WO2018235805A1 - 粉末食品、及びその製造方法、並びに粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法 - Google Patents

粉末食品、及びその製造方法、並びに粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法 Download PDF

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WO2018235805A1
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myrosinase
cruciferous
finely divided
food
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康平 彈塚
拓磨 東浦
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カゴメ株式会社
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    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Definitions

  • the present invention relates to a powdered food, a method for producing the same, and a method for promoting myrosinase activity of the powdered food.
  • Priority is claimed on Japanese Patent Application No. 2017-120932, filed Jun. 21, 2017, the content of which is incorporated herein by reference.
  • the application of the functional component is, for example, food, cosmetics, etc., and examples of the food include beverages, seasonings, supplements and the like.
  • GSL glucosinolate
  • GSL is contained in plants, for example, in cruciferous vegetables such as broccoli, cabbage and Japanese radish. GSL intake is known to prevent and ameliorate various diseases such as cancer and liver disorder (see Non-Patent Documents 1 and 2).
  • ITC isothiocyanate
  • ITC isothiocyanate
  • Myrosinase is an enzyme and is present in the body of cruciferous vegetables and in the intestines of humans.
  • GSL GSL in the form of vegetables etc.
  • the tissue is destroyed by chewing in the oral cavity, so that GSL in the vegetables and myrosinase react, and ITC converted from GSL is absorbed into the body.
  • many processed foods have myrosinase inactivated by heating during the production process. Therefore, when GSL is ingested with such processed foods, conversion to ITC in the oral cavity is hardly performed.
  • conversion to ITC is carried out by myrosinase possessed by intestinal bacteria in the body. The problem in this case is that the conversion efficiency is very low.
  • the challenge of processed foods containing GSL is to increase the conversion efficiency of GSL to ITC in foods containing both GSL and myrosinase.
  • the powdery food according to the present invention contains a finely divided first powder having myrosinase activity and a second powder containing GSL.
  • the volume average diameter of the finely divided first powder is 500 ⁇ m or less. That is, myrosinase contained in the first powder which has been refined promotes the conversion of GSL contained in the second powder.
  • a blending step that constitutes the method for producing a powdered food according to the present invention.
  • a finely divided first powder having myrosinase activity and a second powder comprising GSL are formulated.
  • What is further configured is miniaturization.
  • what is obtained is the finely divided first powder. Said refinement is carried out before preparation.
  • a blending step that constitutes the method for promoting the myrosinase activity of the powdered food according to the present invention.
  • a finely divided first powder having myrosinase activity and a second powder comprising GSL are formulated.
  • What is further configured is miniaturization.
  • what is obtained is the finely divided first powder. Said refinement is carried out before preparation.
  • the powder food containing GSL which the conversion efficiency to ITC was improved can be provided.
  • the powdered food (hereinafter referred to as "the present food") according to the present embodiment is a powdered food, which is a blend of at least a finely divided first powder and a second powder.
  • "Powdered food” is a food composed of powdered raw materials, for example, a capsule-packed supplement or powder intended to be added to a liquid and dissolved immediately before eating (eg, powdered beverage, powder Soup), powder seasoning, etc. Among them, capsule-packed supplements that are difficult to feel flavor are preferable.
  • the finely divided first powder is a powdery raw material and has myrosinase activity. Details of the finely divided first powder will be described later.
  • the second powder is a powdered raw material and contains glucosinolate. The details of the second powder will be described later.
  • ITCs are volatile due to their volatility and dissipate over time. Therefore, it is not preferable that the present food be converted from GSL to ITC before intake. That is, it is not preferable that GSL be converted to ITC in the present food. Being a powdered food interferes with the reaction of GSL and myrosinase. In this food, GSL and myrosinase react for the first time in the body after being ingested or in the liquid which is dissolved immediately before ingesting to generate ICT.
  • additives may be suitably used in the present food.
  • the additives are usually added to food, and for example, sweeteners such as acesulfame potassium, acidulants such as citric acid, antioxidants such as ascorbic acid, thickeners such as gum arabic, stear It is an anti-caking agent such as calcium phosphate, an excipient such as starch, a flavor, a coloring agent and the like.
  • the present food may further contain vegetable-derived powders other than the first powder and the second powder. That is, in one aspect, the powdery food according to one embodiment of the present invention comprises a finely divided first powder having myrosinase activity, a second powder containing glucosinolate, and optionally other components. .
  • the other component is at least one component selected from the group consisting of additives that can be approved as food, or powders derived from vegetables other than the first powder and the second powder.
  • the food-acceptable additive is at least one component selected from the group consisting of sweeteners, acidulants, antioxidants, thickeners, anti-caking agents, excipients, flavors, and colorants is there.
  • the blending amount of the other components is preferably 0 to 70% by weight based on the total weight of the powdered food.
  • the “first powder” means a powdered raw material having a myrosinase activity before being micronized (ie, a powdered raw material not containing micronization, which contains myrosinase).
  • the term "refined first powder” means a powdered raw material in which the first powder is finely divided, and has a myrosinase activity. The details of myrosinase activity will be described later.
  • the finely divided first powder is not particularly limited as long as it has myrosinase activity, but at least one powder selected from the group consisting of at least a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables It is preferable to contain
  • the cruciferous vegetables are rich in myrosinase.
  • a powder derived from a cruciferous vegetable refers to a cruciferous vegetable itself or a powder obtained from an extract from a cruciferous vegetable.
  • the "powder derived from the seeds of cruciferous vegetables” refers to the seeds of cruciferous vegetables themselves or those obtained by powdering the extract from the seeds of cruciferous vegetables.
  • Brain vegetables refers to vegetables classified as cruciferous. Examples thereof include mustard vegetables, cabbage, broccoli, kale, watercress, komatsuna, bok choy, cauliflower radish, cauliflower, Chinese cabbage, nabanas, takana, kohlrabi, and the like, with the mustard being especially preferred.
  • mustard vegetables cabbage, broccoli, kale, watercress, komatsuna, bok choy, cauliflower radish, cauliflower, Chinese cabbage, nabanas, takana, kohlrabi, and the like.
  • mustard being especially preferred.
  • One or more of these vegetables may be used. Moreover, you may use all or one part of the site
  • the finely divided first powder according to a powdery food according to an embodiment of the present invention is at least one selected from the group consisting of a powder derived from a cruciferous vegetable and a powder derived from a seed of cruciferous vegetable It is a powder consisting of only one.
  • the finely divided first powder according to a powdery food according to an embodiment of the present invention is at least one selected from the group consisting of a powder derived from a cruciferous vegetable and a powder derived from a seed of cruciferous vegetable And two other powders (eg, additives, etc.).
  • the content of at least one powder selected from the group consisting of a powder derived from a cruciferous vegetable and a powder derived from a seed of a cruciferous vegetable in the finely divided first powder is the total weight of the finely divided first powder 10 to 100% by weight is preferred.
  • the means for obtaining an extract from cruciferous vegetables and seeds thereof is not particularly limited as long as it can be performed while retaining myrosinase activity, but myrosinase is inactivated at high temperature (50 ° C. to 70 ° C.), so low temperature (eg 10) It is preferable to employ an extraction means at a temperature of not less than 50.degree. For example, water extraction at normal temperature or lower (for example, water extraction at 10 to 30 ° C.) and squeezing with a mill can be mentioned.
  • the means for producing powder may be pulverized after drying.
  • the means for drying is not particularly limited as long as it can be carried out while retaining myrosinase activity, but since myrosinase is inactivated at high temperatures, it is possible to adopt drying means at low temperatures (eg, -60 ° C or more and less than 50 ° C) preferable.
  • drying means at low temperatures (eg, -60 ° C or more and less than 50 ° C) preferable.
  • the means of grinding may be any method which is usually used, and for example, a method using a pin mill, jet mill or the like.
  • the “at least one powder selected from the group consisting of a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables” contained in the first powder before micronization is the cruciferous vegetables
  • at least one material selected from the group consisting of the seeds of the cruciferous vegetables is a powder obtained by extracting at low temperature, drying and grinding.
  • micronization refers to reducing the value of Mean Volume Diameter of powder or selecting a smaller powder.
  • the index to be aimed by the finely divided first powder is a specific volume average diameter.
  • the volume average diameter can be measured using the laser diffraction / scattering type particle size distribution measuring apparatus under the conditions described in the examples below.
  • the volume average diameter of the finely divided first powder is preferably more than 0 ⁇ m and not more than 500 ⁇ m, more preferably more than 0 ⁇ m and not more than 300 ⁇ m, and still more preferably 50 to 300 ⁇ m.
  • the volume average diameter in the above range promotes conversion of GSL to ITC by myrosinase.
  • volume average diameter is larger than 500 ⁇ m, conversion of GSL to ITC by myrosinase is not promoted, and if the volume average diameter is too small, powder scattering and moisture absorption and aggregation are likely to occur, and the first finely divided first It leads to the loss in the compounding process of powder, and the fall of processing aptitude. That is, in the present specification, “to make finer” means to select or adjust a powder having a volume average diameter of more than 0 ⁇ m and not more than 500 ⁇ m, preferably more than 0 ⁇ m and not more than 300 ⁇ m, more preferably 50 to 300 ⁇ m. For example, it can be performed by sieving with a mesh described later.
  • the “finely divided first powder” is a powder having a volume average diameter of more than 0 ⁇ m and not more than 500 ⁇ m, preferably more than 0 ⁇ m and not more than 300 ⁇ m, and more preferably 50 to 300 ⁇ m.
  • the means for refining is not particularly limited, but sieving by mesh is preferred.
  • the opening of the mesh is more than 0 ⁇ m, preferably 500 ⁇ m or less, more than 0 ⁇ m, more preferably 300 ⁇ m or less, and still more preferably 50 to 300 ⁇ m.
  • the myrosinase activity of the finely divided first powder is preferably 25.0 unit / g or more, and more preferably 40.0 unit / g or more.
  • the myrosinase activity of the first powder is promoted by micronization to 25.0 unit / g or more.
  • "having myrosinase activity” means that myrosinase activity is greater than 0 unit / g.
  • the amount of the finely divided first powder blended into the present food is not particularly limited because it varies depending on the form of the present food, but it is 2 to 20% by weight based on the total weight of the powdered food according to an embodiment of the present invention. It is preferably% (w / w).
  • the finely divided first powder has a GSL content of less than 60 mg / g, and preferably does not contain GSL. In another aspect, the finely divided first powder has a content of glucoraphanin (hereinafter sometimes abbreviated as GR) of less than 60 mg / g as GSL, and preferably does not contain GR.
  • GR glucoraphanin
  • the second powder is a powdery raw material and contains GSL.
  • the second powder is not particularly limited as long as it has GSL, but at least one powder selected from the group consisting of a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables preferable.
  • the cruciferous vegetables are rich in GSL.
  • a powder derived from a cruciferous vegetable refers to a cruciferous vegetable itself or a powder obtained from an extract from a cruciferous vegetable.
  • the "powder derived from the seeds of cruciferous vegetables” refers to the seeds of cruciferous vegetables themselves or those obtained by powdering the extract from the seeds of cruciferous vegetables.
  • the second powder according to the powdery food which is an embodiment of the present invention comprises at least one selected from the group consisting of a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables It is a powder.
  • the second powder according to the powder food which is an embodiment of the present invention comprises at least one powder selected from the group consisting of a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables.
  • other powders for example, additives etc.
  • the content of at least one powder selected from the group consisting of a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables is 10 to 100 weight based on the total weight of the second powder % Is preferred.
  • the cruciferous vegetables are as described above.
  • the cruciferous vegetable used for the second powder is preferably broccoli.
  • Broccoli is not limited by its maturity and may be sprouts.
  • One or more of these vegetables may be used.
  • the means for obtaining an extract from cruciferous vegetables and seeds thereof is not particularly limited as long as GSL can be extracted. Since GSL is a very stable compound, a commonly used extraction method may be adopted, for example, hot water extraction (for example, extraction with 50 to 100 ° C. hot water) and the like.
  • the means for producing powder may be pulverized after drying. The means for drying is not particularly limited as long as it can be carried out while retaining the GSL. Since GSL is a very stable compound, a commonly used drying method may be adopted, and examples thereof include spray drying, drum drying, vacuum freeze drying, cold air drying and the like.
  • the means of pulverization may be any commonly used method, and examples thereof include a pin mill and a jet mill.
  • the second powder may be appropriately used as the second powder in order to make it powder efficiently.
  • it is powdered base materials, such as dextrin.
  • the “powder” is a powder obtained by hot water extraction of at least one selected from the group consisting of the cruciferous vegetables and the seeds of cruciferous vegetables.
  • GSL contained in the second powder is not particularly limited, and exemplarily, glucoraphanin (sometimes abbreviated as GR; also referred to as sulforaphan glucosinolate), sinigrin, glucoercine, glucobrassicin, glucoraphenin, glucorafa Satin, phenethyl glucosinolate and the like, and GR is particularly preferred.
  • glucoraphanin sometimes abbreviated as GR; also referred to as sulforaphan glucosinolate
  • sinigrin glucoercine
  • glucobrassicin glucoraphenin
  • glucorafa Satin phenethyl glucosinolate
  • GR is particularly preferred.
  • One or more of these GSLs may be used.
  • the GSL content contained in the second powder is not particularly limited, but is preferably 60 mg / g or more and 1000 mg / g or less, and more preferably 120 mg / g or more and 1000 mg / g or less.
  • the GR content is preferably 60 mg / g or more and 1000 mg / g or less, and more preferably 120 mg / g or more and 1000 mg / g or less.
  • the second powder may or may not have myrosinase activity. Since the second powder needs to contain GSL, it is not preferable that GSL be converted to ITC during the production process (for example, during extraction). Therefore, it is preferable that myrosinase be inactivated in the production process of the second powder, and as a result, the second powder preferably has no myrosinase activity.
  • the term "without myrosinase activity" means that myrosinase activity is 0 unit / g in the measurement of myrosinase activity described later.
  • the second powder according to the powdered food according to one embodiment of the present invention is a powder whose myrosinase activity is less than 25.0 units / g, preferably less than 10 units / g.
  • the second powder according to the powdery food which is one embodiment of the present invention is a powder having no myrosinase activity (myrosinase activity is 0 unit / g).
  • the volume average diameter of the second powder according to the powdery food which is an embodiment of the present invention is preferably 20 to 1000 ⁇ m.
  • the blending amount of the second powder to the present food is not particularly limited because it varies depending on the form of the present food, but the blending amount of the second powder is relative to the total weight of the powdered food which is one embodiment of the present invention It is preferably 25 to 97% by weight (w / w). However, the total of the blending amount of the first powder, the blending amount of the second powder, and the blending amount of the other components does not exceed 100% by weight (w / w).
  • Myrosinase activity refers to an enzyme activity (titer) that converts GSL to ITC. Myrosinase activity (unit / g) is calculated by reacting myrosinase with GSL which is a substrate, measuring GSL content or ITC content at regular intervals, and based on the change.
  • the measurement of GSL content and ITC content can be performed by methods known to those skilled in the art.
  • the HPLC (high performance liquid chromatography) method can be used, and as a specific method of measuring GSL, the method of Fayhey et al. (Fahey et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 94, 10367- 10372, 1997) and the like, and as a method of measuring ITC, it may be performed according to the method of Han et al. (Han et al., Int. J. Mol. Sci., 12, 1854-1861, 2011) etc. it can.
  • Han et al. Han et al.
  • the powdered food according to an embodiment of the present invention is preferably, for example, about 30 mg in amount of glucosinolate per day.
  • a blending step that constitutes a method for producing a powdered food according to the present embodiment (hereinafter referred to as "the present production method").
  • the compounding step a finely divided first powder having myrosinase activity and a second powder containing glucosinolate are compounded.
  • the means for preparation is not particularly limited as long as the finely divided first powder and the second powder are uniformly mixed.
  • the finely divided first powder is a powder having a volume average diameter of more than 0 ⁇ m and not more than 500 ⁇ m, preferably more than 0 ⁇ m, and not more than 300 ⁇ m, and more preferably 50 to 300 ⁇ m.
  • the powder may be a powder that has been refined so as to be in the above numerical range, or may be a commercially available powder whose volume average diameter is in the above numerical range.
  • the micronization step is performed on the first powder prior to compounding, and the result is the micronized first powder.
  • the means of miniaturization is as described above. That is, in one aspect, the method for producing a powdered food according to an embodiment of the present invention is And D. formulating a finely divided first powder having myrosinase activity and a second powder comprising glucosinolate. Furthermore, the production method may include, prior to the preparation, micronizing the raw material containing myrosinase to obtain the micronized first powder.
  • the miniaturization may be carried out by sieving with a mesh having a mesh size of more than 0 ⁇ m and not more than 500 ⁇ m, preferably more than 0 ⁇ m and not more than 300 ⁇ m, more preferably 50 to 300 ⁇ m.
  • the raw material containing myrosinase may be a raw material containing at least one component selected from the group consisting of components derived from cruciferous vegetables and components derived from seeds of cruciferous vegetables;
  • the component derived from the cruciferous vegetable may be cruciferous vegetable itself, may be an extract from cruciferous vegetable, or may be further dried and crushed.
  • the component derived from the seed of the cruciferous vegetable may be the seed of the cruciferous vegetable itself, or an extract from the seed of the cruciferous vegetable, preferably a low temperature extract, and these may be further dried. It may be one that has been allowed to dry or is crushed.
  • the method may include obtaining the second powder by hot-water extracting raw materials including at least seeds of cruciferous vegetables and cruciferous vegetables before the preparation, drying and crushing.
  • a method of producing a powdered food of powdered food is At least obtaining a first powder by extracting at low temperature material containing cruciferous vegetables and cruciferous vegetable seeds at low temperature, drying and crushing; Obtaining a finely divided first powder having myrosinase activity by refining the first powder; At least obtaining a second powder comprising glucosinolate by hot-water extracting, drying and grinding materials comprising cruciferous vegetables and cruciferous vegetable seeds; Formulating a finely divided first powder having the myrosinase activity and a second powder comprising the glucosinolate; Is a method that includes
  • the present method It is at least a blending step that constitutes the method for promoting the myrosinase activity of the powdered food according to the present embodiment (hereinafter referred to as "the present method").
  • the finely divided first powder and the second powder are compounded.
  • the means for preparation is not particularly limited as long as the first powder and the second powder are uniformly mixed.
  • the micronization step is performed on the first powder prior to compounding, and the result is the micronized first powder.
  • the means of miniaturization is as described above. That is, in one aspect, the method for promoting myrosinase activity of a powdered food according to an embodiment of the present invention, And D. formulating a finely divided first powder having myrosinase activity and a second powder comprising glucosinolate. Furthermore, the method may include, prior to the compounding, comminuting the raw material containing myrosinase to obtain the finely divided first powder.
  • the miniaturization may be carried out by sieving with a mesh having a mesh size of more than 0 ⁇ m and not more than 500 ⁇ m, preferably more than 0 ⁇ m and not more than 300 ⁇ m, and more preferably 50 to 300 ⁇ m.
  • the raw material containing myrosinase may be a raw material containing at least one component selected from the group consisting of a component derived from cruciferous vegetables and a component derived from seeds of cruciferous vegetables;
  • the component derived from the cruciferous vegetable may be cruciferous vegetable itself, may be an extract from cruciferous vegetable, or may be further dried and crushed.
  • the component derived from the seed of the cruciferous vegetable may be the seed of the cruciferous vegetable itself, or an extract from the seed of the cruciferous vegetable, preferably a low temperature extract, and these may be further dried. It may be one that has been allowed to dry or is crushed.
  • the method may include hot-water extracting raw materials including at least seeds of cruciferous vegetables and cruciferous vegetables, drying and grinding to obtain the second powder before the preparation.
  • the method for promoting myrosinase activity of a powdered food comprises At least obtaining a first powder by extracting at low temperature material containing cruciferous vegetables and cruciferous vegetable seeds at low temperature, drying and crushing; Obtaining a finely divided first powder having myrosinase activity by refining the first powder; At least obtaining a second powder comprising glucosinolate by hot-water extracting, drying and grinding materials comprising cruciferous vegetables and cruciferous vegetable seeds; Formulating a finely divided first powder having the myrosinase activity and a second powder comprising the glucosinolate; Is a method that includes
  • the "myrosinase activity promotion" indicates that the myrosinase activity of the finely divided first powder is enhanced as compared to the myrosinase activity of the first powder before being finely divided (the first powder not being finely divided). .
  • the myrosinase activity of the first powder which has been micronized by the promotion of myrosinase activity is preferably 25.0 unit / g or more, and more preferably 40.0 unit / g or more.
  • “promoting myrosinase activity” means that myrosinase activity, which was less than 25.0 unit / g before micronization, becomes 25.0 unit / g or more by micronization.
  • the powdered food according to an embodiment of the present invention is At least a finely divided first powder having myrosinase activity, and Including a second powder comprising glucosinolate;
  • the finely divided first powder is At least one powder selected from the group consisting of at least a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables;
  • the powder comprises at least one powder selected from the group consisting of a powder derived from cruciferous vegetables and a powder derived from seeds of cruciferous vegetables;
  • the cruciferous vegetables are mustard beet, cabbage, broccoli, kale, watercress, komatsuna, bok choy, caiflower radish, cauliflower, Chinese cabbage, nabana, takana, kohlrabi, preferably beard beet;
  • the volume average diameter of the first powder that has been refined is 22 ⁇ m or more and 500 ⁇ m or less, preferably 50 to 300 ⁇ m;
  • the at least one powder selected from the group consisting of the powder derived from the cruciferous vegetable and the powder derived from the seed of the cruciferous vegetable, which is contained in the finely divided first powder comprises the cruciferous vegetable and the cruciferous It may be a powder obtained by extracting at least one selected from the group consisting of vegetable seeds at low temperature: The at least one powder selected from the group consisting of the powder derived from the cruciferous vegetable and the powder derived from the seed of the cruciferous vegetable, which is contained in the second powder, is derived from the seeds of the cruciferous vegetable and the cruciferous vegetable It may be a powder obtained by hot water extraction of at least one selected from the group consisting of Furthermore, the finely divided first powder may have a GSL content of less than 60 mg / g, or may not contain GSL. The finely divided first powder may have a GR content of less than 60 mg / g, or may not contain GR.
  • a method of producing a powdered food is: At least obtaining a first powder by extracting at low temperature material containing cruciferous vegetables and cruciferous vegetable seeds at low temperature, drying and crushing; Obtaining a finely divided first powder having myrosinase activity by refining the first powder; At least obtaining a second powder comprising glucosinolate by hot-water extracting, drying and grinding materials comprising cruciferous vegetables and cruciferous vegetable seeds; Blending the finely divided first powder having the myrosinase activity and the second powder comprising the glucosinolate;
  • the cruciferous vegetables in the first powder are mustard beet, cabbage, broccoli, kale, watercress, komatsuna, bok choy cayflower, cauliflower, cauliflower, Chinese cabbage, nabana, takanana, kohlrabi, preferably bearded mustard; Said micronization is sieving with a mesh having an opening of more
  • myrosinase activity was performed on GR in GSL by evaluating sulforaphan (SFN), which is an ITC converted from GR by myrosinase.
  • SFN sulforaphan
  • ⁇ Micronization> The refinement was done by sieve.
  • the cake obtained from the aforementioned mustard mustard seeds was ground with a pin mill, and the obtained powder was sieved with a sieve with different openings to obtain first powders with different volume average diameters.
  • the openings of the sieves used for sieving were 25 ⁇ m, 53 ⁇ m, 100 ⁇ m, 300 ⁇ m, 500 ⁇ m, 710 ⁇ m, and 850 ⁇ m.
  • the GR content and the SFN content in each of the first powders were determined by the HPLC method, and the GR and the SFN were not contained in each of the first powders.
  • the measuring method of GR content and SFN content is mentioned later.
  • volume average diameter The measurement of the volume average diameter of each first powder was performed using a laser diffraction / scattering particle size distribution measuring device (Microtrac MT3300EX, manufactured by Microtrac BEL). As analysis conditions, distilled water was used as the solvent, the solvent refractive index was “1.333”, the permeability was “transmission”, the particle refractive index was “1.81”, and the shape was “non-spherical”.
  • Broccoli sprout was used as the raw material.
  • Broccoli seeds (Caudill Seed Co., Inc.) were germinated and grown for 1 day after germination to obtain broccoli sprouts. This was subjected to extraction with hot water at 95 ° C. for 30 minutes, and the residue of broccoli sprout was removed to obtain an extract. The extract was concentrated using a rotary evaporator and then mixed with dextrin to obtain a second powder by spray drying. The GR content in the second powder was determined by HPLC method to be 145 mg / g. The SFN content in the second powder was measured by HPLC, and it was found that the second powder contained no SFN. Moreover, since 2nd powder extracted with hot water, it does not have myrosinase activity.
  • SFN content The measurement of the SFN content was performed by HPLC under the following conditions.
  • Mobile phase: Ultra pure water: Acetonitrile 80: 20 (v: v)
  • the SFN content was calculated from the concentration of SFN in the sample obtained by HPLC analysis and the amount of sample subjected to extraction.
  • the myrosinase activity (unit / g) of each first powder was evaluated by measuring the SFN content converted from GR by the reaction of myrosinase. Specifically, it was calculated by the following equation.
  • the reaction of myrosinase by mixing the first powder and the second powder was performed as follows.
  • the first powder of each volume average diameter was prepared in each of 2.5 mg, 5.0 mg and 10.0 mg in a 50 mL tube.
  • the second powder was dissolved in 33 mM phosphate buffer (pH 7.0) to a GR content of 2.0 mg / ml, and kept at 37 ° C. in a water bath (second powder solution). 5 mL of the second powder solution was added to a 50 mL tube containing the first powder, mixed well, and reaction of myrosinase was started at 37 ° C. in a water bath.
  • Table 1 shows the volume average diameter and myrosinase activity of each first powder obtained by the treatment of sieves with different openings.
  • the myrosinase activity in the case of using the first powder sieved with a sieve with an aperture of 500 ⁇ m was determined by using a sieve with a sieve with an aperture of 850 ⁇ m having the largest volume average diameter. It was about twice compared with the case where powder was used.
  • the volume average diameter of the first powder at this time was about 500 ⁇ m. Furthermore, the smaller the mesh size, the smaller the volume average diameter of the first powder and the higher the myrosinase activity.
  • the myrosinase activity in the case of using the first powder having a volume average diameter of about 600 ⁇ m obtained by a sieve with an opening of 710 ⁇ m is compared with the case of using the first powder obtained by a sieve of an opening 850 ⁇ m. Almost unchanged.
  • the powdered food comprising the finely divided first powder and the second powder comprising GSL is a powdered food with increased conversion to ITC.
  • the present invention is extremely important industrially because it can provide a powdered food containing GSL, a method for producing the same, and a method for promoting the myrosinase activity of the powdered food containing GSL, in which the conversion efficiency to ITC is enhanced.

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Abstract

少なくとも、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末、及び、グルコシノレートを含む第２粉末、を含む粉末食品。

Description

粉末食品、及びその製造方法、並びに粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法
　本発明が関係するのは、粉末食品、及びその製造方法、並びに粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法である。
　本願は、２０１７年６月２１日に、日本に出願された特願２０１７－１２０９３２号に基づき優先権を主張し、その内容をここに援用する。
　近年、健康志向の高まりの下、人々が注目するのは、食品の機能性成分である。前記機能性成分の用途は、幅広く、例えば、食品や化粧品等であり、前記食品としては、例えば、飲料、調味料、サプリメント等が挙げられる。
　注目されている食品由来の機能性成分の一つは、グルコシノレート（以下、ＧＳＬと略すことがある）である。ＧＳＬは、植物に含有されており、例えば、ブロッコリー、キャベツ、ダイコン等のアブラナ科野菜に含有されている。ＧＳＬの摂取は、がんや肝障害等の様々な疾病を予防、改善することが知られている（非特許文献１、２参照）。摂取したＧＳＬは、イソチオシアネート（以下、ＩＴＣと略すことがある）に変換され、ＩＴＣが活性本体として前述の予防、改善効果を示す。ＧＳＬをＩＴＣに変換するのは、ミロシナーゼである。ミロシナーゼは、酵素であり、アブラナ科野菜中やヒトの腸等の体内に存在する。
　通常、我々は、ＧＳＬを野菜等の形で摂取する。その際、口腔内での咀嚼により組織が破壊されることで、野菜中のＧＳＬとミロシナーゼが反応し、ＧＳＬから変換されたＩＴＣが体内に吸収される。しかし、多くの加工食品は、製造過程の加熱によってミロシナーゼが失活している。そのため、そのような加工食品でＧＳＬを摂取した場合、口腔内でのＩＴＣへの変換はほとんど行われない。また、咀嚼を伴わないサプリメント等の形態で摂取した場合も同様である。このような食品でＧＳＬを摂取した場合、ＩＴＣへの変換は、体内の腸内細菌が有するミロシナーゼによって行われる。この場合の問題点は、変換効率が非常に低いことである。
Ｄｉｎｋｏｖａ－Ｋｏｓｔｏｖａ　ＡＴら、他１名、Ｔｒｅｎｄｓ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ、２０１２年、第１８巻、第３３７から３４７ページ。 Ｋｉｋｕｃｈｉら、他７名、Ｗｏｒｌｄ　Ｊ　Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ、２０１５年、第２１巻、第１２４５７から１２４６７ページ。
　ＧＳＬを含む加工食品の課題は、ＧＳＬとミロシナーゼの両方を含む食品におけるＧＳＬからＩＴＣへの変換効率を高めることである。
　前記課題を解決するために、本発明者らは鋭意検討した結果、ミロシナーゼ活性を有する粉末を微細化することで、ＧＳＬのＩＴＣへの変換を促進できることを見出した。本発明に係る粉末食品は、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末とＧＳＬを含む第２粉末とを含有する。ここで、微細化された第１粉末の体積平均径は、５００μｍ以下である。つまり、微細化された第１粉末に含まれるミロシナーゼは、第２粉末に含まれるＧＳＬの変換を促進する。
　本発明に係る粉末食品の製造方法を構成するのは、少なくとも、調合工程である。ここで、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末とＧＳＬを含む第２粉末は、調合される。更に構成するのは、微細化である。ここで、得られるのは、微細化された第１粉末である。前記微細化は、調合の前に行われる。
　本発明に係る粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法を構成するのは、少なくとも、調合工程である。ここで、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末とＧＳＬを含む第２粉末は、調合される。更に構成するのは、微細化である。ここで、得られるのは、微細化された第１粉末である。前記微細化は、調合の前に行われる。
　本発明によれば、ＩＴＣへの変換効率が高められた、ＧＳＬを含む粉末食品を提供できる。
　＜本実施の形態に係る粉末食品の概要＞ 
　本実施の形態に係る粉末食品（以下、「本食品」という。）とは、粉末食品であって、少なくとも、微細化された第１粉末と、第２粉末とが配合されたものである。「粉末食品」とは、粉末状の原材料から構成される食品であって、例示するとカプセル詰めサプリメントや喫飲直前に液体に添加して溶解させることを目的とした粉末（例えば、粉末飲料、粉末スープ）、粉末調味料等である。中でも香味を感じにくいカプセル詰めサプリメントが好ましい。
　微細化された第１粉末とは、粉末状の原材料であり、ミロシナーゼ活性を有する。微細化された第１粉末の詳細は、後述する。第２粉末は、粉末状の原材料であり、グルコシノレートを含む。第２粉末の詳細は、後述する。
　ＩＴＣは、揮発性のため不安定であり、経時的に消失する。したがって、本食品は、摂取前にＧＳＬからＩＴＣに変換されることは好ましくない。つまり、本食品中においてＧＳＬがＩＴＣに変換されることは、好ましくない。粉末食品であることは、ＧＳＬとミロシナーゼの反応を妨げる。本食品では、摂取された後の体内で、又は摂取直前に溶解した液体中で初めてＧＳＬとミロシナーゼが反応し、ＩＣＴが生成される。
　本食品は、各種添加物が適宜使用されていてもよい。前記添加物は、通常、食品に添加されるものであり、例示すると、アセスルファムカリウム等の甘味料、クエン酸等の酸味料、アスコルビン酸等の酸化防止剤、アラビアガム等の増粘剤、ステアリン酸カルシウム等の固結防止剤、スターチ等の賦形剤、香料、着色料等である。また、本食品は、第１粉末及び第２粉末以外の野菜由来の粉末をさらに含んでいてもよい。
　すなわち、１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品は、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末と、グルコシノレートを含む第２粉末と、所望によりその他の成分とを含む。
　前記その他の成分は、食品として許可され得る添加剤、又は第１粉末及び第２粉末以外の野菜由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの成分である。
　前記食品として許可され得る添加剤は、甘味料、酸味料、酸化防止剤、増粘剤、固結防止剤、賦形剤、香料、及び着色料からなる群から選択される少なくとも１つの成分である。
　前記その他の成分の配合量は、前記粉末食品の総重量に対して、０～７０重量％が好ましい。
　＜微細化された第１粉末＞
　本明細書において「第１粉末」とは、ミロシナーゼ活性を有する、微細化される前の粉末状の原材料（すなわち、ミロシナーゼを含む、微細化が行われていない粉末状の原材料）を意味する。
　本願明細書において「微細化された第１粉末」とは、前記第１粉末が微細化された粉末状の原材料を意味し、ミロシナーゼ活性を有する。
　ミロシナーゼ活性の詳細は、後述する。微細化された第１粉末は、ミロシナーゼ活性を有していれば特に限定されないが、少なくとも、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末を含有することが好ましい。アブラナ科野菜は、ミロシナーゼを豊富に含んでいるためである。「アブラナ科野菜由来の粉末」とは、アブラナ科野菜そのもの又はアブラナ科野菜からの抽出物を粉末にしたものをいう。「アブラナ科野菜の種子由来の粉末」とは、アブラナ科野菜の種子そのもの又はアブラナ科野菜の種子からの抽出物を粉末にしたものをいう。
　「アブラナ科野菜」とは、アブラナ科に分類される野菜をいう。例示すると、カラシ菜、キャベツ、ブロッコリー、ケール、クレソン、コマツナ、チンゲンサイ、カイワレダイコン、カリフラワー、ハクサイ、ナバナ、タカナ、コールラビ等であり、特にカラシ菜が好ましい。これらの野菜のうち１種、又は複数種用いてもよい。また、これら野菜の部位（花、葉や茎）の全部、又は一部を用いてもよい。
　１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品に係る微細化された第１粉末は、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つのみからなる粉末である。
　別の側面として、本発明の一実施形態である粉末食品に係る微細化された第１粉末は、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末と、さらにその他の粉末（例えば、添加剤等）とを含む。
　微細化された第１粉末において、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末の含有量は、微細化された第１粉末の総重量に対して、１０～１００重量％が好ましい。
　アブラナ科野菜及びその種子から抽出物を得る手段は、ミロシナーゼ活性を保持したまま行うことができれば特に限定されないが、ミロシナーゼは高温（５０℃～７０℃）で失活するため、低温（例えば、１０℃以上５０℃未満）での抽出手段を採用することが好ましい。例えば、常温以下での水抽出（例えば、１０～３０℃での水抽出）や、搾油機での圧搾が挙げられる。粉末にする手段は、乾燥後に粉砕すればよい。乾燥の手段は、ミロシナーゼ活性を保持したまま行うことができれば特に限定されないが、ミロシナーゼは高温で失活するため、低温（例えば、－６０℃以上５０℃未満）での乾燥手段を採用することが好ましい。例示すると、真空凍結乾燥や冷風乾燥等である。粉砕の手段は、通常用いられる方法であればよく、例示すると、ピンミルやジェットミル等を用いる方法である。
　１つの側面として、微細化前の第１粉末に含まれる、「アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末」は、前記アブラナ科野菜及び前記アブラナ科野菜の種子からなる群から選択される少なくとも１つの材料を低温で抽出し、乾燥させ、粉砕することによって得られる粉末である。
　本明細書において「微細化」とは、粉末の体積平均径（Ｍｅａｎ　Ｖｏｌｕｍｅ　Ｄｉａｍｅｔｅｒ）の値を小さくすること、又は小さい粉末を選択することをいう。微細化された第１粉末が目指すべき指標は、特定の体積平均径である。体積平均径は、レーザー回折／散乱式粒子径分布測定装置を用いて後述の実施例に記載の条件で測定できる。微細化された第１粉末の体積平均径は、０μｍより大きく、５００μｍ以下であることが好ましく、０μｍより大きく、３００μｍ以下であることがより好ましく、５０～３００μｍであることがさらに好ましい。体積平均径が前記範囲であることにより、ミロシナーゼによるＧＳＬのＩＴＣへの変換が促進される。体積平均径が５００μｍより大きいと、ミロシナーゼによるＧＳＬのＩＴＣへの変換が促進されず、体積平均径が小さすぎると、粉末の飛散や吸湿による固着、凝集が発生しやすく、微細化された第１粉末の調合工程でのロスや加工適性の低下につながる。
　すなわち、本明細書において「微細化する」とは、体積平均径が、０μｍより大きく、５００μｍ以下、好ましくは０μｍより大きく、３００μｍ以下、より好ましくは５０～３００μｍの粉末を選択するか又は調整することを意味し、例えば、後述のメッシュによる篩別により行うことができる。
　１つの側面として、「微細化された第１粉末」とは、体積平均径が、０μｍより大きく、５００μｍ以下、好ましくは０μｍより大きく、３００μｍ以下、より好ましくは５０～３００μｍの粉末である。
　微細化の手段は、特に限定されないが、メッシュによる篩別が好ましい。メッシュの目開きは、０μｍより大きく、５００μｍ以下が好ましく、０μｍより大きく、３００μｍ以下がより好ましく、５０～３００μｍであることがさらに好ましい。
　微細化された第１粉末のミロシナーゼ活性は、２５．０ｕｎｉｔ／ｇ以上であることが好ましく、４０．０ｕｎｉｔ／ｇ以上であることがより好ましい。第１粉末のミロシナーゼ活性は、微細化によって促進され、２５．０ｕｎｉｔ／ｇ以上となる。
　本明細書において「ミロシナーゼ活性を有する」とは、ミロシナーゼ活性が０ｕｎｉｔ／ｇより大きいことを意味する。
　本食品への微細化された第１粉末の配合量は、本食品の形態によって異なるため、特に限定されないが、本発明の一実施形態である粉末食品の総重量に対して、２～２０重量％（ｗ／ｗ）であることが好ましい。
　１つの側面として、微細化された第１粉末は、ＧＳＬの含有量が６０ｍｇ／ｇ未満であり、好ましくはＧＳＬを含まない。
　また、別の側面として、微細化された第１粉末は、ＧＳＬとして、グルコラファニン（以下、ＧＲと略すことがある）の含有量が６０ｍｇ／ｇ未満であり、好ましくはＧＲを含まない。
　＜第２粉末＞
　第２粉末とは、粉末状の原材料であり、ＧＳＬを含有する。第２粉末は、ＧＳＬを有していれば特に限定されないが、少なくとも、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末を含有することが好ましい。アブラナ科野菜は、ＧＳＬを豊富に含んでいるためである。「アブラナ科野菜由来の粉末」とは、アブラナ科野菜そのもの又はアブラナ科野菜からの抽出物を粉末にしたものをいう。「アブラナ科野菜の種子由来の粉末」とは、アブラナ科野菜の種子そのもの又はアブラナ科野菜の種子からの抽出物を粉末にしたものをいう。
　１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品に係る第２粉末は、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つのみからなる粉末である。
　別の側面として、本発明の一実施形態である粉末食品に係る第２粉末は、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末と、さらにその他の粉末（例えば、添加剤等）とを含む。
　第２粉末において、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末の含有量は、第２粉末の総重量に対して、１０～１００重量％が好ましい。
　アブラナ科野菜とは、前述のとおりである。なかでも第２粉末に用いられるアブラナ科野菜は、ブロッコリーが好ましい。ブロッコリーは、その成熟度によって限定されず、スプラウトであってもよい。これらの野菜のうち１種、又は複数種用いてもよい。また、これら野菜の部位（花、葉や茎）の全部、又は一部を用いてもよい。
　アブラナ科野菜及びその種子から抽出物を得る手段は、ＧＳＬが抽出可能であれば特に限定されない。ＧＳＬは非常に安定な化合物であるため、通常用いられる抽出方法を採用すればよく、例示すると、熱水抽出（例えば、５０～１００℃の熱水で抽出）等である。粉末にする手段は、乾燥後に粉砕すればよい。乾燥の手段は、ＧＳＬを保持したまま行うことができれば特に限定されない。ＧＳＬは非常に安定な化合物であるため、通常用いられる乾燥方法を採用すればよく、例示すると、スプレードライ、ドラム乾燥、真空凍結乾燥、冷風乾燥等である。粉砕の手段は、通常用いられる方法であればよく、例示すると、ピンミルやジェットミル等が挙げられる。第２粉末は、効率的に粉末化するために各種添加物が適宜使用されていてもよい。前記添加物を例示すると、デキストリン等の粉末化基材である。
　１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品に係る第２粉末に含まれる、「アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末」とは、前記アブラナ科野菜及び前記アブラナ科野菜の種子からなる群から選択される少なくとも１つを熱水抽出することによって得られる粉末である。
　第２粉末が含有するＧＳＬは、特に限定されないが、例示すると、グルコラファニン（ＧＲと略すことがある；スルフォラファングルコシノレートとも呼ばれる）、シニグリン、グルコエルシン、グルコブラシシン、グルコラフェニン、グルコラファサティン、フェネチルグルコシノレート等であり、特にＧＲが好ましい。これらのＧＳＬのうち１種、又は複数種用いてもよい。
　第２粉末に含まれるＧＳＬ含量は、特に限定されないが、６０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下であることが好ましく、１２０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下であることがより好ましい。また、別の側面として、ＧＳＬ含量として、ＧＲ含量が、６０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下であることが好ましく、１２０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下であることがより好ましい。
　第２粉末は、ミロシナーゼ活性を有していても、有していなくてもよい。第２粉末は、ＧＳＬを含むことが必要なため、製造過程の途中（例えば抽出中）でＧＳＬがＩＴＣに変換されることは好ましくない。したがって、第２粉末は、その製造過程においてミロシナーゼが失活することが好ましく、結果、第２粉末は、ミロシナーゼ活性を有さないほうが好ましい。「ミロシナーゼ活性を有さない」とは、後述するミロシナーゼ活性の測定において、ミロシナーゼ活性が０ｕｎｉｔ／ｇであることを意味する。
　１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品に係る第２粉末は、ミロシナーゼ活性が２５．０ｕｎｉｔ／ｇ未満、好ましくは１０ｕｎｉｔ／ｇ未満である粉末である。
　別の側面として、本発明の一実施形態である粉末食品に係る第２粉末は、ミロシナーゼ活性を有さない（ミロシナーゼ活性が０ｕｎｉｔ／ｇである）粉末である。
　また、本発明の一実施形態である粉末食品に係る第２粉末の体積平均径は、２０～１０００μｍであることが好ましい。
　本食品への第２粉末の配合量は、本食品の形態によって異なるため、特に限定されないが、第２粉末の配合量は、本発明の１実施形態である粉末食品の総重量に対して、２５～９７重量％（ｗ／ｗ）であることが好ましい。
　但し、前記第１粉末の配合量、前記第２粉末の配合量、及び前記その他の成分の配合量の合計は、１００重量％（ｗ／ｗ）を超えない。
　＜ミロシナーゼ活性＞
　「ミロシナーゼ活性」とは、ＧＳＬをＩＴＣへ変換する酵素活性（力価）をいう。ミロシナーゼ活性（ｕｎｉｔ／ｇ）は、ミロシナーゼと基質であるＧＳＬを反応させ、一定時間ごとにＧＳＬ含量又はＩＴＣ含量を測定し、その変化を基に算出される。
　ＧＳＬ含量及びＩＴＣ含量の測定は、当業者周知の方法により行うことができる。例えば、ＨＰＬＣ（高速液体クロマトグラフィー）法を用いることができ、具体的なＧＳＬの測定方法としては、Ｆａｙｈｅｙらの方法（Ｆａｈｅｙ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｐｒｏｃ．　Ｎａｔｌ．　Ａｃａｄ．　Ｓｃｉ．　ＵＳＡ，　９４，　１０３６７－１０３７２，　１９９７）等に従って行うことができ、ＩＴＣの測定方法としては、Ｈａｎらの方法（Ｈａｎ　ｅｔ　ａｌ．，　Ｉｎｔ．　Ｊ．　Ｍｏｌ．　Ｓｃｉ．，　１２，　１８５４－１８６１，　２０１１）等に従って行うことができる。
　本発明の一実施形態である粉末食品は、例えば、１日あたり、グルコシノレートの量で３０ｍｇ程度を摂取することが好ましい。
　＜本実施の形態に係る粉末食品の製造方法＞
　本実施の形態に係る粉末食品の製造方法（以下、「本製法」という。）を構成するのは、少なくとも、調合工程である。調合工程では、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末とグルコシノレートを含む第２粉末とが調合される。調合の手段は、前記微細化された第１粉末と前記第２粉末が均一に混合されればよく、特に限定されない。
　前記微細化された第１粉末は、体積平均径が０μｍより大きく、５００μｍ以下、好ましくは０μｍより大きく、３００μｍ以下、より好ましくは５０～３００μｍの粉末であり、後述の微細化工程により体積平均径が上記数値範囲となるよう微細化された粉末であってもよく、体積平均径が上記数値範囲である市販されている粉末であってもよい。
　前記調合工程では、得られる粉末食品の総重量に対して、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末を２～２０重量％、第２粉末を２５～９７重量％で調合することが好ましい。
　本製法を更に構成するのは、微細化工程である。微細化工程は、調合の前に第１粉末に対して行われ、その結果得られるのは、微細化された第１粉末である。微細化の手段は前述のとおりである。
　すなわち、１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品の製造方法は、
　ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末と、グルコシノレートを含む第２粉末とを調合することを含む。
　さらに、前記製造方法は、前記調合の前に、ミロシナーゼを含む原材料を微細化して前記微細化された第１粉末を得ることを含んでもよく、
　前記微細化は、目開き０μｍより大きく、５００μｍ以下、好ましくは０μｍより大きく、３００μｍ以下、より好ましくは５０～３００μｍのメッシュによる篩別により行ってもよい。
　前記ミロシナーゼを含む原材料は、アブラナ科野菜料由来の成分及びアブラナ科野菜の種子由来の成分からなる群から選択される少なくとも１つの成分を含む原材料であってもよく；
　前記アブラナ科野菜由来の成分は、アブラナ科野菜そのものであってもよく、アブラナ科野菜からの抽出物であってもよく、これらをさらに乾燥、粉砕したものであってもよい。
　前記アブラナ科野菜の種子由来の成分は、アブラナ科野菜の種子そのものであってもよく、アブラナ科野菜の種子からの抽出物、好ましくは低温での抽出物であってもよく、これらをさらに乾燥させたもの又は乾燥させ粉砕したものであってもよい。
　前記製造方法は、前記調合の前に、少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む原材料を熱水抽出し、乾燥させ、粉砕することによって前記第２粉末を得ることを含んでもよい。
　別の側面として、本発明の一実施形態である粉末食品の粉末食品の製造方法は、
　少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む材料を低温で抽出し、乾燥させ、粉砕することによって第１粉末を得ることと、
　前記第１粉末を微細化することによって、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末を得ることと、
　少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む材料を熱水抽出し、乾燥させ、粉砕することによってグルコシノレートを含む第２粉末を得ることと、
　前記ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末と前記グルコシノレートを含む第２粉末とを調合することと、
を含む、方法である。
　＜本実施の形態に係る粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法＞
　本実施の形態に係る粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法（以下、「本方法」という。）を構成するのは、少なくとも、調合工程である。調合工程では、微細化された第１粉末と第２粉末が調合される。調合の手段は、前記第１粉末と前記第２粉末とが均一に混合されればよく、特に限定されない。
　本方法を更に構成するのは、微細化工程である。微細化工程は、調合の前に第１粉末に対して行われ、その結果得られるのは、微細化された第１粉末である。微細化の手段は前述のとおりである。
　すなわち、１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法は、
　ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末と、グルコシノレートを含む第２粉末とを調合することを含む。
　さらに、前記方法は、前記調合の前に、ミロシナーゼを含む原材料を微細化して前記微細化された第１粉末を得ることを含んでもよく、
　前記微細化は、目開き０μｍより大きく、５００μｍ以下、好ましくは０μｍよりい大きく、３００μｍ以下、より好ましくは５０～３００μｍのメッシュによる篩別により行ってもよい。
　前記ミロシナーゼを含む原材料は、アブラナ科野菜由来の成分及びアブラナ科野菜の種子由来の成分からなる群から選択される少なくとも１つの成分を含む原材料であってもよく；
　前記アブラナ科野菜由来の成分は、アブラナ科野菜そのものであってもよく、アブラナ科野菜からの抽出物であってもよく、これらをさらに乾燥、粉砕したものであってもよい。
　前記アブラナ科野菜の種子由来の成分は、アブラナ科野菜の種子そのものであってもよく、アブラナ科野菜の種子からの抽出物、好ましくは低温での抽出物であってもよく、これらをさらに乾燥させたもの又は乾燥させ粉砕したものであってもよい。
　前記方法は、前記調合の前に、少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む原材料を熱水抽出し、乾燥させ、粉砕することによって前記第２粉末を得ることを含んでもよい。
　別の側面として、本発明の一実施形態である粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法は、
　少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む材料を低温で抽出し、乾燥させ、粉砕することによって第１粉末を得ることと、
　前記第１粉末を微細化することによって、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末を得ることと、
　少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む材料を熱水抽出し、乾燥させ、粉砕することによってグルコシノレートを含む第２粉末を得ることと、
　前記ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末と前記グルコシノレートを含む第２粉末とを調合することと、
を含む、方法である。
　「ミロシナーゼ活性促進」とは、微細化された第１粉末のミロシナーゼ活性が、微細化される前の第１粉末（微細化されていない第１粉末）のミロシナーゼ活性と比べて、高まることを指す。ミロシナーゼ活性促進によって、微細化された第１粉末のミロシナーゼ活性は、２５．０ｕｎｉｔ／ｇ以上となることが好ましく、４０．０ｕｎｉｔ／ｇ以上となることがより好ましい。
　別の側面として、「ミロシナーゼ活性促進」とは、微細化前は２５．０ｕｎｉｔ／ｇ未満であったミロシナーゼ活性が、微細化により２５．０ｕｎｉｔ／ｇ以上になることを意味する。
　１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品は、
　少なくとも、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末、及び、
　グルコシノレートを含む第２粉末を含み；
　前記微細化された第１粉末は、
　少なくとも、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末を含み、
　好ましくはアブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つからなる粉末であり；
　前記アブラナ科野菜は、カラシ菜、キャベツ、ブロッコリー、ケール、クレソン、コマツナ、チンゲンサイ、カイワレダイコン、カリフラワー、ハクサイ、ナバナ、タカナ、コールラビであり、好ましくはカラシ菜であり；
　前記微細化された第１粉末の体積平均径は２２μｍ以上５００μｍ以下、好ましくは５０～３００μｍであり；
　前記微細化された第１粉末のミロシナーゼ活性は、２５．０ｕｎｉｔ／ｇ以上、好ましくは４０．０ｕｎｉｔ／ｇ以上であり；
　前記第２粉末は、
　少なくとも、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末を含み、　好ましくはアブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末からなる粉末であり；
　前記アブラナ科野菜は、カラシ菜、キャベツ、ブロッコリー、ケール、クレソン、コマツナ、チンゲンサイ、カイワレダイコン、カリフラワー、ハクサイ、ナバナ、タカナ、コールラビ、好ましくはブロッコリーであり；
　第２粉末に含まれるグルコシノレートの含量は６０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下、好ましくは１２０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下であり；
　前記グルコシノレートは、グルコラファニンであり；
　前記第２粉末は、ミロシナーゼ活性が２５．０ｕｎｉｔ／ｇ未満、好ましくは１０ｕｎｉｔ／ｇ未満であり、又はミロシナーゼ活性を有さず；
　前記第１粉末の配合量は、前記粉末食品の総重量に対して、２～２０重量％であり、
　前記第２粉末の配合量は、前記粉末食品の総重量に対して、２５～９７重量％であり、
　前記第１粉末と前記第２粉末の配合量の合計は１００重量％を超えない、
　粉末食品である。
　前記微細化された第１粉末に含まれる、前記アブラナ科野菜由来の粉末及び前記アブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末は、前記アブラナ科野菜及び前記アブラナ科野菜の種子からなる群から選択される少なくとも１つを低温で抽出することによって得られる粉末であってもよく：
　前記第２粉末に含まれる、前記アブラナ科野菜由来の粉末及び前記アブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末は、前記アブラナ科野菜及び前記アブラナ科野菜の種子からなる群から選択される少なくとも１つを熱水抽出することによって得られる粉末であってもよい。
　さらに、前記微細化された第１粉末は、ＧＳＬの含有量が６０ｍｇ／ｇ未満であってもよく、又はＧＳＬを含まなくてもよい。
　前記微細化された第１粉末は、ＧＲの含有量が６０ｍｇ／ｇ未満であってもよく、又はＧＲを含まなくてもよい。
　１つの側面として、本発明の一実施形態である粉末食品の製造方法は、
　少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む材料を低温で抽出し、乾燥させ、粉砕することによって第１粉末を得ることと、
　前記第１粉末を微細化することによって、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末を得ることと、
　少なくとも、アブラナ科野菜及びアブラナ科野菜の種子を含む材料を熱水抽出し、乾燥させ、粉砕することによってグルコシノレートを含む第２粉末を得ることと、
　前記ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末と前記グルコシノレートを含む第２粉末とを調合することと、を含み；
　前記第１粉末における前記アブラナ科野菜は、カラシ菜、キャベツ、ブロッコリー、ケール、クレソン、コマツナ、チンゲンサイ、カイワレダイコン、カリフラワー、ハクサイ、ナバナ、タカナ、コールラビであり、好ましくはカラシ菜であり；
　前記微細化が、目開き０μｍ超５００μｍ以下、好ましくは０μｍ超３００μｍ以下、より好ましくは５０～３００μｍのメッシュによる篩別であり；
　前記微細化が、前記第１粉末の体積平均径が２２μｍ以上５００μｍ以下、好ましくは５０～３００μｍとなるように微細化することであり；
　前記微細化が、第１粉末のミロシナーゼ活性が、２５．０ｕｎｉｔ／ｇ以上、好ましくは４０．０ｕｎｉｔ／ｇ以上となるように微細化することであり：
　前記第２粉末における前記アブラナ科野菜は、カラシ菜、キャベツ、ブロッコリー、ケール、クレソン、コマツナ、チンゲンサイ、カイワレダイコン、カリフラワー、ハクサイ、ナバナ、タカナ、コールラビ、好ましくはブロッコリーであり；
　第２粉末に含まれるグルコシノレートの含量は６０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下、好ましくは１２０ｍｇ／ｇ以上１０００ｍｇ／ｇ以下であり；
　前記グルコシノレートは、グルコラファニンであり；
　前記第２粉末は、ミロシナーゼ活性が２５．０ｕｎｉｔ／ｇ未満であり、又はミロシナーゼ活性を有さず；
　前記調合は、前記粉末食品の総重量に対して、前記第１粉末の配合量が２～２０重量％、前記第２粉末の配合量が２５～９７重量％で行われ、
　前記第１粉末と前記第２粉末の配合量の合計は１００重量％を超えない、
　製造方法である。
　以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるものではない。本実施例において、ミロシナーゼ活性は、ＧＳＬの中のＧＲを対象とし、ミロシナーゼによってＧＲから変換されるＩＴＣであるスルフォラファン（ＳＦＮ）を評価することで行った。
　＜第１粉末＞
　原材料には、カラシ菜の種子（イエローマスタードシード）を用いた。カラシ菜の種子を搾油機で圧搾し、搾油ケーキを得た。前記ケーキをデシケーター内で常温（２０℃）にて乾燥させ、微細化前のサンプル（第１粉末）を得た。
　＜微細化＞
　微細化は、篩別にて行った。前述のカラシ菜の種子から得たケーキをピンミルで粉砕し、得られた粉体を目開きの異なる篩機にて篩別を行うことで、それぞれ体積平均径の異なる第１粉末を得た。篩別に用いた篩機の目開きは、２５μｍ、５３μｍ、１００μｍ、３００μｍ、５００μｍ、７１０μｍ、８５０μｍであった。
　各第１粉末中のＧＲ含量及びＳＦＮ含量をＨＰＬＣ法により測定したところ、各第１粉末中にＧＲ及びＳＦＮは含まれていなかった。ＧＲ含量及びＳＦＮ含量の測定方法は後述する。
　＜体積平均径＞
　各第１粉末の体積平均径の測定は、レーザー回折・散乱式粒子径分布測定装置（マイクロトラックＭＴ３３００ＥＸ、ＭｉｃｒｏｔｒａｃＢＥＬ社製）を用いて行った。分析条件は、溶媒に蒸留水を用い、溶媒屈折率を「１．３３３」、透過性を「透過」、粒子屈折率を「１．８１」、形状を「非球形」とした。
　＜第２粉末＞
　原材料には、ブロコッリースプラウトを用いた。ブロッコリーの種子（Ｃａｕｄｉｌｌ　Ｓｅｅｄ　Ｃｏ．，　Ｉｎｃ．）を発芽させ、発芽後１日間栽培してブロッコリースプラウトを得た。これを９５℃の熱水で３０分間抽出を行った後、ブロッコリースプラウトの残渣を除去して、抽出液を得た。前記抽出液をロータリーエバポレーターを用いて濃縮した後、デキストリンと混合し、スプレードライ法により第２粉末を得た。第２粉末中のＧＲ含量をＨＰＬＣ法により測定したところ、１４５ｍｇ／ｇであった。第２粉末中のＳＦＮ含量をＨＰＬＣ法により測定したところ、第２粉末中にＳＦＮは含まれていなかった。また、第２粉末は、熱水で抽出を行ったため、ミロシナーゼ活性を有していない。
　＜ＧＲ含量＞
　ＧＲ含量の測定は、以下の条件でＨＰＬＣ法にて行った。
　　装置：ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　Ｈ－Ｃｌａｓｓシステム（Ｗａｔｅｒｓ社製）
　　カラム：ＡＣＱＵＩＴＹＣＳＨ　Ｃ１８（Φ２．１×１００ｍｍ，　１．７μｍ）（Ｗａｔｅｒｓ社製）
　　カラム温度：３０℃
　　サンプル注入量：１０μＬ
　　移動相Ａ：超純水：トリフルオロ酢酸＝９９．９５：０．０５（ｖ：ｖ）
　　移動相Ｂ：メタノール：トリフルオロ酢酸＝９９．９５：０．０５（ｖ：ｖ）
　　グラジエント：
５分間　移動相Ｂ割合０％を維持
１０分間で移動相Ｂ割合０→１０％のリニアグラジエント
５分間で移動相Ｂ割合１０→１００％のリニアグラジエント
５分間　移動相Ｂ割合１００％を維持
２分間で移動相Ｂ割合１００→０％のリニアグラジエント
５分間　移動相Ｂ割合０％を維持
　　流速：０．１ｍＬ／ｍｉｎ
　　検出波長：２３５ｎｍ
ＧＲ含量は、ＨＰＬＣ分析によって得られたサンプル中のＧＲ濃度と抽出に供したサンプル量から算出した。 
　＜ＳＦＮ含量＞
　ＳＦＮ含量の測定は、以下の条件でＨＰＬＣ法にて行った。
　　装置：ＡＣＱＵＩＴＹ　ＵＰＬＣ　Ｈ－Ｃｌａｓｓシステム（Ｗａｔｅｒｓ社製）
　　カラム：ＡＣＱＵＩＴＹＢＥＨ　Ｃ１８(Φ２．１×５０ｍｍ、 １．７μｍ)（Ｗａｔｅｒｓ社製）
　　カラム温度：３５℃
　　サンプル注入量：１０μＬ
　　移動相：超純水：アセトニトリル＝８０：２０（ｖ:ｖ）
　　流速：０．２ｍＬ／ｍｉｎ
　　検出波長：２０２ｎｍ
ＳＦＮ含量は、ＨＰＬＣ分析によって得られたサンプル中のＳＦＮ濃度と抽出に供したサンプル量から算出した。 
　＜ミロシナーゼ活性＞
　各第１粉末のミロシナーゼ活性（ｕｎｉｔ／ｇ）は、ミロシナーゼの反応によってＧＲから変換されたＳＦＮ含量を測定することで評価した。具体的には、下記式により算出した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-M000001
　第１粉末と第２粉末の混合によるミロシナーゼの反応は、次のとおり行った。各体積平均径の第１粉末は、５０ｍＬ容チューブに２．５ｍｇ、５．０ｍｇ、１０．０ｍｇずつ準備した。第２粉末は、ＧＲ含量２．０ｍｇ／ｍｌとなるように３３ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ７．０）に溶解し、ウォーターバスにて３７℃で保温した（第２粉末溶液）。第１粉末の入った５０ｍＬ容チューブに第２粉末溶液を５ｍＬ添加し、よく混合し、ウォーターバスにて３７℃でミロシナーゼの反応を開始させた。反応開始から１０分後、２０分後、３０分後に反応液から１００μＬずつ回収し、２０μＬの２０％トリフルオロ酢酸溶液と混合し、氷上で保管した。全ての反応液の回収が完了した後、酢酸エチル０．４ｍＬを添加し、よく混合した。得られた液を遠心分離（１０００×ｇ、４℃、５分間）し、回収した上清２００μＬを遠心濃縮器（４０℃、２０分間）で乾固させた。２５０μＬの超純水を添加し、超音波処理によって乾固物を再溶解させた。遠心分離し、回収した上清をＳＦＮ含量の測定のためのＨＰＬＣサンプルとした。
　評価結果は表１のとおりである。表１が示すのは、目開きの異なる篩機の処理によって得られた各第１粉末の体積平均径及びミロシナーゼ活性である。表１によれば、目開き５００μｍの篩機を用いて篩別した第１粉末を用いた場合のミロシナーゼ活性は、最も体積平均径の大きい目開き８５０μｍの篩機を用いて篩別した第１粉末を用いた場合と比較し、約２倍となった。このときの第1粉末の体積平均径は、約５００μｍであった。さらに、目開きが小さくなるほど、第１粉末の体積平均径はより小さくなり、ミロシナーゼ活性はより高くなった。一方、目開き７１０μｍの篩機によって得られた体積平均径約６００μｍの第１粉末を用いた場合のミロシナーゼ活性は、目開き８５０μｍの篩機によって得られた第１粉末を用いた場合と比較してほとんど変わらなかった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　体積平均径が５００μｍ以下の第１粉末（すなわち、微細化された第１粉末）を用いた場合は、ミロシナーゼ活性が促進されており、ＧＲのＳＦＮへの変換を高めることができた。つまり、微細化された第１粉末を用いた場合、ＩＴＣへの変換を高めることできることが示された。したがって、微細化された第１粉末とＧＳＬを含む第２粉末を含有する粉末食品は、ＩＴＣへの変換が高められた、粉末食品である。
　本発明は、ＩＴＣへの変換効率が高められた、ＧＳＬを含む粉末食品、及びその製造方法、並びにＧＳＬを含む粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法を提供できるので、産業上極めて重要である。

Claims (17)

  1. 　少なくとも、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末、及び、グルコシノレートを含む第２粉末、を含む粉末食品。
  2. 　前記第１粉末の体積平均径は、５００μｍ以下である、請求項１に記載の粉末食品。
  3. 　前記第１粉末の体積平均径は、５０～３００μｍである、請求項１に記載の粉末食品。
  4. 　前記第１粉末は、少なくとも、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末を含む、請求項１から３のいずれか一項に記載の粉末食品。
  5. 　前記アブラナ科野菜が、カラシ菜である、請求項４に記載の粉末食品。
  6. 　前記第２粉末は、少なくとも、アブラナ科野菜由来の粉末及びアブラナ科野菜の種子由来の粉末からなる群から選択される少なくとも１つの粉末を含む、請求項１から５のいずれか一項に記載の粉末食品。
  7. 　前記アブラナ科野菜が、ブロッコリーである、請求項６に記載の粉末食品。
  8. 　前記グルコシノレートは、グルコラファニンである、請求項１から７のいずれか一項に記載の粉末食品。
  9. 　前記第２粉末は、ミロシナーゼ活性を有さない、請求項１から８のいずれか一項に記載の粉末食品。
  10. 　少なくとも、ミロシナーゼ活性を有する微細化された第１粉末、及び、グルコシノレートを含む第２粉末、を調合することを含む、
    　粉末食品の製造方法。
  11. 　さらに、前記調合の前に、ミロシナーゼを含む原材料を微細化して前記微細化された第１粉末を得ることを含む、請求項１０に記載の製造方法。
  12. 　前記微細化は、目開き５００μｍ以下のメッシュによる篩別である、請求項１１に記載の製造方法。
  13. 　前記微細化は、前記微細化された第１粉末の体積平均径が、５００μｍ以下となるように微細化することである、請求項１０から１２のいずれか一項に記載の製造方法。
  14. 　少なくとも、ミロシナーゼを含む微細化された第１粉末、及び、グルコシノレートを含む第２粉末、を調合することを含む、粉末食品のミロシナーゼ活性促進方法。
  15. 　さらに、前記調合の前に、ミロシナーゼを含む原材料を微細化して前記微細化された第１粉末を得ることを含む、請求項１４に記載のミロシナーゼ活性促進方法。
  16. 　前記微細化は、目開き５００μｍ以下のメッシュによる篩別である、請求項１５に記載の方法。
  17. 　前記微細化が、前記微細化された第１粉末の体積平均径が、５００μｍ以下となるように微細化することである、請求項１４から１６のいずれか一項に記載の方法。
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