JP5498698B2 - シロキクラゲ雑多糖またはその抽出物の新用途 - Google Patents
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Description
1)通常の微生物発酵方法(参考文献(1)シロキクラゲ深層発酵条件についての研究、呉大康等;食品科学;2002,Vol.23,No.1;64;(2)シロキクラゲ菌分離方法の研究、張炳熾;中国食用菌;Vol.13,No.3;22)取得したシロキクラゲ発酵液を80-100℃に加熱し、0.5-2時間保温してからろ過する。ろ過済み液を最終的に穴径0.1-1μmのフィルターを通してろ過液を得る。
2952が望ましい。同乳酸菌Lactobacillusはグラム陽性の無性芽杆菌で56種類あるが、デルブリュック菌、KW乳酸菌とKK乳酸菌を優先し、さらにデルブリュック菌を優先する。同デルブリュック菌はデルブリュック菌ブルガリア亜種が望ましく、ブルガリア菌ATCC
11480がより望ましい。
subsp.bulgaricusをより優先、ブルガリア菌ATCC 11480を最優先する。
干燥したシロキクラゲの現物を水に浸し、膨張してから黄褐色の根元部分を取り除いてきれいに洗浄する。洗浄後の原料を抽出ビーカーに入れ、100倍量の水を加えて、100℃の水温で4時間攪拌する。その後ろ過を行い、ろ過済み液を最終的には穴径0.1-1μmのフィルターを通す。均一に攪拌して、ろ過済み液とアルコールを充分に混ぜ合わせ、混合液中のアルコールの最終濃度を85%とする。沈殿物を収集し、純アルコールにより脱水を行い、沈殿物を収集する。-40℃でフリーズドライし、粉砕してシロキクラゲ雑多糖抽出物(WSK-1)を得る。製品収集率は20%(乾燥シロキクラゲの重量計)、シロキクラゲ雑多糖の純度は80%である。
鮮度を保って冷蔵したシロキクラゲの現物を水に浸し、黄褐色の根元部分を取り除いてきれいに洗浄する。洗浄後の原料を抽出ビーカーに入れ、生材料の15倍量の水を加えて、100℃の水温で4時間攪拌する。それからろ過し、ろ過済み液を最終的には穴径0.1-1μmのフィルターを通す。ろ過澄み液を加熱して濃縮させ、濃縮液を得る。ろ過済み液とアルコールを充分に混ぜ合わせ、混合液中のアルコールの最終濃度を85%とする。沈殿物を収集し、純アルコールを用いて脱水脱色を行い、収集した沈殿物を80℃の熱風で乾燥し、粉砕してシロキクラゲ雑多糖抽出物を得る。製品収集率は2.1%(新鮮なシロキクラゲの重量計)である。
微生物の発酵により得られたシロキクラゲ発酵液を100℃で0.5時間加熱し、通常どおりろ過を行う。ろ過滓を廃棄し、ろ過済み液を最終的には穴径0.1-1μmのフィルターを通す。均一に攪拌して、ろ過済み液とアルコールを充分に混ぜ合わせ、混合液中のアルコールの最終濃度を85%とする。沈殿物を収集し、純アルコールを用いて脱水脱色を行い、沈殿物を集める。-40℃でフリーズドライし、粉碎してシロキクラゲ雑多糖抽出物を得る。製品収集率は0.55%(発酵液の重量計)である。
実施例1〜3のシロキクラゲ雑多糖抽出物を600倍(重量)のイオン除去水に溶解し、溶解した後200mLのクロロフォルムを加える。ブタノール=4:1(体積比)の混合溶液を充分に混ぜ合わせた後、遠心分離機で遠心分離にかけ(4000r/min、30分間)、上澄み液を収集する。遠心分離後の上澄み液と上記のクロロフォルムブタノール混合溶液を3:1(体積比)の割合で混ぜ合わせ、遠心分離機で遠心分離にかけ(4000r/min、30分間)、上澄み液を収集する。以上の操作を繰り返し、水相の280nm箇所のOD値(752紫外線回折格子分光光度計、上海精密科学儀器廠)がそれ以上下がらなくなるまで繰り返し処理する。水相を減圧により三分の一まで圧縮し、濃縮液と水相3倍量(体積比)の95%アルコールを充分に混合して、4000r/minで30分遠心分離を行い、沈殿物を得る。沈殿物を100倍(重量)のイオン除去水に溶かした後、遠心分離にかけ、解けない物質を除去する。ろ過済み液を30cm長さの透析袋内に入れ(透析袋は5000分子量以下の物質を通すことができる)透析(両端を括ってイオン除去水のビン内に吊るし、かつイオン除去水を使用して流水で12時間洗い流す)を行い、5000分子量以上の物質を集める。透析後のろ過済み液と3倍量(体積)の純アルコールを充分に混合し、再度4000r/minで30分遠心分離を行って、沈殿物を得る。沈殿物を無水アルコールで脱水した後、60℃で真空乾燥し、純シロキクラゲ雑多糖(WSK)を取得する。
サンプル名:実施例4で得られたシロキクラゲ雑多糖(WSK)、フラクトオリゴ糖(無錫軽工大学食品学院から提供を受けた標準品)
測定菌株:ビフィズス菌(Bifidobacteria)ATCC 2952、アメリカ菌種保存センター(American Type Culture Collection)から購買
培地:MRS寒天培地
滅菌方法:90℃以下で30分間滅菌する
実験処理は以下の3項に分ける:
対照グループ 1:培地6.3mL+菌液0.3mL
対照グループ 2:培地6.0mL+フラクトオリゴ糖0.3mL+菌液0.3mL(同培地中のフラクトオリゴ糖:培地の質量比は1:80)
実験グループ:培地6.0mL+シロキクラゲ雑多糖溶液0.3mL+菌液0.3mL(同培地中のフラクトオリゴ糖:培地の質量比は1:80)
実験方法:液体培養法
培養ビフィズス菌培養の手順は以下のとおりである:嫌気菌基礎培地(上海生物製品研究所)にビタミンKを 0.1wt%まで加えて液体培地を作り、通常通りにインキュベーション37℃で48時間静止培養する。
2952のMRS寒天培地中の培養時間は48時間から24時間に前倒しできる。また染色片からわかるように、対象グループ1と比較すると、実験グループの菌体は大きく増えており、同一視野における菌量の密度は明らかに増加している。図2Aと図2Bを参照する。
サンプル名:実施例4で得られた的シロキクラゲ雑多糖(WSK)、フラクトオリゴ糖(無錫軽工大学食品学院から提供を受けた基準品)
測定菌株:ブルガリア菌(Lactobacillus)ATCC 11480、中科院微生物研究所から購入。
培地滅菌方法:90℃下で30分滅菌
実験処理は以下の3項に分ける:
対象グループ 1:培地6.3mL+菌液0.3mL
対象グループ 2:培地6.0mL+フラクトオリゴ糖0.3mL+菌液0.3mL(同培地中のフラクトオリゴ糖:培地の質量比は1:80)
実験方法:液体培養法
乳酸菌の培養:嫌O2菌基礎培地(上海生物製品研究所)にビタミンKを加えて濃度 0.1wt%にして液体培地を生成し、通常のインキュベーションで、37℃で48時間静止培養する。
11480のMRS寒天培地中の培養時間は48時間から24時間に前倒しできる。また染色片からわかるように、対照グループ1と比較すると、実験グループの菌体は大きく増えており、同一視野における菌量の密度は明らかに増加している。図4Aと図4Bを参照する。
A2及びB2グループ:毎回の服用量は100mL、1日2回
A3及びB3グループ:毎回の服用量は100mL、1日2回
連続7日服用した後、服用者の排便回数に対して統計をとるとともに体に違和感がないか及び7日前に観察した顔面部皮膚のツヤとの変化状況を記録した。
C2及びD2グループ:毎回の服用量は100mL、毎日2回
C3及びD3グループ:毎回の服用量は100mL、毎日2回
連続7日服用した後、服用者の排便回数に対して統計をとるとともに体に違和感がないか及び7日前に観察した顔面部皮膚のツヤとの変化状況を記録した。
1)シロキクラゲ雑多糖抽出物には大便潤滑の作用があり、また便秘を改善できる。
Claims (21)
- 一種のシロキクラゲ雑多糖を含む経口摂取用組成物であって、
前記一種のシロキクラゲ雑多糖の構造はα-(1-3)マンノースを主鎖とし、70-93重量%の中性総糖、6-28重量%のグルクロン酸、0.1-3重量%の構造蛋白から構成され、当該シロキクラゲ雑多糖の平均分子量は85-160万ドルトンであり、そのうち分子量が6000ドルトン以上のものが90重量%以上を占め、
前記中性総糖には35-60重量%のマンノース、10-25重量%のフコース、8-18重量%のキシロース、および5-15重量%のグルコースの糖基が含まれ、当該重量%はシロキクラゲ雑多糖の重量に対する比率であり、
前記シロキクラゲ雑多糖が以下の構造式に示す構造ユニットを含んでおり、同構造ユニットの分子量は2578.5または2724.7であり、
前記一種のシロキクラゲ雑多糖は、
(a)干燥したシロキクラゲ子実体原料を水に浸して膨張させた後、水中で洗浄し、黄褐色の根元部分を除去するステップと、
(b)前記シロキクラゲ子実体原料を、前記シロキクラゲ子実体原料量の20-100倍(重量)の水中において80-100℃で攪拌することによって粗抽出液を抽出するステップであって、前記攪拌に用いる水の量は、複数回抽出を行う場合には、前記水の合計が前記干燥したシロキクラゲ子実体原料量の200倍(重量)を超えないステップと、
(c)穴径0.1-1μmのフィルターを通してろ過液を得るステップと、
(d)前記ステップ(c)で得られたろ過液中にアルコールを加え、アルコールの最終体積濃度を50-85%にして、沈殿物を収集するステップと、
(e)前記沈殿物を乾燥させるステップと、を含む方法によって得られることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物。
- 経口摂取用の一種のシロキクラゲ雑多糖抽出物であって、請求項1に記載の80-98重量%の一種のシロキクラゲ雑多糖、0.1-3.3重量%の遊離蛋白、及び0.5-8重量%の灰分からなり、当該シロキクラゲ雑多糖抽出物の平均分子量は75-140万ドルトンであり、そのうち分子量が6000ドルトン以上のものが75-98重量%を占めることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項1に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物、または、請求項2に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、プロバイオティクスの成長及び/または繁殖を促進する薬品、飲食品または健康食品の調合の用途に用いられることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項1に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物、または請求項2に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、便秘改善機能を備えた薬品、飲食品または健康食品の調合の用途に用いられることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項1に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物、または請求項2に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、毒素の排出機能及びデトックス美顔美容機能を備えた薬品、飲食品または健康食品の調合の用途に用いられることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項3に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、前記プロバイオティクスはビフィズス菌及び/または乳酸菌であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項6に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、前記ビフィズス菌はビフィダムであり、乳酸菌は徳氏デルブリュック菌ブルガリア亜種であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項7に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、前記ビフィダムはビフィズス菌ATCC 2952であり、徳氏デルブリュック菌ブルガリア亜種はブルガリア乳酸菌ATCC 11480であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項3乃至8のいずれかに記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、前記薬品は粉末剤、錠剤、カプセル剤(ソフトカプセルとハードカプセルを含む)、液体剤、浮遊液、乳剤、口服液、ゼリーまたは水溶性服用剤であり、前記飲食品はシロキクラゲ雑多糖またはシロキクラゲ雑多糖抽出物を含む濃縮液及び/または干燥物の飲料または食品であって、当該飲食品の応用には制限はなく、粉末剤、錠剤、カプセル剤(ソフトカプセルとハードカプセルを含む)、顆粒、水溶性服用剤、ゼリー、飲料、乳製品、ヨーグルトまたはスナック焼き物に使用でき、前記健康食品は粉末剤、錠剤、カプセル剤(ソフトカプセルとハードカプセルを含む)、液体剤、浮遊液、乳剤、経口液、ゼリーまたは水溶性服用剤であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項1に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物、または請求項2に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、プロバイオティクスの成長及び/または繁殖を促進する促進剤に使用されることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項10に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、前記プロバイオティクスはビフィズス菌及び/または乳酸菌であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項11に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物であって、前記ビフィズス菌はビフィズス菌ATCC 2952、乳酸菌はブルガリア乳酸菌ATCC 11480であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物。
- 請求項1に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物、または、請求項2に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、プロバイオティクスの成長及び/または繁殖を促進する薬品、飲食品または健康食品の調合の用途に使用することを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項1に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物、または請求項2に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、便秘改善機能を備えた薬品、飲食品または健康食品の調合の用途に使用することを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項1に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物、または請求項2に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、毒素の排出機能及びデトックス美顔美容機能を備えた薬品、飲食品または健康食品の調合の用途に使用することを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項3に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、前記使用方法が薬品、飲食品、健康食品の調合の用途に使用する方法であって、前記プロバイオティクスはビフィズス菌及び/または乳酸菌であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項6に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、前記使用方法が薬品、飲食品、健康食品の調合の用途に使用する方法であって、前記ビフィズス菌はビフィダムであり、乳酸菌は徳氏デルブリュック菌ブルガリア亜種であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項7に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、前記使用方法が薬品、飲食品、健康食品の調合の用途に使用する方法であって、前記ビフィダムはビフィズス菌ATCC 2952であり、徳氏デルブリュック菌ブルガリア亜種はブルガリア乳酸菌ATCC 11480であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項3乃至8のいずれかに記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、前記使用方法が薬品、飲食品、健康食品の調合の用途に使用する方法であって、前記薬品は粉末剤、錠剤、カプセル剤(ソフトカプセルとハードカプセルを含む)、液体剤、浮遊液、乳剤、口服液、ゼリーまたは水溶性服用剤であり、前記飲食品はシロキクラゲ雑多糖またはシロキクラゲ雑多糖抽出物を含む濃縮液及び/または干燥物の飲料または食品であって、当該飲食品の応用には制限はなく、粉末剤、錠剤、カプセル剤(ソフトカプセルとハードカプセルを含む)、顆粒、水溶性服用剤、ゼリー、飲料、乳製品、ヨーグルトまたはスナック焼き物に使用でき、前記健康食品は粉末剤、錠剤、カプセル剤(ソフトカプセルとハードカプセルを含む)、液体剤、浮遊液、乳剤、経口液、ゼリーまたは水溶性服用剤であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項10に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、前記使用方法が薬品、飲食品、健康食品の調合の用途に使用する方法であって、前記プロバイオティクスはビフィズス菌及び/または乳酸菌であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
- 請求項11に記載の経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法であって、前記使用方法が薬品、飲食品、健康食品の調合の用途に使用する方法であって、前記ビフィズス菌はビフィズス菌ATCC 2952、乳酸菌はブルガリア乳酸菌ATCC 11480であることを特徴とする経口摂取用シロキクラゲ雑多糖組成物または経口摂取用シロキクラゲ雑多糖抽出物の使用方法。
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