KR100868777B1 - Ｒｓ３ 유형의 저항 전분에 대해 분해능이 있는비피도박테리움 아도레스센티스를 유효성분으로 함유하는것을 특징으로 하는 식품 조성물 - Google Patents
Ｒｓ３ 유형의 저항 전분에 대해 분해능이 있는비피도박테리움 아도레스센티스를 유효성분으로 함유하는것을 특징으로 하는 식품 조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR100868777B1 KR100868777B1 KR1020070048250A KR20070048250A KR100868777B1 KR 100868777 B1 KR100868777 B1 KR 100868777B1 KR 1020070048250 A KR1020070048250 A KR 1020070048250A KR 20070048250 A KR20070048250 A KR 20070048250A KR 100868777 B1 KR100868777 B1 KR 100868777B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- bifidobacterium
- resistance
- starch
- jcs2
- adolescentis
- Prior art date
Links
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 title claims abstract description 28
- 235000013305 food Nutrition 0.000 title claims abstract description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 17
- 229920000294 Resistant starch Polymers 0.000 title claims description 13
- 235000021254 resistant starch Nutrition 0.000 title claims description 13
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims abstract description 5
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 4
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 4
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 3
- 235000008452 baby food Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 abstract description 43
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 abstract description 29
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 abstract description 29
- 239000008107 starch Substances 0.000 abstract description 29
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 28
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 24
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 13
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 12
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 12
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 abstract description 9
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 abstract description 9
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 abstract description 3
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 abstract description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 2
- 235000014048 cultured milk product Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 11
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 11
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 10
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010052764 Fructose-6-phosphate phosphoketolase Proteins 0.000 description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 6
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 6
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 4
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 4
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 4
- 235000021391 short chain fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 4
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 3
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 3
- 229920000856 Amylose Polymers 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- 241000286268 Bifidobacterium bifidum ATCC 29521 = JCM 1255 = DSM 20456 Species 0.000 description 2
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 description 2
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 2
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- 229920000881 Modified starch Polymers 0.000 description 1
- 239000004368 Modified starch Substances 0.000 description 1
- 108010019160 Pancreatin Proteins 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 244000063464 Vitex agnus-castus Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 235000009347 chasteberry Nutrition 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 102000038379 digestive enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108091007734 digestive enzymes Proteins 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 230000002550 fecal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 235000019426 modified starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 238000000879 optical micrograph Methods 0.000 description 1
- 238000001139 pH measurement Methods 0.000 description 1
- 229940055695 pancreatin Drugs 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001393 triammonium citrate Substances 0.000 description 1
- 235000011046 triammonium citrate Nutrition 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/38—Other non-alcoholic beverages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L29/00—Foods or foodstuffs containing additives; Preparation or treatment thereof
- A23L29/065—Microorganisms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/51—Bifidobacterium
- A23V2400/513—Adolescentes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Abstract
본 발명은 RS3 유형의 저항 전분에 대해 분해능이 있는 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis)를 유효성분으로 함유하는 식품 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 균주는 저항 전분 분해능이 우수하고, 내산성 및 내답즙성이 뛰어나므로 발효유제품, 유산균제품, 생균제, 유산균 및 정장제 등을 포함하는 여러 형태의 식품 조성물로 개발될 수 있다.
비피도박테리움 아도레스센티스, 저항 전분, 내산성, 내답즙성, 활생균, 프레바이오틱스
Description
도 1은 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 균주의 광학현미경 사진이고,
도 2는 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 균주의 탄수화물 발효 성상(API 50 CHL Test Kit) 결과이고,
도 3은 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 균주의 생균수와 pH 측정 결과이고,
도 4는 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 균주 및 대조 균주들의 배양시 pH 변화 측정 결과이고,
도 5는 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 균주 및 대조 균주들의 16S rRNA PCR 결과 사진이고,
도 6은 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 균주 및 대조 균주들의 내산성 측정 결과이고,
도 7은 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 균주 및 대조 균주들의 내담즙성 측정 결과이다.
본 발명은 RS3 유형의 저항 전분 분해능이 있는 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식품 조성물에 관한 것이다.
활생균(프로바이오틱스, probiotics)은 사람에게 투여하였을 때 장내 미생물 균형을 향상시킴으로써 건강증진 효과 및 숙주에게 유익한 효과를 나타내는 활성미생물 및 발효산물 등의 식이 보충제를 지칭한다(Fuller, R. Probiotics in man and animals. J. Appl . Bacteriol. 66:365-378. 1989).
활생균은 장내 균총을 안정화시키고, 유해 세균의 정착억제에 따른 부패 생성물 감소, 콜레스테롤 저하, 항암, 변비 예방 및 억제에 그 기능성이 있다(Fuller, R. Probiotics in human medicine. Gut 32:439-442. 1991). 대표적인 활생균으로는 비피도박테리움(Bifidobacterium), 락토바실러스(Lactobacillus) (WHO & FAO. 2001)를 들 수 있다.
반면, 프레바이오틱스(prebiotics)는 대장 내에 이미 상주하고 있는 특정 균중 활생균의 활성과 생육을 선택적으로 촉진하여 인체에 유익한 영향을 줄 수 있는 식품 성분을 가리킨다(Manning, T. Prebiotics. Best Pract Res Clin Gastroenterol. 18:287-298, 2004). 대표적인 예로 올리고당과 식이섬유를 들 수 있다.
한편, 저항 전분(Resistant starch)은 올리고당 및 식이섬유와 비슷한 생리활성을 가지고 있는 전분으로서, 건강한 사람의 소장에서는 소화·흡수되지 않으며, 혈중 콜레스테롤이나 지방질의 축적을 저하시켜 성인병을 예방하는 효과를 발휘하고, 소장에서 흡수되지 않고 대장으로 넘어간 저항 전분은 미생물에 의해 탄소원으로 이용되어 단쇄 지방산(Short Chain Fatty Acid, SCFA)을 생산하는 데 일조를 하게 된다. 특히 단쇄 지방산 중 대장암의 위험도를 낮추는 부티르산의 생성이 현저히 증가한다고 알려져 있는데(Faisant, N. Structural features of resistant starch at the end of the human small intestine. Eur . J. Clin . Nutr. 47:285-296. 1992), 암세포 성장을 억제하는 부티르산 생성이 식이섬유 섭취시보다 대장암의 억제 능력에 있어 더 큰 것으로 보고되었다(Edwards, C. A. In vitro method for quantification of the fermentation of starch by human fecal bacteria. J. Sci . Food Agric . 71:209-217. 1996).
이상과 같은 효능을 발휘하는 저항 전분은 크게 4개 유형으로 나뉘지는데, 물리적으로 효소의 접근이 어려운 RS1, 생전분으로 B형의 결정형을 갖는 입자형의 RS2, 노화된 아밀로오스의 결정을 포함하는 노화 전분인 RS3와 화학적 변성 전분으로 소화되지 않는 전분인 RS4형으로 나뉜다(신말식, 식품산업과 영양 9(2). 1-9. 2004).
이에 상기와 같은 특성을 지닌 저항 전분을 분해할 수 있는 유산균을 새롭게 개발한다면, 유산균이 상대적으로 적게 존재하는 소장에서는 저항 전분이 많이 분해되지 않아 식이섬유로서의 역할을 기대할 수 있고, 유산균이 많은 대장으로 넘어와서는 저항 전분이 유산균의 생육을 위한 먹이로 활용이 되어 유산균으로부터 여러 단쇄 지방산의 배출을 유도함으로써 대장암을 예방할 수 있는 역할을 기대할 수 있다.
그런데, 유산균의 경우는 경구 섭취시 pH가 낮은 위장에서 생육이 저해되고, 또 위장을 통과한 후에는 소장에서 분비되는 소화효소 및 담즙산에 의해서 그 생육이 억제되는 문제점이 있어 경구용 식품 조성물로 개발하기에는 근본적인 한계가 있어 왔다.
이에 본 발명은 상기의 문제점을 해결하고자 안출된 것으로, 저항 전분의 분해능이 우수하고, 경구 섭취하였을 때 위와 소장을 거치면서 생존을 유지할 수 있는 새로운 유산균을 분리하여 제공하는 데 그 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 RS3 유형의 저항 전분 분해능이 있는 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis)를 유효성분으로 함유 하는 것을 특징으로 하는 식품 조성물을 제공한다.
이하, 본 발명의 구성을 더욱 상세히 설명하고자 한다.
본 발명은 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis)에 RS3 유형의 저항 전분 분해능이 있는 것을 최초로 규명하여 이를 유효성분으로 함유하는 식품 조성물 형태로 제공하는 것이다.
유산균을 함유하는 식품 조성물은 다양한 형태로 제조될 수 있으나, 바람직하게는 유산균 발효유, 두유, 분유, 음료, 이유식, 생식 또는 건강보조식품 중 어느 하나인 것이 좋다.
한편, 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis)는 공시 균주를 사용하여도 무방하나, 바람직하게는 본 발명자들이 분리한 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP)을 사용하는 것이 좋다. 본 발명자들이 분리한 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP)가 공시 균주인 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) ATCC 15703 보다 저항 전분 이용능(저항 전분을 빠르게 이용하는 특징이 있음)이 우수하기 때문이다.
비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP)는 본 발명자들의 실험 대상자의 분변으로부터 분리한 균으로서, 노화된 아밀로오스의 결정을 포함하는 노화전분인 RS3 유형의 저항 전분을 탄소원으로 함유하는 배지를 통해 분리하였다.
분리한 JCS2 균주는 V-, Y- 곤봉형의 그람 양성 간균이고, 편성 혐기성균임이 확인되었다. 이후, F6PPK 테스트(Scardovi, V. Starch gel electrophoresis of fructose-6-phosphate phosphoketolase in the genus Bifidobacterium . J. Bacteriol. 106:1036-1039. 1971)를 통해, 본 발명에서 분리한 JCS2 균이 비피도박테리움인 것이 확인되었고, 발효실험 결과, JCS2는 전형적인 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis)의 탄수화물 발효성상을 나타냈다.
또한, 16S rRNA 유전자의 염기서열을 분석하였는데, BLAST 검색 결과(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) JCS2의 16S rRNA의 염기서열은 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) ATCC 15703와 99% 동일하였으며, 위의 균주를 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2로 명명하여 한국생명공학연구원 생물자원센터에 기탁하였다(기탁일자 2006년 3월 17일, 기탁번호 KCTC 10924BP).
한편, 다른 비피더스(Bifidus) 균주(Bifidobacterium infantis ATCC 15697, Bifidobacterium longum ATCC 15707, Bifidobacterium bifidum ATCC 29521)들이 RS-3 유형의 저항 전분을 이용하지 못하는 반면, 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) 계통은 RS3-유형의 저항 전분을 생육을 위한 탄소원로 이용할 수 있었다.
그런데, 그 중 본 발명자들이 분리한 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2가 공시 균주인 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) ATCC 15703보다 저항 전분 이용능이 더 우수 하였고, 성장 속도도 저항 전분을 배지로 사용하였을 경우 글루코오스에서 배양했을 때와 비슷한 정도로 빠른 결과를 나타냈다.
한편, 본 발명에서 분리한 균주 JCS2의 내산성을 알아보기 위하여 pH 6.8에서 생육된 균수에 대한 pH 5.0에서 생육한 균수의 백분율을 생존율로 하여 산에 대한 내성을 측정하였는데, 그 결과 JCS2의 생존율은 94%로 높아 내산성이 우수함을 확인할 수 있었다.
또한, 본 발명에서 분리한 균주 JCS2의 내담즙성을 확인하기 위하여, 배지에 균액을 2% 수준으로 접종하고 생존 균수를 측정하였는데, 그 결과 JCS2가 61%의 생존율을 나타냈으며, 다른 공시 유산균에 비해 내담즙성이 우수함을 확인할 수 있었다.
이하, 본 발명의 구성을 하기 실시 예를 들어 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니다.
[실시예 1]
비피도박테리움의
분리 및 동정
실험 대상자의 분변을 받아 멸균된 혐기성 완충용액에 십 배수로 희석한 후, 유산균 선택배지인 MRS(DeMan-Rogosa-Sharpe)배지를 변형한 mMRS 배지(표 1)를 사용하여, 저항 전분을 탄소원으로 이용하는 균주를 분리하였다.
| 구성 성분 (1L) | |
| 저항 전분 | 10g |
| 펩톤 | 10g |
| 아가 | 10g |
| 비프 익스트랙트(Beef extract) | 8.0g |
| 소디움 아세테이트(Sodium acetate) 3H2O | 5.0g |
| 이스트 익스트랙트(Yeast extract) | 4.0g |
| K2HPO4 | 2.0g |
| 트리암모니움 시트레이트(Triammonium citrate) | 2.0g |
| MgSO4 7H2O | 0.2g |
| MnSO4 4H2O | 0.05g |
| 폴리옥시에틸렌 솔비탄 모노올레이트(Polyoxyethylene sorbitan monooleate; tween 80) | 1.0mL |
| L-시스테인(Cysteine) | 0.5g |
-pH는 6.8로 조정
상기 표에서 저항 전분은 Novelose 330®(National Starch & Chemical, NJ, USA) 전분에 판크레아틴(pancreatin)과 아밀로글루코시데이스(amyloglucosidase) 효소를 혼합하여 37°C에서 16시간 동안 반응시킨 후 잔존한 전분(잔존 전분은 RS3 유형의 저항 전분임)을 분리하여 사용하였다(Englyst, H. N. Classification and measurement of nutritionally important starch fractions. Eur . J. Clin . Nutr. 46:S33-S55. 1992).
균주 선발을 위한 혐기성 배양은 Gas-pak을 이용하여 37℃에서 48시간 동안 수행하였다. mMRS 배지에서 생성된 콜로니를 분리하고 다시 산성에서 노란색을 나타내는 BCP 배지를 이용하여 노란색 환을 나타내는 콜로니 JCS2를 분리하였다. 분리한 콜로니 JCS2는 V-, Y- 곤봉형의 그람 양성 간균이고 편성 혐기성균임을 확인하였다(도 1).
한편, 비피도박테리움은 특징적으로 프럭토오스-6-포스페이트 포스포케톨레이스(fructose-6-phosphate phosphoketolase; F6PPK)의 대사계를 가지고 있으므로, F6PPK 시험(Scardovi, V. J. Bacteriol. 106:1036-1039. 1971)를 통해 상기에서 분리한 JCS2 균이 F6PPK 시험에서 양성 반응을 보이는 균주임을 확인하였다.
이 균주를 API 50 CHL 당 발효 키트 (bioMerieux Vitex, Inc, France)을 이용하여 균주의 탄수화물 발효 형태를 결정하였고, 발효실험 결과(도 2) JCS2는 전형적인 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis)의 탄수화물 발효성상을 나타냈다.
종(specie) 수준에서는 Bergey's Manual(Bergey, D. H. Bergey's manual of systematic bacteriology. 1418-1434. 1986)의 지침에 따라 실험하였다. 16S rRNA 유전자의 염기서열을 분석하였는데, BLAST 검색 결과(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast) JCS2의 16S rRNA의 염기서열은 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) ATCC 15703와 99% 동일하였으며, 위의 균주를 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2로 명명한 후, 한국생명공학연구원 생물자원센터에 국제 기탁하였다(기탁일자 2006년 3월 17일, 기탁번호 KCTC 10924BP).
본 발명에 따른 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP)의 특성은 아래와 같다.
[
실험예
1] 본 발명의 균주
비피도박테리움
아도레스센티스
(
Bifidobacterium
adolescentis
)
JCS2
(
KCTC
10924BP)의
mMRS
배지에서 성장 곡선 및
pH
변화
mMRS broth(하기 표 1) 배지를 사용하여 JCS2 균주를 배지의 2% 수준으로 접종하여 pH와 균수(도 3에서 보라색으로 표시된 것은 mMRS 배지에서 측정한 균수임)를 측정하였다. 측정 결과, 탄소원으로 글루코오스가 있는 MRS 배지와 저항 전분만 들어 있는 mMRS 배지에서 둘 다 비슷한 속도의 성장속도가 나타났다(도 3).
또한, 다른 비피더스(Bifidus) 균주(Bifidobacterium infantis ATCC 15697, Bifidobacterium longum ATCC 15707, Bifidobacterium bifidum ATCC 29521)는 저항 전분을 이용하지 못하는 반면, 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) 계통은 저항 전분을 생육을 위한 탄소원로 이용할 수 있었다(도 4), 한편, 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2는 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) ATCC 15703(도 4에서 노란색 표시) 보다 저항 전분 이용능이 더 우수하였으며(저항 전분을 보다 빨리 이용함), JCS2의 경우 성장 속도도 저항 전분에서 배양했을 경우, 글루코오스에서 배양했을 때와 비슷한 정도로 빨랐다.
[
실험예
2]
PCR
에 의한 본 발명의 균주
비피도박테리움
아도레스센티스
(
Bifidobacterium
adolescentis
) JCS2 (
KCTC
10924
BP
)의 16S
rRNA
의 증폭
프라이머(표 2)로는 BiADO-1 BiADO-2 (Matsuki, T. Rapid identification of human intestinal bifidobacteria by 16S rRNA-targeted species and group-specific primers. FEMS Microbiol . Lett. 167:113-121. 1998)를 이용하였다. PCR은 94°C에서 20초간 변성(denaturation)시키고, 55°C에서 20초간 어니일링(annealing)하여 72°C에서 30초간 신장(extension)시키는 과정을 30회 반복하여 실시하였다.
그 결과, 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP)이 유전자 수준에서 비피도박테리움 아도레스센티스(Bidobacterium adolescentis) ATCC 15703와 일치함을 확인할 수 있었다(도 5).
[
실험예
3] 본 발명의 균주
비피도박테리움
아도레스센티스(
Bifidobacterium
adolescentis
)
JCS2
(
KCTC
10924
BP
)의 산성에 대한 저항성 (
Acid
resistance
)
본 발명에서 분리한 균주 JCS2의 내산성을 측정하기 위하여 시스테인이 첨가된 MRS broth 배지를 HCl을 사용하여 pH를 6.8, 5.0으로 조절하여 실험하였다. 배지에 균액을 2% 수준으로 접종하고 균수를 측정하였다. pH 6.8에서 생육된 균수에 대한 pH 5.0에서 생육한 균수의 백분율을 생존율로 하여 산에 대한 내성을 측정하였다. 측정 결과(도 6), JCS2의 생존율은 94%로 높아 내산성이 우수함을 확인할 수 있었다.
[
실험예
4] 본 발명의 균주
비피도박테리움
아도레스센티스
(
Bifidobacterium
adolescentis
)
JCS2
(
KCTC
10924BP)의
담즙산에
대한 저항성 (
Bile
resistance
)
본 발명에서 분리한 균주 JCS2의 내담즙성을 측정하기 위하여 시스테인이 첨가된 MRS broth 배지에 OX-BILE을 0.25% 농도로 첨가하여 사용하였다. 배지에 활성화된 균액을 2% 수준으로 접종하고 균수를 측정하였다. 측정 결과(도 7), JCS2가 61%의 생존율을 나타냈으며, 다른 공시 균주에 비해 내담즙성이 우수함을 확인할 수 있었다.
[
제제예
1]
비피도박테리움
아도레스센티스
(
Bifidobacterium
adolescentis
)
JCS2
(
KCTC
10924
BP
)를 함유하는 정제의 제조
당업계에서 공지된 기술을 사용하여, 본 발명의 유산균 JCS2를 포함하는 식품조성물을 분말제, 과립제, 정제, 캡슐제 또는 드링크제로 제형화할 수 있다.
예를 들어, 정제를 제조하기 위하여 탈지유(skim milk)를 10%(w/v) 함유하는 액체 배지에 1~2%(중량)의 올리고당, 2-4%(중량)의 락토바실러스 아시도필러스(L. acidophilus) 균주 및 상기 실시예에서 확인된 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP) 균주의 혼합물을 첨가한 후 35~40℃ 온도에서 10~20시간 동안 발효를 수행하였다.
그 후, 상기 혼합물을 유동층 분리기 및 정립기를 사용하여 직경이 5mm이하가 되도록 입자를 형성시키고, 건조시킨 후 타정기에 넣고 일시적인 압력을 가하여 입자의 중량이 개당 300mg 정도 되도록 정제를 제조하였다.
또한, 상기 혼합물을 진공상태에서 동결 건조시켜서 고형화된 결정체를 얻은 후, 결정화된 고형분을 적당히 분쇄하여 과립제, 분말제를 형성하거나, 그 분말제를 물에 녹여 드링크제로 제조하였다.
[
제제예
2]
비피도박테리움
아도레스센티스
(
Bifidobacterium
adolescentis
)
JCS2
(
KCTC
10924
BP
)를 이용한 요구르트의 제조
지방질 3.2%의 원유(탈지고형분 함량 : 8.6%)에 탈지 분유를 첨가하여, 탈지고형분 함량이 12%가 되도록 조정한 후, 가온하여 균질 및 살균하여 배지를 제조하였다.
그 후, 동결 건조된 발효 균주 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP)와 락토바실러스 아시도필러스(L. acidophilus) 균주를 접종하여 37℃에서 배양하였다. 배양은 pH 4.5가 될 때까지 수행하였다.
그 후, 감미제로 과실 쨈을 첨가하여 요구르트를 최종 제조하였다.
이상 상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 비피도박테리움 아도레스센티 스(Bifidobacterium adolescentis) 균주는 저항 전분 분해능이 우수하고, 내산성 및 내답즙성이 뛰어나므로 다양한 식품 조성물로 개발될 수 있는 바, 식품산업에서 매우 유용한 발명인 것이다.
Claims (3)
- RS3 유형의 저항 전분에 대해 분해능이 있는 비피도박테리움 아도레스센티스(Bifidobacterium adolescentis) JCS2 (KCTC 10924BP)를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 식품 조성물.
- 삭제
- 제1항에 있어서,상기 식품 조성물은,유산균 발효유, 두유, 분유, 음료, 이유식, 생식 또는 건강보조식품 중 어느 하나인 것을 특징으로 하는 조성물
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR20070025715 | 2007-03-15 | ||
| KR1020070025715 | 2007-03-15 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20080084519A KR20080084519A (ko) | 2008-09-19 |
| KR100868777B1 true KR100868777B1 (ko) | 2008-11-17 |
Family
ID=40024841
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020070048250A KR100868777B1 (ko) | 2007-03-15 | 2007-05-17 | Ｒｓ３ 유형의 저항 전분에 대해 분해능이 있는비피도박테리움 아도레스센티스를 유효성분으로 함유하는것을 특징으로 하는 식품 조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR100868777B1 (ko) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102034353B1 (ko) | 2017-11-10 | 2019-10-18 | 김양희 | 반려동물 사료에 사용할 수 있는 저항전분 강화 쌀의 제조방법 |
| KR102224547B1 (ko) * | 2018-11-16 | 2021-03-08 | 경희대학교 산학협력단 | 저항 전분 분해능을 가진 신규한 균주 및 이의 용도 |
| KR102312806B1 (ko) * | 2020-06-25 | 2021-10-14 | 경희대학교 산학협력단 | 비피도박테리움 속 유래인 저항전분 분해 활성을 나타내는 아밀라아제들 및 이의 용도 |
| KR102312807B1 (ko) * | 2020-06-25 | 2021-10-14 | 경희대학교 산학협력단 | 비피도박테리움 속의 저항전분 분해 활성을 가지는 아밀라아제들 및 이의 용도 |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4187321A (en) | 1977-03-31 | 1980-02-05 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Method for producing foods and drinks containing bifidobacteria |
| KR20020016826A (ko) * | 1999-06-09 | 2002-03-06 | 브이에스엘 파마 리미티드 | 식이요법제, 건강보조식품 또는 약학 제품으로서 사용하기위한 알칼리성 스핑고마이엘리나제 함유 조성물 |
| KR20030033950A (ko) * | 2001-10-20 | 2003-05-01 | 주식회사 알엔에이 | 유산균 세포질 분획물 또는 유산균 파쇄물을 유효성분으로포함하는 동맥경화 억제제 |
| EP0888118B1 (en) * | 1996-03-20 | 2004-11-03 | The University Of New South Wales | Enhancement of microbial colonisation of the gastrointestinal tract |
| KR20040096605A (ko) * | 2002-02-21 | 2004-11-16 | 소시에떼 데 프로듀이 네슬레 소시에떼아노님 | 피부용 광보호성 경구 투여성 조성물 |
| KR20070074592A (ko) * | 2004-10-15 | 2007-07-12 | 악티알 파마수티카 엘디에이. | 고도의 분산성을 갖는 동결건조된 젖산균 및 비피더스균제품 |
-
2007
- 2007-05-17 KR KR1020070048250A patent/KR100868777B1/ko not_active IP Right Cessation
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4187321A (en) | 1977-03-31 | 1980-02-05 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Method for producing foods and drinks containing bifidobacteria |
| EP0888118B1 (en) * | 1996-03-20 | 2004-11-03 | The University Of New South Wales | Enhancement of microbial colonisation of the gastrointestinal tract |
| KR20020016826A (ko) * | 1999-06-09 | 2002-03-06 | 브이에스엘 파마 리미티드 | 식이요법제, 건강보조식품 또는 약학 제품으로서 사용하기위한 알칼리성 스핑고마이엘리나제 함유 조성물 |
| KR20030033950A (ko) * | 2001-10-20 | 2003-05-01 | 주식회사 알엔에이 | 유산균 세포질 분획물 또는 유산균 파쇄물을 유효성분으로포함하는 동맥경화 억제제 |
| KR20040096605A (ko) * | 2002-02-21 | 2004-11-16 | 소시에떼 데 프로듀이 네슬레 소시에떼아노님 | 피부용 광보호성 경구 투여성 조성물 |
| KR20070074592A (ko) * | 2004-10-15 | 2007-07-12 | 악티알 파마수티카 엘디에이. | 고도의 분산성을 갖는 동결건조된 젖산균 및 비피더스균제품 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20080084519A (ko) | 2008-09-19 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0901371B1 (en) | Alteration of microbial populations in the gastrointestinal tract | |
| US8168171B2 (en) | Folic acid producing bifidobacterium bacterial strains, formulations and use thereof | |
| US8709398B2 (en) | Probiotic Bifidobacterium strains | |
| US10597740B2 (en) | Bifidobacterium longum CBT BG7 strain for promotion of growth and nutraceutical composition for promotion of growth containing the same | |
| CA2774073C (en) | Anti-obesity agent, anti-obesity food or beverage, glucose tolerance-ameliorating agent, and food or beverage for amelioration of glucose tolerance | |
| US11026983B2 (en) | Bifidobacterium breve CBT BR3 strain for promotion of growth and nutraceutical composition for promotion of growth containing the same | |
| WO2017057718A1 (ja) | 難消化性成分を含む飲食品および大腸内水素ガス産生剤 | |
| EP1972208A1 (en) | Composition for improving intestinal microflora | |
| AU2004241895B2 (en) | A probiotic composition comprising at least two lactic acid bacterial strains which are able to colonise the gastrointestinal tracts in combination with having intestinal survival property, intestinal binding property, an infection protection property and a fiber fermenting property | |
| EP3808357A1 (en) | Composition and uses thereof | |
| KR101589464B1 (ko) | 신규한 비피더스 균주 및 이를 포함하는 성장촉진용 기능성 식품 조성물 | |
| KR102224072B1 (ko) | 면역 조절능력과 혈중콜레스테롤 감소 능력이 모두 뛰어난 비피도박테리엄 롱검 아종 균주 및 이의 용도 | |
| KR100868777B1 (ko) | Ｒｓ３ 유형의 저항 전분에 대해 분해능이 있는비피도박테리움 아도레스센티스를 유효성분으로 함유하는것을 특징으로 하는 식품 조성물 | |
| Kumar et al. | Bifidobacteria for life betterment | |
| Bielecka | Probiotics in food | |
| Chaia et al. | Dairy propionibacteria from milk or cheese diets remain viable and enhance propionic acid production in the mouse cecum | |
| WO2004009800A1 (ja) | ラクトバシラス・カゼイ 亜種 カゼイ増殖促進用組成物 | |
| JP2023523221A (ja) | 腸内ビフィズス菌の増殖の刺激 | |
| Grmanová et al. | Survival of bifidobacteria in adult intestinal tract | |
| KR101453982B1 (ko) | 과민성 대장 증후군 예방 또는 치료용 조성물 | |
| WO2023150628A2 (en) | Probiotic strain selected by targeted in vivo enrichment to aid with healthy lactose digestion | |
| Libudzisz | Probiotics in human nutrition-plenary lecture | |
| Beccati | Investigations of prebiotics and of inter-and intra-molecular glycan-protein interactions | |
| Busi | Studies on the selection of a strain of lactic acid bacteria to grow at optimal conditions for the production of probiotics |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20121106 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20131028 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20141104 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20151104 Year of fee payment: 8 |
|
| LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |