WO2020139312A1 - Клебсиелезно-протейная вакцина «клепропримавак» против клебсиеллы и протея - Google Patents

Клебсиелезно-протейная вакцина «клепропримавак» против клебсиеллы и протея Download PDF

Info

Publication number
WO2020139312A1
WO2020139312A1 PCT/UA2019/000166 UA2019000166W WO2020139312A1 WO 2020139312 A1 WO2020139312 A1 WO 2020139312A1 UA 2019000166 W UA2019000166 W UA 2019000166W WO 2020139312 A1 WO2020139312 A1 WO 2020139312A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
proteus
klebsiella
registration number
strains
deposited under
Prior art date
Application number
PCT/UA2019/000166
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Игорь Семёнович МАРКОВ
Артём Игоревич МАРКОВ
Original Assignee
Игорь Семёнович МАРКОВ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Игорь Семёнович МАРКОВ filed Critical Игорь Семёнович МАРКОВ
Publication of WO2020139312A1 publication Critical patent/WO2020139312A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/116—Polyvalent bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents

Definitions

  • the group of inventions relates to medical microbiology, the pharmaceutical industry, in particular to vaccines, namely, Klebsiella and Proteus vaccines, methods for their manufacture and methods of treatment and prevention, and can be used to treat local and systemic, acute and chronic bacterial diseases etiology in children and adults: nose, sinuses, pharynx, mouth, tongue, gums, teeth, conjunctiva and eyes, trachea, bronchi, lungs, urogenital system, gall bladder, abdominal cavity, skin, subcutaneous tissue, etc.
  • vaccines namely, Klebsiella and Proteus vaccines
  • methods for their manufacture and methods of treatment and prevention and can be used to treat local and systemic, acute and chronic bacterial diseases etiology in children and adults: nose, sinuses, pharynx, mouth, tongue, gums, teeth, conjunctiva and eyes, trachea, bronchi, lungs, urogenital system, gall bladder, abdominal cavity, skin, subcutaneous tissue
  • Klebsiella (lat. Klebsiella) are straight gram-negative rods (0.3-1, 0 * 0.6-6.0 microns), which are located singly, in pairs or short chains. Form capsules. Motionless. Optional anaerobes. Representative of normal, conditionally pathogenic microflora of the human intestine. Virulence factors: capsule, endotoxin, mannose-resistant drank (drank, or fimbriae, or villi - filiform protein structures located on the surface of the cells of many bacteria). They grow on simple nutrient media. They have pronounced biochemical activity.
  • Proteus is a genus of gram-negative, non-spore forming, optionally anaerobic bacteria. Representative of normal, conditionally pathogenic microflora of the human intestine. Proteins have the appearance of small, 0.3 by 3 microns, filiform sticks. They are very active in mobility. Proteins have toxic (produce endotoxin) and hemolytic properties.
  • This drug is veterinary and is prescribed for adults and young animals (from 1 month) in order to prevent acute intestinal diseases. This tool does not have pronounced medicinal properties.
  • VP-4 multicomponent vaccine
  • VP-4 for immunotherapy of diseases, which includes such strains: Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, Escherichia coli, S. aureus. [RU N ° 94019810 Al, A61K 39/1 16, 1996].
  • This vaccine has an insufficient number of Klebsiella and Proteus strains, as a result of which it is not effective enough against these bacteria and the diseases they cause.
  • Klebsiella is sown in mattresses with Worfel-Ferposson medium. After 18-24 hours, the grown culture is washed off, standardized, and hydroxylamine hydrochloride is added. Incubated for 48 hours at 37 ° C. Centrifuged for 2 days and then dried in vials. Similarly, they are treated with strains of Proteus and Escherichia coli, but they are grown in mattresses on a medium from casein acid hydrolyzate. The staphylococcal component of the vaccine is prepared immediately before its composition and drying. Strains of S.
  • aureus are grown in mattresses on a medium from casein hydrolyzate, incubated for 16-24 hours at 37 ° C.
  • the culture is washed off with distilled water.
  • Thick microbial suspension is standardized and mixed in equal amounts from all 4 staphylococcus strains.
  • the resulting microbial mass is treated three times with acetone.
  • Dry acetone inactivated microbial mass is subjected to three times aqueous extraction, centrifuged. Dry antigenic complexes of Klebsiella, Proteus, Escherichia coli are mixed with an aqueous extract of staphylococcus.
  • 60.0 mg of dry antigens should be taken. After that, sterilizing filtration is carried out, pouring 4 ml into ampoules, freeze-dried and ampoules are sealed under vacuum.
  • Closest to the claimed method of treatment is a method of treating a multicomponent vaccine containing the antigens of Klebsiella pneumonia, Proteus, staphylococcus and Escherichia coli.
  • Vaccination can be done subcutaneously the method, as well as the combined intranasal-subcutaneous and intranasal-oral methods [RU ⁇ ° 94019810 A1, ⁇ 61 ⁇ 39/116, 1996].
  • the vaccine is used in the treatment of inflammatory obstructive diseases of the respiratory system - chronic bronchitis, an infectious-dependent form of bronchial asthma.
  • the basis of the invention is the task of creating a Klebsiella proteus inactivated liquid vaccine against Klebsiella and Proteus, which would be clinically more targeted against the actual strain that causes the disease and which is dominant at the time of treatment with a bacterial vaccine, highly effective, with a more prolonged immunostimulating effect, would not side effects.
  • the second task which is the basis of the invention, is the creation of a simple method for the manufacture of Klebsiella protea inactivated liquid vaccine against Klebsella and Proteus, which would have a high general and local immunogenic effect and would give positive clinical responses after vaccination.
  • the third task which is the basis of the invention, is the creation of a method for the treatment and prevention of Klebsiella-protea inactivated liquid vaccine against Klebsiella and Proteus, which would allow to achieve a stable positive clinical result, a more prolonged general and local immunostimulating effect and would have wide functional capabilities.
  • the Klebsiella protea inactivated liquid vaccine against Klebsiella and Proteus including bacterial strains Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, according to the invention, additionally contains bacterial strains Klebsiella oxytoca, Proteus mirabilis, Proteus peneri, in total at least 2 types of Klebsi and 3 types of Proteus, including 21 bacterial strains, namely: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 of a certain location, isolated in various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology with varying degrees of resistance to antibiotics, including hospital strains with 100% antibiotic resistance, including bacterial strains deposited in Depositories of the Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine:
  • Klebsiella oxytoca is deposited under the registration number IIV B-7659;
  • Proteus peneri is deposited under the registration number IIV B-7671.
  • the shelf life of the vaccine is 24 months.
  • Klebsiella and 3 types of Proteus in the vaccine including the 21st original strain of bacteria, namely: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3 , Proteus peneri - 1 of different locations, isolated from various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology in children and adults, makes the action of the KleproPro Primavak vaccine more emphasized with a more pronounced positive clinical, as well as general and local immunostimulating effect.
  • the vaccine has no side effects.
  • the second task is solved by the fact that in the method of manufacturing the Klebsiella protea inactivated liquid vaccine against Klebsiella and Proteus, including the cultivation of the bacterial strains Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, the inactivation of the strains, mixing, according to the invention, the bacterial strains Klebsiella oxytoca, Proteus mi Proteus mi peneri, no less than 2 species of Klebsiella and 3 species of Proteus, including 21 bacterial strains, namely: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 of different locations isolated from various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology, the bacterial agar culture is washed off the surface of a solid nutrient medium with pyrogen-free distilled water and placed in sterile containers, and to eliminate nutrient im
  • the method uses a 24-hour agar culture.
  • Erbisol or Inflamafertin or another drug of embryonic origin, is used as a preparation of embryonic origin.
  • Bacterial strains are washed with distilled water by centrifugation three times.
  • the pellet is standardized in accordance with the MAK Farland (McF) standard with an optical density of 1.0, which corresponds to 3 billion (3.0 * 10 L 9) microbial cells in 1 ml of the finished vaccine.
  • McF MAK Farland
  • the vaccine is poured into ampoules of 1 ml.
  • Spilled and sealed ampoules are checked for leaks, labeled and packaged in 10 ampoules for vaccination, leaving 2 ampoules of each series for control.
  • Klebsiella and 3 types of Proteus including the 21st strain of bacteria, namely: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 of different locations, isolated from various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology in children and adults, allows you to get a vaccine that has a high overall and local immunogenic effects and positive clinical responses after vaccination.
  • the 21st strain of bacteria namely: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 of different locations, isolated from various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology in children and adults, allows you to get a vaccine that has a high overall and local immunogenic effects and positive clinical responses after vaccination.
  • the vaccination course consists of 10-12 injections that are given every other day, while the first day at a dose of 0.1 ml intradermally into the inner surface of the forearm with the formation of "lemon peel", and the next subcutaneously in a circle in turn to the right shoulder / thigh, left thigh / shoulder with a gradual increase in the dose of the drug.
  • vaccination is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.2 - 0.3 - 0.4 - 0.45 - 0.5 - 0.55 - 0.6 - 0.65 - 0.7 ml .
  • a prolonged vaccine is used in the treatment of inflammatory obstructive diseases of the respiratory system, it provides a good effect in 70-80% of patients with chronic bronchitis, an infectious-dependent form of bronchial asthma.
  • the claimed vaccine has broader functionality, it is used for various acute and chronic diseases of bacterial etiology in children and adults: nose, sinuses, pharynx, mouth, tongue, gums, teeth, conjunctiva and eyes, trachea, bronchi , lungs, genitourinary system, gall bladder, abdominal cavity, skin, subcutaneous tissue, etc., that is, the vaccine has wide functional capabilities.
  • the inventive vaccine has a stable positive clinical effect and a more prolonged immunostimulating effect due to the use of at least 2 types of Klebsiella and 3 types of Proteus, including the 21st original strain of bacteria.
  • the Klebsiella Protein inactivated liquid vaccine Klepro Primavak against Klebsiella and Proteus includes the bacterial strains Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus peneri, no less than 2 types of Klebsiella and 3 types of Proteus, including 21 bacteria, including 21 Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 of different locations, isolated in various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology in children and adults, with different degrees of resistance to antibiotics, including hospital strains with 100% antibiotic resistance, including bacterial strains deposited in the Depository of the Institute of Microbiology and Virology of the National Academy of Sciences of Ukraine:
  • Klebsiella pneumonia isolated from the urine of a patient with chronic cystitis on 09/01/2017, deposited on 10/26/2017 under registration number IIV ⁇ -7623, antibiotic resistance - 0%;
  • Klebsiella pneumonia isolated from the urine of a patient with chronic pyelonephritis September 5, 2017, deposited October 26, 2017 under registration number IIV B-7624, resistance - 10%;
  • Klebsiella pneumonia isolated from the urine of a patient with chronic cystitis on 09/01/2017, deposited on 10/26/2017 under registration number IIV ⁇ -7625, resistance - 100%;
  • Klebsiella pneumonia, strain 680 isolated from the pharynx of a patient with recurrent stomatitis on 01.11.2017, deposited on 01.17.2018 under registration number - IIW B-7686, resistance - 10%;
  • Klebsiella pneumonia strain 775, isolated from the urine of a patient with chronic pyelonephritis 12/01/2017, deposited 03/23/2018, under registration number IIV B-7707, resistance - 100%;
  • Klebsiella pneumonia strain 800 / V, isolated from the sputum of a patient suffering from cystic fibrosis on October 3, 2018, deposited on October 31, 2018 under registration number IIV B-7787, resistance - 20%;
  • Klebsiella pneumonia isolated from the sputum of a patient with chronic bronchitis on 11/14/2018, deposited on 12/12/2018 under registration number IIV B-7803, resistance - 40%;
  • Proteus vulgaris strain 569, isolated from mucus from the nose of a patient with chronic pansinusitis on 04/25/2018, deposited on 05/14/2018 under registration number IIV B-7762, resistance - 10%;
  • Proteus vulgaris strain 230, isolated from the urine of a patient with chronic pyelonephritis of a transplanted kidney on October 4, 2017, deposited on October 26, 2017 under registration number IIV B-7672, resistance - 100%;
  • Proteus mirabilis, strain 782 isolated from the secretion of the prostate of a patient with chronic urethro-prostatitis 09/27/2017, deposited on 10/26/2017 under registration number IMV V-7664, resistance - 10%;
  • Proteus peneri, strain 921 isolated from the urine of a patient with chronic cystitis on 10/04/2017, deposited on 10/26/2017 under registration number IIV B-7671, resistance - 0%.
  • a method of manufacturing a Klebsiella protea inactivated liquid vaccine against Klebsiella and Proteus is as follows.
  • the strains of bacteria Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus peneri grow separately, no less than 2 species of Klebsiella and 3 species of Proteus of a certain location, including 21 original bacterial strains, namely: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxy - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1, isolated from various acute and chronic inflammatory diseases of bacterial etiology in children and adults: nose, sinuses, pharynx, mouth, tongue, gums, teeth, conjunctiva and eyes, trachea, bronchi, lungs, urogenital system, gall bladder, abdominal cavity, skin, subcutaneous tissue, etc.
  • At least 2 types of Klebsiella and 3 types of Proteus are used, including 21 original bacteria strains with varying degrees of resistance to existing antibiotics (from 0% resistance - sensitive to all antibiotics, and up to 100% resistance - hospital strains that are not at all sensitive to all antibiotics).
  • a 24-hour agar culture of bacteria is washed off the surface of a solid nutrient medium with pyrogen-free distilled water and placed in sterile containers, and bacteria strains are washed to remove nutrient impurities distilled water by triple centrifugation at 1500-3000 rpm for 10-15 minutes, pouring out the supernatant.
  • the resulting culture pellet of the bacteriological strain grown separately is suspended in pyrogen-free distilled water for injection and standardized in accordance with the MAK Farland (McF) standard with an optical density of 1.0, which corresponds to 3 billion (3.0 * 10 l 9) microbial cells in 1 ml, and microorganism strains are taken in equal amounts.
  • McF MAK Farland
  • a standardized suspension of strains is inactivated in an autoclave at a temperature of 1 15-125 ° C and a pressure of 1 ATM. within 15-40 minutes.
  • an equal amount of a preparation of embryonic origin, or physiological saline, or water for injection, or another solvent is added in accordance with the technical regulations and a suspension of microbial cells of 1.5 billion (1.5 * 10 L 9) in 1 ml of finished vaccines.
  • vaccine samples are plated on a nutrient broth, crops are incubated in an incubator at a temperature of 35-40 ° C for 24-48 hours, and in the absence of growth, preservative and other ingredients are added (according to technical regulations) and the vaccine is poured into sterile 1 ml ampoules.
  • Spilled and sealed ampoules are checked for leaks, labeled and packaged in 10 ampoules for vaccination, leaving 2 ampoules of each series for control.
  • the vaccination course consists of 10-12 injections that are given every other day, on the first day at a dose of 0.1 ml intradermally into the inner surface of the forearm with the formation of a "lemon peel", and the next subcutaneously in a circle alternately in the right shoulder / thigh, left thigh / shoulder with a gradual increase in the dose of the drug.
  • vaccination is carried out according to the scheme: 0.1 - 0.2 - 0.3 - 0.4 - 0.45 - 0.5 - 0.55 - 0.6 - 0.65 - 0.7 ml .
  • the shelf life of the KleproPrimavak vaccine is 24 months.
  • the invention is not limited to the manufacture of a liquid vaccine.
  • the vaccine can also be made in the form of sublingual sucking tablets, capsules for oral administration, drops in the nose or spray, vaginal suppository suppositories, ointments, solution for irrigation of the mucous membranes.
  • the invention is illustrated by examples of the use of a vaccine.
  • Example 1 Patient M, 35 years old. For 12 years, he suffers from chronic bilateral sinusitis mainly of Klebsiella etiology, although Staphylococcus aureus, Proteus, Escherichia coli and other bacteria were additionally isolated from mucus from the nose and nasopharyngeal swabs. Multiple antibiotic treatment courses (at least 5-6 times a year) gave a short-term effect with the subsequent development of another relapse. Moreover, the intervals between the end of the course of antibiotic treatment and a new relapse were constantly reduced.
  • Klebsiella was not found; Staphylococcus aureus and Enterococcus aureus were isolated. Additional sequential courses of immunization were carried out with the claimed KleproPrimavak vaccine and a vaccine against bacterial and fungal pathogens of diseases of the nasopharynx, mouth and eyes of RinodentPrimavak. There was a persistent clinical remission - over the next 3 years there was no observation of sinusitis relapse.
  • Child A 5 years old, has been suffering from chronic constantly recurring cystitis of mainly proteic etiology for 3 years, although during bacteriological examination of urine, Escherichia coli, enterococci, Klebsiella and other bacteria were also isolated for several years. Conducted multiple courses of antibiotic treatment (taking into account the sensitivity of the isolated bacteria cultures to antibiotics) gave a short-term and unstable result - the last exacerbation of cystitis developed several days after the end of the next 10-day course of treatment. When contacting the clinic in the general analysis of urine, proteinuria and leukocyturia were detected (protein - 0.099 g / l, white blood cells - 80-100 in n / a).

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Изобретения относятся к медицинской микробиологии, фармацевтической промышленности, в частности, к вакцинным препаратам, а именно, к вакцинам против клебсиеллы и протея, способам их изготовления и способам лечения и профилактики, и может быть использована для лечения и профилактики локальных и системных, острых и хронических заболеваний бактериальной этиологии у детей и взрослых. Вакцина включает штаммы бактерий Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus peneri, всего не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21 оригинальный штамм бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1, определенной локации, выделенных при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых, с разной степенью резистентности к антибиотикам, включая госпитальные штаммы со 100%-ной антибиотикорезистентностью. Изобретения обеспечивают повышение иммуногенного эффекта вакцины, усиление иммунологического и клинического эффекта после вакцинации без аллергических реакций, широкий спектр применения.

Description

КЛЕБСИЕЛЕЗНО-ПРОТЕЙНАЯ ВАКЦИНА «КЛЕПРОПРИМАВАК» ПРОТИВ
КЛЕБСИЕЛЛЫ И ПРОТЕЯ
Группа изобретений относится к медицинской микробиологии, фармацевтической промышленности, в частности к вакцинным препаратам, а именно, к вакцинам против клебсиеллы и протея, способов их изготовления и способов лечения и профилактики, и может быть использована для лечения локальных и системных, острых и хронических заболеваний бактериальной этиологии у детей и взрослых: носа, придаточных пазух носа, глотки, ротовой полости, языка, десен, зубов, конъюнктивы и глаз, трахеи, бронхов, легких, мочеполовой системы, желчного пузыря, брюшной полости, кожи, подкожной клетчатки и др.
Клебсиеллы (лат. Klebsiella)— это прямые грамотрицательные палочки (0,3-1 ,0*0,6- 6,0 мкм), которые располагаются одиночно, парами или короткими цепочками. Образуют капсулы. Неподвижны. Факультативные анаэробы. Представитель нормальной, условно- патогенной микрофлоры кишечника человека. Факторы вирулентности: капсула, эндотоксин, маннозорезистентные пили (пили, или фимбрии, или ворсинки - нитевидные белковые структуры, расположенные на поверхности клеток многих бактерий). Растут на простых питательных средах. Имеют выраженную биохимическую активность.
Протей (лат. Proteus) — род грамотрицательных, не образующих споры, факультативно анаэробных бактерий. Представитель нормальной, условно-патогенной микрофлоры кишечника человека. Протеи имеют вид мелких, 0,3 на 3 мкм, нитевидных палочек. Они отличаются очень активной подвижностью. Протеи обладают токсическими (вырабатывают эндотоксин) и гемолитическими свойствами.
Известна вакцина против колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллёза, протея в виде инъекционного раствора [https://33korovy.in.ua/product/ vakcina-okz-protiv- kolibakterioza-salm-za-klebsiel-protejnoj-inf- 100ml] .
Этот препарат является ветеринарным и назначается взрослым особям и молодняку (с 1 месяца) с целью профилактики острых кишечных заболеваний. Данное средство не имеет выраженных лечебных свойств.
Наиболее близкой к заявляемой вакцине является поликомпонентная вакцина (ВП- 4) для иммунотерапии заболеваний, в состав которой входят такие штаммы: Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, Escherichia coli, S. aureus. [RU N°94019810 Al , A61K 39/1 16, 1996].
Эта вакцина имеет недостаточное количество штаммов клебсиеллы и протея, в результате чего недостаточно эффективна против этих бактерий и вызываемых ими заболеваний.
Известен способ изготовления поликомпонентной вакцины (ВП-4) для иммунотерапии заболеваний [RU N°94019810 А1, А61К 39/1 16, 1996].
Для приготовления используют 4 штамма: Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, Escherichia coli, S. aureus.
Предварительно получают белково-липополисахаридные комплексы из 3-х первых видов микроорганизмов. Для этого производят посев клебсиеллы в матрасах со средой Ворфель-Ферпоссона. Через 18-24 часа выросшую культуру смывают, стандартизируют и добавляют солянокислый гидроксиламин. Инкубируют 48 часов при 37°С. Центрифугируют в течение 2-х суток и затем высушивают во флаконах. Аналогично поступают со штаммами протея и кишечной палочки, но их выращивают в матрасах на среде из кислотного гидролизата казеина. Стафилококковый компонент вакцины готовят непосредственно перед ее компоновкой и высушиванием. Штаммы S. aureus растят в матрасах на среде из гидролизата казеина, инкубируют 16-24 часа при 37°С. Культуру смывают дистиллированной водой. Густую микробную суспензию стандартизируют и смешивают в равных количествах от всех 4-х штаммов стафилококка. Полученную микробную массу обрабатывают трижды ацетоном. Сухую инактивированную ацетоном микробную массу подвергают трехкратной водной экстракции, центрифугируют. Сухие антигенные комплексы клебсиеллы, протея, кишечной палочки смешивают с водным экстрактом стафилококка. Чтобы приготовить 100,0 мл вакцины следует взять сухих антигенов по 60,0 мг. После этого проводят стерилизующую фильтрацию, разлив по 4 мл в ампулы, лиофильно высушивают и запаивают ампулы под вакуумом.
В таком способе изготовления вакцины используют недостаточное количество штаммов против клебсиеллы и протея, в результате чего полученная вакцина недостаточно эффективна. Способ изготовления является достаточно сложным и трудоемким.
Известен способ лечения вакциной против колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллёза, протея, в котором инъекционный раствор вакцины вводят животным в область задней трети шеи с перерывом в 10-14 дней [https://33korovy.in.ua product vakcina- okz-protiv-kolibakterioza-salm-za-klebsiel-protejnoj -inf- 100ml] .
Наиболее близким к заявляемому способу лечения является способ лечения поликомпонентной вакциной, содержащей антигены клебсиеллы пневмонии, протея, стафилококка и кишечной палочки. Вакцинацию можно осуществлять подкожным методом, а также комбинированными интраназально-подкожным и интраназально- оральным методами [RU Г°94019810 А1, А61К 39/116, 1996].
В таком способе лечения поликомпонентной вакциной используют недостаточное количество штаммов против клебсиеллы и протея, в результате чего полученная вакцина недостаточно эффективна. Вакцину применяют при лечении воспалительных обструктивных заболеваний органов дыхания - хронический бронхит, инфекционно- зависимая форма бронхиальной астмы.
В основу изобретения поставлена задача создать клебсиеллёзно- протейную инактивированную жидкую вакцину против клебсиеллы и протея, которая была бы клинически более прицельной против актуального штамма, вызывающего заболевание и являющегося доминирующим на момент назначения лечения бактериальной вакциной, высокоэффективной, с более пролонгированным иммуностимулирующим эффектом, не имела бы побочных действий.
Вторая задача, которую поставлено в основу изобретения, - это создание простого способа изготовления клебсиеллёзно-протейной инактивированной жидкой вакцины против клебсиеллы и протея, которая имела бы высокий общий и местный иммуногенный эффект и давала бы положительные клинические ответы после вакцинации.
Третья задача, поставленная в основу изобретения, - это создание способа лечения и профилактики клебсиеллёзно-протейной инактивированной жидкой вакциной против клебсиеллы и протея, который позволил бы достичь устойчивого положительного клинического результата, более пролонгированного общего и местного иммуностимулирующего эффекта и имел бы широкие функциональные возможности.
Поставленную задачу решают тем, что клебсиеллёзно-протейная инактивированная жидкая вакцина против клебсиеллы и протея, включающая штаммы бактерий Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, согласно изобретению, дополнительно содержит штаммы бактерий Klebsiella oxytoca, Proteus mirabilis, Proteus peneri, всего не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21 штамм бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 определенной локации, выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии с разной степенью резистентности к антибиотикам, включая госпитальные штаммы со 100%-ной антибиотикорезистентностью, в том числе штаммы бактерий, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академии наук Украины:
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7623;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7624;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7625;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7686;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7707;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7773;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7783;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7787;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7803;
Klebsiella oxytoca депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7630;
Klebsiella oxytoca депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7659;
Proteus vulgaris депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7762;
Proteus vulgaris депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7673;
Proteus vulgaris депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7672;
Proteus mirabilis депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7664;
Proteus peneri депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7671.
Срок годности вакцины составляет 24 месяца.
Использование в составе вакцины не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21-го оригинального штамма бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 различной локации, выделенных при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых, делает действие вакцины КлепроПримавак более акцентированным с более выраженным положительным клиническим, а также общим и местным иммуностимулирующим эффектом. Вакцина не имеет побочных действий.
Вторую поставленную задачу решают тем, что в способе изготовления клебсиеллёзно-протейной инактивированной жидкой вакцины против клебсиеллы и протея, включающем выращивание штаммов бактерий Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, инактивацию штаммов, смешивание, согласно изобретению, также выращивают штаммы бактерий Klebsiella oxytoca, Proteus mirabilis, Proteus peneri, всего не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21 штамм бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 различной локации, выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии, агаровую культуру бактерий смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой и помещают в стерильные емкости, а для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут, выливая надосадочную жидкость, полученный осадок биомассы культуры бактериологического штамма, выращенного порознь, суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют, причем штаммы микроорганизмов берут в равных количествах, стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 115-125 °С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут, в емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах препарат эмбрионального происхождения, или физиологический раствор, или воду для инъекций и получают суспензию микробных клеток, для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон, посевы инкубируют в термостате при температуре 35-40°С в течение 24-48 часов, а при отсутствии роста добавляют консервант и разливают вакцину в стерильные ампулы.
В способе используют 24-часовую агаровую культуру.
В качестве препарата эмбрионального происхождения используют Эрбисол или Инфламафертин, или другой препарат эмбрионального происхождения.
Штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования .
Осадок стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0* 10л9) микробных клеток в 1 мл готовой вакцины.
В способе получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1,5* 10Л9) в 1 мл готовой вакцины.
Разливают вакцину в ампулы по 1 мл.
Разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.
Использование в способе не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21-го штамма бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 различной локации, выделенных при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых, позволяет получить вакцину, которая имеет высокий общий и местный иммуногенный эффекты и положительные клинические ответы после вакцинации.
Третью поставленную задачу решают тем, что в способе лечения и профилактики клебсиеллёзно-протейной инактированной жидкой вакциной против клебсиеллы и протея, включающем введение вакцины в соответствующих нарастающих дозах согласно изобретению, курс вакцинации состоит из 10-12 инъекций, которые делают через день, при этом в первый день в дозе 0,1 мл внутрикожно во внутреннюю поверхность предплечья с образованием «лимонной корки», а последующие - подкожно по кругу по очереди в правое плечо/бедро, левое бедро/плечо с постепенным увеличением дозы препарата.
Для детей первого года жизни вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,45 - 0,5 - 0,55 - 0,6 - 0,65 - 0,7 мл.
Для детей от одного до пяти лет вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,6 - 0,65 - 0,7 - 0,75 - 0,8 мл.
Для детей старше пяти лет и взрослых вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,6 - 0,7 - 0,8 - 0,9 - 1 ,0 мл.
Пролонгированную вакцину применяют при лечении воспалительных обструктивных заболеваний органов дыхания, она обеспечивает хороший эффект у 70-80% больных хроническим бронхитом, инфекционно-зависимой формы бронхиальной астмы. В противоположность прототипу заявляемая вакцина имеет более широкие функциональные возможности, ее применяют при различных острых и хронических заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых: носа, придаточных пазух носа, глотки, ротовой полости, языка, десен, зубов, конъюнктивы и глаз, трахеи, бронхов, легких, мочеполовой системы, желчного пузыря, брюшной полости, кожи, подкожной клетчатки и др., то есть вакцина имеет широкие функциональные возможности.
Заявляемая вакцина имеет устойчивый положительный клинический эффект и более пролонгированное иммуностимулирующее действие в связи с использованием в ней не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21-го оригинального штамма бактерий.
Клебсиеллёзно-протейная инактивированная жидкая вакцина КлепроПримавак против клебсиеллы и протея включает штаммы бактерий Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus peneri, всего не менее 2 видов клебсиелл и 3 видов протея, в том числе 21 штамм бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 различной локации, выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых, с разной степенью резистентности к антибиотикам, включая госпитальные штаммы со 100%-ной антибиотикорезистентностью, в том числе штаммы бактерий, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академии наук Украины:
Klebsiella pneumonia, штамм 907, изолированный из мочи больной хроническим циститом 05.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В- 7623, резистентность к антибиотикам - 0%;
Klebsiella pneumonia, штамм 335, изолированный из мочи больного хроническим пиелонефритом 05.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В-7624, резистентность - 10%;
Klebsiella pneumonia, штамм 706, изолированный из мочи больной хроническим циститом 05.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В- 7625, резистентность - 100%;
Klebsiella pneumonia, штамм 680, изолированный из зева больной рецидивирующим стоматитом 01.11.2017 г., депонирован 17.01.2018 г. под регистрационный номером - ИМВ В-7686, резистентность - 10%;
Klebsiella pneumonia, штамм 775, изолированный из мочи больной хроническим пиелонефритом 01.12.2017 г., депонирован 23.03.2018 г. под регистрационым номером ИМВ В-7707, резистентность - 100%;
Klebsiella pneumonia, штамм 72, изолированный из трофической язвы на коже голени больного 06.06.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В- 7773, резистентность - 100%;
Klebsiella pneumonia, штамм 863, изолированный из мокроты больной бронхиальной астмой 26.09.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В- 7783, резистентность - 20%;
Klebsiella pneumonia, штамм 800/V, изолированный из мокроты больной муковисцедозом 03.10.2018 г., депонирован 31.10.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7787, резистентность - 20%;
Klebsiella pneumonia, штамм 667, изолированный из мокроты больного хроническим бронхитом 14.11.2018 г., депонирован 12.12.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7803, резистентность - 40%;
Klebsiella oxytoca, штамм 174, изолированный из зева больного хроническим гайморитом 12.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В-7630, резистентность - 0%;
Klebsiella oxytoca, штамм 613, изолированный из мочи больного уретро-простатитом 19.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером - ИМВ В-7659, резистентность - 0%;
Proteus vulgaris, штамм 569, изолированный из слизи из носа больного хроническим пансинуситом 25.04.2018 г., депонирован 14.05.2018 г. под регистрационным номером ИМВ В-7762, резистентность - 10%;
Proteus vulgaris, штамм 539, изолированный из раны больного 04.10.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В-7673, резистентность - 20%;
Proteus vulgaris, штамм 230, изолированный из мочи больной хроническим пиелонефрит трансплантированной почки 04.10.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В-7672, резистентность - 100%;
Proteus mirabilis, штамм 782, изолированный из секрета простаты больного хроническим уретро-простатитом 27.09.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номеромИМВ В-7664, резистентность - 10%;
Proteus peneri, штамм 921, изолированный из мочи больной хроническим циститом 04.10.2017 г., депонирован 26.10.2017 г. под регистрационным номером ИМВ В-7671, резистентность - 0%.
Способ изготовления клебсиеллёзно-протейной инактивированной жидкой вакцины против клебсиеллы и протея осуществляют следующим образом.
Выращивают порознь штаммы бактерий Klebsiella pneumonia, Klebsiella oxytoca, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Proteus peneri, всего не менее 2 видов клебсиелл и 3 видов протея определенной локации, в том числе 21 оригинальный штамм бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 , выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии у детей и взрослых: носа, придаточных пазух носа, глотки, ротовой полости, языка, десен, зубов, конъюнктивы и глаз, трахеи, бронхов, легких, мочеполовой системы, желчного пузыря, брюшной полости, кожи, подкожной клетчатки и др.
При изготовлении вакцины используют не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21 оригинальный штамм бактерий с разной степенью резистентности к существующим антибиотикам (от 0% резистентности - чувствительные ко всем антибиотикам, и до 100% резистентности - госпитальные совсем не чувствительные ко всем антибиотикам штаммы).
24-часовую агаровую культуру бактерий смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой и помещают в стерильные емкости, а для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут, выливая надосадочную жидкость. Полученный осадок культуры бактериологического штамма, выращенного порознь, суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0* 10л9) микробных клеток в 1 мл, причем штаммы микроорганизмов берут в равных количествах. Стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 1 15-125°С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут. В емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах препарат эмбрионального происхождения, или физиологический раствор, или воду для инъекций, или другой растворитель согласно техническому регламенту и получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1 ,5* 10Л9) в 1 мл готовой вакцины. Для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон, посевы инкубируют в термостате при температуре 35-40°С в течение 24-48 часов, а при отсутствии роста добавляют консервант и другие ингредиенты (согласно техническому регламенту) и разливают вакцину по 1 мл в стерильные ампулы.
Разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.
Курс вакцинации состоит из 10-12 инъекций, которые делают через день, при этом в первый день в дозе 0,1 мл внутрикожно во внутреннюю поверхность предплечья с образованием «лимонной корки», а последующие - подкожно по кругу поочередно в правое плечо/бедро, левое бедро/плечо с постепенным увеличением дозы препарата.
Для детей первого года жизни вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,45 - 0,5 - 0,55 - 0,6 - 0,65 - 0,7 мл.
Для детей от одного до пяти лет вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,6 - 0,65 - 0,7 - 0,75 - 0,8 мл.
Для детей старше пяти лет и взрослых вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,6 - 0,7 - 0,8 - 0,9 - 1,0 мл.
Срок годности вакцины КлепроПримавак составляет 24 месяца.
Изобретение не ограничивается изготовлением жидкой вакцины. Вакцина может также быть изготовлена в виде сублингвальных сосательных таблеток, капсул для приема внутрь, капель в нос или спрея, вагинальных свечей-суппозиториев, мази, раствора для орошения слизистых оболочек.
Изобретение иллюстрируется примерами применения вакцины.
Пример 1 Пациент M , 35 лет. В течение 12 лет страдает хроническим двусторонним гайморитом преимущественно клебсиеллёзной этиологии, хотя периодически из слизи из носа и мазков из носоглотки дополнительно при бактериологическом исследовании выделяли золотистый стафилококк, протей, кишечную палочку и другие бактерии. Многократные курсы лечения антибиотиками (не менее 5-6 раз в году) давали кратковременный эффект с последующим развитием очередного рецидива. При этом интервалы между окончанием курса лечения антибиотиком и новым рецидивом постоянно сокращались. Перенес более 10 проколов гайморовой пазухи, левостороннюю конхотомию, операцию по выравниванию носовой перегородки, что не оказало заметного положительного влияния на клиническое состояние больного и течение заболевания. Обратился в клинику в период очередного обострения гайморита с обильными гнойными выделениями из носа (более 100 мл в сутки) и затрудненным носовым дыханием. Была выделена культура Klebsiella pneumonia со 100%-ной резистентностью ко всем антибиотикам. Проведен курс лечения бактериальной клебсиеллёзно-протейной вакциной КлепроПримавак из 10 подкожных инъекций по стандартной схеме в сочетании с местным лечением и промыванием пазух носа. Выделения из носа прекратились в течение 8-10 дней, полностью восстановилось носовое дыхание. При контрольных бактериологических исследованиях клебсиеллы не обнаружено, выделен золотистый стафилококк и энтерококк. Проведены дополнительные последовательные курсы иммунизации заявляемой вакциной КлепроПримавак и вакциной против бактериальных и грибковых возбудителей заболеваний носоглотки, рта и глаз РинодентаПримавак. Наступила стойкая клиническая ремиссия - в течение последующих 3 лет наблюдения рецидивов гайморита не было.
Пример 2
Ребенок А., 5 лет, в течение 3-х лет страдает хроническим постоянно рецидивирующим циститом преимущественно протейной этиологии, хотя при бактериологическом обследовании мочи в течение нескольких лет также выделяли кишечную палочку, энтерококки, клебсиеллы и другие бактерии. Проведенные многократные курсы лечения антибиотиками (с учетом чувствительности выделенных культур бактерий к антибиотикам) давали кратковременный и нестабильный результат - последнее обострение цистита развилось через несколько дней после окончания очередного 10-дневного курса лечения. При обращении в клинику в общем анализе мочи выявлены протеинурия и лейкоцитурия (белок - 0,099 г/л, лейкоциты - 80-100 в п/зр.). При бактериологическом обследовании из мочи была в очередной раз выделена доминирующая культура Proteus vulgaris с 40%-ной устойчивостью к антибиотикам. Было проведено лечение клебсиеллёзно-протейной вакциной КлепроПримавак из 10 подкожных инъекций по стандартной схеме в возрастной дозировке. Анализы мочи нормализовались в течение 9-10 дней, протей при контрольных бактериологических исследованиях больше не выделяли. В течение ближайших 2-х лет было проведено еще 5 последовательных курсов иммунизации бактериальными вакцинами - стафилококовой вакциной СтафилоПримавак, вакциной против возбудителей бактериальных и грибковых заболеваний мочеполовой системы УроПримавак и вакциной против кишечной палочки и энтерококков ЕкоПримавак с полным клиническим выздоровлением ребенка (в течение 3-х лет катамнестического наблюдения рецидивов цистита больше не было).

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Клебсиеллёзно-протейная инактивированная жидкая вакцина против клебсиеллы и протея, включающая штаммы бактерий Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, отличаюгцяяся тем, что дополнительно содержит штаммы бактерий Klebsiella oxytoca, Proteus mirabilis, Proteus peneri, всего не менее 2 видов клебсиелл и 3 видов протея, в том числе 21 штамм бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 различной локации, выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии, с разной степенью резистентности к антибиотикам, включая госпитальные штаммы со 100%-ной антибиотикорезистентностью, в том числе и штаммы бактерий, депонированные в Депозитарии Института микробиологии и вирусологии Национальной академии наук Украины:
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7623;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7624;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7625;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7686;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7707;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7773;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7783;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7787;
Klebsiella pneumonia депонирован под регистрационным номером ИМВ В -7803;
Klebsiella oxytoca депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7630;
Klebsiella oxytoca депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7659;
Proteus vulgaris депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7762;
Proteus vulgaris депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7673;
Proteus vulgaris депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7672;
Proteus mirabilis депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7664;
Proteus peneri депонирован под регистрационным номером ИМВ В-7671.
2. Способ изготовления клебсиелл ёзно-протейной инактивированной жидкой вакцины против клебсиеллы и протея, включающий выращивание штаммов бактерий Klebsiella pneumonia, Proteus vulgaris, инактивацию штаммов, смешивания, отличающийся тем, что также выращивают штаммы бактерий Klebsiella oxytoca, Proteus mirabilis, Proteus peneri, всего не менее 2-х видов клебсиелл и 3-х видов протея, в том числе 21 штамм бактерий, а именно: Klebsiella pneumonia - 9, Klebsiella oxytoca - 3, Proteus vulgaris - 5, Proteus mirabilis - 3, Proteus peneri - 1 определенной локации, выделенные при различных острых и хронических воспалительных заболеваниях бактериальной этиологии, агаровую культуру бактерий смывают с поверхности твердой питательной среды апирогенной дистиллированной водой и помещают в стерильные емкости, а для устранения примесей питательной среды штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем центрифугирования при 1500-3000 об/мин. в течение 10-15 минут, выливая надосадочную жидкость, полученный осадок биомассы культуры бактериологического штамма, выращенного порознь, суспендируют в апирогенной дистиллированной воде для инъекций и стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1,0, что соответствует 3 млрд (3,0* 10Л9) микробных клеток в 1 мл, причем штаммы микроорганизмов берут в равных количествах, стандартизированную суспензию штаммов инактивируют в автоклаве при температуре 115-125°С и давлении 1 атм. в течение 15-40 минут, в емкости с инактивированными бактериями добавляют в равных количествах препарат эмбрионального происхождения, или физиологический раствор или воду для инъекций и получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд (1,5* 10Л9) в 1 мл готовой вакцины, для контроля стерильности образцы вакцины высевают на питательный бульон, посевы инкубируют в термостате при температуре 35-40 °С в течение 24-48 часов, а при отсутствии роста добавляют консервант и разливают вакцину в стерильные ампулы.
3. Способ по п.2, отличающийся тем, что используют 24-часовую агаровую культуру.
4. Способ по п.2, отличающийся тем, что в качестве препарата эмбрионального происхождения используют Эрбисол или Инфламафертин.
5. Способ по п.2, отличающийся тем, что штаммы бактерий отмывают дистиллированной водой путем трехкратного центрифугирования.
6. Способ по п.2, отличающийся тем, что стандартизируют в соответствии со стандартом МАК Фарленд (McF) с оптической плотностью 1 ,0, что соответствует 3 млрд. (3,0* 10А9) микробных клеток в 1 мл.
7. Способ по п.2, отличающийся тем, что получают суспензию микробных клеток 1,5 млрд. (1,5* 10л9) в 1 мл готовой вакцины.
8. Способ по п.2, отличающийся тем, что разливают вакцину в ампулы по 1 мл.
9. Способ по п.2, отличающийся тем, что разлитые и запаянные ампулы проверяют на герметичность, этикетируют и упаковывают по 10 ампул для вакцинации, оставляя по 2 ампулы каждой серии для контроля.
10. Способ лечения и профилактики клебсиеллёзно-протейной инактивированной жидкой вакциной против клебсиеллы и протея, включающий введение вакцины в соответствующих нарастающих дозах, отличающийся тем, что курс вакцинации состоит из 10-12 инъекций, которые делают через день, при этом в первый день в дозе 0,1 мл внутрикожно во внутреннюю поверхность предплечья с образованием «лимонной корки», а последующие подкожно по кругу по очереди в правое плечо/бедро, левое бедро/плечо с постепенным увеличением дозы препарата.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что для детей первого года жизни вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,45 - 0,5 - 0,55 - 0,6 - 0,65 - 0,7 мл.
12. Способ по п.10, отличающийся тем, что для детей от одного до пяти лет вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,6 - 0, 65 - 0,7 - 0,75 - 0,8 мл.
13. Способ по п.10, отличающийся тем, что для детей старше пяти лет и взрослых вакцинацию осуществляют по схеме: 0,1 - 0,2 - 0,3 - 0,4 - 0,5 - 0,6 - 0, 7 - 0,8 - 0,9 - 1,0 мл.
PCT/UA2019/000166 2018-12-27 2019-12-27 Клебсиелезно-протейная вакцина «клепропримавак» против клебсиеллы и протея WO2020139312A1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
UAA201812976 2018-12-27
UAA201812976A UA125387C2 (uk) 2018-12-27 2018-12-27 Клебсієльозно-протейна інактивована рідка вакцина проти клебсієли та протею, спосіб її виготовлення і спосіб лікування та профілактика нею

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2020139312A1 true WO2020139312A1 (ru) 2020-07-02

Family

ID=71128389

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/UA2019/000166 WO2020139312A1 (ru) 2018-12-27 2019-12-27 Клебсиелезно-протейная вакцина «клепропримавак» против клебсиеллы и протея

Country Status (2)

Country Link
UA (1) UA125387C2 (ru)
WO (1) WO2020139312A1 (ru)

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2083223C1 (ru) * 1994-05-27 1997-07-10 Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.Мечникова РАМН Способ получения поликомпонентной вакцины для иммунотерапии заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами
US20130337012A1 (en) * 2004-06-07 2013-12-19 Qu Biologics Inc. Tissue Targeted Antigenic Activation of the Immune Response to Treat Cancers

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2083223C1 (ru) * 1994-05-27 1997-07-10 Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им.Мечникова РАМН Способ получения поликомпонентной вакцины для иммунотерапии заболеваний, вызываемых условно-патогенными микроорганизмами
US20130337012A1 (en) * 2004-06-07 2013-12-19 Qu Biologics Inc. Tissue Targeted Antigenic Activation of the Immune Response to Treat Cancers

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
AVDEEVA T.G., RUKOVODSTVO UCHASTKOVOGO PEDIATRA. 3-E ISD., ISPR. I DOP - M., GEOTAR -MEDIA, 2017, pages 546 *
BLAGOVIDOV D.A. ET AL.: "Perenosimost vaktsiny protiv R. aeruginosa u detei s mukovistsidozom i vrozhdennymi porokami razvitiia legkikh", EPIDEMIOLOGIYA I VAKTSINOPROFILAKTIKA, vol. 2, no. 87, 2016, pages 55 - 66 *

Also Published As

Publication number Publication date
UA125387C2 (uk) 2022-03-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109806389B (zh) 一种副猪嗜血杆菌三价灭活疫苗及其应用
US20220267419A1 (en) Human Immunoglobulin Against Methicillin-Resistant Staphylococcus Aureus, Preparation Method Therefor, And Use Thereof
JPS6160618A (ja) 尿路感染症治療用ワクチン
WO2020139316A1 (ru) Поливалентная комбинированная инактивированная жидкая вакцина «уропримавак» и способ ее изготовления
BROOK Management of chronic suppurative otitis media: superiority of therapy effective against anaerobic bacteria
CN114377127B (zh) 一种三联卵黄抗体制剂及其制备方法和应用
WO2020139312A1 (ru) Клебсиелезно-протейная вакцина «клепропримавак» против клебсиеллы и протея
Satta et al. Evaluation of ceftriaxone and other antibiotics against Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and Streptococcus pneumoniae under in vitro conditions simulating those of serious infections
KR0169982B1 (ko) 피부염 치료용 약제
CN111905058A (zh) 一种用于皮肤黏膜护理和伤口修复的药物组合物及其制备方法
WO2020139314A1 (ru) Противобактериальная поливалентная комбинированная инактивированная жидкая вакцина
CN105012946A (zh) 一种鸭巴氏杆菌病和鸭大肠杆菌病二联蜂胶灭活疫苗及其制备方法
SU997599A3 (ru) Способ получени гетеровакцины дл лечени синдрома трихомонада
WO2020139308A1 (ru) Инактивированная стафилококковая жидкая вакцина
Miller et al. Studies on the action of penicillin: VI. Further observations on the development of penicillin resistance by Meningococcus in vitro
CN106860468A (zh) 一种治疗肺结核的药物组合物的配方及其制作方法
CN114149483A (zh) 一种抗菌肽组合物及其应用
WO2020139309A1 (ru) Псевдомонадная инактивированная вакцина «псевдопримавак» против синегнойной палочки
WO2020139311A1 (ru) Ешерихиозно-энтерококковая инактивированная жидкая вакцина «екопримавак» против кишечной палочки и энтерококков, способ ее изготовления, способ лечения и профилактики ею
GB1585863A (en) Pharmaceutical lactobacillus preparations
UA126439C2 (uk) Полівалентна комбінована інактивована рідка вакцина проти бактеріальних і грибкових збудників захворювань бронхолегеневої системи, спосіб її виготовлення і спосіб лікування та профілактики нею
CN112831442B (zh) 一株具有交叉保护力的血清14型副猪嗜血杆菌及其应用
CN112940112B (zh) 一种抗兔d型多杀性巴氏杆菌卵黄抗体及其制备方法
WO2020139310A1 (ru) Инактивированная жидкая вакцина «кандопримавак» против кандидоза, способ ее получения и способ лечения и профилактики ею
EA029938B1 (ru) Вакцина против мыта лошадей

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 19905680

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

DPE1 Request for preliminary examination filed after expiration of 19th month from priority date (pct application filed from 20040101)
NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 19905680

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1