JP2024000267A - エクオールの製造方法 - Google Patents
エクオールの製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2024000267A JP2024000267A JP2022098960A JP2022098960A JP2024000267A JP 2024000267 A JP2024000267 A JP 2024000267A JP 2022098960 A JP2022098960 A JP 2022098960A JP 2022098960 A JP2022098960 A JP 2022098960A JP 2024000267 A JP2024000267 A JP 2024000267A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- equol
- weight
- parts
- raw material
- culture
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- ADFCQWZHKCXPAJ-GFCCVEGCSA-N equol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@@H]1CC2=CC=C(O)C=C2OC1 ADFCQWZHKCXPAJ-GFCCVEGCSA-N 0.000 title claims abstract description 125
- 235000019126 equol Nutrition 0.000 title claims abstract description 125
- ADFCQWZHKCXPAJ-UHFFFAOYSA-N indofine Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1CC2=CC=C(O)C=C2OC1 ADFCQWZHKCXPAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 125
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims abstract description 55
- ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N Daidzein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 53
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 45
- 235000007240 daidzein Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 26
- -1 daidzein glycoside Chemical class 0.000 claims abstract description 15
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims abstract description 15
- JHYXBPPMXZIHKG-CYBMUJFWSA-N Dihydrodaidzein Natural products C1=CC(O)=CC=C1[C@@H]1C(=O)C2=CC=C(O)C=C2OC1 JHYXBPPMXZIHKG-CYBMUJFWSA-N 0.000 claims abstract description 13
- JHYXBPPMXZIHKG-UHFFFAOYSA-N dihydrodaidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1C(=O)C2=CC=C(O)C=C2OC1 JHYXBPPMXZIHKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 72
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 31
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 31
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 30
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 19
- 239000012533 medium component Substances 0.000 claims description 14
- 235000020712 soy bean extract Nutrition 0.000 claims description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 38
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 38
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 23
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 19
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 13
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 12
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 12
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 12
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 12
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 8
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 8
- CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N isoflavone Natural products C1=C(OC)C(OC)=CC(OC)=C1C1=COC2=C(C=CC(C)(C)O3)C3=C(OC)C=C2C1=O CJWQYWQDLBZGPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 150000002515 isoflavone derivatives Chemical class 0.000 description 8
- 235000008696 isoflavones Nutrition 0.000 description 8
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 6
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 6
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 6
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 6
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 6
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 6
- 241000452716 Adlercreutzia equolifaciens Species 0.000 description 5
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 5
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 5
- 241000711835 Slackia sp. Species 0.000 description 5
- 241000319720 Thracia Species 0.000 description 5
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 4
- 241000606125 Bacteroides Species 0.000 description 4
- 241001394620 Eggerthella sp. Species 0.000 description 4
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 4
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 4
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 4
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 4
- 239000003002 pH adjusting agent Substances 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 4
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 230000003068 static effect Effects 0.000 description 4
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 3
- 241000193464 Clostridium sp. Species 0.000 description 3
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 3
- 241000194031 Enterococcus faecium Species 0.000 description 3
- 241001560644 Enterorhabdus mucosicola Species 0.000 description 3
- 241001267419 Eubacterium sp. Species 0.000 description 3
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 3
- 241000394636 Lactobacillus mucosae Species 0.000 description 3
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 description 3
- 241000186610 Lactobacillus sp. Species 0.000 description 3
- 241000194036 Lactococcus Species 0.000 description 3
- 241000168733 Paraeggerthella Species 0.000 description 3
- 241000191996 Pediococcus pentosaceus Species 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000588770 Proteus mirabilis Species 0.000 description 3
- 241000756761 Sharpea Species 0.000 description 3
- 241001657520 Slackia Species 0.000 description 3
- 241001191217 Slackia isoflavoniconvertens Species 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241001291896 Streptococcus constellatus Species 0.000 description 3
- 241000194046 Streptococcus intermedius Species 0.000 description 3
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 3
- 229920005549 butyl rubber Polymers 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940032049 enterococcus faecalis Drugs 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 description 3
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 3
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 description 3
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N (D)-(+)-Pantothenic acid Chemical compound OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-ZETCQYMHSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000466670 Adlercreutzia Species 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 241001135228 Bacteroides ovatus Species 0.000 description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 2
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001430149 Clostridiaceae Species 0.000 description 2
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 2
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-SQOUGZDYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 2
- 241000186394 Eubacterium Species 0.000 description 2
- 239000001116 FEMA 4028 Substances 0.000 description 2
- 241000192016 Finegoldia magna Species 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000283160 Inia Species 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- 241001640457 Lactobacillus intestinalis Species 0.000 description 2
- 241000194040 Lactococcus garvieae Species 0.000 description 2
- 241000178948 Lactococcus sp. Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- JDJPNKPFDDUBFV-UHFFFAOYSA-N O-Desmethylangolensin Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(C)C(=O)C1=CC=C(O)C=C1O JDJPNKPFDDUBFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000192001 Pediococcus Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 2
- 241001634360 Sharpea azabuensis Species 0.000 description 2
- 241000645045 Slackia equolifaciens Species 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001331543 Veillonella sp. Species 0.000 description 2
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N beta-cyclodextrin Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CO)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO WHGYBXFWUBPSRW-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 2
- 235000011175 beta-cyclodextrine Nutrition 0.000 description 2
- 229960004853 betadex Drugs 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 235000006539 genistein Nutrition 0.000 description 2
- 229940045109 genistein Drugs 0.000 description 2
- TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N genistein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NNUVCMKMNCKPKN-UHFFFAOYSA-N glycitein Natural products COc1c(O)ccc2OC=C(C(=O)c12)c3ccc(O)cc3 NNUVCMKMNCKPKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000008466 glycitein Nutrition 0.000 description 2
- DXYUAIFZCFRPTH-UHFFFAOYSA-N glycitein Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC(C2=O)=C1OC=C2C1=CC=C(O)C=C1 DXYUAIFZCFRPTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OZBAVEKZGSOMOJ-MIUGBVLSSA-N glycitin Chemical compound COC1=CC(C(C(C=2C=CC(O)=CC=2)=CO2)=O)=C2C=C1O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O OZBAVEKZGSOMOJ-MIUGBVLSSA-N 0.000 description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 2
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 2
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 description 2
- 229920001343 polytetrafluoroethylene Polymers 0.000 description 2
- 239000004810 polytetrafluoroethylene Substances 0.000 description 2
- FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N potassium nitrate Chemical compound [K+].[O-][N+]([O-])=O FGIUAXJPYTZDNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical group 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- PMYDPQQPEAYXKD-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxy-n-naphthalen-2-ylnaphthalene-2-carboxamide Chemical compound C1=CC=CC2=CC(NC(=O)C3=CC4=CC=CC=C4C=C3O)=CC=C21 PMYDPQQPEAYXKD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- GBKFVTZWCWRZII-UHFFFAOYSA-M B(O)(O)O.[Cl-].[K+].NC1=CC=C(C(=O)O)C=C1 Chemical compound B(O)(O)O.[Cl-].[K+].NC1=CC=C(C(=O)O)C=C1 GBKFVTZWCWRZII-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241001430332 Bifidobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 241000741973 Bifidobacterium breve DSM 20213 = JCM 1192 Species 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N Carbon monoxide Chemical compound [O+]#[C-] UGFAIRIUMAVXCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N Chick antidermatitis factor Natural products OCC(C)(C)C(O)C(=O)NCCC(O)=O GHOKWGTUZJEAQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001657523 Coriobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 241001467496 Coriobacterium Species 0.000 description 1
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N D-gluconic acid Natural products OCC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GMTUGPYJRUMVTC-UHFFFAOYSA-N Daidzin Natural products OC(COc1ccc2C(=O)C(=COc2c1)c3ccc(O)cc3)C(O)C(O)C(O)C=O GMTUGPYJRUMVTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KYQZWONCHDNPDP-UHFFFAOYSA-N Daidzoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 KYQZWONCHDNPDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001657509 Eggerthella Species 0.000 description 1
- 241001215841 Eggerthellaceae Species 0.000 description 1
- 241000237537 Ensis Species 0.000 description 1
- 241001560646 Enterorhabdus Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 241001112690 Eubacteriaceae Species 0.000 description 1
- 241001617393 Finegoldia Species 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- ZCOLJUOHXJRHDI-FZHKGVQDSA-N Genistein 7-O-glucoside Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)c1cc(O)c2C(=O)C(c3ccc(O)cc3)=COc2c1 ZCOLJUOHXJRHDI-FZHKGVQDSA-N 0.000 description 1
- CJPNHKPXZYYCME-UHFFFAOYSA-N Genistin Natural products OCC1OC(Oc2ccc(O)c3OC(=CC(=O)c23)c4ccc(O)cc4)C(O)C(O)C1O CJPNHKPXZYYCME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- XJTZHGNBKZYODI-UHFFFAOYSA-N Glycitin Natural products OCC1OC(Oc2ccc3OC=C(C(=O)c3c2CO)c4ccc(O)cc4)C(O)C(O)C1O XJTZHGNBKZYODI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000661816 Homo sapiens Suppression of tumorigenicity 18 protein Proteins 0.000 description 1
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N L-citrulline Chemical compound NC(=O)NCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O RHGKLRLOHDJJDR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- 241001468155 Lactobacillaceae Species 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010027304 Menopausal symptoms Diseases 0.000 description 1
- 241000593720 Morganellaceae Species 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N Ndelta-carbamoyl-DL-ornithine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=O RHGKLRLOHDJJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- YCUNGEJJOMKCGZ-UHFFFAOYSA-N Pallidiflorin Natural products C1=CC(OC)=CC=C1C1=COC2=CC=CC(O)=C2C1=O YCUNGEJJOMKCGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000924954 Peptoniphilaceae Species 0.000 description 1
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 235000010575 Pueraria lobata Nutrition 0.000 description 1
- 244000046146 Pueraria lobata Species 0.000 description 1
- 101100091568 Saccharomyces cerevisiae (strain ATCC 204508 / S288c) RPE1 gene Proteins 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N Succinic acid Natural products OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241001148134 Veillonella Species 0.000 description 1
- 241001430183 Veillonellaceae Species 0.000 description 1
- 229930003779 Vitamin B12 Natural products 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- WKLPMEPGENRPIL-UHFFFAOYSA-K [Cl-].[Na+].N1=C(C)C(O)=C(CO)C(CO)=C1.S(=O)(=O)([O-])[O-].[Mn+2] Chemical compound [Cl-].[Na+].N1=C(C)C(O)=C(CO)C(CO)=C1.S(=O)(=O)([O-])[O-].[Mn+2] WKLPMEPGENRPIL-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- TWLBWHPWXLPSNU-UHFFFAOYSA-L [Na].[Cl-].[Cl-].[Ni++] Chemical compound [Na].[Cl-].[Cl-].[Ni++] TWLBWHPWXLPSNU-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 229910001860 alkaline earth metal hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 102000006995 beta-Glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010047754 beta-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000007621 bhi medium Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 1
- AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L calcium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ca+2] AXCZMVOFGPJBDE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000920 calcium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001861 calcium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- BRPQOXSCLDDYGP-UHFFFAOYSA-N calcium oxide Chemical compound [O-2].[Ca+2] BRPQOXSCLDDYGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000292 calcium oxide Substances 0.000 description 1
- ODINCKMPIJJUCX-UHFFFAOYSA-N calcium oxide Inorganic materials [Ca]=O ODINCKMPIJJUCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002091 carbon monoxide Inorganic materials 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002173 citrulline Drugs 0.000 description 1
- 235000013477 citrulline Nutrition 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical compound [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000000306 component Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 1
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 description 1
- KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N daidzein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 101150015371 epi-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 1
- IMBKASBLAKCLEM-UHFFFAOYSA-L ferrous ammonium sulfate (anhydrous) Chemical compound [NH4+].[NH4+].[Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O IMBKASBLAKCLEM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000174 gluconic acid Substances 0.000 description 1
- 235000012208 gluconic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000011261 inert gas Substances 0.000 description 1
- 239000002198 insoluble material Substances 0.000 description 1
- 238000004898 kneading Methods 0.000 description 1
- 229940040511 liver extract Drugs 0.000 description 1
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 1
- VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L magnesium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Mg+2] VTHJTEIRLNZDEV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000000347 magnesium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 229910001862 magnesium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- XAYKVLGTUTWAMP-PROWLMFFSA-L magnesium;5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]pentanoic acid;sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-]S([O-])(=O)=O.N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 XAYKVLGTUTWAMP-PROWLMFFSA-L 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002101 nanobubble Substances 0.000 description 1
- 150000002823 nitrates Chemical class 0.000 description 1
- 229910017464 nitrogen compound Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002830 nitrogen compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000005416 organic matter Substances 0.000 description 1
- 229940055726 pantothenic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000019161 pantothenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011713 pantothenic acid Substances 0.000 description 1
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 description 1
- 239000004323 potassium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010333 potassium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 1
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 1
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 239000011684 sodium molybdate Substances 0.000 description 1
- 235000015393 sodium molybdate Nutrition 0.000 description 1
- TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N sodium molybdate (anhydrous) Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Mo]([O-])(=O)=O TVXXNOYZHKPKGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 description 1
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011655 sodium selenate Substances 0.000 description 1
- 235000018716 sodium selenate Nutrition 0.000 description 1
- 229960001881 sodium selenate Drugs 0.000 description 1
- 244000148755 species properties Species 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940005605 valeric acid Drugs 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
- 235000019163 vitamin B12 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011715 vitamin B12 Substances 0.000 description 1
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
【課題】微生物を利用したエクオールを製造において、従来よりも少ない水分条件でエクオールを製造する方法の提供。【解決手段】ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物で培養する工程;を有してエクオールを産生するエクオールの製造方法であって、前記培養工程において、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満で培養を行う、上記方法により上記課題を解決する。【選択図】なし
Description
本発明は、エクオール産生能を有する微生物によるエクオールの製造方法に関する。本発明は、特に、培養工程において用いる水分量を低く抑えた、エクオール産生能を有する微生物によるエクオールの製造方法に関する。
大豆、葛などのマメ科の植物に多く含まれているイソフラボン類はポリフェノールの分類のひとつであり、イソフラボンを基本骨格とするフラボノイドである。近年の調査により、イソフラボン類は女性ホルモン作用(エストロゲン)や抗酸化作用を有し、イソフラボン類を摂取することにより、乳癌、前立腺癌、骨粗しょう症、高コレステロール血症、心疾患、更年期障害などに対して予防効果があることが明らかとなっている。
イソフラボン類は、たとえば大豆内では、糖と共有結合した配糖体の形、ダイジン(daidzin)、グリシチン(glycitin)、ゲニスチン(genistin)として存在しており、アグリコンの形ではごく少量存在しているのみである。これら配糖体はさらにマロニル化、アセチル化されているものも存在している。これらの配糖体は、ヒトや動物の体内に入ると消化酵素又は腸内細菌の産生する酵素であるβグルコシダーゼ等の働きにより、それぞれダイゼイン(daidzein)、グリシテイン(glycitein)、ゲニステイン(genistein)となる。さらに、ダイゼインは腸内細菌の働きにより、ジヒドロダイゼイン(dihydrodaidzein)を経て、O-デスメチルアンゴレンシン(O-desmethylangolensin:O-DMA)又はエクオール(equol)へと酵素的に変換されることが知られている。
イソフラボン類は、たとえば大豆内では、糖と共有結合した配糖体の形、ダイジン(daidzin)、グリシチン(glycitin)、ゲニスチン(genistin)として存在しており、アグリコンの形ではごく少量存在しているのみである。これら配糖体はさらにマロニル化、アセチル化されているものも存在している。これらの配糖体は、ヒトや動物の体内に入ると消化酵素又は腸内細菌の産生する酵素であるβグルコシダーゼ等の働きにより、それぞれダイゼイン(daidzein)、グリシテイン(glycitein)、ゲニステイン(genistein)となる。さらに、ダイゼインは腸内細菌の働きにより、ジヒドロダイゼイン(dihydrodaidzein)を経て、O-デスメチルアンゴレンシン(O-desmethylangolensin:O-DMA)又はエクオール(equol)へと酵素的に変換されることが知られている。
エクオールは、これらの代謝産物の中で最もエストロゲン活性が高いことが知られている。しかしながら、人間の場合、イソフラボンの代謝には個人差があり、上記のようにダイゼインを発酵させてエクオールを産生する能力を有する腸内細菌を保有する人は少なく、その保有率は日本人で約5割、欧米人で約3割程度であることが明らかとなっている。そのため、エクオール産生菌を保有しない人は、大豆等のマメ科食物を摂取してもエクオールを体内で産生することができないという問題点が存在していた。
これらの課題を克服するために、乳酸菌等の嫌気性微生物を用いて体外的にエクオールを産生させる試みがなされている(特許文献1~5)。しかしながら、培養濃度が低く、製品化する際に多量の水を蒸発させる必要があり、エネルギーを多量に消費する状況であった。エネルギーの無駄遣いは、二酸化炭素を多く排出し、地球温暖化を進行させてしまう重大な問題である。
特許文献5では、適量の水を大豆胚軸に加えて水分含量を調整し、上記エタオール産生菌を接種することにより大豆胚軸の発酵処理を行うことを開示する。また、該文献は、大豆胚軸に添加される水の量が、使用するエタオール産生菌の種類や発酵槽の種類等によって応じて適宜設定されることを開示し、通常、発酵開始時に、大豆胚軸と水が以下の割合で共存することを開示する:大豆胚軸(乾燥重量換算)100重量部に対して、水が400~4000重量部、好ましくは500~2000重量部、更に好ましくは600~1000重量部。しかしながら、上述したとおり、多量の水を用いると製品化の際に多量の水を蒸発させる必要があり、エネルギーを多量に消費するという問題があった。
そこで、本発明の目的は、微生物を利用したエクオールを製造において、従来よりも少ない水分条件でエクオールを製造する方法を提供することにある。
上記課題を解決するため、本発明者らは、以下の発明を見出した。
<1> ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物で培養する工程;を有してエクオールを産生するエクオールの製造方法であって、
前記培養工程において、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満で培養を行う、上記方法。
<1> ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物で培養する工程;を有してエクオールを産生するエクオールの製造方法であって、
前記培養工程において、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満で培養を行う、上記方法。
<2> 上記<1>において、エクオール原料が大豆胚軸であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
<3> 上記<1>において、エクオール原料が大豆胚軸抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
<4> 上記<1>において、エクオール原料が大豆胚軸抽出物精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
<3> 上記<1>において、エクオール原料が大豆胚軸抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
<4> 上記<1>において、エクオール原料が大豆胚軸抽出物精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
<5> 上記<1>において、エクオール原料が大豆抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
<6> 上記<1>において、エクオール原料が大豆抽出精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
<6> 上記<1>において、エクオール原料が大豆抽出精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
本発明により、微生物を利用したエクオールを製造において、従来よりも少ない水分条件でエクオールを製造する方法を提供することができる。
本願は、エクオールの製造方法、特に培養工程において用いる水分量を低く抑えたエクオールの製造方法を提供する。
具体的には、本願は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物で培養する工程;を有してエクオールを産生するエクオールの製造方法であって、
前記培養工程において、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満で培養を行う、上記方法を提供する。
具体的には、本願は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物で培養する工程;を有してエクオールを産生するエクオールの製造方法であって、
前記培養工程において、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満で培養を行う、上記方法を提供する。
<培養工程>
培養工程は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程である。
該培養工程は、エクオールを産生することができれば、その条件等は、用いる水の条件以外、特に限定されない。例えば、従来公知の条件を用いることができるが、該条件に限定されない。
培養工程は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する微生物で培養する工程である。
該培養工程は、エクオールを産生することができれば、その条件等は、用いる水の条件以外、特に限定されない。例えば、従来公知の条件を用いることができるが、該条件に限定されない。
前記培養工程において、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水を400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満で培養を行う。
液体若しくは、高濃度スラリー状態での微生物発酵を利用したエクオールの製造方法は、知られていたものの、上記のような水分量で培養を行うことによって、エクオールを製造する方法は、知られていなかった。
培養工程での水分量を抑えることによって、エクオールを製品化する際に使用するエネルギーを画期的に減らすことが実現でき、安価にエクオールを製造することが可能となる。ひいては、より多くの人々に、エクオールを供給することができるようになる。また、製造する為に必要なエネルギーを大幅に削減することができ、地球温暖化抑制対策としても非常に有効である。
液体若しくは、高濃度スラリー状態での微生物発酵を利用したエクオールの製造方法は、知られていたものの、上記のような水分量で培養を行うことによって、エクオールを製造する方法は、知られていなかった。
培養工程での水分量を抑えることによって、エクオールを製品化する際に使用するエネルギーを画期的に減らすことが実現でき、安価にエクオールを製造することが可能となる。ひいては、より多くの人々に、エクオールを供給することができるようになる。また、製造する為に必要なエネルギーを大幅に削減することができ、地球温暖化抑制対策としても非常に有効である。
具体的には、ある面において、エクオール原料は大豆胚軸であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
また、本発明の他の面において、エクオール原料は、大豆胚軸抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
また、本発明の他の面において、エクオール原料は、大豆胚軸抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
さらに、本発明のさらに他の面において、エクオール原料が大豆胚軸抽出物精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
また、本発明のさらなる他の面において、エクオール原料が大豆抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
さらに、本発明のさらなる他の面において、エクオール原料が大豆抽出精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
また、本発明のさらなる他の面において、エクオール原料が大豆抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
さらに、本発明のさらなる他の面において、エクオール原料が大豆抽出精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が400重量部未満、好ましくは350重量部未満、より好ましくは300重量部未満であるのがよい。
培養工程において、水は、流動性をたもてる程度であればよく、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、例えば100重量部以上、好ましくは150重量部以上、より好ましくは180重量部以上であるのがよい。
なお、原料は、水分を含んでもよいが、該水分と合わせた水分量が上記範囲であるのがよい。
ここで、「乾燥重量」とは、105℃、4時間で重量減少する水を代表とする揮発成分を除いた重量である。
なお、原料は、水分を含んでもよいが、該水分と合わせた水分量が上記範囲であるのがよい。
ここで、「乾燥重量」とは、105℃、4時間で重量減少する水を代表とする揮発成分を除いた重量である。
<<エクオール原料>>
本発明の方法において用いるエクオール原料は、文字通り、エクオールの原料として用いられるものであれば、その形態は問わない。
エクオール原料は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種を含んでいればよく、その形態は問わない。例えば、ダイゼイン配糖体そのもの、ダイゼインそのもの、又はジヒドロダイゼインそのものであっても、それらを含有するもの、例えば大豆、大豆加工物、大豆胚軸、大豆胚軸加工物、例えば大豆抽出物、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物が挙げられ、具体的には市販イソフラボンであってもよい。
本発明の方法において用いるエクオール原料は、文字通り、エクオールの原料として用いられるものであれば、その形態は問わない。
エクオール原料は、ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種を含んでいればよく、その形態は問わない。例えば、ダイゼイン配糖体そのもの、ダイゼインそのもの、又はジヒドロダイゼインそのものであっても、それらを含有するもの、例えば大豆、大豆加工物、大豆胚軸、大豆胚軸加工物、例えば大豆抽出物、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物が挙げられ、具体的には市販イソフラボンであってもよい。
<<微生物>>
本発明の方法は、エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物を用いる。なお、「エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力」を、本明細書において、単に「エクオール産生能」という場合がある。
本発明の方法において用いるエクオール産生能を有する微生物は、上記エクオール原料からエクオールを産生する能力を有する微生物であれば、特に限定されない。
なお、エクオール原料は、微生物の「エクオール産生能」との関係において決まる。例えば、ある微生物Aがダイゼイン配糖体については「エクオール産生能」を有しないが、ダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、該微生物Aのエクオール原料は、「ダイゼイン」となる。また、この場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換する工程を培養工程前に有してもよい。例えば、ある微生物Bがダイゼイン配糖体及びダイゼインについては「エクオール産生能」を有しないが、ジヒドロダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、該微生物Bのエクオール原料は、「ジヒドロダイゼイン」となる。また、この場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換し、ダイゼインをさらにジヒドロダイゼインへと変換する工程を培養工程前に有してもよい。
微生物として、嫌気性微生物を挙げることができる。該嫌気性微生物は、例えば、37℃付近(例えば30~42℃)の温度でエクオールを産生することができる。
本発明の方法は、エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物を用いる。なお、「エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力」を、本明細書において、単に「エクオール産生能」という場合がある。
本発明の方法において用いるエクオール産生能を有する微生物は、上記エクオール原料からエクオールを産生する能力を有する微生物であれば、特に限定されない。
なお、エクオール原料は、微生物の「エクオール産生能」との関係において決まる。例えば、ある微生物Aがダイゼイン配糖体については「エクオール産生能」を有しないが、ダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、該微生物Aのエクオール原料は、「ダイゼイン」となる。また、この場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換する工程を培養工程前に有してもよい。例えば、ある微生物Bがダイゼイン配糖体及びダイゼインについては「エクオール産生能」を有しないが、ジヒドロダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、該微生物Bのエクオール原料は、「ジヒドロダイゼイン」となる。また、この場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換し、ダイゼインをさらにジヒドロダイゼインへと変換する工程を培養工程前に有してもよい。
微生物として、嫌気性微生物を挙げることができる。該嫌気性微生物は、例えば、37℃付近(例えば30~42℃)の温度でエクオールを産生することができる。
なお、エクオール産生能は、培養物中のダイゼイン、ジヒドロダイゼイン、エクオール等を定量することにより確認することができる。これらの定量は、当業者であれば、例えばWO2012/033150、特開2012-135217、特開2012-135218、特開2012-135219等の記載に基づき行うことができる。これらの定量方法の一例を以下に示す。
例えば、培養液に酢酸エチルを加えて、激しく攪拌した後遠心し、酢酸エチル層を取り出す。必要に応じて同培養液に同様の操作を数回行い、それら酢酸エチル層を合わせてエクオール抽出液を得ることができる。この抽出液をエバポレーターで減圧下に濃縮、乾固し、メタノールに溶解させる。これをポリテトラフルオロエチレン(PTFE)膜等の膜を使用して濾過し、不溶物を除去したものを高速液体クロマトグラフィー測定サンプルとすることができる。高速液体クロマトグラフィーの条件は例えば以下のものを例示することができるがこれに限定されない。
[高速液体クロマトグラフィー条件]
カラム:Phenomenox Luna 5uC18、2.0mm×150mm(島津ジーエルシー)
移動相:水/メタノール[55:45,v/v]
流速:0.2mL/min
カラム温度:40℃
検出:UV280nm
保持時間:ジヒドロダイゼインが13.8分、ダイゼインが19.6分、グリシテインが22.5分、エクオールが25.6分、ゲニステインが35.0分
カラム:Phenomenox Luna 5uC18、2.0mm×150mm(島津ジーエルシー)
移動相:水/メタノール[55:45,v/v]
流速:0.2mL/min
カラム温度:40℃
検出:UV280nm
保持時間:ジヒドロダイゼインが13.8分、ダイゼインが19.6分、グリシテインが22.5分、エクオールが25.6分、ゲニステインが35.0分
エクオール産生する能力を有する微生物として、以下の属に分類される微生物を挙げることができるがこれらに限定されない。
アドレクラウチア(Adlercreutzia)属
バクテロイデス(Bacteroides)属
ビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)属
クロストリジウム(Clostridium)属
エガセラ(Eggerthella)属
エンテロコッカス(Enterococcus)属
エンテロハブダス(Enterorhabdus)属
ユーバクテリウム(Eubacterium)属
フィネゴルディア(Finegoldia)属
ラクトバチルス(Lactobacillus)属
ラクトコッカス(Lactococcus)属
パラエガセラ(Paraeggerthella)属
ペディオコッカス(Pediococcus)属
プロテウス(Proteus)属
シャーペア(Sharpea)属
スラキア(Slackia)属
ストレプトコッカス(Streptococcus)属
ベイロネラ(Veillonella)属
アドレクラウチア(Adlercreutzia)属
バクテロイデス(Bacteroides)属
ビフィドバクテリウム(Bifidobacterium)属
クロストリジウム(Clostridium)属
エガセラ(Eggerthella)属
エンテロコッカス(Enterococcus)属
エンテロハブダス(Enterorhabdus)属
ユーバクテリウム(Eubacterium)属
フィネゴルディア(Finegoldia)属
ラクトバチルス(Lactobacillus)属
ラクトコッカス(Lactococcus)属
パラエガセラ(Paraeggerthella)属
ペディオコッカス(Pediococcus)属
プロテウス(Proteus)属
シャーペア(Sharpea)属
スラキア(Slackia)属
ストレプトコッカス(Streptococcus)属
ベイロネラ(Veillonella)属
エクオールを産生する能力を有する微生物として、具体的には、以下の微生物を挙げることができるがこれらに限定されない。
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus)
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens)
バクテロイデス・オバツス(Bacteroides ovatus)
ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)
ビフィドバクテリウム・ロングム(Bifidobacterium longum)
クロストリジウム・エスピー(Clostridium sp.)
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp. )
エンテロコッカス・フェカーリス(Enterococcus faecalis)
エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)
エンテロハブダス・ムコシコラ(Enterorhabdus mucosicola)
ユーバクテリウム・エスピー(Eubacterium sp.)
フィネゴルディア・マグナ(Finegoldia magna)
ラクトバチルス・ファーメンタム(Lactobacillus fermentum)
ラクトバチルス・ムコサエ(Lactobacillus mucosae)
ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)
ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus plantarum)
ラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)
ラクトバチルス・エスピー(Lactobacillus sp.)
ラクトコッカス・ガルビエ(Lactococcus garvieae)
ラクトコッカス・エスピー(Lactococcus sp.)
パラエガセラ・エスピー(Paraeggerthella sp.)
ペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)
プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)
シャーペア・アザブエンシス(Sharpea azabuensis)
スラキア・エクオリファシエンス(Slackia equolifaciens)
スラキア・イソフラボニコンバーテンス(Slackia isoflavoniconvertens)
スラキア・エスピー(Slackia sp.)
ストレプトコッカス・コンステラタス(Streptococcus constellatus)
ストレプトコッカス・インターメディウス(Streptococcus intermedius)
ベイロネア・エスピー(Veillonella sp.)
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus)
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens)
バクテロイデス・オバツス(Bacteroides ovatus)
ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidobacterium breve)
ビフィドバクテリウム・ロングム(Bifidobacterium longum)
クロストリジウム・エスピー(Clostridium sp.)
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp. )
エンテロコッカス・フェカーリス(Enterococcus faecalis)
エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)
エンテロハブダス・ムコシコラ(Enterorhabdus mucosicola)
ユーバクテリウム・エスピー(Eubacterium sp.)
フィネゴルディア・マグナ(Finegoldia magna)
ラクトバチルス・ファーメンタム(Lactobacillus fermentum)
ラクトバチルス・ムコサエ(Lactobacillus mucosae)
ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)
ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus plantarum)
ラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)
ラクトバチルス・エスピー(Lactobacillus sp.)
ラクトコッカス・ガルビエ(Lactococcus garvieae)
ラクトコッカス・エスピー(Lactococcus sp.)
パラエガセラ・エスピー(Paraeggerthella sp.)
ペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)
プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)
シャーペア・アザブエンシス(Sharpea azabuensis)
スラキア・エクオリファシエンス(Slackia equolifaciens)
スラキア・イソフラボニコンバーテンス(Slackia isoflavoniconvertens)
スラキア・エスピー(Slackia sp.)
ストレプトコッカス・コンステラタス(Streptococcus constellatus)
ストレプトコッカス・インターメディウス(Streptococcus intermedius)
ベイロネア・エスピー(Veillonella sp.)
上記記載の微生物のうち、例えばエガセラ(Eggerthellaceae)科に分類される微生物、ビフィドバクテリアセアエ(Bifidobacteriaceae)科に分類される微生物、クロストリジアセアエ(Clostridiaceae)科に分類される微生物、コーリオバクテリアセアエ(Coriobacteriaceae)科に分類される微生物、エンテロコッカセアエ(Enterococcaceae)科に分類される微生物、ユーバクテリアセアエ(Eubacteriaceae)科に分類される微生物、モルガネラセアエ(Morganellaceae)科に分類される微生物、ペプトニフィラセアエ(Peptoniphilaceae)科に分類される微生物、ラクトバチラセアエ(Lactobacillaceae)科に分類される微生物、ストレプトコッカセアエ(Streptococcaceae)科に分類される微生物、ベイロネラセアエ(Veillonellaceae)科に分類される微生物、又はこれらの類縁微生物が挙げられる。好ましくは、アドレクラウチア(Adlercreutzia)属、バクテロイデス属、ビフィドバクテリウム属、クロストリジウム属、コリオバクテリウム属、エガセラ属、エンテロコッカス属、ユーバクテリウム属、フィネゴルディア属、ラクトバチルス属、ラクトコッカス属、パラエガセラ属、ペディオコッカス属、プロテウス属、シャーペア属、スラキア属、ストレプトコッカス属、ベイロネア属、又はこれらの類縁微生物に分類される微生物であるのがよい。さらに好ましくは、アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス、アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス、バクテロイデス・オバツス、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・ロングム、クロストリジウム・エスピー、エガセラ・エスピー、エンテロコッカス・フェカーリス、エンテロコッカス・フェシウム、エンテロハブダス・ムコシコラ、ユーバクテリウム・エスピー、フィネゴルディア・マグナ、ラクトバチルス・ファーメンタム、ラクトバチルス・インテスティナリス、ラクトバチルス・ムコサエ、ラクトバチルス・パラカゼイ、ラクトバチルス・プランタルム、ラクトバチルス・ラムノサス、ラクトバチルス・エスピー、ラクトコッカス・ガルビエ、ラクトコッカス・エスピー、パラエガセラ・エスピー、ペディオコッカス・ペントサセウス、プロテウス・ミラビリス、シャーペア・アザブエンシス、スラキア・エクオリファシエンス、スラキア・イソフラボニコンバーテンス、スラキア・エスピー、ストレプトコッカス・コンステラタス、ストレプトコッカス・インターメディウス、ベイロネア・エスピーであるのがよい。
上記記載の微生物のうち、特に以下に記載する微生物のいずれか又はこれらの菌と同様の種としての性質を有する類縁の菌をより好ましい嫌気性微生物として挙げることができる。
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus)DSM 18785株
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens)DSM 19450株
バクテロイデス・オバツス(Bacteroides ovatus)E-23-15株
ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidibacterium breve)ATCC 15700株
ビフィドバクテリウム・ロングム(Bifidobacterium longum)BB536株
クロストリジウム・エスピー(Clostridium sp.)HGH136株
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp.)Julong 732株
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp.)YY7918株
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp.)D1株
エンテロコッカス・フェカーリス(Enterococcus faecalis)INIA P333株
エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)EPI1株
エンテロハブダス・ムコシコラ(Enterohabdus mucosicola)Mt1B8株
ユーバクテリウム・エスピー(Eubacterium sp.)D2株
フィネゴルディア・マグナ(Finegoldia magna)EPI3株
ラクトバチルス・ファーメンタム(Lactobacillus fermentum)DPPMA114株
ラクトバチルス・インテスティナリス(Lactobacillus intestinalis)KTCT13676BP株
ラクトバチルス・ムコサエ(Lactobacillus mucosae)EPI2株
ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)JS1株
ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus plantarum)DPPMA24W株
ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus plantarum)DPPMASL33株
ラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)DPPMAAZ1株
ラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)INIA P540株
ラクトバチルス・エスピー(Lactobacillus sp.)Niu-O16株
ラクトコッカス・ガルビエ(Lactococcus garvieae)20-92株
パラエガセラ・エスピー(Paraeggerthella sp.)SNR40-432株
ペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)CS1株
プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)LH-52株
シャーペア・アザブエンシス(Sharpea azabuensis)ST18株
スラキア・エクオリファシエンス(Slackia equolifaciens)DSM 24851株
スラキア・イソフラボニコンバーテンス(Slackia isoflavoniconvertens)DSM 2200
6株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)FJK1株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)NATTS株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)YIT11861株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)TM-30株
ストレプトコッカス・コンステラタス(Streptococcus constellatus)E-23-17株
ストレプトコッカス・インターメディウス(Streptococcus intermedius)A6G-225株
ベイロネア・エスピー(Veillonella sp.)EP株。
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus)DSM 18785株
アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・エクオリファシエンス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. equolifaciens)DSM 19450株
バクテロイデス・オバツス(Bacteroides ovatus)E-23-15株
ビフィドバクテリウム・ブレーベ(Bifidibacterium breve)ATCC 15700株
ビフィドバクテリウム・ロングム(Bifidobacterium longum)BB536株
クロストリジウム・エスピー(Clostridium sp.)HGH136株
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp.)Julong 732株
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp.)YY7918株
エガセラ・エスピー(Eggerthella sp.)D1株
エンテロコッカス・フェカーリス(Enterococcus faecalis)INIA P333株
エンテロコッカス・フェシウム(Enterococcus faecium)EPI1株
エンテロハブダス・ムコシコラ(Enterohabdus mucosicola)Mt1B8株
ユーバクテリウム・エスピー(Eubacterium sp.)D2株
フィネゴルディア・マグナ(Finegoldia magna)EPI3株
ラクトバチルス・ファーメンタム(Lactobacillus fermentum)DPPMA114株
ラクトバチルス・インテスティナリス(Lactobacillus intestinalis)KTCT13676BP株
ラクトバチルス・ムコサエ(Lactobacillus mucosae)EPI2株
ラクトバチルス・パラカゼイ(Lactobacillus paracasei)JS1株
ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus plantarum)DPPMA24W株
ラクトバチルス・プランタルム(Lactobacillus plantarum)DPPMASL33株
ラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)DPPMAAZ1株
ラクトバチルス・ラムノサス(Lactobacillus rhamnosus)INIA P540株
ラクトバチルス・エスピー(Lactobacillus sp.)Niu-O16株
ラクトコッカス・ガルビエ(Lactococcus garvieae)20-92株
パラエガセラ・エスピー(Paraeggerthella sp.)SNR40-432株
ペディオコッカス・ペントサセウス(Pediococcus pentosaceus)CS1株
プロテウス・ミラビリス(Proteus mirabilis)LH-52株
シャーペア・アザブエンシス(Sharpea azabuensis)ST18株
スラキア・エクオリファシエンス(Slackia equolifaciens)DSM 24851株
スラキア・イソフラボニコンバーテンス(Slackia isoflavoniconvertens)DSM 2200
6株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)FJK1株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)NATTS株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)YIT11861株
スラキア・エスピー(Slackia sp.)TM-30株
ストレプトコッカス・コンステラタス(Streptococcus constellatus)E-23-17株
ストレプトコッカス・インターメディウス(Streptococcus intermedius)A6G-225株
ベイロネア・エスピー(Veillonella sp.)EP株。
なお、上記嫌気性微生物は、その寄託番号に示された寄託機関から入手することができる。各受託番号は、当該嫌気性微生物が、それぞれ次の寄託機関に寄託されていることを示す。
FERM 特許生物寄託センター;International Patent Organism Depositary (IPOD)
http://unit.aist.go.jp/pod/ci/index.html
DSM German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (DSMZ)
http://www.dsmz.de/
KCCM Korean Culture Center of Microorganisms
FERM 特許生物寄託センター;International Patent Organism Depositary (IPOD)
http://unit.aist.go.jp/pod/ci/index.html
DSM German Collection of Microorganisms and Cell Cultures (DSMZ)
http://www.dsmz.de/
KCCM Korean Culture Center of Microorganisms
本発明においては、エクオールの産生能を有する嫌気性微生物は、エクオールの生産に適した条件で培養される。本発明におけるエクオールの生産に適した条件とは、エクオールの生成活性を持つ嫌気性微生物の生存と活動が維持される条件をいう。より具体的には、嫌気性微生物の生存が可能な気相条件(嫌気性条件)が維持され、当該嫌気性微生物の活性と増殖を支持するための栄養素が与えられることを言う。嫌気性微生物の生存に適した種々の培地組成が公知である。したがって、先に示したエクオールの産生能を有する嫌気性微生物について、当業者は、適切な培地組成を選択することができる。たとえば、Difco社製のBHI培地や、実施例において用いた培地等を使用することができるがこれらに限定されない。
本発明で用いられる培地には、水溶性の有機物を炭素源として加えることができる。水溶性の有機物として、以下の化合物を挙げることができるが、これらに限定されない。ここで添加する炭素源は、粉末、固体状、液体状のいずれの性状であっても使用することができる。
ソルボース、フラクトース、グルコース等の糖類;
メタノール等のアルコール類;
吉草酸、酪酸、プロピオン酸、酢酸、ギ酸等有機酸類、またはこれらの塩。
ソルボース、フラクトース、グルコース等の糖類;
メタノール等のアルコール類;
吉草酸、酪酸、プロピオン酸、酢酸、ギ酸等有機酸類、またはこれらの塩。
炭素源としての培地に加える有機物の濃度は、効率的に培地中の嫌気性微生物を発育させるために適宜調節することができる。
培地には、窒素源を加えることができる。本発明において、窒素源としては通常の発酵に用いうる各種の窒素化合物を用いることができる。好ましい無機窒素源は、アンモニウム塩、及び硝酸塩である。より好ましい無機窒素源は、硫安、塩化アンモニウム、リン酸アンモニウム、リン酸水素アンモニウム、硝酸カリウム及び硝酸ソーダである。一方、好ましい有機窒素源はアミノ酸類、酵母エキス、ペプトン類、肉エキス、肝臓エキス、消化血清末等である。より好ましい有機窒素源はアルギニン、システイン、シスチン、シトルリン、リジン、酵母エキス、ペプトン類である。ここで添加する窒素源は、粉末、固体状、液体状のいずれの性状であっても使用することができる。また、エキス類を使用する場合は、窒素源、炭素源、両方の栄養素として使用することもできる。
さらに、炭素源や窒素源に加えて、エクオールの製造に適した他の有機物あるいは無機物を培地に加えることもできる。たとえば、ビタミン等の補因子や各種の塩類等の無機化合物を培地に加えることによって、嫌気性微生物の増殖や活性を増強できる場合もある。たとえば無機化合物、ビタミン類、動植物由来の微生物増殖補助因子として以下のものを挙げることができる。ここで添加するビタミン等の補因子や各種の塩類等の無機化合物は、粉末、固体状、液体状のいずれの性状であっても使用することができる。また、エキス類を使用する場合は、ビタミン類の補因子や各種の塩類等の無機化合物に加え、さらに窒素源、炭素源としての栄養素も兼ねることもできる。
無機化合物 ビタミン類
リン酸二水素カリウム ビオチン
硫酸マグネシウム 葉酸
硫酸マンガン ピリドキシン
塩化ナトリウム チアミン
塩化コバルト リボフラビン
塩化カルシウム ニコチン酸
硫酸亜鉛 パントテン酸
硫酸銅 ビタミンB12
明ばん チオオクト酸
モリブデン酸ソーダ p-アミノ安息香酸
塩化カリウム
ホウ酸等
塩化ニッケル
タングステン酸ナトリウム
セレン酸ナトリウム
硫酸第一鉄アンモニウム
リン酸二水素カリウム ビオチン
硫酸マグネシウム 葉酸
硫酸マンガン ピリドキシン
塩化ナトリウム チアミン
塩化コバルト リボフラビン
塩化カルシウム ニコチン酸
硫酸亜鉛 パントテン酸
硫酸銅 ビタミンB12
明ばん チオオクト酸
モリブデン酸ソーダ p-アミノ安息香酸
塩化カリウム
ホウ酸等
塩化ニッケル
タングステン酸ナトリウム
セレン酸ナトリウム
硫酸第一鉄アンモニウム
これらの無機化合物やビタミン類、あるいは増殖補助因子を添加して培養液を製造する方法として、従来公知の手法を用いることができる。培地は、液体、半固体状、あるいは固体状とすることができる。
液体とする場合、上述の範囲の水分量での溶液を作成し、エクオール原料、例えば大豆胚軸、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物、大豆抽出物または、大豆抽出物精製物に、添加し混錬する。
半固体状とする場合、エクオール原料、例えば大豆胚軸、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物、大豆抽出物、または大豆抽出物精製物に混錬する。
固体状とする場合、エクオール原料、例えば大豆胚軸、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物、大豆抽出物、または大豆抽出物精製物に添加し混合後、少量の水を加えて混錬するか、又は先に上述の範囲の水分量である少量の水を加えて培地成分を添加後、混錬してもよい。
液体とする場合、上述の範囲の水分量での溶液を作成し、エクオール原料、例えば大豆胚軸、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物、大豆抽出物または、大豆抽出物精製物に、添加し混錬する。
半固体状とする場合、エクオール原料、例えば大豆胚軸、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物、大豆抽出物、または大豆抽出物精製物に混錬する。
固体状とする場合、エクオール原料、例えば大豆胚軸、大豆胚軸抽出物、大豆胚軸抽出物精製物、大豆抽出物、または大豆抽出物精製物に添加し混合後、少量の水を加えて混錬するか、又は先に上述の範囲の水分量である少量の水を加えて培地成分を添加後、混錬してもよい。
本発明において用いる培地は、デキストリン類を含むことができる。デキストリン類を含む培地で嫌気性微生物を培養すれば、培養後に改めて培養物にデキストリン類を接触させることなく、エクオールおよびデキストリン類を含む液を調製することができる。
デキストリン類の培地への添加は、微生物の培養前および培養中に行うことができる。
特にβ-シクロデキストリンを添加する場合は、発酵により、水溶性エクオールβ-シクロデキストリン包接錯体として製造することができる。
デキストリン類の培地への添加は、微生物の培養前および培養中に行うことができる。
特にβ-シクロデキストリンを添加する場合は、発酵により、水溶性エクオールβ-シクロデキストリン包接錯体として製造することができる。
本発明において用いる培地に、消泡剤 好ましくは大豆油、より好ましくはビタミンE入り大豆油を含むことができる。
本願の方法において、微生物、特に嫌気性微生物は、公知の微生物の培養方法にしたがって培養することができる。
本願の方法において、嫌気性微生物を用いる場合には、発酵槽内への酸素の混入を防ぐのがよい。発酵槽は、通常用いられる発酵槽がそのまま利用できる。発酵槽内に混入する酸素を、窒素等の不活性気体で置換することにより、嫌気的な雰囲気を作ることができる。
本発明における培養工程において、その気相は、水素を含む1種類以上の気体からなるのがよい。気相を構成する気体は、水素を含む1種類以上の気体からなれば特に限定されないが、水素及び水素以外の1種以上の気体を有するのがよい。水素以外の気体として、二酸化炭素、窒素、一酸化炭素等を挙げることができるが、特に限定されない。
前記気体の水素濃度は、特に限定されないが、例えば30%以下、10%以下、4%以下などを挙げることができる。
なお、本発明における培養工程において、通気せずゴム栓で密栓したビンや試験管内等の密閉系で行うこともできる。
前記気体の水素濃度は、特に限定されないが、例えば30%以下、10%以下、4%以下などを挙げることができる。
なお、本発明における培養工程において、通気せずゴム栓で密栓したビンや試験管内等の密閉系で行うこともできる。
効率よくエクオールを回収するためには、気相を構成する混合気体の培養槽への通気量として、0.001~2.0V/V/Mガス量/液量/分、例えば0.01~2.0V/V/Mガス量/液量/分とすることができるが、これに限定されない。
培養工程は、培養槽で行うことができ、その形状、大きさは特に限定されない。また、密閉して加熱殺菌でき、気相部にガスを吹き込むことができ、発酵中温度を調節できる装置であれば好適に使用することができる。また、攪拌機を備えていると、混錬しながら、気相部と接触できるため、ガス交換がスムースに行え、反応を良好に進行させることができる。培養槽として、例えば、二軸混錬機やニーダー、リボン式フードミキサー、パドル式フードミキサーなどを例示することができるがこれらに限定されない。
培養槽の形状によっては、無攪はんであっても、攪はんを行ってもよい。攪はんを行う場合、培地を十分に撹はんするため、撹はん機等を利用することもできる。培養槽内の培養物を攪拌することによって、培地成分や基質ガスを嫌気性微生物に接触させる機会を増やして、エクオールの生成効率を最適化することができる。また基質ガスをナノバブルとして供給することもできる。
無攪はんで行う場合は、すのこやトレイに薄く敷き詰めることが望ましい。また、これらを多段に重ねて行ってもよい。
培養槽の形状によっては、無攪はんであっても、攪はんを行ってもよい。攪はんを行う場合、培地を十分に撹はんするため、撹はん機等を利用することもできる。培養槽内の培養物を攪拌することによって、培地成分や基質ガスを嫌気性微生物に接触させる機会を増やして、エクオールの生成効率を最適化することができる。また基質ガスをナノバブルとして供給することもできる。
無攪はんで行う場合は、すのこやトレイに薄く敷き詰めることが望ましい。また、これらを多段に重ねて行ってもよい。
本発明において、微生物を培養する際は常圧で行うこともできるが、加圧する場合、加圧条件は、当該微生物が生育できる条件であれば特に限定されるものではない。好ましい加圧条件としては、0.2MPa以下の範囲、例えば0.02~0.2MPaの範囲を挙げることができるがこれに限定されない。
エクオールの産生量を増加させるため、培養槽の温度は特に制限されるものではないが、好ましくは30℃~40℃をさらに好ましくは33℃~38℃の温度を挙げることができる。
培養時間は、エクオールの生成量、及び/又はイソフラボン類の残存量等に応じて、適宜設定することができる。例えば8~240時間、8~120時間、好ましくは12~160時間、より好ましくは12~72時間、特に好ましくは16~120時間、さらに好ましくは16~60時間を例示することができるがこれらに限定されない。
培養時間は、エクオールの生成量、及び/又はイソフラボン類の残存量等に応じて、適宜設定することができる。例えば8~240時間、8~120時間、好ましくは12~160時間、より好ましくは12~72時間、特に好ましくは16~120時間、さらに好ましくは16~60時間を例示することができるがこれらに限定されない。
本発明の方法は、培養工程前後に、培養工程以外の工程を有してもよい。
例えば、培養工程前に、上述したように、所望の「エクオール原料」の形態にする工程、例えば、ある微生物Aを本発明の方法の培養工程に用いる場合、該微生物Aがダイゼイン配糖体については「エクオール産生能」を有しないが、ダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換する工程を有してもよい。
例えば、培養工程前に、上述したように、所望の「エクオール原料」の形態にする工程、例えば、ある微生物Aを本発明の方法の培養工程に用いる場合、該微生物Aがダイゼイン配糖体については「エクオール産生能」を有しないが、ダイゼインについては「エクオール産生能」を有する場合、ダイゼイン配糖体をダイゼインへと変換する工程を有してもよい。
また、培養工程後に、培養工程で得られたエクオールを含む培養液にpH調整剤を添加しpHを調整する工程を有してもよい。例えば、pHを酸側に調整する場合、pH調整剤は、有機酸及び無機酸からなる群から選ばれる少なくとも1種を有するのがよい。
有機酸として、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸を挙げることができるがこれらに限定されない。また、無機酸として、塩酸、硫酸、及びリン酸を挙げることができるがこれらに限定されない。
例えば、pHをアルカリ側に調整する場合、pH調整剤は、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる1種を有するのがよい。
具体的には、アルカリ側に調整するpH調整剤として、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム及び水酸化マグネシウムを挙げることができるがこれらに限定されない。
有機酸として、炭酸、炭酸水素、クエン酸、コハク酸、フマル酸、乳酸、グルコン酸、酢酸、リンゴ酸、アスコルビン酸及び安息香酸を挙げることができるがこれらに限定されない。また、無機酸として、塩酸、硫酸、及びリン酸を挙げることができるがこれらに限定されない。
例えば、pHをアルカリ側に調整する場合、pH調整剤は、アルカリ金属の水酸化物、及びアルカリ土類金属の水酸化物からなる群から選ばれる1種を有するのがよい。
具体的には、アルカリ側に調整するpH調整剤として、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化カルシウム、酸化カルシウム及び水酸化マグネシウムを挙げることができるがこれらに限定されない。
さらに、培養工程後に、pHを調整する工程を有する場合にはpHを調整する工程後に、遠心分離工程、膜ろ過工程といったエクオールを産生する能力を有する微生物を除去する工程を有してもよい。
また、培養工程で得られた液を乾燥させる工程を有してもよい。乾燥工程は、従来公知の方法により行うことができる。例えば、加熱乾燥処理、凍結乾燥処理、流動床乾燥、流動層乾燥などを挙げることができるがこれらに限定されない。
加熱乾燥処理は、例えば回転ドラム乾燥機や棚式乾燥機を、凍結乾燥処理は凍結乾燥機を、流動床乾燥処理は流動床乾燥使用して行うことができる。乾燥方法は、液体を乾燥できる乾燥機ならば、どのような乾燥機でも良い。
また、加熱乾燥処理は、常圧下でも、減圧下でも行うことができる。減圧下で行う場合は、品温の上昇を防ぐことができ、着色など熱の影響を抑えながら乾燥できる。品温と熱媒の温度差が大きく取れることも乾燥を速やかに行うためにも好適である。
乾燥処理されて得られた物は、必要に応じて粉砕化処理に供してもよい。
以下、本発明を実施例に基づいて説明するが、本発明の範囲は以下の実施例に限定されるものではない。
また、培養工程で得られた液を乾燥させる工程を有してもよい。乾燥工程は、従来公知の方法により行うことができる。例えば、加熱乾燥処理、凍結乾燥処理、流動床乾燥、流動層乾燥などを挙げることができるがこれらに限定されない。
加熱乾燥処理は、例えば回転ドラム乾燥機や棚式乾燥機を、凍結乾燥処理は凍結乾燥機を、流動床乾燥処理は流動床乾燥使用して行うことができる。乾燥方法は、液体を乾燥できる乾燥機ならば、どのような乾燥機でも良い。
また、加熱乾燥処理は、常圧下でも、減圧下でも行うことができる。減圧下で行う場合は、品温の上昇を防ぐことができ、着色など熱の影響を抑えながら乾燥できる。品温と熱媒の温度差が大きく取れることも乾燥を速やかに行うためにも好適である。
乾燥処理されて得られた物は、必要に応じて粉砕化処理に供してもよい。
以下、本発明を実施例に基づいて説明するが、本発明の範囲は以下の実施例に限定されるものではない。
〔実施例1〕
(前培養)
ブレインハートインフュージョン培地に0.5g/Lになるようにアルギニンを添加溶解し、嫌気性微生物培養用18mm試験管(三紳工業製)に10mL分注し、気相を窒素に置換しながらブチルゴム栓とプラスチックキャップをはめて121℃、15分間滅菌した。この培地に、アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus)DSM 18785株を植菌し、無菌フィルターを通した水素ガスで気相を2分間以上置換した後、37℃、48時間静置培養を行い、前培養液を調製した。
(前培養)
ブレインハートインフュージョン培地に0.5g/Lになるようにアルギニンを添加溶解し、嫌気性微生物培養用18mm試験管(三紳工業製)に10mL分注し、気相を窒素に置換しながらブチルゴム栓とプラスチックキャップをはめて121℃、15分間滅菌した。この培地に、アドレクラウチア・エクオリファシエンス・サブスピーシズ・セラツス(Adlercreutzia equolifaciens subsp. celatus)DSM 18785株を植菌し、無菌フィルターを通した水素ガスで気相を2分間以上置換した後、37℃、48時間静置培養を行い、前培養液を調製した。
(本培養)
表1に示したA~G各々の組成で混合し、pH6.9に調整した培地を各々50g採取し、500mLの容器に入れ、121℃、15分間加熱し高圧蒸気滅菌した。この培地に、上記前培養液を1mL植菌し、気相を水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比の混合ガスでガス置換し、37℃で静置培養を行った。気相は、24時間毎に同じ組成(水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比)の混合ガスに置換を繰り返し、96時間培養を行い、本培養物中のエクオール濃度をHPLC法にて分析した。
表1に示したA~G各々の組成で混合し、pH6.9に調整した培地を各々50g採取し、500mLの容器に入れ、121℃、15分間加熱し高圧蒸気滅菌した。この培地に、上記前培養液を1mL植菌し、気相を水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比の混合ガスでガス置換し、37℃で静置培養を行った。気相は、24時間毎に同じ組成(水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比)の混合ガスに置換を繰り返し、96時間培養を行い、本培養物中のエクオール濃度をHPLC法にて分析した。
結果を表2に示す。実施例1より、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水が390重量部以下で、エクオールの濃度が顕著に向上していることを確認した。
〔実施例2〕
(前培養)
GAM培地に10g/Lになるようにアルギニンを添加溶解し、嫌気性微生物培養用18mm試験管(三紳工業製)に10mL分注し、気相を窒素に置換しながらブチルゴム栓とプラスチックキャップをはめて121℃、15分間滅菌した。この培地に、スラキア・エクオリファシエンス(Slackia equlifaciens)DSM 24851株を植菌し、無菌フィルターを通した水素ガスで気相を2分間以上置換した後、37℃、48時間静置培養を行い、前培養液を調製した。
(前培養)
GAM培地に10g/Lになるようにアルギニンを添加溶解し、嫌気性微生物培養用18mm試験管(三紳工業製)に10mL分注し、気相を窒素に置換しながらブチルゴム栓とプラスチックキャップをはめて121℃、15分間滅菌した。この培地に、スラキア・エクオリファシエンス(Slackia equlifaciens)DSM 24851株を植菌し、無菌フィルターを通した水素ガスで気相を2分間以上置換した後、37℃、48時間静置培養を行い、前培養液を調製した。
(本培養)
表1に示したA~G各々の組成で混合し、pH6.9に調整した培地を各々50g採取し、500mLの容器に入れ、121℃、15分間加熱し高圧蒸気滅菌した。この培地に、上記前培養液を1mL植菌し、気相を水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比の混合ガスでガス置換し、37℃で静置培養を行った。気相は、24時間毎に同じ組成(水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比)の混合ガスに置換を繰り返し、96時間培養を行い、本培養物中のエクオール濃度をHPLC法にて分析した。
表1に示したA~G各々の組成で混合し、pH6.9に調整した培地を各々50g採取し、500mLの容器に入れ、121℃、15分間加熱し高圧蒸気滅菌した。この培地に、上記前培養液を1mL植菌し、気相を水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比の混合ガスでガス置換し、37℃で静置培養を行った。気相は、24時間毎に同じ組成(水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比)の混合ガスに置換を繰り返し、96時間培養を行い、本培養物中のエクオール濃度をHPLC法にて分析した。
結果を表3に示す。実施例2より、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水が390重量部以下で、エクオールの濃度が顕著に向上していることを確認した。
〔実施例3〕
(前培養)
GAM培地に10g/Lになるようにアルギニンを添加溶解し、嫌気性微生物培養用18mm試験管(三紳工業製)に10mL分注し、気相を窒素に置換しながらブチルゴム栓とプラスチックキャップをはめて121℃、15分間滅菌した。この培地に、スラキア・イソフラボニコンバーテンス(Slackia isoflavoniconvertens)DSM 22006株を植菌し、無菌フィルターを通した水素ガスで気相を2分間以上置換した後、37℃、48時間静置培養を行い、前培養液を調製した。
(前培養)
GAM培地に10g/Lになるようにアルギニンを添加溶解し、嫌気性微生物培養用18mm試験管(三紳工業製)に10mL分注し、気相を窒素に置換しながらブチルゴム栓とプラスチックキャップをはめて121℃、15分間滅菌した。この培地に、スラキア・イソフラボニコンバーテンス(Slackia isoflavoniconvertens)DSM 22006株を植菌し、無菌フィルターを通した水素ガスで気相を2分間以上置換した後、37℃、48時間静置培養を行い、前培養液を調製した。
(本培養)
表4に示したH~N各々の組成に調整した培地を200mLの容器に入れ、121℃、15分間加熱し高圧蒸気滅菌した。この培地に、上記前培養液を200μL植菌し、気相を水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比の混合ガスでガス置換し、37℃で静置培養を行った。気相は、24時間毎に同じ組成(水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比)の混合ガスに置換を繰り返し、96時間培養を行い、本培養物中のエクオール濃度をHPLC法にて分析した。
表4に示したH~N各々の組成に調整した培地を200mLの容器に入れ、121℃、15分間加熱し高圧蒸気滅菌した。この培地に、上記前培養液を200μL植菌し、気相を水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比の混合ガスでガス置換し、37℃で静置培養を行った。気相は、24時間毎に同じ組成(水素:二酸化炭素:窒素=30:10:60比)の混合ガスに置換を繰り返し、96時間培養を行い、本培養物中のエクオール濃度をHPLC法にて分析した。
結果を表5に示す。実施例3より、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水を減じることでエクオール産生量が向上することが確認でき、特に、水が381重量部以下で、エクオールの濃度が顕著に向上していることを確認した。
Claims (8)
- ダイゼイン配糖体、ダイゼイン及びジヒドロダイゼインからなる群から選ばれる少なくとも1種のエクオール原料を、該エクオール原料を資化してエクオールを産生する能力を有する微生物で培養する工程;を有してエクオールを産生するエクオールの製造方法であって、
前記培養工程において、エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水400重量部未満で培養を行う、上記方法。 - エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水350重量部未満で培養を行う請求項1に記載の方法。
- エクオール原料の乾燥重量100重量部に対して、水300重量部未満で培養を行う請求項1に記載の方法。
- 前記エクオール原料が大豆胚軸であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が請求項1~3のいずれか一項に記載の量で培養を行う、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記エクオール原料が大豆胚軸抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が請求項1~3のいずれか一項に記載の量で培養を行う、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記エクオール原料が大豆胚軸抽出物精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が請求項1~3のいずれか一項に記載の量で培養を行う、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記エクオール原料が大豆抽出物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が請求項1~3のいずれか一項に記載の量で培養を行う、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記エクオール原料が大豆抽出物精製物を含む培地成分であり、その乾燥重量100重量部に対して、水が請求項1~3のいずれか一項に記載の量で培養を行う、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022098960A JP2024000267A (ja) | 2022-06-20 | 2022-06-20 | エクオールの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2022098960A JP2024000267A (ja) | 2022-06-20 | 2022-06-20 | エクオールの製造方法 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2024000267A true JP2024000267A (ja) | 2024-01-05 |
Family
ID=89384701
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2022098960A Pending JP2024000267A (ja) | 2022-06-20 | 2022-06-20 | エクオールの製造方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP2024000267A (ja) |
-
2022
- 2022-06-20 JP JP2022098960A patent/JP2024000267A/ja active Pending
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Wang et al. | Fermentation optimization and kinetic model for high cell density culture of a probiotic microorganism: Lactobacillus rhamnosus LS-8 | |
KR101106668B1 (ko) | 프로테아제 생성능 및 가바 생성능을 가진 식물성 유산균의 이단 발효를 이용한 천연가바 함유 발효물의 제조방법 | |
JP2008061584A (ja) | エクオール生産能を持つ微生物及び飲食品、医薬品、動物飼料およびその製造法 | |
US11168300B2 (en) | Microorganism and production method for urolithins using same | |
WO2018124135A1 (ja) | ウロリチン類の製造方法 | |
JP7373402B2 (ja) | ウロリチン類の製造方法 | |
Guo et al. | Fermentation of soymilk by Lactobacillus acidipiscis isolated from Chinese stinky tofu capable of efficiently biotransforming isoflavone glucosides to dihydrodaidzein and dihydrogenistein | |
JP2023178479A (ja) | 機能性物質の製造方法 | |
JP6715170B2 (ja) | 食品の製造方法 | |
JP2024000267A (ja) | エクオールの製造方法 | |
JP7463627B1 (ja) | エクオールを含む食品組成物およびその製造方法 | |
WO2023199929A1 (ja) | エクオールの製造方法 | |
Tsuda et al. | Bioconversion of daidzin to daidzein by lactic acid bacteria in fermented soymilk | |
JP2024053420A (ja) | エクオールの製造方法 | |
JP7432053B2 (ja) | シクロデキストリンにエクオールが包接された包接体を含有するエクオール吸収性組成物 | |
JP7422056B2 (ja) | エクオール含有食品組成物およびその製造方法 | |
JP7484031B1 (ja) | 組成物の製造方法及び飲食品の製造方法 | |
JP6968575B2 (ja) | 微生物を用いた5‐ヒドロキシエクオールの製造方法 | |
JP7433215B2 (ja) | エコール産生菌の培養方法 | |
Kim | Development of a Chemically Defined Medium to Assay the Metabolism of Lactic Acid Bacteria | |
JP2024015191A (ja) | 機能性物質の製造方法 | |
US20210222206A1 (en) | Method for producing functional substance | |
Zhuo-Teng et al. | Isolation and identification of equol-producing bacterial strains from cultures of pig faeces | |
JP2019180283A (ja) | ウロリチン類の製造方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20240109 |