WO2007114125A1

WO2007114125A1 - 微生物によるアダマンタン水酸化体の製造方法

Info

Publication number: WO2007114125A1
Application number: PCT/JP2007/056542
Authority: WO
Inventors: Yuuichi Mitsuda; Kazuyuki Minagawa; Tomoyuki Ogawa
Original assignee: Shionogi & Co., Ltd.
Priority date: 2006-03-31
Filing date: 2007-03-28
Publication date: 2007-10-11
Also published as: JPWO2007114125A1; TW200808970A

Abstract

機能性樹脂や医薬品の中間体として有用であるＮ－（モノヒドロキシ－２－アダマンチル）－フタルイミド誘導体の高収率かつ安価な製造方法を提供することにある。土壌から分離したナカタエア属、リゾクトニア属、カエトミウム属に属する糸状菌は、Ｎ－（２－アダマンチル）－フタルイミド誘導体から、Ｎ－（モノヒドロキシ－２－アダマンチル）－フタルイミド誘導体を培地中に高生産することができる。

Description

明細書

微生物によるァダマンタン水酸化体の製造方法

技術分野

[0001] 本発明は、微生物を用いるモノヒドロキシ一 2—ァダマンタナミンのァミノ保護体 (たとえば、 N— (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体）の生産方法に関する。モノヒドロキシ一 2—ァダマンタナミンのァミノ保護体は、モノヒドロキシ一 2— ァダマンタナミンの原料であり、モノヒドロキシー2—ァダマンタナミンは、医薬品の中間体として有用である。

背景技術

[0002] フォトリソグラフィー分野における感光性榭脂などの機能性榭脂のモノマー (特許文献 1)や、医薬品の分野における 11ベータ—ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ I 型酵素（11 β HSD1)の阻害剤（特許文献 2、 27ページ）として、ァダマンタンの水酸化体は知られている。また、 DPPIV阻害剤としても、ァダマンチル基を有する化合物が知られている。そしてこれらの化合物を合成する場合、ァダマンタンの水酸化体の一部の置換基を保護したィ匕合物は、その反応性力も合成中間体として有用といえる

[0003] そして、微生物を用いたァダマンタン誘導体の水酸ィ匕体の生産方法は以前力知られて、る。例えば、ボーべリア'スルフレツセンス (Beauveria sulfurescens)の生体内変換を用いて、ベンジルアミドで保護されたァダマンタミン誘導体の水酸ィ匕体を生産できる（非特許文献 1)。また、フタルイミドで保護されたァダマンタン誘導体についても、スポロトリカム'スルフレツセンス（Sporotrichum sulfurescens)の生体内変換により、ジヒドロキシ体を生産できることが報告されている (非特許文献 2)。

特許文献 1：特開 2006 -63061

特許文献 2：国際公開第 WO04Z056744号パンフレット

非特許文献 1：「ジャーナルォブオーガニックケミストリー（Journal of Organic Chemistry)」、 1992年、 57卷、 p.7209-7212

非特許文献 2 :「ザジャーナルォブオーガニックケミストリー (The Journal of Organic Chemistry)」、 1968年、 33卷、 p.3201— 3207

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0004] 本発明の解決しょうとする課題は、機能性榭脂ゃ医薬品の中間体として有用であるモノヒドロキシ - 2-ァダマンタナミンの原料となるモノヒドロキシ 2—ァダマンタナミンのァミノ保護体（たとえば、 N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体)の微生物を用いた高収率かつ安定な製造方法を提供することにある。

課題を解決するための手段

[0005] 本発明者らは、上記の目的を達成すべく鋭意研究を行った。その結果、本発明者らにより土壌力分離された糸状菌が以下に示すように、 N—（2—ァダマンチル）ーフタルイミド誘導体から、 N- (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を生産することを初めて見出した。またこの糸状菌を用いて液体培養することにより、 N- (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を培地中に高生産させることに成功し、本発明を完成した。

[化 1]

[0006] すなわち、本発明は、

(1)糸状菌またはその抽出物を用いて、 N—（2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を水酸化することを特徴とする、 N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体を生産する方法、

(2)

糸状菌がナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属 (Rhizoctonia)、カェトミゥム属（

Chaetomium)の群から選択される、前記（1)記載の方法、糸状菌がナカタエア ·シグモイデア（Nakataea sigmoidea)リゾクトニア ·ソラ- (Rhi zoctonia solani)ま 7こ ίま力エトゥム ·コクリオテス (Chaetomium cochliodes)である、前記（2)記載の方法、

(4)

糸状菌により行われる、前記（1)〜（3)のいずれか 1項に記載の方法、

(5)

糸状菌の抽出物により行われ、抽出物が水酸化酵素を含有する、前記（1)記載の方法、

(6)

前記 N—（2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体が以下の式で表わされる化合物である前記（1)記載の方法、

[化 2]

(7)

前記 N— (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体が以下のいずれかの式で表わされる化合物である前記（1)記載の方法、

[化 3]

(8)

糸状菌を培地中で培養する工程、及び培養液から前記 N— (モノヒドロキシ— 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を分離する工程を含む、前記（1)記載の方法、 (9)

N- (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を生産する能力を有するナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属（Rhizoctonia)、カェトミゥム属（Chaet omium)の!、ずれかの属に属する微生物の菌体、

(10)

ナカタエァ.シグモイデア RF— 9475株（FERM ABP— 10791)、リゾクトニア ·ソラ -RF— 9402株（FERM ABP— 10790)または力エトミゥム 'コクリオデス RF— 57 33株（FERM ABP— 10789)のいずれかの株、

(11)

以下の式で表される、いずれかの化合物、

[化 4]

(12)

ナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属（Rhizoctonia)、カェトミゥム属（Chaeto mium)の、ずれかの属に属する微生物の菌またはその抽出物により、 2 ァダマンタナミンのアミノ保護体力モノヒドロキシ一 2—ァダマンタナミンのァミノ保護体を生産する方法、

(13)

(1)〜（8)および（12)のいずれかに記載の方法により得られた、 N （モノヒドロキシ —2—ァダマンチル）—フタルイミド誘導体を脱保護することを特徴とする、化合物 (I)

[化 5]

( I )

で示される化合物の製造方法。

(14)

前記（13)記載の方法により得られた式 (I)で示される化合物を、

式（Π)： A - R¹ - R² - R³ - X

(式中、 Aは置換されて、てもよヽ環式炭化水素基または置換されて、てもよ、複素環式基であり、 R¹は単結合、 C ( = 0)—、— O または— NR⁴—であり、 R²は単結合または置換されていてもよいアルキレンであり、 R³は単結合または— C ( = 0)—であり、 Xは水酸基、ハロゲンまたは水酸基力導かれる脱離基であり、 R⁴は水素または置換されて、てもよ、アルキルである）で示される化合物と反応させることを特徴とする、式 (ΠΙ) :

[化 6]

で示される化合物の製造方法、

に関する。

発明の効果

[0007] 本発明の N— (モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体の製造法は、安定した N （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体の生産'供給を実現するものであり、 N （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を効率よぐ安全で安価に製造することが可能となる。また、本発明の微生物は、上記 N— (モノヒドロキシ— 2—ァダマンチル）—フタルイミド誘導体の製造法に、好適に使用することができる。

発明を実施するための最良の形態

[0008] 次に、本発明を詳細に説明する。

本発明の N— (モノヒドロキシ— 2—ァダマンチル）—フタルイミド誘導体の製造法は、 N （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体の生産能を有する糸状菌を培地で培養し、培地中に N （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）ーフタルイミド誘導体を生産'蓄積させ、これを採取することを含む。

[0009] N—（2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体とは、本発明の生産方法の出発原料となりうる化合物であり、実施例に示す N— (2—ァダマンチル）—フタルイミドの他、その誘導体、例えばフタロイル基のベンゼン環部分力 F、 Cl、 Br、 Iなどのハロゲン、ァルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、ァリール、ァリールアルキル、カルボキシ、ェステル、力ルバモイルなどで置換されたィ匕合物や、ァダマンチル基の水酸ィ匕される以外の部分が F、 Cl、 Br、 Iなどのハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、ァリール、ァリールアルキル、カルボキシ、エステル、力ルバモイルなどで置換された化合物、また、ベンゼン環部分及びァダマンタン部分が上記の置換基で置換された化合物も含まれる。

[0010] N- (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体とは、 N— (2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を出発原料として本発明の方法によって生産される化合物であり、実施例に示す N （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミドの他、その誘導体、例えばフタロイル基のベンゼン環力 F、 Cl、 Br、 Iなどのハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、ァリール、ァリールアルキル、カルボキシ、アルコキシカルボ-ル、力ルバモイルなどで置換される化合物も含まれる。特に、好ましい態様としては、 N— (5 ヒドロキシ一 2 ァダマンチル）一フタルイミドもしくは、 N— (6 ヒドロキシ一 2 ァダマンチル）一フタルイミドである。

「アルキル」とは、炭素数 1〜10個の直鎖状又は分枝状のアルキル基を意味し、例えば、メチル、ェチル、 n-プロピル、イソプロピル、 n-ブチル、イソブチル、 sec-ブチル、 t ert-ブチル、 n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、 n-へキシル、イソへキシル、 n -ヘプチル、 n-ォクチル、 n-ノニル、 n-デシル等が挙げられる。好ましくは、炭素数 1 〜6または 1〜4個のアルキルであり、例えば、メチル、ェチル、 n-プロピル、イソプロピル、 n-ブチル、イソブチル、 sec-ブチル、 tert-ブチル、 n-ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、 n-へキシル、イソへキシルが挙げられる。アルコキシのアルキル部分は、上記のアルキルと同意義である。

「ァリール」とは、単環芳香族炭化水素基 (例：フエニル)及び多環芳香族炭化水素基 (例： 1—ナフチル、 2—ナフチル、 1—アントリル、 2—アントリル、 9—アントリル、 1— フエナントリル、 2—フエナントリル、 3—フエナントリル、 4—フエナントリル、 9—フエナントリル等）が挙げられる。ァリールアルキルは、上記のァリールで置換された上記ァルキルを意味する。アルコキシカルボ-ルのアルコキシ部分は、上記のアルキルと同思（¾る。

「環式炭化水素基」とは、「シクロアルキル」、「シクロアルケ-ル」、「ァリール」を包含する。

「シクロアルキル」とは、炭素数 3〜15の環状飽和炭化水素基を意味し、例えば、シク口プロピノレ、シクロブチノレ、シクロペンチノレ、シクロへキシノレ、シクロへプチノレ、シクロォクチル、橋かけ環式炭化水素基、スピロ炭化水素基などが挙げられる。

「橋かけ環式炭化水素基」とは、 2つ以上の環が 2個またはそれ以上の原子を共有している炭素数 5〜8の脂肪族環力水素を 1つ除いてできる基を包含する。具体的にはビシクロ [2. 1. 0]ペンチル、ビシクロ [2. 2. 1]ヘプチル、ビシクロ [2. 2. 2]オタチルおよびビシクロ [3. 2. 1]ォクチル、トリシクロ [2. 2. 1. 0]ヘプチルなどが挙げられる。

「スピロ炭化水素基」とは、 2つの炭化水素環が 1個の炭素原子を共有して構成されている環力も水素を 1つ除いてできる基を包含する。具体的にはスピロ [3. 4]ォクチルなどが挙げられる。

「シクロアルケニル」とは、炭素数 3〜7個の環状の不飽和脂肪族炭化水素基を意味し、例えば、シクロプロべ-ル、シクロブテュル、シクロペンテ-ル、シクロへキセ-ル

、シクロヘプテュルが挙げられ、好ましくはシクロプロべ-ル、シクロブテュル、シクロペンテ-ル、シクロへキセ-ルである。シクロアルケ-ルには、環中に不飽和結合を有する橋力 4ナ環式炭化水素基およびスピロ炭化水素基も含む。

「複素環式基」とは、「ヘテロァリール、ヘテロサイクル」を包含する。

「ヘテロァリール」とは、単環芳香族複素環式基及び縮合芳香族複素環式基を意味する。単環芳香族複素環式基は、酸素原子、硫黄原子、および Z又は窒素原子を環内に 1〜4個含んでいてもよい 5〜8員の芳香環力誘導される、置換可能な任意の位置に結合手を有していてもよい基を意味する。縮合芳香族複素環式基は、酸素原子、硫黄原子、および/又は窒素原子を環内に 1〜4個含んでいてもよい 5〜8員の芳香環が、 1〜4個の 5〜8員の芳香族炭素環もしくは他の 5〜8員の芳香族へテロ環と縮合して、る、置換可能な任意の位置に結合手を有して、てもよ、基を意味する。例えば、フリル（例： 2 フリル、 3 フリル）、チェ-ル（例： 2 チェ-ル、 3 チェ -ル）、ピロリル（例： 1 ピロリル、 2 -ピロリル、 3 -ピロリル）、イミダゾリル（例： 1 ィミダゾリル、 2 イミダゾリル、 4 イミダゾリル）、ピラゾリル（例： 1 ピラゾリル、 3—ビラゾリル、 4 ピラゾリル）、トリァゾリル（例： 1, 2, 4 トリァゾール— 1—ィル、 1, 2, 4- トリァゾール— 3—ィル、 1, 2, 4 トリァゾール— 4—ィル）、テトラゾリル（例： 1—テトラゾリル、 2—テトラゾリル、 5—テトラゾリル）、ォキサゾリル（例： 2—ォキサゾリル、 4 ォキサゾリル、 5—ォキサゾリル）、イソキサゾリル（例： 3—イソキサゾリル、 4 イソキサゾリル、 5 イソキサゾリル）、チアゾリル（例： 2 チアゾリル、 4 チアゾリル、 5 チアゾリル）、チアジアゾリル、イソチアゾリル（例： 3—イソチアゾリル、 4 イソチアゾリル、 5—イソチアゾリル）、ピリジル（例： 2 ピリジル、 3 ピリジル、 4 ピリジル）、ピリダジ -ル（例： 3 -ピリダジ -ル、 4 -ピリダジ -ル）、ピリミジ -ル（例： 2 -ピリミジ -ル、 4 - ピリミジ -ル、 5 -ピリミジ -ル）、フラザ-ル（例： 3 -フラザ-ル）、ピラジュル（例： 2 - ピラジュル）、ォキサジァゾリル（例：1, 3, 4 ォキサジァゾ一ルー 2 ィル）、ベンゾフリル（例： 2 べンゾ [b]フリル、 3 べンゾ [b]フリル、 4一べンゾ [b]フリル、 5 ベンゾ [b]フリル、 6 べンゾ [b]フリル、 7 べンゾ [b]フリル）、ベンゾチェ-ル（例： 2— ベンゾ [b]チェ-ル、 3—べンゾ [b]チェ-ル、 4一べンゾ [b]チェ-ル、 5—べンゾ [b ]チェ-ル、 6—べンゾ [b]チェ-ル、 7—べンゾ [b]チェ-ル）、ベンズイミダゾリル（例： 1一べンゾイミダゾリル、 2 べンゾイミダゾリル、 4一べンゾイミダゾリル、 5 ベンゾイミダゾリル）、ジベンゾフリル、ベンゾォキサゾリル、キノキサリル（例： 2—キノキサリ -ル、 5—キノキサリニル、 6—キノキサリニル）、シンノリ-ル（例： 3—シンノリ-ル、 4 —シンノリ-ル、 5—シンノリニル、 6—シンノリニル、 7—シンノリニル、 8—シンノリ-ル )、キナゾリル（例： 2 キナゾリ-ル、 4ーキナゾリ-ル、 5 キナゾリ-ル、 6 キナゾリ -ル、 7 キナゾリ-ル、 8 キナゾリ-ル）、キノリル（例： 2 キノリル、 3 キノリル、 4 —キノリル、 5—キノリル、 6—キノリル、 7—キノリル、 8—キノリル）、フタラジュル（例： 1—フタラジュル、 5 フタラジュル、 6 フタラジュル）、イソキノリル（例： 1—イソキノリル、 3—イソキノリル、 4 イソキノリル、 5—イソキノリル、 6—イソキノリル、 7—イソキノリル、 8 イソキノリル）、プリル、プテリジ-ル（例： 2 プテリジ-ル、 4ープテリジ-ル、 6—プテリジニル、 7—プテリジニル）、カルバゾリル、フエナントリジニル、アタリジニル (例： 1—アタリジ-ル、 2—アタリジ-ル、 3—アタリジ-ル、 4—アタリジ-ル、 9ーァクリジ -ル）、インドリル（例：1 インドリル、 2 インドリル、 3 インドリル、 4 インドリル、 5 インドリル、 6 インドリル、 7 インドリル）、イソインドリル、ファナジ-ル（例： 1 フエナジ-ル、 2—フエナジ-ル）又はフエノチアジ-ル（例： 1 フエノチアジ-ル、 2 フエノチアジ-ル、 3—フエノチアジ-ル、 4 フエノチアジ-ル）等が挙げられる。「ヘテロサイクル」とは、酸素原子、硫黄原子、及び Z又は窒素原子を環内に 1〜4個含んで!/、てもよぐ置換可能な任意の位置に結合手を有して!/、てもよ!、非芳香族複素環式基を意味する。また、そのような非芳香族複素環式基がさらに炭素数 1〜4のアルキル鎖で架橋されて!、てもよく、シクロアルカン（5〜6員環が好まし!/、）やべンゼン環が縮合していてもよい。非芳香族であれば、飽和でも不飽和でもよい。例えば、 1 ピロリニル、 2 ピロリニル、 3 ピロリニル、 1 ピロリジニル、 2 ピロリジニル、 3— ピロリジ -ル、 1 イミダゾリ-ル、 2 イミダゾリ-ル、 4 イミダゾリ-ル、 1 イミダゾリジ -ル、 2—イミダゾリジ -ル、 4—イミダゾリジ -ル、 1—ビラゾリ-ル、 3—ビラゾリ-ル、 4ーピラゾリニル、 1ーピラゾリジニル、 3 ピラゾリジニル、 4ーピラゾリジニル、ピペリジ入 2 ピペリジニル、 3 ピペリジニル、 4ーピペリジニル、 1ーピペラジニル、 2— ピペラジニル、 2 モルホリニル、 3 モルホリニル、モルホリノ、テトラヒドロビラニル等があげられる。

「アルキレン」とは、メチレンが 1〜6個連続した 2価の基を包含し、具体的にはメチレン、エチレン、トリメチレン、テトラメチレン、ペンタメチレンおよびへキサメチレン等が挙げられる。

「水酸基から導かれる脱離基」とは、一 OMs、一 OTs、一 OTf、一 ONs等があげられる。ここで、「Ms」はメタンスルホ-ル基、「Ts」はパラトルエンスルホ-ル基、「Tf」はトリフルォロメタンスルホ-ル基、「Ns」はオルト-トロベンゼンスルホ -ル基を表す。本発明の方法で用いられる N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体の生産能を有する糸状菌としては、 N （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体またはその塩を産生する能力を有する微生物であればいかなる微生物でもよい。このような微生物として、例えば、 N- (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）—フタルイミド誘導体の生産能を有し、かつ、ナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属 (Rhizoctonia)、カェトミゥム属（Chaetomium)に属する微生物が挙げられる。

[0012] N （モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体の生産能を有する微生物は、微生物を好適な培地、好ましくは液体培地で培養し、培養液中に蓄積された N— (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体の有無によって、検索することができる。培地中の N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体の検出は、例えば、本発明により得られる N— (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体を標準品として用いた HPLCにより、行うことができる。

[0013] 本発明に用いる微生物の具体的な例としては、 N— (モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体生産能を有する微生物として、今回新たに分離した RF— 9402株がある。この菌株は、リゾクトニア属（Rhizoctonia)に属する糸状菌であり、本発明の方法に最も好適に用いられる N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体生産菌の一例である。同菌株は、好適な条件で培養すると、 N— ( モノヒドロキシ - 2-ァダマンチル）フタルイミド誘導体を菌体外に生産する。

この他に、カェトミゥム属（Chaetomium)に属する RF— 5733株、ナカタエァ属（Na kataea) RF— 9475株についても同様の特徴を有することを見出した。

これらの菌学的性質を以下に記載する。

[0014] RF— 9402株は、ポテトデキストロース寒天培地上での生育は旺盛だが、明瞭なコロニーを形成せず、部分的にフェルト状あるいは粉状を呈する。気中菌糸は淡褐色〜褐色で、幅は 7— 20 /ζ πι、概ね直角に分枝し、分枝部でくびれる。茶褐色の菌核を形成するが、分生子および胞子は見られない。

RF— 5733株は、ポテトデキストロース寒天培地上で上部に開口した亜球形〜卵形のペルセシァを形成する。ペルセシァは二種の頂毛を有し、一種は基部から生じ、細く緩く波打ち、もう一方は下部がまっすぐで上は 3— 5回螺旋状に巻く。子嚢はこん棒状で、 8個のレモン型の子嚢胞子を格納する。子嚢胞子のサイズは 7. 5 - 10. 0 X 6. 5-8. O /z mであった。

RF— 9475株は、ポテトデキストロース寒天培地上での生育は旺盛で、豊富な気中菌糸を伴い、ルーズフェルト状のコロニーを形成する。気中菌糸は無色で直径 1. 0 〜2. O ^ m,寒天中の栄養菌糸は褐色で直径 2. 0〜5. O /z mである。ポテトデキストロース寒天培地、コーンミール寒天培地、モルトエキス寒天培地などの上で、分生子ゃ菌核、有性生殖器官の形成は認められない。

これらの所見を基に、菌類図鑑下（1977年講談社)、日本菌類誌第三卷第三号（1995年養賢堂)などで検索し、 RF— 9402株はリゾクトニア'ソラ- (Rhizoctoni a solani)ゝ RF— 5733株は力エトミゥム 'コクリオデス（Chaetomium cochlidodes )、RF— 9475株はナカタエァ'シグモイデア（Nakataea sigmoidea)と同定し、リゾクトニア .ソラニ1¾^ 9402、力エトミゥム 'コクリオデス RF— 5733、ナカタエァ 'シグモイデア RF— 9475とそれぞれ命名した。

これらの糸状菌は、平成 19年 2月 26日に、独立行政法人産業技術総合研究所内特許生物寄託センター (茨城県つくば巿東 1— 1— 1中央第 6)に、「Chaetomium cochlidodes RF— 5733」（受領番号 FERM ABP— 10789)、「Rhizoctonia s olani RF— 9402」（受領番号 FERM ABP— 10790)および「Nakataea sigmoi dea RF— 9475」（受領番号 FERM ABP— 10791)なる表示で特許手続上の微生物の寄託の国際的承認に関するブタペスト条約に基づいて国際寄託されている。

[0015] リゾクトニア ·ソラ -RF— 9402、力エトミゥム 'コクリオデス RF— 5733、及びナカタエア.シグモイデア RF— 9475は、例えば、ポテト'デキストロース寒天培地のスラント上での保存、又は 10%グリセリンを添加したポテト'デキストロースブロスを保護剤として用いたマイナス 80°C以下での凍結保存により、安定に保存することができる。

[0016] 以上、 N （モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体生産菌の一例である、 RF— 9402株、 RF— 5733株、及び RF— 9475株について説明した力一般的には糸状菌類はその菌学的性状が極めて変化しやすぐ一定したものではない。菌類は、自然的あるいは通常行われている紫外線照射、 X線照射、変異誘発剤（例えば、 N メチノレ N' -トロー N -トロソグァ-ジンなど）を用、た人為的変異手段により変異することは周知の事実である。このような自然変異株ならびに人工変異株も含め、糸状菌に属し、 N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体を生産する能力を有する菌株はすべて本発明に使用することができる。

[0017] リゾクトニア属に属する糸状菌としては、リゾクトニア'ソラ- (Rhizoctonia solani)、リゾクトニア ·アデロリデイイ (Rhizoctonia aderholdii)、リゾクトニア ·ァェレア（Rhiz octonia aerea)、リゾクトニア ·アルピナ（Rhizoctonia alpina)等が挙げられる。力エトミゥム属に属する糸状菌としては、力エトミゥム 'コクリオデス（Chaetomium co chliodes)、力エトミゥム 'フニコラ (Chaetomium funicola)力エトミゥム 'インディ力ム (Chaetomium indicum)、力エトゥム ·オリノセゥム (Chaetomium olivaceu m)等が挙げられる。

ナカタエァ属に属する糸状菌としては、 Nakataea curvularioides (ナカタエア力一ブラリオイデス）、 Nakataea cylindrospora (ナカタエアシリンドロスポラ）、 Nak ataea fusispora (ナカタエアフシスボラ）等が挙げられる。

[0018] 本発明の方法を実施するに当っては、糸状菌に属する N— (モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体生産菌を、用いる微生物に好適な培地、例えば、通常の微生物が利用しうる栄養物を含有する培地、好ましくは液体培地中にぉ、て培養する。本生産菌の培養には、微生物の培養に用いられる通常の培養方法が適用される。栄養源としては、使用される微生物が資化しうる炭素源、窒素源および無機塩などを程よく含有する培地であれば天然培地、合成培地の!/ヽずれでも利用できる。

[0019] 用いる培地に含有される微生物が資化しうる炭素源としては、グルコース、フルクトース、ガラクトース、グリセロール、可溶性デンプン、グルタミン酸、糖蜜、動'植物油等を利用できる。また、窒素源としては、麦芽エキス、コーンスティープリカ一、肉ェキス、ペプトン、酵母エキス、硫酸アンモ-ゥム、硝酸ナトリウム、尿素などを使用できる。そのほか必要に応じ、ナトリウム、カリウム、カルシウム、ビタミン類、マグネシウム、塩素、硫酸およびその他のイオンを生成することができる無機塩類を培地中に添加することができる。また、使用する N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体生産菌の発育を助け、 N- (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体の生産を促進するような無機物質および (または)有機物質を適当に添加できる。例えば、ヒドロキシプロピル一 β—シクロデキストリン、 α—シクロデキストリン、 β ーシクロデキストリン、 _Ίーシクロデキストリン、メチルー 13ーシクロデキストリンなどの包接剤が挙げられる。

[0020] リゾクトニア ·ソラ -RF— 9402、力エトミゥム 'コクリオデス RF— 5733、ナカタエァ 'シグモイデア RF— 9475の生育に好適な培地としては、ポテト'デキストロース寒天培地、麦芽エキス寒天培地、 V— 8ジュース寒天培地及びポテトキヤロット寒天培地が挙げられる。

[0021] Ν （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体生産菌の培養方法には、好気的条件下での培養法、特に通気下の深部液体培養法が最も適している。培養に適当な温度は、 10〜30°Cである力多くの場合 15〜30°Cで培養するのがよい。 N— (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体の生産は、用いた培地の種類や培養条件によって異なる力振とう培養、タンク培養とも 3〜10日間の培養でその蓄積量が最高に達する。

[0022] 培養物中に生産された N （モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体の蓄積量が最高に達した時点で培養を停止し、その培養物から、発酵生産物を採取する一般的な方法に準じて N— (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体の分離を行うのがよい。具体的には、例えば、溶媒抽出、イオン交換クロマトグラフィー、活性炭処理、結晶化、膜分離等により、 N- (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル） -フタルイミド誘導体を培地力ゝら単離することができる。

[0023] N- (モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体を効率よく生産させる培養条件は、前記培地成分の組成、培養温度、撹拌速度、 pH、通気量、種母の培養時間、種母の接種量等を、使用する生産菌株の種類および外部条件等に応じて、適宜に調節あるいは選択して設定する。液体培養において発泡がある場合は、シリコーン油、植物油および界面活性剤等の消泡剤を単独または混合して適宜に培地に配合する。

[0024] 包接剤存在下で N— (2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体 lOgZL以上を溶解状態で添加することも可能で、実施例に示した方法を改良し培養開始時に 2%、培養 2 日目に 8%を添加するなどの方法を取ることにより 80%を超える変換率を得ることができる。

[0025] 糸状菌は、真菌菌糸全体としてまたは水酸化酵素を含有する抽出物の形で生体内変換に使用することができる。抽出物とは、真菌の菌体を破砕して処理を施したものであり、可溶性の酵素を含有するものを意味する。抽出物の酵素、特に水酸化酵素は、場合によっては、例えば酵素の天然の補助因子、ノッファー、塩を加えることによつて、安定ィ匕させることができる。抽出物の水酸ィ匕酵素は固定ィ匕型で使用することもできる。

本発明には、ナカタエァ属（Nakataea)、リゾタト-ァ属（Rhizoctonia)、力エトミゥム属（Chaetomium)のいずれかの属に属する微生物の菌またはその抽出物により、 2 ァダマンタナミンのァミノ保護体からモノヒドロキシ 2—ァダマンタナミンのアミノ保護体を生産する方法も包含される。

ナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属（Rhizoctonia)、カェトミゥム属（Chaeto mium)のいずれかの属に属する微生物としては、上記に記載された微生物などを用いることがでさる。

2—ァダマンタナミンのァミノ保護体としては、ァダマンタナミンのァミノ基が保護された化合物であれば、いずれの化合物も包含される。なお、ァダマンタン部分の水酸化される以外の部分が F、 Cl、 Br、 Iなどのハロゲン、アルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、ニトロ、ァリール、ァリールアルキル、カルボキシ、エステル、力ルバモイルなどで置換されていてもよい。好ましくは、 N— (2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体、 N - (2—ァダマンチル）—フタルイミド、 N ベンゾィル—2—ァダマンタナミン誘導体、 N -ベンゾィル— 2—ァダマンタナミン、 N -ァセチル - 2-ァダマンタナミン誘導体、 N ァセチル 2—ァダマンタナミンなどが挙げられる。

モノヒドロキシ - 2-ァダマンタナミンのァミノ保護体は、上記の 2—ァダマンタナミンのァミノ保護体がモノ水酸化された化合物を意味する。

本発明により得られた、モノヒドロキシ一 2—ァダマンタナミンのァミノ保護体、 N— (モノヒドロキシ 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体は、保護基をはずすことにより、容易にモノヒドロキシ 2—ァダマンタナミンに変換することができる。

[0026] 本発明を実施例により更に具体的に説明する。実施例 1

[0027] 以下に示す方法により社内の菌株ライブラリーをスクリーニングし、 2—ァダマンタンフタルイミド水酸ィ匕反応を行う株を見出した。

[スクリーニング条件]

グルコース 2. 0%、ソィビーンミール 0. 5%、イーストエタストラタ KDifco) 0. 5 %、塩化ナトリウム 0. 5%、リン酸カリウム 0. 5%、ヒドロキシプロピル- —シクロデキストリン 1. 4%水道水（PH7に希塩酸で調整）の組成の培地 200mlを 121°C、 20 分間滅菌した。 2—ァダマンタンフタルイミド 40mgを DMSO溶液 (1. 0ml)として添加した後、 1mlずつを無菌的に 24穴マルチプレート 8枚に分注し、変換用力ビライブラリーを胞子懸濁液として接種し、毎分 400回転 (丸菱バイオェンジ製 MBSS- 10 0)で、 28。C、 7曰間培養した。

[抽出'分析]

発酵終了した 24穴マルチプレート培養液は、 1ゥエルあたり lmlのアセトンを力卩ぇ撹拌抽出した後、 96穴ディーププレートに移し変え、毎分 2500回転で 15分間遠心分離し、上澄み液を逆相 HPLC分析に供した。

[結果]

変換反応の結果、新たなピークの検出されるサンプルについて ESI— MSにより水酸基が 1つ付与したと推定されるピークとして P5、 P6を同定した。基質を 80%以上これらの化合物に効率的変換する株として以下の 3株を選択した。無胞子不完全菌 R F— 9475は P5、 P6に相当する化合物の両方をほぼ等量作るのに対し、リゾクトニア 'ソラ -RF— 9402株、及びケトミゥム 'コクリオデス RF— 5733は基質の 80%以上をそれぞれ P5、 P6に変換する。

なお、先行技術（ジャーナルォブオーガニックケミストリー、 1992年、 57卷、 p.72 12-7216)に記載されるボーべリア'スルフレツセンス（またはボーべリア'バッシァーナ） ATCC— 7159株についてもこの方法でスクリーニングを行った力反応率は 20 %と顕著な水酸ィ匕体の生成は認められな力つた。

実施例 2

[0028] [種培養] グルコース 2. 0%、ソィビーンミーノレ 0. 5%、イーストエタストラタ KDifco)0. 5% 、塩ィ匕ナトリウム 0. 5%、リン酸カリウム 0. 5%水道水（PH7に調整、希塩酸)の組成の培地 100mlを 500ml容広口フラスコに分注し、 121°C、 20分間滅菌した。この培地に Helminthosporium sigmoideum (へノレミントスポリゥムシグモイデゥム) RF— 9475株を寒天斜面培養物よりかきとり接種し、振幅 70mm、毎分 180回転で、 28°C、 2日間培養し、種培養とした。

[生体触媒反応]

グルコース 2. 0%、ソィビーンミール 0. 5%、イーストエタストラタ KDifco) 0. 5% 、塩化ナトリウム 0. 5%、リン酸カリウム 0. 5%、ヒドロキシプロピル - j8—シクロデキストリン 1. 4%水道水（PH7. 0に調整、希塩酸）の組成の培地 100mlを 500ml容広口フラスコ 50本に分注し、 121°C、 20分間滅菌した。フラスコ当たり 2—ァダマンタンフタルイミド lOOmgを DMS02ml溶液とし、無菌的に添カ卩した後、種培養物 4mlずつ接種し、振幅 70mm、毎分 180回転で、 28°C、 4日間培養した。逆相 HPLC分析の結果、 57. 2%の基質を P5に、 43. 7%の基質を P6に変換した。

[抽出]

フラスコ 50本分の発酵終了液は、酢酸ェチル 3Lで抽出した後、 n—ブタノール 1L で再抽出した。両抽出液を合わせ、減圧下、濃縮乾固し、 11. 39gの粗抽出物を得た。

[単離，精製]

得られた粗抽出物 11. 39gはシリカゲル (MSゲル D— 150— 60A、旭硝子株式会社製） 200gを充填した中圧力ラム (内径 3cm、長さ 50cm)を用い、酢酸ェチルで溶出し、有効画分を濃縮乾固し、 5. Olgの粗抽出物を得た。

得られた粗抽出物 5. Olgは、 Develosil UG— C18 15/30 (内径 5cm、長さ 50c m)カラムを用い、ァセトニトリル/水 0. 1%蟻酸酸性 30〜60%(40分)のダラディエント、流速 50ml/分でクロマトを行った。

有効画分を減圧濃縮し、凍結乾燥により 2—ァダマンタンフタルイミド -P5、 P6 の精製品として各々 1. 36g、 1. 02gを得た。

それぞれの物性値は以下の通りである。 2 -ァダマンタンフタルイミド- P5：

ESIMS mZz: 298 [M+H] +、 280[M+H— H20] +

'Η NMR(DMSO-d ) δ： 7.817(4H、 s)、 4.48(1H、 br. s)、 4.13(1H、 br. s)

6

、 2.69(1H、 br. s)、 2.10(2H、 br. d、 J =〜13Hz)ゝ 2.05(1H、 m)、 1.78(2H 、 br. d、 J =〜12Hz)ゝ 1.70(2H、 br. d、 J =〜12Hz)ゝ 1.65(2H、 br. d、 J = 〜3Hz)、 1.44(2H、 br. d、 J =〜13Hz)

¹³C NMR(DMSO-d ) δ : 168.96、 134.22、 131.43、 122.57、 65.48、 59.

6

50、 45.29、 45.15、 31.86、 31.20、 28.61

2 -ァダマンタンフタルイミド- P6：

ESIMS mZz: 298 [M+H] +、 280[M+H— H20] +

XH NMR(DMSO-d ) δ : 7.817(4H、 s)、 4.631(1H、 d、 J = 3.3Hz)、 4.17(1

6

H、 br. s)、 3.68(1H、 br. q、 J =〜3Hz)、 2.43(1H、 br. s)、 2.37(1H、 br. s) 、 2.305(1H、 dq、 J = 13.1、 3.1Hz)ゝ 2.224(1H、 dq、 J= 12.4、 3.0Hz)ゝ 1. 94(2H、 m)、 1.90(1H、 m)、 1.80(1H、 br. q、 J =〜3Hz)、 1.78(1H、 m)、 1. 72(1H、 br. q、 J =〜3Hz)、 1.54(2H、 br. d、 J =〜13Hz)

1³C NMR(DMSO-d ) δ : 168.91、 134.19、 131.41、 122.54、 71.91、 60.

6

25、 36.42、 33.36、 32.79、 31.41、 31.34、 29.86、 29.11、 25.90 実施例 3

[種培養]

グルコース 2. 0%、ソィビーンミーノレ 0. 5%、イーストエタストラタ KDifco)0. 5% 、塩ィ匕ナトリウム 0. 5%、リン酸カリウム 0. 5%水道水（PH7に調整、希塩酸)の組成の培地 100mlを 500ml容広口フラスコに分注し、 121°C、 20分間滅菌した。この培地に Rhizoctonia solani (リゾクトニアノラ-) RF— 9402株を寒天斜面培養物より接種し、振幅 70mm、毎分 180回転で、 28°C、 3日間培養し、種培養とした。

[生体触媒反応]

グルコース 2.0%、ソィビーンミール 0.5%、イーストエタストラタ KDifco) 0.5%、塩化ナトリウム 0.5%、リン酸カリウム 0.5%、ヒドロキシプロピル - 一シクロデキストリン 1.4%水道水（PH7に調整、希塩酸）の組成の培地 100mlを 500ml容広口フラスコ 3本に分注し、 121°C、 20分間滅菌した。フラスコ当たり 2—ァダマンタンフタルイミド 20mg、 40mg、 lOOmgを DMSO 0.4ml, 0.8ml, 2ml溶液とし、無菌的に添カロした後、種培養物 4mlずつ接種し、振幅 70mm、毎分 180回転で、 28°C、 3 日間培養した。逆相 HPLC分析の結果、 88.2%の基質を P5に変換した。

[抽出]

フラスコ 3本分の発酵終了液は、 n—ブタノール 150mlで抽出した。抽出液は、減圧下、濃縮乾固し、 0.253gの粗抽出物を得た。

[単離，精製]

得られた粗抽出物 0.253gは、 Unison US— C18 (内径 2cm、長さ 15cm)カラムを用い、ァセトニトリル/水 0.1%蟻酸酸性 30- 95%(20分)のグラディエント、流速 1 5ml/分でクロマトを行った。

有効画分を減圧濃縮し、凍結乾燥により 2—ァダマンタンフタルイミド -P5の精製品 65.4mgを得た。

実施例 4

[種培養]

1) グルコース 2.0%、ソィビーンミーノレ 0.5%、イーストエタストラタ KDifco) 0.5 %、塩化ナトリウム 0.5%、リン酸カリウム 0.5%水道水（PH7に調整、希塩酸)の組成の培地 100mlを 500ml容広口フラスコに分注し、 121°C、 20分間滅菌した。この培地にボーべリア ·バッシァーナ ATCC— 7159株を寒天斜面培養物より胞子懸濁液とし接種し、振幅 70mm、毎分 180回転で、 28°C、 2日間培養し、種培養とした。

2) グルコース 10g、 C. S. L 20g水道水 1L (PH 7.0に調整、希苛性ソーダ）の組成の培地 100mlを 500ml容広口フラスコに分注し、 121°C、 20分間滅菌した。この培地にボーべリア'バッシァーナ ATCC— 7159株を寒天斜面培養物より胞子懸濁液とし接種し、振幅 70mm、毎分 180回転で、 28°C、 2日間培養し、種培養とした。

[生体触媒反応]

グルコース 2.0%、ソィビーンミール 0.5%、イーストエタストラタ KDifco) 0.5%、塩化ナトリウム 0.5%、リン酸カリウム 0.5%水道水（PH7に調整、希塩酸)の組成の培地 50mlを含む 500ml容広口フラスコ 1本とグルコース 1.0%、 C. S. L 2.0 %水道水（PH 7.0に調整、希苛性ソーダ）の組成の培地 50mlを 500ml容広口フラスコ 1本に分注し、 121°C、 20分間滅菌した。フラスコ当たり 2—ァダマンタンフタルイミド lOmgを DMSO 0.2ml溶液とし、無菌的に添カロした後、種培養物 5mlずつ接種し、振幅 70mm、毎分 180回転で、 28°C、 3日間培養した。逆相 HPLC分析の結果、 23.6 %の基質を P5に、 1.1 %の基質を P6に変換した。

[抽出]

フラスコ 2本分の発酵終了液は、 n-ブタノール 100mlで抽出した。抽出液は、減圧下、濃縮乾固し、 0. 097gの粗抽出物を得た。

[単離，精製]

得られた粗抽出物 0. 097gは Unison US— C 18 (内径 2cm、長さ 15cm)カラムを用い、ァセトニトリル/水 20— 95% (20分）のグラディエント、流速 15ml/分でクロマトを行った。有効画分を減圧濃縮し、凍結乾燥により 2—ァダマンタンフタルイミド -P 5、 P6 の精製品として各々 2. 4mg、 0. lmgを得た。

実施例 5

[0031] [ィ匕 7]

化合物 l(2.0g)のエタノール溶液 (20ml)にメチルヒドラジン (776mg)をカ卩え、 24時間加熱還流を行った。反応終了後、溶媒を留去し、残渣を 2N塩酸水溶液 (30ml)で希釈した。水層を酢酸ェチルで洗浄 (50ml X 2)した後に、減圧下、 1/3程度に濃縮した。析出した結晶を濾取し、イソプロピルアルコールで洗浄した。目的物 2(890mg)を無色結晶として得た。

NMR(d6-DMSO); 1.33— 1.42(m,2H), 1.58-1.72(m,6H), 1.85— 1.95(m,2H), 1.98— 2.05( m,lH), 2.06-2.14(m,2H), 3.18— 3.28(m,lH), 8.10— 8.20(br, 3H).

実施例 6

[0032] [化 8]

化合物 3(150mg)のジメチルホルムアミド溶液（DMF) (5ml)に、窒素雰囲気下、モノヒドロキシ一 2 ァダマンタナミン (140mg)、 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール（HOBT) (31 mg)、 1- (3-ジメチルァミノプロピル)- 3-ェチルカルボジイミド塩酸塩 (WSC) (174mg)、トリェチルァミン (TEA) (180 1)を加え、室温で 14時間攪拌した。反応終了後、 2N塩酸水溶液 (30ml)を加え、酢酸ェチルで抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和食塩水の順に洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を留去し、残渣をシリカゲルクロマトグラフィーで精製し、化合物 4(226mg)を得た。

NMR:(CDC13);1.06(d,J=6.6Hz,6H),1.53-2.20(m,14H),3.72(s,3H),3.98(d,J=6.6Hz,2H ),6.25-6.30(m,lH),7.71(s,lH)

産業上の利用可能性

機能性榭脂ゃ医薬品の中間体として有用である N （モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体の安価で高収率の製造方法として利用することができる。

Claims

請求の範囲

[1] 糸状菌またはその抽出物を用いて、 N—（2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体を水酸化することを特徴とする、 N— (モノヒドロキシ一 2—ァダマンチル）一フタルイミド誘導体を生産する方法。

[2] 糸状菌がナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属 (Rhizoctonia)、カェトミゥム属（

Chaetomium)の群から選択される、請求項 1記載の方法。

[3] 糸状菌がナカタエア'シグモイデア（Nakataea sigmoidea)リゾクトニア'ソラ - (Rhi zoctonia solani) *7こ ίま力エトゥム ·コクリオテス (Chaetomium cochliodes)である、請求項 2記載の方法。

[4] 糸状菌により行われる、請求項 1〜3のいずれか 1項に記載の方法。

[5] 糸状菌の抽出物により行われ、抽出物が水酸化酵素を含有する、請求項 1記載の方法。

[6] 前記 N—（2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体が以下の式で表わされる化合物である請求項 1記載の方法。

[化 1]

前記 N— (モノヒドロキシー 2—ァダマンチル）フタルイミド誘導体が以下のいずれかの式で表わされる化合物である請求項 1記載の方法。

[化 2]

糸状菌を培地中で培養する工程、及び培養液から前記 N （モノヒドロキシダマンチル）フタルイミド誘導体を分離する工程を含む、請求項 1記載の方法。

[9] N- (モノヒドロキシー 2 ァダマンチル）フタルイミド誘導体を生産する能力を有するナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属（Rhizoctonia)、カェトミゥム属（Chaet omium)の!、ずれかの属に属する微生物の菌体。

[10] ナカタエァ'シグモイデア RF— 9475株（FERM ABP— 10791)、リゾクトニア ·ソラ

-RF 9402株（FERM ABP— 10790)または力エトミゥム 'コクリオデス RF— 57

33株（FERM ABP— 10789)のいずれかの株。

[11] 以下の式で表される、いずれかの化合物。

[化 3]

[12] ナカタエァ属（Nakataea)、リゾクトニア属（Rhizoctonia)、カェトミゥム属（Chaeto mium)の、ずれかの属に属する微生物の菌またはその抽出物により、 2 ァダマンタナミンのアミノ保護体力モノヒドロキシ一 2—ァダマンタナミンのァミノ保護体を生産する方法。

[13] 請求項 1〜8および 12のいずれかに記載の方法により得られた、 N— (モノヒドロキシ —2—ァダマンチル）—フタルイミド誘導体を脱保護することを特徴とする、化合物 (I)

[化 4]

で示される化合物の製造方法。

請求項 13記載の方法により得られた式 (I)で示される化合物を、

式（Π)： A— R¹— R²— R³— X (式中、 Aは置換されて、てもよヽ環式炭化水素基または置換されて、てもよ、複素環式基であり、 R¹は単結合、— C ( = 0)—、— O—または— NR⁴—であり、 R²は単結合または置換されていてもよいアルキレンであり、 R³は単結合または— C ( = 0)—であり、 Xは水酸基、ハロゲンまたは水酸基力導かれる脱離基であり、 R⁴は水素または置換されて、てもよ、アルキルである）で示される化合物と反応させることを特徴とする、式 (ΠΙ) :

[化 5]

で示される化合物の製造方法。