WO2006131586B1 - Péptidos bioactivos identificados en hidrolizados enzimáticos de caseínas lácteas y procedimiento de obtención - Google Patents

Péptidos bioactivos identificados en hidrolizados enzimáticos de caseínas lácteas y procedimiento de obtención

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Abstract

La invención consiste en la producción de productos bioactivos derivados de las proteínas lácteas para producción de lactoproductos bioactivos derivados de proteínas de lácteas, en especial, caseínas . Los 16 péptidos objeto de la patente se pueden obtener químicamente, biotecnológicamente o por tratamiento enzimático a partir de proteínas que los contengan y dan lugar a péptidos con actividad antimicrobiana, inhibidora de la enzima convertidora de la angiotensina in vitro y/o actividad antihipertensiva y/o actividad antioxidante. Estos productos nutracéuticos, ya sea como hidrolizado o como péptido biactivos, son tanto útiles para la industria alimentaria como para la farmacéutica.

Claims

AMENDED CLAIMS [received by the International Bureau on 12 December 2006 (12.12.2006)]
1. Péptido bioactivo caracterizado por a. poseer actividad antimicrobiana y/o actividad IECA in vitro y/o actividad antihipertensiva in vivo y/o actividad antioxidante 5 b. presentes en hidrolizados enzimátícos de caseínas lácteas con pepsina y c. las secuencias de aminoácidos del grupo siguiente: SEQ, ID. N°- 1, SEQ. ID. N° 2, SEQ. ID. N°. 3, SEQ. ID. N°. 4, SEQ. ID. N°, 5, SEQ. ID. N°. 6, SEQ. ID. N°. 7, SEQ. ED. N°. 8, SEQ. ID. N° 9 y SEQ. ID. N° 10; SEQ. ID. N° 13, SEQ. ID. N°. 14.
10 2. Péptido bioactivo según la reivindicación 1 de secuencias SEQ. ID. N°. 2, SEQ. ID. N°. 5, SEQ. ID. N°. 6, SEQ. ID. N°. 7, SEQ. ID. N°. 8, o SEQ. ID. N° 10 caracterizados por comprender la SEQ. ID. N°. 7.y derivarse de la αS2-caseína
3. Péptido bioactivo derivados de los péptidos bioactivos la reivindicación 2 caracterizados por la SEQ. ID. N°. 15 y por ser la unidades finales obtenidas tras
15 simular la digestión gastrointestinal de la SEQ. ID. N°. 7
4. Péptido bioactivo según la reivindicación 1 de secuencias SEQ. ID, N°, 1, SEQ, ID. N°. 3, SEQ. ID. N°. 4, o SEQ. ID. N° 9 caracterizados por comprender la SEQ. ID. N°. Ly derivarse de la α.82-caseína.
5. Péptido bioactivo según Ia reivindicación 1 de secuencias SEQ. ID- N°. 13, 20 caracterizados por derivarse de la αs1-caseína.
6. Péptido bioactivo según la reivindicación 1 de secuencias SEQ. ID. N°. 14, caracterizados por derivarse de la β-caseína.
7. Péptido bioactivo según las reivindicaciones 1 a 3 caracterizado por presentar actividad antimicrobiana frente a bacterias Gram-positivas
25 8. Péptido bioactivo de secuencia de aminoácidos SEQ. ID. N° 3 según Ia reivindicación 1 caracterizados por presentar actividad antimicrobiana frente a bacterias Gram-negativas como Escherichia coli
9. Péptido bioactivo según las reivindicaciones 1 a 6 caracterizados por la secuencia de aminoácidos SEQ. ID. N° 1, SEQ. ID. N°. 7, SEQ. 3D. N° 13, SEQ. ID. N°. 14,
30 SEQ. ID. N° 15, y presentar actividad IECA in vitro
10. Péptido bioactivo según las reivindicaciones 1 a 6 caracterizado por la secuencia de aminoácidos SEQ ID N° 7, SEQ. ID. N° 13 y SEQ. ID. N°. 14 SEQ. ID. N° 15, y por presentar actividad antihipertensiva.
11. Péptido bioactivo según las reivindicaciones 1 a 3 caracterizados por la secuencia de aminoácidos SEQ ID N° 7 y por presentar actividad antioxidante mediante quelación de radicales de oxígeno.
12. Péptido bioactivo según las reivindicaciones 1 a 11, caracterizado por obtenerse mediante un procedimiento de síntesis química o enziraática o mediante métodos recombinantes.
13. Péptido bioactivo según Ia reivindicación 12, caracterizado por obtenerse por un procedimiento de hidrólisis enzimática de αa1-caseína, αS2-casema, β-caseína o caseína entera o leche en sus diferentes formas de presentación, subproductos lácteos, o productos lácteos fermentados.
14. Procedimiento para producir cualquiera de los péptidos bioactivos según la reivindicación 1 a 13, caracterizado por: a. obtenerse por hidrólisis del material de partida que sería cualquier sustrato apropiado que contenga una o más proteínas o péptidos, de origen animal o vegetal, o procedentes de microoganisnios, preferiblemente caseína o leche entera, cuya secuencia de aminoácidos comprendiese la secuencia de aminoácidos de alguno de los péptidos bioactivos de interés indicados en la reivindicación 1, b. disolverse o dispersarse dicho material de partida, a una concentración apropiada, en agua o en una disolución tarnpón, a un pH adecuado para la actuación de la enzima proteolítica, c. emplearse cualquier enzima proteolítica capaz de romper la proteína presente en el material de partida y proporcionar los péptidos de interés, pero preferiblemente pepsina a pH 3,0; o microorganismos proteolíticos que llevaran a cabo una fermentación del sustrato, y d. el tiempo de reacción estaría comprendido entre 10 minutos y 24 horas, pero que preferiblemente fuera entre 30 minutos y 3 horas.
15. Procedimiento para producir cualquiera de los péptidos bioactivos según Ia reivindicación 3, 9,10,12,13, y los péptidos de secuencia de aminoácidos SEQ. ID. N°. 12, SEQ. ID. N° 16 y SEQ. ID. N°. 17 caracterizado por: a. obtenerse por hidrólisis del material de partida que sería cualquier sustrato apropiado que contenga una o más proteínas o péptidos, de origen animal o vegetal, o procedentes de microoganismos, preferiblemente caseína o leche entera, cuya secuencia de aminoácidos comprendiese Ia secuencia de aminoácidos de alguno de los péptidos bioactivos de interés indicados en la reivindicaciones 3 y 7, b. disolverse o dispersarse dicho material de partida, a una concentración apropiada, en agua o en una disolución tampón, a un pH adecuado para la actuación de la enzima proteolítica, c. emplearse cualquier enzima proteolítica capaz de romper la proteína presente en el material de partida y proporcionar los péptidos de interés, pero preferiblemente pepsina a pH 3,0 en una relación enzima/sustrato 3,7/100 (p/p) y realizando la hidrólisis a 37°C; Corolasa PP® a pH a pH 7-8, en una relación enzima/sustrato 1:25 p/p a 37°C?,o microorganismos proteolíticos que llevaran a cabo una fermentación del sustrato, y d. el tiempo de reacción estaría comprendido entre 10 minutos y 24 horas, pero que preferiblemente fuera de 30 minutos para el caso de la pepsina y durante un tiempo de, aproximadamente, 2,5 horas para el caso de la Corolasa PP® cuya reacción se interrumpe calentando a 950C durante 10 minutos en un baño de agua,
16. Péptido bioactivo según las reivindicaciones 1 a 5 caracterizado porque para su obtención se emplean los procedimientos indicados en la reivindicación 15.
17. Péptido bioactivo según las reivindicaciones 3 y 7 caracterizado porque para su obtención se emplean los procedimientos indicados en la reivindicación 16.
18. Producto bioactivo caracterizado porque contiene al menos alguno de los péptidos indicados en las reivindicaciones 1 a 13, 16 y 17 al tratarse del propio hidrolizado enzimático, cualquiera de sus fracciones, o una purificación de los mismos.
19. Uso de un péptido caracterizado por las secuencias de aminoácidos: SEQ. ID. N°. 16 y SEQ. ID. N°. 17 y por ser la unidades finales obtenidas tras simular la digestión gastrointestinal con pepsina y Corolasa PP® de la SEQ, ID. N°. 14 para la elaboración de un producto funcional (alimento o aditivo) favorable para controlar o disminuir la presión arterial y/o medicamento para el tratamiento de la hipertensión arterial.
20. Composición farmacéutica caracterizada por comprender al menos alguno de los péptido bioactivos con actividad antimicrobiana y/o actividad IECA in vitro y/o actividad antihipertensiva in vivo y/o actividad antioxidante según las reivindicaciones 1 a 13 ,16 y l7 y/o el producto bioactivo según la reivindicación 18.
21. Aditivo, ingrediente, o suplemento alimentario funcional caracterizado por comprender al menos alguno de los péptidos bioactivos con actividad antimicrobiana, IECA in vitro y/o actividad antihipertensiva in vivo y/o actividad antioxidante según las reivindicaciones 1 a 13 ,16 y 17 y/o el producto bioactivo según la reivindicación 18
22. Producto alimentario funcional caracterizado por comprender al menos alguno de los péptidos bioactivos con actividad antimicrobiana, IECA in vitro y/o actividad antihipertensiva in vivo y/o actividad antioxidante según las 1 a 13 ,16 y 17 y/o el producto bioactivo según la reivindicación 18 y/o el aditivo, ingrediente, o suplemento alimentario funcional según la reivindicación 21
23. Uso de la composición farmacéutica según la reivindicación 20 en la elaboración de un medicamento para la prevención y/o el tratamiento de infecciones microbianas.
24. Uso de la composición farmacéutica según la reivindicación 20 en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de la hipertensión.
25. Uso de aditivo, ingrediente, alimentario funcional según la reivindicación 22 en la elaboración de un producto alimentario funcional favorable para prevenir infecciones microbianas.
26. Uso de aditivo, ingrediente, alimentario funcional según la reivindicación 22 en la elaboración de un producto alimentario funcional favorable para mitigar la hipertensión.
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