WO2014087960A1 - アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-as-bi-フォスフォヒドロラーゼに対する酵素活性促進剤、並びにそれを利用した発毛または育毛剤 - Google Patents

アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-as-bi-フォスフォヒドロラーゼに対する酵素活性促進剤、並びにそれを利用した発毛または育毛剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2014087960A1
WO2014087960A1 PCT/JP2013/082322 JP2013082322W WO2014087960A1 WO 2014087960 A1 WO2014087960 A1 WO 2014087960A1 JP 2013082322 W JP2013082322 W JP 2013082322W WO 2014087960 A1 WO2014087960 A1 WO 2014087960A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
hair growth
chaga
hot water
group
extract
Prior art date
Application number
PCT/JP2013/082322
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
山下　菊治
Original Assignee
国立大学法人徳島大学
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 国立大学法人徳島大学 filed Critical 国立大学法人徳島大学
Publication of WO2014087960A1 publication Critical patent/WO2014087960A1/ja

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/68—Plantaginaceae (Plantain Family)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9783—Angiosperms [Magnoliophyta]
    • A61K8/9789—Magnoliopsida [dicotyledons]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q7/00—Preparations for affecting hair growth

Definitions

  • the present invention relates to an enzyme activity promoter for alkaline phosphatase and / or naphthol-AS-BI-phosphohydrolase containing a plant extract as an active ingredient.
  • the present invention also relates to a hair growth or hair growth agent having an action of promoting hair growth by enhancing the metabolic activity of the skin based on the activity promoting action of the enzyme or other enzymes.
  • minoxidil trade name: Reup
  • finasteride trade name: Propecia
  • Various hair growth or hair growth agents that contain plant extracts or herbal extracts as active ingredients have also been proposed.
  • extract extracts such as carrots, Tamakitake, Yokuinin, Kashu, birch, bamboo shoots (see Patent Documents 1 to 6) are known.
  • the object of the present invention is to provide a hair growth or hair growth agent containing a plant extract as an active ingredient. Another object of the present invention is to provide an enzyme activity promoter that contributes to the hair growth or hair growth action of the plant extract.
  • the present inventor has conducted extensive research to solve the above problems, and found that the hot water extract of Chaga has an excellent hair growth or hair growth action, and such an excellent action is the hot water extract of Chaga.
  • the alkaline phosphatase and / or naphthol-AS which are considered to be effective for hair growth or hair growth, in particular, are included in the components contained in the water to activate a plurality of enzymes, particularly in the hot water extract of Chaga -BI-phosphohydrolase was found to be activated.
  • Enzyme activity promoter (I-1).
  • (I-2) The enzyme activity promoter according to (I-1), which further promotes the activity of at least one enzyme selected from the group consisting of esterase, leucine allylamidase, valine allylamidase, cystine allylamidase and ⁇ -fucosidase. .
  • Hair growth or hair growth agent (II) Hair growth or hair growth agent (II).
  • a hair growth or growth agent comprising as an active ingredient the enzyme activity promoter according to any one of (I-1) to (I-5).
  • (II) can be rephrased as follows.
  • (II-1) A hair growth or hair growth agent containing hot water extract of Chaga as an active ingredient.
  • (II-2) Furthermore, the hair growth or the hair restoring agent as described in (II-1) containing the solvent extract of a plantago mayol.
  • (II-3) The hair growth or hair growth agent described in (II-2), wherein the solvent extract of plantago mayor is a water extract of plantagomayor (including a hot water extract).
  • (II-4) The hair growth or hair restorer according to any one of (II-1) to (II-3), which has an oral dosage form or a transdermal dosage form.
  • the method comprises the step of orally or transdermally administering the enzyme activity promoter described in any of (I-1) to (I-5) to a mammal. Hair growth or hair growth method.
  • (III) can be rephrased as follows.
  • (III-1) A method of hair growth or hair growth comprising the step of orally or transdermally administering to a mammal a composition containing a hot water extract of Chaga as an active ingredient for hair growth or hair growth.
  • (III-2) The method for hair growth or hair growth described in (III-1), wherein the composition further contains a solvent extract of plantago mayol.
  • (III-3) The method of hair growth or hair growth described in (III-2), wherein the solvent extract of plantago mayor is a water extract of plantagomayor (including a hot water extract).
  • (III-4) The hair growth or hair growth method according to any one of (III-1) to (III-2), wherein the composition has an oral dosage form or a transdermal dosage form.
  • the hot water extract of Chaga has the action of promoting the enzymatic activity of alkaline phosphatase and / or naphthol-AS-BI-phosphohydrolase.
  • the hot water extract of the Chaga preferably has, in addition to the enzyme activity promoting action, an esterase, leucine allylamidase, valine allylamidase, cystine allylamidase, trypsin, ⁇ -mannosidase, and ⁇ -fucosidase. It has the effect of promoting the activity of at least one selected enzyme.
  • the enzyme activity promoter the metabolism of hair root cells can be promoted to promote hair growth and hair growth, which is useful as a hair growth or hair growth agent.
  • the hair growth or hair growth agent comprising hot water extract of Chaga as an active ingredient
  • this is applied to the scalp (transdermal administration) or taken orally (oral administration).
  • scalp transdermal administration
  • oral administration oral administration
  • the hair growth or hair growth agent of the present invention has no side irritation due to long-term continuous use because it has no irritation to the skin and is excellent in safety even when transdermally administered. Furthermore, even when orally administered, the hair growth or hair growth agent of the present invention does not show a decrease in appetite (decrease in food intake) or a decrease in body weight, and can be safely applied to a living body. Since it has the effect of reducing the amount and total cholesterol, it has the effect of preventing or improving lifestyle diseases such as diabetes and arteriosclerosis and adult diseases by long-term continuous use.
  • Chaga's hot water extract (Ch W) to human scalp 4-5 times a day at a rate of 400 ⁇ l for 15 weeks, 9th week, 11th week, 13th week, and The results of measuring the number of hairs in one section of the scalp at 15 weeks are shown.
  • Chaga alcohol extract (Ch A) Chaga hot water extract (Ch W) have enzyme activity (from left, alkaline phosphatase, esterase, lipase, leucine allylamidase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, ⁇ -
  • the absorbance is measured and the result compared with the control value (CTR) is shown.
  • Chaga hot water extract Ch W
  • Chaga hot water extract and planta mayor hot water equivalent mixture Ch W + Pl W
  • Chaga hot water extract and plantagomayor alcohol extract etc.
  • the quantity mixture (Ch W + Pl A) is enzymatic activity (from left, alkaline phosphatase, esterase, leucine allylamidase, valine allylamidase, trypsin, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, ⁇ -glucuronidase, ⁇ -mannosidase, and ⁇ -
  • CTR control value
  • the enzyme activity promoter of the present invention comprises at least one enzyme selected from the group consisting of alkaline phosphatase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, with hot water extract of Chaga as an active ingredient. It has the effect
  • Charga is a type of mushroom that parasitizes the trunk of a birch tree and inhabits extremely cold regions such as Russia, Mongolia, and northeastern China.
  • it is a kind of mushrooms belonging to the genus Sabinatake, which is also known as Fuscoporia obliqua (also known as Fuscoporia obliqua).
  • Fuscoporia obliqua also known as Fuscoporia obliqua
  • the Chaga that we are inventing includes all Chaga that do not involve the origin, such as Russia, Siberia, Mongolia, China, Japan or Europe.
  • the hot water extract of Chaga can be prepared by drying the Chaga and then subjecting it to an extraction operation with hot water as it is or after pulverization.
  • the dried pulverized product of Chaga can be obtained commercially.
  • hot water extraction is usually performed at a temperature of 50 ° C. or higher, preferably 70 to 90 ° C., more preferably 75 to 85 ° C., and the above-mentioned Chaga dried product for 0.5 to several tens of hours. Preferably, it is carried out by performing immersion extraction for about 1 to 24 hours.
  • the extraction operation should be performed using hot water of 2 to 10 times, preferably 3 to 5 times the weight of the dried Chaga product. Is preferred.
  • a component that activates alkaline phosphatase and / or naphthol-AS-BI-phosphohydrolase can be selectively extracted.
  • the active ingredient of naphthol-AS-BI-phosphohydrolase cannot be obtained by an extraction method using alcohol (including hydrous alcohol) instead of hot water, or is hardly obtained by hot water extraction. This is a component obtained uniquely (see FIG. 3 of Experimental Example 3).
  • the active component of alkaline phosphatase cannot be obtained by an extraction method using alcohol (including hydrous alcohol) instead of hot water (see FIGS. 10 to 12 in Experimental Example 6), or even hot water can be obtained. It is a component that is obtained uniquely by hot water extraction, less than when extracted (see FIG. 3 of Experimental Example 3).
  • an extraction method a commonly used method can be adopted, for example, using the above-mentioned hot water, an extraction method used for preparing various herbal preparations such as an extract, an elixir, a soaking agent, a decoction, a flowing extract and a tincture.
  • an extraction method used for preparing various herbal preparations such as an extract, an elixir, a soaking agent, a decoction, a flowing extract and a tincture.
  • it is not limited, for example, a method of immersing the dried product of the above Chaga (as it is, crude powder, shredded product or pulverized product) in hot water, a method of extracting with stirring under heating conditions, a steam distillation method Or a percolation method.
  • the obtained extract after removing solids by filtration or centrifugation as required, is used as it is, or partially concentrated by distilling off the solvent as a soft extract, depending on the mode of use.
  • it can be dried by a usual means such as reduced pressure drying, freeze drying or spray drying, and used as a dried extract.
  • the concentrated or dried product obtained after concentration or drying may be used after being purified by washing with an insoluble solvent, or may be used by further dissolving or suspending it in an appropriate solvent.
  • the hot water extract of Chaga obtained by the above method has an action of promoting the enzyme activity of alkaline phosphatase and / or naphthol-AS-BI-phosphohydrolase. Further, the hot water extract of Chaga obtained by the above method promotes at least leucine allylamidase, valine allylamidase, cystine allylamidase, ⁇ -glucuronidase, and ⁇ -fucosidase activities in addition to the above enzymes.
  • Chaga's hot water extract is used as an enzyme activity promoter for alkaline phosphatase or / and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, and in addition to alkaline phosphatase or / and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase.
  • enzyme activities include a total of 19 types including the above-mentioned enzymes (alkaline phosphatase, esterase, esterase lipase, lipase, leucine allylamidase, valine allylamidase, cystine allylamidase, trypsin, ⁇ -chymotrypsin, acid phosphatase, naphthol-AS Microwell for testing the enzyme activity of -BI-phosphohydrolase, ⁇ -galactosidase, ⁇ -galactosidase, ⁇ -glucuronidase, ⁇ -glucosidase, N-acetyl- ⁇ -glucosaminidase, ⁇ -mannosidase, ⁇ -fucosidase)
  • the enzyme activity research reagent kit provided with Apizza Im can be easily measured. However, the measuring tool is not limited to this.
  • the enzyme activity promoter of the present invention has the effect on hair growth or hair growth action as long as it does not significantly adversely affect the enzyme activity promotion action of alkaline phosphatase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase possessed by Chaga hot water extract.
  • Other contributing components for example, a component having an action of promoting the activity of at least one enzyme selected from the group consisting of alkaline phosphatase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase
  • plant extracts as well, for example, solvent extracts of plantagomayor and solvent extracts of Ultica squid.
  • solvent extract of a plant may be used alone or in combination with the hot water extract of the above Chaga, or two types may be used in combination with the hot water extract of the above Chaga.
  • it is a solvent extract of plantagomayor.
  • Plantago mayor is a perennial plant belonging to the genus Plantaginaceae, which is also known as a car front grass (scientific name: Plantago lanceolata, Plantago major, etc.). Ultica squid is a perennial plant belonging to the family Urticaceae (Scientific name: Urtica thunbergiana).
  • these plants may be subjected to extraction operations as they are (raw) or crushed as they are, or a part thereof (leaves, stems, roots, flowers, etc.) After drying, it may be subjected to an extraction operation as pulverized or powdered as necessary.
  • the extraction solvent examples include water, an organic solvent, or a mixture thereof.
  • an organic solvent For example, C1-C4 lower alcohols, such as methanol, ethanol, propanol, and butanol; Lower alkyl esters, such as an ethyl acetate; Ethylene glycol, butylene glycol, propylene glycol, It can be appropriately selected from glycols such as glycerin; and other polar solvents such as ethyl ether, acetone and acetic acid. These solvents may be used alone or in combination of two or more.
  • an appropriate amount of water can be added to the above organic solvent to use as a water-containing organic solvent, and as such a water-lower alcohol mixed solvent, preferably an ethanol-containing aqueous solution of preferably about 10 to 98% by volume Can be mentioned.
  • water is more preferably used as an extraction solvent for planta mayor and Ultica squid.
  • the extraction method a generally used method can be employed, and examples thereof include various methods described in relation to the above-described Chaga hot water extraction method.
  • the obtained extract may be used as it is depending on the mode of use after removing solids by filtration or centrifugation, if necessary, or may be partially concentrated by distilling off the solvent to obtain a soft extract or reduced pressure. It can also be used as a dried extract by drying by ordinary means such as drying, freeze drying or spray drying.
  • the concentrated or dried product obtained after concentration or drying may be used after being purified by washing with an insoluble solvent, or may be used by further dissolving or suspending it in an appropriate solvent.
  • the enzyme activity promoter of the present invention may be in a liquid form or in a solid form such as a powder or a granule regardless of its form. Preferably it is liquid. Oral dosage forms (liquids, tablets, capsules, pills, powders, granules, etc.) may be used, and transdermal dosage forms (liquids, creams, ointments, gels, sprays, aerosols) Agent, foam agent (mousse agent), patch, emulsion, suspension, powder).
  • the ratio of the hot water extract of chaga contained in the enzyme activity promoter of the present invention is not particularly limited and can be appropriately selected from the range of 1 to 100% by weight in terms of solids.
  • the content of the solvent extract of plantagomayor is not particularly limited, and is appropriately selected from a range of 1 to 95% by weight in terms of solids. You can choose.
  • the mixing ratio of the Chaga hot water extract and the planta mayor solvent extract is not particularly limited, but the planta mayor solvent extract 0.1 per 10 parts by weight of the chaga hot water extract in solid conversion. Examples are up to 100 parts by weight, preferably 1 to 50 parts by weight.
  • the hair growth or hair growth agent of the present invention is characterized by comprising the above-mentioned enzyme activity promoter as an active ingredient. More specifically, the hair growth or hair growth agent of the present invention comprises, as an active ingredient, a hot water extract of Chaga having an action of promoting the activity of alkaline phosphatase or / and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase enzyme, Further, it is characterized in that it contains a solvent extract of plantagogool, preferably a water extract, as necessary.
  • the hair growth or hair growth agent of the present invention has an action of promoting a plurality of enzyme activities including alkaline phosphatase and / or naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, the enzyme activity related to the metabolism of hair root cells. It is considered that excellent hair growth or hair growth action is exhibited by promoting hair growth.
  • the enzyme activity promoter described above is usually 0.001 to 50% by weight, preferably 0.01 to 20% in terms of the weight of the dried product of the hot water extract of Chaga. It is desirable to include it in a proportion of wt%, more preferably 1 to 5 wt%.
  • the content of the hot water extract of Chaga contained in the hair growth or hair growth agent of the present invention is converted to the ratio of the dried Chaga material as a raw material, 0.01 ml of the Chaga dry matter in 1 mL of the hair growth or hair growth agent. -10,000 mg, preferably 1-1000 mg, more preferably 10-200 mg.
  • the hair growth or hair restorer of the present invention usually has a solvent extract of plantagogoyl converted to the weight of the dried product, usually 0.001 to It is desirable to include 50% by weight, preferably 0.01 to 20% by weight, more preferably 1 to 5% by weight.
  • the content of the solvent extract of the plantago mayor contained in the hair growth or hair growth agent of the present invention is converted to the ratio of the planta mayol dry product that is the raw material, the planta mayor dry product in 1 mL of the hair growth or hair growth agent Examples include 0.01 to 10,000 mg, preferably 1 to 1000 mg, more preferably 10 to 200 mg.
  • the hair growth or hair growth agent of the present invention may contain a skin peripheral vasodilator as a component other than Chaga's hot water extract and, if necessary, Plantago mayol solvent extract.
  • a skin peripheral vasodilator as a component other than Chaga's hot water extract and, if necessary, Plantago mayol solvent extract.
  • the peripheral vasodilator include carpronium chloride, benzyl nicotinate, vitamin E, vitamin E acetate, vitamin E linoleate, vitamin E nicotinate, chili tincture and the like. These may be used alone or in any combination of two or more.
  • the hair growth or hair growth agent of the present invention is not limited to the hot water extract of the above-mentioned Chaga, the solvent extract of plantago mayol as necessary, and the skin peripheral vasodilator, as well as the effects of the present invention.
  • additives commonly used in hair growth or hair growth agents such as hinokitiol, cationic surfactants, fungicides such as parabens, cooling agents such as l-menthol, hydrocarbons, waxes, fats and oils, esters, Oils such as higher fatty acids and higher alcohols, other surfactants, fragrances, pigments, antioxidants, UV protection agents, alcohols, pH adjusters, water and the like can also be blended.
  • the hair growth or hair growth agent of the present invention can be prepared as a food or drink, a pharmaceutical product, a quasi-drug, or a cosmetic (including medicinal cosmetics).
  • a pharmaceutical product e.g., a pharmaceutical product, a quasi-drug, or a cosmetic (including medicinal cosmetics).
  • a cosmetic including medicinal cosmetics.
  • Examples of the form include a transdermal dosage form and an oral dosage form.
  • the hair growth or hair growth agent of the present invention has a transdermal administration form, lotion (liquid), ointment, cream, spray, aerosol, gel, foam (mousse), patch, emulsion, suspension, powder
  • a normal external preparation scalp external preparation
  • it can be prepared in the form of hair tonic, hair lotion, scalp cream, care shampoo, hair rinse, hair treatment, etc. according to the application and usage.
  • These hair growth or hair growth agents are used by applying to the scalp once or several times a day depending on the shape and form.
  • the dosage form is not particularly limited, but usual oral such as liquids (drinks), tablets, capsules, pills, powders, granules, etc.
  • the dosage form can be taken. Specifically, it can be prepared in the form of supplements (food or drinks), oral pharmaceuticals, etc., according to the usual method according to the use and usage.
  • supplements food or drinks
  • oral pharmaceuticals etc.
  • preparation of these preparations in addition to Chaga hot water extract, if necessary, Plantagogool solvent extract, according to the common general technical knowledge of the pharmaceutical preparation field, excipients, binders, lubricants, pH adjusters, Stabilizers, preservatives, and flavoring agents can also be used. These hair growth or hair growth agents are taken by internal use once or several times a day.
  • Experimental example 1 A depilatory cream (trade name: Epirat, Kracie Holding Co., Ltd.) was applied to the back skin of ICR mouse (Closed Colony, Nippon Charles River) to a thickness of about 3 mm and wiped off after about 10 minutes to remove hair.
  • Chaga's hot water extract (Ch W), other samples (Asol, Bsol, plantago major alcohol extract (Pl A), plantago major hot water extract (Pl W), and Compared with the Chaga alcohol extract (Ch A)), it was confirmed that there was a very strong hair growth and hair growth action.
  • an equivalent mixture of Chaga and Plantagogo hot water extract (Mix (Pl W + Ch W)) which is inferior to the hair growth and hair growth effects of Chaga hot water extract (Ch W) alone, is significant. A strong hair growth / hair growth effect was observed.
  • Experimental example 2 Human scalp was sprayed with an aqueous solution of Chaga hot water extract and plantago hot water extract (each concentration of 3% by weight) 4-5 times a day on the top of the head at a rate of about 400 ⁇ l. Photos were taken 9, 11, 13, and 15 weeks after the start of the experiment, and the number of predetermined sections was measured using RS Image Express software (Roper Scientific, Martinstried, Germany).
  • Chaga alcohol extract (Ch A) was found to enhance (promote) the enzymatic activities of alkaline phosphatase, esterase, lipase, leucine allylamidase, and ⁇ -glucosidase.
  • Chaga's hot water extract (Ch W) showed a stronger activation effect (activity promoting effect).
  • Chaga alcohol extract (Ch A) has no activation effect (activity promoting effect) or Almost no activity was observed, and only the hot water extract of Chaga (Ch W) showed an activation effect (activity promoting effect) on these enzymes.
  • Chaga hot water extract Ch W
  • Chaga hot water extract and planta mayor hot water extract equivalent mixture Ch W + Pl A
  • various enzymes alkaline phosphatase, esterase, leucine allylamidase, valine allylamidase, trypsin, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, ⁇ -glucuronidase, ⁇ -mannosidase, and ⁇ -
  • Azyme Sysmex Biomelieu, Japan
  • the enzyme activity was measured using SD rat liver, pancreas, small intestine, plasma, and kidney homogenate (internal organ solution) as the enzyme solution.
  • Chaga hot water extract Ch W
  • Chaga hot water extract and planta mayor hot water extract Ch W + Pl W
  • Chaga hot water extract and plantago mayor Equal volume mixture of alcohol extract Ch W + Pl A
  • 32.5 ⁇ l each and 32.5 ⁇ l of enzyme solution 32.5 ⁇ l of enzyme solution (internal organ solution) and 32.5 ⁇ l of ultrapure water as control group (CTR) was added to the Apizza Im kit and incubated at 37 ° C for 4 hours.
  • Chaga hot water extract (Ch W) alone, alkaline phosphatase, esterase, leucine allylamidase, valine allylamidase, trypsin, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, ⁇ -glucuronidase, ⁇ -Mannosidase and ⁇ -fucosidase activities were enhanced.
  • chaga hot water extract and plantago mayor hot water extract slightly increased the activities of alkaline phosphatase, leucine allylamidase, trypsin, esterase, naphthol-AS-BI-phos Phohydrolase and ⁇ -glucuronidase were activated more strongly than Chaga's hot water extract (Ch W) alone.
  • esterase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase are slightly activated, and valine allylamidase is strongly activated It was done.
  • an enzyme solution (internal organ solution)
  • SD rat liver, pancreas, small intestine, plasma, and kidney homogenate were used as in Experimental Example 3.
  • Enzyme solution (internal organ solution) 32.5 ⁇ l and commercially available hair restorer (Reup x 5: A sol, Black Kaminomoto NEO: B sol, Scalp Premium XL: C sol, Kaloyan Aposika Sigma Plus: D sol) or Chaga 32.5 ⁇ l of each hot water extract (charga 500 ⁇ g / ml) and 32.5 ⁇ l of internal organ solution and 32.5 ⁇ l of ultrapure water were added to the control group and added to the Aquizime kit.
  • Chaga's hot water extract alone is more alkaline phosphatase, esterase, esterase lipase, lipase, leucine allylamidase, valine allylamidase, acidic than Asol, Bsol, Csol, Dsol.
  • the enzyme activities of phosphatase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase, ⁇ -galactosidase, ⁇ -glucuronidase, ⁇ -glucosidase, ⁇ -glucosidase, and ⁇ -fucosidase were strongly enhanced.
  • C sol also slightly activated alkaline phosphatase, esterase, esterase lipase, lipase, leucine allylamidase, valine allylamidase, ⁇ -glucosidase, and ⁇ -fucosidase.
  • D sol only slightly activated cystine allylamidase.
  • liver and skin homogenates were prepared.
  • TP total protein amount
  • T-Cho total cholesterol amount
  • TG neutral fat amount
  • glucose amount in plasma glucose amount in plasma
  • TP total protein amount
  • T-Cho total cholesterol amount
  • TG neutral fat amount
  • glucose amount in plasma glucose amount in plasma
  • activities of various metabolic enzymes were analyzed using plasma, liver and skin homogenates as samples.
  • the metabolic enzyme activity was analyzed using an enzyme activity research reagent “Apizza Im Kit”, and the absorbance of the reaction solution was measured using a spectrophotometer (NanoDrop 1000, Thermo Fisher Scientific, Chelmsford, MA, USA).
  • the hair follicles excised by microarray analysis are collected using trypsin-EDTA solution (SAFC Biosciences, KS, USA), washed with PBS, and then the total RNA is analyzed according to the attached protocol of Qiagen RNeasy Midi Kit (Qiagen, Hilden, Germany). Extraction was performed. Subsequently, cDNA was synthesized from a 500 ng total RNA sample using Low RNA (Agilent Technologies), and the cRNA was labeled and amplified.
  • cRNA prepared from the Chaga hot water extract administration group (Ch W group) and the Chaga alcohol extract administration group (Ch A group) was labeled with Cy5 and also prepared from the control group (CTR group) was labeled with Cy3.
  • Labeled cRNA was hybridized at 60 ° C. for 17 hours using a Human 1A v2 oligo microarray (Agilent Technologies) loaded with about 19,000 representative human genes. Analysis was performed using Feature Extraction (Agilent Technologies) and GeneSpring 7.0 (Silicon Genetics, CA, USA) software.
  • FIG. 6 shows rats (Ch A group [Chaga alcohol extract administration group], Ch W group [Chaga hot water extract administration group], CTR group [Control group] ]) Over time and the total amount of water consumed for 4 weeks. 7 and 8 show the total amount of food intake and body weight change in rats (Ch A group, Ch W group, CTR group) in 4 weeks, respectively.
  • the amount of water in the Ch ⁇ W group started to decrease from the 18th day compared with the CTR group, and the difference became larger with time (left in Fig. 6).
  • the amount of water consumed decreased significantly over 4 weeks (Fig. 6 right), while the amount of food intake increased significantly (Fig. 7).
  • a decrease in water consumption and an increase in food intake were observed as in the Ch W group, but the degree was moderate compared with those in the Ch W group.
  • the body weight of the Ch W group and the Ch ⁇ A group increased compared to the CTR group, and it was confirmed that growth was promoted by taking Chaga extract.
  • FIG. 9 shows the results of quantifying the total protein amount (TP), total cholesterol amount (T-Cho), neutral fat amount (triglyceride amount) (TG), and glucose amount in blood. From this result, it can be seen that the amount of glucose in the blood is significantly reduced in the Ch W group compared to the CTR group and the Ch A group. In addition, it was confirmed that the total cholesterol level (T-Cho) decreased in the Ch W group compared to the CTR group, and the triglyceride level (TG) did not increase unlike the Ch A group.
  • alkaline phosphatase and acid phosphatase were observed to increase in energy metabolism enzymes in the Ch W group by 1.07 times and 1.42 times in the Ch W group.
  • esterase is 1.83 times in fat metabolism; 1.19 times in cystine aminopeptidase in protein metabolism; ⁇ -glucuronidase, ⁇ -glucosidase, ⁇ -glucosidase, and ⁇ -glucosaminidase in sugar metabolism are 1.19, 1.6, 1.31, and 1.96, respectively.
  • Double the activity was observed in the Ch W group compared to the Ch A group.
  • alkaline phosphatase, acid phosphatase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase were compared in the Ch ⁇ ⁇ ⁇ ⁇ W group compared to the Ch A group for the energy metabolic enzymes. 1.43 times, 1.8 times and 1.35 times increased activity were observed.
  • esterase, esterase lipase and lipase are 1.97 times, 1.52 times and 4.06 times in fat metabolism system; valine allylamidase and chymotrypsin are 2.35 times and 1.22 times in protein metabolism system respectively; ⁇ -galactosidase and ⁇ -glucuronidase in sugar metabolism system , ⁇ -glucosidase, ⁇ -glucosidase, and ⁇ -fucosidase were 1.84 times, 1.73 times, 1.57 times, 2.13 times, and 1.82 times as high as those in the Ch W group, respectively.
  • alkaline phosphatase and naphthol-AS-BI-phosphohydrolase are 1.78 times higher in the Ch W group than in the Ch A group, respectively.
  • a 3.03-fold increase in activity was observed.
  • leucine allylamidase and cystine allylamidase are 2.8 times and 1.43 times, respectively, in protein metabolism systems;
  • ⁇ -galactosidase, ⁇ -mannosidase, ⁇ -glucosaminidase, and ⁇ -glucuronidase are 1.12 times, 1.74 times, and 1.4 times, respectively, in sugar metabolism systems.
  • 2.79 times higher activity was observed in the Ch W group compared to the Ch A group.
  • the genes that were strongly expressed in the Ch ⁇ ⁇ ⁇ group were Pip, a prolactin-related gene, Prp, Prl17b1, and Prl8a7, which showed 540.08, 55.84, 29.40, and 3.08 times that of the Ch A group, respectively.
  • Gh1 and Ghsr which are growth hormone-related genes, were strongly expressed in the Ch W group, which showed 190.20 times and 3.22 times that of the Ch A group, respectively. Growth hormone is thought to act through the expression of insulin-like growth factor-1 and IGF binding protein genes.
  • Igfbp5 and Insl6 are strongly expressed in the Ch ⁇ W group, 3.31 times and 3.24 times that in the Ch A group, respectively, suggesting that these genes work to promote hair growth. It was also confirmed that many keratin-related genes (Krt18, Krt24, LOC683212, Kb15, Krt1-5, Krtap14l, Krtap13-2) were strongly expressed. In addition, hairy enhancers Hey2 and Hes3 were strongly expressed in the Ch ⁇ W group, 22.95 times and 4.98 times of the Ch ⁇ A group, respectively.
  • cadherin-related genes such as Cd86, Pcdh11x, Pcdh17, and Cd75 was increased in the Ch W group by 22.49-fold, 15.97-fold, 7.34-fold, and 4.73-fold, respectively.
  • the next most strongly expressed genes were Fgf4 and Fgf12, and the expression was increased 18.21 times and 3.45 times that of the Ch A group, and the Ch W group, respectively.
  • Co19a1 and C016a1 are 13.45 times and 6.47 times that of Ch A group, respectively, and expression is increased in Ch W group, contributing to hair growth promotion by stabilizing the connective tissue of hair follicle cells. it is conceivable that.
  • Card6 and Casp8 have increased expression in Ch W group by 5.37 times and 5.03 times, respectively, and are considered to induce apoptosis and promote hair growth.
  • Abpa, Magree, Irf2, LOC689378, Lepr, LOC691984, Itgb3, and Eltd1 are also expressed more in the Ch W group than in the Ch A group, and show a hair growth promoting effect by different mechanisms. It seems to be.
  • Mucin 5AC oligomeric mucus / gel-forming
  • Keratin associated protein 31-1 a gene part from Muc76ac to Muc5ac
  • Krtap-31-1 a gene part from Krtap31-71 to Krtap31-2. It is known that mucin is mucus in hair follicles, but if overexpressed, hair follicle mucin deposition occurs and alopecia occurs.
  • K31 of keratin is keratin that appears in mature hair follicles that have stopped growing, and is known to suppress hair growth (Ramot Y, et al., FASEB J. 2010 Jun; 24 (6): 1768-79. Doi: 10.1096 / fj.09-146415. Epub 2010 Jan 26). For this reason, it is considered that a strong hair growth promoting effect cannot be expected by drinking Chaga alcohol extract.
  • Chaga hot water extract enhances appetite and suppresses thirst.
  • Chaga hot water extract has a function of lowering blood glucose level (blood glucose level) and total cholesterol level, so that it can prevent or suppress diabetes and arteriosclerosis. It is thought that it contributes effectively.
  • the Chaga alcohol extract was found to specifically increase the amount of neutral fat in the blood, unlike the Chaga hot water extract.
  • the Chaga alcohol extract reduces the total cholesterol content, and thus has an effect of preventing arteriosclerosis due to cholesterol reduction, but rather increases neutral fat.
  • Chaga alcohol extract has the effect
  • the activity of 13 types of metabolic enzymes in the skin is controlled by oral administration of Chaga hot water extract, so that the control group (CTR group) and the Chaga alcohol extract administration group (Ch A group) It was confirmed that it rises more strongly than that.
  • CTR group control group
  • Ch A group Chaga alcohol extract administration group
  • alkaline phosphatase, acid phosphatase, and naphthol-AS-BI-phosphohydrase which seem to be related to hair growth, showed a strong increase in activity.
  • the increase in alkaline phosphatase activity suggests that the hair growth effect may be promoted by enhancing bone tissue and kidney function.
  • esterase, esterase lipase, and lipase which are lipid metabolizing enzymes that help hair growth, were all strongly increased by oral administration of Chaga hot water extract.
  • activity of eight kinds of blood metabolic enzymes was increased more strongly than the CTR group and Ch A group by oral administration of Chaga hot water extract.
  • alkaline phosphatase, acid phosphatase, esterase, and cystine aminopeptidase show a strong increase in activity, and are likely to work to promote hair growth.
  • the activity of eight liver metabolic enzymes was increased more strongly than the CTR group and Ch A group by oral administration of Chaga hot water extract.
  • alkaline phosphatase naphthol-AS-BI-phosphohydrase, and leucine allylamidase showed a strong increase in activity, and it is highly possible that they are effective in promoting hair in hair follicles.
  • Igf1 insulin-like growth factor-1
  • Igfbp5 and Insl6 are strongly expressed, and thus promote hair growth.
  • many keratin-related genes (Krt18, Krt24, LOC683212, Kb15, Krt1-5, Krtap14l, Krtap13-2, etc.) were strongly expressed. Keratin is a major component of hair, and the enhanced expression of this gene is directly linked to hair growth. In addition, hair enhancers Hey2 and Hes3 were strongly expressed.
  • cadherin-related genes such as Cd86, Pcdh11x, Pcdh17, and Cd75 was increased.
  • Fgf4 and Fgf12 are the genes that appear strongly when hair follicles cultured with HEY1, BMP2, and SFRP2 initiate hair growth, and are known to exert hair growth and hair growth effects by acting on hair matrix cells (Caire A. et.al. P1-10, PNAS Early Edition (2013)). These Fgf4 and Fgf12 genes may also be related to hair growth promotion. In addition, Co19a1 and C016a1 also increased, and it seems that the connective tissue of hair follicle cells is stabilized and contributes to hair growth promotion. Card6 and Casp8 are thought to increase and promote apoptosis and promote hair growth. Abpa, Magree, Irf2, LOC689378, Lepr, LOC691984, Itgb3, Eltd1 and the like are also expressed, and it seems that hair growth is promoted by different mechanisms.
  • cRNA prepared from the cream application group with Chaga hot water extract (Ch W application group) and the cream application group with Chaga alcohol extract (Ch A application group) was labeled with Cy5, and the control group (CTR group)
  • the cRNA prepared from was labeled with Cy3.
  • the labeled cRNA was hybridized at 60 ° C. for 17 hours using a Human 1A v2 oligo microarray (Agilent Technologies) carrying about 19,000 representative human genes, and microarray analysis was performed.
  • the gene most strongly expressed in the Ch W application group was Fgf7, which was 28.31 times that of the Ch A application group. This strong enhancement of gene expression is directly linked to hair growth activity.
  • the genes strongly expressed in the Ch W application group were Igfl3 and Igfbp5, which were 22.69 times and 21.80 times in the Ch A application group, respectively.
  • Igfl3 and Igfbp5, which were strongly expressed in hair follicles, are thought to play some role similar to Igf1.
  • Mmp12, Mmp13, Mmp9, Mmp3, and Mmp7 were strongly expressed in the Ch W application group, showing 19.23, 10.83, 7.41, 4.28, and 4.22 times that of the Ch A application group, respectively.
  • Mmp matrix metalloproteins
  • the genes that were strongly expressed in the Ch W application group were S100a9, S100vp,, and S100a8, which were 9.05, 5.65, and 4.47 times the expression level of the Ch A application group, respectively.
  • S100A genes are known to be strongly expressed in hair follicles. Expression of S100A3 is limited to the growth period, and S100A4 and S100A6 are also expressed in the regression, resting, and growth periods (Kizawa K, et al., Br J Dermatol. 2005 Feb; 152 (2): 314 -20) The regulation mechanism in the hair follicle has not been clarified yet.
  • S100a9, S100vp, and S100a8 detected in this study are also considered to be involved in some regulation in hair follicles.
  • cadherin-related genes such as Cdh15, Cdh17, Cdh20,, and Cdhr1 were strongly expressed in the Ch W application group, which were 6.54, 3.94, 2.97, and 3.09 times the expression level in the Ch A application group, respectively.
  • suppression of P-cadherin expression in hair follicles decreased IGF-1 expression, which promotes the growth phase, and increased Tgfb2 expression in the regression phase.
  • Cdh15, Cdh17, Cdh20, Cdhr1, etc. are also presumed to maintain the growth phase and suppress the transition to the regression phase.
  • Gene 700 showed expression of approximately 3 times or more (2.97 times or more) of Ch A application group than that of Ch W application group
  • Table 4 shows the genes that are closely related to hair growth.
  • the gene most strongly expressed in the Ch A application group was LOC68320 (TNFa-inducing protein 3), and the superfamily Tnfrsf26 and Tnfrsf15 also expressed 6.01 times and 3.80 times as compared with the Ch W application group, respectively.
  • TNF related to these is known to have an inhibitory effect on hair growth through suppression of prolactin expression (Ewan A. et al., PLoS ONE 8 (4): e60819. Doi: 10.1371 / journal.pone. 0060819), considered to work in a suppressive manner.
  • TNFa is a typical inflammatory cytokine that induces functional inhibition such as condensation of the entire hair papilla on the hair papilla itself, decomposes the matrix by activation of metalloproteinase, secretes TGFb, and regresses (Burton MJ, et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010 Jul; 51 (7): 3583-90. Doi: 10.1167 / iovs.09-4550. Epub 2010 Mar 17 ). Therefore, these TNF-related genes are considered to work to suppress hair growth.
  • the interferon-inducing protein 44-like Ifi44l showed 30.07-fold expression compared to the Ch W application group.
  • IL17 and Il4 showed 17.36-fold and 12.08-fold expression, respectively, compared with the Ch W application group.
  • Interleukin is a factor expressed at the site of inflammation and may be the cause of hair loss (Lu D, et al., Gene. 2013 Jun 1; 521 (2): 282-6. Doi: 10.1016 / j.gene.2013.02 .048. Epub 2013 Mar 28).
  • Prl2b1 a prolactin family 2 related protein, was 9.39 times higher than the Ch W application group.
  • Prolactin is thought to be closely related to hair growth by promoting the expression of keratin K5, K14, K15, K19 and suppressing K6 and K3131 (Ramot Y, et al., FASEB J. 2010 Jun; 24 (6): 1768-79. Doi: 10.1096 / fj.09-146415. Epub 2010 Jan 26).
  • Hair growth / growth spray Prepare hair growth / growth spray by adding 0.05% by weight of paraben (paraoxybenzoate) as a preservative to an aqueous solution containing 2% by weight of hot water extract of Chaga. To do.
  • Formulation 2 Hair growth / hair growth cream 10% urea cream with 2% by weight of hot water extract of Chaga and 0.05% by weight of paraben (paraoxybenzoate) as a preservative to prepare hair growth / hair growth cream To do.
  • Formulation 3 Hair growth and hair growth shampoo POE Add lauryl ether sulfate Na, cocamidopropyl betaine (or lauramide propyl betaine), cocamide DEA (or cocamide MEA) 2% by weight of hot water extract of Chaga Prepare hair growth and hair growth shampoo.
  • a hair growth / hair growth tonic is prepared by adding 2% by weight of hot water extract of Chaga to nicotinamide as a hair growth / hair growth tonic blood circulation promoter and piroctone olamine as a bactericidal agent.
  • Formulation Example 5 As a hair growth / hair growth capsule excipient, Chaga's hot water extract (dried product) was added to 10% by weight using lactose and mixed to make homogeneous. Fill things into capsules.
  • Formulation example 6 Hair growth / hair growth tablet
  • hot water extract of Chaga dried product
  • lactose lactose
  • Formulation example 7 Hair growth and hair-growing tea A tea bag is filled with 10 g of Chaga's hot water extract (dried product), dipped in hot water and drinks as tea.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

　チャーガの熱水抽出物を有効成分とし、必要に応じて、さらにプランタゴマヨルの溶媒抽出物を含有する、アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ酵素の活性促進剤。当該酵素の活性促進剤を有効成分とする発毛または育毛剤。

Description

アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼに対する酵素活性促進剤、並びにそれを利用した発毛または育毛剤
　本発明は植物抽出物を有効成分とするアルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼに対する酵素活性促進剤に関する。また、本発明は当該酵素またはその他複数の酵素の活性促進作用に基づいて、皮膚の代謝活性を高めることで、発毛を促す作用を有する発毛または育毛剤に関する。
　従来から、薄毛に対する治療剤として、ミノキシジル（商品名：リアップ）やフィナステリド（商品名：プロペシア）等が知られている。また、植物抽出物や生薬エキスを有効成分とする発毛または育毛剤も種々提案されている。例えば、発毛または育毛作用がある植物抽出物または生薬エキスとしては、ニンジン、タモキタケ、ヨクイニン、カシュウ、カバノアナタケ、オオバコ等の抽出エキス（特許文献１～６等参照）などが知られている。
特公平１－１３４５１号公報 特開平２－４８５１４号公報 特開２００７－２５４３４３号公報 特開２００７－５１０７５号公報 特開２００５－１２６４０３号公報 特開平９－４８７１２号公報
　本発明は、植物抽出物を有効成分とする発毛または育毛剤を提供することを目的とする。また本発明は、当該植物抽出物の発毛または育毛作用に貢献する酵素活性促進剤を提供することを目的とする。
　本発明者は、上記課題を解決するため鋭意研究を重ねていたところ、チャーガの熱水抽出物に優れた発毛ないし育毛作用があることを見出し、かかる優れた作用はチャーガの熱水抽出物に含まれる成分が複数の酵素を活性化すること、特にチャーガの熱水抽出物に特有に含まれる成分が発毛または育毛に好適に作用していると考えられるアルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼを活性化することを見出した。
　本発明は、これらの知見に基づいて完成したものであり、下記の実施形態を包含するものである。
（Ｉ）酵素活性促進剤
（I-1）．チャーガの熱水抽出物を有効成分とする、アルカリ性フォスファターゼ及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼからなる群から選択される少なくとも１種に対する酵素活性促進剤。
　（I-2）．さらにエステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ及びα－フコシダーゼからなる群から選択される少なくとも１種の酵素の活性を促進するものである、（I-1）記載の酵素活性促進剤。
　（I-3）．さらにプランタゴマヨルの溶媒抽出物を含有する、（I-1）に記載する酵素活性促進剤。
　（I-4）．プランタゴマヨルの溶媒抽出物がプランタゴマヨルの水抽出物（熱水抽出物を含む）である（I-3）に記載する酵素活性促進剤。
　（I-5）．さらにエステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、及びβ－グルクロニダーゼからなる群から選択される少なくとも１種の酵素の活性を促進するものである、（I-3）または（I-4）記載の酵素活性促進剤。
　（II）発毛または育毛剤
（II）．（I-1）～（I-5）のいずれかに記載する酵素活性促進剤を有効成分とする発毛または育毛剤。
　なお、上記（II）は、下記のように言い換えることができる。
（II-1）．チャーガの熱水抽出物を有効成分とする発毛または育毛剤。
（II-2）．さらにプランタゴマヨルの溶媒抽出物を含有する、（II-1）に記載する発毛または育毛剤。
（II-3）．プランタゴマヨルの溶媒抽出物がプランタゴマヨルの水抽出物（熱水抽出物を含む）である（II-2）に記載する発毛または育毛剤。
（II-4）．経口投与形態または経皮投与形態を有する（II-1）乃至（II-3）のいずれかに記載する発毛または育毛剤。
　（III）哺乳動物に対する発毛または育毛方法
（III）（I-1）～（I-5）のいずれかに記載する酵素活性促進剤を、哺乳動物に経口または経皮投与する工程を有する、発毛または育毛方法。
　なお、上記（III）は、下記のように言い換えることができる。
（III-1）．チャーガの熱水抽出物を発毛または育毛の有効成分として含有する組成物を哺乳動物に経口または経皮投与する工程を有する、発毛または育毛方法。
（III-2）．上記組成物が、さらにプランタゴマヨルの溶媒抽出物を含有するものである、（III-1）に記載する発毛または育毛方法。
（III-3）．プランタゴマヨルの溶媒抽出物がプランタゴマヨルの水抽出物（熱水抽出物を含む）である（III-2）に記載する発毛または育毛方法。
（III-4）．上記組成物が経口投与形態または経皮投与形態を有するものである（III-1）乃至（III-2）のいずれかに記載する発毛または育毛方法。
　（IV）発毛または育毛剤としての使用
（IV）（I-1）～（I-5）のいずれかに記載する酵素活性促進剤の、哺乳動物に対する経口または経皮投与形態を有する発毛剤または育毛剤の製造のための使用。
　なお、上記（IV）は、下記のように言い換えることができる。
（IV-1）．チャーガの熱水抽出物の、哺乳動物に対する経口または経皮投与形態を有する発毛剤または育毛剤の製造のための使用。
（IV-2）．チャーガの熱水抽出物及びプランタゴマヨルの溶媒抽出物の混合物の、哺乳動物に対する経口または経皮投与形態を有する発毛剤または育毛剤の製造のための使用。
（IV-3）．プランタゴマヨルの溶媒抽出物がプランタゴマヨルの水抽出物（熱水抽出物を含む）である（IV-2）に記載する使用。
（IV-4）．哺乳動物を発毛または育毛するために使用されるチャーガの熱水抽出物。
（IV-5）．哺乳動物を発毛または育毛するために使用されるチャーガの熱水抽出物及びプランタゴマヨルの溶媒抽出物の混合物。
（IV-6）．プランタゴマヨルの溶媒抽出物がプランタゴマヨルの水抽出物（熱水抽出物を含む）である（IV-5）に記載する混合物。
　チャーガの熱水抽出物は、アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの酵素活性を促進する作用を有する。また、当該チャーガの熱水抽出物は、好ましくは当該酵素活性促進作用に加えて、エステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、α－マンノシダーゼ、及びα－フコシダーゼからなる群から選択される少なくとも１種の酵素の活性を促進する作用を有する。当該酵素活性促進剤によれば、毛根細胞の代謝を促進し、発毛や育毛を促すことができ、発毛または育毛剤として有用である。
　本発明の酵素活性促進剤、言い換えるとチャーガの熱水抽出物を有効成分とする発毛または育毛剤によれば、これを頭皮に塗布（経皮投与）または経口的に摂取（経口投与）することで、頭髪の発毛・育毛を促すことができ、薄毛を治療ないし改善することができる。
　また、本発明の発毛または育毛剤は、経皮投与した場合でも、皮膚への刺激がなく、安全性に優れているため、長期連用による副作用がなく安心して使用することができる。さらに本発明の発毛または育毛剤は、経口投与した場合でも、食欲の低下（摂食量の低下）や体重の減少は認められず、生体に対して安全に適用できるだけでなく、血中のグルコース量や総コレステロール量を低下させる作用があるため、長期連用することで糖尿病や動脈硬化などの生活習慣病や成人病を予防若しくは改善することができるという効果をも有する。
除毛したマウス背部に、(1)「リアップ×５」（大正製薬（株）製）（A Sol）、(2)「ブラック加美乃素NEO」（（株）加美乃素本舗）（B Sol）、(3)プランタゴマヨルのアルコール抽出物（Pl A）、(4)プランタゴマヨルの熱水抽出物（Pl A）、(5)チャーガの熱水抽出物（Ch W）、(6)チャーガのアルコール抽出物（Ch A）、及び（4）と(5)の等量混合物（Mix(Plw＋Chw)）を、400μlの割合で、毎日2時間おきに一日５回スプレーして、14日経過した後に、生えてきた毛の密度をRSイメージエクスプレスソフトウェアー（Roper Scientific, Martinstried, Germany） を用いて測定した結果を示す。 ヒトの頭皮に、チャーガの熱水抽出物（Ch W）を一日４～５回、400μlの割合で塗布することを１５週間にわたり実施し、９週目、１１週目、１３週目、及び１５週目に、頭皮の一区間における毛髪の本数を測定した結果を示す。 チャーガのアルコール抽出物（Ch A）、チャーガの熱水抽出物（Ch W）が酵素活性（左から、アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、α－グルコシダーゼ）に与える影響を明らかにするために、吸光度を測定し、コントロール値（CTR）と比較した結果を示す。 チャーガの熱水抽出物（Ch W）、チャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルの熱水抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl W）、チャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルのアルコール抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl A）が酵素活性（左から、アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、トリプシン、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－グルクロニダーゼ、α－マンノシダーゼ、及びα－フコシダーゼ）に与える影響を明らかにするために、吸光度を測定し、コントロール値（CTR）と比較して、酵素活性を亢進（+）するかあるいは抑制（-）するかを示した図である。 市販の育毛剤（A sol：「リアップ×５」（大正製薬（株））、B sol：「ブラック加美乃素NEO」（（株）加美乃素本舗）、C sol：「スカルププレミアムXL」（株式会社ドウシシャ）、D sol：「カロヤンアポジカシグマプラス」（第一三共ヘルスケア株式会社））と、チャーガの熱水抽出物（ChW）（charga 500μg/ml）が酵素活性（左から、アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、酸性フォスファターゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、β－グルクロニダーゼ、α－グルコシダーゼ、β－グルコシダーゼ、及びα－フコシダーゼ）に与える影響を明らかにするために吸光度を測定し、コントロール値（CTR）と比較して、酵素活性を亢進（+）するかあるいは抑制（-）するかを示す。 実験例６の実験結果として、ラット（Ch A群［チャーガのアルコール抽出物投与群］、Ch W群[チャーガの熱水抽出物投与群]、CTR群［対照群］）の飲水量の経時的変化（左）と4週間における飲水総量（右）を示す。 実験例６の実験結果として、ラット（Ch A群、Ch W群、CTR群）の4週間における摂食総量を示す。 実験例６の実験結果として、ラット（Ch A群、Ch W群、CTR群）の4週間における体重変化を示す。 実験例６において、血中の総タンパク質量（TP）、総コレステロール量（T-Cho）、中性脂肪量（トリグリセリド量）（TG）、及びグルコース量を定量した結果を示す。 実験例６において、血液を対象とした代謝酵素活性の測定結果のうち、CTR群及びCh A群と比較して、Ch W群において有意に活性上昇が認められたものを示す。 実験例６において、皮膚を対象とした代謝酵素活性の測定結果のうち、CTR群及びCh A群と比較して、Ch W群において有意に活性上昇が認められたものを示す。 実験例６において、肝臓を対象とした代謝酵素活性の測定結果のうち、CTR群及びCh A群と比較して、Ch W群において有意に活性上昇が認められたものを示す。
（Ｉ）酵素活性促進剤
　本発明の酵素活性促進剤は、チャーガの熱水抽出物を有効成分とし、アルカリ性フォスファターゼ及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼからなる群から選択される少なくとも一種の酵素活性を促進する作用を有することを特徴とする。すなわち、本発明が対象とする酵素活性促進剤は、アルカリ性フォスファターゼの酵素活性を促進する作用、またはナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの酵素活性を促進する作用を有するものであり、アルカリ性フォスファターゼとナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの両者の酵素活性を促進する作用を有するものも含まれる。好ましくは、アルカリ性フォスファターゼとナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの両者の酵素活性を促進する作用を有するものである。
　ここでチャーガ(Charga)とは、白樺の木の幹に寄生するキノコの一種であり、ロシアやモンゴル、中国東北部などシベリアに近接した酷寒の地域に生息する。国内では、別名カバノアナタケ（樺孔茸）（学名：Fuscoporia obliqua)とも称されるタバコウロコタケ科サビアナタケ属のキノコの一種である。これらは、ほとんど同一のキノコであり、代謝酵素活性への影響もほとんど類似していた。従って、我々が発明の対象とするチャーガは、ロシア、シベリア、モンゴル、中国、日本、あるいはヨーロッパなどの原産地にはかかわらないすべてのチャーガを含むものである。
　チャーガの熱水抽出物は、チャーガを乾燥した後、そのまま若しくは粉砕して、熱水による抽出操作に供することで調製することができる。なお、チャーガの乾燥粉砕物は商業的に入手することができる。
　抽出操作において、熱水抽出は、通常、50℃以上、好ましくは70～90℃、より好ましくは75～85℃の温度に加温した水に、上記するチャーガ乾燥物を0.5時間～数十時間、好ましくは1～24時間程度、浸漬抽出を行うことで実施される。より発毛または育毛作用の高い成分を効率よく抽出するためには、チャーガの乾燥物に対して、２～１０倍、好ましくは３～５倍の重量の熱水を用いて抽出操作を行うことが好ましい。
　かくしてアルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼを活性化する成分（活性成分）を選択的に抽出することができる。なお、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの活性成分は、熱水に代えてアルコール（含水アルコールを含む）を用いた抽出方法では得ることができないか、若しくは殆ど得られない、熱水抽出によって特有に得られる成分である（実験例３の図３参照）。またアルカリ性フォスファターゼの活性成分も、熱水に代えてアルコール（含水アルコールを含む）を用いた抽出方法では得ることができないか（実験例６の図１０～１２参照）、若しくは得られても熱水抽出した場合よりも少なく（実験例３の図３参照）、熱水抽出により特有に得られる成分である。
　抽出方法としては、一般に用いられる方法が採用でき、例えば前述する熱水を用いて、エキス剤、エリキシル剤、浸剤・煎剤、流エキス剤及びチンキ剤等の各種生薬製剤の調製に用いられる抽出方法を広く挙げることができる。制限はされないが、例えば熱水中に上記のチャーガの乾燥物（そのまま、粗末、細切物または粉砕物）を浸漬静置する方法、加温条件下で撹拌しながら抽出する方法、水蒸気蒸留法、またはパーコレーション法等を挙げることができる。
　得られた抽出液は、必要に応じてろ過または遠心分離によって固形物を除去した後、使用の態様に応じて、そのまま用いるか、または溶媒を留去して一部濃縮して軟エキスとして、または減圧乾燥、凍結乾燥若しくは噴霧乾燥等の通常の手段により乾燥して、エキス乾燥物として使用することもできる。また濃縮ないしは乾燥後、得られる濃縮物ないしは乾燥物は、非溶解性溶媒で洗浄して精製して用いても、またこれを更に適当な溶剤に溶解もしくは懸濁して用いることもできる。
　上記の方法により取得されるチャーガの熱水抽出物は、アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの酵素活性を促進する作用を有する。さらに、上記の方法により取得されるチャーガの熱水抽出物は、上記酵素以外に、少なくともロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ、β－グルクロニダーゼ、及びα－フコシダーゼ活性を促進する。このことから、チャーガの熱水抽出物はアルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの酵素活性促進剤として、またアルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼに加えて、少なくともロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ、β－グルクロニダーゼ、及びα－フコシダーゼからなる群から選択される少なくとも１種の酵素の活性促進剤として有用である。
　なお、これらの酵素活性は、上記酵素を含む合計１９種類（アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、α－キモトリプシン、酸性フォスファターゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、α－ガラクトシダーゼ、β－ガラクトシダーゼ、β－グルクロニダーゼ、α－グルコシダーゼ、Ｎ－アセチル－β－グルコサミニダーゼ、α－マンノシダーゼ、α－フコシダーゼ）の酵素の活性を試験するためのマイクロウエルを備えた酵素活性研究試薬キットであるアピザイム（シスメックス・ビオメリュー株式会社）を用いて簡便に測定することができる。但し、測定用具はこれに制限されるものではない。
　本発明の酵素活性促進剤は、チャーガ熱水抽出物が有するアルカリ性フォスファターゼ及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼの酵素活性促進作用に著しく悪影響を及ぼさないことを限度として、発毛または育毛作用に貢献する他の成分、例えばアルカリ性フォスファターゼ及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼからなる群から選択される少なくとも１つの酵素の活性を促進する作用を有する成分）を含有することもできる。かかる成分としては、同様に植物抽出物を挙げることができ、例えば、プランタゴマヨルの溶媒抽出物、及びウルチカディオイカの溶媒抽出物を挙げることができる。かかる植物の溶媒抽出物は、一種単独で上記チャーガの熱水抽出物と併用してもよいし、また２種を組み合わせて上記チャーガの熱水抽出物と併用してもよい。好ましくはプランタゴマヨルの溶媒抽出物である。
　プランタゴマヨルは、オオバコ科(Plantaginaceae)オオバコ属に属する多年草植物で、別名を車前草ともいう(学名：Plantago lanceolata,Plantago majorほか)。またウルチカディオイカはイラクサ科（Urtica）イラクサ属（Urticaceae）に属する多年草植物である（学名：Urtica thunbergiana）。
　これらの植物は、その抽出物を調製するにあたり、全草またはその一部（葉、茎、根、花など）を、そのまま（生）若しくは破砕物として抽出操作に付してもいいし、また乾燥後、必要に応じて粉砕若しくは粉体状として抽出操作に付してもよい。
　抽出溶媒としては、例えば、水、有機溶媒またはこれらの混合物を挙げることができる。有機溶媒としては特に制限されるものではないが、例えばメタノール，エタノール，プロパノール及びブタノール等の炭素数１～４の低級アルコール；酢酸エチルエステル等の低級アルキルエステル；エチレングリコール、ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなどのグリコール類；その他エチルエーテル、アセトン、酢酸等の極性溶媒のなかから適宜選択することができる。これらの溶媒は、単独で用いてもよく、二種以上を組み合わせて使用することもできる。例えば必要に応じて上記有機溶媒に適量の水を加えて含水有機溶媒として用いることもでき、かかるものとしては好適に水と低級アルコールの混合溶媒、好ましくは１０～９８容量％程度のエタノール含有水溶液を挙げることができる。
　本発明において、プランタゴマヨル及びウルチカディオイカの抽出溶媒として、より好ましくは水である。
　抽出方法としては、一般に用いられる方法が採用でき、例えば、前述するチャーガの熱水抽出法に関して説明した各種の方法を挙げることができる。
　得られた抽出液は、必要に応じてろ過または遠心分離によって固形物を除去した後、使用の態様により、そのまま用いるか、または溶媒を留去して一部濃縮して軟エキスとして、または減圧乾燥、凍結乾燥若しくは噴霧乾燥等の通常の手段により乾燥して、エキス乾燥物として使用することもできる。また濃縮ないしは乾燥後、得られる濃縮物ないし乾燥物は、非溶解性溶媒で洗浄して精製して用いても、またこれを更に適当な溶剤に溶解もしくは懸濁して用いることもできる。
　本発明の酵素活性促進剤は、その形態を問わず、液状であっても、また粉末または顆粒状等の固形状を有するものであってもよい。好ましくは液状である。また経口投与形態（液剤、錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤など）を有していても良いし、経皮投与形態（液剤、クリーム剤、軟膏剤、ジェル剤、スプレー剤、エアゾール剤、フォーム剤（ムース剤）、貼付剤、乳液、懸濁液、パウダー）を有していてもよい。
　本発明の酵素活性促進剤に含まれるチャーガの熱水抽出物の割合としては、特に制限されず固形換算で１～１００重量％の範囲から適宜選択することができる。また、本発明の酵素活性促進剤がプランタゴマヨルの溶媒抽出物を含む場合、当該プランタゴマヨルの溶媒抽出物の含有割合としては、特に制限されず、固形換算で１～９５重量％の範囲から適宜選択することができる。この場合、チャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルの溶媒抽出物の配合比は、特に制限されないが、固形換算でチャーガの熱水抽出物１０重量部に対してプランタゴマヨルの溶媒抽出物０．１～１００重量部、好ましくは１～５０重量部を例示することができる。
　（II）発毛または育毛剤
　本発明の発毛または育毛剤は、前述する酵素活性促進剤を有効成分とすることを特徴とする。より具体的には、本発明の発毛または育毛剤は、アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ酵素の活性を促進する作用を有するチャーガの熱水抽出物を有効成分とし、また必要に応じてプランタゴマヨルの溶媒抽出物、好ましくは水抽出物を含むことを特徴とする。
　本発明の発毛または育毛剤は、アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼを始めとする複数の酵素活性を促進する作用を有することから、毛根細胞の代謝に関連した酵素活性を促進することにより優れた発毛または育毛作用を発揮するものと考えられる。
　本発明の発毛または育毛剤は、前述する酵素活性促進剤を、チャーガの熱水抽出物の乾燥物の重量に換算して、通常０．００１～５０重量％、好ましくは０．０１～２０重量％、より好ましくは１～５重量％の割合で含むことが望ましい。なお、本発明の発毛または育毛剤に含まれるチャーガの熱水抽出物の含有量を、原料であるチャーガ乾燥物の割合に換算すると、発毛または育毛剤１ｍＬ中、チャーガ乾燥物０．０１～１００００ｍｇ、好ましくは１～１０００ｍｇ、より好ましくは１０～２００ｍｇを挙げることができる。
　前述する酵素活性促進剤がプランタゴマヨルの溶媒抽出物を含む場合、本発明の発毛または育毛剤は、プランタゴマヨルの溶媒抽出物を、その乾燥物の重量に換算して、通常０．００１～５０重量％、好ましくは０．０１～２０重量％、より好ましくは１～５重量％の割合で含むことが望ましい。この場合、本発明の発毛または育毛剤に含まれるプランタゴマヨルの溶媒抽出物の含有量を、原料であるプランタゴマヨル乾燥物の割合に換算すると、発毛または育毛剤１ｍＬ中、プランタゴマヨル乾燥物０．０１～１００００ｍｇ、好ましくは１～１０００ｍｇ、より好ましくは１０～２００ｍｇを挙げることができる。
　また、本発明の発毛または育毛剤は、チャーガの熱水抽出物、必要に応じてプランタゴマヨル溶媒抽出物以外の成分として、皮膚末梢血管拡張剤を含有していてもよく、このような皮膚末梢血管拡張剤としては、例えば塩化カルプロニウム、ニコチン酸ベンジル、ビタミンＥ、ビタミンＥアセテート、ビタミンＥリノレート、ビタミンＥニコチネート、トウガラシチンキ等が挙げられる。これらは一種単独で使用してもよいし、また二種以上を任意に組合せて使用することもできる。
　また、本発明の発毛または育毛剤には、前記のチャーガの熱水抽出物、必要に応じてプランタゴマヨルの溶媒抽出物、皮膚末梢血管拡張剤のほか、本発明の効果を妨げないことを限度に、通常発毛または育毛剤に用いられる添加剤、例えばヒノキチオール、カチオン界面活性剤、パラベン等の殺菌剤、ｌ－メントール等の清涼剤、炭化水素類、ロウ類、油脂類、エステル類、高級脂肪酸、高級アルコール等の油分、その他界面活性剤、香料、色素、抗酸化剤、紫外線防御剤、アルコール類、ｐＨ調整剤、および水などを配合することもできる。
　本発明の発毛または育毛剤は、飲食品、医薬品、医薬部外品、または化粧料（薬用化粧料を含む）として調製することができる。その形態としては、経皮投与形態、及び経口投与形態を挙げることができる。
　本発明の発毛または育毛剤が経皮投与形態を有する場合、ローション（液状）、軟膏、クリーム、スプレー、エアゾール、ジェル剤、フォーム剤（ムース剤）、貼付剤、乳液、懸濁液、パウダーなど、通常の外用剤（頭皮用外用剤）の形状を採ることができる。具体的には、用途や用法に従って、ヘアトニック、ヘアローション、頭皮クリーム、ケアシャンプー、ヘアリンス、ヘアトリートメントなどの形態に調製することができる。これらの発毛または育毛剤は、一日一回または複数回、形状や形態に応じて、頭皮に適用して用いられる。
　本発明の発毛または育毛剤が経口投与形態を有する場合、その剤型は特に制限されないものの、例えば液剤（ドリンク剤）、錠剤、カプセル剤、丸剤、散剤、及び顆粒剤などの通常の経口投与剤の形状を採ることができる。具体的には、用途や用法に従って、定法に従って、サプリメント（飲食品）や経口医薬品などの形態に調製することができる。これらの製剤の調製に際して、チャーガの熱水抽出物、必要に応じてプランタゴマヨルの溶媒抽出物以外に、医薬製剤分野の技術常識に従って、賦形剤、結合剤、滑沢剤、ｐＨ調製剤、安定剤、保存剤、及び呈味剤などを用いることもできる。これらの発毛または育毛剤は、一日一回または複数回、内服により服用される。
　以下、本発明を実験例及び実施例に基づいてさらに詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例によって何ら制限されるものではない。
　製造例１　チャーガの熱水抽出物の調製
　チャーガの乾燥物250gを粉砕し三角フラスコに入れて、１lの超純水を加え、スターラーで攪拌しながら、保温器にて70～90℃の温度に加温された状態で24時間抽出を行った。チャーガはモンゴルの会社：イオンセイサムワ（Ionsei Samhwa, ウランバートル、モンゴリア）から購入した。抽出処理後、固液分離して液相（抽出液）をチャーガの熱水抽出物として後述する実験例で使用した（チャーガを乾燥物換算で250g/L含有）。
　参考製造例１　チャーガのアルコール抽出物の調製
　チャーガの乾燥物250gを粉砕し三角フラスコに入れて、エタノール濃度35％のホワイトリカー（焼酎甲類、はざま酒造、岐阜）１lを加え、スターラーで攪拌しながら、日中は４℃、夜間は室温にて2週間抽出を行った。抽出処理後、固液分離して液相（抽出液）をチャーガのアルコール抽出物として後述する実験例で使用した（チャーガを乾燥物換算で250g/L含有）。
　製造例２　プランタゴマヨルの熱水抽出物の調製
　プランタゴマヨルの乾燥物250gを粉砕し三角フラスコに入れて、１lの超純水を加え、スターラーで攪拌しながら、保温器にて70～90℃の温度に加温された状態で24時間抽出を行った。プランタゴマヨルはモンゴルの会社：イオンセイサムワ（Ionsei Samhwa, ウランバートル、モンゴリア）から購入した。抽出処理後、固液分離して液相（抽出液）をプランタゴマヨルの熱水抽出物として後述する実験例で使用した（プランタゴマヨルを乾燥物換算で250g/L含有）。
　製造例３　プランタゴマヨルのアルコール抽出物の調製
　プランタゴマヨルの乾燥物250gを粉砕し三角フラスコに入れて、１lのエタノール濃度50％のエタノール水溶液を加え、スターラーで攪拌しながら、日中は４℃、夜間は室温にて2週間抽出を行った。抽出処理後、固液分離して液相（抽出液）をプランタゴマヨルのアルコール抽出物として後述する実験例で使用した（プランタゴマヨルを乾燥物換算で250g/L含有）。
　実験例１
　脱毛クリーム（商品名：エピラット、クラシエホールディング（株））をICRマウス（クローズドコロニー、日本チャールズリバー）の背部皮膚に３mm厚程度に塗布して、約１０分後に拭き取り、毛を取り除いた。除毛したICRマウス背部に、 (1)リアップ×５（大正製薬（株）、日本）（A Sol）、(2)ブラック加美乃素NEO（（株）加美乃素本舗、日本）（B Sol）、(3)プランタゴマヨルのアルコール抽出物（Pl A）、(4)プランタゴマヨルの熱水抽出物（Pl W）、(5) チャーガのアルコール抽出物（Ch A）、(6) チャーガの熱水抽出物（Ch W）、及び（4）と(6)の等量混合物（Mix(Pl W＋Ch W)）を、毎日2時間おきに一日５回、１回あたり400μl程度塗布し、14日経過した後に、生えてきた毛の密度をRSイメージエクスプレスソフトウェアー（Roper Scientific, Martinstried, Germany） を用いて測定した。
　結果を図１に示す。
　図１に示すように、チャーガの熱水抽出物（Ch W）に、他の試料（Asol、Bsol、プランタゴマヨルアルコール抽出物（Pl A）、プランタゴマヨルの熱水抽出物（Pl W）、及びチャーガのアルコール抽出物（Ch A））と比較して、極めて強い発毛及び育毛作用があることが確認された。また、チャーガとプランタゴマヨルの熱水抽出物の等量混合液（Mix(Pl W＋Ch W)）にも、チャーガの熱水抽出物（Ch W）単独の発毛及び育毛作用には劣るものの、有意に強い発毛・育毛効果が認められた。一方、プランタゴマヨルアルコール抽出物（Pl A）、プランタゴマヨルの熱水抽出物（Pl W）、及びチャーガのアルコール抽出物（Ch A）の発毛・育毛作用は、いずれも市販の育毛剤であるAsol及び Bsolと同程度であった。
　実験例２
　ヒトの頭皮に、チャーガ熱水抽出物及びプランタゴ熱水抽出物の水溶液（各濃度３重量％）を1日４～５回、頭頂部に約400μlの割合でスプレーした。実験開始から9、11、13、15週後に写真を撮り、RSイメージエクスプレスソフトウェアー（Roper Scientific, Martinstried, Germany）を用いて、所定区画の本数を測定した。
　結果を図２に示す。図２からわかるように、チャーガ熱水抽出物とプランタゴ熱水抽出物の混合物を頭皮に適用することで、適用後９週から１５週にかけて、経時的に明らかな発毛・育毛効果が認められた。
　実験例３
　チャーガの熱水抽出物およびチャーガアルコール抽出物が、種々の酵素活性（アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、及びα－グルコシダーゼに与える影響を酵素活性研究試薬キットであるアピザイム（シスメックス・ビオメリュー株式会社、日本）を用いて測定した。アピザイムの測定は、酵素液として、SDラット（クローズドコロニー、日本チャールズリバー、東京）の肝臓、膵臓、小腸、血漿、及び腎臓のホモジネート（インターナルオルガン溶液）を用いた。具体的には、酵素液（インターナルオルガン溶液）32.5μlとチャーガの熱水抽出物（Ch W）またはチャーガのアルコール抽出液（Ch A）のそれぞれ32.5μlを、またコントロール群（CTR）には酵素液（インターナルオルガン溶液）32.5μlと超純水32.5μlをそれぞれ混合して、アピザイムキットのマイクロウエルに加えて、37℃で４時間インキュベーションした後、キットに備え付けのZYM A試薬溶液32.5μlとZYM B試薬溶液32.5μlを加えて、ナノドロップ1000分光光度計（エル・エム・エス、東京）にて吸光度[アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ (以上、551nm)；ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ(以上、497nm)；シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、α－キモトリプシン(以上、402nm)；酸性フォスファターゼ(540nm)、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ(547nm)、α－ガラクトシダーゼ(403nm)、β－ガラクトシダーゼ(551nm)、β－グルクロニダーゼ(586nm)、α－グルコシダーゼ(556nm)、Ｎ－アセチル－β－グルコサミニダーゼ(416nm)、α－マンノシダーゼ(403nm)、α－フコシダーゼ(552nm)]を測定した。
　結果を図３に示す。
　図３に示すように、チャーガのアルコール抽出物（Ch A）では、アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、α－グルコシダーゼの酵素活性を亢進（促進）する効果が認められたが、これらすべての酵素でチャーガの熱水抽出物（Ch W）の方が強い活性化効果（活性促進効果）を示した。ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼとβ－ガラクトシダーゼに関しては（特にナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ）、チャーガのアルコール抽出物（Ch A）には活性化効果（活性促進効果）は全く若しくは殆ど認められず、チャーガの熱水抽出物（Ch W）についてのみこれらの酵素に対して活性化効果（活性促進効果）が認められた。このことから、特にナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼを活性化するか、または当該酵素活性を促進する作用は、チャーガの熱水抽出物（Ch W）に特有に認められ、チャーガのアルコール抽出物（Ch A）（厳密には、含水エタノール抽出物）には認められない作用であることが判明した。
　実験例４
　チャーガの熱水抽出物（Ch W）、チャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルの熱水抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl W）、及びチャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルのアルコール抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl A）について、種々の酵素（アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、トリプシン、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－グルクロニダーゼ、α－マンノシダーゼ、及びα－フコシダーゼ）に与える効果を酵素活性研究試薬キットであるアピザイム（シスメックス・ビオメリュー株式会社、日本）を用いて測定した。酵素活性の測定は、実験例３と同様に、酵素液としてSDラットの肝臓、膵臓、小腸、血漿、及び腎臓のホモジネート（インターナルオルガン溶液）を用いて行った。
　具体的には、チャーガの熱水抽出物（Ch W）、チャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルの熱水抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl W）、またはチャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルのアルコール抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl A）各32.5μlと酵素液32.5μlとの混合液を、またコントロール群（CTR）として酵素液（インターナルオルガン溶液）32.5μlと超純水32.5μlとの混合液を、アピザイムキットに加えて、37℃で４時間インキュベーションした後、ZYM A試薬溶液32.5μlとZYM B試薬溶液32.5μlを加えて、ナノドロップ1000分光光度計（エル・エム・エス、東京）にて各吸光度[アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ (以上、551nm)；ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ(以上、497nm)、シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、α－キモトリプシン(402nm)、酸性フォスファターゼ(540nm)、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ(547nm)、α－ガラクトシダーゼ(403nm)、β－ガラクトシダーゼ(551nm)、β－グルクロニダーゼ(586nm)、α－グルコシダーゼ(556nm)、Ｎ－アセチル－β－グルコサミニダーゼ(416nm)、α－マンノシダーゼ(403nm)、α－フコシダーゼ(552)]を測定した。
　結果を図４に示す。
　図４に示すように、チャーガの熱水抽出物（Ch W）単独では、アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、トリプシン、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－グルクロニダーゼ、α－マンノシダーゼ、及びα－フコシダーゼの活性を亢進した。チャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルの熱水抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl W）では、アルカリ性フォスファターゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、トリプシンの活性を僅かに亢進し、エステラーゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－グルクロニダーゼについては、チャーガの熱水抽出物（Ch W）単独よりも強く活性化した。チャーガの熱水抽出物とプランタゴマヨルのアルコール抽出物の等量混合物（Ch W＋Pl A）では、エステラーゼ、とナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼが僅かに活性化され、バリンアリルアミダーゼが強く活性化された。
　実験例５
　市販の育毛剤（A sol：リアップ×５（大正製薬（株））、B sol：ブラック加美乃素NEO（（株）加美乃素本舗）、C sol：スカルププレミアムXL（（株）ドウシシャ）、D sol：「カロヤンアポジカシグマプラス」（第一三共ヘルスケア（株）））と、チャーガの熱水抽出物（charga 500μg/ml）について、各種の酵素（アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、酸性フォスファターゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、α－ガラクトシダーゼ、β－ガラクトシダーゼ、β－グルクロニダーゼ、α－グルコシダーゼ、β－グルコシダーゼ、及びα－フコシダーゼ）の活性に与える影響を明らかにするために、酵素活性研究試薬キットであるアピザイム（シスメックス・ビオメリュー株式会社、日本）を用いて吸光度[アルカリフォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ (以上、551nm)；ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ(以上、497nm)；シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、α－キモトリプシン(以上、402nm)；酸性フォスファターゼ(540nm)、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ(547nm)、α－ガラクトシダーゼ(403nm)、β－ガラクトシダーゼ(551nm)、β－グルクロニダーゼ(586nm)、α－グルコシダーゼ(556nm)、Ｎ－アセチル－β－グルコサミニダーゼ(416nm)、α－マンノシダーゼ(403nm)、α－フコシダーゼ(552nm)]を測定した。酵素液（インターナルオルガン溶液）として、実験例３と同様に、SDラットの肝臓、膵臓、小腸、血漿、及び腎臓のホモジネートを使用した。酵素液（インターナルオルガン溶液）32.5μlと、市販の育毛剤（リアップ×５：A sol, ブラック加美乃素NEO：B sol, スカルププレミアムXL：C sol, カロヤンアポジカシグマプラス：D sol）またはチャーガの熱水抽出物（charga 500μg/ml）をそれぞれ32.5μlとを混合し、またコントロール群にはインターナルオルガン溶液32.5μlと超純水32.5μlとを混合して、アピザイムキットに加えて、37℃で４時間インキュベーションした後、ZYM A試薬溶液32.5μlとZYM B試薬溶液32.5μlを加えて、ナノドロップ1000分光光度計（エル・エム・エス、東京）にて吸光度[アルカリフォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ (551nm)、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ(497nm)、シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、α－キモトリプシン(402nm)、酸性フォスファターゼ(540nm)、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ(547nm)、α－ガラクトシダーゼ(403nm)、β－ガラクトシダーゼ(551nm)、β－グルクロニダーゼ(586nm)、α－グルコシダーゼ(556nm)、Ｎ－アセチル－β－グルコサミニダーゼ(416nm)、α－マンノシダーゼ(403nm)、α－フコシダーゼ(552nm)]を測定した。
　結果を図５に示す。
　図５に示すように、チャーガの熱水抽出物（ChW）単独は、Asol, Bsol, Csol, Dsolと比較して、アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、酸性フォスファターゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼ、β－ガラクトシダーゼ、β－グルクロニダーゼ、α－グルコシダーゼ、β－グルコシダーゼ、及びα－フコシダーゼの酵素活性を強力に亢進した。A solでは僅かに、アルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、α－ガラクトシダーゼ、β－グルコシダーゼを活性化した。B solでも、僅かにアルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、酸性フォスファターゼを活性化した。C solでも、僅かにアルカリ性フォスファターゼ、エステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、リパーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、β－グルコシダーゼ、及びα－フコシダーゼを活性化した。D solは、僅かにシスチンアリルアミダーゼのみを活性化した。
　実験例６
[実験方法]
　SPFラット（SD系統）に、チャーガのアルコール抽出液(チャーガを乾燥物換算に250μg/ml含有。最終アルコール濃度0.22%)、またはチャーガの熱水抽出液(チャーガを乾燥物換算で250μg/ml含有)をそれぞれ飲料水として飲ませ、4週間後に髭と背部の毛を剃毛した（Ch A群は２匹、Ch W群は５匹使用）。対照群（CTR群、n=3）として水を飲ませたラットについても、4週間後に同様に剃毛した。ラット飼育中に、食餌量、飲水量、体重をおよそ5日ごとに計測した。また、剃毛後8日目に屠殺し、ヘパリンを含むシリンジに血液を採取し、肝臓、皮膚、及び毛包を摘出した。次いで、摘出した肝臓及び皮膚をそれぞれPBSにてホモジナイズし、肝臓及び皮膚のホモジネートを調製した。
　血液を被験試料として、血漿中の総タンパク質量（TP）、総コレステロール量（T-Cho）、中性脂肪量（トリグリセリド量）（TG）、及びグルコース量を定法に従って定量した。また、血漿、肝臓及び皮膚のホモジネートをそれぞれ試料として、各種の代謝酵素の活性を解析した。なお、代謝酵素活性の解析は、実験例３等と同様に、酵素活性研究試薬である「アピザイムキット」を使用し、反応液の吸光度をスペクトロフォトメーター（NanoDrop 1000, Thermo Fisher Scientific, Chelmsford, MA, USA）にて測定した。
　さらに、髭と背部から摘出した毛包における遺伝子の発現変化を、下記のマイクロアレイ解析により求めた。
　マイクロアレイ解析
　摘出した毛包を、trypsin-EDTA溶液（SAFC Biosciences, KS, USA）を用いて回収し、PBSにて洗浄後、Qiagen RNeasy Midi Kit (Qiagen, Hilden, Germany) の添付プロトコールに従って全RNAの抽出を行った。続いて、Low RNA(Agilent Technologies) を用いて500ng全RNAサンプルからcDNAを合成し、cRNAをラベル化し増幅を行った。具体的には、チャーガ熱水抽出物投与群（Ch W群）及びチャーガアルコール抽出物投与群（Ch A群）から調製したcRNAをCy5でラベル化し、また対照群（CTR群）から調製したcRNAをCy3でラベル化した。約19,000個の代表的ヒト遺伝子を搭載したHuman 1A v2 oligo microarray (Agilent Technologies)を用いてラベル化cRNAを、60℃で17時間ハイブリダイゼーションを行った。解析はFeature Extraction (Agilent Technologies)およびGeneSpring7.0(Silicon Genetics, CA, USA)ソフトウェアーを用いて行った。
　[実験結果]
（１）ラット飲水量、摂食量、及び体重変化
　図６にラット（Ch A群［チャーガのアルコール抽出物投与群］、Ch W群［チャーガの熱水抽出物投与群］、CTR群［対照群］）の飲水量の経時的変化と4週間における飲水総量を示す。また図７及び８にラット（Ch A群、Ch W群、CTR群）の4週間における摂食総量及び体重変化をそれぞれ示す。
　これからわかるように、Ch W群はCTR群と比較して、18日目ぐらいから飲水量が減少し始め、その差は時間とともに大きくなった（図６左）。また、4週間を通して飲水量は有意に減少し（図６右）、逆に摂食量は有意に増加した（図７）。Ch A群についても、Ch W群と同様に飲水量の減少及び摂食量の増大が認められたが、その程度は、Ch W群のそれらと比較して緩やかであった。また摂食量の増大に伴い、Ch W群及びCh A群の体重は、CTR群と比較して増加しており、これからチャーガ抽出物の服用により成長が促進されることが認められた。
　（２）血液解析（総タンパク質量、総コレステロール量、中性脂肪量（トリグリセリド量）、及びグルコース量）
　血中の総タンパク質量（TP）、総コレステロール量（T-Cho）、中性脂肪量（トリグリセリド量）（TG）、及びグルコース量を定量した結果を図９に示す。この結果から、Ch W群は、CTR群及びCh A群と比較して、血中のグルコース量が顕著に減少することがわかる。またCh W群は、CTR群と比較して総コレステロール量（T-Cho）が低下し、またCh A群とは異なり中性脂肪量（TG）が上昇しないことが確認された。
　一方、Ch A群は、Ch W群と同様に、CTR群と比較して総コレステロール量（T-Cho）は低下するものの、中性脂肪量（TG）は逆に増加することが確認された。
　（３）代謝酵素活性解析（血液、肝臓、皮膚）
　血液、皮膚及び肝臓を対象とした代謝酵素活性の測定結果から、CTR群及びCh A群と比較して、Ch W群において有意に活性上昇が認められた代謝酵素の結果を、図１０（血液）、図１１（皮膚）、及び図１２（肝臓）にそれぞれ示す。
　図１０に示すように、血液の代謝酵素のうち、エネルギー代謝系酵素についてはアルカリ性フォスファターゼと酸性フォスファターゼが、Ch W群において、Ch A群の1.07倍及び1.42倍の活性上昇が認められた。同様に、脂肪代謝系ではエステラーゼが1.83倍；タンパク質代謝系ではシスチンアミノペプチダーゼが1.19倍；糖代謝系ではβグルクロニダーゼ、αグルコシダーゼ、βグルコシダーゼ及びβグルコサミニダーゼがそれぞれ1.19倍、1.6倍、1.31倍及び1.96倍もの高い活性が、Ch A群と比較してCh W群において認められた。
　また図１１に示すように、皮膚の代謝酵素のうち、エネルギー代謝系酵素についてはアルカリ性フォスファターゼ、酸性フォスファターゼ及びナフトール－AS-BI-フォスフォヒドロラーゼが、Ch W群においてCh A群と比較してそれぞれ1.43倍、1.8倍及び1.35倍の活性上昇が認められた。同様に、脂肪代謝系ではエステラーゼ、エステラーゼリパーゼ及びリパーゼがそれぞれ1.97倍、1.52倍及び4.06倍；タンパク質代謝系ではバリンアリルアミダーゼ及びキモトリプシンがそれぞれ2.35倍及び1.22倍；糖代謝系ではβガラクトシダーゼ、βグルクロニダーゼ、αグルコシダーゼ、βグルコシダーゼ、及びαフコシダーゼがそれぞれ1.84倍、1.73倍、1.57倍、2.13倍及び1.82倍もの高い活性が、Ch A群と比較してCh W群において認められた。
　さらに図１２に示すように、肝臓の代謝酵素のうち、エネルギー代謝系酵素についてはアルカリ性フォスファターゼ及びナフトール－AS-BI-フォスフォヒドロラーゼが、Ch W群においてCh A群と比較してそれぞれ1.78倍及び3.03倍の活性上昇が認められた。同様に、タンパク質代謝系ではロイシンアリルアミダーゼ及びシスチンアリルアミダーゼがそれぞれ2.8倍及び1.43倍；糖代謝系ではαガラクトシダーゼ、αマンノシダーゼ、βグルコサミニダ－ゼ、及びβグルクロニダーゼがそれぞれ1.12倍、1.74倍、1.4倍及び2.79倍もの高い活性が、Ch A群と比較してCh W群において認められた。
　（４）マイクロアレイ解析
　チャーガアルコール抽出液とチャーガ熱水抽出液を内服することで発現した遺伝子の中で、Ch W群での発現がCh A抽出群での発現の3倍以上を示した遺伝子914個のうち、発毛に密接に関係すると考えられる遺伝子を表1に示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　Ch W群に強く発現した遺伝子はプロラクチン関連遺伝子のPipをはじめ、Prp、 Prl17b1、及びPrl8a7であり、それぞれCh A群の540.08倍、55.84倍、29.40倍、及び3.08倍を示した。次に、Ch W群に強く発現した遺伝子は成長ホルモン関連遺伝子であるGh1及びGhsrであり、それぞれCh A群の190.20倍及び3.22倍を示した。成長ホルモンはインスリン様成長因子‐1およびIGF結合タンパク質の遺伝子の発現を介して作用するものと考えられている。本研究でも、Igfbp5及びInsl6が、それぞれCh A群の3.31倍及び3.24倍と、Ch W群に強く発現することから、これらの遺伝子は発毛促進に働くものと推測される。また、多くのケラチンの関連遺伝子（Krt18, Krt24, LOC683212, Kb15, Krt1-5, Krtap14l, Krtap13-2）が強く発現していることが確認された。また、ヘアリーエンハンサー（hairy enhancer）であるHey2及びHes3は、それぞれCh A群の22.95倍及び4.98倍と、Ch W群に強く発現した。更に、本研究ではCd86、Pcdh11x、Pcdh17、及びCd75などのカドヘリン関連遺伝子が、それぞれCh A群の22.49倍、15.97倍、7.34倍、及び4.73倍、Ch W群において発現が上昇していた。次に強く発現した遺伝子はFgf4及びFgf12であり、それぞれCh A群の18.21倍及び3.45倍、Ch W群において発現が上昇していた。また、Co19a1及びC016a1は、それぞれCh A群の13.45倍及び6.47倍、Ch W群において発現が上昇しており、毛包細胞の結合組織を安定なものにして、発毛促進に寄与していると考えられる。Card6及びCasp8は、それぞれCh A群の5.37倍及び5.03倍、Ch W群において発現が上昇しており、アポトーシスを誘導して発毛の成長を促進するものと考えられる。これら以外の、Abpa、 Magree、 Irf2、 LOC689378、 Lepr、LOC691984、 Itgb3、及び Eltd1などもCh A群よりもCh W群において発現が上昇しており、それぞれ異なった機構で発毛の促進効果を示すものと思われる。
　次は、逆にチャーガアルコール抽出液とチャーガ熱水抽出液を内服した時に発現した遺伝子の中で、Ch A群での発現がCh W群での発現の3倍以上を示した遺伝子533個のうち発毛に密接に関係すると考えられる遺伝子を表２に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　Ch A群での発現がCh W群での発現の3倍以上を示した遺伝子の群の中で、発毛に関係する遺伝子の発現はほとんど認められなかった。発現が検出された遺伝子は、Mucin 5AC, oligomeric mucus/gel-forming、及びKeratin associated protein 31-1の二つだけであった。Mucin 5ACはMuc76ac からMuc5acまでの72個の遺伝子部分、及びKrtap-31-1はKrtap31-71からKrtap31-2までの70個の遺伝子部分からなりたっていた。ムチンは毛包内の粘液であるが、過剰に発現されると毛包性ムチン沈着症になり、脱毛症が起こることが知られている。また、ケラチンのK31は増殖が停止した成熟した毛包に現れるケラチンであり、発毛を抑制することが知られている（Ramot Y, et al., FASEB J. 2010 Jun;24(6):1768-79. doi: 10.1096/fj.09-146415. Epub 2010 Jan 26）。
このため、チャーガアルコール抽出液を飲むことでは強い発毛促進効果は期待できないものとみなされる。
　[考察]
　以上示すように、チャーガ抽出物の内服による生体に対する影響は、チャーガのアルコール抽出物とチャーガの熱水抽出物とで明らかな違いが認められた。
　具体的には、上記（１）の結果から、チャーガ熱水抽出物は食欲を亢進して、のどの渇きを抑える作用があると推測できる。また、（２）に示すように、チャーガ熱水抽出物には、血中のグルコース量（血糖値）と総コレステロール量を低下させる働きがあることから、糖尿病や動脈硬化などの予防ないしは抑制に有効に寄与すると考えられる。
　一方、チャーガアルコール抽出物は、チャーガ熱水抽出物とは異なり、血中の中性脂肪量を特異的に増加させることが認められた。チャーガアルコール抽出物は、総コレステロール量を低下させることから、コレステロール低下による動脈硬化の予防効果は認められるが、中性脂肪はむしろ増加させてしまう。またチャーガアルコール抽出物は血中のグルコース量を低下する作用があるものの、その程度はチャーガ熱水抽出物と比べて低く、糖尿病の予防若しくは改善効果も弱いと考えられる。
　さらに（３）に示すように、チャーガ熱水抽出物を経口投与することで、13種類の皮膚の代謝酵素の活性が、対照群（CTR群）及びチャーガアルコール抽出物投与群（Ch A群）よりも強く上昇することが確認された。なかでも毛髪の成長に関係すると思われるアルカリ性フォスファターゼ、酸性フォスファターゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドラーゼは強い活性上昇が認められた。またアルカリフォスファターゼ活性の上昇は、骨組織や腎機能が亢進することで発毛効果が促進される可能性を示唆している。また、毛髪の成長を助ける脂質代謝酵素のエステラーゼ、エステラーゼリパーゼ、及びリパーゼはいずれも、チャーガ熱水抽出物の経口投与により活性が強く上昇された。またチャーガ熱水抽出物を経口投与することで、8種類の血液の代謝酵素の活性が、CTR群及びCh A群よりも強く上昇することが確認された。なかでもアルカリ性フォスファターゼ、酸性フォスファターゼ、エステラーゼ、シスチンアミノペプチダーゼは強い活性上昇が認められ、毛髪の成長促進に働いている可能性が高い。さらにチャーガ熱水抽出物を経口投与することで、8種類の肝臓の代謝酵素の活性が、CTR群及びCh A群よりも強く上昇することが確認された。なかでもアルカリ性フォスファターゼ、ナフトール-AS-BI-フォスフォヒドラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼは強い活性上昇が認められ、これらは毛包での毛髪促進に有効に働いている可能性が高い。
　遺伝子の発現に関しては、チャーガアルコール抽出液を内服することによって、プロラクチン関連遺伝子のPipをはじめ、Prp、Prl17b1、及びPrl8a7の発現が強くなった。プロラクチンは毛髪の成長を促進することが知られている（Ramot Y, et al., FASEB J. 2010 Jun;24(6):1768-79. doi: 10.1096/fj.09-146415. Epub 2010 Jan 26）。次に、成長ホルモン関連遺伝子である、Gh1とGhsrの発現が増強した。成長ホルモンはインスリン様成長因子‐1およびIGF結合タンパク質の遺伝子を発現させることにより毛包に作用するものと考えられる。Batch (1996)らは、インシュリン様成長因子-1（Igf1）は毛包の成長と毛周期の生理学的制御因子として重要であると指摘し(Batch J.A., et al., (1996) J. Invest. Dermatol. 106, 471-475)、Su(1999)らは毛包成長期における細胞の増殖と移動に重要な役割を果たしていることを示している(Su H.Y., et al., (1999). Insulin -like growth factor 1 and hair growth. Dermatol. Online J. 5, 1.)。
　本研究でも、Igfbp5とInsl6が強く発現することから発毛促進に働くものと推測される。また、多くのケラチンの関連遺伝子（Krt18, Krt24, LOC683212, Kb15, Krt1-5, Krtap14l, Krtap13-2など）が強く発現した。ケラチンは毛の主要成分であり、この遺伝子の発現増強は発毛に直結している。また、ヘアーエンハンサー(hair enhancer)であるHey2とHes3が強く発現した。更に、本研究ではCd86, Pcdh11x, Pcdh17, Cd75などのカドヘリン関連遺伝子の発現が上昇していた。PカドヘリンをコードしているCdh3が働かない変異では髪の毛が短くなる症状が報告されている。また、毛包内でPカドヘリンの発現を抑制すると成長期を促進するIGF-1の発現が減少し、退行期で関連するTgfb2の発現が増加したことが報告されている(Samuelov L, et al., J Invest Dermatol. 2012 Oct;132(10):2332-41. doi: 10.1038/jid.2012.171. Epub 2012 Jun 14)。本研究で検出されたCd86, Pcdh11x, Pcdh17, Cd75なども成長期を維持し、退行期への移行を抑制する方向に働くものと推測される。次に強く発現した遺伝子はFgf4とFgf12であった。Fgf7はHEY1, BMP2, SFRP2とともに培養した毛包が発毛を開始する際に強く表れる遺伝子の一つであり、毛母幹細胞に働きかけて発毛、増毛効果を示すことが知られている(Caire A. et.al. P1-10, PNAS Early Edition (2013))。これらFgf4とFgf12遺伝子も発毛促進に関連しているものと考えらえる。また、Co19a1とC016a1も増加し、毛包細胞の結合組織を安定なものにして、発毛促進に寄与しているのではないかと考えられる。Card6とCasp8は増加しアポトーシスを促進して発毛の成長を促進するものと考えられる。これら以外の、Abpa, Magree, Irf2, LOC689378, Lepr, LOC691984, Itgb3, Eltd1なども発現が増加して、それぞれ異なった機構で発毛の促進効果を示すものと思われる。
　以上のことから、チャーガ熱水抽出物とチャーガアルコール抽出物とは、明らかに成分及び作用が異なることが判明した。
　実験例７
[実験方法]
　SPFラット（SD系統）の剃髪後の背部皮膚及び切断後の髭周囲皮膚に、チャーガのアルコール抽出物(チャーガを乾燥物換算に250μg/ml含有。最終アルコール濃度0.22%)（Ch A塗布群：n=4）、またはチャーガの熱水抽出物(チャーガを乾燥物換算で250μg/ml含有)（Ch W塗布群：n=4）をそれぞれ含むクリーム(10% w/w) （ケラチナミンコーワ、20％尿素配合クリーム、コーワ、東京）を塗布して、2週間後に、背部皮膚及び髭の毛包を摘出し、遺伝子の発現変化を下記のマイクロアレイ解析により求めた。対照群（n=4）には上記クリームだけを塗布した。
　マイクロアレイ解析
　実験例６と同様に、摘出した毛包を、trypsin-EDTA溶液（SAFC Biosciences, KS, USA）を用いて回収し、PBSにて洗浄後、Qiagen RNeasy Midi Kit (Qiagen, Hilden, Germany) の添付プロトコールに従って全RNAの抽出を行った。続いて、Low RNA(Agilent Technologies) を用いて500ng全RNAサンプルからcDNAを合成し、cRNAをラベル化し増幅を行った。具体的には、チャーガ熱水抽出物入りクリーム塗布群（Ch W塗布群）及びチャーガアルコール抽出物入りクリーム塗布群（Ch A塗布群）から調製したcRNAをCy5でラベル化し、また対照群（CTR群）から調製したcRNAをCy3でラベル化した。約19,000個の代表的ヒト遺伝子を搭載したHuman 1A v2 oligo microarray (Agilent Technologies)を用いてラベル化cRNAを、60℃で17時間ハイブリダイゼーションを行い、マイクロアレイ解析を行った。
　[結果と考察]
　チャーガアルコール抽出物及びチャーガ熱水抽出物を塗布することによって、それぞれ2999個及び4042個の遺伝子の発現が対照群の2倍以上に促進された。さらに、チャーガアルコール抽出物またはチャーガ熱水抽出物の塗布によって発現した遺伝子の中で、Ch W塗布群における発現がCh A塗布群における発現のおよそ3倍以上(2.97倍以上)を示した遺伝子755個のうち発毛に密接に関係する考えられる遺伝子を表３に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
　Ch W塗布群に最も強く発現した遺伝子はFgf7で、Ch A塗布群の28.31倍であった。この遺伝子発現の強力な亢進は、発毛活性に直結している。次にCh W塗布群に強く発現した遺伝子はIgfl3及びIgfbp5であり、Ch A塗布群のそれぞれ22.69倍及び21.80倍であった。本実験にて、毛包内で強い発現が見られたIgfl3とIgfbp5もIgf1に類似した何らかの役割を果たしていると考えられる。次に、Mmp12、Mmp13、Mmp9、Mmp3、及びMmp7はCh W塗布群に強く発現し、Ch A塗布群のそれぞれ19.23、10.83、7.41、4.28、及び4.22倍を示した。毛型の表皮細胞が毛乳頭を形成するために真皮層に侵入する際、何種類ものマトリックスメタロプロテイネース(Mmp)が必要である。また、Ets-2のノックアウトマウスは、Mmp3とMmp9が皮膚で発現されず、発毛に異常をきたして縮れ毛になることが報告されている(Engsig MT, et al., J Cell Biol. 2000 Nov 13;151(4):879-89.) 。従って、発現が増強されたMmp9及びMmp 3だけでなく、Mmp12、Mmp13、及びMmp7も発毛に重要な役割を担っているものと考えられる。次に、Ch W塗布群に強く発現が認められた遺伝子はS100a9, S100vp, 及びS100a8で、それぞれCh A塗布群の発現量の9.05, 5.65,及び4.47倍であった。これらのS100A遺伝子群は毛包内での強い発現が知られている。S100A3の発現は成長期に限局し、S100A4とS100A6は退行期、休止期、成長期にも発現が認められるが(Kizawa K, et al., Br J Dermatol. 2005 Feb;152(2):314-20)、未だ毛包内での調節機構は明らかになっていない。本研究で検出されたS100a9, S100vp,及びS100a8なども何らかの毛包内での調節にかかわっているものと考えられる。更に、Cdh15, Cdh17, Cdh20, 及びCdhr1などのカドヘリン関連遺伝子がCh W塗布群に強く発現が認められ、それぞれCh A塗布群の発現量の6.54, 3.94, 2.97, 3.09倍であった。また、毛包内でPカドヘリンの発現を抑制すると成長期を促進するIGF-1の発現が減少し、退行期で関連するTgfb2の発現が増加していた。Cdh15, Cdh17, Cdh20, Cdhr1なども成長期を維持し、退行期への移行を抑制する方向に働くものと推測される。
　以上のCh W塗布群に認められた遺伝子の発現状況からも、チャーガ熱水抽出物が高い毛髪成長促進効果を発揮することが裏付けられた。
　逆にチャーガアルコール抽出物とチャーガ熱水抽出物の塗布によって発現した遺伝子の中で、Ch A塗布群の発現がCh W塗布群の発現のおよそ3倍以上(2.97倍以上)を示した遺伝子700個のうち発毛に密接に関係する考えられる遺伝子を表４に示た。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
　Ch A塗布群で最も強く発現した遺伝子はLOC68320（TNFa誘導タンパク質3）であり、スーパーファミリーのTnfrsf26及びTnfrsf15も、Ch W塗布群と比べてそれぞれ6.01倍及び3.80倍の発現を示した。これらに関連するTNFはプロラクチンの発現抑制を介して毛の成長阻害効果が知られていることから(Ewan A. et al., PLoS ONE 8(4): e60819. doi:10.1371/journal.pone.0060819)、抑制的に働くものと考えられる。なかでも、TNFa は代表的な炎症性サイトカインで、毛乳頭自身に対しては毛乳頭全体の凝縮等の機能阻害を誘発し、メタロプロテイナーゼの活性化によりマトリックスを分解し、TGFbを分泌させ、退行期、休止期を誘導するものと考えられる(Burton MJ, et al., Invest Ophthalmol Vis Sci. 2010 Jul;51(7):3583-90. doi: 10.1167/iovs.09-4550. Epub 2010 Mar 17)。従って、これらTNF関連遺伝子は毛髪の成長抑制に働くものと考えられる。次に、インターフェロン誘導タンパク質44様のIfi44lは、Ch W塗布群と比べて30.07倍の発現を示した。インターフェロンの副作用で髪が抜けることはよく知られている(Duncan FJ, et al., J Invest Dermatol. 2013 Feb;133(2):334-43. doi: 10.1038/jid.2012.344. Epub 2012 Sep 27)。また、プロスタグランジンFレセプターであるPtgfrはCh W塗布群と比べて17.81倍の発現を示した。プロスタグランジンD2は毛包の毛髪の成長をストップさせる働きを持っていて、脱毛症部位の活性が高くなっていることが報告されている(Garza LA, et al., Sci Transl Med. 2012 Mar 21;4(126):126ra34. doi: 10.1126/scitranslmed.300312)。更に、IL17及びIl4はCh W塗布群と比べてそれぞれ17.36倍及び12.08倍の発現を示した。インターロイキンは炎症部位に発現する因子で、髪の毛が抜ける原因とも考えられる(Lu D, et al., Gene. 2013 Jun 1;521(2):282-6. doi: 10.1016/j.gene.2013.02.048. Epub 2013 Mar 28)。また、プロラクチンファミィーリー2関連タンパク質のPrl2b1は、Ch W塗布群と比べて9.39倍と高い発現を示した。プロラクチンはケラチンのK5, K14, K15, K19の発現を促進して、K6とK31を抑制することで、発毛に密接に関係しているものと考えられている (Ramot Y, et al., FASEB J. 2010 Jun;24(6):1768-79. doi: 10.1096/fj.09-146415. Epub 2010 Jan 26)。
　以上の遺伝子のほとんどすべては、発毛を阻害して、抜け毛や成長停止に働く遺伝子であり、このことからチャーガアルコール抽出物は、チャーガ熱水抽出液とは逆に毛髪成長抑制に働くと考えられる。
　以上説明するように、発毛の促進に働くものと期待される多くの遺伝子が、Ch A塗布群よりもCh W塗布群において強く発現していることが明らかになった。このことは、チャーガ熱水抽出物が、チャーガアルコール抽出物よりも強い発毛・育毛効果を有していることを示すものである。
　処方例1　発毛・育毛スプレー
　チャーガの熱水抽出物２重量％を含む水溶液に保存剤としてパラベン（パラオキシ安息香酸エステル 類）０．０５重量％加えてスプレー容器に入れ発毛・育毛スプレーを調製する。
　処方例２　発毛・育毛クリーム
　１０％尿素クリームにチャーガの熱水抽出物２重量％を加え、保存剤としてパラベン（パラオキシ安息香酸エステル 類）０．０５重量％加えて発毛・育毛クリームを調製する。
　処方例３　発毛・育毛シャンプー
　POEラウリルエーテル硫酸Na、コカミドプロピルベタイン（または、ラウラミドプロピルベタイン）、コカミドDEA（または、コカミドMEA）を含むシャンプーにチャーガの熱水抽出物２重量％を加え、発毛・育毛シャンプーを調製する。
　処方例４　発毛・育毛トニック
　血行促進剤としてニコチン酸アミド、殺菌剤としてピロクトン オラミンに、チャーガの熱水抽出物２重量％を加え、発毛・育毛トニックを調製する。
　処方例５　発毛・育毛カプセル
　賦形剤として、乳糖を用いて１０重量％になるようにチャーガの熱水抽出物（乾燥物）を１０重量％になるように加え、混和して均質としたものをカプセルに充てんする。
　処方例６　発毛・育毛錠剤
賦形剤として、乳糖を用いて１０重量％になるようにチャーガの熱水抽出物（乾燥物）を１０重量％になるように加え、混和して均質としたものを打錠機にて、錠剤とする。
　処方例７　発毛・育毛茶
ティーバッグにチャーガの熱水抽出物（乾燥物）１０ｇを充てんし、熱湯に浸漬して、お茶として飲む。
 

Claims (11)

  1. 　チャーガの熱水抽出物を有効成分とする、アルカリ性フォスファターゼ及びナフトール-AS-BI-フォスフォヒドロラーゼからなる群から選択される少なくとも１種に対する酵素活性促進剤。
  2. 　さらにエステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ及びα－フコシダーゼからなる群から選択される少なくとも１種の酵素の活性を促進するものである、請求項１記載の酵素活性促進剤。
  3. 　さらにプランタゴマヨルの溶媒抽出物を含有する、請求項１に記載する酵素活性促進剤。
  4. 　プランタゴマヨルの溶媒抽出物がプランタゴマヨルの水抽出物（熱水抽出物を含む）である、請求項３に記載する酵素活性促進剤。
  5. 　さらにエステラーゼ、ロイシンアリルアミダーゼ、バリンアリルアミダーゼ、シスチンアリルアミダーゼ、トリプシン、及びβ－グルクロニダーゼからなる群から選択される少なくとも１種の酵素の活性を促進するものである、請求項３または４記載の酵素活性促進剤。
  6. 　請求項１～５のいずれかに記載する酵素活性促進剤を有効成分とする発毛または育毛剤。
  7. 　請求項１～５のいずれかに記載する酵素活性促進剤を、哺乳動物に経口または経皮投与する工程を有する、発毛または育毛方法。
  8. 　請求項１～５のいずれかに記載する酵素活性促進剤の、哺乳動物に対する経口または経皮投与形態を有する発毛剤または育毛剤の製造のための使用。
  9. 　哺乳動物を発毛または育毛するために使用されるチャーガの熱水抽出物。
  10. 　哺乳動物を発毛または育毛するために使用されるチャーガの熱水抽出物及びプランタゴマヨルの溶媒抽出物の混合物。
  11. 　プランタゴマヨルの溶媒抽出物がプランタゴマヨルの水抽出物（熱水抽出物を含む）である請求項１０に記載する混合物。
     
PCT/JP2013/082322 2012-12-03 2013-12-02 アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-as-bi-フォスフォヒドロラーゼに対する酵素活性促進剤、並びにそれを利用した発毛または育毛剤 WO2014087960A1 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2012-264767 2012-12-03
JP2012264767 2012-12-03

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2014087960A1 true WO2014087960A1 (ja) 2014-06-12

Family

ID=50883377

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2013/082322 WO2014087960A1 (ja) 2012-12-03 2013-12-02 アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-as-bi-フォスフォヒドロラーゼに対する酵素活性促進剤、並びにそれを利用した発毛または育毛剤

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2014087960A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019004479A1 (ja) * 2017-06-30 2019-01-03 株式会社スヴェンソン 毛乳頭細胞増殖促進剤、線維芽細胞増殖因子－７（ｆｇｆ－７）産生促進剤、血管内皮増殖因子（ｖｅｇｆ）産生促進剤、インシュリン様増殖因子－１（ｉｇｆ－１）産生促進剤、肝細胞増殖因子（ｈｇｆ）産生促進剤及び育毛剤

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08301730A (ja) * 1995-05-01 1996-11-19 Nonogawa Shoji Kk 育毛剤
JPH0948712A (ja) * 1995-08-04 1997-02-18 Pola Chem Ind Inc 発毛・育毛料
JPH11130692A (ja) * 1997-10-23 1999-05-18 Kazuo Sakuma カバノアナタケ抽出物を含有する注射液及びその他の薬 剤並びに健康飲食製品
JP2004191106A (ja) * 2002-12-10 2004-07-08 Ichimaru Pharcos Co Ltd 育毛剤有効成分のスクリーニング方法とその利用
JP2005126403A (ja) * 2003-10-27 2005-05-19 Akira Abe カバノアナタケエキス養毛剤
US20080166435A1 (en) * 2006-12-29 2008-07-10 Volodymyr Pylypchuk Composition and methods of use of an immunomodulator

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH08301730A (ja) * 1995-05-01 1996-11-19 Nonogawa Shoji Kk 育毛剤
JPH0948712A (ja) * 1995-08-04 1997-02-18 Pola Chem Ind Inc 発毛・育毛料
JPH11130692A (ja) * 1997-10-23 1999-05-18 Kazuo Sakuma カバノアナタケ抽出物を含有する注射液及びその他の薬 剤並びに健康飲食製品
JP2004191106A (ja) * 2002-12-10 2004-07-08 Ichimaru Pharcos Co Ltd 育毛剤有効成分のスクリーニング方法とその利用
JP2005126403A (ja) * 2003-10-27 2005-05-19 Akira Abe カバノアナタケエキス養毛剤
US20080166435A1 (en) * 2006-12-29 2008-07-10 Volodymyr Pylypchuk Composition and methods of use of an immunomodulator

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019004479A1 (ja) * 2017-06-30 2019-01-03 株式会社スヴェンソン 毛乳頭細胞増殖促進剤、線維芽細胞増殖因子－７（ｆｇｆ－７）産生促進剤、血管内皮増殖因子（ｖｅｇｆ）産生促進剤、インシュリン様増殖因子－１（ｉｇｆ－１）産生促進剤、肝細胞増殖因子（ｈｇｆ）産生促進剤及び育毛剤
JPWO2019004479A1 (ja) * 2017-06-30 2019-06-27 株式会社スヴェンソン 毛乳頭細胞増殖促進剤、線維芽細胞増殖因子−７（ｆｇｆ−７）産生促進剤、血管内皮増殖因子（ｖｅｇｆ）産生促進剤、インシュリン様増殖因子−１（ｉｇｆ−１）産生促進剤、肝細胞増殖因子（ｈｇｆ）産生促進剤及び育毛剤
CN110891577A (zh) * 2017-06-30 2020-03-17 株式会社姿美森 毛乳头细胞生长促进剂、fgf-7产生促进剂、vegf产生促进剂、igf-1产生促进剂、hgf产生促进剂及生发剂
CN110891577B (zh) * 2017-06-30 2023-11-28 株式会社姿美森 毛乳头细胞生长促进剂、fgf-7产生促进剂、vegf产生促进剂、igf-1产生促进剂、hgf产生促进剂及生发剂

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7323706B2 (ja) 発毛促進活性を有するペプチド、及びその用途
JP2024010247A (ja) 皮膚化粧料、頭髪化粧料および飲食品
US20090036385A1 (en) Hair care preparation
EP3203981B1 (fr) Activite deglycation d'une combinaison d'un extrait de salvia miltiorrhiza et de niacine et/ou de niacinamide
CN102370591A (zh) 石榴皮提取方法及其提取物的应用
JP2011201788A (ja) 抗炎症剤
KR101229927B1 (ko) 잠사 추출물 또는 누에 추출물을 이용한 피부 미백제 조성물
US10662140B2 (en) Method for skin-whitening using composition containing resveratryl triglycolate
US8455023B2 (en) Composition for inhibiting melanogenesis and use thereof
KR101733065B1 (ko) 데칸알 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 발모 촉진용 조성물
JP4681230B2 (ja) フィトスフィンゴシンのスリミング剤としての化粧的使用、及び、フィトスフィンゴシンを含む化粧組成物
US20090170788A1 (en) Novel use of 1, 2, 3, 4, 6-penta-o-galloyl-beta-d-glucose
EP3801778B1 (fr) Utilisation d'un extrait de bixa orellana
KR101810139B1 (ko) 발모 및 육모 촉진용 조성물
TW200938215A (en) Anti-glycation properties of asiatic acid and madecassic acid
WO2014087960A1 (ja) アルカリ性フォスファターゼまたは／及びナフトール-as-bi-フォスフォヒドロラーゼに対する酵素活性促進剤、並びにそれを利用した発毛または育毛剤
KR101778654B1 (ko) 다이하이드로디하이드로다이이소유게놀의 용도 및 다이하이드로디하이드로다이이소유게놀을 포함하는 제제
KR101764264B1 (ko) 진세노사이드 Rd의 함량이 증가된 발효 인삼 또는 홍삼 추출물의 제조방법 및 상기 방법에 의해 제조된 추출물을 포함하는 탈모방지 또는 발모촉진용 조성물
JP2016079154A (ja) 皮膚化粧料、頭髪化粧料および飲食品
JP7479038B2 (ja) ペプチジルアルギニンデイミナーゼ１発現促進剤
JP4540967B2 (ja) Ｎｍｆ産生促進剤
KR102013803B1 (ko) 밤송이 유래 신규 화합물을 포함하는 탈모 개선용 조성물
JP2012171909A (ja) 糖化阻害剤
JP5667774B2 (ja) メラニン産生抑制剤、グルタチオン産生促進剤、ヒアルロン酸産生促進剤、及びインボルクリン産生促進剤、並びに皮膚化粧料
JP7361412B2 (ja) 皮膚化粧料、頭髪化粧料および飲食品

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 13861396

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 13861396

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: JP