WO2020071961A1 - Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований - Google Patents

Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований

Info

Publication number
WO2020071961A1
WO2020071961A1 PCT/RU2019/000703 RU2019000703W WO2020071961A1 WO 2020071961 A1 WO2020071961 A1 WO 2020071961A1 RU 2019000703 W RU2019000703 W RU 2019000703W WO 2020071961 A1 WO2020071961 A1 WO 2020071961A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
dca
antitumor
compound
agent
active substance
Prior art date
Application number
PCT/RU2019/000703
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Марина Владимировна ФИЛИМОНОВА
Людмила Ивановна ШЕВЧЕНКО
Александр Сергеевич ФИЛИМОНОВ
Алина Сергеевна САБУРОВА
Пётр Викторович ШЕГАЙ
Андрей Дмитриевич КАПРИН
Сергей Анатольевич ИВАНОВ
Original Assignee
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр радиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ радиологии" Минздрава России)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр радиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ радиологии" Минздрава России) filed Critical Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр радиологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ радиологии" Минздрава России)
Priority to EA202100103A priority Critical patent/EA202100103A1/ru
Publication of WO2020071961A1 publication Critical patent/WO2020071961A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/155—Amidines (), e.g. guanidine (H2N—C(=NH)—NH2), isourea (N=C(OH)—NH2), isothiourea (—N=C(SH)—NH2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C335/00—Thioureas, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C335/04—Derivatives of thiourea
    • C07C335/24—Derivatives of thiourea containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom

Definitions

  • the invention relates to new drugs that have complex antiangiogenic and hypoxia-oriented cytotoxic effects and can find application as targeted therapy for solid malignant neoplasms.
  • regorafenib a protein kinase inhibitor used in targeted therapy of colorectal cancer
  • CORRECT metastatic colorectal cancer
  • regorafenib like other antiangiogenic agents, is the progressive weakening of the antitumor effect due to the development of tumor resistance to its effects.
  • the increase in the survival period of cancer patients due to the use of antiangiogenic agents does not exceed 1 year, and prolonged suppression of tumor growth during monotherapy with such drugs is extremely rare (Frandsen S., Corr S., Wehland M. et al. Latest results for anti-angiogenic drugs in cancer treatment. Curr. Pharm. Des. 2016.22 (39): 5927-42).
  • Bevacizumab a targeted drug containing recombinant monoclonal IgGl antibodies, is known for the treatment of metastatic colorectal, ovarian and other types of cancer.
  • bevacizumab in ovarian cancer: A critical review of phase III studies Oncotarget. 2017 Feb 14; 8 (7): 12389-12405).
  • Antitumor agent according to patent RU 2503450 Cl, Federal State Budgetary Institution MRRC of the Ministry of Health and Social Development of Russia, 10.01.2014.
  • the tool is an effective NOS inhibitor, causing marked inhibition of the growth and metastasis of a number of transplanted animal tumors, due mainly to the antiangiogenic, hypoxic effect, against which proliferation decreases and tumor cell apoptosis is enhanced.
  • the antitumor effect of this agent is realized mainly at the early stage of tumor development.
  • the prototype of the patented invention is a "vasoconstrictor agent" (RU 2475479 C1, FSBI MRRC of the Ministry of Health and Social Development of Russia, 02.20.2013) with the general structural formula -
  • Compound T1023 is an effective NOS inhibitor; it induces a pronounced vasoconstrictor effect that can create hypoxia in biological tissues, including tumor tissues.
  • the disadvantage of the prototype is a decrease in its antitumor effectiveness in the long term after exposure, which is manifested by the development of hypoxic resistance of experimental neoplasias: a progressive decrease in the activity of apoptosis of tumor cells, a weakening inhibition of tumor growth and an increase in their recurrent growth.
  • the technical result of the invention is to create a new antitumor agent that has a longer duration and severity of antitumor action, and is also able to suppress (or inhibit) the development of neoplasia resistance.
  • Na-DCA compound dichloroacetate in the form of a sodium salt
  • PDK1 a sodium salt
  • a number of experimental studies have shown the ability of the Na-DCA compound to inhibit the development of hypoxic tumor resistance during therapy with some pharmacopoeial antiangiogenic agents (V. Koblyakov, Hypoxia and glycolysis as possible targets for antitumor effects. Advances in molecular oncology. 2014, 2: 44-49; Duan Y., Zhao X, Ren W. et al.
  • the authors showed the feasibility and promise of combining Na-DCA and T1023 with the preparation of a new drug for targeted therapy of malignant neoplasms.
  • the product contains, as the active substance, 1-isobutanoyl-2-isopropylisothiourea dichloroacetate (hereinafter referred to as compound T1084) with the structural formula:
  • the active substance 10-100 mg / kg has NOS-inhibiting and PDK1-inhibiting activity, and has anti-angiogenic and hypoxia-oriented cytotoxic effects.
  • T1084 The toxicity of the compound T1084 was studied in male outbred mice using the acute toxicity test at the age of 2-2.5 months with a body weight of 22-25 g with a single intraperitoneal administration (Guidelines for preclinical studies of drugs. Part One / Ed. A.N. Mironova - M .: Grif and K, 2012). T1084 working solutions were prepared on the basis of a 0.9% aseptic sodium chloride solution (Dalkhimpharm, RF). Observation of animals was carried out for 14 days. The calculation of indicators of "acute" toxicity was carried out by probit analysis according to the Litchfield-Wilcoxon method.
  • the aim of the experiment was a comparative study of the effect of the compounds T1023, Na-DCA (DCA in the form of sodium salt) and T1084 with their chronic use on the growth of solid CE in mice.
  • the study was performed on 81 female F-hybrid mice (CBA x C 57 Bl / 6j) aged 2-2.5 months with a body weight of 19-22 g, randomized into 4 experimental groups: control and three experimental, 20- 21 individuals in each.
  • CE was transplanted to all animals according to the method described in the Guidelines for conducting preclinical studies of drugs (2012). Control animals subsequently did not receive any experimental effects.
  • T1023 and T1084 Animals of the experimental groups from the 6th to the 20th day of CE growth were given daily intraperitoneal (ip) administration of T1023 and T1084, respectively, in equimolar doses: T1023 - 60 mg / kg; Na-DHA - 33.6 mg / kg; T1084 - 70.7 mg / kg.
  • T1023 and T1084 solutions were prepared on the basis of a 0.9% aseptic sodium chloride solution (Dalchimpharm, RF), Na-DCA solutions were prepared on the basis of water for injection (Dalchimpharm, RF). Antitumor effects were studied according to the method described in the Guidelines for preclinical studies of drugs (2012).
  • T1084 suppressed the adaptation of the tumor to this effect and maintained stable inhibition of tumor growth at the level of 45-50% (90-100% of maximum efficiency) until the end of the observation. .
  • the antitumor effect of T1084 was statistically significantly superior to the effects of T1023 and Na-DCA.
  • the aim of the experiment was a comparative study of the effect of compounds T1023, Na-DCA and T1084 in their chronic use on the growth of cervical cancer (Cervical cancer) in mice.
  • volume indicators are normalized to the initial volume of tumors before the effects on the 7th day of growth.
  • the experimental tumor used was quite sensitive to T1084, and the antitumor effects of this compound were significantly more pronounced and stable compared with the effects of T1023 and Na-DCA.
  • T1084 injection course On the 21st day, there was no significant adaptation of the tumor to the action of T1084 - inhibition of cervical cancer growth remained stable at 35-40% (80-90% of maximum efficiency).
  • the antitumor effect of the compound T1084 on cervical cancer-5 was not only stable, but also long-term - as shown in Table. 3, a statistically significant effect persisted for the next 5 days after the end of the application of T1084.
  • the technical result of the patented invention consists in providing a more pronounced and stable antitumor effect of the compound T1084 in comparison with analogues - 1-isobutanoyl-2-isopropylisothiourea hydrobromide (compound T1023) and sodium dichloroacetate (compound Na-DCA), as well as in suppression (or inhibition) development of neoplasia resistance.
  • T1084 In toxicological studies, it was established (see Section H) that replacing salt-forming acid from hydrobromide (T1023) with dichloroacetate (T1084) does not change the “acute” toxicity of 1-isobutanoyl-2-isopriliziourea salts, and, formally, does not increase the risks of negative effects in case of using T1084 as a medicine. Moreover, in studies on two tumor models - solid Ehrlich carcinoma (see p. 4) and cervical cancer RShM-5 (see p. 5) in mice, the T1084 compound showed a significantly more pronounced and stable antitumor activity compared to T1023 and Na-DHA. In both tumor models, the chronic effects of T1023 and Na-DHA were accompanied by the development of tumor resistance to their action.
  • the effect of the T1084 compound qualitatively reproduced on both tumor models used the effects observed with the combined use of the considered T1023 compounds and Na-DCA. Consequently, a compound containing 1-isobutanoyl-2-isopropylisothiourea dichloroacetate as an active ingredient can be considered as a combination drug for targeted therapy of malignant neoplasms, which opens up new possibilities for the development of more effective pharmacological antitumor agents.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к средству таргетной терапии солидных злокачественных новообразований, содержащего в качестве действующего вещества дихлорацетат 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины со структурной формулой: Оказывает комплексное антинеобластное - NOS-ингибирующее антиангиогенное и PDK1-ингибирующее гипоксия-ориентированное цитотоксическое действие.

Description

СРЕДСТВО ДЛЯ ТАРГЕТНОЙ ТЕРАПИИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ
НОВООБРАЗОВАНИЙ
Область техники
Изобретение относится к новым лекарственным средствам, которые обладают комплексным антиангиогенным и гипоксия-ориентированным цитотоксическим действием и могут найти применение в качестве средств таргетной терапии солидных злокачественных новообразований.
Предшествующий уровень техники
Проблема разработки эффективных средств для лечения онкологических заболеваний остается высоко актуальной для всего мирового сообщества. Так, в Российской Федерации в настоящее время на учёте с различными онкологическими заболеваниями состоит около 3,3 миллионов больных, нуждающихся в эффективном лечении. Но, несмотря на существенные успехи онкологии последних десятилетий, многие распространенные онкологические заболевания, по-прежнему, с трудом поддаются лечению. Например, рак молочной железы, ежегодно поражающий свыше 65 тысяч женщин в России, становится причиной смерти 35% заболевших, а летальность рака легких, которым ежегодно заболевает около 60 тысяч россиян, достигает 85% ( Каприн А.Д., Старинский В. В., Петрова В. Г. Злокачественные новообразования в России в 2015 году (заболеваемость и смертность) - М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ НМИРЦ М3 РФ, 2017).
По мнению многих специалистов, изменение сложившейся картины в лечении онкологических заболеваний возможно лишь с внедрением в клиническую практику эффективных таргетных противоопухолевых средств, в частности антиангиогенных, мишенью воздействия которых являются биохимические и патофизиологические процессы, специфичные для всех злокачественных новообразований или для их определенных видов ( Willett C.G., Duda D.G., di Tomaso E. et al. Complete pathological response to bevacizumab and chemoradiation in advanced rectal cancer. Nat. Clin. Pract. Oncol. 2007. 4(5): 316-21 ; Lein S., Lowman H.B. Therapeutic anti-VEFG antibodies. Handb. Exp. Pharmacol. 2008. 181 : 131-50).
Так, известен регорафениб, ингибитор протеинкиназ, применяющийся в таргетной терапии колоректального рака ( Grothey A., Van Cutsem Е., Sobrero A. et al. Regorafenib monotherapy for previously treated metastatic colorectal cancer (CORRECT): an international, multicenter, randomized, placebo-controlled, phase 3 trial. Lancet. 2013. 381(9863): 303-12).
Недостатком регорафениба, как и других антиангиогенных средств, является прогрессивное ослабевание противоопухолевого эффекта вследствие развития резистентности опухоли к его воздействию. Так, по данным клинических исследований увеличение периода выживания онкологических больных за счет применении антиангиогенных средств не превышает 1 года, а длительное подавление роста опухолей при монотерапии такими препаратами наблюдается крайне редко ( Frandsen S., Корр S., Wehland М. et al. Latest results for anti -angiogenic drugs in cancer treatment. Curr. Pharm. Des. 2016. 22(39): 5927-42).
Известен бевацизумаб, таргетный препарат, содержащий рекомбинантные моноклональные IgGl антитела, для лечения метастатического колоректального, овариального и других видов рака.
Недостатками бевацизумаба являются значительные ограничения к применению, связанные с побочными явлениями (перфорация ЖКТ, трудности при заживлении ран, кровоизлияние, артериальная тромбоэмболия, гипертензивный криз, обратимый лейкоэнцефалопатический синдром, нейтропения и инфекция, нефротический синдром, застойная сердечная недостаточность), а также его неспособность увеличивать общую выживаемость пациентов ( Rossi L., Verrico М., Zaccarelli Е., Papa A., Colonna M., Strudel M., Vici P., Bianco V, Tomao F. Bevacizumab in ovarian cancer: A critical review of phase III studies. Oncotarget. 2017 Feb 14; 8(7): 12389-12405).
Известно «Противоопухолевое средство» по патенту RU 2503450 Cl, ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, 10.01.2014). Средство является эффективным ингибитором NOS, вызывает выраженное подавление роста и метастазирования ряда перевиваемых опухолей животных, обусловленное, главным образом, антиангиогенным, гипоксическим действием, на фоне которого снижается пролиферация и усиливается апоптоз опухолевых клеток. Недостатки: противоопухолевый эффект указанного средства реализуется преимущественно на раннем этапе развития опухоли. Поскольку весь молекулярный аппарат, участвующий в ангиогенезе, остаётся сохранным при действии этого средства, то его «отмена» сопровождается быстрой реваскуляризацией и возобновлением роста опухоли {Филимонова М.В., Южаков В. В., Шевченко Л. И. и др. Экспериментальное исследование противоопухолевой активности нового ингибитора синтаз оксида азота Т1023. Молек. мед. 2015. (1): 61-64).
Прототипом патентуемого изобретения является «Вазоконстрикторное средство» (RU 2475479 С1, ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, 20.02.2013) с общей структурной формулой -
NH
(CH3)2CHCON=C
. HBr
SR
где R= (СН3)2СН;
- гидробромид 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины (далее - соединение Т1023). Соединение Т1023 является эффективным ингибитором NOS, вызывает выраженное вазоконстрикторное действие, способное создавать гипоксию в биологических тканях, в том числе в тканях опухоли.
Недостатком прототипа является снижение его противоопухолевой эффективности в отдаленные сроки после воздействия, что проявляется развитием гипоксической резистентности экспериментальных неоплазий: прогрессивным снижением активности апоптоза опухолевых клеток, ослаблением ингибирования роста опухолей и усилением их рецидивирующего роста.
Технический результат изобретения заключается в создании нового противоопухолевого средства, обладающего большей продолжительностью и выраженностью противоопухолевого действия, а также способного подавлять (или тормозить) развитие резистентности неоплазий.
Проведенные нами исследования подтверждают мнение ряда авторов, что одним из перспективных путей для преодоления гипоксической резистентности неоплазий является применение дихлорацетата в виде соли натрия (соединение Na- ДХА), который является ингибитором PDK1 и обладает свойствами гипоксия- ориентированного цитотоксина. В ряде экспериментальных работ показана способность соединения Na-ДХА подавлять развитие гипоксической резистентности опухолей на фоне терапии некоторыми фармакопейными антиангиогенными средствами ( Кобляков В. А. Гипоксия и гликолиз как возможные объекты противоопухолевого воздействия. Успехи молек. онкол. 2014, 2: 44-49; Duan Y., Zhao X, Ren W. et al. Antitumor activity of dichloroacetate on C6 glioma cell: in vitro and in vivo evaluation. Onco. Targets Ther. 2013. 6: 189-98; Kumar A., Kant S., Singh S. Antitumor and chemosensitizing action of dichloracetate implicates modulation of tumor microenvironment: A role of reorganized glucose metabolism, cell survival regulation and macrophage differentiation. Toxicol. Appl. Pharmacol. 2013. 273(1): 196- 208; Kumar K, Wigfield S, Gee HE, et al. Dichloroacetate reverses the hypoxic adaptation to bevacizumab and enhances its antitumor effects in mouse xenografts. J. Mol. Med. (Berl). 2013. 91(6): 749-58).
Раскрытие изобретения
Авторами показана целесообразность и перспективность совмещения Na- ДХА и соединения Т1023 с получением нового средства для таргетной терапии злокачественных новообразований. Средство содержит в качестве действующего вещества дихлорацетат 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины (далее в тексте - соединение Т1084) со структурной формулой:
Figure imgf000005_0001
При дозах действующего вещества 10-100 мг/кг оно обладает NOS- ингибирующей и PDK1 -ингибирующей активностью, и оказывает антиангиогенное и гипоксия-ориентированное цитотоксическое действие. Содержит 0,1-10% действующего вещества в составе растворов для инъекций или инфузий или содержит 1-50 мг действующего вещества в составе твердых лекарственных форм.
Технический результат - реализация в одном средстве обоих видов фармакологической активности - NOS-ингибирующего, антиангиогенного и гипоксия-ориентированного цитотоксического действия. Лучший вариант осуществления изобретения
Химический синтез соединения Т1084, которое получают из соединения Т1023, токсикологические свойства и противоопухолевая активность, а также достижение заявленного технического результата подробно описаны ниже.
1. Получение соединения Т1023
Смесь 6 г (40 ммоль) изобутаноилтиомочевины, 9,8 г (80 ммоль) изопропилбромида и 15 мл сухого ацетонитрила в запаянной ампуле нагревают на кипящей водяной бане в течение 20 часов. Растворитель упаривают, остаток отфильтровывают и перекристаллизовывают из 4-метил-2-пентанона. Выход 3,6 г (33%).
Тпл 129-13ГС. Спектр ПМР (DMSO-d6) 6 1,1 (д, 6Н) ; 1,36 (д, 6Н); 2,73 (м, 1Н); 4,1 (м, 1Н); 10,9 (ушир.т, 2Н).
Вычислено, %: С 35,69; Н 6,37; N 10,41 C8H16N2OS HBr
Найдено, %: С 35,76; Н 6,51; N 10,45
В результате получен гидробромид 1 -изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины.
2. Получение соединения Т1084
1,3 г гидробромида 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины растворяют в 10 мл воды, по каплям добавляют концентрированный водный раствор аммиака до pH 8 и экстрагируют дважды диэтиловым эфиром (2x10 мл). Сушат безводным Na2S04, а затем упаривают. Выход основания 0,7 г.
Растворяют основание в 5 мл диэтилового эфира и добавляют к нему раствор 0,5 г дихлоруксусной кислоты в 3 мл диэтилового эфира. Охлаждают. Выделившийся осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана. Выход 0,8 г (68%).
T™ 67-69°С.
Вычислено, %: С 37,86; Н 5,72; N 8,83 C8Hi6N20S C2H2Cl202
Найдено, %: С 37,91 ; Н 6,09; N 9,04
В результате получают дихлорацетат 1 -изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины (соединение Т1084).
3. Определение токсичности соединения Т1084
Токсичность соединения Т1084 исследована на самцах белых беспородных мышей по тесту «острой» токсичности в возрасте 2-2,5 месяца с массой тела 22-25 г при однократном внутрибрюшинном введении (Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / под ред. А.Н. Миронова - М.: Гриф и К, 2012). Рабочие растворы Т1084 изготавливали на основе 0,9% асептического раствора хлорида натрия (Дальхимфарм, РФ). Наблюдение за животными осуществляли в течение 14 суток. Расчет показателей «острой» токсичности проводили путем пробит-анализа по методу Литчфильда-Уилкоксона.
Результаты этих исследований показали, что, как и Т1023, соединение Т1084 по ГОСТ 12.1.007-76 относится к третьему классу токсичности и опасности (умеренно токсично). Показатель его средней смертельной дозы (ЛД50) составил для мышей 447±9 мг/кг (Табл. 1).
Таблица 1 - Показатели «острой» токсичности соединений Т1084 и Т1023 для аутбредных мышей при однократном внутрибрюшинном введении
Figure imgf000007_0001
Примечание. * - ранее полученные показатели «острой» токсичности Т1023
Сопоставление показателей «острой» токсичности соединения Т1084 с соответствующими показателями для Т1023, полученными ранее на таких же животных и при таком же способе введения, показывает, что их различие в молярном выражении не превышает 10%. Это свидетельствует, что изменение солеобразующей кислоты с гидробромида на дихлорацетат значимо не изменяет токсичность солей 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины, а отличия, наблюдаемые в показателях «острой» токсичности соединений Т1023 и Т1084 при выражении в мг/кг, практически полностью определяются различиями молекулярного веса этих соединений.
Ниже приведены результаты исследования активности полученного соединения Т1084 на двух моделях: солидной карциномы Эрлиха (КЭ) и модели рака шейки матки.
4. Противоопухолевая активность соединения Т1084 на модели солидной карциномы Эрлиха (КЭ)
Целью эксперимента являлось сравнительное изучение влияния соединений Т1023, Na-ДХА (ДХА в виде натриевой соли) и Т1084 при их хроническом применении на рост солидной КЭ у мышей. Исследование выполнено на 81 самке мышей-гибридов F (СВА х C57Bl/6j) в возрасте 2-2,5 месяцев с массой тела 19-22 г, распределенных методом рандомизации в 4 экспериментальные группы: контрольную и три опытные, по 20- 21 особи в каждой. Всем животным трансплантировали КЭ по методике, описанной в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств (2012). Контрольные животные в дальнейшем не получали каких-либо экспериментальных воздействий. Животным опытных групп с 6-х по 20-е сутки роста КЭ проводили ежедневое внутрибрюшинное (в/б) введение, соответственно, Т1023, и Т1084 в эквимолярных дозах: Т1023 - 60 мг/кг; Na-ДХА - 33,6 мг/кг; Т1084 - 70,7 мг/кг. Растворы Т1023 и Т1084 изготавливали на основе 0,9% асептического раствора хлорида натрия (Дальхимфарм, РФ), растворы Na-ДХА изготавливали на основе воды для инъекций (Дальхимфарм, РФ). Противоопухолевые эффекты изучали по методике, описанной в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств (2012).
Результаты этого эксперимента показали, что при использованных схемах введения и дозах Т1023 и Na-ДХА оказывали сходное влияние на развитие КЭ (Табл. 2).
Таблица 2 - Влияние соединений Т1023, Na-ДХА и Т1084 в эквимолярных дозах на рост солидной карциномы Эрлиха у самок мышей F \ (СВА х C5-7BI/6J)
Figure imgf000008_0001
Примечания. Показатели объема нормированы на исходный объем опухолей перед началом воздействий на 6-е сутки роста. ’ и - статистически достоверное различие (р < 0,05) по Q-критерию Данна с контрольной группой (7), с группой, получавшей Т1023 (2), и с группой, получавшей Na-ДХА (5). В группах п = 20-21. Практически в течение всего срока наблюдения действие этих соединений сопровождалось статистически достоверным противоопухолевым эффектом. Максимальный противоопухолевый эффект развивался к концу первой недели применения Т1023 и Na-ДХА, и проявлялся торможением роста КЭ примерно на 40%. Но в последующем противоопухолевая эффективность соединений Т1023 и Na-ДХА прогрессивно снижалась и на поздних сроках индекс ТРО составлял 21- 24% (около 50% от максимальной эффективности).
Начальные этапы развития противоопухолевого эффекта соединения Т1084 были подобны действию Т1023. Но нарастание противоопухолевого действия Т1084 было более продолжительным и достигало максимума к 10-м суткам от начала его применения. И в эти сроки противоопухолевый эффект Т1084 на уровне статистической тенденции (р = 0,12) на 20-25% превышал эффекты Т1023 и Na- ДХА. А в дальнейшем динамика противоопухолевого действия соединения Т1084 качественно отличалась от действия Т1023 и Na-ДХА. Если на поздних сроках торможение роста КЭ под влиянием Т1023 и Na-ДХА прогрессивно ослабевало, то действие Т1084 подавляло адаптацию опухоли к такому воздействию и поддерживало до конца наблюдения стабильное торможение роста опухоли на уровне 45-50% (90-100% от максимальной эффективности). И при этом на поздних сроках противоопухолевый эффект Т1084 статистически достоверно превосходил эффекты Т1023 и Na-ДХА.
Это отражает способность соединения Т1084 реализовать оба вида фармакологической активности - NOS-ингибирующее, антиангиогенное и гипоксия-ориентированное цитотоксическое действие.
5. Противоопухолевая активность соединения Т1084 на модели рака шейки матки
Целью эксперимента являлось сравнительное изучение влияния соединений Т1023, Na-ДХА и Т1084 при их хроническом применении на рост рака шейки матки (РШМ-5) у мышей.
Исследование выполнено на 74 самках мышей-гибридов Fi (СВА х Cs7Bl/6j) в возрасте 2-2,5 месяцев с массой тела 19-22 г, распределенных методом рандомизации в 4 экспериментальные группы: контрольную и три опытные, по 18- 20 особей в каждой. Всем животным трансплантировали РШМ-5 в область латеральной поверхности правого бедра путем подкожного введения 2-106 опухолевых клеток в 0,1 мл суспензии на основе среды 199 (Пан-Эко, РФ). Контрольные животные в дальнейшем не получали каких-либо экспериментальных воздействий. Животным опытных групп с 7-х по 21-е сутки роста РШМ-5 проводили ежедневое внутрибрюшинное введение Т1023, Na-ДХА и Т1084 в эквимолярных дозах - 60, 33,6 и 70,7 мг/кг, соответственно. Противоопухолевые эффекты изучали по методике, описанной в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств (2012).
Результаты этого эксперимента показали, что использованная экспериментальная неоплазия была слабо чувствительна к действию Т1023 и Na- ДХА (Табл. 3). Кратковременный статистически достоверный противоопухолевый эффект развивался к 3-м суткам после начала применения соединений Т1023 и Na- ДХА, и проявлялся торможением роста РШМ у мышей этих групп на 30-35%.
Таблица 3 - Влияние Т1023, Na-ДХА и Т1084 в эквимолярных дозах на рост рака шейки матки РШМ-5 у самок мышей Fj (СВА х C57Bl/6j)
Figure imgf000010_0001
Примечания. Показатели объема нормированы на исходный объем опухолей перед началом воздействий на 7-е сутки роста. 1' 2 и 3 - статистически достоверное различие (р < 0,05) по Q-критерию Данна с контрольной группой (7), с группой, получавшей Т1023 (2), и с группой, получавшей Na-ДХА (3). В группах п = 18-20.
Но в последующем неоплазия стремительно приобретала практически полную резистентность к действию этих соединений. Уже через 5-7 суток от начала применения Т1023 и Na-ДХА ингибирование роста РШМ-5 резко ослабевало, и до конца наблюдения их противоопухолевые эффекты полностью отсутствовали даже на уровне статистической тенденции.
В то же время, к действию Т1084 использованная экспериментальная опухоль была вполне чувствительной, и противоопухолевые эффекты этого соединения были существенно более выраженными и стабильными в сравнении с эффектами Т1023 и Na-ДХА. К 3-5-м суткам от начала применения Т1084 торможение роста РШМ достигало 45%. И в последующем, до конца курса инъекций Т1084 (по 21-е сутки) значимой адаптации опухоли к действию Т1084 не наблюдалось - ингибирование роста РШМ стабильно сохранялось на уровне 35-40% (80-90% от максимальной эффективности). Причем, противоопухолевое действие соединения Т1084 на РШМ-5 было не только стабильным, но и долгосрочным - как показано в Табл. 3, статистически достоверный эффект сохранялся и в течение последующих 5 суток после окончания применения Т1084.
Доказательство достижения технического результата
Технический результат патентуемого изобретения заключается в обеспечении более выраженного и стабильного противоопухолевого эффекта соединения Т1084 в сравнении с аналогами - гидробромидом 1 -изобутаноил-2- изопропилизотиомочевины (соединение Т1023) и натрия дихлорацетатом (соединение Na-ДХА), а также в подавлении (или торможении) развития резистентности неоплазий.
В приведенном эксперименте (см. п.4) установлено, что сочетанное применение ингибитора NOS соединений Т1023 и Na-ДХА сопровождается более выраженным и стабильным противоопухолевым действием на солидную КЭ мышей и подавляет развитие резистентности карциномы к действию Т1023 и Na-ДХА. Полученный результат свидетельствует, что два однонаправленных (противоопухолевых) вида фармакологической активности - ХОБ-ингибирующее антиангиогенное действие Т1023 и PDK1 -ингибирующее гипоксия- ориентированное цитотоксическое действие ДХА, способны к фармакодинамическому синергическому взаимодействию. И в этой связи, сочетание этих видов фармакологической активности, реализуемых по различным механизмам, является перспективным подходом для разработки эффективных комплексных средств и методов таргетной терапии онкологических заболеваний. В токсикологических исследованиях установлено (см. п.З), что замена солеобразующей кислоты с гидробромида (Т1023) на дихлорацетат (Т1084) не изменяет «острую» токсичность солей 1-изобутаноил-2-изоприлизотиомочевины, и, формально, не повышает риски негативных эффектов в случае применения Т1084 в качестве лекарственного средства. При этом в исследованиях на двух опухолевых моделях - солидной карциноме Эрлиха (см. п. 4) и раке шейки матки РШМ-5 (см. п.5) у мышей соединение Т1084 проявляло существенно более выраженную и стабильную противоопухолевую активность в сравнении с Т1023 и Na-ДХА. На обеих опухолевых моделях хроническое воздействие Т1023 и Na-ДХА сопровождалось развитием резистентности опухолей к их действию.
В целом, на обеих использованных опухолевых моделях действие соединения Т1084 качественно воспроизводило эффекты, наблюдавшиеся при сочетанном применении рассмотренных соединений Т1023 и Na-ДХА. Следовательно, соединение, содержащее в качестве действующего вещества дихлорацетат 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины, можно рассматривать как комбинированное средство таргетной терапии злокачественных новообразований, что открывает новые возможности для разработки более эффективных фармакологических противоопухолевых средств.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований, содержащее в качестве действующего вещества дихлорацетат 1 -изобутаноил-2- изопропилизотиомочевины со структурной формулой:
Figure imgf000013_0001
2. Средство по п. 1, характеризующееся тем, что обладает NOS- ингибирующей и PDK1 -ингибирующей активностью, и оказывает антиангиогенное и гипоксия-ориентированное цитотоксическое действие при дозах действующего вещества 10-100 мг/кг.
3. Средство по п.п.1 или 2, характеризующееся тем, что содержит 0,1-10% действующего вещества в составе растворов для инъекций или инфузий.
4. Средство по п.п.1 или 2, характеризующееся тем, что содержит 1-50 мг действующего вещества в составе твердых лекарственных форм.
5. Средство по любому из п.п.1 -4, характеризующееся тем, что применяется при дозах действующего вещества 10-100 мг/кг в качестве монотерапии или в составе фармацевтической композиции для химиотерапии, или в сочетании с лучевой терапией.
PCT/RU2019/000703 2018-10-05 2019-10-02 Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований WO2020071961A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EA202100103A EA202100103A1 (ru) 2018-10-05 2019-10-02 Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2018135078 2018-10-05
RU2018135078A RU2699558C2 (ru) 2018-10-05 2018-10-05 Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2020071961A1 true WO2020071961A1 (ru) 2020-04-09

Family

ID=65013896

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2019/000703 WO2020071961A1 (ru) 2018-10-05 2019-10-02 Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований

Country Status (3)

Country Link
EA (1) EA202100103A1 (ru)
RU (1) RU2699558C2 (ru)
WO (1) WO2020071961A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2751776C2 (ru) * 2020-09-15 2021-07-16 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России) Комплексное противоопухолевое средство

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2733883C2 (ru) * 2020-04-15 2020-10-07 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России) Радиозащитное фармакологическое средство

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009067767A2 (en) * 2007-11-26 2009-06-04 Katholieke Universiteit Leuven Targeted radiotherapy
RU2475479C1 (ru) * 2011-12-23 2013-02-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации "Медицинский радиологический научный центр" (ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России) Вазоконстрикторное средство
RU2503450C1 (ru) * 2012-04-19 2014-01-10 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение "Медицинский Радиологический Научный Центр" Министерства Здравоохранения и Социального Развития Российской Федерации (ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России) Противоопухолевое средство
WO2018031407A1 (en) * 2016-08-07 2018-02-15 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Methods of detecting and treating a tumor expressing pt346 pdk1

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH09504278A (ja) * 1944-06-01 1997-04-28 ザ、ウェルカム、ファンデーション、リミテッド Ｎｏシンターゼインヒビターとしての置換尿素およびイソチオ尿素誘導体
RU2034543C1 (ru) * 1993-05-18 1995-05-10 Леонидов Николай Борисович Противоопухолевое средство
RU2066181C1 (ru) * 1994-06-02 1996-09-10 Онкологический научный центр им. Н.Н.Блохина Противоопухолевое средство

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009067767A2 (en) * 2007-11-26 2009-06-04 Katholieke Universiteit Leuven Targeted radiotherapy
RU2475479C1 (ru) * 2011-12-23 2013-02-20 Федеральное государственное бюджетное учреждение Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации "Медицинский радиологический научный центр" (ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России) Вазоконстрикторное средство
RU2503450C1 (ru) * 2012-04-19 2014-01-10 Федеральное Государственное Бюджетное Учреждение "Медицинский Радиологический Научный Центр" Министерства Здравоохранения и Социального Развития Российской Федерации (ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России) Противоопухолевое средство
WO2018031407A1 (en) * 2016-08-07 2018-02-15 The Wistar Institute Of Anatomy And Biology Methods of detecting and treating a tumor expressing pt346 pdk1

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KUMAR A. ET AL.: "Antitumor and chemosensitizing action of dichloroacetate implicates modulation of tumor microenvironment: A role of reorganized glucose metabolism, cell survival regulation and macrophage differentiation", TOXICOLOGY AND APPLIED PHARMACOLOGY, vol. 273, no. 1, 2013, pages 196 - 208, XP028771494, DOI: 10.1016/j.taap.2013.09.005 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2751776C2 (ru) * 2020-09-15 2021-07-16 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр радиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России) Комплексное противоопухолевое средство

Also Published As

Publication number Publication date
RU2018135078A (ru) 2019-01-15
RU2699558C2 (ru) 2019-09-06
RU2018135078A3 (ru) 2019-04-01
EA202100103A1 (ru) 2021-11-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2828177T3 (es) Procedimiento para el tratamiento de tumor, composición farmacéutica y botiquín
RU2605335C2 (ru) Комбинированная терапия противоопухолевым алкалоидом
JP2017511360A5 (ru)
RU2017117413A (ru) Пролекарства карбидопа и l-dopa и их применение для лечения болезни паркинсона
JP2014508804A5 (ru)
JP2019515908A5 (ru)
AU2020391220A1 (en) Combination therapy involving diaryl macrocyclic compounds
RU2012135698A (ru) Способ и композиция
WO2020071961A1 (ru) Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований
ES2385850T3 (es) Potenciador de radioterapia
US11219633B2 (en) Nucleobase analogue derivatives and their applications
JP2014530181A5 (ru)
EA024038B1 (ru) Производные нитрила, их использование в фармацевтических целях и в композициях
EP3400942B1 (en) Use of quinoline derivatives for treating oesophageal cancer and treatment method, pharmaceutical composition and kit thereof
ES2953005T3 (es) Tratamiento para el cáncer
RU2334517C2 (ru) Средство, потенцирующее противоопухолевый эффект, и противоопухолевое средство
ES2877809T3 (es) Terapia combinada para enfermedades proliferativas
MXPA06014477A (es) Agente antitumor, fortificador de efecto antitumor y metodo de terapia para cancer.
RU2503450C1 (ru) Противоопухолевое средство
EP1206256A2 (en) Combination therapy using pentafluorobenzenesulfonamide and platin compound
ES2671730T3 (es) Terapia de combinación para el cáncer de ovario
EA043643B1 (ru) Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований
JP2010530411A (ja) 白金（ｉｖ）錯体
WO2002039958A9 (en) Combination therapy using pentafluorobenzenesulfonamides and antineoplastic agents
ES2747073T3 (es) Combinación de RO5503781, capecitabina y oxaliplatino para el tratamiento del cáncer

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 19869607

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 19869607

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1