WO2007010723A1

WO2007010723A1 - トリプトファン誘導体及びその用途

Info

Publication number: WO2007010723A1
Application number: PCT/JP2006/312978
Authority: WO
Inventors: Masanori Somei; Atsuhiko Hattori; Nobuo Suzuki
Original assignee: National University Corporation Kanazawa University; National University Corporation Tokyo Medical And Dental University
Priority date: 2005-07-20
Filing date: 2006-06-29
Publication date: 2007-01-25
Also published as: US20090054511A1; EP1911744A4; JP5070050B2; CN101233105A; CN101233105B; JPWO2007010723A1; EP1911744B1; US7659304B2; EP1911744A1

Description

明細書

トリブトファン誘導体及びその用途

技術分野

[0001] 本発明は、トリブトファン誘導体及びその用途、特に骨粗鬆症治療薬、骨芽細胞活性化剤に関する。

背景技術

[0002] 骨粗鬆症は骨の形成を担う骨芽細胞と骨の吸収を司る破骨細胞の働きのバランスが崩れて発症する。骨芽細胞を活性化させる化合物及び破骨細胞を抑制する化合物は骨組鬆症の治療に有効であると考えられる。エストロゲンは、骨芽細胞を活性化させ、破骨細胞を抑制すると考えられ骨組鬆症の治療に用いられているが、骨以外の細胞、特に生殖器官に対する作用を併せもっため、子宮癌、乳癌の危険性が増加する等の副作用が懸念されており、また、厚生労働省は、 2004年 1月 29日付で、エストロゲンを長期間服用すると、乳癌や痴呆症の発症を高める可能性があるとして

、注意を呼びかける安全性情報を発している。更に、エストロゲンは、分子構造が複雑であるため、合成は煩雑かつ困難である。

[0003] インドール骨格を有するメラトニン (N—ァセチル— 5—メトキシトリプタミン）は骨芽細胞及び破骨細胞の両者に対して抑制的に作用することが報告されて、る（非特許文献 1)力トリブトファン誘導体と骨芽細胞及び破骨細胞に対する作用との関係につ!ヽては何ら報告されて、な、。

非特許文献 1 : N. Suzuki, and A. Hattori, J. Pineal Res., 33, 253-258 (2002) 発明の開示

発明が解決しょうとする課題

[0004] 本発明は、医薬として有用なトリブトファン誘導体、特に骨芽細胞を活性化させるトリブトフアン誘導体及びこれを用いた骨粗鬆症治療薬、骨芽細胞活性化剤を提供することを目的とする。

課題を解決するための手段

[0005] 本発明は、以下の発明を包含する。 [0006] (1)次式 (I) :

[化 1]

[0007] (式中、 Xはハロゲン原子を表し; R¹は水素原子、置換又は非置換の C アルキ

1-6 ル基、置換又は非置換の C アルケニル基、置換又は非置換の C アルキニ

2-6 2-6 ル基、置換又は非置換の芳香族基、置換又は非置換のァラルキル基、置換又は非置換のァシル基、置換又は非置換のァリールスルホニル基、置換又は非置換の C _ アルキルスルホ-ル基、置換又は非置換の C アルコキシカルボ-ル基、又

6 2-7

は水酸基を表し; R²は置換又は非置換の C —アルキル基を表し; R³、 R⁵及び R⁶

1-21

は、同一又は異なり、水素原子又はハロゲン原子を表し; R⁴は水素原子、又は置換又は非置換の C —アルキル基を表し; R⁷は水素原子、又は、置換又は非置換の C

1-6

炭化水素基を表す。 )

1 -21

で示される化合物又はその塩。

[0008] (2)前記（1)に記載の式 (I)において、 Xが臭素原子、 R¹が水素原子、置換又は非置換の C アルキル基、置換又は非置換の C アルケニル基、置換又は非置

1-6 2-6

換の C アルキニル基、置換又は非置換の芳香族基、置換又は非置換のァラル

2-6

キル基、置換又は非置換のァシル基、置換又は非置換のァリールスルホニル基、置換又は非置換の C アルキルスルホニル基、又は置換又は非置換の C アル

1-6 2-7 コキシカルボ-ル基、 R²カチル基、 R³、 R⁵及び R⁶力同一又は異なり、水素原子又は臭素原子、 R⁴力 Sメチル基、 R⁷が C —アルキル基である化合物又はその塩。

1-6

[0009] (3)前記（1)又は（2)に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。

[0010] (4)前記（1)又は（2)に記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する骨粗鬆症治療薬。 [0011] (5)前記（1)又は（2)に記載の化合物又はその塩を含有する骨芽細胞活性化剤。発明の効果

[0012] 本発明によれば、骨芽細胞を活性化させるトリブトファン誘導体及びこれを用いた骨粗鬆症治療薬、骨芽細胞活性化剤を提供することができる。また、本発明のトリプトフアン誘導体は、エストロゲンよりも容易に合成でき、大量生産が可能である。発明を実施するための最良の形態

[0013] 以下、本発明を詳細に説明する。

[0014] 本発明において、 C アルキル基、及び各置換基中の「C アルキル基」とし

1-6 1-6

ては、例えばメチル基、ェチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル基、イソブチル基、 sec ブチル基、 tert ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、へキシル基、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロへキシル基が挙げられる。

[0015] C アルキル基としては、例えばメチル基、ェチル基、プロピル基、イソプロピル

1- 21

基、ブチル基、イソブチル基、 sec ブチル基、 tert ブチル基、ペンチル基、イソべンチル基、へキシル基、ヘプチル基、ォクチル基、ノニル基、デシル基、ゥンデシル基、ドデシル基、トリデシル基、テトラデシル基、ペンタデシル基、へキサデシル基、ヘプタデシル基、ォクタデシル基、ノナデシル基、ィコシル基、ヘンィコシル基、シク口プロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロへキシル基が挙げられる。

[0016] 前記式 (I)において R²で表される C アルキル基としては、 C アルキル基

1-21 1-6

が好ましぐメチル基が更に好ましい。

[0017] C アルケニル基としては、例えばビニル基、 1 プロぺニル基、ァリル基、 1

2- 6

ブテニル基、 2—ブテュル基、ペンテ-ル基、へキセニル基が挙げられる。

[0018] C アルキ-ル基としては、例えばェチュル基、 1 プロピ-ル基、 2 プロピ-

2-6

ル（プロパルギル）基、 3—プチ-ル基、ペンチ-ル基、へキシュル基が挙げられる。

[0019] 芳香族基としては、例えばフニル基、トリル基、ナフチル基等の芳香族炭化水素基;フリル基、チェニル基、ピロリル基、ォキサゾリル基、イソォキサゾリル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、イミダゾリル基、ピラゾリル基、ピリジル基、ピリミジニル基、ピリダジニル基、ビラジニル基、キノリル基、イソキノリル基等の芳香族複素環基が挙げられる。

[0020] ァラルキル基としては、例えばべンジル基、フエネチル基が挙げられる。

[0021] C 炭化水素基としては、例えば、メチル基、ェチル基、プロピル基、イソプロピ

1-21

ル基、ブチル基、イソブチル基、 sec ブチル基、 tert ブチル基、ペンチル基、イソペンチル基、へキシル基、ヘプチル基、ォクチル基、ノニル基、デシル基、ゥンデシル基、ドデシル基、トリデシル基、テトラデシル基、ペンタデシル基、へキサデシル基、ヘプタデシル基、ォクタデシル基、ノナデシル基、ィコシル基、ヘンィコシル基等の直鎖状又は分岐状の C アルキル基;シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロ

1-21

ペンチル基、シクロへキシル基、シクロへプチル基等の C シクロアルキル基；ビ

3-21

ニル基、 1—プロべ-ル基、ァリル基、 1ーブテュル基、 2—ブテュル基、ペンテ-ル基、へキセ-ル基、ォレイル基等の C ァルケ-ル基；ェチュル基、 1 プロピ-

2-21

ル基、 2 プロピ-ル（プロパルギル）基、 3 プチ-ル基、ペンチ-ル基、へキシュル基等の C アルキ-ル基；フ -ル基、トリル基、ナフチル基等の芳香族炭化

2-21

水素基；ベンジル基、フエネチル基等のァラルキル基；ァダマンチル基等の橋かけ環炭化水素基;スピロ環炭化水素基;縮合環炭化水素基が挙げられる。

[0022] ァシル基としては、例えばホルミル基、ァセチル基、プロピオ-ル基 (プロパノィル基 )、プチリル基 (ブタノィル基）、バレリル基 (ペンタノィル基）、へキサノィル基等の C 脂肪族ァシル基；ベンゾィル基、トルオイル基等の芳香族ァシル基 (ァロイル基）

6

が挙げられる。

[0023] ァリールスルホ-ル基としては、例えばフエ-ルスルホ -ル基（ベンゼンスルホ-ル基）、 P トルエンスルホニル（トシル）基、ナフタレンスルホニル基等の芳香族炭化水素一スルホ-ル基；フランスルホ-ル基、チオフェンスルホ-ル基、ピロ一ルスルホ- ル基、ォキサゾールスルホ -ル基、イソォキサゾールスルホ -ル基、チアゾールスルホ-ル基、イソチアゾールスルホ -ル基、イミダゾールスルホ -ル基、ピラゾールスルホ-ル基、ピリジンスルホ-ル基、ピリミジンスルホ-ル基、ピリダジンスルホ-ル基、ピラジンスルホ-ル基、キノリンスルホ-ル基、イソキノリンスルホ -ル基等の芳香族複素環ースルホニル基が挙げられる。

[0024] C アルキルスルホ-ル基としては、例えばメタンスルホ-ル（メシル）基、ェタンスルホ-ル基が挙げられる。

[0025] C アルコキシカルボ-ル基とは、 C アルコキシ基で置換されたカルボ-ル

2-7 1-6

基をいい、例えばメトキシカルボ-ル基、エトキシカルボ-ル基、プロポキシカルボ- ル基、 tert ブトキシカルボ-ル基が挙げられる。

[0026] ハロゲン原子としては、例えばフッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子が挙げられる。

[0027] 前記式 (I)にお —アル

キル基、 R¹で表される C —ァルケ-ル基、 C —アルキ-ル基、 C —アルキル

2-6 2-6 1-6 スルホニル基及び C アルコキシカルボ-ル基並びに R⁷で表される C 炭化

2-7 1-21 水素基は、芳香族基、ァシル基、水酸基、カルボキシ基、ハロゲン原子、 C アル

1-6 コキシ基 (例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基)等力も選ばれる 1以上の置換基で置換されていてもよい。

[0028] 前記式 (I)にお、て R¹で表される芳香族基、ァラルキル基、ァシル基及びァリールスルホ -ル基は、 c —アルキル基、 C —ァルケ-ル基、 C —アルキ-ル基、

1-6 2-6 2-6

芳香族基、ァシル基、水酸基、カルボキシ基、ハロゲン原子、 C アルコキシ基（

1-6

例えばメトキシ基、エトキシ基、プロポキシ基)等力も選ばれる 1以上の置換基で置換されていてもよい。

[0029] 前記式 (I)で示される化合物の塩としては、薬学的に許容される塩が好ましぐ例えば、塩酸、硫酸、リン酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、ピロ硫酸、メタリン酸等の無機酸、又はクェン酸、安息香酸、酢酸、プロピオン酸、フマル酸、マレイン酸、スルホン酸（例えば、メタンスルホン酸、 p トルエンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸）等の有機酸との塩が挙げられる。また、フエノール性水酸基又はカルボキシル基を有する場合には、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩として用いることもできる。

[0030] 前記式 (I)で示される化合物のうち、 R¹が水素原子である化合物は、例えば、前記式 (I)において Xが水素原子である化合物（例えば、 N—ァセチルー 5—メトキシトリブトフアンメチルエステル)をハロゲンィ匕することにより製造することができる。また、前記式 (I)において R¹が水酸基、 Xが水素原子である化合物（例えば、 N ァセチルー 1 —ヒドロキシ一 5—メトキシトリブトファンメチルエステル）をハロゲン化することによっても、前記式 (I)において R¹が水酸基、 Xがハロゲン原子である化合物を製造することができる。

[0031] 前記式 (I)で示される化合物のうち、 R¹が置換又は非置換の C アルキル基、

1 - 6

置換又は非置換の c アルケニル基、置換又は非置換の c アルキニル基、

2-6 2-6

置換又は非置換の芳香族基、置換又は非置換のァラルキル基、置換又は非置換のァシル基、置換又は非置換のァリールスルホニル基、又は置換又は非置換の C

1-6 アルキルスルホニル基である化合物は、例えば、前記のようにして得られた前記式

(I)において R¹が水素原子、 Xがハロゲン原子である化合物を、 N, N ジメチルホルムアミド等の有機溶媒中、塩基触媒の存在下、式: RLX(式中、 R¹は置換又は非置換の C アルキル基、置換又は非置換の C アルケニル基、置換又は非置換

1-6 2-6

のアルキ-ル基、置換又は非置換の芳香族基、置換又は非置換のァラルキ

2-6

ル基、置換又は非置換のァシル基、置換又は非置換のァリールスルホニル基、又は置換又は非置換の c アルキルスルホ二ル基を表し、 Xはハロゲン原子を表す。 )

1-6

で示される化合物と反応させることにより製造することができる。

[0032] 前記式 (I)で示される化合物のうち、 R¹が置換又は非置換の C アルコキシカル

2- 7

ボニル基である化合物は、例えば、前記式 (I)において R¹が水素原子、 Xがハロゲン原子である化合物を、クロ口ホルム等の有機溶媒中、塩基触媒の存在下、式： (R¹)

2

0 (式中、 R¹は置換又は非置換の C アルコキシカルボ二ル基を表す。）で示され

2-7

る化合物と反応させることにより製造することができる。

[0033] 前記式 (I)で示される化合物のうち、 R¹が水酸基である化合物は、例えば、前記式

(I)において R¹及び Xが水素原子である化合物を、過酸ィ匕水素及びタングステン酸ナトリウムで処理した後、ハロゲン化することにより製造することができる。

[0034] 前記式 (I)で示される化合物のうち、 R⁴が水素原子である化合物は、例えば、前記式 (I)において X及び R⁴が水素原子である化合物（例えば、 R R³、 R⁵、 R⁶が水素原子である化合物）をハロゲン化 (例えば、酢酸、クロ口ホルム等を溶媒として、臭素又は N プロモコハク酸イミド等の臭素ィ匕剤で処理)することにより製造することができる

[0035] 前記式 (I)で示される化合物は、塩基触媒の存在下、加水分解して、ァシル基（一 CO— R²)を脱離させた後、酸無水物 (R CO-0-COR² )等で処理し、別のァシル基を導入することにより、ァシル基を変換することができる。この際、中間体である脱ァシル化体は、一般に空気中で酸化されやすいため、精製することなぐ次のァシルイ匕工程に用いることが好まし、。

[0036] 前記式 (I)で示される化合物のうち、 R⁷が水素原子である化合物は、例えば、がメチル基である化合物を、水酸化ナトリウム水溶液と加熱して加水分解することにより製造することができる。

[0037] 前記のようにして得られる生成物を精製するには、通常用いられる手法、例えばシリカゲル等を担体として用いたカラムクロマトグラフィーやメタノール、エタノール、クロ口ホルム、ジメチルスルホキシド、水等を用いた再結晶法によればよい。カラムクロマトグラフィ一の溶出溶媒としては、メタノール、エタノール、クロ口ホルム、アセトン、へキサン、ジクロロメタン、酢酸ェチル、及びこれらの混合溶媒等が挙げられる。

[0038] 前記式 (I)で示される化合物及びその塩 (以下「トリブトファン誘導体 (I)」と!、う。）は、骨芽細胞を活性化させる作用を有し、骨に関する種々の疾患、例えば骨粗鬆症の予防又は治療のための医薬組成物として、また、骨芽細胞活性化剤として、各種分野、例えば再生医療、歯科分野、魚類の生育、家畜の健康な生育による食肉生産、卵生産に有用である。また、ラジカルスキヤベンジャー作用を有し、不眠症、生活習慣病の予防又は治療のための医薬組成物としても有用である。更に、本発明のトリプトフアン誘導体は、前記以外の医薬として、例えば、血管拡張剤、降圧剤、アミノ酸補給剤、抗がん剤、血小板凝集抑制剤などとしての可能性も期待できる。

[0039] 本発明のトリブトファン誘導体を有効成分とする骨粗鬆症治療薬は、他の骨粗鬆症治療薬、例えばカルシウム製剤、ビタミン D系製剤、ホルモン系製剤、カルシトニン系製剤、ビスフォスホネート製剤、イブリフラボン製剤などと併用することができる。この場合には、必要に応じて、後述の投与量を適宜増減することができる。

[0040] 以下、トリブトファン誘導体 (I)の投与量及び製剤化について説明する。

[0041] トリブトファン誘導体 (I)はそのまま、あるいは慣用の製剤担体と共に動物及びヒトに投与することができる。投与形態としては、特に限定がなぐ必要に応じ適宜選択して使用され、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、徐放性製剤、懸濁液、ェマルジョン剤、シロップ剤、エリキシル剤等の経口剤、注射剤、坐剤、塗布剤、貼付剤等の非経口剤が挙げられる。

[0042] 経口剤は、例えばデンプン、乳糖、白糖、マンニット、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類等を用いて常法に従って製造される。

[0043] この種の製剤には、適宜前記賦形剤の他に、結合剤、崩壊剤、界面活性剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤、着色剤、香料等を使用することができる。

[0044] 結合剤としては、例えばデンプン、デキストリン、アラビアゴム末、ゼラチン、ヒドロキシプロピノレスターチ、メチノレセノレロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ヒドロキシプロピノレセルロース、結晶セルロース、ェチノレセルロース、ポリビュルピロリドン、マクロゴールが挙げられる。

[0045] 崩壊剤としては、例えばデンプン、ヒドロキシプロピルスターチ、カルボキシメチルセルロースナトリウム、カルボキシメチルセルロースカルシウム、カルボキシメチルセル口ース、低置換ヒドロキシプロピルセルロースが挙げられる。

[0046] 界面活性剤としては、例えばラウリル硫酸ナトリウム、大豆レシチン、ショ糖脂肪酸ェステル、ポリソルベート 80が挙げられる。

[0047] 滑沢剤としては、例えばタルク、ロウ類、水素添加植物油、ショ糖脂肪酸エステル、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸アルミニウム、ポリエチレングリコールが挙げられる。

[0048] 流動性促進剤としては、例えば軽質無水ケィ酸、乾燥水酸ィ匕アルミニウムゲル、合成ケィ酸アルミニウム、ケィ酸マグネシウムが挙げられる。

[0049] 注射剤は常法に従って製造され、希釈剤として一般に注射用蒸留水、生理食塩水、ブドウ糖水溶液、ォリーブ油、ゴマ油、ラッカセィ油、ダイズ油、トウモロコシ油、プロピレンダリコール、ポリエチレングリコール等を用いることができる。更に必要に応じて、殺菌剤、防腐剤、安定剤を加えてもよい。また、注射剤は安定性の点から、バイァル等に充填後冷凍し、通常の凍結乾燥技術により水分を除去し、使用直前に凍結乾燥物から液剤を再調製することもできる。更に、必要に応じて適宜、等張化剤、安定剤、防腐剤、無痛化剤等を加えてもよい。

[0050] その他の非経口剤としては、外用液剤、軟膏等の塗布剤、貼付剤、直腸内投与のための坐剤等が挙げられ、常法に従って製造される。

[0051] 本発明の製剤は、剤形、投与経路等により異なるが、 1日 1〜数回から 1〜数回 Z 週〜月の投与が可能である。

[0052] 経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なるが、通常成人でトリブトファン誘導体 (I)の重量として l〜200mgを、 1日数回に分けての服用が適当である。

[0053] 非経口剤として所期の効果を発揮するためには、患者の年令、体重、疾患の程度により異なる力通常成人でトリブトファン誘導体 (I)の重量として 1日 l〜50mgの静注、点滴静注、皮下注射、筋肉注射が適当である。

[0054] 本明細書は、本願の優先権の基礎である特願 2005— 209753の明細書に記載された内容を包含する。

実施例

[0055] 以下、実施例をあげて本発明を更に具体的に説明する力本発明の範囲はこれらに限定されるものではない。

[0056] [実施例 1]

(S) - ( + )—N—ァセチル— 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（1)から（S) - ( + )—N—ァセチルー 2, 6—ジブ口モー 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（2) , (S)— ( + )— N—ァセチル— 2, 4, 7—トリブロモ—5—メトキシトリブトファンメチルエステル（3) , (S)— ( + )— N—ァセチル— 2, 4, 6—トリブロモ—5—メトキシトリブトファンメチルエステル（4)の合成

[化 2]

56. 6mg (0. 20mmol)の（S)— ( + )— N—ァセチル— 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（1) (M. Somei and Y. Fukui, Heterocycles, 36, 1859 (1993)に記載の方法に従い合成した。高価ではあるが、市販品もある。 )を 4. 5mLの酢酸に溶解した溶液に、別途に 458. Omgの臭素及び 41. 8mgの酢酸ナトリウムを 5. OmLの酢酸に溶解して調製した臭素溶液を 1. OmL (0. 59mmol)加え、室温下 30分間撹拌した。反応液に 1. OmLの 10%ハイポ水溶液をカ卩えて、クロ口ホルムメタノール（95 : 5, v/v)混合溶媒を加えた後、 40%水酸ィ匕ナトリウム水溶液を加えて全体をアルカリ性にした。次いで、クロ口ホルム一メタノール（95 : 5, vZv)混合溶媒で抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去して黄色固形物を得た。シリカゲルを担体とし、クロ口ホルムメタノール（99. 5 : 0. 5, v/v) 混合溶媒を溶出溶媒とするカラムクロマトグラフィーを行い、溶出順に 28. 4mgの分離困難な（S) - ( + )—N ァセチル— 2, 6 ジブロモ— 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（2)及び（S)—（ + )—N ァセチルー 2, 4, 7 トリブ口モー 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（3)の混合物、次いで 53. 7mg (52%)の（S)—（ + ) —N ァセチル— 2, 4, 6 トリブロモ—5—メトキシトリブトファンメチルエステル（4) を得た。

[化合物 (4) ]

mp 198-199 °C (無色粒状晶、酢酸ェチルエステル力再結晶).

IR (KBr): 3307, 1730, 1647, 1556, 1300, 1232, 1028 cm"¹.

'H-NMR (CDCl ) δ： 1.88 (3Η, s), 3.29 (1H, dd, J=9.8, 14.6 Hz), 3.58 (1H, dd, J=5

3

.2, 14.6 Hz), 3.77 (3H, s), 3.88 (3H, s), 5.01 (1H, ddd, J=5.2, 8.6, 9.8 Hz, D O添カロ

2 により dd, J=5.2, 9.8 Hzに変ィ匕)， 6.17 (1H, br d, J=8.6 Hz, D O添カロにより消失)， 7.3

2

7 (1H, s), 8.70 (1H, br s, D O添カロにより消失).

2

質量分析 m/z: 530 (M+), 528 (M"), 526 (M⁺), 524 (M⁺).

Anal. Calcd for: C H Br N O : C, 34.19; H, 2.87; N, 5.32. Found: C, 34.24; H, 2.

15 15 3 2 4

89; N, 5.18.

旋光度 [ a ] ²⁶ +14.8° (DMSO, c=0.200). [ a ] ²⁷ +1.47。 (MeOH, c=0.204).

D D

[ a ] ²⁸ +4.4。 (CHC1 , c=0.203).

D 3

[実施例 2] 9- rd lfi4-9 ^l — / fUl— τ— ^^ — N— ( + )— (S) WO) エ

^ べ厶 (H ^^ — S— ¾cl :fH— 9 ' 'Ζ- /^^-Κ- ( + ) - (S)

•(oos'o=。 ' IDHD) 。ε·ε+ _κ [ " ]狐

•ε Ή ·8Γ8ε 'D： P画 d 'N -OZT Ή -0S"8S 'つ： O N H D： p つ -puy

•(₊ ) fZ9 ₊n) 9Z9 XVi) 829 0S9： ^ζ/ω措晷葛

绺〇 'ΖΗ S"8=f 'Ρ 'Ηΐ) fV9 '(^^コ Γ^ΖΗ ΓΟΐ 'Ζ' =ί 'PPdT^Hfi¾¾〇 α '^Η ΐ· οτ 's'8 'ζ' =ί 'ΡΡΡ 'ΗΪ) zo's '(s Ήε) 06·ε '(s Ήε) s x '(ΖΗ ζ~ 's"e=f 'ρρ 'ΗΪ) e

9·ε '(^ΖΗ ε· ΐ 'Γ0ΐ=Γ 'ΡΡ 'Ηΐ) 8ε·ε '(^s Ήε) 68·ΐ '(^s Ή6) 69·ΐ： 9 (OQD) Η Ν-Η_Τ

ιικΠΐΐ '63Π ' LZI '96SI 'ΐ39ΐ 'ZZLI '63Ζΐ ' Ζ HI • (f - ^Λ^ ^ ^^W^ )つ。 82Ϊ-92Ϊ dm [0900]

(9)呦 W目、 ¾TO) (%86) §rag - 9^¾ -if ^-^

^^ム ΰ マ瀚缀 ffi缀瀚缀習 Λ/Λ 'ΐ :66) 一, ^—マ / crn^

、つ辛爵^止 s教继

〇£止¾累ェ" ¥Hf 继缀っ缀^マ

( ）エ ^ べ厶 (Η 、^

— g— ar lfH— 9 ' 'Ζ- /^^-Κ- ( + ) - (S)0> (louiui60 O)^S^S ·6 [6S00]

剛

-^Ο) (9) エ ^ べ 4 lfH 、^ Η ー S— -^

^: ：— ar lfH— 9 '

■^Λ^ ^ ( ^ -^-^ ( -9 ' 'Ζ- /^^-Κ- (+) - (s)

8L6Zl£/900Zdr/13d εζ.οιο/.οοζ OA - g— ar ifH— 9 ^l 'Ζ-Λ^^-Κ- (+) - (s)

[ 薦第]

•(SOS'0=。 ' DHD) 。8·εΐ+ [ " ]狐

•98·， 'N： ε

i Ζ ΐ 61 81

•ε Ή · 6" ε Ό： ρ画 d w 'Ν :8ε·ε Ή -zvsz 'つ： ο Ν Η つ：ュ P^PD "P

•(₊ ) 9S η) 993 893 ' (₊Vi) OZS： z/m措晷葛

•(s 'Ηΐ) ΐ ·Ζ '(¥¾6)T D¥ 绺〇 α 'ΖΗ Ζ·8=ί" 'Ρ 'Ηΐ) ZV9 '(^ΖΗ ΓΖΐ 'ε'Οΐ '8· =ί" 'ΡΡ 'Ηΐ) 98'S '(ΖΗ S T=f ' Ρ 'Ηΐ) 6Γ3 ^ΖΗ 8·6 '¥ =ί 'PPCiT 绺。 '^Η 8·6 'Γ8 '¥ =ί 'ΡΡΡ 'Ηΐ) we '(ΖΗ ΓΖΪ=Γ 'ρ 'ΗΪ) ε8· '(ω Ήζ) L'f '(^s Ήε) 68·ε '(^s Ήε) ∑τ '(^ΖΗ m

e=f 'ρρ 'ΗΪ) Ζ9τ '(^ΖΗ ·^ΐ '8·6=ί" 'ΡΡ 'ΗΪ) ητ '(^s Ήε) 98·ΐ： 9 (\DQD) Η Ν-Η_Τ

UI。 9ΐ0ΐ '^ZZl 'Lf l ' f9l 'ZZLl 'SOSS HI • (眢 ¾S ：エ ^エ邈 ^W^ ) Οο 26Ϊ-Ϊ6Ϊ dm [2900]

(9)呦 W目 ¾TO) (%

66)3ra 一 ^ Mム! ^マ 2 «；？瀚缀 ffi缀マ ^ mc^、つ

■2 Μ^。： ·Π# ½ θε止 ¾累 " ^Wt^A^ ^C O) (IOUIUIXQ ·χ '86S ·χ

缀コマ ^ — Ν 'NOnrag -z^ { ) Λ^ .-^Λ(^ ^^Λ ( ^Λ

ー g— ar ifH— 9 ' 'Ζ- /^^-Κ- (+) -(s) > d^OUIUI80 )^§^8 ·6ε [ΐ900]

剛

8L6Zl£/900Zdr/13d ZY εζ.οιο/.οοζ OAV ステル（4)から（S) ( + )— N—ァセチル— 2, 4, 6 トリブロモ—5—メトキシ— 1— プロパルギルトリプトファンメチルエステル (7)の合成

[化 5]

[0063] 23. 6mg (0. 04mmol)の（S)— ( + )— N—ァセチルー 2, 4, 6 トリブロモ 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（4)を 2. OmLの N, N ジメチルホルムアミドに溶解した溶液に、 21. 6mg (0. 16mmol)の炭酸カリウムを加え、次いで 0. 08mL (d= 1. 335, 0. 9mmol)のプロパルギルブ口ミドを加えて、室温下 30分間撹拌した。反応液に水をカ卩えて、酢酸ェチルエステル抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去してピンク色油状物を得た。シリカゲルを担体とし、クロ口ホルムを溶出溶媒とするカラムクロマトグラフィーで精製すると 23 . 9mg (94%)の収率で目的物（7)が得られた。

[0064] mp 284-285 °C (分解点、封管測定、無色針状晶、クロ口ホルムメタノール力再結晶).

IR (KBr): 3284, 3224, 2114, 1724, 1647, 1552, 1230, 1016 cm"¹.

'H-NMR (DMSO-d ) δ： 1.82 (3Η, s), 3.28 (IH, dd, J=7.1, 14.9 Hz), 3.33 (IH, dd,

6

J=8.7, 14.9 Hz), 3.33 (IH, t, J=2.4 Hz), 3.48 (3H, s), 3.80 (3H, s), 4.47 (IH, ddd, J =7.1, 7.1, 8.7 Hz, D O添加により dd, J=7.1, 8.7 Hzに変化)， 5.13 (2H, dt, J=2.4, 4.2

2

Hz), 8.02 (IH, s), 8.44 (IH, br d, J=7.1 Hz, D O添カロにより消失).

2

質量分析 m/z: 568 (M+), 566 (M^, 564 (M⁺), 562 (M⁺).

Anal. Calcd for: C H Br N O : C, 38.26; H, 3.03; N, 4.96. Found: C, 38.11; H, 3.

18 17 3 2 4

12; N, 4.83.

旋光度 [ a ] ²⁴ +7.7° (DMSO, c=0.202).

D

[実施例 5] (S)— ( + )— N ァセチル— 2, 4, 6 トリブロモ—5—メトキシトリブトファンメチルェステル（4)から（S)— ( + )— N—ァセチル— 1—ベンジル— 2, 4, 6 トリブロモ—5

[化 6]

[0065] 19. 6mg (0. 04mmol)の（S)— ( + )— N ァセチルー 2, 4, 6 トリブロモ—5— メトキシトリブトファンメチルエステル（4)を 1. 5mLの N, N ジメチルホルムアミドに溶解した溶液に、 18. Omg (0. 13mmol)の炭酸カリウムを加え、次いで 0. 09mL (d = 1. 44, 0. 7mmol)のベンジルブロミドをカ卩えて、室温下 30分間撹拌した。反応液に水を加えて、酢酸ェチルエステルメタノール（95 : 5, vZv)混合溶媒で抽出した。有機相を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去して黄色油状物を得た。シリカゲルを担体とし、クロ口ホルムメタノール（99 : 1, v/v) 混合溶媒を展開溶媒とする薄層クロマトグラフィーを行い、 Rf値 0. 18〜0. 29の帯をクロ口ホルム一メタノール（95 : 5, vZv)混合溶媒で抽出すると、 22. Omg (96%) の収率で目的物（8)が得られた。

[0066] mp 226-227 °C (無色針状晶、メタノールから再結晶).

IR (KBr): 3298, 1732, 1643, 1550, 1414, 1230, 1018 cm"¹.

'H-NMR (DMSO-d ) δ： 1.80 (3Η, s), 3.28 (1H, dd, J=7.1 , 14.4 Hz), 3.40 (1H, dd,

6

J=8.5, 14.7 Hz, D O添カ卩により現れた。 ), 3.47 (3H, s), 3.79 (3H, s), 4.55 (1H, ddd,

2

J=7.1 , 7.1 , 8.5 Hz, D O添加により dd, J=7.1 , 8.5 Hzに変化)， 5.53 (2H, s), 6.96 (2H,

2

d, J=7.1 Hz), 7.25 (1H, t, J=7.1 Hz), 7.31 (2H, t, J=7.1 Hz), 7.90 (1H, s) 8.45 (1H, d, J=7.1 Hz, D O添加により消失).

2

質量分析 m/z: 620 (M⁺), 618 (M⁺), 616 (M⁺), 614 (M⁺).

Anal. Calcd for: C H Br N O : C, 42.82; H, 3.43; N, 4.54. Found: C, 42.69; H, 3. 47; N, 4.56.

旋光度 [ α ] ²⁴ +8.3° (CHC1 , c=0.204).

D 3

[実施例 6]

(S) - ( + )—N ァセチル— 2, 6 ジブロモ— 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（2) , (S)— ( + )— N ァセチル— 2, 4, 7 トリブロモ—5—メトキシトリブトファンメチルエステル（3)の混合物から（S) - ( + ) N ァセチルー 2, 6 ジブ口モー 1 t—ブトキシカルボ-ルー 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（9)の合成と化合物 (3)の分離

[化 7]

[0067] 93. 3mgの分離困難な化合物（2) , (3) (NMRから 1： 2の存在比）の混合物を 10.

OmLのクロ口ホルムに溶解した溶液に、 9. 6mg (0. 08mmol,混合物の全てがトリブロモ体と考えて 0. 5当量）のジメチルァミノピリジン及び 68. 9mg (0. 31mmol,混合物の全てがトリブロモ体と考えて 2. 0当量）のジ tーブチルジカルボナートを 1. Om Lのクロ口ホルムに溶かした溶液を加え、室温下 10時間攪拌した。反応液を減圧下に留去して黄色油状物を得た。シリカゲルを担体とし、クロ口ホルム一メタノール（99 : 1, vZv)混合溶媒を溶出溶媒とするシリカゲルカラムクロマトグラフィーを行い、溶出順に 39. Omgの化合物（9)及び 62. Omgの化合物（3)を得た。

[0068] [化合物 (3) ]

mp 218-220 °C (無色プリズム晶、クロ口ホルム一へキサンから再結晶).

IR (KBr): 3435, 3303, 1728, 1653, 1552 cm"¹. '81 [6900]

[ ] ^θ) (Ζ) エ ^ べ ifH 、^ Η — S— ¾ΰ

'Ζ-Λ ^ ,-Κ- ( + ) - (S) W(6) エ ^ べ厶 (Η ^Ε ^ - 9 - - ^4 ： - ΐ - 1 - ¾ - 9 'Ζ- /^^-Κ- ( + )— (S)

'DHD) ₀6'Zl+ _K [»]狐

·ε000·9½ 'S966"Z½ '2S66"6½： puno^ n00"9 f

•(^s 'Ηΐ) ZZ'S '(^s 'Ηΐ) LVL '( 绺 O α 'ΖΗ 9"Z=f 'Ρ 'Ηΐ) 3Γ9 Η 9"Z S=f 'PPCiT 绺 O a 'ZH 9" 'z"e=f '^ρ 'ΗΪ) 38"^ '(^s Ήε) 6"ε '(s Ήε) 69·ε '(^ΖΗ O'SI 'z"e=f 'ρρ 'HI)

Ζτ '(^ΖΗ 0"3ΐ '9"Ζ=Γ 'ΡΡ 'Ηΐ) ΙΖτ '(^s Ήε) 66·ΐ '(^s 'Η6) 0Ζ-ΐ： 9 (OQD) Η Ν-Η_Τ

1113 fqgi 'gg i 'ZfLl '1862 ： ( I

[ " ]狐

'N -16

•Z Ή :00· ε 'D： P画 d S'S 'N -LS'Z Ή ·6Γ^ε 'D： O N ¾ H D： p つ -puy

•(+ ) Z ) 9Z ) sz ) ose ^:z/^ra¾^¥

コ绺〇 ^{<s J}q 'ΗΪ) ιε·8 '(^S 'HI) eo"z

'(¥¾ コ绺〇 ^<ZH S'8=f 'P 'Ηΐ) 2Γ9 H Ο ΐ TS=f 'PPCiT

Sgo a 'ZH 0 ΐ 's'8 Te=f 'PPP 'HI) OO'S '(S Ήε) ΐ6·ε '(^s Ήε) e x '(ΖΗ 9· Ϊ 're

=f 'PP 'Ηΐ) 8ST '(ZH 9'fl '0 ΐ=Γ 'PP 'Ηΐ) TST '(s '_Ηε) 8"ΐ： 9 (OQD) H N-H_T

8.6ZTC/900Zdf/X3d 91· εζ.οιο/.οοζ OA トキシカルボ二ルー 5—メトキシトリブトファンメチルエステル（9)を 3. 2mLのクロロホルムに溶解した溶液に、 10%溶液になるように 0. 8mLのトリフルォロ酢酸を氷冷下で加えた。更に室温下 12時間攪拌した。反応液にクロ口ホルムを加え、有機相を飽和重曹水で洗浄した。更に飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧留去して無色油状物を得た。シリカゲルを担体とし、クロ口ホルム一メタノール（99 : 1 , vZv)混合溶媒を溶出溶媒とするカラムクロマトグラフィーを行い、 10. 3 mg (70%)の化合物（2)を得た。

[0070] mp 174-175 °C (無色プリズム晶、メタノール一水から再結晶).

IR (KBr): 3363, 1745, 1716, 1660, 1647 cm"¹. IR (CHC1 ): 1739, 1674 cm"¹.

3

'H-NMR (CDCl ) δ： 1.98 (3H, s), 3.21 (IH, dd, J=4.6, 14.0 Hz), 3.24 (IH, dd, J=4

3

.6, 14.0 Hz), 3.70 (3H, s), 3.93 (3H, s), 4.90 (IH, dt, J=7.6, 4.6 Hz, D O添加により

2

t, J=4.6 Hzに変化)， 6.05 (IH, br d, J=7.6 Hz, D O添カ卩により消失)， 7.07 (IH, s), 7.

2

48 (IH, s), 8.01 (IH, br, D O添カロにより消失).

2

質量分析 m/z: 450 (M+), 448 (M⁺), 446 (M⁺).

Anal. Calcd for: C H Br N O ： C, 40.20; H, 3.60; N, 6.25. Found: C, 40.27; H, 3.

15 16 2 2 4

71 ; N, 6.17.

旋光度 [ a ] ²⁷ +12.0° (MeOH, c=0.217).

D

[実施例 8]トリブトファン誘導体の骨細胞に対する影響試験

N. Suzuki, and A. Hattori, J. Pineal Res. , 33, 253-258 (2002)に記載の方法に従つて、トリブトファン誘導体の骨細胞に対する影響について試験した。

[0071] キンギヨのメス（体重 30g前後）を MS 222 (3 ァミノ安息香酸ェチルエステルメタンスルホン酸、ethyl 3-aminobenzoate, methane sulfonic acid salt) XAldrich)で脉酔し、ゥロコを所要枚数剥離した。そのゥロコを 1 %の抗生物質 (ペニシリンストレブトマイシン混合物）を含むイーグルスの最少培地 (大日本製薬)で 2度洗浄した。同様の培地を 24穴のプレートにそれぞれ lmlずつ入れ、前記ゥロコを複数枚ずつ（通常 8 枚)それぞれ入れるとともに、各穴に 10^_6Mのトリブトファン誘導体をそれぞれ添加した。次いで、これらを 25°Cで 6時間培養した。なお、トリブトファン誘導体無添加の群（コントロール)も作成し、骨細胞に対する作用を比較した。この時、破骨細胞用と骨芽細胞用の 2群を設けた。即ち、コントロール、 10^_bMのトリブトファン誘導体 (それぞれ 2穴）の合計 4穴作成した。したがって、 24穴のプレートでは 6種類のトリプトファン誘導体を調べることができる。

[0072] 培養後、培地を取り除き、 10%ホルマリンの入った 0. 05M力コジル酸緩衝液（pH 7. 4)を加え、固定した。このゥロコは、酵素活性の測定まで、 0. 05M力コジル酸緩衝液中に 4°Cで保管した。

[0073] (1)破骨細胞の受ける影響:酒石酸抵抗性酸ホスファターゼ (TRAP)の活性測定前記固定処理を施したゥロコを取り出し、ゥロコの重量を測定した。測定後、ゥロコを 96穴のマイクロプレートに入れ、それぞれの穴に 20mM酒石酸及び 10mMパラ-ト口フエノールリン酸（基質）の入った lOOmM酢酸緩衝液（pH5. 3)を 200 /z l加え、 2 5°Cで 20分間反応させ、次、で 3モル水酸ィ匕ナトリウム水溶液 (50 μ 1)を加えて反応を止めた。その後、反応終了液 100 1を別のマイクロプレートに移し、 TRAPにより生じたパラ-トロフエノール (P— NP)の量を分光光度計 (405nm)により測定した。破骨細胞の活性は、ゥロコ lg当り、 1分間にパラ-トロフエノールリン酸を分解し、 p— NPを産生させた量として表示した。

[0074] 結果を表 1に示す。

[表 1]

T R A P活性

p < 0 . 0 0 [0075] (2)骨芽細胞の受ける影響：アルカリホスファターゼ (ALP)活性測定前記固定処理を施したゥロコを取り出し、ゥロコの重量を測定した。測定後、ゥロコを 96穴のマイクロプレートに入れ、それぞれの穴に 10mMパラ-トロフエノールリン酸（基質）、 ImM塩化マグネシウム及び 0. ImM塩化亜鉛の入った lOOmMトリス一塩酸緩衝液 (PH9. 5)を 200 1カ卩えて 25°Cで 15分間反応させ、 3モル水酸化ナトリウム水溶液（50 1)をカ卩えて反応を止めた。その後、反応終了液 100 1を別のマイク口プレートに移し、 ALPにより生じた p— NPの量を分光光度計 (405nm)により測定し、活性を求めた。

[0076] 結果を表 2に示す。

[表 2]

A L P 活性

p < 0 ,

p < 0 .

[0077] 表 1及び表 2から、メラトニンが破骨細胞及び骨芽細胞の両者に対して抑制的に作用するのに対し、本発明のトリブトファン誘導体は骨芽細胞を活性化する作用を有することがわかる。この結果から、本発明のトリブトファン誘導体は優れた骨粗鬆症治療薬となりうることが示された。

[0078] 本明細書中で引用した全ての刊行物、特許及び特許出願をそのまま参考として本明細書中にとり入れるものとする。

産業上の利用可能性 [0079] 本発明は骨粗鬆症治療薬、骨芽細胞活性化剤等の医薬の分野で利用される。

Claims

請求の範囲 [1] 次式 (I)

[化 1] R²

(式中、 Xはハロゲン原子を表し; R¹は水素原子、置換又は非置換の C —アルキ

1-6 ル基、置換又は非置換の c アルケニル基、置換又は非置換のアルキニ

2-6 c 2-6 ル基、置換又は非置換の芳香族基、置換又は非置換のァラルキル基、置換又は非置換のァシル基、置換又は非置換のァリールスルホニル基、置換又は非置換の C _ アルキルスルホ-ル基、置換又は非置換の C アルコキシカルボ-ル基、又は水酸基を表し; R²は置換又は非置換の C アルキル基を表し; R³、 R⁵及び R

-21

は、同一又は異なり、水素原子又はハロゲン原子を表し; R⁴は水素原子、又は置換又は非置換の C アルキル基を表し; R⁷は水素原子、又は、置換又は非置換の C

1-6

炭化水素基を表す。 )

1 -21

で示される化合物又はその塩。

請求項 1記載の式 (I)において、 Xが臭素原子、 R¹が水素原子、置換又は非置換 ( C アルキル基、置換又は非置換の C ーァルケ-ル基、置換又は非置換の

1-6 2-6

c アルキニル基、置換又は非置換の芳香族基、置換又は非置換のァラルキル

2-6

基、置換又は非置換のァシル基、置換又は非置換のァリールスルホニル基、置換又は非置換の c アルキルスルホニル基、又は置換又は非置換のアルコキ

1-6 C 2-7 シカルボ-ル基、 R²力メチル基、 R³、 R⁵及び R⁶が、同一又は異なり、水素原子又は臭素原子、 R⁴カチル基、 R⁷が C —アルキル基である化合物又はその塩。

1-6

請求項 1又は 2記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する医薬組成物。

請求項 1又は 2記載の化合物又はその薬学的に許容される塩を有効成分として含有する骨粗鬆症治療薬。

請求項 1又は 2記載の化合物又はその塩を含有する骨芽細胞活性化剤。