JP2006347991A

JP2006347991A - ヒスタミン遊離抑制剤

Info

Publication number: JP2006347991A
Application number: JP2005178866A
Authority: JP
Inventors: Koichiro Komai; 功一郎駒井; Tomoyuki Nakamura; 友幸中村; Yukito Akiyama; 幸仁秋山; Ikuyo Kasuga; 郁代春日
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2005-06-20
Filing date: 2005-06-20
Publication date: 2006-12-28

Abstract

【課題】この発明は、アレルギー原因物質であるヒスタミンの放出を抑制するヒスタミンの遊離抑制剤を提供することを目的とする。
【解決手段】（１）カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ等のキノコの菌糸体由来物質の1以上を含有するヒスタミン遊離抑制剤。
（２）キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である前記（１）に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
（３）前記ヒスタミン遊離抑制剤を含有する健康食品。
【選択図】なし。

Description

この発明は、アレルギー原因物質であるヒスタミンの放出を抑制するヒスタミン遊離抑制剤に関するものであり、更に詳しくは、キノコ（カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ）の菌糸体由来物質の1以上を含有するヒスタミン遊離抑制剤に関するものである。

この十数年間でアレルギー疾患の患者数は急増し、現代病として世界的な問題となっている。
この問題を解決するために、副作用の少ない天然物由来の抗アレルギー作用物質がキノコについても検索され、従来、アガリクス（ＡｇａｒｉｃｕｓｂｌａｚｅｉＭｕｒｉｌｌ）とメシマコブ（Ｐｈｅｌｌｉｎｕｓｌｉｎｔｅｕｓ）の抗アレルギー（ヒスタミン遊離抑制）作用については知られている。
特開２００４−１２１０７０特開２００３−２８１１特開２００４−１６８６８９特開２００４−２０３７５２特開２００４−３３１６１９

しかしながら、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）についてのヒスタミン遊離抑制作用については知られていない。

そこで発明者等は、副作用の少ない天然物由来の抗アレルギー作用物質を得るために、アガリクスとメシマコブ以外のキノコに着目し、ヒスタミン遊離抑制作用について鋭意研究したところ、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）には、顕著なヒスタミン遊離抑制作用が存在することを知り本発明を完成した。

本願発明は、下記の請求項１〜請求項１６により構成されている。
請求項１：下記の（１）〜（１３）に記載するキノコの菌糸体由来物質の１以上
を含有することを特徴とするヒスタミン遊離抑制剤。
（１）カアバノアナタケ（Ｆｕｓｃｏｐｏｒｉａｏｂｌｉｑｕａ）
（２）ハナビラタケ（Ｓｐａｒａｓｓｓｉｓｃｒｉｓｐａ）
（３）ハタケシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍｄｅｃａｓｔｅｓ）
（４）エリンギ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｅｒｙｎｇｉｉ）
（５）ブナハリタケ（Ｍｙｃｏｌｅｐｔｏｄｏｎｏｉｄｅｓａｉｔｃｈｉｓｏｎｉｉ）
（６）マツタケ（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｍａｔｓｕｔａｋｅ）
（７）カラカサタケモドキ（Ｍａｃｒｏｌｅｐｉｔａｇｒａｃｉｌｅｎｔａ）
（８）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍｓｈｉｍｅｊｉ）
（９）シロアギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｎｅｂｒｏｄｅｎｓｉｓ）
（１０）マイタケ（Ｇｒｉｆｏｌａｆｒｏｎｄｏｓａ）
（１１）ヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍｅｒｉｎａｃｅｕｍ）
（１２）カンゾウタケ（Ｆｉｓｔｕｌｉｎａｈｅｐａｔｉｃａ）
（１３）タモギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ）
請求項２：キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である請求項１に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項３：キノコが、カバノアナタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項４：キノコが、ハナビラタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項５：キノコが、ハタケシメジである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項６：キノコが、エリンギある請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項７：キノコが、ブナハリタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項８：キノコが、マツタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項９：キノコが、カラカサタケモドキである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１０：キノコが、ホンシメジである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１１：キノコが、シロアギタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１２：キノコが、マイタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１３：キノコが、ヤマブシタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１４：キノコが、カンゾウタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１５：キノコが、タモギタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１６：請求項１〜請求項１５に記載するヒスタミン遊離抑制剤を含有することを特徴とする健康食品。

本願発明を以上のように構成する理由は、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ等のキノコ（特にこれらのキノコの菌糸体由来成分）には、顕著なヒスタミン遊離抑制作用が存在することが確かめられたからである。

本願発明によれば、カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ等の菌糸体から、アレルギー原因物質であるヒスタミンの放出を抑制するヒスタミン遊離抑制剤が容易に得られるという効果を有する。

＊各キノコの菌糸体乾燥粉末の取得
本発明に係る１３種類のキノコ（カバノアナタケ、ハナビラタケ、ハタケシメジ、エリンギ、ブナハリタケ、マツタケ、カラカサタケモドキ、ホンシメジ、シロアギタケ、マイタケ、ヤマブシタケ、カンゾウタケ、タモギタケ）を下記の条件で各々培養した。
大型タンク（１０００Ｌ）を用いて、炭素源としてグルコースを４．０％、天然物由来窒素源イーストエキス及びポリぺプトンを各０．３％、ＫＨ_２ＰＯ_４及びＮａ_２ＨＰＯ_４を各０．０５％を含み、初発培地ｐＨ５．５の培養液に、各キノコの菌糸体を接種し、強制的に０．２２μｍフィルターを通した無菌空気を培地内へ通気し、温度２８℃で４５日間培養した。
この培養液を遠心分離して得られた菌糸体を凍結乾燥して各キノコの菌糸体の乾燥粉末を得た。

＊各キノコの菌糸体の熱水抽出物
前記各キノコの菌糸体の乾燥粉末に１０倍量のイオン交換水を加え、１００℃で２時間、熱水抽出処理を行ない、不溶物を除去して各キノコの菌糸体の熱水抽出物を得た。この熱水抽出物を約７０℃で減圧濃縮した後凍結乾燥した。
なお、前記各キノコの乾燥菌糸体粉末１３００ｇより、前記各キノコの熱水抽出乾燥物が約１２０〜１８０ｇ得られた。

＊ヒスタミン遊離抑制効果の確認
（１）13種類の各キノコの菌糸体の熱水抽出物を被検体として、マスト細胞からのヒスタミン遊離抑制効果を調べることで、Ｉ型アレルギー反応抑制効果を調べた。
（２）被験動物及び細胞の調製方法
（ａ）被験動物には、Ｗｉｓｔｅｒ系ラット雄（６〜８週齢）を用いた。
（ｂ）細胞の調製方法
ラットをエーテルで麻酔させ、脱血死させた後、ラットの腹腔内にＴｙｒｏｄｅＢｕｆｆｅｒ１５ｍｌを注入し、腹腔内液を回収した。更にラットの腹腔内にＴｙｒｏｄｅＢｕｆｆｅｒ１０ｍｌを注入し、更に腹腔内液を回収して先に採取した腹腔内液と混合した。この腹腔内液を、８００ｒｐｍ・４℃・１０分間遠心分離を行い、上澄を除去してフィルターをかけた。
更に、ＴｙｒｏｄｅＢｕｆｆｅｒを加えた細胞懸濁液を、８００ｒｐｍ・４℃・１０分間遠心分離を行い、上清を除去して、細胞を均一にした。この細胞懸濁液を血球計算盤で測定し、８×１０^６×ｃｅｌｌｓ／ｍｌに調製して用いた。

（３）生物検定の実験方法およびヒスタミンの分析方法
（ａ）生物検定の実験方法
１．２ｍｌのマイクロチューブに分注した、細胞懸濁液３７０μｌを３７℃のウォーターバスでプレインキュベートした。
１０分後、１ｍｇ／ｍｌに希釈した各キノコのサンプル（熱水抽出乾燥物）の２０μｌを添加した。
更に、１０分後、アレルギー誘発剤であるｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８０（マスト細胞刺激用試薬：和光純薬）１０μｌ（０．５μｇ／ｍｌ）を添加した。
１５分後、氷上で反応を停止した。
更に、マスト細胞を除去するため、８．０００ｒｐｍ・４℃・１５分間遠心分離し、上清１００μｌを回収した。
この上清を、ＨＰＬＣ分析のジアゾ化するサンプルとした。

（ｂ）ヒスタミンジアゾ化誘導体の調製
等量の２０ｍＭｐ−ニトロアニリン塩酸溶液と２００ｍＭ亜硝酸ナトリウム水溶液をよく混合した（ジアゾ試薬）。
ジアゾ試薬１０μｌに、前記（ヒスタミン）ジアゾ化用サンプル２０μｌを加え、ボルテックスミキサーでよく混合した。
更に、１０％炭酸ナトリウムエタノール溶液３０μｌを加え、ボルテックスミキサーでよく混合した。
この溶液の２０μｌをＨＰＬＣ分析に用いた。

（ｃ）ヒスタミンの分析は、ジアゾ化法により行った（ＳｐｅｃｉｆｉｃＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＨｉｓｔａｍｉｎｅｉｎＦｉｓｈｂｙＨｉｇｈ−ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙａｆｔｅｒＤｉａｚｉＣｏｕｐｌｉｎｇ：Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．５９（７），１２０８−１２１０（１９９５））。
生物検定におけるヒスタミンのＨＰＬＣ分析条件〈ジアゾ法〉は表１記載のとおりである。

（４）各キノコのサンプル（熱水抽出乾燥物）の５０μｇ／ｍｌ濃度のマスト細胞からのヒスタミン遊離の抑制効果の結果を表２に示す。

なお、活性指標物質（ポジティブコントロール）として、サンテンチャ（バラ科キイチゴ属の甜葉縣鈎子（ＲｕｂｕｓＳｕａｖｉｓｓｉｍｕｓ）の抽出エキス）を用いた。サンテンチャには、アレルギー原因物質であるヒスタミンの放出を抑制する効果があるとされ、現在ではアレルギー抑制剤として商品化されているものである。

前記各キノコの熱水抽出物は、そのまま、又は他の任意の食品（粉末）、又は任意の健康食品（粉末）と混合して摂取することができる。

Claims

下記の（１）〜（１３）に記載するキノコの菌糸体由来物質の１以上を含有することを特徴とするヒスタミン遊離抑制剤。
（１）カアバノアナタケ（Ｆｕｓｃｏｐｏｒｉａｏｂｌｉｑｕａ）
（２）ハナビラタケ（Ｓｐａｒａｓｓｓｉｓｃｒｉｓｐａ）
（３）ハタケシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍｄｅｃａｓｔｅｓ）
（４）エリンギ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｅｒｙｎｇｉｉ）
（５）ブナハリタケ（Ｍｙｃｏｌｅｐｔｏｄｏｎｏｉｄｅｓａｉｔｃｈｉｓｏｎｉｉ）
（６）マツタケ（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｍａｔｓｕｔａｋｅ）
（７）カラカサタケモドキ（Ｍａｃｒｏｌｅｐｉｔａｇｒａｃｉｌｅｎｔａ）
（８）ホンシメジ（Ｌｙｏｐｈｙｌｌｕｍｓｈｉｍｅｊｉ）
（９）シロアギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｎｅｂｒｏｄｅｎｓｉｓ）
（１０）マイタケ（Ｇｒｉｆｏｌａｆｒｏｎｄｏｓａ）
（１１）ヤマブシタケ（Ｈｅｒｉｃｉｕｍｅｒｉｎａｃｅｕｍ）
（１２）カンゾウタケ（Ｆｉｓｔｕｌｉｎａｈｅｐａｔｉｃａ）
（１３）タモギタケ（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｃｏｒｎｕｃｏｐｉａｅ）
キノコ菌糸体由来物質が、キノコ菌糸体の熱水抽出物である請求項１に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、カバノアナタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、ハナビラタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、ハタケシメジである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、エリンギある請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、ブナハリタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、マツタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、カラカサタケモドキである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、ホンシメジである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、シロアギタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、マイタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、ヤマブシタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、カンゾウタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
キノコが、タモギタケである請求項１又は請求項２に記載するヒスタミン遊離抑制剤。
請求項１〜請求項１５に記載するヒスタミン遊離抑制剤を含有することを特徴とする健康食品。