JPH0799967A

JPH0799967A - 乳酸菌生育促進剤

Info

Publication number: JPH0799967A
Application number: JP5267875A
Authority: JP
Inventors: Taisuke Iwasaki; 泰介岩崎; Takashi Fujita; 孝藤田
Original assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Current assignee: Snow Brand Milk Products Co Ltd
Priority date: 1993-09-30
Filing date: 1993-09-30
Publication date: 1995-04-18

Abstract

(57)【要約】【目的】ユーグレナ細胞および／またはユーグレナ細
胞抽出物を有効成分とする乳酸菌生育促進剤を提供す
る。【構成】ユーグレナを培養して、その細胞を回収し、
必要に応じてその抽出物を得ることにより、乳酸菌生育
促進剤の有効成分とする。【効果】ユーグレナを大量に培養することにより、乳
酸菌生育促進剤を安価に提供することが可能となる。ま
た、この乳酸菌生育促進剤は、通常の乳酸菌を培養する
培地やチーズ、ヨーグルト、乳酸菌飲料などを製造する
際に乳酸菌スターターに添加して用いることができるの
で有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、ユーグレナに由来する
乳酸菌の生育促進剤に関する。この乳酸菌生育促進剤
は、通常の乳酸菌を培養する際に用いることができると
共に、チーズ、ヨーグルトあるいは乳酸菌飲料などを製
造する際に乳酸菌スターターに添加して用いることもで
きるので有用である。

【０００２】

【従来の技術】従来、チーズ、ヨーグルトあるいは乳酸
菌飲料などの発酵に際して使用する乳酸菌スターターの
生育を良くするために、酵母エキスやペプトンなどを添
加することが一般的に行われている。

【０００３】一方、ユーグレナは単細胞の真核生物であ
って、生物分類学上はミドリムシ植物門に分類される植
物であり、かつ、原生動物門に属する動物でもある特異
な生物である。このユーグレナは、淡水中に広く分布し
ており、多くは池、沼のような静水中に生棲するが、海
水中、汚水中でも生育が可能である。また、ユーグレナ
は、比較栄養学の材料生物として有用であり、その生理
について多くの研究がなされている〔ユーグレナ−生理
と生化学、北岡正三郎編、学会出版センター発行、１９
８９年〕。このユーグレナは、アラキドン酸やエイコサ
ペンタエン酸などの高度不飽和脂肪酸、さらにはビタミ
ンＣ、Ｅ、β−カロチンなどのビタミン類及び良質の蛋
白質や多糖類などの有用物質を生産することが知られて
いる。

【０００４】しかしながら、これまでにユーグレナ細胞
あるいはその抽出物を乳酸菌の生育促進の目的で利用す
るという提案はなされていない。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明者らは、ユーグ
レナの生産する有用物質について種々検討する過程で、
ユーグレナ細胞あるいはその抽出物中に乳酸菌の生育を
促進する活性を見出し、本発明を成すに至った。したが
って、本発明は、ユーグレナ細胞および／またはユーグ
レナ細胞抽出物を有効成分とする乳酸菌生育促進剤を提
供することを課題とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明では、ユーグレナ
を炭素源および窒素源を含む培地で培養してその細胞を
蓄積し、次いでこれを分離、採取し、さらに必要に応じ
てその抽出物を得ることにより、乳酸菌生育促進剤とし
てのユーグレナ細胞あるいはユーグレナ細胞抽出物を調
製することができる。

【０００７】なお、本発明では、ユーグレナ属に属し、
乳酸菌の生育を促進する効果を有するものであれば全て
の種を用いることができる。代表的なユーグレナとして
は、Ｅｕｇｌｅｎａｇｒａｃｉｌｉｓ、Ｅｕｇｌｅｎ
ａｇｒａｃｉｌｉｓｖａｒ．ｂａｃｉｌｌａｒｉ
ｓ、Ｅｕｇｌｅｎａｖｉｒｉｄｉｓなどが知られてお
り、これらの変異種を用いることもできる。

【０００８】本発明でユーグレナを培養する際に用いら
れる培地は、特に限定されるものではなく、通常ユーグ
レナの培養に用いられるものであれば良い。また、炭素
源、窒素源、無機物、ビタミン類などを適宜組み合わせ
て用いても良い。例えば、ハトナー培地〔ジャーナル・
オブ・プロトズーオロジー、第６巻、第２３頁、１９５
９年〕、コレン−ハトナー培地〔ジャーナル・オブ・プ
ロトズーオロジー、第１４巻、第１７頁、１９６７年〕
など、従来から知られている培地を用いることができ
る。なお、ハトナー培地は、培地１ｌ当たり、リンゴ酸
２ｇ、グルタミン酸ナトリウム５ｇ、リン酸二水素カリ
ウム０．４ｇ、リン酸水素二アンモニウム０．２ｇ、硫
酸マグネシウム０．５ｇ、炭酸カルシウム０．２ｇ、硫
酸亜鉛２２ｍｇ、硫酸マンガン５．８ｍｇ、硫酸第一鉄
アンモニウム５．７ｍｇ、モリブデン酸アンモニウム
１．５ｍｇ、硫酸銅１．６ｍｇ、硫酸コバルト１．９ｍ
ｇ、ホウ酸１１．４ｍｇＥＤＴＡ・２Ｎａ５０ｍｇ、
ビタミンＢ₁ ２．５ｍｇ、ビタミンＢ₁₂ ０・０２ｍｇ
を含み、ｐＨは３．３に調整されている培地である。ま
た、コレン−ハトナー培地は、培地１ｌ当たり、アルギ
ニン塩酸塩０．５ｇ、アスパラギン酸０．３ｇ、グルコ
ース１２．０ｇ、グルタミン酸４．０ｇ、グリシン０．
３ｇ、ヒスチヂン塩酸塩０．０５ｇ、リンゴ酸６．５
ｇ、クエン酸３Ｎａ０．５ｇ、コハク酸２Ｎａ０．１
ｇ、硫酸アンモニウム０．５ｇ、炭酸水素アンモニウム
０．２５ｇ、リン酸二水素カリウム０．２５ｇ、炭酸カ
ルシウム０．１２ｇ、ＥＤＴＡ・２Ｎａ５０ｍｇ、硫
酸第一鉄５０ｍｇ、硫酸マンガン１８ｍｇ、硫酸亜鉛２
５ｍｇ、モリブデン酸アンモニウム４．０ｍｇ、硫酸銅
１．２ｍｇ、バナジン酸アンモニウム０．５ｍｇ、硫酸
コバルト０．５ｍｇ、ホウ酸０．６ｍｇ、硫酸ニッケル
０．５ｍｇ、ビタミンＢ₁ ２．５ｍｇ、ビタミンＢ
₁₂０．００５ｍｇを含み、ｐＨは３．５に調整されてい
る培地である。

【０００９】本発明でユーグレナを培養する際に用いら
れる培地では、炭素源としては特にグルコースを、窒素
源としては特にグルタミン酸及びリン酸水素二アンモニ
ウムを用いることが好ましい。

【００１０】本発明でユーグレナを培養するに際して
は、上記のような培地で、ｐＨ２．５〜８．０、好まし
くは３．０〜４．５、培養温度１０〜３５℃、好ましく
は２０〜３２℃、光照射下あるいは暗黒下で２〜１０日
間、好ましくは３〜７日間培養を行う。なお、ユーグレ
ナを大量に培養する場合には、先に本発明者らが提案し
た培養装置（特開平３−９８５７４号公報) 及び流加培
養法（特願平４−３３９７７９号) を適用すると良い。

【００１１】上述のように培養して得られたユーグレナ
細胞を遠心分離などの処理によって培養液から回収し、
以下のような処理を行って乳酸菌生育促進剤を調製する
ことができる。

【００１２】培養液から回収したユーグレナ細胞を、そ
のまま凍結乾燥するか、室温で風乾あるいは４０〜５０
℃程度の温度で乾燥して、ユーグレナ細胞から成る乳酸
菌生育促進剤とする。あるいは、培養液から回収したユ
ーグレナ細胞を超音波処理や乳鉢、ガラスビーズ、ワー
リングブレンダー、ミキサー、ポリトロンなどを用いて
破砕した後、遠心分離して上清を採取し、その上清を凍
結乾燥して、ユーグレナ細胞抽出物から成る乳酸菌生育
促進剤とすることもできる。さらには、ユーグレナ細胞
を破砕し、遠心分離して得られた上清に、エタノール、
メタノール、アセトンなどの有機溶媒を添加し、生成す
る沈澱を室温乾燥するなどして、ユーグレナ細胞抽出物
から成る乳酸菌生育促進剤とすることもできる。また、
培養液から回収したユーグレナ細胞をアセトンなどの有
機溶媒で５分間から数時間の短時間処理した後、そのま
ま乾燥させて、ユーグレナ細胞から成る乳酸菌生育促進
剤としても良い。

【００１３】このようにして得られたユーグレナ細胞お
よび／またはユーグレナ細胞抽出物を有効成分とする乳
酸菌生育促進剤は、乳酸菌の培養に用いる培地あるいは
乳酸菌の培養物に０．１〜１０％、好ましくは０．５〜
５％添加することにより、本発明の効果を発揮すること
ができる。次に実施例を示し, 本発明を詳しく説明す
る。

【００１４】

【実施例１】５００ｍｌ容三角フラスコ１０本にグルコ
ース１．８ｇ、グルタミン酸０．３ｇ、リン酸水素二ア
ンモニウム０．２５ｇを含む改変ハトナー培地各１００
ｍｌを入れ、同様の培地で前培養したＥｕｇｌｅｎａ
ｇｒａｃｉｌｉｓＳＭ−ＺＫ（大阪府立大農学部より
分与）を５％接種して、２５℃、４日間、１２０ｒｐｍ
で振とう培養を行った後、培養液を遠心分離（３，００
０ｒｐｍ、１５分間）してユーグレナ細胞を回収し、引
き続いて凍結乾燥して、ユーグレナ細胞１８ｇを得た。

【００１５】

【実施例２】実施例１と同様にして培養液から回収した
ユ─グレナ細胞に、０．０１Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．
０）１００ｍｌを加えて懸濁し、再び遠心分離して上清
を除去することにより、ユーグレナ細胞を洗浄した。次
いで、このユ─グレナ細胞に、蒸留水２０ｍｌを加えて
よく懸濁した後、超音波発生装置（ＴＩ−１００型、ト
ミー製、出力発振周波数１０ｋｃ／ｓ）を使用して１０
分間処理し、これをそのまま凍結乾燥して、ユーグレナ
細胞抽出物１９．２ｇを得た。

【００１６】

【実施例３】容量２ｌの発酵槽に、グルコース１８ｇ／
ｌ、グルタミン酸３ｇ／ｌ、リン酸水素二アンモニウム
２．５ｇ／ｌを含む改変ハトナー培地１．３ｌを充填し
て滅菌し、同様の培地で前培養したＥｕｇｌｅｎａｇ
ｒａｃｉｌｉｓＳＭ−ＺＫ（大阪府立大農学部より分
与）を５％接種した。培養は、２５℃で行い、特殊な攪
拌羽根（特開平３−９８５７４号公報）を用いて６０ｒ
ｐｍの速度で攪拌しながら７日間行った。通気速度は、
培養０〜３日が０．３２ｌ／分、４〜５日が１．３ｌ／
分、６〜７日が１．９５ｌ／分として、培養３日目と５
日目にグルコース１３ｇ／ｌ、グルタミン酸３ｇ／ｌ及
びリン酸水素二アンモニウム１．５ｇ／ｌをそれぞれ添
加する流加培養を行った。培養終了後、培養液を遠心分
離（３，０００ｒｐｍ、１５分間）してユーグレナ細胞
を回収し、凍結乾燥してユーグレナ細胞３９．０ｇを得
た。さらに、このユーグレナ細胞に、アセトンを添加
し、常温で３時間放置した後、沈澱を回収して乾燥し、
アセトン処理ユーグレナ細胞３７．３ｇを得た。

【００１７】

【試験例１】実施例１で調製した粉末状のユーグレナ細
胞から成る本発明の乳酸菌生育促進剤を１１．５％の還
元脱脂乳培地に添加し、１１５℃、１５分間滅菌した
後、乳酸菌を接種して乳酸菌の生育促進活性を測定し
た。乳酸菌は、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｉｄ
ｏｐｈｉｌｕｓＳＢＴ−２０６２（ＦＥＲＭＰ−１
０７３０）を用い、３７℃、１６時間培養後の培養物１
０ｇを中和するに要する０．１Ｎ−ＮａＯＨの所要量
（酸度）とｐＨを測定した。結果を表１に示す。

【００１８】

【表１】 ──────────────────────────────────── 乳酸菌生育促進剤添加量０．１Ｎ−ＮａＯＨ所要量ｐＨ ──────────────────────────────────── ０．０（％）１０．０３（ｍｌ）４．２４０．１１０．３５４．１８０．５１１．１５４．１１１．０１１．７３４．０８３．０１２．２０４．０８５．０１２．７５４．０７ ────────────────────────────────────

【００１９】

【試験例２】実施例２で調製した粉末状のユーグレナ細
胞抽出物から成る本発明の乳酸菌生育促進剤を用い、試
験例１と同様にして乳酸菌の生育促進活性を測定した。
なお乳酸菌は、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓａｃｉｄ
ｏｐｈｉｌｕｓＳＢＴ−２０６４（ＦＥＲＭＰ−９
９７２）を用いた。結果を表２に示す。

【００２０】

【表２】 ──────────────────────────────────── 乳酸菌生育促進剤添加量０．１Ｎ−ＮａＯＨ所要量ｐＨ ──────────────────────────────────── ０．０（％）１０．０５（ｍｌ）４．２４０．１１０．４５４．１６０．５１１．５５４．０７１．０１２．１３４．０６３．０１３．００４．０９５．０１３．１５４．０６ ────────────────────────────────────

【００２１】

【試験例３】実施例３で調製した粉末状のアセトン処理
ユーグレナ細胞から成る本発明の乳酸菌生育促進剤を用
い、試験例１と同様にして乳酸菌の生育促進活性を測定
した。なお乳酸菌は、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｇ
ａｓｓｅｒｉＳＢＴ−２０５６（ＦＥＲＭＰ−８７
４４）を用いた。結果を表３に示す。

【００２２】

【表３】 ──────────────────────────────────── 乳酸菌生育促進剤添加量０．１Ｎ−ＮａＯＨ所要量ｐＨ ──────────────────────────────────── ０．０（％）１０．０２（ｍｌ）４．２５０．１１０．３０４．１８０．５１１．４１４．０８１．０１２．０３４．０７３．０１２．８９４．０７５．０１２．９７４．０７ ────────────────────────────────────

【００２３】

【実施例４】実施例１で調製した粉末状のユーグレナ細
胞から成る本発明の乳酸菌生育促進剤について、脱脂乳
培地にＬ−アスコルビン酸を０．１％添加する以外は試
験例１と同様にして乳酸菌の生育促進活性を測定した。
なお乳酸菌は、Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｏ
ｎｇｕｍＳＢＴ−２９２８（ＦＥＲＭＰ−１０６５
７）を用いた。結果を表４に示す。

【００２４】

【表４】 ──────────────────────────────────── 乳酸菌生育促進剤添加量０．１Ｎ−ＮａＯＨ所要量ｐＨ ──────────────────────────────────── ０．０（％）３．６３（ｍｌ）５．４８０．１３．６８５．４５０．５４．７８５．１０１．０６．２８４．８５３．０１１．５３４．３４５．０１５．３８４．１１ ────────────────────────────────────

【００２５】

【発明の効果】ユーグレナ細胞および／またはユーグレ
ナ細胞抽出物を有効成分とする乳酸菌生育促進剤は、顕
著に乳酸菌の生育を促進するので、通常の乳酸菌を培養
する培地やチーズ、ヨーグルトあるいは乳酸菌飲料など
を製造する際に乳酸菌スターターに添加して用いること
ができる。また、ユーグレナ細胞については、ユーグレ
ナを培養することにより、大量にかつ安価に提供するこ
とが可能である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ユーグレナ細胞および／またはユーグレ
ナ細胞抽出物を有効成分とする乳酸菌生育促進剤。
【請求項２】ユーグレナが、ユーグレナ・グラチリス
（Ｅｕｇｌｅｎａｇｒａｃｉｌｉｓ）である請求項１記
載の乳酸菌生育促進剤。