WO2007040005A1

WO2007040005A1 - ペルオキシソーム増殖剤応答性受容体ＰＰＡＲα活性化剤、および該活性化剤を含有する特定症状の予防または改善用組成物

Info

Publication number: WO2007040005A1
Application number: PCT/JP2006/317484
Authority: WO
Inventors: Teruo Kawada; Min-Sook Kang; Tsuyoshi Goto; Yoichiro Ezaki
Original assignee: Kyoto University; Arakawa Chemical Industries, Ltd.
Priority date: 2005-09-06
Filing date: 2006-09-05
Publication date: 2007-04-12
Also published as: JPWO2007040005A1

Abstract

　デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、１３β－△８－ジヒドロアビエチン酸および１２－スルホデヒドロアビエチン酸からなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とするペルオキシソーム増殖剤応答性受容体α活性化剤。該活性化剤はインスリン抵抗性、２型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満および脂肪肝からなる群より選ばれる少なくとも一種の症状の予防または改善に有用である。

Description

明細書

ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 PPAR a活性化剤、および該活性化剤を含有する特定症状の予防または改善用組成物

技術分野

[0001] 本発明は、ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 ex活性化剤、および該活性ィ匕剤を含有する特定症状の予防または改善用組成物に関する。より詳細には、ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 _α活性化剤として作用し、インスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満および脂肪肝からなる群より選ばれる少なくとも一種の症状を予防または改善する作用を有する組成物に関する。

背景技術

[0002] ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 (PPAR)は、脂質や糖の代謝糖に関与する遺伝子群の発現制御を担う核内受容体ファミリーに属する活性化剤依存性転写制御因子である。 PPARには、 PPAR— a、 PPAR- δ、 PPAR- γの 3種が知られている。 PPAR- γは主に脂肪組織、免疫細胞、副腎、脾臓、小腸で、 PPAR- aは主に脂肪組織、肝臓、腎臓、骨格筋で発現し、 PPAR- δは主に組織特異性が見られず普遍的に発現して、ることが知られて!/、る（非特許文献 1)。

[0003] これら PPARのサブタイプのうち PPAR— aは、長鎖脂肪酸やクロフイブレート、フエノフイブレート、ベザフイブレート、ゲムフイブロジル等の薬剤によって活性化されると報告されている (非特許文献 2および 3参照)。 PPAR- α活性化剤は脂肪酸の代謝を亢進し、血中トリグリセリド濃度を低下させることが知られており、高脂血症等の予防または治療薬として有用である。さらに、 PPAR- α活性化剤は、脂質代謝のみでなぐ糖代謝も改善し、血中脂質低下、血糖値の低下、インスリン抵抗性の改善等の効果を示すことが報告されており（非特許文献 4、 5、 6、 7、 8を参照）、高脂血症、 2 型糖尿病、高血糖、インスリン抵抗性、肥満等の予防および Ζまたは改善剤として有効である。しかしながら、前記の化合物には長期服用による副作用などの問題があり、より安全な当該予防または治療薬の開発が望まれている。

非特許文献 1 :医学のあゆみ， 1998年， 184卷， 519〜523頁非特許文献 2：ジャーナル ·ォブ ·ザ ·ナショナル ·キャンサ一'インスティテュート (Jour nal of the NationalCancer Institute) , 1998年 90卷， 1702〜1709頁非特許文献 3：カレント ·オピニオン ·リピドロジ一（CurrentOpinion in Lipidology) , 1999年， 10卷， 245〜257頁

非特許文献 4:日本臨床， 2005年， 63卷， 4号， 539〜548頁

非特許文献 5 :日本臨床， 2005年， 63卷， 4号， 549〜555頁

非特許文献 6 :日本臨床， 2005年， 63卷， 4号， 557〜564頁

非特許文献 7 :日本臨床， 2005年， 63卷， 4号， 631〜642頁

非特許文献 8 :ダイアベ一ト（Diabetes) , 2001年， 50卷， 411〜417頁

発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0004] 本発明は、安全性が高ぐ有用なペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤を提供すること、およびインスリン抵抗性、 2型糖尿病、内臓脂肪型肥満、脂肪肝、高脂血、高血圧などを予防または改善する作用を有する糸且成物を提供することを目的とする。

課題を解決するための手段

[0005] 本発明者らは、従来未検討であった、天然物であるロジン中に含有される榭脂酸成分に着目し、そのペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 oc活性化との関係につ!ヽて鋭意検討した結果、ロジン中の特定の榭脂酸やその誘導体、すなわち、デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 j8— Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12—スルホデヒドロアビエチン酸力なる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩が、優れたペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 (X活性化作用を有することを見出し、この知見に基づいてさらに研究を進め、本発明を完成するに至つた。

[0006] すなわち、本発明は、

(1)デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 j8— Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12 ースルホデヒドロアビエチン酸力なる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とするペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 _α活性化剤、

(2)ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 exが介在する疾患または症状を予防または改善するための前記（1)記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 OC活性化剤、

(3)ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 exが介在する疾患または症状が、インスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満または脂肪肝である前記（2)記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤、

(4)インスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満もしくは脂肪肝の予防または改善用組成物である前記（1)記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤、

(5)前記（1 )記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤を含有することを特徴とするインスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満もしくは脂肪肝の予防または改善用組成物、

(6)医薬組成物である前記（5)記載の予防または改善用組成物、

(7)食品である前記（5)記載の予防または改善用組成物、

(8)デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 β Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12 ースルホデヒドロアビエチン酸力なる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩を含有し、かつペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 a が介在する疾患または症状が予防または改善される旨を表示したことを特徴とする食

P

TO、

(9)ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 exが介在する疾患または症状が、インスリン抵抗性 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満または脂肪肝である前記（ 8)記載の食品、

( 10)ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 exが介在する疾患または症状を有する患者に、デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 β Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12—スルホデヒドロアビエチン酸力もなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを特徴とするペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 aが介在する疾患または症状の予防または改善方法、および ( 11)ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 αが介在する疾患または症状を予防または改善する薬剤の製造のためのデヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 |8— Δ ⁸— ジヒドロアビエチン酸および 12—スルホデヒドロアビエチン酸からなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用、

に関する。

発明の効果

[0007] 本発明のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 ex活性化剤における有効成分であるデヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 β Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12 ースルホデヒドロアビエチン酸またはその薬学的に許容される塩は、、ずれも優れたペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 oc活性化作用を有し、しかも天然物に由来するため安全性が高い。このため、本発明のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤またはそれを含有した組成物は、インスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満および脂肪肝力なる群より選ばれる少なくとも一種の症状を予防または改善するため有用であり、医薬または食品に適用できる。

発明を実施するための最良の形態

[0008] 以下、本発明を詳細に説明する。

本発明のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 _α活性化剤は、デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 β— Δ ⁸ ジヒドロアビエチン酸および 12—スルホデヒドロアビェチン酸力なる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とする。

[0009] 本発明のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 ex活性化剤における有効成分 (遊離酸)の構造式を示せば、次の通りである。

[化 1]

デヒドロアビエチン酸メルクシ酸

1 3 i3—△ 8 ジヒドロアビエチン酸 1 2—スルホデヒドロアビエチン酸

[0010] 前記有効成分のうちデヒドロアビエチン酸、メルクシ酸は、一般的に榭脂酸と呼ばれ、松の木から製造される松脂を精製して得られる軟化点約 70〜80°Cの琥珀色の透明ガラス状榭脂（ロジン）の成分である。 13 18— Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸はロジンを水素化して得られる水素化ロジンの成分である。また 12—スルホデヒドロアビエチン酸はデヒドロアビエチン酸のスルホン化物である。これらは、それぞれ公知の化合物である力ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 OC活性化剤の有効成分としては、本願以前には全く知られていない。

[0011] 該有効成分である化合物は公知の方法で容易に単離 ·精製ある!/、は合成できる。

例えば、メルクシ酸の場合は特開昭 51— 131899号公報に記載の方法、デヒドロアビエチン酸の場合はジャーナル.ォブ.オーガニック.ケミストリー， 1966年， 31卷， 4 246〜4247頁に記載の方法、メルクシ酸の場合はホルツフォルシユング（holzforsh ung) , 1974年，第 28卷， 186〜188頁に記載の方法、 13 j8— Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸の場合は特開昭 51— 149256号公報に記載の方法、 12—スルホデヒドロアビエチン酸の場合は特開昭 58— 77814号公報に記載の方法等を採用できる。本発明のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤では、上記の方法で精製' 単離された少なくとも一種の榭脂酸またはその薬学的に許容される塩を、単独または適宜に組合せて用いてもょヽ。

[0012] 本発明の有効成分が塩の場合、力かる塩としては、薬理学的に許容されるものすベてが含まれる。薬理学的に許容される塩は毒性の少ないものが好ましい。適当な塩として、例えばアルカリ金属 (カリウム、ナトリウム、リチウム等）の塩、アルカリ土類金属（カルシウム、マグネシウム等）の塩、アンモ-ゥム塩 (テトラメチルアンモ -ゥム塩、テトラプチルアンモ-ゥム塩等)または有機アミン（トリェチルァミン、メチルァミン、ジメチルァミン、シクロペンチルァミン、ベンジルァミン、フエネチルァミン、ピぺリジン、モノエタノールアミン、ジエタノールァミン、トリス（ヒドロキシメチル)メチルァミン、リジン、アルギニン、 N—メチル D—グルタミン等）の塩等が挙げられる。

[0013] これら有効成分の PPAR a活性化作用（PPAR aァゴ-スト活性）は、例えばエフ · ィ一.ビ一.エスレターズ， 2002年， 514卷， 315〜322頁等の方法で測定できる。すなわち、 PPAR— αのリガンド結合部位と GAL4 (酵母の DNA結合性転写因子活性ィ匕因子）の DNA結合部位のキメラタンパクを産生するプラスミド (pM— PPAR a ) と、レポーター遺伝子であるルシフェラーゼ遺伝子の上流に GAL4の応答配列（UA Sg)が 4個組み込まれてヽるプラスミド (4 X UASg-luc)を、アフリカミドリザル腎臓由来培養細胞（CV— 1)にリポフエクシヨン法によりコトランスフエクシヨンし、得られたトランスフォーマントを一定期間培養後、被験化合物と接触させることにより、 PPAR a GAL4キメラタンパクを活性化させ、 4 X UASg— luc上流の UASgへの結合を亢進し、それによりルシレラーゼの産生を増加させる。 PPAR α活性ィ匕作用は、産生されたルシフェラーゼの活性を測定することにより評価することができる。

なお、上記測定法において、 PPAR— αのリガンド結合部位は、ヒト PPAR— αアミノ酸配列（http：〃 www.genome.jp/dbget- bin/www_bget?sp:PPAT_HUMAN参照）において、アミノ酸配列 201— 463に相当する。また、 GAL4 (酵母の DNA結合性転写因子活性化因子）の DNA結合部位のタンパクは、 GAL4のアミノ酸配列（http：〃 ww w.genome.jp/dbget- bin/www_bget?sp:GAL4_YEAST参照）にお!/、て、アミノ酸配列 1 〜147に相当する。

[0014] また、本発明の有効成分は、 PPAR α活性ィ匕作用に基づき、糖代謝改善作用、脂質代謝改善作用、血糖降下作用、体脂肪蓄積抑制作用、内臓脂肪蓄積抑制作用、インスリン低下作用などを発揮すると共に、本発明の有効成分は、肥満に関連する炎症性因子であるサイト力イン (例えば、 MCP—1)の減少作用を有する。このため、本発明のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 _α活性化剤は、肥満に伴う生活習慣病ゃメタボリックシンドロームの予防、改善剤として有用であり、より具体的には、ィンスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満および脂肪肝などの予防 ·改善剤として有用である。

[0015] 本発明のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 a活性化剤およびそれを含む組成物 (以下、両者を合わせて製剤ともいう）を医薬とする場合、慣用の担体と共に経口剤、注射剤、外用剤または坐剤または吸入剤等とされる。経口剤としては、例えば錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、カプセル剤、液剤、乳剤、懸濁剤、シロップ剤等の剤形が挙げられる。これら製剤は自体公知の方法によって製造することができる。たとえば、顆粒剤、細粒剤、散剤および錠剤とする場合には、本発明の有効成分と、医薬上許容される添加剤、例えば賦形剤（例.乳糖、デンプン、ショ糖、ブドウ糖、マン-トール、コンスターチ、無機塩類等）、滑沢剤（例.タルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウム等）、崩壊剤（例.カルメロース、カルメロースカルシウム、デンプン、結晶セルロース、低置換ヒドロキシプロピルセルロース等）、結合剤（例.デンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ヒドロキシプロピルスターチ、結晶セルロース、ェチルセル口ース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビュルピロリドン等)などと共に公知の方法で混和し、造粒、打錠または粉砕することにより製造することができる。なお、顆粒剤および錠剤には、適当なコーティング剤（例.ゼラチン、白糖、アラビアゴム、カルナパロウ等）、腸溶性コーティング剤（例.酢酸フタル酸セルロース、メタアクリル酸コポリマー、ヒドロキシプロピルセル口ースフタレート、カルボキシメチルェチルセルロース等）などで剤皮を施してもよ、。

[0016] カプセル剤として製造する場合には、本発明の有効成分を公知の賦形剤と共に均等に混和し、または粒状ィ匕し、若しくは粒状ィ匕し、必要によりさらに適当なコーティング剤で剤皮を施したのち、カプセルに充填するカゝ、適当なカプセル基剤（例.ゼラチン等）にグリセリンまたはソルビトール等を加えて塑性を増したカプセル基剤で被包成形してもよい。該賦形剤としては、例えば、流動性と滑沢性を向上させるためのステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、タルクまたは軽質無水ケィ酸、加圧流動性のための結晶セルロースや乳糖、あるいは上記崩壊剤等が挙げられる。

[0017] 乳剤、懸濁剤またはシロップ剤として製造する場合には、例えば安定剤（例.ェデト酸ナトリウム等）、懸濁化剤 (例.アラビアゴム、カルメロース等）、矯味剤 (例.単シロップ、ブドウ糖等)、芳香剤、精製水、ヱタノール、植物油、乳化剤等を適宜選択して使用することができる。

[0018] 上記注射剤は、水性注射剤または油性注射剤の、ずれでもよ!/ヽ。水性注射剤とする場合、公知の方法に従って、例えば、水性溶媒 (例.注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液等）に、医薬上許容される添加剤、例えば等張化剤 (例.塩ィ匕ナトリウム、塩化カリウム、グリセリン、マン-トール、ソルビトール、ブドウ糖、プロピレングリコール等）、緩衝剤（例.リン酸緩衝液、酢酸緩衝液、炭酸緩衝液、クェン酸緩衝液、トリス緩衝液、グルタミン酸緩衝液、ィプシロンアミノカプロン酸緩衝液等）、保存剤（例 .クロロブタノール等）、増粘剤（例.ヒドロキシェチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、ポリビュルアルコール、ポリエチレングリコール等）、安定化剤（例.亜硫酸水素ナトリウム、チォ硫酸ナトリウム、ェデト酸ナトリウム、クェン酸ナトリウム、ァスコルビン酸等）、懸濁剤（例.アラビアゴム、トラガント、デキストリン、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシェチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、カルボキシビュルポリマー、ポリビュルアルコール、ポリビュルピロリドン、ベントナイト、ビーガムまたは無水ケィ酸等）、乳化剤（ラウリル硫酸ナトリウム、ソルビタン、脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン、ポリオキシエチレン脂肪酸エステルまたはモノグリセリド等)または pH調整剤（例.塩酸、水酸化ナトリウム、リン酸、酢酸等)などを適宜添加した溶液に、本発明の有効成分を溶解した後、フィルタ一等で濾過して滅菌し、次いで無菌的な容器に充填することにより調製することができる。また適当な溶解補助剤、例えばアルコール (エタノール等）、ポリアルコール（プロピレングリコール、ポリエチレングリコール等）、非イオン界面活性剤（ポリソルベート 80、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油 50等)などを使用してもよい。油性注射剤とする場合、油性溶媒としては、例えば、ゴマ油、落花生油、大豆油、トウモロコシ油等が用いられ、溶解補助剤として安息香酸ベンジル、ベンジルアルコール等を使用してもよい。調製された注射液は、通常、適当なアンプルまたはバイアルに充填される。注射剤中の本発明の有効成分の濃度は、通常約 0. 001〜10. OwZv%程度、好ましくは約 0. 005-5. OwZv%程度に調整される。

[0019] また、外用剤としては、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤等挙げられ、軟膏剤やタリーム剤の場合には、例えば吸水軟膏、親水軟膏、単軟膏、白色軟膏またはマクロゴール軟膏あるいは、ステアリルアルコール、セタノール、パラフィン、流動パラフィン、蜜蝌、ヤシ油等の公知の基剤と混和する等製剤上の常法により調製することができる

[0020] ローション剤には、通常用いられる添加剤が含まれていてもよぐ例えばこのような添加剤として、懸濁剤、乳化剤、湿潤剤（例.グリセリン、プロピレングリコール、ソルビトール、 1, 3—ブチレングリコール、 dl—ピロリドンカルボン酸、乳酸ナトリウム等）または保存剤（例.ノォキシ安息香酸エステル類、塩ィ匕ベンザルコ-ゥム、クロロブタノール、ベンジルアルコール、デヒドロ酢酸ナトリウム、ェデト酸ナトリウム、ホウ酸、ホウ砂等)などが挙げられる。上記したこれらの添加剤を用いて、常法に従ってローション剤を調製することができる。

[0021] 坐剤も慣用の基剤（例えばカカオ脂、ラウリン脂、グリセ口ゼラチン、マクロゴール、ウイテツプゾル等)を用いた製剤上の常法によって調製することができる。

[0022] また、吸入剤も製剤上の常套手段によって調整することができる。吸入剤として製造する場合、その添加剤としては、一般に吸入用製剤に使用される添加剤であればいずれのものであってもよぐ例えば、噴射剤の他、上記した賦形剤、結合剤、滑沢剤、保存剤、安定化剤、等張化剤、 PH調整剤または矯味剤 (タエン酸、メントール、グリチルリチンアンモ-ゥム塩、グリシン、香料等)などが用いられる。噴射剤としては、液化ガス噴射剤、圧縮ガス等が用いられる。液化ガス噴射剤としては、例えば、フッ化炭化水素（HCFC22、 HCFC— 123、 HCFC—134a、 HCFC142等の代替フロン類等）、液化石油、ジメチルエーテル等が挙げられる。圧縮ガスとしては、例えば、可溶性ガス (炭酸ガス、亜酸ィ匕窒素ガス等）、不溶性ガス（窒素ガス等)などが挙げられる。

[0023] 本発明の製剤を医薬として用いる場合、有効成分の投与量は、患者の年齢、体重、疾患の程度、剤型により異なるが、例えば注射剤の場合、成人に対する投与量は、重量として通常約 0. Olmg〜： LgZ日であり、経口剤の場合は、重量として、通常約 0 . Olmg〜： LgZ曰である。

[0024] 本発明の製剤を食品として使用する場合、食品添加物として許容される添加物 (例 .ブドウ糖、果糖、ショ糖、マルトース、ソルビトール、ステピオサイド、ルブソサイド、コーンシロップ、乳糖、クェン酸、酒石酸、リンゴ酸、コハク酸、乳酸、 Lーァスコルビン酸、 dl— a—トコフエロール、エリソルビン酸ナトリウム、グリセリン、プロピレングリコール、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、アラビアガム、力ラギーナン、カゼイン、ゼラチン、ぺクチン、寒天、ビタミン B類、ニコチン酸アミド、ノントテン酸カルシウム、アミノ酸類、カルシウム塩類、色素、香料または保存剤等）と共に、公知の方法により、錠剤、顆粒剤、カプセル剤等とすることができる。

[0025] また本発明の製剤は、他の食品成分に混合して食品とすることもできる。この場合、他の食品成分は特に限定はされず、様々な食品に利用可能である。利用可能な食品としては、例えば、醤油、粉末醤油、味噌、粉末味噌、もろみ、ひしお、フリカケ、マヨネーズ、ドレッシング、食酢、三杯酢、粉末すし酢、天つゆ、麵つゆ、ソース、ケチヤップ、焼肉のたれ、カレールー、中華の素、シチューの素、スープの素、ダシの素、複合調味料、みりん、新みりん、テーブルシュガーまたはコーヒーシュガー等の調味料、せんべい、あられ、おこし、花林糖、求肥、餅、まんじゅう、ういろう、あん、羊羹、水羊羹、錦玉、ゼリー、カステラまたは飴玉等の和菓子、ビスケット、クラッカー、クッキー、パイ、プリン、シュークリーム、ワッフル、スポンジケーキ、ドーナッツ、チョコレート、チューインガム、キャラメル、キャンデーまたはグミゼリー等の洋菓子、アイスクリーム、アイスキャンデーまたはシャーベット等の氷菓、氷蜜等のシロップ、バタークリーム、力スタードクリーム、フラワーペースト、ピーナッツペーストまたはフルーツペースト等のスプレッドおよびペースト、ジャム、マーマレード、シロップ漬または糖菓等の加工果実および加工野菜、パン、麵、米飯または人造肉等の穀類加工食品、サラダオイルまたはマーガリン等の油脂食品、福神漬、べつたら漬、千枚漬またはらつきよう漬等の漬物、たくあん漬の素または白菜漬の素等の漬物の素、ハムまたはソーセージ等の畜肉製品、魚肉ハム、魚肉ソーセージ、力マボコ、チクヮまたはハンペン等の魚肉製品、ゥ二の塩辛、イカの塩辛、酢コンブ、さきするめまたはフグのみりん干し等の珍味、農産物、畜産物または水産物等力製造される煮物、焼物、炒め物、揚げ物、蒸し物またはあえ物等の惣菜、えびフライ、コロッケ、シユーマイ、ぎょうざ、春卷、ハンバーグステーキ、ミートボール、フィッシュハンバーグまたはフィッシュボール等の冷凍調理食品、ハンバーグ、ミートボール、赤飯、牛めし、とり釜めし、玄米がゆ、カレー、ミートソース、ドミグラスソース、ポタージュスープ、コンソメスープ、シチュー、おでん、八宝菜、煮豆、焼鳥、茶碗蒸しまたは野菜の水煮等のレトルト食品、錦糸卵、乳飲料、ノターまたはチーズ等の卵製品および乳製品、魚肉、畜肉、果実または野菜等の瓶詰および缶詰、合成酒、醸造酒、果実酒または洋酒等の酒類、コーヒー、ココア、ジュース、茶、紅茶、ウーロン茶、ミネラル飲料、炭酸飲料、乳酸飲料または乳酸菌飲料等の清涼飲料、プリンミックス、ホットケーキミックス、即席ジュース、即席しるこまたは即席スープ等の即席食品等が挙げられる。

[0026] 上記食品中の本発明の製剤の含有量は、食品の種類により異なるが、有効成分の含有量として、通常約 0. 001-0. 1質量％程度である。

[0027] 以下に本発明を実施例に基づいて、より具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

実施例

[0028] [実施例 1]

(PPAR- aリガンド活性の測定方法）

CV- 1細胞 (雄性アフリカミドリザル腎臓由来の培養細胞）を 96穴培養プレートに 1 穴あたり 6 X 10³個となるように植え込み、 37°C、 5%CO条件下で 24時間培養した

2

。培地には、 10%FBS (ゥシ胎仔血清）、 lOmlZLペニシリン 'ストレプトマイシン溶液（それぞれ 5000IU/ml、 5000 μ g/ml, GIBCO社製）、 37mg/Lァスコルビン酸（和光純薬工業（株）製）を含む DMEM (Dulbeccos Modified Eagle Medium : GIB CO社製）を用、た。細胞を OPTI - MEM (GIBCO社製）で洗浄した後、 pM— PP AR αと 4 X UASg— lucをリポフエクトァミン ·プラス（GIBCO社製）を用いてトランスフエクシヨンした。なお、 pM— PPAR aは、ヒト PPAR— αリガンド結合部遺伝子（ァミノ酸配列 201—463)を結合したキメラタンパクの遺伝子を挿入したプラスミドであり、 4 X UASg— lucはルシフェラーゼ遺伝子の上流に GAL4の応答配列（UASg)を 4回糸且み込んだレポータ一'プラスミドである（Cell, 1995年， 83卷， 803〜812頁などに記載の方法で作成可能)。トランスフエクシヨンの約 24時間後、各被験化合物を含む培地に交換し (n=4)、 24時間培養した。被験化合物はジメチルスルホキシド（ DMSO)に溶解したものを、無処置対照には DMSOを用い、培地に 1Z1000量添カロした。細胞を Ca、 Mg含有リン酸緩衝生理食塩水（PBS + )で洗浄した後、ルツクライト（Packard社製）を添加し、トップカウント 'マイクロプレートシンチレーシヨン Zルミネッセンスカウンター（Packard社製）にてルシフェラーゼの発光強度を測定した。測定群と同様に、コントロール群として pM— PPAR o;の代わりに pMを用いて測定した。各被験化合物について、測定群およびコントロール群の発光強度の平均値 (n =4)の比 (測定群 Zコントロール群)を算出し、無処置対照に対する比活性を各被験化合物の PPAR— ひリガンド活性とした。結果を表 1に示す。

[表 1]

[実施例 2]

(PPAR a活性を有する組成物の糖質代謝、脂質代謝改善の動物実験) 4週齢の雄性 KKAy遺伝性肥満'糖尿病発症マウス（日本クレア社製)を市販固形飼料（日本クレア社製)で 6日間予備飼育後、 1群 6〜7匹として 4群に分け、基礎精製高脂肪飼料 (タンパク質エネルギー比 20%、炭水化物エネルギー比 20%、脂肪エネルギー比 60%、リサーチダイエット社製 D12492)のみで、または基礎精製高脂肪飼料に下記表 2に示す被験化合物を所定量添加した試料でペアフィーディングにより 5週間飼育した。

[0031] [表 2]

[0032] 試験期間中、血糖値の測定を行い、 5週目に体重測定後に、屠殺し、腹腔内脂肪重量および血中パラメータの測定を行い、血糖値、レプチン、インスリンおよび MCP 1の分泌量、腹腔内脂肪量の体重に対する比を求めた。結果は表 3〜7の通りである。なお、統計解析は対応のある t検定で行い、表中の *印はコントロールに比べ危険率 5%未満で有意差があることを示す。

[0033] [表 3]

[0034] [表 4] レブチン分泌量（ngZml)

デヒドロアビエチン酸デヒドロアビエチン酸ベザフイブレ一ドコントロール群

0. 25%投与群 0. 5%投与群投与群

1 8. 1フ ±0. 28 1 6. 31 ±0. 81 1 4. 31 ± 1 . 1 5* 1 4. 28 ± 1 . 60*

[0035] [表 5]

上記表から、デヒドロアビエチン酸投与群は、コントロール群に比べ有意に血糖値上昇を抑制すると共に、レブチン、インスリン、 MCP— 1の濃度および腹腔内脂肪量 Z体重が有意に低下したことがわかる。この結果より、デヒドロアビエチン酸は、糖'脂質の代謝改善作用、内臓脂肪蓄積抑制作用、高インスリン血症の改善作用を有することが明らかである。

[0038] [実施例 3]

(in vitroにおける PPAR a活性を有する組成物の抗炎症活性の測定）

RAW264. 7細胞 (マウス由来マクロファージ様細胞株)カゝら分泌される炎症性サイトカイン MCP— 1の抑制を評価した。すなわち、実施例 1記載の DMEM培地中に RAW264. 7細胞を懸濁し、該懸濁液（l X 10⁶cellsZml)を 12穴培養プレートに 1穴あたり 2000 /z l分注し、 37°C CO インキュベーターで 2時間培養後、リポポリサッカリド (LPS、 lOOng/mUシグマ社

2

製）を 1穴あたり 2 1および所定量のデヒドロアビエチン酸を添カ卩し、 37°C COイン

2 キュベータ一で 16時間刺激した。次いで、培養上清を回収し、上清中における MCP 1の産生量を常法により ELISA法で、 mRNA発現量を常法によりリアルタイム PC Rにて定量した。 MCP—1分泌量および MCP—1の mRNA発現量を、コントロール 100%とした場合の相対値で表した。その結果は、表 8および 9の通りである。なお、統計解析は対応のある t検定で行い、表中の *印はコントロールに比べ危険率 5%未満、 * *印はコントロールに比べ危険率 1%未満で有意差があることを示す。

[0039] [表 8]

[0040] [表 9]

[0041] 上記表から、 LPS刺激後、デヒドロアビエチン酸を添カ卩した各 RAW264. 7細胞では、コントロールに比べて、タンパク質レベルでの MCP—1の分泌が有意に抑制され、 mRNAレベルにおいても発現が有意に抑制されたことがわかる。この結果より、デヒドロアビエチン酸は、抗炎症活性、すなわち炎症性因子である MCP— 1の減少により、肥満に関連する炎症抑制作用を有することが明らかである。

[0042] [製剤例 1] (錠剤）

デヒドロアビエチン酸 5. Og

トウモロコシデンプン 12. Og

乳糖 22. 6g

ステアリン酸マグネシウム 0. 4g

上記各成分を加えてよく混和し、湿性錠剤調製法に準じて打錠用顆粒とする。ステアリン酸マグネシウムを加えて打錠し、錠剤 400錠とする。錠剤は、必要に応じて糖衣を施してもよい。

[0043] [製剤例 2]

(^¾. p)

砂糖 650gに水飴 300gを 150°Cで加熱融解し、 120°Cに冷却後、クェン酸 10gをカロえた後に、 13 |8— Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸を 3g、香料 10gを添加後、撹拌し、均一化した後に、成形し、冷却してキャンディーを得る。

産業上の利用可能性

[0044] 本発明によるペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 a活性化剤はインスリン抵抗性、 2型糖尿病、内臓脂肪型肥満、脂肪肝等、高脂血、高血圧などを抑制 '防止する医薬または食品等に利用することができる。

Claims

請求の範囲

[1] デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 j8— Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12— スルホデヒドロアビエチン酸力もなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩を有効成分として含有することを特徴とするペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 O活性化剤。

[2] ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 ocが介在する疾患または症状を予防または改善するための請求の範囲第 1項記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体ひ活性化剤 o

[3] ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 ocが介在する疾患または症状が、インスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満または脂肪肝である請求の範囲第 2項記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤。

[4] インスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満もしくは脂肪肝の予防または改善用組成物である請求の範囲第 1項記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 O活性化剤。

[5] 請求の範囲第 1項記載のペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 α活性化剤を含有することを特徴とするインスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満もしくは脂肪肝の予防または改善用組成物。

[6] 医薬組成物である請求の範囲第 5項記載の予防または改善用組成物。

[7] 食品である請求の範囲第 5項記載の予防または改善用組成物。

[8] デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 j8— Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12— スルホデヒドロアビエチン酸力もなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩を含有し、かつペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 aが介在する疾患または症状が予防または改善される旨を表示したことを特徴とする食

P

PPo

[9] ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 ocが介在する疾患または症状が、インスリン抵抗性、 2型糖尿病、高脂血、高血圧、内臓脂肪型肥満または脂肪肝である請求の範囲第 8項記載の食品。

[10] ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 aが介在する疾患または症状を有する患者に、デヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 13 β Δ ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 1 2—スルホデヒドロアビエチン酸力なる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩を投与することを特徴とするペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 OCが介在する疾患または症状の予防または改善方法。

ペルォキシソーム増殖剤応答性受容体 ocが介在する疾患または症状を予防または改善する薬剤の製造のためのデヒドロアビエチン酸、メルクシ酸、 1318— Δ⁸—ジヒドロアビエチン酸および 12—スルホデヒドロアビエチン酸からなる群より選ばれる少なくとも一種の化合物またはその薬学的に許容される塩の使用。