WO2022075222A1 - 腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤、血清コレステロール値低減剤、及びこれらを含有する飲食品組成物 - Google Patents

腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤、血清コレステロール値低減剤、及びこれらを含有する飲食品組成物 Download PDF

Info

Publication number
WO2022075222A1
WO2022075222A1 PCT/JP2021/036467 JP2021036467W WO2022075222A1 WO 2022075222 A1 WO2022075222 A1 WO 2022075222A1 JP 2021036467 W JP2021036467 W JP 2021036467W WO 2022075222 A1 WO2022075222 A1 WO 2022075222A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
region
area
glucan
molecular weight
intestinal
Prior art date
Application number
PCT/JP2021/036467
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
高生 久下
誠治 小池
Original Assignee
株式会社Adeka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 株式会社Adeka filed Critical 株式会社Adeka
Priority to JP2022555444A priority Critical patent/JPWO2022075222A1/ja
Publication of WO2022075222A1 publication Critical patent/WO2022075222A1/ja

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L2/00Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
    • A23L2/52Adding ingredients
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/125Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/899Poaceae or Gramineae (Grass family), e.g. bamboo, corn or sugar cane
    • A61K36/8998Hordeum (barley)
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/14Prodigestives, e.g. acids, enzymes, appetite stimulants, antidyspeptics, tonics, antiflatulents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06Antihyperlipidemics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Definitions

  • the present invention relates to an intestinal bacterial growth promoting agent, a blood glucose level reducing agent, a serum cholesterol level reducing agent, and a food or drink composition containing these.
  • the balance of intestinal bacteria is important for maintaining good health.
  • many substances have been studied as growth promoting substances of intestinal bacteria, and oligosaccharides such as lactilose and fructooligosaccharide (for example, Patent Document 1) and dietary fiber such as inulin are known.
  • oligosaccharides such as lactilose and fructooligosaccharide (for example, Patent Document 1)
  • dietary fiber such as inulin
  • ⁇ -glucan it is known that ⁇ -1,3-1,6 glucan increases intestinal bacteria (for example, Patent Document 2).
  • An object of the present invention is to provide a novel gut microbiota growth promoting agent capable of improving fermentability in the intestine and promoting the growth of gut microbiota.
  • the present invention includes the following contents.
  • a gramineous plant extract containing 10% by mass or more of ⁇ -1,3-1,4-glucan in the solid content was used as an active ingredient, and the solid content of the gramineous plant extract was measured by GPC.
  • the intestinal bacterial growth promoter according to. [5] The intestinal bacterial growth according to any one of [1] to [4], wherein the intestinal bacterium is at least one selected from Bifidobacterium and Bacteroides. Accelerator.
  • a gramineous plant extract containing 10% by mass or more of ⁇ -1,3-1,4-glucan in the solid content was used as an active ingredient, and the solid content of the gramineous plant extract was measured by GPC.
  • the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region to the total area of all peaks is 10 to 50%.
  • a gramineous plant extract containing 10% by mass or more of ⁇ -1,3-1,4-glucan in the solid content was used as an active ingredient, and the solid content of the gramineous plant extract was measured by GPC.
  • a serum cholesterol level reducing agent in which the ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan to the total area of all peaks in the chromatogram is 70% or more.
  • the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region to the total area of all peaks is 10 to 50%.
  • a food or drink composition for promoting the growth of intestinal bacteria which comprises the agent according to any one of [1] to [5].
  • a food or drink composition for reducing blood glucose level which comprises the agent according to any one of [6] to [8].
  • a food or drink composition for reducing serum cholesterol levels which comprises the agent according to any one of [9] to [11].
  • a novel gut microbiota growth promoting agent capable of improving fermentability in the intestine and promoting the growth of gut microbiota. Since such an intestinal bacterial growth promoter does not easily inhibit the taste of the food or drink when added to the food or drink, it can be used in a wide range of food or drink, and has an effect of reducing fasting blood glucose level and cholesterol in serum. It also has a reducing effect and is extremely beneficial for maintaining the health of the ingested target.
  • the present invention further comprises a novel blood glucose level reducing agent capable of promoting the growth of intestinal bacteria and reducing the fasting blood glucose level, and a novel serum cholesterol level capable of promoting the growth of intestinal bacteria and reducing the serum cholesterol level. Reducing agents can also be provided.
  • FIG. 1 is an image diagram showing the ratio of the area of the molecular weight region in the chromatogram obtained by GPC measurement of the solid content in the gramineous plant extract.
  • FIG. 2 shows the amount of ⁇ -glucan excreted in feces (left figure) and the ⁇ -glucan fermentation rate when the feeds A and B containing the intestinal bacterial growth promoter according to the embodiment of the present invention are ingested. (Right figure) is shown.
  • FIG. 3 shows the measurement results of the cecal weight when the feeds A and B containing the intestinal bacterial growth promoting agent and the control feed according to the embodiment of the present invention are ingested.
  • FIG. 1 is an image diagram showing the ratio of the area of the molecular weight region in the chromatogram obtained by GPC measurement of the solid content in the gramineous plant extract.
  • FIG. 2 shows the amount of ⁇ -glucan excreted in feces (left figure) and the ⁇ -glucan fermentation rate when the feeds A and B containing
  • FIG. 4 shows the measurement results of the short-chain fatty acid concentration in the cecum when the feeds A and B containing the intestinal bacterial growth promoting agent and the control feed according to the embodiment of the present invention were ingested.
  • the upper figure shows the acetic acid concentration, and the lower figure shows the propionic acid concentration.
  • FIG. 5 shows the measurement results of the number of bacteria in the cecum when the feeds A and B containing the intestinal bacterial growth promoting agent and the control feed according to the embodiment of the present invention are ingested.
  • the upper figure shows Bifidobacterium bacteria, the middle figure shows Bacteroides bacteria, and the lower figure shows Lactobacillus bacteria.
  • FIG. 6 shows the measurement results of the fasting blood glucose level when the feeds A and B containing the intestinal bacterial growth promoting agent and the control feed according to the embodiment of the present invention were ingested.
  • FIG. 7 shows the measurement results of serum cholesterol levels when feeds A and B containing an intestinal bacterial growth promoter and a control feed according to an embodiment of the present invention are ingested.
  • the upper figure shows the LDL cholesterol level, and the lower figure shows the HDL cholesterol level.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention contains a gramineous plant extract as an active ingredient.
  • the gramineous plant extract means an extract obtained by extracting a solvent-soluble component from a gramineous plant.
  • Examples of gramineous plants for obtaining gramineous plant extracts include rice, wheat, corn, morokoshi, barley, millet, millet, barley, oats (crow barley) and Grains such as barley can be mentioned.
  • any of bran, bran, malt, germ and endosperm sites obtained in the grain refining step may be used, including crushed whole seeds (whole grain flour). It is preferable that the whole grain flour of barley or oats, the endosperm portion obtained by grinding these grains from the outer periphery, and the bran, rice bran, wheat or corn bran or germ generated at that time, and more preferably barley. Whole grains of wheat and barley, the endosperm portion obtained by grinding these grains from the outer periphery, and the bran generated at that time.
  • ⁇ -1,3-1,4-glucan since the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan is relatively high, it is preferable to use whole barley seeds (whole grains).
  • the ⁇ -1,3-1,4-glucan content of barley varies depending on the variety, but it is easy to obtain an extract containing 10% by mass or more of ⁇ -1,3-1,4-glucan in the solid content. It is preferably 3% by mass or more, more preferably 7% by mass or more.
  • the ⁇ -1,3-1,4-glucan content of barley can be measured by the same method as the measurement of the ⁇ -1,3-1,4-glucan content in the solid content of the grass extract described later.
  • the extraction method for obtaining an extract from a gramineous plant is not particularly limited, and the gramineous plant may be added to an extraction solvent for extraction, and an extract insoluble in the solvent may be separated to obtain an extract.
  • the extraction solvent is not particularly limited, and water, hot water, hot water or salt solution, an acid or alkaline aqueous solution, an organic solvent and the like can be used.
  • ⁇ -1,3-1,4-glucan in rice plants can be dissolved in water as a water-soluble polymer, so that it is water, hot water, hot water or salt solution, and further acid or alkaline.
  • any one of the aqueous solutions of the above, or a combination thereof more preferably water, hot water or hot water, and further preferably using hot water having a temperature of 4 ° C. or higher and 80 ° C. or lower.
  • the hot water is more preferably 10 ° C. or higher and 80 ° C. or lower, further preferably 25 ° C. or higher and 80 ° C. or lower, and particularly preferably 40 ° C. or higher and 70 ° C. or lower.
  • the amount of the extraction solvent used for the gramineous plant as a raw material is not particularly limited, and for example, the amount used can be arbitrarily set in the range of 2 to 100 times the amount (based on mass) with respect to the raw material.
  • the extraction time is not particularly limited, but when the hot water of 4 ° C. or higher and 80 ° C. or lower is used, the extraction time is about 10 minutes to 24 hours. Further, an extraction accelerator or the like can be added at the time of extraction.
  • the extraction method for example, as a method for obtaining a high molecular weight ⁇ -1,3-1,4-glucan from barley or oat, a method of producing by water extraction using polywax barley as a raw material (for example).
  • a method for obtaining a water-soluble ⁇ -glucan having a weight average molecular weight of 100,000 to 1,000,000 by using barley or oat as a raw material and then neutralizing or precipitating alcohol see, for example, Japanese Patent Publication No. 4-11197.
  • a method for extracting water-soluble ⁇ -glucan in hot water at 80 to 90 ° C. using barley bran having a fermented yield of 82% or less as a raw material for example, JP-A-11-225706). (Refer to the official gazette, etc.) and the like.
  • ⁇ -1,3-1,4 glucan contained in the grass extract has a high thickening effect, it can be reduced in molecular weight by a known method.
  • a method for reducing the molecular weight of the above ⁇ -1,3-1,4-glucan any of the known hydrolysis reactions of polysaccharides can be used.
  • water-soluble polysaccharides are hydrolyzed by pressurizing and heating in the presence of an acid, and this can be used to reduce the molecular weight.
  • it is also effective to reduce the molecular weight by utilizing a hydrolysis reaction by an enzyme, and 1,3- ⁇ -glucanase or the like can be used as such an enzyme.
  • the rice plant extract can be produced by any of the above-mentioned extracts themselves, purified extracts separated into solid and liquid after concentration, concentrated liquids and pastes, and powdered solids. It can be used in any form, in any form, or in any purity.
  • the rice plant extract thus obtained contains components other than ⁇ -1,3-1,4-glucan, for example, saccharides such as monosaccharides and disaccharides, amylose, amylopectin, arabinoxylan, and xyloglucan. Polysaccharides other than ⁇ -1,3-1,4 glucan, water-soluble proteins, etc. are also included.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention comprises a gramineous plant extract containing ⁇ -1,3-1,4-glucan in an amount of 10% by mass or more in a solid content as an active ingredient.
  • a gramineous plant extract containing ⁇ -1,3-1,4-glucan in an amount of 10% by mass or more in a solid content as an active ingredient.
  • GPC chromatogram obtained by GPC measurement of the solid content of the gramineous plant extract
  • the proportion of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less is 70% or more.
  • the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan in the gramineous plant extract is in terms of solid mass. It is more preferably 15% by mass or more, still more preferably 16% by mass or more, 18% by mass or more, 20% by mass or more, 22% by mass or more, 24% by mass or more, or 25% by mass or more.
  • the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan in the grass extract is in such a range, it is preferable from the viewpoint of realizing an intestinal bacterial growth promoter having less sweetness and unpleasant taste.
  • the content of -1,3-1,4-glucan is preferably 50% by mass or less, more preferably 48% by mass or less, 46% by mass or less, 45% by mass or less, 44% by mass or less in terms of solid content. It is 42% by mass or less or 40% by mass or less.
  • the ⁇ -1,3-1,4-glucan content in the solid content of the Gramineae plant extract can be measured by the McCreery method (enzymatic method).
  • McCreery method enzyme method
  • the measurement sample sifted with an opening of 500 ⁇ m (30 mesh) is subjected to infrared rays.
  • the water content is measured in advance using a moisture meter (model number FD-230, manufactured by Kett), and the amount of anhydrous substance W (mg) is calculated.
  • ⁇ -1,3-1,4-glucan content can be determined by the following formula.
  • F and W are as follows.
  • F (100) / (absorbance EG of 100 ⁇ g glucose)
  • W amount of anhydrous substance (mg)
  • the grass extract which is an active ingredient in the intestinal bacterial growth promoting agent of the present invention, is a standard ⁇ -1 for the total area of all peaks in the GPC chromatogram from the viewpoint of realizing the growth promoting effect of intestinal bacteria.
  • 3-1,4-Glucan equivalent The ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less is preferably 70% or more.
  • the ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less is from the viewpoint of obtaining an intestinal bacterial growth promoting agent having a better effect of promoting the growth of intestinal bacteria, and also from the viewpoint of obtaining an intestinal bacterial growth promoting agent having good solubility in water. From the viewpoint of obtaining an accelerator, it is more preferably 75% or more, still more preferably 76% or more, 78% or more, 80% or more, 82% or more, 84% or more or 85% or more.
  • the upper limit of the ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less is not particularly limited and may be 100%, 99% or less, 98% or less, 96% or less, 95% or less, and the like.
  • the ratio of the area of the region having a molecular weight of less than 1,000 in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan to the total area is preferably 10% or more, more preferably 15% or more, still more preferably 20% or more. 22% or more, 24% or more, 25% or more, 26% or more, 28% or more, or 30% or more.
  • the upper limit of the ratio of the area of the region having a molecular weight of less than 1,000 is preferably 60% or less, more preferably 55% or less. More preferably, it is 50% or less, 48% or less, 46% or less, 45% or less, 44% or less, 42% or less, or 40% or less.
  • the ratio of the area of the region having a molecular weight of less than 1,000 is in such a range, it is also preferable from the viewpoint of realizing an intestinal bacterial growth promoter having less sweetness and unpleasant taste.
  • the molecular weight of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan equivalent to the total area of all peaks 1 The proportion of the area of the region of 000 to 200,000 is preferably 30% or more, more preferably 35% or more, 36% or more, 38% or more or 40% or more.
  • the upper limit of the ratio of the area of the region having a molecular weight of 1,000 to 200,000 is preferably 70% or less, more preferably 68% or less, 67% or less, 66% or less, or 65% or less.
  • the gramineous plant extract which is an active ingredient in the intestinal bacterial growth promoting agent of the present invention, is a monosaccharide and a disaccharide from the viewpoint of obtaining an intestinal bacterial growth promoting agent having a better growth promoting effect on the intestinal bacteria.
  • the content is preferably in a specific range. Specifically, in the GPC chromatogram, the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region to the total area of all peaks is 10 to 50%, and the disaccharide region is larger than the monosaccharide region area. It is preferable that the area of the region is large.
  • an intestinal bacterial growth promoter having less sweetness and unpleasant taste can be realized, and an intestinal bacterial growth promoter having good solubility in water can be obtained. It is also preferable from the viewpoint of obtaining.
  • the proportion of the total area of the disaccharide region is more preferably 12% or more, 14% or more, 15% or more or 16% or more.
  • the upper limit of the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region is more preferably 45% or less, 40% or less, 35% or less, and 30% or less from the viewpoint of obtaining an intestinal bacterial growth promoter having less sweetness. Or 25% or less.
  • the area of the disaccharide region is larger than the area of the monosaccharide region, but the “area of the disaccharide region / area of the monosaccharide region” in the GPC chromatogram is From the viewpoint of realizing an intestinal bacterial growth promoter having less sweetness and unpleasant taste, it is preferably 1.1 or more, more preferably 1.3 or more, still more preferably 1.5 or more.
  • the upper limit of the area ratio is not particularly limited, but may be, for example, 5 or less, 3 or less, 2.5 or less, and the like.
  • the peaks of monosaccharides and disaccharides can be easily analyzed by comparing with standard monosaccharides such as glucose and standard disaccharides such as maltose. Specifically, it can be analyzed by a method described later.
  • the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 200 with respect to the total area of all peaks in the GPC chromatogram regardless of the types of monosaccharides, disaccharides, and other components and their content ratios, the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 200 with respect to the total area of all peaks in the GPC chromatogram.
  • the ratio of the area of the region of 000 or less is 70% or more, and preferably, the area of the region having a molecular weight of less than 1,000 in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan with respect to the total area of all peaks.
  • the ratio is 10% or more, and / or the area of the monosaccharide region and the disaccharide region is 10 to 50% in total with respect to the total area of the total peak, and the disaccharide region is larger than the monosaccharide region.
  • the ratio of the area of the region and / or the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region is within the above-mentioned preferable range, and the relationship between the monosaccharide region and the disaccharide region is the above-mentioned relationship.
  • the satisfied rice plant extract can be obtained by appropriately setting the extraction conditions when ⁇ -1,3-1,4-glucan is extracted from the rice family plant by the above-mentioned extraction method.
  • the ⁇ -glucan composition can be efficiently produced when the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan is high in the crushed barley product, ⁇ -1, the crushed barley product is preliminarily classified. It is more preferable to increase the content of 3-1,4-glucan or to use a ground barley product having a high ⁇ -1,3-1,4-glucan content.
  • the glycolytic enzyme can be appropriately used as long as it can reduce the molecular weight of the components contained in barley.
  • the glycolytic enzyme preferably contains amylase, cellulase, or amylase and cellulase. The amount of the enzyme added can be appropriately set depending on the activity thereof.
  • the ratio of the area of each molecular weight region in the GPC chromatogram is the ratio of the area of the region having a standard ⁇ -1,3-1,4-glucan equivalent molecular weight of 200,000 or less to the area of the entire region, and the standard ⁇ -1,3. Calculated as the ratio of the area of the region having a -1,4-glucan-equivalent molecular weight of less than 1,000 and the ratio of the area of the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 1,000 to 200,000. It shall be.
  • the region of the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 1,000 to 200,000 is the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 1,000 and the standard ⁇ -1
  • Regions sandwiched between 3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 200,000, and regions with standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of less than 1,000 are standard ⁇ -1
  • Regions sandwiched between 3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 1,000 and molecular weight of 0 are defined, and regions with standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight of 200,000 or less are these regions. It is the total of.
  • the area ratio in the GPC chromatogram is not only the value of ⁇ -1,3-1,4-glucan but also the gramineous plant extract containing components other than ⁇ -1,3-1,4-glucan. It is a value as
  • the molecular weight in the above GPC measurement is a molecular weight equivalent to standard ⁇ -1,3-1,4-glucan (manufactured by Megasim) measured by GPC (gel permeation chromatography), and specifically, the following apparatus and column. Use the value measured in. ⁇ Equipment EcoSEC HLC8320GPC (manufactured by Tosoh Corporation) -Column TSK GEL G6000PWXL (manufactured by Tosoh) -Shodex Sugar SB-802 (manufactured by Showa Denko)
  • the following conditions can be adopted. ⁇ Eluent Milli-Q Isocratic elution with water ⁇ Flow rate 0.5 mL / min ⁇ Measurement temperature 60 °C (column, inlet, RI) ⁇ Detection RI detection (45 ° C) ⁇ Analysis time 60 minutes ⁇ Sample concentration 1 mg / mL ⁇ Sample injection volume 50 ⁇ L -GPC analysis software (HLC8320GPC, EcoSEC data analysis Ver1.07, manufactured by Tosoh Corporation)
  • the ratio of the area of the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan-equivalent molecular weight region of 1,000 to 200,000 can be specifically calculated by the following procedure.
  • ⁇ -1,3-1,4-glucan (“ ⁇ -Glucan MW Standards”, manufactured by Megazyme) is used as a standard substance, and laminari-oligosaccharide [2-5] (Megazyme) is used as a low molecular weight correction substance.
  • a calibration curve is prepared using (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) and glucose (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). Then, the obtained calibration curve data is input to the GPC analysis software.
  • a chromatogram of a gramineous plant extract is prepared.
  • the vertical axis represents the detection intensity (mV) and the horizontal axis represents the elution time.
  • the total area of all peaks of the chromatogram is calculated.
  • the total area of all peaks in the chromatogram is the sum of the peak areas of all the peaks appearing in the chromatogram. Further, as shown in FIG.
  • the area of the region X between the elution time T 2 of 4-glucan was calculated using GPC analysis software, and the molecular weight of the region was 1,000 to 200,000 in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan. The area.
  • the molecular weight in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan with respect to the total area of all peaks is 1,000 to Calculate the proportion of the area of 200,000 areas.
  • the above area is calculated by drawing a baseline in the chromatogram parallel to the time axis with reference to the state of only the eluent, and calculating based on the baseline.
  • the ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan is the ⁇ -1,3-1,4-glucan having a molecular weight of 200,000 in the obtained chromatogram.
  • the peak area after the elution time T 1 may be calculated by dividing the peak area by the total area of all peaks and multiplying the value obtained by 100.
  • the ratio of the area of the monosaccharide region and the area of the disaccharide region can be specifically calculated by the following procedure.
  • the monosaccharide standard product is used to specify the elution time of the monosaccharide in the GPC measurement.
  • the data is input to GPC analysis software prior to the preparation of the chromatogram of the gramineous plant extract.
  • a chromatogram of a gramineous plant extract is prepared as described above.
  • the area of the region of the time when the monosaccharide was eluted in the obtained chromatogram was calculated in the same manner as above, and used as the area of the region of the monosaccharide.
  • the area of the disaccharide region is calculated in the same manner. Then, by dividing the total value of the area of the obtained monosaccharide region and the area of the disaccharide region by the total area of all peaks and multiplying by 100, the monosaccharide with respect to the total area of all peaks. Calculate the ratio of the total area of the area of the disaccharide and the area of the disaccharide.
  • a monosaccharide standard product used to identify the peak of a monosaccharide for example, glucose (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) can be used.
  • the disaccharide standard product used to identify the peak of the disaccharide marker for example, maltose (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), cellobiose (manufactured by Megazyme), and laminaribiose (manufactured by Megazyme) can be used. ..
  • Examples of the intestinal bacterium whose growth is promoted in the present invention include Bifidobacterium bacterium, Bacteroides bacterium, Lactobacillus bacterium and the like.
  • Bifidobacterium bacteria, Bacteroides bacteria and the like can be satisfactorily propagated.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention may contain components other than the above-mentioned gramineous plant extract as long as the effects of the present invention are not impaired.
  • Contains pharmaceutically acceptable additives such as excipients, binders, lubricants, disintegrants, emulsifiers, surfactants, bases, solubilizers, suspending agents, carriers and the like. good.
  • examples of the excipient include lactose, sucrose, starch, dextrin and the like.
  • the binder include polyvinyl alcohol, gum arabic, tragant, gelatin, hydroxypropylmethyl cellulose, hydroxypropyl cellulose, sodium carboxymethyl cellulose, polyvinylpyrrolidone and the like.
  • examples of the lubricant include magnesium stearate, calcium stearate, talc and the like.
  • examples of the disintegrant include crystalline cellulose, agar, gelatin, calcium carbonate, sodium hydrogencarbonate, dextrin and the like.
  • the emulsifier or surfactant include Tween 60, Tween 80, Span 80, glycerin monostearate and the like.
  • Examples of the base include cetostearyl alcohol, lanolin, polyethylene glycol, fish oil (DHA, EPA, etc.), vegetable oil (rice bran oil, olive oil, soybean oil, etc.) and the like.
  • Examples of the solubilizing agent include polyethylene glycol, propylene glycol, sodium carbonate, sodium citrate and the like.
  • Examples of the suspending agent include polyvinyl alcohol, polyvinylpyrrolidone, methyl cellulose, hydroxymethyl cellulose, sodium alginate and the like, in addition to the above-mentioned surfactant.
  • the carrier may be appropriately selected depending on the dosage form and the like, and examples thereof include ethanol, water, starch and the like.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention may be in any form such as solid (for example, powder), liquid (water-soluble or fat-soluble solution or suspension), paste, etc., and may be a powder, a granule, or a tablet. , Capsules, liquids, suspensions, emulsions and the like.
  • the daily intake of the intestinal bacterial growth promoter of the present invention is preferably 30 mg / day or more, more preferably 300 mg / day or more, and further, in terms of solid content of the gramineous plant extract contained as an active ingredient. It is preferably 3000 mg / day or more. Thereby, a good effect of promoting the growth of intestinal bacteria can be exhibited.
  • the upper limit is preferably 60 g / day or less, more preferably 40 g / day or less, still more preferably 20 g / day or less.
  • the content of the gramineous plant extract in the intestinal bacterial growth promoting agent and the dose of the intestinal bacterial growth promoting agent may be appropriately determined with reference to the above-mentioned guideline for intake.
  • the method for administering the intestinal bacterial growth promoter to the subject is not particularly limited, and examples thereof include oral administration and enteral administration, and oral administration is preferable because the effects of the present invention are exhibited and administration is easy.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention can improve the fermentability in the intestine and promote the growth of intestinal bacteria.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention can also be used in a wide range of foods and drinks because it does not easily inhibit the taste of the foods and drinks when added to foods and drinks, and has an effect of reducing fasting blood glucose level and serum. It also has the effect of reducing cholesterol, which is extremely beneficial for maintaining the health of the ingested subject.
  • the intestinal flora is useful for preventing or suppressing diseases such as inflammatory bowel disease, metabolic syndrome, obesity, diabetes, and colorectal cancer
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention can prevent or suppress these diseases. It is also useful as an inhibitor.
  • the administration target of the intestinal bacterial growth promoter of the present invention is not limited to humans, and may be animals other than humans (for example, mammals such as mice, dogs, cats, cows, pigs, and monkeys).
  • the present inventors have found that a gramineous plant extract having a molecular weight in a specific range has an effect of reducing blood glucose level in addition to an effect of promoting the growth of intestinal bacteria. Therefore, the present invention also provides a blood glucose level reducing agent.
  • the blood glucose level reducing agent of the present invention contains a gramineous plant extract as an active ingredient.
  • the gramineous plant extract including its production method, is as described in the above [Gut microbiota growth promoter].
  • the gramineous blood level reducing agent of the present invention comprises a gramineous plant extract containing ⁇ -1,3-1,4-glucan in an amount of 10% by mass or more in a solid content as an active ingredient, and the gramineous plant extract is used as an active ingredient.
  • the molecular weight in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan with respect to the total area of all peaks is 200,000 or less.
  • the ratio of the area of the region is 70% or more.
  • the suitable composition of the rice plant extract used as an active ingredient is as described in the above [Gut microbiota growth promoting agent], and "Promoting the growth of intestinal bacteria with a better effect of promoting the growth of intestinal bacteria” It may be applied by replacing “from the viewpoint of obtaining an agent” with “from the viewpoint of obtaining a blood glucose reducing agent having a better blood glucose level reducing effect”.
  • the molecular weight of the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan equivalent to the total area of all peaks is less than 1,000 in the GPC chromatogram.
  • the ratio of the area of the region is preferably 10% or more. More preferable ranges and embodiments are as described in the above [Gut microbiota growth promoter].
  • the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region to the total area of all peaks is 10 to 50% in the GPC chromatogram. It is preferable that the area of the disaccharide region is larger than the area of the monosaccharide region. More preferable ranges and embodiments are as described in the above [Gut microbiota growth promoter].
  • ingredients other than the gramineous plant extract that can be contained in the blood glucose reducing agent of the present invention, the dosage form of the blood glucose reducing agent of the present invention, the standard of daily intake, the administration method, and the administration target are also described in the above [ It is the same as that described in [Intestinal Bacterial Growth Promoter].
  • the blood glucose level reducing agent of the present invention can also be used as an agent for preventing or suppressing these diseases. It is useful.
  • a gramineous plant extract having a molecular weight in a specific range also has an effect of reducing serum cholesterol level in addition to an effect of promoting growth of intestinal bacteria and an effect of reducing blood glucose level. Therefore, the present invention also provides a serum cholesterol level reducing agent.
  • the serum cholesterol level reducing agent of the present invention contains a gramineous plant extract as an active ingredient.
  • the gramineous plant extract including its production method, is as described in the above [Gut microbiota growth promoter].
  • the serum cholesterol level reducing agent of the present invention contains a gramineous plant extract containing ⁇ -1,3-1,4-glucan in an amount of 10% by mass or more in a solid content as an active ingredient, and the rice thereof.
  • GPC chromatogram obtained by GPC measurement of the solid content of the grass extract
  • the molecular weight in terms of standard ⁇ -1,3-1,4-glucan with respect to the total area of all peaks is 200,000 or less.
  • the ratio of the area of the region is 70% or more.
  • the suitable composition of the gramineous plant extract used as an active ingredient is as described in the above [Gut microbiota growth promoting agent], and "Promoting the growth of intestinal bacteria with a better effect of promoting the growth of intestinal bacteria" "From the viewpoint of obtaining an agent” may be read as "from the viewpoint of obtaining a serum cholesterol level reducing agent having a better effect of reducing the serum cholesterol level” and applied.
  • the molecular weight of the standard ⁇ -1,3-1,4-glucan equivalent to the total area of all peaks is 1,000 in the GPC chromatogram. It is preferable that the ratio of the area of the area less than 10% is 10% or more. More preferable ranges and embodiments are as described in the above [Gut microbiota growth promoter].
  • the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region to the total area of all peaks is 10 to 50 in the GPC chromatogram. %, And it is preferable that the area of the disaccharide region is larger than the area of the monosaccharide region. More preferable ranges and embodiments are as described in the above [Gut microbiota growth promoter].
  • ingredients other than the gramineous plant extract that can be contained in the serum cholesterol level reducing agent of the present invention, the dosage form of the serum cholesterol level reducing agent of the present invention, the standard of daily intake, the administration method, and the administration target are also included. It is the same as that described in the above [Gut microbiota growth promoter].
  • the serum cholesterol level reducing action is useful for prevention or suppression of diseases such as hyperlipidemia, arteriosclerosis, myocardial infarction, and cerebral infarction
  • the serum cholesterol level reducing agent of the present invention is for preventing or suppressing these diseases. It is also useful as an agent for.
  • the intestinal bacterial growth promoting agent, the blood glucose level reducing agent, and the serum cholesterol level reducing agent of the present invention may be contained in foods and drinks.
  • the present invention also provides a food or drink composition containing the agent of the present invention.
  • the food and drink composition of the present invention is a food and drink composition for promoting intestinal bacterial growth containing the intestinal bacterial growth promoting agent of the present invention.
  • the food and drink composition of the present invention is a food and drink composition for reducing blood glucose level, which contains the blood glucose level reducing agent of the present invention.
  • the food and drink composition of the present invention is a food and drink composition for reducing serum cholesterol level, which contains the serum cholesterol level reducing agent of the present invention.
  • Examples of the food and beverage composition include beverages (soft beverages, carbonated beverages, alcoholic beverages, nutritional beverages, powdered beverages, fruit beverages, dairy beverages, jelly beverages, etc.), confectionery (chocolate, cookies, cakes, gums, candies, etc.). Tablets, gummy, pudding, jelly, ice cream, sherbet, etc.), processed marine products (kamaboko, chikuwa, etc.), processed meat products (hamburger, ham, sausage, wiener, etc.), processed dairy products (yogurt, cheese, butter, raw) Creams, cheeses, etc.), soups (powdered soups, liquid soups, etc.), main foods (rice, breads, noodles, powders, cereals, etc.), seasonings (mayonnaise, dressings, sauces, etc.).
  • beverages soft beverages, carbonated beverages, alcoholic beverages, nutritional beverages, powdered beverages, fruit beverages, dairy beverages, jelly beverages, etc.
  • confectionery chocolate, cookies, cakes, gums, candies, etc.
  • Tablets
  • Examples of food and drink compositions include health foods, functional foods, supplements, dietary supplements, foods for specified health use, foods for medical use (oral nutritional supplements, parenteral nutritional supplements (enteric nutritional supplements, etc.)) and the like. Be done.
  • Example 1 1000 g of a pulverized barley seed ( ⁇ -1,3-1,4-glucan content: 10% by mass) was added to 5 liters of water, and the mixture was stirred at 60 ° C. for 3 hours for extraction. After centrifuging the insoluble matter, the supernatant was frozen at ⁇ 20 ° C. and then thawed, and the solid content containing ⁇ -glucan in the solution was filtered and dried. The yield was 26 g. This was designated as barley extract A (intestinal bacterial growth promoter A).
  • ⁇ -1,3-1,4-glucan content measurement kit model number K-BGLU
  • McCreery method enzyme method
  • the ratio of the area of each molecular weight region is standard ⁇ -1,3-1, measured by GPC (gel permeation chromatography). It is a ratio based on the molecular weight in terms of 4-glucan (manufactured by Megasim). Specifically, the values measured under the following conditions with the following devices and columns were adopted.
  • Example 2 Disperse 1000 g of pulverized barley ( ⁇ -1,3-1,4-glucan content: 20% by mass) in 9 liters of water, add 35 units of cellulase (1.5 L of cell crust, Novozymes), and then add. The reaction was carried out at 60 ° C. for 3 hours. The reaction solution was centrifuged, and the supernatant was freeze-dried to obtain 302 g of a powder. The obtained powder was used as barley extract B (intestinal bacterial growth promoter B). Table 1 shows the results of measuring the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan and the ratio of the area of each molecular weight region in the same manner as in Example 1.
  • Example 3 Disperse 1000 g of pulverized barley ( ⁇ -1,3-1,4-glucan content: 10% by mass) in 9 liters of water, add 35 units of cellulase (1.5 L of cell crust, Novozymes), and then add. The reaction was carried out at 60 ° C. for 3 hours. The reaction solution was centrifuged, and the supernatant was freeze-dried to obtain 185 g of a powder. The obtained powder was used as barley extract C (intestinal bacterial growth promoter C). Table 1 shows the results of measuring the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan and the ratio of the area of each molecular weight region in the same manner as in Example 1.
  • Example 4 Disperse 1000 g of pulverized barley ( ⁇ -1,3-1,4-glucan content: 4% by mass) in 9 liters of water, and add 50,000 U / g of ⁇ -amylase ( ⁇ -amylase 60, HBI). After adding 0.1 g, the reaction was carried out at 60 ° C. for 3 hours. The reaction solution was centrifuged, and the supernatant was freeze-dried to obtain 261 g of a powder. The obtained powder was used as barley extract D (intestinal bacterial growth promoter D). Table 1 shows the results of measuring the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan and the ratio of the area of each molecular weight region in the same manner as in Example 1.
  • Example 5 After dispersing 1000 g of pulverized barley ( ⁇ -1,3-1,4-glucan content: 20% by mass) in 9 liters of water and adding 54,000 units of ⁇ -amylase (Fungamyl 800 L, Novozymes). The reaction was carried out at 60 ° C. for 7 hours. The reaction solution was centrifuged, and the supernatant was freeze-dried to obtain 398 g of powder. The obtained powder was used as barley extract E (intestinal bacterial growth promoter E). Table 1 shows the results of measuring the content of ⁇ -1,3-1,4-glucan and the ratio of the area of each molecular weight region in the same manner as in Example 1.
  • the intestinal bacterial growth promoters B and C of Examples 2 and 3 had a better taste (there was no habit of taste) as compared with other intestinal bacterial growth promoters. Therefore, it can be used for a wide range of foods and drinks without disturbing the taste of the foods and drinks.
  • the intestinal bacterial growth promoters A, D, and E of Examples 1, 4, and 5 can be used without any problem as long as they match the taste of the food and drink itself.
  • the intestinal bacterial growth promoters B to E of Examples 2 to 5 are beneficial because they have good solubility and are easy to use in beverages. Although the intestinal bacterial growth promoter A of Example 1 is inferior in solubility, it can be used in foods without any problem.
  • lard was added so that the fat energy ratio was 25%. All ⁇ -glucans were blended in an amount of 4% by mass and adjusted with cellulose so that the total amount of dietary fiber was equal.
  • the ⁇ -glucan of the intestinal bacterial growth promoter A of Example 1 was mixed with 68% by mass of ⁇ -cornstarch so as to be 32% by mass, hydrated and heated to dissolve, and then freeze-dried to feed this mixture. Was added to. The amount of casein was adjusted so that the protein mass of each group added was equal.
  • mice fed feed A containing the intestinal bacterial growth promoter B of Example 2 in which all the parameters were within the preferable range of the present invention were compared with mice fed feed B to ⁇ -glucan in feces. It was found that the ⁇ -glucan fermentation rate was higher. From this, it was found that the mice fed the feed A had more ⁇ -glucan degraded as a substrate by the intestinal bacteria than the mice fed the feed B.
  • mice fed with the feed B containing the intestinal bacterial growth promoting agent A of Example 1 and the mice fed with the feed A containing the intestinal bacterial growth promoting agent B of Example 2 were fed with the control feed. It can be inferred that the weight of the cecum has increased compared to the above, and that intestinal fermentation has progressed and intestinal bacteria have increased.
  • various proportions such as the ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less, the ratio of the area of the region having a molecular weight of less than 1,000, and the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region.
  • mice fed the feed A containing the intestinal bacterial growth promoter B of Example 2 whose parameters were within the preferable range of the present invention was increased as compared with the mice fed the feed B. From this, it was found that the mice fed with the feed A had more advanced intestinal fermentation than the mice fed with the feed B, and it could be inferred that the number of intestinal bacteria was increased.
  • the organic acid was identified using the standard substance, and the concentration was calculated from the ratio with the internal standard substance.
  • Acetic acid and propionic acid were used as standard substances (both manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). The results are shown in FIG. Specifically, the upper figure shows the acetic acid concentration, and the lower figure shows the propionic acid concentration.
  • mice fed with the feed B containing the intestinal bacterial growth promoting agent A of Example 1 and the mice fed with the feed A containing the intestinal bacterial growth promoting agent B of Example 2 were fed with the control feed.
  • the concentration of acetic acid and the concentration of propionic acid in the cecum tended to increase.
  • the gut microbiota produces short-chain fatty acids from dietary fiber by fermentative metabolism, more specifically, Bifidobacterium (Bifidobacterium) produces acetic acid, and Bacteroides (Bacteroides). Produces propionic acid. Therefore, it was speculated that the mice fed the feed A and the feed B had an increased amount of bifidobacteria and Bacteroides bacteria in the cecum as compared with the mice fed the control feed.
  • mice fed the feed A containing the intestinal bacterial growth promoter B of Example 2 whose parameters were within the preferred range of the present invention had a higher increase in acetic acid in the cecum as compared with the mice fed the feed B. Propionic acid was significantly increased relative to the control. Therefore, it was speculated that the mice fed the feed A had more bifidobacteria in the cecum than the mice fed the feed B.
  • the calibration curve was prepared using the Ct value measured by serially diluting the DNA solution extracted from the standard strain. The results are shown in FIG. In detail, the upper figure shows Bifidobacterium spp., The middle figure shows Bacteroides spp., And the lower figure shows Lactobacillus spp.
  • mice fed with the feed B containing the intestinal bacterial growth promoting agent A of Example 1 and the mice fed with the feed A containing the intestinal bacterial growth promoting agent B of Example 2 were fed with the control feed.
  • Bifidobacterium, Bacteroides, and Lactobacillus tended to increase in the cecum.
  • mice fed the diet A containing the intestinal bacterial growth promoter B of Example 2 whose parameters were within the preferred range of the present invention had Bifidobacterium spp. In the cecum as compared to the mice fed the feed B.
  • Bacteroides spp. And Bacteroides spp. Were increasing, especially Bifidobacterium spp. And Bacteroides spp. Were significantly increasing. From this, it was found that the number of intestinal bacteria was increased in the mice fed with the feed A as compared with the mice fed with the feed B.
  • mice fed with the feed B containing the blood glucose reducing agent A of Example 1 and the mice fed with the feed A containing the blood glucose reducing agent B of Example 2 were compared with the mice fed with the control feed.
  • Fasting blood glucose levels tended to decrease.
  • various proportions such as the ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less, the ratio of the area of the region having a molecular weight of less than 1,000, and the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region.
  • the mice fed the feed A containing the blood glucose reducing agent B of Example 2 having the parameters within the preferable range of the present invention had a lower fasting blood glucose level as compared with the mice fed the feed B. ..
  • mice fed with the feed B containing the blood glucose reducing agent A of Example 1 and the mice fed with the feed A containing the blood glucose reducing agent B of Example 2 were compared with the mice fed with the control feed.
  • the amount of LDL-cholesterol and HDL-cholesterol in serum tended to be reduced.
  • various proportions such as the ratio of the area of the region having a molecular weight of 200,000 or less, the ratio of the area of the region having a molecular weight of less than 1,000, and the ratio of the total area of the monosaccharide region and the disaccharide region.
  • mice fed feed A containing the serum cholesterol level reducing agent B of Example 2 whose parameters are within the preferable range of the present invention have the same amount of LDL-cholesterol in serum as compared with mice fed feed B.
  • the amount of HDL-cholesterol was significantly reduced with respect to the control.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention can improve the fermentability in the intestine and promote the growth of intestinal bacteria.
  • the intestinal bacterial growth promoter of the present invention can be used in a wide range of foods and drinks because it does not easily inhibit the taste of the foods and drinks when added to the foods and drinks, and also has an effect of reducing fasting blood glucose level and serum. Since it also has the effect of reducing blood glucose inside, it is extremely beneficial for maintaining the health of the ingested target.
  • the blood glucose level reducing agent of the present invention can exhibit the growth promoting effect of intestinal bacteria and reduce the fasting blood glucose level
  • the serum cholesterol level reducing agent of the present invention exhibits the growth promoting effect of intestinal bacteria. It was also found that the cholesterol level in serum can be reduced.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

腸内の発酵性を良好にし、腸内細菌の増殖を促進することができる新規な腸内細菌増殖促進剤を提供する。該腸内細菌増殖促進剤は、β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上であることを特徴とする。

Description

腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤、血清コレステロール値低減剤、及びこれらを含有する飲食品組成物
 本発明は、腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤、血清コレステロール値低減剤、及びこれらを含有する飲食品組成物に関する。
 腸内細菌のバランスは、健康維持において重要である。従来、腸内細菌の増殖促進物質として多くの物質が研究され、ラクチロース、フラクトオリゴ糖等のオリゴ糖(例えば特許文献1)、イヌリン等の食物繊維が知られている。また、βグルカンについては、β-1,3-1,6グルカンが腸内細菌を増加させることが知られている(例えば特許文献2)。
特開2004-159659号公報 特開平1-137990号公報
 本発明は、腸内の発酵性を良好にし、腸内細菌の増殖を促進することができる新規な腸内細菌増殖促進剤を提供することを課題とする。
 本発明者らは、上記の課題につき鋭意検討した結果、下記構成を有する新規な腸内細菌増殖促進剤を見出し、本発明を完成させるに至った。
 すなわち、本発明は以下の内容を含む。
[1] β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である、腸内細菌増殖促進剤。
[2] 前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上である、[1]に記載の腸内細菌増殖促進剤。
[3] 前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大である、[1]又は[2]に記載の腸内細菌増殖促進剤。
[4] 腸内細菌が、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌、バクテロイデス属(Bacteroides)細菌、ラクトバシラス属(Lactobacillus)細菌から選択される少なくとも一種である、[1]~[3]の何れかに記載の腸内細菌増殖促進剤。
[5] 腸内細菌が、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌及びバクテロイデス属(Bacteroides)細菌から選択される少なくとも一種である、[1]~[4]の何れかに記載の腸内細菌増殖促進剤。
[6] β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である、血糖値低減剤。
[7] 前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上である、[6]に記載の血糖値低減剤。
[8] 前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大である、[6]又は[7]に記載の血糖値低減剤。
[9] β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である、血清コレステロール値低減剤。
[10] 前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上である、[9]に記載の血清コレステロール値低減剤。
[11] 前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大である、[9]又は[10]に記載の血清コレステロール値低減剤。
[12] [1]~[5]の何れかに記載の剤を含有する、腸内細菌増殖促進用飲食品組成物。
[13] [6]~[8]の何れかに記載の剤を含有する、血糖値低減用飲食品組成物。
[14] [9]~[11]の何れかに記載の剤を含有する、血清コレステロール値低減用飲食品組成物。
 本発明によれば、腸内の発酵性を良好にし、腸内細菌の増殖を促進することができる新規な腸内細菌増殖促進剤を提供することができる。斯かる腸内細菌増殖促進剤は、飲食品に添加した際に該飲食品の呈味を阻害し難いことから、幅広い飲食品に利用できると共に、空腹時血糖値の低減効果や血清中のコレステロール低減効果も併せ持ち、摂取対象の健康維持に極めて有益である。
 本発明はさらに、腸内細菌の増殖促進効果を呈すると共に空腹時血糖値を低減できる新規な血糖値低減剤、腸内細菌の増殖促進効果を呈すると共に血清コレステロール値を低減できる新規な血清コレステロール値低減剤も提供することができる。
図1は、イネ科植物抽出物中の固形分のGPC測定によって得られるクロマトグラムにおける分子量領域の面積の割合を示すイメージ図である。 図2は、本発明の一実施形態に係る腸内細菌増殖促進剤を含有する飼料A及びBを摂取した場合の、糞便中のβ-グルカン排泄量(左図)と、β-グルカン発酵率(右図)を示す。 図3は、本発明の一実施形態に係る腸内細菌増殖促進剤を含有する飼料A及びB、コントロール飼料を摂取した場合の、盲腸重量の測定結果を示す。 図4は、本発明の一実施形態に係る腸内細菌増殖促進剤を含有する飼料A及びB、コントロール飼料を摂取した場合の、盲腸内短鎖脂肪酸濃度の測定結果を示す。上図は酢酸濃度、下図はプロピオン酸濃度を示す。 図5は、本発明の一実施形態に係る腸内細菌増殖促進剤を含有する飼料A及びB、コントロール飼料を摂取した場合の、盲腸内細菌数の測定結果を示す。上図はビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌、中図はバクテロイデス属(Bacteroides)細菌、下図はラクトバシラス属(Lactobacillus)細菌を示す。 図6は、本発明の一実施形態に係る腸内細菌増殖促進剤を含有する飼料A及びB、コントロール飼料を摂取した場合の、空腹時血糖値の測定結果を示す。 図7は、本発明の一実施形態に係る腸内細菌増殖促進剤を含有する飼料A及びB、コントロール飼料を摂取した場合の、血清コレステロール値の測定結果を示す。上図はLDLコレステロール値、下図はHDLコレステロール値を示す。
 以下、本発明をその好適な実施形態に即して詳細に説明する。ただし、本発明は、下記実施形態及び例示物に限定されるものではなく、本発明の特許請求の範囲及びその均等の範囲を逸脱しない範囲において任意に変更して実施され得る。
 [腸内細菌増殖促進剤]
 本発明の腸内細菌増殖促進剤は、イネ科植物抽出物を有効成分とする。本発明において、イネ科植物抽出物とは、イネ科植物から溶媒に可溶な成分を抽出することにより得られる抽出物を意味する。
 イネ科植物抽出物を得るためのイネ科植物の例としては、米類、小麦類、トウモロコシ類、モロコシ類、ヒエ類、アワ類、キビ類、大麦類、オーツ麦類(カラス麦類)及びライ麦類等の穀類を挙げることができる。
 抽出には、植物全体を原料として用いることができるが、β-グルカンの含有量が比較的高い種子を用いることが好ましい。また、種子を用いる場合には、全体を粉砕したもの(全粒粉)をはじめ、穀類の精製工程で得られる糠、フスマ、麦芽、胚芽及び胚乳部位のいずれを用いてもよい。好ましくは、大麦類やオーツ麦類の全粒粉、これらの穀粒を外周部より搗精した胚乳部分及びその際発生する糠、米糠、小麦やトウモロコシ類のフスマや胚芽等であり、さらに好ましくは大麦類やオーツ麦類の全粒粉、これらの穀粒を外周部より搗精した胚乳部分及びその際発生する糠である。
 本発明においては、β-1,3-1,4-グルカンの含有量が比較的高いことから、大麦の種子全体(全粒)を用いることが好ましい。大麦のβ-1,3-1,4-グルカン含量は、品種によって異なるが、β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有する抽出物が得られ易いため、好ましくは3質量%以上、より好ましくは7質量%以上である。大麦のβ-1,3-1,4-グルカン含量は、後述のイネ科植物抽出物の固形分におけるβ-1,3-1,4-グルカン含量の測定と同様の方法で測定できる。
 イネ科植物から抽出物を得るための抽出方法に特に制限はなく、イネ科植物を抽出溶媒に添加して抽出を行い、溶媒に不溶な成分を分離して抽出液を得ればよい。抽出溶媒は特に制限はなく、水、温水、熱水若しくは塩溶液、さらには酸若しくはアルカリ性の水溶液、又は有機溶媒等を使用することができる。これら中でも、イネ科植物中のβ-1,3-1,4-グルカンは、水溶性高分子として水に溶解することができることから、水、温水、熱水若しくは塩溶液、さらには酸若しくはアルカリ性の水溶液のいずれか、又はこれらを組み合わせて使用することが好ましく、水、温水又は熱水を使用することがより好ましく、温度4℃以上80℃以下の温水を使用することがさらに好ましい。上記温水は10℃以上80℃以下であることがより好ましく、25℃以上80℃以下であることがさらに好ましく、40℃以上70℃以下であることが特に好ましい。
 原料であるイネ科植物に対する抽出溶媒の使用量には特に制限はなく、例えば原料に対して2~100倍量(質量基準)の範囲で任意に使用量を設定することができる。抽出時間についても特に制限されないが、上記4℃以上80℃以下の温水を使用する場合、抽出時間は10分~24時間程度である。また、抽出時には抽出促進剤等を加えることもできる。
 抽出方法の具体例としては、例えば、大麦又はオーツ麦から高分子量のβ-1,3-1,4-グルカンを得る方法として、多ろう質大麦を原料とし、水抽出により製造する方法(例えば特公平4-11197号公報等参照)、大麦又はオーツ麦を原料として、アルカリ抽出後、中和又はアルコール沈殿により、重量平均分子量10万~100万の水溶性β-グルカンを得る方法(例えば特公平6-83652号公報等参照)、搗精歩留まりが82%以下の大麦糠類を原料として、80~90℃の熱水にて水溶性β-グルカンを抽出する方法(例えば特開平11-225706号公報等参照)等が挙げられる。
 イネ科植物抽出物に含まれるβ-1,3-1,4グルカンは増粘効果が高いため、公知の方法で低分子化することもできる。上記のβ-1,3-1,4-グルカンを低分子化する方法としては、公知である多糖類の加水分解反応のいずれも利用可能である。例えば、水溶性多糖類は、酸存在下で加圧・加熱することにより加水分解することが知られており、これを利用して低分子化することができる。また、酵素による加水分解反応を利用した低分子化も有効であり、このような酵素としては、1,3-β-グルカナーゼ等を用いることができる。さらに、WO98/13056又は特開2002-97203号公報等に記載の方法により、低分子化された水溶性β-グルカンを、原料穀物から直接抽出することにより得ることもできる。この場合、特開2002-105103号公報に記載の抽出促進剤等を使用してもよい。
 本発明において、イネ科植物抽出物は、上述の抽出液そのもの、濃縮後に固液分離した精製抽出液、濃縮した液体やペースト状のもの、又は粉末化した固体状のものなど、いずれの製造方法で得たものも、いずれの形態のものも、いずれの純度のものも使用可能である。
 このようにして得られたイネ科植物抽出物には、β-1,3-1,4-グルカン以外の成分、例えば、単糖類、二糖類などの糖類や、アミロース、アミロペクチン、アラビノキシラン、キシログルカン等のβ-1,3-1,4グルカン以外の多糖類、水溶性蛋白質等も含まれる。
 好適な一実施形態において、本発明の腸内細菌増殖促進剤は、β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラム(以下、「GPCクロマトグラム」ともいう。)において、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である。
 β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分として用いることにより、腸内の発酵性を良好にし、腸内細菌の増殖を促進することができる。腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、イネ科植物抽出物中のβ-1,3-1,4-グルカンの含有量は、固形分換算で、より好ましくは15質量%以上、さらに好ましくは16質量%以上、18質量%以上、20質量以上、22質量%以上、24質量%以上又は25質量%以上である。イネ科植物抽出物中のβ-1,3-1,4-グルカンの含有量が斯かる範囲にあると、甘味や雑味の少ない腸内細菌増殖促進剤を実現する観点からも好ましい。
 腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点、また、水への溶解性が良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、イネ科植物抽出物中のβ-1,3-1,4-グルカンの含有量は、固形分換算で、好ましくは50質量%以下、より好ましくは48質量%以下、46質量%以下、45質量%以下、44質量%以下、42質量%以下又は40質量%以下である。
 イネ科植物抽出物の固形分におけるβ-1,3-1,4-グルカン含量は、McCleary法(酵素法)によって測定することができる。例えば、β-1,3-1,4-グルカン含量測定キット(型番K-BGLU、メガザイム社製)を用いて測定する場合、まず目開き500μm(30メッシュ)のふるいにかけた測定サンプルについて、赤外線水分計(型番FD-230、Kett社製)を用いて予め水分含量を測定し、無水物質量W(mg)を算出する。これとは別に、この測定サンプル10mgを17mLチューブに取り、50%(v/v)エタノール溶液を200μL加え、分散させる。次に4mLの20mMリン酸緩衝液(pH6.5)を加え、よく混合した後、煮沸した湯浴中にて1分間加温する。よく混合し、さらに2分間、湯浴中で加熱する。遠心分離にて上清を得て、50℃に冷却後、5分間放置してから、各チューブにリケナーゼ酵素溶液(キットに付属するバイアルを20mLの20mMリン酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存)の200μL(10U)を加え、50℃にて1時間反応させる。チューブに200mM酢酸緩衝液(pH4.0)を5mL加えて、静かに混合する。室温に5分間放置し、遠心分離にて上清を得る。上清100μLを3本のチューブに取り、1本には100μLの50mM酢酸緩衝液(pH4.0)を、他の2本には100μL(0.2U)のβ-グルコシターゼ溶液(キットに付属するバイアルを20mLの50mM酢酸緩衝液で希釈、残量は凍結保存)を加え、50℃にて10分間反応させる。3mLのグルコースオキシダーゼ/ペルオキシダーゼ溶液を加えて、50℃にて20分間反応させ、各サンプルの510nmにおける吸光度(EA)を測定する。これとは別に、グルコース100μgを含む3mLのグルコースオキシダーゼ/ペルオキシダーゼ溶液の吸光度(EG)を測定する。これらの測定結果から、次式によりβ-1,3-1,4-グルカン含量は求められる。
 β-1,3-1,4-グルカン含量(%,w/w)=(EA)×(F/W)×8.46式中、F及びWは次のとおりである。
 F=(100)/(グルコース100μgの吸光度EG)
 W=無水物質量(mg)
 本発明の腸内細菌増殖促進剤において有効成分とされるイネ科植物抽出物は、腸内細菌の増殖促進効果を実現する観点から、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上であることが好ましい。斯かる分子量200,000以下の領域の面積の割合は、腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点、また、水への溶解性が良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、より好ましくは75%以上、さらに好ましくは76%以上、78%以上、80%以上、82%以上、84%以上又は85%以上である。
 分子量200,000以下の領域の面積の割合の上限は、特に限定されず100%であってもよく、99%以下、98%以下、96%以下、95%以下などであってもよい。
 腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点、また、水への溶解性が良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合は、好ましくは10%以上、より好ましくは15%以上、さらに好ましくは20%以上、22%以上、24%以上、25%以上、26%以上、28%以上又は30%以上である。
 腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、分子量1,000未満の領域の面積の割合の上限は、好ましくは60%以下、より好ましくは55%以下、さらに好ましくは50%以下、48%以下、46%以下、45%以下、44%以下、42%以下又は40%以下である。分子量1,000未満の領域の面積の割合が斯かる範囲にあると、甘味や雑味の少ない腸内細菌増殖促進剤を実現する観点からも好ましい。
 腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000~200,000の領域の面積の割合は、好ましくは30%以上、より好ましくは35%以上、36%以上、38%以上又は40%以上である。分子量1,000~200,000の領域の面積の割合の上限は、好ましくは70%以下、より好ましくは68%以下、67%以下、66%以下又は65%以下である。
 本発明の腸内細菌増殖促進剤において有効成分とされるイネ科植物抽出物は、腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、単糖類及び二糖類の含有量が特定の範囲にあることが好ましい。具体的には、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大であることが好ましい。単糖類及び二糖類の含有量が斯かる範囲にあると、甘味や雑味の少ない腸内細菌増殖促進剤を実現する観点、また、水への溶解性が良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点からも好ましい。
 腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点、また、雑味が少なく水への溶解性が良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合は、より好ましくは12%以上、14%以上、15%以上又は16%以上である。単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合の上限は、甘味の少ない腸内細菌増殖促進剤を得る観点から、より好ましくは45%以下、40%以下、35%以下、30%以下又は25%以下である。
 単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大であることが好ましいことは先述のとおりであるが、GPCクロマトグラムにおける「二糖類の領域の面積/単糖類の領域の面積」は、甘味や雑味のより少ない腸内細菌増殖促進剤を実現する観点から、好ましくは1.1以上、より好ましくは1.3以上、さらに好ましくは1.5以上である。該面積比の上限は、特に限定されないが、例えば、5以下、3以下、2.5以下などであってよい。
 単糖類及び二糖類のピークはグルコース等の単糖類標準品やマルトース等の二糖類標準品と比較することで容易に分析することができる。具体的には、後述する方法で分析することができる。
 なお、本明細書においては、単糖類、二糖類をはじめとする他の成分の種類及びその含有量については特定していない。その理由は以下のとおりである。
 イネ科植物からβ-1,3-1,4-グルカンを含む抽出物を得る際に、β-1,3-1,4-グルカンを単離することは困難であり、抽出物には、β-1,3-1,4-グルカンに加え、単糖類、二糖類などの糖類や、他の成分が含まれる。これらの成分は抽出に使用するイネ科植物の種類や部位によってその成分の種類及びその含有割合が異なる。また、抽出方法によっても、成分の種類及びその含有割合が異なる。そうすると、抽出物中の単糖類、二糖類などの糖類や、他の成分の種類及びその割合を特定することは困難であり、且つ非現実的である。そして、単糖類、二糖類、及び、他の成分の種類及びその含有割合に関わらず、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上であり、好適には、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上、及び/又は、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の面積が合計で10~50%であり、かつ単糖類の領域よりも二糖類の領域が大であるとの条件をさらに満たすイネ科植物抽出物によれば、本発明の課題を好ましく解決することができる。そのため、本明細書においては、イネ科植物抽出物における単糖類、二糖類、及び、他の成分の種類及びその含有量は特定していない。
 GPCクロマトグラムにおいて、標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合、標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合、及び/又は、単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が上述の好適範囲となり、かつ単糖類の領域と二糖類の領域との関係が上述の関係を満たすイネ科植物抽出物は、上述した抽出方法によって、イネ科植物からβ-1,3-1,4-グルカンを抽出するときに、抽出条件を適切に設定することによって得ることができる。例えば、大麦の粉砕物を水に分散させた後、大麦の粉砕物に糖質分解酵素を作用させることによって得ることができる。ここで、大麦の粉砕物はβ-1,3-1,4-グルカンの含有量が高いと効率よく上記β-グルカン組成物を製造できるため、分級により予め大麦の粉砕物のβ-1,3-1,4-グルカン含量を高めたり、β-1,3-1,4-グルカン含量の高い大麦粉砕物を用いたりすることがより好ましい。糖質分解酵素は大麦に含まれる成分を低分子化できるものであれば適宜用いることができる。糖質分解酵素はアミラーゼ、セルラーゼ、又は、アミラーゼ及びセルラーゼを含むことが好ましい。なお、酵素の添加量はその活性によって適宜設定することができる。
 GPCクロマトグラムにおける各分子量領域の面積の割合は、全体の領域の面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量200,000以下の領域の面積の割合、標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量1,000未満の領域の面積の割合、及び標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量1,000~200,000の領域の面積の割合として算出するものとする。上記標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量1,000~200,000の領域とは、標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量1,000と標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量200,000に挟まれた領域をいうものとし、標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量1,000未満の領域とは、標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量1,000と分子量0で挟まれた領域をいうものとし、標準β-1,3-1,4-グルカン換算分子量200,000以下の領域とはこれらの領域の合計とする。
 なお、上記GPCクロマトグラムにおける面積の割合は、β-1,3-1,4-グルカンのみの数値ではなく、β-1,3-1,4-グルカン以外の成分を含むイネ科植物抽出物全体としての値である。
 上記GPC測定における分子量は、GPC(ゲルパーミエーションクロマトグラフィ)で測定した標準β-1,3-1,4-グルカン(メガサイム社製)換算の分子量であり、具体的には、以下の装置及びカラムで測定した値を採用する。
 ・装置 EcoSEC HLC8320GPC(東ソー社製)
 ・カラム TSK GEL G6000PWXL(東ソー社製)-Shodex Sugar SB-802(昭和電工社製)
 GPCの測定条件としては、例えば、下記の条件を採用することができる。
 ・溶離液 Milli-Q水によるイソクラチック溶出
 ・流速 0.5mL/min
 ・測定温度 60℃(カラム、インレット、RI)
 ・検出 RIによる検出(45℃)
 ・分析時間 60分
 ・試料濃度 1mg/mL
 ・サンプル注入量 50μL
 ・GPC解析ソフト(HLC8320GPC、EcoSECデータ解析Ver1.07、東ソー社製)
 例えば、標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000~200,000領域の面積の割合は、具体的には以下の手順で算出することができる。
 まず、上記装置及びカラムを用いて、β-1,3-1,4-グルカンの分子量と溶出時間との関係を示す検量線を作成する。具体的には、標準物質としてβ-1,3-1,4-グルカン(「β-Glucan MW Standards」、Megazyme社製)を用い、低分子量の補正物質としてラミナリオリゴ糖[2~5](Megazyme社製)及びグルコース(和光純薬社製)を用いて、検量線を作成する。そして、得られた検量線のデータをGPC解析ソフトに入力する。
 次いで、イネ科植物抽出物のクロマトグラムを作成する。クロマトグラムでは、例えば、図1に示すとおり、縦軸に検出強度(mV)をとり、横軸に溶出時間をとる。そして、GPC解析ソフトを用いて、クロマトグラムの全ピークの総面積を算出する。クロマトグラムの全ピークの総面積は、クロマトグラムに現れた全てのピークのピーク面積の総和である。また、図1に示すとおり、得られたクロマトグラムにおける、分子量200,000のβ-1,3-1,4-グルカンの溶出時間T及び分子量1,000のβ-1,3-1,4-グルカンの溶出時間T間の領域Xの面積を、GPC解析ソフトを用いて算出し、標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000~200,000の領域の面積とする。そして、該面積を全ピークの総面積で除して得られた値に100を掛けることにより、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000~200,000の領域の面積の割合を算出する。上記の面積の算出は、クロマトグラムにおけるベースラインを溶離液のみの状態を基準として時間軸に平行に引くことによって設定し、そのベースラインを基準に算出する。
 標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合は、得られたクロマトグラムにおける、分子量200,000のβ-1,3-1,4-グルカンの溶出時間T以降のピーク面積を、全ピークの総面積で除して得られた値に100を掛けることにより算出すればよい。
 また、単糖類の領域の面積及び二糖類の領域の面積の割合は、具体的には以下の手順で算出することができる。
 まず、単糖類標準品を用いて、GPC測定における単糖類の溶出時間を特定する。そのデータを、イネ科植物抽出物のクロマトグラムの作成に先立ち、GPC解析ソフトに入力する。
 次いで、イネ科植物抽出物のクロマトグラムを上述のとおり作成する。
 最後に、GPC解析ソフトを用いて、得られたクロマトグラムにおける単糖類が溶出した時間の領域の面積を上記と同様に算出し、単糖類の領域の面積とする。二糖類についても同様にして、二糖類の領域の面積を算出する。そして、得られた単糖類の領域の面積及び二糖類の領域の面積の合計値を全ピークの総面積で除して得られた値に100を掛けることにより、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合を算出する。
 単糖類のピークを特定するために用いられる単糖類標準品としては、例えば、グルコース(和光純薬社製)を用いることができる。二糖標のピークを特定するために用いられる二糖類標準品としては、例えば、マルトース(和光純薬社製)、セロビオース(Megazyme社製)、ラミナリビオース(Megazyme社製)を用いることができる。
 本発明において増殖が促進される腸内細菌としては、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌、バクテロイデス属(Bacteroides)細菌、ラクトバシラス属(Lactobacillus)細菌等が挙げられる。本発明においては、特に、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌、バクテロイデス属(Bacteroides)細菌等を良好に増殖できる。
 本発明の腸内細菌増殖促進剤は、本発明の効果を阻害しない限りにおいて、上記のイネ科植物抽出物以外の成分を含有してよい。例えば、賦形剤、結合剤、滑沢剤、崩壊剤、乳化剤、界面活性剤、基剤、溶解補助剤、懸濁化剤、担体等の、薬学的に許容される添加剤を含有してよい。
 例えば、賦形剤としては、ラクトース、スクロース、デンプン、デキストリン等が挙げられる。結合剤としては、ポリビニルアルコール、アラビアゴム、トラガント、ゼラチン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリビニルピロリドン等が挙げられる。滑沢剤としては、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルク等が挙げられる。崩壊剤としては、結晶セルロース、寒天、ゼラチン、炭酸カルシウム、炭酸水素ナトリウム、デキストリン等が挙げられる。乳化剤又は界面活性剤としては、Tween 60、Tween 80、Span 80、モノステアリン酸グリセリン等が挙げられる。基剤としては、セトステアリルアルコール、ラノリン、ポリエチレングリコール、魚油(DHA、EPA等)、植物油(米糠油、オリーブ油、大豆油)等が挙げられる。溶解補助剤としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、炭酸ナトリウム、クエン酸ナトリウム等が挙げられる。懸濁化剤としては、上述の界面活性剤の他、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、メチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム等が挙げられる。担体としては、剤形等に応じて適宜選択してよく、例えば、エタノール、水、デンプン等が挙げられる。
 本発明の腸内細菌増殖促進剤は、固体(例えば、粉末)、液体(水溶性又は脂溶性の溶液又は懸濁液)、ペースト等のいずれの形状でもよく、また、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳剤等のいずれの剤形をとってもよい。
 本発明の腸内細菌増殖促進剤の1日あたりの摂取量は、有効成分として含まれるイネ科植物抽出物の固形分換算で、好ましくは30mg/日以上、より好ましくは300mg/日以上、さらに好ましくは3000mg/日以上である。これにより、良好な腸内細菌の増殖促進効果が発揮され得る。上限は、好ましくは60g/日以下、より好ましくは40g/日以下、さらに好ましくは20g/日以下である。腸内細菌増殖促進剤におけるイネ科植物抽出物の含有量及び腸内細菌増殖促進剤の投与量は、上記摂取量の目安を参照して適宜決定すればよい。
 対象に腸内細菌増殖促進剤を投与する方法は特に制限されないが、例えば、経口投与、経腸投与が挙げられ、本発明の効果を発揮し、且つ投与の容易さから、経口投与が好ましい。
 本発明の腸内細菌増殖促進剤は、腸内の発酵性を良好にし、腸内細菌の増殖を促進することができる。本発明の腸内細菌増殖促進剤はまた、飲食品に添加した際に該飲食品の呈味を阻害し難いことから、幅広い飲食品に利用できると共に、空腹時血糖値の低減効果や血清中のコレステロール低減効果も併せ持ち、摂取対象の健康維持に極めて有益である。
 腸内細菌叢は、炎症性腸疾患、メタボリックシンドローム、肥満症、糖尿病、大腸癌等の疾患の予防又は抑制に役立つことから、本発明の腸内細菌増殖促進剤は、これらの疾患の予防又は抑制用の剤としても有用である。
 本発明の腸内細菌増殖促進剤の投与対象は、ヒトに限定されず、ヒト以外の動物(例えば、マウス、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、サル等の哺乳類)であってもよい。
 [血糖値低減剤]
 本発明者らは、分子量が特定範囲にあるイネ科植物抽出物が、腸内細菌の増殖促進効果に加えて、血糖値を低減する効果も奏することを見出した。よって、本発明は、血糖値低減剤も提供する。
 本発明の血糖値低減剤は、イネ科植物抽出物を有効成分とする。イネ科植物抽出物に関しては、その製造方法も含めて、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりである。
 好適な一実施形態において、本発明の血糖値低減剤は、β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラム(「GPCクロマトグラム」)において、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である。
 有効成分として用いられるイネ科植物抽出物の好適な組成は、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりであり、「腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から」を「血糖値低減効果がより良好な血糖値低減剤を得る観点から」と読み替えて適用すればよい。
 例えば、血糖値低減効果がより良好な血糖値低減剤を得る観点から、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上であることが好ましい。より好適な範囲、実施形態に関しては、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりである。
 また、血糖値低減効果がより良好な血糖値低減剤を得る観点から、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大であることが好ましい。より好適な範囲、実施形態に関しては、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりである。
 本発明の血糖値低減剤が含有し得るイネ科植物抽出物以外の成分や、本発明の血糖値低減剤の剤形、1日あたりの摂取量の目安、投与方法、投与対象も、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したものと同様である。
 血糖値低減作用は、糖尿病、メタボリックシンドローム、高血糖症、肥満症等の疾患の予防又は抑制に役立つことから、本発明の血糖値低減剤は、これらの疾患の予防又は抑制用の剤としても有用である。
 [血清コレステロール値低減剤]
 本発明者らは、分子量が特定範囲にあるイネ科植物抽出物が、腸内細菌の増殖促進効果や血糖値低減効果に加えて、血清コレステロール値を低減する効果も奏することを見出した。よって、本発明は、血清コレステロール値低減剤も提供する。
 本発明の血清コレステロール値低減剤は、イネ科植物抽出物を有効成分とする。イネ科植物抽出物に関しては、その製造方法も含めて、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりである。
 好適な一実施形態において、本発明の血清コレステロール値低減剤は、β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラム(「GPCクロマトグラム」)において、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である。
 有効成分として用いられるイネ科植物抽出物の好適な組成は、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりであり、「腸内細菌の増殖促進効果がより良好な腸内細菌増殖促進剤を得る観点から」を「血清コレステロール値低減効果がより良好な血清コレステロール値低減剤を得る観点から」と読み替えて適用すればよい。
 例えば、血清コレステロール値低減効果がより良好な血清コレステロール値低減剤を得る観点から、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上であることが好ましい。より好適な範囲、実施形態に関しては、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりである。
 また、血清コレステロール値低減効果がより良好な血清コレステロール値低減剤を得る観点から、GPCクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大であることが好ましい。より好適な範囲、実施形態に関しては、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したとおりである。
 本発明の血清コレステロール値低減剤が含有し得るイネ科植物抽出物以外の成分や、本発明の血清コレステロール値低減剤の剤形、1日あたりの摂取量の目安、投与方法、投与対象も、上記[腸内細菌増殖促進剤]にて説明したものと同様である。
 血清コレステロール値低減作用は、高脂血症、動脈硬化、心筋梗塞、脳梗塞等の疾患の予防又は抑制に役立つことから、本発明の血清コレステロール値低減剤は、これらの疾患の予防又は抑制用の剤としても有用である。
 [飲食品組成物]
 本発明の腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤及び血清コレステロール値低減剤(以下、単に「本発明の剤」ともいう。)は、飲食品に含有させて用いてもよい。本発明は、本発明の剤を含有する飲食品組成物も提供する。
 一実施形態において、本発明の飲食品組成物は、本発明の腸内細菌増殖促進剤を含有する、腸内細菌増殖促進用飲食品組成物である。
 一実施形態において、本発明の飲食品組成物は、本発明の血糖値低減剤を含有する、血糖値低減用飲食品組成物である。
 一実施形態において、本発明の飲食品組成物は、本発明の血清コレステロール値低減剤を含有する、血清コレステロール値低減用飲食品組成物である。
 飲食品組成物としては、例えば、飲料(清涼飲料、炭酸飲料、アルコール飲料、栄養飲料、粉末飲料、果実飲料、乳飲料、ゼリー飲料等)、菓子類(チョコレート、クッキー、ケーキ、ガム、キャンディー、タブレット、グミ、プリン、ゼリー、アイスクリーム、シャーベット等)、水産加工品(かまぼこ、ちくわ等)、食肉加工品(ハンバーグ、ハム、ソーセージ、ウィンナー等)、乳加工品(ヨーグルト、チーズ、バター、生クリーム、チーズ等)、スープ(粉末状スープ、液状スープ等)、主食類(ご飯類、パン類、麺類、粉物、シリアル等)、調味料(マヨネーズ、ドレッシング、ソース等)が挙げられる。
 飲食品組成物としては、例えば、健康食品、機能性食品、サプリメント、栄養補助食品、特定保健用食品、医療用食品(経口栄養剤、非経口栄養剤(経腸栄養剤等))等も挙げられる。
 以下、本発明を実施例により具体的に説明する。本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
 <腸内細菌増殖促進剤の調製>
 〔実施例1〕
 大麦の種子(β-1,3-1,4-グルカン含量:10質量%)の粉砕物1000gを5リットルの水に添加し、60℃で3時間撹拌し、抽出を行った。不溶分を遠心分離した後、上澄み液を-20℃で凍結させた後に融解させ、溶液中のβ-グルカンを含有する固形分を濾過して乾燥した。収量は26gであった。これを大麦抽出物A(腸内細菌増殖促進剤A)とした。
 腸内細菌増殖促進剤Aにおけるβ-1,3-1,4-グルカンの含有量は、β-1,3-1,4-グルカン含量測定キット(型番K-BGLU)(メガザイム社製)を用いてMcCleary法(酵素法)を利用して測定した。また、各分子量領域の面積の割合(分子量1000~200000の領域、分子量1000未満の領域及び二糖類、単糖類)は、GPC(ゲルパーミエーションクロマトグラフィ)で測定した標準β-1,3-1,4-グルカン(メガサイム社製)換算の分子量による割合であり、具体的には、以下の装置及びカラムで、以下の条件により測定した値を採用した。結果を表1に示す。
 装置及びカラム:
 ・装置 EcoSEC HLC8320GPC(東ソー社製)
 ・カラム TSK GEL G6000PWXL(東ソー社製)-Shodex Sugar SB-802(昭和電工社製)
 GPC条件:
 ・溶離液 Milli-Q水によるイソクラチック溶出
 ・流速 0.5mL/min
 ・測定温度 60℃(カラム、インレット、RI)
 ・検出 RIによる検出(45℃)
 ・分析時間 60分
 ・試料濃度 1mg/mL
 ・サンプル注入量 50μL
 ・GPC解析ソフト(HLC8320GPC、EcoSECデータ解析Ver1.07、東ソー社製)
 〔実施例2〕
 大麦(β-1,3-1,4-グルカン含量:20質量%)の粉砕物1000gを9リットルの水に分散させ、セルラーゼ(セルクラスト1.5L、ノボザイム社)を35ユニット添加した後、60℃で3時間反応させた。反応液を遠心分離し、上清を凍結乾燥して粉末を302g得た。得られた粉末を大麦抽出物B(腸内細菌増殖促進剤B)とした。実施例1と同様にしてβ-1,3-1,4-グルカンの含有量及び各分子量領域の面積の割合測定を行った結果を表1に示す。
 〔実施例3〕
 大麦(β-1,3-1,4-グルカン含量:10質量%)の粉砕物1000gを9リットルの水に分散させ、セルラーゼ(セルクラスト1.5L、ノボザイム社)を35ユニット添加した後、60℃で3時間反応させた。反応液を遠心分離し、上清を凍結乾燥して粉末を185g得た。得られた粉末を大麦抽出物C(腸内細菌増殖促進剤C)とした。実施例1と同様にしてβ-1,3-1,4-グルカンの含有量及び各分子量領域の面積の割合測定を行った結果を表1に示す。
 〔実施例4〕
 大麦(β-1,3-1,4-グルカン含量:4質量%)の粉砕物1000gを9リットルの水に分散させ、α-アミラーゼ(αアミラーゼ60、エイチビイアイ社)を50,000U/gを0.1g添加した後、60℃で3時間反応させた。反応液を遠心分離し、上清を凍結乾燥して粉末を261g得た。得られた粉末を大麦抽出物D(腸内細菌増殖促進剤D)とした。実施例1と同様にしてβ-1,3-1,4-グルカンの含有量及び各分子量領域の面積の割合測定を行った結果を表1に示す。
 〔実施例5〕
 大麦(β-1,3-1,4-グルカン含量:20質量%)の粉砕物1000gを9リットルの水に分散させ、α-アミラーゼ(Fungamyl800L、ノボザイム社)を54,000ユニット添加した後、60℃で7時間反応させた。反応液を遠心分離し、上清を凍結乾燥して粉末を398g得た。得られた粉末を大麦抽出物E(腸内細菌増殖促進剤E)とした。実施例1と同様にしてβ-1,3-1,4-グルカンの含有量及び各分子量領域の面積の割合測定を行った結果を表1に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
 <腸内細菌増殖促進剤の評価1(呈味)>
 水100gに対して、実施例1~5の腸内細菌増殖促進剤A~Eのいずれかを1.0g添加し、室温(60℃)で撹拌して均質に溶解して水溶液を得た。得られた水溶液について、10人のパネラーになめさせ、その呈味について、下記評価基準により5段階評価させ、その合計点数について合計点が18点以上のものを++++、14~17点のものを+++、11~13点のものを++、6~10点のものを+、5点以下のものを-とした。結果を表2に示す。
・雑味
2点:雑味を感じない
1点:大麦由来の雑味をわずかに感じる
0点:大麦由来の雑味を強く感じる
・甘味
2点:甘味を感じない
1点:わずかに甘味を感じる
0点:強い甘味を感じる
 <腸内細菌増殖促進剤の評価2(溶解性)>
 水100gに対して、実施例1~5の腸内細菌増殖促進剤A~Eのいずれかを1.0g添加し、室温(25℃)で撹拌し、未溶解物の有無を下記基準で判断し、溶解容易性について評価した。結果を表2に示す。
++:10分以内に均一に溶解した
+:20分以内に均一に溶解した
-:不溶物が残った
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
 上記より、β-1,3-1,4-グルカンの含有量や、各分子量領域の面積の割合によって、呈味や溶解性に差異がみられることが確認された。例えば、実施例2、3の腸内細菌増殖促進剤B、Cは、他の腸内細菌増殖促進剤に比し、呈味が良好であった(呈味に癖がなかった)。このため、飲食品の呈味を阻害することなく、幅広い飲食品へ利用可能である。この点、実施例1、4、5の腸内細菌増殖促進剤A、D、Eに関しても、飲食品そのものの呈味とマッチする限り、問題なく利用可能である。また、実施例2~5の腸内細菌増殖促進剤B~Eは、溶解性が良好であり、飲料品に利用し易いため有益である。実施例1の腸内細菌増殖促進剤Aは、溶解性に劣るものの、食品には問題なく利用可能である。
 [腸内発酵特性]
 1.飼料の調製
 腸内細菌増殖促進剤として、実施例2の大麦抽出物B(腸内細菌増殖促進剤B)、実施例1の大麦抽出物A(腸内細菌増殖促進剤A)を使用した。また、コントロールとしてセルロースを使用した。なお、実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bの総食物繊維量は45質量%,β-グルカン33質量%、たんぱく質4質量%であった。調製した各飼料の組成を表3に示す。
 AIN-93G組成の飼料を基本として、脂肪エネルギー比が25%になるように、ラードを添加した。β-グルカンはいずれも4質量%配合し、総食物繊維量が等しくなるようにセルロースで調整した。実施例1の腸内細菌増殖促進剤Aのβ-グルカンは32質量%になるようにαコーンスターチ68質量%と混合し、加水し加温して溶解後、凍結乾燥して、この混合物を飼料に添加した。添加各群のたんぱく質量が等しくなるようにカゼイン量を調整した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
 2.腸内発酵特性の評価
 4週齢の雄C57BL/6Jマウス(日本チャールス・リバー株式会社)を用いた。固形飼料(NMF、オリエンタル酵母工業株式会社)で1週間の予備飼育後、体重が均一になるように1群8匹に群分けした。それぞれの試験群のマウスには、表3に示した飼料A、飼料B、またはコントロール飼料と、水を61日間自由摂取させた。なお、飼育環境は、室温22±1℃、湿度50±5%、12時間の明暗サイクル(8:00~20:00)とした。
 <腸内細菌増殖促進剤の評価3(発酵率(糞便排泄量))>
 3日間糞便を採取し、凍結乾燥・粉砕して均一にした後、AOAC995.16(Streamlined Method)に準じてβ-グルカンを測定した(メガザイム社β-グルカン測定キット)。β-グルカンの摂取量と排泄量から発酵率を算出した。以下、全ての統計処理は統計ソフト(JMP14 Pro)を用いて、平均値の差の検定は、Tukey-Kramerの多重比較を行った。p値は、コントロール飼料を食べさせた群に対する有意差を示している。p値は小さいほど有意であり、特にp値が0.05未満を統計的に有意とみなした。結果を図2に示す。詳細には、左図にβ-グルカンの排泄量を、右図に算出したβ-グルカンの発酵率を示す。
 実施例1の腸内細菌増殖促進剤Aを含む飼料Bを与えたマウスにおいても、実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスにおいても、β-グルカンの摂取量に比し排泄量は低下しており、腸内細菌によりβ-グルカンが基質として分解されていることがわかった。特に、GPCクロマトグラムにおいて、分子量200,000以下の領域の面積の割合、分子量1,000未満の領域の面積の割合、単糖類の領域と二糖類の領域の合計面積の割合をはじめとする各種パラメータが何れも本発明の好適範囲内にある実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスと比較して、糞便中のβ-グルカンが少なく、β-グルカン発酵率がより高いことがわかった。これにより、飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスよりも、腸内細菌によりβ-グルカンが基質として分解されていることがわかった。
 <腸内細菌増殖促進剤の評価4(盲腸重量)>
 実験最終日に、飼料摂取量、体重を測定後、8時間絶食させ、イソフルラン・炭酸ガスで安楽死後、開腹し、心臓より血液を採取した。盲腸を摘出し、重量を測定した。結果を図3に示す。
 実施例1の腸内細菌増殖促進剤Aを含む飼料Bを与えたマウスにおいても、実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスにおいても、コントロール飼料を与えたマウスに比し盲腸重量は増加しており、腸内発酵が進み腸内細菌が増加していることが推測できた。特に、GPCクロマトグラムにおいて、分子量200,000以下の領域の面積の割合、分子量1,000未満の領域の面積の割合、単糖類の領域と二糖類の領域の合計面積の割合をはじめとする各種パラメータが本発明の好適範囲内にある実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスの盲腸重量は、飼料Bを与えたマウスと比較して、増加していた。これにより、飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスよりも、腸内発酵が進んでいることがわかり、腸内細菌がより増加していることが推測できた。
 <腸内細菌増殖促進剤の評価5(盲腸内短鎖脂肪酸)>
 盲腸重量を測定した盲腸を凍結保存し、分析用の試料とした。盲腸内容物の誘導体化は、次のようにした。盲腸内容物を20mg測りとり、100μMクロトン酸および濃塩酸、ジエチルエーテルを加え、TissueLyzerII (Quiagen社)を用いてホモジナイズして有機酸を抽出した。抽出した有機酸を遠心分離(3000rpm、10min)後、上層(エーテル層)を採取し、誘導体化した。分析条件は以下のとおりであった。
 分析条件:
 ・誘導体化:MTBSTFA(シグマ社)を90μL添加、80℃、20分間反応、48時間室温静置
 ・装置:7890 GC/5975C MSD with 7693 自動前処理機能付きオートサンプラ(アジレント・テクノロジー社)
 ・カラム:DB-5ms + Duragurd (10m) 30m、 0.25mm、0.25μm
 ・注入量:1μL
 ・注入法:スプリット、10:1
 ・注入口温度:250℃
 ・オーブン:60℃(7min)-10℃/min-325℃(10min)
 ・カラム流量:1.1mL/min (定流量モード) 
 ・インターフェース温度:290℃
 ・イオン源温度:250℃
 ・測定モード:SIMモード測定
 標準物質を用いて、有機酸を同定し、内部標準物質との比から濃度を算出した。標準物質としては、酢酸、プロピオン酸を用いた(いずれも和光純薬(株)製)。結果を図4に示す。詳細には、上図に酢酸濃度を、下図にプロピオン酸濃度を示す。
 実施例1の腸内細菌増殖促進剤Aを含む飼料Bを与えたマウスにおいても、実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスにおいても、コントール飼料を与えたマウスに比し盲腸内の酢酸濃度、プロピオン酸濃度は増加する傾向にあった。腸内細菌叢は、発酵代謝により、食物繊維から短鎖脂肪酸を産生し、詳細には、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌(ビフィズス菌)は酢酸を産生し、バクテロイデス属(Bacteroides)細菌はプロピオン酸を産生する。よって、飼料A、飼料Bを与えたマウスは、コントロール飼料を与えたマウスと比較して、盲腸内でビフィズス菌、バクテロイデス属細菌が増加していることが推測された。
 特に、GPCクロマトグラムにおいて、分子量200,000以下の領域の面積の割合、分子量1,000未満の領域の面積の割合、単糖類の領域と二糖類の領域の合計面積の割合をはじめとする各種パラメータが本発明の好適範囲内にある実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスと比較して、盲腸内の酢酸がより増加しており、プロピオン酸はコントロールに対して有意に増加していた。よって、飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスと比較して、盲腸内でビフィズス菌がより増加していることが推測された。
 <腸内細菌増殖促進剤の評価6(盲腸内細菌)>
 盲腸内細菌は、QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit (Qiagen社)を用いて抽出した。各腸内細菌数をリアルタイムPCR法にて分析した。Applies Biosystems QuantStudio3 Real-Time PCRsystemを用いたSYBER Green法で測定した。抽出した盲腸内細菌のDNA溶液2μLにBifidobacterium属、Bacteroides属、ラクトバシラス属(Lactobacillus属)のそれぞれのプライマーを添加したSYBER Green溶液10.5μLを加えて増幅させた。求められたCt値から、検量線を用いてそれぞれの菌数を算出した。なお、検量線は標準菌株から抽出したDNA溶液を段階希釈して測定したCt値を用いて作成した。結果を図5に示す。詳細には、上図にBifidobacterium属細菌を、中図にBacteroides属細菌を、下図にLactobacillus属細菌を示す。
 実施例1の腸内細菌増殖促進剤Aを含む飼料Bを与えたマウスにおいても、実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスにおいても、コントール飼料を与えたマウスに比し、盲腸内でBifidobacterium属細菌、Bacteroides属細菌、Lactobacillus属細菌が増加する傾向にあった。
 特に、GPCクロマトグラムにおいて、分子量200,000以下の領域の面積の割合、分子量1,000未満の領域の面積の割合、単糖類の領域と二糖類の領域の合計面積の割合をはじめとする各種パラメータが本発明の好適範囲内にある実施例2の腸内細菌増殖促進剤Bを含む飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスと比較して、盲腸内で、Bifidobacterium属細菌、Bacteroides属細菌、Lactobacillus属細菌がより増加しており、特にBifidobacterium属細菌、Bacteroides属細菌が顕著に増加していた。これにより、飼料Aを与えたマウスにおいては、飼料Bを与えたマウスよりも、腸内細菌が増加していることがわかった。
 [血糖値低減特性]
 1.飼料の調製
 血糖値低減剤として、実施例2の大麦抽出物B(血糖値低減剤B)、実施例1の大麦抽出物A(血糖値低減剤A)、コントロールとしてセルロースを使用して、上記[腸内発酵特性]における「1.飼料の調製」と同様にして、コントロール飼料、飼料A、飼料Bを調製した。調製した各飼料の組成は、上記の表3と同じであった。
 2.血糖値低減特性の評価
 上記[腸内発酵特性]における「2.腸内発酵特性の評価」と同様にして、上記1.で調製した各飼料を用いて、マウスを飼育した。
 <血糖値低減剤の評価(空腹時血糖値)>
 飼育最終週に朝8時より8時間の絶食後、マウスの尾部より採血した。血糖値の定量には「小型血糖測定器 グルテストエースR」(株式会社三和科学研究所)を使用した。結果を図6に示す。
 実施例1の血糖値低減剤Aを含む飼料Bを与えたマウスにおいても、実施例2の血糖値低減剤Bを含む飼料Aを与えたマウスにおいても、コントール飼料を与えたマウスに比し、空腹時血糖値は低減される傾向にあった。特に、GPCクロマトグラムにおいて、分子量200,000以下の領域の面積の割合、分子量1,000未満の領域の面積の割合、単糖類の領域と二糖類の領域の合計面積の割合をはじめとする各種パラメータが本発明の好適範囲内にある実施例2の血糖値低減剤Bを含む飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスと比較して、空腹時血糖値はより低減されていた。
 [血清コレステロール値低減特性]
 1.飼料の調製
 血清コレステロール値低減剤として、実施例2の大麦抽出物B(血清コレステロール値低減剤B)、実施例1の大麦抽出物A(血清コレステロール値低減剤A)、コントロールとしてセルロースを使用して、上記[腸内発酵特性]における「1.飼料の調製」と同様にして、コントロール飼料、飼料A、飼料Bを調製した。調製した各飼料の組成は、上記の表3と同じであった。
 2.血清コレステロール値低減特性の評価
 上記[腸内発酵特性]における「2.腸内発酵特性の評価」と同様にして、上記1.で調製した各飼料を用いて、マウスを飼育した。
 <血清コレステロール値低減剤の評価(血清脂質)>
 飼育最終週に朝8時より8時間の絶食後、マウスの尾部より採血した。採取した血液は、血清を分離し、LDL-コレステロール(LDL-C)、HDL-コレステロール(HDL-C)を酵素法にて分析した。分析は富士ドライケム(富士フィルム社製)を用いて分析した。結果を図7に示す。詳細には、上図にLDL-コレステロールを、下図にHDL-コレステロールを示す。
 実施例1の血糖値低減剤Aを含む飼料Bを与えたマウスにおいても、実施例2の血糖値低減剤Bを含む飼料Aを与えたマウスにおいても、コントール飼料を与えたマウスに比し、血清中のLDL-コレステロール量、HDL-コレステロール量は低減される傾向にあった。特に、GPCクロマトグラムにおいて、分子量200,000以下の領域の面積の割合、分子量1,000未満の領域の面積の割合、単糖類の領域と二糖類の領域の合計面積の割合をはじめとする各種パラメータが本発明の好適範囲内にある実施例2の血清コレステロール値低減剤Bを含む飼料Aを与えたマウスは、飼料Bを与えたマウスと比較して、血清中のLDL-コレステロール量を同等に低減し、HDL-コレステロール量をコントロールに対して有意差をもって低減していた。
 上記の結果より、本発明の腸内細菌増殖促進剤は、腸内の発酵性を良好にし、腸内細菌の増殖を促進できることが確認された。また、本発明の腸内細菌増殖促進剤は、飲食品に添加した際に該飲食品の呈味を阻害し難いことから、幅広い飲食品に利用できると共に、空腹時血糖値の低減効果や血清中のコレステロール低減効果も併せ持つことから、摂取対象の健康維持に極めて有益である。さらに、本発明の血糖値低減剤は、腸内細菌の増殖促進効果を呈すると共に空腹時血糖値を低減でき、また、本発明の血清コレステロール値低減剤は、腸内細菌の増殖促進効果を呈すると共に血清中のコレステロール値を低減できることがわかった。

Claims (14)

  1.  β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である、腸内細菌増殖促進剤。
  2.  前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上である、請求項1に記載の腸内細菌増殖促進剤。
  3.  前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大である、請求項1又は2に記載の腸内細菌増殖促進剤。
  4.  腸内細菌が、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌、バクテロイデス属(Bacteroides)細菌、ラクトバシラス属(Lactobacillus)細菌から選択される少なくとも一種である、請求項1~3の何れか1項に記載の腸内細菌増殖促進剤。
  5.  腸内細菌が、ビフィドバクテリウム属(Bifidobacterium)細菌及びバクテロイデス属(Bacteroides)細菌から選択される少なくとも一種である、請求項1~4の何れか1項に記載の腸内細菌増殖促進剤。
  6.  β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である、血糖値低減剤。
  7.  前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上である、請求項6に記載の血糖値低減剤。
  8.  前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大である、請求項6又は7に記載の血糖値低減剤。
  9.  β-1,3-1,4-グルカンを固形分中10質量%以上含有するイネ科植物抽出物を有効成分とし、該イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量200,000以下の領域の面積の割合が70%以上である、血清コレステロール値低減剤。
  10.  前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する標準β-1,3-1,4-グルカン換算の分子量1,000未満の領域の面積の割合が10%以上である、請求項9に記載の血清コレステロール値低減剤。
  11.  前記イネ科植物抽出物の固形分のGPC測定により得られたクロマトグラムにおいて、全ピークの総面積に対する単糖類の領域及び二糖類の領域の合計面積の割合が10~50%であり、且つ単糖類の領域の面積よりも二糖類の領域の面積が大である、請求項9又は10に記載の血清コレステロール値低減剤。
  12.  請求項1~5の何れか1項に記載の剤を含有する、腸内細菌増殖促進用飲食品組成物。
  13.  請求項6~8の何れか1項に記載の剤を含有する、血糖値低減用飲食品組成物。
  14.  請求項9~11の何れか1項に記載の剤を含有する、血清コレステロール値低減用飲食品組成物。
PCT/JP2021/036467 2020-10-06 2021-10-01 腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤、血清コレステロール値低減剤、及びこれらを含有する飲食品組成物 WO2022075222A1 (ja)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022555444A JPWO2022075222A1 (ja) 2020-10-06 2021-10-01

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2020168935 2020-10-06
JP2020-168935 2020-10-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2022075222A1 true WO2022075222A1 (ja) 2022-04-14

Family

ID=81126867

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2021/036467 WO2022075222A1 (ja) 2020-10-06 2021-10-01 腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤、血清コレステロール値低減剤、及びこれらを含有する飲食品組成物

Country Status (2)

Country Link
JP (1) JPWO2022075222A1 (ja)
WO (1) WO2022075222A1 (ja)

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002241784A (ja) * 2001-02-15 2002-08-28 Asahi Denka Kogyo Kk βグルカン含有油脂組成物
US20030147993A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-07 Heddleson Ronald A. Food products with improved bile acid binding functionality and methods for their preparation
JP2006521828A (ja) * 2003-04-02 2006-09-28 カーギル,インコーポレイティド 低分子量グルカンを含んでなる、改良された食物繊維含有物質
JP2010241769A (ja) * 2009-04-09 2010-10-28 Sapporo Breweries Ltd メタボリックシンドローム改善又は予防剤
JP2012006865A (ja) * 2010-06-24 2012-01-12 Adeka Corp アディポネクチン産生促進剤
JP2015084687A (ja) * 2013-10-29 2015-05-07 株式会社えんばく生活 えん麦のふすま由来の食品組成物およびその製造方法
JP2015186477A (ja) * 2014-03-10 2015-10-29 群栄化学工業株式会社 植物由来β−グルカン含有シロップ
JP2018042521A (ja) * 2016-09-16 2018-03-22 群栄化学工業株式会社 β−グルカン含有飲料及びその製造方法
WO2019035315A1 (ja) * 2017-08-16 2019-02-21 株式会社Adeka βグルカン含有組成物

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2002241784A (ja) * 2001-02-15 2002-08-28 Asahi Denka Kogyo Kk βグルカン含有油脂組成物
US20030147993A1 (en) * 2002-02-01 2003-08-07 Heddleson Ronald A. Food products with improved bile acid binding functionality and methods for their preparation
JP2006521828A (ja) * 2003-04-02 2006-09-28 カーギル,インコーポレイティド 低分子量グルカンを含んでなる、改良された食物繊維含有物質
JP2010241769A (ja) * 2009-04-09 2010-10-28 Sapporo Breweries Ltd メタボリックシンドローム改善又は予防剤
JP2012006865A (ja) * 2010-06-24 2012-01-12 Adeka Corp アディポネクチン産生促進剤
JP2015084687A (ja) * 2013-10-29 2015-05-07 株式会社えんばく生活 えん麦のふすま由来の食品組成物およびその製造方法
JP2015186477A (ja) * 2014-03-10 2015-10-29 群栄化学工業株式会社 植物由来β−グルカン含有シロップ
JP2018042521A (ja) * 2016-09-16 2018-03-22 群栄化学工業株式会社 β−グルカン含有飲料及びその製造方法
WO2019035315A1 (ja) * 2017-08-16 2019-02-21 株式会社Adeka βグルカン含有組成物

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DONG JI-LIN, YU XIAO, DONG LIANG-ER, SHEN RUI-LING: "In vitro fermentation of oat β -glucan and hydrolysates by fecal microbiota and selected probiotic strains : In vitro fermentation of OGH by fecal microbiota and selected probiotics", JOURNAL OF THE SCIENCE OF FOOD AND AGRICULTURE, vol. 97, no. 12, 1 September 2017 (2017-09-01), GB , pages 4198 - 4203, XP055919607, ISSN: 0022-5142, DOI: 10.1002/jsfa.8292 *
MIO KENTO, YAMANAKA CHIEMI, ICHINOSE YASUNORI, KOHYAMA NORIKO, YANAGISAWA TAKASHI, AOE SEIICHIRO: "Effects of barley β‐glucan with various molecular weights partially hydrolyzed by endogenous β‐glucanase on glucose tolerance and lipid metabolism in mice", CEREAL CHEMISTRY, vol. 97, no. 5, 1 September 2020 (2020-09-01), US , pages 1056 - 1065, XP055919610, ISSN: 0009-0352, DOI: 10.1002/cche.10328 *
MIYAWAKI, OSATO: "Enzymatic concentration of -glucan from barley (H.vulgare) and its effecton molecular-weight-distribution and functionality as a water soluble food-fiber", ANNUAL REPORT, THE TOJURO IIJIMA FOUNDATION FOR FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY, JAPAN, vol. 31, 1 January 2015 (2015-01-01), Japan, pages 233 - 238, XP009535732, ISSN: 2188-0662 *

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2022075222A1 (ja) 2022-04-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zaporozhets et al. The prebiotic potential of polysaccharides and extracts of seaweeds
RU2376889C2 (ru) Пищевой продукт и напиток, модулирующий кишечную флору человека, пищевые добавки, способы их получения и применения препаратов арабиноксилана
CA2746008C (en) Nutriment containing arabinoxylan and oligosaccharides
EP2844266B1 (en) Therapeutic use of chardonnay seed products
EFSA Panel on Food Additives and Nutrient Sources added to Food (ANS) et al. Re‐evaluation of guar gum (E 412) as a food additive
KR101992537B1 (ko) 신규한 락토바실러스 사케이 및 이를 포함하는 조성물
US8461130B2 (en) Food containing glycogen and use thereof
KR20160132050A (ko) 신규한 락토바실러스 파라카세이 균주
WO2017146213A1 (ja) ロイコノストック メセンテロイデスが産生する菌体外多糖を有効成分として含む代謝異常の予防または治療用組成物
Biswal et al. Current trends and future prospective of prebiotics as therapeutic food
WO2017159647A1 (ja) フィーカリバクテリウム属細菌増殖剤
WO2022075222A1 (ja) 腸内細菌増殖促進剤、血糖値低減剤、血清コレステロール値低減剤、及びこれらを含有する飲食品組成物
JPH1084909A (ja) 腸内酪酸濃度上昇促進剤
WO2016136624A1 (ja) 免疫調節剤及びその用途
JP7311336B2 (ja) 腸内短鎖脂肪酸産生促進用組成物
US20230102599A1 (en) Highly resistant starch and manufacturing process therefor
JP7396798B2 (ja) 腸内酪酸産生促進用組成物
TWI786105B (zh) 生體內酚化合物減低劑
EP4249052A1 (en) Composition for improving intestinal bacterial flora and composition for suppressing production of substances by intestinal putrefaction
JP2011246414A (ja) 筋肉組織における脂質代謝促進剤
KR102531783B1 (ko) 노을찰 수수를 포함하는 장 기능 개선용 조성물
WO2022230966A1 (ja) タマリンド分解物、酪酸産生菌増殖促進剤、腸内酪酸産生用組成物、並びに、タマリンド分解物の製造方法
JP2022048629A (ja) 抗生物質誘発性の腸内ディスバイオシスを改善するための組成物
JP6206983B2 (ja) 筋肉組織における脂質代謝促進剤
Tian et al. The role of arabinoxylan purified from wheat bran in bread and biscuits: Impacts on digestibility and colonic fermentability in vitro

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 21877521

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2022555444

Country of ref document: JP

Kind code of ref document: A

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 21877521

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1