EA043643B1 - Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований - Google Patents
Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований Download PDFInfo
- Publication number
- EA043643B1 EA043643B1 EA202100103 EA043643B1 EA 043643 B1 EA043643 B1 EA 043643B1 EA 202100103 EA202100103 EA 202100103 EA 043643 B1 EA043643 B1 EA 043643B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- dca
- antitumor
- compound
- growth
- tumor
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 13
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 13
- 238000002626 targeted therapy Methods 0.000 title claims description 6
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 title 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 37
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims description 15
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 claims description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 7
- 230000001772 anti-angiogenic effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 4
- NTVZGMWLWFIGHY-UHFFFAOYSA-N 2,2-dichloroacetic acid propan-2-yl N-(2-methylpropanoyl)carbamimidothioate Chemical compound ClC(C(=O)O)Cl.C(C(C)C)(=O)NC(SC(C)C)=N NTVZGMWLWFIGHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 3
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 claims description 3
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 claims description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims 4
- 101000600756 Homo sapiens 3-phosphoinositide-dependent protein kinase 1 Proteins 0.000 claims 1
- 101001117146 Homo sapiens [Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase isozyme 1, mitochondrial Proteins 0.000 claims 1
- 102100024148 [Pyruvate dehydrogenase (acetyl-transferring)] kinase isozyme 1, mitochondrial Human genes 0.000 claims 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 claims 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 claims 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 claims 1
- 239000007909 solid dosage form Substances 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 29
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 28
- JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N dichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)Cl JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 14
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 12
- 238000011161 development Methods 0.000 description 11
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 11
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 9
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 8
- 206010008342 Cervix carcinoma Diseases 0.000 description 7
- 208000006105 Uterine Cervical Neoplasms Diseases 0.000 description 7
- 201000010881 cervical cancer Diseases 0.000 description 7
- 230000009471 action Effects 0.000 description 6
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 description 6
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 description 6
- 229940120124 dichloroacetate Drugs 0.000 description 6
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 6
- 230000009826 neoplastic cell growth Effects 0.000 description 6
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 6
- 239000004037 angiogenesis inhibitor Substances 0.000 description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 5
- 230000001146 hypoxic effect Effects 0.000 description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 208000037839 Solid Ehrlich Carcinoma Diseases 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- TVCUKDYXRQAELD-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n'-(2-methylpropanoyl)carbamimidothioate;hydrobromide Chemical compound Br.CC(C)SC(N)=NC(=O)C(C)C TVCUKDYXRQAELD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002138 L01XE21 - Regorafenib Substances 0.000 description 3
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 3
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 description 3
- FNHKPVJBJVTLMP-UHFFFAOYSA-N regorafenib Chemical compound C1=NC(C(=O)NC)=CC(OC=2C=C(F)C(NC(=O)NC=3C=C(C(Cl)=CC=3)C(F)(F)F)=CC=2)=C1 FNHKPVJBJVTLMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960004836 regorafenib Drugs 0.000 description 3
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 2
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 229960005215 dichloroacetic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 239000005526 vasoconstrictor agent Substances 0.000 description 2
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 2
- NAMYKGVDVNBCFQ-UHFFFAOYSA-N 2-bromopropane Chemical compound CC(C)Br NAMYKGVDVNBCFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonium chloride Substances [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010007559 Cardiac failure congestive Diseases 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000001333 Colorectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 206010052358 Colorectal cancer metastatic Diseases 0.000 description 1
- 101710112752 Cytotoxin Proteins 0.000 description 1
- 206010014513 Embolism arterial Diseases 0.000 description 1
- 206010018001 Gastrointestinal perforation Diseases 0.000 description 1
- 208000032612 Glial tumor Diseases 0.000 description 1
- 206010018338 Glioma Diseases 0.000 description 1
- 206010019280 Heart failures Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010020802 Hypertensive crisis Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Chemical compound CC(C)CC(C)=O NTIZESTWPVYFNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N Methyl isobutyl ketone Natural products CCC(C)C(C)=O UIHCLUNTQKBZGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229940123921 Nitric oxide synthase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010033128 Ovarian cancer Diseases 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229940124611 PDK1 inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 208000015634 Rectal Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000011047 acute toxicity test Methods 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000003851 biochemical process Effects 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000003034 chemosensitisation Effects 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 1
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-M dichloroacetate Chemical compound [O-]C(=O)C(Cl)Cl JXTHNDFMNIQAHM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 230000034659 glycolysis Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 231100001228 moderately toxic Toxicity 0.000 description 1
- QDAGIMDDJUTAFV-UHFFFAOYSA-N n-carbamothioyl-2-methylpropanamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC(N)=S QDAGIMDDJUTAFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000004235 neutropenia Diseases 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 239000000236 nitric oxide synthase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000002611 ovarian Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000035778 pathophysiological process Effects 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000007425 progressive decline Effects 0.000 description 1
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- FFEXVKGHYSOYKM-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl N'-(2-methylpropanoyl)carbamimidothioate Chemical class CC(C)SC(N)=NC(=O)C(C)C FFEXVKGHYSOYKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003909 protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000011127 radiochemotherapy Methods 0.000 description 1
- 206010038038 rectal cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000001275 rectum cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000000250 revascularization Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229940080263 sodium dichloroacetate Drugs 0.000 description 1
- LUPNKHXLFSSUGS-UHFFFAOYSA-M sodium;2,2-dichloroacetate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C(Cl)Cl LUPNKHXLFSSUGS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002110 toxicologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000723 toxicological property Toxicity 0.000 description 1
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 1
- 230000005748 tumor development Effects 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- 239000008215 water for injection Substances 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Description
Область техники
Изобретение относится к новым лекарственным средствам, которые обладают комплексным антиангиогенным и гипоксия-ориентированным цитотоксическим действием и могут найти применение в качестве средств таргетной терапии солидных злокачественных новообразований.
Предшествующий уровень техники
Проблема разработки эффективных средств для лечения онкологических заболеваний остается высоко актуальной для всего мирового сообщества. Так, в Российской Федерации в настоящее время на учёте с различными онкологическими заболеваниями состоит около 3,3 миллионов больных, нуждающихся в эффективном лечении. Но, несмотря на существенные успехи онкологии последних десятилетий, многие распространенные онкологические заболевания, по-прежнему, с трудом поддаются лечению. Например, рак молочной железы, ежегодно поражающий свыше 65 тысяч женщин в России, становится причиной смерти 35% заболевших, а летальность рака легких, которым ежегодно заболевает около 60 тысяч россиян, достигает 85% (Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова В.Г. Злокачественные новообразования в России в 2015 году (заболеваемость и смертность) - М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ НМИРЦ МЗ РФ, 2017).
По мнению многих специалистов, изменение сложившейся картины в лечении онкологических заболеваний возможно лишь с внедрением в клиническую практику эффективных таргетных противоопухолевых средств, в частности, антиангиогенных, мишенью воздействия которых являются биохимические и патофизиологические процессы, специфичные для всех злокачественных новообразований или для их определенных видов (Willett C.G., Duda D.G., di Tomaso E. et al. Complete pathological response to bevacizumab and chemoradiation in advanced rectal cancer. Nat. Clin. Pract. Oncol. 2007. 4(5): 316-21; Lein S., Lawman H.B. Therapeutic anti-VEFG antibodies. Handb. Exp. Pharmacol. 2008. 181: 131-50).
Так, известен регорафениб, ингибитор протеинкиназ, применяющийся в таргетной терапии колоректального рака (Grothey A., Van Cutsem Е., Sobrero A. et al. Regorafenib monotherapy for previously treated metastatic colorectal cancer (CORRECT): an international, multicenter, randomized, placebo-controlled, phase 3 trial. Lancet. 2013. 381(9863): 303-12).
Недостатком регорафениба, как и других антиангиогенных средств, является прогрессивное ослабевание противоопухолевого эффекта вследствие развития резистентности опухоли к его воздействию. Так, по данным клинических исследований увеличение периода выживания онкологических больных за счет применении антиангиогенных средств не превышает 1 года, а длительное подавление роста опухолей при монотерапии такими препаратами наблюдается крайне редко; Frandsen S., Kopp S., Wehland M. et al. Latest results for anti-angiogenic drugs in cancer treatment. Curr. Pharm. Des. 2016. 22(39): 5927-42).
Известен бевацизумаб, таргетный препарат, содержащий рекомбинантные моноклональные IgG1 антитела, для лечения метастатического колоректального, овариального и других видов рака.
Недостатками бевацизумаба являются значительные ограничения к применению, связанные с побочными явлениями (перфорация ЖКТ, трудности при заживлении ран, кровоизлияние, артериальная тромбоэмболия, гипертензивный криз, обратимый лейкоэнцефалопатический синдром, нейтропения и инфекция, нефротический синдром, застойная сердечная недостаточность), а также его неспособность увеличивать общую выживаемость пациентов (Rossi L., Verrico M., Zaccarelli E., Papa A., Colonna M., Strudel М., Vici P., Bianco V., Tomao F. Bevacizumab in ovarian cancer: A critical review of phase III studies. Oncotarget. 2017 Feb 14; 8(7): 12389-12405).
Известно Противоопухолевое средство по патенту RU 2503450 С1, ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, 10.01.2014). Средство является эффективным ингибитором NOS, вызывает выраженное подавление роста и метастазирования ряда перевиваемых опухолей животных, обусловленное, главным образом, антиангиогенным, гипоксическим действием, на фоне которого снижается пролиферация и усиливается апоптоз опухолевых клеток.
Недостатки: противоопухолевый эффект указанного средства реализуется преимущественно на раннем этапе развития опухоли. Поскольку весь молекулярный аппарат, участвующий в ангиогенезе, остаётся сохранным при действии этого средства, то его отмена сопровождается быстрой реваскуляризацией и возобновлением роста опухоли (Филимонова М.В., Южаков В.В., Шевченко Л.И. и др. Экспериментальное исследование противоопухолевой активности нового ингибитора синтаз оксида азота Т1023. Молек. мед. 2015. (1): 61-64).
Прототипом патентуемого изобретения является Вазоконстрикторное средство (RU 2475479C1, ФГБУ МРНЦ Минздравсоцразвития России, 20.02.2013) с общей структурной формулой XNH9 (CHA>CHCON=C 2 3 2 I . HBr
SR где R = (CH3)2CH;
гидробромид 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины (далее - соединение Т1023). Т1023 является эффективным ингибитором NOS, вызывает выраженное вазоконстрикторное действие, способное создавать гипоксию в биологических тканях, в том числе в тканях опухоли.
- 1 043643
Недостатком прототипа является снижение его противоопухолевой эффективности в отдаленные сроки после его воздействия, что проявляется развитием гипоксической резистентности экспериментальных неоплазий: прогрессивным снижением активности апоптоза опухолевых клеток, ослаблением ингибирования роста опухолей и усилением их рецидивирующего роста.
Технический результат изобретения заключается в создании нового противоопухолевого средства, обладающего большей продолжительностью и выраженностью противоопухолевого действия, а также способного подавлять (или тормозить) развитие резистентности неоплазий.
Проведенные нами исследования подтверждают мнение ряда авторов, что одним из перспективных путей для преодоления гипоксической резистентности неоплазий является применение дихлорацетата в виде соли натрия (Na-ДХА), который является ингибитором PDK1 и обладает свойствами гипоксияориентированного цитотоксина. В ряде экспериментальных работ показана способность Na-ДХА подавлять развитие гипоксической резистентности опухолей на фоне терапии некоторыми фармакопейными антиангиогенными средствами (Кобляков В.А. Гипоксия и гликолиз как возможные объекты противоопухолевого воздействия. Успехи молек. онкол. 2014, 2: 44-49; Duan Y., Zhao X., Ren W. et al. Antitumor activity of dichloroacetate on C6 glioma cell: in vitro and in vivo evaluation. Onco. Targets Ther. 2013. 6: 18998; Kumar A., Kant S., Singh S. Antitumor and chemosensitizing action of dichloracetate implicates modulation of tumor microenvironment: A role of reorganized glucose metabolism, cell survival regulation and macrophage differentiation. Toxicol. Appl. Pharmacol. 2013. 273(1): 196-208; Kumar K, Wigfield S, Gee HE, et al. Dichloroacetate reverses the hypoxic adaptation to bevacizumab and enhances its antitumor effects in mouse xenografts. J. Mol. Med. (Berl). 2013. 91(6): 749-58).
Раскрытие изобретения
Авторами показана целесообразность и перспективность совмещения Na-ДХА и соединения Т1023 в виде нового средства для лечения онкологических заболеваний.
Сущностью технического решения, включающего гидробромид 1-изобутаноил-2-изопропилизотио мочевины и применение дихлорацетата, является синтез дихлорацетата 1-изобутаноил-2-изопропилизо тиомочевины (далее в тексте - соединение Т1084) и применение этого соединения в качестве действующего вещества противоопухолевых средств.
Лучший вариант осуществления изобретения
Химический синтез соединения Т1084, которое получают из соединения Т1023, токсикологические свойства и противоопухолевая активность, а также достижение заявленного технического результата подробно описаны ниже.
Этап 1. Получение соединения Т1023.
Смесь 6 г (40 ммоль) изобутаноилтиомочевины, 9,8 г (80 ммоль) изопропилбромида и 15 мл сухого ацетонитрила в запаянной ампуле нагревают на кипящей водяной бане в течение 20 часов. Растворитель упаривают, остаток отфильтровывают и перекристаллизовывают из 4-метил-2-пентанона. Выход 3,6 г (33%). Тпл 129-131°С. Спектр ПМР (DMSO-d6) δ 1,1 (д, 6Н); 1,36 (д, 6Н); 2,73 (м, 1H); 4,1 (м, 1H); 10,9 (ушир.т, 2Н).
Вычислено, %: С 35,69; Н 6,37; N 10,41 C8H16N2OS-HBr.
Найдено, %: С 35,76; Н 6,51; N 10,45.
В результате получен гидробромид 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины.
Этап 2. Получение соединения Т1084.
1,3 г гидробромида 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины растворяют в 10 мл воды, по каплям добавляют концентрированный водный раствор аммиака до рН 8 и экстрагируют дважды диэтиловым эфиром (2x10 мл). Сушат безводным Na2SO4, а затем упаривают. Выход основания 0,7 г.
Растворяют основание в 5 мл диэтилового эфира и добавляют к нему раствор 0,5 г дихлоруксусной кислоты в 3 мл диэтилового эфира. Охлаждают. Выделившийся осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из гексана. Выход 0,8 г (68%). Тпл 67-69°С.
Вычислено, %: С 37,86; Н 5,72; N 8,83 C8H16N2OS-C2H2Cl2O2.
Найдено, %: С 37,91; Н 6,09; N 9,04.
В результате получают дихлорацетат 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины (соединение Т1084).
Токсическая характеристика соединения Т1084.
Токсичность соединения Т1084 исследована на самцах белых беспородных мышей по тесту острой токсичности в возрасте 2-2,5 месяца с массой тела 22-25 г при однократном внутрибрюшинном введении (Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / под ред. А.Н. Миронова - М.: Гриф и К, 2012). Рабочие растворы Т1084 изготавливали на основе 0,9% асептического раствора хлорида натрия (Дальхимфарм, РФ). Наблюдение за животными осуществляли в течение 14 суток. Расчет показателей острой токсичности проводили путем пробит-анализа по методу Литчфильда-У илкоксона.
Результаты этих исследований показали, что, как и Т1023, соединение Т1084 по ГОСТ 12.1.007-76 относится к третьему классу токсичности и опасности (умеренно токсично). Показатель его средней
- 2 043643 смертельной дозы (ЛД50) составил для мышей 447±9 мг/кг (табл. 1).
Таблица 1
Показатели острой токсичности соединений Т1084 и Т1023 для аутбредных мышей при однократном внутрибрюшинном введении
Соединение | ЛД16 | ЛД50 | лд84 | |||
мг/кг | ммоль/л | мг/кг | ммоль/л | мг/кг | ммоль/л | |
Т1084 | 330 | 1,04 | 447±9 | 1,41 | 613 | 1,93 |
Т1023* | 272 | 1,01 | 410±11 | 1,52 | 552 | 2,04 |
Примечание: * - ранее полученные показатели острой токсичности Т1023
Сопоставление показателей острой токсичности соединения Т1084 с соответствующими показателями для Т1023, полученными нами ранее на таких же животных и при таком же способе введения, показывает, что их различие в молярном выражении не превышает 10%. Это свидетельствует, что изменение солеобразующей кислоты с гидробромида на дихлорацетат значимо не изменяет токсичность солей 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины, а отличия, наблюдаемые в показателях острой токсичности Т1023 и Т1084 при выражении в мг/кг, практически полностью определяются различиями молекулярного веса этих соединений.
Ниже приведены результаты исследования активности полученного соединения Т1084 на двух опухолевых моделях: солидной карциноме Эрлиха (КЭ) и раке шейки матки (РШМ-5) у мышей.
Пример 1. Противоопухолевая активность соединения Т1084 на модели солидной карциномы Эрлиха (КЭ).
Целью эксперимента являлось сравнительное изучение влияния Т1023, Na-ДХА (ДХА в виде натриевой соли) и Т1084 при их хроническом применении на рост солидной КЭ у мышей.
Исследование выполнено на 81 самке мышей-гибридов F1 (CBA х C57Bl/6j) в возрасте 2-2,5 месяцев с массой тела 19-22 г, распределенных методом рандомизации в 4 экспериментальные группы: контрольную и три опытные, по 20-21 особи в каждой. Всем животным трансплантировали КЭ по методике, описанной в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств (2012). Контрольные животные в дальнейшем не получали каких-либо экспериментальных воздействий. Животным опытных групп с 6-х по 20-е сутки роста КЭ проводили ежедневое в/б введение, соответственно, Т1023, и Т1084 в эквимолярных дозах: Т1023 - 60 мг/кг; Na-ДХА - 33,6 мг/кг; Т1084 - 70,7 мг/кг. Растворы Т1023 и Т1084 изготавливали на основе 0,9% асептического раствора хлорида натрия (Дальхимфарм, РФ), растворы Na-ДХА изготавливали на основе воды для инъекций (Дальхимфарм, РФ). Противоопухолевые эффекты изучали по методике, описанной в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств (2012).
Результаты этого эксперимента показали, что при использованных схемах введения и дозах Т1023 и Na-ДХА оказывали сходное влияние на развитие КЭ (табл. 2). Практически в течение всего срока наблюдения действие этих соединений сопровождалось статистически достоверным противоопухолевым эффектом. Максимальный противоопухолевый эффект развивался к концу первой недели применения Т1023 и Na-ДХА, и проявлялся торможением роста КЭ примерно на 40%. Но в последующем противоопухолевая эффективность Т1023 и Na-ДХА прогрессивно снижалась и на поздних сроках индекс ТРО составлял 21-24% (около 50% от максимальной эффективности).
Таблица 2
Влияние Т1023, Na-ДХА и Т1084 в эквимолярных дозах на рост солидной карциномы Эрлиха у самок мышей F1 (CBA х C57Bl/6j)
Время роста опухоли, сутки | Средний объем опухоли (К), отн. ед. (Μ ± σ); индекс ТРО, % | ||||||
Контроль | Т1023, 60 мг/кг в/б ежедневно | Na-ДХА, 33,6 мг/кг в/б ежедневно | T1084, 70,7 мг/кг в/б ежедневно | ||||
V | V | ТРО | V | ТРО | V | ТР О | |
6 | 1,о | 1,о | 0 | 1,о | 0 | 1,0 | 0 |
9 | 3,7 ± 1,3 | 2,3 ± 0,8 1 | 37 | 2,7 ± 0,8 | 26 | 2,4 ±0,5 1 | 35 |
12 | 8,7 ±3,7 | 5,1 ± 1,41 | 41 | 5,8 ± 1,8 1 | 33 | 5,3 ± 1,41 | 39 |
14 | 13,4 ±4,6 | 8,3 ± 2,2 1 | 38 | 7,7 ±2,2 1 | 42 | 7,1 ± 1,8 1 | 47 |
16 | 18,8 ±5,3 | 12,1 ±4,3 1 | 36 | 11,3 ±3,3 1 | 40 | 9,3 ± 2,0 х | 51 |
19 | 27,3 ± 6,2 | 19,8 ±5,0 1 | 27 | 19,2 ± 3,91 | 30 | 14,2 ±3,9 123 | 48 |
21 | 33,5 ±6,7 | 26,6 ± 5,9 1 | 21 | 25,6 ± 5,01 | 24 | 18,2 ±4,6 123 | 46 |
Примечания. Показатели объема нормированы на исходный объем опухолей перед началом воздействий на 6-е сутки роста. 1,2 и 3 - статистически достоверное различие (р < 0,05) по Q-критерию Данна с контрольной группой (1), с группой, получавшей Т1023 (2), и с группой, получавшей Na-ДХА (3). В группах n = 20-21.
- 3 043643
Начальные этапы развития противоопухолевого эффекта соединения Т1084 были подобны действию Т1023. Но нарастание противоопухолевого действия Т1084 было более продолжительным и достигало максимума к 10-м суткам от начала его применения. И в эти сроки противоопухолевый эффект Т1084 на уровне статистической тенденции (р = 0,12) на 20-25% превышал эффекты Т1023 и Na-ДХА. А в дальнейшем динамика противоопухолевого действия соединения Т1084 качественно отличалась от действия Т1023 и Na-ДХА. Если на поздних сроках торможение роста КЭ под влиянием Т1023 и NaДХА прогрессивно ослабевало, то действие Т1084 подавляло адаптацию опухоли к такому воздействию и поддерживало до конца наблюдения стабильное торможение роста опухоли на уровне 45-50% (90100% от максимальной эффективности). И при этом на поздних сроках противоопухолевый эффект Т1084 статистически достоверно превосходил эффекты Т1023 и Na-ДХА.
Это отражает способность соединения Т1084 реализовать оба вида фармакологической активности NOS-ингибирующее, антиангиогенное и гипоксия-ориентированное цитотоксическое действие.
Пример 2. Противоопухолевая активность соединения Т1084 на модели рака шейки матки.
Целью эксперимента являлось сравнительное изучение влияния Т1023, Na-ДХА и Т1084 при их хроническом применении на рост рака шейки матки (РШМ-5) у мышей.
Исследование выполнено на 74 самках мышей-гибридов F1 (CBA х C57Bl/6j) в возрасте 2-2,5 месяцев с массой тела 19-22 г, распределенных методом рандомизации в 4 экспериментальные группы: контрольную и три опытные, по 18-20 особей в каждой. Всем животным трансплантировали РШМ-5 в область латеральной поверхности правого бедра путем подкожного введения 2-106 опухолевых клеток в 0,1 мл суспензии на основе среды 199 (Пан-Эко, РФ). Контрольные животные в дальнейшем не получали каких-либо экспериментальных воздействий. Животным опытных групп с 7-х по 21-е сутки роста РШМ5 проводили ежедневое в/б введение Т1023, Na-ДХА и Т1084 в эквимолярных дозах - 60, 33,6 и 70,7 мг/кг, соответственно. Противоопухолевые эффекты изучали по методике, описанной в Руководстве по проведению доклинических исследований лекарственных средств (2012).
Результаты этого эксперимента показали, что использованная экспериментальная неоплазия была слабо чувствительна к действию Т1023 и Na-ДХА (Табл. 3). Кратковременный статистически достоверный противоопухолевый эффект развивался к 3-м суткам после начала применения соединения Т1023 и Na-ДХА, и проявлялся торможением роста РТТТМ у мышей этих групп на 30-35%. Но в последующем неоплазия стремительно приобретала практически полную резистентность к действию этих соединений. Уже через 5-7 суток от начала применения Т1023 и Na-ДХА ингибирование роста РШМ-5 резко ослабевало, и до конца наблюдения их противоопухолевые эффекты полностью отсутствовали даже на уровне статистической тенденции.
Таблица 3
Влияние Т1023, Na-ДХА и Т1084 в эквимолярных дозах на рост рака шейки матки РШМ-5 у самок мышей F1 (CBA х C57Bl/6j)
Время роста опухоли, | Средний объем опухоли (С), отн. ед. (Μ ± σ); индекс ТРО, % | ||||||
Контроль | Т1023, 60 мг/кг в/б ежедневно | Na-ДХА, 33,6 мг/кг в/б ежедневно | Т1084, 70,7 мг/кг в/б ежедневно | ||||
сутки | V | V | ТРО | V | ТРО | V | ТРО |
7 | 1,0 | 1,0 | 0 | 1,0 | 0 | 1,0 | 0 |
9 | 2,2 ± 0,6 | 1,4 ±0,2 1 | 36 | 1,5 ±0,5 1 | 32 | 1,2 ± 0,2 1 | 45 |
12 | 5,5 ± 1,9 | 4,0 ± 1,7 | 27 | 5,2 ±4,4 | 5 | 3,1 ± 1,1 1 | 44 |
14 | 9,9 ±4,4 | 8,5 ±4,0 | 14 | 10,3 ± 5,8 | 0 | 6,4 ± 2,2 | 35 |
16 | 15,0 ±6,8 | 12,5 ±4,9 | 17 | 14,0 ± 8,1 | 7 | 9,0 ± 2,7 | 40 |
19 | 19,8 ±8,1 | 18,6 ± 9,7 | 6 | 20,9 ± 9,8 | 0 | 12,1 ±3,5 13 | 39 |
21 | 28,2 ± 8,9 | 28,4 ± 12,4 | 0 | 28,7 ± 11,6 | 0 | 18,0 ±4,2 1 | 36 |
23 | 34,4 ± 10,3 | 32,7 ± 9,4 | 5 | 31,0± 11,8 | 10 | 23,4 ±5,7 12 | 32 |
26 | 51,1 ± 14,0 | 50,0 ± 12,6 | 2 | 50,4 ± 18,6 | 1 | 35,9 ±9,0 12 | 30 |
Примечания. Показатели объема нормированы на исходный объем опухолей перед началом воздействий на 7-е сутки роста. 1,2 и 3 - статистически достоверное различие (р < 0,05) по Q-критерию Данна с контрольной группой (1), с группой, получавшей Т1023 (2), и с группой, получавшей Na-ДХА (3). В группах n = 18-20.
В то же время, к действию Т1084 использованная экспериментальная опухоль была вполне чувствительной, и противоопухолевые эффекты этого соединения были существенно более выраженными и стабильными в сравнении с эффектами Т1023 и Na-ДХА. К 3-5-м суткам от начала применения Т1084 торможение роста РШМ достигало 45%. И в последующем, до конца курса инъекций Т1084 (по 21-е сутки) значимой адаптации опухоли к действию Т1084 не наблюдалось - ингибирование роста РШМ стабильно сохранялось на уровне 35-40% (80-90% от максимальной эффективности). Причем, противоопухолевое действие соединения Т1084 на РШМ-5 было не только стабильным, но и долгосрочным - как
- 4 043643 показано в табл. 3, статистически достоверный эффект сохранялся и в течение последующих 5 суток после окончания применения Т1084.
Доказательство достижения технического результата.
Заявленный технический результат предлагаемого изобретения заключается в обеспечении более выраженного и стабильного противоопухолевого эффекта соединения Т1084 в сравнении с прототипами - гидробромидом 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины (соединение Т1023) и натрия дихлорацетатом (Na-ДХА), а также в подавлении (или торможении) развития резистентности неоплазий.
В токсикологических исследованиях установлено, что замена солеобразующей кислоты с гидробромида (Т1023) на дихлорацетат (Т1084) не изменяет острую токсичность солей 1-изобутаноил-2изоприлизотиомочевины, и, формально, не повышает риски негативных эффектов в случае применения Т1084 в качестве лекарственного средства. При этом в исследованиях на двух опухолевых моделях - солидной карциноме Эрлиха (КЭ; см. пример 1) и раке шейки матки (РШМ-5; см. пример 2) у мышей соединение Т1084 проявляло существенно более выраженную и стабильную противоопухолевую активность в сравнении с Т1023 и Na-ДХА. На обеих опухолевых моделях хроническое воздействие Т1023 и Na-ДХА сопровождалось развитием резистентности опухолей к их действию.
Следовательно, соединение Т1084 - дихлорацетат 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины можно рассматривать как комбинированное средство таргетной терапии злокачественных новообразований, что позволяет создать новые возможности для разработки более эффективных фармакологических противоопухолевых средств.
Claims (5)
- ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ1. Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований, содержащее в качестве действующего вещества дихлорацетат 1-изобутаноил-2-изопропилизотиомочевины со структурной формулой:О ОA γ ^Ν^ ΝΗ/но γi. ci
- 2. Средство по п.1, характеризующееся тем, что обладает NOS-ингибирующей и PDK1ингибирующей активностью и оказывает антиангиогенное и гипоксия-ориентированное цитотоксическое действие.
- 3. Средство по π. 1 или 2, характеризующееся тем, что содержит 0,1-10% действующего вещества в составе растворов для инъекций или инфузий.
- 4. Средство по π. 1 или 2, характеризующееся тем, что содержит 1-50 мг действующего вещества в составе твердых лекарственных форм.
- 5. Применение средства по пп. 1-4 для таргетной терапии злокачественных новообразований в дозах действующего вещества 10/100 мг/кг в сутки в качестве монотерапии или в сочетании с химиотерапией или лучевой терапией.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018135078 | 2018-10-05 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
EA043643B1 true EA043643B1 (ru) | 2023-06-07 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
ES2828177T3 (es) | Procedimiento para el tratamiento de tumor, composición farmacéutica y botiquín | |
ES2959419T3 (es) | Formulaciones secas por aspersión | |
ES2790414T3 (es) | Terapia de combinación con un inhibidor de topoisomerasa | |
KR20180054657A (ko) | Dna 손상제 및 atr 저해제의 병용물을 사용한 암 치료 방법 | |
JP2017511360A5 (ru) | ||
TW201625240A (zh) | 醫藥組成物 | |
RU2013108857A (ru) | Соединения для лечения/профилактики воспалительных глазных заболевний | |
RU2012135698A (ru) | Способ и композиция | |
US20220117935A1 (en) | Carbazole derivatives for the treatment of fibrotic diseases and related symptoms, and conditions thereof | |
EA038323B1 (ru) | Комбинация из дексаметазона и edo-s101 для лечения гематологического рака | |
US20170105984A1 (en) | Cancer stem cell proliferation inhibitor and intracellular active oxygen accumulation inducer | |
RU2013136895A (ru) | Новое бициклическое соединение или его соль | |
RU2699558C2 (ru) | Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований | |
UA113634C2 (uk) | Режим введення n-гідрокси-4-{2-[3-(n,n-диметиламінометил)бензофуран-2-ілкарбоніламіно]етокси}бензаміду | |
JP2022501344A (ja) | 新規キナゾリンegfr阻害剤 | |
MX2020002429A (es) | Compuestos para reducir la viscosidad de las formulaciones biologicas. | |
EA024038B1 (ru) | Производные нитрила, их использование в фармацевтических целях и в композициях | |
EP3044593A1 (en) | Cancer therapy | |
KR101838764B1 (ko) | (e)-4-카복시스티릴-4-클로로벤질설폰의 개선된 안정한 수성 제형 | |
EP3391887A1 (en) | Wound treatment agent | |
EA043643B1 (ru) | Средство для таргетной терапии злокачественных новообразований | |
CN110642910B (zh) | 胸苷衍生物及其制备方法和用途 | |
MXPA06014477A (es) | Agente antitumor, fortificador de efecto antitumor y metodo de terapia para cancer. | |
RU2503450C1 (ru) | Противоопухолевое средство | |
ES2671730T3 (es) | Terapia de combinación para el cáncer de ovario |