WO2018169011A1

WO2018169011A1 - 腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤

Info

Publication number: WO2018169011A1
Application number: PCT/JP2018/010284
Authority: WO
Inventors: 綾香中島; 修岩田; 鈴木　健吾
Original assignee: 株式会社ユーグレナ
Priority date: 2017-03-16
Filing date: 2018-03-15
Publication date: 2018-09-20

Abstract

ユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤を提供する。　本発明は、ユーグレナ由来物質を有効成分として含有し、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率（Ｆ／Ｂ比）を低下させるために用いられる腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤により解決される。

Description

腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤

　本発明は、腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤に関する。

　ヒトの腸内には、１００種類以上の腸内細菌が１００兆個以上生息しており、腸内細菌の集団は腸内フローラや腸内細菌叢と呼ばれている。
　腸内細菌は、腸内で相互にバランスを保ちながら腸内フローラを形成しており、腸内フローラが、ヒトの健康と関連していることがわかってきた。

　疾病、老化、精神的・肉体的ストレス、環境の変化、食生活の変化などの原因により腸内フローラのバランスが崩れると、悪玉菌が増えることで有害物質が腸内で増加し、便秘や下痢、免疫機能の低下が生じる。
　また、腸内で発生した有害物質が吸収されると、心臓、肝臓及び腎臓に負担を与え、例えば、肥満症、高血圧症、糖尿病、高脂血症、心筋梗塞、脳卒中などの生活習慣病と呼ばれる疾患の原因となることもある。
　生活習慣病は、個々の原因で発症するのではなく、種々の原因が影響し合って発症することが分かっており、このような複合生活習慣病は、メタボリックシンドロームとも呼ばれている。

　近年、腸内フローラと疾患の関係についての研究が進み、腸内フローラが、肥満症及びメタボリックシンドローム等の疾患に関与する環境要因の一つであることが明らかになってきており（非特許文献１、非特許文献２）、腸内フローラに着目した、肥満症及びメタボリックシンドローム等の疾患の予防又は治療が行われている。
　例えば、プレバイオティクス等の機能性食品によって、腸内フローラを改善する試みがなされ、有用細菌（善玉菌）である乳酸菌やビフィズス菌を増殖させる機能性食品が開発されている。

　一方で、食糧、飼料、燃料等としての利用が有望視されている生物資源として、ユーグレナ（属名：Ｅｕｇｌｅｎａ、和名：ミドリムシ）が注目されている。
　ユーグレナは、ビタミン，ミネラル，アミノ酸，不飽和脂肪酸など、人間が生きていくために必要な栄養素の大半に該当する５９種類もの栄養素を備え、多種類の栄養素をバランスよく摂取するためのサプリメントとしての利用や、必要な栄養素を摂取できない貧困地域での食糧供給源としての利用の可能性が提案されている。

　ユーグレナは、食物連鎖の最底辺に位置し、捕食者により捕食されることや、光、温度条件、撹拌速度などの培養条件が他の微生物に比べて難しいなどの理由から、大量培養が難しいとされてきたが、近年、本発明者らの鋭意研究によって、大量培養技術が確立され、ユーグレナ及びユーグレナから抽出されるパラミロン等、ユーグレナ由来物質の大量供給の途が開かれた。
　ユーグレナは、鞭毛運動をする動物的性質をもちながら、同時に植物として葉緑体を持ち光合成を行うユニークな生物であり、ユーグレナ自体やユーグレナ由来の物質に、多くの機能性があることが期待されている。

　特許文献１には、ユーグレナ細胞又はユーグレナ細胞抽出物を有効成分とする乳酸菌生育促進剤が、乳酸菌の生育を促進することが記載されている。

特開平７－９９９６７号公報

園山慶、「メタボリックシンドロームと腸内細菌叢」、腸内細菌学雑誌、ｖｏｌ．２４、ｐｐ．１９３－２０１、２０１０入江潤一郎ら、「腸内細菌叢と肥満症」、日本内科学会雑誌、ｖｏｌ．１０４、ｎｏ．４、ｐｐ．７０３－７０９、２０１５

　本発明は、上記の課題に鑑みてなされたものであり、本発明の目的は、新規な腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤を提供することにある。
　また、本発明の他の目的は、ユーグレナ由来物質の新規な利用方法となる腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤を提供することにある。

　本発明者らは、鋭意研究した結果、ユーグレナ由来物質が腸内フローラにおける腸内細菌のバランスを変化させることを見出した。
　より詳細には、ユーグレナ由来物質が、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させる腸内フローラバランス改善剤として機能することを明らかにして、本発明をするに至った。
　また、ユーグレナ由来物質が、腸内フローラにおけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を増加させる腸内フローラバランス改善剤として機能することを明らかにして、本発明をするに至った。

　従って、前記課題は、本発明によれば、ユーグレナ由来物質を有効成分として含有し、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させるために用いられることを特徴とする腸内フローラバランス改善剤により解決される。
　上記構成により、腸内フローラにおける細菌のバランスが崩れているヒト・動物や、腸内フローラにおける細菌のバランスが崩れる可能性のあるヒト・動物にユーグレナ由来物質を投与すると、ユーグレナ由来物質が生体内において、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させる作用を果たすため、腸内細菌のバランスを改善するとともに、体重を減少させたり、肥満を解消したりすることができる。

　このとき、前記ユーグレナ由来物質は、ユーグレナ藻体、パラミロン、パラミロンの加工品を含む群より選択される一種以上であってもよい。
　また、前記ユーグレナ由来物質は、アモルファスパラミロンであってもよい。
　このように、本発明の腸内フローラバランス改善剤として、食品としても認可されているユーグレナ藻体又はパラミロンを用いるため、長期間の投与又は摂取が可能である腸内フローラバランス改善剤を提供できる。

　このとき、前記ユーグレナ由来物質は、パラミロン又はアモルファスパラミロンより選択される一種以上であり、腸内フローラにおけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の割合を増加させるために用いられるものであってもよい。
　また、腸内フローラにおけるビフィズス菌の割合を増加させるために用いられるものであってもよい。
　このように、本発明の腸内フローラバランス改善剤は、アッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を増加させる作用を示すため、血糖値、血中インスリン値、脂質値を下げる効果や、肥満、糖尿病、心疾患などの疾患を予防したり治療したりすることができる。
　また、腸内フローラにおける細菌のバランスが崩れていないヒト・動物に対しても、本発明の腸内フローラバランス改善剤を用いることができる。例えば、家族歴や、肥満，高血糖，高血圧，脂質異常症などの生活習慣病に罹患している、糖尿病、心疾患に罹患している、ある種の薬の服用履歴がある等の情報に基づいて、腸内フローラバランスが崩れる可能性が高い状態にあると判断された場合に、投与されることにより、腸内フローラバランスが崩れてしまうことを予防するために用いることができる。

　このとき、前記ユーグレナ由来物質は、ユーグレナ藻体又はパラミロンより選択される一種以上であり、腸内フローラにおける乳酸菌及びプレボテラ属分類される菌の占有率を増加させるために用いられるものであってもよい。

　また、前記課題は、本発明によれば、ユーグレナ由来物質を有効成分として含有し、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させることを特徴とする腸内フローラバランス改善用食品組成物により解決される。
　上記構成により、腸内フローラにおける細菌のバランスが崩れているヒト・動物や、腸内フローラにおける細菌のバランスが崩れる可能性のあるヒト・動物にユーグレナ由来物質を投与すると、ユーグレナ由来物質が生体内において、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させる作用を果たすため、腸内細菌のバランスを改善するとともに、体重を減少させたり、肥満を解消したりすることができる。

　このとき、前記ユーグレナ由来物質は、ユーグレナ藻体、パラミロン、パラミロンの加工品を含む群より選択される一種以上であってもよい。
　また、前記ユーグレナ由来物質は、アモルファスパラミロンであってもよい。
　このように、本発明の腸内フローラバランス改善用食品組成物として、食品としても認可されているユーグレナ藻体又はパラミロンを用いるため、長期間の投与又は摂取が可能である腸内フローラバランス改善用食品組成物を提供できる。

　このとき、前記ユーグレナ由来物質は、パラミロン又はアモルファスパラミロンより選択される一種以上であり、腸内フローラにおけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の割合を増加させるものであってもよい。
　また、腸内フローラにおけるビフィズス菌の割合を増加させるものであってもよい。
　このように、本発明の腸内フローラバランス改善用食品組成物は、アッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を増加させる作用を示すため、血糖値、血中インスリン値、脂質値を下げる効果や、肥満、糖尿病、心疾患などの疾患を予防したり改善したりすることができる。
　また、腸内フローラにおける細菌のバランスが崩れていないヒト・動物であっても本発明の腸内フローラバランス改善用食品組成物を摂取することができる。例えば、家族歴や、肥満，高血糖，高血圧，脂質異常症などの生活習慣病に罹患している、糖尿病、心疾患に罹患している、ある種の薬の服用履歴がある等の情報に基づいて、腸内フローラバランスが崩れる可能性が高い状態にあると判断された場合に、摂取することにより、腸内フローラバランス改善用食品組成物として用いることができる。

　本発明によれば、新規な腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤を提供することができる。
　本発明によれば、腸内フローラにおける細菌バランスが崩れているヒト・動物や、腸内フローラにおける細菌バランスが崩れる可能性のあるヒト・動物にユーグレナ由来物質を投与すると、ユーグレナ由来物質が生体内において、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させる作用を果たすため、腸内細菌のバランスを改善するとともに、体重を減少させたり、肥満症を解消したりすることができる。
　更に、アッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を増加させる作用を有しているため、血糖値、血中インスリン値、脂質値を下げる効果や、肥満、糖尿病、心疾患などの疾患を予防したり治療したりすることができる。
　本発明の腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤は、有効成分として食品としても認可されているユーグレナ藻体又はパラミロンを含むため、長期服用又は摂取しても安全で副作用の少ない腸内フローラバランス改善用食品組成物及び腸内フローラバランス改善剤を提供することができる。

本発明の一実施形態に係るユーグレナ由来物質を、ラットに対して４週間投与したときの糞における腸内細菌叢のＦ／Ｂ比を比較したグラフである。本発明の一実施形態に係るユーグレナ由来物質を、ラットに対して４週間投与したときの糞におけるラクトバチルス属の細菌（乳酸菌）の占有率を示すグラフである。本発明の一実施形態に係るユーグレナ由来物質を、ラットに対して４週間投与したときの糞におけるプレボテラ属の細菌の占有率を示すグラフである。本発明の一実施形態に係るユーグレナ由来物質を、高脂肪食を飼料として与えたマウスに対して２週間及び４週間投与したときの糞における腸内細菌叢のＦ／Ｂ比を比較したグラフである。本発明の一実施形態に係るユーグレナ由来物質を、高脂肪食を飼料として与えたマウスに対して２週間及び４週間投与したときの糞におけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を示すグラフである。本発明の一実施形態に係るユーグレナ由来物質を、高脂肪食を飼料として与えたマウスに対して２週間及び４週間投与したときの糞における乳酸菌の占有率を示すグラフである。本発明の一実施形態に係るユーグレナ由来物質を、高脂肪食を飼料として与えたマウスに対して２週間及び４週間投与したときの糞におけるビフィズス菌の占有率を示すグラフである。

　以下、本発明の実施形態について、図１乃至図７を参照しながら説明する。
　本実施形態は、ユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤に関するものである。

（定義）
　本明細書において、「腸内」とは、ヒト等の動物の小腸や大腸など、バクテロイデス門やファーミキューテス門、ビフィドバクテリウム等の細菌が常在して、摂取した食物を消化し、栄養を吸収する消化器官の内部を指す。
　本明細書において、「腸内細菌」とは、ヒト等の動物の腸内に存在する各種の菌をいう。
　本明細書において、「腸内フローラ（Ｉｎｔｅｒｓｔｉｎａｌ　ｆｌｏｒａ）」とは、腸内に存在する細菌の集団のことをいい、腸内細菌叢や腸内ミクロビオータ（Ｇｕｔ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｔａ）ともいう。
　本明細書において、「腸内フローラバランス」とは、腸内フローラにおける各腸内細菌の占有率のバランス（構成比）のことをいい、「腸内フローラバランス改善」とは、腸内フローラにおける各種腸内細菌の占有率のバランスが、宿主にとって都合のよい方向に変動することをいう。

　本明細書において、「肥満」とは、正常な状態と比較して体重が多い状態、又は体脂肪が過剰に蓄積した状態である。肥満の判定基準として、ＢＭＩ（Ｂｏｄｙ　Ｍａｓｓ　Ｉｎｄｅｘ、ボディマス指数）が用いられている。ＷＨＯ（Ｗｏｒｌｄ　Ｈｅａｌｔｈ　Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ、世界保健機関）による肥満の判定基準では、ＢＭＩ　３０以上を肥満とし、一方、日本ではＢＭＩ　２５以上を肥満としている。日本の判定基準は、日本肥満学会が定義した基準で、日本人はＢＭＩ　２５を超えたあたりから、耐糖能障害、脂質異常症、高血圧といった合併症の発症頻度が高まることに基づいている。
　本明細書において、「肥満症」とは、肥満に起因、関連する健康障害を有するか、該健康障害が予測される内臓脂肪が過剰に蓄積した場合で、減量治療を必要とする状態のことである。
　本明細書において、「抗肥満」とは、上記肥満症を予防又は治療することを意味する。

　本明細書において、「メタボリックシンドローム」とは、インスリン抵抗性を基盤とする２型糖尿病、高脂血症、高血圧、内臓脂肪型肥満、脂肪肝などの一連の病態群を合併した状態を表し、シンドロームＸ、インスリン抵抗性症候群、内臓脂肪症候群、マルチプルリスクファクター症候群などの呼称でも知られている。
　本明細書において、「抗メタボリックシンドローム」とは、上記の病態群より選ばれる少なくとも１つ以上の病態を予防又は治療することを意味する。

＜腸内細菌＞
　ヒト等の動物の腸内に存在する腸内細菌として、代表的なものとしては、例えば、ファーミキューテス（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ）門、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｔｅｓ）門、アクチノバクテリア（Ａｃｔｉｎｏｂａｃｔｅｒｉａ）門、プロテオバクテリア（Ｐｒｏｔｅｏｂａｃｔｅｒｉａ）門が挙げられる。これらの４つの門に分類される菌で腸内細菌の９５％を占めることが知られている（服部正平，「ヒト腸内細菌叢の全体像と多様性」，Ｂｉｏｐｈｉｌｉａ，ｖｏｌ．５，Ｎｏ．２，ｐｐ．６－９，２０１６）。
　その他の腸内細菌として、ウェルコミクロビウム（Ｖｅｒｒｕｃｏｍｉｃｒｏｂｉａ）門、フソバクテリウム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉａ）門、ユリアーキオータ（Ｅｕｒｙａｒｃｈａｅｏｔａ）門などの菌が挙げられる。

（ファーミキューテス門）
　ファーミキューテス門は、ＤＮＡ中の窒素塩基のうちグアニン（Ｇ）及びシトシン（Ｃ）の割合であるＧＣ含量が２５～５５ｍｏｌ％の範囲を有するグラム陽性の菌群であり、グラム陽性低ＧＣ含量細菌とも呼ばれる。
　ファーミキューテス門は、ヒト腸内に棲息する最優勢分類群の一つであり、ファーミキューテス門に分類される菌として、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）属、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属、ルミノコッカス（Ｒｕｍｉｎｏｃｏｃｃｕｓ）属などの菌が知られている。

　乳酸菌は、ラクトバチルス属に属する有用細菌（善玉菌）であり、例えば、ラクトバチルス・アシドフィルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ａｃｉｄｏｐｈｉｌｕｓ）、ラクトバチルス・カゼイ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｃａｓｅｉ）、ラクトバチルス・ガセリ（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｇａｓｓｅｒｉ）などが例として挙げられる。

（バクテロイデス門）
　バクテロイデス門は、グラム陰性の菌群である。
　バクテロイデス門は、ヒト腸内に棲息する最優勢分類群の一つであり、バクテロイデス門に分類される菌として、バクテロイデス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ）属、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属などの菌が知られている。
　通常のヒトの腸内フローラにおいては、ファーミキューテスとバクテロイデスで約８０～９５％を占めることが知られている。

（アクチノバクテリア門）
　アクチノバクテリア門（放線菌門）は、ＤＮＡのＧＣ含量が約５５ｍｏｌ％以上の高い値を有するグラム陽性の菌群であり、グラム陽性高ＧＣ含量細菌とも呼ばれる。
　アクチノバクテリア門に分類される菌として、ビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）属などの菌が知られている。

　ビフィズス菌は、ビフィドバクテリウム属に属する有用細菌（善玉菌）であり、例えば、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｂｒｅｖｅ）などが例として挙げられる。

（プロテオバクテリア門）
　プロテオバクテリア門は、グラム陰性の菌群である。
　プロテオバクテリア門に分類される菌として、エシェリキア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ）属（大腸菌）などの菌が知られている。

（アッカーマンシア・ムシニフィラ菌）
　アッカーマンシア・ムシニフィラ（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ　ｍｕｃｉｎｉｐｈｉｌａ）菌は、ウェルコミクロビウム門のアッケルマンシア（Ａｋｋｅｒｍａｎｓｉａ）属に属する腸内細菌の一種である。

＜腸内フローラバランス改善剤＞
　本実施形態に係る腸内フローラバランス改善剤は、ユーグレナ由来物質を有効成分とする腸内フローラバランス改善剤である。
　「ユーグレナ由来物質」には、ユーグレナ生細胞やユーグレナの乾燥藻体などのユーグレナ藻体の他、ユーグレナ細胞から抽出されたパラミロン、パラミロン粉末や、パラミロンの加工品等が含まれる。
　「腸内フローラバランス改善剤」とは、腸内フローラにおける各種腸内細菌の占有率のバランス（比率、構成比）を、宿主にとって都合のよい方向に変動させるために用いられる剤のことをいう。
　また、腸内フローラバランスが、宿主の健康状態に影響を与え、それにより宿主にとって都合の良い方向に変動したときに、「腸内フローラバランスが改善した」という。

（Ｆ／Ｂバランスの改善）
　本実施形態に係る腸内フローラバランス改善剤の有効成分であるユーグレナ由来物質は、ヒト等の動物が摂取することにより、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率（Ｆ）を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率（Ｂ）で割った比率（以下、Ｆ／Ｂ比という）を低下させることができる。ファーミキューテス門及びバクテロイデス門はヒト腸内フローラの最優勢菌種である。ユーグレナ由来物質は腸内フローラの優勢菌種の勢力を変え腸内フローラのバランスを宿主にとって都合の良い方向へ変動させることができる。

　肥満状態にある動物の腸内においては、バクテロイデス門に分類される菌の構成比率が低く、ファーミキューテス門に分類される菌の構成比率が高い状態になっており、体重が減少するのに伴って、バクテロイデス門の構成比率が相対的に高くなり、ファーミキューテス門の構成比率が相対的に低くなることが知られている（R. E. Ley et al., “Obesity alters gut microbial ecology”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol.102, no.31, pp.11070-11075, 2005）。
　また、痩せているヒトは太っているヒトよりも、バクテロイデス門の構成比率が高く、ファーミキューテス門の構成比率が低いことがわかっている（R. E. Ley et al.，“Human gut microbes associated with obesity“, Nature, vol.444, pp.1022-1023, 2006）。

　また、腸内細菌のいない無菌マウスに対して、それぞれ肥満マウスの腸内細菌叢と、正常マウスの腸内細菌叢を腸内に移植すると、肥満マウスの腸内細菌叢を移植された群が、正常マウスの腸内細菌叢を移植された群と比較して便中のエネルギー喪失が少なく肥満を呈することが報告されている（P. J. Turnbaugh et al.，“An obesity-associated gut microbiome with increased capacity for energy harvest“, Nature, vol.444, pp.1027-1031, 2006）。

　さらに、高脂肪食を摂取しているヒトやマウス等の動物の腸内細菌叢において、Ｆ／Ｂ比が高くなることが知られている。
　例えば、高脂肪食を摂取するヒトにおける腸内細菌叢の解析においてファーミキューテス門に分類される菌の占有率が増え、バクテロイデス門に分類される菌の占有率が減ることが報告されている（K. A. Kim et al., “High fat diet-induced gut microbiota exacerbates inflammation and obesity in mice via the TLR4 signaling pathway”, PLOS ONE, vol.7, no.10, e47713, 2012）。
　また、高脂肪食を給餌したマウスでは胆汁酸産生が促進される結果として、ファーミキューテス門に分類される菌の占有率が増加する一方、バクテロイデス門に分類される菌の占有率が減少することが報告されている（M. A. Hildebrandt et al., “High-Fat Diet Determines the Composition of the Murine Gut Microbiome Independently of Obesity”, Gastroenterology, vol.137, no.5, pp.1716-1724, 2009、K. B. Islam et al., “Bile acid is a host factor that regulates the composition of the cecal microbiota in rats”, Gastroenterology, vol.141, pp.1773-1781, 2011）。

　従って、本実施形態に係る腸内フローラバランス改善剤の摂取により、腸内のバクテロイデス門の細菌が増加し、ファーミキューテス門の細菌が減少することにより、体重の減少や、肥満の解消が期待される。
　また、高脂肪食の摂取に起因して、腸内フローラにおけるＦ／Ｂ比が高くなっているヒトや動物等が、本実施形態に係る腸内フローラバランス改善剤を摂取することで、Ｆ／Ｂ比が低下して腸内フローラバランスが改善される。

　なお、Ｆ／Ｂ比は、腸内フローラにおける各種腸内細菌の占有率のバランスを議論するための便宜的な定義に過ぎず、Ｆ／Ｂ比の逆数であるＢ／Ｆ比で腸内フローラにおける各種腸内細菌の占有率のバランスを議論することも可能である。
　この場合、腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率（Ｂ）を腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率（Ｆ）で割った比率であるＢ／Ｆ比は、本実施形態に係る腸内フローラバランス改善剤の有効成分であるユーグレナ由来物質を摂取することにより、増加することとなる。

（アッカーマンシア・ムシニフィラ菌バランスの改善）
　また、本実施形態に係る腸内フローラバランス改善剤の有効成分であるユーグレナ由来物質は、ヒト等の動物が摂取することにより、腸内フローラにおけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を増加させることができる。ユーグレナ由来物質は腸内フローラにおける特定菌種の勢力を変え腸内フローラのバランスを宿主にとって都合の良い方向へ変動させることができる。

　アッカーマンシア・ムシニフィラ菌は、高繊維食の摂取に関連しており、血糖値、血中インスリン値、脂質値を下げ、肥満、糖尿病、心疾患などの疾患の予防や治療に効果的であると考えられている（A. Everard et al., “Cross-talk between Akkermansia muciniphila and intestinal epithelium controls diet-induced obesity.”, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol.110, no.22, pp.9066-9071, 2013）。
　従って、本実施形態に係る腸内フローラバランス改善剤の摂取により、腸内のアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率が増加することにより、血糖値、血中インスリン値、脂質値を下げる効果や、肥満、糖尿病、心疾患などの疾患を予防したり治療したりする効果が期待される。

＜抗肥満剤・抗メタボリックシンドローム剤＞
　本実施形態に係る抗肥満剤、および抗メタボリックシンドローム剤は、ユーグレナ由来物質を有効成分とする。
　ユーグレナ由来物質は、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させることにより、体重を減少させ、その結果、抗肥満やメタボリックシンドロームの予防または治療効果を発揮する。

＜ユーグレナ＞
　本実施形態において、「ユーグレナ」とは、動物学や植物学の分類でユーグレナ属（Ｅｕｇｌｅｎａ）に分類される微生物、その変種、その変異種のすべてを含む。
　ここで、ユーグレナ属（Ｅｕｇｌｅｎａ）の微生物とは、動物学では原生動物門（Ｐｒｏｔｏｚｏａ）の鞭毛虫綱（Ｍａｓｔｉｇｏｐｈｏｒｅａ）、植物鞭毛虫亜綱（Ｐｈｙｔｏｍａｓｔｉｇｏｐｈｏｒｅａ）に属するミドリムシ目（Ｅｕｇｌｅｎｉｄａ）のユーグレノイディナ亜目（Ｅｕｇｌｅｎｏｉｄｉｎａ）に属する微生物である。一方、ユーグレナ属の微生物は、植物学ではミドリムシ植物門（Ｅｕｇｌｅｎｏｐｈｙｔａ）のミドリムシ藻類綱（Ｅｕｇｌｅｎｏｐｈｙｃｅａｅ）に属するミドリムシ目（Ｅｕｇｌｅｎａｌｅｓ）に属している。

　ユーグレナ属の微生物としては、具体的には、Euglena acus、Euglena anabaena、Euglena caudata、Euglena chadefaudii、Euglena deses、Euglena gracilis、Euglena granulata、Euglena intermedia、Euglena mutabilis、Euglena oxyuris、Euglena proxima、Euglena spirogyra、Euglena viridis、Euglena vermiformis、Euglena intermedia, Euglena pirideなどが挙げられる。
　ユーグレナ細胞としては、ユーグレナ・グラシリス（E. gracilis）、特に、ユーグレナ・グラシリス（E. gracilis）Ｚ株、ユーグレナ・グラシリス（E. gracilis）ＮＩＥＳ－４９株などを用いることができるが、そのほか、ユーグレナ・グラシリス（E. gracilis）Ｚ株の変異株ＳＭ－ＺＫ株（葉緑体欠損株）や変種のvar. bacillaris、これらの種の葉緑体の変異株等の遺伝子変異株由来のβ－１，３－グルカナーゼ、Euglena intermedia, Euglena piride、及びその他のユーグレナ類、例えばAstaia longaであってもよい。

　ユーグレナ属は、池や沼などの淡水中に広く分布しており、これらから分離して使用しても良く、また、既に単離されている任意のユーグレナ属を使用してもよい。
　ユーグレナ属は、その全ての変異株を包含する。また、これらの変異株の中には、遺伝的方法、たとえば組換え、形質導入、形質転換等により得られたものも含有される。

　ユーグレナ細胞の培養において、培養液としては、例えば、窒素源，リン源，ミネラルなどの栄養塩類を添加した培養液、例えば、改変Ｃｒａｍｅｒ－Ｍｙｅｒｓ培地（（ＮＨ_４）_２ＨＰＯ_４　１．０ｇ／Ｌ，ＫＨ_２ＰＯ_４　１．０ｇ／Ｌ，ＭｇＳＯ_４・７Ｈ_２Ｏ　０．２ｇ／ｌ，ＣａＣｌ_２・２Ｈ_２Ｏ　０．０２ｇ／ｌ，Ｆｅ_２（ＳＯ_２）_３・７Ｈ_２Ｏ　３ｍｇ／ｌ，ＭｎＣｌ_２・４Ｈ_２Ｏ　１．８ｍｇ／ｌ，ＣｏＳＯ_４・７Ｈ_２Ｏ　１．５ｍｇ／ｌ，ＺｎＳＯ_４・７Ｈ_２Ｏ　０．４ｍｇ／ｌ，Ｎａ_２ＭｏＯ_４・２Ｈ_２Ｏ　０．２ｍｇ／ｌ，ＣｕＳＯ_４・５Ｈ_２Ｏ　０．０２ｇ／ｌ，チアミン塩酸塩（ビタミンＢ１）　０．１ｍｇ／ｌ，シアノコバラミン（ビタミンＢ１２）、（ｐＨ３．５））を用いることができる。なお、（ＮＨ_４）_２ＨＰＯ_４は、（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４やＮＨ_３ａｑに変換することも可能である。また、そのほか、ユーグレナ　生理と生化学（北岡正三郎編、（株）学会出版センター）の記載に基づき調製される公知のＨｕｔｎｅｒ培地，Ｋｏｒｅｎ－Ｈｕｔｎｅｒ培地を用いてもよい。

　培養液のｐＨは好ましくは２以上、また、その上限は、好ましくは６以下、より好ましくは４．５以下である。ｐＨを酸性側にすることにより、光合成微生物は他の微生物よりも優勢に生育することができるため、コンタミネーションを抑制できる。
　ユーグレナ細胞の培養は、太陽光を直接利用するオープンポンド方式、集光装置で集光した太陽光を光ファイバー等で送り、培養槽で照射させ光合成に利用する集光方式等により行っても良い。
　また、ユーグレナ細胞の培養は、例えば供給バッチ法を用いて行われ得るが、フラスコ培養や発酵槽を用いた培養、回分培養法、半回分培養法（流加培養法）、連続培養法（灌流培養法）等、いずれの液体培養法により行っても良い。
　ユーグレナ細胞の分離は、例えば培養液の遠心分離，濾過又は単純な沈降によって行われる。

（ユーグレナ藻体）
　本実施形態では、ユーグレナ藻体として、遠心分離，濾過又は沈降等によって分離したユーグレナ生細胞をそのまま用いることができる。ユーグレナ生細胞は、培養槽から収穫後そのままの状態で使用することもできるが、水若しくは生理食塩水で洗浄するのが好ましい。また、ユーグレナ藻体が水などの液体に分散した分散液の状態で用いてもよい。本実施形態において、ユーグレナ生細胞を凍結乾燥処理やスプレー乾燥処理して得たユーグレナの乾燥藻体をユーグレナ藻体として用いると好適である。
　更に、ユーグレナ生細胞を超音波照射処理や、ホモゲナイズ等の機械処理を行うことにより得た藻体の機械的処理物をユーグレナ藻体として用いてもよい。また、機械的処理物に乾燥処理を施した機械的処理物乾燥物をユーグレナ藻体として用いてもよい。

（パラミロン）
　「パラミロン（ｐａｒａｍｙｌｏｎ）」とは、約７００個のグルコースがβ－１，３－結合により重合した高分子体（β－１，３－グルカン）で多孔質であり、ユーグレナ属が含有する貯蔵多糖である。パラミロン粒子は、扁平な回転楕円体粒子であり、β－１，３－グルカン鎖がらせん状に絡まりあって形成されている。

　パラミロンは、すべての種，変種のユーグレナ細胞内に顆粒として存在し、その個数,形状，粒子の均一性は、種により特徴がある。
　パラミロンは、グルコースのみからなり、E. gracilis Zの野生株と葉緑体欠損株SM-ZKから得られたパラミロンの平均重合度は、グルコース単位で約７００である。
　パラミロンは、水，熱水には不溶性であるが、希アルカリ，濃い酸，ジメチルスルホキシド，ホルムアルデヒド，ギ酸に溶ける。
　パラミロンの平均密度は、E. gracilis Zでは１．５３、E. gracilis var. bacillaris SM-L1では１．６３である。
　パラミロンは、粉末図形法を用いたＸ線解析によれば、３本の直鎖状β－１，３－グルカンが右巻きの縄のようにねじれあったゆるやかならせん構造をとっている。このグルカン分子がいくつか集まってパラミロン顆粒を形成する。パラミロン顆粒は結晶構造部分が非常に多く約９０％を占め、多糖類の中で最も結晶構造率の高い化合物である（ユーグレナ生理と生化学，北岡正三郎編，学会出版センター）。
　なお、パラミロン（（株）ユーグレナ製）の粒度分布は、レーザ回折／散乱式粒度分布測定装置で測定したときのメジアン径が、１．５～２．５μｍである。

　パラミロン粒子は、培養されたユーグレナ細胞から任意の適切な方法で単離及び微粒子状に精製され、通常、粉末体として提供されている。
　例えば、パラミロン粒子は、（１）任意の適切な培地中でのユーグレナ細胞の培養、（２）当該培地からのユーグレナ細胞の分離、（３）分離されたユーグレナ細胞からのパラミロンの単離、（４）単離されたパラミロンの精製、および必要に応じて（５）冷却及びその後の凍結乾燥によって得ることができる。
　パラミロンの単離は、例えば、大部分が生物分解される種類の非イオン性又は陰イオン性の界面活性剤を用いて行われる。パラミロンの精製は、実質的には単離と同時に行われる。

　なお、ユーグレナからのパラミロンの単離および精製は周知であり、例えば、E. Ziegler, “Die naturlichen und kunstlichen Aromen” Heidelberg, Germany, 1982, Chapter 4.3 “Gefriertrocken”、ＤＥ４３２８３２９、又は特表２００３－５２９５３８号公報に記載されている。

（パラミロンの加工品）
　パラミロンの加工品としては、公知の種々の方法によりパラミロンを化学的又は物理的に処理して得た水溶性パラミロン、硫酸化パラミロン等や、パラミロン誘導体も含まれる。

　パラミロンの加工品としては、例えば、アモルファスパラミロンが挙げられる。
　アモルファスパラミロンとは、ユーグレナ由来の結晶性パラミロンをアモルファス化した物質である。
　アモルファスパラミロンは、ユーグレナから公知の方法で生成された結晶性のパラミロンに対する相対結晶度が、１～２０％である。
　但し、この相対結晶度は、特開２０１１－１８４５９２号記載の方法により求めたものである。
　つまり、アモルファスパラミロン及びパラミロンを、それぞれ、粉砕機（Ｒｅｔｓｈ社製ボールミルＭＭ４００）にて、振動数２０回／秒で５分間粉砕後、Ｘ線回折装置（スペクトリス社製Ｈ‘ＰｅｒｔＰＲＯ）を用い、管電圧４５ＫＶ、管電流４０ｍＡにて、２θが５°乃至３０°の範囲でスキャンを行い、パラミロンとアモルファスパラミロンの２θ＝２０°の付近の回折ピークＰｃ，Ｐａを得る。
　このＰｃ，Ｐａの値を用い、アモルファスパラミロンの相対結晶度を、
　アモルファスパラミロンの相対結晶度＝Ｐａ／Ｐｃ×１００（％）
　により算出する。

　アモルファスパラミロンは、特開２０１１－１８４５９２号記載の方法に従い、結晶性のパラミロン粉末を、アルカリ処理した後に酸で中和し、その後洗浄、水分除去工程を経て、乾燥を行うことにより調製される。
　パラミロンの加工品としては、そのほか、公知の種々の方法によりパラミロンを化学的又は物理的に処理して得た水溶性パラミロン、硫酸化パラミロン等や、パラミロン誘導体も含まれる。

＜用途＞
　実施形態に係るユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤は、腸内フローラバランスが崩れているという確定診断を受けた患者や、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームの確定診断を受けた患者に投与される。
　また、本実施形態のユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤は、医薬組成物、健康食品等の食品組成物として構成され、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームの自覚症状を発現した者や、ＢＭＩが増加傾向にある者や、遺伝的に又は生活環境から考慮して、腸内フローラバランスが崩れる可能性の高い者、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームに罹患する可能性の高い者等、肥満症やメタボリックシンドローム予備軍の者に、予防的に投与される。

　ユーグレナ藻体やパラミロンなどのユーグレナ由来物質は、食品としても摂取可能で副作用がないため、腸内フローラバランスが崩れているという確定診断を受ける前や、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームの確定診断を受ける前であっても、投与可能である。また、確定診断を受ける前から、確定診断を受けた後の任意の時点、例えば、Ｆ／Ｂ比が所定の基準値よりも低下した時点や、ＢＭＩ値が２５未満まで低下した時点や、他の抗肥満剤に切り替える時点などまで、継続して投与可能である。

　また、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームの治療を完了した人は、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームを再発しやすいため、本実施形態のユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤を、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームの患者が治療によりＢＭＩ値が２５未満まで低下した後、ＢＭＩ値が２５未満まで低下した患者に対して、症状の再発を抑制することを目的に、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームの再発予防、抑制薬として、継続投与することができる。

　一般的に、腸内フローラバランスの崩れ、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームは、ストレス、食生活、遺伝的要因など、様々な要因によって引き起こされることが知られている。
　よって、本実施形態のユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤を、心理的ストレス・社会的ストレスのかかり易い環境にある人、例えば、心因性ストレスのかかりやすい職場、住環境にある人や試験等の準備中の人に対して、長期間継続投与できる。

　また、本実施形態のユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤を、食生活や、遺伝的要因により、腸内フローラバランスが崩れる可能性の高い人、肥満症及び／又はメタボリックシンドロームに罹患する可能性の高い環境にある人、例えば、食生活の乱れた家庭の人、親などの家族に肥満症及び／又はメタボリックシンドロームに罹患した者がいる家庭の人に対して、長期間継続投与できる。

　さらに、本実施形態に係るユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤を投与する対象は、上記症状又は状態の者や、ヒト以外の動物に限定されるものではない。

　例えば、白色脂肪細胞が特に増加する、乳幼児期や思春期のヒトのうち、ＢＭＩ　２５以上の肥満状態のヒトに、ユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤を投与し、又は摂取させることができる。
　乳幼児期や思春期の年齢のヒトは、白色脂肪細胞が増加し易く、肥満になり易いが、ユーグレナ由来物質が備える、腸内フローラバランス改善効果により、体重を減少させることができる。

　ここで、「乳児期」とは、生後から１歳未満の期間であり、「幼児期」とは、１歳以上から６歳未満の期間である。
　また、「思春期」とは、二次性徴が始まり、成熟して、身長発育が最終的に停止するまでの期間である。男性に関しては、概ね１２歳～１７歳の期間であるが、女性に関し、日本産科婦人科学会の定義によれば、「性機能の発育（乳房発育・恥毛発育など）に始まり、初経を経て第二次性徴の完成と月経周期がほぼ順調になるまでの期間で、現在の日本人の場合、平均的には８、９歳から１７、１８歳の間とする」と定義される。ＷＨＯ（世界保健機関）によれば１０～１９歳と定義されるように、性別や個人差によって、幅を有する概念であるが、８～１９歳の期間である。

　また、４０歳以降の年齢のヒトに、ユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、腸内フローラバランス改善用食品組成物、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤を投与することができる。
　４０歳以上のヒトは、余分な脂肪を分解することによって熱を生み出す働きが衰えており、脂肪が蓄積し易く、中年太りになり易くなっているが、ユーグレナ由来物質が備える、腸内フローラバランス改善効果により、中年太りを抑制することができる。

　また、本実施形態に係るユーグレナ由来物質を有効成分として含有する腸内フローラバランス改善剤、抗肥満剤、及び抗メタボリックシンドローム剤は、薬理学的に許容され得る添加剤を加え、食品組成物、医薬組成物等の組成物として用いることができる。

（食品組成物）
　また、本発明のユーグレナ由来物質は、食品にも用いることが可能である。
　本実施形態の腸内フローラバランス改善用食品組成物は、食品の分野では、腸内フローラバランス改善作用を有効に発揮できる有効な量のユーグレナ由来物質を食品素材として、各種食品に配合することにより、当該作用を有する食品組成物を提供することができる。
　すなわち、本発明は、食品の分野において、腸内フローラバランス改善用等と表示された食品の食品組成物を提供することができる。当該食品組成物としては、一般の食品のほか、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品、病院患者用食品、サプリメント等が挙げられる。また、食品添加物として用いることもできる。
　当該食品組成物としては、例えば、調味料、畜肉加工品、農産加工品、飲料（清涼飲料、アルコール飲料、炭酸飲料、乳飲料、果汁飲料、茶、コーヒー、栄養ドリンク等）、粉末飲料（粉末ジュース、粉末スープ等）、濃縮飲料、菓子類（キャンディ（のど飴）、クッキー、ビスケット、ガム、グミ、チョコレート等）、パン、シリアル等が挙げられる。また、特定保健用食品、栄養機能食品、機能性表示食品等の場合、カプセル、トローチ、シロップ、顆粒、粉末等の形状であっても良い。

　ここで特定保健用食品とは、生理学的機能等に影響を与える保健機能成分を含む食品であって、消費者庁長官の許可を得て特定の保健の用途に適する旨を表示可能なものである。本発明においては、特定の保健用途として「腸内細菌のバランスを整えます」、「腸内の環境を良好に保ちます」、「おなかの調子を整えます」、「良い菌を増やして、悪い菌を減らします」などと表示して販売される食品となる。
　また栄養機能食品とは、栄養成分（ビタミン、ミネラル）の補給のために利用される食品であって、栄養成分の機能を表示するものである。栄養機能食品として販売するためには、一日当たりの摂取目安量に含まれる栄養成分量が定められた上限値、下限値の範囲内にある必要があり、栄養機能表示だけでなく注意喚起表示等もする必要がある。
　また機能性表示食品とは、事業者の責任において、科学的根拠に基づいた機能性を表示した食品である。販売前に安全性及び機能性の根拠に関する情報などが消費者庁長官へ届け出られたものである。

　本実施形態に係る食品組成物には、ユーグレナ由来物質に加え、通常食品組成物に用いることができる成分を、１種または２種以上自由に選択して配合することが可能である。例えば、各種調味料、保存剤、乳化剤、安定剤、香料、着色剤、防腐剤、ｐＨ調整剤などの、食品分野で通常使用し得る全ての添加剤を含有させることができる。

　　（医薬組成物）
　本実施形態の腸内フローラバランス改善剤は、医薬組成物として利用することができる。
　本実施形態の腸内フローラバランス改善剤は、医薬の分野では、腸内フローラバランス改善作用を有効に発揮できる量のユーグレナ由来物質と共に、薬学的に許容される担体や添加剤を配合することにより、当該作用を有する医薬組成物が提供される。当該医薬組成物は、医薬品であっても医薬部外品であってもよい。
　当該医薬組成物は、内用的に適用されても、また外用的に適用されても良い。従って、当該医薬組成物は、内服剤、静脈注射、皮下注射、皮内注射、筋肉注射及び／又は腹腔内注射等の注射剤、経粘膜適用剤、経皮適用剤等の製剤形態で使用することができる。
　当該医薬組成物の剤型としては、適用の形態により、適当に設定できるが、例えば、錠剤、顆粒剤、カプセル剤、粉末剤、散剤などの固形製剤、液剤、懸濁剤などの液状製剤、軟膏剤、またはゲル剤等の半固形剤が挙げられる。

　本実施形態に係る医薬組成物には、薬学的に許容される添加剤を１種または２種以上自由に選択して含有させることができる。
　例えば、本実施形態に係る医薬組成物を経口剤に適用させる場合、例えば、賦形剤、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、保存剤、着色剤、矯味剤、香料、安定化剤、防腐剤、酸化防止剤等の、医薬製剤の分野で通常使用し得る全ての添加剤を含有させることができる。また、ドラックデリバリーシステム（ＤＤＳ）を利用して、徐放性製剤等にすることもできる。

　以下、具体的実施例に基づいて本発明を具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

＜実施例１＞
　ユーグレナ由来物質として、ユーグレナ・グラシリス粉末（ユーグレナ藻体、（株）ユーグレナ製）を用いた。

＜実施例２＞
　ユーグレナ由来物質としてのパラミロンを、以下の手順により調製した。
　ユーグレナグラシリス粉末（（株）ユーグレナ社製）を蒸留水に入れ、室温で２日間撹拌した。これを超音波処理して細胞膜を破壊し、遠心分離により粗製パラミロン粒子を回収した。回収したパラミロン粒子を１％ドデシル硫酸ナトリウム水溶液に分散し、９５℃で２時間処理し、再度遠心分離により回収したパラミロン粒子を０．１％ドデシル硫酸ナトリウム水溶液に分散して５０℃で３０分間処理した。当該操作により脂質やタンパク質を除去し、その後アセトン及びエーテルで洗浄した後、５０℃で乾燥して、精製パラミロン粒子を得た。

＜実施例３＞
　ユーグレナ由来物質としてのアモルファスパラミロン（パラミロンのアルカリ処理物）を、以下の手順により調製した。
　実施例２で調製したパラミロン粉末を、１Ｎの水酸化ナトリウム水溶液に５％（ｗ／ｖ）添加して溶解させ、１～２時間スターラで撹拌して、アルカリ処理した。その後、１Ｎの塩酸を、パラミロン粉末が溶解した１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液に滴下して中和した。遠心分離の後上澄みを捨て、沈殿を蒸留水で洗浄する工程を繰り返した後、沈殿したゲルを回収し、凍結させた後凍結乾燥機で凍結乾燥し、アモルファスパラミロンを得た。

＜試験１＞
　ラットに実施例１～３で調製したユーグレナ由来物質を経口摂取させ、ユーグレナ由来物質の腸内フローラバランスの改善作用を確認する試験を行った。具体的には、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率（Ｆ）を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率（Ｂ）で割った比率であるＦ／Ｂ比を測定する試験を行った。
　試験には、３週齢のＷｉｓｔａｒ系雄性ラット（日本クレア株式会社）５匹を用いた。飼料と飲料水（蒸留水）は自由摂取とした。
　ラットは、１週間の予備飼育後、３つの群に５匹ずつ分けて４週間飼育した。飼料は、精製飼料（ＡＩＮ－９３Ｎ、日本クレア株式会社）に基づき作成し、コントロール群としての無繊維群にはセルロースを除いた飼料を経口摂取させた。また、セルロース群にはセルロースを５％添加し、ユーグレナ群にはセルロースの代わりとして実施例１で調製したユーグレナ藻体を５％添加し、パラミロン群にはセルロースの代わりとして実施例２で調製したパラミロンを５％添加し、アモルファスパラミロン群にはセルロースの代わりとして実施例３で調製したパラミロンを５％添加した飼料を摂取させた（下記表１及び２に示す飼料組成を参照）。

　４週間飼育後に、ラットの糞を採糞した。
　試験は、各ラットの腸内細菌叢において、バクテロイデス門に分類される細菌と、ファーミキューテス門に分類される細菌との各占有率を門ごとに測定した。
　具体的には、各ラットの糞における腸内細菌叢について、細菌叢に由来する１６ＳｒＲＮＡ部分の塩基配列の解析を公知な方法に基づいて行った（Nagashima K, et al., “Application of New Primer-Enzyme Combinations to Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism Profiwling of Bacterial Populations in Human Feces” Appl Environ Microbiol, vol.69, pp.1251-1262 , 2003）。
　ここでバクテロイデス門に分類される細菌としてバクテロイデス属およびプレボテラ属の細菌を選択し、ファーミキューテス門に分類される細菌としてクロストリジウム属およびラクトバチルス属の細菌を選択した。
　また、各ラットの腸内細菌叢において、ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）属の細菌（乳酸菌）と、プレボテラ（Ｐｒｅｖｏｔｅｌｌａ）属の細菌が占める割合（占有率）を測定した。

（試験１の結果）
　試験結果として、無繊維群と、５％セルロース群と、ユーグレナ群と、パラミロン群と、アモルファスパラミロン群との、Ｆ／Ｂ比を比較したグラフを図１に示す。
　図１より、無繊維群に比べて、ユーグレナ群、アモルファスパラミロン群では、Ｆ／Ｂ比が有意に下がった（§無繊維群対アモルファスパラミロン群：ｐ＜０．００１、§§無繊維群対ユーグレナ群：ｐ＜０．０１）。また、パラミロン群では、Ｆ／Ｂ比が減少傾向を示した。
　一般的な食物繊維としての比較群である５％セルロース群に比べて、アモルファスパラミロン摂取群では、Ｆ／Ｂ値が有意に下がった（＊５％セルロース群対アモルファスパラミロン群、ｐ＜０．０５）。
　パラミロン群も、無繊維群や、５％セルロース群と比べてＦ／Ｂ比が下がる傾向があった。

　図２に、無繊維群と、５％セルロース群と、ユーグレナ群と、パラミロン群との、ラットの糞におけるラクトバチルス属の細菌（乳酸菌）の占有率を比較したグラフを示す。
　図２より、無繊維群に比べて、ユーグレナ群、パラミロン群では、腸内細菌叢におけるラクトバチルス属の細菌の占有率が有意に増加した（＊無繊維群対ユーグレナ群または無繊維群対パラミロン群：ｐ＜０．０１）。

　図３に、無繊維群と、５％セルロース群と、ユーグレナ群と、パラミロン群との、ラットの糞におけるプレボテラ属の細菌の占有率を比較したグラフを示す。
　図３より、無繊維群に比べて、ユーグレナ群、パラミロン群では、腸内細菌叢におけるプレボテラ属の細菌の占有率が有意に増加する傾向があることが分かった。

　試験例１の結果より、ユーグレナ、パラミロン及びアモルファスパラミロンを継続摂取した、ユーグレナ群、パラミロン群及びアモルファスパラミロン群のラットでは、腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率であるＦ／Ｂ比が低くなっていることが分かった。
　また、アモルファスパラミロン群のラットでは、腸内細菌叢におけるＦ／Ｂ比が他の群よりも低い値を示した。
　すなわち、パラミロンには、腸内環境の改善作用の効果があり、また、セルロースと同等又は同等以上の腸内環境の改善作用の効果があった。

　また、ラクトバチルス属の細菌（乳酸菌）は、無繊維群と比べて、ユーグレナ又はパラミロンの摂取によって、占有率が上がることが分かった。さらに、プレボテラ属の細菌も、無繊維群と比べて、ユーグレナ又はパラミロンの摂取によって、占有率が上がる傾向があることが分かった。

　以上より、ユーグレナ由来物質が生体に経口投与されると、腸内のバクテロイデス門に分類される細菌をファーミキューテス門に分類される細菌よりも相対的に活性化及び増殖させる作用を果たし、腸内フローラのバランス改善を果たすことが分かった。

＜試験２＞
　高脂肪食を飼料として与えたマウスに実施例１及び実施例２で調製したユーグレナ由来物質を経口摂取させ、ユーグレナ由来物質の腸内フローラバランスの改善作用を確認する試験、具体的には、腸内フローラにおけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌、乳酸菌、ビフィズス菌の占有率を測定する試験を行った。
　試験には、５週齢のＳＴＡＭ（登録商標）マウス６匹を用いた。飼料と飲料水（蒸留水）は自由摂取とした。
　マウスは、１週間の予備飼育後、９週間飼育した。コントロール群は、飼料として高脂肪食（Ｈｉｇｈ　Ｆａｔ　Ｄｉｅｔ　３２、放射線滅菌、日本クレア（株））を経口摂取させた。また、ユーグレナ群には実施例１で調製したユーグレナ藻体を３ｇ／ｋｇ添加し、パラミロン群には実施例２で調製したパラミロンを３ｇ／ｋｇ添加した飼料を摂取させた。

　２週間飼育後、４週間飼育後に、マウスの糞を採糞した。糞便は各群６匹のもののｍｉｘｔｕｒｅとし、平準化を行った。
　試験は、各群のラットの腸内細菌叢において、バクテロイデス門に分類される細菌と、ファーミキューテス門に分類される細菌との各占有率を門ごとに測定した。
　ここでバクテロイデス門に分類される細菌としてバクテロイデス属およびプレボテラ属の細菌を選択し、ファーミキューテス門に分類される細菌としてクロストリジウム属およびラクトバチルス属の細菌を選択した。
　また、各マウスの腸内細菌叢において、アッカーマンシア・ムシニフィラ菌、乳酸菌、ビフィズス菌の占有率を測定した。
　具体的には、各マウスの２週間飼育後の糞、４週間飼育後の糞における腸内細菌叢について、細菌叢に由来する１６ＳｒＲＮＡ部分の塩基配列の解析を公知な方法に基づいて行った（Nagashima K, et al., 2003）。

（試験２の結果）
　試験結果として、コントロール群と、ユーグレナ群と、パラミロン群との、２週間飼育後の糞及び４週間飼育後の糞におけるＦ／Ｂ比を比較したグラフを図４に示す。
　図４より、コントロール群（高脂肪食摂取群）に比べて、ユーグレナ群、パラミロン群では、Ｆ／Ｂ比が下がる傾向があることが分かった。

　試験結果として、コントロール群と、ユーグレナ群と、パラミロン群との、２週間飼育後の糞及び４週間飼育後の糞における各種腸内細菌の占有率を比較したグラフを図５乃至７に示す。
　図５より、アッカーマンシア・ムシニフィラ菌は、コントロール群と比べて、パラミロンの摂取によって占有率が上がる傾向があることが分かった。
　また、図６より、乳酸菌（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ）は、コントロール群と比べて、ユーグレナの摂取によって、占有率が上がる傾向があることが分かった。
　更に、図７より、ビフィズス菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）は、コントロール群と比べて、パラミロンの摂取によって、占有率が上がる傾向があることが分かった。

　高脂肪食を与え、腸内フローラにおけるＦ／Ｂ比が高くなっていることが想定されるマウスに対しても、腸内のバクテロイデス門に分類される細菌をファーミキューテス門に分類される細菌よりも相対的に活性化及び増殖させる作用を果たし、腸内フローラのバランス改善を果たすことが分かった。

Claims

　ユーグレナ由来物質を有効成分として含有し、
　腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させるために用いられることを特徴とする腸内フローラバランス改善用食品組成物。
　前記ユーグレナ由来物質は、ユーグレナ藻体、パラミロン、パラミロンの加工品を含む群より選択される一種以上であることを特徴とする請求項１記載の腸内フローラバランス改善用食品組成物。
　前記ユーグレナ由来物質は、アモルファスパラミロンであることを特徴とする請求項１又は２記載の腸内フローラバランス改善用食品組成物。
　前記ユーグレナ由来物質は、パラミロン又はアモルファスパラミロンより選択される一種以上であり、
　腸内フローラにおけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を増加させるために用いられることを特徴とする請求項１乃至３いずれか記載の腸内フローラバランス改善用食品組成物。
　腸内フローラにおけるビフィズス菌の占有率を増加させるために用いられることを特徴とする請求項４記載の腸内フローラバランス改善用食品組成物。
　前記ユーグレナ由来物質は、ユーグレナ藻体又はパラミロンより選択される一種以上であり、
　腸内フローラにおける乳酸菌及びプレボテラ属分類される菌の占有率を増加させるために用いられることを特徴とする請求項１又は２に記載の腸内フローラバランス改善用食品組成物。
　ユーグレナ由来物質を有効成分として含有し、
　腸内フローラにおけるファーミキューテス門に分類される細菌の占有率を腸内フローラにおけるバクテロイデス門に分類される細菌の占有率で割った比率を低下させるために用いられることを特徴とする腸内フローラバランス改善剤。
　前記ユーグレナ由来物質は、ユーグレナ藻体、パラミロン、パラミロンの加工品を含む群より選択される一種以上であることを特徴とする請求項７記載の腸内フローラバランス改善剤。
　前記ユーグレナ由来物質は、アモルファスパラミロンであることを特徴とする請求項７又は８記載の腸内フローラバランス改善剤。
　前記ユーグレナ由来物質は、パラミロン又はアモルファスパラミロンより選択される一種以上であり、
　腸内フローラにおけるアッカーマンシア・ムシニフィラ菌の占有率を増加させるために用いられることを特徴とする請求項７乃至９いずれか記載の腸内フローラバランス改善剤。
　腸内フローラにおけるビフィズス菌の占有率を増加させるために用いられることを特徴とする請求項１０記載の腸内フローラバランス改善剤。
　前記ユーグレナ由来物質は、ユーグレナ藻体又はパラミロンより選択される一種以上であり、
　腸内フローラにおける乳酸菌及びプレボテラ属分類される菌の占有率を増加させるために用いられることを特徴とする請求項７又は８に記載の腸内フローラバランス改善剤。