WO2007132900A1

WO2007132900A1 - 皮膚保湿剤および皮膚炎治療剤

Info

Publication number: WO2007132900A1
Application number: PCT/JP2007/060071
Authority: WO
Inventors: Tokushiro Yoshinari; Kazunori Kato
Original assignee: Three B Co., Ltd.
Priority date: 2006-05-16
Filing date: 2007-05-16
Publication date: 2007-11-22
Also published as: JP2007308394A; JP4383427B2

Abstract

たもぎ茸由来セラミドを有効成分として含有する皮膚炎治療剤／皮膚保湿剤が開示される。たもぎ茸由来セラミドは、皮膚炎発症に重要な役割を果たす２種類のケモカイン、すなわち、ランゲルハンス細胞からのケモカインＣＣＬ１産生阻害効果、および表面角化細胞からの皮膚炎誘発ケモカインCCL27産生の抑制効果を有する。また、たもぎ茸由来セラミドは、皮膚炎モデルマウスにおいて、保湿作用および皮膚炎発症抑制作用を示す。本発明の皮膚炎治療剤／皮膚保湿剤は、副作用が少なく、長期に使用することができる。

Description

明細書

皮膚保湿剤および皮膚炎治療剤

技術分野

[0001] 本発明は、たもぎ茸由来セラミドを有効成分として含有する皮膚炎治療剤および皮膚保湿剤、ならびにたもぎ茸由来セラミドを用いる皮膚炎の治療方法および皮膚の保湿方法に関する。

背景技術

[0002] 皮膚炎は種々の原因に対する皮膚の炎症反応であり、アトピー性皮膚炎、脂漏性皮膚炎、接触性皮膚炎、手湿疹、じんましん、皮脂欠乏性皮膚炎、皮膚そう痒症、乾癬、多形滲出性紅斑などが知られている。このような皮膚炎の治療には、主としてステロイドおよび非ステロイド抗炎症剤が用いられており、またアトピー性皮膚炎の治療には抗ヒスタミン剤も用いられる。しかし、これらの治療法はいずれも対症療法にすぎず、再発を繰り返す例が多い。また、ステロイド剤には副作用が伴うため、その長期の使用には制限があった。

[0003] したがって、副作用が少なぐ長期に使用しうる新たな皮膚炎治療剤が求められている。

[0004] 本明細書において引用される参考文献は以下のとおりである。これらの文献に記載される内容はすべて本明細書の一部としてここに引用する。これらの文献のいずれか力本明細書に対する先行技術であると認めるものではない。

特許文献 1： W098/44928

非特許文献 l : Gombert M,et al.The Journal of Immunology,2005, 174:5082- 5091 非特許文献 2 :Vestergaard C,et al. Experimental Dermatology,2004,13:551-557 非特許文献 3 : Makiura M,et al.The Journal of International Medical Research. 2004,32:392-399

発明の開示

課題を解決するための手段

[0005] 本発明者らは、たもぎ茸由来のセラミドが、高い保湿作用ならびに皮膚炎の発症および症状の抑制作用を有することを見いだした。すなわち、本発明は、たもぎ茸由来セラミドを有効成分とする皮膚炎治療剤ならびに皮膚保湿剤を提供する。本発明の皮膚炎治療剤および皮膚保湿剤は、アトピー性皮膚炎を始めとして様々な皮膚炎（脂漏性皮膚炎、接触性皮膚炎、手湿疹、じんましん、皮脂欠乏性皮膚炎、皮膚そう痒症、乾癬、多形滲出性紅斑）に対する予防および治療に有用である。

[0006] 別の観点においては、本発明は、被験者にたもぎ茸由来セラミドを投与することにより皮膚炎を治療する方法および皮膚を保湿する方法を提供する。

図面の簡単な説明

[0007] [図 1]図 1は、ヒト末梢血力のランゲルノ、ンス細胞誘導方法および実験項目を示す。

[図 2]図 2は、ランゲルノ、ンス細胞からのケモカイン CCL1産生に及ぼすたもぎ茸由来セラミドの抑制効果を示す。

[図 3]図 3は、たもぎ茸由来セラミド添カ卩によるランゲルノ、ンス細胞の表面抗原発現変化の解析を示す。

[図 4]図 4は、表皮角化細胞からのケモカイン CCL27産生に及ぼすたもぎ茸由来セラミドの抑制効果を示す。

[図 5]図 5は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスの皮膚水分蒸散量を示す。

[図 6]図 6は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスの背部皮膚の状態を示す。

[図 7]図 7は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスの搔痒行動を示す。

[図 8]図 8は、正常 HR—1マウスの皮膚組織を示す (A群、 X 200)。

[図 9]図 9は、正常 HR—1マウスの皮膚組織を示す (A群、 X 400)。

[図 10]図 10は、皮膚炎誘発 HR—1マウスの皮膚組織を示す (B群、 X 200)。

[図 11]図 11は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスの皮膚組織を示す (B群、 X 400)。

[図 12]図 12は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスにたもぎ茸由来セラミドを投与したときの皮膚組織を示す (C群、 X 200)。

[図 13]図 13は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスにたもぎ茸由来セラミドを投与したときの皮膚組織を示す (C群、 X 400)。

[図 14]図 14は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスに米ぬか由来セラミドを投与したときの皮膚組織を示す (D群、 X 200)。 [図 15]図 15は、皮膚炎誘発 HR— 1マウスに米ぬか由来セラミドを投与したときの皮膚組織を示す (D群、 X 400)。

発明を実施するための最良の形態

[0008] たもぎ茸は、ヒラタケ属に属するキノコであり、北海道を中心として広く食用に供されて、る。たもぎ茸にはキノコ類に特徴的な糖脂質構造であるスフインゴ糖脂質が大量に含まれており、その主成分は、 9—メチル 4—トランス一 8—トランス一スフインガジェニンと 2—ヒドロキシパルミチン酸力も構成されるモノダルコシルセラミドである。スフインゴ糖脂質、いわゆるセラミド成分は、細胞膜の安定化に重要な生理物質であり、細胞個体の膜安定ィ匕だけではなぐ細胞間相互作用、ある種のウィルス受容体、ァポトーシス誘導分子など多様な活性を有して、ると報告されて、る。

[0009] 米ぬかやコンニヤク由来のセラミド成分が、細胞膜の安定化を誘導することにより皮膚の保湿効果を示すことは広く知られている。また、免疫調節に関しては、海綿由来のセラミド糖脂質が一部の免疫細胞 (NKT細胞)だけを選択的に活性ィ匕し、抗腫瘍効果を示すことが報告されている（国際公開番号 W098Z44928)。しかし、セラミドが直接アレルギー発症機序を抑える効果や皮膚炎発症を抑制する効果は知られていなかった。本発明は、たもぎ茸由来のセラミドが皮膚炎誘発ケモカインの産生を抑制する効果を有し、モデル動物において皮膚炎発症を抑制しうるという発見に基づくものである。

[0010] たもぎ茸力もセラミドを抽出するためには、既知のセラミド抽出法の任意のものを用いることができる。まず、たもぎ茸の子実体または石突きを、そのまま、あるいは水または熱水で水溶性成分を除いた後に、乾燥する。方法としては、風乾、熱乾燥、真空乾燥など、慣用の乾燥方法のいずれを用いてもよぐ乾燥後の水分含有量は、後の工程を考慮して適宜選択することができる。次に、乾燥試料を破砕して粉体とし、セラミドを抽出する。抽出溶媒としては、エタノール、メタノール、プロパノール、イソプロパノール等のアルコール類、へキサン、クロ口ホルム等の、脂質を溶解することができる任意の有機溶媒を用いることができる。また、水とアルコール類の混合物を用いてもよぐアルカリ性エタノール溶液を用いてもよい。あるいは、超臨界抽出法により二酸化炭素で抽出してもよい。 [0011] このようにして得られたたもぎ茸由来セラミドの有効性は、細胞からの皮膚炎誘発ケモカイン産生の抑制効果を調べることにより、あるいは皮膚炎モデル動物における保湿作用や炎症抑制効果を調べることにより評価することができる。

[0012] ランゲルノ、ンス細胞は皮下真皮層内に存在する細胞で、皮膚力浸入してくるァレルギー性抗原に対する免疫応答に関与する細胞群であり、ランゲルノヽンス細胞の異常活性ィ匕により、アトピー性皮膚炎などのアレルギー反応が増悪すると考えられている。この異常活性ィ匕にはケモカイン (細胞走ィ匕因子）の 1種である CCL1 (別名ト 309, TCA-3)の過剰産生が本体であることが知られている（Gombert M,et al.The Journ al of Immunology,2005, 174:5082-5091)。アトピー性皮膚炎患者においては CCL1 遺伝子の高発現が確認されており、抗原で刺激されたランゲルノヽンス細胞がこの CC L1を産生する細胞であることが知られている。従ってこの CCL1の産生を阻害する効果を示す物質は抗アレルギー効果があることが予想される。

[0013] 一方、表皮角化細胞は外来病原菌から生体を保護する皮膚バリアに重要な細胞群であり、角化細胞の損傷'炎症はアレルギー反応の誘発原因とも考えられる。特に角化細胞が産生する細胞走化因子 CCL27 (別名 CTACK,ALP,ILC ESkine)は皮膚表皮細胞の損傷時に産生亢進されるケモカインであり、皮膚表皮部に T細胞の走ィ匕を誘導し外来抗原除に働く (Vestergaard C,et al.Experimental Dermatology, 2 004,13:551-557)。し力しながらその過剰産生は慢性的な皮膚炎を誘発するので、 C CL27を産生調節する物質は抗皮膚炎効果を発揮できると予想される。

[0014] 以上の背景より、ランゲルハンス細胞や角化細胞の働きを負に制御する成分は抗アレルギー作用を有することが推定できるので、これら細胞に与えるたもぎ茸由来セラミドの効果を指標として、抗皮膚炎治療薬としてのたもぎ茸由来セラミドの効果を確認することができる。

[0015] さらに、皮膚炎発症抑制効果は、皮膚炎発症モデルマウスである HR— 1マウスを用いて評価することができる。 HR- 1マウスは毛根の発達が阻害されて、る無毛 (ヌード)マウスの 1種で、ミネラルであるマグネシウムと亜鉛含量が低、特殊飼料を配合してマウスに自由摂取させると、約 2週間目力皮膚の保湿作用が低下し痒みを伴うドライスキンを誘発する。このマウスは、皮膚炎症'細胞浸潤'血清 IgE値増加などの諸症状を発症するアトピー性皮膚炎のモデルマウスとして用いられて、る (Makiura M,et al.The Journal of International Medical Research.2004,32:392- 399)。この低ミネラル特殊肥料にたもぎ茸由来セラミドを配合しセラミドをマウスに自由摂取させ、皮膚からの水分蒸散を測定し、および皮膚組織の病理切片を解析することにより、たもぎ茸由来セラミドの皮膚保湿剤としての有用性ならびに皮膚炎の予防薬及び治療薬としての有効性を評価することができる。

[0016] 本発明の皮膚炎治療剤 Z皮膚保湿剤は、当業者に公知の方法で医薬製剤とすることができる。経口投与用には、上述のようにして調製したたもぎ茸由来セラミドを、当該技術分野においてよく知られる薬学的に許容しうる担体と混合することにより、錠剤、丸薬、糖衣剤、カプセル、液体、ゲル、シロップ、スラリー、懸濁液等として処方することができる。あるいは、本発明の皮膚炎治療剤 Z皮膚保湿剤は、食品添加物として調製してもよい。非経口投与用には、たもぎ茸由来セラミドを当該技術分野においてよく知られる薬学的に許容しうる担体または賦形剤、例えば、滅菌水や生理食塩水、植物油、乳化剤、懸濁剤、界面活性剤、安定剤、香味剤、賦形剤、べヒクル、防腐剤、結合剤などと適宜組み合わせて、一般に認められた製薬実施に要求される単位用量形態で混和することによって製剤化することができる。特に、本発明の皮膚炎治療剤 Z皮膚保湿剤は、ローション、軟膏、クリーム、ノ^ク、貼付剤などの形態で、皮膚外用剤として製剤化することができる。

[0017] 本発明の皮膚炎治療剤 Z皮膚保湿剤は、好ましくは経口投与するか、または食品に添加して摂取するが、皮膚の疾患部に局所的に投与することもできる。本発明の皮膚炎治療剤 Z皮膚保湿剤の投与量は、症状、投与経路、患者の体重および年齢

、併用する他の薬剤などにより異なる力セラミドの量として例えば 1日あたり 0.6〜3m gを 1日に 1ないし数回投与することができる。

[0018] 本明細書において明示的に引用される全ての特許および参考文献の内容は全て本明細書の一部としてここに引用する。また，本出願が有する優先権主張の基礎となる出願である日本特許出願 2006-137006号の明細書および図面に記載の内容は全て本明細書の一部としてここに引用する。

[0019] 以下に実施例により本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。

実施例 1

[0020] ランゲルノヽンス細胞の誘導

ランゲルハンス細胞はヒト末梢血単球より Pivarcsiらの報告（Pivarcsi A,et al.Journ al of Immunology,2004,173:5810-5817)に従い誘導した。概要を図 1に示す。へパリン (清水製薬社製)を加えたシリンジを用いて健常人左腕静脈部より血液 15〜20ml 採取し無菌下で PBS (リン酸緩衝液)等量にて希釈した。等倍希釈血液を予め無菌プラスチックチューブに準備したリンフォセパール 15ml (IBL社製）上に重層し、 1500 rpmで 30分間遠心分離した。遠心後、リンフォセパール上の単核球層を回収し、 PB Sにて細胞を 2回遠心洗浄した。単核球は最終的に RPMI1640培地、 10%牛胎児血清含 (Sigma社製）に希釈し、単核球中に約 10%含まれる CD14陽性単球を、磁気ビーズ (AutoMACS,Monocyte Isolation kit II.Miltenyi Biotec社)を用いて分離し、約 9 5%の精製度で採取した。この CD14単球を GM- CSF、 IL- 4、 TGF-ベータ 1を各 50ng /mlの濃度で添加した培養液中で 7日間培養した。その結果、大型の榭状突起を有して、る浮遊性の細胞を回収することができた。この細胞を抗 Eカドヘリン抗体および抗ランゲリン抗体で染色し、フローサイトメトリで解析した結果、榭状細胞とは異なり、 Eカドヘリンおよびランゲリン陽性のランゲルノヽンス細胞が誘導されていた。

実施例 2

[0021] ランゲルハンス細胞力の皮膚炎謙ケモカインこ及ぼすたネ、ぎ昔由セラミの影響

誘導ランゲルノヽンス細胞に（lxlO⁵ cells/ml)たもぎ茸由来セラミドを各濃度 (1〜10 μ g/ml)で添加した。たもぎ茸由来セラミドは、凍結乾燥したたもぎ茸子実体から、クロ口ホルム Zメタノールで抽出し、アルカリ処理した後に、水 Zクロ口ホルム Zメタノールで数回洗浄し、フラッシュカラムおよび HPLCにより精製した。セラミドは 70%エタノール溶液に lmg/mlで溶解しているため陰性コントロールとして同最終濃度のエタノールを培養溶液中に添加した。培養 24時間後に、抗原刺激として LPS (細菌成分, Sig ma社)または CpGオリゴ核酸（ウィルス成分, Sigma- Genosys社)を最終濃度 1 μ g/ml で添加した。 36時間後にランゲルノヽンス細胞培養上清を回収し、産生されたケモカイン CCL 1量を ELISA法 (R&D社)にて測定した。

[0022] 培養液中にたもぎ茸由来セラミドを添加培養し、ランゲルノヽンス細胞を顕微鏡で観察したところ、細胞の明らかな死滅、増殖抑制、形態変化は観察されな力つた。 24時間後の培養上清中に産生されたケモカイン量を測定した結果を図 2に示す。ランゲルノヽンス細胞は抗原刺激をカ卩えないと CCL1産生量が 70±5pg/mlと僅かである力 L PS抗原刺激で 422± 17pg/ml、 CpGオリゴ核酸刺激で 131士 14pg/mlと産生が誘導された。この抗原刺激細胞にたもぎ茸由来セラミドを最終濃度 1 μ g/mlで添加した場合、 CCL1ケモカインの産生がそれぞれ 270± 14pg/ml (阻害率 43%)と 85±4pg/ml (阻害率 75%)と有為に抑制された。

[0023] 次に、同様の処理をしたランゲルハンス細胞をプラスチックチューブに回収し、 RPM II 640培地で遠心洗浄後、 PE標識抗ヒト CD80抗体、抗ヒト CD86抗体、抗ヒト CD83抗体、抗ヒト CCR7抗体 (V、ずれも eBioscience社製）を各 5 μ 1添カ卩し 4°Cで 1時間反応後、 FACS (BD社製）にて細胞表面抗原の発現変化を解析した。その結果、抗原提示に必要な細胞表面抗原 CD80、 CD83、 CD86、 CCR7の発現は変化していなかった（薄ヽ線ーセラミド非添カ卩：濃、線セラミド添加)。これらの表面分子の発現は LPS 刺激によって同等に誘導されていることから、このたもぎ茸由来セラミドの効果カ^ンゲルノヽンス細胞に対する非特異的な抑制によるものではなぐケモカイン産生に特異的に及ぼすものであることが示唆された。

実施例 3

[0024] 化細胞からの皮膚炎誘発ケモカイン CCL27産牛.に及ぼすたもぎ由セラミドの

m

ヒト皮膚角化細胞は三光純薬より購入し、培養液も三光純薬で指定された角化細胞培養用培地を用いて解凍後培養した。培養角化細胞（lxlO⁵ cells/ml)にたもぎ茸由来セラミドを各濃度 (1〜10 g/ml)で添加し、培養 24時間後に、抗原刺激として炎症性サイト力イン TNF o; (R&D社)を最終濃度 50ng/mlで添加した。 36時間後に角化細胞培養上清を回収し産生されたケモカイン CCL27量を ELISA法 (R&D社)にて測定した。

[0025] 表皮角化細胞を培養し、培養液中にたもぎ茸由来セラミドを添加し顕微鏡で観察した結果、細胞の明らかな死滅、増殖抑制、形態変化は観察されな力つた。培養上清中に産生されたケモカイン量を測定した結果を図 4に示す。表皮角化細胞から産生される CCL27量は 31.7 ± 0.3pg/mlである力炎症性サイト力イン TNF刺激で 61.5 ±0. 5pg/mlと約 2倍の産生亢進が認められた。この TNF刺激角化細胞にたもぎ茸由来セラミドを最終濃度 1 μ g/mlで添カ卩した場合、 CCL27ケモカインの産生が 50.5± 1.3pg/ ml (阻害率 37%)と有為に抑制された。

[0026] 以上の結果より、たもぎ茸由来セラミドは、皮膚炎発症に重要な役割を果たす 2種類のケモカイン CCL1、 CCL27の産生を有為に抑制することから、アトピー性皮膚炎を始めとする皮膚炎の治療薬として有効であると示唆された。

実施例 4

[0027] HR- 1マウス皮膚炎の病理解析

皮膚炎のモデル動物である HR— 1マウスを用いて、本発明の皮膚炎治療剤 Z皮膚保湿剤の有効性を評価した。 3週齢の Hos:HR-l雄性マウスを 1週間予備飼育した後、実験に使用した。実験開始時の体重は 10. 5- 16. 9gであった。無処置群には普通飼料および水道水を、対照群および被検物質投与群は特殊飼料 (HR-AD用精製飼料、粉末、日本農産工業株式会社製)および水道水を自由に接種させ、温度 2 2± 3°C、湿度 50± 20%、照明時間 8 : 00— 20 : 00および換気回数 10— 17回 Z時間に設定した飼育条件下で飼育した。

[0028] 4週齢の HR-1マウスを、体重を指標に層別連続無作為化法により各群に割り付けた。群分け後、普通飼料群 (A群)を除き， Bから D群に特殊飼料を摂取させた。さらに C、 D群にはそれぞれ、被験物質が添加された特殊飼料を自由に摂取させた。たもぎ茸由来セラミドとしては実施例 1と同様にして製造したセラミドを、米ぬか由来セラミドとしては市販のセラミド (二ップンセラミド RPS、日清製粉社製)を用いた。

[0029] [表 1] 翻成表

投与量 a) 動物数

群飼料

(%，混餌） (匹）

A 無処置 M 料 0 8

B 対昭特翻料 0 8

C たもぎ昔由来セラミド特麵料 0.1 8

D 米ぬか由来セラミド特翻料 0.1 8

^>セラミドとしての配合量を示す

[0030] たもぎ由セラミドの保湿効果

特殊飼料による飼育中、 1週間に 1回、背部皮膚の水分蒸散量 (TEWL)を測定した。測定は Tewameter TM300 (Courage+Khazaka)を用いて定法にしたがって行った。結果を図 5に示す。特殊飼料を与えた対照群では、 TEWLは時間と共に増加した 1S たもぎ茸由来セラミド群では有意な TEWL増加の抑制効果が認められ、 28日目および 35日目では無処置群とほぼ同様の値であった。一方、米ぬか由来セラミド群では、対照群と有意な差が認められなかった。なお、試験期間中、飼料摂取量はほぼ一定しており、体重増加は各群について差がな力つた。この結果から、 HR— 1マウスにおいて、たもぎ茸由来セラミドは、米ぬか由来セラミドと比較して有意に高い保湿作用を有することが示された。

[0031] たネ、ぎ苴由セラミド摂 Β¾による普部膚状能の化

6週目（10週齢目）に全例について皮膚の状態をデジタルカメラで撮影して観察した。 HR- 1マウスは通常飼料で飼育した場合はドライスキンを伴う皮膚炎の発症は認められないが、低ミネラルの特殊飼料を 6週間摂取させた結果、図 6左下に示すように乾燥肌状態が顕著に現れ、しわの数も増力!]した。これに対してたもぎ茸由来セラミドを摂取させたマウス（図 6中）では乾燥肌状態が軽減されており、図 6右の通常飼料摂取マウスと明らかな差異は認められな力つた。

[0032] 皮膚搔痒行動

特殊飼料を 6週間自由摂取させた HR— 1マウス（10週齢)および各セラミド配合飼料投与群のマウスをビデオカメラにより 30分間観察し、搔痒行動 (スクラッチ行動'グルーミング行動'舐め行動回数を測定した。結果を図 7に示す。グルーミング (毛繕い )行動と舐め行動は健常マウスでも認められる行動であり、特殊飼料摂取させたマウスでも増加していない。これに対してスクラッチ行動（ひつ力き行動）は特殊飼料の配合により有為に増加しており、痒みを伴うアトピー性皮膚炎様の状態にマウスが達して、ることを示して、る。このスクラッチ行動はたもぎ由来セラミドを 0.1%配合した特殊飼料摂取マウス群 (C群)で有為に低下しており、ほぼ正常マウスと同様の行動回数であった。また米ぬかセラミド配合摂取マウスでもスクラッチ行動が低下して、たが

、これはこの群（D群）のマウスは他群マウスと比較して衰弱しており、全体の行動能力が低下しているためと考えられた。

[0033] 皮膚病理組織を用いる皮膚炎発症抑制効の解析

特殊飼料を 6週間自由摂取させた HR— 1マウス（10週齢)および各セラミド配合飼料投与群のマウスをエーテル麻酔下で安楽死させた後、皮膚を lcmX5cmの長方形サイズに切開し、皮膚組織 (角質—上皮-真皮—脂肪層）を背部筋層から剥離し回収した。回収した皮膚組織は中性緩衝 10%ホルマリン溶液 (和光純薬）に浸け 4°Cで 1晚以上固定した。固定した皮膚組織はパラフィン包埋し、スライドガラス上に剥離病理切片を吸着させた後、へマトキシリン，ェォジン染色 (HE染色)を行った。染色病理切片は顕微鏡 (NIKON社製)で観察し 200倍および 400倍率画像を CCDカメラにて撮影しデジタルファイルとして保存した。

[0034] HR— 1ヘアレスマウスに普通飼料を摂取させた場合 (A群）、図 8および 9に示すように正常の皮膚構造をとつて、る。特徴としては表面側から薄、角質層→細胞層が 1 層の表皮層（平均の厚さ 15 m)→真皮層→脂肪層となっている。真皮層にはランゲルノヽンス様細胞が混在しているが細胞分布に偏りは見られず、正常の皮膚組織像を呈して、る。これに対して低ミネラルの特殊飼料を摂取させたマウス (B群)では図 10 および 11に示すように、表皮部では角化亢進 (角質層の多重化）、角化細胞死、表皮過形成 (表皮肥厚）が認められ、保湿性が保たれてヽなヽドライスキン状態になつていた。平均表皮層の厚さは 60 mと正常マウスの約 4倍に増していた。さらに真皮部では上皮との境界部に大量の炎症性細胞の浸潤や赤血球の血管外滲出が随所に観察されており、典型的な皮膚炎症状を呈している。

[0035] 一方、特殊飼料にたもぎ茸由来セラミドを配合した飼料を摂取させたマウス (C群）では、図 12および 13に示すように、表皮細胞層の厚みが正常マウスに比べて若干増しているが、角化亢進による保湿阻害や細胞浸潤等の炎症所見は観察されておらず、皮膚炎の発症が明らかに抑えられている。比較検討の対象として同濃度の米ぬか由来セラミドを配合した特殊飼料摂取マウス (D群)では、図 14および 15に示すように、全く皮膚炎症状を改善しておらず、逆に悪ィ匕の傾向にあることが判明した。特に重度の角化亢進と真皮層のみならず一部では表皮層にまで炎症性細胞が浸潤していた。また赤血球の血管外滲出も随所で観察された。

[0036] 以上、行動学的解析および病理学的解析結果により、たもぎ茸由来セラミドは皮膚炎の発症を抑える効果を有していることが判明した。一方、比較対象の米ぬか由来セラミドでは皮膚炎抑制効果は全く認められず、この皮膚炎発症抑制効果はたもぎ茸由来セラミドの独自の効果である。たもぎ茸由来セラミドが皮膚炎誘発ケモカイン産生を抑制するという実施例 2および 3の実験結果と合わせると、たもぎ茸由来セラミドは、アトピー性皮膚炎を始めとして様々な皮膚炎 (脂漏性皮膚炎、接触性皮膚炎、手湿疹、じんましん、皮脂欠乏性皮膚炎、皮膚そう痒症、乾癬、多形滲出性紅斑）に対する予防および治療に応用できると考えられる。

産業上の利用可能性

[0037] たもぎ茸由来セラミドを有効成分として含有する本発明の皮膚炎治療剤 Z皮膚保湿剤は、アトピー性皮膚炎を始めとする皮膚炎の治療薬として有効である。

Claims

請求の範囲

[1] たもぎ茸由来セラミドを有効成分として含有する皮膚炎治療剤。

[2] 皮膚炎がアトピー性皮膚炎である、請求項 1記載の皮膚炎治療剤。

[3] たもぎ茸由来セラミドを有効成分として含有する皮膚保湿剤。

[4] 被験者にたもぎ茸由来セラミドを投与することにより皮膚炎を治療する方法。

[5] 皮膚炎がアトピー性皮膚炎である、請求項 4記載の方法。

[6] 被験者にたもぎ茸由来セラミドを投与することにより皮膚を保湿する方法。