WO2020009548A1 - 펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물 - Google Patents

펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물 Download PDF

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WO2020009548A1
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acid
complex
oligopeptide
fine dust
seq
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PCT/KR2019/008330
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강성진
박문영
김다은
김재일
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애니젠 주식회사
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    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin

Definitions

  • the present invention relates to a cosmetic composition for removing or removing fine dust containing the peptide complex as an active ingredient.
  • PM Particulate matter
  • ionic components such as nitrates (NO 3 ⁇ ), ammonium (NH 4 + ) and sulfates (SO 4 2- ), carbon compounds or metal compounds. It means a particulate matter having a diameter of 10 ⁇ m or less floating in the long term.
  • Fine dust is expressed as PM 10 when the particle diameter is 10 ⁇ m or less, and denoted as PM 2.5 when the particle diameter is less than 2.5 ⁇ m, and is referred to as ultrafine dust or ultrafine dust. Most of the ultra fine dust is caused by human factors such as automobile emissions, industrial processes, dust from roads, etc.
  • Fine dust has been reported to exacerbate respiratory diseases such as asthma and reduce lung function.
  • ultrafine dust particles are so fine that they do not filter through the nasal mucosa and immediately penetrate into the alveoli, leading to the prevalence and prevalence of lung disease. Increase mortality.
  • fine dust can enter the body not only through the nose, mouth, but also through the skin.
  • Fine dust is up to 20 times smaller than the size of the pores, so it is difficult to penetrate into the pores and are difficult to remove.
  • Increasing inflammatory cytokines and free radicals by the absorbed fine dust can reduce skin immunity and cause acne. It further accelerates skin aging such as wrinkles, skin dryness and pigmentation.
  • fine dust may cause inflammatory reactions to damage the skin barrier and exacerbate atopic dermatitis, and produce reactive oxygen species in mitochondria to reduce collagen synthesis and increase collagen breakdown to reduce skin aging. May cause
  • polynuclear aromatic hydrocarbons (PAH) adhered to fine dust can increase melanocytes and increase pigment spots on the face.
  • Asians have darker skin than white, which increases pigment spots due to fine dust. It is very likely to cause dermatitis, burning and pruritus in people with sensitive skin. Long-term exposure to fine dust can cause irreversible skin damage that can cause serious illnesses such as skin cancer, as the skin loses its ability to protect itself from environmental stressors.
  • the amino acid sequence in the peptide has a biological activity in vivo or in the skin can be applied to a variety of biological materials development, semi-treatment for the improvement of wrinkles, whitening, trouble skin and various skin diseases It can also be applied to the development of sexual products, which is expected to have an excellent industrial utility value as a cosmetic and pharmaceutical material.
  • Korean Patent No. 173941 discloses a 'cosmetic composition for adsorption and removal of fine dust as an active ingredient of coral lake and Bengal rubber resin extract', and Korean Patent No. 1850313 uses' Chrysanthemum extract as an active ingredient.
  • a cosmetic composition for removing heavy metals or fine dust containing the fine dust removal or adsorption cosmetic composition containing the peptide complex of the present invention as an active ingredient.
  • the present invention has been derived by such a demand, and the present inventors have described amino acids; Or a fatty acid-amino acid complex and a fatty acid-oligopeptide complex by combining saturated fatty acid or unsaturated fatty acid to the N-terminal, C-terminal or side chain of the oligopeptide, and the complex reduces the cytotoxicity caused by the fine dust and The present invention was completed by confirming that coagulation and fine dust could be removed.
  • the present invention is an amino acid; Or N terminal, C terminal or side chain of the oligopeptide; provides a cosmetic composition for removing fine dust or adsorption containing a complex of fatty acids as an active ingredient.
  • the composition comprising the peptide complex of the present invention is a variety of It is expected to be usefully used as a cosmetic or pharmaceutical composition for the prevention and treatment of diseases.
  • FIG. 1 is a conceptual diagram illustrating a method of binding a fatty acid to an N-terminus (A), C-terminus (B) or side chain (C) of an oligopeptide (pentapeptide).
  • 5 to 15 are the results of confirming the cell viability after treating HaCaT cells with ultrafine dust (diesel exhaust particles; fine dust with a diameter of 2.5 ⁇ m or less, PM2.5) and the peptide complex of the present invention at the same time.
  • N.C. negative control: 0.2% dimethyl sulfoxide (DMSO) / Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM), P.C. (positive control): 10% DMSO / DMEM.
  • 16 is a graph showing cytotoxicity by treating the concentration of ultrafine dust in human lung cancer epithelial cell line (A549) by concentration.
  • Figure 18 shows the aggregation effect of the peptide complex (complex of capric acid (C10) in the 9th K side chain of the oligopeptide (llwialrkk) of SEQ ID NO: 30) and ultrafine dust using silver staining method Is a SDS-PAGE gel picture analyzed.
  • FIG. 19 is a graph showing particle removal efficiencies of commercially available masks (HIP's) and fine dust masks (KF84) using a dust collection (particle removal) efficiency evaluation system.
  • HIP's commercially available masks
  • KF84 fine dust masks
  • 20 and 21 illustrate a general mask sprayed with nothing using a dust collection efficiency evaluation system, a general mask sprayed with purified water, and a normal mask sprayed with a 250 ppm solution of a fatty acid-oligopeptide complex (distilled water dilution). It is a graph showing the ultrafine particle removal efficiency.
  • the present invention is amino acid; Or N terminal, C terminal or side chain of the oligopeptide; provides a cosmetic composition for removing fine dust or adsorption containing a complex of fatty acids as an active ingredient.
  • the fine dust is a concept including the ultra fine dust
  • the term 'fine dust' refers to dust having a diameter of 10 ⁇ m or less
  • the term 'ultra fine dust' refers to dust having a diameter of 2.5 ⁇ m or less It may include, but is not limited to, air pollutants such as yellow dust, automobile exhaust gas, factory smoke, domestic combustion gas, and heavy metals.
  • the term 'fine dust adsorption' may mean to remove by adsorbing fine substances remaining in the pores in the skin.
  • Treatment of cosmetic compositions based on fatty acid and amino acid complexes or fatty acid and oligopeptide complexes improves adsorption to fine dust in the skin and is hypoallergenic to the skin and eliminates skin irritation or skin problems that may occur when fine dust remains. Can be.
  • N-terminal and C-terminal' in the present invention means one end having an amino group (-NH 2 ) and the other end having a carboxyl group (-COOH) in the amino acid sequence of the peptide, the term 'side chain' It refers to an aliphatic carbon chain attached to a ring in a carbon chain or a cyclic compound in which branches are divided from straight chain carbon atoms in which carbon atoms are regularly connected.
  • the amino acid is alanine (A), cysteine (C), aspartic acid (D), glutamic acid (G), phenylalanine (Phenylalanine , F), Glycine (G), Histidine (H), Isoleucine (I), Lysine (Lysine, K), Leucine (L), Methionine (M), Asparagine , N), Pyrrolysine (O), Proline (P), Glutamine (Q), Arginine (Arginine, R), Serine (S), Threonine (Threonine, T), Seleno At least one selected from the group consisting of cysteine (U), valine (V), tryptophan (W) and tyrosine (Y), preferably glycine (G), glutamic acid (E) or Lysine (K), but is not limited thereto.
  • the amino acid may include both D-type and L-type amino acids, but is
  • the fatty acid may be saturated or unsaturated fatty acid, but is not limited thereto.
  • the saturated fatty acid according to the present invention is caproic acid (Caproic acid, C6: 0), caprylic acid (Caprylic acid, C8: 0), Pelargonic acid (Pelargonic acid, C9: 0), capric acid (Capric acid, C10: 0), Undecylic acid (C11: 0), Lauric acid (C12: 0), Myristic acid (C14: 0), Pentadecylic acid (C15: 0 ), Palmitic acid (C16: 0), Margaric acid (C17: 0), Stearic acid (Ctearic acid, C18: 0), Nonadecylic acid (C19: 0), Sub Arachidic acid (C20: 0), Henicosylic acid (C21: 0), Behenic acid (C22: 0), Tricosylic acid (Cricosylic acid.
  • the unsaturated fatty acid may be palmitoleic acid (Palmitoleic acid, C16: 1), oleic acid (Oleic acid, C18: 1), elideic acid (Elaidic acid, C18: 1), petroleic acid (Petroselinic acid, C18: 1) ), Vaccenic acid (C18: 1), Gondoic acid (C20: 1), Erucic acid (C22: 1), Nervonic acid (C24: 1), Linoleic acid acid, C18: 2), cis-Linolenic acid (C18: 3), Punicic acid (C18: 3), Eleostearic acid (C18: 3), Stearic acid ( stearidonic acid (C18: 4), Arachidonic acid (C20: 4), Eicosapentaenoic acid (C20: 5), Docosapentaenoic acid (C22: 5), Adrenic acid ( Adrenic acid (C22: 4), docosapent
  • the fine dust removal or adsorption cosmetic composition of the present invention is an amino acid; Or an N-terminal, C-terminal or side chain of the oligopeptide; a complex of fatty acids and amino acids bound to a fatty acid or a complex of fatty acids and oligopeptides, wherein the complex of fatty acids and amino acids is glycine (G), glutamic acid (E) or lysine ( K) may be an unsaturated fatty acid oleic acid is bound, but is not limited thereto, the complex of the fatty acid and oligopeptide is SEQ ID NO: 1, 4, 6, 7, 8, 10, 11, 15, 16, 17, 19 Caprylic acid, capric acid, lauric acid, myristic acid, palmitic acid, mar, at the N-terminal, C-terminal, or side chain of any of the oligopeptides consisting of the amino acid sequences 21, 27, 28, 29, and 30 At least one saturated fatty acid selected from the group consisting of garic acid, stearic acid, behe
  • the complex in which a fatty acid is bound to the side chain of the oligopeptide is preferably an oligopeptide (LLWIALRKK, L-type amino acid; llwialrkk, D-type amino acid) amino acid of SEQ ID NO. Lysine 9 in the sequence (Lysine, K); Fourth lysine in the oligopeptide amino acid sequence of SEQ ID NO: 6 (KTTKS) and SEQ ID NO: 7 (KTTK); Fatty acid may be bound to the fifth lysine in the oligopeptide amino acid sequence of SEQ ID NO: 16 (KKKKK), but is not limited thereto.
  • the peptide complex of the present invention may be in the form of an amino group (-NH 2 ) or a carboxyl group (-COOH) is bonded to the N- or C- terminal, specifically, NH 2 -amino acid-fatty acid-COOH; NH 2 -oligopeptide-fatty acid-COOH; COOH-amino acid-fatty acid-NH 2 ; COOH-oligopeptide-fatty acid-NH 2 ; NH 2 -fatty acid-amino acid-COOH; NH 2 -fatty acid-oligopeptide-COOH; COOH-fatty acid-amino acid-NH 2 ; And COOH-fatty acid-oligopeptide-NH 2 form, but is not limited thereto.
  • Amino acids of the invention Or the N-terminus, C-terminus or side chain of the oligopeptide; the conjugated saturated fatty acid or unsaturated fatty acid is not toxic to normal skin cells, can reduce the cytotoxicity caused by fine dust, ultrafine particles It has a removal (dust collection) effect.
  • Cosmetic composition for removing or adsorbing fine dust of the present invention is selected from solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactant-containing cleansing, oils, powder foundations, foundations, wax foundations and sprays.
  • the composition of each of these formulations may contain a variety of bases and additives necessary for the formulation of the formulation and are suitable, and the types and amounts of these components can be readily selected by those skilled in the art.
  • the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal carriers, plant fibers, waxes, paraffins, starches, tracantes, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc acid may be used as carrier components.
  • animal carriers plant fibers, waxes, paraffins, starches, tracantes, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc acid may be used as carrier components.
  • plant fibers such as a paste, cream or gel
  • waxes such as a paste, cream or gel
  • tracantes such as carrier components
  • cellulose derivatives such as polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc acid
  • lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellant such as butane or dimethyl ether.
  • a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 Fatty acid esters of, 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan.
  • liquid carrier diluents such as water, ethanol or propylene glycol
  • suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystalline Cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
  • the carrier component is aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide.
  • Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable fats and oils, linolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.
  • Amino acid raw materials used in the synthesis of the complex were purchased from GLS (GL Biochem, Shanghai), and fatty acids were purchased from TCI chemicals (India) and Sigma (Sigma Aldrich, US) (Table 1), dimethylformamide (dimethylformamide, DMF), diisopropylethylamine (N, N-diisopropylethylamine, DIEA), dichloromethane (DCM) and piperidine were purchased from Daejungchem, Korea.
  • a solid-phase synthesis reactor equipped with a filtration membrane was used, and peptide synthesis having a carboxyl group (-COOH) at the end of the complex was performed using 2-chlorotritylchloride resin (Bead Tech, Korea). , Peptide synthesis terminated with a peptide bond (-CONH 2 ) at the end of the complex using a link amide resin (GLS, China).
  • the resin was prepared by swelling the resin for 20 minutes using dichloromethane and dimethylformamide.
  • Synthesis with chlorotrityl chloride resin involves loading the first amino acid into the resin.
  • the resin was removed from the solvent through a filtration membrane under reduced pressure. 3 to 5 equivalents of amino acid in the resin was completely dissolved in DMF, and then added to chlorotrityl chloride resin, and diisopropylethylamine considering the density was added in an amount corresponding to 3 to 5 equivalents of chlorotrityl chloride resin. Thereafter, the reactor was reacted at a temperature of 24 ° C. to 32 ° C. for at least 5 hours.
  • Synthesis using the chlorotrityl chloride resin or linkamide resin included a process of deprotection of Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride (Fmoc).
  • Fmoc Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride
  • the solvent was removed through a filtration membrane under reduced pressure, washed for 5 minutes with DMF added with 20% (v / v) piperidine, and then again for 10 minutes.
  • the reaction solution was removed by filtration under reduced pressure, and washed six more times for 5 minutes using DCM or DMF.
  • Solid phase peptide synthesis through 6 to 24 carbon atoms of fatty acids (Table 3) and the amino acids glycine (G), glutamic acid (E), lysine (K) or oligos of SEQ ID NOs: 1-30 New complexes with peptides have been developed. Specifically, amino acids; Or an amino group (NH 2 ) present at the N-terminus of the oligopeptide and a carboxyl group (COOH) of a fatty acid (FIG. 1A), and an amino acid using ethylene glycol as a linker; Alternatively, the carboxyl group of the fatty acid present at the C terminus of the oligopeptide may bind the carboxyl group of the fatty acid (FIG. 1B), and the carboxyl group of the fatty acid may be bonded to the side chain present in the lysine (K) of the oligopeptide (FIG. 1C).
  • SPPS Solid phase peptide synthesis
  • the synthesized complexes of amino acids or oligopeptides and fatty acids are shown in Tables 4 and 10, in which the uppercase letters indicate L-type amino acids and the lowercase letters indicate D-type amino acids. amino acid;
  • the complexes in which the fatty acids are bound to the N-terminus of the oligopeptides are described in the order of fatty acids-peptide
  • the complexes in which the fatty acids are bound to the C-terminus of the amino acids or oligopeptides are described in the order of peptide-fatty acids
  • Complexes in which fatty acids are bound are described by underlining (_) the amino acids with the side chains to which the fatty acids are bound and in parentheses on the fatty acids.
  • the composite preparations synthesized in Example 1 were dissolved in distilled water to which 10% (v / v) acetonitrile was added, and then purified by high performance liquid chromatography (HPLC) under gradient conditions (FIG. 2). To 4), lyophilization to obtain the desired complex. HPLC conditions and gradient conditions of the separation phase are shown in Tables 11 and 12 below. And the molecular weight of the purified composite preparations were measured using MALDI-TOF-MASS, the molecular weight measurement method is shown in Table 13, the molecular weight measurement results are shown in Table 14 to Table 23.
  • MTT 5 mg / ml in PBS
  • DMSO dimethyl sulfoxide
  • the cell survival rate of the complex-treated group was 100 ⁇ 4%, which was similar to that of the negative control group, compared to the negative control group with 100% cell viability. It was confirmed that it was ⁇ 25% (not shown).
  • the N-terminal, C-terminal or side chain of the oligopeptide; fatty acid is conjugated to the complex was found to be non-toxic to skin cells.
  • the fatty acid-amino acid complex and the fatty acid-oligopeptide (SEQ ID NOS: 1-30) complex can reduce the increased cytotoxicity caused by ultrafine dust, ultrafine dust on human skin-derived keratinocytes (HaCaT cells) Diesel exhaust particles, DEP) And the complexes were analyzed for cytotoxicity via MTT assay.
  • the DEP fine dust having a diameter of 2.5 ⁇ m or less, PM2.5
  • PM2.5 is purchased from the National Institute for Environmental Studies (Japan), and is a 4JB1 type 2740 cc four-cylinder direct injection diesel engine (Isuzu Automobile Co., Japan). was collected by a glass fiber filter operating at 1500 rpm load conditions and 10 torque (10 kg / ml) conditions.
  • Cells were diluted in DMEM (10% FBS) medium so that the number of cells was 2 ⁇ 10 4 cells / ml, 100 ⁇ l of the cells were dispensed into 96-well culture vessels, and cultured for 16-20 hours until the cells adhered to the plate surface. After the incubation was completed, the medium was removed, and 100 ⁇ l of a solution containing 10 ⁇ M complex and 50 ⁇ g / ml ultrafine dust in each well was incubated in a 37 ° C., 5% CO 2 incubator for 24 hours. The medium was removed again. Thereafter, cell viability was confirmed by MTT assay in the same manner as in Example 3.
  • the complexes in which the fatty acid is bound to the amino acids or oligopeptides of the present invention can aggregate ultrafine dust and effectively protect skin cells.
  • MTT assay After ultrafine dust was treated to human lung cancer epithelial cell line (A549), cytotoxicity was analyzed by MTT assay.
  • the MTT assay was performed in the same manner as in Example 3, and cultured A549 cells were treated with ultrafine dust at concentrations of 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120 and 200 ⁇ g / ml.
  • Cytotoxicity was analyzed by MTT assay to determine whether the fatty acid-oligopeptide (saturated fatty acid binding to the amino acid sequence side chain of SEQ ID NO: 30) complex can reduce the cytotoxicity caused by ultrafine dust.
  • MTT assay was performed in the same manner as in Example 3.
  • the cell viability was increased in the group treated with fatty acid-oligopeptide complex compared to the group treated with ultrafine dust alone (approximately 40%), especially saturated fatty acids of C8-16 except for C6 saturated fatty acid.
  • Cell viability was significantly increased in the peptide complex.
  • the complex P4, P11, P18, P25
  • capric acid C10
  • Ultrafine dust and fatty acid-oligopeptide complex P11 (capric acid binding to the side chain of the amino acid sequence of SEQ ID NO: 30) simultaneously on a 20% SDS-PAGE gel and the amount of complex that is not aggregated with ultrafine dust by silver staining It was confirmed.
  • DMEM medium was treated with 100 ⁇ g / ml ultrafine dust alone or simultaneously with ultrafine dust and P11 complexes at 10, 50 and 100 ⁇ M concentrations and then incubated in 37 ° C., 5% CO 2 incubator for 24 hours and centrifugal force. Supernatant samples were prepared by centrifugation at 10,000 ⁇ g for 1 hour. Then 15 ⁇ l of the supernatant was loaded on a 20% SDS-PAGE gel and subjected to electrophoresis. The silver staining process was performed using Elpis Biotech's kit (PeptiGel TM, ELPISBIOTECH, EBA-1053) as follows.
  • the gel was reacted with a solution of 30% ethanol and 10% acetic acid for 1 hour to be immobilized, and washed twice with distilled water. After soaking in solution A for 1 minute, washed twice with distilled water, and again soaking gel in solution B containing formaldehyde 20-30 minutes. Finally, the gel was washed twice with distilled water for 1 minute and then immersed in solution C and waited until a band appeared, and then the reaction was stopped using a fixed solution.
  • the band strength decreased slightly compared with the group treated with complex P11 alone, which was due to the aggregation of the ultrafine dust and fatty acid-oligopeptide complexes and the amount of peptide remaining in the supernatant. It was found to be reduced (FIG. 18). Through this, it was found that the complexes in which the fatty acid is bound to the oligopeptide of the present invention can remove the ultrafine dust by aggregation with the ultrafine dust.
  • the collection capture efficiency was similar in the general mask without spraying anything and the distilled water spray, and compared with the normal mask without spraying nothing, the fatty acid-peptide complex (Palmitic acid-KTTKS, In the mask treated with Palmitic acid-RRRRR, Palmitic acid-KKKKK, Capric acid-RRRRR, and Capric acid-RRRRRRRRR, the dust collection efficiency was increased. Particularly, the smaller the fine dust particle size, the more effective the particle removal efficiency of the fatty acid-peptide complex. It was confirmed to be excellent (FIGS. 20 and 21).

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Abstract

본 발명은 지방산-아미노산 복합체 또는 지방산-올리고펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 복합체는 피부 독성 없이 미세먼지를 제거하는 효과가 우수하므로 미세먼지에 의해 유발되는 각종 질환들을 예방 또는 치료하기 위한 조성물로 유용하게 활용될 수 있다.

Description

펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물
본 발명은 펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물에 관한 것이다.
미세먼지(particulate matter, PM)는 질산염(NO 3 -), 암모늄(NH 4 +), 황산염 (SO 4 2-) 등의 이온 성분, 탄소 화합물 또는 금속 화합물 등을 포함하는 대기오염 물질로서, 대기 중에서 장기간 떠다니는 지름 10 ㎛ 이하의 입자상 물질을 의미한다. 미세먼지는 입자 지름이 10 ㎛ 이하이면 PM 10이라 표기하며, 입자 지름이 2.5 ㎛ 미만이면 PM 2.5로 표기하고 초미세먼지 또는 극미세먼지라고 지칭한다. 초미세먼지는 대부분 자동차 배출가스, 산업공정, 도로 등에서 날리는 먼지 등의 인위적 요인에 의해 발생되는 것이 대부분이다.
장기간 미세먼지에 노출될 경우 면역력이 급격히 저하되어 감기, 천식, 기관지염 등의 호흡기 질환뿐만 아니라 심혈관 질환, 피부 질환, 안구 질환 등의 각종 질병에 노출될 수 있다. 미세먼지는 천식과 같은 호흡기 질병을 악화시키고 폐 기능의 저하를 초래한다고 보고되어 있으며, 특히 초미세먼지는 입자가 매우 미세하여 코 점막을 통해 걸러지지 않고 바로 폐포까지 침투되어 폐질환의 유병률과 조기사망률을 증가시킨다. 또한, 미세먼지는 코, 입뿐만 아니라 피부를 통해서도 몸 속에 침입할 수 있다. 미세먼지는 모공의 크기보다 최대 20배 정도 작기 때문에 모공 속으로 쉽게 침투되어 제거가 어렵고, 흡수된 미세먼지에 의한 염증성 사이토카인과 체내 활성산소의 증가로 인해 피부 면역력을 저하시킬 수 있으며, 여드름 유발, 주름생성, 피부건조, 색소침착 등과 같은 피부 노화 현상을 더욱 가속화시킨다. 구체적으로, 미세먼지는 염증반응을 일으켜 피부장벽에 손상을 주어 아토피 피부염을 악화시킬 수 있고, 미토콘드리아에서 활성산소종(reactive oxygen species)을 생산하여 콜라겐 합성을 감소시키고 콜라겐 분해를 증가시켜 피부노화를 유발할 수 있다. 또한, 미세먼지에 붙은 다환방향족탄화수소(polynuclear aromatic hydrocarbon, PAH)가 멜라닌 세포를 증식시켜 얼굴에 색소반점을 증가시킬 수 있으며, 특히 아시아인은 피부색이 백인보다 어둡기 때문에 미세먼지로 인한 색소반점이 증가할 가능성이 크며, 민감성 피부를 가진 사람들에게는 피부염과 작열감, 소양감을 증가시킬 수 있다. 미세먼지에 장기적으로 노출될 경우 되돌릴 수 없는 피부 손상으로 인해 피부가 환경적 스트레스 요소들로부터 몸을 보호하는 기능을 상실하면서 피부암과 같은 심각한 병을 초래할 수도 있다.
최근 미세먼지의 위험성과 피해가 심각하게 대두되면서 미세먼지 차단을 위한 제품개발에 대한 관심이 높아짐에 따라 미세먼지와 관련된 화장품, 건강기능식품, 공기청정기, 마스크 등의 제품 판매량이 급증하고 있으며, 특히 미세먼지를 제거하거나 미세먼지의 흡착을 현저히 방지할 수 있는 화장료 조성물에 대한 개발이 지속적으로 요구되고 있는 실정이다. 이러한 흐름에 부합하고 있는 고기능성 바이오 원료 중 대표적인 것으로 펩타이드 소재를 들 수 있다. 펩타이드 내 아미노산 서열이 가지는 배열 및 구조에 따라 생체 내 혹은 피부에서 생리활성을 가지게 되어 생물학적 소재 개발에 다양하게 응용될 수 있으며, 주름개선, 미백, 트러블성 피부 및 여러 피부 질환의 개선을 위한 준치료성 제품 개발에도 적용할 수 있어 화장품 및 의약품 소재로서 산업적 효용가치가 뛰어날 것으로 전망된다.
한편, 한국등록특허 제1723941호에는 '산호수 및 뱅갈고무나무 수지 추출물을 유효성분으로 하는 미세먼지 흡착 및 제거용 화장료 조성물'이 개시되어 있고, 한국등록특허 제1850313호에는 '국화 추출물을 유효성분으로 함유하는 중금속 또는 미세먼지 제거용 화장료 조성물'이 개시되어 있으나 본 발명의 펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물에 대해서는 기재된 바가 없다.
본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명자들은 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N 말단, C 말단 또는 곁사슬;에 포화지방산 또는 불포화지방산을 결합시켜 지방산-아미노산 복합체 및 지방산-올리고펩타이드 복합체를 개발하였으며, 상기 복합체가 미세먼지에 의한 세포독성을 감소시키고 미세먼지와 응집되어 미세먼지를 제거할 수 있음을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N 말단, C 말단 또는 곁사슬;에 지방산이 결합된 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 펩타이드 복합체는 미세먼지에 대한 세포 보호 효과뿐만 아니라, 미세먼지와 응집 또는 결합하여 미세먼지를 제거하는 효과가 우수하므로, 본 발명의 펩타이드 복합체를 포함하는 조성물은 미세먼지 노출에 의한 각종 질환의 예방 및 치료용 화장료 또는 약학 조성물로 유용하게 활용될 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 올리고펩타이드(펜타펩타이드, pentapeptide)의 N-말단(A), C-말단(B) 또는 곁사슬(C)에 지방산을 결합시키는 방법을 나타낸 개념도이다.
도 2 내지 도 4는 고성능 액체 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography, HPLC)를 통해 정제된 펩타이드 복합체(표 5-구분9)를 분석한 결과이다.
도 5 내지 도 15는 HaCaT 세포에 초미세먼지(디젤 배기 입자; 지름 2.5㎛ 이하인 미세먼지, PM2.5)와 본 발명의 펩타이드 복합체를 동시에 처리한 후 세포 생존율을 확인한 결과이다. N.C.(음성대조군): 0.2% DMSO(dimethyl sulfoxide)/DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium) 처리, P.C.(양성대조군): 10% DMSO/DMEM 처리.
도 16는 인간폐암상피세포주(A549)에 초미세먼지가 담긴 용액을 농도별로 처리하여 세포독성을 나타낸 그래프이다.
도 17은 A549 세포에 초미세먼지와 올리고펩타이드에 포화지방산이 결합된 복합체를 동시에 처리한 후 세포 생존율을 확인한 결과이다. 그래프 X축 시료의 정보는 하기 표 10과 동일하다.
도 18은 은 염색(silver staining)법을 이용하여 펩타이드 복합체(P11, 서열번호 30의 올리고펩타이드(llwialrkk) 9번째 K 곁사슬에 카프릭산(C10)이 결합된 복합체)와 초미세먼지의 응집 효과를 분석한 SDS-PAGE 겔 사진이다.
도 19는 분진 포집(입자제거) 효율 평가 시스템을 이용하여 시중에서 판매하고 있는 일반 마스크(HIP's)와 미세먼지 마스크(KF84)의 입자 제거 효율을 나타낸 그래프이다.
도 20 및 도 21은 분진 포집(입자제거) 효율 평가 시스템을 이용하여 아무것도 분사하지 않은 일반 마스크, 정제수가 분사된 일반 마스크 및 지방산-올리고펩타이드 복합체 250 ppm 용액(증류수 희석)이 분사된 일반 마스크의 초미세먼지 입자 제거 효율을 나타낸 그래프이다.
본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N 말단, C 말단 또는 곁사슬;에 지방산이 결합된 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명에서, 미세먼지는 초미세먼지를 포함하는 개념이며, 용어 '미세먼지'는 지름이 10 ㎛ 이하의 먼지를 의미하고, 용어 '초미세먼지'는 지름 2.5 ㎛ 이하의 먼지를 의미하는 것으로, 황사, 자동차 배기가스, 공장 매연, 생활주변 연소가스, 중금속 등의 대기오염 물질을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에서 용어 '미세먼지 흡착'은 피부 내 모공 등에 잔존하고 있는 미세물질을 흡착함으로써 제거하는 것을 의미할 수 있다. 지방산과 아미노산 복합체 또는 지방산과 올리고펩타이드 복합체를 기반으로 한 화장료 조성물의 처리로 피부 내 미세먼지에 대한 흡착력을 높여 피부에 저자극성이면서, 미세먼지 잔존 시 발생할 수 있는 피부 염증 또는 피부 트러블 등을 해소할 수 있다.
본 발명에서 용어 'N-말단 및 C-말단'은 펩타이드의 아미노산 서열에서 아미노기(-NH 2)를 가지는 한쪽 끝과 카복실기(-COOH)를 가지는 다른 한쪽 끝을 의미하며, 용어 '곁사슬'은 탄소 원자가 규칙적으로 이어져 있는 곧은 사슬 모양의 탄소 원자로부터 가지가 나누어져 있는 탄소 사슬 또는 고리 모양 화합물에서 고리에 붙어 있는 지방족의 탄소 사슬을 의미한다.
본 발명의 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물에서, 상기 아미노산은 알라닌(Alanine, A), 시스테인(Cysteine, C), 아스파르트산(Aspartic acid, D), 글루탐산(Glutamic acid, E), 페닐알라닌(Phenylalanine, F), 글라이신(Glycine, G), 히스티딘(Histidine, H), 아이소류신(Isoleucine, I), 라이신(Lysine, K), 류신(Leucine, L), 메티오닌(Methionine, M), 아스파라긴(Asparagine, N), 피롤라이신(Pyrrolysine, O), 프롤린(Proline, P), 글루타민(Glutamine, Q), 아르기닌(Arginine, R), 세린(Serine, S), 트레오닌(Threonine, T), 셀레노시스테인(Selenocysteine, U), 발린(Valine, V), 트립토판(Tryptophan, W) 및 타이로신(Tyrosine, Y)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 글라이신(G), 글루탐산(E) 또는 라이신(K)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 아미노산은 D형 아미노산과 L형 아미노산을 모두 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물에서, 상기 올리고펩타이드는 2개 이상의 아미노산으로 이루어진 펩타이드로, 바람직하게는 AAPV(서열번호 1), AAP(서열번호 2), AA(서열번호 3), GHK(서열번호 4), GH(서열번호 5), KTTKS(서열번호 6), KTTK(서열번호 7), KTT(서열번호 8), KT(서열번호 9), EEMQRR(서열번호 10), EEMQR(서열번호 11), EEMQ(서열번호 12), EEM(서열번호 13), EE(서열번호 14), KKKKKKKKK(서열번호 15), KKKKK(서열번호 16), KKK(서열번호 17), KK(서열번호 18), GPO(서열번호 19), GP(서열번호 20), GQPR(서열번호 21), GQP(서열번호 22), GQ(서열번호 23), TTKS(서열번호 24), TKS(서열번호 25), TK(서열번호 26), RRRRRRRRR(서열번호 27), RRRRR(서열번호 28), RRR(서열번호 29) 및 LLWIALRKK(서열번호 30)로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 올리고펩타이드의 아미노산은 D형 아미노산 또는 L형 아미노산으로 이루어진 것일 수 있고, 상기 서열번호 19의 아미노산 PO는 O-하이드록시프롤린(O-hydroxyproline)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물에서, 상기 지방산은 포화 또는 불포화지방산일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명에 따른 상기 포화지방산은 카프로산(Caproic acid, C6:0), 카프릴산(Caprylic acid, C8:0), 펠라르곤산(Pelargonic acid, C9:0), 카프릭산(Capric acid, C10:0), 운데실산(Undecylic acid, C11:0), 라우르산(Lauric acid, C12:0), 미리스트산(Myristic acid, C14:0), 펜타데실산(Pentadecylic acid, C15:0), 팔미트산(Palmitic acid, C16:0), 마르가르산(Margaric acid, C17:0), 스테아르산(Stearic acid, C18:0), 노나데실산(Nonadecylic acid, C19:0), 아라킨산(Arachidic acid, C20:0), 헤네이코실산(Heneicosylic acid, C21:0), 베헨산(Behenic acid, C22:0), 트라이코실산(Tricosylic acid. C23:0), 리그노세르산(Lignoceric acid, C24:0), 펜타코실산(Pentacosylic acid, C25:0), 세로트산(Cerotic acid, C26:0), 헵타코실산(Heptacosylic acid, C27:0), 몬탄산(Montanic acid, C28:0), 노나코실산(Nonacosylic acid, C29:0), 멜리스산(Melissic acid, C30:0), 헤나트라이아콘틸산(Henatriacontylic acid, C31:0), 락세로산(Lacceroic acid, C32:0), 프실산(Psyllic acid, C33:0), 게드산(Geddic acid, C34:0), 세로플라스트산(Ceroplastic acid, C35:0) 및 헥사트라이아콘틸산(Hexatriacontylic acid, C36:0)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 카프릴산, 카프릭산, 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 마르가르산, 스테아르산, 베헨산 또는 리그노세르산일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 상기 불포화지방산은 팔미톨레산(Palmitoleic acid, C16:1), 올레산(Oleic acid, C18:1), 엘라이드산(Elaidic acid, C18:1), 페트로셀린산(Petroselinic acid, C18:1), 바크센산(Vaccenic acid, C18:1), 곤도산(Gondoic acid, C20:1), 에루크산(Erucic acid, C22:1), 네르본산(Nervonic acid, C24:1), 리놀레산(Linoleic acid, C18:2), 시스-리놀렌산(cis-Linolenic acid, C18:3), 푸니크산(Punicic acid, C18:3), 엘레오스테아르산(Eleostearic acid, C18:3), 스테아리돈산(stearidonic acid, C18:4), 아라키돈산(Arachidonic acid, C20:4), 에이코사펜타엔산(Eicosapentaenoic acid, C20:5), 도코사펜타엔산(Docosapentaenoic acid, C22:5), 아드렌산(Adrenic acid, C22:4), 도코사헥사엔산(Docosahexaenoic acid, C22:6) 및 리시놀레산(Ricinoleic acid, C18:1)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상일 수 있고, 바람직하게는 올레산, 리놀레산, 팔미톨레산, 엘라이드산, 페트로셀린산, 바크센산, 곤도산, 에루크산, 네르본산, 시스-리놀렌산, 푸니크산, 엘레오스테아르산, 도코사펜타엔산 또는 리시놀레산일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물은 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N 말단, C 말단 또는 곁사슬;에 지방산이 결합된 지방산과 아미노산의 복합체 또는 지방산과 올리고펩타이드의 복합체로, 상기 지방산과 아미노산의 복합체는 글라이신(G), 글루탐산(E) 또는 라이신(K)에 불포화지방산인 올레산이 결합된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않으며, 상기 지방산과 올리고펩타이드의 복합체는 서열번호 1, 4, 6, 7, 8, 10, 11, 15, 16, 17, 19, 21, 27, 28, 29 및 30의 아미노산 서열로 이루어진 올리고펩타이드 중 어느 하나의 N 말단, C 말단 또는 곁사슬에 카프릴산, 카프릭산, 라우르산, 미리스트산, 팔미트산, 마르가르산, 스테아르산, 베헨산 및 리그노세르산으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 포화지방산; 또는 올레산, 리놀레산, 팔미톨레산, 엘라이드산, 페트로셀린산, 바크센산, 곤도산, 에루크산, 네르본산, 시스-리놀렌산, 푸니크산, 엘레오스테아르산, 도코사펜타엔산 및 리시놀레산으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 불포화지방산;이 결합된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물에 있어서, 상기 올리고펩타이드의 곁사슬에 지방산이 결합된 복합체는 바람직하게는, 서열번호 30의 올리고펩타이드(LLWIALRKK, L형 아미노산; llwialrkk, D형 아미노산) 아미노산 서열에서 9번째의 라이신(Lysine, K); 서열번호 6(KTTKS) 및 서열번호 7(KTTK)의 올리고펩타이드 아미노산 서열에서 4번째의 라이신; 서열번호 16(KKKKK)의 올리고펩타이드 아미노산 서열에서 5번째의 라이신;에 지방산이 결합된 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
또한, 본 발명의 펩타이드 복합체는 N-말단 또는 C-말단에 아미노기(-NH 2) 또는 카복실기(-COOH)가 결합된 형태일 수 있고, 구체적으로는 NH 2-아미노산-지방산-COOH; NH 2-올리고펩타이드-지방산-COOH; COOH-아미노산-지방산-NH 2; COOH-올리고펩타이드-지방산-NH 2; NH 2-지방산-아미노산-COOH; NH 2-지방산-올리고펩타이드-COOH; COOH-지방산-아미노산-NH 2; 및 COOH-지방산-올리고펩타이드-NH 2 형태일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N-말단, C-말단 또는 곁사슬;에 포화지방산 또는 불포화지방산이 결합된 복합체는 정상 피부 세포에 대해 독성이 없고, 미세먼지에 의한 세포 독성을 감소시킬 수 있으며, 초미세먼지 입자 제거(분진 포집) 효과가 있다.
구체적으로는, 본 발명의 카프릭산과 서열번호 6, 7, 15, 16, 27, 28 또는 29의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 팔미트산과 서열번호 4, 6, 7, 15, 16, 27, 28, 29 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 올레산과 서열번호 1, 4, 6, 7, 8, 11, 15, 16, 21, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 리놀레산과 서열번호 10, 16, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 카프릴산과 서열번호 15, 16, 27 또는 28의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 라우르산과 서열번호 4, 15, 16, 17, 27 또는 28의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 미리스트산과 서열번호 10, 15, 16, 27 또는 28의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 마르가르산과 서열번호 15, 16, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 스테아르산과 서열번호 15, 16, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 베헨산과 서열번호 15, 16, 19, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 리그노세린산과 서열번호 15, 16, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 팔미톨레산과 서열번호 1, 15. 21 또는 27의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 엘라이드산과 서열번호 6, 15, 16, 19 또는 27의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 페트로셀린산과 서열번호 6, 15, 16, 27 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 바크센산과 서열번호 15, 27 또는 28의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 곤도산과 서열번호 6, 15, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 에루크산과 서열번호 15, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 네르본산과 서열번호 4, 6, 15, 16, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 시스-리놀렌산과 서열번호 15, 16, 27, 28 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 푸니크산과 서열번호 6, 15, 16 또는 27의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 엘레오스테아르산과 서열번호 6, 15, 27 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 도코사펜타엔산과 서열번호 1, 15, 16 또는 29의 올리고펩타이드가 결합된 복합체; 또는 리시놀레산과 서열번호 15, 27 또는 30의 올리고펩타이드가 결합된 복합체;가 초미세먼지에 의해 증가된 세포 독성을 감소시키고 초미세먼지 입자 제거(분진 포집)율 증가시키는 효과가 우수하다.
본 발명의 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 중에서 선택된 어느 하나의 제형인 것이 바람직하며, 더 바람직하게는 피부외용 연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어 컨디셔너, 헤어 트리트먼트, 젤, 스킨 로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 마사지 크림, 영양크림, 아이크림, 모이스처 크림, 핸드 크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디 로션 및 바디 클렌저로 이루어지는 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형의 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유지, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 펩타이드 복합체의 제조
복합체 합성에 사용된 아미노산 원료는 GLS(GL Biochem, Shanghai)로부터 구매하였고, 지방산은 TCI(TCI chemicals, India)와 Sigma(Sigma Aldrich, US)에서 구매하였으며(표 1), 디메틸포름아미드(dimethylformamide, DMF), 디이소프로필에틸아민(N,N-diisopropylethylamine, DIEA), 디클로로메탄(dichloromethane, DCM) 및 피페리딘(piperidine)은 대정화금(Daejungchem, Korea)으로부터 구매하여 사용하였다.
지방산 구입 정보
구분 지방산 구입처
1 카프릭산 TCI (TCI chemicals, Korea), D0017
2 팔미트산 TCI (TCI chemicals, Korea), P0002
3 아라킨산 TCI (TCI chemicals, Korea), E0006
4 올레산 TCI (TCI chemicals, Korea), O0011
5 리놀레산 Sigma(Sigma Aldrich, Korea), L1376
6 에이코사펜타엔산 TCI (TCI chemicals, Korea), E0441
7 카프릴산 TCI (TCI chemicals, Korea), E0120
8 라우르산 TCI (TCI chemicals, Korea), A0932
9 미리스트산 TCI (TCI chemicals, Korea), M0477
10 마르가르산 TCI (TCI chemicals, Korea), C0950
11 스테아르산 TCI (TCI chemicals, Korea), S0235
12 베헨산 TCI (TCI chemicals, Korea), B1248
13 리그노세르산 TCI (TCI chemicals, Korea), L0111
14 팔미톨레산 TCI (TCI chemicals, Korea), H0501
15 엘라이드산 TCI (TCI chemicals, Korea), O0010
16 페트로셀린산 Sigma(Sigma Aldrich, Korea), P8750
17 바크센산 TCI (TCI chemicals, Korea), M2308
18 곤도산 Sigma(Sigma Aldrich, Korea), E3635
19 에루크산 TCI (TCI chemicals, Korea), D0965
20 네르본산 TCI (TCI chemicals, Korea), T1642
21 푸니크산 Cayman (Cayman chemicals, USA), 22976EL
22 엘레오스테아르산 Chemical Book USA, 10008349
23 아라키돈산 TCI (TCI chemicals, Korea), A0781
24 도코사펜타엔산 TCI (TCI chemicals, Korea), D2964
25 시스-리놀렌산 TCI (TCI chemicals, Korea), L0152
26 도코사헥사엔산 TCI (TCI chemicals, Korea), D2226
27 리시놀레산 TCI (TCI chemicals, Korea), R0027
1-1. 레진 팽윤(swelling)
여과막이 장착된 고상(solid-phase) 합성 반응기를 사용하였으며, 복합체 말단에 카르복시기(-COOH)를 갖는 펩타이드 합성은 2-클로로트리틸 클로라이드 레진(2-Chlorotritylchloride resin; Bead Tech, 한국)을 이용하였고, 복합체 말단에 펩타이드 결합(-CONH 2)으로 끝나는 펩타이드 합성은 링크 아마이드 레진(Rink amide resin; GLS, 중국)을 이용하였다. 디클로로메탄 및 디메틸포름아미드를 사용하여 20분 동안 레진을 팽윤시켜 합성준비를 하였다.
1-2. 아미노산 로딩(loading)
클로로트리틸 클로라이드 레진을 이용한 합성은 첫 아미노산을 레진에 로딩시키는 과정을 포함한다. 레진을 감압 하에서 여과막을 통해 용매를 제거하였다. 상기 레진에 3~5 당량의 아미노산을 DMF에 완전히 녹인 후 클로로트리틸 클로라이드 레진에 첨가하였고, 밀도를 고려한 디이소프로필에틸아민를 클로로트리틸 클로라이드 레진의 3~5 당량에 해당하는 양을 첨가하였다. 이후 반응기를 이용하여 24℃ 내지 32℃ 온도에서 5시간 이상 반응시켰다.
1-3. 레진 Fmoc 탈보호
상기 클로로트리틸 클로라이드 레진 또는 링크 아마이드 레진을 이용한 합성과정은 Fmoc(Fluorenylmethyloxycarbonyl chloride)의 탈보호 반응시키는 과정이 포함되었다. 레진 Fmoc 탈보호 과정은 감압 하에서 여과막을 통하여 용매를 제거하였고, 20%(v/v) 피페리딘을 첨가한 DMF로 5분간 세척한 후 다시 10분간 세척하였다. 감압 하에서 여과하여 반응액을 제거하고 DCM 또는 DMF를 사용하여 5분씩 6차례 이상 세척하였다.
1-4. 지방산-아미노산 복합체 및 지방산-올리고펩타이드 복합체 합성
상기 링크 아마이드 레진에 3~5 당량의 아미노산을 DMF에 완전히 녹인 후 용매를 제거한 링크 아마이드 레진에 넣어주었다. 커플링 시약(coupling reagent)으로 2 M HOBt/DIC(hydroxybenzotriazole/diisopropylcarbodiimide)를 아미노산 당량 및 링크 아마이드 레진 양에 맞게 넣어주었다. 이후, 반응기를 이용하여 5시간 이상, 24~32℃에서 합성을 실시하였다. 반응이 종료되면 용매를 감압 하에 여과막을 통해 제거시킨 후, 깨끗한 DMF로 5분씩 6회에 걸쳐 세척하였다. 세척이 끝나고 상기 아미노산 결합 방법과 같은 방법으로 각각 아미노산을 순서대로 커플링하였다. 그 후, 펩타이드가 합성된 상태의 레진에 지방산을 3 당량, 2 M HOBt/DIC를 아미노산 당량 및 레진 양에 맞게 넣어주었다. 이후 반응기를 이용하여 5시간 이상, 24~32℃ 온도에서 반응시켰다.
1-5. 분리(Cleavage)
반응이 끝나고 감압 하에서 여과막을 통하여 용매를 제거한 후 깨끗한 DMF로 2분씩 2회, DCM으로 2분씩 2회에 걸쳐 세척한 다음 감압 하에 여과막을 통해 용매를 거의 제거하였다. 건조된 펩타이드 복합체 레진을 70%(v/v) TFA/ 29%(v/v) DCM/ 1%(v/v) H 2O 용액을 이용하여 4시간 동안 분리를 실시하였다.
1-6. 재결정(Crystallize)
분리가 완료된 용매를 에틸에테르(ethyl ether)를 이용해 조(crude) 제품을 재결정화시켜 추출하였다. 구체적인 합성공정은 하기 표 2와 같다.
본 발명의 펩타이드 복합체 합성공정
* 레진 치환율: - Rink amide MBHA resin (치환율: 0.54 mmole/g) - Chlorotrityl chloride resin (치환율: 1.25 mmol/g)* 아미노산: 3~10 eq * 커플링 시약: DIC, HOBt, DMF* 커플링 시간: 6시간* 커플링 온도: 24 ~ 32℃* 분리: 70% TFA/29% DCM/1% H2O,4시간, 또는 5% TFA/95% DCM 5분* 추출: Ethyl ether
1-7. 합성 산물
고체상 펩타이드 합성법(Solid Phase Peptide Synthesis, SPPS)을 통해 탄소수가 6~24개인 지방산(표 3)과, 아미노산인 글라이신(G), 글루탐산(E), 라이신(K) 또는 서열번호 1 내지 30의 올리고펩타이드가 결합된 신규한 복합체를 개발하였다. 구체적으로, 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N 말단에 존재하는 아미노기(NH 2)와 지방산의 카복실기(COOH)를 결합시킬 수 있고(도 1A), 에틸렌글리콜을 링커(linker)로 사용하여 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 C 말단에 존재하는 카복실기에 지방산의 카복실기를 결합시킬 수 있으며(도 1B), 올리고펩타이드의 라이신(K)에 존재하는 곁사슬에 지방산의 카복실기를 결합시킬 수 있다(도 1C).
최종적으로 합성된 아미노산 또는 올리고펩타이드와 지방산의 복합체는 하기 표 4 및 표 10에 나타내었으며, 표 10에서 대문자는 L형 아미노산을 의미하고, 소문자는 D형 아미노산을 의미한다. 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N-말단에 지방산이 결합된 복합체는 지방산-펩타이드 순으로 기재하였고, 아미노산 또는 올리고펩타이드의 C-말단에 지방산이 결합된 복합체는 펩타이드-지방산 순으로 기재하였으며, 올리고펩타이드의 곁사슬에 지방산이 결합된 복합체는 지방산이 결합되어 있는 곁사슬이 붙어있는 아미노산에 밑줄(_)을 그어 표시한 후 지방산에 괄호로 표시하여 기재하였다.
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실시예 2. 복합체 정제
상기 실시예 1에서 합성한 복합체 조제품들을 각각 10%(v/v) 아세토니트릴(acetonitrile)이 첨가된 증류수에 녹인 후, 구배(gradient) 조건하에서 고성능액체크로마토그래피(HPLC)로 정제하고(도 2 내지 도 4), 동결건조하여 목적 복합체를 수득하였다. HPLC 조건 및 분리상의 구배 조건은 하기 표 11 및 표 12에 나타내었다. 그리고 정제된 복합체 조제품들의 분자량은 MALDI-TOF-MASS를 이용하여 측정하였고, 분자량 측정 방법은 표 13, 분자량 측정 결과는 표 14 내지 표 23에 나타내었다.
HPLC 조건
기기 Shimadzu 8A (5 cm×25 cm)/8A (prep(dia 5 cm))
용매 조성 버퍼 A=0.05% TFA/아세토나이트릴, 버퍼 B=0.05% TFA/H 2O
유속 14 ㎖/분
컬럼 Silicagel C18 reverse phase
흡광도 230 nm
분리조건 구배 (gradient)
구배 조건
시간(분) H 20(%) 아세토니트릴(acetonitrile)(%)
0~12 89→77 11→23
12~13 77→5 23→95
13~18 5→5 95→95
18~19 5→89 95→11
19~27 89→99 11→11
분자량 측정 방법
- 기기명 : SHIMADZU MALDI-TOF- 샘플 5 μL를 matrix 용액 5 μL와 혼합하여 혼합액의 0.5 μL를 target plate에 로딩한다.- 이후 질량분석기의 매뉴얼에 따라 측정한다.- 여기서 matrix 용액은 0.1% TFA(Trifluoroacetic acid) 아세토니트릴/물=1/1 (v/v)에 알파-시아노히드록시신나믹산(α-Cyanohydroxycinnamic acid)의 포화용액.
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실시예 3. HaCaT 세포에서 초미세먼지의 세포 독성 분석
지방산-아미노산 복합체 및 지방산-올리고펩타이드(서열번호 1 내지 30) 복합체의 세포 독성을 확인하기 위해 세포수가 2×10 4 개/㎖이 되도록 DMEM(10% FBS) 배지에 희석하고 96-웰 배양용기에 100 ㎕씩 분주한 후 세포가 플레이트 표면에 부착할 때까지 16~20시간 동안 배양하였다. 배지를 제거하고 각 복합체 물질을 DMEM 배지로 10 μM 농도로 희석하여 100 ㎕씩 세포에 처리한 후 24시간 동안 37 ℃, 5% CO 2 인큐베이터에서 배양한 후 다시 배지를 제거하였다. DMEM 배지에 MTT(5 mg/㎖ in PBS) 시약을 10배 희석한 용액을 100 ㎕씩 분주하고 3~4 시간 동안 반응시킨 후 MTT 시약을 제거하고 DMSO(dimethyl sulfoxide)를 100 ㎕씩 분주하여 인큐베이터에서 30분 반응시킨 후 흡광도(540 nm) 측정을 통해 DMEM 배지 처리군, 0.2% DMSO/DMEM 처리군(음성대조군), 10% DMSO/DMEM 처리군(양성 대조군) 및 상기 표 4 내지 표 10에 개시된 아미노산 또는 올리고펩타이드와 지방산이 결합된 복합체를 처리한 군의 세포 생존율을 분석하였다.
그 결과, 세포 생존율이 100%인 음성대조군과 비교했을 때 복합체가 처리된 군의 세포 생존율은 100±4%로 음성대조군과 유사한 수준인 것을 확인하였고, 세포 독성에 대한 양성 대조군은 세포 생존율이 8~25%인 것을 확인하였다(보유결과 미제시). 이를 통해 본 발명의 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N 말단, C 말단 또는 곁사슬;에 지방산이 결합된 복합체는 피부 세포에 독성이 없음을 알 수 있었다.
실시예 4. 초미세먼지에 대한 아미노산 또는 올리고펩타이드와 지방산 복합체의 세포 보호 효과(HaCaT 세포)
지방산-아미노산 복합체 및 지방산-올리고펩타이드(서열번호 1 내지 30) 복합체가 초미세먼지에 의해 증가된 세포독성을 감소시킬 수 있는지 확인하기 위해, 인간피부 유래 각질세포(HaCaT cell)에 초미세먼지(디젤 배기 입자, Diesel exhaust particles, DEP) 및 복합체를 처리하여 MTT 분석법을 통해 세포 독성을 분석하였다. 상기 DEP(지름 2.5㎛ 이하인 미세먼지, PM2.5)는 국립환경과학원(National Institute for Environmental studies, Japan)으로부터 구입한 것으로, 4JB1형 2740 cc 4기통 직접 분사식 디젤 엔진(Isuzu Automobile Co., Japan)을 1500 rpm 부하 조건 및 10 토크(10 kg/ml) 조건으로 작동하여 유리 섬유 필터에 의해 수집되었다.
세포수가 2×10 4 개/㎖이 되도록 DMEM(10% FBS) 배지에 희석하고 96-웰 배양용기에 100 ㎕씩 분주한 후 세포가 플레이트 표면에 부착할 때까지 16~20시간 동안 배양하였다. 배양이 끝난 후 배지를 제거하고 각 웰에 10 μM의 복합체 및 50 ㎍/㎖ 농도의 초미세먼지가 담긴 용액을 각각 100 ㎕씩 분주하고 24시간 동안 37 ℃, 5% CO 2 인큐베이터에서 배양한 후 다시 배지를 제거하였다. 그 후 상기 실시예 3과 동일하게 MTT 분석법을 통해 세포 생존율을 확인하였다.
그 결과, 초미세먼지만 단독 처리한 군에 비해 초미세먼지 및 아미노산 또는 올리고펩타이드와 지방산이 결합된 복합체를 동시에 처리한 군에서 세포 생존율이 현저하게 증가한 것을 확인하였고(도 5 내지 도 15),
이를 통해, 본 발명의 아미노산 또는 올리고펩타이드에 지방산이 결합된 복합체가 초미세먼지를 응집시켜 피부 세포를 효과적으로 보호할 수 있음을 알 수 있었다.
실시예 5. A549 세포에서 초미세먼지의 세포 독성 분석
인간 폐암상피세포주(A549)에 초미세먼지를 처리한 후 MTT 분석법을 통해 세포 독성을 분석하였다. MTT 분석법은 상기 실시예 3과 동일한 방법으로 수행되었으며, 배양된 A549 세포에 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120 및 200 ㎍/㎖ 농도의 초미세먼지를 처리하였다.
그 결과, 초미세먼지의 처리 농도가 증가할수록 세포생존율이 감소하였고, 특히 최고농도인 200 ㎍/㎖ 미세먼지 처리군에서는 약 20%의 세포만이 생존하는 것을 확인하였다(도 16).
실시예 6. 초미세먼지에 대한 펩타이드와 지방산 복합체의 세포 보호 효과 분석(A549 세포)
지방산-올리고펩타이드(서열번호 30의 아미노산 서열 곁사슬에 포화지방산 결합) 복합체가 초미세먼지에 의한 세포 독성을 감소시킬 수 있는지 확인하기 위해 MTT 분석법을 통해 세포 독성을 분석하였다. MTT 분석법은 상기 실시예 3과 동일한 방법으로 수행되었다.
그 결과, 초미세먼지만 단독 처리한 군(약 40%)에 비해 지방산-올리고펩타이드 복합체를 처리한 군에서 세포 생존율이 증가하였고, 특히 C6의 포화지방산을 제외한 나머지 C8~16의 포화지방산이 결합된 펩타이드 복합체에서 세포 생존율이 현저하게 증가하였으며, 그 중에서도 카프릭산(Capric acid, C10)과 결합된 복합체(P4, P11, P18, P25)는 70% 이상의 세포생존율을 보여 초미세먼지에 대한 세포 독성을 감소시킴을 확인하였다(도 17).
실시예 7. 은 염색(silver staining)법을 이용한 지방산-올리고펩타이드 복합체와 초미세먼지의 응집 효과 분석
20% SDS-PAGE 겔에 초미세먼지와 지방산-올리고 펩타이드 복합체 P11(서열번호 30의 아미노산 서열의 곁사슬에 카프릭산 결합)를 동시에 처리하고 은 염색법을 통해 초미세먼지와 응집되지 않은 복합체의 양을 확인하였다.
DMEM 배지에 100 ㎍/㎖ 농도의 초미세먼지를 단독, 또는 초미세먼지와 10, 50, 100 μM 농도의 P11 복합체를 동시에 처리한 후 24시간 동안 37℃, 5% CO 2 인큐베이터에서 배양하고 원심력 10,000 x g로 1시간 동안 원심분리하여 상등액 샘플을 준비하였다. 이후 20% SDS-PAGE 겔에 상등액 15 ㎕를 로딩하고 전기영동을 실시하였다. 은 염색 과정은 엘피스 바이오텍의 키트(PeptiGel™, ELPISBIOTECH, EBA-1053)를 이용하여 다음과 같이 수행하였다. 전기영동이 끝난 겔을 30% 에탄올과 10% 아세트산을 혼합한 용액에 1시간 동안 반응시켜 고정화시키고, 증류수로 2번 세척하였다. 이후 용액 A에 1분간 담갔다가 증류수로 2번 세척하고, 다시 포름알데히드가 포함된 용액 B에 20~30분간 겔을 담가 두었다. 마지막으로 겔을 증류수로 1분간 2번 세척한 후 용액 C에 담아 밴드가 나타날 때까지 기다린 후 고정액을 사용하여 반응을 중지시켰다.
그 결과, 초미세먼지와 복합체 P11을 동시에 처리한 군에서는 복합체 P11 단독 처리군에 비해 밴드 세기가 다소 감소하였고, 이는 초미세먼지와 지방산-올리고펩타이드 복합체가 응집되어 상등액에 남아있던 펩타이드 양이 감소된 것임을 알 수 있었다(도 18). 이를 통해, 본 발명의 올리고펩타이드에 지방산이 결합된 복합체는 초미세먼지와 응집됨으로써 초미세먼지를 제거할 수 있음을 알 수 있었다.
실시예 8. 마스크의 미세먼지 입자 투과량 비교를 이용한 지방산-올리고펩타이드 복합체의 분진 포집(입자 제거) 효율 분석
지방산-올리고펩타이드 복합체가 이동하는 초미세먼지를 흡착하여 마스크의 필터 효율을 증가시키는지 확인하기 위해 분진 포집(입자제거) 효율을 분석하였고, 분진 포집 효율의 평가 방법 및 계산식은 하기 표 24와 같다.
분진 포집(입자제거) 효율 평가 및 계산식
1) 마스크 필터 교체 2) 유량조절 : 19.4 LPM, 0.6 LPM으로 flow 조절3) CPC와 연결한 뒤 flow meter로 유량 체크 후 조절4) 유량 조절 후 DMA와 연결하여 leak test(blank) -> CPC 0값 확인 -> sheath 6.0l pm / particle diameter 0nm -> sheath(6) : CPC(0.6) = 10 : 1 5) DMA 50,100,200,300 nm로 변경하여 down-stream kPa 값과 CPC 값 체크6) 마스크 입자 제거(분진 포집) 효율 평가 계산식 * 마스크 입자 제거(분진 포집) 효율 efficiency(%)=(1-down/up)*100 * pressure drop(kPa) = down 값 확인
일반 마스크(HIP's)와 미세먼지 마스크(KF84)에 공기 중의 50-300 nm 크기의 미세먼지 입자 투과량을 전·후로 정량하여 마스크 입자 제거 효율(%)을 측정한 결과, 미세먼지 마스크는 50~300 nm 크기의 미세먼지 입자에 대하여 약 89~100%의 입자 제거(분진 포집) 효율이 있는 반면, 일반 마스크는 50~300 nm 크기의 미세먼지 입자에 대하여 약 39-57%의 입자 제거 효율이 있음을 확인하였다(도 19).
또한, 일반 마스크에 증류수 또는 지방산-올리고펩타이드 복합체 250 ppm 용액(증류수 희석)을 각각 1회 분사한 후, 공기 중의 50~300 nm 크기의 미세먼지 입자 투과량을 전·후로 정량하여 마스크 입자 제거(분진 포집) 효율(%)을 측정한 결과, 아무것도 분사하지 않은 일반 마스크와 증류수를 분사한 일반 마스크에서는 분집 포집 효율이 유사하였고, 아무것도 분사하지 않은 일반 마스크에 비해 지방산-펩타이드 복합체(Palmitic acid-KTTKS, Palmitic acid-RRRRR, Palmitic acid-KKKKK, Capric acid-RRRRR, Capric acid-RRRRRRRRR) 용액을 처리한 마스크에서 분진 포집 효율이 증가하였으며, 특히 미세먼지 입자 크기가 작을수록 지방산-펩타이드 복합체의 입자 제거 효율이 우수한 것으로 확인되었다(도 20 및 도 21).

Claims (5)

  1. 아미노산; 또는 올리고펩타이드의 N 말단, C 말단 또는 곁사슬;에 지방산이 결합된 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 올리고펩타이드는 서열번호 1 내지 30의 아미노산 서열로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 지방산은 포화지방산 또는 불포화지방산인 것을 특징으로 하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물.
  4. 제3항에 있어서, 상기 포화지방산은 카프로산(Caproic acid, C6:0), 카프릴산(Caprylic acid, C8:0), 펠라르곤산(Pelargonic acid, C9:0), 카프릭산(Capric acid, C10:0), 운데실산(Undecylic acid, C11:0), 라우르산(Lauric acid, C12:0), 미리스트산(Myristic acid, C14:0), 펜타데실산(Pentadecylic acid, C15:0), 팔미트산(Palmitic acid, C16:0), 마르가르산(Margaric acid, C17:0), 스테아르산(Stearic acid, C18:0), 노나데실산(Nonadecylic acid, C19:0), 아라킨산(Arachidic acid, C20:0), 헤네이코실산(Heneicosylic acid, C21:0), 베헨산(Behenic acid, C22:0), 트라이코실산(Tricosylic acid. C23:0), 리그노세르산(Lignoceric acid, C24:0), 펜타코실산(Pentacosylic acid, C25:0), 세로트산(Cerotic acid, C26:0), 헵타코실산(Heptacosylic acid, C27:0), 몬탄산(Montanic acid, C28:0), 노나코실산(Nonacosylic acid, C29:0), 멜리스산(Melissic acid, C30:0), 헤나트라이아콘틸산(Henatriacontylic acid, C31:0), 락세로산(Lacceroic acid, C32:0), 프실산(Psyllic acid, C33:0), 게드산(Geddic acid, C34:0), 세로플라스트산(Ceroplastic acid, C35:0) 및 헥사트라이아콘틸산(Hexatriacontylic acid, C36:0)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물.
  5. 제3항에 있어서, 상기 불포화지방산은 팔미톨레산(Palmitoleic acid, C16:1), 올레산(Oleic acid, C18:1), 엘라이드산(Elaidic acid, C18:1), 페트로셀린산(Petroselinic acid, C18:1), 바크센산(Vaccenic acid, C18:1), 곤도산(Gondoic acid, C20:1), 에루크산(Erucic acid, C22:1), 네르본산(Nervonic acid, C24:1), 리놀레산(Linoleic acid, C18:2), 시스-리놀렌산(cis-Linolenic acid, C18:3), 푸니크산(Punicic acid, C18:3), 엘레오스테아르산(Eleostearic acid, C18:3), 스테아리돈산(stearidonic acid, C18:4), 아라키돈산(Arachidonic acid, C20:4), 에이코사펜타엔산(Eicosapentaenoic acid, C20:5), 도코사펜타엔산(Docosapentaenoic acid, C22:5), 아드렌산(Adrenic acid, C22:4), 도코사헥사엔산(Docosahexaenoic acid, C22:6) 및 리시놀레산(Ricinoleic acid, C18:1)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상인 것을 특징으로 하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물.
PCT/KR2019/008330 2018-07-06 2019-07-05 펩타이드 복합체를 유효성분으로 함유하는 미세먼지 제거 또는 흡착용 화장료 조성물 WO2020009548A1 (ko)

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