
  • m, T 3 , T 4 , T 6 , D 1 , D 2 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 2 , R 3 , R 4 , L 1 and L 2 are as defined in the present invention .
  • the present invention also provides the following compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof,
  • the present invention also provides the above compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof, wherein the pharmaceutically acceptable salt is hydrochloride or trifluoroacetic acid salt.
  • the compound of the present invention has significant inhibitory activity on dual targets of HDAC1 and LSD1, obvious inhibitory activity on MCF-7, MDA-MB-231 and BT-474 cell proliferation, and good pharmacokinetic properties.
  • pharmaceutically acceptable refers to those compounds, materials, compositions and/or dosage forms, which are suitable for use in contact with human and animal tissues within the scope of sound medical judgment , without undue toxicity, irritation, allergic reaction or other problems or complications, commensurate with a reasonable benefit/risk ratio.
  • pharmaceutically acceptable salt refers to a salt of a compound of the present invention, which is prepared from a compound having a specific substituent found in the present invention and a relatively non-toxic acid or base.
  • base addition salts can be obtained by contacting such compounds with a sufficient amount of base, either neat solution or in a suitable inert solvent.
  • acid addition salts can be obtained by contacting such compounds with a sufficient amount of the acid, either neat solution or in a suitable inert solvent.
  • Certain specific compounds of the present invention contain basic and acidic functional groups and can thus be converted into either base or acid addition salts.
  • the pharmaceutically acceptable salts of the present invention can be synthesized from the parent compound containing acid groups or bases by conventional chemical methods.
  • such salts are prepared by reacting the free acid or base form of these compounds with a stoichiometric amount of the appropriate base or acid in water or an organic solvent or a mixture of both.
  • the compounds of the invention may exist in particular geometric or stereoisomeric forms.
  • the present invention contemplates all such compounds, including cis and trans isomers, (-)- and (+)-enantiomers, (R)- and (S)-enantiomers, diastereomers isomers, (D)-isomers, (L)-isomers, and their racemic and other mixtures, such as enantiomerically or diastereomerically enriched mixtures, all of which are subject to the present within the scope of the invention.
  • Additional asymmetric carbon atoms may be present in substituents such as alkyl groups. All such isomers, as well as mixtures thereof, are included within the scope of the present invention.
  • enantiomer or “optical isomer” refer to stereoisomers that are mirror images of each other.
  • cis-trans isomers or “geometric isomers” arise from the inability to rotate freely due to the double bond or the single bond of the carbon atoms forming the ring.
  • diastereoisomer refers to stereoisomers whose molecules have two or more chiral centers and which are not mirror images of the molecules.
  • keys with wedge-shaped solid lines and dotted wedge keys Indicates the absolute configuration of a stereocenter, with a straight solid-line bond and straight dashed keys Indicates the relative configuration of the stereocenter, with a wavy line Indicates wedge-shaped solid-line bond or dotted wedge key or with tilde Indicates a straight solid line key and straight dashed keys
  • the following formula (A) means that the compound exists as a single isomer of formula (A-1) or formula (A-2) or as two isomers of formula (A-1) and formula (A-2).
  • the following formula (B) means that the compound exists in the form of a single isomer of formula (B-1) or formula (B-2) or in the form of both formula (B-1) and formula (B-2) It exists as a mixture of isomers.
  • the following formula (C) represents that the compound exists in the form of a single isomer of formula (C-1) or formula (C-2) or in the form of two isomers of formula (C-1) and formula (C-2). It exists in the form of a mixture.
  • tautomer or “tautomeric form” means that isomers with different functional groups are in dynamic equilibrium at room temperature and are rapidly interconvertible. If tautomerism is possible (eg, in solution), then chemical equilibrium of the tautomers can be achieved.
  • proton tautomers also called prototropic tautomers
  • prototropic tautomers include interconversions via migration of a proton, such as keto-enol isomerization and imine-ene Amine isomerization.
  • Valence isomers (valence tautomers) involve interconversions by recombination of some bonding electrons.
  • keto-enol tautomerization is the interconversion between two tautomers of pentane-2,4-dione and 4-hydroxypent-3-en-2-one.
  • the terms “enriched in an isomer”, “enriched in an isomer”, “enriched in an enantiomer” or “enantiomerically enriched” refer to one of the isomers or enantiomers
  • the content of the enantiomer is less than 100%, and the content of the isomer or enantiomer is greater than or equal to 60%, or greater than or equal to 70%, or greater than or equal to 80%, or greater than or equal to 90%, or greater than or equal to 95%, or Greater than or equal to 96%, or greater than or equal to 97%, or greater than or equal to 98%, or greater than or equal to 99%, or greater than or equal to 99.5%, or greater than or equal to 99.6%, or greater than or equal to 99.7%, or greater than or equal to 99.8%, or greater than or equal to 99.9%.
  • the terms “isomer excess” or “enantiomeric excess” refer to the difference between the relative percentages of two isomers or two enantiomers. For example, if the content of one isomer or enantiomer is 90% and the other isomer or enantiomer is 10%, then the isomer or enantiomeric excess (ee value) is 80% .
  • Optically active (R)- and (S)-isomers as well as D and L-isomers can be prepared by chiral synthesis or chiral reagents or other conventional techniques. If one enantiomer of a compound of the invention is desired, it can be prepared by asymmetric synthesis or derivatization with chiral auxiliary agents, wherein the resulting diastereomeric mixture is separated and the auxiliary group is cleaved to provide pure desired enantiomer.
  • a diastereomeric salt is formed with an appropriate optically active acid or base, and then a diastereomeric salt is formed by a conventional method known in the art. Diastereomeric resolution is performed and the pure enantiomers are recovered. Furthermore, the separation of enantiomers and diastereomers is usually accomplished by the use of chromatography using chiral stationary phases, optionally in combination with chemical derivatization methods (e.g. from amines to amino groups formate).
  • the compounds of the present invention may contain unnatural proportions of atomic isotopes at one or more of the atoms that constitute the compounds.
  • compounds may be labeled with radioactive isotopes such as tritium ( 3 H), iodine-125 ( 125 I) or C-14 ( 14 C).
  • radioactive isotopes such as tritium ( 3 H), iodine-125 ( 125 I) or C-14 ( 14 C).
  • heavy hydrogen can be used to replace hydrogen to form deuterated drugs.
  • the bond formed by deuterium and carbon is stronger than the bond formed by ordinary hydrogen and carbon.
  • deuterated drugs can reduce toxic side effects and increase drug stability. , enhance the efficacy, prolong the biological half-life of drugs and other advantages. All changes in isotopic composition of the compounds of the invention, whether radioactive or not, are included within the scope of the invention.
  • "Optional" or “optionally” means that the subsequently described event or circumstance can but need not occur, and that the description includes instances where said
  • substituted refers to the replacement of any one or more hydrogen atoms on a specified atom with a substituent, which may include deuterium and hydrogen variants, as long as the valence of the specified atom is normal and the substituted compound is stable of.
  • Oxygen substitution does not occur on aromatic groups.
  • optionally substituted means that it may or may not be substituted, and unless otherwise specified, the type and number of substituents may be arbitrary on a chemically realizable basis.
  • any variable eg, R
  • its definition is independent at each occurrence.
  • said group may optionally be substituted with up to two R, with independent options for each occurrence of R.
  • substituents and/or variations thereof are permissible only if such combinations result in stable compounds.
  • linking group When the number of a linking group is 0, such as -(CRR) 0 -, it means that the linking group is a single bond.
  • substituent When a substituent is vacant, it means that the substituent does not exist. For example, when X in A-X is vacant, it means that the structure is actually A. When the enumerated substituent does not indicate which atom it is connected to the substituted group, this substituent can be bonded through any atom, for example, pyridyl as a substituent can be connected to any atom on the pyridine ring. The carbon atom is attached to the group being substituted.
  • linking group listed does not indicate its linking direction
  • its linking direction is arbitrary, for example,
  • the connecting group L in the middle is -MW-, at this time -MW- can connect ring A and ring B in the same direction as the reading order from left to right to form It can also be formed by connecting loop A and loop B in the opposite direction to the reading order from left to right
  • any one or more sites of the group can be linked to other groups through chemical bonds.
  • connection method of the chemical bond is not positioned, and there is an H atom at the connectable site, when the chemical bond is connected, the number of H atoms at the site will decrease correspondingly with the number of chemical bonds connected to become the corresponding valence group.
  • the chemical bonds that the site connects with other groups can use straight solid line bonds Straight dotted key or tilde express.
  • the straight-shaped solid-line bond in -OCH3 indicates that it is connected to other groups through the oxygen atom in the group;
  • the straight dotted line bond indicates that the two ends of the nitrogen atom in the group are connected to other groups;
  • the wavy lines in indicate that the 1 and 2 carbon atoms in the phenyl group are connected to other groups;
  • the number of atoms in a ring is generally defined as the number of ring members, eg, "5-7 membered ring” means a “ring” with 5-7 atoms arranged around it.
  • C 1-6 alkyl is used to denote a straight or branched chain saturated hydrocarbon group consisting of 1 to 6 carbon atoms.
  • the C 1-6 alkyl group includes C 1-5 , C 1-4 , C 1-3 , C 1-2 , C 2-6 , C 2-4 , C 6 and C 5 alkyl, etc.; it can be Is monovalent (such as methyl), divalent (such as methylene) or multivalent (such as methine).
  • C 1-6 alkyl groups include, but are not limited to, methyl (Me), ethyl (Et), propyl (including n-propyl and isopropyl), butyl (including n-butyl, isobutyl , s-butyl and t-butyl), pentyl (including n-pentyl, isopentyl and neopentyl), hexyl, etc.
  • C 1-3 alkyl is used to denote a straight or branched chain saturated hydrocarbon group consisting of 1 to 3 carbon atoms.
  • the C 1-3 alkyl group includes C 1-2 and C 2-3 alkyl groups, etc.; it can be monovalent (such as methyl), divalent (such as methylene) or multivalent (such as methine) .
  • Examples of C 1-3 alkyl include, but are not limited to, methyl (Me), ethyl (Et), propyl (including n-propyl and isopropyl), and the like.
  • C 1-3 alkoxy denotes those alkyl groups containing 1 to 3 carbon atoms attached to the rest of the molecule through an oxygen atom.
  • the C 1-3 alkoxy group includes C 1-2 , C 2-3 , C 3 and C 2 alkoxy groups and the like.
  • Examples of C 1-3 alkoxy include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy (including n-propoxy and isopropoxy), and the like.
  • C 3-6 cycloalkyl means a saturated cyclic hydrocarbon group composed of 3 to 6 carbon atoms, which is a monocyclic and bicyclic system, and the C 3-6 cycloalkyl includes C 3-5 , C 4-5 and C 5-6 cycloalkyl, etc.; it may be monovalent, divalent or multivalent.
  • Examples of C 3-6 cycloalkyl include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl and the like.
  • a heteroatom may occupy the attachment position of the heterocycloalkyl to the rest of the molecule.
  • the 3-6-membered heterocycloalkyl group includes 4-6-membered, 5-6-membered, 4-membered, 5-membered and 6-membered heterocycloalkyl groups and the like.
  • Examples of 3-6 membered heterocycloalkyl groups include, but are not limited to, azetidinyl, oxetanyl, thietanyl, pyrrolidinyl, pyrazolidinyl, imidazolidinyl, tetrahydrothiophenyl ( Including tetrahydrothiophen-2-yl and tetrahydrothiophen-3-yl, etc.), tetrahydrofuranyl (including tetrahydrofuran-2-yl, etc.), tetrahydropyranyl, piperidinyl (including 1-piperidinyl, 2- piperidinyl and 3-piperidinyl, etc.), piperazinyl (including 1-piperazinyl and 2-piperazinyl, etc.), morpholinyl (including 3-morpholinyl and 4-morpholinyl, etc.), Dioxanyl, dithianyl, isoxazolidinyl, isothiazolid
  • halogen or halogen by itself or as part of another substituent means a fluorine, chlorine, bromine or iodine atom.
  • the 5-6 membered heteroaryl can be attached to the rest of the molecule through a heteroatom or a carbon atom.
  • the 5-6 membered heteroaryl includes 5 and 6 membered heteroaryl.
  • Examples of the 5-6 membered heteroaryl groups include, but are not limited to, pyrrolyl (including N-pyrrolyl, 2-pyrrolyl and 3-pyrrolyl, etc.), pyrazolyl (including 2-pyrazolyl and 3-pyrrolyl Azolyl, etc.), imidazolyl (including N-imidazolyl, 2-imidazolyl, 4-imidazolyl and 5-imidazolyl, etc.), oxazolyl (including 2-oxazolyl, 4-oxazolyl and 5- Oxazolyl, etc.), triazolyl (1H-1,2,3-triazolyl, 2H-1,2,3-triazolyl, 1H-1,2,4-triazolyl and 4H-1, 2,4-triazolyl, etc.
  • 6-membered heteroaryl ring and “6-membered heteroaryl” in the present invention can be used interchangeably.
  • a 6-membered heteroaryl can be attached to the rest of the molecule through a heteroatom or a carbon atom.
  • 6-membered heteroaryl group examples include, but are not limited to, pyridyl (including 2-pyridyl, 3-pyridyl and 4-pyridyl, etc.), pyrazinyl, morpholinyl or pyrimidyl (including 2-pyrimidyl and 4-pyrimidinyl, etc.).
  • C n-n+m or C n -C n+m includes any specific instance of n to n+m carbons, for example C 1-12 includes C 1 , C 2 , C 3 , C 4 , C 5 , C 6 , C 7 , C 8 , C 9 , C 10 , C 11 , and C 12 , also including any range from n to n+m, for example, C 1-12 includes C 1-3 , C 1-6 , C 1-9 , C 3-6 , C 3-9 , C 3-12 , C 6-9 , C 6-12 , and C 9-12 etc.; similarly, n to n +m means that the number of atoms on the ring is n to n+m, for example, a 3-12-membered ring includes a 3-membered ring, a 4-membered ring, a 5-membered ring, a 6-membered ring, a 7-membered ring, an 8-membere
  • leaving group refers to a functional group or atom that can be replaced by another functional group or atom through a substitution reaction (eg, a nucleophilic substitution reaction).
  • a substitution reaction eg, a nucleophilic substitution reaction
  • representative leaving groups include triflate; chlorine, bromine, iodine; sulfonate groups such as mesylate, tosylate, brosylate, tosylate esters, etc.; acyloxy groups such as acetoxy, trifluoroacetoxy, and the like.
  • protecting group includes, but is not limited to, "amino protecting group", “hydroxyl protecting group” or “mercapto protecting group”.
  • amino protecting group refers to a protecting group suitable for preventing side reactions at the amino nitrogen position.
  • Representative amino protecting groups include, but are not limited to: formyl; acyl, such as alkanoyl (such as acetyl, trichloroacetyl or trifluoroacetyl); alkoxycarbonyl, such as tert-butoxycarbonyl (Boc) ; arylmethoxycarbonyl, such as benzyloxycarbonyl (Cbz) and 9-fluorenylmethyloxycarbonyl (Fmoc); arylmethyl, such as benzyl (Bn), trityl (Tr), 1,1-di -(4'-methoxyphenyl)methyl; silyl groups such as trimethylsilyl (TMS) and tert-butyldimethylsilyl (TBS) and the like.
  • acyl such as alkanoyl (such as acetyl, trichloroacetyl or trifluoroacetyl); alkoxycarbonyl, such as
  • hydroxyl protecting group refers to a protecting group suitable for preventing side reactions of the hydroxy group.
  • Representative hydroxy protecting groups include, but are not limited to: alkyl, such as methyl, ethyl, and tert-butyl; acyl, such as alkanoyl (such as acetyl); arylmethyl, such as benzyl (Bn), p-formyl Oxybenzyl (PMB), 9-fluorenylmethyl (Fm) and diphenylmethyl (diphenylmethyl, DPM); silyl groups such as trimethylsilyl (TMS) and tert-butyl Dimethylsilyl (TBS) and the like.
  • alkyl such as methyl, ethyl, and tert-butyl
  • acyl such as alkanoyl (such as acetyl)
  • arylmethyl such as benzyl (Bn), p-formyl Oxybenzyl (PMB), 9
  • the compounds of the present invention can be prepared by a variety of synthetic methods well known to those skilled in the art, including the specific embodiments listed below, the embodiments formed by combining them with other chemical synthesis methods, and the methods well known to those skilled in the art Equivalent alternatives, preferred embodiments include but are not limited to the examples of the present invention.
  • the structure of the compounds of the present invention can be confirmed by conventional methods known to those skilled in the art. If the present invention involves the absolute configuration of the compound, the absolute configuration can be confirmed by conventional technical means in the art. For example, in single crystal X-ray diffraction (SXRD), the cultured single crystal is collected with a Bruker D8 venture diffractometer to collect diffraction intensity data, the light source is CuK ⁇ radiation, and the scanning method is: After scanning and collecting relevant data, the absolute configuration can be confirmed by further analyzing the crystal structure by direct method (Shelxs97).
  • SXRD single crystal X-ray diffraction
  • the detection of the optical rotation value uses Auton Paar MCP500 instrument, sodium light, the wavelength of the light source is 589nm, the length of the liquid holding tube is 1dm, and the detection temperature is 25°C.
  • aq stands for water
  • HATU O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate
  • EDC represents N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylcarbodiimide hydrochloride
  • eq represents equivalent, equivalent
  • CDI represents carbonyldiimidazole
  • DCM represents dichloromethane
  • PE represents Petroleum ether
  • DIAD stands for diisopropyl azodicarboxylate
  • DMF stands for N,N-dimethylformamide
  • DMSO stands for dimethylsulfoxide
  • EtOAc stands for ethyl acetate
  • EtOH stands for ethanol
  • MeOH stands for methanol
  • BOC stands for tert-butoxycarbonyl is an amine protecting group
  • HOAc stands for acetic
  • reaction solution was slowly poured into a stirred saturated aqueous ammonium chloride solution (1000mL) to quench, extracted with ethyl acetate (800mL ⁇ 3), the organic phase was washed with saturated aqueous sodium chloride solution (1000mL ⁇ 1), and washed with anhydrous sulfuric acid Dry over sodium, filter, and concentrate the filtrate under reduced pressure.
  • the crude product is separated by silica gel column chromatography (10:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound A-3.
  • reaction solution was slowly poured into a stirred saturated aqueous ammonium chloride solution (800mL) to quench, extracted with ethyl acetate (500mL ⁇ 3), the organic phase was washed with saturated aqueous sodium chloride solution (800mL ⁇ 1), and washed with anhydrous sulfuric acid Dry over sodium, filter, and concentrate the filtrate under reduced pressure.
  • the crude product is separated by silica gel column chromatography (10:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound A-5.
  • reaction solution was concentrated under reduced pressure to remove the organic solvent, the residue was dissolved in water (50 mL), adjusted to pH 9 with saturated sodium carbonate, extracted with ethyl acetate (80 mL ⁇ 2), and the aqueous phase was adjusted to pH with hydrochloric acid (1 mol/L) to 5, extracted with ethyl acetate (100 mL ⁇ 3), the organic phase was washed with saturated aqueous sodium chloride solution (100 mL ⁇ 1), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain compound A-6.
  • reaction solution was diluted with dichloromethane (50mL), washed with saturated aqueous sodium bicarbonate (50mL ⁇ 1) and saturated brine (50mL ⁇ 1), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, the filtrate was concentrated under reduced pressure, and the crude product was passed through Compound 5-2 was obtained by separation and purification by thin layer chromatography (1:2 petroleum ether/ethyl acetate). MS-ESI calculated [M+H] + 633, found 633.
  • the aqueous phase was adjusted to pH 5 with hydrochloric acid (1 mol/L), extracted with ethyl acetate (200 mL ⁇ 2), the organic phase was washed with saturated aqueous sodium chloride solution (200 mL ⁇ 1), dried over anhydrous sodium sulfate, and filtered. The filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain crude compound 7-5.
  • the compound 22-2 and 22-3 mixture (350mg, 0.166mmol) was dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (5mL), and diethylamine (121mg, 1.66mmol) and tetrakistriphenylphosphopalladium (19.2mg, 16.6 ⁇ mol) were added , The system was raised to 70°C and then stirred for 1 hour. The reaction solution was concentrated under reduced pressure, and the crude product was separated by preparative high performance liquid chromatography (acidic, hydrochloric acid system) to obtain the hydrochloride of compound 22 and the hydrochloride of compound 23.
  • reaction solution was added dropwise to water (50mL) under stirring, filtered, the filter cake was washed with water (10mL ⁇ 2), and the filter cake was dried under reduced pressure.
  • the crude product was subjected to thin-layer chromatography (1:1.5 petroleum ether/ethyl acetate ester) separation and purification to obtain compound 29-8.
  • Lithium hydroxide monohydrate (796mg, 19.0mmol) was dissolved in water (25mL), and hydrogen peroxide (2.15g, 31.6mmol) was added to the reaction solution. The reaction solution was stirred at 25°C for 0.5 hours. The reaction solution was added to a solution of compound B-6 (5.57 g, 15.8 mmol) in tetrahydrofuran (50 mL) and water (25 mL), and the reaction solution was stirred at 25° C. for 2.5 hours.
  • Lithium hydroxide monohydrate (792mg, 18.9mmol) was dissolved in water (25mL), and hydrogen peroxide (2.14g, 31.5mmol) was added to the reaction solution. The reaction solution was stirred at 25°C for 0.5 hours. The reaction solution was added to a solution of compound B-7 (5.54 g, 15.7 mmol) in tetrahydrofuran (50 mL) and water (25 mL), and the reaction solution was stirred at 25° C. for 2.5 hours.
  • Lithium aluminum hydride (117mg, 3.09mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (5mL), and a tetrahydrofuran solution (5mL) of compound 32-1 (300mg, 1.03mmol) was added dropwise to the reaction solution, and the reaction solution was kept at 25°C under nitrogen protection. Stir for 12 hours, quench the reaction solution with water (0.05mL), sodium hydroxide (4mol/L, 0.05mL), water (0.1mL), filter, dry the filtrate with anhydrous sodium sulfate, filter, concentrate the filtrate under reduced pressure, and The product was separated by silica gel column chromatography (2:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound 32-2. MS-ESI calculated value [M-56+H] + 208, measured value 208.
  • compound 34-1 (50.0mg, 0.145mmol) was dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (10mL), and lithium aluminum tetrahydride (6.6mg, 0.174mmol) was added at 0°C, and the reaction solution was stirred at 0°C for 1 After 1 hour, water (0.5 mL) was added to the reaction solution at room temperature, followed by anhydrous magnesium sulfate (5.00 g), stirred for 10 minutes, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain compound 34-2.
  • MS-ESI calculated value [M-56+H] + 262, found value 262.
  • reaction solution was filtered through diatomaceous earth, the filtrate was diluted with ethyl acetate (100mL), washed with water (100mL ⁇ 3) and saturated brine (100mL ⁇ 1) successively, the organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was depressurized After concentration, the crude product was separated and purified by silica gel column chromatography (10:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound 37-1.
  • reaction solution was quenched with hydrochloric acid (1mol/L, 20mL) and stirred at room temperature for 10 minutes, neutralized with ammonia water (20mL), extracted with ethyl acetate (30mL ⁇ 2), combined organic phases, washed with saturated brine (50mL ⁇ 1) washed, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain compound 37-2.
  • reaction solution was cooled to room temperature, diluted with ethyl acetate (50 mL), washed with water (50 mL ⁇ 3) and saturated brine (50 mL ⁇ 1), respectively, the organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure.
  • the crude product was separated and purified by silica gel column chromatography (3:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound 38-3.
  • reaction solution was quenched with hydrochloric acid (1mol/L, 20mL) and stirred at room temperature for 10 minutes, neutralized with ammonia water (20mL), extracted with ethyl acetate (20mL ⁇ 2), combined organic phases, washed with saturated brine (50mL ⁇ 1) washed, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain compound 38-4.
  • MS-ESI calculated [M+H] + 372, found 372.
  • Triethylamine 99.4mg, 0.982mmol
  • compound 34-3 139mg, 0.786mmol
  • tetrahydrofuran 5mL
  • reaction solution was cooled to room temperature, diluted with ethyl acetate (50 mL), washed with water (50 mL ⁇ 3) and saturated brine (50 mL ⁇ 1), respectively, the organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure.
  • the crude product was separated and purified by silica gel column chromatography (4:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound 42-2.
  • reaction solution was quenched with hydrochloric acid (1mol/L, 30mL), stirred at 25°C for 10 minutes, adjusted to neutral pH with ammonia water, extracted with ethyl acetate (30mL ⁇ 2), combined organic phases, and washed with saturated brine (50 mL ⁇ 1), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure to obtain compound 42-3.
  • Tri-n-propyl cyclic phosphoric anhydride (50% ethyl acetate solution, 8.65g, 13.6mmol), N,N-diisopropylethylamine (2.64g, 20.4mmol) and compound 44-1 (1.00g, 6.80 mmol) was dissolved in anhydrous N,N-dimethylformamide (20mL), compound 1-1 (1.70g, 8.16mmol) was added to the reaction solution, the reaction solution was stirred at 25°C for 12 hours, and the reaction solution was water (20mL), the mixture was extracted with ethyl acetate (30mL ⁇ 3), the organic phase was washed with saturated sodium chloride (30mL ⁇ 1), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, the filtrate was concentrated under reduced pressure, and the crude product was passed through silica gel Compound 44-2 was obtained by separation and purification by column chromatography (10:1 dichloromethane/methanol).
  • compound 44-7 (10.0 g, 37.0 mmol) was dissolved in tetrahydrofuran (100 mL) and water (20 mL), and lithium hydroxide monohydrate (4.66 g, 111 mmol) was added, and the reaction solution was stirred at 60 °C for 12 After hours, the reaction solution was concentrated under reduced pressure to remove tetrahydrofuran, the remaining liquid was adjusted to pH 3 with hydrochloric acid (1mol/L), water (200mL) was added, and extracted with dichloromethane (300mL ⁇ 6).
  • compound 45-4 (125 mg, 0.310 mmol) was dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (10 mL), and lithium tetrahydrohydride (23.6 mg, 0.621 mmol) was added at 0°C, and the reaction solution was stirred at 0°C for 2 hours , add water (0.2 mL) to the reaction solution at room temperature, then add anhydrous magnesium sulfate (3.00 g), stir for ten minutes, filter, and concentrate the filtrate to obtain compound 45-5.
  • MS-ESI calculated [M+H] + 375, found 375.
  • compound 46-2 (130mg, 0.702mmol) was dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (10mL), and lithium tetrahydrohydride (32.0mg, 0.842mmol) was added at 0°C, and the reaction solution was stirred at 0°C for 1 hour , add water (0.2 mL) to the reaction solution at room temperature, then add anhydrous magnesium sulfate (3.00 g), stir for ten minutes, filter, and concentrate the filtrate under reduced pressure to obtain compound 46-3.
  • compound 46-5 (70.0mg, 0.212mmol) was dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (20mL), then sodium bicarbonate (26.7mg, 0.318mmol) and di-tert-butyl dicarbonate (55.5mg, 0.254 mmol), the reaction solution was stirred at 25°C for 12 hours, water (20mL) was added to the reaction solution, extracted with ethyl acetate (20mL ⁇ 1), the organic phase was washed with saturated brine (20mL ⁇ 1), anhydrous sulfuric acid It was dried over sodium, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure. The residue was separated and purified by silica gel column chromatography (10:1 dichloromethane/methanol) to obtain compound 46-6. MS-ESI calculated [M+H] + 431, found 431.
  • Dissolve 34-2 (280mg, 882 ⁇ mol) in dichloromethane (5mL) at 0°C, add 4-dimethylaminopyridine (108mg, 882 ⁇ mol) and p-nitrophenyl chloroformate (231mg ,1.15mol). The reaction solution was reacted at 25° for 2 hours, and a solution of compound 47-3 hydrochloride (202 mg, 1.06 mol) in N,N-dimethylformamide (2 mL) was added at 0°C. The reaction was continued at 25° for 10 hours.
  • Dissolve 34-2 120 mg, 378 ⁇ mol in dichloromethane (5 mL) at 0° C., add dimethylaminopyridine (46.2 mg, 378 ⁇ mol) and p-nitrophenyl chloroformate (99.1 mg, 491 ⁇ mol) .
  • the reaction solution was reacted at 25°C for 2 hours, and a solution of compound 48-3 hydrochloride (80.4 mg, 453.7 ⁇ mol) in N,N-dimethylformamide (2 mL) was added at 0°C.
  • the reaction was carried out at 25°C for 10 hours.
  • Dissolve 36-8 (300 mg, 982 ⁇ mol) in anhydrous dichloromethane (5 mL) at 0° C., add dimethylaminopyridine (120 mg, 982 ⁇ mol) and p-nitrophenyl chloroformate (257 mg, 1.28 mmol) ). The reaction solution was reacted at 25°C for 2 hours, and a solution of compound 47-3 hydrochloride (188 mg, 982 ⁇ mol) in N,N-dimethylformamide (2 mL) was added at 0°C. The reaction was carried out at 25°C for 10 hours.
  • reaction solution was concentrated, water (60 mL) was added thereto, extracted with ethyl acetate (90 mL ⁇ 3), the combined organic phases were washed with saturated brine (90 mL ⁇ 3), dried over anhydrous sodium sulfate, and filtered.
  • the product was separated by preparative high performance liquid chromatography (neutral, ammonium bicarbonate system) to obtain compound 49-1. MS-ESI calculated [M+Na] + 545, found 545.
  • reaction solution was concentrated under reduced pressure, water (60 mL) was added thereto, extracted with ethyl acetate (90 mL ⁇ 3), the combined organic phase was washed with saturated brine (90 mL ⁇ 3), dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was reduced to Concentrate under pressure. The residue was separated by preparative high performance liquid chromatography (neutral, ammonium bicarbonate system) to obtain compound 50-1. MS-ESI calculated [M+Na] + 531, found 531.
  • N,N-diisopropylethylamine (186mg, 1.44mmol), O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N,N-tetramethyluronium hexafluorophosphate Salt (365mg, 0.960mmol) and compound 53-2 (244mg, 0.480mmol) were dissolved in anhydrous N,N-dimethylformamide (10mL), the reaction solution was stirred at 25°C for 1 hour, and added to the reaction solution Compound 1-1 (120mg, 0.576mmol) was added, the reaction solution was stirred at 25°C for 12 hours, the reaction solution was concentrated under reduced pressure, and the crude product was separated by thin layer chromatography (1:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound 53-3. MS-ESI calculated value [M-Boc+H] + 599, found value 599.
  • reaction solution was cooled to room temperature, diluted with ethyl acetate (50 mL), washed with water (50 mL ⁇ 3) and saturated brine (50 mL ⁇ 1), respectively, the organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, and the filtrate was concentrated under reduced pressure.
  • the crude product was separated and purified by silica gel column chromatography (10:1-5:1 petroleum ether/ethyl acetate) to obtain compound 54-2.
  • Dissolve compound 54-2 (320mg, 0.900mmol) in anhydrous methanol (8mL), cool to 0°C, add cobalt chloride (234mg, 1.80mmol), stir the reaction solution at 0°C for 5 minutes, add Sodium borohydride (341mg, 9.00mmol), the reaction solution was stirred at 28°C for 12 hours.
  • reaction solution was quenched with hydrochloric acid (1mol/L, 20mL) and stirred at room temperature for 10 minutes, neutralized with ammonia water (20mL), extracted with ethyl acetate (20mL ⁇ 2), combined organic phases with saturated brine (50mL ⁇ 2) 1) Wash, dry over anhydrous sodium sulfate, filter, and concentrate the filtrate under reduced pressure to obtain compound 54-3.
  • N,N-Diisopropylethylamine (237mg, 1.83mmol) was added to compound 55-1 (180mg, 1.01mmol) and compound 35-1 (420mg, 0.916mmol) in dichloromethane (5mL) at 0°C solution, the reaction solution was stirred and reacted at 25°C for 12 hours.

Abstract

涉及N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺类化合物及其应用，具体涉及式(I)所示化合物及其药学上可接受的盐。所述化合物对HDAC1和LSD1双靶点具有显著的抑制活性，对MCF-7、MDA-MB-231和BT-474细胞增殖抑制活性明显，并具有良好的药代动力学性质。

Description

N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺类化合物及其应用
本申请主张如下优先权：
CN202110785654.X，2021年07月12日。
技术领域
本发明涉及一类N-(2-氨基苯基)苯甲酰胺类化合物及其应用，具体涉及式(Ⅰ)所示化合物及其药学上可接受的盐。
背景技术
表观遗传是指DNA序列不发生变化但基因表达却发生了可遗传的改变，即基因型未变化但表型发生了改变，且这种改变在细胞增殖过程中能够稳定地遗传[Berger S L,Kouzarides T,Shiekhattar R,et al.An operational definition of epigenetics.Genes&development,2009,23(7):781-783.]。表观遗传的调控机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重塑和非编码RNA[Holliday R.Epigenetics:a historical overview.Epigenetics,2006,1(2):76-80.]。其中，组蛋白翻译后修饰(post-translational modifications，PTMs)是表观遗传调控的重要环节，主要包括组蛋白乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化、类泛素化、糖基化、ADP核糖基化、羰基化等[Walsh G,Jefferis R.Post-translational modifications in the context of therapeutic proteins.Nature biotechnology,2006,24(10):1241-1252.]。组蛋白的乙酰化调控由组蛋白乙酰基转移酶(histone acetyl transferases,HATs)和组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)协调控制。HATs催化乙酰基转移至组蛋白赖氨酸侧链；HDACs与HATs作用正相反，通过移除组蛋白赖氨酸ε-氨基的乙酰基，参与转录调控。HDACs包括18种亚型，可以分为四类：I类包括HDAC1，HDAC2，HDAC3和HDAC8亚型；IIa类包括HDAC4，HDAC5，HDAC7和HDAC9亚型；IIb类包括HDAC6和HDAC10；IV类HDAC11包含有I和II类HDACs的催化位点；III类HDACs是尼克酰胺腺苷酸(NAD +)依赖的去乙酰化酶Sirtunis家族(SIRT1-7)，它不能被I、II类HDACs的抑制剂所抑制[Bolden J E,Peart M J,Johnstone R W.Anticancer activities of histone deacetylase inhibitors.Nature reviews Drug discovery,2006,5(9):769-784.]。
HDACs的异常招募参与多种类型肿瘤的病理进程，HDACs各亚型的过表达也与肿瘤发生发展关系密切[Witt O,Deubzer H E,Milde T,et al.HDAC family:What are the cancer relevant targets？Cancer letters,2009,277(1):8-21.]。HDAC1在部分前列腺癌、胃癌、结肠癌、乳腺癌病例中过表达；HDAC2在部分结直肠癌、头颈部癌和胃癌中过表达；HDAC3在部分结肠癌而HDAC6在部分乳腺癌病例中过表达。因此，开发HDAC抑制剂对于肿瘤治疗具有重要意义。
目前已经上市的HDAC抑制剂有5个，处于临床III期研究的有3个，还有13个处于临床II期研究。这些研究成果表明靶向HDACs作为表观遗传的治疗手段经得起临床验证，而开发HDAC抑制剂作为抗肿瘤药物具有广阔的应用前景。
组蛋白的甲基化状态由组蛋白甲基转移酶和组蛋白去甲基化酶共同调控。赖氨酸特异性去甲基化酶(Lysine specific demethylase 1，LSD1，又名KDM1A)是第一个被报道的组蛋白赖氨酸去甲基化酶，通过调控组蛋白赖氨酸的甲基化状态，广泛参与转录调控，影响细胞增殖和分化、胚胎干细胞多能性等诸多生理过程。[Yujiang Shi,Fei Lan,Caitlin Matson et al.,Cell,2004,941–953][Daniel P.Mould,Alison E.McGonagle,Daniel H.Wiseman et al.,Medicinal Research Reviews,2015,35,586–618]。LSD1在多种不同类型的肿瘤中异常表达。LSD1在急性髓性白血病(acute myeloid leukemia，AML)亚型中高表达，是维持白血病干细胞(leukemia stem cell，LSC)潜能的重要因素。LSD1在多种实体瘤如肺癌、乳腺癌、前列腺癌、肝癌和胰腺癌中高表达，与肿瘤的预后不良密切相关。LSD1抑制钙粘蛋白的表达，与肿瘤的侵袭和上皮-间质转移(epithelial-mesenchymal transition,EMT)密切相关[Hosseini A,Minucci S.Epigenomics,2017,9,1123-1142.]。
LSD1抑制剂目前没有药物获批上市，已有8个药物处于临床研究阶段，主要用于血液肿瘤、小细胞肺癌和尤文氏肉瘤等疾病的治疗。然而，面对巨大的未满足市场，该领域仍然需要活性更好，药代动力学参数更优的候选化合物推进临床试验，以满足治疗需求。
HDAC1/2与LSD1共同组成转录复合物NuRD或CoREST，发挥去乙酰化和去甲基化调控作用[Laugesen,A.&Helin,K.Chromatin repressive complexes in stem cells,development,and cancer.Cell Stem.Cell 14,735–751(2014).]。因此，开发HDAC/LSD1双重抑制剂在作用机理上协同增效，有望成为高效低毒的表观遗传学调控药物。
发明内容
本发明提供了式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2022104706-appb-000001
其中，
环A为
Figure PCTCN2022104706-appb-000002
T 1、T 2、T 3和T 4分别独立地为CH或N；
T 5为CH或N；
T 6为CH或N；
D 1为单键、-CH 2-或-CH 2-CH 2-、；
D 2为-CH 2-、-CH 2-CH 2-、-CH 2-CH 2-CH 2-、-O-CH 2-CH 2-或-S-CH 2-CH 2-；
L 1为
Figure PCTCN2022104706-appb-000003
Figure PCTCN2022104706-appb-000004
L 11为单键或-CH 2-，且L 11与环A上的一个环原子相连；
L 12为单键、-O-或-NH-；
L 2为单键、-CH 2-、-C(＝O)-、-CH 2-C(＝O)-或-CH 2-C(＝O)-NH-；
R 11、R 12、R 13和R 14分别独立地为H、F、Cl、Br、I、C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、苯基或5-6元杂芳基，其中所述C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、苯基和5-6元杂芳基分别独立地任选地被1、2或3个R a取代；
R 2分别独立地为H、F、Cl、Br、I、CN、COOH、OH、NH 2、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基，其中所述C 1-3烷基和C 1-3烷氧基分别独立地任选地被1、2或3个R b取代；
R 3为H、-CH 2-C(＝O)-吗啉基或-CH 2-环丙基；
R 4为H、COOH、C 1-6烷基、C 3-6环烷基、3-6元杂环烷基、5-6元杂芳基或苯基，其中所述C 1-6烷基、C 3-6环烷基、3-6元杂环烷基、5-6元杂芳基和苯基分别独立地任选地被1、2或3个R c取代；
R 5分别独立地为H或C 1-3烷基；
或者，连接在同一个C原子上的两个R 5与其所连接的C原子一起形成一个C 3-6元环烷基；
R 6分别独立地为H或C 1-3烷基；
R a和R b分别独立地为F、Cl、Br、I、OH或NH 2；
R c分别独立地为F、Cl、Br、I、CN、COOH、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基，其中所述C 1-3烷基和C 1-3烷氧基分别独立地任选地被1、2或3个R取代；
R分别独立地为F、Cl、Br、I、OH或NH 2；
m为1、2、3或4；
所述3-6元杂环烷基和5-6元杂芳基中的“杂”表示1、2、3或4个分别独立地选自-O-、-NH-、-S-、S(＝O) 2和N的杂原子或杂原子团。
本发明的一些方案中，上述T 1和T 2分别独立地为CH或N，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述T 3和T 4分别独立地为CH或N，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述D 1为单键或-CH 2，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述D 2为-CH 2-、-CH 2-CH 2-、-CH 2-CH 2-CH 2-或-O-CH 2-CH 2-，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R分别独立地为F，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R b分别独立地为F，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R c分别独立地为F、Cl、Br、I、CN、COOH、CH 3、CF 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000005
或-OCH 3，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 11、R 12、R 13和R 14分别独立地为H、F、Cl、Br或I，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 11、R 13和R 14分别独立地为H，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 12为H或F，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 2分别独立地为H、F、Cl、Br、I、CN、COOH、OH、NH 2、-OCH 3、-CF 3、-OCHF 2或-OCF 3，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 2分别独立地为H、F、Cl、CN、-OCH 3、-CF 3、-OCHF 2或-OCF 3，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 3为H、
Figure PCTCN2022104706-appb-000006
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 4为H、COOH、C 1-6烷基、C 3-6环烷基、3-6元杂环烷基、6元杂芳基或苯基，其中所述C 1-6烷基、C 3-6环烷基、3-6元杂环烷基、6元杂芳基和苯基分别独立地任选地被1、2或3个R c取代，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 4为H、COOH、CH 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000007
Figure PCTCN2022104706-appb-000008
其中所述CH 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000009
Figure PCTCN2022104706-appb-000010
Figure PCTCN2022104706-appb-000011
分别独立地任选地被1、2或3个R c取代，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 4为H、COOH、CH 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000012
Figure PCTCN2022104706-appb-000013
其中所述CH 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000014
Figure PCTCN2022104706-appb-000015
分别独立地任选地被1、2或3个R c取代，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 4为H、COOH、CH 3、CF 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000016
Figure PCTCN2022104706-appb-000017
Figure PCTCN2022104706-appb-000018
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 4为H、COOH、CH 3、CF 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000019
Figure PCTCN2022104706-appb-000020
Figure PCTCN2022104706-appb-000021
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 4为H、COOH、CH 3、CF 3、
Figure PCTCN2022104706-appb-000022
Figure PCTCN2022104706-appb-000023
Figure PCTCN2022104706-appb-000024
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 5分别独立地为H或CH 3，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述R 6分别独立地为H或CH 3，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述m为1，其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述环A为
Figure PCTCN2022104706-appb-000025
Figure PCTCN2022104706-appb-000026
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述结构单元
Figure PCTCN2022104706-appb-000027
为
Figure PCTCN2022104706-appb-000028
Figure PCTCN2022104706-appb-000029
Figure PCTCN2022104706-appb-000030
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述结构单元
Figure PCTCN2022104706-appb-000031
为
Figure PCTCN2022104706-appb-000032
Figure PCTCN2022104706-appb-000033
Figure PCTCN2022104706-appb-000034
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述L 1为
Figure PCTCN2022104706-appb-000035
Figure PCTCN2022104706-appb-000036
Figure PCTCN2022104706-appb-000037
其他变量如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述化合物及其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2022104706-appb-000038
其中，m、T 1、T 2、T 3、T 4、T 5、T 6、D 1、D 2、R 11、R 12、R 13、R 14、R 2、R 3、R 4、L 1和L 2如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述化合物及其药学上可接受的盐
Figure PCTCN2022104706-appb-000039
Figure PCTCN2022104706-appb-000040
其中，m、T 1、T 2、T 3、T 4、T 6、D 2、R 11、R 12、R 13、R 14、R 2、R 3、R 4、L 1和L 2如本发明所定义。
本发明的一些方案中，上述化合物及其药学上可接受的盐
Figure PCTCN2022104706-appb-000041
其中，m、T 3、T 4、T 6、D 1、D 2、R 11、R 12、R 13、R 14、R 2、R 3、R 4、L 1和L 2如本发明所定义。
本发明还提供了下列化合物或其药学上可接受的盐，
Figure PCTCN2022104706-appb-000042
Figure PCTCN2022104706-appb-000043
Figure PCTCN2022104706-appb-000044
Figure PCTCN2022104706-appb-000045
Figure PCTCN2022104706-appb-000046
Figure PCTCN2022104706-appb-000047
本发明的一些方案中，上述化合物及其药学上可接受的盐，其选自
Figure PCTCN2022104706-appb-000048
Figure PCTCN2022104706-appb-000049
Figure PCTCN2022104706-appb-000050
Figure PCTCN2022104706-appb-000051
Figure PCTCN2022104706-appb-000052
Figure PCTCN2022104706-appb-000053
本发明的一些方案中，上述化合物及其药学上可接受的盐，其选自
Figure PCTCN2022104706-appb-000054
Figure PCTCN2022104706-appb-000055
本发明还提供了上述化合物或其药学上可接受的盐，其中所述药学上可接受的盐为盐酸盐或三氟乙酸 盐。
技术效果
本发明的化合物对HDAC1和LSD1双靶点具有显著的抑制活性，对MCF-7、MDA-MB-231和BT-474细胞增殖抑制活性明显，以及具有良好的药代动力学性质。
定义和说明
除非另有说明，本文所用的下列术语和短语旨在具有下列含义。一个特定的术语或短语在没有特别定义的情况下不应该被认为是不确定的或不清楚的，而应该按照普通的含义去理解。当本文中出现商品名时，意在指代其对应的商品或其活性成分。
这里所采用的术语“药学上可接受的”，是针对那些化合物、材料、组合物和/或剂型而言，它们在可靠的医学判断的范围之内，适用于与人类和动物的组织接触使用，而没有过多的毒性、刺激性、过敏性反应或其它问题或并发症，与合理的利益/风险比相称。
术语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，由本发明发现的具有特定取代基的化合物与相对无毒的酸或碱制备。当本发明的化合物中含有相对酸性的功能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与这类化合物接触的方式获得碱加成盐。当本发明的化合物中含有相对碱性的官能团时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与这类化合物接触的方式获得酸加成盐。本发明的某些特定的化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱或酸加成盐。
本发明的药学上可接受的盐可由含有酸根或碱基的母体化合物通过常规化学方法合成。一般情况下，这样的盐的制备方法是：在水或有机溶剂或两者的混合物中，经由游离酸或碱形式的这些化合物与化学计量的适当的碱或酸反应来制备。
本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式。本发明设想所有的这类化合物，包括顺式和反式异构体、(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。烷基等取代基中可存在另外的不对称碳原子。所有这些异构体以及它们的混合物，均包括在本发明的范围之内。
除非另有说明，术语“对映异构体”或者“旋光异构体”是指互为镜像关系的立体异构体。
除非另有说明，术语“顺反异构体”或者“几何异构体”系由因双键或者成环碳原子单键不能自由旋转而引起。
除非另有说明，术语“非对映异构体”是指分子具有两个或多个手性中心，并且分子间为非镜像的关系的立体异构体。
除非另有说明，“(+)”表示右旋，“(-)”表示左旋，“(±)”表示外消旋。
除非另有说明，用楔形实线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000056
和楔形虚线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000057
表示一个立体中心的绝对构型，用直形实线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000058
和直形虚线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000059
表示立体中心的相对构型，用波浪线
Figure PCTCN2022104706-appb-000060
表示楔形实线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000061
或楔形虚线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000062
或用波浪线
Figure PCTCN2022104706-appb-000063
表示直形实线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000064
和直形虚线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000065
除非另有说明，当化合物中存在双键结构，如碳碳双键、碳氮双键和氮氮双键，且双键上的各个原子均连接有两个不同的取代基时(包含氮原子的双键中，氮原子上的一对孤对电子视为其连接的一个取代基)，如果该化合物中双键上的原子与其取代基之间用波浪线
Figure PCTCN2022104706-appb-000066
连接，则表示该化合物的(Z)型异构体、(E)型异构体或两种异构体的混合物。例如下式(A)表示该化合物以式(A-1)或式(A-2)的单一异构体形式存在或以式(A-1)和式(A-2)两种异构体的混合物形式存在；下式(B)表示该化合物以式(B-1)或式(B-2)的单一异构体形式存在或以式(B-1)和式(B-2)两种异构体的混合物形式存在。下式(C)表示该化合物以式(C-1)或式(C-2)的单一异构体形式存在或以式(C-1)和式(C-2)两种异构体的混合物形式存在。
Figure PCTCN2022104706-appb-000067
除非另有说明，术语“互变异构体”或“互变异构体形式”是指在室温下，不同官能团异构体处于动态平衡，并能很快的相互转化。若互变异构体是可能的(如在溶液中)，则可以达到互变异构体的化学平衡。例如，质子互变异构体(proton tautomer)(也称质子转移互变异构体(prototropic tautomer))包括通过质子迁移来进行的互相转化，如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键异构体(valence tautomer)包括一些成键电子的重组来进行的相互转化。其中酮-烯醇互变异构化的具体实例是戊烷-2,4-二酮与4-羟基戊-3-烯-2-酮两个互变异构体之间的互变。
除非另有说明，术语“富含一种异构体”、“异构体富集”、“富含一种对映体”或者“对映体富集”指其中一种异构体或对映体的含量小于100％，并且，该异构体或对映体的含量大于等于60％，或者大于等于70％，或者大于等于80％，或者大于等于90％，或者大于等于95％，或者大于等于96％，或者大于等于97％，或者大于等于98％，或者大于等于99％，或者大于等于99.5％，或者大于等于99.6％，或者大于等于99.7％，或者大于等于99.8％，或者大于等于99.9％。
除非另有说明，术语“异构体过量”或“对映体过量”指两种异构体或两种对映体相对百分数之间的差值。例如，其中一种异构体或对映体的含量为90％，另一种异构体或对映体的含量为10％，则异构体或对映体过量(ee值)为80％。
可以通过的手性合成或手性试剂或者其他常规技术制备光学活性的(R)-和(S)-异构体以及D和L异构体。如果想得到本发明某化合物的一种对映体，可以通过不对称合成或者具有手性助剂的衍生作用来制备，其中将所得非对映体混合物分离，并且辅助基团裂开以提供纯的所需对映异构体。或者，当分子中含有碱性官能团(如氨基)或酸性官能团(如羧基)时，与适当的光学活性的酸或碱形成非对映异构体的盐，然后通过本领域所公知的常规方法进行非对映异构体拆分，然后回收得到纯的对映体。此外，对映异构体和非对映异构体的分离通常是通过使用色谱法完成的，所述色谱法采用手性固定相，并任选地与化学衍生法相结合(例如由胺生成氨基甲酸盐)。
本发明的化合物可以在一个或多个构成该化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素标记化合物，比如氚( 3H)，碘-125( 125I)或C-14( 14C)。又例如，可用重氢取代氢形成氘代药物，氘与碳构成的键比普通氢与碳构成的键更坚固，相比于未氘化药物，氘代药物有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等优势。本发明的化合物的所有同位素组成的变换，无论放射性与否，都包括在本发明的范围之内。“任选”或“任选地”指的是随后描述的事件或状况可能但不是必需出现的，并且该描述包括其中所述事件或状况发生的情况以及所述事件或状况不发生的情况。
术语“被取代的”是指特定原子上的任意一个或多个氢原子被取代基取代，可以包括重氢和氢的变体，只要特定原子的价态是正常的并且取代后的化合物是稳定的。当取代基为氧(即＝O)时，意味着两个氢原子被取代。氧取代不会发生在芳香基上。术语“任选被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有规定，取代基的种类和数目在化学上可以实现的基础上可以是任意的。
当任何变量(例如R)在化合物的组成或结构中出现一次以上时，其在每一种情况下的定义都是独立的。因此，例如，如果一个基团被0-2个R所取代，则所述基团可以任选地至多被两个R所取代，并且每种情况下的R都有独立的选项。此外，取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
当一个连接基团的数量为0时，比如-(CRR) 0-，表示该连接基团为单键。
当其中一个变量选自单键时，表示其连接的两个基团直接相连，比如A-L-Z中L代表单键时表示该结构实际上是A-Z。
当一个取代基为空缺时，表示该取代基是不存在的，比如A-X中X为空缺时表示该结构实际上是A。当所列举的取代基中没有指明其通过哪一个原子连接到被取代的基团上时，这种取代基可以通过其任何原子相键合，例如，吡啶基作为取代基可以通过吡啶环上任意一个碳原子连接到被取代的基团上。
当所列举的连接基团没有指明其连接方向，其连接方向是任意的，例如，
Figure PCTCN2022104706-appb-000068
中连接基团L为-M-W-，此时-M-W-既可以按与从左往右的读取顺序相同的方向连接环A和环B构成
Figure PCTCN2022104706-appb-000069
也可以按照与从左往右的读取顺序相反的方向连接环A和环B构成
Figure PCTCN2022104706-appb-000070
所述连接基团、取代基和/或其变体的组合只有在这样的组合会产生稳定的化合物的情况下才是被允许的。
除非另有规定，当某一基团具有一个或多个可连接位点时，该基团的任意一个或多个位点可以通过化学键与其他基团相连。当该化学键的连接方式是不定位的，且可连接位点存在H原子时，则连接化学键时，该位点的H原子的个数会随所连接化学键的个数而对应减少变成相应价数的基团。所述位点与其他基团连接的化学键可以用直形实线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000071
直形虚线键
Figure PCTCN2022104706-appb-000072
或波浪线
Figure PCTCN2022104706-appb-000073
表示。例如-OCH 3中的直形实线键表示通过该基团中的氧原子与其他基团相连；
Figure PCTCN2022104706-appb-000074
中的直形虚线键表示通过该基团中的氮原子的两端与其他基团相连；
Figure PCTCN2022104706-appb-000075
中的波浪线表示通过该苯基基团中的1和2位碳原子与其他基团相连；
Figure PCTCN2022104706-appb-000076
表示该哌啶基上的任意可连接位点可以通过1个化学键与其他基团相连，至少包括
Figure PCTCN2022104706-appb-000077
Figure PCTCN2022104706-appb-000078
这4种连接方式，即使-N-上画出了H原子，但是
Figure PCTCN2022104706-appb-000079
仍包括
Figure PCTCN2022104706-appb-000080
这种连接方式的基团，只是在连接1个化学键时，该位点的H会对应减少1个变成相应的一价哌啶基。
除非另有规定，环上原子的数目通常被定义为环的元数，例如，“5-7元环”是指环绕排列5-7个原子的“环”。
除非另有规定，术语“C 1-6烷基”用于表示直链或支链的由1至6个碳原子组成的饱和碳氢基团。所述C 1-6烷基包括C 1-5、C 1-4、C 1-3、C 1-2、C 2-6、C 2-4、C 6和C 5烷基等；其可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。C 1-6烷基的实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(包括n-丙基和异丙基)、丁基(包括n-丁基，异丁基，s-丁基和t-丁基)、戊基(包括n-戊基，异戊基和新戊基)、己基等。
除非另有规定，术语“C 1-3烷基”用于表示直链或支链的由1至3个碳原子组成的饱和碳氢基团。所述C 1-3烷基包括C 1-2和C 2-3烷基等；其可以是一价(如甲基)、二价(如亚甲基)或者多价(如次甲基)。C 1-3 烷基的实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(包括n-丙基和异丙基)等。
除非另有规定，术语“C 1-3烷氧基”表示通过一个氧原子连接到分子的其余部分的那些包含1至3个碳原子的烷基基团。所述C 1-3烷氧基包括C 1-2、C 2-3、C 3和C 2烷氧基等。C 1-3烷氧基的实例包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(包括正丙氧基和异丙氧基)等。
除非另有规定，“C 3-6环烷基”表示由3至6个碳原子组成的饱和环状碳氢基团，其为单环和双环体系，所述C 3-6环烷基包括C 3-5、C 4-5和C 5-6环烷基等；其可以是一价、二价或者多价。C 3-6环烷基的实例包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环己基等。
除非另有规定，术语“3-6元杂环烷基”本身或者与其他术语联合分别表示由3至6个环原子组成的饱和环状基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子，其中氮原子任选地被季铵化，碳、氮和硫杂原子可任选被氧化(即C(＝O)、NO和S(O) p，p是1或2)。其包括单环和双环体系，其中双环体系包括螺环、并环和桥环。此外，就该“3-6元杂环烷基”而言，杂原子可以占据杂环烷基与分子其余部分的连接位置。所述3-6元杂环烷基包括4-6元、5-6元、4元、5元和6元杂环烷基等。3-6元杂环烷基的实例包括但不限于氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氢噻吩基(包括四氢噻吩-2-基和四氢噻吩-3-基等)、四氢呋喃基(包括四氢呋喃-2-基等)、四氢吡喃基、哌啶基(包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌嗪基(包括1-哌嗪基和2-哌嗪基等)、吗啉基(包括3-吗啉基和4-吗啉基等)、二噁烷基、二噻烷基、异噁唑烷基、异噻唑烷基、1,2-噁嗪基、1,2-噻嗪基、六氢哒嗪基、高哌嗪基或高哌啶基等。
除非另有规定，术语“卤代素”或“卤素”本身或作为另一取代基的一部分表示氟、氯、溴或碘原子。
除非另有规定，本发明术语“5-6元杂芳环”和“5-6元杂芳基”可以互换使用，术语“5-6元杂芳基”表示由5至6个环原子组成的具有共轭π电子体系的单环基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子。其中氮原子任选地被季铵化，碳、氮和硫杂原子可任选被氧化(即C(＝O)、NO和S(O) p，p是1或2)。5-6元杂芳基可通过杂原子或碳原子连接到分子的其余部分。所述5-6元杂芳基包括5元和6元杂芳基。所述5-6元杂芳基的实例包括但不限于吡咯基(包括N-吡咯基、2-吡咯基和3-吡咯基等)、吡唑基(包括2-吡唑基和3-吡唑基等)、咪唑基(包括N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基和5-咪唑基等)、噁唑基(包括2-噁唑基、4-噁唑基和5-噁唑基等)、三唑基(1H-1,2,3-三唑基、2H-1,2,3-三唑基、1H-1,2,4-三唑基和4H-1,2,4-三唑基等)、四唑基、异噁唑基(3-异噁唑基、4-异噁唑基和5-异噁唑基等)、噻唑基(包括2-噻唑基、4-噻唑基和5-噻唑基等)、呋喃基(包括2-呋喃基和3-呋喃基等)、噻吩基(包括2-噻吩基和3-噻吩基等)、吡啶基(包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基等)、吡嗪基或嘧啶基(包括2-嘧啶基和4-嘧啶基等)。
除非另有规定，本发明术语“6元杂芳环”和“6元杂芳基”可以互换使用，术语“6元杂芳基”表示由6个环原子组成的具有共轭π电子体系的单环基团，其1、2、3或4个环原子为独立选自O、S和N的杂原子，其余为碳原子。其中氮原子任选地被季铵化，碳、氮和硫杂原子可任选被氧化(即C(＝O)、NO和S(O) p，p是1 或2)。6元杂芳基可通过杂原子或碳原子连接到分子的其余部分。所述6元杂芳基的实例包括但不限于吡啶基(包括2-吡啶基、3-吡啶基和4-吡啶基等)、吡嗪基、吗啉基或嘧啶基(包括2-嘧啶基和4-嘧啶基等)。
除非另有规定，C n-n+m或C n-C n+m包括n至n+m个碳的任何一种具体情况，例如C 1-12包括C 1、C 2、C 3、C 4、C 5、C 6、C 7、C 8、C 9、C 10、C 11、和C 12，也包括n至n+m中的任何一个范围，例如C 1-12包括C 1-3、C 1-6、C 1-9、C 3-6、C 3-9、C 3-12、C 6-9、C 6-12、和C 9-12等；同理，n元至n+m元表示环上原子数为n至n+m个，例如3-12元环包括3元环、4元环、5元环、6元环、7元环、8元环、9元环、10元环、11元环、和12元环，也包括n至n+m中的任何一个范围，例如3-12元环包括3-6元环、3-9元环、5-6元环、5-7元环、6-7元环、6-8元环、和6-10元环等。
术语“离去基团”是指可以被另一种官能团或原子通过取代反应(例如亲核取代反应)所取代的官能团或原子。例如，代表性的离去基团包括三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、对溴苯磺酸酯、对甲苯磺酸酯等；酰氧基，如乙酰氧基、三氟乙酰氧基等等。
术语“保护基”包括但不限于“氨基保护基”、“羟基保护基”或“巯基保护基”。术语“氨基保护基”是指适合用于阻止氨基氮位上副反应的保护基团。代表性的氨基保护基包括但不限于：甲酰基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基、三氯乙酰基或三氟乙酰基)；烷氧基羰基，如叔丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1,1-二-(4'-甲氧基苯基)甲基；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。术语“羟基保护基”是指适合用于阻止羟基副反应的保护基。代表性羟基保护基包括但不限于：烷基，如甲基、乙基和叔丁基；酰基，例如链烷酰基(如乙酰基)；芳基甲基，如苄基(Bn)，对甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基，DPM)；甲硅烷基，如三甲基甲硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基甲硅烷基(TBS)等等。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的多种合成方法来制备，包括下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法的结合所形成的实施方式以及本领域技术上人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。
本发明的化合物可以通过本领域技术人员所熟知的常规方法来确认结构，如果本发明涉及化合物的绝对构型，则该绝对构型可以通过本领域常规技术手段予以确证。例如单晶X射线衍射法(SXRD)，把培养出的单晶用Bruker D8 venture衍射仪收集衍射强度数据，光源为CuKα辐射，扫描方式：
Figure PCTCN2022104706-appb-000081
扫描，收集相关数据后，进一步采用直接法(Shelxs97)解析晶体结构，便可以确证绝对构型。
旋光值的检测使用Auton Paar MCP500仪器，钠光，光源波长为589nm，盛液管长度为1dm，检测温度25℃。
本发明所使用的溶剂可经市售获得。本发明采用下述缩略词：aq代表水；HATU代表O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸盐；EDC代表N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺 盐酸盐；eq代表当量、等量；CDI代表羰基二咪唑；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DIAD代表偶氮二羧酸二异丙酯；DMF代表N，N-二甲基甲酰胺；DMSO代表二甲亚砜；EtOAc代表乙酸乙酯；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；BOC代表叔丁氧羰基是一种胺保护基团；HOAc代表乙酸；NaCNBH 3代表氰基硼氢化钠；r.t.代表室温；O/N代表过夜；THF代表四氢呋喃；Boc 2O代表二-叔丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIPEA代表二异丙基乙基胺；SOCl 2代表氯化亚砜；EA代表丙烯酸乙酯；SPhos代表2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯；Pd(dba) 2代表双(二亚芐基丙酮)钯；NaBH(OAc) 3代表三乙酰氧基硼氢化钠；EDTA代表乙二胺四乙酸二钠；EGTA代表乙二醇二乙醚二胺四乙酸；hr是时间单位，代表小时；Alloc代表烯丙基氧羰基；NCO代表异氰酸酯基。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明进行详细描述，但并不意味着对本发明任何不利限制。本文已经详细地描述了本发明，其中也公开了其具体实施例方式，对本领域的技术人员而言，在不脱离本发明精神和范围的情况下针对本发明具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
参考例1
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000082
第一步
将钠氢(36.6g,914mmol,60％)溶于四氢呋喃(1000mL)中,0℃下向反应液中加入化合物A-2(143g,640mmol)。反应液在20℃下搅拌1小时。再在0℃下向反应液中加入化合物A-1(100g,609mmol),反应液在20℃下搅拌3小时。将反应液缓慢倒入搅拌的饱和氯化铵水溶液(1000mL)中淬灭,用乙酸乙酯(800mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(1000mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物A-3。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.04(d,J＝8.0Hz,2H),7.63-7.57(m,3H),6.49-6.45(d,J＝16.0Hz,1H),3.94(s,3H),1.56(s,9H)。
第二步
将钠氢(7.32g,183mmol,60％)溶于无水二甲基亚砜(300mL)中,在0℃、氮气保护下向反应液中加入A-4(35.2g,160mmol)。反应液在20℃下搅拌1小时,0℃下向反应液中加入化合物A-3(40.0g,153mmol), 反应液在50℃下搅拌12小时。将反应液缓慢倒入搅拌的饱和氯化铵水溶液(800mL)中淬灭,用乙酸乙酯(500mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(800mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物A-5。
第三步
将化合物A-5(30.0g,109mmol)溶于乙酸乙酯(300mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,217mL)。反应液在20℃下搅拌1小时。反应液减压浓缩除去有机溶剂,剩余物加水(50mL)溶解,用饱和碳酸钠调节pH至9,用乙酸乙酯(80mL×2)萃取,再将水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物A-6。
第四步
将化合物A-6(18.0g,81.7mmol)溶于无水叔丁醇(200mL)中,向反应液中加叠氮磷酸二苯酯(33.7g,123mmol)和三乙胺(16.5g,163mmol)。反应液在90℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(1000mL),用乙酸乙酯(500mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物A-7。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.96-7.94(m,2H),7.19-7.17(m,2H),3.92(s,3H),2.82-2.78(m,1H),2.13-2.08(m,1H),1.47(s,9H),1.27-1.23(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +292,实测值292。
第五步
将化合物A-7(24.0mg,82.4μmol)溶于四氢呋喃(1mL)中,0℃下向反应液中加四氢铝锂(6.25mg,0.165mmol)。反应液在25℃下搅拌3小时,依次加水(0.1mL),15％氢氧化钠溶液(0.1mL),水(0.3mL)淬灭,搅拌,过滤,用水(10mL)洗涤滤饼,滤液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(10mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物A-8。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.28-7.26(m,2H),7.14-7.12(m,2H),4.65(s,2H),2.72-2.71(m,1H),1.85-1.84(m,1H),1.46(s,9H),1.15-1.14(m,1H),0.89-0.85(m,1H)。
参考例2
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000083
第一步
将叔丁醇钾(26.4g,235mmol)溶于无水二甲基亚砜(500mL)中,向反应液中加入三甲基碘化亚砜(64.7g,294mmol)。反应液在25℃下搅拌1小时。将化合物B-1(50.0g,196mmol)加入反应液。反应液在25℃下搅拌2小时。加饱和氯化铵(1000mL)淬灭,用乙酸乙酯(800mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠(1000mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。粗产物经过硅胶柱层析法(10：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物B-2。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.33-7.31(m,2H),6.91-6.89(m,2H),4.12-4.07(m,2H),2.41-2.39(m,1H),1.80-1.78(m,1H),1.54-1.53(m,1H),1.23-1.19(m,4H)。
第二步
将化合物B-2(26.0g,96.6mmol)溶于四氢呋喃(50mL),水(50mL)和乙醇(10mL)中,向反应液中加入一水合氢氧化锂(8.11g,193mmol)。反应液在55℃下搅拌3小时。减压浓缩,加水(150mL),用叔丁基甲醚(50mL×2)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至3,用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠(100mL×1)洗,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物B-3。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.44-7.41(m,2H),7.01-6.97(m,2H),2.58-2.55(m,1H),1.89-1.87(m,1H),1.68-1.66(m,1H),1.38-1.37(m,1H)。
第三步
将化合物B-3(1.00g,4.15mmol)溶于无水叔丁醇(10mL)中,向反应液中加入叠氮磷酸二苯酯(1.71g,6.22mmol),三乙胺(839mg,8.30mmol)。反应液在90℃下搅拌12小时。加水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠(50mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。粗产物经过硅胶柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物B-4。MS-ESI计算值[M+H] +312,314,实测值312,314。
参考例3
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000084
第一步
将化合物B-3(17.0g,70.5mmol)溶于二氯甲烷(170mL)中,向反应液中加入草酰氯(10.7g,84.6mmol),N,N-二甲基甲酰胺(515mg,7.05mmol)。反应液在25℃下搅拌1小时。减压浓缩得到化合物B-5。
第二步
将化合物B-5(18.0g,69.4mmol)溶于二氯甲烷(200mL)中,向反应液中加入三乙胺(10.5g,104mmol),和化合物(S)-4-异丙基噁唑烷-2-酮(10.8g,83.2mmol)。反应液在30℃下搅拌32小时。加水(500mL),用乙酸乙酯(300mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠(500mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。粗产物经过硅胶柱层析法分离得到化合物B-6(4：1石油醚/乙酸乙酯,Rf1＝0.60),MS-ESI计算值[M+H] +352,354,实测值352,354。化合物B-7(4：1石油醚/乙酸乙酯,Rf2＝0.50)。MS-ESI计算值[M+H] +352,354,实测值352,354。
实施例1
Figure PCTCN2022104706-appb-000085
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000086
第一步
将化合物1-1(10.0g,48.0mmol)加至碳酸氢钠(6.05g,72.0mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液中,将反应液冷至0℃,向其中加入氯甲酸烯丙酯(6.37g,52.8mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液,反应液在15℃下搅拌反应3小时。将反应液浓缩,向其中加入水(100mL),用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,合并有机相用饱和 食盐水(300mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物1-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.54-7.43(m,2H),7.34-7.11(m,3H),6.71(br s,1H),6.01-5.94(m,1H),5.38-5.25(m,2H),4.68-4.66(m,2H),1.52(s,9H)。
第二步
将化合物1-2(15.0g,51.3mmol)溶于乙酸乙酯(75mL),将反应液冷至0℃,向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,75mL),反应液在15℃下搅拌1小时。反应液过滤,滤饼减压干燥得到粗品化合物1-3。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.48-7.45(m,2H),7.40-7.36(m,2H),6.07-5.99(m,1H),5.42-5.38(m,1H),5.28-5.26(m,1H),4.72-4.70(m,2H)。
第三步
将化合物A-8(10.0g,38.0mmol)溶于无水二氯甲烷(250mL),冷却至0℃后加入4-二甲基氨基吡啶(4.64g,37.9mmol)和氯甲酸对硝基苯酯(10.0g,49.61mmol),反应液在15℃下搅拌2小时,在0℃下加入化合物1-4(7.50g,45.4mmol)的无水N,N-二甲基甲酰胺(100mL)溶液,反应液在15℃搅拌10小时。将反应液在搅拌下滴加至水(600mL)中,用二氯甲烷(300mL×2)萃取,合并有机相后依次用氢氧化钠水溶液(1mol/L,500mL×2)、盐酸(1mol/L,500mL×1)和饱和食盐水(500mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用石油醚/乙酸乙酯(v/v＝4/1,500mL)打浆,过滤,滤饼用石油醚(50mL)洗涤,后真空干燥得到化合物1-5。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.02-7.99(m,2H),7.37-7.35(m,2H),7.29-7.27(m,2H),7.15-7.13(m,2H),5.15(br s,1H),5.11(s,2H),4.87(br s,1H),4.48-4.44(m,2H),3.93(s,3H),2.74(br s,1H),2.08-2.03(m,1H),1.47(s,9H),1.19-1.16(m,2H)。MS-ESI计算值[M+2Na] +500,实测值500。
第四步
将化合物1-5(6.00g,13.2mmol)溶于无水四氢呋喃(60mL)和水(60mL),向反应液中加入一水合氢氧化锂(1.66g,39.6mmol)。反应液在50℃下搅拌2小时。减压浓缩除去四氢呋喃,剩余物用水(50mL)稀释,用盐酸(1mol/L水溶液)调节pH值至2,过滤,滤饼真空干燥得到化合物1-6。MS-ESI计算值[M+Na] +463,实测值463。
第五步
将化合物1-6(5.72g,13.0mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(100mL),向其中加O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(5.93g,15.6mmol)和N,N-二异丙基乙胺(3.36g,26.0mmol)。反应液在20℃下搅拌0.5小时,向反应液中加入化合物1-3(2.97g,13.0mmol),反应液在20℃下搅拌10小时。将反应液在搅拌下滴加至水(1L)中,过滤,滤饼真空干燥得到化合物1-7。MS-ESI计算值[M+H] +615,实测值615。
第六步
将化合物1-7(380mg,0.618mmol)溶于无水四氢呋喃(6mL),向其中加入二乙胺(452mg,6.18mmol)和 四(三苯基磷)钯(71.4mg,61.8μmol),反应液在80℃下搅拌3小时。反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：4石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物1-8。MS-ESI计算值[M+Na] +553,实测值553。
第七步
将化合物1-8(230mg,0.433mmol)溶于甲醇(3mL),向其中加入氯化氢甲醇溶液(4mol/L,3mL,12.0mmol),反应液在20℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物1的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.07-8.05(m,2H),7.56-7.50(m,6H),7.49-7.47(m,2H),7.34-7.21(m,2H),5.11(s,2H),4.41(s,2H),2.88-2.86(m,1H),2.42-2.38(m,1H),1.46-1.42(m,1H),1.38-1.35(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +431,实测值431。
实施例2
Figure PCTCN2022104706-appb-000087
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000088
第一步
将化合物1-7(6.20g,10.1mmol)溶于乙酸乙酯(50mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,50mL,200mmol),反应液在15℃下搅拌2小时。反应液过滤,滤饼真空干燥得到化合物2-1的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H] +515,实测值515。
第二步
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,0.544mmol)和化合物2-2(38.0mg,0.542mmol)溶于无水乙醇(6mL),将三乙胺(110mg,1.09mmol)和分子筛(
Figure PCTCN2022104706-appb-000089
300mg)加至反应液,80℃下搅拌12小时。将反应液降温至0℃,加入硼氢化钠(31.0mg,0.819mmol),反应液在20℃下搅拌6小时。减压浓缩,剩余物用四氢呋喃(20mL)溶解,过滤,滤液减压浓缩得到粗产物2-3。MS-ESI计算值[M+H] +569,实测值569。
第三步
将化合物2-3(260mg,0.457mmol)溶于无水四氢呋喃(5mL),向其中加入二乙胺(334mg,4.57mmol)和 四(三苯基磷)钯(52.8mg,45.7μmol),将反应液升至80℃在氮气保护下搅拌2小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物2的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.04(m,2H),7.55-7.47(m,6H),7.37-7.35(m,2H),7.22-7.20(m,2H),5.11(s,2H),4.41(s,2H),3.12-3.09(m,2H),3.03-3.01(m,1H),2.52-2.50(m,1H),1.55-1.53(m,1H),1.43-1.41(m,1H),1.14-1.12(m,1H),0.74-0.71(m,2H),0.45-0.43(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +485,实测值485。
实施例3
Figure PCTCN2022104706-appb-000090
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000091
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,0.544mmol)和化合物3-1(76.0mg,0.541mmol)溶于无水乙醇(6mL),向反应液中加入三乙胺(110mg,1.09mmol)和分子筛(
Figure PCTCN2022104706-appb-000092
300mg),反应液80℃下搅拌10小时。将反应液降温至0℃,加入硼氢化钠(31.0mg,0.819mmol),反应液在20℃下搅拌6小时。减压浓缩,剩余物用四氢呋喃(20mL)溶解,过滤,滤液减压浓缩得到粗产物3-2。MS-ESI计算值[M+H] +639,实测值639。
第二步
将化合物3-2(310mg,0.485mmol)溶于无水四氢呋喃(6mL),向其中加入二乙胺(355mg,4.85mmol)和四(三苯基磷)钯(56.1mg,48.5μmol),将体系升至80℃在氮气保护下搅拌2小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物3的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03-8.01(m,2H),7.51-7.44(m,7H),7.38-7.34(m,5H),7.15-7.13(m,2H),5.11(s,2H),4.41-4.40(m,4H),3.04-3.00(m,1H),2.47-2.44(m,1H),1.54-1.51(m,1H),1.45-1.41(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +555,实测值555。
实施例4
Figure PCTCN2022104706-appb-000093
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000094
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(200mg,0.363mmol)和化合物4-1(44.0mg,0.439mmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,向反应中加入冰醋酸(65.4mg,1.09mmol),在25℃下搅拌10小时。向反应液中向反应液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(231mg,1.09mmol),在25℃下搅拌2小时。反应液用二氯甲烷(20mL)稀释,用饱和碳酸氢钠水溶液(20mL×1)和饱和食盐水(20mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(0：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物4-2。MS-ESI计算值[M+H] +599,实测值599。
第二步
将化合物4-2(180mg,0.301mmol)溶于无水四氢呋喃(5mL),向其中加入二乙胺(220mg,3.01mmol)和四(三苯基磷)钯(34.7mg,30.1μmol),将体系升至80℃在氮气保护下搅拌2小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物4的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.04(m,2H),7.57-7.49(m,6H),7.47-7.36(m,2H),7.23-7.20(m,2H),5.11(s,2H),4.41(s,2H),4.06-4.02(m,2H),3.59-3.50(m,1H),3.47-3.44(m,2H),3.03-3.01(m,1H),2.53-2.51(m,1H),2.11-2.09(m,2H),1.75-1.72(m,2H),1.56-1.51(m,1H),1.47-1.45(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +515,实测值515。
实施例5
Figure PCTCN2022104706-appb-000095
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000096
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(200mg,0.363mmol)和化合物5-1(58.4mg,0.436mmol)溶于无水二氯甲烷(6mL),将冰醋酸(65.4mg,1.09mmol)加至反应液,25℃下搅拌10小时。向反应液中加入三乙酰氧基硼氢化钠(231mg,1.09mmol),在25℃下搅拌2小时。反应液用二氯甲烷(50mL)稀释,用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL×1)和饱和食盐水(50mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：2石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物5-2。MS-ESI计算值[M+H] +633,实测值633。
第二步
将化合物5-2(260mg,0.411mmol)溶于无水四氢呋喃(6mL),向其中加入二乙胺(301mg,4.11mmol)和四(三苯基磷)钯(47.5mg,41.1μmol),将体系升至80℃在氮气保护下搅拌2小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物5的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.05-8.03(m,2H),7.53-7.45(m,6H),7.38-7.36(m,2H),7.23-7.21(m,2H),5.12(s,2H),4.41(s,2H),3.50-3.47(m,1H),3.04-3.02(m,1H),2.51-2.49(m,1H),2.25-2.21(m,4H),1.77-1.74(m,2H),1.56-1.53(m,2H),1.52-1.47(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +549,实测值549。
实施例6
Figure PCTCN2022104706-appb-000097
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000098
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,0.544mmol)和化合物6-1(102mg,0.688mmol)溶于无水甲醇(6mL)和醋酸(0.6mL)的混合溶剂,向反应液中加入2-甲基吡啶硼烷复合物(90.0mg,0.841mmol),反应液在30℃、氮气保护下搅拌12小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(20：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物6-2。MS-ESI计算值[M+H] +647,实测值647。
第二步
将化合物6-2(310mg,0.479mmol)溶于无水四氢呋喃(6mL),向其中加入二乙胺(351mg,4.79mmol)和四(三苯基磷)钯(55.4mg,47.9μmol),将体系升至80℃在氮气保护下搅拌2小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物6的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.04(m,2H),7.54-7.50(m,6H),7.48-7.36(m,2H),7.24-7.22(m,2H),5.11(s,2H),4.41(s,2H),3.73-3.71(m,1H),3.35-3.30(m,1H),3.28-3.26(m,1H),3.22-3.15(m,2H),3.07-3.04(m,1H),2.59-2.55(m,3H),2.29-2.26(m,2H),1.60-1.58(m,1H),1.50-1.48(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +563,实测值563。
实施例7
Figure PCTCN2022104706-appb-000099
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000100
第一步
将化合物A-2(14.3g,64.0mmol)溶于四氢呋喃(100mL)中,0℃下在0.5小时内向反应液中加入钠氢(4.87g,122mmol,60％),再加入化合物7-1(10.0g,60.9mmol)。反应液在20℃下搅拌4小时。加入饱和氯化铵水溶液(200mL),用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物7-3。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.12-8.11(m,1H),7.96-7.94(m,1H),7.61-7.60(m,1H),7.56-7.52(m,1H),7.40-7.36(m,1H),6.39-6.35(m,1H),3.67(s,3H),1.47(s,9H)。
第二步
将钠氢(2.77g,69.3mmol,60％)溶于无水二甲基亚砜(90mL)中,向反应液中加入三甲基碘化亚砜(11.4g,52.0mmol)。反应液在20℃下搅拌1小时。在0℃下向反应液中加入化合物7-3(9.09g,34.7mmol)。 反应液在50℃下搅拌12小时。加入饱和氯化铵水溶液(500mL)淬灭,用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(200mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物7-4。
第三步
将化合物7-4(9.05g,32.8mmol)溶于二氯甲烷(100mL)中,向反应液中加入三氟乙酸(77.0g,675mmol)。反应液在25℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,加水(100mL),用饱和碳酸氢钠调节pH至8,用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。将水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(200mL×2)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(200mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物7-5。
第四步
将化合物7-5(6.85mg,31.1mmol)溶于无水叔丁醇(70mL)中,向反应液中加入叠氮磷酸二苯酯(12.8g,46.7mmol),三乙胺(6.30g,62.2mmol)。反应液在90℃下搅拌12小时。加水(100mL),用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物7-6。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.79-7.78(m,1H),7.76-7.69(m,1H),7.32-7.26(m,2H),4.78-4.77(m,1H),3.84(s,3H),2.69-2.68(m,1H),2.04-2.00(m,1H),1.38(s,9H),1.18-1.11(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +292,实测值292。
第五步
将化合物7-6(4.00g,13.7mmol)溶于四氢呋喃(40mL)中,0℃下向反应液中加入四氢铝锂(1.04g,27.5mmol)。反应液在20℃下搅拌3小时。0℃下依次加水(1mL),氢氧化钠水溶液(1mL,15％),水(3mL)淬灭。过滤,滤饼用乙酸乙酯(80mL×1)洗涤,有机相用饱和氯化钠水溶液(80mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物7-7。
第六步
将化合物7-7(3.20g,12.2mmol)和化合物7-8(3.73g,14.6mmol)溶于二氯甲烷(5mL)和乙腈(5mL)中,向反应液中加入4-二甲氨基吡啶(742mg,6.08mmol)。反应液在20℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩得到化合物7-9。
第七步
将化合物7-9(4.90g,12.1mmol)和化合物1-4(2.20g,13.3mmol)溶于二氯甲烷(50mL)中,向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(3.13g,24.2mmol)。反应液在20℃下搅拌12小时。加水(100mL),用二氯甲烷(80mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：2石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物7-10。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +355,实测值355。
第八步
将化合物7-10(2.80g,6.16mmol)溶于四氢呋喃(3mL)和水(3mL)中,向反应液中加入氢氧化钠(493mg,12.3mmol)。反应液在60℃下搅拌12小时。减压浓缩,加水(10mL),用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,将水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,再用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(50mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物7-11。MS-ESI计算值[M+Na] +463,实测值463。
第九步
将化合物7-11(2.08g,4.60mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中,在0℃下向反应液中加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(2.62g,6.89mmol),N,N-二异丙基乙胺(1.19g,9.19mmol)。反应液在20℃下搅拌1小时。再在0℃下向反应液中加入化合物1-3(972mg,5.06mmol),反应液在20℃下搅拌12小时。加水(200mL),搅拌30分钟,过滤,滤饼用水(50mL×1)洗涤,滤饼分散到石油醚(200mL)中搅拌30分钟,过滤,滤饼用石油醚(20mL×1)洗涤,滤饼减压干燥得到化合物7-12。MS-ESI计算值[M+Na] +637,实测值637。
第十步
将化合物7-12(2.58g,4.09mmol)溶于乙酸乙酯(20mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,10.2mL)。反应液在20℃下搅拌1小时。将反应液减压浓缩得到化合物7-13。MS-ESI计算值[M+H] +515,实测值515。
第十一步
将化合物7-13(300mg,544μmol)和化合物2-2(42.0mg,599μmol)溶于乙醇(5mL)中,向反应液中加入三乙胺(110mg,1.09mmol)和分子筛(
Figure PCTCN2022104706-appb-000101
0.20g)。反应液在80℃下搅拌12小时。再在0℃下向反应液中加入硼氢化钠(41.2mg,1.09mmol)。反应液在20℃下搅拌4小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠(50mL)淬灭,过滤,浓缩除去有机溶剂,水相用二氯甲烷(10mL×3)萃取,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物7-14。MS-ESI计算值[M+H] +569,实测值569。
第十二步
将化合物7-14(200mg,352μmol)溶于四氢呋喃(4mL)中,向反应液中加四三苯基膦钯(40.6mg,35.2μmol)和二乙胺(257mg,3.52mmol)。反应液在80℃下搅拌2小时,减压浓缩除去溶剂,加盐酸(1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物7的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.07-8.05(m,2H),7.56-7.50(m,6H),7.49-7.48(m,2H),7.22-7.17(m,2H),5.12(s,2H),4.42(s,2H),3.12-3.09(m,2H),3.04-3.02(m,1H),2.54-2.51(m,1H),1.57-1.54(m,1H),1.45-1.41(m,1H),1.15-1.14(m,1H),0.74-0.71(m,2H),0.46-0.43(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +485,实测值485。
实施例8
Figure PCTCN2022104706-appb-000102
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000103
第一步
将化合物7-13(300mg,544μmol)和化合物2-2(42.0mg,599μmol)溶于甲醇(10mL)中,向反应液中加入冰醋酸(65.4mg,1.09mmol),2-甲基吡啶硼烷复合物(87.4mg,817μmol)。反应液在20℃下搅拌12小时。减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(0：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物8-1。MS-ESI计算值[M+H] +623,实测值623。
第二步
将化合物8-1(200mg,321μmol)溶于乙醇(2mL),在0℃下向反应液中加入硼氢化钠(18.2mg,482μmol)。反应液在20℃下搅拌12小时,向反应液中加入饱和碳酸氢钠(50mL)淬灭,过滤,滤液减压浓缩除去溶剂,加盐酸(1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物8的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.04(m,2H),7.54-7.51(m,6H),7.49-7.47(m,2H),7.34-7.14(m,2H),5.12(m,2H),4.41(m,2H),3.50-3.40(m,2H),3.25-3.17(m,3H),2.72-2.71(m,1H),1.76-1.75(m,1H),1.53-1.52(m,1H),1.28-1.25(m,1H),1.16-1.13(m,1H),0.81-0.68(m,4H),0.52-0.38(m,4H)。MS-ESI计算值[M+H] +539,实测值539。
实施例9
Figure PCTCN2022104706-appb-000104
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000105
第一步
将化合物7-13(300mg,544μmol)和化合物9-1(34.8mg,599μmol)溶于甲醇(10mL)中,向反应液中加入冰醋酸(65.4mg,1.09mmol),2-甲基吡啶硼烷复合物(87.4mg,817μmol)。反应液在20℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(0：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物9-2。MS-ESI计算值[M+H] +557,实测值557。
第二步
将化合物9-2(150mg,269μmol)溶于乙醇(2mL)中,向反应液中加入硼氢化钠(15.3mg,404μmol)。反应液在20℃下搅拌12小时,加入饱和碳酸氢钠淬灭,过滤减压浓缩除去溶剂,加盐酸(1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物9的盐酸盐。1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.04(m,2H),7.55-7.47(m,6H),7.34-7.30(m,2H),7.21-7.15(m,2H),5.12(s,2H),4.41(s,2H),3.55-3.50(m,1H),2.98-2.95(m,1H),2.50-2.45(m,1H),1.53-1.50(m,1H),1.46-1.44(m,1H),1.41-1.39(m,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +473,实测值473。
实施例10
Figure PCTCN2022104706-appb-000106
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000107
第一步
将化合物7-12(180mg,0.288mmol)和硼氢化钠(10.9mg,0.288mmol)溶解在乙醇(5mL)中,反应液在25℃氮气保护下反应1小时,反应结束后,反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)淬灭,有机相减压浓缩,粗品经薄层层析法(20：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物10-1。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ9.62(s,1H),7.96-7.91(m,4H),7.39-7.37(m,2H),7.28-7.23(m,3H),7.21-7.14(m,3H),7.09-7.04(m,1H),7.00-6.95 (m,1H),6.80-6.77(m,1H),4.47-4.17(m,4H),2.63(m,1H),1.93-1.88(m,1H),1.38(s,9H),1.15-1.07(m,3H)。MS-ESI计算值[M+H] +531,实测值531。
第二步
将化合物10-1(98.0mg,0.169mmol)溶解在乙酸乙酯(5mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,4.57mL),反应液在15℃条件下搅拌0.5小时,反应液减压浓缩,粗品经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物10的盐酸盐。1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ8.08-8.06(m,2H),7.71-7.47(m,6H),7.35-7.27(m,2H),7.21-7.14(m,2H),5.12(s,2H),4.42(s,2H),2.89-2.95(m,1H),2.45-2.40(m,1H),1.49-1.44(m,1H),1.38-1.33(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +431,实测值431。
实施例11
Figure PCTCN2022104706-appb-000108
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000109
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(400mg,736μmol)和化合物11-1(61.1mg,871μmol)溶于甲醇(50mL)中,向反应液中加入冰醋酸(5.25g,87.4mmol),2-甲基吡啶硼烷复合物(116mg,1.09mmol)。反应液在20℃下搅拌12小时。减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(0：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物11-2。MS-ESI计算值[M+H] +569,实测值569。
第二步
将化合物11-2(370mg,419μmol)溶于乙醇(5mL)中,向反应液中加入硼氢化钠(31.7mg,839μmol)。反应液在20℃下搅拌12小时,向反应液中加入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)淬灭,用盐酸(1mol/L)调节pH至5。减压浓缩,剩余物用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物11的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.94-7.92(m,2H),7.42-7.35(m,6H),7.23-7.20(m,2H),7.09-7.07(m,2H),4.99(s,2H),4.29(s,2H),3.87-3.83(m,1H),2.83-2.75(m,1H),2.36-2.30(m,1H),2.28-2.26(m,2H),2.20-2.15(m,2H), 1.85-1.84(m,2H),1.40-1.38(m,1H),1.28-1.27(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +485,实测值485。
实施例12
Figure PCTCN2022104706-appb-000110
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000111
将化合物2-1的盐酸盐(400mg,736μmol)和化合物12-1(131mg,871μmol)溶于乙醇(10mL)中,向反应液中加三乙胺(147mg,1.45mmol)和分子筛(
Figure PCTCN2022104706-appb-000112
400mg)。反应液在80℃下搅拌12小时,再在0℃下加入硼氢化钠(54.9mg,1.45mmol),反应液在20℃下搅拌3小时。加入饱和碳酸氢钠溶液(50mL)淬灭,过滤,浓缩,加盐酸(1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物12的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.10-8.03(m,4H),7.63-7.61(m,2H),7.50-7.48(m,6H),7.36-7.34(m,2H),7.20-7.15(m,2H),5.11(s,2H),4.48(s,2H),4.41(s,2H),3.07-3.03(m,1H),2.50-2.45(m,1H),1.56-1.52(m,1H),1.44-1.42(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +565,实测值565。
实施例13
Figure PCTCN2022104706-appb-000113
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000114
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,544μmol)和化合物9-1(34.8mg,599μmol)溶于甲醇(10mL)中,向反应 液中加入冰醋酸(65.4mg,1.09mmol),2-甲基吡啶硼烷复合物(87.4mg,817μmol)。反应液在20℃下搅拌12小时。减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：2石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物13-1。MS-ESI计算值[M+H] +557,实测值557。
第二步
将化合物13-1(185mg,326μmol)溶于四氢呋喃(4mL)中,向反应液中加四三苯基膦钯(37.7mg,32.6μmol)和二乙胺(238mg,3.26mmol)。反应液在80℃下搅拌2小时,减压浓缩除去溶剂,加盐酸(1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物13的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.07-8.05(m,2H),7.56-7.48(m,6H),7.38-7.36(m,2H),7.23-7.21(m,2H),5.11(s,2H),4.41(s,2H),3.60-3.57(m,1H),2.97-2.94(m,1H),2.51-2.50(m,1H),1.56-1.52(m,1H),1.48-1.45(m,1H),1.42-1.40(m,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +473,实测值473。
实施例14
Figure PCTCN2022104706-appb-000115
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000116
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,544μmol)和化合物14-1(56.3mg,653μmol)溶于甲醇(10mL)中,向反应液中加入冰醋酸(210mg,3.50mmol),反应液在20℃下搅拌12小时。再在0℃下向反应液加入2-甲基吡啶硼烷复合物(87.4mg,817μmol)。反应液在20℃下搅拌2小时。减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(0：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物14-2。MS-ESI计算值[M+H] +585,实测值585。
第二步
将化合物14-2(190mg,294μmol)溶于四氢呋喃(4mL)中,向反应液中加四三苯基膦钯(34.0mg,29.4μmol)和二乙胺(215mg,2.94mmol)。反应液在80℃下搅拌2小时,减压浓缩除去溶剂,加盐酸(1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物14的盐酸盐。 1H NMR(400MHz, CD 3OD)δ8.06-8.04(m,2H),7.49-7.47(m,6H),7.38-7.36(m,2H),7.22-7.20(m,2H),5.12(s,2H),4.41(s,2H),3.31-3.30(m,1H),2.97-2.96(m,1H),2.51-2.50(m,1H),1.86-1.80(m,4H),1.56-1.51(m,1H),1.48-1.46(m,1H),1.05-1.02(m,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +501,实测值501。
实施例15
Figure PCTCN2022104706-appb-000117
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000118
将化合物2-1的盐酸盐(400mg,726μmol)和化合物15-1(119mg,871μmol)溶于乙醇(8mL)中,向反应液中加三乙胺(147mg,1.45mmol)和分子筛(
Figure PCTCN2022104706-appb-000119
400mg)。反应液在80℃下搅拌12小时,再在0℃下加入硼氢化钠(41.2mg,1.09mmol),反应液在20℃下搅拌6小时。加饱和碳酸氢钠溶液(10mL)淬灭,减压浓缩除去溶剂,加盐酸(1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物15的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.00-7.98(m,2H),7.46-7.44(m,4H),7.42-7.40(m,3H),7.36-7.34(m,1H),7.14-7.12(m,4H),6.98-6.96(m,2H),5.11(s,2H),4.40(s,2H),4.32(s,2H),3.82(s,3H),2.98-2.97(m,1H),2.48-2.45(m,1H),1.51-1.49(m,1H),1.41-1.39(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +551,实测值551。
实施例16
Figure PCTCN2022104706-appb-000120
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000121
将化合物2-1的盐酸盐(400mg,726μmol)和化合物16-1(153mg,871μmol)溶于乙醇(8mL)中,向反应液中加三乙胺(147mg,1.45mmol)和分子筛(
Figure PCTCN2022104706-appb-000122
400mg)。反应液在80℃下搅拌12小时。再在0℃下加硼氢化钠(41.2mg,1.09mmol),反应液在20℃下搅拌6小时。加入饱和碳酸氢钠(10mL)淬灭,加盐酸 (1mol/L)调节pH至5。用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物16的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.89-8.88(m,1H),8.25-8.24(m,1H),8.07-8.05(m,2H),7.91-7.90(m,1H),7.54-7.47(m,6H),7.36-7.34(m,2H),7.15-7.13(m,2H),5.11(s,2H),4.60-4.57(m,2H),4.41(s,2H),3.13-3.11(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.63-1.59(m,1H),1.47-1.42(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +590,实测值590。
实施例17
Figure PCTCN2022104706-appb-000123
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000124
将化合物2-1的盐酸盐(50.0mg,90.7μmol)和化合物17-1(11.6mg,0.109mmol)溶于乙醇(5mL)中,加入三乙胺(18.4mg,0.181mmol)和分子筛
Figure PCTCN2022104706-appb-000125
反应液在80℃条件下搅拌12小时,向反应液中加入硼氢化钠(3.43mg,90.7μmol),反应液在20℃条件下搅拌2小时,反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(7mL)洗涤,过滤,滤液减压浓缩,粗品经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物17的盐酸盐。 1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03-8.18(m,2H),7.50-7.45(m,14H),7.39-7.13(m,1H),5.11(s,2H),4.41 4.39(s,2H),4.39(s,2H),3.03-3.00(m,1H),2.48-2.45(m,1H),1.54-1.50(m,1H),1.44-1.41(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +521,实测值521。
实施例18
Figure PCTCN2022104706-appb-000126
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000127
第一步
将化合物18-1(64.0mg,0.726mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中,加入N,N-二异丙基乙胺(141mg,1.09mmol)和O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(276mg,0.726mmol),反应液在30℃条件下搅拌2小时,加入化合物2-1的盐酸盐(200mg,0.363mmol),反应液在30℃条件下搅拌12小时,加入乙酸乙酯(50mL)稀释反应液,有机相用饱和食盐水(20mL×2)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗品粗产物经过薄层层析法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物18-2。 1HNMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95-7.92(m,2H),7.59-7.53(m,2H),7.46-7.43(m,2H),7.31-7.23(m,3H),7.17-7.15(m,2H),6.00-5.93(m,1H),5.36-5.31(m,1H),5.22-5.16(m,1H),5.09(s,2H),4.66-4.65(m,2H),4.40(s,1H),3.37(s,3H),2.88-2.83(m,1H),2.06-2.00(m,1H),1.21-1.17(m,4H),1.13-1.11(m,4H)。
第二步
将化合物18-2(196mg,335mmol),四三苯基膦钯(38.7mg,33.5μmol),二乙胺(245mg,3.35mmol)溶解在四氢呋喃(5mL)中,反应液在80℃氮气保护下反应1小时,反应液加入硫脲树脂搅拌过夜,过滤,滤液减压浓缩,粗品经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物18的盐酸盐。 1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.67(s,1H),8.04-7.87(m,4H),7.39-7.10(m,7H),7.01-6.97(m,1H),6.82-6.80(m,1H),6.65-6.61(m,1H),5.20-5.01(m,3H),4.28-4.27(m,2H),2.83-2.78(m,1H),2.37-2.28(m,1H),1.94-1.89(m,1H),1.17-1.09(m,2H),1.01-0.99(m,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +501,实测值501。
实施例19
Figure PCTCN2022104706-appb-000128
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000129
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,0.544mmol)和化合物19-1(61.1mg,0.544mmol)溶于无水乙醇(5mL)中,将三乙胺(110mg,1.09mmol)和分子筛(
Figure PCTCN2022104706-appb-000130
1.00g)加至反应液,80℃下搅拌12小时。将反应降温至0℃,加入硼氢化钠(20.6mg,0.544mmol),在20℃下搅拌12小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液至无气体放出。将反应液过滤,滤液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(0：1石油醚/乙酸乙酯)分离分离纯化得到化合物19-2。MS-ESI计算值[M+H] +611,实测值611。
第二步
将化合物19-2(85.0mg,99.6μmol)溶于无水四氢呋喃(3mL)中,加入二乙胺(72.9mg,0.996mmol)和四三苯基磷钯(11.5mg,9.96μmol),将体系升至70℃搅拌2小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物19的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.00-7.98(m,2H),7.45-7.43(m,2H),7.39-7.27(m,4H),7.26-7.13(m,4H),5.11(s,2H),4.00(s,2H),3.10-2.95(m,3H),2.56-2.45(m,1H),1.88-1.69(m,6H),1.57-1.48(m,1H),1.46-1.18(m,4H),1.14-0.98(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +527,实测值527。
实施例20
Figure PCTCN2022104706-appb-000131
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000132
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(250mg,0.454mmol)和化合物20-1(53.4mg,0.544mmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,将冰醋酸(81.7mg,1.36mmol)加至反应液,15℃下搅拌12小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠(144mg,0.680mmol),在15℃下搅拌2小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液至无气体放出。加入水(50mL)将反应液稀释,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物20-2。MS-ESI计算值[M+H] +597,实测值597。
第二步
将化合物20-2(200mg,0.314mmol)溶于无水四氢呋喃(4mL)中,加入二乙胺(230mg,3.14mmol)和四三苯基磷钯(36.3mg,31.4μmol),将体系升至70℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物20的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02-8.00(m,2H),7.52-7.27(m,8H),7.19-7.17(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),3.28-3.27(m,1H),2.98-2.94(m,1H),2.47-2.42(m,1H),2.22-2.16(m,2H),1.93-1.82(m,2H),1.73-1.70(m,1H),1.53-1.31(m,6H),1.30-1.15(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +513,实测值513。
实施例21
Figure PCTCN2022104706-appb-000133
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000134
第一步
将化合物21-1(5.00g,24.7mmol)和碳酸氢钠(4.16g,49.5mmol)加至无水四氢呋喃(200mL)中,将体系降温至-78℃后加入化合物21-2(1.70g,29.7mmol),-78℃下搅拌0.5小时,将反应液升温至15℃搅拌2小时。加入乙酸乙酯(250mL)稀释,分别用饱和碳酸氢钠溶液(200mL×1)和饱和食盐水(200mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物21-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ6.82-6.47(m,1H),3.82(s,2H),2.75-2.68(m,1H),0.83-0.76(m,2H),0.58-0.53(m,2H)。
第二步
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,0.544mmol)溶于乙腈(3mL)中,加入N,N-二异丙基乙胺(211mg,1.63mmol)搅拌至反应液澄清,将化合物21-3(116mg,0.653mmol)加至反应液,在30℃下搅拌12小时。加入水(50mL)稀释,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,有机相合并后用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物21-4。MS-ESI计算值[M+H] +612,实测值612。
第三步
将化合物21-4(230mg,0.240mmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,加入二乙胺(175mg,2.40mmol)和四三苯基磷钯(27.7mg,24.0μmol),将体系升至70℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物21的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-7.99(m,2H),7.55-7.44(m,6H),7.35-7.32(m,2H),7.20-7.17(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),3.91(s,2H),3.01-2.97(m,1H),2.74-2.69(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.58-1.51(m,1H),1.40-1.35(m,1H),0.78-0.73(m,2H),0.53-0.49(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +528,实测值528。
实施例22,实施例23
Figure PCTCN2022104706-appb-000135
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000136
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(400mg,0.726mmol)溶解于乙腈(200mL)中,加入N,N-二异丙基乙胺(281mg,2.18mmol)搅拌至澄清,将化合物22-1(226mg,1.09mmol)加至反应液,在30℃下搅拌12小时。加水(50mL)稀释,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,有机相合并后用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物22-2和22-3混合物。
第二步
将化合物22-2和22-3混合物(350mg,0.166mmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,加入二乙胺(121mg,1.66mmol)和四三苯基磷钯(19.2mg,16.6μmol),将体系升至70℃后搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物22的盐酸盐和化合物23的盐酸盐。
化合物22的盐酸盐： 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.05-8.01(m,2H),7.52-7.44(m,6H),7.35-7.33(m,2H),7.20-7.18(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),4.28(s,2H),3.70-3.66(m,4H),3.62-3.60(m,2H),3.46-3.44(m,2H),3.04-3.00(m,1H),2.59-2.54(m,1H),1.59-1.53(m,1H),1.41-1.36(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +558,实测值558。
化合物23的盐酸盐： 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.05-8.03(m,2H),7.58-7.47(m,6H),7.36-7.34(m,2H),7.16-7.14(m,2H),5.09(s,2H),4.61(s,4H),4.39(s,2H),3.71-3.62(m,12H),3.48-3.43(m,5H),2.94-2.89(m, 1H),1.87-1.81(m,1H),1.44-1.39(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +685,实测值685。
实施例24
Figure PCTCN2022104706-appb-000137
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000138
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,0.544mmol)和化合物24-1(62.1mg,0.544mmol)溶于无水乙醇(5mL)中,将三乙胺(110mg,1.09mmol)和无水硫酸钠(300mg,2.11mmol)加至反应液,在80℃下搅拌12小时。将反应降温至0℃,加入硼氢化钠(30.9mg,0.817mmol),在20℃下反应2小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液至无气体放出。将反应液过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物24的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.03(m,2H),7.59-7.45(m,6H),7.36-7.34(m,2H),7.21-7.19(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),3.98-3.95(m,2H),3.48-3.39(m,2H),3.12-3.10(m,2H),3.03-2.99(m,1H),2.59-2.54(m,1H),2.07-1.99(m,1H),1.73-1.70(m,2H),1.60-1.55(m,1H),1.42-1.32(m,3H)。MS-ESI计算值[M+H] +529,实测值529。
实施例25
Figure PCTCN2022104706-appb-000139
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000140
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(500mg,0.907mmol)溶于乙腈(10mL)中,加入N,N-二异丙基乙胺(352mg,2.72 mmol)搅拌至反应液澄清,将化合物25-1(180mg,1.18mmol)加至反应液,在25℃下搅拌12小时。加水(30mL)稀释,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,有机相合并后用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：3石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物25-2。MS-ESI计算值[M+H] +587,实测值587。
第二步
将化合物25-2(400mg,0.376mmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,在氮气保护下加入二乙胺(275mg,3.76mmol)和四三苯基磷钯(43.5mg,37.6μmol),将体系升至70℃后搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物25-3。MS-ESI计算值[M+H] +503,实测值503。
第三步
将化合物25-3(160mg,0.318mmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,将氢氧化钠(25.5mg,0.637mmol)溶于水(1mL)后加至反应液,在50℃搅拌1小时。反应液用盐酸(1mol/L)调节pH至4后减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物25的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02-8.00(m,2H),7.46-7.33(m,8H),7.20-7.15(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),4.10(s,2H),3.05-3.01(m,1H),2.57-2.52(m,1H),1.57-1.52(m,1H),1.41-1.36(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +489,实测值489。
实施例26
Figure PCTCN2022104706-appb-000141
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000142
第一步
将化合物26-1(7.00g,27.3mmol)溶于无水甲醇(10mL)中,在氮气保护下将钯碳(700mg,10％)加至反应液后置换氢气,在15℃、15Psi下搅拌12小时。反应液过滤,滤液减压浓缩得粗品化合物26-2。 1H NMR (400MHz,DMSO-d6)δ8.41(s,1H),7.21-7.18(m,1H),6.67-6.22(m,2H),4.77(s,2H),1.47(s,9H)。
第二步
将化合物1-6(200mg,0.454mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中,将O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(207mg,0.545mmol)和N,N-二异丙基乙胺(176mg,1.36mmol)加至反应液,反应液在25℃下搅拌0.5小时。将化合物26-2(103mg,0.454mmol)加至反应液,在25℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物26-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.89(s,1H),7.80-7.78(m,2H),7.44-7.41(m,1H),7.27-7.23(m,2H),7.17-7.12(m,4H),7.04-7.02(m,2H),6.79-6.75(m,1H),5.37-5.28(m,1H),5.01(s,2H),4.90-4.78(m,1H),4.34-4.33(m,2H),2.63-2.57(m,1H),1.95-1.91(m,1H),1.42(s,9H),1.37(s,9H),1.08-1.05(m,2H)。
第三步
将化合物26-3(230mg,0.355mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中,0℃下加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.266mL),体系升至15℃后搅拌0.5小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物26的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.96-7.94(m,2H),7.43-7.41(m,2H),7.34-7.32(m,2H),7.27-7.23(m,1H),7.17-7.15(m,2H),6.85-6.73(m,2H),5.08(s,2H),4.37(m,2H),2.85-2.83(m,1H),2.36-2.34(m,1H),1.43-1.31(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +449,实测值449。
实施例27
Figure PCTCN2022104706-appb-000143
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000144
将化合物2-1的盐酸盐(300mg,0.544mmol)和化合物27-1(58.3mg,0.544mmol)溶于无水乙醇(5mL)中,将三乙胺(110mg,1.09mmol)和无水硫酸钠(300mg,2.11mmol)加至反应液,在80℃下搅拌12小时。将反应降温至0℃,加入硼氢化钠(30.9mg,0.817mmol)后在20℃下搅拌2小时。加入盐酸(1mol/L)至无气体放出。将反应液过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物27的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.70-8.69(m,1H),8.05-7.98(m,3H),7.65-7.63(m,1H),7.58-7.46(m,7H),7.37-7.32(m,2H),7.16-7.14(m,2H),5.09(s,2H),4.60(s,2H),4.39(s,2H),3.14-3.08(m,1H),2.59-2.54(m,1H),1.62-1.56(m,1H),1.45-1.38(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +522,实测值522。
实施例28
Figure PCTCN2022104706-appb-000145
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000146
第一步
将化合物2-1的盐酸盐(200mg,0.363mmol)和化合物28-1(56.9mg,75％水溶液,0.436mmol)溶于无水甲醇(2mL)和冰醋酸(0.2mL)的混合溶剂中,加入2-甲基吡啶硼烷复合物(194mg,1.81mmol),在45℃下搅拌12小时。加入饱和碳酸氢钠水溶液至无气体放出。用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,有机相合并后用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物28-2。MS-ESI计算值[M+H] +597,实测值597。
第二步
将化合物28-2(80.0mg,0.130mmol)溶于无水四氢呋喃(1mL)中,加入二乙胺(95.0mg,1.30mmol)和四三苯基磷钯(15.0mg,13.0μmol),将体系升至70℃后搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物28的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.04-8.02(m,2H),7.54-7.46(m,6H),7.35-7.33(m,2H),7.19-7.17(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),4.15-3.97(m,2H),3.07-2.98(m,1H),2.54-2.41(m,1H),1.57-1.45(m,1H),1.42-1.34(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +513,实测值513。
实施例29
Figure PCTCN2022104706-appb-000147
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000148
第一步
将化合物B-4(5.00g,15.2mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中,将体系降温至0℃后将氢化钠(60％,1.22g,30.4mmol)加至反应液,在0℃下搅拌0.5小时,将化合物29-1(3.08g,22.8mmol)在0℃下加至反应液,反应液在25℃下搅拌1.5小时。加水(500mL)淬灭,用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(200mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(5：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物29-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.40-7.35(m,2H),7.02-6.99(m,2H),3.29-3.23(m,1H),3.05-3.00(m,1H),2.82-2.78(m,1H),2.08-2.03(m,1H),1.43(s,9H),1.29-1.25(m,1H),1.17-1.14(m,1H),1.06-0.96(m,1H),0.51-0.39(m,2H),0.27-0.12(m,2H)。
第二步
将化合物29-2(4.50g,12.3mmol)与将化合物29-3(5.29g,61.4mmol)溶于无水二氧六环(200mL)中,在氮气保护下加入三(二亚苄基丙酮)二钯(1.12g,1.23mmol),四氟硼酸三叔丁基膦(1.43g,4.91mmol)和N,N-二环己基甲胺(4.80g,24.6mmol),反应液在100℃搅拌12小时。将反应液过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物29-4。MS-ESI计算值[M-56+H] +316,实测值316。
第三步
将化合物29-4(5.00g,13.5mmol)溶于无水四氢呋喃(50mL)中,将氢氧化钠(1.08g,26.9mmol)溶于水(10mL)后加至反应液,反应液在50℃下搅拌3小时。加水(100mL)稀释反应液,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至4,用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(300mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得粗品化合物29-5。MS-ESI计算值[M-56+H] +302,实 测值302。
第四步
将化合物29-5(1.50g,4.20mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中,将O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(1.91g,5.04mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.63g,12.6mmol)加至反应液,反应反应液在25℃下搅拌0.5小时。将化合物1-4(762mg,4.62mmol)加至反应液,在25℃下搅拌12小时。将反应液在搅拌下滴加至水(150mL)中,过滤,滤饼用水(50mL×2)洗涤,滤饼真空干燥得粗品化合物29-6。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.99-7.97(m,2H),7.66-7.60(m,1H),7.41-7.36(m,4H),7.11-7.09(m,2H),6.44-6.38(m,1H),6.29-6.26(m,1H),4.62-4.60(m,2H),3.90(s,3H),3.28-3.22(m,1H),3.07-3.01(m,1H),2.86-2.82(m,1H),2.12-2.07(m,1H),1.42(s,9H),1.32-1.21(m,2H),1.04-0.96(m,1H),0.51-0.39(m,2H),0.28-0.21(m,1H),0.17-0.12(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +505,实测值505。
第五步
将化合物29-6(1.70g,3.37mmol)溶于无水四氢呋喃(20mL)中,将氢氧化钠(269mg,6.74mmol)溶于水(10mL)后加至反应液,反应液在50℃下搅拌3小时。加入水(100mL)稀释反应液,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH值至4,用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,饱和食盐水(300mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得粗品化合物29-7。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.00-7.99(m,2H),7.58-7.54(m,1H),7.50-7.48(m,2H),7.43-7.41(m,2H),7.17-7.15(m,2H),6.64-6.59(m,1H),4.56(s,2H),3.27-3.08(m,2H),2.86-2.81(m,1H),2.15-2.10(m,1H),2.00-1.98(m,1H),1.41(s,9H),1.36-1.32(m,1H),1.08-0.99(m,1H),0.52-0.42(m,2H),0.29-0.23(m,1H),0.19-0.13(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +491,实测值491。
第六步
将化合物29-7(300mg,0.611mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,将O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(279mg,0.734mmol)和N,N-二异丙基乙胺(237mg,1.83mmol)加至反应液,反应液在25℃下搅拌0.5小时。将化合物1-1(127mg,0.611mmol)加至反应液,25℃下搅拌12小时。将反应液在搅拌下滴加至水(50mL)中,过滤,滤饼用水(10mL×2)洗涤,滤饼减压干燥,粗产物经过薄层层析法(1：1.5石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物29-8。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.96-7.94(m,2H),7.61-7.54(m,2H),7.50-7.47(m,4H),7.45-7.41(m,1H),7.24-7.14(m,4H),6.65-6.59(m,1H),4.58(s,2H),3.28-3.08(m,2H),2.86-2.83(m,1H),2.16-2.09(m,1H),1.48(s,9H),1.41(s,9H),1.36-1.27(m,2H),1.08-0.98(m,1H),0.54-0.41(m,2H),0.29-0.23(m,1H),0.19-0.13(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +681,实测值681。
第七步
将化合物29-8(230mg,0.338mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中,在0℃下加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.253mL),体系升至15℃后搅拌0.5小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸 体系)分离得到化合物29的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02-8.00(m,2H),7.60-7.48(m,5H),7.37-7.21(m,6H),6.69-6.65(m,1H),4.59(s,2H),3.11-3.02(m,3H),2.54-2.49(m,1H),1.58-1.53(m,1H),1.46-1.40(m,1H),1.15-1.09(m,1H),0.74-0.69(m,2H),0.44-0.40(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +481,实测值481。
实施例30
Figure PCTCN2022104706-appb-000149
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000150
第一步
将一水合氢氧化锂(796mg,19.0mmol)溶于水(25mL)中,向反应液中加入双氧水(2.15g,31.6mmol)。 反应液在25℃下搅拌0.5小时。将该反应液加入到化合物B-6(5.57g,15.8mmol)的四氢呋喃(50mL)和水(25mL)的溶液中,反应液在25℃下搅拌2.5小时。加饱和亚硫酸钠(100mL)淬灭,用乙酸乙酯(200mL×3)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,再用乙酸乙酯(200mL×3)萃取,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物30-1。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.45-7.41(m,2H),7.01-7.00(m,2H),2.59-2.57(m,1H),1.91-1.89(m,1H),1.70-1.67(m,1H),1.41-1.39(m,1H)。
第二步
将化合物30-1(3.10g,12.9mmol)溶于无水叔丁醇(30mL)中,向反应液中加入叠氮磷酸二苯酯(5.31g,19.3mmol),三乙胺(2.60g,25.7mmol)。反应液在90℃下搅拌7小时。加水(100mL),用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠(200mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。粗产物经过硅胶柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物30-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.41-7.38(m,2H),7.05-7.03(m,2H),4.86-4.85(m,1H),2.70-2.69(m,1H),2.04-2.01(m,1H),1.47(s,9H),1.18-1.14(m,2H)。
第三步
将化合物30-2(1.00g,3.20mmol)和化合物29-3(552mg,6.41mmol)溶于甲苯(10mL)中,氮气下向反应液中加入醋酸钯(71.9mg,320μmol),四甲基乙二胺(447mg,3.84mmol)和三苯基磷(168mg,641μmol)。反应液在130℃下搅拌12小时。加水(100mL),用乙酸乙酯(80mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(4：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物30-3。MS-ESI计算值[M-56+H] +262,实测值262。
第四步
将化合物30-3(600mg,1.89mmol)溶于四氢呋喃(10mL)和水(10mL)中,向反应液中加入氢氧化钠(151mg,3.78mmol)。反应液在50℃下搅拌3小时。加水(10mL),减压浓缩,加水(80mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,水相用盐酸调节pH至5,再用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物30-4。MS-ESI计算值[M-56+H] +248,实测值248。
第五步
将化合物30-4(300mg,494μmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,向反应液中加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,472mg,1.48mmol),N,N-二异丙基乙胺(320mg,2.47mmol)。反应液在25℃下搅拌1小时。再将化合物1-4(196mg,1.19mmol)加入到反应液中,反应液在25℃下搅拌11小时。加水(80mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(80mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(20：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物30-5。MS-ESI计算值[M+H] +451,实测值451。
第六步
将化合物30-5(400mg,888μmol)溶于四氢呋喃(4mL)和水(4mL)中,向反应液中加入氢氧化钠(107mg,2.66mmol)。反应液在60℃下搅拌3小时。减压浓缩,加水(100mL),用乙酸乙酯(50mL×2)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至4,再用乙酸乙酯(80mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(20：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物30-6。MS-ESI计算值[M+H] +437,实测值437。
第七步
将化合物30-6(120mg,275μmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中,向反应液中加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(157mg,412μmol),N,N-二异丙基乙胺(88.8mg,687μmol)。反应液在20℃下搅拌1小时。再将化合物1-1(68.7mg,330μmol)加入到反应液中,反应液在20℃下搅拌12小时。加水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(20mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物30-7。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +527,实测值527。
第八步
将化合物30-7(100mg,160μmol)溶于乙酸乙酯(1mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,399μL)。反应液在20℃下搅拌3小时,减压浓缩除去溶剂,剩余物用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物30的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.08-8.06(m,2H),7.57-7.52(m,9H),7.25-7.23(m,2H),6.72-6.68(m,1H),4.62(s,2H),2.94-2.90(m,1H),2.43-2.42(m,1H),1.49-1.46(m,1H),1.42-1.39(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +427,实测值427。
实施例31
Figure PCTCN2022104706-appb-000151
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000152
第一步
将一水合氢氧化锂(792mg,18.9mmol)溶于水(25mL)中,向反应液中加入双氧水(2.14g,31.5mmol)。反应液在25℃下搅拌0.5小时。将该反应液加入到化合物B-7(5.54g,15.7mmol)的四氢呋喃(50mL)和水(25mL)的溶液中,反应液在25℃下搅拌2.5小时。加饱和亚硫酸钠(100mL)淬灭,用乙酸乙酯(200mL×3)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,再用乙酸乙酯(200mL×3)萃取,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物31-1。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.45-7.41(m,2H),7.01-7.00(m,2H),2.59-2.57(m,1H),1.91-1.89(m,1H),1.70-1.67(m,1H),1.41-1.39(m,1H)。
第二步
将化合物31-1(3.10g,12.9mmol)溶于无水叔丁醇(30mL)中,向反应液中加入叠氮磷酸二苯酯(5.31g,19.3mmol),三乙胺(2.60g,25.7mmol)。反应液在90℃下搅拌7小时。加水(100mL),用乙酸乙酯(100mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠(200mL×1)洗,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。粗产 物经过硅胶柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物31-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.41-7.38(m,2H),7.05-7.03(m,2H),4.86-4.85(m,1H),2.70-2.69(m,1H),2.04-2.01(m,1H),1.47(s,9H),1.18-1.14(m,2H)。
第三步
将化合物31-2(200mg,0.641mmol)和化合物29-3(55.2mg,0.640mmol)溶解在二氧六环(4mL)中,加入醋酸钯(14.4mg,0.064mmol),三苯基磷(33.6mg,0.128mmol)和四甲基乙二胺(89.3mg,0.769mmol),将反应液置于封管中,氮气保护下130℃反应16小时,反应液用水(10mL)淬灭,水相用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(5：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物31-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.67-7.637(m,1H),7.43-7.41(m,2H),7.14-7.12(m,2H),6.40-6.36(m,1H),3.80(s,3H),1.57(s,4H),1.46-1.45(m,9H)。MS-ESI计算值[M-56+H] +262,实测值262。
第四步
将化合物31-3(87.0mg,0.274mmol)溶解在混合溶剂[水(2mL),乙醇(2mL),四氢呋喃(2mL)]中,加入氢氧化钠(32.9mg,0.822mmol),反应液在50℃条件下搅拌反应2小时,反应液用盐酸(1mol/L)调节pH至4,反应液减压浓缩得到粗品化合物31-4。MS-ESI计算值[M-56+H] +248,实测值248。
第五步
将化合物31-4(234mg,0.739mmol)溶解在无水二氯甲烷(10mL)中,加入化合物1-4(366mg,2.22mmol)和三乙胺(224mg,2.22mmol),将反应液冷却至0℃,加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,470mg,1.48mmol),反应液在25℃条件下反应15小时,反应液用冰水(5mL)淬灭,用二氯甲烷(10mL×3)萃取,有机相用水(10mL×1)洗涤,饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(20：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物31-5。 1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69-8.66(m,1H),7.95-7.92(m,2H),7.48-7.40(m,5H),7.14-7.10(m,2H),6.66-6.62(m,1H),4.49-4.47(m,2H),3.85(s,3H),2.34-2.33(m,1H),1.96-1.90(m,1H),1.38(s,9H),1.18-1.10(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +451,实测值451。
第六步
将化合物31-5(117mg,0.248mmol)溶解在乙醇(3mL),水(3mL),四氢呋喃(3mL)中,向反应液中加入氢氧化钠(29.8mg,0.745mmol),反应液在50℃下反应2小时,用盐酸(1mol/L)调PH至4,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,反应液用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品31-6。MS-ESI计算值[M+H] +437,实测值437。
第七步
将化合物31-6(82.0mg,0.188mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,向反应液中加入化合物1-1 (78.3mg,0.376mmol),继续加入三乙胺(57.0mg,564μmol)和O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(215mg,0.564mmol),反应液在20℃条件下反应15小时,反应液用乙酸乙酯(20mL)稀释,用饱和食盐水(5mL)淬灭,有机相用饱合适盐水(10mL×2)洗涤,反应液用无水硫酸钠干燥,过滤,粗品粗产物经过硅胶柱层析法(20：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物31-7。MS-ESI计算值[M+Na] +649,实测值649。
第八步
将化合物31-7(97.0mg,0.130mmol)溶解在氯化氢甲醇溶液(4mol/L,5mL)中,反应液在25℃条件下反应1小时,反应液减压浓缩,粗品经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物31的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.88-7.85(m,2H),7.47-7.34(m,5H),7.09-7.01(m,1H),6.99-6.96(m,3H),6.81-6.79(m,1H),6.69-6.65(m,1H),6.54-6.49(m,1H),4.48(s,2H),2.42-2.38(m,1H),1.84-1.76(m,1H),0.99-0.91(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +427,实测值427。
实施例32
Figure PCTCN2022104706-appb-000153
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000154
第一步
将化合物31-2(1.00g,3.20mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)和甲醇(10mL)中,在氮气保护下加入三苯基磷(168mg,0.641mmol),醋酸钾(943mg,9.61mmol),1,1-二(二苯基磷基)二茂铁二氯化钯(469mg,0.641mmol),将反应液在80℃一氧化碳(50psi)氛围下反应40小时,反应液减压浓缩除去甲醇,反应液用水(15mL)稀释,乙酸乙酯(15mL×3)萃取,有机相以饱和食盐水(15mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(20：1～6:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物32-1。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.93-7.91(m,2H),7.17-7.15(m,2H),3.89(s,3H),2.78-2.76(m,1H),2.10-2.04(m,1H),1.44(s,9H),1.25-1.21(m,2H)。
第二步
将四氢铝锂(117mg,3.09mmol)溶解在四氢呋喃(5mL)中,向反应液中滴加化合物32-1(300mg,1.03mmol)的四氢呋喃溶液(5mL),反应液在25℃氮气保护下搅拌12小时,反应液用水(0.05mL),氢氧化钠(4mol/L,0.05mL),水(0.1mL)淬灭,过滤,滤液用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅 胶柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物32-2。MS-ESI计算值[M-56+H] +208,实测值208。
第三步
将化合物32-2(175mg,0.603mmol)溶解在乙腈中(5mL)中,向反应液中加入化合物7-8(463mg,1.81mmol)和三乙胺(122mg,1.21mmol),反应液在20℃条件下反应12小时,反应液减压浓缩得到粗品32-3。
第四步
将化合物32-3(200mg,0.495mmol)溶解在乙腈(3mL)中,向反应液中加入三乙胺(101mg,0.989mmol)和化合物1-4(409mg,2.47mmol),反应液在20℃下反应12小时,反应液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(4：1二氯甲烷/乙酸乙酯)分离得到化合物32-4。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.00(d,J＝8.4Hz,2H),7.34(d,J＝7.6Hz,2H),7.26(d,J＝8.4Hz,2H),7.13-7.11(d,J＝7.6Hz,2H),5.09(s,2H),4.44-4.43(m,2H),3.91(s,3H),2.72-2.68(m,1H),2.06-2.01(m,1H),1.45(s,9H),1.19-1.14(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +477,实测值477。
第五步
将化合物32-4(151mg,0.323mmol)溶解在水(3mL),乙醇(3mL)和四氢呋喃(3mL)中,向反应液中加入一水和氢氧化锂(40.6mg,0.968mmol),在50℃条件下反应2小时,反应液用盐酸(1mol/L)调节到PH至4,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,有机相减压浓缩得到粗品32-5。MS-ESI计算值[M+Na] +463,实测值463。
第六步
将化合物32-5(121mg,0.263mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,向反应液中加入1-1(165mg,0.788mmol),三乙胺(79.7mg,0.788mmol)和O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(300mg,0.788mmol),反应液在15℃条件下反应15小时,反应液以冰水(5mL)淬灭,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,有机相减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(20：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物32-6。MS-ESI计算值[M+H] +631,实测值631。
第七步
将化合物32-6(80.0mg,0.117mmol)溶解在氯化氢甲醇溶液(4mol/L,3mL)中,反应液在15℃条件下反应0.5小时,反应液减压浓缩,粗品经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物32的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.01-7.99(m,2H),7.45-7.43(m,6H),7.32-7.30(m,2H),7.16-7.14(m,2H),5.06(s,2H),4.36(s,2H),2.84-2.80(m,1H),2.38-2.32(m,1H),1.41-1.27(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +431,实测值431。
实施例33
Figure PCTCN2022104706-appb-000155
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000156
第一步
将化合物30-2(1.00g,3.20mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)和甲醇(10mL)中,在氮气保护下向其中加入1,1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(469mg,0.641mmol),三苯基磷(168mg,0.641mmol)和醋酸钾(943mg,9.61mmol)。反应液在一氧化碳(50psi)氛围下80℃搅拌12小时。反应液减压浓缩得到化合物33-1。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.87-7.85(m,2H),7.10-7.08(m,2H),2.97(s,3H),2.71-2.70(m,1H),2.04-1.98(m,1H),1.38(s,9H),1.18-1.15(m,2H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +192,实测值192。
第二步
将化合物33-1(650mg,2.23mmol)溶于四氢呋喃(10mL)中,冷却至0℃,在氮气保护下向反应液中加入四氢铝锂(169mg,4.46mmol),反应液25℃下搅拌3小时。向反应液中加入水(0.5mL),氢氧化钠水溶液(15％,0.5mL),水(1.5mL)进行淬灭,搅拌30分钟,过滤,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗产物33-2。MS-ESI计算值[M+Na] +286,实测值286。
第三步
参照实施例1第三步得到化合物33-3。MS-ESI计算值[M+H] +455,实测值455。
第四步
参照实施例1第四步得到化合物33-4。MS-ESI计算值[M+Na] +463,实测值463。
第五步
参照实施例1第五步得到化合物33-5。MS-ESI计算值[M+H] +631,实测值631。
第六步
将化合物33-5(0.240g，380μmol)溶于二氯甲烷(2mL)中,0℃下向反应液中加入三氟乙酸(1mL),混合物在15℃下搅拌2小时。反应液减压浓缩,剩余物经过制备高效液相色谱法(酸性,三氟乙酸体系)分离纯化得到化合物33的三氟乙酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02(d,J＝8.4Hz,2H),7.45-7.43(m,6H),7.32(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(d,J＝8.0Hz,2H),5.06(s,2H),4.36(s,2H),2.84-2.80(m,1H),2.38-2.32(m,1H),1.41-1.27(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +431,实测值431。
实施例34
Figure PCTCN2022104706-appb-000157
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000158
第一步
将化合物29-2(3.00g,8.02mmol)溶解在甲醇(20mL)和无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)的混合溶剂中,继续在氮气保护下向反应液中加入1,1-二(二苯基膦)二茂铁二氯化钯(Ⅱ)二氯甲烷络合物(1.31g,1.60mmol),三苯基磷(210mg,0.802mmol)和醋酸钾(2.36g,24.1mmol),反应液在80℃一氧化碳(50psi)下搅拌12小时,反应液过滤,滤液减压浓缩,反应液用水(10mL)稀释,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(20：1～6:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物34-1。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.76(d,J＝8.0Hz,2H),7.07(d,J＝8.0Hz,2H),3.72(s,3H),3.11-3.07(m,1H),2.96-2.90(m,1H),2.75-2.71(m,1H),2.04-1.99(m,1H),1.32-1.31(m,1H),1.24(s,9H),1.19-1.14(m,1H),0.91-0.84(m,1H),0.37-0.27(m,2H),0.14-0.02(m,2H)。
第二步
氮气保护下,将化合物34-1(50.0mg,0.145mmol)溶于无水四氢呋喃(10mL)中,0℃下加入四氢铝锂(6.6mg,0.174mmol),反应液在0℃下搅拌1小时,室温下向反应液中加入水(0.5mL),再加入无水硫酸镁(5.00g),搅拌10分钟,过滤,滤液减压浓缩得到化合物34-2。MS-ESI计算值[M-56+H] +262,实测值262。
第三步
将化合物34-2(270mg,0.851mmol)溶于无水四氢呋喃(2mL)中,加入三乙胺(129mg,1.28mmol)和化合物34-3(180mg,1.02mmol),反应液在25℃搅拌12小时,向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×1)萃取,有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物34-4。MS-ESI计算值[M+Na] +517,实测值517。
第四步
将化合物34-4(300mg,0.607mmol)溶于无水四氢呋喃(8mL)和水(2mL)中,加入一水合氢氧化锂(127mg,3.03mmol),反应液在65℃下搅拌12小时,将反应液旋干,向反应液中加入盐酸(1mol/L)调节pH＝5,用二氯甲烷和甲醇混合溶液(二氯甲烷：甲醇＝10:1,30mL×1)萃取,饱和食盐水(30mL×1)洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到化合物34-5。MS-ESI计算值[M+Na] +503,实测值503。
第五步
氮气保护下,将化合物34-5(25.0mg,0.052mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL)中,加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,99.3mg,0.156mmol)和三乙胺(21.1mg,0.208mmol),再加1-1(11.9mg,0.572mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,向反应液中加入水(50mL),用二氯甲烷(30mL×1)萃取,饱和食盐水洗涤(50mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物34-6。MS-ESI计算值[M+Na] +693,实测值693。
第六步
将化合物34-6(220mg,0.328mmol)溶于无水甲醇(5mL)中,25℃下滴加氯化氢甲醇溶液(4mol/L,5mL),反应液于25℃搅拌1小时,减压浓缩,粗品经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物34的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02(d,J＝8.8Hz,2H),7.64(d,J＝8.8Hz,2H),7.48-7.39(m,6H),7.22-7.18(m,2H),5.19(s,2H),3.11-3.07(m,2H),3.04-2.99(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.58-1.53(m,1H),1.43-1.37(m,1H),1.18-1.10(m,1H),0.74-0.69(m,2H),0.44-0.41(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +471,实测值471。
实施例35
Figure PCTCN2022104706-appb-000159
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000160
第一步
将化合物34-2(300mg,0.945mmol)溶于乙腈(3mL)和二氯甲烷(3mL)中,冷至0℃,向其中依次加入7-8(436mg,1.70mmol)和4-二甲氨基吡啶(57.7mg,0.473mmol)。反应液在28℃下搅拌2小时。将反应液减压浓缩得到化合物35-1。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +359,实测值359。
第二步
将化合物35-1(435mg,0.949mmol)溶于二氯甲烷(6mL)中,冷至0℃,向其中加入N,N-二异丙基乙胺(245mg,1.90mmol)和化合物35-2(187mg,1.04mmol)。反应液在27℃下搅拌12小时。加水(80mL),用二氯甲烷(50mL×2)萃取,合并有机相,用饱和氯化钠水溶液(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物35-3。 1H NMR(400MHz, CDCl 3)δ7.86-7.83(m,2H),7.22-7.20(m,2H),7.10-7.05(m,2H),6.95-6.84(m,2H),4.89-4.84(m,2H),4.74(s,1H),3.75(s,3H),3.10-3.05(m,1H),2.94-2.88(m,1H),2.68-2.65(m,1H),1.96-1.91(m,1H),1.33-1.31(m,3H),1.28(s,9H),1.14-1.09(m,1H),1.06-1.02(m,1H),0.89-0.83(m,1H),0.34-0.23(m,2H),0.11-0.05(m,1H),0.02-0.04(m,1H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +423,实测值423。
第三步
将化合物35-3(300mg,0.574mmol)溶于四氢呋喃(2mL),水(2mL)和乙醇(2mL)中,向其中加入一水合氢氧化锂(72.3mg,1.72mmol)。反应液在50℃下搅拌2小时。反应液减压浓缩,加水(20mL),水相用盐酸(1mol/L)调节pH值至4,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物35-4。MS-ESI计算值[M+Na] +531,实测值531。
第四步
将化合物35-4(325mg,0.639mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(6mL),向其中加O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(300mg,0.789mmol)和N,N-二异丙基乙胺(165mg,1.28mmol)。反应液在26℃下搅拌0.5小时,向反应液中加入化合物1-1(150mg,0.720mmol),反应液在26℃下搅拌10小时。将反应液加至水(20mL)中,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相后分别用水(50mL×2)和饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物35-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +599,实测值599。
第五步
将化合物35-5(400mg,0.572mmol)溶于乙酸乙酯(10mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,10mL),反应液在28℃搅拌1小时。反应液过滤,滤饼减压干燥后经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物35的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.07-8.05(m,2H),7.59-7.49(m,6H),7.35-7.33(m,2H),7.20-7.18(m,2H),5.11-5.00(m,1H),4.83(s,2H),3.11-3.08(m,2H),3.02-3.00(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.49-1.47(m,3H),1.43-1.37(m,1H),1.18-1.11(m,1H),0.75-0.70(m,2H),0.44-0.42(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +499,实测值499。
实施例36
Figure PCTCN2022104706-appb-000161
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000162
第一步
将化合物36-2(546mg,3.71mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL),向其中加O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(1.61g,4.24mmol)和N,N-二异丙基乙胺(916mg,7.08mmol),反应液在28℃下搅拌0.5小时,向反应液中加入化合物26-2(800mg,3.54mmol),反应液在28℃下搅拌10小时。反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释,依次用水(100mL×3)和饱和食盐水(100mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(5：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物36-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.34(br s,1H),7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.70(d,J＝8.4Hz,2H),7.63-7.56(m,1H),6.93-6.81(m,3H),1.44(s,9H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +256,实测值256。
第二步
将化合物36-3(350mg,0.985mmol)溶于无水甲醇(10mL)中,冷至0℃,加入氯化钴(256mg,1.97mmol),反应液在0℃下搅拌5分钟,向其中加入硼氢化钠(373mg,9.85mmol),反应液在28℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L,30mL)淬灭并在室温下搅拌10分钟,用氨水(30mL)中和,用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物36-4。MS-ESI计算值[M-56+H] +304,实测值304。
第三步
将化合物A-7(3.00g,10.3mmol)溶于乙酸乙酯(25mL),向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L, 12.8mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩得到化合物36-5的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H] +192,实测值192。
第四步
将化合物36-5的盐酸盐(2.00g,8.78mmol)和丙酮(673mg,11.6mmol)溶于甲醇(4mL),冷却至0℃,向反应液中加入二甲基吡啶硼烷(1.02g,9.57mmol)和冰醋酸(400μL),反应液在25℃下搅拌5小时。在0℃下向反应液中加入饱和碳酸氢钠(100mL)淬灭,用乙酸乙酯(100mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物36-6。MS-ESI计算值[M+H] +234,实测值234。
第五步
将化合物36-6(2.00g,8.57mmol)溶于二氯甲烷(30mL),冷却至0℃,加入二异丙基乙胺(1.66g,12.9mmol)和二碳酸二叔丁酯(2.06g,9.43mmol),反应液在25℃下搅拌2小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物36-7。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +234,实测值234。
第六步
将化合物36-7(2.00g,6.00mmol)溶于四氢呋喃(20mL),冷却至0℃,氮气保护下向反应液中加入四氢铝锂(273mg,7.20mmol),反应液在20℃搅拌0.5小时。在0℃下向反应液中依次加入水(1mL),NaOH(15％水溶液,1mL),水(3mL)淬灭,反应液20℃下搅拌0.5小时,过滤,残渣用乙酸乙酯(20mL×1)洗,加水(50mL)用乙酸乙酯(20mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(80mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物36-8。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.31-7.28(d,J＝8.0Hz,2H),7.12-7.10(d,J＝8.0Hz,2H),4.67(d,J＝5.6Hz,2H),4.08-4.04(m,1H),2.58-2.56(m,1H),2.13-2.12(m,1H),1.66-1.64(m,1H),1.45(s,9H),1.40-1.39(m,1H),1.30-1.28(d,J＝2.4Hz,3H),1.24-1.22(d,J＝2.4Hz,3H)。MS-ESI计算值[M-56+H] +250,实测值250。
第七步
将化合物36-8(200mg,0.655mmol)溶于乙腈(4mL)和二氯甲烷(4mL)中,冷至0℃,向其中依次加入7-8(300mg,1.17mmol)和4-二甲氨基吡啶(40mg,0.327mmol)。反应液在28℃下搅拌2小时。将反应液减压浓缩得到化合物36-9。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +347,实测值347。
第八步
将化合物36-9(295mg,0.661mmol)溶于二氯甲烷(6mL)中,冷至0℃,向其中加入N,N-二异丙基乙胺(256mg,1.98mmol)和化合物36-4(300mg,0.835mmol)。反应液在28℃下搅拌12小时。反应液用水(30mL)淬灭,用二氯甲烷(30mL×2)萃取,合并有机相,用饱和氯化钠水溶液(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥, 过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物36-10。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +591,实测值591。
第九步
将化合物36-10(248mg,0.359mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在28℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,剩余物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物36的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02(d,J＝8.0Hz,2H),7.48-7.36(m,5H),7.22-7.14(m,4H),5.11(s,2H),4.40(s,2H),3.62-3.55(m,1H),2.97-2.95(m,1H),2.49-2.44(m,1H),1.54-1.45(m,2H),1.40(d,J＝6.4Hz,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +491,实测值491。
实施例37
Figure PCTCN2022104706-appb-000163
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000164
第一步
将化合物29-2(1g,2.73mmol),氰化锌(520mg,4.43mmol)和四(三苯基磷)钯(380mg,0.329mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中,反应液在氮气保护下于100℃搅拌12小时。反应液通过硅藻土过滤,滤液用乙酸乙酯(100mL)稀释,依次用水(100mL×3)和饱和食盐水(100mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10：1石油醚/乙酸乙酯)分离分离纯化得到化合物37-1。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.06(d,J＝8.0Hz,2H),3.17-3.11(m,1H),2.87-2.82(m,1H),2.74-2.71(m,1H),2.02-1.97(m,1H),1.27(s,9H),1.24-1.20(m,1H),1.13-1.10(m,1H),0.89-0.81(m,1H),0.37-0.25(m,2H),0.12-0.07(m,1H),0.02--0.04(m,1H)。MS-ESI计算值[M-56+H] +257, 实测值257。
第二步
将化合物37-1(300mg,0.960mmol)溶于无水甲醇(8mL)中,冷至0℃,加入氯化钴(250mg,1.93mmol),反应液在0℃下搅拌5分钟,向其中加入硼氢化钠(363mg,9.59mmol),反应液在28℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L,20mL)淬灭并在室温下搅拌10分钟,用氨水(20mL)中和,用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物37-2。
第三步
将化合物37-3(1g,6.57mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(20mL),向其中加O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(3.00g,7.89mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1.70g,13.2mmol),反应液在28℃下搅拌0.5小时,向反应液中加入化合物1-1(1.37g,6.57mmol),反应液在28℃下搅拌6小时。反应液用乙酸乙酯(100mL)稀释,依次用水(100mL×3)和饱和食盐水(100mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物37-4。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.24(br s,1H),7.93(d,J＝8.0Hz,1H),7.79(d,J＝7.6Hz,1H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),7.27-7.15(m,3H),6.93-6.91(m,1H),4.77(d,J＝4.4Hz,2H),2.81(s,1H),1.53(s,9H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +243,实测值243。
第四步
将化合物37-4(250mg,0.730mmol)溶于乙腈(3mL)和二氯甲烷(3mL)中,冷至0℃,向其中依次加入7-8(338mg,1.32mmol)和4-二甲氨基吡啶(44.6mg,0.365mmol)。反应液在28℃下搅拌2小时。将反应液减压浓缩得到化合物37-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +384,实测值384。
第五步
将化合物37-5(353mg,0.730mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中,冷至0℃,向其中加入N,N-二异丙基乙胺(283mg,2.19mmol)和化合物37-2(310mg,0.980mmol)。反应液在28℃下搅拌12小时。反应液用水(30mL)淬灭,用二氯甲烷(30mL×2)萃取,合并有机相,用饱和氯化钠水溶液(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物37-6。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +585,实测值585。
第六步
将化合物37-6(305mg,0.445mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在30℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,剩余物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物37的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.08(d,J＝8.0Hz,2H),7.57(d,J＝8.0Hz,2H),7.53-7.41(m,4H),7.28(d,J＝8.0Hz,2H),7.17(d,J＝8.0Hz,2H),5.23(s,2H),4.30(s,2H),3.14-3.05(m,2H), 3.02-2.98(m,1H),2.52-2.47(m,1H),1.55-1.50(m,1H),1.42-1.36(m,1H),1.17-1.10(m,1H),0.77-0.71(m,2H),0.45-0.43(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +485,实测值485。
实施例38
Figure PCTCN2022104706-appb-000165
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000166
第一步
将化合物38-1(1.00g,5.23mmol)溶于水(10mL)和1,4-二氧六环(40mL)中,向其中加入一水合氢氧化锂(439mg,10.5mmol)。反应液在28℃下搅拌10小时。反应液减压浓缩,加水(20mL),水相用盐酸(1mol/L)调节pH值至4,用二氯甲烷(50mL×2)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物38-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.26(d,J＝8.0Hz,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.35(s,1H),4.14(s,3H)。
第二步
将化合物38-2(380mg,2.14mmol)和化合物1-1(449mg,2.15mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中,加入N,N-二异丙基乙胺(846mg,6.55mmol),反应液冷至0℃,加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,2.85g,4.47mmol),反应液在50℃条件下搅拌10小时。将反应液冷至室温,用乙酸乙酯(50mL)稀释,分别用水(50mL×3)和饱和食盐水(50mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物38-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.74(br s,1H),8.39(d,J＝8.0Hz,1H),7.76-7.50(m,2H),7.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.32(d,J＝1.2Hz,1H),7.27-7.20(m, 2H),6.73(br s,1H),4.14(s,3H),1.51(s,9H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +268,实测值268
第三步
将化合物38-3(300mg,0.817mmol)溶于无水甲醇(6mL)中,冷至0℃,加入氯化钴(212mg,1.63mmol),反应液在0℃下搅拌5分钟,向其中加入硼氢化钠(309mg,8.17mmol),反应液在28℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L,20mL)淬灭并在室温下搅拌10分钟,用氨水(20mL)中和,用乙酸乙酯(20mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物38-4。MS-ESI计算值[M+H] +372,实测值372。
第四步
将化合物38-4(220mg,0.493mmol)溶于二氯甲烷(6mL)中,冷至0℃,向其中加入N,N-二异丙基乙胺(191mg,1.48mmol)和化合物36-9(310mg,0.835mmol)。反应液在28℃下搅拌12小时。加水(20mL),用二氯甲烷(20mL×2)萃取,合并有机相,用饱和氯化钠水溶液(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物38-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +603,实测值603。
第五步
将化合物38-5(136mg,0.194mmol)溶于乙酸乙酯(3mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,3mL),反应液在28℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,剩余物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物38的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.45-7.43(m,1H),7.38-7.36(m,2H),7.21-7.13(m,3H),7.09-7.05(m,1H),7.01-6.99(m,1H),6.95-6.93(m,1H),6.83-6.79(m,1H),5.12(s,2H),4.38(s,2H),4.02-3.94(m,3H),3.61-3.54(m,1H),2.96-2.93(m,1H),2.53-2.48(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.47-1.44(m,1H),1.40(br d,J＝6.4Hz,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +503,实测值503。
实施例39
Figure PCTCN2022104706-appb-000167
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000168
第一步
将三乙胺(99.4mg,0.982mmol)和化合物34-3(139mg,0.786mmol)加至化合物36-8(200mg,0.655mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液中,反应液在25℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(30mL),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物39-1。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +383,实测值383。
第二步
将化合物39-1(280mg,0.580mmol)溶于四氢呋喃(2mL)和水(2mL),向反应液中加入一水合氢氧化锂(48.7mg,1.16mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(50mL),用甲基叔丁基醚(20mL×2)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物39-2。MS-ESI计算值[M+Na] +491,实测值491。
第三步
将化合物39-2(110mg,0.235mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(134mg,0.352mmol)和N,N-二异丙基乙胺(60.7mg,0.470mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(53.8mg,0.258mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物39-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +559,实测值559。
第四步
将化合物39-3(100mg,0.152mmol)溶于乙酸乙酯(2mL),向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,379μL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体 系)得到化合物39的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.05(d,J＝8.0Hz,2H),7.92-7.80(m,1H),7.65(d,J＝8.4Hz,2H),7.55-7.50(m,3H),7.43(d,J＝8.0Hz,2H),7.24(d,J＝8.4Hz,2H),5.22(s,2H),3.62-3.56(m,1H),2.97-2.94(m,1H),2.54-2.52(m,1H),1.58-1.55(m,1H),1.47-1.45(m,1H),1.42-1.41(m,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +459,实测值459。
实施例40
Figure PCTCN2022104706-appb-000169
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000170
第一步
将化合物36-9(290mg,0.650mmol)和化合物40-1(137mg,0.714mmol)溶于二氯甲烷(5mL),向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(168mg,1.30mmol),反应液在25℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物40-2。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +423,实测值423。
第二步
将化合物40-2(300mg,0.574mmol)溶于四氢呋喃(2mL)和水(2mL)中,向反应液中加入一水合氢氧化锂(48.2mg,1.15mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(50mL),用甲基叔丁基醚(20mL×2)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗产物40-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +409,实测值409。
第三步
将化合物40-3(260mg,0.511mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(292mg,0.767mmol)和N,N-二异丙基乙胺(132mg,1.02mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(117mg,0.562mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物40-4。MS-ESI计算值[M+H] +699,实测值699。
第四步
将化合物40-4(260mg,0.372mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,930μL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物40的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02-7.99(m,2H),7.51-7.48(m,4H),7.38-7.36(m,4H),7.23-7.22(m,2H),5.11-5.10(m,2H),3.62-3.57(m,1H),2.97-2.95(m,1H),2.52-2.49(m,1H),1.55-1.53(m,1H),1.47-1.45(m,1H),1.41-1.40(m,3H),1.40-1.39(m,3H),1.36-1.35(m,4H)。MS-ESI计算值[M+H] +499,实测值499。
实施例41
Figure PCTCN2022104706-appb-000171
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000172
第一步
将钠氢(90.5mg,2.26mmol,60％)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),向反应液中加入化合物41-1(500mg,1.88mmol)和碘甲烷(321mg,2.26mmol),反应液25℃下搅拌3小时。向反应液中加入饱和氯化铵(30mL)淬灭,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物41-2。MS-ESI计算值[M-56+H] +224,实测值224。
第二步
将化合物41-2(510mg,1.83mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,4.56mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩得到粗产物41-3的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H] +180,实测值180。
第三步
将化合物36-9(200mg,0.448mmol)和化合物41-3的盐酸盐(96.6mg,0.448mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(115mg,0.896mmol),反应液25℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物41-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +411,实测值411。
第四步
将化合物41-4(170mg,0.333mmol)溶于四氢呋喃(2mL)和水(2mL)中,向反应液中加入一水合氢氧化锂(27.9mg,0.666mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(50mL),水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗产物41-5。MS-ESI计算值[M+Na] +519,实测值519。
第五步
将化合物41-5(120mg,0.242mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(138mg,0.362mmol)和N,N-二异丙基乙胺(62.5mg,0.483mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(55.4mg,0.266mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物41-6。MS-ESI计算值[M+H] +687,实测值687。
第六步
将化合物41-6(160mg,0.233mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,582μL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物41的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.07-8.06(m,2H),7.58-7.57(m,2H),7.56-7.55(m, 1H),7.52-7.51(m,1H),7.40-7.38(m,2H),7.22-7.21(m,1H),7.20-7.19(m,3H),5.16(s,2H),4.62(s,2H),3.61-3.57(m,1H),2.96-2.95(m,4H),2.54-2.52(m,1H),1.58-1.55(m,1H),1.47-1.45(m,1H),1.421.40(m,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +487,实测值487。
实施例42
Figure PCTCN2022104706-appb-000173
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000174
第一步
将化合物42-1(500mg,3.03mmol)和化合物1-1(631mg,3.03mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中,向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(1.17g,9.08mmol),反应液冷至0℃,再向反应液中加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,3.85g,6.06mmol),反应液在50℃条件下搅拌10小时。将反应液冷至室温,用乙酸乙酯(50mL)稀释,分别用水(50mL×3)和饱和食盐水(50mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(4：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物42-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.17-9.14(m,1H),8.29-8.25(m,1H),7.86-7.84(m,1H),7.65-7.62(m,1H),7.54-7.51(m,1H),7.36-7.34(m,1H),7.29-7.25(m,2H),6.64(br s,1H),1.52(s,9H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +256,实测值256。
第二步
将化合物42-2(300mg,0.844mmol)溶于无水甲醇(10mL)中,反应液冷却至0℃,向反应中加入氯化钴(219mg,1.69mmol),在0℃下搅拌5分钟。再向反应液中加入硼氢化钠(319mg,8.44mmol),在25℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L,30mL)淬灭,在25℃下搅拌10分钟,再用氨水调节pH至中性,用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压 浓缩得到化合物42-3。MS-ESI计算值[M+H] +360,实测值360。
第三步
将化合物36-9(200mg,0.448mmol)和化合物42-3(161mg,0.448mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(116mg,0.896mmol),反应液25℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物42-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +591,实测值591。
第四步
将化合物42-4(170mg,0.246mmol)溶于乙酸乙酯(2mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,615μL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物42的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.93-7.91(m,1H),7.57-7.55(m,2H),7.52-7.50(m,2H),7.38-7.36(m,2H),7.23-7.22(m,1H),7.22-7.21(m,3H),5.12(s,2H),4.40(s,2H),3.62-3.55(m,1H),2.96-2.94(m,1H),2.54-2.51(m,1H),1.57-1.55(m,1H),1.46-1.44(m,1H),1.42-1.39(m,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +491,实测值491。
实施例43
Figure PCTCN2022104706-appb-000175
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000176
第一步
将化合物35-1(280mg,0.611mmol)和化合物40-1(117mg,0.611mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(158mg,1.22mmol),反应液在25℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(30 mL),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物43-1。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +435,实测值435。
第二步
将化合物43-1(300mg,0.561mmol)溶于四氢呋喃(3mL),乙醇(1mL)和水(3mL)中,向反应液中加入一水合氢氧化锂(35.3mg,0.842mmol),反应液在55℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,用盐酸(1mol/L)调节pH至6,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗产物43-2。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +421,实测值421。
第三步
将化合物43-2(253mg,0.486mmol)和化合物1-1(111mg,0.535mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(157mg,1.21mmol)和三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,232mg,0.729mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物43-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +611,实测值611。
第四步
将化合物43-3(50mg,70.3μmol)溶于乙酸乙酯(3mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,176μL,),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物43的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.00-7.98(m,2H),7.45-7.44(m,4H),7.38-7.34(m,4H),7.22-7.20(m,2H),5.09-5.06(m,2H),3.12-3.03(m,3H),2.52-2.51(m,1H),1.55-1.53(m,1H),1.43-1.42(m,1H),1.36-1.35(m,4H),1.13-1.11(m,1H),0.75-0.72(m,2H),0.43-0.42(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +511,实测值511。
实施例44
Figure PCTCN2022104706-appb-000177
合成路线:
Figure PCTCN2022104706-appb-000178
第一步
将三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,8.65g,13.6mmol),N,N-二异丙基乙胺(2.64g,20.4mmol)和化合物44-1(1.00g,6.80mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中,向反应液中加入化合物1-1(1.70g,8.16mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,反应液用水(20mL)淬灭,混合物用乙酸乙酯萃取(30mL×3),有机相用饱和氯化钠(30mL×1)洗涤,用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10:1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物44-2。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.08(d,J＝8.4Hz,2H),7.93-7.91(m,1H),7.77(d,J＝8.4Hz,2H),7.32-7.28(m,1H),7.21-7.12(m,2H),1.53(s,9H)。
第二步
将化合物44-2(1.00g,2.96mmol)溶解在甲醇(200mL)中,反应液冷却至0℃,缓慢加入盐酸(12mol/L,247μL),氮气保护下向反应液中加入钯/碳(10％,800mg),反应用氢气置换3次,反应液在氢气(15psi)氛下搅拌12小时,反应液过滤,滤液减压浓缩得到化合物44-3的盐酸盐。1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.19-8.17(m,1H),8.09-8.07(m,2H),7.69-7.63(m,3H),7.50-7.48(m,1H),7.28-7.26(m,1H),4.25(s,2H),1.52(s,9H)。
第三步
氮气保护下将钠氢(5.16g,129mmol,60％)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(200mL)中,在0℃下滴加44-5(18.6g,94.6mmol),反应液在20℃下搅拌0.5小时。将化合物44-4(16.0g,86.0mmol)在0℃下加到反应液中,反应液在氮气保护下20℃下搅拌1小时。向反应液中加入水(500mL),用乙酸乙酯(500mL×2)萃取。 有机相用饱和食盐水洗涤(500mL×3),无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(10:1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物44-6。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.64(dd,J＝2.0,4.4Hz,2H),7.97(t,J＝2.0Hz,1H),7.59(d,J＝16.4Hz,1H),6.50(d,J＝16.4Hz,1H),4.27(q,J＝7.2Hz,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。
第四步
氮气保护下将钠氢(3.00g,75.0mmol,60％)溶于无水二甲基亚砜(200mL)中,在0℃下加入A-4(14.4g,65.6mmol),反应液在20℃下搅拌0.5小时。将化合物44-6(16.0g,62.5mmol)在0℃下加到反应液中,反应液在氮气保护下20℃下搅拌1.5小时。向反应液中加入水(200mL),用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(200mL×3),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(10:1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物44-7。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.52(d,J＝2.0Hz,1H),8.36(d,J＝2.0Hz,1H),7.50(t,J＝2.0Hz,1H),4.19(q,J＝7.2Hz,2H),2.52-2.47(m,1H),1.96-1.92(m,1H),1.69-1.64(m,1H),1.35-1.24(m,4H)。
第五步
氮气保护下,将化合物44-7(10.0g,37.0mmol)溶于四氢呋喃(100mL)和水(20mL)中,加入一水合氢氧化锂(4.66g,111mmol),反应液在60℃下搅拌12小时,反应液减压浓缩除去四氢呋喃,剩余液体用盐酸(1mol/L)调节pH至3,加入水(200mL),用二氯甲烷(300mL×6)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(300mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物44-8。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.49(d,J＝2.0Hz,1H),8.40(d,J＝2.0Hz,1H),7.80(t,J＝2.0Hz,1H),2.55-2.51(m,1H),1.99-1.97(m,1H),1.63-1.59(m,1H),1.47-1.44(m,1H)。
第六步
将化合物44-8(7.00g,28.9mmol)和三乙胺(4.39g,43.4mmol)溶于叔丁醇(70mL)中,向其中加入叠氮磷酸二苯酯(9.55g,34.7mmol)。反应液在氮气保护90℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(100mL),用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水(200mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(3:1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物44-9。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.48(d,J＝2.0Hz,1H),8.37(d,J＝2.0Hz,1H),7.56(t,J＝2.0Hz,1H),4.97(br s,1H),2.76-2.72(m,1H),2.07-1.97(m,1H),1.45(s,9H),1.27-1.20(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +313和315,实测值313和315。
第七步
氮气保护下将化合物44-9(700mg,2.24mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,在0℃下加入钠氢(179mg,4.47mmol,60％),反应液在0℃下搅拌0.5小时。将29-1(453mg,3.35mmol)在0℃下加到反应液中,反应液在氮气保护下25℃下搅拌0.5小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水(20mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(3:1 石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物44-10。MS-ESI计算值[M+H] +367和369,实测值367和369。
第八步
氮气保护下将化合物44-10(120mg,0.295mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,加入三乙胺(5mL),甲醇(15mL),1,1-双(二苯基膦)二茂铁二氯化钯(43.1mg,0.0589mmol),反应液在一氧化碳(50Psi)氛围下80℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(30mL),用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水(30mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(3:1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物44-11。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.06(d,J＝2.0Hz,1H),8.72(d,J＝2.0Hz,1H),8.29(t,J＝2.0Hz,1H),3.97(s,3H),3.15-3.12(m,2H),2.73-2.68(m,1H),2.08-2.03(m,1H),1.48(s,9H),1.03-0.98(m,3H),0.52-0.49(m,2H),0.23-0.21(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +347,实测值347。
第九步
氮气保护下将化合物44-11(100mg,0.289mmol)溶于无水四氢呋喃(3mL)中,在0℃下加入四氢锂铝(21.9mg,0.577mmol),反应液在20℃下搅拌0.5小时。向反应液中加入水(0.2mL),氢氧化钠水溶液(15％,0.2mL),再加入水(0.6mL)。反应液在20℃下搅拌0.5小时。然后过滤,滤液减压浓缩得到化合物44-12。MS-ESI计算值[M+H] +319,实测值319。
第十步
将化合物44-12(90.0mg,0.218mmol)溶于二氯甲烷(2mL)中,在0℃下向其中加入4-二甲氨基吡啶(26.6mg,0.218mmol)和氯甲酸对硝基苯酯(57.1mg,0.283mmol)。反应液在氮气保护下25℃搅拌2小时。把反应液冷却到0℃,将44-3的盐酸盐(89.3mg,0.262mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液加入到反应液中,反应液在氮气保护下25℃搅拌10小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水(30mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(1:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物44-13。MS-ESI计算值[M+H] +686,实测值686。
第十一步
将化合物44-13(120mg,0.130mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,3mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩,剩余物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离纯化得到化合物44的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.65(s,1H),8.61(d,J＝2.0Hz,1H),8.52(d,J＝2.0Hz,1H),8.00-7.89(m,4H),7.39-7.36(m,3H),7.16(d,J＝7.6Hz,1H),6.97(t,J＝7.6Hz,1H),6.84-6.77(m,2H),6.62-6.58(m,1H),6.48-6.43(m,1H),5.12(s,2H),4.90(s,2H),4.28(d,J＝6.4Hz,2H),3.72(d,J＝6.4Hz,2H),2.80-2.78(m,2H),1.05-1.04(m,1H),0.56-0.54(m,2H),0.34-0.32(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +486,实测值486。
实施例45
Figure PCTCN2022104706-appb-000179
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000180
第一步
氮气保护下将草酰氯(1.90g,15.0mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL)中,降温到-70℃,将二甲基亚砜(1.33g,17.0mmol)的无水二氯甲烷(5mL)溶液滴加到反应液中,在-70℃下搅拌15分钟,将化合物45-1(1.0g,7.74mmol)的无水二氯甲烷(5mL)溶液滴加到反应液中,反应液在-70℃下搅拌1小时,向反应液中加入三乙胺(3.77g,37.3mmol),反应液缓慢升温至25℃再搅拌15分钟。加入饱和碳酸钠水溶液(20mL)淬灭,用二氯甲烷(20mL×1)萃取,有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(8：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物45-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.66(s,1H),3.39-3.38(m,2H),2.85-2.82(m,2H),2.65(s,3H),2.30-2.26(m,3H),2.02-1.98(m,2H)。
第二步
将化合物36-5的盐酸盐(130mg,0.571mmol)和化合物45-2(87.1mg,0.685mmol)溶于无水甲醇(3mL)和乙酸(0.3mL)中,将二甲基吡啶硼烷络合物(91.6mg,0.856mmol)加至反应液,在25℃下搅拌反应0.5小时,向反应液中加入饱和碳酸氢钠(20mL),用乙酸乙酯(20mL×1)萃取除杂,得到化合物45-3的水溶液,水相无需纯化直接投下一步。MS-ESI计算值[M+H] +303,实测值303。
第三步
氮气保护下,向化合物45-3的水溶液中加入四氢呋喃(20mL),向反应液中加入碳酸氢钠(95.6mg,1.14mmol)和二碳酸二叔丁酯(186mg,0.853mmol),在25℃下搅拌12小时,向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(30mL×1)萃取,有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩, 剩余物用硅胶柱色谱法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物45-4。MS-ESI计算值[M+H] +403,实测值403。
第四步
氮气保护下,将化合物45-4(125mg,0.310mmol)溶于无水四氢呋喃(10mL)中,0℃下加入四氢铝锂(23.6mg,0.621mmol),反应液在0℃下搅拌2小时,室温下向反应液中加入水(0.2mL),再加入无水硫酸镁(3.00g),搅拌十分钟,过滤,将滤液浓缩得到化合物45-5。MS-ESI计算值[M+H] +375,实测值375。
第五步
氮气保护下,0℃下将化合物45-5(114mg,0.304mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL)中,再加入对二甲氨基吡啶(37.2mg,0.304mmol)和氯甲酸对硝基苯酯(79.8mg,0.396mmol),反应液在25℃下搅拌2小时,0℃下将化合物44-3的盐酸盐(125mg,0.365mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液滴加到反应液中,反应液在25℃下搅拌10小时,将反应液浓缩除去二氯甲烷,向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(30mL×1)萃取,有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物45-6。MS-ESI计算值[M+H] +742,实测值742。
第六步
将化合物45-6(90.0mg,0.121mmol)溶于无水甲醇(5mL)中,25℃下滴加氯化氢甲醇溶液(4mol/L,4.5mL),反应液于25℃搅拌1小时,减压浓缩,粗品经过制备高效液相色谱法(盐酸,盐酸体系)分离得到化合物45的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.04(d,J＝8.0Hz,2H),7.55-7.51(m,3H),7.49-7.45(m,3H),7.37-7.33(m,2H),7.22-7.20(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),3.57-3.54(m,2H),3.20-3.19(m,2H),3.07-3.04(m,2H),2.87(s,3H),2.66-2.61(m,1H),2.14-2.10(m,3H),1.74-1.54(m,4H),1.42-1.38(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +542,实测值542。
实施例46
Figure PCTCN2022104706-appb-000181
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000182
第一步
将化合物46-1(700mg,4.09mmol)溶于无水甲醇(10mL)中,0℃下滴加浓硫酸(40.1mg,0.409mmol),反应液在80℃下搅拌反应12小时,将反应液加压浓缩除去溶剂,向剩余物中加入饱和碳酸钠(20mL),用乙酸乙酯(20mL×1)萃取,有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物46-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ3.69(s,3H),2.88-2.85(m,2H),2.76-2.67(m,1H),2.33-2.26(m,1H),2.22-2.16(m,2H),1.95-1.92(m,2H),1.77-1.75(m,2H),1.05(d,J＝6.4Hz,6H)。
第二步
氮气保护下,将化合物46-2(130mg,0.702mmol)溶于无水四氢呋喃(10mL)中,0℃下加入四氢铝锂(32.0mg,0.842mmol),反应液在0℃下搅拌1小时,室温下向反应液中加入水(0.2mL),再加入无水硫酸镁(3.00g),搅拌十分钟,过滤,将滤液减压浓缩得到化合物46-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ3.49(d,J＝6.4Hz,2H),2.92-2.89(m,2H),2.75-2.66(m,1H),2.15-2.09(m,2H),1.77-1.74(m,2H),1.54-1.45(m,1H),1.31-1.24(m,2H),1.04(d,J＝6.4Hz,6H)。
第三步
氮气保护下将草酰氯(148mg,1.17mmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,降温到-70℃,将二甲亚砜(104mg,1.33mmol)的无水二氯甲烷(2mL)溶液滴加到反应液中,在-70℃下搅拌15分钟,-70℃下将化合物46-3(95.0mg,0.604mmol)的无水二氯甲烷(2mL)溶液滴加到反应液中,反应液在-70℃下搅拌1小时,再加入三乙胺(295mg,2.91mmol),反应液缓慢升到25℃搅拌15分钟,加入水(10mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)淬灭,用氯仿(10mL×1)萃取,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物溶于乙酸乙酯(10mL),过滤掉不溶物,减压浓缩得到化合物46-4。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.64(d,J＝1.2Hz,1H), 2.86-2.81(m,2H),2.78-2.72(m,1H),2.30-2.27(m,2H),2.25-2.21(m,1H),1.95-1.91(m,2H),1.75-1.65(m,2H),1.04(d,J＝6.8Hz,6H)。
第四步
将化合物36-5的盐酸盐(120mg,0.527mmol)和化合物46-4(98.2mg,0.632mmol)溶于无水甲醇(3mL)和乙酸(0.3mL)中,将二甲基吡啶硼烷络合物(84.6mg,0.791mmol)加至反应液,在25℃下搅拌反应0.5小时,向反应液中加入饱和碳酸氢钠(20mL),用乙酸乙酯(20mL×1)萃取,有机相减压浓缩得到粗品化合物46-5。MS-ESI计算值[M+H] +331,实测值331。
第五步
氮气保护下,将化合物46-5(70.0mg,0.212mmol)溶于无水四氢呋喃(20mL)中,再加入碳酸氢钠(26.7mg,0.318mmol)和二碳酸二叔丁酯(55.5mg,0.254mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×1)萃取,有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物46-6。MS-ESI计算值[M+H] +431,实测值431。
第六步
氮气保护下,将化合物46-6(90.0mg,0.209mmol)溶于无水四氢呋喃(10mL)中,0℃下加入四氢铝锂(15.9mg,0.418mmol),反应液在0℃下搅拌2小时,室温下向反应液中加入水(0.2mL),再加入无水硫酸镁(2.00g),搅拌十分钟,过滤,将滤液浓缩得到化合物46-7。MS-ESI计算值[M+H] +403,实测值403。
第七步
氮气保护下,0℃下将化合物46-7(84.0mg,0.209mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL)中,向反应液中加入对二甲氨基吡啶(25.5mg,0.209mmol)和氯甲酸对硝基苯酯(54.7mg,0.271mmol),反应液在25℃下搅拌2小时,0℃下将化合物44-3的盐酸盐(85.5mg,0.250mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(4mL)溶液滴加到反应液中,反应液在25℃下搅拌10小时,将反应液减压浓缩除去二氯甲烷,向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(30mL×1)萃取,有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱色谱法(10：1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物46-8。MS-ESI计算值[M+H] +770,实测值770。
第八步
将化合物46-8(80.0mg,0.104mmol)溶于无水甲醇(5mL)中,25℃下滴加氯化氢甲醇溶液(4mol/L,5mL),反应液于25℃搅拌1小时,减压浓缩,粗品经制备高效液相色谱法(盐酸,盐酸体系)分离得到化合物46的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.05(d,J＝8.4Hz,2H),7.56-7.52(m,3H),7.49-7.45(m,3H), 7.38-7.33(m,2H),7.22-7.20(m,2H),5.09(s,2H),4.39(s,2H),3.52-3.49(m,3H),3.20-3.19(m,2H),3.09-3.04(m,3H),2.70-2.58(m,1H),2.17-2.13(m,3H),1.76-1.70(m,2H),1.67-1.63(m,1H),1.43-1.39(m,1H),1.38(d,J＝6.4Hz,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +570,实测值570。
实施例47
Figure PCTCN2022104706-appb-000183
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000184
第一步
在氮气保护下将化合物47-1(2.00g,6.41mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中,加入三乙胺(6mL)、甲醇(18mL)和1,1-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(937mg,1.28mmol),反应液在一氧化碳(50Psi)氛围下80℃搅拌12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(50mL×3),无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(5：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物47-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.89-7.78(m,2H),7.17(d,J＝7.6Hz,1H),4.62(s,2H),3.91(s,3H),3.66(t,J＝5.2Hz,2H),2.88(t,J＝5.2Hz,2H),1.50(s,9H)。
第二步
将化合物47-2(1.50g,5.15mmol)溶于甲醇(10mL)中,加入氯化氢甲醇溶液(4mol/L,10mL)。反应液在25℃下搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到化合物47-3的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,D 2O)δ7.93-7.75(m,2H),7.28(d,J＝7.6Hz,1H),4.40(s,2H),3.87(s,3H),3.51(t,J＝6.4Hz,2H),3.13(t,J＝6.4Hz,2H)。
第三步
在0℃下将34-2(280mg,882μmol)溶于二氯甲烷(5mL)中，向反应液中加入4-二甲基氨基吡啶(108mg,882μmol)和氯甲酸对硝基苯酯(231mg,1.15mol)。反应液在25°下反应2小时,在0℃下加入化合物47-3的盐酸盐(202mg,1.06mol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液。反应在25°下持续反应10小时。将反应液浓缩,向其中加入水(60mL),用乙酸乙酯(90mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(90mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(中性,碳酸氢铵体系)分离得到化合物47-4。MS-ESI计算值[M+Na] +557,实测值557。
第四步
将化合物47-4(85.0mg,159μmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,向反应液中加入一水合氢氧化锂(20mg,477μmol)和水(1mL)。反应液在60℃下反应进行12小时。反应液用盐酸(1mol/L)调节pH至2,用二氯甲烷(20mL×6)萃取,合并有机相用饱和食盐水(20mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物47-5。MS-ESI计算值[M+Na] +543,实测值543。
第五步
将化合物47-5(95.0mg,135μmol)和1-1(28.0mg,135μmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,向反应液中加入三乙胺(40.9mg,404μmol)和三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,128mg,404μmol)。反应液在25℃下持续反应3小时。将反应液减压浓缩后,粗品经过薄层层析法(2：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物47-6。MS-ESI计算值[[M+Na] +733,实测值733。
第六步
将化合物47-6(60.0mg,84.4μmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物47的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.98-7.88(m,2H),7.53-7.44(m,4H),7.38-7.36(m,3H),7.21-7.17(m,2H),5.16(s,2H),4.73(s,2H),3.76-3.56(m,2H),3.13-3.07(m,2H),3.03-2.97(m,3H),2.54-2.50(m,1H),1.57-1.51(m,1H),1.42-1.37(m,1H),1.16-1.10(m,1H),0.74-0.70(m,2H),0.44-0.40(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +511,实测值511。
实施例48
Figure PCTCN2022104706-appb-000185
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000186
第一步
参照实施例47第一步得到化合物48-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.98-7.91(m,2H),7.35-7.28(m,1H),4.72-4.68(m,4H),3.92(s,3H),1.52(s,9H)。
第二步
参照实施例47第二步得到化合物48-3的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,D 2O)δ8.01-7.98(m,2H),7.49(d,J＝8.0Hz,1H),4.69-4.67(m,4H),3.89(s,3H)。
第三步
在0℃下将34-2(120mg,378μmol)溶于二氯甲烷(5mL),向其中加入二甲基氨基吡啶(46.2mg,378μmol)和氯甲酸对硝基苯酯(99.1mg,491μmol)。反应液在25℃下反应2小时,在0℃下加入化合物48-3的盐酸盐(80.4mg,453.7μmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液。反应在25℃下反应10小时。将反应液浓缩,向其中加入水(20mL),用乙酸乙酯(90mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(90mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,剩余物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体体系)得到化合物48-4。MS-ESI计算值[M+Na] +543,实测值543。
第四步
将化合物48-4(80.0mg,154μmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,加入一水合氢氧化锂(6.45mg,154μmol)和水(1mL)。反应液在60℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L)调节pH至2,用二氯甲烷(20mL×6)萃取,合并有机相用饱和食盐水(20mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物48-5。MS-ESI计算值[M+Na] +529,实测值529。
第五步
将化合物48-5(80.0mg,158μmol)和1-1(49.3mg,237μmol)溶于无水二氯甲烷(3mL)中,向溶液中加入三乙胺(95.9mg,474μmol)和三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,100mg,316μmol)。反应液在25℃下反应3小时。将反应液减压浓缩后,粗品经过硅胶柱层析法(2：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物48-6。 MS-ESI计算值[M-Boc+H] +597实测值597。
第六步
将化合物48-6(230mg,0.433mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物48的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝8.0Hz,2H),7.45-7.55(m,5H),7.42(d,J＝8.4Hz,2H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),5.22(s,2H),4.86(s,2H),4.82(s,2H),3.13-3.02(m,3H),2.55-2.50(m,1H),1.58-1.53(m,1H),1.45-1.40(m,1H),1.18-1.12(m,1H),0.76-0.72(m,2H),0.46-0.44(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +497,实测值497。
实施例49
Figure PCTCN2022104706-appb-000187
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000188
第一步
在0℃下将36-8(300mg,982μmol)溶于无水二氯甲烷(5mL),向其中加入二甲基氨基吡啶(120mg,982μmol)和氯甲酸对硝基苯酯(257mg,1.28mmol)。反应液在25℃下反应2小时,在0℃下加入化合物47-3的盐酸盐(188mg,982μmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)的溶液。在25℃下反应10小时。将反应液浓缩,向其中加入水(60mL),用乙酸乙酯(90mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(90mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤。产物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系)得到化合物49-1。MS-ESI计算值[M+Na] +545,实测值545。
第二步
将化合物49-1(140mg,268μmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,向反应液中加入一水合氢氧化锂(11.2mg,268μmol)和水(1mL)。反应液在60℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L)调节pH至2,用二氯甲烷(20mL×6)萃取,合并有机相用饱和食盐水(20mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤。减压浓缩得到化合物49-2。MS-ESI计算值[M+Na] +531,实测值531。
第三步
将化合物49-2(130mg,263μmol)和1-1(72.7mg,349μmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,向溶液中加入三乙胺(70.6mg,698μmol)和三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,296mg,465μmol)。反应液在25℃下反应3小时。反应液减压浓缩,粗品经过硅胶柱层析法分离得到化合物49-3。MS-ESI计算值[[M+Na] +721实测值721。
第四步
将化合物49-3(110mg,157μmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL)反应液在25℃下搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物49的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.90(d,J＝6.8Hz,2H),7.52-7.46(m,4H),7.38-7.32(m,3H),7.21(d,J＝8.4Hz,2H),5.17(s,2H),4.71-4.73(m,2H),3.76-3.75(m,2H),3.55-3.58(m,1H),2.93-2.98(m,3H),2.48-2.52(m,1H),1.51-1.55(m,1H),1.42-1.44(m,1H),1.39(d,J＝6.8Hz,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +499,实测值499。
实施例50
Figure PCTCN2022104706-appb-000189
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000190
第一步
在0℃下将36-8(300mg,982μmol)溶于无水二氯甲烷,向其中加入二甲基氨基吡啶(120mg,982μmol)和氯甲酸对硝基苯酯(257mg,1.28mmol)。反应液在25℃下搅拌2小时,在0℃下加入化合物48-3的盐酸(209mg,1.18mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(2mL)溶液。反应在25℃下持续反应10小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(60mL),用乙酸乙酯(90mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(90mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。剩余物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系)得到化合物50-1。MS-ESI计算值[M+Na] +531,实测值531。
第二步
将化合物50-1(140mg,257μmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,加入一水合氢氧化锂(11.6mg,275μmol)和水(1mL)。反应液在60℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L)调节pH至2,用二氯甲烷(20mL×6)萃取,合并有机相用饱和食盐水(20mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物50-2。MS-ESI计算值[M+Na] +517,实测值517。
第三步
将化合物50-2(130mg,263μmol)和1-1(82.1mg,394μmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,向溶液中加入三乙胺(79.8mg,788μmol)和三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,334mg,526μmol)。反应液在25℃下持续反应3小时。将反应液减压浓缩后,粗品经过薄层层析法(2：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物50-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +585,实测值585。
第四步
将化合物50-3(185mg,148μmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物50的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.02(d,J＝8.4Hz,2H),7.55-7.49(m,4H),7.48-7.40(m,3H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.20(s,2H),4.83(s,2H),4.80(s,2H),3.54-3.50(m,1H),2.96-2.93(m,1H),2.52-2.47(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.47-1.43(m,1H),1.40(d,J＝6.4Hz,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +485,实测值485。
实施例51
Figure PCTCN2022104706-appb-000191
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000192
第一步
在0℃下将化合物51-1(782mg,5.28mmol),N,N-二异丙基乙胺(1.86g,14.4mmol)和化合物1-1(1.00g,4.80mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,向反应液中加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,3.06g,9.60mmol),反应液在60℃条件下搅拌12小时,反应液用水(10mL)稀释,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,有机相用饱和氯化钠水溶液(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物51-2。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.26(d,J＝1.6Hz,1H),8.54-8.51(m,1H),8.06(d,J＝3.6Hz,1H),7.62-7.53(m,2H),7.32-7.21(m,2H),1.51(s,9H)。MS-ESI计算值[M+Na] +361,实测值361。
第二步
将化合物51-2(50.0mg,0.148mmol)溶解在甲醇(20mL)中,反应液冷却至0℃,氮气保护下向反应液中加入盐酸溶液(12mol/L,12.3μL)和Pd/C(10％,40mg,0.188mmol),反应用氢气置换3次,反应液在0℃氢气(50psi)下搅拌2小时,反应液过滤,滤液减压浓缩得到化合物51-3的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)9.21(m,1H),8.42-8.40(m,1H),7.64-7.62(m,1H),7.54-7.47(m,2H),7.31-7.25(m,2H),4.42(s,2H),1.51(s,9H)。
第三步
将化合物35-1(72.0mg,0.157mmol)溶解在乙腈(5mL)中,继续向反应液中加入三乙胺(31.8mg,0.314mmol)和化合物51-3的盐酸盐(43.0mg,0.126mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(20：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物51-4。MS-ESI计算值[M+H] +686,实测值686。
第四步
将化合物51-4(39.0mg,56.9μmol)溶解到乙酸乙酯(5mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,3mL),反应液在25℃下搅拌1小时,反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物51的盐酸盐。1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.17(s,1H),8.52-8.49(m,1H),7.65-7.61(m,1H),7.58-7.49(m,4H),7.39-7.37(m,2H),7.22-7.20(m,2H),5.13(s,2H),4.56(s,2H),3.15-3.02(m,4H), 2.53-2.49(m,1H),1.55-1.52(m,1H),1.17-1.10(m,1H),0.78-0.70(m,2H),0.44-0.43(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +486,实测值486。
实施例52
Figure PCTCN2022104706-appb-000193
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000194
第一步
将化合物36-9(156mg,0.349mmol)溶解在乙腈(5mL)中,继续向反应液中加入三乙胺(70.7mg,0.699mmol)和化合物51-3的盐酸盐(102mg,0.245mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,反应液减压浓缩,粗品经过薄层层析法(20：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物52-1。MS-ESI计算值[M+H] +674,实测值674。
第二步
将化合物52-1(65.0mg,96.5μmol)溶解到乙酸乙酯(3mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,3mL),反应液在25℃下搅拌1小时,反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物52的盐酸盐。1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.37(m,1H),9.06-9.05(m,1H),8.11-8.09(d,J＝8.0Hz,1H),7.61-7.52(m,4H),7.40-7.37(m,2H),7.24-7.22(m,2H),5.14(s,2H),4.76(s,2H),3.62-3.54(m,1H),2.98-2.95(m,1H),2.54-2.48(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.48-1.45(m,1H),1.42(d,J＝6.8Hz,6H)。MS-ESI计算值[M+H] +474,实测值474。
实施例53
Figure PCTCN2022104706-appb-000195
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000196
第一步
将化合物35-1(456mg,0.995mmol)和化合物41-3的盐酸盐(171mg,0.796mmol)溶解在二氯甲烷(10mL)中,向反应液中加入三乙胺(302mg,2.98mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,反应液用二氯甲烷(10mL)稀释,用盐酸溶液(1mol/L,20mL×1)和饱和氯化钠水溶液(20mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物53-1。H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.00-7.99(m,2H),7.33-7.29(m,2H),7.24-7.20(m,2H),7.14-7.08(m,2H),5.15(s,2H),4.55(s,2H),3.92(s,3H),3.28-3.23(m,1H),3.09-3.02(m,1H),2.87-2.84(m,3H),2.11-2.10(m,1H),1.44(s,9H),1.30-1.25(m,2H),1.06-0.98(m,1H),0.90-0.86(m,1H),0.51-0.41(m,2H),0.28-0.22(m,1H),0.19-0.13(m,1H)。MS-ESI计算值[M+Na] +545,实测值545。
第二步
将化合53-1(336mg,0.623mmol)溶解在水(3mL),四氢呋喃(3mL)和乙醇(3mL)的混合溶剂中,向反应液中加入氢氧化钠(51.4mg,1.29mmol),反应液50℃下搅拌1小时,反应液用盐酸(1mol/L)调节PH至4,反应液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,得到化合物53-2。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +409,实测值409。
第三步
将N,N-二异丙基乙胺(186mg,1.44mmol),O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(365mg,0.960mmol)和化合物53-2(244mg,0.480mmol)溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中,反应液在25℃下搅1小时,向反应液中加入化合物1-1(120mg,0.576mmol),反应液在25℃下搅12小时,反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物53-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +599,实测值599。
第四步
将化合物53-3(216mg,309μmol)溶解到乙酸乙酯(5mL)中,向反应液中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在25℃下搅拌1小时,反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物53的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.07-8.05(m,2H),7.56-7.45(m,5H),7.40-7.38(m,2H),7.34-7.30(m,1H),7.24-7.18(m,2H),5.18(s,2H),4.63(s,2H),3.12-3.09(m,2H),3.03-3.00(m,1H),2.96(s,3H),2.52-2.47(m,1H),1.56-1.52(m,1H),1.46-1.40(m,1H),1.16-1.09(m,1H),0.75-0.73(m,2H),0.432(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +499,实测值499。
实施例54
Figure PCTCN2022104706-appb-000197
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000198
第一步
将化合物54-1(500mg,3.03mmol)和化合物1-1(631mg,3.03mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中,向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(1.17g,9.08mmol),反应液冷至0℃,加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,3.85g,6.06mmol),反应液在50℃条件下搅拌10小时。将反应液冷至室温,用乙酸乙酯(50mL)稀释,分别用水(50mL×3)和饱和食盐水(50mL×1)洗涤,有机相用无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(10:1～5:1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物54-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.88(br s,1H),7.95(d,J＝8.0Hz,1H),7.90-7.86(m,2H),7.78-7.74(m,1H),7.34-7.30(m,1H),7.24-7.20(m,1H),7.13-7.11(m,1H),6.68(br s,1H),1.56(s,9H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +256,实测值256。
第二步
将化合物54-2(320mg,0.900mmol)溶于无水甲醇(8mL)中,冷至0℃,加入氯化钴(234mg,1.80mmol),反应液在0℃下搅拌5分钟,向其中加入硼氢化钠(341mg,9.00mmol),反应液在28℃下搅拌12小时。反应 液用盐酸(1mol/L,20mL)淬灭并在室温下搅拌10分钟,用氨水(20mL)中和,用乙酸乙酯(20mL×2)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物54-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +260,实测值260。
第三步
将化合物35-1(290mg,0.632mmol)溶于二氯甲烷(8mL)中,冷至0℃,向其中加入N,N-二异丙基乙胺(245mg,1.90mmol)和化合物54-3(340mg,0.946mmol)。反应液在28℃下搅拌12小时。反应液用水(20mL)淬灭,用二氯甲烷(20mL×2)萃取,合并有机相,用饱和氯化钠水溶液(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物54-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +603,实测值603。
第四步
将化合物54-4(340mg,0.484mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,剩余物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物54的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.89-7.87(m,1H),7.82-7.79(m,1H),7.55-7.53(m,1H),7.51-7.48(m,4H),7.37-7.35(m,2H),7.22-7.20(m,2H),5.11(s,2H),4.45(s,2H),3.12-3.08(m,2H),3.04-3.01(m,1H),2.55-2.50(m,1H),1.57-1.52(m,1H),1.44-1.39(m,1H),1.16-1.12(m,1H),0.74-0.72(m,2H),0.44-0.43(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +503,实测值503。
实施例55
Figure PCTCN2022104706-appb-000199
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000200
第一步
0℃下将N,N-二异丙基乙胺(237mg,1.83mmol)加至化合物55-1(180mg,1.01mmol)和化合物35-1(420mg,0.916mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中,反应液在25℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(80mL),用二氯甲烷(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(80mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物55-2。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +423,实测值423。
第二步
将化合物55-2(450mg,0.861mmol)溶于四氢呋喃(2mL),乙醇(1mL)和水(2mL),向反应液中加入一水合氢氧化锂(72.3mg,1.72mmol),反应液在50℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(10mL),用乙酸乙酯(20mL×1)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物55-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +409,实测值409。
第三步
将化合物55-3(300mg,0.590mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(269mg,0.708mmol)和N,N-二异丙基乙胺(114mg,0.885mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,向反应液中加入化合物1-1(135mg,0.649mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物55-4。MS-ESI计算值[M+H] +699,实测值699。
第四步
将化合物55-4(380mg,0.544mmol)溶于乙酸乙酯(2mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,1.36mL),反应液在25℃下搅拌0.5小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物55的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06-8.04(m,2H),7.54-7.47(m,6H),7.35-7.33(m,2H),7.20-7.18(m,2H),5.11-5.00(m,3H),3.11-3.00(m,3H),2.53-2.52(m,1H),1.56-1.54(m,1H),1.49-1.47(m,3H),1.41-1.39(m,1H),1.14-1.13(m,1H),0.75-0.70(m,2H),0.44-0.43(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +499,实测值499。
实施例56
Figure PCTCN2022104706-appb-000201
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000202
第一步
向化合物56-1(500mg,2.91mmol)和化合物56-2(584mg,2.91mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中加入三乙胺(590mg,5.83mmol)。反应液在80℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(80mL),用乙酸乙酯(80mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物56-3。MS-ESI计算值[M+H] +336,实测值336。
第二步
将化合物56-3(600mg,1.79mmol)溶于乙酸乙酯(8mL),向反应液中加入盐酸乙酸乙酯(4mol/L,4.47mL),反应液在25℃下搅拌1小时。将反应液减压浓缩得到化合物56-4的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H] +236,实测值236。
第三步
将化合物35-1(140mg,0.305mmol)和化合物56-4的盐酸盐(105mg,0.305mmol)溶于二氯甲烷(3mL),加入N,N-二异丙基乙胺(78.9mg,0.611mmol),反应液在25℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物56-5。MS-ESI计算值[M+H] +579,实测值579。
第四步
将化合物56-5(100mg,0.173mmol)溶于四氢呋喃(2mL),乙醇(0.5mL)和水(2mL),加入氢氧化钠(13.8mg,0.346mmol),反应液在50℃下搅拌3小时。将反应液浓缩,向其中加入水(10mL),水相用盐酸(1mo/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物56-7。MS-ESI计算值[M+H] +565,实测值565。
第五步
将化合物56-7(90mg,0.159mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(90.9mg,0.239mmol)和N,N-二异丙基乙胺(51.5mg,0.398mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(39.8mg,0.191mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物56-8。MS-ESI计算值[M+H] +755,实测值755。
第六步
将化合物56-8(100mg,0.132mmol)溶于乙酸乙酯(1mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.331mL),反应液在25℃搅拌0.5小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系),分离结束后加一滴盐酸(12mol/L)得到化合物56的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.77(d,J＝2.0,1H),8.16-8.13(m,1H),7.36(d,J＝8.4,2H),7.22(d,J＝8.0,3H),7.14-7.12(m,1H),6.97-6.96(m,1H),6.88(d,J＝8.4,1H),6.90-6.87(m,1H),5.16(s,2H),4.41-4.40(m,1H),4.29-4.27(m,2H),4.03-3.99(m,1H),3.42-3.37(m,2H),3.11-3.01(m,4H),2.58-2.57(m,1H),1.60-1.59(m,1H),1.41-1.39(m,1H),1.21(s,3H),1.20-1.19(m,1H),0.73-0.71(m,2H),0.46-0.44(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +555,实测值555。
实施例57
Figure PCTCN2022104706-appb-000203
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000204
第一步
将化合物57-1(500mg,2.33mmol)和化合物56-2(466mg,2.33mmol)溶于甲苯(10mL),向反应液中加入三(二亚苄基丙酮)二钯(213mg,0.233mmol),4,5-双(二苯基磷)-9,9-二甲基氧杂蒽(135mg,0.233mmol),碳酸铯(2.27g,6.98mmol),反应液在95℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(80mL),用乙酸乙酯(80mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(80mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物57-2。MS-ESI计算值[M+H] +335,实测值335。
第二步
将化合物57-2(500mg,1.50mmol)溶于乙酸乙酯(10mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,3.74mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩得到化合物57-3的盐酸盐。MS-ESI计算值[M+H] +235,实测值235。
第三步
将化合物35-1(216mg,0.471mmol)和化合物57-3的盐酸盐(145mg,0.471mmol)溶于二氯甲烷(8mL),加入N,N-二异丙基乙胺(122mg,0.942mmol),反应液在25℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物57-4。MS-ESI计算值[M+H] +578,实测值578。
第四步
将化合物57-4(230mg,0.398mmol)溶于四氢呋喃(2mL),乙醇(0.5mL)和水(2mL),加入氢氧化钠(31.9mg,0.796mmol),反应液在50℃下搅拌3小时。将反应液浓缩,加入水(10mL),用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物57-5。MS-ESI计算值[M+H] +564,实测值564。
第五步
将化合物57-5(180mg,0.319mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(182mg,0.479mmol)和N,N-二异丙基乙胺(103mg,0.798mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(79.8mg,0.383mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物57-6。MS-ESI计算值[M+H] +754,实测值754。
第六步
将化合物57-6(200mg,0.265mmol)溶于乙酸乙酯(1mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.663mL),反应液在25℃搅拌0.5小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系),分离结束后加一滴盐酸(12mol/L)得到化合物57的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.01(d,J＝8.8,1H),7.43-7.24(m,7H),7.22(d,J＝8.4,2H),7.03(d,J＝8.4,2H),5.16(s,2H),4.42-4.41(m,1H),4.03-4.00(m,1H),3.85-3.74(m,2H),3.37-3.36(m,1H),3.19-3.00(m,5H),2.61-2.60(m,1H),1.63-1.60(m,1H),1.41-1.39(m,1H),1.30-1.28(m,3H),1.18-1.17(m,1H),0.73-0.70(m,2H),0.47-0.44(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +554,实测值554。
实施例58
Figure PCTCN2022104706-appb-000205
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000206
第一步
向化合物A-8(700mg,2.66mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入三乙胺(403mg,3.99mmol)和化合物34-3(518mg,2.92mmol)。反应液在25℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(30mL),用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过柱层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物58-1。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.01(d,J＝8.4,2H),7.47(d,J＝8.4,2H),7.33(d,J＝8.0,2H),7.17(d,J＝8.0,2H),6.85-6.84(m,1H),5.19(s,2H),4.85-4.84(m,1H),3.92(s,3H),2.75-2.74(m,1H),2.09-2.05(m,1H),1.47(s,9H),1.20-1.17(m,2H)。
第二步
将化合物58-1(800mg,1.82mmol)溶于四氢呋喃(8mL)和水(8mL),向反应液中加入氢氧化钠(145mg,3.63mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(150mL),水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(80mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物58-2。MS-ESI计算值[M+2Na] +472,实测值472。
第三步
将化合物58-2(700mg,1.64mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(935mg,2.46mmol)和N,N-二异丙基乙胺(424mg,3.28mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(376mg,1.80mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(60mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物58-3。MS-ESI计算值[M-Boc-56+H] +461,实测值461。
第四步
将化合物58-3(400mg,0.649mmol)溶于乙酸乙酯(4mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,1.62mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体 系)得到化合物58的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.04(d,J＝8.8,2H),7.66(d,J＝8.8,2H),7.53-7.49(m,4H),7.42(d,J＝8.0,2H),7.22(d,J＝8.0,2H),5.21(s,2H),2.89-2.86(m,1H),2.42-2.39(m,1H),1.46-1.39(m,1H),1.38-1.36(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +417,实测值417。
实施例59
Figure PCTCN2022104706-appb-000207
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000208
第一步
0℃下向化合物A-8(200mg,0.760mmol)和化合物7-8(292mg,1.14mmol)的二氯甲烷(3mL)和乙腈(3mL)溶液中加入4-二甲氨基吡啶(46.4mg,0.380mmol).反应液在25℃下搅拌反应1小时。向反应液减压浓缩得到化合物59-1。
第二步
向化合物59-1(300mg,0.742mmol)和化合物57-3的盐酸盐(228mg,0.742mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入N,N-二异丙基乙胺(192mg,1.48mmol)。反应液在25℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物59-2。MS-ESI计算值[M+H] +524,实测值524。
第三步
将化合物59-2(290mg,0.554mmol)溶于四氢呋喃(3mL),水(3mL)和乙醇(0.5mL),向反应液中加入氢氧化钠(44.3mg,1.11mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(10mL),水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物59-3。MS-ESI计算值[M+H] +510,实测值510。
第四步
将化合物59-3(160mg,0.314mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),0℃加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(179mg,0.471mmol)和N,N-二异丙基乙胺(81.2mg,0.628mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(71.9mg,0.345mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物59-4。MS-ESI计算值[M+H] +700,实测值700。
第五步
将化合物59-4(80mg,0.114mmol)溶于乙酸乙酯(2mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.286mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物59的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.01(d,J＝8.8,2H),7.55-7.49(m,4H),7.37(d,J＝8.4,2H),7.21(d,J＝8.4,2H),7.05(d,J＝8.8,2H),5.19-5.12(m,2H),4.43-4.41(m,1H),4.04-4.01(m,1H),3.79-3.78(m,1H),3.76-3.75(m,1H),3.48-3.47(m,1H),3.23-3.18(m,1H),3.01-3.00(m,1H),2.89-2.87(m,1H),2.42-2.41(m,1H),1.46-1.43(m,1H),1.39-1.35(m,1H),1.31-1.29(m,3H)。MS-ESI计算值[M+H] +500,实测值500。
实施例60
Figure PCTCN2022104706-appb-000209
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000210
第一步
向化合物60-1(300mg,1.37mmol)的二氧六环(10mL)溶液中加入三光气(609mg,2.05mmol)和三乙胺(277mg,2.74mmol)。反应液在90℃下搅拌反应2小时。将反应液过滤,滤液浓缩得到化合物60-2。
第二步
向化合物60-2(330mg,1.35mmol)和化合物A-8(197mg,0.748mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入三乙胺(151mg,1.50mmol)。反应液在25℃下搅拌反应2小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物60-3。MS-ESI计算值[M+2Na] +554,实测值554。
第三步
将化合物60-3(340mg,0.669mmol)溶于四氢呋喃(3mL)和水(3mL),向反应液中加入一水合氢氧化锂(42.1mg,1.00mmol),反应液在50℃下搅拌3小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(10mL),水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物60-4。MS-ESI计算值[M+2Na] +540,实测值540。
第四步
将化合物60-4(300mg,0.607mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(346mg,0.910mmol)和N,N-二异丙基乙胺(196mg,1.52mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(139mg,0.667mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物60-5。MS-ESI计算值[M+H] +685,实测值685。
第五步
将化合物60-5(160mg,0.234mmol)溶于乙酸乙酯(2mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.58mL),反应液在20℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物60的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.42-8.41(m,1H),8.34-8.32(m,1H),8.06(d,J＝8.4,1H),7.52-7.48(m,4H),7.42(d,J＝8.0,2H),7.23(d,J＝8.0,2H),5.24(s,2H),2.90-2.87(m,1H),2.42-2.39(m,1H),1.46-1.42(m,1H),1.40-1.36(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +485,实测值485。
实施例61
Figure PCTCN2022104706-appb-000211
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000212
第一步
向化合物61-1(300mg,1.97mmol)的二氧六环(8mL)溶液中加入三光气(878mg,2.96mmol)和三乙胺(399mg,3.94mmol)。反应液在90℃下搅拌反应3小时。将反应液冷却至室温后过滤,滤液浓缩得到化合物61-2。
第二步
向化合物61-2(300mg,1.68mmol)和化合物A-8(202mg,0.765mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入三乙胺(155mg,1.53mmol)。反应液在25℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物61-3。MS-ESI计算值[M+Na] +464,实测 值464。
第三步
将化合物61-3(250mg,0.669mmol)溶于四氢呋喃(3mL)和水(3mL),向反应液中加入一水合氢氧化锂(47.5mg,1.13mmol),反应液在40℃下搅拌2小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(10mL),水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物61-4。MS-ESI计算值[M+Na] +450,实测值450。
第四步
将化合物61-4(100mg,0.234mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(2mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(133mg,0.351mmol)和N,N-二异丙基乙胺(60.5mg,0.468mmol),反应液在20℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(48.7mg,0.234mmol),反应液在20℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物61-5。MS-ESI计算值[M+H] +618,实测值618。
第五步
将化合物61-5(40mg,64.8umol)溶于乙酸乙酯(1mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.162mL),反应液在20℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物61的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ9.02-9.01(m,1H),8.74-8.71(m,1H),7.83(d,J＝8.8,1H),7.57-7.54(m,4H),7.46(d,J＝8.4,2H),7.24(d,J＝8.4,2H),5.33(s,2H),2.90-2.88(m,1H),2.44-2.41(m,1H),1.48-1.45(m,1H),1.39-1.36(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +418,实测值418。
实施例62
Figure PCTCN2022104706-appb-000213
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000214
第一步
向化合物62-1(300mg,1.77mmol)的二氧六环(8mL)溶液中加入三光气(789mg,2.66mmol)和三乙胺(359mg,3.55mmol)。反应液在90℃下搅拌反应1小时。将反应液冷却至室温后过滤,滤液浓缩得到化合物62-2。
第二步
向化合物62-2(340mg,1.74mmol)和化合物A-8(229mg,0.871mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中加入三乙胺(176mg,1.74mmol)。反应液在25℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物62-3。MS-ESI计算值[M+Na] +481,实测值481。
第三步
将化合物62-3(300mg,0.654mmol)溶于四氢呋喃(3mL)和水(3mL),向反应液中加入氢氧化钠(52.3mg,1.31mmol),反应液在55℃下搅拌2小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(10mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物62-4。MS-ESI计算值[M+Na] +467,实测值467。
第四步
将化合物62-4(160mg,0.360mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(205mg,0.540mmol)和N,N-二异丙基乙胺(93.1mg,0.720mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(82.5mg,0.396mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤, 无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物62-5。MS-ESI计算值[M+H] +635,实测值635。
第五步
将化合物62-5(180mg,0.284mmol)溶于乙酸乙酯(2mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.71mL),反应液在20℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物62的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.22-8.21(m,1H),7.91-7.86(m,2H),7.52-7.44(m,4H),7.43(d,J＝8.8,2H),7.22(d,J＝8.8,2H),5.24(s,2H),2.89-2.86(m,1H),2.43-2.39(m,1H),1.46-1.42(m,1H),1.38-1.36(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +435,实测值435。
实施例63
Figure PCTCN2022104706-appb-000215
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000216
第一步
0度下向化合物63-1(150mg,0.784mmol)和三乙胺(198mg,1.96mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液中加入三光气(349mg,1.18mmol)。反应液在25℃下搅拌反应1小时。将反应液浓缩。将残渣溶于四氢呋喃(3mL),在0度下将化合物A-8(207mg,0.784mmol)和钠氢(157mg,3.92mmol)反应液在80℃下搅拌反应24小时。将反应液用饱和氯化铵(50mL)淬灭过滤,用乙酸乙酯(80mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物63-2。MS-ESI计算值[M+Na] +503,实测值503。
第二步
向化合物63-2(240mg,0.499mmol)的四氢呋喃(2mL)和水(2mL)溶液中加入一水合氢氧化锂(41.9mg,0.999mmol)。反应液在50℃下搅拌反应3小时。将反应液浓缩,向其中加入水(150mL),用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸 钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物63-3。MS-ESI计算值[M+Na] +489,实测值489。
第三步
将化合物63-3(180mg,0.386mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(220mg,0.579mmol)和N,N-二异丙基乙胺(99.7mg,0.772mmol),反应液在20℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(88.4mg,0.424mmol),反应液在20℃搅拌12小时。向反应液中加入水(50mL),用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(60mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物63-4。MS-ESI计算值[M+H] +657,实测值657。
第四步
将化合物63-4(170mg,0.259mmol)溶于乙酸乙酯(2mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.647mL),反应液在20℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物63的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.93-7.88(m,3H),7.57-7.49(m,4H),7.41(d,J＝8.0,2H),7.23(d,J＝8.0,2H),5.26(s,2H),3.88-3.85(m,2H),2.92-2.89(m,3H),2.41-2.40(m,1H),2.01-1.98(m,2H),1.46-1.34(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +457,实测值457。
实施例64
Figure PCTCN2022104706-appb-000217
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000218
第一步
向化合物59-1(2.30g,5.69mmol)和化合物55-1(1.12g,6.26mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入N,N- 二异丙基乙胺(1.47g,11.4mmol)。反应液在25℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(80mL),用二氯甲烷(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(80mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过柱层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物64-1。MS-ESI计算值[M+2Na] +514,实测值514。
第二步
将化合物64-1(750mg,1.60mmol)溶于四氢呋喃(2mL)乙醇(1mL)和水(2mL),向反应液中加入一水合氢氧化锂(134mg,3.20mmol),反应液在55℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(10mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(50mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物64-2。MS-ESI计算值[M+2Na] +500,实测值500。
第三步
将化合物64-2(700mg,1.54mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(10mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(703mg,1.85mmol)和N,N-二异丙基乙胺(398mg,3.08mmol),反应液在30℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(321mg,1.54mmol),反应液在25℃搅拌2小时。向反应液中加入水(80mL),用乙酸乙酯(80mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物64-3。MS-ESI计算值[M+H] +645,实测值645。
第四步
将化合物64-3(900mg,1.40mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,3.49mL),反应液在10℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物64的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.06(d,J＝8.0,2H),7.55-7.48(m,6H),7.32-7.31(m,2H),7.19-7.18(m,2H),5.03(s,2H),4.80-4.82(m,1H),2.88-2.85(m,1H),2.40-2.39(m,1H),1.49-1.42(m,4H),1.37-1.34(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +445,实测值445。
实施例65
Figure PCTCN2022104706-appb-000219
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000220
第一步
0℃下向化合物65-1(8.74g,90.0mmol)的二氯甲烷(200mL)加入戴斯-马丁氧化剂(38.2g,90.0mmol),反应液在15℃下搅拌12小时。加入饱和硫代亚硫酸钠(200mL)和饱和碳酸氢钠(200mL)进行淬灭,用二氯甲烷(150mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(150mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过柱层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物65-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ9.38(s,1H),1.81-1.77(m,4H)。
第二步
向化合物65-3(2.54g,12.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(5.92g,15.6mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.64g,35.9mmol),反应液在30℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物1-1(2g,12.0mmol),反应液在30℃搅拌11小时。缓慢将反应液加入水(200mL)中,20℃下搅拌0.5小时,过滤,滤饼用水(30mL×3)洗涤,收集滤饼,真空干燥得到化合物65-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +258,实测值258。
第三步
氮气保护下向化合物65-4(2g,5.60mmol)的甲醇(20mL)和乙酸乙酯(20mL)溶液中加入湿钯碳(0.2g,10％纯度)。氢气置换三次。反应液在20℃下15个大气压的氢气下搅拌反应3小时。将反应液过滤,用乙酸乙酯(20mL×3)洗涤,滤液减压浓缩,粗产物经过柱层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物65-5。MS-ESI计算值[M+H] +328,实测值328。
第四步
向化合物65-2(90mg,0.946mmol)和化合物36-5(237mg,1.04mmol)的二氯甲烷(5mL)中加入冰醋酸(170mg,2.84mmol),反应液在15℃下搅拌12小时。再向反应液中加入醋酸硼氢化钠(501mg,2.37mmol),反应液在15℃下搅拌2小时。加饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)进行淬灭,,用二氯甲烷(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物65-6。MS-ESI计算值[M+H] +271,实测值271。
第五步
将化合物65-6(250mg,0.925mmol)溶于二氯甲烷(3mL),向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(239mg,1.85mmol)和二碳酸二叔丁酯(202mg,0.925mmol),反应液在30℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,向其中加入水(80mL),用乙酸乙酯(80mL×2)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过柱层析法(3：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物65-7。MS-ESI计算值[M+2Na] +416,实测值416。
第六步
在0℃下向化合物65-7(120mg,0.324mmol)的四氢呋喃(1mL),加入硼氢化锂(14.1mg,0.648mmol),反应液在15℃下搅拌1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)进行淬灭,用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(80mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物65-8。MS-ESI计算值[M+Na] +365,实测值365。
第七步
将化合物65-8(110mg,0.321mmol)溶于二氯甲烷(1mL),0℃下加入N,N-二甲氨基吡啶(39.2mg,0.321mmol)和氯甲酸对硝基苯酯(77.7mg,0.385mmol),反应液在35℃下搅拌2小时,再向反应液中加入化合物65-5(110mg,0.337mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液,反应液在35℃搅拌10小时。向反应液中加入二氯甲烷(20mL)稀释,依次用氢氧化钠(1mol/L,10mL×2),盐酸(1mol/L,10mL×2)和饱和食盐水(20mL×2)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物65-9。MS-ESI计算值[M+H] +696,实测值696。
第八步
将化合物65-9(40mg,57.5umol)溶于乙酸乙酯(1mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.14mL),反应液在15℃搅拌0.5小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(酸性,盐酸体系)得到化合物65的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝8.8,2H),7.65(d,J＝8.8,2H),7.46-7.42(m,6H),7.25(d,J＝8.4,2H),5.22(s,2H),3.46-3.45(m,2H),3.13-3.09(m,1H),2.62-2.59(m,1H),1.63-1.52(m,1H),1.50-1.48(m,3H),1.33-1.31(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +496,实测值496。
实施例66
Figure PCTCN2022104706-appb-000221
合成路线:
Figure PCTCN2022104706-appb-000222
第一步
将化合物58-2(390mg,0.914mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL),加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(522mg,1.37mmol)和N,N-二异丙基乙胺(355mg,2.74mmol)。反应液在28℃下搅拌0.5小时,向反应液中加入化合物26-2(228mg,1.01mmol),反应液在28℃下搅拌10小时。将反应液加至水(30mL)中,用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,合并有机相后依次用水(50mL×3)和饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1,石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物66-1。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +535,实测值535。
第二步
将化合物66-1(418mg,0.658mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相A:体积分数为0.05％的盐酸水溶液；流动相B:乙腈；B％：15％-35％,7.5分钟)分离得到化合物66的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02(d,J＝8.8Hz,2H),7.65(d,J＝8.8Hz,2H),7.43-7.41(m,3H),7.23-7.15(m,4H),5.21(s,2H),2.90-2.86(m,1H),2.42-2.37(m,1H),1.47-1.41(m,1H),1.39-1.34(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +435,实测值435。
实施例67
Figure PCTCN2022104706-appb-000223
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000224
第一步
将化合物67-1(300mg,1.77mmol)和三乙胺(359mg,3.55mmol)溶于无水二氧六环(6mL),加入三光气(789mg,2.66mmol),反应液在氮气保护下于90℃下搅拌12小时,反应液过滤,滤液减压浓缩得到化合物67-2。MS-ESI计算值[M+MeOH+H] +228,实测值228。
第二步
将化合物A-8(300mg,1.14mmol)溶于无水二氯甲烷(10mL),向其中加化合物67-2(350mg,1.79mmol)和三乙胺(364mg,3.59mmol),反应液在27℃下搅拌16小时。反应液用水(30mL)淬灭后用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(2：1,石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物67-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.81-7.77(m,1H),7.38-7.34(m,1H),7.21(s,1H),7.05-7.03(m,3H),7.00-6.98(m,1H),5.08(s,2H),3.83(s,3H),2.64(br s,1H),1.99-1.94(m,1H),1.38(s,9H),1.10-1.06(m,2H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +359,实测值359。
第三步
将化合物67-3(410mg,0.894mmol)溶于四氢呋喃(2mL),乙醇(2mL)和水(2mL)中,加入氢氧化钠(108mg,2.70mmol),反应液在50℃下搅拌2小时。反应液减压浓缩并加水(30mL)稀释,水相用盐酸(1mol/L)调节pH值至3～4,用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物67-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +345,实测值345。
第四步
将化合物67-4(380mg,0.855mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(8mL),加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(488mg,1.28mmol)和N,N-二异丙基乙胺(331mg,2.56mmol),反应液在25℃下搅拌0.5小时,加入化合物1-1(178mg,0.855mmol),反应液在25℃下搅拌10小时。将反应液加至 水(30mL)中,用乙酸乙酯(30mL×2)萃取,合并有机相后依次用水(50mL×3)和饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1,石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物67-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +535,实测值535。
第五步
将化合物67-5(310mg,0.488mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5.00mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩后经过制备高效液相色谱法(3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相A:体积分数为0.05％的盐酸水溶液；流动相B:乙腈；B％：12％-32％,6.5分钟)分离得到化合物67的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.92-7.88(m,1H),7.67-7.62(m,1H),7.57-7.46(m,4H),7.42-7.40(m,2H),7.33-7.30(m,1H),7.23-7.21(m,2H),5.21(s,2H),2.90-2.86(m,1H),2.44-2.39(m,1H),1.48-1.43(m,1H),1.39-1.34(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +435,实测值435。
实施例68
Figure PCTCN2022104706-appb-000225
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000226
第一步
将化合物35-1(850mg,1.85mmol)溶于二氯甲烷(10mL)中,冷至0℃,加入N,N-二异丙基乙胺(742mg,5.74mmol)和化合物68-1(465mg,2.19mmol)。反应液在20℃下搅拌12小时。反应液加水(20mL)稀释,用二氯甲烷(20mL×2)萃取,合并有机相,用饱和氯化钠水溶液(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(3：1,石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物68-2。MS-ESI计算值[M+Na] +577和579,实测值577和579。
第二步
将化合物68-2(570mg,1.03mmol),醋酸钾(302mg,3.08mmol)和1,1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(150mg,0.205mmol)溶于甲醇(6mL)和N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中,在氮气保护下加入三苯基膦(26.9mg,0.103mmol),反应液在一氧化碳(50psi)氛围下于80℃搅拌48小时。反应液过滤,滤液用水(50mL)稀释,乙酸乙酯(50mL×2)萃取,合并有机相,依次用水(100mL×3)和饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(3：1,石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物68-3。MS-ESI计算值[M+Na] +557,实测值557。
第三步
将化合物68-3(414mg,0.774mmol)溶于四氢呋喃(5mL)和水(2.5mL)中,加入氢氧化钠(92.9mg,2.32mmol)。反应液在30℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L)调节pH值至3～4,用乙酸乙酯(20mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物68-4。MS-ESI计算值[M+Na] +543,实测值543。
第四步
将化合物68-4(408mg,0.783mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(6mL),加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(447mg,1.18mmol)和N,N-二异丙基乙胺(304mg,2.35mmol)。反应液在28℃下搅拌0.5小时,加入化合物1-1(165mg,0.792mmol),反应液在28℃下搅拌10小时。将反应液滴加至水(60mL)中,形成的混合物过滤,收集的滤饼用水(20mL)洗涤,用二氯甲烷(50mL)溶解,有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1,石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物68-5。MS-ESI计算值[M+Na] +733,实测值733。
第五步
将化合物68-5(450mg,0.633mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL),反应液在15℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物68的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.96-7.93(m,2H),7.59-7.49(m,4H),7.47-7.37(m,3H),7.23-7.19(m,2H),5.23-5.18(m,1H),5.15(s,2H),3.12-3.01(m,4H),2.97-2.91(m,1H),2.62-2.54(m,2H),2.07-1.92(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.44-1.39(m,1H),1.20-1.13(m,1H),0.75-0.71(m,2H),0.45-0.43(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +511,实测值511。
实施例69
Figure PCTCN2022104706-appb-000227
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000228
第一步
将化合物34-2(750mg,2.36mmol)溶于无水二氯甲烷(15mL),加入化合物67-2(575mg,2.95mmol)和三乙胺(763mg,7.54mmol),反应液在20℃下搅拌16小时。反应液用水(30mL)淬灭,用二氯甲烷(30mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(5：1,石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物69-1。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +413,实测值413。
第二步
将化合物69-1(1.28g,2.30mmol)溶于四氢呋喃(20mL)和水(10mL)中,加入氢氧化钠(280mg,7.00mmol)。反应液在30℃下搅拌12小时。反应液用盐酸(1mol/L)调节pH值至3～4,用乙酸乙酯(50mL×2)萃取,合并有机相,用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物69-2。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +399,实测值399。
第三步
将化合物69-2(1.18g,2.37mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(10mL),加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(1.35g,3.55mmol)和N,N-二异丙基乙胺(920mg,7.12mmol)。反应液在28℃下搅拌0.5小时,加入化合物1-1(500mg,2.40mmol),反应液在28℃下搅拌10小时。将反应液滴加至水(100mL)中,形成的混合物过滤,收集的滤饼用水(50mL)洗涤,用二氯甲烷(100mL)溶解,有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过硅胶柱层析法(2：1,石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物69-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +589,实测值589。
第四步
将化合物69-3(1.00g,1.45mmol)溶于乙酸乙酯(10.0mL),加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,10.0mL),反应液在20℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法(Phenomenex Luna C18  150×25mm×10μm；流动相A:体积分数为0.05％的盐酸水溶液；流动相B:乙腈；B％：12％-42％,10分钟)分离得到化合物69的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.24-8.20(m,1H),7.92-7.86(m,2H),7.57-7.48(m,4H),7.45-7.43(m,2H),7.24-7.22(m,2H),5.24(s,2H),3.15-3.08(m,2H),3.05-3.01(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.58-1.53(m,1H),1.45-1.40(m,1H),1.18-1.11(m,1H),0.76-0.72(m,2H),0.46-0.42(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +489,实测值489。
实施例70
Figure PCTCN2022104706-appb-000229
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000230
第一步
将化合物58-1(1.86g,4.22mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中,再加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,20mL),反应液在25℃下搅拌2小时,将反应液减压浓缩,剩余物在石油醚/乙酸乙酯混合液(1/1，15mL)中25℃下搅拌10分钟,过滤收集滤饼得到化合物70-1。MS-ESI计算值[M+H] +341,实测值341。
第二步
氮气保护下,将化合物70-1(110mg,0.292mmol)溶于干燥四氢呋喃(2mL)和甲醇(2mL)中,加入三乙胺(59.1mg,0.584mmol)和四氢吡喃-4-酮(35.1mg,0.350mmol),反应液在60℃下搅拌1小时,降温至零度下再加入硼氢化钠(22.1mg,0.584mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再加入二碳酸二叔丁酯(95.6mg,0.438mmol),反应液在25℃下搅拌10小时,将反应液浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2/1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物70-2。MS-ESI计算值[M+Na] +547,实测值547。
第三步
将化合物70-2(130mg,0.248mmol)溶于无水四氢呋喃(8mL),甲醇(2mL)和水(2mL)中,再加入一水合氢氧化锂(52.0mg,1.24mmol),反应液在30℃下搅拌12小时,将反应液减压浓缩,向反应液中加入盐酸(1mol/L)调节pH至5,用二氯甲烷：甲醇＝10:1(30mL×1)萃取,饱和食盐水(30mL×1)洗涤有机相,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到化合物70-3。MS-ESI计算值[M+Na] +533,实测值533。
第四步
氮气保护下,将化合物70-3(120mg,0.176mmol)溶于干燥二氯甲烷(10mL)中,加入三正丙基环磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,224mg,0.353mmol)和三乙胺(53.5mg,0.529mmol),再加1-1(36.7mg,0.176mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,向反应液中加入水(50mL),用二氯甲烷(30mL×1)萃取,饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法分离纯化(1：1石油醚/乙酸乙酯)得到化合物70-4。MS-ESI计算值[M+H] +701,实测值701。
第五步
将化合物70-4(940mg,1.34mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中,25℃下滴加氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,40mL),反应液于25℃搅拌6小时,停止搅拌,静置过夜,过滤,滤饼用乙酸乙酯(5mL)洗涤,粗品经制备高效液相色谱法(色谱柱:Phenomenex Genimi NX C18 150*40mm*5μm；流动相:[水(0.05％盐酸)-乙腈]；梯度:乙腈1％-30％,10min)分离得到70的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.64(d,J＝8.8Hz,2H),7.57-7.47(m,4H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.20(s,2H),4.05-4.01(m,2H),3.60-3.54(m,1H),3.48-3.42(m,2H),3.02-3.00(m,1H),2.51-2.47(m,1H),2.09-2.06(m,2H),1.75-1.66(m,2H),1.55-1.50(m,1H),1.49-1.43(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +501,实测值501。
实施例71
Figure PCTCN2022104706-appb-000231
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000232
第一步
将化合物70-4(1.50g,0.586mmol)手性拆分(分离柱:Chiralpak AD-3(50mm*4.6mm,3μm)；流动相:A:二氧化碳,B:乙醇(0.05％二乙胺)；梯度:5％-40％B 2min，保持40％1.2min,5％B 0.8min,流速：4mL/min)得到化合物71-1(保留时间RT＝1.871min,ee＝100％)。MS-ESI计算值[M+H] +701,实测值701。化合物71-2(保留时间RT＝2.026min,ee＝99.87％)。MS-ESI计算值[M+H] +701,实测值701。
第二步
将化合物71-1(700mg,0.999mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中,25℃下滴加氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,40mL),反应液于25℃搅拌6小时,停止搅拌,静置过夜,过滤,滤饼用乙酸乙酯(5mL)洗涤,粗品经制备高效液相色谱法(色谱柱:Phenomenex Genimi NX C18 150*40mm*5μm；流动相:[水(0.05％盐酸)-乙腈]；梯度:乙腈1％-30％,10min)分离得到71的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.04(d,J＝9.2Hz,2H),7.66(d,J＝9.2Hz,2H),7.58-7.43(m,6H),7.50-7.23(m,2H),5.22(s,2H),4.07-4.03(m,2H),3.62-3.56(m,1H),3.50-3.44(m,2H),3.04-3.00(m,1H),2.52-2.47(m,1H),2.11-2.08(m,2H),1.77-1.67(m,2H),1.57-1.45(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +501,实测值501。比旋光值[α] 25 D＝-40.066(C＝1.046g/100mL,CH 3OH)。
实施例72
Figure PCTCN2022104706-appb-000233
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000234
第一步
将化合物71-2(720mg,0.225mmol)溶于无水甲醇(5mL)中,25℃下滴加氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,40mL),反应液于25℃搅拌6小时,停止搅拌,静置过夜,过滤,滤饼用乙酸乙酯(5mL)洗涤,粗品经制备高效液相色谱法(色谱柱:Phenomenex Genimi NX C18 150*40mm*5μm；流动相:[水(0.05％盐酸)-乙腈]；梯度:乙腈1％-30％,10min)分离得到72的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝8.4Hz,2H),7.64(d,J＝8.4Hz,2H),7.56-7.47(m,4H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.20(s,2H),4.05-4.01(m,2H),3.65-3.54(m,1H),3.48-3.42(m,2H),3.03-2.99(m,1H),2.54-2.49(m,1H),2.10-2.07(m,2H),1.78-1.66(m,2H),1.57-1.53(m,1H),1.48-1.43(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +501,实测值501。
实施例73
Figure PCTCN2022104706-appb-000235
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000236
第一步
将化合物A-8(600mg,2.28mmol),7-8(1.17g,4.56mmol)溶解在乙腈(10mL)和二氯甲烷(10mL)中,0℃下向反应液中加入4-二甲氨基吡啶(139mg,1.14mmol),反应液在25℃下搅拌1.5小时。反应液减压浓缩得到粗品化合物73-1。
第二步
将化合物73-1(158mg,0.391mmol),73-2(99.4mg,0.469mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中,继续向反应液中加入三乙胺(119mg,1.17mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,反应液用二氯甲烷(20mL)稀释,用盐酸(1mol/L,20mL×1),饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(0：1石油醚/二氯甲烷)分离得到化合物73-3。MS-ESI计算值[M+Na] +523和525,实测值523和525。
第三步
将化合物73-3(54.0mg,0.104mmol)溶解在甲醇(5mL)和N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,氮气氛下向反应液中加入1,1-双(二苯基磷)二茂铁氯化钯(15.2mg,0.021mmol),三苯基磷(2.72mg,0.010mmol)和乙酸钾(30.6mg,0.311mmol),反应液在80℃的CO(50psi)氛下反应12小时,反应液过滤,滤液减压浓缩,将底物用水(10mL)稀释,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。粗产物经过薄层层析法(75：1二氯甲烷/甲醇)分离得到化合物73-4。 1H NMR(CD 3OD,400MHz)δ7.39-7.34(m,1H),7.32-7.17(m,3H),7.15-7.13(m,3H),5.10(s,3H),4.61(s,3H),2.98-2.97(m,1H),2.96-2.95(m,1H),2.87-2.85(m,1H),2.66-2.65(m,1H),2.00-1.91(m,2H),1.87(s,9H),1.46-1.14(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +503,实测值503。
第四步
将化合物73-4(47.0mg,0.091mmol)溶解在水(2mL),乙醇(2mL)和四氢呋喃(2mL)中,向反应液中加入氢氧化钠(10.9mg,0.274mmol),反应液在50℃下搅拌2小时,用盐酸(1mol/L)将反应液PH调节到4,反应液用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到粗品化合物73-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +367,实测值367。
第五步
将化合物73-5(174mg,0.373mmol)溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中,向反应液中加入O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸盐(284mg,0.746mmol),N,N-二异丙基乙胺(1.19g,9.19mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,向反应液中加入化合物1-1(155mg,0.746mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,向反应液中加入水(20mL),反应液用乙酸乙酯(20mL×3)萃取,机相用盐酸(1mol/L,20mL)和饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩。粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物73-6。MS-ESI计算值[M+H] +657,实测值657。
第六步
将化合物73-6(185mg,0.257umol)溶解在乙酸乙酯(5mL)中,继续向反应液中加入盐酸乙酸乙酯(4m,5mL),反应液在25℃下搅拌0.8h,反应液减压浓缩,经过制备高效液相色谱法(色谱柱:3_Phenomenex Luna C18 75×30mm×3μm；流动相:水(0.05％盐酸)-乙腈；梯度:12％-32％,7min)分离得到化合物73的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95-7.93(m,2H),7.49-7.48(m,4H),7.43(m,1H),7.39-7.37(m,2H),7.22-7.20(m,2H),5.23-5.11(m,3H),3.08-297(m,1H),2.89-2.86(m,2H),2.42-2.41(m,1H),1.99-1.96(m,1H),1.46-1.45(m,1H),1.43-1.42(m,1H),1.39-1.35(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +457,实测值457。
实施例74
Figure PCTCN2022104706-appb-000237
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000238
第一步
氮气保护下将化合物74-1(400mg,2.21mmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,0℃下加入三光气(393mg,1.32mmol),然后加入三乙胺(447mg,4.42mmol),反应液在氮气保护下25℃搅拌2小时。向反应液中加入水(20mL),用二氯甲烷(30mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到化合物74-2。MS-ESI计算值[M+MeOH+H] +240,实测值240。
第二步
氮气保护下将化合物A-8(200mg,0.76mmol)溶于无水二氯甲烷(5mL)中,0℃下加入74-2(263mg,1.14mmol),三乙胺(154mg,1.52mmol),反应液在氮气保护下25℃搅拌1小时。向反应液中加入水(20mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(30mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(1:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物74-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.19(d, J＝8.4Hz,1H),7.69(dd,J＝1.6,8.4Hz,1H),7.52(d,J＝1.6Hz,1H),7.48(s,1H),7.33(d,J＝8.0Hz,2H),7.16(d,J＝8.0Hz,2H),5.17(s,2H),4.84(br s,1H),3.91(d,J＝3.2Hz,6H),2.77-2.69(m,1H),2.08-2.03(m,1H),1.46(s,9H),1.19-1.16(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +493,实测值493。
第三步
氮气保护下,将化合物74-3(170mg,0.361mmol)溶于四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中,加入一水合氢氧化锂(45.5mg,1.08mmol),反应液在60℃下搅拌12小时,反应液减压浓缩除去四氢呋喃,剩余物用盐酸(1mol/L)调节pH至3,加入水(20mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(30mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到化合物74-4。MS-ESI计算值[M+Na] +479,实测值479。
第四步
将化合物74-4(180mg,0.228mmol)和1-1(47.4mg,0.228mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向其中加入三正丙基磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,290mg,0.455mmol)和三乙胺(69.1mg,0.683mmol)。反应液在氮气保护下20℃搅拌1小时。向反应液中加入水(30mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(30mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物74-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +547,实测值547。
第五步
将化合物74-5(100mg,0.151mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,2mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩,剩余物用制备高效液相色谱法(酸性，盐酸体系)分离得到化合物74的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.15(d,J＝8.8Hz,1H),7.74-7.67(m,2H),7.53-7.43(m,4H),7.40(d,J＝8.4Hz,2H),7.20(d,J＝8.4Hz,2H),5.20(s,2H),3.98(s,3H),2.88-2.84(m,1H),2.43-2.38(m,1H),1.47-1.41(m,1H),1.35-1.32(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +447,实测值447。
实施例75
Figure PCTCN2022104706-appb-000239
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000240
第一步
氮气保护下将化合物75-1(200mg,0.850mmol)溶于无水甲苯(5mL)和三乙胺(0.5mL)中,加入三光气(151mg,0.510mmol),反应液在氮气保护下100℃搅拌0.5小时,然后加入A-8(202mg,0.765mmol),反应液在氮气保护下100℃搅拌1小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(5:1～3:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物75-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.36(d,J＝8.8Hz,1H),7.97(dd,J＝1.6,8.8Hz,1H),7.92(t,J＝1.6Hz,1H),7.33(d,J＝8.0Hz,2H),7.17(d,J＝8.4Hz,3H),5.19(s,2H),4.84(s,1H),3.92(s,3H),2.76-2.71(m,1H),2.10-2.05(m,1H),1.46(s,9H),1.21-1.15(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +547,实测值547。
第二步
氮气保护下,将化合物75-2(400mg,0.763mmol)溶于四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中,加入一水合氢氧化锂(96.0mg,2.29mmol),反应液在60℃下搅拌12小时,反应液旋蒸除去四氢呋喃,剩余液体用1M盐酸水溶液调节pH至3,然后加入水(20mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(30mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,得到化合物75-3。MS-ESI计算值[M+Na] +533,实测值533。
第三步
将化合物75-3(400mg,0.233mmol)和1-1(48.9mg,0.233mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向其中加入三正丙基磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,297mg,0.467mmol)和三乙胺(70.8mg,0.700mmol)。反应液在氮气保护下20℃搅拌1小时。向反应液中加入水(30mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(30mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物75-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +601,实测值601。
第四步
将化合物75-4(200mg,0.201mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,1mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩,剩余物用制备高效液相色谱法(酸性，盐酸体系)分离得到化合物75的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.26(d,J＝8.8Hz,1H),8.16-7.99(m,2H),7.56-7.44(m,4H),7.41(d,J＝8.0Hz,2H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),5.23(s,2H),2.88-2.84(m,1H),2.43-2.38(m,1H),1.47-1.42(m,1H),1.37-1.32(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +501,实测值501。
实施例76
Figure PCTCN2022104706-appb-000241
合成路线:
Figure PCTCN2022104706-appb-000242
第一步
参照实施例75第一步得到化合物76-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.40(d,J＝8.8Hz,1H),8.27-8.17(m,2H),7.33(d,J＝8.0Hz,2H),7.17(d,J＝8.0Hz,2H),5.21(s,2H),3.93(s,3H),2.76-2.71(m,1H),2.09-2.03(m,1H),1.46(s,9H),1.21-1.17(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +488,实测值488。
第二步
参照实施例75第二步得到化合物76-3。MS-ESI计算值[M+Na] +474,实测值474。
第三步
参照实施例75第三步得到化合物76-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +542,实测值542。
第四步
参照实施例75第四步得到化合物76的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.39(d,J＝2.0Hz,1H),8.30(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H),8.07-8.03(m,1H),7.53-7.40(m,6H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),5.24(s,2H),2.89-2.85(m,1H), 2.43-2.38(m,1H),1.47-1.41(m,1H),1.39-1.34(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +442,实测值442。
实施例77
Figure PCTCN2022104706-appb-000243
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000244
第一步
参照实施例75第一步得到化合物77-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.58-7.52(m,2H),7.50-7.46(m,1H),7.30(d,J＝8.4Hz,2H),7.20-7.11(m,2H),5.22(s,2H),4.27-4.24(m,2H),3.97-3.92(m,2H),3.89(s,3H),2.76-2.71(m,1H),2.11-2.05(m,1H),1.46(s,9H),1.20-1.16(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +505,实测值505。
第二步
参照实施例75第二步得到化合物77-3。MS-ESI计算值[M+Na] +491,实测值491。
第三步
参照实施例75第三步得到化合物77-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +559,实测值559。
第四步
参照实施例75第四步得到化合物77的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.66-7.60(m,2H),7.58-7.47(m,4H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),5.28(s,2H),4.34-4.25(m,2H),4.03-3.94(m,2H),2.92-2.86(m,1H),2.46-2.41(m,1H),1.49-1.44(m,1H),1.40-1.34(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +459,实测值459。
实施例78
Figure PCTCN2022104706-appb-000245
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000246
第一步
参照实施例75第一步得到化合物78-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.32(d,J＝8.4Hz,1H),8.04(s,1H),7.94(d,J＝8.4Hz,1H),7.42-7.31(m,3H),7.17(d,J＝8.0Hz,1H),5.19(s,2H),3.91(s,3H),2.76-2.71(m,1H),2.08-2.04(m,1H),1.46(s,9H),1.32-1.19(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +497,实测值497。
第二步
参照实施例75第二步得到化合物78-3。MS-ESI计算值[M+Na] +483,实测值483。
第三步
参照实施例75第三步得到化合物78-4。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +551,实测值551。
第四步
参照实施例75第四步得到化合物78的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.21-8.13(m,2H),8.01(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H),7.53-7.39(m,6H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),5.23(s,2H),2.89-2.85(m,1H),2.42-2.37(m,1H),1.46-1.41(m,1H),1.38-1.33(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +451,实测值451。
实施例79
Figure PCTCN2022104706-appb-000247
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000248
第一步
参照实施例75第一步得到化合物79-1。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.99(br s,1H),7.59-7.53(m,2H),7.31(d,J＝8.0Hz,2H),7.15(d,J＝8.0Hz,2H),5.23(s,2H),4.30-4.22(m,2H),4.01-3.93(m,2H),3.89(s,3H),3.29-3.24(m,1H),3.08-3.03(m,1H),2.86-2.83(m,1H),2.15-2.05(m,1H),1.44(s,9H),1.23-1.15(m,2H),1.04-0.99(m,1H),0.52-0.42(m,2H),0.27-0.15(m,2H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +437,实测值437。
第二步
参照实施例75第二步得到化合物79-2。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +423,实测值423。
第三步
参照实施例75第三步得到化合物79-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +613,实测值613。
第四步
参照实施例75第四步得到化合物79的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.10(d,J＝8.0Hz,1H),7.63-7.56(m,2H),7.45-7.35(m,6H),7.22(d,J＝8.4Hz,2H),5.26(s,2H),4.33-4.22(m,2H),4.04-3.94(m,2H),3.13-3.05(m,2H),3.04-3.00(m,1H),2.57-2.52(m,1H),1.59-1.53(m,1H),1.43-1.38(m,1H),1.19-1.09(m,1H),0.74-0.67(m,2H),0.44-0.41(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +513,实测值513。
实施例80
Figure PCTCN2022104706-appb-000249
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000250
第一步
氮气保护下将化合物63-1(200mg,1.05mmol)和三乙胺(318mg,3.14mmol)加入到二氯甲烷(10mL)中,0℃下加入三光气(186mg,0.628mmol),反应液在氮气保护下25℃搅拌1小时,然后反应液减压浓缩,剩余物中加入无水四氢呋喃(10mL),在0℃下加入34-2(299mg,0.941mmol)和氢化钠(209mg,5.23mmol,60％的纯度),反应液在氮气保护下80℃搅拌48小时。向反应液中加入水(30mL),用乙酸乙酯(30mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(5:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物80-1。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.87-7.76(m,3H),7.34-7.29(m,2H),7.14(d,J＝8.0Hz,2H),5.22(s,2H),3.90(s,3H),3.84-3.78(m,2H),3.29-3.24(m,1H),3.09-3.03(m,1H),2.86-2.81(m,3H),2.14-2.10(m,1H),1.97-1.94(m,2H),1.44(s,9H),1.29-1.24(m,2H),1.06-1.01(m,1H),0.50-0.45(m,2H),0.25-0.16(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +557,实测值557。
第二步
参照实施例75第二步得到化合物80-2。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +421,实测值421。
第三步
参照实施例75第三步得到化合物80-3。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +611,实测值611。
第四步
参照实施例75第四步得到化合物80的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.90-7.83(m,3H),7.46-7.38(m,6H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.23(s,2H),3.85-3.78(m,2H),3.13-3.07(m,2H),3.04-3.00(m,1H),2.88(t,J＝6.4Hz,2H),2.60-2.55(m,1H),2.00-1.94(m,2H),1.61-1.56(m,1H),1.42-1.37(m,1H),1.20-1.10(m,1H),0.74-0.66(m,2H),0.45-0.41(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +511,实测值511。
实施例81
Figure PCTCN2022104706-appb-000251
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000252
第一步
将化合物A-7(7.2g,24.7mmol),进行手性拆分(色谱柱:DAICEL CHIRALPAKAD(250mm*50mm,10μm)；流动相A:体积分数为0.1％的氨水乙醇溶液；流动相B:25％-25％),得到化合物81-1(保留时间t＝3.292min，ee＝99.61％)。1H NMR(400MHz,CD 3Cl)δ7.94(d,J＝8.0Hz,2H),7.17(d,J＝8.0Hz,2H),4.87(br s,1H),3.90(s,3H),2.79-2.78(m,1H),2.16-2.00(m,1H),1.45(s,9H),1.26-1.22(m,2H)。MS-ESI计算值[M-56+H] +236,实测值236。
化合物81-2(保留时间t＝2.964min,ee＝100％)。 1H NMR(400MHz,CD 3Cl)δ7.94(d,J＝8.4Hz,2H),7.17(br d,J＝8.0Hz,2H),4.87(br s,1H),3.90(s,3H),2.79-2.78(m,1H),2.18-1.91(m,1H),1.45(s,9H),1.30-1.19(m,2H)。MS-ESI计算值[M-56+H] +236,实测值236。
第二步
在氮气保护下将化合物81-1(420mg,1.44mmol)溶于四氢呋喃(10mL)中,在0℃下加入四氢铝锂(65.7 mg,1.73mmol),在0℃下搅拌反应1小时。加入水(0.5mL)淬灭，加入无水硫酸镁除水,过滤，收集滤液，减压浓缩除去溶剂后得到化合物81-3MS-ESI计算值[M+2Na] +309,实测值309。
第三步
将化合物81-3(550mg,2.09mmol),溶于四氢呋喃(10mL)然后加入三乙胺(317mg,3.13mmol)中,再加入化合物34-3(370mg,2.09mmol)在25℃下搅拌反应1.5小时。向反应液中加入水(20mL),水相用乙酸乙酯萃取(20mL×3),合并有机相,有机相用饱和食盐水(10mL)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤浓缩后,所得粗品经硅胶柱层析法(20:1二氯甲烷/甲醇)分离纯化得到化合物81-4。MS-ESI计算值[M+Na] +463,实测值463。
第四步
将化合物81-4(770mg,1.75mmol)溶于乙酸乙酯(10mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,8.74mL),在20℃下搅拌反应1小时。反应液浓缩后加入石油醚(5mL)和乙酸乙酯(5mL)搅拌10分装后过滤,收集滤饼,真空干燥后得到化合物81-5。MS-ESI计算值[M-H] +341,实测值341。
第五步
将化合物81-5(262mg,770μmol),化合物65-2(87.8mg,923μmol)溶于四氢呋喃(5mL)和甲醇(5mL)中,然后加入碳酸氢钠(129mg,1.54mmol),在60℃下搅拌反应1小时。在0℃加入硼氢化钠(58.2mg,1.54mmol)在20℃下搅拌反应0.5小时,加入二碳酸二叔丁酯(252mg,1.15mmol),在30℃下搅拌反应12小时,向反应液中加入水(20mL),水相用二氯甲烷萃取(20mL×3),合并有机相,有机相用饱和食盐水(5mL)洗涤,无水硫酸钠干燥,所得粗品经硅胶柱层析法(3:1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物81-6。MS-ESI计算值[M+Na] +542,实测值542。
第六步
将化合物81-6(340mg,654μmol)溶于四氢呋喃(8mL)和水(2mL)中,加入一水合氢氧化锂(137mg,3.27mmol),在35℃下搅拌反应16小时。用盐酸(1mol/L)调节反应液pH至5,加入水(20mL),水相用乙酸乙酯萃取(30mL×3),合并有机相,有机相用饱和食盐水(5mL)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到化合物81-7。MS-ESI计算值[M+Na] +528,实测值528。
第七步
将化合物81-7(250mg,495μmol)和化合物1-1(103mg,495μmol)溶于二氯甲烷(10mL),加入三正丙基环磷酸酐50％乙酸乙酯溶液(629mg,989μmol)和三乙胺(150mg,1.48mmol)在20℃下搅拌反应1小时。加入水(20mL),水相用二氯甲烷萃取(20mL×3),合并有机相,有机相用饱和食盐水(5mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,所得粗品经硅胶柱层析法(3:1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物81-8。MS-ESI计算值[M+H] +596,实测值596。
第八步
将化合物81-8(100mg,143μmol)溶于氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,718μL)),在20℃下搅拌反应12小时。反应液浓缩后,剩余物经过制备高效液相色谱法(色谱柱column:Venusil ASB Phenyl 150*30mm*5μm；流动相A:体积分数为0.05％的盐酸水溶液；流动相B:乙腈B％:19％-39％,9分钟)分离得到化合物81的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝8.4Hz,2H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.56-7.38(m,6H),7.23(d,J＝8.0Hz,2H),5.20(s,2H),3.52-3.40(m,2H),3.15-3.07(m,1H),2.62-2.60(m,1H),1.66-1.56(m,1H),1.52-1.42(m,3H),1.35-1.32(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +496,实测值496。
实施例82
Figure PCTCN2022104706-appb-000253
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000254
第一步
氮气保护下将化合物82-1(500mg,2.31mmol)溶于无水四氢呋喃(5mL)中,0℃下加入氢化钠(111mg,2.77mmol,60％纯度),反应液在氮气保护下0℃搅拌0.5小时。加入82-2(530mg,2.31mmol),反应液在氮气保护下25℃搅拌1.5小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×3),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(1:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物82-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.03(d,J＝8.0Hz,2H),7.34(d,J＝8.0Hz,2H),4.92(br s,1H),4.67-4.57(m,1H),4.53-4.39(m,2H),3.93(s,3H),3.49-3.44(m,2H),3.38-3.31(m,1H),3.19-3.15(m,1H),1.41(s,9H)。MS-ESI计算值[M-56+H] +309,实测值309。
第二步
将化合物82-3(500mg,1.37mmol)溶于乙酸乙酯(5mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,5mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到化合物82-4的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.04(d,J＝8.0Hz,2H),7.44(d,J＝8.0Hz,2H),4.85-4.80(m,1H),4.58-4.45(m,2H),3.91(s,3H),3.70(t,J＝8.8Hz,1H),3.29-3.16(m,3H)。MS-ESI计算值[M+H] +265,实测值265。
第三步
将化合物82-4的盐酸盐(400mg,1.33mmol)和29-2(487mg,1.33mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)中,加入碳酸铯(1.30g,3.99mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦基-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯基-2-基)钯(121mg,0.133mmol),反应液在氮气氛围下90℃搅拌12小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(1:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物82-5。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.02(d,J＝8.0Hz,2H),7.34(d,J＝8.0Hz,2H),6.98(d,J＝8.4Hz,2H),6.54(d,J＝8.4Hz,2H),4.82-4.70(m,1H),4.48(d,J＝4.4Hz,2H),3.93(s,2H),3.80(s,3H),3.44-3.39(m,1H),3.32-3.21(m,3H),3.09-3.04(m,1H),2.75-2.71(m,1H),2.04-2.00(m,1H),1.45(s,9H),1.17–1.00(m,3H),0.53-0.37(m,2H),0.28-0.10(m,2H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +450,实测值450。
第四步
氮气保护下,将化合物82-5(200mg,0.364mmol)溶于四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中,加入一水合氢氧化锂(45.8mg,1.09mmol),反应液在25℃下搅拌12小时,反应液减压浓缩除去四氢呋喃,剩余物用盐酸(1mol/L)调节pH至3,然后加入水(20mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩得到化合物82-6。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +436,实测值436。
第五步
将化合物82-6(200mg,0.312mmol)和1-1(65.0mg,0.312mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向其中加入三正丙基磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,397mg,0.624mmol)和三乙胺(94.7mg,0.936mmol)。反应液在氮气保护下20℃搅拌1小时。向反应液中加入水(30mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物82-7。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +626,实测值626。
第六步
将化合物82-7(90.0mg,0.119mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,1mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩,剩余物用制备高效液相色谱法(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX 80×40mm×3μm；流动相:流动相A:体积分数为(0.05％的氨水+10mmol的碳酸氢胺)水溶液；流动相B:乙腈；B％：32％-60％,8分钟)分离,制备馏分加入盐酸(1mol/L,1mL)得到化合物82的盐酸 盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.89(d,J＝7.2Hz,2H),7.37(d,J＝7.2Hz,2H),7.19(d,J＝8.0Hz,1H),7.11-7.04(m,1H),6.92(dd,J＝2.4,8.4Hz,3H),6.78(t,J＝7.6Hz,1H),6.60(d,J＝8.4Hz,2H),4.65-4.61(m,2H),4.37-4.32(m,1H),3.61(t,J＝8.8Hz,1H),3.51-3.32(m,3H),3.05-2.94(m,2H),2.84-2.77(m,1H),2.37-2.35(m,1H),1.44-1.32(m,1H),1.27-1.22(m,1H),1.07-1.04(m,1H),0.69-0.64(m,2H),0.38-0.36(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +526,实测值526。
实施例83
Figure PCTCN2022104706-appb-000255
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000256
第一步
将化合物82-1(495mg,2.29mmol)和83-1(600mg,2.29mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)中,加入碳酸铯(1.49g,4.58mmol),碘化亚铜(43.6mg,0.229mmol)和(1R,2R)-(-)-N,N-二甲基环己烷-1,2-二胺(32.6mg,0.229mmol),反应液在氮气氛围下90℃搅拌12小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(1:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物83-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ8.06(d,J＝8.8Hz,2H),7.63(d,J＝8.8Hz,2H),5.00-4.95(m,1H),4.85-4.72(m,1H),4.14-4.05(m,1H),3.95-43.91(m,4H),3.57-3.54(m,2H),1.40(s,9H)。MS-ESI计算值[M-56+H] +295,实测值295。
第二步
将化合物83-2(210mg,0.599mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,1mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到化合物83-3的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.05(d,J＝8.8Hz,2H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),5.04-4.94(m,1H),4.34(t,J＝9.3Hz,1H),3.94-3.89(m,4H),3.43-3.35(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +251,实测值251。
第三步
将化合物83-3的盐酸盐(170mg,0.593mmol)和29-2(234mg,0.593mmol)溶于1,4-二氧六环(5mL)中,加入碳酸铯(580mg,1.78mmol)和甲磺酸(2-二环己基膦基-3,6-二甲氧基-2,4,6-三异丙基-1,1-联苯)(2-氨基-1,1-联苯基-2-基)钯(53.8mg,0.0593mmol),反应液在氮气氛围下90℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(1:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物83-4。 1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝8.8Hz,2H),7.63(d,J＝8.8Hz,2H),7.01(d,J＝8.4Hz,2H),6.61(d,J＝8.4Hz,2H),4.96-4.89(m,1H),4.14-4.09(m,1H),3.95-3.89(m,5H),3.61-3.43(m,2H),3.27-3.22(m,1H),3.09-3.04(m,1H),2.76-2.73(m,1H),2.04-2.01(m,1H),1.45(s,9H),1.18-1.02(m,3H),0.48-0.42(m,1H),0.26-0.15(m,2H)。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +436,实测值436。
第四步
氮气保护下,将化合物83-4(180mg,0.336mmol)溶于四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中,加入一水合氢氧化锂(42.3mg,1.01mmol),反应液在25℃下搅拌3小时,反应液加压浓缩除去四氢呋喃,剩余物用盐酸(1mol/L)调节pH至3,加入水(20mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(30mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,得到化合物83-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +422,实测值422。
第五步
将化合物83-5(160mg,0.133mmol)和1-1(27.7mg,0.133mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向其中加入三正丙基磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,169mg,0.266mmol)和三乙胺(40.4mg,0.399mmol)。反应液在氮气保护下20℃搅拌1小时。向反应液中加入水(30mL),用二氯甲烷(30mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水(30mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(3:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物83-6。MS-ESI计算值[M-Bocc+H] +612,实测值612。
第六步
将化合物83-6(100mg,0.123mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,1mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩,剩余物用制备高效液相色谱法(色谱柱:Phenomenex Gemini-NX 80×40mm×3μm；流动相:流动相A:体积分数为(0.05％的氨水+10mmol的碳酸氢胺)水溶液；流动相B:乙腈；B％：36％-60％,8min)分离,制备馏分加入盐酸(1mol/L,1mL)得到化合物83的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.02(d,J＝8.8Hz,2H),7.72(d,J＝8.8Hz,2H),7.18(d,J＝8.0Hz,1H),7.11-7.07(m, 1H),6.97-6.90(m,3H),6.78(t,J＝7.6Hz,1H),6.71-6.65(m,2H),4.64-4.61(m,1H),4.25(t,J＝8.8Hz,1H),4.00-3.96(m,1H),3.57-3.46(m,2H),3.08-3.02(m,2H),2.84-2.80(m,1H),2.39-2.34(m,1H),1.43-1.38(m,1H),1.27-1.22(m,1H),1.14-1.11(m,1H),0.71-0.68(m,2H),0.42-0.37(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +512,实测值512。
实施例84
Figure PCTCN2022104706-appb-000257
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000258
第一步
氮气保护下将化合物84-1(95mg,0.448mmol)溶于无水甲苯(5mL)和三乙胺(1mL)中,加入三光气(79.8mg,0.269mmol),反应液在氮气保护下100℃搅拌0.5小时，加入81-3(106mg,0.403mmol),反应液在氮气保护下100℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(3:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物84-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.37-7.29(m,4H),7.20-7.13(m,3H),5.22-5.16(m,1H),5.10(s,2H),2.98-2.91(m,2H),2.73-2.58(m,2H),2.07-2.03(m,1H),1.84-1.77(m,1H),1.49(s,9H),1.17-1.14(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +523和525,实测值523和525。
第二步
氮气保护下将化合物84-2(120mg,0.239mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中,加入三乙胺(3mL),甲醇(9mL),1,1-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(17.5mg,0.0239mmol),反应液在一氧化碳(50Psi)氛围下80℃搅拌36小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×3),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2:1石油醚/乙酸乙酯)分 离得到化合物84-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.92-7.90(m,2H),7.38(d,J＝8.4Hz,1H),7.31(d,J＝8.0Hz,2H),7.16(d,J＝8.0Hz,2H),5.33-5.27(m,1H),5.13(s,2H),3.93(s,3H),3.01-2.85(m,2H),2.78-2.65(m,2H),2.10-2.05(m,1H),1.89-1.83(m,1H),1.48(s,9H),1.21-1.17(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +503,实测值503。
第三步
氮气保护下,将化合物84-3(90.0mg,0.187mmol)溶于四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中,加入一水合氢氧化锂(23.6mg,0.562mmol),反应液在40℃下搅拌12小时,反应液旋蒸除去四氢呋喃,剩余物用盐酸(1mol/L)调节pH至3,然后加入水(10mL),用二氯甲烷(10mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,得到化合物84-4。MS-ESI计算值[M+Na] +489,实测值489。
第四步
将化合物84-4(75.0mg,0.140mmol)和1-1(29.1mg,0.140mmol)溶于二氯甲烷(3mL)中,向其中加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-YL)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦盐(106mg,0.280mmol)和三乙胺(42.4mg,0.419mmol)。反应液在氮气保护下20℃搅拌1小时。向反应液中加入水(20mL),用二氯甲烷(20mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物84-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +557,实测值557。
第五步
将化合物84-5(55.0mg,0.0837mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.75mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到化合物84的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.93-7.89(m,2H),7.51-7.35(m,7H),7.19(d,J＝8.0Hz,2H),5.22-5.12(m,3H),3.13-3.05(m,1H),2.97-2.84(m,2H),2.60-2.54(m,1H),2.41-2.36(m,1H),1.97-1.90(m,1H),1.45-1.41(m,1H),1.35-1.32(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +457,实测值457。
实施例85
Figure PCTCN2022104706-appb-000259
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000260
第一步
氮气保护下将化合物85-1(95.0mg,0.448mmol)溶于无水甲苯(5mL)和三乙胺(1mL)中,加入三光气(79.8mg,0.269mmol),反应液在氮气保护下100℃搅拌0.5小时,然后加入81-3(106mg,0.403mmol),反应液在氮气保护下100℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(20mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(3:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物85-2。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.37-7.30(m,4H),7.23-7.13(m,3H),5.22-5.18(m,1H),5.10(s,2H),2.98-2.85(m,2H),2.72-2.60(m,2H),2.09-2.03(m,1H),1.85-1.79(m,1H),1.46(s,9H),1.19-1.16(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +523和525,实测值523和525。
第二步
氮气保护下将化合物85-2(130mg,0.259mmol)溶于无水N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中,加入三乙胺(3mL),甲醇(9mL),1,1-双(二苯基膦基)二茂铁二氯化钯(19.0mg,0.0259mmol),反应液在一氧化碳(50Psi)氛围下80℃下搅拌24小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。有机相用饱和食盐水(20mL×3)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物85-3。 1H NMR(400MHz,CDCl 3)δ7.91-7.88(m,2H),7.38-7.36(m,1H),7.29(d,J＝8.0Hz,2H),7.14(d,J＝8.0Hz,2H),5.31-5.26(m,1H),5.12(s,2H),3.92(s,3H),3.05-2.84(m,2H),2.74-2.62(m,2H),2.07-2.03(m,1H),1.89-1.80(m,1H),1.46(s,9H),1.19-1.16(m,2H)。MS-ESI计算值[M+Na] +503,实测值503。
第三步
氮气保护下,将化合物85-3(85.0mg,0.177mmol)溶于四氢呋喃(5mL)和水(1mL)中,加入一水合氢氧化锂(22.3mg,0.531mmol),反应液在40℃下搅拌12小时,反应液旋蒸除去四氢呋喃,剩余物用盐酸(1mol/L)调节pH至3,然后加入水(10mL),用二氯甲烷(10mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水洗涤(10 mL×1),无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,得到化合物85-4。MS-ESI计算值[M+Na] +489,实测值489。
第四步
将化合物85-4(70.0mg,0.139mmol)和叔丁基-2-氨基苯基氨基甲酸酯(28.9mg,0.139mmol)溶于二氯甲烷(5mL)中,向其中加入三正丙基磷酸酐(50％乙酸乙酯溶液,211mg,0.332mmol)和三乙胺(42.1mg,0.416mmol)。反应液在氮气保护下20℃搅拌1小时。向反应液中加入水20mL),用二氯甲烷(20mL×3)萃取。有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,减压浓缩,剩余物用硅胶柱层析法(2:1石油醚/乙酸乙酯)分离得到化合物85-5。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +557,实测值557。
第五步
将化合物85-5(40.0mg,0.0609mmol)溶于乙酸乙酯(3mL)中,加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,1mL)。反应液在25℃搅拌反应1小时。反应液减压浓缩得到化合物85的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.93-7.88(m,2H),7.45-7.35(m,7H),7.18(d,J＝8.0Hz,2H),5.22-5.08(m,3H),3.06-3.04(m,1H),2.88-2.84(m,2H),2.61-2.55(m,1H),2.39-2.34(m,1H),1.99-1.90(m,1H),1.44-1.39(m,1H),1.36-1.33(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +457,实测值457。
实施例86，87
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000261
第一步
将化合物34(120mg,,0.221mmol)经超临界流体萃取法(色谱柱:Chiralpak IG-3 50×4.6mm I.D.,3μm；流动相:A:二氧化碳B:异丙醇(0.05％二乙胺)；梯度:B 40％；流量:4mL/min；柱温:35℃；柱压:1500psi)分离纯化得到化合物86和化合物87。
化合物86(保留时间t＝4.877min,ee＝100％)。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.64(d,J＝8.8Hz,2H),7.56-7.44(m,4H),7.40(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.19(s,2H),3.13-2.99(m,3H),2.55-2.51(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.43-1.38(m,1H),1.17-1.10(m,1H),0.74-0.69(m,2H),0.44-0.41(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +471,实测值471。
化合物87(保留时间t＝6.186min,ee＝100％)。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝8.8Hz,2H),7.64(d,J＝8.8Hz,2H),7.56-7.45(m,4H),7.40(d,J＝8.0Hz,2H),7.21(d,J＝8.0Hz,2H),5.19(s,2H),3.13-2.99(m,3H),2.54-2.49(m,1H),1.57-1.52(m,1H),1.43-1.38(m,1H),1.15-1.08(m,1H),0.74-0.69(m,2H),0.44-0.41(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +471,实测值471。
实施例88,89
Figure PCTCN2022104706-appb-000262
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000263
第一步
化合物69(400mg,0.819mmol)经超临界流体萃取法(色谱柱:Chiralpak IG-3 50×4.6mm I.D.,3μm；流动相:A:二氧化碳B:异丙醇(0.05％二乙胺)；梯度:B 40％；流量:4mL/min；柱温:35℃；柱压:1500psi)分离纯化得到化合物88和化合物89粗品。
化合物88(手性方法保留时间t＝4.202min)粗品,用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物88的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.20(t,J＝8.4Hz,1H),7.94-7.84(m,2H),7.57-7.45(m,4H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.22(s,2H),3.12-3.05(m,2H),3.03-3.00(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.58-1.53(m,1H),1.43-1.38(m,1H),1.18-1.09(m,1H),0.74-0.68(m,2H),0.45-0.40(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +489,实测值489。
化合物89(手性方法保留时间t＝5.148min)粗品,用制备高效液相色谱法(酸性,盐酸体系)分离得到化合物89的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.20(t,J＝8.4Hz,1H),7.91-7.85(m,2H),7.56-7.45(m,4H),7.42(d,J＝8.0Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.22(s,2H),3.12-3.05(m,2H),3.03-2.99(m,1H),2.56-2.51(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.43-1.38(m,1H),1.17-1.09(m,1H),0.74-0.69(m,2H),0.45-0.41(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +489,实测值489。
实施例90
Figure PCTCN2022104706-appb-000264
合成路线；
Figure PCTCN2022104706-appb-000265
第一步
参照实施例67第一步得到化合物90-1。MS-ESI计算值[M+MeOH+H] +386,实测值386。
第二步
参照实施例36第四步得到化合物90-2。MS-ESI计算值[M+H] +262,实测值262。
第三步
参照实施例36第五步得到化合物90-3。MS-ESI计算值[M-56+H] +306,实测值306。
第四步
参照实施例36第六步得到化合物90-4。MS-ESI计算值[M-56+H] +278,实测值278。
第五步
参照实施例67第二步得到化合物90-5。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.91(d,J＝8.8Hz,2H),7.61-7.59(m,3H),7.45-7.41(m,1H),7.34(d,J＝8.8Hz,2H),7.23-7.21(m,2H),7.16-7.15(m,2H),5.17(s,2H),4.41-4.38(m,1H),4.05-3.99(m,1H),3.85-3.71(m,3H),2.71-2.63(m,1H),2.17-2.03(m,3H),1.49(s,9H),1.42-1.40(m,10H),1.28-1.26(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +687,实测值687。
第六步
参照实施例70第五步得到化合物90的盐酸盐。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ8.03(d,J＝6.8Hz,2H),7.64(d,J＝8.0Hz,2H),7.55-7.48(m,4H),7.41(d,J＝6.8Hz,2H),7.22(d,J＝8.0Hz,2H),5.19(s,2H),4.11-4.05(m,3H),3.84-3.76(m,2H),3.03-3.02(m,1H),2.58-2.57(m,1H),2.56-2.41(m,1H),2.31-2.25(m,1H),1.60-1.57(m,1H),1.46-1.42(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +487,实测值487。
实施例91
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000266
第一步
向化合物70-1(500mg,1.47mmol)和化合物91-1(116mg,1.62mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入冰醋酸(176mg,2.94mmol)和二甲基吡啶硼烷(160mg,1.50mmol)。反应液在25℃下搅拌反应3小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)进行淬灭,用二氯甲烷(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物91-2。MS-ESI计算值[M+H] +397,实测值397。
第二步
将化合物91-2(580mg,1.46mmol)溶于二氯甲烷(5mL),向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(377mg,2.92mmol)和氯甲酸烯丙酯(211mg,1.75mmol),反应液在25℃下搅拌12小时。向反应液中加入水(20mL),用二氯甲烷(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(20mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物91-3。MS-ESI计算值[M+H] +481,实测值481。
第三步
将化合物91-3(210mg,437mmol)溶于四氢呋喃(2mL),水(2mL)和乙醇(1mL),加入氢氧化钠(21.0mg,0.524mmol),反应液在50℃下搅拌3小时。反应液浓缩,向其中加入水(5mL),用乙酸乙酯(5mL×1)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10 mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,得到化合物91-4。MS-ESI计算值[M+H] +467,实测值467。
第四步
将化合物91-4(200mg,0.429mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(4mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(179mg,0.472mmol)和N,N-二异丙基乙胺(111mg,0.857mmol),反应液在25℃下搅拌1小时。再向反应液中加入化合物91-5(51.0mg,0.472mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物91-6。MS-ESI计算值[M+H] +557,实测值557。
第五步
将化合物91-6(110mg,0.198mmol)溶于四氢呋喃(5mL),加入四三苯基磷钯(22.8mg,0.20mmol)和二乙胺(145mg,1.98mmol),反应液在80℃下搅拌1小时。将反应液减压浓缩除去溶剂,加甲醇(2mL),加100mg硫脲树脂,室温下搅拌30min,过滤,浓缩。粗产物经过制备高效液相色谱法(中性,碳酸氢铵体系)分离得到化合物91。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95(d,J＝8.8,2H),7.61(d,J＝8.8,2H),7.33(d,J＝8.0,2H),7.19(d,J＝8.0,1H),7.09(d,J＝8.0,3H),6.92-6.91(m,1H),6.81-6.79(m,1H),5.17(s,2H),4.83-4.82(m,2H),4.59-4.57(m,2H),4.17-4.12(m,1H),2.34-2.30(m,1H),1.94-1.91(m,1H),1.10-1.03(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +473,实测值473。
实施例92
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000267
第一步
将化合物70-1(350mg,1.03mmol)和化合物24-1(141mg,1.23mmol)溶于甲醇(5mL),向反应液中加入 冰醋酸(185mg,3.08mmol),反应液在25℃下搅拌0.5小时。再向反应液中加入醋酸硼氢化钠(545mg,2.57mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)进行淬灭,用二氯甲烷(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物92-1。MS-ESI计算值[M+H] +439,实测值439。
第二步
将化合物92-1(450mg,1.03mmol)溶于二氯甲烷(5mL),向其中加入N,N-二异丙基乙胺(265mg,2.05mmol)和二碳酸叔丁酯(269mg,1.23mmol),反应液在25℃搅拌12小时。反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物92-2。MS-ESI计算值[M+Na] +561,实测值561。
第三步
将化合物92-2(500mg,0.928mmol)溶于四氢呋喃(4mL)和水(2mL),加入氢氧化钠(74.3mg,1.86mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液浓缩,向其中加入水(5mL),用乙酸乙酯(5mL×1)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物92-3。MS-ESI计算值[M+Na] +547,实测值547。
第四步
将化合物92-3(300mg,0.572mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(6mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(261mg,0.686mmol)和N,N-二异丙基乙胺(148mg,0.199mmol),反应液在25℃下搅拌0.5小时。再向反应液中加入化合物1-1(125mg,0.600mmol),反应液在25℃搅拌12小时。将反应液加入水(50mL)中,过滤,滤饼用水(20mL)洗,将滤饼减压干燥,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物92-4。MS-ESI计算值[M+H] +715,实测值715。
第五步
将化合物92-4(200mg,0.280mmol)溶于乙酸乙酯(5mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,10mL),反应液在25℃搅拌2小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系)得到化合物92。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95(d,J＝8.8,2H),7.61(d,J＝8.8,2H),7.40(d,J＝8.0,2H),7.19(d,J＝8.0,3H),7.10-7.08(m,1H),6.94-6.92(m,1H),6.81-6.77(m,1H),5.20(s,2H),4.00-3.96(m,2H),3.44-3.43(m,3H),2.98-2.96(m,1H),2.35-2.33(m,1H),1.94-1.92(m,1H),1.73-1.69(m,2H),1.39-1.37(m,5H)。MS-ESI计算值[M+H] +515,实测值515。
实施例93
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000268
第一步
向化合物70-1(500mg,1.47mmol)和化合物93-1(176mg,1.76mmol)溶于甲醇(5mL),向反应液中加入冰醋酸(265mg,4.41mmol),反应液在25℃下搅拌0.5小时。再向反应液中加入醋酸硼氢化钠(778mg,3.67mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)进行淬灭,用二氯甲烷(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物93-2。MS-ESI计算值[M+H] +425,实测值425。
第二步
将化合物93-2(550mg,1.30mmol)溶于二氯甲烷(5mL),向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(336mg,2.60mmol)和氯甲酸烯丙酯(188mg,1.56mmol),反应液在25℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物93-3。MS-ESI计算值[M+H] +509,实测值509。
第三步
将化合物93-3(300mg,0.590mmol)溶于四氢呋喃(3mL),乙醇(1mL)和水(3mL),加入氢氧化钠(35.4mg,0.885mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液浓缩,向其中加入水(5mL),用乙酸乙酯(5mL×1)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物93-4。MS-ESI计算值[M+H] +495,实测值495。
第四步
将化合物93-4(180mg,0.364mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(3mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(208mg,0.546mmol)和N,N-二异丙基乙胺(94.1mg,0.728mmol),反应液在25℃下搅拌1小时。再向反应液中加入化合物91-5(47.2mg,0.437mmol),反应液在25℃搅拌12小时。反应液加入水(10mL)中,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无 水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物93-5。MS-ESI计算值[M+H] +585,实测值585。
第五步
将化合物93-5(140mg,0.239mmol)溶于四氢呋喃(1mL),向其中加入四三苯基磷钯(27.7mg,0.024mmol)和二乙胺(175mg,2.39mmol),反应液在80℃下搅拌1小时。将反应液减压浓缩除去溶剂,加甲醇(2mL),加100mg硫脲树脂,室温下搅拌30min,过滤,浓缩。粗产物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系)得到化合物93。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95(d,J＝8.8,2H),7.61(d,J＝8.8,2H),7.35(d,J＝8.0,2H),7.19(d,J＝8.0,1H),7.13-7.11(m,3H),6.93-6.91(m,1H),6.79-6.78(m,1H),5.18(s,2H),4.58(s,1H),4.51-4.46(m,2H),4.37-4.33(m,2H),3.01(s,1H),2.42-4.41(m,1H),2.01-2.00(m,1H),1.36(s,3H),1.16-1.15(m,1H),1.09-1.08(m,1H)。MS-ESI计算值[M+H] +501,实测值501。
实施例94
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000269
第一步
将化合物70-1(500mg,1.33mmol)和化合物94-1(137mg,1.59mmol)溶于甲醇(5mL),向反应液中加入冰醋酸(239mg,3.98mmol),反应液在25℃下搅拌0.5小时。再向反应液中加入醋酸硼氢化钠(703mg,3.32mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向其中加入饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)进行淬灭,用二氯甲烷(20mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物94-2。MS-ESI计算值[M+H] +411,实测值411。
第二步
将化合物94-2(540mg,1.32mmol)溶于二氯甲烷(5mL),向反应液中加入N,N-二异丙基乙胺(341mg,2.64mmol)和氯甲酸烯丙酯(175mg,1.45mmol),反应液在25℃下搅拌12小时。将反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物94-3。MS-ESI计算值[M+H] +495,实测 值495。
第三步
将化合物94-3(350mg,0.708mmol)溶于四氢呋喃(3mL),乙醇(1mL)和水(3mL),加入氢氧化钠(42.5mg,1.06mmol),反应液在55℃下搅拌3小时。将反应液浓缩,向其中加入水(5mL),用乙酸乙酯(5mL×1)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物94-4。MS-ESI计算值[M+H] +481,实测值481。
第四步
将化合物94-4(280mg,0.583mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(332mg,0.874mmol)和N,N-二异丙基乙胺(150mg,1.17mmol),反应液在25℃下搅拌1小时。再向反应液中加入化合物91-5(75.6mg,0.699mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物94-5。MS-ESI计算值[M+H] +571,实测值571。
第五步
将化合物94-5(190mg,0.333mmol)溶于四氢呋喃(1mL),向其中加入四三苯基磷钯(38.5mg,0.033mmol)和二乙胺(244mg,3.33mmol),反应液在80℃下搅拌1小时。将反应液减压浓缩除去溶剂,加甲醇(2mL),加100mg硫脲树脂,室温下搅拌30min,过滤,浓缩。粗产物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸氢铵体系)得到化合物94。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95(d,J＝8.8,2H),7.61(d,J＝8.8,2H),7.34(d,J＝8.0,2H),7.20-7.19(m,1H),7.11-7.09(m,3H),6.93-6.92(m,1H),6.79-6.78(m,1H),5.18(s,2H),4.82-4.78(m,2H),4.43-4.41(m,2H),3.18-3.16(m,1H),3.06-3.04(m,2H),2.32-2.30(m,1H),1.92-1.89(m,1H),1.09-1.02(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +487,实测值487。
实施例95
合成路线：
Figure PCTCN2022104706-appb-000270
第一步
向化合物95-1(5.00g,34.7mmol)的叔丁醇(50mL)溶液中加入二碳酸二叔丁酯(8.33g,38.2mmol)和4-二甲氨基吡啶(1.27g,10.4mmol)。反应液在25℃下搅拌反应3小时。将反应液加入水(100mL)中,用乙酸乙酯(100mL×2)萃取,合并有机相用饱和食盐水(100mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物95-2。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ3.67(s,3H),1.39(s,9H),1.31-1.30(m,4H)。
第二步
向化合物95-2(4g,20.0mmol)的四氢呋喃(40mL)和水(40mL)的溶液中加入氢氧化钠(799mg,20.0mmol)。反应液在50℃下搅拌反应3小时。将反应液浓缩,用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(30mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物95-3。
第三步
将化合物95-3(2.2g,11.8mmol)溶于四氢呋喃(20mL),向反应液中加入羰基二咪唑(2.30g,14.2mmol),反应液在25℃下搅拌1小时。0℃下向反应液中加入硼氢化钠(894mg,23.6mmol)的水(2mL)溶液,反应液在25℃下搅拌1小时。将反应液用饱和碳酸氢钠水溶液(50mL)淬灭,用二氯甲烷(30mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(50mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物95-4。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ3.60(s,2H),1.46(s,9H),1.22-1.21(m,2H),0.82-0.81(m,2H)。
第四步
将化合物95-4(400mg,2.32mmol)溶于二氯甲烷(4mL),0℃下加入三乙胺(1.20g,11.9mmol)和甲烷磺酰氯(960mg,8.38mmol),反应液在0-25℃下搅拌1小时。向反应液中加入饱和碳酸氢钠水溶液(20mL)淬灭,用二氯甲烷(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物95-5。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ4.23(s,2H),3.00(s,3H),1.38(s,9H),1.28-1.27(m,2H),0.92-0.91(m,2H)。
第五步
向化合物70-1(408mg,1.20mmol)和化合物95-5(300mg,1.20mmol)的乙腈(5mL)溶液中加入碳酸钾(497mg,3.60mmol)和碘化钠(199mg,1.33mmol)。反应液在70℃下搅拌反应12小时。向反应液中加入水(20mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物95-6。MS-ESI计算值[M+H] +495,实测值495。
第六步
将化合物95-6(600mg,1.03mmol)溶于二氯甲烷(6mL),向其中加入N,N-二异丙基乙胺(314mg,2.43mmol)和二碳酸叔丁酯(318mg,1.46mmol),反应液在25℃搅拌12小时。反应液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(1：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物95-7。MS-ESI计算值[M+2Na] +640,实测值640。
第七步
将化合物95-7(300mg,0.504mmol)溶于四氢呋喃(3mL),乙醇(0.5mL)和水(3mL),加入氢氧化钠(24.2mg,0.605mmol),反应液在55℃下搅拌2小时。将反应液浓缩,向其中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×1)萃取,水相用盐酸(1mol/L)调节pH至5,用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩得到化合物95-8。MS-ESI计算值[M-Boc+H] +481,实测值481。
第八步
将化合物95-8(250mg,0.431mmol)溶于N,N-二甲基甲酰胺(5mL),加入O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N,N-四甲基脲六氟膦酸盐(196mg,0.517mmol)和N,N-二异丙基乙胺(111mg,0.861mmol),反应液在25℃下搅拌1小时,再向反应液中加入化合物91-5(51.2mg,0.474mmol),反应液在25℃搅拌12小时。向反应液中加入水(10mL),用乙酸乙酯(10mL×3)萃取,合并有机相用饱和食盐水(10mL×1)洗涤,无水硫酸钠干燥,过滤,滤液减压浓缩,粗产物经过薄层层析法(2：1石油醚/乙酸乙酯)分离纯化得到化合物95-9。MS-ESI计算值[M+H] +671,实测值671。
第九步
将化合物95-9(200mg,0.298mmol)溶于乙酸乙酯(4mL),向其中加入氯化氢乙酸乙酯溶液(4mol/L,0.745mL),反应液在25℃搅拌1小时。反应液减压浓缩,粗产物经过制备高效液相色谱法分离(中性,碳酸 氢铵体系)得到化合物95。 1H NMR(400MHz,CD 3OD)δ7.95(d,J＝8.8,2H),7.61(d,J＝8.8,2H),7.40(d,J＝8.0,2H),7.19(d,J＝8.0,3H),7.09-7.08(m,1H),6.93-6.91(m,1H),6.81-6.79(m,1H),5.20(s,2H),3.15(s,2H),2.91-2.88(m,1H),2.46-2.44(m,1H),1.50-1.47(m,1H),1.36-1.34(m,1H),1.19-1.18(m,2H),0.73-0.71(m,2H)。MS-ESI计算值[M+H] +515,实测值515。
生物化学检测：
实验例1：LSD1活性评价
本试验目的是检测化合物对LSD1的体外抑制活性。本试验采用的酶为人源LSD1，标准底物为组蛋白H3K4me肽(20μM)，采用酶荧光偶联法，通过辣根过氧化酶(HPR)和荧光试剂Amplex Red联合检测LSD1反应后生成的H 2O 2的方法测定化合物的活性。从10μM开始3倍稀释，检测化合物的10个浓度下IC 50值。化合物在加入底物开始反应前，酶和底物共孵化30分钟。荧光检测器：EnVision，激发波长：Ex/Em＝530/590nM。
测试化合物对LSD1抑制活性，结果如表1所示。
表1：本发明化合物体外LSD1活性筛选试验结果
化合物编号 IC 50(nM) 化合物编号 IC 50(nM)
化合物1的盐酸盐 1976 化合物59的盐酸盐 1328
化合物2的盐酸盐 539.4 化合物62的盐酸盐 1693
化合物3的盐酸盐 240.4 化合物63的盐酸盐 536
化合物4的盐酸盐 103.3 化合物65的盐酸盐 14.22
化合物5的盐酸盐 295.6 化合物66的盐酸盐 956.8
化合物6的盐酸盐 72.08 化合物67的盐酸盐 428.8
化合物7的盐酸盐 597.7 化合物68的盐酸盐 81.17
化合物9的盐酸盐 219.4 化合物69的盐酸盐 124.30
化合物10的盐酸盐 1868 化合物70的盐酸盐 114
化合物11的盐酸盐 508.4 化合物71的盐酸盐 62.58
化合物12的盐酸盐 95.24 化合物72的盐酸盐 550
化合物13的盐酸盐 337.7 化合物73的盐酸盐 841.9
化合物14的盐酸盐 149.9 化合物74的盐酸盐 1842
化合物15的盐酸盐 335.1 化合物75的盐酸盐 608.4
化合物16的盐酸盐 191.8 化合物77的盐酸盐 442.9
化合物17的盐酸盐 357.6 化合物78的盐酸盐 2161
化合物20的盐酸盐 432.2 化合物79的盐酸盐 49.18
化合物21的盐酸盐 318.4 化合物80的盐酸盐 93.17
化合物22的盐酸盐 600.6 化合物82的盐酸盐 1161
化合物24的盐酸盐 326.2 化合物83的盐酸盐 1296
化合物26的盐酸盐 2408 化合物84的盐酸盐 195.3
化合物27的盐酸盐 254 化合物85的盐酸盐 412.5
化合物29的盐酸盐 306.9 化合物86的盐酸盐 305
化合物30的盐酸盐 120 化合物91 46.07
化合物34的盐酸盐 417.2 化合物92 162.4
化合物55的盐酸盐 554.4 化合物93 133.3
化合物58的盐酸盐 726.6 化合物94 106.8
结论：本发明化合物对LSD1抑制活性明显。
实验例2：HDAC1活性评价
本试验目的是检测化合物对HDAC1的体外抑制活性。本试验采用的酶为人源HDAC1，荧光标记的p53残基379-382[RHKK(Ac)AMC]。反应缓冲液为三羟甲基氨基甲烷盐酸盐(50mM)、pH 8.0、氯化钠(137mM)、氯化钾(2.7mM)和氯化镁(1mM)；牛血清蛋白(1mg/mL)；DMSO(1％)。将HDAC1加入微孔板中(反应缓冲液加入空白对照孔中)，待测化合物的DMSO溶液加入酶体系中预孵育。底物加入反应混合体系中，震荡，30℃密封孵育30分钟。加入古曲菌素A终止反应，在荧光检测仪Ex/Em＝355/460nm下通过检测随时间荧光信号的变化，计算得到反应初速度。化合物从10μM开始3倍稀释，检测化合物的10个浓度下IC 50值。
测试化合物对HDAC1抑制活性，结果如表2所示。
表2：本发明化合物体外HDAC1活性筛选试验结果
化合物编号 IC 50(μM) 化合物编号 IC 50(μM)
化合物1的盐酸盐 0.049 化合物36的盐酸盐 0.961
化合物2的盐酸盐 0.069 化合物37的盐酸盐 0.228
化合物3的盐酸盐 0.206 化合物39的盐酸盐 0.362
化合物4的盐酸盐 0.134 化合物40的盐酸盐 0.404
化合物5的盐酸盐 0.243 化合物41的盐酸盐 0.264
化合物6的盐酸盐 0.058 化合物42的盐酸盐 0.477
化合物7的盐酸盐 0.172 化合物44的盐酸盐 1.440
化合物8的盐酸盐 0.578 化合物45的盐酸盐 0.218
化合物9的盐酸盐 0.164 化合物46的盐酸盐 0.211
化合物10的盐酸盐 0.169 化合物52的盐酸盐 1.730
化合物11的盐酸盐 0.060 化合物55的盐酸盐 0.020
化合物12的盐酸盐 0.240 化合物57的盐酸盐 1.148
化合物13的盐酸盐 0.235 化合物58的盐酸盐 0.163
化合物14的盐酸盐 0.121 化合物61的盐酸盐 0.911
化合物15的盐酸盐 0.205 化合物62的盐酸盐 0.281
化合物16的盐酸盐 0.184 化合物63的盐酸盐 0.461
化合物17的盐酸盐 0.237 化合物66的盐酸盐 1.354
化合物18的盐酸盐 0.152 化合物67的盐酸盐 0.517
化合物19的盐酸盐 0.205 化合物68的盐酸盐 0.574
化合物20的盐酸盐 0.162 化合物69的盐酸盐 0.525
化合物21的盐酸盐 0.073 化合物70的盐酸盐 0.318
化合物22的盐酸盐 0.111 化合物71的盐酸盐 0.211
化合物23的盐酸盐 0.192 化合物72的盐酸盐 0.488
化合物24的盐酸盐 0.167 化合物73的盐酸盐 0.161
化合物25的盐酸盐 0.216 化合物76的盐酸盐 1.642
化合物26的盐酸盐 0.269 化合物77的盐酸盐 0.0937
化合物27的盐酸盐 0.142 化合物78的盐酸盐 0.546
化合物28的盐酸盐 0.732 化合物79的盐酸盐 0.0973
化合物29的盐酸盐 0.109 化合物82的盐酸盐 0.686
化合物30的盐酸盐 0.053 化合物83的盐酸盐 0.571
化合物31的盐酸盐 0.050 化合物84的盐酸盐 0.431
化合物32的盐酸盐 0.088 化合物85的盐酸盐 0.274
化合物33的三氟乙酸盐 0.284 化合物86的盐酸盐 0.211
化合物34的盐酸盐 0.109    
化合物35的盐酸盐 0.280    
结论：本发明化合物对HDAC1抑制活性明显。
实验例3：对MCF-7细胞增殖抑制活性评价
实验目的：检测待测化合物对MCF-7细胞增殖抑制活性。
实验材料：MEM培养基，胎牛血清，盘尼西林/链霉素抗生素购自维森特。CellTiter-Glo试剂(细胞活率化学发光检测试剂)购自Promega。MCF-7细胞系购自南京科佰生命科技有限公司。Nivo多标记分析仪(PerkinElmer)。
实验方法：将MCF-7细胞种于白色384孔板中，40μL细胞悬液每孔，其中包含1000个MCF7细胞。细胞板置于二氧化碳培养箱中过夜培养。将待测化合物用排枪进行3倍稀释至第10个浓度，即从2mM稀释至101.6nM，设置双复孔实验。向中间板中加入78μL培养基，再按照对应位置，转移2μL每孔的梯度稀释化合物至中间板，混匀后转移10μL每孔到细胞板中。转移到细胞板中的化合物浓度范围是10μM至0.508nM。细胞板置于二氧化碳培养箱中培养3天。另准备一块细胞板，在加药当天读取信号值作为最大值(下面方程式中Max值)参与数据分析。读数时去掉培养板培养基，向此细胞板每孔加入10μL细胞活率化学发光检测试剂，室温孵育10分钟使发光信号稳定。采用多标记分析仪读数。
数据分析：利用方程式(Sample-Min)/(Max-Min)*100％将原始数据换算成抑制率，IC 50的值即可通过四参数进行曲线拟合得出(GraphPad Prism中"log(inhibitor)vs.response--Variable slope"模式得出)。
测试化合物对MCF-7细胞增殖抑制活性，结果如表3所示。
表3：本发明化合物对MCF-7细胞增殖抑制试验结果
化合物编号 IC 50(μM) 化合物编号 IC 50(μM)
化合物1的盐酸盐 0.68 化合物42的盐酸盐 1.75
化合物2的盐酸盐 1.34 化合物43的盐酸盐 2.13
化合物3的盐酸盐 5.75 化合物46的盐酸盐 3.09
化合物4的盐酸盐 1.29 化合物50的盐酸盐 5.00
化合物5的盐酸盐 2.34 化合物53的盐酸盐 2.99
化合物6的盐酸盐 3.17 化合物54的盐酸盐 3.18
化合物7的盐酸盐 2.15 化合物55的盐酸盐 1.41
化合物8的盐酸盐 5.15 化合物57的盐酸盐 4.07
化合物9的盐酸盐 2.15 化合物58的盐酸盐 2.45
化合物10的盐酸盐 1.57 化合物62的盐酸盐 2.75
化合物11的盐酸盐 2.42 化合物63的盐酸盐 3.64
化合物13的盐酸盐 1.59 化合物66的盐酸盐 4.52
化合物15的盐酸盐 3.95 化合物67的盐酸盐 3.97
化合物17的盐酸盐 2.61 化合物68的盐酸盐 2.57
化合物20的盐酸盐 3.30 化合物69的盐酸盐 2.68
化合物24的盐酸盐 2.56 化合物70的盐酸盐 4.37
化合物26的盐酸盐 2.00 化合物71的盐酸盐 3.25
化合物27的盐酸盐 4.71 化合物72的盐酸盐 5.05
化合物29的盐酸盐 1.86 化合物73的盐酸盐 2.06
化合物30的盐酸盐 3.13 化合物76的盐酸盐 3.95
化合物32的盐酸盐 1.20 化合物77的盐酸盐 1.58
化合物34的盐酸盐 1.64 化合物78的盐酸盐 3.84
化合物35的盐酸盐 2.56 化合物79的盐酸盐 1.15
化合物36的盐酸盐 2.88 化合物83的盐酸盐 3.87
化合物37的盐酸盐 1.33 化合物86的盐酸盐 1.93
化合物39的盐酸盐 1.58 化合物87的盐酸盐 2.49
化合物40的盐酸盐 1.55    
化合物41的盐酸盐 1.47    
结论：本发明化合物对MCF-7细胞增殖抑制活性明显。
实验例4：对MDA-MB-231细胞增殖抑制活性评价
实验目的：检测待测化合物对MDA-MB-231细胞增殖抑制活性。
实验材料：DMEM培养基，胎牛血清，盘尼西林/链霉素抗生素购自维森特。CellTiter-Glo试剂(细胞活率化学发光检测试剂)购自Promega。MDA-MB-231细胞系购自南京科佰生命科技有限公司。Nivo多标记分析仪(PerkinElmer)。
实验方法：将MDA-MB-231细胞种于白色384孔板中，40μL细胞悬液每孔，其中包含500个MDA-MB-231细胞。细胞板置于二氧化碳培养箱中过夜培养。将待测化合物用排枪进行3倍稀释至第10个浓度，即从2mM稀释至101.6nM，设置双复孔实验。向中间板中加入78μL培养基，再按照对应位置，转移2μL每孔的梯度稀释化合物至中间板，混匀后转移10μL每孔到细胞板中。转移到细胞板中的化合物浓度范围是10μM至0.508nM。细胞板置于二氧化碳培养箱中培养3天。另准备一块细胞板，在加药当天读取信号值作为最大值(下面方程式中Max值)参与数据分析。读数时去掉培养板培养基，向此细胞板每孔加入10μL细胞活率化学发光检测试剂，室温孵育10分钟使发光信号稳定。采用多标记分析仪读数。
数据分析：
利用方程式(Sample-Min)/(Max-Min)*100％将原始数据换算成抑制率，IC 50的值即可通过四参数进行曲线拟合得出(GraphPad Prism中"log(inhibitor)vs.response--Variable slope"模式得出)。
测试化合物对MDA-MB-231细胞增殖抑制活性，结果如表4所示。
表4：本发明化合物对MDA-MB-231细胞增殖抑制试验结果
化合物编号 IC 50(μM) 化合物编号 IC 50(μM)
化合物1的盐酸盐 0.83 化合物53的盐酸盐 0.76
化合物2的盐酸盐 0.52 化合物54的盐酸盐 1.11
化合物4的盐酸盐 0.69 化合物55的盐酸盐 0.56
化合物6的盐酸盐 2.83 化合物56的盐酸盐 3.77
化合物7的盐酸盐 1.59 化合物57的盐酸盐 1.68
化合物9的盐酸盐 1.79 化合物58的盐酸盐 1.12
化合物10的盐酸盐 2.64 化合物59的盐酸盐 2.16
化合物11的盐酸盐 0.75 化合物61的盐酸盐 2.12
化合物13的盐酸盐 0.35 化合物62的盐酸盐 1.13
化合物20的盐酸盐 0.69 化合物63的盐酸盐 1.69
化合物24的盐酸盐 1.31 化合物64的盐酸盐 1.22
化合物26的盐酸盐 2.61 化合物66的盐酸盐 2.45
化合物29的盐酸盐 0.99 化合物67的盐酸盐 1.51
化合物30的盐酸盐 0.72 化合物68的盐酸盐 0.88
化合物34的盐酸盐 0.71 化合物69的盐酸盐 0.93
化合物35的盐酸盐 1.75 化合物70的盐酸盐 3.33
化合物36的盐酸盐 1.87 化合物71的盐酸盐 3.18
化合物37的盐酸盐 0.99 化合物72的盐酸盐 3.93
化合物39的盐酸盐 1.09 化合物73的盐酸盐 1.48
化合物40的盐酸盐 1.13 化合物76的盐酸盐 3.92
化合物41的盐酸盐 0.77 化合物77的盐酸盐 0.74
化合物42的盐酸盐 1.14 化合物78的盐酸盐 1.71
化合物43的盐酸盐 1.15 化合物79的盐酸盐 0.49
化合物45的盐酸盐 4.16 化合物80的盐酸盐 3.27
化合物46的盐酸盐 4.03 化合物86的盐酸盐 4.22
化合物47的盐酸盐 2.97 化合物87的盐酸盐 3.86
化合物48的盐酸盐 3.52 化合物91 2.16
化合物49的盐酸盐 2.96 化合物92 3.52
化合物50的盐酸盐 2.71 化合物93 2.80
化合物51的盐酸盐 5.06 化合物94 1.57
化合物52的盐酸盐 4.86    
结论：本发明化合物对MDA-MB-231细胞增殖抑制活性明显
实验例5：对BT-474细胞增殖抑制活性评价
实验目的：检测待测化合物对BT-474细胞增殖抑制活性。
实验材料：Hybri-Care Medium购自ATCC，胎牛血清，盘尼西林/链霉素抗生素购自维森特。CellTiter-Glo试剂(细胞活率化学发光检测试剂)购自Promega。BT-474细胞系购自南京科佰生命科技有限公司。Nivo多标记分析仪(PerkinElmer)。
实验方法：将BT-474细胞种于白色384孔板中，40μL细胞悬液每孔，其中包含1000个BT-474细胞。细胞板置于二氧化碳培养箱中过夜培养。将待测化合物用排枪进行3倍稀释至第10个浓度，即从2mM稀释至101.6nM，设置双复孔实验。向中间板中加入78μL培养基，再按照对应位置，转移2μL每孔的梯度稀释化合物至中间板，混匀后转移10μL每孔到细胞板中。转移到细胞板中的化合物浓度范围是10μM至0.508nM。细胞板置于二氧化碳培养箱中培养3天。另准备一块细胞板，在加药当天读取信号值作为最大值(下面方程式中Max值)参与数据分析。读数时去掉培养板培养基，向此细胞板每孔加入10μL细胞活率化学发光检测试剂，室温孵育10分钟使发光信号稳定。采用多标记分析仪读数。
数据分析：利用方程式(Sample-Min)/(Max-Min)*100％将原始数据换算成抑制率，IC 50的值即可通过四参数进行曲线拟合得出(GraphPad Prism中"log(inhibitor)vs.response--Variable slope"模式得出)。
测试化合物对BT-474细胞增殖抑制活性，结果如表5所示。
表5：本发明化合物对BT-474细胞增殖抑制试验结果
化合物编号 IC 50(μM) 化合物编号 IC 50(μM)
化合物2的盐酸盐 0.88 化合物58的盐酸盐 1.46
化合物13的盐酸盐 0.50 化合物62的盐酸盐 1.69
化合物34的盐酸盐 0.85 化合物63的盐酸盐 3.13
化合物37的盐酸盐 1.19 化合物66的盐酸盐 4.26
化合物43的盐酸盐 1.41 化合物67的盐酸盐 2.32
化合物44的盐酸盐 3.17 化合物68的盐酸盐 3.82
化合物46的盐酸盐 1.57 化合物69的盐酸盐 1.78
化合物47的盐酸盐 3.09 化合物73的盐酸盐 2.36
化合物48的盐酸盐 3.23 化合物77的盐酸盐 1.29
化合物51的盐酸盐 3.80 化合物78的盐酸盐 3.64
化合物53的盐酸盐 1.65 化合物79的盐酸盐 1.47
化合物54的盐酸盐 1.38    
结论：本发明化合物对BT-474细胞增殖抑制活性明显。
实验例6：化合物药代动力学评价
实验例6-1：化合物小鼠药代动力学评价
实验目的：
测试化合物在CD-1小鼠体内的药代动力学
实验材料：
CD-1小鼠(雄性,6～9周龄,上海西普尔-必凯实验动物有限公司)
实验操作：
以标准方案测试化合物静脉注射及口服给药后的啮齿类动物药代特征,实验中候选化合物配成澄清溶液,给予小鼠单次静脉注射及口服给药。静注及口服溶媒为5％DMSO,5％Solutol,90％水配成的混合溶媒。该项目使用四只雄性CD-1小鼠,两只小鼠进行静脉注射给药,给药剂量为1mg/kg或5mg/kg,采集给药后 0.0833,0.25,0.5,1,2,4,6,8,24h的全血,另外两只小鼠口服灌胃给药,给药剂量为2mg/kg或20mg/kg,采集给药后0.25、0.5,1,2,4,6,8,24h的全血。24小时内各时间点的全血样品在4℃条件经3200g离心10分钟,分离取上清血浆样品,存至-70±10℃直至进行样品前处理和分析。取一定量的血浆加入20倍体积含内标的乙腈溶液沉淀蛋白,离心取上清液转移到96孔板再离心取上清后直接进样,以LC-MS/MS分析方法定量分析血药浓度,并计算药代参数,如达峰浓度(Cmax),清除率(CL),半衰期(T1/2),表观分布容积(Vdss),药时曲线下面积(AUC0-last),生物利用度(F)等。
实验结果如表6所示：
表6：小鼠药代动力学测试结果
Figure PCTCN2022104706-appb-000271
结论：本发明化合物在小鼠体内具有良好的药代动力学性质,包括良好的口服生物利用度,口服暴露量,半衰期和清除率等。
实验例6-2：化合物大鼠药代动力学评价
实验目的：
测试化合物在SD大鼠体内的药代动力学
实验材料：
SD大鼠(雄性,6～9周龄,北京维通利华实验动物技术有限公司)
实验操作：
以标准方案测试化合物静脉注射及口服给药后的啮齿类动物药代特征,实验中候选化合物配成澄清溶液,给予大鼠单次静脉注射及口服给药。静注及口服溶媒为5％DMSO,5％Solutol,90％水配成的混合溶媒。该项目使用四只雄性SD大鼠,两只大鼠进行静脉注射给药,给药剂量为3mg/kg,采集给药后0.0833,0.25,0.5,1,2,4,6,8,24h的全血,另外两只大鼠口服灌胃给药,给药剂量为10mg/kg,采集给药后0.25、0.5,1,2,4,6,8,24h的全血。24小时内各时间点的全血样品在4℃条件经3200g离心10分钟,分离取上清血浆样品,存 至-70±10℃直至进行样品前处理和分析。取一定量的血浆加入20倍体积含内标的乙腈溶液沉淀蛋白,离心取上清液转移到96孔板再离心取上清后直接进样,以LC-MS/MS分析方法定量分析血药浓度,并计算药代参数,如达峰浓度(Cmax),清除率(CL),半衰期(T1/2),表观分布容积(Vdss),药时曲线下面积(AUC0-last),生物利用度(F)等。
实验结果如表7所示：
表7：大鼠药代动力学测试结果
Figure PCTCN2022104706-appb-000272
结论：本发明化合物在大鼠体内具有良好的药代动力学性质,包括良好的口服生物利用度,口服暴露量,半衰期和清除率等。

Claims (19)

  1. 式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐，
    Figure PCTCN2022104706-appb-100001
    其中，
    环A为
    Figure PCTCN2022104706-appb-100002
    T 1、T 2、T 3和T 4分别独立地为CH或N；
    T 5为CH或N；
    T 6为CH或N；
    D 1为单键、-CH 2-或-CH 2-CH 2-；
    D 2为-CH 2-、-CH 2-CH 2-、-CH 2-CH 2-CH 2-、-O-CH 2-CH 2-或-S-CH 2-CH 2-；
    L 1为
    Figure PCTCN2022104706-appb-100003
    Figure PCTCN2022104706-appb-100004
    L 11为单键或-CH 2-，且L 11与环A上的一个环原子相连；
    L 12为单键、-O-或-NH-；
    L 2为单键、-CH 2-、-C(＝O)-、-CH 2-C(＝O)-或-CH 2-C(＝O)-NH-；
    R 11、R 12、R 13和R 14分别独立地为H、F、Cl、Br、I、C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、苯基或5-6元杂芳基，其中所述C 1-3烷基、C 1-3烷氧基、苯基和5-6元杂芳基分别独立地任选地被1、2或3个R a取代；
    R 2分别独立地为H、F、Cl、Br、I、CN、COOH、OH、NH 2、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基，其中所述C 1-3烷基和C 1-3烷氧基分别独立地任选地被1、2或3个R b取代；
    R 3为H、-CH 2-C(＝O)-吗啉基或-CH 2-环丙基；
    R 4为H、COOH、C 1-6烷基、C 3-6环烷基、3-6元杂环烷基、5-6元杂芳基或苯基，其中所述C 1-6烷基、C 3-6环烷基、3-6元杂环烷基、5-6元杂芳基和苯基分别独立地任选地被1、2或3个R c取代；
    R 5分别独立地为H或C 1-3烷基；
    或者，连接在同一个C原子上的两个R 5与其所连接的C原子一起形成一个C 3-6元环烷基；
    R 6分别独立地为H或C 1-3烷基；
    R a和R b分别独立地为F、Cl、Br、I、OH或NH 2；
    R c分别独立地为F、Cl、Br、I、CN、COOH、C 1-3烷基或C 1-3烷氧基，其中所述C 1-3烷基和C 1-3烷氧基分别独立地任选地被1、2或3个R取代；
    R分别独立地为F、Cl、Br、I、OH或NH 2；
    m为1、2、3或4；
    所述3-6元杂环烷基和5-6元杂芳基中的“杂”表示1、2、3或4个分别独立地选自-O-、-NH-、-S-、S(＝O) 2和N的杂原子或杂原子团。
  2. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R c分别独立地为F、Cl、Br、I、CN、COOH、CH 3、CF 3、
    Figure PCTCN2022104706-appb-100005
    或-OCH 3。
  3. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R 11、R 12、R 13和R 14分别独立地为H、F、Cl、Br或I。
  4. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R 2分别独立地为H、F、Cl、Br、I、CN、COOH、OH、NH 2、-OCH 3、-CF 3、-OCHF 2或-OCF 3。
  5. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R 3为H、
    Figure PCTCN2022104706-appb-100006
  6. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R 4为H、COOH、CH 3、
    Figure PCTCN2022104706-appb-100007
    Figure PCTCN2022104706-appb-100008
    Figure PCTCN2022104706-appb-100009
    其中所述CH 3、
    Figure PCTCN2022104706-appb-100010
    Figure PCTCN2022104706-appb-100011
    分别独立地任选地被1、2或3个R c取代。
  7. 根据权利要求6所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R 4为H、COOH、CH 3、CF 3、
    Figure PCTCN2022104706-appb-100012
    Figure PCTCN2022104706-appb-100013
  8. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R 5分别独立地为H或CH 3。
  9. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，R 6分别独立地为H或CH 3。
  10. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，环A为
    Figure PCTCN2022104706-appb-100014
    Figure PCTCN2022104706-appb-100015
  11. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，结构单元
    Figure PCTCN2022104706-appb-100016
    为
    Figure PCTCN2022104706-appb-100017
    Figure PCTCN2022104706-appb-100018
  12. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，结构单元
    Figure PCTCN2022104706-appb-100019
    为
    Figure PCTCN2022104706-appb-100020
    Figure PCTCN2022104706-appb-100021
    Figure PCTCN2022104706-appb-100022
  13. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，其中，L 1为
    Figure PCTCN2022104706-appb-100023
    Figure PCTCN2022104706-appb-100024
  14. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，
    Figure PCTCN2022104706-appb-100025
    其中，m、T 1、T 2、T 3、T 4、T 5、T 6、D 1、D 2、R 11、R 12、R 13、R 14、R 2、R 3、R 4、L 1和L 2如权利要求1所定义。
  15. 根据权利要求1所述的化合物及其药学上可接受的盐，
    Figure PCTCN2022104706-appb-100026
    其中，m、T 1、T 2、T 3、T 4、T 6、D 2、R 11、R 12、R 13、R 14、R 2、R 3、R 4、L 1和L 2如权利要求1所定义。
  16. 下列化合物或其药学上可接受的盐，
    Figure PCTCN2022104706-appb-100027
    Figure PCTCN2022104706-appb-100028
    Figure PCTCN2022104706-appb-100029
    Figure PCTCN2022104706-appb-100030
    Figure PCTCN2022104706-appb-100031
    Figure PCTCN2022104706-appb-100032
  17. 根据权利要求16所述的化合物及其药学上可接受的盐，其选自
    Figure PCTCN2022104706-appb-100033
    Figure PCTCN2022104706-appb-100034
    Figure PCTCN2022104706-appb-100035
    Figure PCTCN2022104706-appb-100036
    Figure PCTCN2022104706-appb-100037
    Figure PCTCN2022104706-appb-100038
  18. 根据权利要求17所述的化合物及其药学上可接受的盐，其选自
    Figure PCTCN2022104706-appb-100039
    Figure PCTCN2022104706-appb-100040
  19. 根据权利要求1-18任意一项所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述的盐为盐酸盐或三氟乙酸盐。
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