WO2021070996A1 - 곡물유래 유산균을 포함하는 숙취 및 장트러블 해소용 조성물 - Google Patents
곡물유래 유산균을 포함하는 숙취 및 장트러블 해소용 조성물 Download PDFInfo
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Definitions
- the present invention comprises a grain-derived lactic acid bacterium Lactobacillus fermentum JS (patent deposit/KCCM-10499) strain having the ability to increase ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) enzyme activity and/or enzyme activity.
- the present invention does not have the ability to increase ADH and ALDH enzyme activity, but shows a synergistic effect when used with the grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) strain.
- Lactobacillus plantarum Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus acidophilus, Lactococcus lactis, Lactococcus lactis, Lactococcus lactis It relates to a composition for relieving a hangover comprising at least one lactic acid bacteria selected from the group consisting of Bifidobacterium breve and Bifidobacterium lactis.
- Hangover refers to a phenomenon in which the human body has a specific discomfort, headache, or mental and physical decline in working capacity after awakening from the sleep after ingesting alcohol for 1 to 2 days. About 20% of alcohol entering the body is absorbed in the stomach, and most of the rest is absorbed in the small intestine, of which 80-90% is metabolized in the liver. It is known that hangovers are mostly caused by toxicity by acetaldehyde, an intermediate metabolite made in the process of decomposing alcohol in the liver.
- Commonly used methods to eliminate hangovers are to reduce the concentration of alcohol remaining in the human body by supplying moisture, or drink something that has a diuretic effect, such as coffee or tea, to bring alcohol to the outside of the body. There is a way to discharge it.
- hangover relievers There are several products for hangover relief on the market. Most of these hangover relievers are a way to indirectly prevent and relieve hangovers by preventing damage to liver cells that break down alcohol.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- alcohol alcohol
- Lactobacillus is the most well-known microorganism among beneficial bacteria, and is commonly referred to as probiotics in Korea, and has the effect of inhibiting the growth of harmful bacteria in the human intestine.
- lactic acid bacteria do not directly inhibit harmful bacteria, but secrete lactic acid bacteria-producing substances called postbiotics, thereby creating an environment where harmful bacteria cannot live, thereby suppressing harmful bacteria.
- lactic acid bacteria secrete ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) on their own to help metabolize alcohol in the small intestine, and they directly secrete ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase). Even if the strain does not, it increases the activity of ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) by secreting a substance that can act as a coenzyme among useful substances inside the cell of the strain or lactic acid bacteria producing substances called postbiotics. . Most of these lactic acid bacteria useful substances and lactic acid bacteria producing substances have very stable properties such as heat and acid because their molecular weight is small and the binding is very hard.
- the main prior art related to hangover relief is focused on maintaining the activities of ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) secreted in the human body by preventing damage to hepatocytes that degrade alcohol.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- alcohol and acetaldehyde are used when the activity of ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) secreted by an individual is low, or when an excessive amount of alcohol is consumed.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- an object of the present invention is to have a lactic acid bacteria capable of secreting alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH), or a useful substance and a lactic acid bacteria-producing substance in the cell that can increase the activity of alcohol dehydrogenase (ADH) and aldehyde dehydrogenase (ALDH).
- ADH alcohol dehydrogenase
- ADH aldehyde dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- the present invention is to provide a composition for relieving a hangover that can relieve intestinal problems such as abdominal pain, nausea, and diarrhea that occur with a hangover.
- Hangover including a grain-derived lactic acid bacterium Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499), which has the ability to secrete ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) enzymes and/or increase enzyme activity Provide a good composition.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- the grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS [Lactobacillus fermentum JS (patent deposit / KCCM-10499)] strain and ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) enzyme activity increase ability is weak or not Lactobacillus Fermentum JS [Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499)] Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus (Lactobacillus casei), which exhibit a synergistic effect when mixed with strain , Lactobacillus acidophilus, Lactococcus lactis, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium lactis 1 selected from the group consisting of It provides a composition for relieving hangovers containing more than one species of lactic acid bacteria.
- a composition for relieving a hangover containing a strain of Lactobacillus fermentum JS [Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499)] or a grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS (patent deposited /KCCM-10499)] Strains and Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus), Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus acidophilus (Lactococcus lactis), Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium lactis (Bifidobacterium lactis).
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- composition for relieving hangover of the present invention is effective in relieving bowel problems such as abdominal pain, nausea, and diarrhea that occur after drinking alcohol.
- Fig. 1 shows the whole genome contig of the selected strain [Lactobacillus fermentum JS (patent deposit/KCCM-10499)].
- Figure 2 shows the 16S rDNA nucleotide sequence of Lactobacillus fermentum JS-KCCM-10499.
- Figure 3 shows the results of measuring ADH and ALDH activities of the selected strain [Lactobacillus fermentum JS (patent deposit/KCCM-10499)].
- Figure 5 shows the measurement result of alcohol reduction change over time of soju to which the product of the present invention is added.
- the present invention is in its best form, the grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) having the ability to secrete and/or increase the activity of ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) enzymes. ] It presents a composition for relieving hangovers, including strains.
- the inventors of the present invention were trying to find a composition for relieving hangovers containing them and lactic acid bacteria that secrete or increase the activity of ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase), which are enzymes involved in alcohol metabolism in the small intestine and liver.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- the present invention was completed by discovering that Lactobacillus fermentum JS (KCCM-10499) secretes ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) or increases its activity.
- the present invention is a grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) having the ability to secrete ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) enzymes and/or increase enzyme activity. It provides a composition for relieving a hangover comprising a.
- composition for relieving hangover of the present invention secretes or increases the activity of ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase), which are enzymes involved in alcohol metabolism in the small intestine and liver, Lactobacillus fermentum JS (KCCM -10499)], which is mechanically different from existing hangover relievers, and acts directly on alcohol and acetaldehyde to decompose, thereby reducing the amount of alcohol delivered to the liver, thus making the small intestine or liver unreasonable. It prevents you from going and can relieve a hangover.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- Fig. 1 shows the whole genome contig of Lactobacillus Fermentum JS (Patent Deposit/KCCM-10499) of the present invention. (See Registration Patent 10-0435168)
- Figure 2 shows the 16S rDNA nucleotide sequence of Lactobacillus fermentum JS-KCCM-10499.
- the present inventors believe that some lactic acid bacteria secrete ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) enzymes or have a somewhat low ability to increase their activity, but the grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/ KCCM-10499)] found to produce a synergistic effect when used together with the strain, and completed the present invention.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- the present invention is a grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS [Lactobacillus fermentum JS (patent deposit / KCCM-10499)] strain and Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus esidophilus, It provides a composite lactic acid bacteria composition for hangover relief comprising at least one lactic acid bacteria selected from the group consisting of Lactococcus lactis, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium lactis.
- the present invention provides a composition for relieving hangovers in the above composition, wherein the bacteria are live or dead or contain a product thereof.
- composition for relieving hangover of the present invention secretes or activates ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase), which are enzymes involved in alcohol metabolism in the small intestine and liver, unlike existing hangover relieving agents that provide only a protective effect on the liver.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- composition for relieving hangovers of the present invention is mechanically different from the existing hangover relieving agents and acts directly on alcohol and acetaldehyde to decompose it so that the small intestine or liver does not have an effect, and has an effect on relieving hangovers. can see.
- the composition for relieving a hangover of the present invention together with the Lactobacillus fermentum JS (KCCM-10499), has a somewhat low ability to increase ADH and ALDH enzyme activities, but the grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS (patent Deposited/KCCM-10499)] Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casey, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus esidophilus, Lactococcus lactis, Bifidobacterium breve, and Including one or more lactic acid bacteria selected from the group consisting of Bifidobacterium lactis, it has the effect of relieving hangovers and preventing bowel problems, including the unique effects of probiotics.
- the synergistic effect is due to the fact that the mixed strains produce more physiologically active substances through competition between the bacteria by giving appropriate stimulation to the lactic acid strains having a physiologically active effect.
- the strains are purchased and used for production and sale, or are grown by a general culture method for lactic acid bacteria, and are recovered by a separation process such as centrifugation, but are not limited thereto, I can.
- the strain concentrate and starch are mixed and prepared by lyophilizing, and subsidiary materials such as glucose and fructose may be added.
- the composition for relieving a hangover of the present invention is preferably Lactobacillus fermentum JS [Lactobacillus fermentum JS (patent deposit/KCCM-10499)] strain, and Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casey, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus Essi Dophilus, Lactococcus lactis, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium lactis may contain two or more types of lactic acid bacteria selected from the group consisting of lactis, more preferably Lactobacillus Permentum JS [ Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499)] strain, and Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casey, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus esidophilus, Lactobacillus lactis, Bifidobacterium breve and BP It may contain 7 types of lactobacill
- Lactobacillus fermentum JS and Lactobacillus fermentum JS strains contained in the composition for relieving hangovers of the present invention exhibit synergistic effects when used together with lactic acid bacteria having excellent ethanol resistance, ethanol and/or acetaldehyde resolution, as well as acid resistance. , It has excellent bile acid resistance and intestinal fixation.
- the hangover relief composition may be for use in removing one or more of ethanol and acetaldehyde from a sample.
- the term “removal” refers to reducing the concentration of one or more of ethanol and acetaldehyde in a sample, and includes completely removing it.
- the sample may be a bodily fluid.
- the sample may be intestinal fluid or blood.
- the intestinal fluid may be gastric juice, duodenal fluid, small intestine fluid, or large intestine fluid.
- Lactobacillus Fermentum JS (KCCM-10499), Lactobacillus Plantarum, Lactobacillus Casey, Lactobacillus Rhamnosus, Lactobacillus Ecidophilus, Lactococcus Lactis, Bifidobacterium Brave and BP
- a hangover relief composition comprising at least one lactic acid bacteria selected from the group consisting of gambling terium lactis, preferably 40-60% by weight of Lactobacillus Permentum JS (KCCM-10499) and Lactobacillus plantarum, lacto 40-60% by weight of one or more lactic acid bacteria selected from the group consisting of Bacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus ecidophilus, Lactococcus lactis, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium lactis Can include.
- the lactic acid bacteria exhibiting a synergistic effect when used together with the grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus fermentum JS are preferably caused by hangovers.
- the present invention provides a hangover relief product comprising a hangover relief composition.
- the product for relieving hangover of the present invention may be separately ingested before drinking alcohol, but it is preferably consumed with alcohol after drinking.
- the product for relieving hangovers according to the present invention may be prepared in the form of various foods, for example, beverages, teas, vitamin complexes, powders, granules, tablets, capsules, and the like.
- the hangover relief product is not particularly limited except for containing a hangover relief composition, and may contain various sweeteners or natural carbohydrates as an additional component, such as a conventional food. That is, as natural carbohydrates, monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as sucrose, maltose, and lactose, conventional sugars such as starch, dextrin, and cyclodextrin, fructooligosaccharide, paratinose, indigestible maltodextrin And sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. Examples of the sweetener include natural sweeteners (taumatin, stevia extract, glycylysin, etc.) and synthetic sweeteners (saccharin, aspartame, etc.).
- natural carbohydrates monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as sucrose, maltose, and lactose
- conventional sugars such as
- the product of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavoring agents such as synthetic flavoring agents and natural flavoring agents, coloring agents, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, It may contain a pH adjuster, a stabilizer, a preservative, glycerin, alcohol, a carbonation agent used in carbonated beverages, and the like.
- the present invention may preferably include at least one selected from starch, glucose, fructose, fructooligosaccharide, isomaltooligosaccharide, indigestible maltodextrin, and palatinose.
- the hangover relief product of the present invention is made of powder
- the powdered hangover relief composition of the present invention and other additional ingredients may be pulverized and mixed.
- the hangover relieving product is 40-60% by weight of a strain, 5-30% by weight of glucose or fructose, 5-20% by weight of fructooligosaccharide or isomaltooligosaccharide, 5-20% by weight of indigestible maltodextrin, and Palatinose 1-
- the final viable cell number may be 1.0 ⁇ 10 8 ⁇ 9.0 ⁇ 10 9 cfu/g.
- an alcohol-resistant strain was selected because the strain must be able to proliferate in the small intestine with an increased alcohol concentration.
- the medium used for alcohol resistance of the strain is MRS (de Man, Rogosa & Sharpe) medium powder 5.5 in fermented spirits diluted with alcohol concentrations of 10%, 15%, 20%, 25%, and 30%. % Was added to dissolve, and 20 ml of this liquid medium was sterilized with a membrane filter and used as a medium.
- All strains used for selection are GRAS (Generally Recognized As Safe) grade lactic acid bacteria, and only lactic acid bacteria that can be used as food from the Food and Drug Administration's Food Ingredients List were used. 20 kinds of grain-derived lactic acid bacteria owned/deposited by Wellbeing LS Co., Ltd. Eight strains with relatively high alcohol resistance were shown in Table 1 using 50 species. Table 1 shows the test results of the top 4 strains possessing alcohol resistance of public/vegetable lactic acid bacteria among candidate strains.
- ADH (alcohol dehydrogenase) activity was measured by measuring the absorbance at 340 nm using a UV-Vis spectrophotometer to measure NADH (Nicotinamide adenine dinucleotide, reduced form) formed by decomposition of alcohol.
- ADH alcohol dehydrogenase
- distilled water was added to the control instead of the sample.
- ADH alcohol dehydrogenase
- hepos syrup of Cho-A Pharmaceutical was purchased at a pharmacy and diluted by 1/2 according to the prescription.
- the activity of ADH (alcohol dehydrogenase) was expressed as the ratio of the maximum absorbance at the end of the reaction to the maximum absorbance of the control, and was calculated by the following equation.
- the change in absorbance according to the production of NADH was measured at 340 nm.
- 100 ⁇ l of ALDH was added to measure the change in absorbance at 340 nm.
- distilled water was added instead of the candidate strain.
- Lactobacillus fermentum with high alcohol resistance among the top 8 strains possessing alcohol resistance for which ADH (alcohol dehydrogenase) activity and ALDH (aldehyde dehydrogenase) activity were measured, and high ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) activity.
- the JS (patent deposit/KCCM-10499) strain was determined as the final selection strain and the present invention was completed.
- the enzyme properties (API ZYM KIT) of the selected strain Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) are shown in Table 3 below.
- Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) strain selected through Examples 1 and 2 is mixed and applied with a strain without ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) activity.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- microorganisms used in the mixed strain were freeze-dried microorganisms, and the effective number and microorganism concentration were adjusted to 1.0 ⁇ 10 9 cfu/g.
- ADH alcohol dehydrogenase
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- composition table of mixed strains without ADH (alcohol dehydrogenase) and ALDH (aldehyde dehydrogenase) activity is shown in Table 4 below.
- ADH (alcohol dehydrogenase) activity for mixed strain candidates 1 to 4 was expressed by measuring the absorbance at 340 nm using a UV-Vis spectrophotometer to measure the NADH formed by decomposition of alcohol.
- the strain was diluted 1/10 in distilled water to be 1.0. It was used so that it became x10 8 cfu/ml.
- the positive control was used after mixing 50% of glucose in 50% of Lactobacillus Permentum JS (Patent Deposit/KCCM-10499) at a concentration of 1.0 ⁇ 10 9 cfu/g, followed by 1/10 dilution.
- the activity of ADH (alcohol dehydrogenase) was expressed as the ratio of the maximum absorbance at the end of the reaction to the maximum absorbance of the control, and was calculated by the following equation.
- ALDH aldehyde dehydrogenase
- Distilled water 2.1 ml, 1 M tris HCl 100 ⁇ l, 3 M KCl 100 ⁇ l, 1.0 ⁇ 10 8 cfu/ml candidate composition 100 ⁇ l, NAD 100 ⁇ l, 2-mercaptoethanol 100 ⁇ l, acet
- distilled water was added instead of the candidate strain.
- the positive control was used after mixing 50% of glucose in 50% of Lactobacillus Permentum JS (Patent Deposit/KCCM-10499) at a concentration of 1.0 ⁇ 10 9 cfu/g, followed by 1/10 dilution.
- the activity of ALDH was expressed as a ratio of the maximum absorbance at the end of the reaction to the maximum absorbance of the control, and was calculated by the following equation.
- the composition of the mixed strain is Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) strain 50w/w% regardless of strain, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus casei, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus esidophilus, A complex lactic acid bacteria composition containing 50w/w% of 7 types of lactobacilli of Lactococcus lactis, Bifidobacterium breve, and Bifidobacterium lactis was found to be effective in relieving hangovers and intestinal problems.
- Lactobacillus plantarum 10w/w%, Lactobacillus casey 10w/w%, Lactobacillus rhamnosus 8w/w%, Lactobacillus acidophilus 6w/w%, Lactococcus lactis 6w /w%, Bifidobacterium breve 5w/w%, and Bifidobacterium lactis 5w/w% were found to be effective in relieving hangovers and relieving bowel troubles.
- the culture medium of the Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) strain selected above is usually MRS broth medium, and heat sterilization is performed at 121°C, which is the normal microbial medium sterilization condition, for 15 minutes or more, and the inoculation amount of lactic acid bacteria is 1 ⁇ 10 5 ⁇ 1 ⁇ 10 6 cfu/ml concentration, cultured for 12 to 18 hours at 160 rpm, pH 7.0, 40 to 45°C, and the number of viable bacteria of grain-derived lactic acid bacteria after cultivation is 1 ⁇ 10 9 ⁇ 1 ⁇ 10 10 cfu Incubate so that it is in the range of /ml.
- Lactobacillus fermentum JS (patent deposit/KCCM-10499) seeded in the culture medium prepared in Example 5 was inoculated to a concentration of 1 ⁇ 10 5 ⁇ 1 ⁇ 10 6 cfu/ml, and 160rpm, pH 7.0, 40 ⁇ Incubate for 12 to 18 hours at 45°C, and the number of viable bacteria of grain-derived lactic acid bacteria after cultivation is in the range of 1 ⁇ 10 9 ⁇ 9 ⁇ 10 9 cfu/ml.
- Lactobacillus Fermentum JS (patent deposit/KCCM-10499) strain, which was cultured at 1 ⁇ 10 9 ⁇ 9 ⁇ 10 9 cfu/ml, was centrifuged for about 1 hour at 8000 rpm using a disc type centrifuge and centrifuged grains Lactobacillus derived from Lactobacillus fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) strain concentrate and corn starch were mixed in a ratio of 50:50 (w/w%), and then freeze-dried for 3 days in a conventional method to prepare glucose and fructose.
- Grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus Fermentum JS (patent deposited/KCCM-10499) powder was prepared using the sub-materials of 1.0 to 1.2 ⁇ 10 10 cfu/g.
- Live cell number of 1.0 ⁇ 1.2 ⁇ 10 10 cfu / g grain derived from the manufacture is completed so that the concentration of lactic acid bacteria Lactobacillus buffer momentum claim yieseu (Patent deposit / KCCM-10499) powder and the other 1.0 ⁇ 1.2 ⁇ 10 10 lactic acid bacteria cfu / g concentration ( Purchase and use without cultivation) in the proportions shown in the table below to mix the strains.
- strains mixed with grain-derived lactic acid bacteria Lactobacillus Fermentum JS (patent deposit/KCCM-10499) are used without distinct strains.
- Table 5 shows the mixing ratio of the mixed strain powder.
- the mixed strain was again mixed with glucose 20w/w%, fructooligosaccharide 14w/w%, indigestible maltodextrin 14w/w%, and palatinose 2w/w% with respect to the mixed strain 50w/w% by weight.
- the composition is made so that it has a concentration of ⁇ 10 9 cfu/g, and the composition is named “Sul-ae-ta-oil (lactic acid bacteria that burns in alcohol)”.
- ⁇ Table 6> shows the response results of the age group in their 50s to the hangover relief effect and bowel trouble relief.
- ⁇ Table 7> shows the response results of people in their 40s to the hangover relief effect and bowel trouble relief.
- ⁇ Table 7> is a result of targeting the age of 40 (40s panel: 193 people), and showed similar results to the age of 50s. That is, the product of the present invention showed a higher score than other manufacturers, and it was found that the effect was better in relieving hangover and intestinal trouble the next day after drinking.
- ⁇ Table 8> shows the response results of people in their 30s to the hangover relief effect and bowel trouble relief.
- ⁇ Table 9> shows the response results of the age group in their twenties to the hangover relief effect and bowel trouble relief.
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Abstract
본 발명은 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 활성 증가능을 가지는 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주를 포함하는 숙취해소용 조성물 및 ADH 및 ALDH 효소 활성 증가능은 다소 낮지만 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주와 함께 사용 시 시너지 효과를 나타내는 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스의 7종 유산균을 포함하는 숙취해소용 복합유산균 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 활성 및/또는 효소 활성 증가능을 가지는 곡물유래 유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499) 균주를 포함하는 숙취해소용 조성물에 대한 것이다. 또한 본 발명은 ADH 및 ALDH 효소 활성 증가능은 없지만 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499) 균주와 함께 사용시 시너지 효과를 나타내는 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis), 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 및 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis)로 이루어지는 군에서 선택되는 1종이상의 유산균을 포함하는 숙취해소용 조성물에 관한 것이다.
숙취는 인체가 술을 섭취 한 후 수면에서 깬 후에 특이한 불쾌감이나 두통, 또는 심신의 작업능력 감퇴 등이 1∼2일간 지속되는 현상을 말한다. 체내에 들어온 알코올은 위에서 20% 정도가 흡수되고 나머지는 대부분 소장에서 흡수되어 이중 80-90%가 간에서 대사된다. 숙취는 간에서 알코올(alcohol)이 분해되는 과정에서 만들어지는 중간 대사산물인 아세트알데하이드(acetaldehyde)에 의한 독성에 의하여 발생하는 경우가 대부분인 것으로 알려져 있다.
숙취를 제거하기 위해 일반적으로 사용되는 방법은 수분을 공급하여 인체에 남아있는 알코올(alcohol) 농도를 낮추거나 커피·차 등과 같이 이뇨작용(利尿作用)이 있는 것을 마셔 인체 외부로 알코올(alcohol)을 배출하는 방법이 있다.
숙취해소를 위한 여러 제품이 시장에 나와 있는데 이러한 숙취해소제의 대부분은 알코올(alcohol)을 분해하는 간세포의 손상을 방지하여 간접적으로 숙취를 예방, 해소하는 방법이다.
ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)는 인체가 섭취한 알코올(alcohol)을 대사하는 과정에 직접적으로 관계하는 효소다. 알코올(alcohol)을 섭취시 위와 소장에서 흡수된 알코올(alcohol)은 간에서 분해하게 되는데 이때 1차적으로 ADH(alcohol dehydrogenase)가 알코올(alcohol)을 독성이 강한 아세트알데하이드(acetaldehyde)로 산화시키고, 이때 만들어진 아세트알데하이드(acetaldehyde)는 ALDH(aldehyde dehydrogenase)에 의해 독성이 매우 약한 아세트산으로 전환되는 대사과정을 거쳐 알코올(alcohol)을 분해하게 된다.
사람은 선천적, 연령적 요인 및 음주 섭취시의 컨디션에 따라 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성이 달라지는데 특히 ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성이 좋지 않을 경우에는 아세트알데하이드(acetaldehyde)의 독성에 의해 더 강하고 오래 숙취를 느끼게 된다.
한편, 이전의 알코올(alcohol)대사는 위와 소장에서 흡수된 후 간에서 분해된다고 알려져 왔으나, 최근에는 알코올(alcohol)이 소장에서 유익 미생물에 의해서도 분해되는 것으로 알려져 이에 대한 관심이 커지고 있다.
유산균은 유익균 중 가장 잘 알려진 미생물로 우리나라에서는 흔히 프로바이오틱스로 지칭되며 사람의 장내에서 유해균의 증식을 억제하는 작용을 가진다. 즉, 유산균은 직접 유해균을 저해하는 것이 아니라 포스트바이오틱스(Postbiotics)라고 불리는 유산균생산물질을 분비하여 유해균이 살 수 없는 환경을 만들어 유해균을 억제 시킨다.
또한 유산균 중 일부는 자체적으로 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)을 분비하여 소장내의 알코올(alcohol) 대사에 도움을 주는 경우도 있으며 직접적으로 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)를 분비하지 않는 균주라 하더라도 균주의 세포내부 유용물질 또는 포스트바이오틱스(Postbiotics)라고 불리는 유산균생산물질 중 조효소로써 작용할 수 있는 물질을 분비함으로써 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성을 증가시키기도 한다. 이러한 유산균의 세포내부 유용물질 및 유산균생산물질은 대부분 분자량이 작고 결합이 매우 단단하기 때문에 열, 산 등에 매우 안정적인 특성이 있다.
따라서 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 분비능이 있는 유산균 또는 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성을 증가시킬 수 있는 세포내부 유용물질 및 유산균생산물질을 가지는 유산균을 섭취하면 소장에서 알코올(alcohol)을 분해하는데 도움을 주기 때문에 간으로 전달되는 알코올(alcohol)의 양을 줄일 수 있어 숙취해소에 도움이 될 수 있음이 알려져 있고 관련 제품이 생산되고 있으나 효과가 충분하지 못한 단점이 있다.
한편, 많은 사람들은 술을 마신 후 숙취와 함께 복통, 메스커움, 설사 등의 장 트러블을 호소하는데, 이러한 장 트러블을 해소하는 제품이 없다.
숙취해소와 관련한 주요 종래기술은 알코올(alcohol)을 분해하는 간세포의 손상을 방지하여 인체 내에서 분비하는 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성을 유지하는 것에 초점이 맞추어져 있다.
그러나 이러한 방법의 경우 개인이 분비하는 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성 자체가 낮은 경우나, 과량의 알코올(alcohol)을 섭취하는 경우에 알코올(alcohol) 및 아세트알데하이드(acetaldehyde)를 빠르게 분해할 수 없어 그 효과를 체감하기 어렵다는 단점이 있다.
따라서 본 발명의 목적은 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 분비능이 있는 유산균 또는 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성을 증가시킬 수 있는 세포내부 유용물질 및 유산균 생산물질을 가지는 유산균을 개발하여 섭취시 소장에서 알코올(alcohol)을 분해하기 때문에 알코올(alcohol) 섭취시 간으로 전달되는 알코올(alcohol)의 양을 줄일 수 있어 숙취에 도움을 주는 효과가 우수한 숙취해소용 조성물을 제공하는데 있다.
또한 본 발명은 숙취와 함께 발생하는 복통, 메스커움, 설사 등의 장 트러블을 해소할 수 있는 숙취해소용 조성물을 제공하는데 있다.
상기 목적 달성을 위하여 본 발명은
ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 분비 및/또는 효소 활성 증가능을 가지는 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주를 포함하는 숙취해소용 조성물을 제공한다.
또한 본 발명은, 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주 및 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 활성 증가능은 약하거나 없지만 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주와 혼합시 시너지 효과를 나타내는 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis), 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 및 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis)로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 유산균을 포함하는 숙취해소용 조성물을 제공한다.
본 발명에서는 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주를 포함하는 숙취해소용 조성물 또는 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주 및 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus), 락토코쿠스 락티스(Lactococcus lactis), 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 및 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis)로 이루어지는 군에서 선택되는 1종이상의 유산균을 포함하는 숙취해소용 복합유산균 조성물은 소장과 간에서 이루어지는 알콜대사에 관여하는 효소인 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)를 분비하거나 그 활성을 높임으로써 알코올(alcohol)과 아세트알데하이드(acetaldehyde)에 직접 작용하여 분해하여 소장이나 간에 무리가 가지 않게 하며 숙취를 해소하는 효과가 있다.
본 발명의 숙취해소용 조성물은 음주 후 발생하는 복통, 메스꺼움, 설사 등의 장트러블을 해소하는 효과가 있다.
도 1에 선발된 균주[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)]의 whole genome contig를 나타내었다.
도 2에 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(Lactobacillus fermentum JS) - KCCM-10499의 16S rDNA 염기서열을 나타내었다.
도 3에 선발된 균주[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)]의 ADH 및 ALDH 활성도 측정결과를 나타내었다.
도 4에 혼합균주의 ADH 및 ALDH 활성도 측정결과를 나타내었다.
도 5에 본 발명의 제품을 첨가한 소주의 시간별 알콜감소변화 측정결과를 나타내었다.
본 발명은 최선의 형태로, ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 분비 및/또는 활성 증가능을 가지는 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주를 포함하는 숙취해소용 조성물을 제시한다.
본 발명자는 소장과 간에서 이루어지는 알코올대사에 관여하는 효소인 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)를 분비하거나 그 활성을 증가시키는 유산균 및 이를 포함하는 숙취해소용 조성물을 찾고자 노력하던 중 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(KCCM-10499)]가 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)를 분비하거나 그 활성을 증가시킨다는 것을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 분비 및/또는 효소 활성 증가능을 가지는 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주를 포함하는 숙취해소용 조성물을 제공한다.
본 발명의 숙취해소용 조성물은 소장과 간에서 이루어지는 알코올대사에 관여하는 효소인 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)를 분비하거나 그 활성 증가시키는 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(KCCM-10499)]를 포함함으로써 기존의 숙취해소제와는 메커니즘적으로 다르게 알코올(alcohol) 과 아세트알데하이드(acetaldehyde)에 직접 작용하여 분해함으로써 간에 전달되는 알코올의 양을 줄일 수 있고 따라서 소장이나 간에 무리가 가지 않게 하며 숙취를 해소할 수 있다.
도 1에 본 발명의 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499)의 whole genome contig를 나타내었다.(등록특허 10-0435168 참조)
도 2에 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(Lactobacillus fermentum JS) - KCCM-10499의 16S rDNA 염기서열을 나타내었다.
한편, 본 발명자들은 일부 유산균이 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소를 분비하거나 그의 활성을 증가시키는 능력은 다소 낮지만 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주와 함께 사용시 시너지 효과를 내는 것을 발견하고 본 발명을 완성하였다.
즉, 본 발명은 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주 및 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어진 군에서 선택되는 1종이상의 유산균을 포함하는 숙취해소용 복합유산균 조성물을 제공한다.
본 발명은 상기 조성물에서 균이 생균 또는 사균이거나 그 생성물질을 포함하는 숙취해소용 조성물을 제공한다.
상기 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어진 군에서 선택되는 1종이상의 유산균은 strain과 관계가 없다.
본 발명의 숙취해소용 조성물은 간에 대한 보호효과만을 제공하는 기존 숙취해소제와는 다르게 소장과 간에서 이루어지는 알코올대사에 관여하는 효소인 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase)를 분비하거나 그의 활성을 증가시키는 균주인 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(KCCM-10499)를 통해 음주 후 발생하는 숙취를 해소하고, 설사, 복통, 장의 불편함 등의 장트러블에 대한 해소 효과를 가진다. 즉, 본 발명의 숙취해소용 조성물은 기존의 숙취해소제와는 메커니즘적으로 다르게 알코올(alcohol)과 아세트알데하이드(acetaldehyde)에 직접 작용하여 분해하여 소장이나 간에 무리가 가지 않게 하며 숙취해소에 효과를 볼 수 있다.
또는 본 발명의 숙취해소용 조성물은 상기 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(KCCM-10499)와 함께, ADH 및 ALDH 효소 활성 증가능은 다소 낮지만 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주와 함께 사용 시 시너지 효과를 나타내는 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어진 군에서 선택되는 1종이상의 유산균을 포함하여 프로바이오틱스 고유의 효과를 포함하여 숙취해소 및 장트러블 방지 효과를 갖는다.
상기 시너지 효과는 혼합균주가 생리활성 효과를 가지는 유산균주에 대하여 적절한 자극을 줌으로써 균 사이의 경쟁을 통하여 생리활성 물질을 더 많이 생산되게 하기 때문인 것으로 판단된다.
본 발명에서 균주들은 생산 판매되는 것을 구입하여 사용하거나, 유산균을 위한 일반적인 배양 방법으로 성장되고, 원심분리와 같은 분리과정으로 회수되며, 이에 제한되지는 않지만 동결건조에 의해 생균제 형태로 제조하여 이용될 수 있다. 동결건조에 의해 유산균 분말을 만드는 단계는 균주 농축물과 전분을 섞어 동결건조하여 제조하고 포도당, 과당 등의 부원료를 추가할 수 있다.
본 발명의 숙취해소용 조성물은 바람직하게는 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주, 및 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어진 군에서 선택되는 2종이상의 유산균을 포함할 수 있고, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주, 및 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스의 7종의 유산균을 포함할 수 있다.
본 발명의 숙취해소용 조성물에 포함되는 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스 및 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스 균주와 함께 사용 시 시너지 효과를 나타내는 유산균은 에탄올 내성, 에탄올 및/또는 아세트알데히드 분해능이 우수할 뿐만 아니라 내산성, 내담즙산성 및 장내 정착성이 우수하다.
상기 숙취해소용 조성물은 시료 중 에탄올 및 아세트알데히드 중 하나 이상을 제거하는 데 사용하기 위한 것일 수 있다. 용어 "제거"는 시료 중 에탄올 및 아세트알데히드 중 하나 이상의 농도를 감소시키는 것으로서, 완전히 제거하는 것을 포함한다. 상기 시료는 체액인 것일 수 있다. 상기 시료는 장내 액체, 또는 혈액일 수 있다. 상기 장내 액체는 위액, 십이지장액, 소장액, 또는 대장액일 수 있다.
상기 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(KCCM-10499)와 함께, 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어진 군에서 선택되는 1종이상의 유산균을 포함하는 숙취해소용 조성물의 경우 바람직하게는 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(KCCM-10499) 40-60중량% 및 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어진 군에서 선택되는 1종이상의 유산균 40-60중량%를 포함할 수 있다.
상기 ADH 및 ALDH 효소 활성 증가능은 미미하거나 없지만 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주와 함께 사용 시 시너지 효과를 나타내는 유산균은 바람직하게는 숙취해소용 조성물 총 중량에 대하여 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum) 8-12중량%, 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) 8-12중량%, 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) 6-10중량%, 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 4-8중량%, 락토바실러스 락티스(Lactococcus lactis) 4-8중량%, 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 3-7중량%, 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis) 3-7중량%를 포함할 수 있다.
본 발명은 숙취해소용 조성물을 포함하는 숙취해소용 제품을 제공한다.
본 발명의 상기 숙취해소용 제품은 술을 마시기 전에 별도 섭취하는 것도 가능하나 바람직하게는 술에 타서 술과 함께 마시는 것이다.
이 경우 음주 전 또는 후에 술과 별도로 섭취하는 제품에 비하여, 술의 맛, 색깔, 탁도 등은 변화시키지 않으면서 술에 포함된 알코올을 직접적으로 분해하고, 또한 술과 함께 섭취되었을 때 체내에서 알코올과 함께 아세트알데하이드를 분해하여 숙취를 빠르게 해소하는 효과가 우수하다.
본 발명에 따른 숙취해소용 제품은 각종 식품류, 예를 들어, 음료, 차, 비타민 복합제, 분말, 과립, 정제, 캡슐, 등의 형태로 제조될 수 있다.
하나의 실시예로 상기 숙취해소용 제품은 숙취해소용 조성물을 함유하는 것 외에 특별한 제한은 없으며 통상의 식품과 같이 여러가지 감미료 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 즉, 천연 탄수화물로서 포도당, 과당 등의 모노사카라이드, 슈크로스, 말토스, 락토스 등의 디사카라이드, 전분, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 프락토올리고당, 파라티노스, 난소화성말토덱스트린 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜 등을 포함할 수 있다. 상기 감미료로서는 천연 감미료(타우마틴, 스테비아 추출물, 글리실리친 등) 및 합성 감미료(사카린, 아스파탐 등) 등을 들 수 있다.
그 외 본 발명의 제품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 보존료, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
본 발명은 바람직하게는 전분, 포도당, 과당, 프락토올리고당, 이소말토올리고당, 난소화성말토덱스트린 및 팔라티노스에서 선택되는 1종이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 숙취해소용 제품이 분말로 이루어진 경우 분말화 한 본 발명의 숙취해소용 조성물 및 기타 추가성분을 분말화 하여 혼합할 수 있다.
상기 숙취해소용 제품은 균주 40-60중량%에, 포도당 혹은 과당 5-30중량%, 프락토올리고당 혹은 이소말토올리고당 5-20중량%, 난소화성말토덱스트린 5-20중량% 및 팔라티노스 1-3중량%를 혼합하여 최종 생균수가 1.0×108∼9.0×109cfu/g 일 수 있다.
이하 본 발명을 실시 예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 알코올내성 균주 확인
숙취제거의 효능이 있기 위해서는 알코올 농도가 높아진 소장에서 균주가 증식할 수 있어야하기 때문에 알코올내성 균주를 선발하였다. 균주의 알코올(alcohol)내성에 사용하는 배지는 10%,15%, 20%, 25%, 30%의 알코올(alcohol)농도로 희석된 발효주정에 MRS(de Man, Rogosa & Sharpe) 배지 분말 5.5%를 첨가하여 녹이고 이 액체배지 20ml를 멤브레인 필터(membrane filter)로 제균하여 배지로 사용하였다.
각 농도별 발효주정이 섞인 MRS 배지 및 일반 MRS 배지에 1.0×109 cfu/g 농도로 동결건조된 후보균주 1%를 접종하고 37℃에서 정치 배양하여 일반 MRS 배지 대비 발효주정이 섞인 MRS 배지에 대한 성장정도를 통해 알코올(alcohol)내성을 확인하였다. 균주의 생장 정도는 UV-VIS Spectrophotometer를 이용하여 610nm에서 시료 1ml의 흡광도를 측정하여 확인하였으며 시료는 2hr 경과 시료를 각각 1ml 채취하여 사용하였다.
선발에 사용된 균주는 모두 GRAS(Generally Recognized As Safe)등급의 유산균으로 식약처 식품원료 목록에서 식품으로 사용가능한 유산균주 만을 사용하였으며 ㈜웰빙엘에스에서 보유/기탁한 곡물유래유산균 20종, 일반 공시균주 50종을 사용하여 상대적으로 알코올내성이 높은 균주 8종을 표 1 에 나타내었다. 표 1은 후보균주 중 공시/식물성 유산균의 알코올(alcohol)내성보유 상위 4균주 시험결과이다.
*일반MRS 배지(대조군) 대비 성장정도 ▶ - : 50% 이하, + : 50% 이상, ++ : 75% 이상, +++ : 100
<실시예 2> 알코올(alcohol)내성보유 상위 8균주의 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성도 측정
ADH(alcohol dehydrogenase)활성도는 알코올(alcohol)이 분해되며 형성되는 NADH(Nicotinamide adenine dinucleotide, 환원형)를 UV-Vis spectrophotometer를 이용하여 흡광도 340nm에서 측정함으로써 나타내었다.
15ml Cornical tube에 99% 알코올(alcohol) 100μl, NAD(Nicotinamide adenine dinucleotide) 수용액 500μl, 1.0×108cfu/ml 농도의 후보균주를 100μl를 첨가 후 0.01M glycine-NaOH 완충용액(pH 8.8)를 1.1ml 첨가하여 총 부피가 1.8ml이 되게 한 후 25℃ 항온수조에서 10분간 반응시켰다. 반응 종료 후 ADH(alcohol dehydrogenase) 250μl를 가하여 340nm에서 흡광도의 변화를 측정하였으며 대조구는 시료대신 증류수를 넣은 것으로 하였다. Positive control은 조아제약의 hepos 시럽을 약국에서 구입하여 처방전에 따라 1/2로 희석하여 사용하였다. ADH(alcohol dehydrogenase)의 활성은 반응 종료시의 최대 흡광도를 대조구의 최대 흡광도에 대한 비율로 나타내었으며 다음과 같은 식으로 계산하였다.
ADH activity = (B/A)×100
A: 대조구의 최대 흡광도
B: 실험구의 최대 흡광도
ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성도 측정
ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성도는 NADH생성에 따른 흡광도의 변화를 340nm에서 측정하였다. 15ml Cornical tube에 증류수 2.1 ml, 1 M tris HCl 100μl, 3 M KCl 100μl, 1.0×108cfu/ml 농도의 후보균주 100μl, NAD 100μl, 2-mercaptoethanol 100μl, acetaldehyde 100μl를 혼합한 다음 25℃에서 10분간 반응 시키고 ALDH 100μl를 가하여 340 nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 대조구는 후보균주 대신 증류수를 넣은 것으로 하였다. Positive control은 ADH 활성 영향 측정에서 사용한 것과 동일한 조아제약의 hepos시럽 1/2 희석액 으로 하였으며, ALDH의 활성은 반응 종료시의 최대 흡광도를 대조구의 최대 흡광도에 대한 비율로 나타내었으며 다음과 같은 식으로 계산하였다.
ALDH activity = (B/A)×100
A: 대조구의 최대 흡광도
B: 실험구의 최대 흡광도
결과를 도 3에 도시하였다.
실혐결과 ADH(alcohol dehydrogenase)활성도 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성도 측정이 완료된 알코올(alcohol)내성보유 상위 8균주 중 알콜내성이 높으며 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성이 높은 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주를 최종 선발균주로 결정하고 본 발명을 완성하였다.
선발된 균주 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499)의 효소 특성(API 50 CHL KIT)을 하기 표 2에 나타내었다.
선발된 균주 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499)의 효소 특성(API ZYM KIT)을 하기 표 3에 나타내었다.
<실시예 3> 혼합균주 시너지효과 확인
상기 실시예 1, 2를 통하여 선발된 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주와 함께 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성이 없는 균주를 혼합하여 적용 할 때 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주의 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성증가를 알아보기 위하여 아래와 같은 혼합균주 후보조성으로 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성 측정실험을 실시하였다.
이때 혼합균주에 사용된 미생물은 모두 동결건조된 미생물로 유효숫자 및 미생물 농도를 1.0×109 cfu/g으로 조정하여 사용되었으며 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주를 제외한 개별 균주는 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성 증가능이 거의 없는 균주만 사용하였다.
ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성이 없는 혼합균주 조성표를 하기 표 4에 나타내었다.
혼합균주후보 1~4에 대한 ADH(alcohol dehydrogenase) 활성도는 알코올(alcohol)이 분해되며 형성되는 NADH를 UV-Vis spectrophotometer를 이용하여 흡광도 340nm에서 측정함으로써 나타내었으며 균주는 증류수에 1/10 희석하여 1.0×108cfu/ml이 되도록 하여 사용하였다.
15ml Cornical tube에 99% 알코올(alcohol) 100μl, NAD 수용액 500μl, 1.0×108cfu/ml 농도의 혼합균주 후보조성 100μl을 첨가 후 0.01M glycine-NaOH 완충용액(pH 8.8)를 1.1ml 첨가하여 총 부피가 1.8ml이 되게 한 후 25℃ 항온수조에서 10분간 반응시켰다. 반응 종료 후 ADH(alcohol dehydrogenase) 250μl를 가하여 340nm에서 흡광도의 변화를 측정하였으며 대조구는 시료대신 증류수를 넣은 것으로 하였다. Positive control은 1.0×109 cfu/g 농도의 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 50%에 포도당을 50% 섞은 후 1/10 희석하여 사용하였다. ADH(alcohol dehydrogenase)의 활성은 반응 종료시의 최대 흡광도를 대조구의 최대 흡광도에 대한 비율로 나타내었으며 다음과 같은 식으로 계산하였다.
ADH activity = (B/A)×100
A: 대조구의 최대 흡광도
B: 실험구의 최대 흡광도
ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성도 측정
ALDH(aldehyde dehydrogenase)의 활성도는 NADH생성에 따른 흡광도의 변화를 340nm에서 측정함으로써 나타내었으며 균주는 증류수에 1/10 희석하여 1.0×108cfu/ml이 되도록 하여 사용하였다.
15ml Cornical tube에 증류수 2.1 ml, 1 M tris HCl 100μl, 3 M KCl 100μl, 1.0×108cfu/ml 농도의 혼합균주 후보조성 100μl, NAD 100μl, 2-메캅토에탄올(2-mercaptoethanol) 100μl, 아세트알데히드(acetaldehyde) 100μl를 혼합한 다음 25℃에서 10분간 반응 시키고 ALDH 100μl를 가하여 340 nm에서 흡광도의 변화를 측정하였다. 이때 대조구는 후보균주 대신 증류수를 넣은 것으로 하였다. Positive control은 1.0×109 cfu/g 농도의 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 50%에 포도당을 50% 섞은 후 1/10 희석하여 사용하였다. ALDH의 활성은 반응 종료시의 최대 흡광도를 대조구의 최대 흡광도에 대한 비율로 나타내었으며 다음과 같은 식으로 계산하였다.
ALDH activity = (B/A)×100
A: 대조구의 최대 흡광도
B: 실험구의 최대 흡광도
혼합균주의 ADH 및 ALDH 활성도 측정결과를 도 4에 나타내었다.
실혐결과 ADH(alcohol dehydrogenase)활성도 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성이 거의 없는 균주 7종과 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주를 혼합하는 경우, 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주를 단독으로 사용하는 것 보다 약 30% 더 높은 ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 활성 증가가 나타나는 것으로 보여지며 사용되는 균주의 strain에 대한 영향은 거의 없는 것을 확인하였다. 혼합균주의 조성은 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주 50w/w%에 strain과 관계없이 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스의 7종 유산균 50w/w%를 포함하는 복합유산균 조성물이 숙취해소 및 장트러블 해소에 효과가 있는 것으로 나타났다.
상기 7종의 유산균의 경우 락토바실러스 플렌타럼 10w/w%, 락토바실러스 카세이 10w/w%, 락토바실러스 람노서스 8w/w%, 락토바실러스 에시도필러스 6w/w%, 락토코쿠스 락티스 6w/w%, 비피도박테리움 브레브 5w/w%, 비피도박테리움 락티스 5w/w%를 혼합하는 경우 숙취해소 및 장트러블 해소에 효과가 있는 것으로 나타났다.
<실시예 4> 선발 곡물유래유산균의 Seed culture
위에서 선발한 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주의 배양배지는 통상 MRS broth 배지를 사용하며 가열멸균은 통상의 미생물배지 살균조건인 121℃에서 15분이상 하고 유산균 접종량은 1×105~1×106cfu/ml 농도로 하여, 160rpm, pH 7.0, 40~45℃ 조건에서 12~18hr 배양하며 배양후의 곡물유래유산균의 생균수는 1×109~1×1010cfu/ml 범위가 되도록 배양한다.
<실시예 5> 배양액 제작
100L 배양탱크에 물 70L를 넣고 protease peptone No.3 5w/v%, yeast extract 2.5w/v%, 글루코오스 10w/v%, 아세트산나트륨 4w/v% 및 암모니아 시트레이트 2w/v%를 첨가하여 121℃에서 15분간 살균한 다음 40~45℃로 냉각한다.
<실시예 6> 접종 및 배양
실시예 5에서 준비된 배양배지에 Seed culture 한 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499)을 1×105~1×106cfu/ml 농도가 되도록 접종하고 160rpm, pH 7.0, 40~45℃ 조건에서 12~18hr 배양하며 배양후의 곡물유래유산균의 생균수는 1×109~9×109cfu/ml 범위가 되도록 배양한다.
<실시예 7> 곡물유래유산균의 원심분리, 동결건조 및 분말화
1×109~9×109cfu/ml로 배양이 완료된 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주는 Disc type 원심분리기를 이용하여 8000rpm에서 약 1hr 원심분리하고 원심분리된 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 균주 농축물과 옥수수 전분을 50:50(w/w%) 비율로 섞은 후 통상의 방법으로 3일간 동결건조하여 제조하고 포도당, 과당의 부원료를 사용하여 최종적으로 1.0~1.2×1010cfu/g이 되도록 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 분말을 제조한다.
<실시예 8> 균주 혼합 및 조성물 ‘술애타유’의 제조 및 알코올 분해 활성
생균수가 1.0~1.2×1010cfu/g 농도가 되도록 제조가 완료된 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 분말과 다른 1.0~1.2×1010cfu/g 농도의 유산균(배양치 않고 구매하여 사용)을 아래 표의 비율대로 혼합하여 균주를 혼합한다. 이때 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(특허기탁/KCCM-10499) 외 혼합되는 균주는 별도의 strain을 구분하지 않고 사용한다.
혼합균주 분말의 배합비를 표 5에 나타내었다.
혼합균주는 다시 중량으로써 혼합균주 50w/w%에 대하여 포도당 20w/w%, 프락토올리고당 14w/w%, 난소화성말토덱스트린 14w/w%, 팔라티노스 2w/w%를 혼합하여 최종 생균수가 5.0×109cfu/g 의 농도가 되도록 조성물을 만들며 해당 조성물을 ‘술애타유(술에 타먹는 유산균)’라고 명명한다.
또한 상기 조성물 ‘술애타유’를 실제 판매하는 소주에 적용했을 때의 알코올 분해활성을 알아보기 위하여 아래와 같이 실험하였다.
시중에서 판매되는 소주(알코올도수 17.5%) 1병(360ml)를 구입 후 37℃에서 개봉하지 않고 약 1hr 방치시켜 소주의 온도를 사람의 체온과 유사한 상태로 만든 후 조성물 ‘술애타유’ 1.5g을 첨가하고 진탕배양기에서 37℃, 30rpm의 조건으로 2시간 진탕하였다.
시간 경과에 따른 알코올 농도의 변화를 알아보기 ‘술애타유’ 1.5g이 첨가된 37℃, 30rpm 조건의 소주는 매 30분 간격으로 시료 1ml을 채취하여 굴절 주도계로 알코올 농도를 측정하였으며 이때 대조구는 ‘술애타유’와 조성이 동일하되 혼합균주 대신 덱스트린을 첨가한 조성물 ‘술애타유-균주제외’를 1.5g 첨가하여 동일한 조건에서 알코올 농도의 변화를 측정하였다.
결과는 도 5에 도시하였다.
상기 도 5에 의하면 본 발명의 제품을 술에 첨가한 경우 알코올 농도가 현저히 감소한 것을 알 수 있다.
<실시예 9> 연령대별 조성물을 실제 소주에 적용한 임상 모니터링 결과
숙취해소에 대한 효과를 시험하기 위해 상품명 ‘술애타유’를 주점에서 소주를 마시는 패널들에게 공급해주었다. 패널들은 음주 후 다음 날 숙취해소와 더불어 부가적으로 장트러블 해소에 대한 설문결과에 응답, 그 결과를 통계처리 하였으며 남녀 구분 없이 연령으로만 구분하여 <표 6>, <표 7>, <표 8> 및 <표 9>에 나타내었다.
<표 6>에 숙취해소 효과 및 장트러블 해소에 대한 50대 연령의 응답결과를 나타내었다.
하기 <표 6>에서 보는 바와 같이 50대 연령(50대 패널 : 190명)을 대상으로 한 임상 모니터링 결과에서 음주 후 숙취해소에 대한 결과는 본 발명의 제품이 타 회사의 제품과 비교하여 매우 높은 숙취해소 효과가 있었다. 또한 음주 후 다음 날 설사, 복통, 장의 불편함 등 장트러블에 대한 해소 효과도 매우 높은 것으로 나타났다. 반면에 타 회사의 숙취해소제는 본 발명의 숙취해소제보다 낮은 숙취해소 효과를 나타내었다. 또한 음주 후 장트러블 해소에 대해서도 낮은 점수를 나타내어 효과는 거의 기대할 수 없는 것으로 판단되는 결과를 나타내었다.
*5점: 매우높다, 4점: 높다, 3점: 보통이다, 2점: 낮다, 1점: 아주낮다
**통계처리 결과를 나타낸 값으로서, 세로의 서로 다른 글자(영문 소문자 a, b 및 c)는 유의한 결과를 나타낸 값이다(p<0.05).
<표 7>에 숙취해소 효과 및 장트러블 해소에 대한 40대 연령의 응답결과를 나타내었다.
하기 <표 7>은 40대 연령(40대 패널 : 193명)을 대상으로 한 결과이며, 50대 연령과 비슷한 결과를 나타내었다. 즉, 본 발명의 제품이 타 제조사보다 높은 점수를 나타내어 음주 후 다음 날 숙취해소 및 장트러블 해소에 효과가 더 좋은 것으로 나타났다.
*5점: 매우높다, 4점: 높다, 3점: 보통이다, 2점: 낮다, 1점: 아주낮다
**통계처리 결과를 나타낸 값으로서, 세로의 서로 다른 글자(영문 소문자, a, b 및 c)는 유의한 결과를 나타낸 값이다(p<0.05).
<표 8>에 숙취해소 효과 및 장트러블 해소에 대한 30대 연령의 응답결과를 나타내었다.
하기 <표 8>에서도 30대 연령의 패널(30대 패널 : 197명)을 이용한 결과로서, <표 6>와 <표 7>에서와 마찬가지로 본 발명 제품의 숙취해소제가 더 높은 점수를 나타내어 숙취해소 및 장트러블 해소에 대한 효과가 시장에서 판매중인 타 회사 제품보다 더 좋은 것으로 나타났다.
*5점: 매우높다, 4점: 높다, 3점: 보통이다, 2점: 낮다, 1점: 아주낮다
**통계처리 결과를 나타낸 값으로서, 세로의 서로 다른 글자(영문 소문자, a, b 및 c)는 유의한 결과를 나타낸 값이다(p<0.05).
<표 9>에 숙취해소 효과 및 장트러블 해소에 대한 20대 연령의 응답결과를 나타내었다.
하기 <표 9>는 20대 연령(20대 패널 : 195명)의 음주 후 다음 날 숙취해소 및 장트러블에 대한 효과를 나타낸 것으로서 타 연령대와 비슷한 결과를 나타내었으며, 본 발명 제품의 숙취해소 효과가 타회사 제품보다 좋은 것으로 나타났다. 또한 장트러블 해소에 있어서도 타 회사 제품과 비교하여 좋은 것으로 나타났다.
*5점: 매우높다, 4점: 높다, 3점: 보통이다, 2점: 낮다, 1점: 아주낮다
**통계처리 결과를 나타낸 값으로서, 세로의 서로 다른 글자(영문 소문자, a, b 및 c)는 유의한 결과를 나타낸 값이다(p<0.05).
Claims (10)
- ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 분비 및/또는 활성 증가능을 가지는 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주를 포함하는 숙취해소용 조성물.
- 청구항 1에 있어서, ADH(alcohol dehydrogenase) 및 ALDH(aldehyde dehydrogenase) 효소 활성 증가능은 다소 낮지만 곡물유래유산균 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스[Lactobacillus fermentum JS(특허기탁/KCCM-10499)] 균주와 혼합 시, 시너지 효과를 나타내는 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어지는 군에서 선택되는 1종이상의 유산균을 더 포함하는 숙취해소용 조성물.
- 청구항 1 또는 2에 있어서, 균이 생균 또는 사균인 숙취해소용 조성물.
- 청구항 1 또는 2에 있어서, 장트러블 해소 효과가 있는 숙취해소용 조성물.
- 청구항 2에 있어서, 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스를 포함하는 숙취해소용 조성물.
- 청구항 2에 있어서, 숙취해소용 조성물 총 중량에 대하여 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스(KCCM-10499) 40-60중량% 및 락토바실러스 플렌타럼, 락토바실러스 카세이, 락토바실러스 람노서스, 락토바실러스 에시도필러스, 락토코쿠스 락티스, 비피도박테리움 브레브 및 비피도박테리움 락티스로 이루어진 군에서 선택되는 1종이상의 유산균 40-60중량%를 포함하는 숙취해소용 조성물.
- 청구항 6에 있어서, 숙취해소용 조성물 총 중량에 대하여 락토바실러스 퍼멘텀 제이에스 40-60중량%, 락토바실러스 플렌타럼(Lactobacillus plantarum) 8-12중량%, 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei) 8-12중량%, 락토바실러스 람노서스(Lactobacillus rhamnosus) 6-10중량%, 락토바실러스 에시도필러스(Lactobacillus acidophilus) 4-8중량%, 락토바실러스 락티스(Lactococcus lactis) 4-8중량%, 비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 3-7중량% 및 비피도박테리움 락티스(Bifidobacterium lactis) 3-7중량%를 포함하는 숙취해소용 조성물.
- 청구항 1 또는 청구항 2의 조성물을 포함하는 숙취해소용 제품.
- 청구항 8에 있어서, 상기 숙취해소용 제품이 숙취해소용 조성물 40~60중량% 및 전분, 포도당, 프락토올리고당, 난소화말토덱스트린 및 팔라티노스에서 선택되는 1종 이상을 40~60중량% 포함하는 것을 특징으로 하는 숙취해소용 제품.
- 청구항 8에 있어서, 상기 숙취해소용 제품이 술을 마시기 전, 술에 타서 알코올을 분해시키는 것을 특징으로 하는 숙취해소용 제품.
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