WO2008050688A1 - Séparateur de plasma riche en plaquettes et procédé de séparation de plasma riche en plaquettes - Google Patents

Description

明 細 書

多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法

技術分野

[0001] 本発明は、血液を吸引するために用いられるシリンジと、そのシリンジから血小板及 び血漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられるシリンジと、を有する多血 小板血漿分離装置、及び多血小板血漿分離方法に関する。

背景技術

[0002] 多血小板血漿 (以下、「PRP」とも称される。 )とは、血小板を多く含む血漿である。

血球成分を含む全血においては、赤血球が約 95%、白血球が 3%、血小板が約 1 % の割合で含まれる。これに対し、多血小板血漿においては、血小板が高い割合で含 まれる。 PRPにおける血小板の割合は特に定義がない。一般に、全血における血漿 の割合が約 55%であることを考慮すると、血球成分が除去された血漿に含まれる血 小板の割合は約 2%程度と考えられる。この約 2%程度より明らかに高い割合の血小 板力 PRPに含まれる。

[0003] PRPは、全血を遠心分離することにより得られる。詳細に説明すると、まず、全血を 弱遠心して赤血球を分離して血漿を得る。この血漿には白血球及び血小板が含まれ る。さらに、得られた血漿を強遠心する。これにより、血小板は遠心力が加わる方向（ 以下、本明細書において遠心分離方向とも称する。）に集中し、上清には血小板が ほぼ含まれない。強遠心された血漿から上清を取り除き、或いは遠心分離方向（下 側）の所定量のみを取り出して、 PRPを得る（特許文献 1参照）。

[0004] 血小板の α顆粒中には、 PDGF、 TGF— β、 ILGFなどの成長因子が存在するこ とが知られている。これら成長因子が創傷治癒や組織再生に効果的な役割を果たす ことが着目されている。例えば、歯周組織再生法などの再生医療において、 PRPの 利用が期待されている（特許文献 2、特許文献 3及び非特許文献 1参照）。

[0005] 特許文献 1：特開 2006— 78428号公報

特許文献 2：特開 2006— 232834号公報

特許文献 3 :特開 2005— 278910号公報 非特許文献 1 :多血小板血漿の口腔への応用、ロバート ·Ε·マルクス著、クィーン 'テ ッセンス出版社出版

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0006] PRPを再生医療に用いる場合には、安全性の観点から、 PRPを調整する器具はす ベて γ線滅菌を施すことが要求される。し力もながら、例えば特許文献 1に記載され ている真空採血管のように、ゴム栓を使用した容器に対して γ線滅菌を施すと、ゴム 栓が劣化するという問題がある。ゴム栓の劣化は、ゴム栓に含まれる添加物の滲出、 破断片や砕片の発生を惹起し、これら添加物や破断片などが血液や PRPに混入す るおそれがある。

[0007] 本発明は、これらの事情に問題に鑑みてなされたものであり、 γ線滅菌がされた少 数の器具で実施できる多血小板血漿分離方法及び多血小板血漿分離装置を提供 することを目白勺とする。

課題を解決するための手段

[0008] (1) 本発明に係る多血小板血漿分離装置は、血液を吸引するために用いられる第

1シリンジと、該第 1シリンジ力、ら血小板及び血漿を含む遠心分離区分を吸引するた めに用いられる第 2シリンジと、を具備する。上記第 1シリンジは、採血針が取付可能 な第 1ポートを有する第 1シリンジ筒と、上記第 1ポートに着脱可能な第 1キャップと、 上記第 1シリンジ筒を液密に封止して第 1シリンジ筒内を往復動される第 1ガスケットと 、上記第 1ガスケットに着脱可能に設けられた第 1プランジャと、を具備する。上記第 2 シリンジは、上記第 1ガスケットを貫通可能な第 1中空針と、上記第 1中空針が取付可 能な第 2ポートを有する第 2シリンジ筒と、上記第 2ポートに着脱可能な第 2キャップと 、上記第 2シリンジ筒を液密に封止して第 2シリンジ筒内を往復動される第 2ガスケット と、上記第 2ガスケットに着脱可能に設けられた第 2プランジャと、を具備する。

[0009] 第 1シリンジは、採血針が取り付けられて採血に使用される。第 1ポートへ採血針が 取付可能であるとは、採血針が直接に第 1ポートに取り付けられる態様や、採血針が エクステンションチューブなどの他の部材を介して第 1ポートに取り付けられる態様が 含まれる。採血により第 1シリンジ筒には血液 (全血）が満たされる。第 1シリンジ筒か ら採血針が取り外され、第 1ポートが第 1キャップにより封止される。これにより、第 1シ リンジ筒内に血液が密封される。さらに、第 1ガスケットから第 1プランジャが取り外さ れる。第 1シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により、血液が赤 血球画分 (第 1区分）と、白血球及び血小板を含む血漿画分 (第 2区分）に分離される 。この遠心分離では、赤血球画分が第 1シリンジ筒内の第 1ポート側に、血漿画分が 第 1ガスケット側に分離される。

[0010] 第 2シリンジは、遠心分離された第 1シリンジ筒から血漿画分を吸引するために用い られる。第 2ポートへ第 1中空針が取付可能であるとは、第 1中空針が直接に第 2ポー トに取り付けられる態様や、第 1中空針がエクステンションチューブなどの他の部材を 介して第 2ポートに取り付けられる態様が含まれる。仮に、第 1中空針が直接に第 2ポ ートに取り付けられている場合には、第 2シリンジが第 1シリンジ筒に進入されて、第 1 中空針が第 1ガスケットに貫通される。また、第 1中空針がエクステンションチューブを 介して第 2ポートに取り付けられている場合には、第 1中空針及びエクステンションチ ユーブが第 1シリンジ筒に進入されて、第 1中空針が第 1ガスケットに貫通される。第 1 中空針の先端は、第 1ガスケット側の血漿画分中に到達する。第 2シリンジの第 2ブラ ンジャが引き出されると、第 2ガスケットが第 2シリンジ筒を移動し、これにより、第 1中 空針を通じて血漿画分が第 2シリンジ筒内に吸引される。

[0011] 血漿画分を吸引した後、第 2シリンジと共に第 1中空針力 S、又は第 1中空針とェクス テンションチューブ力 S、第 1シリンジ筒から引き出される。第 2シリンジ筒から第 1中空 針が取り外され、第 2ポートが第 2キャップにより封止される。これにより、第 2シリンジ 筒内に血漿画分が密封される。さらに、第 2ガスケットから第 2プランジャが取り外され る。第 2シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により、血漿画分 は、上側（第 2ガスケット側）がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第 2ポート側） が血小板が多い多血小板血漿となる。第 2シリンジ筒から第 2キャップが外され、第 2 ガスケットに第 2プランジャが取り付けられて、多血小板血漿が、第 2シリンジ筒の第 2 ポートから排出される。

[0012] (2) 上記第 1プランジャは、ねじ込み式により上記第 1ガスケットに対して着脱可能 であることが好ましい。上記第 2プランジャは、ねじ込み式により上記第 2ガスケットに 対して着脱可能であることが好ましい。これにより、第 1ガスケット又は第 2ガスケットに 着脱可能な第 1プランジャ又は第 2プランジャが簡易に実現される。また、第 1プラン ジャ又は第 1プランジャを第 1ガスケット又は第 2ガスケットへ着脱することを繰り返す こと力 Sでさる。

[0013] (3) 上記第 1ガスケットは、上記第 1プランジャが着脱される側にガイド孔を有するも のであってもよい。上記第 2シリンジ筒は、第 2ポートの周囲に上記ガイド孔に嵌入さ れるガイド片を有するものであってもよレ、。

[0014] 第 1シリンジ筒に第 2シリンジを進入させると、第 2シリンジ筒のガイド片が第 1ガスケ ットのガイド孔に嵌入される。これにより、第 2シリンジ筒と第 1ガスケットとが嵌合状態 になる。前述されたように、第 2シリンジ筒から第 2プランジャを引き出すと、第 1シリン ジ筒内の血漿画分が第 2シリンジ筒へ吸引される。これに伴い、第 1ガスケットが、第 1シリンジ筒内を第 1ポート側へ移動する。第 1ガスケットの移動に伴って、第 2シリン ジ筒が、第 1シリンジ筒にさらに進入する。これにより、第 1シリンジ筒から第 2シリンジ 筒への血漿画分の吸引が円滑に行われる。

[0015] (4) 上記第 1シリンジ及び上記第 2シリンジが滅菌袋に密封されたものであることが 好ましい。これらがキットとして 1つの滅菌袋に密封されることにより、使い勝手が向上 する。

[0016] (5) 本発明に係る多血小板血漿分離装置は、血液を吸引するために用いられる第 3シリンジと、該第 3シリンジ力、ら血小板及び血漿を含む遠心分離区分を吸引するた めに用いられる第 4シリンジと、を具備する。上記第 3シリンジは、採血針が取付可能 な第 3ポートを有する第 3シリンジ筒と、上記第 3ポートに着脱可能な第 3キャップと、 上記第 3シリンジ筒を液密に封止して第 3シリンジ筒内を往復動される第 3ガスケットと 、上記第 3ガスケットに設けられ、該第 3ガスケットに通ずる揷通孔を有する第 1分割 プランジャと、上記第 1分割プランジャに着脱可能に接続された第 2分割プランジャと 、を具備する。上記第 4シリンジは、上記第 1分割プランジャの揷通孔を通じて上記第 3ガスケットを貫通可能な第 2中空針と、上記第 2中空針が取付可能な第 4ポートを有 する第 4シリンジ筒と、上記第 4ポートに着脱可能な第 4キャップと、上記第 4シリンジ 筒を液密に封止して第 4シリンジ筒内を往復動される第 4ガスケットと、上記第 4ガスケ ットに着脱可能に設けられた第 4プランジャと、を具備する。

[0017] 第 3シリンジは、採血針が取り付けられて採血に使用される。第 3ポートへ採血針が 取付可能であるとは、採血針が直接に第 3ポートに取り付けられる態様や、採血針が エクステンションチューブなどの他の部材を介して第 3ポートに取り付けられる態様が 含まれる。採血により第 3シリンジ筒には血液 (全血）が満たされる。第 3シリンジ筒か ら採血針が取り外され、第 3ポートが第 3キャップにより封止される。これにより、第 3シ リンジ筒内に血液が密封される。さらに、第 1分割プランジャから第 2分割プランジャ が取り外される。第 3シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により 、血液が赤血球画分 (第 1区分）と白血球及び血小板を含む血漿画分 (第 2区分）に 分離される。この遠心分離では、赤血球画分が第 3シリンジ筒内の第 3ポート側に、 血漿画分が第 3ガスケット側に分離される。

[0018] 第 4シリンジは、遠心分離された第 3シリンジ筒から血漿画分を吸引するために用い られる。第 4ポートへ第 2中空針が取付可能であるとは、第 2中空針が直接に第 4ポー トに取り付けられる態様や、第 2中空針がエクステンションチューブなどの他の部材を 介して第 4ポートに取り付けられる態様が含まれる。仮に、第 2中空針が直接に第 4ポ ートに取り付けられている場合には、第 4シリンジが第 3シリンジ筒に進入されて、第 2 中空針が第 1分割プランジャの揷通孔に到達し、さらに第 3ガスケットを貫通する。ま た、第 2中空針がエクステンションチューブを介して第 4ポートに取り付けられている 場合には、第 2中空針及びエクステンションチューブが第 3シリンジ筒に進入されて、 第 2中空針が第 1分割プランジャの揷通孔に到達し、さらに第 3ガスケットを貫通する 。これにより、第 2中空針の先端は、第 3シリンジ筒内の第 3ガスケット側の血漿画分 中に到達する。第 4シリンジの第 4プランジャが引き出されると、第 4ガスケットが第 4シ リンジ筒を移動し、これにより、第 2中空針を通じて血漿画分が第 4シリンジ筒内に吸 引される。

[0019] 血漿画分を吸引した後、第 4シリンジと共に第 2中空針力 S、又は第 2中空針とェクス テンションチューブ力 S、第 3シリンジ筒から引き出される。第 4シリンジ筒から第 2中空 針が取り外され、第 4ポートが第 4キャップにより封止される。これにより、第 4シリンジ 筒内に血漿画分が密封される。さらに、第 4ガスケットから第 4プランジャが取り外され る。第 4シリンジ筒は、この状態で遠心分離が行われる。遠心分離により、血漿画分 は、上側（第 4ガスケット側）がほぼ血漿成分のみの上清となり、下側（第 4ポート側） が血小板が多い多血小板血漿となる。第 4シリンジ筒から第 4キャップが外され、第 4 ガスケットに第 4プランジャが取り付けられて、多血小板血漿が、第 4シリンジ筒の第 4 ポートから排出される。

[0020] (6) 上記第 2分割プランジャは、ねじ込み式により上記第 1分割プランジャに対して 着脱可能であることが好ましい。上記第 4プランジャは、ねじ込み式により上記第 4ガ スケットに対して着脱可能であることが好ましい。これにより、第 1分割プランジャに着 脱可能な第 2分割プランジャ、及び第 4ガスケットに着脱可能な第 4プランジャが簡易 に実現される。また、第 1分割プランジャへ第 2分割プランジャを着脱すること、第 4ガ スケットに第 4プランジャを着脱することを繰り返すことができる。

[0021] (7) 上記第 1分割プランジャは、上記揷通孔を封止し且つ上記第 2中空針が貫通 可能な栓を有するものが好ましい。これにより、第 2分割プランジャが取り外された状 態においても、第 1分割プランジャの揷通孔を封止して、第 3シリンジ筒の密封状態を 維持すること力 Sでさる。

[0022] (8) 上記第 3シリンジ及び上記第 4シリンジが滅菌袋に密封されたものであることが 好ましい。これらがキットとして 1つの滅菌袋に密封されることにより、使い勝手が向上 する。

[0023] (9) 本発明に係る多血小板血漿分離方法は、第 1ポートを有する第 1シリンジ筒、 該第 1シリンジ筒を液密に封止して第 1シリンジ筒内を往復動される第 1ガスケット、及 び該第 1ガスケットに設けられた第 1プランジャを具備する第 1シリンジと、第 1中空針 、該第 1中空針を取付可能な第 2ポートを有する第 2シリンジ筒、該第 2シリンジ筒を 液密に封止して第 2シリンジ筒内を往復動される第 2ガスケット、及び該第 2ガスケット に設けられた第 2プランジャを具備する第 2シリンジと、を用いる。本多血小板血漿分 離方法は、採血された血液が満たされた上記第 1シリンジ筒の第 1ポートを封止する 第 1ステップと、上記第 1シリンジ筒の第 1ポート側を遠心移動方向として、上記第 1シ リンジ筒内の血液を、赤血球を含む第 1区分と血小板及び血漿を含む第 2区分とに 遠心分離する第 2ステップと、上記第 1シリンジ筒内の第 1ガスケットに第 1中空針を 貫通し、上記第 2区分を上記第 2シリンジ筒に吸引する第 3ステップと、上記第 2区分 が満たされた上記第 2シリンジ筒の第 2ポートを封止する第 4ステップと、上記第 2シリ ンジ筒の第 2ポート側を遠心移動方向として、上記第 2シリンジ筒内の第 2区分に対し て遠心分離を行う第 5ステップと、上記第 2シリンジ筒内の第 2ガスケットを移動させて 、遠心分離された上記第 2区分から多血小板血漿を上記第 2ポートから排出する第 6 ステップと、を含む。

[0024] 第 1シリンジは、採血に使用される。第 1シリンジ筒の第 1ポートには採血針が取り付 け可能である。採血針は、直接に第 1ポートに取り付けても、エクステンションチュー ブなどの他の部材を介して第 1ポートに取り付けてもよ!/、。採血針を取り付けた第 1シ リンジを用いて、通常の方法で採血が行われる。この採血により、第 1シリンジ筒は血 液 (全血）で満たされる。第 1ステップでは、第 1シリンジの第 1ポートを封止して第 1シ リンジ筒を密封状態にする。つまり、採血を行った後、第 1シリンジ筒から採血針を取 り外す。そして、第 1シリンジ筒の第 1ポートをキャップで封止する。

[0025] 第 2ステップでは、密封した第 1シリンジを用いて 1回目の遠心分離を行う。この遠心 分離において、第 1シリンジ筒の第 1ポート側を遠心移動方向とする。ここで、「遠心 移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通常は下側であ る。この遠心分離により、第 1シリンジ筒に密封された血液は、第 1区分と第 2区分とに 分離される。第 1区分は、赤血球を含む画分である。第 2区分は血小板及び血漿を 含む。第 1区分は、遠心分離により遠心移動方向、つまり下側に分離される。

[0026] 第 3ステップでは、第 1シリンジ筒内の第 2区分を第 2シリンジ筒に吸引する。遠心分 離を行った後、第 1シリンジ筒に第 2シリンジを進入させる。そして、第 2シリンジの第 2 ポートに取り付けられた第 1中空針を第 1ガスケットに貫通させる。なお、第 1中空針 は、直接に第 2ポートに取り付けても、エクステンションチューブなどの他の部材を介 して第 2ポートに取り付けてもよい。仮に、第 1中空針をエクステンションチューブを介 して第 2ポートに取り付けた場合には、第 1中空針及びエクステンションチューブを第 1シリンジ筒に進入させて、第 1中空針を第 1ガスケットに貫通させる。その状態で、第 2プランジャを第 2シリンジ筒から引き出して、第 1シリンジ筒内の第 2区分を第 2シリン ジ筒内 吸引する。 [0027] 第 4ステップでは、第 2区分が満たされた第 2シリンジ筒の第 2ポートを封止して、第 2シリンジ筒を密封状態にする。第 2シリンジ筒には第 2区分のみが満たされている。 この第 2シリンジ筒の第 2ポートをキャップで封止する。

[0028] 第 5ステップでは、密封した第 2シリンジを用いて 2回目の遠心分離を行う。この遠心 分離において、第 2シリンジ筒の第 2ポート側を遠心移動方向とする。この遠心分離 により、第 2区分が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり下側に移動する。

[0029] 第 6ステップでは、第 2シリンジ筒から多血小板血漿を排出する。遠心分離を行った 後、第 2シリンジ筒からキャップを外して第 2ポートを開封する。その状態で、第 2ブラ ンジャを操作して第 2ガスケットを第 2ポート側へ移動させる。 2回目の遠心分離により 第 2区分中の血小板が遠心移動して、第 2区分は、上側がほぼ血漿成分のみの上清 となり、下側（第 2ポート側）が血小板が多い多血小板血漿となる。したがって、第 2ガ スケットの移動により第 2ポートから多血小板血漿が排出される。これにより、採血され た血液から多血小板血漿が分離される。

[0030] (10) 上記第 6ステップにおいて、遠心分離された上記第 2区分から上記第 2ポート 側の所定量を多血小板血漿として排出することが考えられる。

[0031] (11) 上記第 2ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第 5ステップにおけ る遠心分離は強遠心であることが考えられる。

[0032] 第 2ステップを弱遠心とすることにより、血液 (全血)を第 1区分及び第 2区分に分離 すること力 Sできる。また、第 1区分と第 2区分との境界付近に血小板が集中することが なぐ第 2区分の吸引に伴う血小板のロスを少なくすることができる。第 5ステップを強 遠心とすることにより、第 2区分から高濃度の多血小板血漿を分離することができる。

[0033] (12) 本発明は、上記多血小板血漿分離方法により得られた多血小板血漿として 捉えること力 Sできる。

[0034] (13) 本発明に係る多血小板血漿分離方法は、第 3ポートを有する第 3シリンジ筒、 該第 3シリンジ筒を液密に封止して第 3シリンジ筒内を往復動される第 3ガスケット、及 び該第 3ガスケットに設けられた第 3プランジャを具備する第 3シリンジと、第 2中空針 、該第 2中空針を取付可能な第 4ポートを有する第 4シリンジ筒、該第 4シリンジ筒を 液密に封止して第 4シリンジ筒内を往復動される第 4ガスケット、及び該第 4ガスケット に設けられた第 4プランジャを具備する第 4シリンジと、を用いる。本多血小板血漿分 離方法は、採血された血液が満たされた上記第 3シリンジ筒の第 3ポートを封止する 第 7ステップと、上記第 3シリンジ筒の第 3ポート側を遠心移動方向として、上記第 3シ リンジ筒内の血液を、赤血球を含む第 1区分と血小板及び血漿を含む第 2区分とに 遠心分離する第 8ステップと、上記第 3シリンジ筒内の第 3ガスケットに第 2中空針を 貫通し、上記第 2区分を上記第 4シリンジ筒に吸引する第 9ステップと、上記第 2区分 が満たされた上記第 4シリンジ筒の第 4ポートを封止する第 10ステップと、上記第 4シ リンジ筒の第 4ポート側を遠心移動方向として、上記第 4シリンジ筒内の第 2区分に対 して遠心分離を行う第 11ステップと、上記第 4シリンジ筒内の第 4ガスケットを移動さ せて、遠心分離された上記第 2区分から多血小板血漿を上記第 4ポートから排出す る第 12ステップと、を含む。

[0035] 第 3シリンジは、採血に使用される。第 3シリンジ筒の第 3ポートには採血針が取り付 け可能である。採血針は、直接に第 3ポートに取り付けても、エクステンションチュー ブなどの他の部材を介して第 3ポートに取り付けてもよ!/、。採血針を取り付けた第 3シ リンジを用いて、通常の方法で採血が行われる。この採血により、第 3シリンジ筒は血 液 (全血）で満たされる。第 7ステップでは、第 3シリンジの第 3ポートを封止して第 3シ リンジ筒を密封状態にする。つまり、採血を行った後、第 3シリンジ筒から採血針を取 り外す。そして、第 3シリンジ筒の第 3ポートをキャップで封止する。

[0036] 第 8ステップでは、密封した第 3シリンジを用いて 1回目の遠心分離を行う。この遠心 分離において、第 3シリンジ筒の第 3ポート側を遠心移動方向とする。ここで、「遠心 移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通常は下側であ る。この遠心分離により、第 3シリンジ筒に密封された血液は、第 1区分と第 2区分とに 分離される。第 1区分は、赤血球を含む。第 2区分は血小板及び血漿を含む。第 1区 分は、遠心分離により遠心移動方向、つまり下側に分離される。

[0037] 第 9ステップでは、第 3シリンジ筒内の第 2区分を第 4シリンジ筒に吸引する。遠心分 離を行った後、第 3シリンジ筒に第 4シリンジを進入させる。そして、第 4シリンジの第 4 ポートに取り付けられた第 2中空針を第 3ガスケットに貫通させる。なお、第 2中空針 は、直接に第 4ポートに取り付けても、エクステンションチューブなどの他の部材を介 して第 4ポートに取り付けてもよい。仮に、第 3中空針をエクステンションチューブを介 して第 4ポートに取り付けた場合には、第 2中空針及びエクステンションチューブを第 3シリンジ筒に進入させて、第 2中空針を第 3ガスケットに貫通させる。その状態で、第 4プランジャを第 4シリンジ筒から引き出して、第 3シリンジ筒内の第 2区分を第 4シリン ジ筒内 吸引する。

[0038] 第 10ステップでは、第 2区分が満たされた第 4シリンジ筒の第 4ポートを封止して、 第 4シリンジ筒を密封状態にする。第 4シリンジ筒には第 2区分のみが満たされている 。この第 4シリンジ筒の第 4ポートをキャップで封止する。

[0039] 第 11ステップでは、密封した第 4シリンジを用いて 2回目の遠心分離を行う。この遠 心分離において、第 4シリンジ筒の第 4ポート側を遠心移動方向とする。この遠心分 離により、第 2区分が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり下側に移動する

[0040] 第 12ステップでは、第 4シリンジ筒から多血小板血漿を排出する。遠心分離を行つ た後、第 4シリンジ筒からキャップを外して第 4ポートを開封する。その状態で、第 4プ ランジャを操作して第 4ガスケットを第 4ポート側へ移動させる。 2回目の遠心分離によ り第 2区分中の血小板が遠心移動して、第 2区分は、上側がほぼ血漿成分のみの上 清となり、下側（第 4ポート側）が血小板が多い多血小板血漿となる。したがって、第 4 ガスケットの移動により第 4ポートから多血小板血漿が排出される。これにより、採血さ れた血液から多血小板血漿が分離される。

[0041] (14) 上記第 12ステップにおいて、遠心分離された上記第 2区分から上記第 4ポー ト側の所定量を多血小板血漿として排出することが考えられる。

[0042] (15) 上記第 8ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第 11ステップにお ける遠心分離は強遠心であることが考えられる。

[0043] (16) 本発明は、上記多血小板血漿分離方法により得られた多血小板血漿として 捉えること力 Sできる。

発明の効果

[0044] 本発明に係る多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法によれば、採血 に使用したシリンジを用いて遠心分離を行って、多血小板血漿を得ることができる。こ れにより、 γ線滅菌がされた少数の器具で多血小板血漿の分離を実現できる。また、 2つのシリンジを用いることにより、第 1区分と第 2区分とを確実に分離して、高濃度の 多血小板血漿を得ることができる。

図面の簡単な説明

[図 1]図 1は、本発明の第 1実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 1シリンジ 10 の外観構成を示す分解斜視図である。

[図 2]図 2は、第 1シリンジ 10の内部構成を示す縦断面図である。

[図 3]図 3は、本発明の第 1実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 2シリンジ 11 の外観構成を示す分解斜視図である。

[図 4]図 4は、第 2シリンジ 11の内部構成を示す縦断面図である。

[図 5]図 5は、第 1実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血 小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。

[図 6]図 6は、第 1実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血 小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。

[図 7]図 7は、第 1実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血 小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。である。

[図 8]図 8は、本発明の第 2実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 3シリンジ 60 の外観構成を示す分解斜視図である。

[図 9]図 9は、第 3シリンジ 60の内部構成を示す縦断面図である。

[図 10]図 10は、本発明の第 2実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 4シリンジ

61の外観構成を示す分解斜視図である。

[図 11]図 11は、第 4シリンジ 61の内部構成を示す縦断面図である。

[図 12]図 12は、第 2実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多 血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。

[図 13]図 13は、第 2実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多 血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。

[図 14]図 14は、第 2実施形態による多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多 血小板血漿分離装置の状態を示す断面図である。である。 符号の説明

10···第 1シリンジ 11···第 2シリンジ 12—第1ポート 13···第 1シリンジ筒 14···第 1キャップ 15···第 1ガスケット 16···第 1プランジャ 30—第1中空針 31···第 2ポート 32···第 2シリンジ筒 33···第 2キャップ

34…第 2ガスケット

35···第 2プランジャ

43…ガイド片

48···取付孔（ガイド孔）

60···第 3シリンジ

61···第 4シリンジ

62···第 3ポート

63···第 3シリンジ筒

64···第 3キャップ

65…第 3ガスケット

66···第 1分割プランジャ

67···第 2分割プランジャ

80···孔 (揷通孔)

83…栓

90···第 2中空針

91···第 4ポート 92 · · ·第 4シリンジ筒

93…第 4キャップ

94 · · ·第 4ガスケット

95 · · ·第 4プランジャ

発明を実施するための最良の形態

[0047] 以下、本発明の好ましい実施形態を説明する。なお、本実施形態は本発明の一実 施態様にすぎず、本発明の要旨を変更しない範囲で実施態様を変更できることは言 うまでもない。

[0048] [第 1実施形態]

図 1は、本発明の第 1実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 1シリンジ 10の 外観構成を示す分解斜視図である。図 2は、第 1シリンジ 10の内部構成を示す縦断 面図である。図 3は、本発明の第 1実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 2シリ ンジ 11の外観構成を示す分解斜視図である。図 4は、第 2シリンジ 11の内部構成を 示す縦断面図である。

[0049] 本発明に係る多血小板血漿分離装置は、第 1シリンジ 10と第 2シリンジ 11とを具備 する。第 1シリンジ 10は、血液を吸引するために用いられる。血液の吸引とは、具体 的には採血が挙げられる力 必ずしも採血である必要はなぐ既に採血された血液を 吸引する場合も含まれる。第 2シリンジ 11は、遠心分離により第 1シリンジ 10に形成さ れた白血球、血小板、及び血漿を含む画分 (本発明の第 2区分に相当する。）を吸引 するために用いられる。

[0050] 図 1及び図 2に示されるように、第 1シリンジ 10は、採血針が取付可能な第 1ポート 1 2を有する第 1シリンジ筒 13と、第 1ポート 12に着脱可能な第 1キャップ 14と、第 1シリ ンジ筒 13内を往復動される第 1ガスケット 15と、第 1ガスケット 15に着脱可能に設け られた第 1プランジャ 16とを具備する。

[0051] 第 1シリンジ筒 13は、ほぼ円筒形状であり、一方の端部が縮径されて針取付部 20 が形成されている。針取付部 20の内部空間は、第 1シリンジ筒 13の内部空間と連続 している。針取付部 20により本発明に係る第 1ポート 12が形成されている。針取付部 20には、採血針が取り付け可能である。第 1シリンジ筒 13の他方の端部は、縮径さ れることなく開口されている。この他方の端部から第 1シリンジ筒 13の内部空間へ第 1 プランジャ 16が進退される。第 1シリンジ筒 13の他方の端部には、第 1シリンジ筒 13 の外周側へ突出する鍔 21が形成されている。鍔 21はハンドリングを向上させるため のものであり、第 1シリンジ筒 13及び第 1プランジャ 16の操作の際に鍔 21に指が掛け られる。

[0052] 第 1シリンジ筒 13の γ線滅菌が可能なものであれば素材は特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 1シリンジ筒 13をポリプロピレンの 成形品とすることが一般的である。第 1シリンジ筒 13の内部空間に満たされた血液や 血漿などを目視確認するために、第 1シリンジ筒 13は、透明ないし半透明であること が好ましい。第 1シリンジ筒 13の容量は特に限定されない。第 1シリンジ筒 13に容量 を示す目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握 できるので好ましい。

[0053] 第 1キャップ 14は、第 1シリンジ筒 13の第 1ポート 12を封止する。図 1及び図 2に示 されるように、第 1キャップ 14は、大径部 22及び小径部 23を有する。小径部 23は、 大径部 22の内側の空間に配置されている。小径部 23は、第 1シリンジ筒 13の針取 付部 20に外嵌可能な管形状である。小径部 23の内部には、第 1シリンジ筒 13の第 1 ポート 12に嵌入可能な栓部 24が配設されている。大径部 22は、第 1キャップ 14を第 1シリンジ筒 13に着脱する際の持ち手として機能する。第 1キャップ 14が第 1シリンジ 筒 13に取り付けられると、図 2に示されるように、小径部 23が針取付部 20の外周面 に密着し、栓部 24が第 1ポート 12に嵌入して、第 1ポート 12が液密に封止される。

[0054] 第 1キャップ 14の素材は γ線滅菌が可能ものであれば特に限定されず、ガラスや 合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされるこ とや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 1キャップ 14としてポリプロピレンゃェ ラストマーの成形品が採用されうる。

[0055] 第 1ガスケット 15は、第 1シリンジ筒 13の内部に揷入されて第 1シリンジ筒 13を液密 に封止する。第 1ガスケット 15は、液密状態を維持したまま、第 1シリンジ筒 13内を往 復動可能である。第 1ガスケット 15の往復動により、第 1シリンジ筒 13の内部に密封 可能な液体の容量が変化する。図 1に示されるように、第 1ガスケット 15は、第 1シリン ジ筒 13の内径に対応した径の円柱形状である。図 2に示されるように、第 1ガスケット 15の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第 1シリンジ筒 1 3の奥部の形状に対応している。第 1プランジャ 16と接続される第 1ガスケット 15の他 方の端面には、取付孔 25が形成されている。取付孔 25は第 1ガスケット 15の円形の 端面の中心に形成されている。取付孔 25は円孔である。この取付孔 25が、本発明に 係るガイド孔に相当する。取付孔 25の内周面には、雌ネジ 26が形成されている。

[0056] 第 1ガスケット 15の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 1ガスケット 15としてエラストマ一 の成形品が採用されうる。

[0057] 第 1プランジャ 16は、ねじ込み式により第 1ガスケット 15に対して着脱可能なもので ある。第 1プランジャ 16の全体形状は、第 1シリンジ筒 13の内部空間に揷入可能な 外形であって、第 1シリンジ筒 13の軸方向（図 1の 1点鎖線方向、図 2における上下 方向）の長さより十分に長い。したがって、第 1ガスケット 15を第 1シリンジ筒 13の奥 部（第 1ポート 12側）に押し込んだ状態で、第 1プランジャ 16の一部が第 1シリンジ筒 13の反対側の端部から突出する。

[0058] 第 1プランジャ 16は、雄ネジ部 27と軸部 28と端板 29とを有する。雄ネジ部 27は、 第 1ガスケット 15の取付孔 25にねじ込まれる。取付孔 25の雌ネジ 26と雄ネジ部 27と は嚙合する。これにより、第 1プランジャ 16が第 1ガスケット 15に対してねじ込み式に より着脱される。この着脱は繰り返し fiうこと力 Sでさる。

[0059] 軸部 28は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部 28の断面形 状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部 28の一方端 に雄ネジ部 27が配置され、他方端に端板 29が配置されている。端板 29は、円板形 状の平板であり、軸部 28の軸方向に対して垂直に接続されている。端板 29は第 1プ ランジャ 16のハンドリングを向上させるためのものであり、第 1プランジャ 16が第 1シリ ンジ筒 13に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、第 1プランジャ 16が第 1シリ ンジ筒 13から引き出される際に持ち手となる。 [0060] 第 1プランジャ 16の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 1プランジャ 16をポリプロピレンの 成形品とすることが一般的である。

[0061] 図 3及び図 4に示されるように、第 2シリンジ 11は、第 1中空針 30と、第 1中空針 30 が取付可能な第 2ポート 31を有する第 2シリンジ筒 32と、第 2ポート 31に着脱可能な 第 2キャップ 33と、第 2シリンジ筒 32内を往復動される第 2ガスケット 34と、第 2ガスケ ット 34に着脱可能に設けられた第 2プランジャ 35とを具備する。

[0062] 第 1中空針 30は、中空管の先端側に刃面が形成されたカヌラ 40と、カヌラ 40の基 端と接続されたハブ 41とを有する。カヌラ 40の軸方向の長さは、第 1シリンジ 10の第 1ガスケット 15を貫通するに必要な長さに設定される。ハブ 41は、ほぼ円筒形状であ り、第 2シリンジ筒 32の針取付部 42に外嵌されるに必要な内径及び軸方向の長さに 設定される。ハブ 41において、カヌラ 40の基端が接続される側の端部は、カヌラ 40 の接続により閉止されている。カヌラ 40とハブ 41とは接着剤等により固定されている 。ハブ 41において、針取付部 42と接続される側の端部は開口されている。カヌラ 40 の基端側の開口は、ハブ 41の内部空間と通じている。したがって、カヌラ 40の先端 側の開口からカヌラ 40内に進入した液体等は、カヌラ 40の基端側の開口からハブ 4 1の内部空間へ流入する。この内部空間は、ハブ 41が針取付部 42に外嵌されること により、第 2ポート 31と連続する。

[0063] 第 2シリンジ筒 32は、ほぼ円筒形状であり、第 1シリンジ筒 13の内部空間に浸入可 能な大きさである。第 2シリンジ筒 32の一方の端部は縮径されて、針取付部 42が形 成されている。針取付部 42の内部空間は、第 2シリンジ筒 32の内部空間と連続して いる。針取付部 42により本発明に係る第 2ポート 31が形成されている。針取付部 42 には、第 1中空針 30が取り付け可能である。第 2シリンジ筒 32には、針取付部 42の 周囲にガイド片 43が形成されている。ガイド片 43は円筒形状であり、一端側が第 2シ リンジ 32に接続されており、他端側が第 2ポート 31と同方向に開口している。ガイド 片 43の内面と針取付部 42の外面との間に間隙が形成されている。この間隙は、第 1 中空針 30のハブ 41並びに第 2キャップ 33の小径部 46が揷入可能に設定される。ガ イド片 43の軸方向の長さは、針取付部 42の軸方向の長さより十分に長ぐ具体的に は、針取付部 42に取り付けられた第 1中空針 30のハブ 41を完全に覆う程度の長さ に設定される。ガイド片 43の外径は、第 1ガスケット 15の取付孔 25の内径に対応して おり、ガイド片 43は取付孔 25に嵌入可能である。なお、本実施形態ではガイド片 43 が第 2シリンジ筒 32と一体に成形されて!/、る力 針取付部 42への第 1中空針 30の取 り付けの容易のために、ガイド片 43は第 2シリンジ筒 32に対して着脱可能であっても よい。

[0064] 第 2シリンジ筒 32の他方の端部は、縮径されることなく開口されている。この他方の 端部から第 2シリンジ筒 32の内部空間へ第 2プランジャ 35が進退される。第 2シリン ジ筒 32の他方の端部には、第 2シリンジ筒 32の外周側へ突出する鍔 44が形成され ている。鍔 44はハンドリングを向上させるためのものであり、第 2シリンジ筒 32及び第 2プランジャ 35の操作の際に鍔 44に指が掛けられる。

[0065] 第 2シリンジ筒 32の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 2シリンジ筒 32をポリプロピレンの 成形品とすることが一般的である。第 2シリンジ筒 32の内部空間に満たされた血漿な どを目視確認するために、第 2シリンジ筒 32は、透明ないし半透明であることが好ま しい。第 2シリンジ筒 32の容量は特に限定されない。第 2シリンジ筒 32に容量を示す 目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握できるの で好ましい。

[0066] 第 2キャップ 33は、第 2シリンジ筒 32の第 2ポート 31を封止する。図 3及び図 4に示 されるように、第 2キャップ 33は、大径部 45及び小径部 46を有する。小径部 46は、 大径部 45の内側の空間に配置されている。小径部 46は、第 2シリンジ筒 32の針取 付部 42に外嵌可能な管形状である。小径部 46の軸方向の長さは、ガイド片 43の軸 方向の長さより十分に長ぐ第 2キャップ 33を針取付部 42に取り付けた状態において 、大径部 45とガイド片 43とが干渉しない。小径部 46の内部には、第 2シリンジ筒 32 の第 2ポート 31に嵌入可能な栓部 47が配設されている。大径部 45は、第 2キャップ 3 3を第 2シリンジ筒 32に着脱する際の持ち手として機能する。第 2キャップ 33が第 2シ リンジ筒 32に取り付けられると、図 4に示されるように、小径部 46が針取付部 42の外 周面に密着し、栓部 47が第 2ポート 31に嵌入して、第 2ポート 31が液密に封止され

[0067] 第 2キャップ 33の素材は _Ί線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 2キャップ 33としてポリプロピレン やエラストマ一の成形品が採用されうる。

[0068] 第 2ガスケット 34は、第 2シリンジ筒 32の内部に揷入されて第 2シリンジ筒 32を液密 に封止する。第 2ガスケット 34は、液密状態を維持したまま、第 2シリンジ筒 32内を往 復動可能である。第 2ガスケット 34の往復動により、第 2シリンジ筒 32の内部に密封 可能な液体の容量が変化する。図 3に示されるように、第 2ガスケット 34は、第 2シリン ジ筒 32の内径に対応した径の円柱形状である。図 4に示されるように、第 2ガスケット 34の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第 2シリンジ筒 3 2の奥部の形状に対応している。第 2プランジャ 35と接続される第 2ガスケット 34の他 方の端面には、取付孔 48が形成されている。取付孔 48は第 2ガスケット 34の円形の 端面の中心に形成されている。取付孔 48は円孔である。取付孔 48の内周面には、 雌ネジ 49が形成されて!/、る。

[0069] 第 2ガスケット 34の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 2ガスケット 34としてエラストマ一 の成形品が採用されうる。

[0070] 第 2プランジャ 35は、ねじ込み式により第 2ガスケット 34に対して着脱可能なもので ある。第 2プランジャ 35の全体形状は、第 2シリンジ筒 32の内部空間に揷入可能な 外形であって、第 2シリンジ筒 32の軸方向（図 3の 1点鎖線方向、図 4における上下 方向）の長さより十分に長い。したがって、第 2ガスケット 34を第 2シリンジ筒 32の奥 部（第 2ポート 31側）に押し込んだ状態で、第 2プランジャ 35の一部が第 2シリンジ筒 32の反対側の端部から突出する。

[0071] 第 2プランジャ 35は、雄ネジ部 50と軸部 51と端板 52とを有する。雄ネジ部 50は、 第 2ガスケット 34の取付孔 48にねじ込まれる。取付孔 48の雌ネジ 49と雄ネジ部 50と は嚙合する。これにより、第 2プランジャ 35が第 2ガスケット 34に対してねじ込み式に より着脱される。この着脱は繰り返し fiうこと力 Sでさる。

[0072] 軸部 51は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部 51の断面形 状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部 51の一方端 に雄ネジ部 50が配置され、他方端に端板 52が配置されている。端板 52は、円板形 状の平板であり、軸部 51の軸方向に対して垂直に接続されている。端板 52は第 2プ ランジャ 35のハンドリングを向上させるためのものであり、第 2プランジャ 35が第 2シリ ンジ筒 32に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、第 2プランジャ 35が第 2シリ ンジ筒 32から引き出される際に持ち手となる。

[0073] 第 2プランジャ 35の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 2プランジャ 35をポリプロピレンの 成形品とすることが一般的である。

[0074] 再生医療に適した多血小板血漿が得ることを考慮すると、多血小板血漿分離装置 を構成する各部材のうち、採血された血液と接触する少なくとも第 1シリンジ筒 13、第 1キャップ 14、第 1ガスケット 15、第 1中空針 30、第 2シリンジ筒 32、第 2キャップ 33、 及び第 2ガスケット 34は、 γ線滅菌される。また、第 1シリンジ 10及び第 2シリンジ 11 を滅菌袋に密封してキットとすることにより、多血小板血漿分離装置の使い勝手が向 上する。

[0075] また、本実施形態に係る第 1シリンジ 10及び第 2シリンジ 11の各部材の構成は一例 であり、本発明の要旨を変更しない範囲において、各部材の構成の一部を他の公知 の部材の構成に変更しうる。例えば、採血針は、第 1シリンジ 10の針取付部 20に直 接に取り付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部 20に取り付け られてもよい。同様に、第 1中空針 30は、第 2シリンジ 11の針取付部 42に直接に取り 付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部 42に取り付けられても よい。

[0076] 以下に、本発明に係る多血小板血漿分離方法が説明される。本実施形態に係る多 血小板血漿分離方法は、上記多血小板血漿分離装置を用いて行われ、 6つの主要 なステップからなる。第 1ステップでは、採血された血液 120が満たされた第 1シリンジ 筒 13の第 1ポート 12を封止する。第 2ステップでは、第 1シリンジ筒 13の第 1ポート 12 側を遠心移動方向として、第 1シリンジ筒 13内の血液 120を、赤血球を含む第 1区分 121と、白血球、血小板、及び血漿を含む第 2区分 122とに遠心分離する。第 3ステ ップでは、第 1シリンジ筒 13内の第 1ガスケット 15に第 1中空針 30を貫通し、第 2区分 122を第 2シリンジ筒 32に吸引する。第 4ステップでは、第 2区分 122が満たされた第 2シリンジ筒 32の第 2ポート 31を封止する。第 5ステップでは、第 2シリンジ筒 32の第 2ポート 31側を遠心移動方向として、第 2シリンジ筒 32内の第 2区分 122に対して遠 心分離を行う。第 6ステップでは、第 2シリンジ筒 32内の第 2ガスケット 34を移動させ て、遠心分離された第 2区分 122から多血小板血漿 123を第 2ポート 31から排出す る。これら各ステップが、図 5から図 7を用いて以下に詳細に説明される。図 5から図 7 は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装置の状態を 示す断面図である。

[0077] 第 1ステップでは、図 5 (a)に示されるように、第 1シリンジ筒 13の第 1ポート 12を第 1 キャップ 14で封止して第 1シリンジ筒 13を密封状態にする。第 1シリンジ 10は、採血 に使用される。採血する際には、第 1シリンジ筒 13の第 1ポート 12に採血針が取り付 けられる。もちろん、エクステンションチューブなどを介して採血針が第 1ポート 12に 取り付けられてもよい。また、第 1プランジャ 16は第 1ガスケット 15に取り付けられる。 採血は通常の方法であり、詳細な説明は省略される。この採血により、第 1シリンジ筒 13は血液 120で満たされる。血液 120は全血であり、赤血球、白血球、血小板、血 漿などを含む。採血後に、第 1シリンジ筒 13の第 1ポート 12から採血針を取り外して、 第 1キャップ 14を用いて第 1ポート 12を封止する。これにより、図 5 (a)に示されるよう に、第 1シリンジ筒 13が密封状態となる。

[0078] 第 2ステップでは、密封したシリンジを用いて 1回目の遠心分離を行う。この遠心分 離に先だって、図 5 (b)に示されるように、第 1プランジャ 16を第 1ガスケット 15から取 り外す。これにより、第 1シリンジ筒 13から第 1プランジャ 16が突出しないので、遠心 分離において第 1シリンジ筒 13の取り扱いが容易である。また、遠心分離において、 第 1プランジャ 16が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離において第 1 プランジャ 16の重量が第 1ガスケット 15に作用しないので、第 1シリンジ筒 13から第 1 キャップ 14が外れるおそれを軽減できる。

[0079] この遠心分離において、第 1シリンジ筒 13の第 1ポート 12側を遠心移動方向とする 。ここで、「遠心移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通 常は下側である。また、第 2ステップにおける遠心分離は、弱遠心である。弱遠心とは 、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「全血を赤血球とその他（白血 球、血小板、血漿）に分離する遠心分離」（非特許文献 1参照）と定義される。具体的 には、遠心分離条件が約 500〜2500rpmの範囲における遠心分離が弱遠心とされ る。遠心分離に用いられる遠心分離装置は一般的なものなので、詳細な説明は省略 される。

[0080] この遠心分離により、第 1シリンジ筒 13に密封された血液 120は、第 1区分 121と第 2区分 122とに分離される。第 1区分 121は、赤血球画分である。第 2区分 122は白 血球、血小板、及び血漿を含む画分である。図 5 (c)に示されるように、第 1区分 121 は、遠心分離により遠心移動方向、つまり第 1シリンジ筒 13の下側に分離される。

[0081] 第 3ステップでは、第 1シリンジ筒 13内の第 2区分 122を第 2シリンジ筒 32に吸引す る。 1回目の遠心分離を行った後、図 6 (a)に示されるように、第 1シリンジ筒 13の上 側から第 2シリンジ 11を第 1シリンジ筒 13内に進入させる。そして、第 2シリンジ筒 32 のガイド片 43を第 1ガスケット 15の取付孔 25に嵌入する。これにより、第 2シリンジ筒 32と第 1ガスケット 15とが嵌合状態になる。同時に、第 2シリンジ 32の第 2ポート 31に 取り付けられた第 1中空針 30を第 1ガスケット 15に貫通させる。これにより、第 1中空 針 30の先端は第 1シリンジ筒 13内の第 2区分 122に到達する。この状態で、第 2シリ ンジ 11の第 2プランジャ 35を第 2シリンジ筒 32から引き出して、第 1シリンジ筒 13内 の第 2区分 122を第 2シリンジ筒 32内へ吸引する。なお、第 1中空針 30がェクステン シヨンチューブなどを介して第 2ポート 31に取り付けられている場合には、第 2シリン ジ 11を第 1シリンジ筒 13内に進入させることなぐ第 1中空針 30及びエクステンション チューブのみを第 1シリンジ筒 13内に進入させて、第 1中空針 30を第 1ガスケット 15 に貫通させればよい。 [0082] 図 6 (b)に示されるように、第 2シリンジ筒 32から第 2プランジャ 35を引き出すと、第 1シリンジ筒 13内の第 2区分 122が第 2シリンジ筒 32へ吸引されるとともに、第 1ガス ケット 15が、第 1シリンジ筒 13内を第 1ポート 12側へ移動する。第 1ガスケット 15と第 2シリンジ筒 32とは嵌合状態にあるので、第 1ガスケット 15の移動に伴って、第 2シリ ンジ筒 32が、第 1シリンジ筒 13にさらに進入する。これにより、第 1シリンジ筒 13から 第 2シリンジ筒 32への第 2区分 122の吸引が連続的かつ円滑に行われる。なお、第 1 シリンジ筒 13には、第 1区分 121及び若干量の第 2区分 122が残る力、これらは廃棄 するか、別目的に使用する。

[0083] 第 2ステップにおける遠心分離を弱遠心とすることにより、血液 120を第 1区分 121 と第 2区分 122とに分離するとともに、第 2区分 122においては血小板をほぼ均等に 分散させること力 Sできる。つまり、第 1区分 121との境界付近に血小板が集中すること がない。これにより、第 2区分 122を第 1シリンジ筒 13から第 2シリンジ筒 32へ吸引す る際に生ずる第 2区分 122の若干のロスにより失われる血小板の量を少なくすること ができる。

[0084] 第 4ステップでは、第 2シリンジ筒 32の第 2ポート 31を第 2キャップ 33で封止して第 2シリンジ筒 32を密封状態にする。図 6 (b)に示されるように、第 2シリンジ筒 32には、 第 1シリンジ筒 13から吸引された第 2区分 122のみで満たされている。第 2プランジャ 35が移動しないように固定しながら、第 2シリンジ 11を第 1シリンジ筒 13から引き出す と、密閉状態の第 1シリンジ筒 13内の第 1ガスケット 15は、第 1シリンジ筒 13を移動せ ずに静止状態を維持する。したがって、第 1ガスケット 15の取付孔 25から第 2シリンジ 筒 32のガイド片 43が抜けて、第 1ガスケット 15と第 2シリンジ筒 32の嵌合状態が解除 される。これとともに、第 1中空針 30が第 1ガスケット 15から抜け出る。第 2シリンジ 11 を第 1シリンジ筒 13から完全に引き出した後、第 2シリンジ筒 32から第 1中空針 30を 外して、図 6 (c)に示されるように、第 2ポート 31を第 2キャップ 33で封止する。これに より、第 2シリンジ筒 32は第 2区分 122が満たされた状態で密封状態になる。

[0085] 第 5ステップでは、密封した第 2シリンジ筒 32を用いて 2回目の遠心分離を行う。こ の遠心分離に先だって、図 7 (a)に示されるように、第 2プランジャ 35を第 2ガスケット 34から取り外す。これにより、第 2シリンジ筒 32から第 2プランジャ 35が突出しないの で、遠心分離において第 2シリンジ筒 32の取り扱いが容易である。また、遠心分離に おいて、第 2プランジャ 35が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離にお いて第 2プランジャ 35の重量が第 2ガスケット 34に作用しないので、第 2シリンジ筒 3 2から第 2キャップ 33が外れるおそれを軽減できる。

[0086] この遠心分離において、第 2シリンジ筒 32の第 2ポート 31側を遠心移動方向とする 。また、第 5ステップにおける遠心分離は、強遠心である。強遠心とは、血液の遠心分 離において慣用されており、一般に、「血小板、白血球と残留赤血球を血漿から分離 する遠心分離」（非特許文献 1参照）と定義される。本発明では、第 2区分の下方に血 小板を濃縮する遠心分離を強遠心という。具体的には、遠心分離条件が約 3000〜 4000rpmの範囲における遠心分離が強遠心とされる。この遠心分離により、図 7 (b) に示されるように、第 2区分 122が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つまり第 2シリンジ筒 32の下側に移動する。また、この遠心分離を強遠心とすることにより、第 2区分 122から高濃度の PRP123を分離することができる。なお、図 7 (b)において、 第 2区分 122中に示された横線の密度が高いほど、血小板濃度が高いことが示され ている。実際には、遠心分離された第 2区分 122において、上側から下側へ向けて 形成されるほぼ透明から濃い黄色へのグラデーションにより、血小板が下側に移動し たことが目視により確認できる。

[0087] 第 6ステップでは、第 2シリンジ筒 32から PRP123を排出する。遠心分離を終了した 後、図 7 (c)に示されるように、第 2プランジャ 35を第 2ガスケット 34に取り付ける。これ により、第 2ガスケット 34が容易に移動できる。そして、第 2シリンジ筒 32から第 2キヤ ップ 33を外して第 2ポート 31を開封する。その状態で、第 2プランジャ 35を操作して 第 2ガスケット 34を第 2ポート 31側へ移動させる。 2回目の遠心分離により第 2区分 1 22中の血小板が遠心移動して、第 2区分 122は、上側がほぼ血漿成分のみの上清 となり、下側（第 2ポート 31側）が血小板が多い PRP123となる。したがって、第 2ガス ケット 34の移動により第 2ポート 31から PRP123が排出される。排出された PRP123 は、滅菌された容器 19で受け取る。これにより、採血された血液 120力、ら PRP123力 S 分離される。

[0088] PRP123における血小板の濃度は必ずしも明確に定義されていないが、例えば、 1 mLにおける血小板数を血小板の濃度とした場合、採取された全血における血小板 の濃度に対して 3〜7倍に濃縮されたものが PRP63とされる。また、本発明に係る多 血小板血漿分離方法においては、第 6ステップにおいて遠心分離された第 2区分 12 2のうちの第 2ポート 31側の所定量を PRP123とすることが考えられる。本実施形態 に係る多血小板血漿分離方法によれば、例えば、約 10mLの血液 60力も約 lmLの PRP63を得ること力 Sできる。

[0089] なお、本実施形態では、第 6ステップにおける PRP123の排出を、第 2シリンジ筒 3 2の第 2ポート 31から容器 19などに直接排出することとしたが、感染防止などを考慮 して、第 2シリンジ筒 32の第 2ポート 31にチューブ及び三方活栓などを接続して、排 出される PRP123を別のシリンジ内に吸引してもよい。

[0090] このように、本発明に係る多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法によ れば、採血に使用した第 1シリンジ 10を用いて遠心分離を行って、血液 120から PR P123を得ること力 Sできる。これにより、 γ線滅菌がされた少数の器具で PRP123の分 離を実現できる。また、 2つのシリンジ 10, 11を用いることにより、第 1区分 121と第 2 区分 122とを確実に分離して、高濃度の PRP123を得ることができる。

[0091] [第 2実施形態]

図 8は、本発明の第 2実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 1シリンジ 60の 外観構成を示す分解斜視図である。図 9は、第 3シリンジ 60の内部構成を示す縦断 面図である。図 10は、本発明の第 2実施形態に係る多血小板血漿分離装置の第 4シ リンジ 61の外観構成を示す分解斜視図である。図 11は、第 4シリンジ 61の内部構成 を示す縦断面図である。

[0092] 本発明に係る多血小板血漿分離装置は、第 3シリンジ 60と第 4シリンジ 61とを具備 する。第 3シリンジ 60は、血液を吸引するために用いられる。血液の吸引とは、具体 的には採血が挙げられる力 必ずしも採血である必要はなぐ既に採血された血液を 吸引する場合も含まれる。第 4シリンジ 61は、遠心分離により第 3シリンジ 60に形成さ れた白血球、血小板、及び血漿を含む画分 (本発明の第 2区分に相当する。）を吸引 するために用いられる。

[0093] 図 8及び図 9に示されるように、第 3シリンジ 60は、採血針が取付可能な第 3ポート 6 3を有する第 3シリンジ筒 63と、第 3ポート 63に着脱可能な第 3キャップ 64と、第 3シリ ンジ筒 63内を往復動される第 3ガスケット 65と、第 3ガスケット 65に設けられた第 1分 割プランジャ 66と、第 1分割プランジャ 66に着脱可能に接続された第 2分割プランジ ャ 67とを具備する。

[0094] 第 3シリンジ筒 63は、ほぼ円筒形状であり、一方の端部が縮径されて針取付部 70 が形成されている。針取付部 70の内部空間は、第 3シリンジ筒 63の内部空間と連続 している。針取付部 70により本発明に係る第 3ポート 62が形成されている。針取付部 70には、採血針が取り付け可能である。第 3シリンジ筒 63の他方の端部は、縮径さ れることなく開口されている。この他方の端部から第 3シリンジ筒 63の内部空間へ第 1 分割プランジャ 66及び第 2分割プランジャ 67が進退される。第 3シリンジ筒 63の他方 の端部には、第 3シリンジ筒 63の外周側へ突出する鍔 71が形成されている。鍔 71は ハンドリングを向上させるためのものであり、第 3シリンジ筒 63、第 1分割プランジャ 66 及び第 2分割プランジャ 67の操作の際に鍔 71に指が掛けられる。

[0095] 第 3シリンジ筒 63の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 3シリンジ筒 63をポリプロピレンの 成形品とすることが一般的である。第 3シリンジ筒 63の内部空間に満たされた血液や 血漿などを目視確認するために、第 3シリンジ筒 63は、透明ないし半透明であること が好ましい。第 3シリンジ筒 63の容量は特に限定されない。第 3シリンジ筒 63に容量 を示す目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握 できるので好ましい。

[0096] 第 3キャップ 64は、第 3シリンジ筒 63の第 3ポート 62を封止する。図 8及び図 9に示 されるように、第 3キャップ 64は、大径部 72及び小径部 73を有する。小径部 73は、 大径部 72の内側の空間に配置されている。小径部 73は、第 3シリンジ筒 63の針取 付部 70に外嵌可能な管形状である。小径部 73の内部には、第 3シリンジ筒 63の第 3 ポート 62に嵌入可能な栓部 74が配設されている。大径部 72は、第 3キャップ 64を第 3シリンジ筒 33に着脱する際の持ち手として機能する。第 3キャップ 64が第 3シリンジ 筒 63に取り付けられると、図 9に示されるように、小径部 73が針取付部 70の外周面 に密着し、栓部 74が第 3ポート 62に嵌入して、第 3ポート 62が液密に封止される。

[0097] 第 3キャップ 64の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 3キャップ 64としてポリプロピレン やエラストマ一の成形品が採用されうる。

[0098] 第 3ガスケット 65は、第 3シリンジ筒 63の内部に揷入されて第 3シリンジ筒 63を液密 に封止する。第 3ガスケット 65は、液密状態を維持したまま、第 3シリンジ筒 63内を往 復動可能である。第 3ガスケット 65の往復動により、第 3シリンジ筒 63の内部に密封 可能な液体の容量が変化する。図 8に示されるように、第 3ガスケット 65は、第 3シリン ジ筒 63の内径に対応した径の円柱形状である。図 9に示されるように、第 3ガスケット 65の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第 3シリンジ筒 6 3の奥部の形状に対応している。第 1分割プランジャ 66と接続される第 3ガスケット 65 の他方の端面には、取付孔 75が形成されている。取付孔 75は第 3ガスケット 65の円 形の端面の中心に形成されている。取付孔 75は円孔であり、その奥部が拡径されて いる。換言すれば、取付孔 25の開口は縮径されている。

[0099] 第 3ガスケット 65の素材は _Ί線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 3ガスケット 65としてエラストマ一 の成形品が採用されうる。

[0100] 第 1分割プランジャ 66は、はめ込み式により第 3ガスケット 65に取り付けられている 。第 1分割プランジャ 66の全体形状は、第 3シリンジ筒 63の内部空間に揷入可能な 外形であって、第 3シリンジ筒 63の軸方向（図 8の 1点鎖線方向、図 9における上下 方向）に長い略円筒形状である。第 1分割プランジャ 66の軸方向の長さは、第 3シリ ンジ筒 63の軸方向の長さより十分に短い。したがって、第 3ガスケット 65に取り付けら れた状態で、第 3ガスケット 65が第 3シリンジ筒 63内を往復動する範囲の大部分にお いて、第 1分割プランジャ 66は第 3シリンジ筒 63の内部空間に埋没して!/、る。

[0101] 第 1分割プランジャ 66は、軸部 79の先端側（第 3ガスケット 65側）に嵌入部 76を有 する。嵌入部 76は、軸部 79の先端から軸方向に突出されており、首部 77と鍔部 78 とを有する。首部 77及び鍔部 78は、首部 77から軸方向に順次配置されている。首 部 77は、鍔部 78及び軸部 79の外形より小さい。つまり、首部 77は、鍔部 78と軸部 7 9との間の縮径された部分である。鍔部 78は、円盤形状であり、軸方向と直交する方 向を円形の端面として配設されている。この首部 77及び鍔部 78の形状と、第 3ガス ケット 65の取付孔 75の形状とが対応して、取付孔 75と嵌入部 76とが嵌合されている

[0102] 軸部 79は、ほぼ円筒形状である。軸部 79により形成される孔 80が本発明に係る揷 通孔に相当する。孔 80は、軸部 79を軸方向にわたって形成されており、嵌入部 76 の鍔部 78に至る。したがって、第 3ガスケット 65と第 1分割プランジャ 66とが嵌合され た状態にお!/、て、孔 80は、軸部 79の基端側（第 2分割プランジャ 67側）から第 3ガス ケット 65に通ずる経路となる。孔 80は、第 2中空針 90のカヌラ 100が揷通されるに十 分な径である。

[0103] 軸部 79の基端側には、接続部 81が形成されている。接続部 81は、軸部 79より縮 径されて軸方向へ突出されている。接続部 81の外周面には雄ネジ 82が形成されて いる。軸部 79の孔 80は、接続部 81に到達して基端側に開口している。この開口に は、栓 83が嵌入されている。栓 83は、ゴムやエラストマ一などの弾性部材であり、第 2 中空針 90のカヌラ 100が貫通可能である。この栓 83により、孔 80の基端側が封止さ れている。また、軸部 79の基端側には栓 83を覆うようにカバー 84が装着されている。 カバー 84は、栓 83の脱落を防止するためのものである。カバー 84には、栓 83の一 部を露出するための孔 85が形成されている。孔 85は、軸部 79の孔 80とほぼ同軸上 に配置されている。したがって、カバー 84の孔 85に揷通された第 2中空針 90のカヌ ラ 100は、栓 83を貫通して軸部 79の孔 80 進入する

[0104] 第 1分割プランジャ 66の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、 ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品 とされることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 1分割プランジャ 66をポリプ ロピレンの成形品とすることが一般的である。

[0105] 第 2分割プランジャ 67は、ねじ込み式により第 1分割プランジャ 66に対して着脱可 能なものである。第 2分割プランジャ 67の全体形状は、第 3シリンジ筒 63の内部空間 に揷入可能な外形であって、第 3シリンジ筒 63の軸方向に長い。第 1分割プランジャ 66と第 2分割プランジャ 67とを接続した状態において、これらの軸方向の長さの合計 は第 3シリンジ 63の軸方向の長さより長い。したがって、第 3ガスケット 65を第 3シリン ジ筒 63の奥部（第 3ポート 62側）に押し込んだ状態で、第 2分割プランジャ 67の一部 が第 3シリンジ筒 63の反対側の端部から突出する。

[0106] 第 2分割プランジャ 67は、雌ネジ部 86と軸部 87と端板 88とを有する。雌ネジ部 86 は、第 1分割プランジャ 66の接続部 81を覆う孔 89の内周面に雌ネジが形成されたも のである。雌ネジ部 86が接続部 81の雄ネジ 82と嚙合することにより、第 1分割プラン ジャ 66と第 2分割プランジャ 67とが同軸に接続され 1つのプランジャをなす。この状 態で、第 1分割プランジャ 66の接続部 81は、第 2分割プランジャ 67の雌ネジ部 86に より完全に覆われる。第 1分割プランジャ 66と第 2分割プランジャ 66との着脱は繰り 返し行うこと力 Sできる。第 1分割プランジャ 66と第 2分割プランが 67とが接続された状 態における 1個のプランジャが、本発明に係る第 3プランジャに相当する。

[0107] 軸部 87は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部 87の断面形 状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部 87の一方端 に雌ネジ部 86が配置され、他方端に端板 88が配置されている。端板 88は、円板形 状の平板であり、軸部 87の軸方向に対して垂直に接続されている。端板 88は、第 1 分割プランジャ 66及び第 2分割プランジャ 67で構成されるプランジャ（第 3プランジャ )のハンドリングを向上させるためのものであり、このプランジャが第 3シリンジ筒 63に 対して押し込まれる際に指が押し当てられ、このプランジャが第 3シリンジ筒 63から引 き出される際に持ち手となる。

[0108] 第 2分割プランジャ 67の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、 ガラスや合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品 とされることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 2分割プランジャ 67をポリプ ロピレンの成形品とすることが一般的である。

[0109] 図 10及び図 11に示されるように、第 4シリンジ 61は、第 2中空針 90と、第 2中空針 3 0が取付可能な第 4ポート 91を有する第 4シリンジ筒 92と、第 4ポート 91に着脱可能 な第 4キャップ 93と、第 4シリンジ筒 92内を往復動される第 4ガスケット 94と、第 4ガス ケット 94に着脱可能に設けられた第 4プランジャ 95とを具備する。

[0110] 第 2中空針 30は、中空管の先端側に刃面が形成されたカヌラ 100と、カヌラ 100の 基端と接続されたハブ 101とを有する。カヌラ 100の軸方向の長さは、第 3シリンジ 60 の第 1分割プランジャ 66の孔 80を揷通して第 3ガスケット 65を貫通するに必要な長さ に設定される。ハブ 101は、ほぼ円筒形状であり、第 4シリンジ筒 92の針取付部 102 に外嵌されるに必要な内径及び軸方向の長さに設定される。ハブ 101において、力 ヌラ 100の基端が接続される側の端部は、カヌラ 100の接続により閉止されている。 カヌラ 100とハブ 101とは接着剤等により固定されている。ハブ 101において、針取 付部 102と接続される側の端部は開口されている。カヌラ 100の基端側の開口は、ハ ブ 101の内部空間と通じている。したがって、カヌラ 100の先端側の開口力、らカヌラ 1 00内に進入した液体等は、カヌラ 100の基端側の開口力、らハブ 101の内部空間へ 流入する。この内部空間は、ハブ 101が針取付部 102に外嵌されることにより、第 4ポ ート 91と連続する。

[0111] 第 4シリンジ筒 92は、ほぼ円筒形状であり、第 3シリンジ筒 63の内部空間に浸入可 能な大きさである。第 4シリンジ筒 92の一方の端部は縮径されて、針取付部 102が形 成されている。針取付部 102の内部空間は、第 4シリンジ筒 92の内部空間と連続し ている。針取付部 102により本発明に係る第 4ポート 91が形成されている。針取付部 102には、第 2中空針 90が取り付け可能である。第 4シリンジ筒 92の他方の端部は、 縮径されることなく開口されている。この他方の端部から第 4シリンジ筒 32の内部空 間へ第 4プランジャ 95が進退される。第 4シリンジ筒 92の他方の端部には、第 4シリン ジ筒 92の外周側へ突出する鍔 103が形成されている。鍔 103はハンドリングを向上 させるためのものであり、第 4シリンジ筒 92及び第 4プランジャ 95の操作の際に鍔 10 3に指が掛けられる。

[0112] 第 4シリンジ筒 92の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 4シリンジ筒 92をポリプロピレンの 成形品とすることが一般的である。第 4シリンジ筒 92の内部空間に満たされた血漿な どを目視確認するために、第 4シリンジ筒 92は、透明ないし半透明であることが好ま しい。第 4シリンジ筒 92の容量は特に限定されない。第 4シリンジ筒 92に容量を示す 目盛りが付されていると、内部空間に満たされた液体の量などが容易に把握できるの で好ましい。

[0113] 第 4キャップ 93は、第 4シリンジ筒 92の第 4ポート 91を封止する。図 10及び図 11に 示されるように、第 4キャップ 93は、大径部 104及び小径部 105を有する。小径部 10 5は、大径部 104の内側の空間に配置されている。小径部 105は、第 4シリンジ筒 92 の針取付部 102に外嵌可能な管形状である。小径部 105の内部には、第 4シリンジ 筒 92の第 4ポート 91に嵌入可能な栓部 106が配設されている。大径部 104は、第 4 キャップ 93を第 4シリンジ筒 92に着脱する際の持ち手として機能する。第 4キャップ 9 3が第 4シリンジ筒 92に取り付けられると、図 11に示されるように、小径部 105が針取 付部 102の外周面に密着し、栓部 106が第 4ポート 91に嵌入して、第 4ポート 91が 液密に封止される。

[0114] 第 4キャップ 93の素材は _Ί線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 4キャップ 93としてポリプロピレン やエラストマ一の成形品が採用されうる。

[0115] 第 4ガスケット 94は、第 4シリンジ筒 92の内部に揷入されて第 4シリンジ筒 92を液密 に封止する。第 4ガスケット 94は、液密状態を維持したまま、第 4シリンジ筒 42内を往 復動可能である。第 4ガスケット 44の往復動により、第 4シリンジ筒 42の内部に密封 可能な液体の容量が変化する。図 10に示されるように、第 4ガスケット 94は、第 4シリ ンジ筒 92の内径に対応した径の円柱形状である。図 11に示されるように、第 4ガスケ ット 94の一方の端面は円錐形状に突出されている。この端面の形状は、第 4シリンジ 筒 92の奥部の形状に対応して!/、る。第 4プランジャ 95と接続される第 4ガスケット 94 の他方の端面には、取付孔 107が形成されている。取付孔 107は第 4ガスケット 94の 円形の端面の中心に形成されている。取付孔 107は円孔である。取付孔 107の内周 面には、雌ネジ 108が形成されている。

[0116] 第 4ガスケット 94の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 4ガスケット 94としてエラストマ一 の成形品が採用されうる。

[0117] 第 4プランジャ 95は、ねじ込み式により第 4ガスケット 94に対して着脱可能なもので ある。第 4プランジャ 95の全体形状は、第 4シリンジ筒 92の内部空間に揷入可能な 外形であって、第 4シリンジ筒 92の軸方向（図 10の 1点鎖線方向、図 11における上 下方向）の長さより十分に長い。したがって、第 4ガスケット 94を第 4シリンジ筒 92の 奥部（第 4ポート 91側）に押し込んだ状態で、第 4プランジャ 95の一部が第 4シリンジ 筒 92の反対側の端部から突出する。

[0118] 第 4プランジャ 95は、雄ネジ部 109と軸部 110と端板 111とを有する。雄ネジ部 109 は、第 4ガスケット 94の取付孔 107にねじ込まれる。取付孔 107の雌ネジ 108と雄ネ ジ部 109とは嚙合する。これにより、第 4プランジャ 95が第 4ガスケット 94に対してね じ込み式により着脱される。この着脱は繰り返し行うことができる。

[0119] 軸部 110は、横断面（軸方向と直交する方向）が十字形状である。軸部 110の断面 形状は成形加工の容易性や強度などを考慮して適宜選択されうる。軸部 110の一方 端に雄ネジ部 109が配置され、他方端に端板 110が配置されている。端板 109は、 円板形状の平板であり、軸部 110の軸方向に対して垂直に接続されている。端板 11 1は第 4プランジャ 95のハンドリングを向上させるためのものであり、第 4プランジャ 95 が第 4シリンジ筒 92に対して押し込まれる際に指が押し当てられ、第 4プランジャ 95 が第 4シリンジ筒 92から引き出される際に持ち手となる。

[0120] 第 4プランジャ 95の素材は γ線滅菌が可能なものであれば特に限定されず、ガラス や合成樹脂などが採用されうる。多血小板血漿分離装置がデイスポーザル品とされ ることや、 γ線滅菌が施されることを考慮すると、第 4プランジャ 95をポリプロピレンの 成形品とすることが一般的である。

[0121] 再生医療に適した多血小板血漿が得ることを考慮すると、多血小板血漿分離装置 を構成する各部材のうち、採血された血液と接触する少なくとも第 3シリンジ筒 63、第 3キャップ 64、第 3ガスケッ卜 65、第 2中空針 90、第 4シリンジ筒 92、第 4キャップ 93、 及び第 4ガスケット 94は、 γ線滅菌される。また、第 3シリンジ 60及び第 4シリンジ 61 を滅菌袋に密封してキットとすることにより、多血小板血漿分離装置の使い勝手が向 上する。

[0122] なお、本実施形態に係る第 3シリンジ 60及び第 4シリンジ 61の各部材の構成は一 例であり、本発明の要旨を変更しない範囲において、各部材の構成の一部を他の公 知の部材の構成に変更しうる。例えば、採血針は、第 3シリンジ 60の針取付部 70に 直接に取り付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部 70に取り 付けられてもよい。同様に、第 2中空針 90は、第 4シリンジ 61の針取付部 102に直接 に取り付けられても、エクステンションチューブなどを介して針取付部 102に取り付け られてもよい。

[0123] 以下に、本発明に係る多血小板血漿分離方法が説明される。本実施形態に係る多 血小板血漿分離方法は、上記多血小板血漿分離装置を用いて行われ、 6つの主要 なステップからなる。第 7ステップでは、採血された血液 120が満たされた第 3シリンジ 筒 63の第 3ポート 62を封止する。第 8ステップでは、第 3シリンジ筒 63の第 1ポート 62 側を遠心移動方向として、第 3シリンジ筒 63内の血液 120を、赤血球を含む第 1区分 121と、白血球、血小板、及び血漿を含む第 2区分 122とに遠心分離する。第 9ステ ップでは、第 3シリンジ筒 63内の第 3ガスケット 65に第 2中空針 90を貫通し、第 2区分 122を第 4シリンジ筒 92に吸引する。第 10ステップでは、第 2区分 122が満たされた 第 4シリンジ筒 92の第 4ポート 91を封止する。第 11ステップでは、第 4シリンジ筒 92 の第 4ポート 91側を遠心移動方向として、第 4シリンジ筒 92内の第 2区分 122に対し て遠心分離を行う。第 12ステップでは、第 4シリンジ筒 92内の第 4ガスケット 94を移 動させて、遠心分離された第 2区分 122から多血小板血漿 123を第 4ポート 91から排 出する。これら各ステップが、図 12から図 14を用いて以下に詳細に説明される。図 1 2から図 14は、多血小板血漿分離方法の各ステップにおける多血小板血漿分離装 置の状態を示す断面図である。

[0124] 第 7ステップでは、図 12 (a)に示されるように、第 3シリンジ筒 63の第 3ポート 62を第 3キャップ 64で封止して第 3シリンジ筒 63を密封状態にする。第 3シリンジ 60は、採 血に使用される。採血する際には、第 3シリンジ筒 63の第 3ポート 62に採血針が取り 付けられる。もちろん、エクステンションチューブなどを介して採血針が第 3ポート 62 に取り付けられてもよい。また、第 1分割プランジャ 66と第 2分割プランジャ 67とは接 続されている。採血は通常の方法であり、詳細な説明は省略される。この採血により、 第 3シリンジ筒 63は血液 120で満たされる。血液 120は全血であり、赤血球、白血球 、血小板、血漿などを含む。採血後に、第 3シリンジ筒 63の第 3ポート 62から採血針 を取り外して、第 3キャップ 64を用いて第 3ポート 62を封止する。これにより、図 12 (a )に示されるように、第 3シリンジ筒 63が密封状態となる。

[0125] 第 8ステップでは、密封したシリンジを用いて 1回目の遠心分離を行う。この遠心分 離に先だって、図 12 (b)に示されるように、第 2分割プランジャ 67を第 1分割プランジ ャ 66から取り外す。これにより、第 3シリンジ筒 63から第 2分割プランジャ 67が突出し ないので、遠心分離において第 3シリンジ筒 63の取り扱いが容易である。また、遠心 分離において、第 2分割プランジャ 67が不用意に操作されることがない。さらに、遠 心分離において第 2分割プランジャ 67の重量が第 3ガスケット 65に作用しないので、 第 3シリンジ筒 63から第 3キャップ 64が外れるおそれを軽減できる。

[0126] この遠心分離において、第 3シリンジ筒 63の第 3ポート 62側を遠心移動方向とする 。ここで、「遠心移動方向」とは、遠心分離において遠心力が作用する方向であり、通 常は下側である。また、第 2ステップにおける遠心分離は、弱遠心である。弱遠心とは 、血液の遠心分離において慣用されており、一般に、「全血を赤血球とその他（白血 球、血小板、血漿）に分離する遠心分離」（非特許文献 1参照）と定義される。具体的 には、遠心分離条件が約 500〜2500rpmの範囲における遠心分離が弱遠心とされ る。遠心分離に用いられる遠心分離装置は一般的なものなので、詳細な説明は省略 される。

[0127] この遠心分離により、第 3シリンジ筒 63に密封された血液 120は、第 1区分 121と第 2区分 122とに分離される。第 1区分 121は、赤血球画分である。第 2区分 122は、白 血球、血小板、及び血漿を含む区分である。図 12 (c)に示されるように、第 1区分 12 1は、遠心分離により遠心移動方向、つまり第 3シリンジ筒 63の下側に分離される。

[0128] 第 9ステップでは、第 3シリンジ筒 63内の第 2区分 122を第 4シリンジ筒 92に吸引す る。 1回目の遠心分離を行った後、図 13 (a)に示されるように、第 4シリンジ 92の第 4 ポート 91に取り付けられた第 2中空針 90を、第 1分割プランジャ 66の孔 80に揷通さ せる。孔 80の基端側は栓 83で封止されているので、栓 83に対して第 2中空針 90の カヌラ 100を貫通させることにより、カヌラ 100を孔 80に進入させる。さらにカヌラ 100 を孔 80に対して進入させると、カヌラ 100の先端が孔 80を抜け出て第 3ガスケット 65 に到達する。さらにカヌラ 100を進めて、第 3ガスケット 65を貫通させる。これにより、 第 2中空針 90のカヌラ 100の先端は第 3シリンジ筒 63内の第 2区分 122に到達する 。この状態で、第 4シリンジ 61の第 4プランジャ 95を第 2シリンジ筒 62から引き出して 、第 3シリンジ筒 63内の第 2区分 122を第 4シリンジ筒 92内へ吸引する。なお、第 2中 空針 90がエクステンションチューブなどを介して第 4ポート 91に取り付けられている 場合にも、前述と同様にして、第 2中空針 90を第 1分割プランジャ 66の孔 80に揷通 させて、第 3ガスケット 65を貫通させればよい。

[0129] 図 13 (b)に示されるように、第 4シリンジ筒 92から第 4プランジャ 95を引き出すと、 第 3シリンジ筒 63内の第 2区分 122が第 4シリンジ筒 92へ吸引されるとともに、第 3ガ スケット 65が、第 3シリンジ筒 63内を第 3ポート 62側へ移動する。第 2中空針 90の力 ヌラ 100が第 3ガスケット 65及び栓 83を貫通した状態にあるので、これらの摩擦力に より、第 3ガスケット 65の移動に伴って、第 4シリンジ筒 92が、第 3シリンジ筒 63内へ 進入する。これにより、第 3シリンジ筒 63から第 4シリンジ筒 92への第 2区分 122の吸 引が連続的かつ円滑に行われる。なお、第 3シリンジ筒 63には、第 1区分 121及び 若干量の第 2区分 122が残る力 S、これらは廃棄するか、別目的に使用する。

[0130] 第 8ステップにおける遠心分離を弱遠心とすることにより、血液 120を第 1区分 121 と第 2区分 122とに分離するとともに、第 2区分 122においては血小板をほぼ均等に 分散させること力 Sできる。つまり、第 1区分 121との境界付近に血小板が集中すること がない。これにより、第 2区分 122を第 3シリンジ筒 63から第 4シリンジ筒 92へ吸引す る際に生ずる第 2区分 122の若干のロスにより失われる血小板の量を少なくすること ができる。

[0131] 第 10ステップでは、第 4シリンジ筒 92の第 4ポート 91を第 4キャップ 93で封止して 第 4シリンジ筒 92を密封状態にする。図 13 (b)に示されるように、第 4シリンジ筒 92に は、第 3シリンジ筒 63から吸引された第 2区分 122のみで満たされている。第 4プラン ジャ 95が移動しないように固定しながら、第 4シリンジ 61に取り付けられた第 2中空針 90を第 1分割プランジャ 66から引き抜くと、密閉状態の第 3シリンジ筒 63内の第 3ガ スケット 65は、第 3シリンジ筒 63を移動せずに静止状態を維持する。その後、第 4シリ ンジ筒 92から第 2中空針 90を外して、図 13 (c)に示されるように、第 4ポート 91を第 4 キャップ 93で封止する。これにより、第 4シリンジ筒 92は第 2区分 122が満たされた状 態で密封状態になる。

[0132] 第 11ステップでは、密封した第 4シリンジ筒 92を用いて 2回目の遠心分離を行う。こ の遠心分離に先だって、図 14 (a)に示されるように、第 4プランジャ 95を第 4ガスケッ ト 94から取り外す。これにより、第 4シリンジ筒 92から第 4プランジャ 95が突出しない ので、遠心分離において第 4シリンジ筒 92の取り扱いが容易である。また、遠心分離 において、第 4プランジャ 95が不用意に操作されることがない。さらに、遠心分離に おいて第 4プランジャ 95の重量が第 4ガスケット 94に作用しないので、第 4シリンジ筒 92から第 4キャップ 93が外れるおそれを軽減できる。

[0133] この遠心分離において、第 4シリンジ筒 92の第 4ポート 91側を遠心移動方向とする 。また、第 11ステップにおける遠心分離は、強遠心である。強遠心とは、血液の遠心 分離において慣用されており、一般に、「血小板、白血球と残留赤血球を血漿から分 離する遠心分離」（非特許文献 1参照）と定義される。本発明では、第 2区分の下方に 血小板を濃縮する遠心分離を強遠心という。具体的には、遠心分離条件が約 3000 〜4000rpmの範囲における遠心分離が強遠心とされる。この遠心分離により、図 14 (b)に示されるように、第 2区分 122が遠心分離され、血小板が遠心移動方向、つま り第 4シリンジ筒 92の下側に移動する。また、この遠心分離を強遠心とすることにより 、第 2区分 122から高濃度の PRP123を分離することができる。なお、図 14 (b)にお いて、第 2区分 122中に示された横線の密度が高いほど、血小板濃度が高いことが 示されている。実際には、遠心分離された第 2区分 122において、上側から下側へ向 けて形成されるほぼ透明から濃い黄色へのグラデーションにより、血小板が下側に移 動したこと力 S目視により確言忍できる。

[0134] 第 12ステップでは、第 4シリンジ筒 92から PRP123を排出する。遠心分離を終了し た後、図 14 (c)に示されるように、第 4プランジャ 95を第 4ガスケット 94に取り付ける。 これにより、第 4ガスケット 94が容易に移動できる。そして、第 4シリンジ筒 92から第 4 キャップ 93を外して第 4ポート 91を開封する。その状態で、第 4プランジャ 95を操作 して第 4ガスケット 94を第 4ポート 91側へ移動させる。 2回目の遠心分離により第 2区 分 122中の血小板が遠心移動して、第 2区分 122は、上側がほぼ血漿成分のみの 上清となり、下側（第 4ポート 91側）が血小板が多い PRP123となる。したがって、第 4 ガスケット 94の移動により第 4ポート 91から PRP123が排出される。排出された PRP 123は、滅菌された容器 19で受け取る。これにより、採血された血液 120力も PRP1 23が分離される。

[0135] PRP123における血小板の濃度は必ずしも明確に定義されていないが、例えば、 1 mLにおける血小板数を血小板の濃度とした場合、採取された全血における血小板 の濃度に対して 3〜7倍に濃縮されたものが PRP63とされる。また、本発明に係る多 血小板血漿分離方法においては、第 6ステップにおいて遠心分離された第 2区分 12 2のうちの第 4ポート 91側の所定量を PRP123とすることが考えられる。本実施形態 に係る多血小板血漿分離方法によれば、例えば、約 10mLの血液 60力も約 lmLの PRP63を得ること力 Sできる。

[0136] なお、本実施形態では、第 12ステップにおける PRP123の排出を、第 4シリンジ筒

92の第 4ポート 91から容器 19などに直接排出することとした力 感染防止などを考 慮して、第 4シリンジ筒 92の第 4ポート 91にチューブ及び三方活栓などを接続して、 排出される PRP123を別のシリンジ内に吸引してもよい。

[0137] このように、本発明に係る多血小板血漿分離装置及び多血小板血漿分離方法によ れば、採血に使用した第 3シリンジ 60を用いて遠心分離を行って、血液 120から PR P123を得ること力 Sできる。これにより、 γ線滅菌された少数の器具で PRP123の分 離を実現できる。また、 2つのシリンジ 60, 61を用いることにより、第 1区分 121と第 2 区分 122とを確実に分離して、高濃度の PRP123を得ることができる。

産業上の利用可能性

[0138] 本発明は、全血を遠心分離することにより PRPを得るための多血小板血漿分離装 置及び多血小板血漿分離方法に適用できる。

Claims

請求の範囲

[1] 血液を吸引するために用いられる第 1シリンジと、該第 1シリンジから血小板及び血 漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられる第 2シリンジと、を具備し、 上記第 1シリンジは、

採血針が取付可能な第 1ポートを有する第 1シリンジ筒と、

上記第 1ポートに着脱可能な第 1キャップと、

上記第 1シリンジ筒を液密に封止して第 1シリンジ筒内を往復動される第 1ガスケット と、

上記第 1ガスケットに着脱可能に設けられた第 1プランジャと、を具備し、 上記第 2シリンジは、

上記第 1ガスケットを貫通可能な第 1中空針と、

上記第 1中空針が取付可能な第 2ポートを有する第 2シリンジ筒と、

上記第 2ポートに着脱可能な第 2キャップと、

上記第 2シリンジ筒を液密に封止して第 2シリンジ筒内を往復動される第 2ガスケット と、

上記第 2ガスケットに着脱可能に設けられた第 2プランジャと、を具備する多血小板 血漿分離装置。

[2] 上記第 1プランジャは、ねじ込み式により上記第 1ガスケットに対して着脱可能であ り、上記第 2プランジャは、ねじ込み式により上記第 2ガスケットに対して着脱可能で ある請求項 1に記載の多血小板血漿分離装置。

[3] 上記第 1ガスケットは、上記第 1プランジャが着脱される側にガイド孔を有し、

上記第 2シリンジ筒は、第 2ポートの周囲に上記ガイド孔に嵌入されるガイド片を有 する請求項 1又は 2に記載の多血小板血漿分離装置。

[4] 上記第 1シリンジ及び上記第 2シリンジが滅菌袋に密封されたものである請求項 1か ら 3のいずれかに記載の多血小板血漿分離装置。

[5] 血液を吸引するために用いられる第 3シリンジと、該第 3シリンジから血小板及び血 漿を含む遠心分離区分を吸引するために用いられる第 4シリンジと、を具備し、 上記第 3シリンジは、 採血針が取付可能な第 3ポートを有する第 3シリンジ筒と、

上記第 3ポートに着脱可能な第 3キャップと、

上記第 3シリンジ筒を液密に封止して第 3シリンジ筒内を往復動される第 3ガスケット と、

上記第 3ガスケットに設けられ、該第 3ガスケットに通ずる揷通孔を有する第 1分割 上記第 1分割プランジャに着脱可能に接続された第 2分割プランジャと、を具備し、 上記第 4シリンジは、

上記第 1分割プランジャの揷通孔を通じて上記第 3ガスケットを貫通可能な第 2中 空針と、

上記第 2中空針が取付可能な第 4ポートを有する第 4シリンジ筒と、

上記第 4ポートに着脱可能な第 4キャップと、

上記第 4シリンジ筒を液密に封止して第 4シリンジ筒内を往復動される第 4ガスケット と、

上記第 4ガスケットに着脱可能に設けられた第 4プランジャと、を具備する多血小板 血漿分離装置。

[6] 上記第 2分割プランジャは、ねじ込み式により上記第 1分割プランジャに対して着脱 可能であり、上記第 4プランジャは、ねじ込み式により上記第 4ガスケットに対して着 脱可能である請求項 5に記載の多血小板血漿分離装置。

[7] 上記第 1分割プランジャは、上記揷通孔を封止し且つ上記第 2中空針が貫通可能 な栓を有する請求項 5又は 6に記載の多血小板血漿分離装置。

[8] 上記第 3シリンジ及び上記第 4シリンジが滅菌袋に密封されたものである請求項 5か ら 7のいずれかに記載の多血小板血漿分離装置。

[9] 第 1ポートを有する第 1シリンジ筒、該第 1シリンジ筒を液密に封止して第 1シリンジ 筒内を往復動される第 1ガスケット、及び該第 1ガスケットに設けられた第 1プランジャ を具備する第 1シリンジと、第 1中空針、該第 1中空針を取付可能な第 2ポートを有す る第 2シリンジ筒、該第 2シリンジ筒を液密に封止して第 2シリンジ筒内を往復動され る第 2ガスケット、及び該第 2ガスケットに設けられた第 2プランジャを具備する第 2シリ ンジと、を用いた多血小板血漿分離方法であって、

採血された血液が満たされた上記第 1シリンジ筒の第 1ポートを封止する第 1ステツ プと、

上記第 1シリンジ筒の第 1ポート側を遠心移動方向として、上記第 1シリンジ筒内の 血液を、赤血球を含む第 1区分と血小板及び血漿を含む第 2区分とに遠心分離する 上記第 1シリンジ筒内の第 1ガスケットに第 1中空針を貫通し、上記第 2区分を上記 第 2シリンジ筒に吸引する第 3ステップと、

上記第 2区分が満たされた上記第 2シリンジ筒の第 2ポートを封止する第 4ステップ と、

上記第 2シリンジ筒の第 2ポート側を遠心移動方向として、上記第 2シリンジ筒内の 第 2区分に対して遠心分離を行う第 5ステップと、

上記第 2シリンジ筒内の第 2ガスケットを移動させて、遠心分離された上記第 2区分 から多血小板血漿を上記第 2ポートから排出する第 6ステップと、を含む多血小板血 漿分離方法。

[10] 上記第 6ステップは、遠心分離された上記第 2区分から上記第 2ポート側の所定量 を多血小板血漿として排出する請求項 9に記載の多血小板血漿分離方法。

[11] 上記第 2ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第 5ステップにおける遠 心分離は強遠心である請求項 9又は 10に記載の多血小板血漿分離方法。

[12] 請求項 9から 11のいずれかに記載の多血小板血漿分離方法により得られた多血 小板血漿。

[13] 第 3ポートを有する第 3シリンジ筒、該第 3シリンジ筒を液密に封止して第 3シリンジ 筒内を往復動される第 3ガスケット、及び該第 3ガスケットに設けられた第 3プランジャ を具備する第 3シリンジと、第 2中空針、該第 2中空針を取付可能な第 4ポートを有す る第 4シリンジ筒、該第 4シリンジ筒を液密に封止して第 4シリンジ筒内を往復動され る第 4ガスケット、及び該第 4ガスケットに設けられた第 4プランジャを具備する第 4シリ ンジと、を用いた多血小板血漿分離方法であって、

採血された血液が満たされた上記第 3シリンジ筒の第 3ポートを封止する第 7ステツ プと、

上記第 3シリンジ筒の第 3ポート側を遠心移動方向として、上記第 3シリンジ筒内の 血液を、赤血球を含む第 1区分と血小板及び血漿を含む第 2区分とに遠心分離する 第 8ステップと、

上記第 3シリンジ筒内の第 3ガスケットに第 2中空針を貫通し、上記第 2区分を上記 第 4シリンジ筒に吸引する第 9ステップと、

上記第 2区分が満たされた上記第 4シリンジ筒の第 4ポートを封止する第 10ステツ プと、

上記第 4シリンジ筒の第 4ポート側を遠心移動方向として、上記第 4シリンジ筒内の 第 2区分に対して遠心分離を行う第 11ステップと、

上記第 4シリンジ筒内の第 4ガスケットを移動させて、遠心分離された上記第 2区分 から多血小板血漿を上記第 4ポートから排出する第 12ステップと、を含む多血小板 血漿分離方法。

[14] 上記第 12ステップは、遠心分離された上記第 2区分から上記第 4ポート側の所定 量を多血小板血漿として排出する請求項 13に記載の多血小板血漿分離方法。

[15] 上記第 8ステップにおける遠心分離は弱遠心であり、上記第 11ステップにおける遠 心分離は強遠心である請求項 13又は 14に記載の多血小板血漿分離方法。

[16] 請求項 13から 15のいずれかに記載の多血小板血漿分離方法により得られた多血 小板血漿。