WO2009096737A2 - 신규 유기 게르마늄 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물 - Google Patents

신규 유기 게르마늄 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물 Download PDF

Info

Publication number
WO2009096737A2
WO2009096737A2 PCT/KR2009/000467 KR2009000467W WO2009096737A2 WO 2009096737 A2 WO2009096737 A2 WO 2009096737A2 KR 2009000467 W KR2009000467 W KR 2009000467W WO 2009096737 A2 WO2009096737 A2 WO 2009096737A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
disease
compound
composition
independently
formula
Prior art date
Application number
PCT/KR2009/000467
Other languages
English (en)
French (fr)
Other versions
WO2009096737A3 (ko
Inventor
Seung Wook Ham
Kwang Ho Lee
Duck-Hyung Lee
Ae Ja Park
Original Assignee
Chung-Ang University Industry-Academy Cooperation Foundation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chung-Ang University Industry-Academy Cooperation Foundation filed Critical Chung-Ang University Industry-Academy Cooperation Foundation
Publication of WO2009096737A2 publication Critical patent/WO2009096737A2/ko
Publication of WO2009096737A3 publication Critical patent/WO2009096737A3/ko

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/30—Germanium compounds

Definitions

  • Novel organic germanium compounds and compositions comprising them as active ingredients
  • the present invention relates to a novel organic germanium and anticancer, antiviral, anti-inflammatory, immune disease or composition for improving skin conditions comprising the same as an active ingredient.
  • Germanium (atomic number 32; atomic weight 72.59; melting point 937.4 ° C; boiling point 2830 ° C) is present in various forms of organic and inorganic substances in stones, soil, plants and animals (1). It is contained about 7 ppm in the earth's crust and is a trace element found in the United States, 0,6-1.3 mg Ge / kg in soil and 0.004-0.6 mg Ge / L in water (2, 3). Humans can easily consume germanium from foods including clams, salmon, canned tuna and germanium, such as milk, butter and tomato juice, and the ingested germanium is absorbed by the body almost 96% (1, 4- 6). Germanium compounds are roughly classified into inorganic germanium compounds and organic germanium compounds.
  • inorganic germanium In general, salts or oxides that lack a germanium-carbon bond are classified as inorganic germanium.
  • organic germanium is characterized by having a germanium-carbon bond,
  • Organic germanium compounds were first synthesized variously by Mironov of Russia for the first time in the 1950s, and in 1966 bis (2-carboxyethyl germanium) sesqui oxide (0 3 (GeCH 2 CH 2 C00H) 2 ) was synthesized ( 2 0, 21).
  • Ge-132 9 (FIG. 1). Chemical structures and physicochemical properties of this compound have already been reported (24-26). Ge-132, widely known by the Asai Germanium Research Institute, has since been studied. The studies have shown that Ge-132 is an immunopotentiator (25, 27) for interferon induction, anticancer activity, It has been shown to exhibit a variety of biological effects, including increased NK cell activity, production of cytotoxic macrophages (13, 25, 27-29).
  • Ge-132 an organic germanium compound, is known to be almost non-toxic and even safe at high doses (9, 31). The substance is almost non-toxic because it can be dissolved in water, easily removed from plasma, and released without accumulation in living tissue (3, 9, 13). The fact that Ge-132 has little toxicity is not because the anti-cancer effect of Ge-132 is directly toxic to cancer cells, but because of its immune enhancing ability ( ⁇ 1 ⁇ 1110101 ⁇ ⁇ 3 1 activity) (26). Through subsequent studies, Ge-132 increases the function of CD4, CD8 cells and NK cells, and produces cytokines such as interferon-gamma (IFN-Y) and interleukin-2 (IL-2).
  • IFN-Y interferon-gamma
  • IL-2 interleukin-2
  • Ge-132 By inducing It has been reported to exhibit anti-inflammatory, antiviral and anticancer effects (16 34, 35) by potent immunomodulatory activity. It has been reported to be particularly effective in treating chronic hepatitis B (36). Ge-132 also activates macrophages and T cells, in particular cytotoxic T cells and NK cells, antibody-dependent cellular cytotoxicity (ADCC) and 2 'in peripheral mononuclear cells. Induces 5'-ol igoadenylate synthetase (25, 36, 38, 39). Many different organic germanium compounds have been made and their derivatives have been made.
  • the present inventors have tried to synthesize a new type of organic germanium compound which has high solubility in water and is easily absorbed into a living body.
  • a novel organic germanium compound in which a functional group having high water solubility is introduced into a conventional organic germanium compound was synthesized.
  • the present invention was completed by experimentally confirming that it can be used for the treatment or amelioration of anticancer, anti-inflammatory, antiviral or immune diseases through (apoptosis).
  • Another object of the present invention is a pharmaceutical composition comprising the novel organic germanium compound as an active ingredient, cancer, viral disease, comprising administering to a subject suffering from cancer, viral disease, inflammatory disease or immune disease,
  • the present invention provides a method for preventing or treating an inflammatory disease or an immune disease.
  • Another object of the present invention is to provide a use of the novel organic germanium compound for the manufacture of a drug (medicament) for the prevention or treatment of cancer, viral diseases, inflammatory diseases or immune diseases.
  • the present invention provides a novel organic germanium compound represented by the following formula (1).
  • R 2 and 3 ⁇ 4 may be each independently connected to each other to form a ring
  • R4 is a functional group capable of increasing the solubility of the compound in water (solubi Hty);
  • X is a straight chain or branched chain of Crd-alkyl, C 2 -C 6 alkenyl group, C 2 -C 4 alkynyl group of, a Ci-C 4 alkyl, amino, nitrogen, oxygen, or sulfur;
  • n, 0 are each independently an integer from 0 to 10;
  • Ge is germanium
  • the present invention provides a composition for improving anticancer, antiviral, anti-inflammatory, immune disease or skin condition comprising the compound represented by Formula 1 as an active ingredient.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising ( a ) a pharmaceutically effective amount of a compound represented by the formula (1) and (b) a pharmaceutically acceptable carrier; cancer, viral diseases, inflammatory diseases Or it provides a method of preventing or treating cancer, viral diseases, inflammatory diseases or immune diseases comprising the step of administering to a subject suffering from an immune disease (subject).
  • the present invention provides a use of the compound represented by the formula (1) for the manufacture of a drug (medicament) for the prevention or treatment of cancer, viral diseases, inflammatory diseases or immune diseases.
  • the present inventors have tried to synthesize a new type of organic germanium compound which has high solubility in water and is easily absorbed into a living body.
  • a novel organic germanium compound was synthesized in which a functional group having high water solubility was introduced into the conventional organic germanium compound, and the novel organic germanium compound inhibited interferon-gamma (IFN-Y) induction and suppressed or killed cancer cell lines.
  • IFN-Y interferon-gamma
  • the present invention has been completed by experimentally confirming that it can be used for anti-cancer, anti-inflammatory, anti-viral, immune disease or skin condition improvement, alleviation or treatment.
  • alkyl (alkyl) a straight chain or branched chain of 4 dC means a straight chain or branched chain saturated hydrocarbon having 1 to 4 carbons, such as methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, isobutyl, n-butyl and t-butyl.
  • alkenyl group of C 2 -C 6 refers to a straight or branched chain unsaturated hydrocarbon group having 2 to 6 carbon atoms having at least one double bond, Examples include ethyl, propenyl, isopropenyl, butenyl, isobutenyl, t-butenyl, n-pentenyl and n-nuxenyl.
  • alkynyl group of C 2 -C 4 means a straight or branched chain unsaturated hydrocarbon group having 2 to 4 carbon atoms having at least one triple bond, for example ethynyl, propynyl , 1′butynyl, 2-butynyl.
  • halo refers to a halogen group element, for example fluoro, chloro, bromo and iodo, preferably fluoro, chloro or bromo.
  • alkyl amino means an alkyl group having an amino substituent, preferably an alkyl amino of C 2 -C 4 .
  • Ri, R 2 and 3 ⁇ 4 may be connected to each other independently to form a cycle.
  • the expression "functional group which can increase the solubility of the compound in water” in the specification of the present invention may be any one that can increase the solubility in water of the organic germanium compound of the present invention and is limited to a specific functional group. It does not mean, usually means a functional group having a polar (polar).
  • the term "functional group” includes compounds as well as functional groups.
  • the functional groups capable of increasing the solubility of the compound in water are natural or unnatural sugars, derivatives thereof, amines, ammonium salts, amides, sulfonamides, carbamates, ureas, alcohols, Esters, ethers, organic acids, thiols, sulfides, ketones and aldehydes.
  • natural or non-natural sugar is a sugar derived from natural or non-naturally occurring monosaccharides, disaccharides, trisaccharides and oligosaccharides. saccharides, preferably monosaccharides or disaccharides, more preferably fructose, glucose, galactose, mannose, Sucrose, lactose or maltose.
  • derivative of natural or non-natural sugars refers to natural or non-natural sugars substituted by substituents, which substituents are, for example, amino, hydroxy, halo, nitro, cyano, dC 4 alkyl group, d-C 4 alkoxy group, C 2 -C 6 alkenyl group and the like.
  • organic acid includes, but is not limited to, for example, carboxylic acid, sulfonic acid, carbamic acid, citric acid, lactic acid.
  • R 2 and 3 ⁇ 4 are each independently a linear or branched alkyl of d-, an alkenyl group of C 2 -C 6 or an alkoxy of C 2 -C 4 Neal.
  • R4 is monosaccharide or disaccharide, more preferably fructose, glucose, galactose, mannose, sucrose, lactose or maltose. to be.
  • X is nitrogen, oxygen, or sulfur
  • m, n and 0 are each independently an integer of 0 to 4.
  • the most preferred organic germanium compound of the present invention is a compound represented by the following formula (2).
  • Me is methyl
  • a sugar component derived from a natural or non-natural substance which is a water-soluble characteristic group is introduced, so that the solubility in water is increased, the absorption in the body becomes easy, and the organic germanium is in vivo.
  • the inherent efficacy of having can be fully exhibited.
  • the organic germanium compounds of the present invention significantly increase the induction of interferon-gamma (interferon- ⁇ ), and have an excellent effect of inhibiting the proliferation or killing of cancer cell lines. Therefore, the organic germanium compounds of the present invention are antiimmune, anticancer (ant i-cancer), antiviral (ant i_virus) use ' and various immune diseases caused by abnormal reactions (immune) It can be used for the prevention, treatment or amelioration of disorders).
  • Cancers to which the organic germanium compounds of the present invention can be applied include, for example, stomach cancer, lung cancer, breast cancer, ovarian cancer, liver cancer, bronchial cancer, nasopharyngeal cancer, laryngeal cancer, pancreatic cancer, bladder cancer, colon cancer and cervical cancer, brain cancer, prostate cancer, bone cancer, skin cancer, Includes but is not limited to thyroid cancer, parathyroid cancer and ureter cancer.
  • Viruses that can be treated or prevented by the organic germanium compounds of the present invention include, for example, human immunodeficiency virus (HIV), hepatitis C virus, chronic hepatitis B virus, Human papilloma virus, herpes virus, including but not limited to.
  • HAV human immunodeficiency virus
  • hepatitis C virus chronic hepatitis B virus
  • Human papilloma virus herpes virus, including but not limited to.
  • the organic germanium compound of the present invention can be used for the treatment or prevention of autoimmune diseases.
  • autoimmune diseases For example, rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosis, ⁇ ⁇ hyperimmunoglobulin syndrome, Hashimoto's thyroiditis, multiple sclerosis, and multiple sclerosis.
  • Treatment and prevention of diseases such as progressive systemic sclerosis, myasthenia gravis, type I diabetes, uveitis, allergic encephalomyelitis, glomerulonephritis Or for improvement.
  • the organic germanium compounds of the present invention can also be used for the treatment and prevention of skin manifestations of inflammatory and hyperproliferative skin diseases and immune mediated diseases, for example, psoriasis, atopic dermatitis, contact dermatitis, eczema Dermatitis (eczematous dermatitises), seborrhoeis dermatitis, lichen planus, pemphis, bullous pemphigoid, epidermolysis bullosa, urticaria, angioedema ), Vasculitis (vascuH tides), erythemas, cutaneous eosinophi 1 ias, lupus erythematosus, systemic lupus erythematosus (SLE), acne and alopecia areata ( Alopecia areata), but is not limited thereto.
  • psoriasis atopic dermatitis
  • contact dermatitis eczema Dermatitis (ec
  • the organic germanium compounds of the present invention can be used for the treatment or prevention of eye diseases caused by various autoimmune or other causes.
  • these diseases include keratoconjunctivitis, vernal conjunctivitis, keratitis it, herpetic keratitis, episcleral dystrophia epithelialis corneae, corneal leukoma, Ocular pemphigus, Mooren's ulcer, Scleritis, Graves' opthalmopathy, Vogt-Koyanagi_Harada syndrome, Sarcoidosis, sarcoidosis Includes multiple myeloma.
  • the compounds of the present invention is chronic obstructive respiratory disease (chronic obstructive pulmonary disease; COPD), asthma (asthma) (. E. G., Bronchial asthma, allergic asthma, intrinsic asthma, extrinsic asthma and dust asthma), particularly chronic Or for the treatment and prevention of obstructive airway diseases such as chronic asthma (e.g., terminal asthma and bronchial hypersensitivity), bronchitis, allergic rhinitis, and of mucous membranes and blood vessels Vascular injuries caused by inflammation, ischemic diseases, and thrombosis and hyperprol iferative vascular disease may also be applied.
  • chronic asthma e.g., terminal asthma and bronchial hypersensitivity
  • bronchitis e.g., allergic rhinitis
  • bronchitis e.g., allergic rhinitis
  • Vascular injuries caused by inflammation, ischemic diseases, and thrombosis and hyperprol iferative vascular disease may also be applied.
  • the immune disease or inflammatory disease to which the compound of the present invention is applied is rheumatoid arthritis, inflammatory bowel disease, psoriasis, asthma, atopic dermatis, allergic rhinitis (allergic rhinitis), chronic obstructive pulmonary disease, and eczema (eczema).
  • the organic germanium compound of the present invention has the efficacy or activity of improving the skin condition.
  • it improves psoriasis, improves atopic disease, improves skin moisturizing, improves blotch, improves acne, improves wrinkles, improves skin elasticity, and ages skin.
  • composition of the present invention is provided in the form of a pharmaceutical composition for the treatment or prevention of cancer, inflammatory diseases, viral diseases or immune diseases.
  • Pharmaceutical compositions of the present invention (a) a pharmaceutically effective amount of the compound represented by Formula 1; And (b) a pharmaceutically acceptable carrier.
  • Pharmaceutically acceptable carriers included in the pharmaceutical composition of the present invention are those commonly used in the preparation, lactose, dextrose, sucrose, sorbbi, manny, starch, acacia rubber, calcium phosphate, alginate, Gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyridone, cellulose, water, syrup, methyl cellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil Including, but not limited to.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may further include a lubricant, a humectant, a sweetener, a flavoring agent, an emulsifier, a suspending agent, a preservative, and the like.
  • a lubricant e.g., talc, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, kaolin, a kaolin, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, sorbitol, mannitol, mannitol, mannitol, mannitol, mannitol, mannitol, mannitol, mannitol, mannitol, mann
  • Suitable dosages of the pharmaceutical compositions of the present invention may vary depending on factors such as formulation method, mode of administration, age, weight, sex, morbidity, food, time of administration, route of administration, rate of excretion and reaction in response to the patient. It may be prescribed.
  • the oral dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is preferably per day
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be administered orally or parenterally, and when administered parenterally, may be administered by intravenous injection, subcutaneous injection, intramuscular injection, intraperitoneal injection, transdermal administration, or the like. It is preferable that the route of administration of the pharmaceutical composition of the present invention is determined according to the type of the disease to be applied.
  • the concentration of the organic germanium compound, which is an active ingredient included in the composition of the present invention may be determined in consideration of the purpose of treatment, the condition of the patient, the period of time, etc., and is not limited to a specific range of concentration.
  • the pharmaceutical compositions of the present invention may be prepared in unit dosage form by formulating with a pharmaceutically acceptable carrier and / or excipient according to methods which can be easily carried out by those skilled in the art. Or may be prepared by incorporating into a multi-dose container.
  • the formulation may be in the form of a solution, suspension or emulsion in an oil or an aqueous medium, or may be in the form of axes, powders, granules, tablets or capsules, and may further include a dispersant or stabilizer.
  • the composition of the present invention is provided in the form of a cosmetic composition for improving skin conditions.
  • Cosmetic composition of the present invention (a) a cosmetically effective amount of the compound represented by the formula (1); And (b) a cosmetically acceptable carrier.
  • cosmetic effective amount means that the compounds of the invention described above are sufficient to achieve skin improvement efficacy.
  • Cosmetic compositions of the present invention may be prepared in any formulation conventionally prepared in the art and include, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactants-containing It may be formulated as cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, spray, and the like, but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.
  • the carrier components include animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide. Can be used.
  • lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular, in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellant such as butane or dimethyl ether.
  • a solvent, a solubilizer or an emulsifier is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 Fatty acid esters of, 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic esters, polyethylene glycols or sorbitan.
  • the carrier component is water
  • liquid diluents such as ethanol or propylene glycol
  • suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol esters and polyoxyethylene sorbitan esters, micro Crystalline salolos, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.
  • the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide.
  • Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.
  • ingredients included in the cosmetic composition of the present invention include ingredients commonly used in cosmetic compositions, and include, for example, conventional auxiliaries such as antioxidants, stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments, and flavoring agents. It may include.
  • the composition of the present invention is provided in the form of "functional food composition" for the alleviation or amelioration of cancer, inflammatory disease, viral disease or immune disease.
  • the functional food composition of the present invention includes ingredients that are commonly added in the manufacture of food, and include, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients and seasonings.
  • natural carbohydrates when manufactured with a drink, flavoring agent in addition to the extract of hawthorn as an active ingredient.
  • natural carbohydrates may be included as additional ingredients.
  • natural carbohydrates include monosaccharides (eg, glucose, fructose, etc.); Disaccharides (eg maltose, sucrose and the like); oligosaccharide; Polysaccharides (eg, dextrins, cyclodextrins, etc.); And sugar alcohols (e.g., xylly, sorbitol, erythritol, etc.).
  • natural flavoring agents e.g., taumartin, stevia extract, etc.
  • synthetic flavoring agents e.g., saccharin, aspartame, etc.
  • the novel organic germanium compound of the present invention has high water solubility in the functional group, so that its solubility in water is increased, the absorption in the body is facilitated, and the inherent efficacy of the organic germanium in the body can be fully exhibited.
  • the organic germanium compounds of the present invention significantly enhance the induction of interferon gamma and exhibit excellent inhibition and death of proliferation of cancer cell lines, thereby preventing, treating and treating various immune diseases caused by anticancer, anti-inflammatory, antiviral and immune response abnormalities. Can be used for improvement purposes. [Brief Description of Drawings]
  • 1 is a chemical structural formula of a conventional organic germanium Ge-132 compound.
  • 2 and 3 are structural formulas of various conventional organic germanium compounds synthesized.
  • FIG. 6-9 show cell viability by trypan blue staining assay in normal cells (HaCaT) and cancer cell lines (HeLa, MCF7) treated with Ge-132 and Ge-OH at various concentrations and times. Is the result of measuring.
  • FIG. 6 shows normal and cancer cells treated with Ge-132 by concentration ( ⁇ . ⁇ , 0.2 ⁇ , 0.5 ⁇ , ⁇ , and 2 ⁇ ) for 24 hours.
  • FIG. 7 shows Ge-OH as normal cells and cancer cells. This is the result of treatment for 24 hours by concentration ( ⁇ . ⁇ , 0.2 ⁇ , 0.5 ⁇ , ⁇ , and 2 ⁇ ).
  • FIG. 8 shows normal cells and cancer cells treated with 2 ⁇ Ge-132 by time (12 hours, 24 hours, 48 hours).
  • FIG. 9 shows normal cells and cancer cells with 2 ⁇ Ge-OH per hour (12 hours, 24 hours, 48 hours).
  • 10 to 15 show the results of measuring the viability of cells by Ge-132 and Ge-0H treatment through MTT analysis.
  • Figure 11 shows the MT analysis of the cancer cell Hela cell line treated with Ge-132.
  • 12 shows MTT analysis results of cancer cell MCF7 cell line treated with Ge-132.
  • Figure 13 shows the MTT analysis of normal cell HeCat cell lines treated with Ge-OH.
  • 14 shows MTT analysis of cancer cell Hela cell lines treated with Ge-OH.
  • 15 shows MTT analysis of cancer cell MCF7 cell line treated with Ge-OH.
  • Figures 16-21 show the apoptosis of cancer cell lines treated with Ge-132 and Ge-OH by annexin V / PI staining and flow cytometry. Cells were incubated at 0, 24 and 48 hours in the presence of 2 uM Ge-0H at a concentration of 100,000 cells.
  • Annexin V staining is shown on the X-axis and PI incorporation is shown on the Y-axis.
  • Annexin V + PI- cells are considered early apoptosis, while Annexin V + PI + is considered late apoptosis.
  • Figure 16 shows the result of measuring apoptosis by Annexin V / PI staining and flow cytometry after incubation of normal cell HaCaT cell line with Ge-132.
  • Figure 17 shows the result of measuring the apoptosis by treatment with anneal V / PI staining and flow cytometry after incubation of cervical cancer cells HeLa cell line with Ge-132.
  • Tr i pheny 1 phosphine (9.739 g, 37.13 ⁇ l) was added to the mixture with CBr 4 (12.32 g, 37.13 mmol) and alcohol (2.28 g, 16. 29 mmol) in dry ether (54 mL). . After stirring at room temperature for 2.5 hours, the reaction mixture was extracted with ether (X 3). The total extract was washed with water (X 3), placed in brine (X 1), dried over MgSO 4 and concentrated.
  • Zinc chloride (22.7 g, 166.5 mmol) solution in H0Ac-Ac 2 0 (1: 5 volume ratio, 85 ml) was added to benzyl 2, 3, in H0Ac-Ac20 (1: 5 volume ratio, 126 ml).
  • 4,6-1 etr a-i? -Benzy 1- ⁇ -Dg 1 ucopy r anos i de was added to the solution via a dropping funnel at 0 ° C. After stirring for 2 hours at room temperature, 500 ml of ice-water were added.
  • mice Seven-week-old ICR mice (Japan SLC, Inc. Inasa Production Facility) were used for experiments after stabilization for one week in a clean animal laboratory at Chung-Ang University College of Medicine. Female mice of 8-9 weeks old were used for the experiment, and all experiments were conducted in the clean animal laboratory. The clean animal laboratory was maintained at a temperature of 23 ° C 1 ° C, a humidity of 40-60%, and was continuously ventilated with fresh air (14-18 times / hr), and mice ate food and water for sterilized mice.
  • the organic germanium compound solution dissolved in PBS was orally administered to mice at 100 mg / kg per mouse weight.
  • Methods for collecting blood from mice include sampling from the tail vain, collecting from orbital blood vessels, and collecting through cardiac puncture, among which blood is collected through cardiac puncture. The method was chosen. Other methods have limitations in drawing large amounts of blood from mice, and attempted to draw the entire amount of mouse blood through cardiac puncture. 2-5. Preparation of Serum
  • Blood samples obtained from the mice are sublimed to obtain serum.
  • serum there are two ways to obtain serum. One of them is obtained by placing the blood at room temperature for 2 hours and then uncoiling. The other is obtained by placing at night at 2-8 ° C. overnight and centrifuging at 2000 X g for 20 minutes. In this experiment, serum was obtained by the former method.
  • Quantikik kit (Mouse IFN- ⁇ assay) from R & D systems was used, and the analysis was performed according to the method instructed by the product. Inject 50 ml of Assay Diluent RD1-21 (R & D systems, Quantikine, Mouse IFN- ⁇ ) into the center of each well of the plate frame, and then collect the standard, control and Placed serum samples were placed in each well 50 ⁇ . Mix the plate frame for 1 minute while gently tapping. The plate frame was covered with an adhesive strip provided with the kit, and then incubated for 2 hours at room temperature. The solution of each well was drained completely and washed with wash buffer, and this process was repeated four more times.
  • the induction of IFN ⁇ ⁇ was measured from the serum of mice treated with the novel synthetic organic germanium compound (Ge-OH) of the present invention, which resulted in Ge-132 treatment. Compared with. Ge-132 orally administered mice had increased IFN- ⁇ from 12 to 24 hours and 326.1 pg / ml at 24 hours. In the case of mice administered orally with Ge-OH, the induction of IFN- ⁇ at 324.6 pg / ml after 24 hours was similar to that of Ge-132.
  • Ge-132 and Ge-OH were treated with normal cell lines, HaCaT, cervical cancer cell line Hela, and breast cancer cell line MCF7, respectively.
  • normal cell lines showed good growth in both treated and untreated Ge-132 and Ge-OH, whereas cancer cell lines HeLa and MCF7 did not proliferate after 48 hours by Ge-132 and Ge-OH. It was rapidly suppressed (FIG. 5).
  • each cell line (HaCaT, Hela, MCF7) was treated with Ge-132 and Ge-OH with a difference in concentration and time. Survival was observed. As a result, the cell viability did not change in Ge-132 treated normal cells, but in HeLa, the cervical cancer cell line, the viability decreased after 36 hours in Ge-132 0.5 uM and 12 hours in Ge-132 1 uM in MCF7. After culture, the cell viability was decreased. In the case of Ge-OH treatment, the cell viability did not change as in Ge-132 treatment in normal cell line.
  • each cell line (HaCaT, Hela, MCF7) was treated with Ge-132 and Ge_0H, and then double-stained with Annexin V and PI for flow cytometry. Observation was made by flow cytometric method. Cells in which apoptosis occurred are stained by annexin V when the phosphatidylserine inside the cell membrane is exposed to the outside, so whether the decrease in viability caused by Ge-132 and Ge-OH is caused by apoptosis or necrosis. ) Can be distinguished.
  • Sublet Y. Subchronic oral toxicity (six months) of car boxyethyl germanium sesquioxide in rats. Applied Organometa 11 ic Chemistry (1992), 6 (3): 267-272.
  • Suzuki, F. Suppression of tumor growth by peritoneal macrophages isolated from mice treated with carboxyethylgermanium sesquioxide (Ge—132). Japanese journal of cancer and chemotherapy (1985), 12: 21222128.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

본 발명은 화학식 1로 표시되는 신규 유기 게르마늄 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암, 항바이러스, 항염증 또는 면역질환 개선용 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 신규 유기 게르마늄 화합물은 수용성 특성이 현저히 향상되어 생체에 적용하는 경우 높은 흡수율을 나타내어 게르마늄의 본래 효능을 충분히 발휘할 수 있다. 상기 화학식 1에서, R1, R2 및 R3는 각각 독립적으로, C1-C4의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬(alkyl), C2-C6의 알케닐(alkenyl)기, C2-C4의 알키닐(alkynyl)기, C1-C4의 알킬아미노, 수소, 질소, 산소, 황 또는 할로이고; 상기 R1, R2 및 R3는 각각 독립적으로 서로 연결되어 환을 형성할 수 있고; R4는 화합물의 물에 대한 용해도를 증가시킬 수 있는 작용기이고; X는 C1-C4의 직쇄 또는 가재쇄의 알킬, C2-C6의 알케닐기, C2-C4의 알키닐기, C1-C4의 알킬아미노, 질소, 산소, 또는 황이고; m, n 및 o는 각각 돌립적으로 0 내지 10의 정수이고; Ge는 게르마늄이다.

Description

【명세서】
【발명의 명칭】
신규 유기 게르마늄 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물
【기술 분야】
본 발명은 신규한 유기 게르마늄 및 이를 유효성분으로 포함하는 항암, 항바이러스, 항염증， 면역질환 또는 피부상태 개선용 조성물에 관한 것이다.
【배경 기술】 게르마늄 (Germanium, atomic number 32； atomic weight 72.59; melting point 937.4°C; boiling point 2830°C)은 유기물이나 무기물의 다양한 형태로 돌과 흙， 식물과 동물에 존재한다 (1). 지각에 대략 7 ppm 정도 포함되어 있고， 미국 기준으로 흙에서는 0,6-1.3 mg Ge/kg, 물에서는 0.004-0.6 mg Ge/L 이 발견되는 미량원소 (trace element)이다 (2， 3). 인간은 대합조개， 연어， 캔참치나 우유, 버터， 토마토 주스와 같은 게르마늄올 포함한 음식들을 통해 게르마늄을 쉽게 섭취할 수 있고， 섭취된 게르마늄은 인체에 거의 96% 정도가 흡수된다 (1, 4-6). 게르마늄 화합물은 크게 무기 게르마늄 화합물 (inorganic germanium compound)과 유기 게르마늄 화합물 (organic germanium compound)로 분류한다. 일반적으로 게르마늄 -탄소 결합 (germanium-carbon bond)이 부족한 염이나 산화물들을 무기 게르마늄으로 분류하고 있다. 대표적인 무기 게르마늄인 Ge02 (germanium dioxide)나 게르마늄 시트레이트 락테이트 (germanium citrate lactate)는 신장독성 (nephrotoxicity)을 가지고 있어 급성 신부전증을 일으켜 죽음에 이르게도 한다 (9-12). 이는 무기 게르마늄이 생체 조직에 쌓이기 때문이라고 여겨진다 (2, 13). 이와는 다르게 유기 게르마늄은 게르마늄 -탄소 결합을 가지고 있는 것이 특징이고,
대체응지 (규칙 제 26조) 이 결합은 게르마늄이 탄소와 같은 14 족이기 때문에 안정적인 결합상태를 유지하고 생체 내에서도 쉽게 결합이 깨지지 않으며, 생체 조직에 쌓이지 않고 쉽게 배출되기 때문에 독성이 거의 없다 (3， 9).
1980 년대에는 유기 게르마늄 화합물이 항암효과와 면역조절 기능을 가진다는 많은 연구 결과들이 나오면서 (15-18)， 암과 AIDS 의 진행을 막고 암세포를 죽일 수 있는 항암효과를 가진 면역강화제로써 알려지게 되었다 (1-3， 14， 19). 유기 게르마늄 화합물들은 1950 년대 처음으로 러시아의 Mironov 에 의해서 다양하게 합성되기 시작했고， 1966 년 bis (2- carboxyethyl germanium) sesqui oxide (03(GeCH2CH2C00H)2)를 합성했다 (20, 21). 그 바로 직후인 1967 년, 같은 물질인 bis (2- carboxyethylgermanium)sesquioxide, (03(GeCH2CH2C00H)2)가 일본 도쿄에 있는 아사이 게르마늄 연구소 (Asai Germanium Research Institute)에서 합성되었고 (22, 23), 이를 Ge-132 라 명명하였다 (9) (도 1). 이 화합물에 대한 화학적 구조와 물리화학적 성질은 이미 보고되었다 (24-26). 아사아 게르마늄 연구소 (Asai Germanium Research Institute)에 의해 널리 알려진 Ge-132 는 이후 많은 연구들이 이루어졌고， 그 연구들은 Ge-132 가 면역강화제로써 (25, 27) 인터페론 유도 (IFN induction), 항암 작용， NK 세포 활성의 증가， 세포독성 대식세포 (cytotoxic macrophages)의 생성 등을 포함하는 다양한 생물학적 효능을 보인다는 것을 밝혀왔다 (13， 25, 27-29). 유기 게르마늄 화합물인 Ge-132 는 거의 독성이 없다고 알려져 있고, 심지어는 대용량 (large dose)에서도 독성이 없이 안전하다 (9, 31). 이 물질이 거의 독성이 없는 이유는 물에 녹을 수 있고 혈장으로부터 쉽게 제거되며 생체 조직에 쌓이지 않고 배출되어 지기 때문이다 (3， 9， 13). Ge- 132 가 독성이 거의 없다는 점은 Ge-132 의 항암효과가 암세포에 직접적인 독성을 가지기 때문이 아니라， 면역강화능력(^1腿1110101∞^3 1 activity)을 가지기 때문이다 (26). 이 후 계속적인 연구를 통해， Ge-132는 CD4, CD8 세포의 기능과 NK 세포의 활성을 증가시키고, 인터페론 -감마 (IFN-Y ), 인터루킨 -2 (IL-2)와 같은 사이토카인의 생성을 유도함으로써 강력한 면역 조절활성에 의해 항염효과 (anti-inflammatory effect), 항바이러스효과 (antiviral effect), 항암효과 (antineoplastic effect)(16 34， 35)를 나타낸다고 보고되었다. 특히 만성 B형 간염 (chronic hepatitis B) 치료에도 효과적인 것으로 보고되었다 (36). 또한, Ge-132은 대식세포와 T 세포, 특히 세포독성 T 세포와 NK 세포， 항체 의존적 세포 독성 (antibody— dependent cellular cytotoxicity, ADCC)을 활성화시키고， 말초 단핵세포 (peripheral mononuclear cell)에 있는 2' , 5' -ol igoadenylate synthetase 를 유도한다 (25,36,38, 39) . 지금까지 많은 다양한 유기 게르마늄 화합물들이 만들어지고 또 그들의 유도체들도 만들어졌다. 이들 중 Ge-132 과 더불어 많이 연구된 스피로게르마늄(5^1"08^111311111111)은 암세포에 대한 세포 독성이 인정되어， 현재 항암제로써 임상실험중에 있다 (49-52). 본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
【발명의 상세한 설명】
【기술적 과제】
본 발명자들은 물에 대한 용해도가 높아 생체내로의 흡수가 용이한 새로운 형태의 유기 게르마늄 화합물을 합성하고자 연구 노력하였다. 그 결과， 종래의 유기 게르마늄 화합물에 수용성 특성이 높은 작용기가 도입된 형태의 신규 유기 게르마늄 화합물을 합성하였고， 이 신규 유기 게르마늄 화합물이 인터페론 -감마 (IFN-Y ) 유도와 암세포주의 증식 억제 또는 세포사멸 (apoptosis)를 통해 항암, 항염증， 항바이러스 또는 면역질환의 치료 또는 개선 용도로 사용될 수 있음을 실험적으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 , 본 발명의 목적은 수용성 특성이 증가되어 생체 흡수율이 향상된 새로운 형태의 유기 게르마늄 화합물을 제공하는 것에 있다. 본 발명의 다른 목적은 상기 신규의 유기 게르마늄 화합물을 유효성분으로 포함하는 항암， 항바이러스, 항염증， 면역질환 또는 피부상태 개선용 조성물을 제공하는 것에 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 신규 유기 게르마늄 화합물을 유효성분으로 포함하는 약제학적 조성물올 암， 바이러스 질환， 염증질환 또는 면역질환을 겪는 객체 (subject)에 투여하는 단계를 포함하는 암， 바이러스 질환， 염증질환 또는 면역질환의 예방 또는 치료 방법을 제공하는 것에 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 암， 바이러스 질환, 염증질환 또는 면역질환의 예방 또는 치료용 약물 (medicament)을 제조하기 위한 상기 신규 유기 게르마늄 화합물의 용도를 제공하는 것에 있다. 본 발명의 목적 및 장점은 하기의 발명의 상세한 설명, 청구의 범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
【기술적 해결방법】
본 발명의 일 양태에 따르면， 본 발명은 하기 화학식 1 로 표시되는 신규 유기 게르마늄 화합물을 제공한다.
[ 1]
Figure imgf000006_0001
상기 화학식 1 에서 , 및 ¾ 는 각각 독립적으로， d-d의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬 (alkyl), C2-C6 의 알케닐 (alkenyl )기， C2-C4 의 알키닐 (alkynyl)기, Ci-C4 의알킬아미노, 수소， 질소, 산소， 황 또는 할로이고;
상기 , R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로 서로 연결되어 환을 형성할 수 있고;
R4 는 화합물의 물 (water)에 대한 용해도 (solubi Hty)를 증가시킬 수 있는 작용기이고; X 는 Crd의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬, C2-C6의 알케닐기， C2-C4의 알키닐기， Ci-C4의 알킬아미노， 질소， 산소， 또는 황이고;
m, n 및 0는 각각 독립적으로 0 내지 10의 정수이고;
Ge는 게르마늄이다.
본 발명의 다른 양태에 따르면， 본 발명은 상기 화학식 1 으로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 항암, 항바이러스, 항염증, 면역질환 또는 피부상태 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면， 본 발명은 (a) 상기 화학식 1 으로 표시되는 화합물의 약제학적 유효량 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물올 암， 바이러스 질환， 염증질환 또는 면역질환을 겪는 객체 (subject)에 투여하는 단계를 포함하는 암， 바이러스 질환， 염증질환 또는 면역질환의 예방 또는 치료 방법을 제공한다.
본 발명의 또 다른 양태에 따르면， 본 발명은 암， 바이러스 질환， 염증질환 또는 면역질환의 예방 또는 치료용 약물 (medicament)을 제조하기 위한 상기 화학식 1로 표시되는 화합물의 용도를 제공한다.
본 발명자들은 물에 대한 용해도가 높아 생체내로의 흡수가 용이한 새로운 형태의 유기 게르마늄 화합물을 합성하고자 연구 노력하였다. 그 결과, 종래의 유기 게르마늄 화합물에 수용성 특성이 높은 작용기가 도입된 형태의 신규 유기 게르마늄 화합물을 합성하였고, 이 신규 유기 게르마늄 화합물이 인터페론 -감마 (IFN-Y ) 유도와 암세포주의 증식 억제 또는 사멸을 통해 항암， 항염증, 항바이러스, 면역질환 또는 피부상태의 개선， 완화 또는 치료 용도로 사용될 수 있음을 실험적으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 화합물은 상기 화학식 1 로 표시된다. 본 발명의 화합물을 정의하는 화학식 1 에서， 용어 "d-C4의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬 (alkyl)" 은 탄소수 1-4 의 직쇄 또는 가지쇄 포화 탄화수소를 의미하며 , 예를 들어， 메틸， 에틸， n-프로필， 이소프로필， 이소부틸, n-부틸 및 t-부틸을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
용어 "C2-C6 의 알케닐 (alkenyl)기" 은 최소 하나의 이중 결합을 갖는 2-6의 탄소수를 갖는 직쇄 또는 가지쇄의 불포화 탄화수소기 의미하며 예를 들어， 에테틸， 프로페닐, 이소프로페닐， 부테닐, 이소부테닐， t- 부테닐， n-펜테닐 및 n-핵세닐을 포함한다.
용어 "C2-C4 의 알키닐 (alkynyl)기" 는 최소 하나의 삼중 결합을 갖는 2-4의 탄소수를 갖는 직쇄 또는 가지쇄의 불포화 탄화수소기 의미하며, 예를 들어， 에티닐， 프로피닐， 1ᅳ부티닐， 2-부티닐을 포함한다.
용어 "할로 " 은 할로겐족 원소를 나타내며， 예컨대， 플루오로, 클로로， 브로모 및 요오도를 포함하며， 바람직하게는 플루오로, 클로로 또는 브로모이다.
용어 "알킬 아미노" 는 아미노 치환체를 갖는 알킬기를 의미하며， 바람직하게는 C2-C4의 알킬 아미노이다.
본 발명의 화학식 1 에서 상기 Ri, R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로 서로 연결되어 환 (cycle)을 형성할 수 있다.
본 발명의 명세서에서 표현 "화합물의 물 (water)에 대한 용해도 (solubility)를 증가시킬 수 있는 작용기 "는 본 발명의 유기 게르마늄 화합물의 물에 대한 용해도를 증가시킬 수 있는 것이면 좋고 특정의 작용기로 한정되지 않으며， 통상 극성 (polar)을 갖는 작용기를 의미한다. 상기 용어 "작용기"는 작용기 (functional group) 뿐만 아니라 화합물 (compound)도 포함한다. 바람직하게는， 상기 화합물의 물에 대한 용해도를 증가시킬 수 있는 작용기는 천연 또는 비천연의 당 (sugar), 이의 유도체， 아민， 암모늄염， 아마이드， 설폰아마이드， 카바메이트， 우레아 (urea), 알코올， 에스테르， 에테르 (ether), 유기산 (organic acid), 티을 (thiol), 설파이드 (sulfide), 케톤 및 알데히드를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
용어 "천연 또는 비천연의 당 (sugar)" 은 천연 또는 비천연 유래의 당으로서 모노사카라이드 (monosaccharide), 다이사카라이드 (di saccharide)， 트리사카라이드 (trisaccharide) 및 을리고사카라이드 (oligo-saccharide)를 포함하며, 바람직하게는 모노사카라이드 (monosaccharide) 또는 다이사카라이드 (disaccharide)이며, 보다 바람직하게는 프럭토오스 (fructose), 글루코오스 (glucose)， 갈락토오스 (galactose)， 만노오스 (mannose), 수크로오스 (sucrose)， 락토오스 ( lactose) 또는 말토오스 (maltose)이다. 용어 천연 또는 비천연의 당 (sugar)의 "유도체" 는 치환기에 의해 치환된 천연 또는 비천연의 당을 의미하며, 상기 치환기는 예를 들어 아미노기， 하이드록시기， 할로， 니트로기， 시아노기， d-C4 알킬기， d- C4 알콕시기， C2-C6 알케닐기 등을 포함한다. 용어 "유기산' '은 예컨대 카르복시산, 설폰산， 카르밤산 (carbamic acid), 시트르산 (citric acid), 락트산 (lactic acid)을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 바람직한 화합물에 따르면， 상기 화학식 1 에서， 상기 ， R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로， d- 의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬, C2-C6의 알케닐기 또는 C2-C4의 알키닐이다.
본 발명의 바람직한 구현예에 의하면， 상기 화학식 1에서 상기 R4 는 모노사카라이드 (monosaccharide) 또는 다이사카라이드 (disaccharide)이며， 보다 바람직하게는 프럭토오스， 글루코오스, 갈락토오스, 만노오스， 수크로오스， 락토오스 또는 말토오스이다.
본 발명의 다른 바람직한 구현예에 따르면， 상기 화학식 1 에서 상기 X 는 질소， 산소， 또는 황이며, 상기 m, n 및 0 는 각각 독립적으로 0 내지 4의 정수이다.
본 발명의 가장 바람직한 유기 게르마늄 화합물은 하기 화학식 2 로 표시되는 화합물이다.
[ 2]
Figure imgf000009_0001
단， 상기 화학식 2에서， Me는 메틸이다.
본 발명의 유기 게르마늄 화합물의 구체적인 제조방법은 하기 실시예에 기재되어 있다.
본 발명의 바람직한 합성 유기 게르마늄 화합물에는 수용성 특성이 강한 작용기인 천연 또는 비천연 유래의 당 (sugar)성분이 도입됨으로써 물에 대한 용해도도 높아지고， 생체 내 흡수가 용이하게 되어, 생체내에서 유기 게르마늄이 갖는 본래의 효능이 충분히 발휘될 수 있다.
본 발명의 유기 게르마늄 화합물은 인터페론 감마 (interferon- γ )의 유도를 현저히 증대시키고， 뛰어난 암세포주의 증식 억제 또는 사멸 효능을 갖는다ᅳ 따라서， 본 발명의 유기 게르마늄 화합물은 항염증 (anti- inf lamation), 항암 (ant i -cancer ) , 항바이러스 (ant i_virus) 용도 ' 및 면역반웅의 이상에 의해 발생되는 다양한 면역질환 (immune disorders)의 예방， 치료 또는 개선의 용도에 사용될 수 있다.
본 발명의 유기 게르마늄 화합물이 적용될 수 있는 암은 예컨대 위암， 폐암， 유방암， 난소암， 간암， 기관지암， 비인두암, 후두암, 췌장암, 방광암， 결장암 및 자궁경부암， 뇌암， 전립선암, 골암， 피부암， 갑상선암， 부갑상선암 및 요관암을 포함하나 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 유기 게르마늄 화합물이 치료 또는 예방할 수 있는 바이러스는 예컨대， 인간면역결핍바이러스 (HIV, human immunodeficiency virus), C 형 간염바이러스 (hepatitis C virus), 만성 B 형 간염 바이러스 (chronic hepatitis B virus), 인유두종바이러스 (human papilloma virus), 헤르페스바이러스 (herpes virus)를 포함하나， 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 유기 게르마늄 화합물은 자가면역질환의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 예컨대， 류마티스 관절염 (Reumatoid arthritis), 전신성흥반성낭창 (systemic lupus erythematosis) , Ε一 과면역글로불린혈증증후군 (hyper i隱 unoglobul in E)， 하시모토시갑상선염 (Hashimoto's thyroiditis), 다발성경화증 (multiple sclerosis) , 전신성 경피증 (progressive systemic sclerosis) , 중증근무력증 (myasthenia gravis) , 제 1 형 당뇨 (type I diabetes) , 포도막염 (uveitis), 알레르기성 뇌척수염 (allergic encephalomyelitis), 사구체신염 (glomerulonephritis) 등의 질환의 치료, 예방 또는 개선에 사용될 수 있다.
또한, 본 발명의 유기 게르마늄 화합물은 염증성 및 과증식성 피부질환 및 면역 매개 질환의 피부 발현의 치료 및 예방에도 사용될 수 있고， 이들 질환은 예를 들어， 건선, 아토피성 피부염， 접촉성 피부염， 습진성 피부염 (eczematous dermatitises) , 지루피부염 (seborrhoeis dermatitis) , 편평태선 (lichen planus) , 천포창 (Pemphigus)， 유천포창 (Bullous pemphigoid), 수포성 표피 박리증 (epidermolysis bullosa), 두드러기 (urticaria), 혈관부종 (angioedemas) , 혈관염 (vascuH tides), 흥반 (erythemas)， 피부 호산백혈구증가증 (cutaneous eosinophi 1 ias) , 흥반성 낭창 (Lupus erythematosus) , 전신성 흥반성 낭창 (Systemic Lupus Erythematosus, SLE), 좌창 (acne) 및 원형탈모증 (Alopecia areata)을 포함하나， 이에 한정되지 않는다.
또한, 본 발명의 유기 게르마늄 화합물은 다양한 자가면역성 또는 다른 원인에 의한 안질환 (eye diseases)의 치료 또는 예방에 사용될 수 있다. 이들 질환의 예는 각결막염 (keratoconjunctivitis), 춘계각결막염 (vernal conjunctivitis), 각막염 (kerat it is)， 헤르페스성 각막염 (herpetic keratitis), 상피각막 근위축증 (dystrophia epithelialis corneae) , 각막백반 (corneal leukoma) , 눈천포창 (ocular pemphigus) , 무렌각막궤양 (Mooren's ulcer), 공막염 (Scleritis) , 그레이브스병 (Graves ' opthalmopathy)， 보크트 -고야나기-하라다증후군 (Vogt-Koyanagi_Harada syndrome) , 유육종증 (sarcoidosis)， 다발성 골수증 (multiple myeloma)을 포함한다.
이 밖에도 본 발명의 화합물은 만성 폐색성 호흡기 질환 (chronic obstructive pulmonary disease; COPD)， 천식 (asthma) (예를.들어， 기관지 천식， 알레르기성 천식, 내인성 천식， 외인성 천식 및 먼지 천식), 특히 만성 또는 고질적 천식 (예를 들어， 말기 천식 및 기관지 과민성)， 기관지염 (bronchitis), 알레르기성 비염과 같은 폐색성 기도 질환의 치료 및 예방에 사용될 수 있고, 위 궤양 (gastric ulcer)과 같은 점막 및 혈관의 염증, 허혈성 질환에 의해 발생되는 혈관손상 및 혈전증과 과증식성 혈관질환 (hyperprol iferative vascular disease)도 적용될 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 의하면, 본 발명의 화합물이 적용되는 면역질환 또는 염증성 질환은 류머티스성 관절염， 염증성 장질환 (inflammatory bowel disease), 건선, 천식, 아토피성 피부염 (atopic dermatis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 만성폐색성 기관지 질환 (chronic obstructive pulmonary disease) 및 습진 (eczema)이다.
특히， 본 발명의 유기 게르마늄 화합물은 피부 상태의 개선의 효능 또는 활성을 갖는다. 특히, 건선의 개선， 아토피 질환의 개선, 피부보습 개선， 검버섯 개선， 여드름 개선, 주름 개선， 피부탄력 개선, 피부노화 방지， 탈모 방지， 발모 촉진， 피부노화방지， 상처 재생 및 피부 재생 효능 등을 포함한다.
본 발명의 바람직한 구현예에 의하면， 본 발명의 조성물은 암， 염증질환， 바이러스 질환 또는 면역질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물의 형태로 제공된다. 본 발명의 약제학적 조성물은 (a) 상기 화학식 1 로 표시되는 화합물의 약제학적 유효량; 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함한다.
본 발명의 약제학적 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서， 락토스， 덱스트로스， 수크로스, 솔비를， 만니를， 전분， 아카시아 고무， 인산 칼슘， 알기네이트， 젤라틴， 규산 칼슘， 미세결정성 셀를로스， 폴리비닐피를리돈， 샐롤로스, 물， 시럽， 메틸 셀롤로스， 메틸히드록시벤조에이트， 프로필히드록시벤조에이트， 활석， 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나， 이에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 약제학적 조성물은 상기 성분들 이외에 윤활제， 습윤제 , 감미제, 향미제， 유화제, 현탁제， 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약제학적으로 허용되는 담체 및 제제는 Remington's Pharmaceutical Sciences (19th ed. , 1995)에 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 약제학적 조성물의 적합한 투여량은 제제화 방법， 투여 방식， 환자의 연령, 체중， 성， 병적 상태, 음식， 투여 시간， 투여 경로， 배설 속도 및 반웅 감웅성과 같은 요인들에 의해 다양하게 처방될 수 있다. 한편, 본 발명의 약제학적 조성물의 경구 투여량은 바람직하게는 1 일 당
0.001-100 mg/kg (체중)이다.
본 발명의 약제학적 조성물은 경구 또는 비경구로 투여할 수 있고, 비경구로 투여되는 경우, 정맥내 주입， 피하 주입， 근육 주입, 복강 주입， 경피 투여 등으로 투여할 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 적용되는 질환의 종류에 따라， 투여 경로가 결정되는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분인 유기 게르마늄 화합물의 농도는 치료 목적， 환자의 상태， 필요기간 등을 고려하여 결정할 수 있으며 특정 범위의 농도로 한정되지 않는다. 본 발명의 약제학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약제학적으로 허용되는 담체 및 /또는 부형제를 이용하여 제제화 함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기내에 내입시켜 제조될 수 있다. 이때 제형은 오일 또는 수성 매질중의 용액， 현탁액 또는 유화액 형태이거나 액스제， 분말제, 과립제， 정제 또는 캅셀제 형태일 수도 있으며， 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 의하면， 본 발명의 조성물은 피부상태 개선용 화장품학적 조성물의 형태로 제공된다. 본 발명의 화장품학적 조성물은 (a) 상기 화학식 1 로 표시되는 화합물의 화장품학적 유효량; 및 (b) 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함한다.
본 명세서에서 용어 "화장품학적 유효량 "은 상술한 본 발명의 화합물이 피부 개선 효능올 달성하는 데 층분한 양올 의미한다.
본 발명의 화장품 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어， 용액， 현탁액， 유탁액， 페이스트， 겔， 크림， 로션， 파우더， 비누， 계면활성게 -함유 클린싱， 오일, 분말 파운데이션， 유탁액 파운데이션， 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나， 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는， 유연 화장수， 영양 화장수, 영양 크림 , 마사지 크림， 에센스， 아이 크림， 클렌징 크림， 클렌징 포음， 클렌징 워터， 팩， 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트， 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스， 파라핀, 전분， 트라칸트, 셀를로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜， 실리콘， 벤토나이트， 실리카， 탈크 또는산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크， 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고， 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판 /부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다. 본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매， 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고， 예컨대 물 , 에탄올， 이소프로판올, 에틸 카보네이트， 에틸 아세테이트， 벤질 알코올， 벤질 벤조에이트， 프로필렌 글리콜， 1,3-부틸글리콜 오일， 글리세를 지방족 에스테르， 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물， 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제， 에톡실화 이소스테아릴 알코올， 폴리옥시에틸렌 소르비틀 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제， 미소결정성 샐롤로오스， 알루미늄 메타히드록시드， 벤토나이트， 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트， 지방족 알코올 에테르 설페이트， 설포숙신산 모노에스테르， 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체， 메틸타우레이트， 사르코시네이트， 지방산 아미드 에테르 설페이트， 알킬아미도베타인， 지방족 알코올， 지방산 글리세리드， 지방산 디에탄올아미드， 식물성 유， 라놀린 유도체 또는 에록실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장품 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분과 담체 성분 이외에, 화장품 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민， 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제를 포함할 수 있다.
본 발명의 바람직한 구현예에 의하면， 본 발명의 조성물은 암， 염증질환， 바이러스 질환 또는 면역질환의 완화 또는 개선용 기능성 식품 조성물의 형태 "로 제공된다.
본 발명의 기능성 식품 조성물은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며， 예를 들어， 단백질， 탄수화물， 지방， 영양소 및 조미제를 포함한다.
예컨대， 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분으로서의 후박나무 추출물 이외에 향미제. 또는 천연 탄수화물을 추가 성분으로서 포함시킬 수 있다. 예를 들어, 천연 탄수화물은 모노사카라이드 (예컨대， 글루코오스， 프럭토오스 등); 디사카라이드 (예컨대， 말토스， 수크로오스 등); 올리고당; 폴리사카라이드 (예컨대, 덱스트린， 시클로덱스트린 등); 및 당알코올 (예컨대， 자일리를, 소르비틀, 에리쓰리를 등)을 포함한다. 향미제로서 천연 향미제 (예컨대, 타우마틴， 스테비아 추출물 등) 및 합성 향미제 (예컨대， 사카린 , 아스파르탐등)을 이용할 수 있다 .
【유리한 효과】
본 발명의 신규 유기 게르마늄 화합물은 수용성 특성이 강한 작용기가 도입됨으로써 물에 대한 용해도가 높아져， 생체 내 흡수가 용이하게 되어， 생체내에서 유기 게르마늄이 갖는 본래의 효능이 층분히 발휘될 수 있다. 본 발명의 유기 게르마늄 화합물은 인터페론 감마의 유도를 현저히 향상시키고， 뛰어난 암세포주의 증식 억제 및 사멸 효능을 나타내어, 항암， 항염증, 항바이러스 및 면역반응 이상에 의해 발생되는 다양한 면역 질환의 예방, 치료 및 개선의 용도에 사용될 수 있다. 【도면의 간단한 설명】
도 1은 종래 유기 게르마늄 Ge-132 화합물에 대한 화학 구조식이다. 도 2 및 도 3 는 종래 합성된 다양한 유기 게르마늄 화합물의 구조식이다ᅳ
도 4은 Ge-132 및 Ge-OH로 처리된 마우스에서 IFN-γ 유도를 측정한 결과이다. Ge-132 (-♦— ) 및 Ge-OH (-■-)는 마우스 1kg 당 lOOmg 의 복용량으로 , 12 시간 간격으로 경구투여하였다. IFN-χ는 Ge-132 및 Ge-OH 모두에 의해 유도되었다.
도 5 는 2μΜ 의 Ge-132 및 Ge-OH 로 처리된 정상세포 및 암세포의 형태학적 변화를 관찰한 결과이다. 모든 이미지는 역상 현미경 (inverted microscope)하에서 얻었다. 비처리군에서는 정상세포와 암세포주 모두 증식이 관찰되었다 (패널 A-D, M-P, a-d). Ge-132 및 Ge~0H 로 처리된 정상세포 (HaCat)들은 증식이 관찰된 반면 (패널 E-L), 2μΜ 의 Ge-132 로 처리된 암세포주 (HeLa, MCF7)는 48 시간의 인큐베이션 (incubation) 까지， 2μΜ 의 Ge-OH 로 처리된 암세포주는 24 시간의 인큐베이션 까지 정상적인 증식이 관찰되었으나 (패널 S, V, g, j), 이 이후부터는 세포들이 죽어 배양 디쉬로부터 떨어져 나오는 것이 관찰되었다 (패널 S, W, g, k). 종국적으로, 72 시간의 인큐베이션 후에는 거의 모든 세포들이 원형 형태를 나타내었으며， 배양액위로 부유하는 것을 관찰하였다 (패널 T, X， h, 1). 도 6 - 도 9 는 Ge-132 및 Ge-OH 으로 다양한 농도 및 시간별로 처리된 정상 세포 (HaCaT) 및 암세포주 (HeLa, MCF7)에서 트립판 블루 염색분석법 (trypan blue staining assay)에 의해 세포 생존능을 측정한 결과이다. 도 6 는 정상세포 및 암세포를 Ge-132 으로 농도별 (Ο.ΙμΜ, 0.2μΜ, 0.5μΜ, ΙμΜ, 및 2μΜ)로 24 시간 동안 처리한 결과이고， 도 7 는 정상세포 및 암세포를 Ge-OH으로 농도별 (Ο.ΙμΜ, 0.2μΜ, 0.5μΜ, ΙμΜ, 및 2μΜ)로 24 시간 동안 처리한 결과이다. 도 8 는 정상세포 및 암세포를 2μΜ의 Ge-132으로 시간별 (12시간， 24시간， 48시간)로 처리한 결과이고, 도 9는 정상세포 및 암세포를 2μΜ의 Ge-OH으로 시간별 (12시간， 24시간， 48시간)로 처리한 결과이다.
도 10 - 도 15 은 MTT 분석을 통해 Ge-132 및 Ge— 0H 처리에 의한 세포의 생존능을 측정한 결과이다.
도 10 는 Ge-132 로 처리된 정상세포 HeCat 세포주의 MTT 분석결과이다.
도 11는 Ge-132로 처리된 암세포 Hela 세포주의 MT분석결과이다. 도 12는 Ge-132로 처리된 암세포 MCF7세포주의 MTT분석결과이다. 도 13는 Ge-OH로 처리된 정상세포 HeCat 세포주의 MTT분석결과이다. 도 14는 Ge-OH로 처리된 암세포 Hela세포주의 MTT분석결과이다. 도 15는 Ge-OH로 처리된 암세포 MCF7세포주의 MTT분석결과이다. 도 16 - 도 21 는 Ge-132 및 Ge-OH 로 처리된 암세포주의 세포사멸 (apoptosis)을 아넥신 V(annexin V)/PI 염색법 및 유세포분석법을 통해 측정한 결과이다. 세포들은 100,000 세포 의 농도로 2uM 의 Ge- 0H의 존재하에서 0시간， 24시간 및 48시간을 인큐베이션하였다. 아넥신 V( Annex in V) 및 PI 로 이중 염색을 행한 후, 사멸되는 세포 군집 (apoptotic cell population)을 유세포분석기 (flow cytometry)에 의해 평가하였다. 아넥신 V 염색은 X-축상으로 표시되고, PI 흔입 (PI incorporation)은 Y- 축상으로 표시된다. 아넥신 V+ PI- 세포들은 초기 아폼토시스로 간주되는 반면， 아넥신 V+ PI+은 후기 아폽토시스로 간주된다. 도 16 는 정상세포 HaCaT 세포주를 Ge-132 로 처리하여 인큐베이션한 후 아넥신 V/PI 염색법 및 유세포분석법을 통해 세포사멸을 측정한 결과이다.
도 17 는 자궁경부암세포 HeLa 세포주를 Ge-132 로 처리하여 인큐베이션한 후 아넥신 V/PI 염색법 및 유세포분석법을 통해 세포사멸을 측정한 결과이다.
도 18는 유방암세포 MCF7 세포주를 Ge-132로 처리하여 인큐베이션한 후 아넥신 V/PI 염색법 및 유세포분석법을 통해 세포사멸을 측정한 결과이다.
도 19 는 정상세포 HaCaT 세포주를 Ge_0H 로 처리하여 인큐베이션한 후 아넥신 V/PI 염색법 및 유세포분석법을 통해 세포사멸을 측정한 결과이다.
도 20 는 자궁경부암세포 HeLa 세포주를 Ge-OH 로 처리하여 인큐베이션한 후 아넥신 V/PI 염색법 및 유세포분석법을 통해 세포사멸을 측정한 결과이다.
도 21 는 유방암세포 MCF7 세포주를 Ge-OH 로 처리하여 인큐베이션한 후 아넥신 V/PI 염색법 및 유세포분석법을 통해 세포사멸을 측정한 결과이다. 【발명의 실시를 위한 형태】
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에 있어서 자명할 것이다. 실험방법 및 실험재료
1. 유기게르마늄 화합물의 합성
1-1. 3-(Trimethylgermyl)propanoic acid 의 제조 (참조: Appl . Organometal . Chew, 2004， 28, 384-393； J. Organomet. Chem, 1990, 385, 247-253)
Figure imgf000018_0001
건조 에테르 (11.09 mL)에 있는 trichl or ogermyl propanoic acid (3 g, 11.90 圓 ol) 용액에, 건조 에테르 (11.09 mL)에 있는 methylmagnesium iodide (16.6 mL, 49.9 隱 ol, 3.0 M in diethyl ether) 용액을 0°C에서 질소하에서 교반하면서 천천히 첨가하였다. 반응흔합물을 30 분간 환류시키고, 넁각시킨 후， 회석된 hydrochloric acid 1 N 용액 (10 mL; pH = 4)에 부었다. 에테르층을 분리해내고， 물로 세정하고 (X 2)， 무수 MgS04 하에서 건조시킨 후， 감압하에서 농축시켜 조 (crude) 화합물을 얻었다 (2.811 g, 100%) . 조화합물 (crude residue)을 추가의 정제없이 다음 과정에 사용하였다. ： IR (neat): 2970, 1709 cm"1 ¾ NMR(CDC13, 300 MHz): δ = 2.43 (t, 2 H, J = 8.4 Hz), 1.04 0(t, 2 H, J = 8.4 Hz), 0.15 (s, 9 H) 13C NMR (CDCls, 75 MHz): δ = 181.73, 29.94, 11.40, -2.44 ppm
1-2. 3-(Tr imethylgermyl )一1— propanol 의 제조 (참조: Appl. Organometal. Chem, 2005, 19, 372-376)
LAH, ether Ge OH
Figure imgf000018_0002
it, overnight 81 % 디에틸에테르 (1그 5 mL)내에서의 3-(Tr imethylgermyl )propanoic acid (2 g, 10.48 mmol)올 디에틸에테르 (17.5 mL)내에서의 LiAlH4 (954 mg, 25.16 mmol)의 현탁액에 첨가하고， 약하게 환류시켰다. 흔합물을 상온에서 12 시간 동안 교반하였다. MeOH (10 mL)를 적하 (dropwise)하여 첨가한 후， 물 (4 mL)을 첨가하고， LAH 를 celite 패드를 통한 여과에 의해 제거하였다. 총 여과물을 진공하에서 증발시키고 잔여물을 실리카 겔 상에서의 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (flash column chromatography) ( Hexane: EtOAc = 2 ： 1)에 의해 정제하여 알코올 화합물을 얻었다 (1.5 g, 81 ) ： IR (neat) ： 3322, 2931 cmᅳ1 ¾ NMR(CDC13( 300 MHz): δ = 3.63 (t, 2 H, J = 6.6 Hz), 1.67 (m, 2 H)' 1.32(s, 1 H), 0.71 (m, 2 H), 0.13(s
(CDCls, 75 MHz): δ = 65.55, 28.29, 12.34, -2.36 ppm
1—3. l-Bromo-3-(tr imethylgermyl )propane 의 제조 (참조: Organic Letter, 2006, 8, 661-664)
Figure imgf000019_0001
Tr i pheny 1 phosph i ne ( 9.739 g, 37.13隱 ol)을 건조 에테르 (54 mL)내의 CBr4 (12.32 g, 37.13 mmol) 및 알코을 (2.28 g, 16. 29 mmol)과의 흔합물에 첨가하였다. 상온에서 2.5 시간 동안 교반한 후, 반응 흔합물을 에테르로 추출하였다 (X 3). 총 추출물을 물로 세정하고 (X 3), 염수에 둔후 (X 1)， MgS04에 대해 건조시키고， 농축시켰다. 잔여물을 실리카 겔상에서의 플래쉬 컬럼 크로마토그래피 (/2— Hexane:EtOAc = 2:1)로 정제하여 브로마이드 화합물을 얻었다 (4.8 g, 100 %)： IR (neat): 2968, 1236 cm"1 ¾ NMR(CDC13> 300 MHz): δ = 3.40 (t, 2 H, J = 7.2 Hz), 1.94 (m, 2 H), 0.81 (m, 2 H) 0.14 (s, 9 H) ； 13C NMR (CDC13, 75 MHz): δ = 36.86, 29.20, 15.85, - 2.28 ppm
1—4. Benzyl 2,3,4,6-tetr a-(9-benzy 1 - β -D-g 1 ucopyr anos i de 의 제조 (참조 Carbohydrate Research, 2005， 340, 1213-1217； Tetrahedron Letter,
2953-2956)
Figure imgf000019_0002
50% 수성 소디엄 하이드록사이드 (sodium hydroxide, 16.6 mL, 208.1 瞧 ol)를 심하게 교반한 무수 DMS0 (466 ml)내의 D-글루코오스 (15 g, 83.26 mmol)용액에 첨가하였다. 곧 이어서， 벤질 브로마이드 (benzyl bromide, 25 ml, 208.1 画 ol)을 상온에서 적하방식 (dropwise)으로 첨가하고， 흔합물을 50°C에서 2 시간 동안 교반하였다. 이어서， 50% 수성 소디엄 하이드록사이드 (16.6 mL, 208.1 mmol) 및 벤질 브로마이드 (25 ml, 208.1 圆 ol)를 연속적으로 첨가하고， 흔합물을 50°C 에서 2 시간 동안 교반하였다. 이어서， 50% 수성 소디엄 하이드록사이드 (13.3 ml 166.5 画 ol) 및 벤질 브로마이드 (20 ml 166.5 mmol)를 이전과 같이 첨가하고， 흔합물을 50°C에서 24 시간동안 교반하였다. DMS0 및 물 (water)의 부피 비율을 약 10： 1 가 되도록 조정하였다. 반응흔합물을 디에틸 에테르로 추출하였다 (x3). 추출물을 물과 염수로 세정하고， MgS04 에 대해 건조시킨 후 농축시켰다. MeOh 로부터 재결정화를 통해 생성물올 얻었다 (25 g, 48%)： [ a ]24 D = + 8.56 (c = 0.025, CHC13); M.P: 77.8 °C IR (neat): 3031, 2867， 1071, 697 cm—1 ¾ NMR(CDC13> 300 MHz): δ = 3.40-3.80 (m, 6 H), 4.40- 5.00 (m, 11 H), 7.10-7.40 (m, 25 H); 13C NMR(CDC13, 75 MHz): δ = 138.71, 138.52, 138.32, 138.23, 137.60, 128.49, 128.31, 128.07, 128.00, 127.88, 102.73, 84.86, 82.43, 78.01, 75.83, 75.12, 75.02， 73.61, 71.27, 69.06； HRMS (EI): m/z calcd for C41H42Na06 (M+Na) 653.2879, found 653.2882 Anal. Found: C, 78.0549； H, 6.7791, calcd.： C, 78.07； H, 6.71； 0,15.22.
1-5. Benzyl 6-6>-acet y 1 -2 , 3 , -t r i -^benzy 1 - β -D- glucopyranoside 의 제조 (참조: Carbohydrate Research, 2005 , 340, 1213- 1217)
Figure imgf000020_0001
H0Ac-Ac20 (1:5 volume ratio, 85 ml)내에서의 염화아연 (22.7 g, 166.5 mmol) 용액을 H0Ac-Ac20 (1:5 volume ratio, 126 ml) 내에서의 benzyl 2 , 3 , 4 , 6- 1 e t r a- i?-benzy 1 - β -D-g 1 ucopy r anos i de (21 g, 33.3 mmol) 용액에 0°C에서 적하 깔때기를 통해 첨가하였다. 상온에서 2시간 동안 교반한 후, 500ml 의 얼음 -물을 첨가하였다. 생성된 백색 침전물을 여과하고， 과량의 물로 세정하고， 핵산 (hexane)으로부터 재결정하여 원하는 아세테이트를 얻었다 (10 g, 53%)： [ a ]24 D = + 3.57 (c = 0.03， CHC13); M.P: 105 °C IR (neat ) ： 3031, 2896, 1730, 1244 cm-1 1H NMR(CDC13, 300 MHz): δ = 2.06 (s, 1 H, -C0CH3), 3.40-3.80 (m, 6 H, H-2, H— 2, H-3, H-4, H— 5)， 4.24 (dd, 1 H, H-6a) , 4.37 (dd, 1 H, H-6b) , 4.50-5.00 (m, 9 H, H-l, -0CH2Ph 8H), 7.20-7.40 (m, 20 H); 13C NMR(CDC13, 75 MHz): δ = 170.91, 138.56, 138.42, 137.89, 137.31, 128.63， 128.58, 128.55, 128.50, 128.30, 128.23 128.164, 128.10, 128.02, 127.83, 102.55， 84.845, 82.35, 75.87, 75.15, 75.03， 73.02, 71.34， 63.29, 21.04； HRMS (EI):m/z calcd for C36H38 Na07 (M+Na) 605.2516, found 605.2518 Anal. Found: C, 74.1605 ； H, 6.6610 ， calcd.： C, 74.21； H, 6.57； 0,19.22
1—6. Benzyl 2 , 3 , ~t r i -^benzy 1 - β -D-g 1 ucopyr anos i de 의 제조 (참조: Carbohydrate Research, 2005 , 340, 1213-1217)
Figure imgf000021_0001
메탄올 (57 ml) 내에서의 글루코실 6-아세테이트 (10 g, 17.16 隱 ol) 및 포타슘 카보네이트 (11.86 g, 85.8 mmol)용액을 상온에서 2 시간 동안 교반하였다. 반응을 NH4C1 으로 퀀칭 (quenching)한 후, 반웅 흔합물을 에틸 아세테이트로 추출하고 (χ3), 물 (χ3) 및 염수 (xl)로 세정하고, MgS04에 대해 건조시켰다. 에탄올로부터 재결정화하여 조 (crude) 1 차 알코올을 얻었다. : [ a ]24 D = + 1.9 (c=0.035, CHC13)； M.P: 90.1 °C IR (neat): 3332, 3060， 2914, 1092cm—1 ¾ NMR(CDC13, 300 MHz): δ = 1.80 (dd, 1 H，― OH), 3.77 (m, 1 H), 3.45 - 3.60 (m, 2 H), 3.64 - 3.74 (m, 2 H), 3.87(m, 1 H), 4.55 - 4.97 (m, 9 H, H-1,-0CH2 Ph 8 H), 7.20 - 7.40 (m, 20 H); 13C NMR(CDC13, 75 MHz): δ = 138.73, 138.54, 138.20, 137.49, 128.63, 128.52, 128.49, 128.26， 128.19, 128.11， 128.00, 127.82, 127.77, 103.04, 84.76, 82.54, 75.82, 71.82, 62.30 ppm; HRMS (EI):m/z calcd for C34H36 Na06 (M+Na) 563,2410 found 563.2409 Anal. Found: C, 75.5068 ； H, 6.7545 ， calcd.： C, 75.53； H, 6.71； 0,17.76
1-7. 6-0- [3-(Tr imethylgermyl )propy 1 ]-1,2, 3 ,4-tet ra-O-benzyl- β -D- glucopyranoside 의 제조 (참조: Tetrahedron Letter, 1995, 36, 2953-2956).
Figure imgf000022_0001
DMS0(5 mL)내의 TBAK386 mg, 1.05 mmol)와 알코올 (2.26 g, 4.17 mmol)의 용액에， 50% 수성 NaOH (0.59 mL, 7.32 mmol)를 첨가하고 이어서 DMS0C3.8 mL)내의 게르마늄 브로마이드 (500 mg, 2.09 mmol)용액을 순차적으로 첨가하였다. 생성된 어두운 갈색 용액을 상온에서 밤샘 교반하였다. 생성된 현탁액을 물에 붓고， 수성층을 에테르로 추출하였다 (X 3). 총 유기 추출물을 물로 세정하고 (X 3), MgS04에 대해서 건조한 후, 감압하에서 농축시켰다. 잔여물을 플래쉬 크로마토그래피 Hlexane ： EtOAc = 3 ： 1)에 의해 정제하여 60-[3-(trimethylgermyl)propyl] - 1,2,3, 4t et r aObenzy 1 D-g 1 ucopyr anos i de (703 mg, 48 %)을 얻었다. ： [ a]24 D = + 8.25 (c=0.02, CHC13); M.P: 55.8 °CIR (neat): 3066, 2903, 1071， 697 cm"1 :H NMR(CDC13, 300 MHz): δ = 7.39 - 7.26 (m, 20 H), 4.99 - 4.61 (m, 8 H), 4.51 (d, 1 H, J = 6.6 Hz), 3.74 - 3.36 (m, 8 H), 1.71 (m, 2 H), 0.74 (m, 2 H), 0.11 (s, 9 H); 13C NMR (CHC13, 75 MHz): δ = 138.75， 138.56, 138.43, 137.63， 128.56, 128.51, 128.46, 128.32, 128.08 128.04， 127.86， 127.77, 102.72, 98.71, 84.88， 82.45, 78.12, 75.86, 75.104, 74.65, 71.23, 69.79, 25.36, 12.85, -2.27； Anal. Found: C, 68.6387； H, 7.2713, calcd.： C, 68.69 ； H, 7.21； Ge, 10.39； 0,13. 72 %； HRMS: m/z calcd C40H5oGe Na06 [M+Na]+ 723.2819, found 723.2715
-8. 6-0- [ 3- ( Tr i met hy 1 ger my I ) pr opy 1 ] - β -D-g 1 ucopyr anos i de 의 제조
(참조: Carbohydrate Research, 2001, 330, 309-318； Organic Letter, 2006 8, 3757-3760) ¬에 eᅳ L ,jt2v B0Ac.E謂
rt,2das,10fl¾
Figure imgf000022_0002
Et0Ac(1.9 mL) EtOH(3.85 mL)내에서의 β -D-g 1 ucopyr anos i de ( 404 mg, 0.578 mmol)의 용액을 상온에서 PdC(10% wt , 600 mg)의 존재 및 ¾ 벌룬 (balloon)분위기하에서 2 일 간 수소화시켰다. 촉매는 Celite 패드 및 실리카 겔 층을 통한 여과에 의해 제거하고, EtOAc (약 30mL)Me0H (약 10 mL)로 심하게 세정하였다. 총 여과물을 진공하에서 증발시켜 조 (crude)생성물을 얻었다 (201 mg, 100%) . 조잔여물은 추가 정제없이 다음 단계에서 사용하였다: [a]24 D = + 0.727 (c=0.125, DMS0)； Μ·Ρ: 119.2 °C IR (neat): 3325, 2908, 1053cm— 1 ¾醒(¾0, 300 MHz): δ = 5.16 (d, 1 H, a- isomer), 4.58 (d, 1 H, Z isomer), 3.90 (m, 1 H), 3.78 - 3.29 (m, 7 H), 3.221 (t, 1 H), 1.67 (m, 2 H), 0.67 (t, 2 H), 0.06 (s, 9 H); 13C NMR (DMS0, 75 MHz): δ = 96.95, 92.32, 76.79， 75.32, 73.36, 70.84, 70.75, 70.56, 70.45， 24.96, 12.44， -2.15 ppm; HRMS: m/z calcd Ci2¾6Ge06 [M+Na]+ 363.0941, found 363.0841
1-9. 6-0-[3-(Tr imethylgermyl )propyl ]-1,2,3, 4-t et r aᅳ으 acety 1- β -D— glucopyranoside 의 제조 (참조: Organic Letter, -664)
Figure imgf000023_0001
상온에서 피리딘 (pyridine, 2.48 mL)내의 β -D-g 1 ucopyr anos ide (222 mg, 0.66 mmol) 용액에 acetic anhydride (1.24 mL)를 첨가하였다. 반응흔합물을 상온에서 24 시간 동안 교반한 후， 흔합물을 물에 붓고, 디에틸 에테르로 회석하였다. 수성층을 에테르로 추출하고 (X 3) 총 유기 추출물을 물로 세정하고 (X 3), 피리미딘이 사라질 때까지 CuS04 용액으로 포화시키고 (X 2)， 염수로 처리하였다 (X 1). 유기 추출물을 MgS04 에 대해 건조시키고， 감압하에서 농축시켜 조생성물을 얻었다. 조생성물을 실리카겔상 ( —Hexane ： EtOAc = 2 ： 1)에서 정제하여 테트라아세테이트 (271 mg, 82%)를 얻었다: [a]24 D = + 4.23 (c=0.03, CHC13) M.P: 69 °C IR (neat): 2963,1744 cm"1: ¾ NMR(CDC13, 300 MHz): δ = 6.34 (d, 1 H, a~ isomer), 5.72 (d, 1 H, Zr isomer), 5.50 (t, 1 H), 5.25 -5.06 (m, 3 H) , 4.07 (m, 1 H), 3.76 (m, 1 H), 3.59-3.36 (m, 6 H), 2.05 (s, 3 H), 2.03 (s, 6 H), 2.02 (s, 3 H), 1.60 (m, 2 H),0.67 (m, 2 H), 0.11 (s, 9 H)'; 13C NMR (CDC13( 75 MHz): δ = 170.45， 170.33, 169.78, 169.38, 169.11, 168.97, 91.87, 89.26, 74.82, 74.73, 74.16， 73.13, 71.30, 70.51, 70.12, 69.43, 69.18， 68.92, 25.07, 21.02, 20.95, 20.78, 20.72, 20.67, 20.56, 12.51, 1.12, -2.33 HRMS: m/z calcd C20H34Ge Na010 [M+Na]+ 531.1364, found 531.1264
2. 동물 실험
2-1. 유기 게르마늄 화합물 용액의 제조
동물 실험을 위해 합성한 유기 게르마늄 화합물 Ge-OH ： (6-0-[3- (Trimethylgermyl )propyl ]-1,2,3,4 tetraOacetyl— β—D— glucopyranoside)을 동물실험 들어가기 바로 전에 멸균 phosphate-buffered saline (PBS, H 7.4)에 녹여서 사용하였다.
2-2. 마우스
7 주 된 ICR 마우스 (Japan SLC, Inc. Inasa Production Facility)를 중앙대학교 의과대학에 있는 청정동물연구실에서 1 주일 간 안정화 (stabilization) 시킨 후 실험에 사용하였다. 실험에는 8~9 주 된 암컷 마우스를 사용하였고, 모든 실험은 청정동물연구실에서 진행하였다. 청정동물연구실은 온도 23士 1°C, 습도 40-60%로 유지되고 신선한 공기로 계속 환기되며 (14-18회 /hr), 마우스는 살균된 마우스용 먹이와 물올 먹었다.
2-3. 먹이
PBS에 녹인 유기 게르마늄 화합물 용액을 마우스 무게당 100mg/kg이 되도록 하여 마우스에게 경구투여 (oral administration) 하였다.
2-4. 혈액 채취
마우스로부터 혈액올 채취하는 방법에는 꼬리정맥 (tail vain)에서의 채취, 안와혈관 (orbital blood vessel)에서의 채취， 심장천공 (cardiac puncture)을 통한 채취 등이 있지만， 그 중에서 심장천공을 통한 혈액채취 방법을 선택하였다. 다른 방법들에서는 마우스로부터 많은 양의 혈액을 뽑는 데에 제한점이 있어 심장천공을 통하여 마우스 혈액 전량을 뽑고자 하였다. 2-5. 혈청의 준비
마우스로부터 얻은 혈액 샘플을 웅고시켜 혈청 (serum)을 얻는다. 통상적으로 혈청을 얻는 방법에는 2 가지가 있다. 그 중 하나는 혈액을 2 시간 동안 상온에 두어 웅고시킨 후 얻는 방법이고, 또 다른 하나는 2- 8°C에서 밤샘 둔 후 2000 X g 로 20 분 동안 원심분리하여 얻는 것이다. 이 실험에서는 전자의 방법으로 혈청을 얻었다.
3. 분석방법
3-1. IFN-γ 분석
IFN- γ 분석에는 R&D systems 의 Quant ikine kit (Mouse IFN- γ assay)을 이용하였고, 제품에 지시된 방법에 따라 분석을 행하몄다. 플레이트 프레임 (plate frame)의 각 웰 (well)의 가운데에 Assay Diluent RD1-21 (R&D systems, Quant ikine, Mouse IFN-γ)을 50 ^씩 넣은 후, 표준 (standard)와 대조군 (control )， 모아둔 혈청 샘플을 각 웰에 50 ^씩 넣었다. 플레이트 프레임을 가볍게 특록 치면서 1 분 동안 섞었다. 해당 키트 (kit)에 같이 제공된 접착성 스트립 (adhesive strip)으로 플레이트 프레임을 덮은 후 상온에서 2시간 동안 배양하였다. 각 웰의 용액을 완전히 뽑아내고 세정 버퍼 (wash buffer)로 씻어낸 후， 이 과정을 4 번 더 반복하였다. 플레이트 (plate)를 뒤집어서 깨끗한 종이타을로 남아있는 세정 버퍼를 닦아내었다. 다시 플레이트 프레임의 각 웰에 마우스 IFN-Y 컨쥬게이트 (conjugate) 100 峰 첨가하고 새 접착성 스트립으로 덮은 후 다시 상온에서 2 시간 동안 배양하였다. 용액을 제거하고 씻는 과정을 전과 같이 5 번 반복하였다. 각 웰에 기질용액 (substrate solution)을 100 ^씩 첨가하고 상온에서 30 분 동안 배양하였다. 이 때 빛에 노출시키지 않도록 유의하였다. 각 웰에 정지 용액 (stop solution)을 100 ^씩 첨가 한 후 플레이트를 가볍게 쳐서 완전히 섞이도록 하였다. 이 후 ELIS Enzyme- Linked I睡 unosorbent Assay)를 이용하여 450 nm 의 파장에서 각 웰의 광학밀도 (optical density)를 측정하였다. 실험결과
1. 본 발명의 유기 게르마늄 화합물에 의한 IFN-Y의 유도
본 발명의 합성 유기 게르마늄 화합물의 항 바이러스 효과를 검증하기 위해 본 발명의 신규 합성 유기 게르마늄 화합물 (Ge-OH)로 처리한 마우스의 혈청으로부터 IFNᅳ γ의 유도를 측정하고， 이를 Ge-132 처리 결과와 비교하였다. Ge-132 경구 투여한 마우스의 경우 12 시간에서 24 시간 까지 IFN-γ 가 증가하였으며 24 시간에는 326.1pg/ml 였다. Ge- OH로 경구투여한 마우스의 경우도 24 시간 후에 324.6 pg/ml 로 IFN-γ의 유도가 Ge-132를 투여한 경우와 비슷하였다. 그러나 Ge-OH로 처리한 경우 72시간까지 IFNᅳ γ 양이 존재하는 것으로 관측되어 Ge-132가 48시간 까지 유도하는 것에 비하여 총 IFN-Y의 유도양은 더 많은 것으로 확인되었다. 이 실험 결과는 3번 이상 반복하여 얻은 걸과이다 (도 4).
2. 본 발명의 유기게르마늄 화합물의 항암효과
2-1. 광학현미경에 의한 암세포주의 증식율 관찰
생물학적 분석방법에 의한 항암 효과를 측정하기에 앞서， 광학현미경을 이용하여 Ge-OH 에 의한 암세포주 증식율 변화를 관찰하였다. 정상세포주인 HaCaT 과 자궁경부암세포주 Hela, 유방암세포주 MCF7 에 Ge- 132 와 Ge-OH 를 각각 처리한 후 광학현미경을 통해 세포의 증식률을 관찰하였다. 그 결과, 정상세포주는 Ge-132 와 Ge-OH 를 처리한 것과 처리하지 않은 것 모두 잘 증식한 반면， 암세포주인 HeLa 와 MCF7 은 Ge- 132 과 Ge-OH 처리에 의해 48 시간 이후 세포의 증식이 급격히 억제되었다 (도 5).
2-2. 트립판 블루 분석법 (trypan blue assay)에 의한 암세포주 생존율 측정
Ge-132 와 Ge-OH 처리에 따른 암세포주의 생존율 변화를 관찰하기 위하여 각 세포주 (HaCaT, Hela, MCF7)에 농도 및 시간 차이를 두고 Ge- 132 와 Geᅳ OH 를 처리한 후 트립판 블루 분석 (trypan blue assay)을 통해 살아있는 세포수를 측정하였다. 그 결과 정상세포주인 HaCat 에서는 세포의 생존율이 큰 변화가 없었으나 자궁경부암 세포주 Hela 와 유방암세포주 MCF7 에서는 암세포주의 세포생존율이 급격히 감소하는 것을 관찰 할 수 있었다 (도 6 - 도 9).
2-3. ΜΊΤ분석법에 의한 암세포주의 생존율 측정
Ge— 132 와 Ge-OH 처리에 따른 암세포주의 생존율 변화를 관찰하기 위하여 각 세포주 (HaCaT, Hela, MCF7)에 농도 및 시간 차이를 두고 Ge- 132 와 Ge-OH 를 처리한 후， MTT 분석법을 통해 생존율을 관찰하였다. 그 결과 Ge-132 를 처리한 정상세포에서는 세포 생존율이 변하지 않았지만， 자궁경부암세포주인 HeLa 에서는 Ge-132 0.5 uM 에서 36 시간 배양후 생존율이 감소하였으며 , 유방암세포주 MCF7에서도 Ge-132 1 uM에서 12시간 배양후 세포생존율이 감소하는 것을 관찰 할 수 있었다. Ge-OH 를 처리한 경우， 정상세포주에서는 Ge-132를 처리한 경우와마찬가지로 세포 생존율이 변하지 않았으며， 자궁경부암세포주인 HeLa 에서는 Ge_0H 0.5uM 에서 24 시간 배양후 생존율이 감소하였고, 유방암세포주 MCF7 에서는 Ge-OH 0.5uM 에서 12 시간 배양후 생존율이 감소하였다. 암세포주의 생존율은 Ge-132 를 처리한 경우보다 Ge-OH 를 처리한 경우에 더 급격한 감소양상을 보였다 (도 10 - 도 15).
2-4. Annex in V 와 Propidium Iodide(PI) 염색에 의한 암세포주의 세포사멸 측정
Ge-132 와 Ge-OH 처리에 의한 세포사멸을 측정하기 위해， 각 세포주 (HaCaT, Hela, MCF7)에 Ge-132 와 Ge_0H 를 처리한 후 아넥신 V(Annexin V)와 PI 로 이중 염색하여 유세포 분석 (flow cytometric) 방법으로 관찰하였다. 세포사멸이 일어난 세포는 세포막 안쪽에 있던 포스파티딜세린 (phosphatidylserine)이 밖으로 노출되면서 아넥신 V에 의해 염색되므로 Ge-132 와 Ge-OH 에 의한 생존율 저하가 세포사멸 (apoptosis)에 의한 것인지 세포괴사 (necrosis)에 의한 것인지 구별할 수 있다. 살아있는 세포는 아넥신 V 와 PI 에 의해 염색되지 않고 세포괴사는 PI 에 의해서만 염색되며 세포사멸이 관찰될 경우는 아넥신 V와 PI 모두에 의해서 염색되어 나타난다. 실험결과 정상세포주에서는 Ge-132 와 Ge-OH 를 처리했을 때， 세포사멸의 신호가 발견되지 않았다. 하지만 암세포주에서는 시간에 비례하게 세포사멸이 증가하는 것을 보였다. Ge-132 를 처리한 암세포주에서의 세포사멸의 증가비율은 HeLa 에서 24 시간처리 후부터 48시간까지 8%가 증가하였고 MCF7에서는 1OT 증가하였다. Ge— 0H를 처리한 암세포의 세포사멸 증가 비율은 HeLa 가 12.4%이고， MCF7 이 54.5%로 관찰되었다. 결과적으로, Ge-OH 가 Ge-132 보다 암세포의 세포사멸을 유도하는데 더 효과적이라는 것을 알수 있었다 (도 16 - 도 21). 이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며， 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서， 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다. 참조문헌
1. Chuang-Hao Lin, Tsan-Ju Chen, Yueh-Ling Hsieh Shiuh-Jen Jiang, Shun-Sheng Chen, Kinetics of germanium dioxide in rats . Toxicology (1999), 132： 147-153.
2. Tao Shyy-Hwa , Bolger P. Michael , Hazard assessment of germanium supplements. Regulatory Toxicology and Pharmacology (1997) , 25： 211-219.
3. Gerber G. B. , Leonard A. , Mutagenicity, carcinogenicity and teratogenicity of germanium compounds . Mutation Research (1997) , 387:
141-146.
4. Schroeder H.A. and Balassa J . J . , Abnormal trace metals in man: germanium. J. Chronic Dis. (1967), 20： 211224
5. Hamilton E. I . , Minski M.J. , Cleary J . J . , The concent rat ion and distr ibut ion of some stable elements in healthy human tissues from gy,) ()scoboo. f Miril85기5919012122:-
Figure imgf000029_0001
q uueat2iaoni ml fl,- ,,,,,,, Ga Sadea Geoteusa Geau a 8.nn M.nhm L.ilin H.rmnim V V
pg,p ()dustcatosaue inrial aHin.etllri98253. M1221211:- ,,,,: ,seauusa.et de Courir. Gemnis2 Ί . Gilin Ha L krmnl nv l
.
gy, ortseess V.B.lof Mtals.vir p^l.
½w, ,,,,:,uuo G.ou OT.ok.. Gresnim. In PYib2 L. NrdbP V V VOTnlk:...- , (/).993133172174174:
¾y asatud Scbtao½ U ti Kini2lvinml s.Ll Evirn.ni11n T: 14. Petra Krystek, Rob Ritsema, Analytical product study of germaniuirr containing medicine by different I CP-MS applications. Journal of Trace Elements in Medicine and Biology (2004) , 18: 9-16.
15. Suzuki F, Brutkiewicz R. R.， and Pollard R. B. Ability of sera from mice treated with Geᅳ 132, an organic germanium compound , to inhibit experimental murine ascites tumors. British Journal of Cancer (1985), 52： 757-763.
16. Brutkiewicz R. R. and Suzuki F. Biological activities and antitumor mechanism of an i mmunopot ent i at i ng organogermanium compound , Ge-132. In Vivo (1987), 1： 189-203.
17. Nakada Y. , Kosaka T. , uwabara M. , Tanaka S. , Sato K. , and Koide, F. Effects of 2-carboxyethylgermanium sesqui oxide (Ge-132) as an immunological modifier of postsurgical immnosuppression in dogs . The Journal of Veterinary Medical Science (1993), 55(5): 795-799.
18. Ikemoto K. , Kobayashi M. , Fukumoto T. , Mori mat su M. ,
Pol lard R. B. , and Suzuki F. , 2-carboxyethylgermanium sesqui oxide, a synthetic organogermanium compound , as an inducer of contrasuppressor T cells. Experientia (1996)， 52： 159-166.
19. Luck BE, Mann H, Melzer H, Dunemann L, Begerow J. Renal and other organ failure caused by germanium intoxication. Nephrology
Dialysis Transplantation (1999), 14： 2464-2468.
20. Mironov VF, Berliner EM, Gar TK, Reaction of tr ichlorogermane with acrylic acid and its derivatives. (Trans 1 at ion) . Zhurnal Obshchei Khimii (1967), 37： 911-912.
21. Mironov VF, Review: Synthetic studies with organic compounds of germanium. Main Group Metal Chemistry (1989) , 12： 355-388.
22. Asai K, Organic Germanium: A Medical Godsend . (Translation). Center BI . , Tokyo: Kogakusha, Ltd. (1977)
23. Asai K, Miracle Cure: Organic Germanium. New York: Japan Publications, Inc. (1980) 24. Tsutsui M, Kakimoto N, Axtell DD, Oikawa H, Asai K.， Crystal structure of "arboxyethyl germanium sesquioxide" . Journal of the American Chemical Society (1982), 98： 8287-8289.
25. Aso Hisashi , Suzuki Fu j i o , Yamaguchi Takahiro, Hayashi Yoshiro, Ebina Takusaburo, Ishida Nakao, Induct ion of Interferon and
Activation of NK Cells and Macrophages in Mice by Oral Administration of Geᅳ 132， an Organic Germanium Compound . Microbiology Immunology (1985), 29(1)： 65-74.
26. Munakata T, Arai S, Kuwano K, Furukawa M, Tomita Y, Induction of Interferon Product ion by Natural Killer Cells by
Or ganogerman ium Compound , Gel32. Journal of Interferon Research (1987) , 7: 69-76
27. Suzuki F, Brutkievvicz R R, Pol lard R B, Importance of Tᅳ eel Is and Macrophages in the Antitumor Activity of Carboxyethylgermanium Sesquioxide (Ge-132) . Anticancer Research (1985) , 5： 479-485
28. Suzuki F, Pol lard R B, Prevent ion of suppressed interferon gamma production in thermal ly injured mice by the administration of a novel germanium compound , Ge-132. Journal of Interferon Research (1984)， 4： 223-233
29. Kumano Nobuko , Nakai Yushi , Ishikawa Tetsuko, Koinumaru Sadahiro, Suzuki Shuj i , Kikumoto Tomoyoshi , Antitumor effect of or ganogerman ium compound , (Ge-132) in mouse tumors. Current Chemotherapy and Infectious Diseases (Proceedings of the 11th ICC and 19th I CMC, American Society for Microbiology) (1980)， 2： 1525-1527.
30. Sawai K, Kurono M, Mitani T, Ninomiya N, Ishiwata Y, Yokochi S, Asano K, Yamada K, Taki M, Meguro T, Minamitani M, Matumoto T, Shikawa Y. , Composition for Enhancing Biosynthesis of Interferon, U. S. Patent # 5,260,056, (1993).
31. Anger F, Anger J. P., Guillou L. , Papi 1 Ion A. , Janson C. ,
Sublet Y. , Subchronic oral toxicity (six months) of car boxyethyl germanium sesquioxide in rats. Applied Organometa 11 ic Chemistry (1992), 6(3)： 267-272.
32. Nagata T, Aramaki Y, Enomoto M, Isaka H, Otsuka J , Chronic intravenous toxicity study with carboxyethylgermanium sesquioxide in beagle dogs. Pharmacometrics (1978) , 16: 613-630.
33. Ishida N, Sat oh H, Suzuki F, Miyao K, Organogermanium induct ion of interferon product ion. U.S. Patent , 473581 (1984)
34. Suzuki , F. , Suppression of tumor growth by peritoneal macrophages isolated from mice treated with carboxyethylgermanium sesquioxide (Ge—132). Japanese journal of cancer and chemotherapy (1985), 12： 21222128.
35. Suzuki , F. , Antitumor activity of Ge-132, a new organogermanium compound , in mice is expressed through the functions of macrophages and T lymphocytes . Japanese journal of cancer and chemotherapy (1985), 12： 14451452.
36. Chisato Hirayama, Hiroshi Suzuki , Madoka Ito, Makoto Okumura, Toshi tugu Oda, Propagermanium: a nonspecific immune modulator for chronic hepatitis B. Journal of Gastroenterology (2003) , 38： 525- 532.
37. Hoofnagle JH, Biscegl ie AM. The treatment of chronic viral hepatitis. The New England Journal of Medicine (1997) , 336： 347-356.
38. ishiwata Y. , Yokochi S. , Suzuki E. , Michishita H. , Tashita A., Asano . , et al., Effects of proxigermanium on interferon product ion and 2' , 5' -ol igoadenylate synthetase activity in the lung of influenza virus-infected mice and in virus-infected human peripheral blood mononuclear cell culture. Arzneimi ttel Forschung (1990), 40： 896-899.
39. Ishiwata Y. , Suzuki E. , Yokochi T. , Ot shuka T. , Tasaka F. , Usada H. , et al . , Studies on the antiviral activity of proxigermanium with immunost imulat ing act ion. Arzneimi ttel Forschung (1994) , 44： 357- 361. 40. umano , N. , Ishikawa, T. , Koinumaru, S. , Kikumoto, T..Suzuki, S. , Nakai， Y. , Konno, Kᅳ， Antitumor effect of the organogerman i urn compound Ge-132 on the Lewis lung carcinoma (3LL) in C57BL/6 (B6) mice. Tohoku Journal of Experimental Medicine (1985) , 146： 97104.
41. Suzuki F. , Brutkiewicz RR, Pol lard RB. , Cooperation of lymphokines and macrophages in expression of antitumor activity of car boxy— germanium sesqui oxide (Ge-132) . Anticancer Research (1986) , 6: 177-183.
42. Jao SW, Lee W. , and Ho YS. Effect of germanium on 1,2- dimethylhydrazince- induced intestinal cancer in rats. Diseases of the Colon & Rectum (1990), 33： 99ᅳ 104.
43. Sato, I . , Yuan, B.D. , Nishimura, T. , Tanaka , N. , Inhibition of tumor growth and metastasis in association with modification of immune response by novel organic germanium compounds . Journal of Biological Response Modifiers (1985), 4: 159168.
44. Jang, J.J. , Cho, K.J. , Lee, Y.S., Bae, J.H., Modifying responses of al lyl sul ide, i ndo 1 e~3-c ar b i no 1 and germanium in a rat multi -organ carcinogenesis mode 1. Carcinogenesis (1991) , 12： 691695.
45. Aso H. , Suzuki F. , Ebina T. , and Ishida N. Antiviral activity of carboxyethylgermanium sesqui ox ide (Ge-132) in mice infected with influenza virus. Journal of Biological Response Modifiers (1989), 8(2)： 180189.
46. Kaars Si jpestei jn A. , Rukens F. , and van der Kerk G. J . M. Antimicrobial activity of organogerman i um derivatives. Nature (1964) ,
201： 736.
47. Suzuki Y. , and Taguchi K. , Pharmacological studies of carboxyethylgermanium sesqui ox ide (Ge-132) . Pharmacometrics (1983) , 26： 803-810. 48. Takahashi , I . , Fukumoto, M. , Inagaki , N. , et al . , Effects of interferon and its inducers on neutrophil chemi luminescence. Japanese journal of cancer and chemotierapy (1984) , 11: 14391443.
49. Trope, C.， Mattsson, W. , Gynning, I . , Johns son, J.E. , Sigurdsson, K. , Orbert , B. , Phase II study of spirogermanium in advanced ovarian malignancy. Cancer Treatment Report (1981), 65: 119— 120.
50. Legha, S.S. , Ajani , J. A. , Bodey, G.P. , Phase I study of spirogermanium given daily. Journal of Clinical Oncology (1983) , 1 (5)： 331-336.
51. Falkson, G. , Falkson, H.C. , Phase II trial of spirogermanium for treatment of advanced breast cancer . Cancer Treatment Report (1984)， 67： 189190.
52. Schein P. S., Slavik M., Smythe T.， Hoth D. , Smith F., Mcdonald J. S. , Woo ley P.V. , Phase I clinical trials of s irogermanium. Cancer Treatment Report (1980) , 64: 1051-1056.

Claims

【청구의 범위】 【청구항 11 하기 화학식 1으로 표시되는 유기 게르마늄 화합물.
[화학식 1]
Figure imgf000035_0001
상기 화학식 1 에서， R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로， d-Ci의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬 (alkyl), C2-C6 의 알케닐 (alkenyl )기， C2-C4 의 알키닐 (alkynyl)기， Cx-C4 의 알킬아미노， 수소， 질소, 산소, 황 또는 할로이고;
상기 ， R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로 서로 연결되어 환을 형성할 수 있고;
¾ 는 화합물의 물 (water)에 대한 용해도 (solubi lity)를 증가시킬 수 있는 작용기이고;
X 는 d- 의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬， c2-c6의 알케닐기 , c2-c4의 알키닐기， (：厂이의 알킬아미노， 질소， 산소 , 또는 황이고;
m, n 및 0는 각각 독립적으로 0 내지 10의 정수이고;
Ge는 게르마늄이다.
【청구항 2】
제 1 항에 있어서， 상기 ， R2 및 는 각각 독립적으로, d-C4의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬， C2-C6의 알케닐기 또는 C2-C4의 알키닐기인 것을 특징으로 하는 유기 게르마늄 화합물.
【청구항 3]
제 1 항에 있어서， 상기 R4 는 천연 또는 비천연의 당 (sugar), 이의 유도체， 아민， 암모늄염， 아마이드, 설폰아마이드， 카바메이트， 우레아 (urea), 알코올, 에스테르， 에테르 (ether), 유기산 (organic acid), 티올 (thiol), 설파이드 (sulfide), 케톤 또는 알데히드인 것을 특징으로 하는 유기 게르마늄 화합물.
【청구항 4】
제 3 항에 있어서， 상기 는 모노사카라이드 (monosaccharide) 또는 다이사카라이드 (disaccharide)인 것을 특징으로 하는 유기 게르마늄 화합물.
【청구항 5】
제 4 항에 있어서, 상기 R4 는 프럭토오스 (fructose), 글루코오스 (glucose), 갈락토오스 (galactose), 만노오스 (mannose) , 수크로오스 (sucrose), 락토오스 ( lactose) 또는 말토오스 (maltose)인 것을 특징으로 하는 유기 게르마늄 화합물.
【청구항 6】
제 1 항에 있어서， 상기 X 는 질소, 산소， 또는 황인 것을 특징으로 하는 유기 게르마늄 화합물.
【청구항 7]
제 1 항에 있어서, 상기 m, n 및 0 는 각각 독립적으로 0 내지 4 의 정수인 것을 특징으로 하는 유기 게르마늄 화합물.
【청구항 8】
제 1 항에 있어서, 상기 화학식 1 의 화합물은 하기 화학식 2 로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 유기 게르마늄 화합물ᅳ
Figure imgf000036_0001
상기 화학식 2에서， Me는 메틸기이다.
【청구항 9】 하기 화학식 1 으로 표시되는 화합물을 유효성분으로 포함하는 항암， 항바이러스， 항염증， 면역질환 개선 또는 피부상태 개선용 조성물.
[ 1]
Figure imgf000037_0001
상기 화학식 1 에서， ， R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로， d-C4의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬 (alkyl), C2-C6 의 알케닐 (alkenyl)기, C2-C4 의 알키닐 (alkynyl)기, C厂 C4 의 알킬아미노， 수소, 질소, 산소， 황 또는 할로이고;
상기 Ri, R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로 서로 연결되어 환을 형성할 수 있고;
는 화합물의 물 (water)에 대한 용해도 (solubil ity)를 증가시킬 수 있는 작용기이고;
X 는 d- 의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬， C2-C6의 알케닐기 , C2-C4의 알키닐기， CH^의 알킬아미노， 질소, 산소, 또는 황이고;
m, n 및 0는 각각 독립적으로 0 내지 10의 정수이고;
Ge는 게르마늄이다.
【청구항 10】
제 9 항에 있어서, 상기 ， R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로， d— C4의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬， C2-C6의 알케닐기 또는 C2-C4의 알키닐기인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 11]
제 9 항에 있어서， 상기 는 천연 또는 비천연의 당 (sugar), 이의 유도체， 아민, 암모늄염, 아마이드， 설폰아마이드， 카바메이트， 우레아 (urea), 알코올， 에스테르， 에테르 (ether), 유기산 (organic acid), 티올 (thiol), 설파이드 (sulfide), 케톤 또는 알데히드인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 12]
제 9 항에 있어서, 상기 R4 는 모노사카라이드 (monosaccharide) 또는 다이사카라이드 (disaccharide)인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 13】
제 9 항에 있어서, 상기 ¾ 는 프럭토오스 (fructose), 글루코오스 (glucose), 갈락토오스 (galactose), 만노오스 (mannose) , 수크로오스 (sucrose), 락토오스 ( lactose) 또는 말토오스 (maltose)인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 14】
제 9 항에 있어서， 상기 X 는 질소， 산소， 또는 황인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 15】
제 9 항에 있어서， 상기 m, n 및 0 는 각각 독립적으로 0 내지 4 의 정수인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 16]
제 9 항에 있어서, 상기 화학식 1 의 화합물은 하기 화학식 2 로 표시되는 화합물인 것을 특징으로 하는 조성물.
[화학식 2]
Figure imgf000038_0001
상기 화학식 2에서， Me는 메틸기이다.
【청구항 17] 제 9 항에 있어서， 상기 조성물은 암， 염증질환， 바이러스 질환 또는 면역질환의 치료 또는 예방용 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 18】
계 17 항에 있어서, 상기 면역질환 또는 염증질환은 류머티스성 관절염 (rheumatoid arthritis) , 염증성 장질환 (inflammatory bowel disease) , 건선 (psoriasis) , 천식 (asthma), 아토피성 피부염 (atopic dermatis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 만성폐색성 기관지 질환 (chronic obstructive pulmonary disease) 또는 습진 (eczema)인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 19]
계 9 항에 있어서， 상기 조성물은 피부상태 개선용 화장품학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 20】
제 19 항에 있어서, 상기 피부상태의 개선은 건선의 개선, 아토피 질환의 개선, 피부보습 개선， 검버섯의 개선, 여드름의 개선， 주름 방지， 피부탄력 방지， 피부노화 방지, 탈모 방지， 발모 촉진， 상처 재생 또는 피부 재생인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 21】
제 9항에 있어서, 상기 조성물은 암， 염증질환, 바이러스 질환 또는 면역질환의 완화 또는 개선용 기능성 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 22】
제 21 항에 있어서， 상기 면역질환 또는 염증질환은 류머티스성 관절염 (rheumatoid arthritis) , 염증성 장질환 ( inflammatory bowel disease), 건선 (psoriasis)， 천식 (asthma), 아토피성 피부염 (atopic dermatis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 만성폐색성 기관지 질환 (chronic obstructive pulmonary disease) 또는 습진 (eczema)인 것을 특징으로 하는 조성물.
【청구항 23]
(a) 하기 화학식 1 으로 표시되는 화합물의 약제학적 유효량 및 (b) 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하는 약제학적 조성물을 암， 바이러스 질환， 염증질환 또는 면역질환을 겪는 객체 (subject)에 투여하는 단계를 포함하는 암, 바이러스 질환， 염증질환 또는 면역질환의 예방 또는 치료 방법.
[
Figure imgf000040_0001
상기 화학식 1 에서， R!, R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로, d-C4의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬 (alkyl), C2-C6 의 알케닐 (alkenyl )기， C2-C4.,.의 알키닐 (alkynyl)기， d-C4 의 알킬아미노， 수소, 질소， 산소, 황 또는 할로이고;
상기 ， R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로 서로 연결되어 환을 형성할 수 있고;
는 화합물의 물 (water)에 대한 용해도 (solubi Π ty)를 증가시킬 수 있는 작용기이고;
X 는 d-d의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬， C2-C6의 알케닐기， C2-C4의 알키닐기, Ci-Cj의 알킬아미노, 질소， 산소， 또는 황이고;
m, n 및 0는 각각 독립적으로 0 내지 10의 정수이고;
Ge는 게르마늄이다.
【청구항 24]
제 23 항에 있어서， 상기 상기 면역질환 또는 염증질환은 류머티스성 관절염 (rheumatoid arthritis) , 염증성 장질환 (inflammatory bowel disease), 건선 (psoriasis)， 천식 (asthma), 아토피성 피부염 (atopic dermatis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 만성폐색성 기관지 질환 (chronic obstructive pulmonary disease) 또는 습진 (eczema)인 것을 특징으로 하는 방법 .
【청구항 25】
암， 바이러스 질환, 염증질환 또는 면역질환의 예방 또는 치료용 약물 (medicament)을 제조하기 위한 하기 화학식 1 로 표시되는 화합물의 용도.
[
Figure imgf000041_0001
상기 화학식 l 에서， R2 및 ¾ 는 각각 독립적으로， d- 의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬 (alkyl), C2-C6 의 알케닐 (alkenyl)기， C2_C4 의 알키닐 (alkynyl)기， d-C4 의 알킬아미노, 수소, 질소， 산소， 황 또는 할로이고;
상기 ， ¾ 및 ¾ 는 각각 독립적으로 서로 연결되어 환을 형성할 수 있고;
¾ 는 화합물의 물 (water)에 대한 용해도 (solubi lity)를 증가시킬 수 있는 작용기이고;
X 는 d- 의 직쇄 또는 가지쇄의 알킬， C2— (：6의 알케닐기， C2— C4의 알키닐기， Ci-C4의 알킬아미노， 질소, 산소， 또는 황이고;
m, n 및 0는 각각 독립적으로 0 내지 10의 정수이고;
Ge는 게르마늄이다.
【청구항 26]
제 25 항에 있어서， 상기 상기 면역질환 또는 염증질환은 류머티스성 관절염 (rheumatoid arthritis) , 염증성 장질환 ( inflammatory bowel disease) , 건선 (psoriasis)， 천식 (asthma), 아토피성 피부염 (atopic dermatis), 알레르기성 비염 (allergic rhinitis), 만성폐색성 기관지 질환 (chronic obstructive pulmonary disease) 또는 습진 (eczema)인 것을 특징으로 하는 용도.
PCT/KR2009/000467 2008-01-31 2009-01-30 신규 유기 게르마늄 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물 WO2009096737A2 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR10-2008-0010327 2008-01-31
KR20080010327 2008-01-31

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2009096737A2 true WO2009096737A2 (ko) 2009-08-06
WO2009096737A3 WO2009096737A3 (ko) 2009-09-24

Family

ID=40913429

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/KR2009/000467 WO2009096737A2 (ko) 2008-01-31 2009-01-30 신규 유기 게르마늄 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물

Country Status (1)

Country Link
WO (1) WO2009096737A2 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011016674A2 (ko) * 2009-08-05 2011-02-10 중앙대학교 산학협력단 신규 유기 게르마늄 화합물

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6451850B1 (en) * 1998-08-17 2002-09-17 Evgeny Vladimirovich Soloviev Bio-chemical germanium complexes with high therapeutic efficiency and wide application spectrum

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6451850B1 (en) * 1998-08-17 2002-09-17 Evgeny Vladimirovich Soloviev Bio-chemical germanium complexes with high therapeutic efficiency and wide application spectrum

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ALEXANDER ERNST ET AL.: 'Oligosaccharide Analogues of Polysaccharides' HELVETICA CHIMICA ACTA vol. 79, 1996, pages 1279 - 1294 *
MANABE S.: 'Reductive deprotection of propargyl ether by a SmI2-amine-water system and its application to polymer-supported oligosaccharide synthesis' TETRAHEDRON LETTERS vol. 49, no. ISS.35, 25 August 2008, pages 5159 - 5161, XP022852727 *
SRINIVAS HOTHA ET AL.: 'Propargyl Glycosides as Stable Glycosyl Donors: Anomeric Activation and Glycoside Syntheses' J. AM. CHEM. SOC. vol. 128, no. 30, 2006, pages 9620 - 9621 *
VASELLA A.: 'An approach to the synthesis of Polysaccharide analogues' PURE AND APPLIED CHEMISTRY vol. 70, no. 2, 1998, pages 425 - 430 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011016674A2 (ko) * 2009-08-05 2011-02-10 중앙대학교 산학협력단 신규 유기 게르마늄 화합물
WO2011016674A3 (ko) * 2009-08-05 2011-06-30 중앙대학교 산학협력단 신규 유기 게르마늄 화합물

Also Published As

Publication number Publication date
WO2009096737A3 (ko) 2009-09-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0312087B1 (de) Bis-aldonsäureamide und Verfahren zu ihrer Herstellung
TW200300093A (en) Steroidal glycosides having appetite suppressant activity and the pharmaceutical compositions thereof
WO1994009020A1 (en) Novel shingoglycolipid and use thereof
CN102822186A (zh) 6’-o-唾液乳糖的制备和中间体
JPWO2002038148A1 (ja) ω−ヒドロキシ脂肪酸類を含有する抗がん剤、香粧品又は飲食品
KR101969814B1 (ko) 글리코실 세라마이드 화합물 및 그 제조방법
JP4693093B2 (ja) 抗癌剤
JP6307138B2 (ja) 新規糖脂質グリコシド化合物およびその製造方法
WO2009096737A2 (ko) 신규 유기 게르마늄 화합물 및 이를 유효성분으로 포함하는 조성물
US8039601B1 (en) Crystalline forms of 1,6-Bis [3-(3-carboxymethylphenyl)-4-(2-α-D-mannopyranosyloxy)-phenyl] hexane
JPH11514992A (ja) 変性エーテルグリセログリコ脂質
DE3508356A1 (de) Sialinsaeure-derivate und verfahren zu ihrer herstellung
EP2098238B1 (en) Helicobacter pylori growth inhibitor containing a monosaccharide derivative having an n-acetylglucosaminyl-group linked at the alpha position
KR101200996B1 (ko) 신규 유기 게르마늄 화합물
CA2071915A1 (en) Antiviral agent
JP5392451B2 (ja) 抗腫瘍剤及び免疫賦活剤
Kunig et al. Enantiomerically pure 3-hydroxypropyl diisopropylidene mannose derivatives
EP4292593A1 (en) Pharmaceutical composition for preventing cytokine storm
JPS6054960B2 (ja) 抗しゆよう性セプタシジン類似体
CN107522760A (zh) 具有免疫活性的α‑GalCer磷酸酯类化合物及其合成方法
CN115160399B (zh) 一种皂皮酸类化合物及其制备方法和医用用途
DE2455026A1 (de) Therapeutisches mittel
Morris et al. The Synthesis of the β-D-Glucoside of Medicagenic Acid, an Alfalfa Root Saponin1
KR100641968B1 (ko) 생리활성 추출물
CA2724767A1 (fr) Analogues synthetiques des phosphatidyl-myo-inositol mannosides pourvus d'une activite inhibitrice de la reponse inflammatoire

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 09706378

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2

NENP Non-entry into the national phase in:

Ref country code: DE

32PN Ep: public notification in the ep bulletin as address of the adressee cannot be established

Free format text: NOTING OF LOSS OF RIGHTS PURSUANT TO RULE 112(1) EPC (EPO FORM 1205A DATED 05/11/2010)

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 09706378

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A2