WO2014005543A1

WO2014005543A1 - 一种s-(羧甲基)-半胱氨酸药物化合物及其制备方法和用途

Info

Publication number: WO2014005543A1
Application number: PCT/CN2013/078856
Authority: WO
Inventors: 陈矛; 朱少璇; 万平; 王玮; 廖维; 胡海容; 傅祥麟; 冯金; 黄冰娥; 张琳; 钟南山; 郑劲平; 莫红缨
Original assignee: 广州白云山制药股份有限公司广州白云山制药总厂; 广州呼吸疾病研究所
Priority date: 2012-07-06
Filing date: 2013-07-05
Publication date: 2014-01-09
Also published as: US10251854B2; US20170333374A1

Abstract

一种S-(羧甲基)-半胱氨酸化合物（I）及其制备方法和用途，以及S-(羧甲基)-D-半胱氨酸铵盐一水化合物，及其在制备预防和治疗慢性阻塞性肺等呼吸系统疾病药物，特别是祛痰药物中的应用，并且能降低COPD模型大鼠气道阻力，减少氧化物的产生，增加抗氧化剂的水平，减轻氧化物、炎症介质对肺的损伤。

Description

一种 S- (羧甲基) -半胱氨酸药物化合物及其制备方法和用途

¾术领域

本发明基于申请日为 2012年 7月 6日的中国专利申请 201210234440.4及 201210234482.8，该申请的内容作为参考引入本文。

本发明属于化学制药领域，具体而言，本发明涉及一种 S- (羧甲基) -半胱氨酸药物化合物及其制备方法和用途。背景技术

羧甲司坦，化学名为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸（carbocisteine、 carboxymethylcysteine, CMC), 于 1961 年由法国 Joume公司首先开发并应用于临床，为粘痰溶解药，可影响支气管腺体的分泌，使低粘度的唾液粘蛋白的分泌增加，高粘度的岩藻粘蛋白的产生减少，且可直接作用于粘蛋白的二硫键，使粘蛋白分子裂解而降低痰液粘滞性，易于咯出；可提高粘膜纤毛清除率；降低气道高反应性。 CMC进入体内后易脱去羧甲基形成半胱氨酸，其所含的巯基能与活性氧（reactive oxygen species, ROS ) 等的亲电子基团相互作用，发挥直接抗氧化作用；此外，半胱氨酸亦是谷胱甘肽（GSH) 的前体，能再合成具有生物活性的 GSH，增加体内 GSH的浓度，起到间接抗氧化作用。 CMC口服吸收良好，起效快，服用 4小时即可见明显疗效，用于治疗慢性支气管炎、肺气肿、慢性阻塞性肺病（COPD)、支气管哮喘等疾病引起的痰液粘稠和咳痰困难。

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease, COPD )是一种气流受限为特征，且气流受限不完全可逆，呈进行性发展的的慢性呼吸系统疾病。据世界卫生组织公布， COPD在全球疾病死亡原因当中，仅次于心脏病、脑血管病和急性肺部感染，与艾滋病一起并列第四位。在全球范围内，受该病困扰的患者多达 6亿，我国每年慢阻肺患者总人数可达 2700万。目前， COPD主要是通过药物治疗改善患者症状，减少疾病的急性加重。

2006年，日本学者 Yasuda H开展随机双盲试验，结果显示 COPD患者长期大量服用 CMC( 1500mg/d, 12 个月）可降低感冒的发病频率以及减缓 COPD 急性加重（Yasuda H, Yamaya M, Sasaki T, et al. Carbocisteine reduces frequency of common colds and exacerbations in patients with chronic obstructive pulmonary disease. J Am Geriatr Soc. 2006;54(2):378-80. )„ 2007年日本学者 Tatsumi K开展多中心平行随机的试验，入选 142名 COPD患者，结果表明， CMC长期大量服用 CMC ( 1500mg/d, 12个月）对 COPD 急性发作具预防作用， St George's 问卷等研究表明还可提高患者生活质量（Tatsumi K, Fukuchi Y. Carbocisteine improves quality of life in patients with chronic obstructive pulmonary disease. J Am Geriatr Soc. 2007;55(ll): 1884-6. )„ 2008 年，钟南山等研究发现，长期大量（1500mg/d， 12 个月）服用羧甲司坦能较好预防慢阻肺的急性发作，每年每人急性发作率可减少 24.5 %。其疗效接近于国际标准的吸入皮质激素联合长效 β激动剂或长效抗胆碱能药物，并且其治疗效果不受慢阻肺严重程度以及合并用药的影响，较之国际标准的吸入治疗方法，治疗费用可减少 85 %。此研究结果表明，羧甲司坦对于慢阻肺的治疗有非常好的应用前景 (Jin-Ping Zheng, Nan- Shan Zhong,etc. Effect of carbocisteine on acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease (PEACE Study): a randomized placebo-controlled study. Lancet, 2008; 371 : 2013 - 18 )。

羧甲司坦作为一种祛痰药物，在我国的生产和使用十分普遍，但羧甲司坦的结构中存在两个羧基，呈酸性，使得该药物对消化道有刺激作用，可引起胃部不适、恶心、呕吐、肠胃道出血等不良反应。若长期服用该药易损伤胃肠粘膜，导致出血、溃疡甚至穿孔等严重副作用。药品说明书中明确注明 "消化道溃疡活动期患者禁用"。因此，寻求安全有效的羧甲司坦替代物，对于 COPD等疾病的治疗具有重大

。发明内容

本发明的目的是提供一种 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物，特别是 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶。

本发明的另一目的是提供一种 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物的制备方法，特别是 S- (羧甲基) -L- 半胱氨酸铵盐一水结晶的制备方法。

本发明的再一目的是提供包含 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物的组合物，特别是包含 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶的药物组合物。

本发明的进一目的是提供 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物，特别是 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶，在制备祛痰药物中的应用，以及在制备预防和治疗慢性阻塞性肺等呼吸系统疾病药物中的应用。

本发明的目的是通过以下具体技术方案实现的：

一种 S- (羧甲基) -半

(I)

其中：

R为药学上可接受的能与 S- (羧甲基) -半胱氨酸成盐的碱性化合物， X为 1~2的整数， y为 1~5的整本发明的通式（I) 药物化合物，其中 R可为氨或者精氨酸。

本发明的通式（I) 药物化合物，其中 R不包括赖氨酸。

本发明的化合物选 S- (羧甲基) -半胱氨酸铵盐一水化合物，其结构式如式（11)。

(II) 其左旋异构体为 S- (羧甲基) -L-半胱氨 ,酸铵盐一水化合物，其结构式如式（111)。

本发明进一步还提供了一种 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物的制备方法，该方法是以 S- (羧甲基) - 半胱氨酸溶解或悬浮于适当的溶剂体系中，优选溶剂为水；加入碱性化合物 R，充分反应使固体溶清后，往反应液中加入析晶溶剂，分离，得 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物结晶。

上述方法中提到的 "析晶溶剂"可理解为与该反应产物至多微溶的溶剂，根据该方法所属的技术领域，溶析结晶法（或溶媒结晶法）是将溶质溶解于水或其他有机溶剂中，然后向结晶体中加入某种溶剂使溶质在原溶剂中的溶解度降低，从而溶质快速析出的结晶方法。加入的溶剂被称作析晶溶剂或沉淀剂。

本发明所述使 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物结晶析出的析晶溶剂为含 C为 1~4的醇，如乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇、 2-丁醇；含 C为 3~6的酮，如丙酮、甲乙酮、戊酮；含 C为 2~4的腈类，如乙腈、丙腈；含 C为 2~6的醚类，如二恶垸、四氢呋喃；含 C为 1~5的酰胺类，如 N， N-二甲基甲酰胺、 N， N-二甲基乙酰胺；或是上述溶剂一种以上的组合。

具体地，本发明提供了 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的制备方法，该方法也可用于 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶异构体化合物如 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的的制备，该方法如下：

将 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸溶解或悬浮于水中，在 20~60°C下，加入适量的氨水，搅拌使其充分反应，反应液溶清后，加入析晶溶剂，使结晶析出，分离得到的 S- (羧甲基) - L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物。

上述制备方法中，可以理解到的具体过程步骤为：

( 1 )、将 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸溶解或悬浮于适当的溶剂体系中，优选溶剂为水；在 20~60°C下，加入至少与 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸等摩尔比的适量氨水，充分搅拌使 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸和氨水反应完全，反应液完全溶清；

(2)、向反应液中加入析晶溶剂，即与反应产物 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶至多微溶的溶剂，使 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶逐步达到饱和或过饱和状态，即可析出晶体，通过不断加入溶剂，控制过饱和过程和晶体生长速度，使析出的晶体晶习良好，使 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶晶体充分析出，分离，干燥，得 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶。

以上所述的析晶过程也可将 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸和氨水的反应液加入到析晶溶剂（与 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶至多微溶的溶剂）中，待晶体充分析出后，分离，干燥，同样可得 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸一水结晶。

以上所述的结晶方法无论是分批结晶、连续结晶、搅拌结晶、静置结晶等结晶操作方式，都可以实施。

以上 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备方法中所述的析晶溶剂是含 C为 1~4的醇，如乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇、 2-丁醇；含 C为 3~6的酮，如丙酮、甲乙酮、戊酮；含 C为 2~4 的腈类，如乙腈、丙腈；含 C为 2~6的醚类，如二恶垸、四氢呋喃；含 C为 1~5的酰胺类，如 N， N- 二甲基甲酰胺、 N， N-二甲基乙酰胺；或是上述溶剂一种以上的组合。这些溶剂或溶剂混合物与水可溶而与 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶微溶。

优选的溶剂是乙醇、丙酮、异丙醇、乙腈或它们的二元、三元或多元混合物。

表 1、 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶在几种溶剂中的溶解性表（25 °C ) :

本发明的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶粒度分布较为均匀，常温下储存一段时间后，性状没有观察到明显的变化，性质较为稳定，不易吸潮，放置一段时间后测得的水分含量差异不大。

组合使用以下各种分析方法对 S- (羧甲基) 半胱氨酸铵盐一水化合物的特定晶型样品进行分析： X射线粉末衍射分析法（下文称 XRPD)、差示扫描量热法（下文称 DSC)、热重分析法（下文称 TG)、熔点、固态核磁共振法、离子色谱法、红外光谱法。由于不同仪器和不同条件可导致产生的数据会略有不同，因此下面所引用的数值不视为绝对的数值。

X射线衍射数据由 D/_max-3A X射线衍射仪获得，采用 C_U-K_ai射线测量以布拉格角 2Θ、相对强度（以相对于最强射线的百分数表达）表达的以下 X-射线粉末衍射图（附图 14 ) :

表 2、 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 X射线衍射峰相对强度

如上所提的取决于所用的测量条件， XRPD衍射图上各峰的强度会有所变动，因此没有用数字表示相对强度，而是使用以下强度定义：表 3、 X射线衍射峰相对强度定义表

上述数据证实 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 X射线衍射图的衍射角（2Θ角 ± 0.2° ) 8.5 ° 、 19.7° 、 21.5 ° 、 23.5 ° 、 27.5 ° 、 29.2 ° 和 32.5 ° 处具有特征峰。

红外图谱由 FT-IR NICOLET 6700仪器获得， S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 KBr压片的红外图谱 (图 15)有如下特征吸收峰： 1600-1610cm-l、 1550-1559 cm- K 1400-1410 cm-1为羧酸盐的特征吸收峰； -N-H吸收频率也在 1600-1610cm-l、 1550-1559 cm-1这个范围，与羧酸盐的吸收有所重叠； 1470-1480 cm-1为 -C-H-吸收峰。

上述数据证实 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶药物化合物的 KBr压片的红外图谱有 1600-1610 cm-l、 1550-1559 cm-K 1470-1480 cm-1、 1400-1410 cm-1特征吸收峰。

以 Optimelt熔点仪进行分析，在 115-119°C间观察到 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物发生熔化。

TG数据由德国 NETZSCH公司 TG209仪器获得，在空气氛围下，以 10°C/mm的速率升温至 350°C，记录热重曲线。如图 10所示， TG差示热分析图显示了在 55 °C左右化合物开始失重， 95-135 °C范围内损失约为 8~9%，与 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物中水的理论含量 8.4%—致。

DSC数据采用德国 NETZSCH公司 DSC204仪器进行分析，在氮气氛围下以 10°C/mm速率升温至 165 °C , 记录升温曲线。 DSC图（图 9 ) 所示，第一次吸热的峰值约在 95 °C左右（吸热作用约在 55 °C开始），在 117°C左右有第二次吸热作用。参考所测得的熔点和 TG数据，表明在加热 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的过程中在 95 °C左右有脱水现象，在 117°C左右为熔化吸热。 TG和 DSC数据结果表明 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物去溶剂化点在 55-115 °C范围内。

采用 Bruker AVANCE AV400兆超导脉冲傅里叶变换核磁共振谱仪进行结构表征（图 11和图 12)， S- (羧甲基）半胱氨酸铵盐一水化合物具有如下主要特征： ^-NMR^D^, 400 MHz) δ: 3.04(m, 1H, CH₂),3.16 (m, 1H, CH₂), 3.30(m, 2H, CH₂),3.91(m, 1H, CH)； ¹³C-丽 R(D₂0, 400 MHz) 5: 178.07 (C-5),173.25(C-l),54.16(C-2),37.52(C-4),33.91(C-3)。

采用 Dionex DX-600仪器分析得到的离子色谱结果（图 13 ) 显示， NH₄ ⁺%含量为 8.35~8.50%，这与 S- (羧甲基) 半胱氨酸铵盐一水化合物中 NH₄ ⁺理论含量一致。

本发明用 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸与药学上可接受的适当的无机碱盐或有机碱成盐后，被人体吸收后在体内水解生成 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸，在保留 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸药效的同时，可以降低 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸的酸性对消化道的刺激，降低其副作用。

本发明的优选方案 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物是利用其羧基的酸性和氨水的碱性形成的可溶性复盐。 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶极易溶于水，且其水溶液的 pH值接近人体的生理范围，产生的胃肠道刺激性较小，而羧甲司坦则显示出较强的酸性（pH 计测得 1 %8-(羧甲基) - 半胱氨酸铵盐一水结晶化合物 pH值为 6.60±0.36 (n=6) ；因羧甲司坦水溶性较差，参照《中国药典 (2010版）》将其配成 1 %混悬液，测得其 pH值为 2.93 ±0.20 (n=6) ) 。此外，该药物被人体吸收以后可在胃酸作用下水解成 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸和氯化铵，不仅能减少 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸对胃肠道的刺激，还可中和多余胃酸。 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶水解后， S- (羧甲基) -L-半胱氨酸在体内继续发挥其药理作用，同时，水解生成的氯化铵对粘膜有化学性刺激，能反射性地增加痰量，使痰液易于排出，有利于不易咳出的少量粘痰的清除，对 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸化痰起了增效作用，更有利于提高疗效。 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐的安全性良好，副作用小，可用于慢阻肺等疾病患者长期服用。

本发明还提供一种药物组合物，包含以 S- (羧甲基) -半胱氨酸药物化合物为有效成分以及可要用载体，更具体而言，是以 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物为有效成分以及可药用载体的药物组合物。

本发明还提供该类 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物，特别是 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物在制备祛痰药物中的应用，以及在制备预防和治疗慢性阻塞性肺呼吸系统疾病药物中的应用。

根据上述通式（1)，可以列举出的具体化合物还有：

■ (羧甲基 •D-半胱氨酸铵盐一水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸铵盐二水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸铵盐三水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸铵盐四水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸铵盐五水化合物；

■ (羧甲基•L-半胱氨酸铵盐二水化合物；

■ (羧甲基•L-半胱氨酸铵盐三水化合物；

■ (羧甲基•L-半胱氨酸铵盐四水化合物；

■ (羧甲基•L-半胱氨酸铵盐五水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸精氨酸盐一水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸精氨酸盐二水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸精氨酸盐三水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸精氨酸盐四水化合物；

■ (羧甲基•D-半胱氨酸精氨酸盐五水化合物；

■ (羧甲基•L-半胱氨酸精氨酸盐一水化合物；

■ (羧甲基 • L -半胱氨酸精氨酸盐二水化合物;

■ (羧甲基 • L -半胱氨酸精氨酸盐三水化合物;

■ (羧甲基 • L -半胱氨酸精氨酸盐四水化合物; S- (羧甲基) - L -半胱氨酸精氨酸盐五水化合物。

制备上述一些化合物的方法同制备 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的方法类似。例如，具体的 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水化合物的制备方法为：将 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸溶解或悬浮于水中，在 20~60°C下，加入适量的氨水，搅拌使其充分反应，反应液溶清后，加入析晶溶剂，使该结晶析出，分离，得 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物。

上述方法中提到的 "析晶溶剂"与前述制备 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备方法中所述的析晶溶剂一样。

在上述本发明的一些制备方法中，根据 S- (羧甲基) -半胱氨酸铵盐与水的不同摩尔比例；所选择的析晶溶剂的不同极性；析晶溶剂与水的不同比例关系，以及析晶时的不同温度可以得到含有不同个数结晶水的化合物。

一般来说，有利于得到含有较多个结晶水化合物的条件为： S- (羧甲基) -半胱氨酸铵盐与水的摩尔比较小，一般其摩尔比不超过 0.5 ; 所选用的析晶溶剂极性相对较弱时，如正丁醇、 2-丁醇、二噁垸、四氢呋喃等；所选用的析晶溶剂与水的质量比较小时，如当析晶溶剂与水的质量比为 1 : 1时候，可以比较容易地到含有 4或 5个结晶水的化合物；而在析晶过程中，较低的环境温度可以更容易地得到含有多个数结晶水的化合物。反之，则倾向于得到含有较少个结晶水化合物，如一水结晶化合物。

上述这些条件不应当理解为影响所得化合物含有结晶水数量多少的绝对条件，应当整体考虑多个影响条件的综合效果。例如，即使所选用的析晶溶剂极性相对较弱时，如正丁醇、 2-丁醇、二噁垸、四氢呋喃等，而这些所用析晶溶剂与水的质量却比较大，如当析晶溶剂与水的质量比为 200: 1时，并且在析晶过程中，析晶的环境温度又较高，如 60°C下，这种条件下，很可能得到的是含有一个水的结晶化合物。

根据上述方法的条件，本发明的一些方法还提供了一种含有多个结晶水的 S- (羧甲基) -半胱氨酸盐制备方法，该方法是以 S- (羧甲基) -半胱氨酸盐一水结晶化合物溶解于适当的溶剂体系中，优选溶剂为水，加入不多于 50倍所用水的质量的析晶溶剂，优选如正丁醇、 2-丁醇、二噁垸、四氢呋喃，控制结晶温度不超过 40°C，养晶，分离，得到含有多个结晶水的 S- (羧甲基) -半胱氨酸盐。

析晶完全后，经过分离，可以得到的纯净的化合物，分离的方式没有限定，一般使用普通过滤、减压过滤、压滤或离心机过滤的方式均可以实施，优选减压过滤的方式。

经过过滤得到化合物，为了进一步提高纯度、去除残留的溶剂，还可以通过干燥的方式处理，如减压烘干、氮气吹干等方式。干燥过程不为必须步骤，不进行干燥，也可以得到能够使用的化合物。有益效果

本发明所得 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸药物化合物，特别是 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶，是一种较均匀粒度分布的良好结晶，性质稳定，不易吸潮，易于保存及制成相应药物制剂。该 S- (羧甲基) -L- 半胱氨酸药物化合物，特别是 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶的制备方法简便易控，收率高，生产周期短，环境污染小，有利于大规模生产应用。初步药效结果表明，本发明所述化合物能显著降低 COPD 模型大鼠气道阻力，减少氧化物的产生，增加抗氧化剂的水平，减轻氧化物、炎症介质等对肺的损伤。國删

附图 1所示为正常组大鼠肺组织病理切片， HE染色（X 100)。

附图 2所示为正常组大鼠肺组织病理切片， HE染色（ X 200 )。

附图 3所示为模型组大鼠肺组织病理切片， HE染色（ X 100)。

附图 4所示为模型组大鼠肺组织病理切片， HE染色（ X 200 )。

附图 5所示为阳性组大鼠肺组织病理切片， HE染色（ X 100)。

附图 6所示为阳性组大鼠肺组织病理切片， HE染色（ X 200 )。

附图 7所示为试验组大鼠肺组织病理切片， HE染色（X 100)。

附图 8所示为试验组大鼠肺组织病理切片， HE染色（X 200)。

附图 9所示为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 DSC图。

附图 10所示为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 TG图。

附图 11所示为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 'H-NMR图。

附图 12所示为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 ¹³C-NMR图。

附图 13所示为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的离子色谱图。

附图 14所示为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的 X射线粉末衍射图。

附图 15所示为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物的红外光谱图。

以下以具体实例来说明本发明的技术方案，本发明的保护范围不限于此。

实施例 1 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 40ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 25ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 600ml乙醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，乙醇滴加完毕后， 25°C下养晶，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 56.5g，收率约 94.5%。

实施例 2 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 25g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 20ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 14ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 400ml异丙醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，异丙醇滴加完毕后， 25°C下养晶，抽滤，少量异丙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 28.5g，收率约 95.4%。

实施例 3 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 40ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 30ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 600ml丙酮，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，丙酮滴加完毕后， 25°C下养晶，抽滤，少量丙酮洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 57.4g，收率约 96.0%。

实施例 4 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：室温下，在装有搅拌装置的烧杯内，加入 25g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 20ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 14ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，备用；向装有搅拌装置的三口瓶中加入 400ml丙酮，水浴加热至 50°C，搅拌下将烧杯中澄清溶液慢慢滴加入丙酮中，有白色晶体析出，滴加完毕后撤水浴， 25 °C下养晶，抽滤，少量丙酮洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 28.2g，收率约 94.4%。

实施例 5 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 40ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 30ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 600ml乙腈，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，乙腈滴加完毕后， 25 °C下养晶，抽滤，少量乙腈洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 58.5g，收率约 97.0%。

实施例 6 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 40g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 30ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 24ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 500ml四氢呋喃，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，四氢呋喃滴加完毕后， 25 °C下养晶，抽滤，少量丙酮洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 26.5g，收率约 55.4%。

实施例 7 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 40g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 30ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 24ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 500ml甲醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，甲醇滴加完毕后， 35 °C下养晶，抽滤，少量甲醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 44.95g，收率约 94.0%。

实施例 8 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 40g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 30ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 24ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 500ml N， N-二甲基甲酰胺，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度， N， N-二甲基甲酰胺滴加完毕后， 45 °C下养晶，抽滤，少量丙酮洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶 46.8g，收率约 98.0%。

实施例 9 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸精氨酸盐四水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 20g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 19.5g精氨酸， 50ml蒸馏水，水浴加热至 50°C，保温搅拌使反应液溶清后，向反应液中滴加 100ml正丁醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，正丁醇滴加完毕后， 5 °C养晶，抽滤，少量正丁醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸精氨酸盐四水结晶 37.5g，收率约 79.0%。水分测定结果为 16.95%，元素分析结果 C 31.12%， S 7.54%, N 16.86%, 0 37.66%。

实施例 10 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸精氨酸盐五水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 25g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 24.5g精氨酸， 20ml蒸馏水，水浴加热至 50°C，保温搅拌使反应液溶清后，向其中滴加 50ml异丙醇与 50ml四氢呋喃的混合液，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，滴加完毕后， 0°C养晶，抽滤，少量上述的混合液洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸精氨酸盐五水结晶 54.8g，收率约 88.6%。水分测定结果为 20.1%，元素分析结果 C 29.73%， S 7.24%, N 15.86%, 0 39.61%。

实施例 11 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸盐三水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 20g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 19.5g精氨酸， 50ml蒸馏水，水浴加热至 50°C，保温搅拌使反应液溶清后，向反应液中滴加 300ml乙醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，乙醇滴加完毕后， 20°C养晶，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸盐三水结晶 42.7g，收率约 93.9%。水分测定结果为 13.7%，元素分析结果 C 32.42%, S 7.96%, N 17.23%, 0 35.38%。

实施例 12 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 20g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 19.5g精氨酸， 50ml蒸馏水，水浴加热至 50°C，保温搅拌使反应液溶清后，向反应液中滴加 300ml乙醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，乙醇滴加完毕后， 20°C养晶，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸盐三水结晶 43.5g，收率约 95.7%。卡氏法测定水分为 4.87%，元素分析: C 35.62%, S 8.87%, N 18.89%, 0 30.22%。

实施例 13 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐二水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸， 30ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 30ml 25%氨水，水浴加热至 50°C，保温搅拌使反应液溶清后，向反应液中滴加 400ml N， N-二甲基甲酰胺，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度， N， N-二甲基甲酰胺滴加完毕后， 30°C养晶，抽滤，少量 N， N-二甲基甲酰胺洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐二水结晶 58.4g，收率约 90.1%。卡氏法测定水分为 15.8%，元素分析： C 25.91%， S 13.82%, N 12.18%, 0 41.46%。

实施例 14 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐二水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 30ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 30ml 25%氨水，水浴加热至 50°C，保温搅拌使反应液溶清后，向反应液中滴加 400ml N， N-二甲基乙酰胺，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度， N， N-二甲基乙酰胺滴加完毕后， 30°C养晶，抽滤，少量 N， N-二甲基乙酰胺洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐二水结晶 60.2g，收率约 92.9%。卡氏法测定水分为 15.9%，元素分析： C 25.95%， S 13.83%, N 12.05%, 0 41.42%。

实施例 15 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸精氨酸盐一水结晶的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 20g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 19.5g精氨酸， 50ml蒸馏水，水浴加热至 50°C，保温搅拌使反应液溶清后，向反应液中滴加 600ml乙醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，乙醇滴加完毕后， 30°C养晶，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸精氨酸盐一水结晶 37.5g，收率约 90.5%。卡氏法测定水分为 4.85%，元素分析： C 35.65%， S 8.83%, N 18.85%, 0 30.12%。

实施例 16 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸钠盐的制备：室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 60ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 11.5g氢氧化钠，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 700ml乙醇，开始时滴加速度稍快，至有白色固体析出时减慢滴加速度，乙醇滴加完毕后，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸钠盐 52.8g，收率约 94%。

实施例 17 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸钾盐的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 60ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 20g氢氧化钾，反应 0.5h后，向其中滴加 400ml乙醇，滴加完毕后，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸钾盐 58g，收率约 96%。

实施例 18 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸钙盐的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 100ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 llg氧化钙，水浴加热反应 0.5h后，向其中滴加 400ml丙酮，滴加完毕后，抽滤，少量丙酮洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸钙盐 48g，收率约 79%。

实施例 19 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸组氨酸盐的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 20g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 60ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 17.3g L-组氨酸，反应 0.5h后，向其中滴加 400ml乙醇，滴加完毕后，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸组氨酸盐 34g，收率约 93%。

实施例 20 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐二水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 10g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物， 30ml 蒸馏水，搅拌得到澄清溶液，将体系温度将至 10°C，向其中滴加 100ml乙醇和 500ml乙腈混合液，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，滴加完毕后，养晶，抽滤，少量乙腈洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵二水结晶 8g，卡氏法测定水分为 15.7%，元素分析: C 25.90%, S 13.80%, N 12.08%, 0 41.40%。

实施例 21 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐四水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 5g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶， 50ml蒸馏水，搅拌得到澄清溶液，将体系温度将至 -10°C，向其中滴加 100ml异丙醇、 300ml乙腈和 800ml四氢呋喃混合液，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，滴加完毕后，养晶，抽滤，少量四氢呋喃洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵四水结晶 6g。水分测定结果为 26.80%，元素分析结果 C 22.39%, S 11.95%, N 10.40%, 0 47.73%。

实施例 22 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸盐三水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 5g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸盐一水结晶， 40ml蒸馏水，搅拌得到澄清溶液，将体系温度将至 -10°C，向其中滴加 100ml异丙醇、 100ml乙醇和 500ml丙酮混合液，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，滴加完毕后，养晶，抽滤，少量丙酮洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸三水合物 7g，水分测定结果为 13.4%，元素分析结果 C 32.44%, S 7.90%, N 17.20%, 0 35.35%。

实施例 23 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸五水结晶合物的制备：室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 5g S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸一水结晶， 80ml蒸馏水，搅拌得到澄清溶液，将体系温度将至 -15°C，向其中滴加 400ml乙腈、 300ml丙酮和 1000ml四氢呋喃混合液，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，滴加完毕后，养晶，抽滤，少量丙酮洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸五水合物 4g，水分测定结果为 20.3%，元素分析结果 C 29.78%， S 7.25%, N 15.80%, 0 39.71%。

实施例 :24 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵二水结晶合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 10g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物， 30ml 蒸馏水，搅拌得到澄清溶液，将体系温度将至 10°C，向其中滴加 100ml乙醇和 500ml乙腈混合液，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，滴加完毕后，养晶，抽滤，少量乙腈洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵二水结晶 7g，卡氏法测定水分为 15.8%，元素分析： C 25.91%, S 13.82%, N 12.08%, 0 41.41%。

实施例 25 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物的制备：

室温下，在装有搅拌装置的三口瓶内，加入 50g S- (羧甲基) -D-半胱氨酸， 40ml蒸馏水，得到的悬浊液中再加入 25ml 25%氨水，快速搅拌得澄清溶液，向其中滴加 600ml乙醇，开始时滴加速度稍快，至有白色晶体析出时减慢滴加速度，乙醇滴加完毕后， 25 °C下养晶，抽滤，少量乙醇洗涤滤饼，抽干，干燥，得白色 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水结晶 55.7g，收率约 93.2%。

实施例 26 药物组合物的制备

通式 I的钾盐（以羧甲基半胱氨酸计） 1质量份

氯扎苯胺 0.1质量份

水（加适量磷酸盐调节 pH至 6 ) 98.9质量份

将上述处方药物及辅料混匀，灌封于定 i ：阀门容器中即可得到喷雾剂。

实施例 27 药物组合物的制备

化合物 III (以羧甲基半胱氨酸计） 1质量份

溴扎苯胺 0.1质量份

水（加适量硼酸盐调节 pH至 7) 98.9质量份

实施例 28 药物组合物的制备

化合物 III (以羧甲基半胱氨酸计） 1.5质量份

溴扎苯胺 0.1质量份

水（加适量硼酸盐调节 pH至 7) 98.4质量份

实施例 29 药物组合物的制备

S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水化合物 1.5质量份

氯扎苯胺 0.1质量份

水（加适量磷酸盐调节 pH至 6 ) 98.4质量份。将上述处方药物及辅料混匀，灌封于定量阀门容器中即可得到喷雾剂。

实施例 30 药物组合物的制备

S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水化合物 1质量份

司盘 85 1.5质量份

乙醇 2质量份

1,1,1,2-四氟乙垸 95.5质量份。

将药物与表面活性剂、共溶剂混合均匀，预冷，充入处方量的抛射剂，灌封于定量阀门容器中即可气雾剂。

实施例 31 药物组合物的制备

S- (羧甲基) -L-半胱氨酸精氨酸盐一水化合物 1.2质量份

溴扎苯胺 0.1质量份

水（加适量硼酸盐调节 pH至 7) 98.7质量份 c

将上述处方药物及辅料混匀，灌封于定量阀门容器中即可得到喷雾剂。

实施例 32 药物效果试验

1.实验方法

1.1大鼠 COPD模型的制备

225只大鼠随机分为 15组，分别为正常组（使用生理盐水）、模型组（使用生理盐水）、阳性组（给药羧甲司坦）、 S-羧甲基 L-半胱氨酸铵盐一水结晶（简称 "L-铵"，实施例 1制得）高中低剂量组、 S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物（简称 "D-铵" ，实施例 25制得）高中低剂量组、 S- (羧甲基) -D- 半胱氨酸精氨酸盐一水结晶化合物（简称 "D-精" ，实施例 15制得）高中低剂量组、和 S- (羧甲基) -L- 半胱氨酸精氨酸盐一水结晶化合物（简称 "L-精" ，实施例 12制得）高中低剂量试验组（即用药组），每组 15只。采用目前国内和国际上普遍应用的熏烟加气管内滴入内毒素脂多糖（LPS)的方法建立大鼠 COPD模型。周期为 3个月（90天）。具体方法：在试验的第 1、 15、 29、 43、 57、 71、 85天，用乙醚麻醉大鼠，拉出大鼠的舌根，用弯头灌胃针头经气管滴入 LPS (200ug/200ul) o 正常组用相同的方法滴入等量的生理盐水，不熏烟。其余 5组大鼠每天置于自制的熏烟仓中熏烟。熏烟仓一侧外接一台负压泵，顶部接有香烟的插口。接通负压泵的电流，点燃香烟，即可将香烟的烟雾抽吸入熏烟仓内。为了防止动物因缺氧而死亡，每次点燃 12支香烟，熏烟 20mm后打开仓盖换新鲜空气。 lh /3次 /日，再加上用弯头灌胃针头经气管滴入 LPS (200ug/200ul) o

1.2 药物干预

实验共 90天，从实验的第 15天开始进行药物干预，阳性组灌注羧甲司坦，低中高试验组灌注不同剂量试验药物，模型组和正常组大鼠灌注等量的生理盐水。

1.3 指标测定

于实验结束后第二天眼眶取血，分离血清，剪取完整的胃冲洗干净，留取肺组织，取胃、右上肺进行病理检测，余肺进行肺组织匀浆后，测定氧化与抗氧化指标过氧化脂质（LPO)、丙二醛（MDA)、还原型谷胱甘肽（GSH) 含量及超氧化物歧化酶（SOD) 活性，炎症介质 TNF-a、 IL-8、 IL-6的浓度。 2.实验结果

2.1 实验过程中动物表现

正常组大鼠活泼好动，毛发光整、有色泽；模型及给药组动物整体状态欠佳，先后出现咳嗽、精神萎靡、倦卧，行动迟缓，毛发干枯发黄、杂乱、脱落等症状和体征。

2.2 胃病理变化

正常组大鼠胃黏膜上皮细胞排列较整齐，腺体排列紧密，除胃窦部有个别炎细胞存在外，其余部分未见炎细胞浸润。阳性组大鼠胃黏膜层轻度水肿充血，大量炎细胞浸润，部分胃黏膜表面柱状上皮细胞化生为杯状上皮细胞。模型组及各用药组胃黏膜层未见明显水肿充血，仅少量炎细胞浸润。

2.3 肺病理变化

正常组大鼠支气管粘膜上皮结构相对完整，纤毛排列整齐，粘膜下少见明显炎性细胞浸润，肺泡结构连续完整，肺泡腔未见明显扩大及炎性渗出。模型组大鼠细支气管狭窄变形甚至闭塞；纤毛粘连、倒伏，有明显脱落，气道粘膜变性坏死，上皮细胞、杯状细胞显著增生，膜下及细支气管周围有大量炎性细胞浸润，以淋巴细胞为主；气道平滑肌增生，肺小动脉平滑肌增厚；肺气肿明显，可见肺大疱形成。各用药组支气管黏膜下炎症细胞浸润、气道粘膜变性坏死程度及肺小动脉平滑肌增生厚度等都较模型组明显减轻。

2.4 炎症指标的测定

与正常组比较，模型组大鼠肺及血清中 TNF- α、 IL-8、 IL-6含量均显著增高（P<0.01 )，表明动物造模成功。与模型组相比，同时给予试验药物治疗， TNF- a、 IL-8、 IL-6含量降低，且呈一定量效关系。试验结果见表 8。表 8、对炎症指标的影响（x ±SD， pg/mL)

TNF-a IL-8 IL-6

组别

肺组织血清肺组织血清肺组织血清正常组 8.83±2.54** 10.12±2.86** 4.07±1.19** 4.88±1.11 ** 4.50±1.12** 5.27±1.72** 模型组 40.39±11.97** 26.23±5.12 15.23±4.21 10.93±2.19 20.67±7.00 13.08±4.34 阳性组 25.17±8.28** 18.37±4.55* 10.91±2.30** 7.87±3.08* 14.24±6.26* 8.13±2.87**

L-铵低剂量组 20.60±9.60** 17.98±3.94** 9.97±1.24** 7.90±2.16* 14.72±5.51 * 7.02±3.30**

L-铵中剂量组 19.98±8.78** 15.11±4.38** 8.66±2.54** 6.30±2.17** 12.91±2.47** 6.24±2.12**

L-铵高剂量组 15.15±4.20** 13.02±5.32** 8.17±1.06** 5.36±1.51 ** 9.28±4.49** 5.83±1.51 **

D-铵低剂量组 28.26±12.06* 21.12±4.11 * 13.09±2.98* 8.56±2.79* 16.36±4.78* 10.76±2.90*

D-铵中剂量组 25.02±10.89* 19.86±3.58** 11.90±1.77** 8.05±1.72** 15.61±4.40* 9.09±3.23*

D-铵高剂量组 21.33±8.57** 17.19±4.05** 11.44±1.64** 7.38±1.54** 13.83±6.19* 7.93±3.10**

D-精低剂量组 30.10±9.44* 23.12±4.20 12.69±2.33* 9.70±1.35* 17.03±7.27 11.07±2.60*

D-精中剂量组 28.28±13.57* 20.09±5.10* 12.01±2.11 ** 8.26±2.67* 15.44±5.64* 10.38±3.54*

D-精高剂量组 24.40±6.09** 19.73±6.08* 10.82±2.59** 7.74±1.28** 13.69±4.33** 8.70±2.35** L精低剂量组 26.17±8.33* 20.22±4.77* 11.88±3.03* 8.56±2.33* 15.80±6.02* 9.17±3.08*

L-精中剂量组 23.65±11.21 ** 18.67±3.89** 9.98±2.43** 7.39±2.02** 14.22±5.13* 7.66±2.83**

L-精高剂量组 20.36±7.41 ** 15.70±5.16** 9.09±1.89** 6.24±1.89** 12.77±4.65** 6.69±1.92** 注：与模型组比较， *P<0.05， **P<0.01

2.5 氧化及抗氧化指标的测定

与正常组比较，模型组大鼠肺及血清中氧化指标 LPO、 MDA含量均显著增高（P<0.01 )，抗氧化指标 GSH和 SOD含量均显著降低成本（P<0.01 )，表明动物造模成功。与模型组相比，同时给予试验药物治疗，肺及血清中 LPO、 MDA含量均显著降低， GSH和 SOD含量均显著升高，且呈一定量效关系。试验结果见表 9和表 10。表 9、对氧化指标的影响（x ±SD )

注：与模型组比较， *P<0.05， **P<0.01 表 10、对抗氧化指标的影响（x ±SD )

阳性组 107.26±23.52* 132.31±24.04* 62.28±15.12* 96.16±23.03**

L-铵低剂量组 113.59 ±24.32* 140.64 ± 19.66* 60.38 ± 16.04* 90.80 ± 15.13**

L-铵中剂量组 124.19 ±30.78** 175.61 ±31.11** 70.71 ± 11.16** 102.98 ±23.26**

L-铵高剂量组 141.69 ±28.40** 232.93 ±40.49** 77.56 ± 18.09** 140.69 ±32.13**

D-铵低剂量组 94.54±17.50 120.16±17.05* 52.17±16.44 72.30±12.66*

D-铵中剂量组 109.68±24.63* 131.33±24.17* 60.31±14.12* 88.85±17.47**

D-铵高剂量组 120.13±25.76** 158.76±29.50** 70.51±20.90* 98.28±19.15**

D-精低剂量组 92.23±13.38 119.02±17.95* 46.86±19.25 74.53±8.70**

D-精中剂量组 107.77±18.26* 124.95±26.07* 54.4±12.18* 83.74±15.27*

D-精高齐 D量组 114.54±20.57* 144.17±27.40** 62.24±16.47* 92.32±20.65**

L精低剂量组 102.45±18.97* 134.21±26.45* 55.67±13.29* 82.67±19.45*

L-精中剂量组 116.22±22.73** 159.33±30.20** 65.44±17.33* 93.20±20.77**

L-精高齐 D量组 128.45±24.09** 180.40±350.78** 72.36±14.55** 116.34±27.86** 注：与模型组比较， *P<0.05， **P<0.01

3.实验结论

COPD 的重要特征是整个气道与肺实质的持续性炎症病变，氧化-抗氧化失衡，体内氧化应激增强。初步药效结果表明， COPD模型大鼠在造模第 15天时同时予试验药物能显著降低相同压力下的气道阻力，减少氧化物的产生，增加抗氧化剂的水平，使氧化 /抗氧化系统趋于平衡，减轻氧化物、炎症介质等对肺的损伤，这与病理切片观察到的结果相一致。同时，给予羧甲司坦的阳性组大鼠胃肠道黏膜出现轻度充血水肿，大量炎细胞浸润等轻度刺激症状，而各用药试验组仅少量炎细胞浸润，表明各试验药物对胃肠道基本无刺激。本发明的一些化合物对于发生溃疡的消化道的刺激性也低于羧甲司坦，因此可用于 "消化道溃疡活动期患者 "（此类患者禁用羧甲司坦）。工业实用性

本发明所提供的 S- (羧甲基) -半胱氨酸药物化合物及其制备方法和用途，特别是 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶药物化合物。该化合物是一种具有较均匀粒度分布的良好结晶，性质稳定，不易吸潮，易于保存及制成相应药物制剂。其制备方法简便易控，收率高，生产周期短，环境污染小，利于工业化批量生产，具有工业实用性。初步药效结果表明，本发明所述化合物能显著降低 COPD模型大鼠气道阻力，减少氧化物的产生，增加抗氧化剂的水平，减轻氧化物、炎症介质等对肺的损伤，对胃肠道基本无刺激性。本发明所述化合物解决了因长期服用羧甲司坦而引起的胃肠粘膜损伤，出血、溃疡甚至穿孔等严重副作用，及胃部不适、恶心、呕吐、肠胃道出血等不良反应。成为羧甲司坦安全有效的替代物，对于 COPD等疾病的治疗具有重大意义。

Claims

权利要求书

1、一种如通式 I所

( I )

其特征在于 R为药学上可接受的能与 S- (羧甲基) -半胱氨酸成盐的碱性化合物， X为 1~2的整数， y为 1~5的整数。

2、根据权利要求 1所述的 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物，其特征在于 R为氨或精氨酸。

3、根据权利要求 1所述的 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物，其特征在于 R不包括赖氨酸。

4、根据权利要求 1、 2中任一项所述的 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物，其特征在于该化合物为 S- (羧甲基) -半胱氨酸盐一水化合物，结构如下：

αι)。

5、根据权利要求 4所述的 S- (羧甲基) -半胱氨酸铵盐一水化合物，其特征在于该化合物为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一其结构式如下，

其特征在于其 X射线衍射图的衍射角在 8.5 ° 、 19.7° 、 21.5 ° 、 23.5 ° 、 27.5 ° 、 29.2 ° 和 32.5 ° 处具有特征峰。

6、权利要求 5所述的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物，其特征在于该化合物为 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水结晶药物化合物，其 KBr压片的红外图谱有 1600-1610 cm ¹ , 1550-1559 cm 1470-1480 cm—¹、 1400-1410 cm—¹特征吸收峰。

7、根据权利要求 4所述的 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物，其特征在于其右旋异构体，为

S- (羧甲基) -D-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物，其结构如下：

8、根据权利要求 1所述的 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物的制备方法，其特征在于使 S- (羧甲基) -半胱氨酸溶解或悬浮于水中，加入碱性化合物 R，充分反应使固体溶清后，往反应液加入析晶溶剂使该结晶析出，分离，得 S- (羧甲基) -半胱氨酸的药物化合物结晶。

9、根据权利要求 5、 6中任一项所述的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物的制备方法，其特征在于将 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸溶解或悬浮于水中，在 20~60°C下，加入氨水，搅拌使其充分反应，反应液溶清后，加入析晶溶剂，使结晶析出，分离得到的 S- (羧甲基) - L-半胱氨酸铵盐一水结晶化合物。

10、根据权利要求 9所述的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物的制备方法，其特征在于析晶溶剂为含 C为 1~4的醇、含 C为 3~6的酮、含 C为 2~4的腈、含 C为 2~6的醚、含 C为 1~5的酰胺的一种或一种以上的组合。

11、根据权利要求 10所述的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物的制备方法，其特征在于含 C为 1~4的醇选自乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇、 2-丁醇；含 C为 3~6的酮选自丙酮、甲乙酮、戊酮；含 C为 2~4的腈为乙腈、丙腈；含 C为 2~6的醚选自二噁垸、四氢呋喃；含 C为 1~5的酰胺为 N， N-二甲基甲酰胺、 N， N-二甲基乙酰胺。

12、药物组合物，包含权利要求 5、 6中任一项所述的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物为有效成分以及可药用载体。

13、权利要求 5、 6中任一项所述的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物用于制备祛痰药物中的应用。

14、权利要求 5、 6中任一项所述的 S- (羧甲基) -L-半胱氨酸铵盐一水药物化合物在制备预防和治疗慢性阻塞性肺疾病药物中的应用。