WO2023224086A1 - エクオールを含む食品組成物およびその製造方法 - Google Patents

エクオールを含む食品組成物およびその製造方法 Download PDF

Info

Publication number
WO2023224086A1
WO2023224086A1 PCT/JP2023/018548 JP2023018548W WO2023224086A1 WO 2023224086 A1 WO2023224086 A1 WO 2023224086A1 JP 2023018548 W JP2023018548 W JP 2023018548W WO 2023224086 A1 WO2023224086 A1 WO 2023224086A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
acid
equol
food composition
group
adjusted
Prior art date
Application number
PCT/JP2023/018548
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
和也 三橋
Original Assignee
株式会社ダイセル
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 株式会社ダイセル filed Critical 株式会社ダイセル
Priority to JP2023561223A priority Critical patent/JP7463627B1/ja
Publication of WO2023224086A1 publication Critical patent/WO2023224086A1/ja
Priority to JP2024049307A priority patent/JP2024075746A/ja

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/02—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group
    • C12P7/22—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a hydroxy group aromatic

Definitions

  • the present invention relates to a food composition containing equol, which is a pH-adjusted liquid food composition or a dried product thereof.
  • the present invention also relates to a method for producing the food composition.
  • Isoflavones which are abundant in leguminous plants such as soybeans and kudzu, are a class of polyphenols, and are flavonoids that have isoflavones as their basic skeleton. Recent research has shown that isoflavones have female hormone effects (estrogen) and antioxidant effects, and that ingesting isoflavones can lead to breast cancer, prostate cancer, osteoporosis, hypercholesterolemia, heart disease, menopausal symptoms, etc. It has been shown that it has a preventive effect.
  • Isoflavones exist, for example, in soybeans in the form of glycosides covalently bonded to sugars, such as daidzin, glycitin, and genistin, and in very small amounts in the form of aglycones. Only. Some of these glycosides are malonylated or acetylated. When these glycosides enter the human or animal body, they are converted into daidzein, glycitein, and genistein, respectively, by the action of digestive enzymes or ⁇ -glucosidase, an enzyme produced by intestinal bacteria. Become. Furthermore, it is known that daidzein is enzymatically converted to O-desmethylangolensin (O-DMA) or equol via dihydrodaidzein by the action of intestinal bacteria. It is being
  • Equol is known to have the highest estrogenic activity among these metabolites.
  • isoflavones there are individual differences in the metabolism of isoflavones, and as mentioned above, few people have intestinal bacteria that have the ability to ferment daidzein and produce equol, and the prevalence rate among Japanese people is approximately It has been revealed that this rate is 50%, and about 30% for Westerners. Therefore, there has been a problem in that people who do not have equol-producing bacteria cannot produce equol in their bodies even if they ingest leguminous foods such as soybeans.
  • Patent Documents 1 to 4 In order to overcome these problems, attempts have been made to produce equol in vitro using anaerobic microorganisms such as lactic acid bacteria (Patent Documents 1 to 4). A method to efficiently recover the produced equol is being sought.
  • Patent Document 5 aims to provide an equol-producing microorganism-containing composition that contains equol-producing microorganisms in a viable state that maintain equol-producing ability, and can stably maintain equol-producing ability even after storage, and uses pH control.
  • Patent Document 5 discloses that a pH adjuster may be added for this purpose, but does not disclose a specific pH adjuster. Further, the pH was adjusted in the anaerobic fermentation process, and the preferred pH was 4.6 or higher.
  • the above food composition which is a pH-adjusted liquid food composition containing equol, or a dried product thereof.
  • the pH is preferably 3 to 5, preferably 3 to 4.
  • the composition has its pH adjusted with one selected from the group consisting of organic acids and inorganic acids,
  • the organic acid is at least one selected from carbonic acid, hydrogen carbonate, citric acid, succinic acid, fumaric acid, lactic acid, gluconic acid, acetic acid, malic acid, ascorbic acid and benzoic acid
  • the inorganic acid is at least one selected from the group consisting of hydrochloric acid, sulfuric acid, and phosphoric acid.
  • the composition preferably contains at least one selected from the group of inorganic acids consisting of hydrochloric acid, sulfuric acid, and phosphoric acid.
  • the pH is preferably 7 to 11, preferably 10 to 11.
  • the pH of the composition is adjusted with one selected from the group consisting of alkali metal hydroxides and alkaline earth metal hydroxides. good.
  • the pH of the composition is adjusted with one selected from the group consisting of sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide, calcium oxide, and magnesium hydroxide. It's good to have one.
  • a method for producing a liquid food composition comprising: obtaining a pH-adjusted liquid food composition containing equol.
  • the adjusted pH is preferably 3 to 5, preferably 3 to 4.
  • the pH adjuster has one selected from the group consisting of organic acids and inorganic acids,
  • the organic acid is at least one selected from carbonic acid, hydrogen carbonate, citric acid, succinic acid, fumaric acid, lactic acid, gluconic acid, acetic acid, malic acid, ascorbic acid and benzoic acid,
  • the inorganic acid is at least one selected from the group consisting of hydrochloric acid, sulfuric acid, and phosphoric acid.
  • the pH adjuster has at least one kind selected from the inorganic acid group consisting of hydrochloric acid, sulfuric acid, and phosphoric acid.
  • the adjusted pH is preferably 7 to 11, preferably 10 to 11.
  • the pH adjuster preferably has one selected from the group consisting of alkali metal hydroxides and alkaline earth metal hydroxides.
  • the pH adjuster is preferably one selected from the group consisting of sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide, calcium oxide, and magnesium hydroxide.
  • the present invention it is possible to provide an equol-containing food composition that can further prevent microbial contamination and a method for producing the same. Moreover, the present invention can provide a method for producing an equol-containing food composition, which efficiently recovers produced equol in addition to or in addition to the above-described effects.
  • the present application provides a method for producing a liquid food composition, a method for producing a powdered food composition, and a powdered food composition that is a liquid food composition and a dried product thereof.
  • a method for producing a liquid food composition and a method for producing a powdered food composition will be explained, and then a powdered food composition that is a liquid food composition and a dried product thereof will be explained.
  • the method for producing a liquid food composition of the present invention includes: (A) a step of culturing at least one equol raw material selected from the group consisting of daidzein glycosides, daidzein, and dihydrodaidzein with a microorganism that assimilates the equol raw material and produces equol; and (B) the culturing step.
  • Step (A) is a step of culturing at least one equol raw material selected from the group consisting of daidzein glycosides, daidzein, and dihydrodaidzein with a microorganism that assimilates the equol raw material and produces equol.
  • the conditions of the culture step are not particularly limited as long as equol can be produced. For example, conventionally known conditions can be used, but the conditions are not limited thereto.
  • the equol raw material used in the method of the present invention can be in any form as long as it can literally be used as a raw material for equol.
  • the equol raw material may be in any form as long as it contains at least one selected from the group consisting of daidzein glycosides, daidzein, and dihydrodaidzein.
  • daidzein glycosides themselves, daidzein itself, or dihydrodaidzein itself, and products containing them, such as soybeans, soybean processed products, soybean hypocotyls, soybean hypocotyl processed products, such as soybean extracts, soybean embryos.
  • Examples include cox extract and purified soybean hypocotyl extract, and specifically, commercially available isoflavones may be used.
  • the method of the present invention uses microorganisms that have the ability to assimilate equol raw materials and produce equol.
  • the "ability to assimilate equol raw materials and produce equol” is sometimes simply referred to as "equol production ability" in this specification.
  • the microorganism having the ability to produce equol used in the method of the present invention is not particularly limited as long as it is a microorganism having the ability to produce equol from the above-mentioned equol raw material. Note that the equol raw material is determined in relation to the "equol production ability" of the microorganism.
  • a certain microorganism A does not have "equol-producing ability" for daidzein glycosides but has "equol-producing ability” for daidzein, the equol raw material of the microorganism A will be "daidzein.”
  • a step of converting daidzein glycosides into daidzein may be included before the step (A).
  • ethyl acetate For example, add ethyl acetate to the culture solution, stir vigorously, centrifuge, and remove the ethyl acetate layer. If necessary, the same operation can be performed on the same culture solution several times, and the ethyl acetate layers can be combined to obtain an equol extract.
  • This extract is concentrated to dryness using an evaporator under reduced pressure, and then dissolved in methanol. This can be filtered using a membrane such as a polytetrafluoroethylene (PTFE) membrane to remove insoluble materials, and the resultant sample can be used as a high performance liquid chromatography measurement sample. Examples of conditions for high performance liquid chromatography include, but are not limited to, the following.
  • microorganisms having the ability to produce equol include, but are not limited to, microorganisms classified into the following genera. Genus Adlercreutzia Genus Bacteroides Genus Bifidobacterium Genus Clostridium Genus Eggerthella Genus Enterococcus Genus Enterorhabdus Genus Eubacterium Genus Finegoldia Genus Lactobacillus Genus Lactococcus Genus Paraeggerthella Genus Pediococcus Genus Proteus Genus Sharpea Genus Slackia Genus Streptococcus Genus Veillonella
  • microorganisms having the ability to produce equol include, but are not limited to, the following microorganisms.
  • Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens Bacteroides ovatus Bifidobacterium breve Bifidobacterium longum Clostridium sp. Eggerthella sp. Enterococcus faecalis Enterococcus faecium Enterorhabdus mucosicola Eubacterium sp.
  • microorganisms classified in the family Eggerthellaceae for example, microorganisms classified in the family Eggerthellaceae, microorganisms classified in the family Bifidobacteriaceae, microorganisms classified in the family Clostridiaceae, and microorganisms classified in the family Clostridiaceae.
  • microorganisms classified in the family Coriobacteriaceae microorganisms classified in the family Enterococceae
  • microorganisms classified in the family Eubacteriaceae and microorganisms classified in the family Morganellaceae.
  • Microorganisms microorganisms classified in the family Peptoniphilaceae, microorganisms classified in the family Lactobacillaceae, microorganisms classified in the family Streptococceae, microorganisms classified in the family Veillonellaceae. Examples include classified microorganisms and related microorganisms.
  • Adlercreutzia Bacteroides, Bifidobacterium, Clostridium, Coriobacterium, Egasella, Enterococcus, Eubacterium, Finegordia, Lactobacillus, Lactococcus
  • the microorganisms are preferably classified into the genus Paraegacella, Pediococcus, Proteus, Sharpea, Thracia, Streptococcus, Veilonea, or related microorganisms thereof. More preferably, Adrecrautia aequorifaciens subsp. ceratus, Adrecrautia aequorifaciens subsp.
  • aequorifaciens Bacteroides obatus, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium longum , Clostridium sp., Egasella sp., Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Enterorhabdus mucosicola, Eubacterium sp., Finegordia magna, Lactobacillus fermentum, Lactobacillus intestinalis, Lactobacillus - Mucosae, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus sp., Lactococcus garubiae, Lactococcus sp., Paraegasera sp., Pediococcus pentosaceus, Proteus mirabilis, Sharpea azabu Preferred are Thracia ensis, Thracia aequor
  • any of the microorganisms described below or related bacteria having similar species properties to these microorganisms can be particularly cited as more preferable anaerobic microorganisms.
  • Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus DSM 18785 strain
  • Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens DSM 19450 strain
  • anaerobic microorganism can be obtained from the depository institution indicated by its deposit number. Each accession number indicates that the anaerobic microorganism has been deposited with the following depositary institution.
  • FERM International Patent Organism Depositary http://unit.aist.go.jp/pod/ci/index.html
  • DSM German Collection of Microorganisms and Cell Cultures http://www.dsmz.de/ KCCM Korean Culture Center of Microorganisms
  • anaerobic microorganisms capable of producing equol are cultured under conditions suitable for producing equol.
  • conditions suitable for equol production refer to conditions that maintain the survival and activity of anaerobic microorganisms having equol production activity. More specifically, it means that gas phase conditions (anaerobic conditions) that allow the survival of anaerobic microorganisms are maintained, and nutrients are provided to support the activity and proliferation of the anaerobic microorganisms.
  • gas phase conditions anaerobic conditions
  • Various medium compositions suitable for the survival of anaerobic microorganisms are known.
  • an appropriate medium composition for the above-mentioned anaerobic microorganisms capable of producing equol for example, BHI medium manufactured by Difco, the medium used in Examples, etc. can be used, but the medium is not limited thereto.
  • a water-soluble organic substance can be added to the culture medium used in the present invention as a carbon source.
  • water-soluble organic substances include, but are not limited to, the following compounds.
  • Sugars such as sorbose, fructose, glucose
  • Alcohols such as methanol
  • Organic acids such as valeric acid, butyric acid, propionic acid, acetic acid, and formic acid, or salts thereof.
  • the concentration of organic matter added to the medium as a carbon source can be adjusted as appropriate to efficiently grow anaerobic microorganisms in the medium.
  • a nitrogen source can be added to the medium.
  • various nitrogen compounds that can be used in normal fermentation can be used as the nitrogen source.
  • Preferred inorganic nitrogen sources are ammonium salts and nitrates. More preferred inorganic nitrogen sources are ammonium sulfate, ammonium chloride, ammonium phosphate, ammonium hydrogen phosphate, potassium nitrate and sodium nitrate.
  • preferred organic nitrogen sources include amino acids, yeast extract, peptones, meat extract, liver extract, and digested serum powder. More preferred organic nitrogen sources are arginine, cysteine, cystine, citrulline, lysine, yeast extract, and peptones.
  • organic or inorganic substances suitable for producing equol can also be added to the medium.
  • the growth and activity of anaerobic microorganisms can be enhanced in some cases by adding cofactors such as vitamins and inorganic compounds such as various salts to the culture medium.
  • cofactors such as vitamins and inorganic compounds such as various salts.
  • examples of microbial growth cofactors derived from inorganic compounds, vitamins, and animals and plants include the following.
  • the medium can be liquid, semi-solid, or solid.
  • a preferred medium form is a liquid medium.
  • the medium used in the present invention can contain dextrins. If anaerobic microorganisms are cultured in a medium containing dextrins, a liquid containing equol and dextrins can be prepared without contacting the culture with dextrins again after culturing. Dextrins can be added to the medium before or during the cultivation of the microorganism.
  • the medium used in the present invention can contain an antifoaming agent, preferably soybean oil, more preferably soybean oil containing vitamin E.
  • microorganisms particularly anaerobic microorganisms
  • a continuous fermentation system that can continuously supply a medium and substrate gas and has a mechanism for recovering the culture can also be used.
  • anaerobic microorganisms when using anaerobic microorganisms, it is preferable to prevent oxygen from entering the fermenter.
  • a commonly used fermenter can be used as is.
  • An anaerobic atmosphere can be created by replacing oxygen mixed into the fermenter with an inert gas such as nitrogen.
  • a stirrer or the like may be used to sufficiently stir the culture medium.
  • the substrate gas can also be supplied in the form of nanobubbles.
  • microorganisms can be cultured under normal pressure, but when pressurized, the pressurizing conditions are not particularly limited as long as the microorganisms can grow.
  • Preferred pressurizing conditions include, but are not limited to, a range of 0.2 MPa or less, for example, a range of 0.02 to 0.2 MPa.
  • the temperature of the culture tank is not particularly limited, but it is preferably 30°C to 40°C, more preferably 33°C to 38°C.
  • the culture time can be appropriately set depending on the amount of equol produced, the remaining amount of isoflavones, and the like. Examples include, but are not limited to, 8 to 120 hours, preferably 12 to 72 hours, particularly preferably 16 to 60 hours.
  • Step (B) is a step of adjusting the pH by adding a pH adjuster to the equol-containing culture solution obtained in step (A), that is, the culture step.
  • the pH of the culture solution is preferably adjusted to the acid side, and specifically, the pH is preferably adjusted to 3 to 5, preferably 3 to 4.
  • step (B) the pH of the culture solution is preferably adjusted to the alkaline side, and specifically, the pH is preferably adjusted to 7 to 11, preferably 10 to 11.
  • the pH of the culture solution is preferably adjusted to be alkaline in this way, specifically adjusting the pH to 7 to 11, especially 10 to 11, the microorganisms used in step (A) can be dissolved. In turn, the recovery efficiency of equol can be improved.
  • the pH adjuster when adjusting the pH to the alkaline side, preferably has one selected from the group consisting of alkali metal hydroxides and alkaline earth metal hydroxides.
  • examples of the pH adjuster for adjusting to the alkaline side include, but are not limited to, sodium hydroxide, potassium hydroxide, calcium hydroxide, calcium oxide, and magnesium hydroxide.
  • the method of the present invention for obtaining a liquid food composition includes steps other than the above steps (A) and (B).
  • You may. Examples include, but are not limited to, processes for removing microorganisms capable of producing equol, such as a centrifugation process and a membrane filtration process.
  • Step (C) is a step of drying the liquid obtained in the pH adjustment step (B).
  • the drying step can be performed by a conventionally known method. Examples include, but are not limited to, heat drying treatment, spray drying treatment, freeze drying treatment, fluidized bed drying, fluidized bed drying, and the like.
  • the heat drying process can be performed using, for example, a rotary drum dryer, the spray drying process can be performed using, for example, a spray dryer, and the freeze drying process can be performed using a freeze dryer. Any drying method may be used as long as it is capable of drying liquids.
  • the product obtained by drying may be subjected to pulverization treatment, if necessary.
  • the method of the present invention may include steps other than the above steps (A), (B), and (C).
  • steps (B) and before step (C) there is a step of heat-treating the pH-adjusted liquid obtained in step (B), and after the heat treatment step, unnecessary solid content is removed from the obtained liquid.
  • It may include a centrifugation step and/or a filtration step for removal.
  • step (B) when the pH is adjusted to an alkaline side, particularly to a pH of 10 to 11, the centrifugation step is not necessary, which is preferable since the number of steps can be reduced.
  • the composition includes a centrifugation step and/or a filtration step to remove unnecessary solids, a clear liquid can be obtained, resulting in a liquid food composition suitable for serving as a beverage.
  • the present application provides the above-mentioned food composition, which is a pH-adjusted liquid food composition or a dried product thereof, which is a food composition containing equol.
  • the food composition of the present invention can also be obtained by the method described above, but is not limited thereto.
  • liquid food composition When the liquid food composition is on the acid side, its pH is preferably 3 to 5, preferably 3 to 4. Further, when the liquid food composition is on the alkaline side, the pH thereof is preferably 7 to 11, preferably 10 to 11.
  • the present application also provides a dried pH-adjusted liquid food composition comprising equol.
  • pH is defined as follows. That is, if the pH when 50 g of the dried product is dissolved or suspended in 1 L of water is in the above range, that is, on the acid side, the pH is 3 to 5, preferably 3 to 4, or if it is on the alkaline side, The pH is preferably 7-11, preferably 10-11.
  • a glass diaphragm electrode can be suitably used for pH measurement, but a simple one such as a pH test paper can also be used.
  • the pH of the food composition is adjusted with one selected from the group consisting of organic acids and inorganic acids.
  • the food composition of the present invention will have one type selected from the group consisting of organic acids and inorganic acids.
  • organic acids include, but are not limited to, carbonic acid, hydrogen carbonate, citric acid, succinic acid, fumaric acid, lactic acid, gluconic acid, acetic acid, malic acid, ascorbic acid, and benzoic acid.
  • examples of inorganic acids include, but are not limited to, hydrochloric acid, sulfuric acid, and phosphoric acid.
  • Example 1 Preparation of preculture medium
  • Anaerobe Basal Broth manufactured by Thermo Scientific, catalog number CM0957B
  • ABB medium distilled water
  • gas replacement was performed with nitrogen gas, and sterilization was performed at 121° C. for 15 minutes.
  • Enzyme-treated soybean germ extract (containing aglyconized isoflavones: daidzein, glycitein, and genistein) was added to ABB medium containing ⁇ -cyclodextrin to a final concentration of 6 g/L, and 1 L was added to a 2 L fermenter. I noted it. Thereafter, gas replacement was performed with nitrogen gas, and sterilization was performed at 121° C. for 15 minutes.
  • pH adjustment process The main culture fluid in which equol production was confirmed was collected into a glass container, the pH was adjusted, and sterilization was performed by heating. For comparison, sterilization by heating was performed without pH adjustment. 1) By adding citric acid to the main culture solution, the pH was lowered to 3, 4, and 5, and sterilization was performed by heating. 2) Furthermore, by adding hydrochloric acid to the main culture solution, the pH was lowered to 3, 4, and 5, and sterilization was performed by heating. 3) Also, by adding sodium hydroxide to the main culture solution, the pH was raised to 8, 9, 10, and 11, and sterilization was performed by heating.
  • Example 3 In Example 1, the following steps were carried out after the pH adjustment step. (Centrifugal sedimentation separation process) After pH adjustment, the heat-sterilized culture solution was placed in a 40 mL centrifuge tube, insoluble components were precipitated using a centrifuge, and the supernatant was collected.
  • Equol and isoflavones in the filtrate were analyzed by HPLC method. The results are shown in Table 3. Table 3 shows that by making alkaline in the pH adjustment step, the isoflavone concentration can be improved and the recovery rate of isoflavones to the filtrate can be increased. Isoflavones other than equol are also expected to have physiological activity, so increasing the concentration of isoflavones can be expected to have effects that cannot be achieved with equol alone.
  • Example 4 In Example 1, the following drying process was performed after the pH adjustment process. Further, in Example 3, after the filtration step was performed, the following drying step was performed. (drying process) The filtrate was subjected to lyophilization and the powder was collected.
  • Example 6 Example 3 was carried out in the same manner as in Example 3, except that Asaccharobacter celatus DSM 18785 was used instead of Adlercreutzia equolifaciens DSM 19450 strain. The results are shown in Table 6. Table 6 shows that by making alkaline in the pH adjustment step, the isoflavone concentration can be improved and the recovery rate of isoflavones to the filtrate can be increased. Isoflavones other than equol are also expected to have physiological activity, so increasing the concentration of isoflavones can be expected to have effects that cannot be achieved with equol alone.
  • Example 7 (Preparation of preculture medium) Anaerobe Basal Broth (manufactured by Thermo Scientific, catalog number CM0957B) was dissolved in a predetermined amount of distilled water (ABB medium), and 1 L was dispensed into a 2 L pressurized fermenter. Thereafter, gas replacement was performed with nitrogen gas, and sterilization was performed at 121° C. for 15 minutes. (Preparation of main culture medium) After crushing the soybean germ, tap water was added to give a concentration of 100 g/L, and 1 L was dispensed into a 2 L fermenter.
  • ABB medium distilled water
  • enzyme was added and the isoflavone glycosides contained were aglyconized by stirring at 50°C overnight, and then arginine was added to give a concentration of 1 g/L, the gas was replaced with nitrogen gas, and the mixture was stirred at 50°C overnight. Sterilized in 15 minutes.
  • Example 7 was carried out in the same manner as in Example 7, except that Asaccharobacter celatus DSM 18785 was used instead of Adlercreutzia equolifaciens DSM 19450 strain. The results are shown in Table 8. Similarly to Example 7, when soybean germ is used as a raw material, equol and isoflavones are also present in the precipitate, but by making it alkaline in the pH adjustment step, the isoflavone concentration and equol concentration in the precipitate decrease, and the concentration in the supernatant decreases. It was found that the isoflavone concentration and equol concentration were improved, and the recovery rate of isoflavones could be increased.
  • the recovery rate of equol can be increased, and isoflavones other than equol are also expected to have physiological activity, so by increasing the concentration of isoflavones, effects that cannot be achieved with equol alone can be expected.
  • a clear aqueous solution By removing the water-insoluble soybean germ by centrifugation, a clear aqueous solution can be recovered, making it more suitable for beverages.

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本発明は、より微生物汚染を防ぐことのできるエクオール含有食品組成物及びその製造方法を提供する。また、本発明は、産生したエクオールを効率的に回収するエクオール含有食品組成物の製造方法を提供する。本発明は、（Ａ）ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程；及び（Ｂ）前記培養工程で得られたエクオールを含む培養液にｐＨ調整剤を添加しｐＨを調整する工程；を有することによりエクオールを含む液体食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物を得る、液体食品組成物の製造方法などにより得られた食品組成物を提供する。

Description

エクオールを含む食品組成物およびその製造方法
　本発明は、エクオールを含む食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物であるか又はその乾燥物である食品組成物に関する。
　また、本発明は、該食品組成物の製造方法に関する。
　大豆、葛などのマメ科の植物に多く含まれているイソフラボン類はポリフェノールの分類のひとつであり、イソフラボンを基本骨格とするフラボノイドである。近年の調査により、イソフラボン類は女性ホルモン作用（エストロゲン）や抗酸化作用を有し、イソフラボン類を摂取することにより、乳癌、前立腺癌、骨粗しょう症、高コレステロール血症、心疾患、更年期障害などに対して予防効果があることが明らかとなっている。
　イソフラボン類は、たとえば大豆内では、糖と共有結合した配糖体の形、ダイジン(daidzin)、グリシチン（glycitin）、ゲニスチン(genistin)として存在しており、アグリコンの形ではごく少量存在しているのみである。これら配糖体はさらにマロニル化、アセチル化されているものも存在している。これらの配糖体は、ヒトや動物の体内に入ると消化酵素又は腸内細菌の産生する酵素であるβグルコシダーゼ等の働きにより、それぞれダイゼイン（daidzein）、グリシテイン（glycitein）、ゲニステイン（genistein）となる。さらに、ダイゼインは腸内細菌の働きにより、ジヒドロダイゼイン（dihydrodaidzein）を経て、O-デスメチルアンゴレンシン（O-desmethylangolensin：O-DMA）又はエクオール（equol）へと酵素的に変換されることが知られている。
　エクオールは、これらの代謝産物の中で最もエストロゲン活性が高いことが知られている。しかしながら、人間の場合、イソフラボンの代謝には個人差があり、上記のようにダイゼインを発酵させてエクオールを産生する能力を有する腸内細菌を保有する人は少なく、その保有率は日本人で約５割、欧米人で約３割程度であることが明らかとなっている。そのため、エクオール産生菌を保有しない人は、大豆等のマメ科食物を摂取してもエクオールを体内で産生することができないという問題点が存在していた。
　これらの課題を克服するために、乳酸菌等の嫌気性微生物を用いて体外的にエクオールを産生させる試みがなされており（特許文献１～４）、エクオールを効率的に産生させるか、及び／又は産生したエクオールを効率的に回収する方法が模索されている。
　特許文献５は、エクオール産生能が維持されたエクオール産生微生物を生菌の状態で含み、保存後でもエクオール産生能を安定に維持できるエクオール産生微生物含有組成物を提供することを目的とし、ｐＨ制御のためにｐＨ調整剤を加えてもよいことを開示している（特許文献５）が、具体的なｐＨ調整剤について開示していなかった。また、ｐＨの調整は、嫌気発酵工程においてなされたものであり、好適なｐＨについても４．６以上とされていた。
特開２００６－２０４２９６号公報。 特表２００６－５０４４０９号公報。 特開２００８－６１５８４号公報。 特開２０１０－１０４２４１号公報。 特許５７６９４１９号公報。
　そこで、本発明の目的は、より微生物汚染を防ぐことのできるエクオール含有食品組成物及びその製造方法を提供することにある。
　また、本発明の目的は、上記目的の他に、又は上記目的に加えて産生したエクオールを効率的に回収するエクオール含有食品組成物の製造方法を提供することにある。
　上記課題を解決するため、本発明者は、以下の発明を見出した。
　＜１＞　エクオールを含む食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物であるか又はその乾燥物である、上記食品組成物。
　＜２＞　上記＜１＞において、ｐＨが３～５、好ましくは３～４であるのがよい。
　＜３＞　上記＜２＞において、組成物が、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものであって、
　前記有機酸が、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸から選ばれる少なくとも一種であり、
　前記無機酸が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる群から選ばれる少なくとも一種であるのがよい。
　＜４＞　上記＜２＞において、前記組成物が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる無機酸群から選ばれる少なくとも一種を有するのがよい。
　＜５＞　上記＜１＞において、ｐＨが７～１１、好ましくは１０～１１であるのがよい。
　＜６＞　上記＜５＞において、前記組成物が、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものであるのがよい。
　＜７＞　上記＜５＞において、前記組成物が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム、及び水酸化マグネシウムからなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものであるのがよい。
　＜８＞　（Ａ）ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程；及び
　（Ｂ）前記培養工程で得られたエクオールを含む培養液にｐＨ調整剤を添加しｐＨを調整する工程；
を有することによりエクオールを含む液体食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物を得る、液体食品組成物の製造方法。
　＜９＞　（Ａ）ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程；
　（Ｂ）前記培養工程で得られたエクオールを含む培養液にｐＨ調整剤を添加しｐＨを調整する工程；及び
　（Ｃ）ｐＨ調整工程で得られた液を乾燥させる工程；
を有することにより、エクオールを含む粉末状食品組成物であってｐＨが調整された粉末状食品組成物を得る、粉末状食品組成物の製造方法。
　＜１０＞　上記＜８＞又は＜９＞において、前記調整されたｐＨが３～５、好ましくは３～４であるのがよい。
　＜１１＞　上記＜１０＞において、前記ｐＨ調整剤が、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる１種を有し、
　前記有機酸が、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸から選ばれる少なくとも一種であり、
　前記無機酸が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる群から選ばれる少なくとも一種であるのがよい。
　＜１２＞　上記＜１０＞において、前記ｐＨ調整剤が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる無機酸群から選ばれる少なくとも一種を有するのがよい。
　＜１３＞　上記＜８＞又は＜９＞において、前記調整されたｐＨが７～１１、好ましくは１０～１１であるのがよい。
　＜１４＞　上記＜１３＞において、前記ｐＨ調整剤が、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種を有するのがよい。
　＜１５＞　上記＜１３＞において、前記ｐＨ調整剤が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム、及び水酸化マグネシウムからなる群から選ばれる１種であるのがよい。
　本発明により、より微生物汚染を防ぐことのできるエクオール含有食品組成物及びその製造方法を提供することができる。
　また、本発明により、上記効果の他に、又は上記効果に加えて産生したエクオールを効率的に回収するエクオール含有食品組成物の製造方法を提供することができる。
　本願は、液体食品組成物の製造方法及び粉末状食品組成物の製造方法、並びに液体食品組成物及びその乾燥物である粉末状食品組成物を提供する。
　以下、液体食品組成物の製造方法及び粉末状食品組成物の製造方法について説明し、次いで液体食品組成物及びその乾燥物である粉末状食品組成物について説明する。
＜液体食品組成物の製造方法＞
　本発明の液体食品組成物の製造方法は、
　（Ａ）ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程；及び
　（Ｂ）前記培養工程で得られたエクオールを含む培養液にｐＨ調整剤を添加しｐＨを調整する工程；
を有することによりエクオールを含む液体食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物を得る。
＜＜（Ａ）工程＞＞
　（Ａ）工程は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程である。
　該培養工程は、エクオールを産生することができれば、その条件等は特に限定されない。例えば、従来公知の条件を用いることができるが、該条件に限定されない。
＜＜エクオール原料＞＞
　本発明の方法において用いるエクオール原料は、文字通り、エクオールの原料として用いられるものであれば、その形態は問わない。
　エクオール原料は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種を含んでいればよく、その形態は問わない。例えば、ダイゼイン配糖体そのもの、ダイゼインそのもの、又はジヒドロダイゼインそのものであっても、それらを含有するもの、例えば大豆、大豆加工物、大豆胚軸、大豆胚軸加工物、例えば大豆抽出物、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物が挙げられ、具体的には市販イソフラボンであってもよい。
＜＜微生物＞＞
　本発明の方法は、エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物を用いる。なお、「エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力」を、本明細書において、単に「エクオール産生能」という場合がある。
　本発明の方法において用いるエクオール産生能を有する微生物は、上記エクオール原料からエクオールを産生する能力を有する微生物であれば、特に限定されない。
　なお、エクオール原料は、微生物の「エクオール産生能」との関係において決まる。例えば、ある微生物Ａがダイゼイン配糖体については「エクオール産生能」を有しないが、ダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、該微生物Ａのエクオール原料は、「ダイゼイン」となる。また、この場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換する工程を（Ａ）工程前に有してもよい。例えば、ある微生物Ｂがダイゼイン配糖体及びダイゼインについては「エクオール産生能」を有しないが、ジヒドロダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、該微生物Ｂのエクオール原料は、「ジヒドロダイゼイン」となる。また、この場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換し、ダイゼインをさらにジヒドロダイゼインへと変換する工程を（Ａ）工程前に有してもよい。
　微生物として、嫌気性微生物を挙げることができる。該嫌気性微生物は、例えば、３７℃付近（例えば３０～４２℃）の温度でエクオールを産生することができる。
　なお、エクオール産生能は、培養物中のダイゼイン、ジヒドロダイゼイン、エクオール等を定量することにより確認することができる。これらの定量は、当業者であれば、例えばＷＯ２０１２／０３３１５０、特開２０１２－１３５２１７、特開２０１２－１３５２１８、特開２０１２－１３５２１９等の記載に基づき行うことができる。これらの定量方法の一例を以下に示す。
　例えば、培養液に酢酸エチルを加えて、激しく攪拌した後遠心し、酢酸エチル層を取り出す。必要に応じて同培養液に同様の操作を数回行い、それら酢酸エチル層を合わせてエクオール抽出液を得ることができる。この抽出液をエバポレーターで減圧下に濃縮、乾固し、メタノールに溶解させる。これをポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ）膜等の膜を使用して濾過し、不溶物を除去したものを高速液体クロマトグラフィー測定サンプルとすることができる。高速液体クロマトグラフィーの条件は例えば以下のものを例示することができるがこれに限定されない。
［高速液体クロマトグラフィー条件］
カラム：Phenomenox Luna ５ｕＣ１８、２．０ｍｍ×１５０ｍｍ（島津ジーエルシー）
移動相：水／メタノール［５５：４５，ｖ／ｖ］
流速：０．２ｍＬ／ｍｉｎ
カラム温度：４０℃
検出：ＵＶ２８０ｎｍ
保持時間：ジヒドロダイゼインが１３．８分、ダイゼインが１９．６分、グリシテインが２２．５分、エクオールが２５．６分、ゲニステインが３５．０分
　エクオール産生する能力を有する微生物として、以下の属に分類される微生物を挙げることができるがこれらに限定されない。
　アドレクラウチア(Adlercreutzia)属
　バクテロイデス(Bacteroides)属
　ビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)属
　クロストリジウム(Clostridium)属
　エガセラ(Eggerthella)属 
　エンテロコッカス(Enterococcus)属
　エンテロハブダス(Enterorhabdus)属
　ユーバクテリウム(Eubacterium)属
　フィネゴルディア(Finegoldia)属
　ラクトバチルス(Lactobacillus)属
　ラクトコッカス(Lactococcus)属
　パラエガセラ(Paraeggerthella)属 
　ペディオコッカス(Pediococcus)属
　プロテウス（Proteus）属
　シャーペア(Sharpea)属
　スラキア(Slackia)属
　ストレプトコッカス(Streptococcus)属
　ベイロネラ(Veillonella)属
　エクオールを産生する能力を有する微生物として、具体的には、以下の微生物を挙げることができるがこれらに限定されない。
　アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus) 
　アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens)
　バクテロイデス・オバツス(Bacteroides ovatus)
　ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)
　ビフィドバクテリウム・ロングム(Bifidobacterium longum)
　クロストリジウム・エスピー(Clostridium sp.)
　エガセラ・エスピー(Eggerthella sp. )
　エンテロコッカス・フェカーリス(Enterococcus faecalis)
　エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)
　エンテロハブダス・ムコシコラ(Enterorhabdus mucosicola)
　ユーバクテリウム・エスピー(Eubacterium sp.)
　フィネゴルディア・マグナ(Finegoldia magna)
　ラクトバチルス・ファーメンタム(Lactobacillus fermentum) 
　ラクトバチルス・ムコサエ(Lactobacillus mucosae)
　ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)
　ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus plantarum)
　ラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)
　ラクトバチルス・エスピー(Lactobacillus sp.)
　ラクトコッカス・ガルビエ(Lactococcus garvieae)
　ラクトコッカス・エスピー（Lactococcus sp.）
　パラエガセラ・エスピー(Paraeggerthella sp.)
　ペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)
　プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）
　シャーペア・アザブエンシス(Sharpea azabuensis)
　スラキア・エクオリファシエンス(Slackia equolifaciens)
　スラキア・イソフラボニコンバーテンス(Slackia isoflavoniconvertens)
　スラキア・エスピー(Slackia sp.) 
　ストレプトコッカス・コンステラタス(Streptococcus constellatus)
　ストレプトコッカス・インターメディウス(Streptococcus intermedius)
　ベイロネア・エスピー(Veillonella sp.) 
　上記記載の微生物のうち、例えばエガセラ(Eggerthellaceae)科に分類される微生物、ビフィドバクテリアセアエ（Bifidobacteriaceae）科に分類される微生物、クロストリジアセアエ（Clostridiaceae）科に分類される微生物、コーリオバクテリアセアエ（Coriobacteriaceae）科に分類される微生物、エンテロコッカセアエ（Enterococcaceae）科に分類される微生物、ユーバクテリアセアエ（Eubacteriaceae）科に分類される微生物、モルガネラセアエ（Morganellaceae）科に分類される微生物、ペプトニフィラセアエ（Peptoniphilaceae）科に分類される微生物、ラクトバチラセアエ（Lactobacillaceae）科に分類される微生物、ストレプトコッカセアエ（Streptococcaceae）科に分類される微生物、ベイロネラセアエ（Veillonellaceae）科に分類される微生物、又はこれらの類縁微生物が挙げられる。好ましくは、アドレクラウチア（Adlercreutzia）属、バクテロイデス属、ビフィドバクテリウム属、クロストリジウム属、コリオバクテリウム属、エガセラ属、エンテロコッカス属、ユーバクテリウム属、フィネゴルディア属、ラクトバチルス属、ラクトコッカス属、パラエガセラ属、ペディオコッカス属、プロテウス属、シャーペア属、スラキア属、ストレプトコッカス属、ベイロネア属、又はこれらの類縁微生物に分類される微生物であるのがよい。さらに好ましくは、アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス、アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス、バクテロイデス・オバツス、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・ロングム、クロストリジウム・エスピー、エガセラ・エスピー、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロハブダス・ムコシコラ、ユーバクテリウム・エスピー、フィネゴルディア・マグナ、ラクトバチルス・ファーメンタム、ラクトバチルス・インテスティナリス、ラクトバチルス・ムコサエ、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・プランタルム、ラクトバチルス・ラムノサス、ラクトバチルス・エスピー、ラクトコッカス・ガルビエ、ラクトコッカス・エスピー、パラエガセラ・エスピー、ペディオコッカス・ペントサセウス、プロテウス・ミラビリス、シャーペア・アザブエンシス、スラキア・エクオリファシエンス、スラキア・イソフラボニコンバーテンス、スラキア・エスピー、ストレプトコッカス・コンステラタス、ストレプトコッカス・インターメディウス、ベイロネア・エスピーであるのがよい。
　上記記載の微生物のうち、特に以下に記載する微生物のいずれか又はこれらの菌と同様の種としての性質を有する類縁の菌をより好ましい嫌気性微生物として挙げることができる。
　アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス（Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus）DSM 18785株
　アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス（Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens）DSM 19450株
　バクテロイデス・オバツス（Bacteroides ovatus）E-23-15株
　ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidibacterium breve）ATCC 15700株
　ビフィドバクテリウム・ロングム（Bifidobacterium longum）BB536株
　クロストリジウム・エスピー（Clostridium sp.）HGH136株
　エガセラ・エスピー（Eggerthella sp.）Julong 732株
　エガセラ・エスピー（Eggerthella sp.）YY7918株
　エガセラ・エスピー（Eggerthella sp.）D1株
　エンテロコッカス・フェカーリス（Enterococcus faecalis）INIA P333株
　エンテロコッカス・フェシウム（Enterococcus faecium）EPI1株
　エンテロハブダス・ムコシコラ（Enterohabdus mucosicola）Mt1B8株
　ユーバクテリウム・エスピー（Eubacterium sp.）D2株
　フィネゴルディア・マグナ（Finegoldia magna）EPI3株
　ラクトバチルス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）DPPMA114株
　ラクトバチルス・インテスティナリス（Lactobacillus intestinalis）KTCT13676BP株
　ラクトバチルス・ムコサエ（Lactobacillus mucosae）EPI2株
　ラクトバチルス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）JS1株
　ラクトバチルス・プランタルム（Lactobacillus plantarum）DPPMA24W株
　ラクトバチルス・プランタルム（Lactobacillus plantarum）DPPMASL33株
　ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）DPPMAAZ1株
　ラクトバチルス・ラムノサス（Lactobacillus rhamnosus）INIA P540株
　ラクトバチルス・エスピー（Lactobacillus sp.）Niu-O16株
　ラクトコッカス・ガルビエ（Lactococcus garvieae）20-92株
　パラエガセラ・エスピー（Paraeggerthella sp.）SNR40-432株
　ペディオコッカス・ペントサセウス（Pediococcus pentosaceus）CS1株
　プロテウス・ミラビリス（Proteus mirabilis）LH-52株
　シャーペア・アザブエンシス（Sharpea azabuensis）ST18株
　スラキア・エクオリファシエンス（Slackia equolifaciens）DSM 24851株
　スラキア・イソフラボニコンバーテンス（Slackia isoflavoniconvertens）DSM 2200
6株
　スラキア・エスピー（Slackia sp.）FJK1株
　スラキア・エスピー（Slackia sp.）NATTS株
　スラキア・エスピー（Slackia sp.）YIT11861株
　スラキア・エスピー（Slackia sp.）TM-30株
　ストレプトコッカス・コンステラタス（Streptococcus constellatus）E-23-17株
　ストレプトコッカス・インターメディウス（Streptococcus intermedius）A6G-225株
　ベイロネア・エスピー（Veillonella sp.）EP株。
　なお、上記嫌気性微生物は、その寄託番号に示された寄託機関から入手することができる。各受託番号は、当該嫌気性微生物が、それぞれ次の寄託機関に寄託されていることを示す。
　FERM　特許生物寄託センター；International Patent Organism Depositary (IPOD)
　　　　　http://unit.aist.go.jp/pod/ci/index.html
　DSM　 German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (DSMZ)
　　　　　http://www.dsmz.de/
　KCCM　Korean Culture Center of Microorganisms
　本発明においては、エクオールの産生能を有する嫌気性微生物は、エクオールの生産に適した条件で培養される。本発明におけるエクオールの生産に適した条件とは、エクオールの生成活性を持つ嫌気性微生物の生存と活動が維持される条件をいう。より具体的には、嫌気性微生物の生存が可能な気相条件（嫌気性条件）が維持され、当該嫌気性微生物の活性と増殖を支持するための栄養素が与えられることを言う。嫌気性微生物の生存に適した種々の培地組成が公知である。したがって、先に示したエクオールの産生能を有する嫌気性微生物について、当業者は、適切な培地組成を選択することができる。たとえば、Difco社製のＢＨＩ培地や、実施例において用いた培地等を使用することができるがこれらに限定されない。
　本発明で用いられる培地には、水溶性の有機物を炭素源として加えることができる。水溶性の有機物として、以下の化合物を挙げることができるが、これらに限定されない。
　ソルボース、フラクトース、グルコース等の糖類；
　メタノール等のアルコール類；
　吉草酸、酪酸、プロピオン酸、酢酸、ギ酸等有機酸類、またはこれらの塩。
　炭素源としての培地に加える有機物の濃度は、効率的に培地中の嫌気性微生物を発育させるために適宜調節することができる。
　培地には、窒素源を加えることができる。本発明において、窒素源としては通常の発酵に用いうる各種の窒素化合物を用いることができる。好ましい無機窒素源は、アンモニウム塩、及び硝酸塩である。より好ましい無機窒素源は、硫安、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、リン酸水素アンモニウム、硝酸カリウム及び硝酸ソーダである。一方、好ましい有機窒素源はアミノ酸類、酵母エキス、ペプトン類、肉エキス、肝臓エキス、消化血清末等である。より好ましい有機窒素源はアルギニン、システイン、シスチン、シトルリン、リジン、酵母エキス、ペプトン類である。
　さらに、炭素源や窒素源に加えて、エクオールの製造に適した他の有機物あるいは無機物を培地に加えることもできる。たとえば、ビタミン等の補因子や各種の塩類等の無機化合物を培地に加えることによって、嫌気性微生物の増殖や活性を増強できる場合もある。たとえば無機化合物、ビタミン類、動植物由来の微生物増殖補助因子として以下のものを挙げることができる。
　無機化合物　　　　　　　　　　　ビタミン類
　リン酸二水素カリウム　　　　　　ビオチン
　硫酸マグネシウム　　　　　　　　葉酸
　硫酸マンガン　　　　　　　　　　ピリドキシン
　塩化ナトリウム　　　　　　　　　チアミン
　塩化コバルト　　　　　　　　　　リボフラビン
　塩化カルシウム　　　　　　　　　ニコチン酸
　硫酸亜鉛　　　　　　　　　　　　パントテン酸
　硫酸銅　　　　　　　　　　　　　ビタミンＢ１２
　明ばん　　　　　　　　　　　　　チオオクト酸
　モリブデン酸ソーダ　　　　　　　p-アミノ安息香酸
　塩化カリウム
　ホウ酸等
　塩化ニッケル
　タングステン酸ナトリウム
　セレン酸ナトリウム
　硫酸第一鉄アンモニウム
　これらの無機化合物やビタミン類、あるいは増殖補助因子を添加して培養液を製造する方法として、従来公知の手法を用いることができる。培地は、液体、半固体、あるいは固体とすることができる。本発明において、好ましい培地の形態は、液体培地である。
　本発明において用いる培地は、デキストリン類を含むことができる。デキストリン類を含む培地で嫌気性微生物を培養すれば、培養後に改めて培養物にデキストリン類を接触させることなく、エクオールおよびデキストリン類を含む液を調製することができる。
　デキストリン類の培地への添加は、微生物の培養前および培養中に行うことができる。
　本発明において用いる培地に、消泡剤、好ましくは大豆油、より好ましくはビタミンＥ入り大豆油を含むことができる。
　本願の方法において、微生物、特に嫌気性微生物は、公知の微生物の培養方法にしたがって培養することができる。工業的な製造には、培地や基質ガスを連続的に供給することができ、かつ培養物を回収するための機構を備えた連続培養システム（continuous fermentation system）を使用することもできる。
　本願の方法において、嫌気性微生物を用いる場合には、発酵槽内への酸素の混入を防ぐのがよい。発酵槽は、通常用いられる発酵槽がそのまま利用できる。発酵槽内に混入する酸素を、窒素等の不活性気体で置換することにより、嫌気的な雰囲気を作ることができる。
　本発明における（Ａ）工程において、その気相は、水素を含む１種類以上の気体からなるのがよい。気相を構成する気体は、水素を含む１種類以上の気体からなれば特に限定されないが、水素及び水素以外の１種以上の気体を有するのがよい。水素以外の気体として、二酸化炭素、窒素、一酸化炭素等を挙げることができるが、特に限定されない。
　前記気体の水素濃度は、特に限定されないが、例えば３０％以下、１０％以下、４％以下などを挙げることができる。
　なお、本発明における（Ａ）工程において、通気せずゴム栓で密栓したビンや試験管内等の密閉系で行うこともできる。
　効率よくエクオールを回収するためには、気相を構成する混合気体の培養槽への通気量として、０．００１～２．０Ｖ／Ｖ／Ｍガス量／液量／分、例えば０．０１～２．０Ｖ／Ｖ／Ｍガス量／液量／分とすることができるが、これに限定されない。
　培養槽の形状によっては、培地を十分に撹はんするため、撹はん機等を利用することもできる。培養槽内の培養物を攪拌することによって、培地成分や基質ガスを嫌気性微生物に接触させる機会を増やして、エクオールの生成効率を最適化することができる。また基質ガスをナノバブルとして供給することもできる。
　本発明において、微生物を培養する際は常圧で行うこともできるが、加圧する場合、加圧条件は、当該微生物が生育できる条件であれば特に限定されるものではない。好ましい加圧条件としては、０．２ＭＰａ以下の範囲、例えば０．０２～０．２ＭＰａの範囲を挙げることができるがこれに限定されない。
　エクオールの産生量を増加させるため、培養槽の温度は特に制限されるものではないが、好ましくは３０℃～４０℃をさらに好ましくは３３℃～３８℃の温度を挙げることができる。
　培養時間は、エクオールの生成量に応じて、イソフラボン類の残存量等に応じても適宜設定できる。例えば８～１２０時間、好ましくは１２～７２時間、特に好ましくは１６～６０時間を例示することができるがこれらに限定されない。
＜＜（Ｂ）工程＞＞
　（Ｂ）工程は、上記（Ａ）工程、すなわち培養工程で得られたエクオールを含む培養液にｐＨ調整剤を添加しｐＨを調整する工程である。
　（Ｂ）工程により、培養液のｐＨを酸側に調整するのがよく、具体的にはｐＨを３～５、好ましくは３～４に調整するのがよい。このように培養液のｐＨを酸側に調整することにより、具体的にはｐＨを３～５、特に３～４に調整することにより、（Ａ）工程で用いた微生物を分離しやすくすることができ、ひいてはエクオールの回収効率を高めることができる。
　また、（Ｂ）工程により、培養液のｐＨをアルカリ側に調整するのがよく、具体的にはｐＨを７～１１、好ましくは１０～１１に調整するのがよい。このように培養液のｐＨをアルカリ側に調整することにより、具体的にはｐＨを７～１１、特に１０～１１に調整することにより、（Ａ）工程で用いた微生物を溶解させることができ、ひいてはエクオールの回収効率を高めることができる。
　（Ｂ）工程において、ｐＨを酸側に調整する場合、ｐＨ調整剤は、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる少なくとも１種を有するのがよい。
　有機酸として、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸を挙げることができるがこれらに限定されない。
　また、無機酸として、塩酸、硫酸、及びリン酸を挙げることができるがこれらに限定されない。
　（Ｂ）工程において、ｐＨをアルカリ側に調整する場合、ｐＨ調整剤は、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種を有するのがよい。
　具体的には、アルカリ側に調整するｐＨ調整剤として、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム及び水酸化マグネシウムを挙げることができるがこれらに限定されない。
　上記（Ａ）工程及び（Ｂ）工程により、液体食品組成物を得ることができるが、液体食品組成物を得る本発明の方法は、上記（Ａ）工程及び（Ｂ）工程以外の工程を有してもよい。例えば、遠心分離工程、膜ろ過工程といったエクオールを産生する能力を有する微生物を除去する工程を挙げることができるがこれらに限定されない。
＜粉末状食品組成物の製造方法＞
　本願は、粉末状食品組成物の製造方法をさらに提供する。
　該方法は、上記（Ａ）工程及び（Ｂ）工程後に、
　（Ｃ）前記（Ｂ）ｐＨ調整工程で得られた液を乾燥させる工程；
を有することにより、エクオールを含む粉末状食品組成物であってｐＨが調整された粉末状食品組成物を得ることができる。
＜＜（Ｃ）工程＞＞
　（Ｃ）工程は、前記（Ｂ）ｐＨ調整工程で得られた液を乾燥させる工程である。
　（Ｃ）乾燥工程は、従来公知の方法により行うことができる。例えば、加熱乾燥処理、噴霧乾燥処理、凍結乾燥処理、流動床乾燥、流動層乾燥などを挙げることができるがこれらに限定されない。
　加熱乾燥処理は、例えば回転ドラム乾燥機を、噴霧乾燥処理は、例えばスプレー乾燥機を、凍結乾燥処理は凍結乾燥機を使用して行うことができる。乾燥方法は、液体を乾燥できる乾燥機ならば、どのような乾燥機でも良い。
　乾燥処理されて得られた物は、必要に応じて粉砕化処理に供してもよい。
　本発明の方法は、上記（Ａ）、（Ｂ）及び（Ｃ）工程以外の工程を有してもよい。
　例えば、（Ｂ）工程後、（Ｃ）工程前に、（Ｂ）工程で得られたｐＨ調整された液を加熱処理する工程、該加熱処理工程後、得られた液から不要な固形分を除去する遠心分離工程及び／又は濾過工程を有してもよい。なお、（Ｂ）工程において、ｐＨをアルカリ側、特にｐＨを１０～１１に調整する場合、遠心分離工程を有さなくともよく、工程数を削減できる点で好ましい。
　不要な固形分を除去する遠心分離工程及び／又はろ過工程を有する場合は、澄明な液が得られるため、飲料等に供するために適した液体状食品組成物となる。
＜食品組成物＞
　本願は、エクオールを含む食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物であるか又はその乾燥物である、上記食品組成物を提供する。
　本発明の食品組成物は、上記の方法によって得ることもできるが、これに限定されない。
＜＜液体食品組成物＞＞
　液体食品組成物は、酸側の場合、そのｐＨが３～５、好ましくは３～４であるのがよい。
　また、液体食品組成物は、アルカリ側の場合、そのｐＨが７～１１、好ましくは１０～１１であるのがよい。
＜＜液体食品組成物の乾燥物＞＞
　本願は、エクオールを含む食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物の乾燥物も提供する。
　乾燥物において、ｐＨは次のように定義する。
　すなわち、乾燥物５０ｇを水１Ｌに溶解又は懸濁したときのｐＨが上述の範囲、すなわち酸側の場合、そのｐＨが３～５、好ましくは３～４であるか、又はアルカリ側の場合、そのｐＨが７～１１、好ましくは１０～１１であるのがよい。
　ｐＨ測定には、ガラス隔膜電極が好適に使用できるが、ｐＨ試験紙のような簡易のものでも使用することができる。
　本発明の食品組成物は、酸側に調整される場合、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものであるのがよい。
　この場合、本発明の食品組成物は、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる１種を有することとなる。
　ここで、有機酸として、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸などを挙げることができるがこれらに限定されない。
　また、無機酸として、塩酸、硫酸、及びリン酸などを挙げることができるがこれらに限定されない。
　本発明の食品組成物は、アルカリ側に調整される場合、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものであるのがよい。
　この場合、本発明の食品組成物は、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種を有することとなる。
　アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種として、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム、及び水酸化マグネシウムなどを挙げることができるがこれらに限定されない。
　以下、本発明を実施例に基づいて説明するが、本発明の範囲は以下の実施例に限定されるものではない。
〔実施例１〕
（前培養培地の調製）
　Anaerobe Basal Broth（Thermo scientific社製：カタログ番号CM0957B）を所定量の蒸留水に溶解させ（ＡＢＢ培地）、２Ｌ加圧発酵槽に１Ｌ分注した。その後、窒素ガスでガス置換し、１２１℃、１５分で滅菌した。
（本培養培地の調製）
　βシクロデキストリンを含むＡＢＢ培地に酵素処理した大豆胚芽抽出物（アグリコン化されたイソフラボン：ダイゼイン、グリシテイン、ゲニステインを含む）を、終濃度６ｇ／Ｌとなるように添加し、２Ｌ発酵槽に１Ｌ分注した。その後、窒素ガスでガス置換し、１２１℃、１５分で滅菌した。
（前培養）
　前培養培地に、アドレクラウチア・エクオリファシエンス（Adlercreutzia equolifaciens） DSM 19450株を植菌した後、滅菌フィルター（孔径：０．２μｍ、材質：ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）製）により除菌した水素を含む嫌気ガスを連続的に供給しながら、３７℃で１日間培養した。
（本培養）
　上記前培養した菌株を本培養培地に植菌した後、滅菌フィルター（孔径：０．２μｍ、材質：ＰＶＤＦ製）により除菌した水素を含む嫌気ガスを連続的に供給しながら、３７℃で２日間培養した。
　ＨＰＬＣ分析により、エクオールが産生されていることを確認した。
（ｐＨ調整工程）
　上記エクオール産生が確認された本培養液を、ガラス容器に採取し、ｐＨ調整を行い、加熱による殺菌を実施した。比較として、ｐＨ調整を行わず、加熱による殺菌を実施した。
１）上記本培養液に、クエン酸を添加することによって、ｐＨを３、４、５まで低下させ、加熱による殺菌を実施した。
２）また、上記本培養液に、塩酸を添加することによって、ｐＨを３、４、５まで低下させ、加熱による殺菌を実施した。
３）また、上記本培養液に、水酸化ナトリウムを添加することによって、ｐＨを８、９、１０、１１まで上昇させ、加熱による殺菌を実施した。
（制菌効果の確認）
　上記ｐＨ調整工程で得られた加熱殺菌液をそのまま室温で一週間静置した。その後、標準寒天培地に、その一部を同量ずつ塗布し、３７℃で１日間培養し、コロニー数をカウントした。
　その結果を表１に示す。
　表１から、無調整の場合、コロニー数がカウントできないほど多い一方、ｐＨ調整工程により酸性もしくはアルカリ性にすることで、菌の増殖を抑えられることが確認できた。本発明のｐＨ調整工程を設けることにより、また、本発明のｐＨが調整された液体食品組成物であるか又はその乾燥物により、微生物汚染を防ぐことができることがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
〔実施例２〕
　実施例１において、ｐＨ調整工程まで実施後、以下の工程を実施した。
（遠心沈降分離工程）
　加熱殺菌した培養液を２ｍＬ容エッペンドルフチューブに入れ、遠心分離機により不溶成分を沈降させ、上清を除き、沈降物の量を確認した。このとき、遠心分離の条件（回転数、時間）を変えて、沈降への影響を見た。
　その結果を表２に示す。
　表２から、ｐＨを酸性にしたものは、遠心分離の回転数を下げても沈殿量は変わらなかったが、ｐＨ７以上では、みかけ沈殿量が増えたことがわかった。
　ｐＨ調整は、遠心分離工程での分離特性に影響することが確認できた。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
〔実施例３〕
　実施例１において、ｐＨ調整工程まで実施後、以下の工程を実施した。
（遠心沈降分離工程）
　ｐＨ調整後、加熱殺菌した培養液を４０ｍＬ容遠沈管に入れ、遠心分離機により不溶成分を沈降させ、上清を回収した。
（ろ過工程）
　遠心沈降分離により回収した上清をＰＶＤＦ製ＭＦ膜（孔径０．２μｍ）で、ろ過し、ろ液を回収した。ろ液中のエクオール、イソフラボンをＨＰＬＣ法により分析した。
　その結果を表３に示す。
　表３から、ｐＨ調整工程においてアルカリ性とすることで、イソフラボン濃度が向上し、イソフラボンのろ液への回収率を高められることがわかった。エクオール以外のイソフラボンも生理活性が期待できるため、イソフラボン濃度が向上することでエクオールだけでは達成できない効果が期待できる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
〔実施例４〕
　実施例１において、ｐＨ調整工程まで実施後、以下の乾燥工程を実施した。
　また、実施例３において、ろ過工程まで実施後、以下の乾燥工程を実施した。
（乾燥工程）
　ろ液を、凍結乾燥に供し、粉末を回収した。
（制菌効果の確認）
　回収した粉末をシャーレに広げ、そのまま室温で一週間静置した。その後、その一部を使用し、標準寒天培地を使用した混釈法により寒天培地とし、３７℃で１日間培養し、コロニー数をカウントした。
　いずれの粉末においても、コロニーは検出されなかった。乾燥しても、制菌効果は維持できていたものと考えられる。
　なお、回収した粉末５０ｇを水１Ｌ、又はこれと同等の比率で溶解又は懸濁して得られた液のｐＨを測定した結果を表４に示す。表４から、回収した粉末を再溶解して得られた液のｐＨ（表４中、「乾燥後」の値）は、実施例１のｐＨ調整工程で用いたｐＨ（表４中、「乾燥前」の値）とほぼ同じ値となることを確認した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
〔実施例５〕
　実施例１において、アドレクラウチア・エクオリファシエンス (Adlercreutzia equolifaciens) DSM 19450株の代わりに、アッサカロバクター・セラツス (Asaccharobacter celatus) DSM　18785を用いた以外、実施例１と同様に実施した。
　その結果を表５に示す。
　表５から、実施例１と同様に、ｐＨ無調整の場合、コロニー数がカウントできないほど多い一方、ｐＨ調整工程により酸性もしくはアルカリ性にすることで、菌の増殖を抑えられることが確認できた。本発明のｐＨ調整工程を設けることにより、また、本発明のｐＨが調整された液体食品組成物であるか又はその乾燥物により、微生物汚染を防ぐことができることがわかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
〔実施例６〕
　実施例３において、アドレクラウチア・エクオリファシエンス（Adlercreutzia equolifaciens） DSM 19450株の代わりに、アッサカロバクター・セラツス（Asaccharobacter celatus） DSM　18785を用いた以外、実施例３と同様に実施した。
　その結果を表６に示す。
　表６から、ｐＨ調整工程においてアルカリ性とすることで、イソフラボン濃度が向上し、イソフラボンのろ液への回収率を高められることがわかった。エクオール以外のイソフラボンも生理活性が期待できるため、イソフラボン濃度が向上することでエクオールだけでは達成できない効果が期待できる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
〔実施例７〕
（前培養培地の調製）
　Anaerobe Basal Broth（Thermo scientific社製：カタログ番号CM0957B）を所定量の蒸留水に溶解させ（ＡＢＢ培地）、２Ｌ加圧発酵槽に１Ｌ分注した。その後、窒素ガスでガス置換し、１２１℃、１５分で滅菌した。
（本培養培地の調製）
　大豆胚芽を粉砕した後、１００ｇ／Ｌとなるように水道水を加え、２Ｌ発酵槽に１Ｌ分注した。その後、酵素を加えて、５０℃、一晩攪拌することにより、含まれるイソフラボン配糖体をアグリコン化した後、１ｇ／Ｌとなるようにアルギニンを加え、窒素ガスでガス置換し、１２１℃、１５分で滅菌した。
（前培養）
　前培養培地に、アドレクラウチア・エクオリファシエンス（Adlercreutzia equolifaciens） DSM 19450株を植菌した後、滅菌フィルター（孔径：０．２μｍ、材質：ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）製）により除菌した水素を含む嫌気ガスを連続的に供給しながら、３７℃で１日間培養した。
（本培養）
　上記前培養した菌株を本培養培地に植菌した後、滅菌フィルター（孔径：０．２μｍ、材質：ＰＶＤＦ製）により除菌した水素を含む嫌気ガスを連続的に供給しながら、３７℃で２日間培養した。
　ＨＰＬＣ分析により、エクオールが産生されていることを確認した。
（ｐＨ調整工程）
　上記エクオール産生が確認された本培養液を、ガラス容器に採取し、ｐＨ調整を行い、加熱による殺菌を実施した。比較として、ｐＨ調整を行わず、加熱による殺菌を実施した。
　また、上記本培養液に、水酸化ナトリウムを添加することによって、ｐＨを８、９、１０、１１まで上昇させ、加熱による殺菌を実施し、実施例３同様に遠心分離機により不溶成分を沈降させ、上清を回収した。沈降させた沈殿物は、そのままイソフラボン分析に供した。
　その結果を表７に示す。
　表７から、大豆胚芽を原料とした場合、沈殿側にもエクオール、イソフラボンが存在するが、ｐＨ調整工程においてアルカリ性とすることで、沈殿中のイソフラボン濃度、エクオール濃度が減少し、上清中のイソフラボン濃度、エクオール濃度が向上し、イソフラボンの回収率を高められることがわかった。
　エクオールの回収率を高められ、またエクオール以外のイソフラボンも生理活性が期待できるため、イソフラボン濃度が向上することでエクオールだけでは達成できない効果が期待できる。
　水に不溶な大豆胚芽を遠心分離で除くことにより、澄明な水溶液を回収することができ、飲料などへの適性を高めることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
〔実施例８〕
　実施例７において、アドレクラウチア・エクオリファシエンス（Adlercreutzia equolifaciens） DSM 19450株の代わりに、アッサカロバクター・セラツス（Asaccharobacter celatus） DSM　18785を用いた以外、実施例７と同様に実施した。
　その結果を表８に示す。
　実施例７同様、大豆胚芽を原料とした場合、沈殿側にもエクオール、イソフラボンが存在するが、ｐＨ調整工程においてアルカリ性とすることで、沈殿中のイソフラボン濃度、エクオール濃度が減少し、上清中のイソフラボン濃度、エクオール濃度が向上し、イソフラボンの回収率を高められることがわかった。
　エクオールの回収率を高められ、またエクオール以外のイソフラボンも生理活性が期待できるため、イソフラボン濃度が向上することでエクオールだけでは達成できない効果が期待できる。
　水に不溶な大豆胚芽を遠心分離で除くことにより、澄明な水溶液を回収することができ、飲料などへの適性を高めることができる。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000008

Claims (15)

  1. 　エクオールを含む食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物であるか又はその乾燥物である、上記食品組成物。
  2. 　前記ｐＨが３～５である請求項１に記載の食品組成物。
  3. 　前記組成物が、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものであって、
    　前記有機酸が、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸から選ばれる少なくとも一種であり、
    　前記無機酸が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる群から選ばれる少なくとも一種である請求項２に記載の食品組成物。
  4. 　前記組成物が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる無機酸群から選ばれる少なくとも一種を有する請求項２に記載の食品組成物。
  5. 　前記ｐＨが７～１１である請求項１に記載の食品組成物。
  6. 　前記組成物が、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものである請求項５に記載の食品組成物。
  7. 　前記組成物が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム、及び水酸化マグネシウムからなる群から選ばれる１種によって、ｐＨが調整されたものである請求項５に記載の食品組成物。
  8. 　（Ａ）ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程；及び
    　（Ｂ）前記培養工程で得られたエクオールを含む培養液にｐＨ調整剤を添加しｐＨを調整する工程；
    を有することによりエクオールを含む液体食品組成物であってｐＨが調整された液体食品組成物を得る、液体食品組成物の製造方法。
  9. 　（Ａ）ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも１種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程；
    　（Ｂ）前記培養工程で得られたエクオールを含む培養液にｐＨ調整剤を添加しｐＨを調整する工程；及び
    　（Ｃ）ｐＨ調整工程で得られた液を乾燥させる工程；
    を有することにより、エクオールを含む粉末状食品組成物であってｐＨが調整された粉末状食品組成物を得る、粉末状食品組成物の製造方法。
  10. 　前記調整されたｐＨが３～５である請求項８又は９に記載の方法。
  11. 　前記ｐＨ調整剤が、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる１種を有し、
    　前記有機酸が、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸から選ばれる少なくとも一種であり、
    　前記無機酸が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる群から選ばれる少なくとも一種である請求項１０に記載の方法。
  12. 　前記ｐＨ調整剤が、塩酸、硫酸、及びリン酸からなる無機酸群から選ばれる少なくとも一種を有する請求項１０に記載の方法。
  13. 　前記調整されたｐＨが７～１１である請求項８又は９に記載の方法。
  14. 　前記ｐＨ調整剤が、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる１種を有する請求項１３に記載の方法。
  15. 　前記ｐＨ調整剤が、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム、及び水酸化マグネシウムからなる群から選ばれる１種である請求項１３に記載の方法。
PCT/JP2023/018548 2022-05-19 2023-05-18 エクオールを含む食品組成物およびその製造方法 WO2023224086A1 (ja)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2023561223A JP7463627B1 (ja) 2022-05-19 2023-05-18 エクオールを含む食品組成物およびその製造方法
JP2024049307A JP2024075746A (ja) 2022-05-19 2024-03-26 エクオールを含む食品組成物およびその製造方法

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022082225 2022-05-19
JP2022-082225 2022-05-19

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2023224086A1 true WO2023224086A1 (ja) 2023-11-23

Family

ID=88835693

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2023/018548 WO2023224086A1 (ja) 2022-05-19 2023-05-18 エクオールを含む食品組成物およびその製造方法

Country Status (2)

Country Link
JP (2) JP7463627B1 (ja)
WO (1) WO2023224086A1 (ja)

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4986586A (ja) * 1972-12-25 1974-08-19
CN102199565A (zh) * 2011-04-07 2011-09-28 中国农业大学 一种屎肠球菌及其产生雌马酚的方法与应用
JP2014233259A (ja) * 2013-06-04 2014-12-15 株式会社ダイセル エクオール以外のイソフラボン類の含有量が低いエクオール含有組成物
JP2019106905A (ja) * 2017-12-15 2019-07-04 大塚製薬株式会社 エクオールおよびコラーゲンペプチドを含有する経口組成物

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS4986586A (ja) * 1972-12-25 1974-08-19
CN102199565A (zh) * 2011-04-07 2011-09-28 中国农业大学 一种屎肠球菌及其产生雌马酚的方法与应用
JP2014233259A (ja) * 2013-06-04 2014-12-15 株式会社ダイセル エクオール以外のイソフラボン類の含有量が低いエクオール含有組成物
JP2019106905A (ja) * 2017-12-15 2019-07-04 大塚製薬株式会社 エクオールおよびコラーゲンペプチドを含有する経口組成物

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2023224086A1 (ja) 2023-11-23
JP7463627B1 (ja) 2024-04-08
JP2024075746A (ja) 2024-06-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP3561067B1 (en) Method for producing urolithins
JP2008061584A (ja) エクオール生産能を持つ微生物及び飲食品、医薬品、動物飼料およびその製造法
US11168300B2 (en) Microorganism and production method for urolithins using same
JP7373402B2 (ja) ウロリチン類の製造方法
CN111197018A (zh) 一种酸鱼乳杆菌、用其发酵豆乳的方法及制备出的发酵豆乳与应用
JP5916132B2 (ja) エクオールの製造方法
JP2024056920A (ja) ６－ヒドロキシダイゼインの製造方法
JP7463627B1 (ja) エクオールを含む食品組成物およびその製造方法
WO2020012681A1 (ja) ８－プレニルナリンゲニンの製造方法
WO2023199929A1 (ja) エクオールの製造方法
JP2024053420A (ja) エクオールの製造方法
JP7211721B2 (ja) 新規微生物及び該微生物を用いたウロリチン類の製造方法
JP2024000267A (ja) エクオールの製造方法
JP6968575B2 (ja) 微生物を用いた５‐ヒドロキシエクオールの製造方法
JP7484031B1 (ja) 組成物の製造方法及び飲食品の製造方法
JP7484030B2 (ja) シクロデキストリンにエクオールが包接された包接体の製造方法
JP2020010635A (ja) 機能性物質の製造方法
JP7422056B2 (ja) エクオール含有食品組成物およびその製造方法
JP2019180283A (ja) ウロリチン類の製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2023561223

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 23807687

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1