WO2011037065A1 - 活性エステル化多糖およびその製造方法 - Google Patents
活性エステル化多糖およびその製造方法 Download PDFInfo
- Publication number
- WO2011037065A1 WO2011037065A1 PCT/JP2010/066052 JP2010066052W WO2011037065A1 WO 2011037065 A1 WO2011037065 A1 WO 2011037065A1 JP 2010066052 W JP2010066052 W JP 2010066052W WO 2011037065 A1 WO2011037065 A1 WO 2011037065A1
- Authority
- WO
- WIPO (PCT)
- Prior art keywords
- polysaccharide
- acid
- group
- active
- active esterified
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B31/00—Preparation of derivatives of starch
- C08B31/02—Esters
- C08B31/04—Esters of organic acids, e.g. alkenyl-succinated starch
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B31/00—Preparation of derivatives of starch
- C08B31/08—Ethers
- C08B31/12—Ethers having alkyl or cycloalkyl radicals substituted by heteroatoms, e.g. hydroxyalkyl or carboxyalkyl starch
Abstract
水溶解時に不溶物を生じることがない安定した品質の活性エステル化多糖の乾燥品、およびそのような品質の活性エステル化多糖の商業スケールでの製造を可能にする製造方法の提供。カルボキシ基を有する多糖と求電子性化合物とをエステル化反応させ、生成した活性エステル化多糖を多価カルボン酸と接触させた後析出回収する活性エステル化多糖の製造方法。
Description
本発明は、活性エステル化多糖およびその製造方法に関する。
生体適合性の高い多糖の側鎖に架橋性基を導入した多糖誘導体は、生体適合材料として有用であることがいくつかの文献で提案されている。なかでも、多糖の側鎖に導入したカルボキシ基を求電子性基とエステル化し、活性水素含有基との接触により該エステル結合が解離することでカルボキシ基が架橋に関与する機構の活性エステル化多糖は、自己架橋性であり、癒着防止材、止血材、医療用接着材などの各種生体適合材料として特に有用である(特許文献1など参照)。
上記活性エステル基は、通常、イミドエステルであり、特にスクシンイミドエステルが代表的である。多糖の活性エステル化としては、分子内にカルボキシ基を有するヒアルロン酸について、ヒアルロン酸テトラブチルアンモニウム塩とN-ヒドロキシスクシンイミドジフェニルリン酸塩との反応によるヒアルロン酸のスクシンイミド活性エステルの合成方法なども報告される(非特許文献1参照)が、従来一般には、まず、分子内にカルボキシ基を有さない多糖の側鎖にカルボキシ基を導入して酸型多糖とし、該カルボキシ基とN-ヒドロキシイミドとを脱水縮合させてエステル形成する。生成した活性エステル化多糖は、貧溶媒で晶析した後減圧乾燥して粉末とし、使用に際して水に溶解する。
Y. Luoら, Bioconjugate Chem. 2001, 12, 1085-1088
生体適合材料として有用性の高い活性エステル化多糖の製品化に際して、乾燥製品の活性エステル化多糖を水に溶解するとダマなどの不溶物を生じることがあるという問題を生じた。不溶分を含む製品は、これまで検討されてきた実験レベルでは報告のない問題であるが、商業的スケールアップを図る上で初めて生じた品質上の問題であり、また生産効率の問題でもある。このため、水溶解時に不溶物を生じることがない安定した品質の活性エステル化多糖、および製造スケールをアップしてもそのような品質の活性エステル化多糖を安定して製造しうる方法が望まれる。
本発明者は、上記課題について種々検討したところ、エステル反応終了後の反応液を多価カルボン酸と接触させることにより、乾燥製品の水溶解時の不溶物を生じる課題を解決しうることを見出した。また、最終乾燥工程および貯蔵時における目的物質の経時的な平均分子量(Mw)上昇も抑制しうることも確認できた。これによりスケールアップの実現を担保でき、本発明を完成した。
なお、この検討過程では、従来の製造方法で得られる活性エステル化多糖は、その乾燥製品が水不溶分を生じる場合、該活性エステル化多糖のGPC測定では、高分子側にショルダーが出現するかまたはショルダーのブロード化が認められ、高分子量成分の生成が示された。この高分子側ショルダー分画はIRスペクトルにより活性エステル化多糖の水素結合物と推測された。このような高分子量成分の生成による平均分子量(Mw)の変化に対する寄与率は必ずしも大きいとはいえず、したがって不溶分が生成してもMwの値が顕著に大きくなるともいえない。また逆に、Mwがある程度増加すると必ず不溶分を生成するともいえないが、事実として、従来の製造方法で得られる活性エステル化多糖は、減圧乾燥時および貯蔵時に経時的にMwが増加する傾向が認められ、またMwの経時的変化率がばらつくという知見も得ている。さらに、減圧乾燥時のMwの増加は貯蔵時よりも顕著であること、および減圧乾燥時のMwの増加を抑制すれば貯蔵時のMwの増加を抑制できるという知見を得ている。したがって減圧乾燥におけるMw評価は貯蔵安定性も含めた製品安定性の評価となる。
なお、この検討過程では、従来の製造方法で得られる活性エステル化多糖は、その乾燥製品が水不溶分を生じる場合、該活性エステル化多糖のGPC測定では、高分子側にショルダーが出現するかまたはショルダーのブロード化が認められ、高分子量成分の生成が示された。この高分子側ショルダー分画はIRスペクトルにより活性エステル化多糖の水素結合物と推測された。このような高分子量成分の生成による平均分子量(Mw)の変化に対する寄与率は必ずしも大きいとはいえず、したがって不溶分が生成してもMwの値が顕著に大きくなるともいえない。また逆に、Mwがある程度増加すると必ず不溶分を生成するともいえないが、事実として、従来の製造方法で得られる活性エステル化多糖は、減圧乾燥時および貯蔵時に経時的にMwが増加する傾向が認められ、またMwの経時的変化率がばらつくという知見も得ている。さらに、減圧乾燥時のMwの増加は貯蔵時よりも顕著であること、および減圧乾燥時のMwの増加を抑制すれば貯蔵時のMwの増加を抑制できるという知見を得ている。したがって減圧乾燥におけるMw評価は貯蔵安定性も含めた製品安定性の評価となる。
一方、上記製造過程において多価カルボン酸と接触させた活性エステル化多糖は、最終乾燥製品における水溶解時の不溶物生成を安定して抑制でき、GPC測定におけるピークに顕著な高分子側のショルダー出現またはブロード化は認められない。また、減圧乾燥時の経時的なMw増大が抑制される効果を奏することも確かめている。本発明の製造過程で使用される多価カルボン酸は、ほとんど最終乾燥製品中には残留しておらず、該乾燥製品を水に溶解した際に不溶物を生じない理由および減圧乾燥時の経時的な高分子量成分の生成もしくはMw増大の抑制効果の理由には明らかではないが、製造過程での多価カルボン酸との接触により安定した乾燥製品を再現性よく得ることができ、乾燥製品の確実な水溶解性を保証することは事実である。したがって以下の本発明を提供する。
本発明は、酸型多糖のカルボキシ基と求電子性基導入剤とをエステル化反応させ、生成した活性エステル化多糖を多価カルボン酸と接触させた後析出させ回収する活性エステル化多糖の製造方法である。
上記沈殿回収後の活性エステル化多糖は、通常、減圧乾燥する。
また本発明では、上記のような方法で得られる活性エステル化多糖を提供する。
上記沈殿回収後の活性エステル化多糖は、通常、減圧乾燥する。
また本発明では、上記のような方法で得られる活性エステル化多糖を提供する。
本発明によれば、最終乾燥工程における目的化合物の経時的な分子量上昇の抑制効果を奏する。不溶物を生じない活性エステル化多糖(乾燥品)を商業スケールでも安定して製造することができ、安定した品質の活性エステル化多糖を提供することができる。
以下に、本発明を製造方法にしたがって具体的に説明する。
本明細書において、カルボキシ基を有する多糖を「酸型多糖」と称する。
本発明では、酸型多糖のカルボキシ基と、求電子性基導入剤とをエステル化反応させ、生成した活性エステル化多糖を多価カルボン酸と接触させた後、活性エステル化多糖を析出させ回収する。
<酸型多糖>
酸型多糖の主鎖となる多糖は、主骨格に単糖構造を2単位以上有するものであればよく、特に制限されない。たとえば、アラビノース、リボース、キシロース、グルコース、マンノース、ガラクトース、フルクトース、ソルボース、ラムノース、フコース、リボデソース等の単糖類;トレハロース、スクロース、マルトース、セロビオース、ゲンチオビオース、ラクトース、メリビオース等の二糖類;ラフィノース、ゲンチアノース、メレチトース、スタキオース等の三糖以上の多糖類が、共有結合することにより形成されたもの、およびこれに対して、さらに官能基を導入したものが挙げられる。このような多糖は、天然に存在するものでも、人工的に合成されたものでもよい。
本明細書において、カルボキシ基を有する多糖を「酸型多糖」と称する。
本発明では、酸型多糖のカルボキシ基と、求電子性基導入剤とをエステル化反応させ、生成した活性エステル化多糖を多価カルボン酸と接触させた後、活性エステル化多糖を析出させ回収する。
<酸型多糖>
酸型多糖の主鎖となる多糖は、主骨格に単糖構造を2単位以上有するものであればよく、特に制限されない。たとえば、アラビノース、リボース、キシロース、グルコース、マンノース、ガラクトース、フルクトース、ソルボース、ラムノース、フコース、リボデソース等の単糖類;トレハロース、スクロース、マルトース、セロビオース、ゲンチオビオース、ラクトース、メリビオース等の二糖類;ラフィノース、ゲンチアノース、メレチトース、スタキオース等の三糖以上の多糖類が、共有結合することにより形成されたもの、およびこれに対して、さらに官能基を導入したものが挙げられる。このような多糖は、天然に存在するものでも、人工的に合成されたものでもよい。
多糖の分子量に特に制限はない。好ましくは、上記の単糖類、二糖類または三糖以上の多糖類が、数十~数千個結合したものに相当する平均分子量(Mw)が5~2500kDaの多糖である。このような多糖であれば、活性エステル化多糖が架橋した後のゲルの硬度を調整しやすく、架橋に関与する活性エステル基および活性水素含有基を1分子鎖に複数導入しやすいからである。好ましくは、Mwが10~1000kDaの多糖である。
酸型多糖における「カルボキシ基」は、通常、カルボン酸基(-COOH)およびカルボキシアルキル基(-RCOOH)基である。-RCOOHとしては、カルボキシメチル基、カルボキシエチル基、カルボキシプロピル基、カルボキシイソプロピル基、カルボキシブチル基などが挙げられる。
酸型多糖は、活性エステル化多糖の前駆段階で酸型であればよく、カルボキシ基を自己保有する天然酸型多糖であってもよく、導入したカルボキシ基を有する酸型多糖であってもよい。カルボキシ基を導入する多糖は、天然酸型多糖であってもそれ自体はカルボキシ基を有さない多糖であってもよい。
上記カルボキシ基を自己保有する天然酸型多糖としては、特に限定されないが、ガラクツロン酸を含むペクチンやヒアルロン酸等が挙げられる。
カルボキシ基を有さない多糖としては、特に限定されないが、デキストラン、プルラン、デキストリンなどが挙げられる。
上記カルボキシ基を自己保有する天然酸型多糖としては、特に限定されないが、ガラクツロン酸を含むペクチンやヒアルロン酸等が挙げられる。
カルボキシ基を有さない多糖としては、特に限定されないが、デキストラン、プルラン、デキストリンなどが挙げられる。
デキストランは、代用血漿剤として使用されており、「Dextran T fractions」(アマシャムバイオサイエンス社)の商品名で入手可能である。
プルランは、経口薬を含む医薬添加剤として使用されており、エンドトキシン等の生物学的コンタミネーションが少ないものが好適である。プルランは、「Pullulan PI-20」(林原社)の商品名で入手可能である。
プルランは、経口薬を含む医薬添加剤として使用されており、エンドトキシン等の生物学的コンタミネーションが少ないものが好適である。プルランは、「Pullulan PI-20」(林原社)の商品名で入手可能である。
デキストリンは、でんぷんの加水分解物であり、分子鎖長の異なるグルコース重合体の混合物である。デキストリンにおけるグルコース単位は、主としてα-1,4結合であり、通常、ある程度の割合でα-1,6結合を含む。本発明では、デキストリン原料のでんぷん種は特に限定されず、したがってα-1,6結合の存在割合も特に限定されない。
本発明で用いられるデキストリンは、入手しやすさ、用時の物性、扱い易さ、被膜形成性などを考慮して、典型的にMw10~200kDa程度のものである。
いずれの多糖も、本発明においては、一般的に商業流通しているものを利用できる。上記医療用途で実績のある多糖は、本発明においては安全性面で好適に利用できる多糖である。
本発明で用いられるデキストリンは、入手しやすさ、用時の物性、扱い易さ、被膜形成性などを考慮して、典型的にMw10~200kDa程度のものである。
いずれの多糖も、本発明においては、一般的に商業流通しているものを利用できる。上記医療用途で実績のある多糖は、本発明においては安全性面で好適に利用できる多糖である。
上記のうちでも、デキストリンは、アナフィラキシーショックが報告されておらず、腹膜透析での使用実績もあり、生体適応における不具合が未だ報告されていない点で特に好ましい多糖である。
また、酸型多糖は、好ましくは、カルボキシメチル基を有するカルボキシメチル化多糖である。
なお、本発明では、酸型多糖におけるカルボキシ基は、塩が配位していない「非塩型」であることが望ましく、最終的に得られる活性エステル化多糖が塩形態ではないことが望ましい。ここで「塩」とは、アルカリ金属、アルカリ土類金属などの無機塩、テトラブチルアンモニウム(TBA)などの四級アミン、ヨウ化クロロメチルピリジリウムなどのハロゲン塩などを包含する。「非塩型」とは、これらの「塩」が配位していないことであり、「塩形態ではない」とは、これらの塩を含まないことを意味する。
また、酸型多糖は、好ましくは、カルボキシメチル基を有するカルボキシメチル化多糖である。
なお、本発明では、酸型多糖におけるカルボキシ基は、塩が配位していない「非塩型」であることが望ましく、最終的に得られる活性エステル化多糖が塩形態ではないことが望ましい。ここで「塩」とは、アルカリ金属、アルカリ土類金属などの無機塩、テトラブチルアンモニウム(TBA)などの四級アミン、ヨウ化クロロメチルピリジリウムなどのハロゲン塩などを包含する。「非塩型」とは、これらの「塩」が配位していないことであり、「塩形態ではない」とは、これらの塩を含まないことを意味する。
多糖のカルボキシ化反応は、公知の酸化反応を利用して、特に制限なく行うことができる。多糖の水酸基を酸化してカルボン酸とする場合、反応の種類は特に限定されないが、例えば、四酸化二窒素酸化、発煙硫酸酸化、リン酸酸化、硝酸酸化、過酸化水素酸化が挙げられ、各々、試薬を用いて通常知られた反応を選択して酸化することができる。各反応条件はカルボキシ基の導入量により適宜設定することができる。例えば、原料となる多糖をクロロホルムあるいは四塩化炭素中に懸濁させ、四酸化二窒素を加えることにより、多糖の水酸基を酸化してカルボン酸を有する酸型多糖を調製することができる。
多糖のカルボキシアルキル化反応は、公知の方法を利用することができ、特に限定されないが、具体的にカルボキシメチル化反応の場合には、多糖をアルカリ化した後にモノクロル酢酸を使用した反応を選択することが可能である。その反応条件はカルボキシメチル基の導入量により適宜設定することができる。ここでの多糖は、通常、水溶液で反応に供される。
カルボキシ基を導入した酸型多糖は、通常、貧溶媒(通常アルコール)を用いて析出させ、減圧乾燥する。
カルボキシ基を導入した酸型多糖は、通常、貧溶媒(通常アルコール)を用いて析出させ、減圧乾燥する。
本発明では、多糖にカルボキシ基を導入する方法として、上記カルボン酸化またはカルボキシアルキル化のいずれの方法も利用でき、特に限定されないが、カルボキシ基導入反応による多糖の分子量の低下が小さく、カルボキシ基の導入量を比較的コントロールしやすい点で、カルボキシアルキル化、特にカルボキシメチル化が好適である。このカルボキシメチル基を、以下「CM-」とも記す。
活性エステル化に使用される酸型多糖は、その乾燥質量1gあたりのカルボキシ基(該基を1分子とみなして)量が、通常、0.1~5mmol/g、好ましくは0.4~3mmol/g、より好ましくは0.5~2mmol/gである。このカルボキシ基量の割合が、0.1mmol/gより少ないと、該基から誘導され架橋点となる活性エステル基数が不充分になる場合が多い。一方、カルボキシ基量の割合が、5mmol/gより多くなると、活性エステル化多糖(未架橋)が水を含む溶媒に溶解しにくくなる。なお、酸型多糖のカルボキシ基量はフェノールフタレインを指示薬として酸塩基逆滴定により定量することができる。
本発明では、最終的な活性エステル化多糖において、活性エステル化されていないカルボキシ基が残存していてもよい。したがって上記カルボキシ基量は、最終的な活性エステル化多糖における活性エステル基と活性エステル化されていないカルボキシ基の合計量となる。
<活性エステル化>
上記のような酸型多糖と求電子性基導入剤とを反応させ、活性エステル基を形成する。この際に使用される酸型多糖は、単種であっても2種以上併用されても良い。
活性エステル基は、カルボキシ基のカルボニル炭素に、通常のアルコールよりも強い求電子性基が結合した基であり、アルカリ共存下の水存在下でエステル結合が解離する。このような活性エステル基を形成する求電子性基導入剤としては、典型的に、比較的安価に入手可能なN-ヒドロキシアミン系化合物が用いられる。具体的には、N-ヒドロキシスクシンイミド、N-ヒドロキシノルボルネン-2,3-ジカルボン酸イミド、2-ヒドロキシイミノ-2-シアノ酢酸エチルエステル、2-ヒドロキシイミノ-2-シアノ酢酸アミド、N-ヒドロキシピペリジン、N-ヒドロキシフタルイミド、N-ヒドロキシイミダゾール、N-ヒドロキシマレイミド等が代表的なものとして挙げられる。これら化合物を2種以上用いてもよい。
このなかでも、N-ヒドロキシイミド、特に、N-ヒドロキシスクシンイミド(以下、NHSとも記す)が、ペプチド合成分野での実績があり、商業上入手し易いことより好適である。
上記のような酸型多糖と求電子性基導入剤とを反応させ、活性エステル基を形成する。この際に使用される酸型多糖は、単種であっても2種以上併用されても良い。
活性エステル基は、カルボキシ基のカルボニル炭素に、通常のアルコールよりも強い求電子性基が結合した基であり、アルカリ共存下の水存在下でエステル結合が解離する。このような活性エステル基を形成する求電子性基導入剤としては、典型的に、比較的安価に入手可能なN-ヒドロキシアミン系化合物が用いられる。具体的には、N-ヒドロキシスクシンイミド、N-ヒドロキシノルボルネン-2,3-ジカルボン酸イミド、2-ヒドロキシイミノ-2-シアノ酢酸エチルエステル、2-ヒドロキシイミノ-2-シアノ酢酸アミド、N-ヒドロキシピペリジン、N-ヒドロキシフタルイミド、N-ヒドロキシイミダゾール、N-ヒドロキシマレイミド等が代表的なものとして挙げられる。これら化合物を2種以上用いてもよい。
このなかでも、N-ヒドロキシイミド、特に、N-ヒドロキシスクシンイミド(以下、NHSとも記す)が、ペプチド合成分野での実績があり、商業上入手し易いことより好適である。
酸型多糖は、通常、非プロトン性極性溶媒の溶液として上記エステル化反応に供する。非プロトン性極性溶媒とは、電気的に陽性な官能基を有する求核剤と水素結合を形成できるプロトンを持たない極性溶媒であり、特に限定されないが、ジメチルスルホキシド(DMSO)、N,N-ジメチルホルムアミド、N-メチル-2-ピロリドン、N,N-ジメチルアセトアミド、1,3-ジメチル-2-イミダゾリジノンなどが例示される。多糖の溶媒への溶解性が良好であることから、DMSOが好適に利用できる。
上記好ましい「非塩型」の酸型多糖であれば、通常、上記溶媒中で20℃~120℃程度に加熱することにより溶解することができる。
上記好ましい「非塩型」の酸型多糖であれば、通常、上記溶媒中で20℃~120℃程度に加熱することにより溶解することができる。
酸型多糖と求電子性基導入剤とのエステル化反応は、通常、脱水縮合剤の存在下で行われる。
脱水縮合剤は、カルボキシ基と求電子性基導入剤との縮合で生成する水分子を1つ引き抜き、すなわち脱水して、両者をエステル結合させるものである。脱水縮合剤としては、特に限定されないが、例えば、1-エチル-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩(EDC)、1-シクロヘキシル-(2-モルホニル-4-エチル)-カルボジイミド・メソp-トルエンスルホネート等が挙げられる。このなかでは、1-エチル-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩(EDC)が、ペプチド合成分野での実績があり、商業上入手し易いことより好適である。
脱水縮合剤は、カルボキシ基と求電子性基導入剤との縮合で生成する水分子を1つ引き抜き、すなわち脱水して、両者をエステル結合させるものである。脱水縮合剤としては、特に限定されないが、例えば、1-エチル-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩(EDC)、1-シクロヘキシル-(2-モルホニル-4-エチル)-カルボジイミド・メソp-トルエンスルホネート等が挙げられる。このなかでは、1-エチル-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩(EDC)が、ペプチド合成分野での実績があり、商業上入手し易いことより好適である。
上記求電子性基導入剤と脱水縮合剤の仕込み量を調整することにより、最終活性エステル化多糖における活性エステル基量を制御することができる。
具体的には、酸型多糖の全カルボキシ基のモル数(Xmmol)に対する脱水縮合剤のモル数(Zmmol)の比(Z/X)が、前述の反応温度において、0.1<Z/X<50を満たす添加条件であることが好ましい。Z/Xが0.1より小さい場合、脱水縮合剤の添加量が少ないため反応効率が低く、所望の活性エステル基導入率を達成し難くなり、Z/Xが50より大きい場合、脱水縮合剤の添加量が多いため、活性エステル基の導入率は高くなるものの、得られた活性エステル化多糖が水に溶解しにくくなるからである。
また、酸型多糖の全カルボキシ基のモル数(Xmmol)に対する求電子性基導入剤のモル数(Ymmol)は、活性エステル基の導入率に応じた反応量以上を添加すれば良く、特に限定されないが、0.1<Y/X<100を満たす添加条件であることが好ましい。通常、求電子性基導入剤は、酸型多糖の全カルボキシ基1モルに対し、2~30モルの過剰量で用いられる。
具体的には、酸型多糖の全カルボキシ基のモル数(Xmmol)に対する脱水縮合剤のモル数(Zmmol)の比(Z/X)が、前述の反応温度において、0.1<Z/X<50を満たす添加条件であることが好ましい。Z/Xが0.1より小さい場合、脱水縮合剤の添加量が少ないため反応効率が低く、所望の活性エステル基導入率を達成し難くなり、Z/Xが50より大きい場合、脱水縮合剤の添加量が多いため、活性エステル基の導入率は高くなるものの、得られた活性エステル化多糖が水に溶解しにくくなるからである。
また、酸型多糖の全カルボキシ基のモル数(Xmmol)に対する求電子性基導入剤のモル数(Ymmol)は、活性エステル基の導入率に応じた反応量以上を添加すれば良く、特に限定されないが、0.1<Y/X<100を満たす添加条件であることが好ましい。通常、求電子性基導入剤は、酸型多糖の全カルボキシ基1モルに対し、2~30モルの過剰量で用いられる。
エステル化反応工程の反応温度は、特に限定されないが、好ましくは0℃~70℃、より好ましくは、20℃~40℃である。反応時間は反応温度により様々であるが、通常は1~48時間、好ましくは12時間~24時間である。
<酸処理>
従来、上記エステル化反応により生成した活性エステル化多糖は、晶析させて回収するが、本発明では、この析出前に、活性エステル化多糖を多価カルボン酸と接触させる。
多価カルボン酸は、ジカルボン酸以上であればよいが、通常、入手容易なジカルボン酸およびトリカルボン酸から選ばれる。特に、従来医薬品添加物として実績のあるジカルボン酸としてコハク酸およびリンゴ酸、トリカルボン酸としてクエン酸が好ましい。これらを2種以上併用してもよい。
多価カルボン酸の使用量は、通常、求電子性基導入剤の仕込み1モルに対する酸当量で、通常、1当量以上、通常、1~10当量である。この範囲であれば、最終的に水不溶物を生じない活性エステル化多糖乾燥品を得ることができる。好ましくは1.5当量以上である。あまり多すぎると乾燥時の経時的な平均分子量Mw変化率が高くなる傾向があり、好ましくは9当量以下、より好ましくは7.5当量以下である。典型的には、3当量である。
活性エステル化多糖と多価カルボン酸との接触は、具体的には、エステル化反応後の反応液に多価カルボン酸を加え、混合すればよい。混合時間は、特に制限されず、通常1~60分である。
従来、上記エステル化反応により生成した活性エステル化多糖は、晶析させて回収するが、本発明では、この析出前に、活性エステル化多糖を多価カルボン酸と接触させる。
多価カルボン酸は、ジカルボン酸以上であればよいが、通常、入手容易なジカルボン酸およびトリカルボン酸から選ばれる。特に、従来医薬品添加物として実績のあるジカルボン酸としてコハク酸およびリンゴ酸、トリカルボン酸としてクエン酸が好ましい。これらを2種以上併用してもよい。
多価カルボン酸の使用量は、通常、求電子性基導入剤の仕込み1モルに対する酸当量で、通常、1当量以上、通常、1~10当量である。この範囲であれば、最終的に水不溶物を生じない活性エステル化多糖乾燥品を得ることができる。好ましくは1.5当量以上である。あまり多すぎると乾燥時の経時的な平均分子量Mw変化率が高くなる傾向があり、好ましくは9当量以下、より好ましくは7.5当量以下である。典型的には、3当量である。
活性エステル化多糖と多価カルボン酸との接触は、具体的には、エステル化反応後の反応液に多価カルボン酸を加え、混合すればよい。混合時間は、特に制限されず、通常1~60分である。
<後処理>
上記接触の後、従来と同様に活性エステル化多糖を析出させ、回収する。通常、反応液を、過剰量のアルコール、アセトンなどの貧溶媒中に注入して析出させ、デカンテーション、遠心、ろ過などの適宜の方法で回収する。析出物の貧溶媒による洗浄を少なくとも1回繰り返して精製することが好ましい。この析出・精製工程におけるろ過および/または洗浄等の手段により、未反応の求電子性基導入剤、脱水縮合剤、反応副生成物とともに反応系に供した多価カルボン酸も除去され、最終活性エステル化多糖中には実質的に多価カルボン酸は残留しない。
本発明では、この工程後の活性エステル化多糖(イニシャル)の平均分子量Mwは、エステル化前の酸型多糖とほぼ同等である。
上記接触の後、従来と同様に活性エステル化多糖を析出させ、回収する。通常、反応液を、過剰量のアルコール、アセトンなどの貧溶媒中に注入して析出させ、デカンテーション、遠心、ろ過などの適宜の方法で回収する。析出物の貧溶媒による洗浄を少なくとも1回繰り返して精製することが好ましい。この析出・精製工程におけるろ過および/または洗浄等の手段により、未反応の求電子性基導入剤、脱水縮合剤、反応副生成物とともに反応系に供した多価カルボン酸も除去され、最終活性エステル化多糖中には実質的に多価カルボン酸は残留しない。
本発明では、この工程後の活性エステル化多糖(イニシャル)の平均分子量Mwは、エステル化前の酸型多糖とほぼ同等である。
<乾燥>
活性エステル化多糖は、水に不安定であり、析出・精製工程後の活性エステル化多糖は通常減圧乾燥する。減圧乾燥は、45℃以下の温度で、通常、少なくとも1時間好ましくは4時間行うことが望ましい。
本発明の製造工程で得られる活性エステル化多糖は、この減圧乾燥時における経時的な分子量増大が抑制されている。減圧乾燥における経時的平均分子量(Mw)の変化率を求めた場合、一態様例として、本発明で製造されるNHSデキストリンの減圧乾燥時における経時的平均分子量(Mw)変化率は1.8未満であることが好ましく、1.4以下であることがより好ましい。なお、従来の方法で得られる活性エステル化多糖は、減圧乾燥時に通常変化率1.8%以上の経時的な平均分子量Mw増大が観察される。
活性エステル化多糖は、水に不安定であり、析出・精製工程後の活性エステル化多糖は通常減圧乾燥する。減圧乾燥は、45℃以下の温度で、通常、少なくとも1時間好ましくは4時間行うことが望ましい。
本発明の製造工程で得られる活性エステル化多糖は、この減圧乾燥時における経時的な分子量増大が抑制されている。減圧乾燥における経時的平均分子量(Mw)の変化率を求めた場合、一態様例として、本発明で製造されるNHSデキストリンの減圧乾燥時における経時的平均分子量(Mw)変化率は1.8未満であることが好ましく、1.4以下であることがより好ましい。なお、従来の方法で得られる活性エステル化多糖は、減圧乾燥時に通常変化率1.8%以上の経時的な平均分子量Mw増大が観察される。
乾燥した活性エステル化多糖は、必要に応じて、解砕あるいは粉砕し粉末化される。必要であれば篩い分けなどにより、粒径調整を行い任意の粒度分布に調整することもできる。特に限定されないが、通常、平均粒子径数十nm~数百μmの粉末が好ましい。
<活性エステル化多糖>
上記のような本発明の方法で得られる活性エステル化多糖(乾燥品)は、架橋性材料として、通常、水に溶解して使用されるが、その際、ダマなどの不溶分を生じない。
上記のような本発明の方法で得られる活性エステル化多糖(乾燥品)は、架橋性材料として、通常、水に溶解して使用されるが、その際、ダマなどの不溶分を生じない。
本発明に係る活性エステル化多糖は、分子内に上記活性エステル基を少なくとも1つ有するが、架橋マトリックスを形成するためには、通常、1分子中に2以上有する。天然原料由来の多糖は、分子量の異なる分子の混合物であることが多いため、活性エステル基含有率は、その乾燥質量1gあたりの活性エステル基量で表すことが適切であろう。その使用目的によっても異なるが、活性エステル化多糖の乾燥質量1gあたりの活性エステル基量は、通常、0.1~5mmol/g、好ましくは0.1~2mmol/gである。
活性エステル基の導入率(%)は、酸型多糖が有する全カルボキシ基(TC)に対して、得られた活性エステル化多糖中の活性エステル基含有量モル量(AE)の比(AE/TC)に100を乗することで表すことができ、例えば、Biochemistry Vol. 14, No.7(1975), p1535-1541に記載の方法により決定することができる。活性エステル基の導入率が100%未満の場合、活性エステル化多糖は活性エステル基とともにエステル化されていないカルボキシ基を有することを意味する。
本発明の活性エステル化多糖の好ましい態様例として、NHSデキストリンが挙げられる。特に、デキストリンのMwが10~200kDaであり、CM基の導入量が0.5~0.9mmol/gのCMデキストリンを活性エステル化したNHS基導入量0.5~0.7mmol/gのものが好ましく挙げられる。
なお、活性エステル化多糖は、活性エステル基が導入された後も、通常、多糖骨格分子内水酸基を有し、したがって分子内に活性水素含有基を有するが、分子内の活性水素含有基は、これに限定されず、必要に応じて分子内に導入した活性水素含有基をさらに有していてもよい。この場合、活性エステル化多糖の有する活性水素含有基は、1種であっても2種以上であってもよい。活性水素含有基は、たとえば水酸基、1級または2級アミノ基、チオール基などである。
また、活性エステル化多糖は、上記活性エステル基および活性水素含有基に加え、本発明の特性を損なわない範囲であれば、公知の元素、原子団等の官能基を広く含むことができる。このような官能基として具体的には、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン元素;カルボキシ基;カルボキシメチル基、カルボキシエチル基、カルボキシプロピル基、カルボキシイソプロピル基等のカルボキシアルキル基;シリル基、アルキレンシリル基、アルコキシシリル基、リン酸基等が挙げられる。このような官能基は、1種単独でも2種以上が導入されていてもよい。
また、活性エステル化多糖は、上記活性エステル基および活性水素含有基に加え、本発明の特性を損なわない範囲であれば、公知の元素、原子団等の官能基を広く含むことができる。このような官能基として具体的には、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素等のハロゲン元素;カルボキシ基;カルボキシメチル基、カルボキシエチル基、カルボキシプロピル基、カルボキシイソプロピル基等のカルボキシアルキル基;シリル基、アルキレンシリル基、アルコキシシリル基、リン酸基等が挙げられる。このような官能基は、1種単独でも2種以上が導入されていてもよい。
本発明の活性エステル化多糖は、本質的に水酸基すなわち活性水素含有基を多糖分子内に有するため、架橋剤を加えない場合でも、アルカリ下で、分子鎖内または分子鎖間で架橋構造を形成することができる自己架橋性である。アルカリ下とは、pH7超の水分が存在する条件をいう。
また活性エステル化多糖を生体表面に適用すれば、生体表面の活性水素含有基との反応により生体表面への接着性を示す。医療用処置材としての用途では、架橋反応時の温度は通常生体温度であり、熱の架橋反応への寄与は実質的に大きくないが、本発明の活性エステル化多糖は、この温度でのアルカリ下で、架橋マトリックスを形成しうる。
以下に、実施例をもって本発明を一層具体的に説明するが、これらは例として示すものであり、本発明はこれらにより何等限定されるものではない。
また活性エステル化多糖を生体表面に適用すれば、生体表面の活性水素含有基との反応により生体表面への接着性を示す。医療用処置材としての用途では、架橋反応時の温度は通常生体温度であり、熱の架橋反応への寄与は実質的に大きくないが、本発明の活性エステル化多糖は、この温度でのアルカリ下で、架橋マトリックスを形成しうる。
以下に、実施例をもって本発明を一層具体的に説明するが、これらは例として示すものであり、本発明はこれらにより何等限定されるものではない。
(実施例1)NHSデキストリンの調製
1.酸型多糖CMデキストリンの調製
500mLフラスコ中、デキストリン(名糖産業株式会社製サンデックSD#100,Mw15kDa)10gを、純水62.5gにダマや濁りがなくなるまで溶解した後、36wt%NaOH水溶液62.5gを添加して、室温で90分間撹拌した。そこに、クロル酢酸10.31g(109.1mmol)に蒸留水を加え75gとしたクロル酢酸水溶液を添加し、60℃で6時間反応させた。室温まで冷却した後、20%HCl水溶液を80mL添加し、CMデキストリンを含む反応液を得た。
次に、エタノール4450mLおよび水180mLを含む5Lビーカー中に、撹拌下、上記で得た反応液全量を注ぎ込んだ。析出物を濾集し、最初に90%エタノール水溶液2Lで、次にエタノール2Lで洗浄した後、室温で24時間減圧乾燥し、CMデキストリンを得た。
1.酸型多糖CMデキストリンの調製
500mLフラスコ中、デキストリン(名糖産業株式会社製サンデックSD#100,Mw15kDa)10gを、純水62.5gにダマや濁りがなくなるまで溶解した後、36wt%NaOH水溶液62.5gを添加して、室温で90分間撹拌した。そこに、クロル酢酸10.31g(109.1mmol)に蒸留水を加え75gとしたクロル酢酸水溶液を添加し、60℃で6時間反応させた。室温まで冷却した後、20%HCl水溶液を80mL添加し、CMデキストリンを含む反応液を得た。
次に、エタノール4450mLおよび水180mLを含む5Lビーカー中に、撹拌下、上記で得た反応液全量を注ぎ込んだ。析出物を濾集し、最初に90%エタノール水溶液2Lで、次にエタノール2Lで洗浄した後、室温で24時間減圧乾燥し、CMデキストリンを得た。
以下のようにして求めたCMデキストリンのCM基量は0.8mmol/gであった。
酸型多糖のカルボキシ基量の定量:酸型多糖(CMデキストリン)0.2g(Ag)を秤取り、0.1mol/L水酸化ナトリウム水溶液20mLと80vol%メタノール水溶液10mLとの混合溶液に添加し、25℃で3時間撹拌した溶液に、1.0%フェノールフタレイン/90vol%エタノール水溶液を滴下し、0.05mol/L硫酸を使用して酸塩基逆滴定を行い、0.05mol/L硫酸の使用量(V1 mL)を測定する。酸型多糖を添加しないブランクでの0.05mol/L硫酸の使用量(V0 mL)を測定し、下記式(1)に従い、酸型多糖のカルボキシ基量(Bmmol/g)を算出する。なお、使用した0.1mol/L水酸化ナトリウム水溶液、0.05mol/L硫酸の力価は、ともに1.00である。
B=(V0-V1)×0.1÷A ・・・(1)
A:酸型多糖の質量(g)
B:カルボキシ基量(mmol/g)
酸型多糖のカルボキシ基量の定量:酸型多糖(CMデキストリン)0.2g(Ag)を秤取り、0.1mol/L水酸化ナトリウム水溶液20mLと80vol%メタノール水溶液10mLとの混合溶液に添加し、25℃で3時間撹拌した溶液に、1.0%フェノールフタレイン/90vol%エタノール水溶液を滴下し、0.05mol/L硫酸を使用して酸塩基逆滴定を行い、0.05mol/L硫酸の使用量(V1 mL)を測定する。酸型多糖を添加しないブランクでの0.05mol/L硫酸の使用量(V0 mL)を測定し、下記式(1)に従い、酸型多糖のカルボキシ基量(Bmmol/g)を算出する。なお、使用した0.1mol/L水酸化ナトリウム水溶液、0.05mol/L硫酸の力価は、ともに1.00である。
B=(V0-V1)×0.1÷A ・・・(1)
A:酸型多糖の質量(g)
B:カルボキシ基量(mmol/g)
2.CMデキストリンの活性エステル化(NHS導入率75%)
1Lフラスコ内に、上記で得られたCMデキストリン10g(酸基量で8mmol)、DMSO300gを装入し、室温で撹拌して完全に溶解し、N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)(和光純薬工業社製)12g(104mmol)を添加し、室温で撹拌して完全に溶解した。次に、1-エチル-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩(EDC)(和光純薬工業社製)20.1g(104mmol)を添加して、室温で撹拌して完全に溶解した後、23℃で16時間撹拌して反応液1を得た。
1Lフラスコ内に、上記で得られたCMデキストリン10g(酸基量で8mmol)、DMSO300gを装入し、室温で撹拌して完全に溶解し、N-ヒドロキシスクシンイミド(NHS)(和光純薬工業社製)12g(104mmol)を添加し、室温で撹拌して完全に溶解した。次に、1-エチル-3-ジメチルアミノプロピルカルボジイミド塩酸塩(EDC)(和光純薬工業社製)20.1g(104mmol)を添加して、室温で撹拌して完全に溶解した後、23℃で16時間撹拌して反応液1を得た。
3.酸処理
上記反応液1を、表1に示す量のクエン酸と20分間混合して反応液2を得た。
上記反応液1を、表1に示す量のクエン酸と20分間混合して反応液2を得た。
4.回収
メタノール/アセトン=1:4(v/v)2Lを含む3Lビーカー中、撹拌下、反応液2の全量を添加した。静置後、デカンテーションして上澄みを除去し、メタノール/アセトン=1:4(v/v)800mLを添加した。φ95mm桐山ロート,No.5A濾紙を用いて吸引ろ過し、析出物を濾集した。ロート上の濾物を、メタノール/アセトン=1:4(v/v)1600mLで洗浄した。
メタノール/アセトン=1:4(v/v)2Lを含む3Lビーカー中、撹拌下、反応液2の全量を添加した。静置後、デカンテーションして上澄みを除去し、メタノール/アセトン=1:4(v/v)800mLを添加した。φ95mm桐山ロート,No.5A濾紙を用いて吸引ろ過し、析出物を濾集した。ロート上の濾物を、メタノール/アセトン=1:4(v/v)1600mLで洗浄した。
5.乾燥
濾物を40℃で24時間減圧乾燥した。4時間、8時間、24時間の乾燥品NHSデキストリンのGPCによる平均分子量Mwを測定し、時間に対する変化率を求めた。変化率(%)は、時間-Mwのプロットを直線とみなした時の傾きとして算出する。また、各乾燥時間の乾燥品の溶解性試験を行った。これら結果を表1に示す。
得られた乾燥品NHSデキストリンは、ゲル化試験でのゲル化が確認された。
濾物を40℃で24時間減圧乾燥した。4時間、8時間、24時間の乾燥品NHSデキストリンのGPCによる平均分子量Mwを測定し、時間に対する変化率を求めた。変化率(%)は、時間-Mwのプロットを直線とみなした時の傾きとして算出する。また、各乾燥時間の乾燥品の溶解性試験を行った。これら結果を表1に示す。
得られた乾燥品NHSデキストリンは、ゲル化試験でのゲル化が確認された。
<平均分子量Mwの測定条件>
試薬:RO水,硝酸ナトリウム
溶離液の調製:硝酸ナトリウム8.49gを秤量し、RO水で2Lに希釈して、50mM硝酸ナトリウム水溶液とする。
試料溶液の調製:試料10mgを秤量し、溶離液10mLで希釈する。溶液を10回転倒混和し、2時間静置する。得られた溶液はメンブランフィルターに通し、測定バイアルに供する。
HPLC測定条件:
測定装置:東ソー製 ECOSEC HPLC-8320GPC
カラム:Shodex φ8.0×300mm 2本
溶離液:50mM硝酸ナトリウム水溶液
流速:1.0mL/min
カラム温度:40℃
検出器:RI
注入量:100μL
試薬:RO水,硝酸ナトリウム
溶離液の調製:硝酸ナトリウム8.49gを秤量し、RO水で2Lに希釈して、50mM硝酸ナトリウム水溶液とする。
試料溶液の調製:試料10mgを秤量し、溶離液10mLで希釈する。溶液を10回転倒混和し、2時間静置する。得られた溶液はメンブランフィルターに通し、測定バイアルに供する。
HPLC測定条件:
測定装置:東ソー製 ECOSEC HPLC-8320GPC
カラム:Shodex φ8.0×300mm 2本
溶離液:50mM硝酸ナトリウム水溶液
流速:1.0mL/min
カラム温度:40℃
検出器:RI
注入量:100μL
<溶解性試験>
試料0.27gをガラス試験管(15mL)に量り取り、RO水0.54mLを加えて3分間激しく撹拌する。その後、外観を観察し、不溶物の有無を確認した。
試料0.27gをガラス試験管(15mL)に量り取り、RO水0.54mLを加えて3分間激しく撹拌する。その後、外観を観察し、不溶物の有無を確認した。
<ゲル化試験>
試料0.27gをガラス試験管(15mL)に量り取り、RO水0.54mLを加えて3分間激しく撹拌する。その後、0.5M炭酸ナトリウム/炭酸水素ナトリウム水溶液0.18mLを加え、10秒間激しく撹拌した後、試験管を反転させる。混合物の流動が認められなければ、ゲルが形成されたと判断した。
試料0.27gをガラス試験管(15mL)に量り取り、RO水0.54mLを加えて3分間激しく撹拌する。その後、0.5M炭酸ナトリウム/炭酸水素ナトリウム水溶液0.18mLを加え、10秒間激しく撹拌した後、試験管を反転させる。混合物の流動が認められなければ、ゲルが形成されたと判断した。
(実施例2)
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸に代えてコハク酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。ゲル化試験でのゲル化が確認された。
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸に代えてコハク酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。ゲル化試験でのゲル化が確認された。
(実施例3)
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸に代えてリンゴ酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。ゲル化試験でのゲル化が確認された。
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸に代えてリンゴ酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。ゲル化試験でのゲル化が確認された。
(参考例1)
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸に代えて表2に示す3種のモノカルボン酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸に代えて表2に示す3種のモノカルボン酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。
(参考例2)
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸を用いず塩酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。
実施例1の3.酸処理におけるクエン酸を用いず塩酸を3当量用いた以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製した。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。
(比較例1)
実施例1の3.酸処理を省略した以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製したコントロール例を4例示す。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。
実施例1の3.酸処理を省略した以外は実施例1と同様にしてNHSデキストリンを調製したコントロール例を4例示す。実施例1と同様に試験した結果を表2に示す。
Claims (9)
- 酸型多糖のカルボキシ基と求電子性基導入剤とをエステル化反応させ、生成した活性エステル化多糖を多価カルボン酸と接触させた後に析出させ回収する活性エステル化多糖の製造方法。
- 前記沈殿回収後の活性エステル化多糖を減圧乾燥する請求項1に記載の方法。
- 前記多価カルボン酸が、ジカルボン酸およびトリカルボン酸から選ばれる少なくとも1種である請求項1または2に記載の方法。
- 前記多価カルボン酸が、コハク酸、リンゴ酸およびクエン酸からなる群より選ばれる少なくとも1種である請求項1~3のいずれかに記載の方法。
- 前記求電子性化合物が、N-ヒドロキシイミドである請求項1~4のいずれかに記載の方法。
- 前記多価カルボン酸の量が、前記求電子性化合物に対し1.5~7.5当量である請求項1~5のいずれかに記載の方法。
- 前記多糖がデキストリンである請求項1~6のいずれかに記載の方法。
- 前記酸型多糖が、カルボキシ基を導入したデキストリンであり、前記求電子性化合物が、N-ヒドロキシスクシンイミドである請求項1~7のいずれかに記載の方法。
- 請求項1~8のいずれかに記載の方法で得られる活性エステル化多糖。
Priority Applications (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
EP10818740.2A EP2484699B1 (en) | 2009-09-28 | 2010-09-16 | Active esterified polysaccharide and method for producing same |
CN201080042781.0A CN102574930B (zh) | 2009-09-28 | 2010-09-16 | 活性酯化多糖及其制造方法 |
US13/431,549 US20120190839A1 (en) | 2009-09-28 | 2012-03-27 | Active esterified polysaccharide and method for producing same |
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2009222975A JP5604072B2 (ja) | 2009-09-28 | 2009-09-28 | 活性エステル化多糖およびその製造方法 |
JP2009-222975 | 2009-09-28 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
US13/431,549 Continuation US20120190839A1 (en) | 2009-09-28 | 2012-03-27 | Active esterified polysaccharide and method for producing same |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
WO2011037065A1 true WO2011037065A1 (ja) | 2011-03-31 |
Family
ID=43795815
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
PCT/JP2010/066052 WO2011037065A1 (ja) | 2009-09-28 | 2010-09-16 | 活性エステル化多糖およびその製造方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20120190839A1 (ja) |
EP (1) | EP2484699B1 (ja) |
JP (1) | JP5604072B2 (ja) |
CN (1) | CN102574930B (ja) |
WO (1) | WO2011037065A1 (ja) |
Families Citing this family (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
KR102196974B1 (ko) | 2012-11-30 | 2020-12-31 | 파르마코스모스 에이/에스 | 동결 보호제, 동결 보호 및 동결 보존 조성물, 그 용도 및 동결 보존 방법 |
WO2014129382A1 (ja) | 2013-02-25 | 2014-08-28 | テルモ株式会社 | 多糖粉末およびこれを含む癒着防止材 |
GB201320571D0 (en) | 2013-11-21 | 2014-01-08 | Academisch Ziekenhuis Leiden | Glycan analysis |
WO2015150394A1 (en) * | 2014-04-01 | 2015-10-08 | Pharmacosmos A/S | Cryoprotective agent, cryoprotective and cryopreserved compositions, uses thereof, and methods of cryopreservation |
Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004081055A1 (ja) | 2003-02-21 | 2004-09-23 | Terumo Kabushiki Kaisha | 架橋性多糖誘導体、その製造方法、架橋性多糖組成物および医療用処置材 |
WO2005087289A1 (ja) * | 2004-03-15 | 2005-09-22 | Terumo Kabushiki Kaisha | 癒着防止材 |
JP2006271716A (ja) * | 2005-03-29 | 2006-10-12 | Terumo Corp | 血管塞栓材料 |
JP2006334007A (ja) * | 2005-05-31 | 2006-12-14 | Terumo Corp | 生体組織接着性経皮デバイス |
JP2007075540A (ja) * | 2005-09-16 | 2007-03-29 | Terumo Corp | 生体組織置換性表面を持つ医療用材料 |
JP2007236657A (ja) * | 2006-03-09 | 2007-09-20 | Terumo Corp | 創傷被覆材 |
JP2008029824A (ja) * | 2006-06-28 | 2008-02-14 | Terumo Corp | 医療用処置材 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4159981A (en) * | 1968-08-23 | 1979-07-03 | Ciba-Geigy Corporation | Peptides and process for their manufacture |
IT1268955B1 (it) * | 1994-03-11 | 1997-03-18 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Esteri attivi di polisaccaridi carbossilici |
DE19529409A1 (de) * | 1995-08-10 | 1997-02-13 | Wolff Walsrode Ag | Maleinsäureadditionsproduktgruppen enthaltende, thermoplastische und biologisch abbaubare Polysaccharidester/-etherester |
IT1303735B1 (it) * | 1998-11-11 | 2001-02-23 | Falorni Italia Farmaceutici S | Acidi ialuronici reticolati e loro usi medici. |
WO2009133763A1 (ja) * | 2008-05-01 | 2009-11-05 | テルモ株式会社 | 視認性医療用処置材 |
-
2009
- 2009-09-28 JP JP2009222975A patent/JP5604072B2/ja active Active
-
2010
- 2010-09-16 EP EP10818740.2A patent/EP2484699B1/en active Active
- 2010-09-16 WO PCT/JP2010/066052 patent/WO2011037065A1/ja active Application Filing
- 2010-09-16 CN CN201080042781.0A patent/CN102574930B/zh active Active
-
2012
- 2012-03-27 US US13/431,549 patent/US20120190839A1/en not_active Abandoned
Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2004081055A1 (ja) | 2003-02-21 | 2004-09-23 | Terumo Kabushiki Kaisha | 架橋性多糖誘導体、その製造方法、架橋性多糖組成物および医療用処置材 |
WO2005087289A1 (ja) * | 2004-03-15 | 2005-09-22 | Terumo Kabushiki Kaisha | 癒着防止材 |
JP2006271716A (ja) * | 2005-03-29 | 2006-10-12 | Terumo Corp | 血管塞栓材料 |
JP2006334007A (ja) * | 2005-05-31 | 2006-12-14 | Terumo Corp | 生体組織接着性経皮デバイス |
JP2007075540A (ja) * | 2005-09-16 | 2007-03-29 | Terumo Corp | 生体組織置換性表面を持つ医療用材料 |
JP2007236657A (ja) * | 2006-03-09 | 2007-09-20 | Terumo Corp | 創傷被覆材 |
JP2008029824A (ja) * | 2006-06-28 | 2008-02-14 | Terumo Corp | 医療用処置材 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
BIOCHEMISTRY, vol. 14, no. 7, 1975 |
See also references of EP2484699A4 * |
Y. LUO ET AL., BIOCONJUGATE CHEM., vol. 12, 2001, pages 1085 - 1088 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN102574930B (zh) | 2014-09-03 |
EP2484699B1 (en) | 2016-04-27 |
JP5604072B2 (ja) | 2014-10-08 |
EP2484699A4 (en) | 2013-07-24 |
CN102574930A (zh) | 2012-07-11 |
JP2011068827A (ja) | 2011-04-07 |
EP2484699A1 (en) | 2012-08-08 |
US20120190839A1 (en) | 2012-07-26 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6254593B2 (ja) | カルボン酸アルカリ金属塩の存在下でセルロースエーテルのエステルを調製する方法 | |
Liebert et al. | Tailored cellulose esters: synthesis and structure determination | |
KR102108813B1 (ko) | 지방족 카복실산의 존재하의 셀룰로스 에테르의 에스테르의 제조 방법 | |
KR102108814B1 (ko) | 알칼리 금속 카복실레이트 및 지방족 카복실산의 존재하의 에스테르화된 셀룰로스 에테르의 제조 방법 | |
JP6273076B2 (ja) | セルロースエーテルのエステルを調製するための効率的な方法 | |
JP5604072B2 (ja) | 活性エステル化多糖およびその製造方法 | |
KR20150046182A (ko) | 카르복시-관능화된 알테르난 | |
Araki | Polyrotaxane derivatives. II. Preparation and characterization of ionic polyrotaxanes and ionic slide‐ring gels | |
US10307486B2 (en) | Surface modified nanocrystalline cellulose and uses thereof | |
Buranaboripan et al. | Preparation and characterization of polymeric host molecules, β-cyclodextrin linked chitosan derivatives having different linkers | |
JP5527898B2 (ja) | 視認性医療用処置材 | |
Hettrich et al. | New possibilities of the acetosulfation of cellulose | |
JP6749929B2 (ja) | エステル化セルロースエーテルを分画するためのプロセス | |
US20170335019A1 (en) | Process for preparing an ester of a cellulose ether | |
Heinze et al. | Recent advances in cellulose chemistry | |
JP5236218B2 (ja) | 医療用処置材 | |
JP6737810B2 (ja) | 高分子量のエステル化セルロースエーテルを調製するプロセス | |
JP2019531390A (ja) | エステル化セルロースエーテルを調製する効率的な方法 | |
JP6725534B2 (ja) | 極めて高い分子量及び低い粘度のエステル化セルロースエーテルの生成プロセス | |
JP6295380B2 (ja) | 脂肪族カルボン酸の存在下でエステル化セルロースエーテルを調製するためのプロセス |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 201080042781.0 Country of ref document: CN |
|
121 | Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application |
Ref document number: 10818740 Country of ref document: EP Kind code of ref document: A1 |
|
WWE | Wipo information: entry into national phase |
Ref document number: 2010818740 Country of ref document: EP |
|
NENP | Non-entry into the national phase |
Ref country code: DE |