JP2003284551A - アンジオテンシンｉ変換酵素阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】 血管内への吸収性および吸収後の安定性がよ
り高く、しかも、食品由来であることにより安全かつ安
価に生産可能な、新規なアンジオテンシンＩ変換酵素阻
害剤を提供する。 【解決手段】 本発明にかかるアンジオテンシンＩ変換
酵素阻害剤は、特定のアミノ酸配列、Ｉｌｅ−Ａｌａ、
Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−Ａ
ｒｇおよびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸
配列からなるペプチドおよびその塩からなる群より選ば
れる少なくとも１つを有効成分として含むことを特徴と
する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はアンジオテンシンＩ
変換酵素阻害剤に関する。また、本発明は新規ペプチド
またはその塩に関する。

【０００２】

【従来の技術】高血圧症の発症には、レニン−アンジオ
テンシン系が深いかかわりを有していることがよく知ら
れている。このレニン−アンジオテンシン系では、血管
内皮細胞膜などに存在するアンジオテンシンＩ変換酵素
（ＥＣ３．４．１５．１；以下ＡＣＥと称することがあ
る）が重要な役割を果たしている。すなわち、肝臓から
分泌されるアンジオテンシノーゲンが、腎臓で産生され
る酵素レニンで切断されることにより、配列番号２のア
ミノ酸配列からなるアンジオテンシンＩが生成し、さら
に、このアンジオテンシンＩがＡＣＥで切断されると、
配列番号３のアミノ酸配列からなるアンジオテンシンＩ
Ｉが生成する。このアンジオテンシンＩＩは、血管を収
縮させて血圧を高め、さらに副腎皮質に作用してアルド
ステロンの分泌を促進させるなどの作用を有する。

【０００３】一方、血漿中に存在する酵素カリクレイン
は、タンパク質キニノーゲンを切断することにより、ブ
ラジキニンを産生する。ブラジキニンは血管を拡張させ
て血圧を下げる働きを有する。このブラジキニンは、Ａ
ＣＥの作用により分解され、不活性化され得る。このよ
うに、ＡＣＥは、一方では昇圧性ペプチドであるアンジ
オテンシンＩＩを生成させるものであり、他方では降圧
性ペプチドであるブラジキニンを分解するものでもある
ため、いずれにしろ血圧を上昇の方向に進める作用を有
する。従って、ＡＣＥの活性を抑制すれば、血圧上昇を
抑制すること、あるいは、血圧を下げることが可能であ
ると考えられる。

【０００４】ここで、ＡＣＥ阻害物質としては、例え
ば、蛇毒より得られた数種のペプチドを初めとして、カ
プトプリル（Ｄ−３−メルカプト−２−メチルプロパノ
イル−Ｌ−プロリン）などの合成化合物が多数知られて
おり、カプトプリルは、高血圧治療薬として使われてい
る。また、近年、種々の食品中から多数のＡＣＥ阻害活
性を有するペプチドが同定されており、そのうち、牛乳
カゼイン、発酵乳および鰹節などを由来とする各種ペプ
チドを添加した食品等が、特定保健用食品として実用化
されている（例えば、特公昭６０−２３０８５号公報；
特公昭６１−５１５６２号公報；特公昭６１−５１５６
４号公報；Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，４３，１１９，１
９９７；Ｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｓ，４３，１２９，１９
９７）。

【０００５】さらに、ゼラチンの微生物コラゲナーゼに
よる加水分解物からもＡＣＥ阻害活性を有するペプチド
（配列番号４、５、６、７、８、９および１０のアミノ
酸配列で表されるペプチド等）が報告されているが、上
記コラゲナーゼは病原性の微生物（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉ
ｕｍ ｈｉｓｔｏｌｙｔｉｃｕｍ）が生産する酵素であ
り、そこから得られたペプチドもＣｌｏｓｔｒｉｄｉｕ
ｍなどの感染によるショック症状との関連でも論じられ
ている（Ｂｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂｉｏｐｈｙｓ
ｉｃａ Ａｃｔａ，Ｖｏｌ．５６６，１２８−１３７，
１９７９）。このように、アンジオテンシンＩ変換酵素
阻害剤については、既に多数の報告があるが、食品由来
であり且つより安価に生産可能なアンジオテンシンＩ変
換酵素阻害剤が、医薬品としてのみならず、特定保健用
食品の素材としても強く要望されている。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】そこで、本発明の解決
しようとする課題は、血管内への吸収性および吸収後の
安定性がより高く、しかも、食品由来であることにより
安全かつ安価に生産可能な、新規なアンジオテンシンＩ
変換酵素阻害剤を提供することにある。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者は、上記課題を
解決するため鋭意検討を行った。その結果、食品由来と
いうこと、および、安全且つ安価に生産可能であること
に着目して、実験および検討を繰り返したところ、コラ
ーゲンおよび／またはゼラチンをプロテアーゼ処理ある
いはさらに醗酵処理して得られた加水分解物により得ら
れるペプチドが、有効なアンジオテンシンＩ変換酵素阻
害剤となり得ることを見出した。また、このようにして
得られたペプチド中の特定のペプチドが、アンジオテン
シンＩ変換酵素阻害剤の有効成分となっていることも見
出した。この特定のペプチドは、従来報告されているゼ
ラチン由来のＡＣＥ阻害ペプチドよりも分子量の小さい
ＡＣＥ阻害ペプチドであった。一般に、２アミノ酸また
は３アミノ酸からなるペプチドは、消化管からの吸収に
非常に優れていると考えられている。また、コラーゲン
および／またはゼラチン由来のペプチドはプロリンを多
く含んでおり、消化管内のプロテアーゼによる加水分解
を受けにくく安定に存在することができるものである。

【０００８】よって、このような知見に基づく上記アン
ジオテンシンＩ変換酵素阻害剤であれば、前述した課題
を一挙に解決できることを確認し、本発明を完成した。
また、本発明者は、上記特定のペプチドにおいて、これ
までに無かった新規なペプチドまたはその塩を同定し
た。すなわち、本発明にかかるアンジオテンシンＩ変換
酵素阻害剤は、配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−
Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−Ａｒｇおよ
びＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配列から
なるペプチドおよびその塩からなる群より選ばれる少な
くとも１つを有効成分として含むことを特徴とする。

【０００９】また、本発明にかかるアンジオテンシンＩ
変換酵素阻害剤は、コラーゲンおよび／またはゼラチン
を黄色コウジカビ由来プロテアーゼにより加水分解して
得られるペプチドを含んでなることを特徴とする。ま
た、本発明にかかるアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤
は、コラーゲンおよび／またはゼラチンのブロメライン
加水分解物を発酵させて得られるペプチドを含んでなる
ことを特徴とする。また、本発明にかかる新規なペプチ
ドまたはその塩は、配列番号１、Ａｌａ−Ａｒｇおよび
Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙのいずれかで表されるアミノ酸
配列からなることを特徴とする。

【００１０】

【発明の実施の形態】以下、上記本発明にかかるアンジ
オテンシンＩ変換酵素阻害剤、および、上記本発明にか
かるペプチドまたはその塩について詳しく説明するが、
本発明の範囲はこれらの説明に拘束されることはなく、
以下の例示以外についても、本発明の趣旨を損なわない
範囲で適宜実施し得る。本発明にかかるアンジオテンシ
ンＩ変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（以下、本発明のアンジ
オテンシンＩ変換酵素阻害剤（本発明のＡＣＥ阻害剤）
と称することがある。）は、配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌ
ａ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ
−ＡｒｇおよびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミ
ノ酸配列からなる６種類のペプチドおよびそれらの塩の
中の少なくとも１つを、有効成分として含むことを特徴
とする。

【００１１】上記各種ペプチドおよびその塩は、特に限
定はされないが、コラーゲンおよび／またはゼラチンを
プロテアーゼ（タンパク質分解酵素）により加水分解す
る、あるいは、該加水分解物をさらに発酵させることに
より得られる生産物から得ることができ、詳しくは、こ
れら加水分解物や発酵生産物から精製等をすることによ
り得ることが好ましい。また、工業的には化学合成によ
り得ることもできる。本発明のアンジオテンシンＩ変換
酵素阻害剤は、コラーゲンおよび／またはゼラチンの黄
色コウジカビ由来プロテアーゼ加水分解により生成する
ペプチドを含んでなるものであってもよい。該ペプチド
には各種アミノ酸配列からなるペプチドが含まれ得る
が、通常、アンジオテンシンＩ変換酵素阻害作用を有す
る配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ、Ａｌａ−ＡｒｇおよびＶａｌ−Ａｒｇで表されるア
ミノ酸配列からなるペプチドの少なくとも１種が含まれ
る。従って、この場合、コラーゲンおよび／またはゼラ
チンの黄色コウジカビ由来プロテアーゼ加水分解液自体
がアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤として作用し得る
ものであってもよいし、該加水分解液を有効成分とする
アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤であってもよい。

【００１２】本発明にかかるアンジオテンシンＩ変換酵
素阻害剤は、ブロメライン加水分解物を醗酵させて得ら
れるペプチドを含んでなるものであってもよい。該ペプ
チドには各種アミノ酸配列からなるペプチドが含まれ得
るが、通常、アンジオテンシンＩ変換酵素阻害作用を有
する配列番号１、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａ
ｒｇおよびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸
配列からなるペプチドの少なくとも１種が含まれる。従
って、コラーゲンおよび／またはゼラチンのブロメライ
ン加水分解物を醗酵させることにより得られたペプチド
混合物自体がアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤として
作用し得るものであってもよいし、該ペプチド混合物を
有効成分とするアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤であ
ってもよい。

【００１３】上記コラーゲンとしては、特に限定はされ
ず、例えば、魚類、ほ乳類、家禽類などの様々な脊椎動
物を起源としてその鱗、皮膚、骨および腱などの各種生
体組織から通常公知の方法（抽出方法等）により得られ
るコラーゲンを用いることができ、また、上記ゼラチン
としては、これらコラーゲンの熱変性物であるゼラチン
を用いることができる。なお、配列番号１のアミノ酸配
列については、下記配列表の記載において、該配列番号
１のアミノ酸配列の起源について記載しているが、単に
例示しているだけであって、特に限定はされない。よっ
て、上記したように様々な起源から得られるコラーゲン
および／またはゼラチンあるいはその他のタンパク質を
由来とするものであってもよいし、全く化学合成により
得られたものであってもよい。

【００１４】コラーゲンおよび／またはゼラチンの酵素
加水分解において用いるプロテアーゼ（タンパク質分解
酵素）としては、特に限定はされるわけではなく、上記
６種類のアミノ酸配列からなるペプチドの少なくとも１
種が生成可能なプロテアーゼであればどのようなもので
もよいが、生産物を特定保健用食品に含むようにする場
合があることも考慮すると、病原性微生物由来の酵素以
外のものを用いることが好ましい。具体的には、例え
ば、パパイン、フィシンおよびブロメライン等の植物由
来プロテアーゼ、パンクレアチン、レンネット、ペプシ
ンおよびトリプシン等の動物、魚類および甲殻類等の臓
器由来プロテアーゼ、糸状菌、酵母、放線菌、担子菌お
よび細菌由来プロテアーゼが好適であり、なかでも、黄
色コウジカビ由来プロテアーゼやブロメラインが、得ら
れたペプチド混合物を食品として利用する場合に風味の
点でより好適である。

【００１５】これらプロテアーゼは、通常の精製方法等
により精製された純度の高いものが好ましいが、特に限
定はされるわけではなく、上記プロテアーゼを含有する
ものであれば、パイナップル、パパイヤおよびイチジク
等の果汁や果肉といった植物組織由来のものをそのまま
利用することもできる。上記酵素加水分解においては、
加水分解処理の反応条件、具体的には、例えば、酵素添
加量、反応温度、反応ｐＨおよび反応時間などは、特に
限定されるわけではなく、原料コラーゲンおよび／また
はゼラチンの種類、状態あるいは使用する酵素の種類等
に応じて、適宜設定することができる。例えば、豚皮由
来コラーゲンの熱変性物であるゼラチンを、黄色コウジ
カビ由来プロテアーゼもしくはブロメラインで加水分解
する場合には、特に限定はされないが、乾燥ゼラチン重
量に対して１０〜１０，０００ｐｐｍの量で黄色コウジ
カビ由来プロテアーゼもしくはブロメラインを添加し、
ｐＨ３．０〜８．０、温度４０〜６０℃で３０〜１８０
分反応させることにより、酵素加水分解処理を実施する
ことができる。

【００１６】上記酵素加水分解においては、所望の条件
にて酵素加水分解反応を行った後、用いた酵素を失活さ
せる。該失活処理としては、特に限定はされないが、例
えば、加熱処理等を挙げることができる。加熱処理とし
ては、例えば、７０〜１００℃で５〜６０分間の熱処理
を施すことで、酵素を失活させることができる。上記酵
素加水分解により得られた加水分解物を醗酵させる場
合、発酵方法としては、通常公知の各種発酵方法を用い
ればよいが、特に限定されるわけではなく、具体的に
は、例えば、酵素失活後、糖分と共に食用の酵母や乳酸
菌などの発酵微生物等を添加し、２５〜３５℃で４〜４
８時間発酵させることで実施することができる。上記食
用の酵母や乳酸菌としては、特に限定はされないが、例
えば、アルコール飲料、発酵乳食品、パン等の生産にお
いて用いられる各種酵母および乳酸菌が挙げられる。

【００１７】上述した加水分解、または、加水分解およ
び発酵により得られた、コラーゲンおよび／またはゼラ
チンのプロテアーゼ加水分解物（加水分解液）、また
は、それを醗酵させた発酵生産物（発酵後の液）から、
配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−ＡｒｇおよびＶａｌ−Ａ
ｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配列からなる上記６種
のペプチドの少なくとも１種を得る場合には、ＡＣＥ阻
害活性（測定方法は後述する）の測定値を指標として、
ペプチドの分画または精製に一般的に用いられる方法、
例えば、限外濾過あるいは各種液体クロマトグラフィー
またはこれらを組み合わせた方法等をもちいればよく、
該方法等により分画または精製すればよい。上記各種液
体クロマトグラフィーとしては、例えば、ゲル濾過クロ
マトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、逆相
クロマトグラフィーおよびアフィニティクロマトグラフ
ィー等が挙げられる。

【００１８】より具体的には、例えば、以下の手順によ
り、分画および精製することができる。すなわち、コラ
ーゲンおよび／またはゼラチンのプロテアーゼ加水分解
物あるいはそれを醗酵させてなる発酵生産物の約６ｇ／
３０ｍｌを、ゲル濾過カラム（例えば、セファデックス
ＬＨ−２０カラム（ファルマシア社製））に３回に分け
て負荷し、３０％メタノール水溶液で溶出してＡＣＥ阻
害活性を有する画分を回収する。顕著なＡＣＥ阻害活性
が認められる画分をイオン交換カラム（例えば、ＤＥＡ
Ｅトヨパール６５０Ｍカラム（東ソー社製）、または、
ＳＰトヨパール６５０Ｍカラム（東ソー社製））に負荷
して、蒸留水で溶出される活性画分を回収する。さらに
１ｍｏｌ／Ｌ（リットル）以下の塩化ナトリウム水溶液
の直線濃度勾配により溶出される活性画分を回収する。
顕著なＡＣＥ阻害活性が認められる各画分については、
逆相カラム（例えば、μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ ５μ
Ｃ ₁₈ ３００Åカラム（ウォーターズ社製））を装填し
た高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）に供し、
０．１％トリフルオロ酢酸を含む３２％以下のアセトニ
トリル水溶液の直線濃度勾配により分画する。回収した
活性画分を減圧乾固することにより、配列番号１、Ｉｌ
ｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒ
ｇ、Ｖａｌ−ＡｒｇおよびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表
されるアミノ酸配列からなるペプチドの少なくとも１種
を得ることができる。

【００１９】なお、配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌ
ｙ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−Ａｒｇ
およびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配列
からなるペプチドは、コラーゲン以外のタンパク質であ
り且つ配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−
Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−ＡｒｇおよびＶａｌ
−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配列からなるペプ
チドと同一のアミノ酸配列を構造単位として含むタンパ
ク質を、上記プロテアーゼで加水分解することにより、
製造することもできる。各ペプチドのＡＣＥ阻害活性
は、例えば、川岸舜朗編，「食品中の生体機能調節物質
研究法（生物化学実験法３８）」（学会出版センター、
１９９６年、第１１６頁）に記載されている方法で測定
することができる。すなわち、ＡＣＥを緩衝液に溶解し
て酵素溶液とし、Ｈｉｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ（Ｈｉｐｐｕ
ｒｙｌ−Ｌ−ｈｉｓｔｉｄｙｌ−Ｌ−ｌｅｕｃｉｎｅ）
を緩衝液に溶解して基質溶液とする。試料溶液と前記酵
素溶液とを混合し、さらに、前記基質溶液を加えて酵素
反応させ、反応停止後に遊離してくる馬尿酸（Ｈｉｐｐ
ｕｒｉｃ ａｃｉｄ）を高速液体クロマトグラフィーに
より定量することにより、阻害率を算出することができ
る。

【００２０】上記配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ
−Ｐｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−Ａｒｇお
よびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配列か
らなるペプチドの塩としては、製剤学上許容されうる酸
付加塩および塩基付加塩等が挙げられ、該ペプチドの塩
は通常用いられる方法により生成し得る。製剤学上許容
されうる酸付加塩としては、特に限定はされないが、具
体的には、例えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機
酸との塩；ギ酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、
コハク酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸等の有機酸との
塩等が挙げられ、また製剤学上許容されうる塩基付加塩
としては、特に限定はされないが、具体的には、例え
ば、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カ
ルシウム塩等のアルカリ土類金属塩；アンモニウム、エ
タノールアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシル
アミン等のアミン類との塩等が挙げられる。

【００２１】本発明にかかる上記６種のペプチドおよび
その塩から選ばれる少なくとも１種を有効成分として含
むアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤においては、上記
ペプチドおよびその塩の含有量は、特に限定されるわけ
ではなく、その投与経路や剤形によって適宜設定すれば
よい。また、上記本発明のアンジオテンシンＩ変換酵素
阻害剤においては、上記有効成分となるペプチドやその
塩、または、上記加水分解あるいは上記加水分解および
発酵により得られるペプチド以外に、他の成分を含んで
いてもよい。すなわち、本発明のアンジオテンシンＩ変
換酵素阻害剤は、これらペプチドまたはその塩のみであ
ってもよいし、他の何らかの成分を含んでなるもの、ま
たは、加えてなるものであってもよい。他の成分として
は、担体や賦形剤や希釈剤や乳化分散剤などや、コラー
ゲン、ゼラチン、酵素、その他のペプチドなどを挙げる
ことができる。担体としては、例えば、水、ゼラチン、
澱粉、ステアリン酸マグネシウム、ラクトースおよび植
物油等の各種個体担体や液体担体が挙げられる。これら
他の成分は、特に限定はされないが、薬剤学的に許容さ
れることのできるものが好ましい。これら他の成分は、
上記有効成分となるペプチドまたはその塩により発揮さ
れるアンジオテンシンＩ変換酵素阻害効果を大きく損な
わない範囲で適宜用いることができる。

【００２２】本発明のアンジオテンシンＩ変換酵素阻害
剤は、例えば、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、懸濁
液、エマルジョン剤、シロップ剤、粉剤等の経口剤、ま
たは注射剤などの形態とすることができる。本発明のア
ンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤を薬剤などとして用い
る場合は上記のように製剤化したものが好ましい。また
本発明のアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤は、各種加
工食品における蛋白強化剤等としても用いることができ
る。本発明にかかるアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤
は、例えば、経口投与、非経口投与で用いることがで
き、非経口投与方法としては、注射（皮下、静脈内等）
または直腸投与等が例示される。これらのなかで、注射
剤として用いられることが最も好適である。注射剤とし
て調製する場合には、前述した他の成分として、例え
ば、生理食塩水およびリンゲル液等の水溶性溶剤、植物
油および脂肪酸エステル等の非水溶性溶剤、ブドウ糖お
よび塩化ナトリウム等の等張化剤、溶解補助剤、安定化
剤、防腐剤、懸濁化剤、または乳化剤などを任意に用い
ることができるが、注射剤以外として調製する場合にも
用いることができる。

【００２３】また、本発明にかかるアンジオテンシンＩ
変換酵素阻害剤は、さまざまな食品や飲料中に添加して
もよく、該食品・飲料を、機能性食品・飲料、特定保健
用食品・飲料、美容健康食品・飲料、栄養補助食品・飲
料などとすることができる。該食品・飲料としては、例
えば、清涼飲料、乳酸飲料、調味料、スープ、チーズ、
ハム、菓子類などが挙げられる。添加量は所望の効果が
現れるように適宜設定することができる。上記本発明に
かかるアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤を、薬剤等と
して投与する場合の投与量は、特に限定はされないが、
具体的には、高血圧症状の程度、患者の年齢、体重、ま
たは投与方法などに応じて適宜決定することができる。
例えば、境界領域の高血圧症患者への経口投与の場合に
は、配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−ＡｒｇおよびＶａｌ−
Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配列からなるペプチ
ドおよびこれらの塩の少なくとも１種が、患者の体重に
対して１日当たり０．１〜４０ｍｇ／ｋｇとなるように
投与することが好ましく、より好ましくは０．５〜１０
ｍｇ／ｋｇである。なお、２種以上を投与する場合には
その合計量で考慮する。また、ヒト以外の各種動物等に
投与することもでき、投与量は適宜設定すればよい。

【００２４】本発明にかかるペプチドまたはその塩（以
下、本発明のペプチドまたはその塩と称することがあ
る。）は、配列番号１、Ａｌａ−ＡｒｇおよびＶａｌ−
Ａｒｇ−Ｇｌｙのいずれかで表されるアミノ酸配列から
なるペプチドまたはその塩である。上記本発明のペプチ
ドの塩としては、製剤学上許容されうる酸付加塩および
塩基付加塩等が挙げられ、該ペプチドの塩は通常用いら
れる方法により生成し得る。製剤学上許容されうる酸付
加塩としては、特に限定はされないが、具体的には、例
えば、塩酸、硫酸、硝酸、リン酸等の無機酸との塩；ギ
酸、酢酸、プロピオン酸、グリコール酸、コハク酸、リ
ンゴ酸、酒石酸、クエン酸等の有機酸との塩等が挙げら
れ、また製剤学上許容されうる塩基付加塩としては、特
に限定はされないが、具体的には、例えば、ナトリウム
塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩；カルシウム塩等の
アルカリ土類金属塩；アンモニウム、エタノールアミ
ン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン等のア
ミン類との塩等が挙げられる。

【００２５】本発明のペプチドまたはその塩は、特に限
定はされないが、上記本発明のアンジオテンシンＩ変換
酵素阻害剤の有効成分となるペプチドまたはその塩を得
る場合と同様の方法により得ることができる。具体的に
は、加水分解あるいは加水分解および発酵により得られ
た、コラーゲンおよび／またはゼラチンのプロテアーゼ
加水分解物（加水分解液）もしくは該加水分解物を醗酵
させた発酵生産物（発酵後の液）から、分画または精製
して得ることができる。また、コラーゲンおよび／また
はゼラチン以外のタンパク質であり且つ配列番号１、Ａ
ｌａ−ＡｒｇおよびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表される
アミノ酸配列からなるペプチドと同一のアミノ酸配列を
含むタンパク質のプロテアーゼ加水分解物等から、分画
または精製することにより得ることもできる。また、工
業的には化学合成により得ることもできる。なお、本発
明のペプチドの塩については、該ペプチドを得た後、通
常一般な方法により所望の塩とすることができる。

【００２６】本発明のペプチドまたはその塩は、それ自
体従来にない新規な物質であり、種々の作用効果を有す
るものである。具体的には、例えば、アンジオテンシン
Ｉ変換酵素阻害作用、プロスタグランジンＥ₂合成促進
作用、プロスタサイクリン合成促進作用および血圧降下
作用などを挙げることができる。また、これら作用効果
を利用した用途としては、特に限定はされないが、具体
的には、例えば、アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤の
有効成分、血圧降下剤の有効成分および動脈硬化防止剤
の有効成分などを挙げることができる。本発明のペプチ
ドまたはその塩を、アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤
として用いる場合は、該ペプチドまたはその塩のみでも
よいし、他の何らかの成分を含んでなるもの、または、
加えてなるものであってもよい。他の成分としては、担
体や賦形剤や希釈剤や乳化分散剤などや、コラーゲン、
ゼラチン、酵素、その他のペプチドなどを挙げることが
できる。担体としては、例えば、水、ゼラチン、澱粉、
ステアリン酸マグネシウム、ラクトースおよび植物油等
の各種個体担体や液体担体が挙げられる。これら他の成
分は、特に限定はされないが、薬剤学的に許容されるこ
とのできるものが好ましい。これら他の成分は、上記ペ
プチドまたはその塩により発揮されるアンジオテンシン
Ｉ変換酵素阻害効果を大きく損なわない範囲で適宜用い
ることができる。アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤と
して用いる場合は、例えば、散剤、顆粒剤、錠剤、カプ
セル剤、懸濁液、エマルジョン剤、シロップ剤、粉剤等
の経口剤、または注射剤などの形態とすることができ
る。本発明のアンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤を薬剤
として用いる場合は上記のように製剤化したものが好ま
しい。

【００２７】また本発明のペプチドまたはその塩は、必
要に応じて上記他の成分を含めてまたはそのままで各種
加工食品における蛋白強化剤等として用いることもでき
る。本発明のペプチドまたはその塩を、アンジオテンシ
ンＩ変換酵素阻害剤等の薬剤等として使用する場合は、
経口投与、非経口投与で用いることができ、非経口投与
方法としては、注射（皮下、静脈内等）、または直腸投
与等が例示される。これらのなかで、注射剤が最も好適
に用いられる。注射剤の調製においては、有効成分の他
に、例えば、生理食塩水もしくはリンゲル液等の水溶性
溶剤、植物油もしくは脂肪酸エステル等の非水溶性溶
剤、ブドウ糖もしくは塩化ナトリウム等の等張化剤、溶
解補助剤、安定化剤、防腐剤、懸濁化剤、または乳化剤
などを任意に用いることができる。

【００２８】また、本発明のペプチドまたはその塩は、
特に限定はされないが、例えば、さまざまな食品・飲料
中に添加してもよく、該食品・飲料を、機能性食品・飲
料、特定保健用食品・飲料、美容健康食品・飲料、栄養
補助食品・飲料などとすることができる。該食品・飲料
としては、例えば、清涼飲料、乳酸飲料、調味料、スー
プ、チーズ、ハム、菓子類などが挙げられる。添加量は
所望の効果が現れるように適宜設定することができる。
上記本発明のペプチドまたはその塩を、アンジオテンシ
ンＩ変換酵素阻害剤を、薬剤等として投与する場合の投
与量は、特に限定はされないが、具体的には、高血圧症
状の程度、患者の年齢、体重、または投与方法などに応
じて適宜決定することができる。例えば、境界領域の高
血圧症患者への経口投与の場合には、配列番号１、Ａｌ
ａ−Ａｒｇ、およびＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表される
アミノ酸配列からなるペプチドおよびこれらの塩の少な
くとも１種が、患者の体重に対して１日当たり０．１〜
４０ｍｇ／ｋｇとなるように投与することが好ましく、
より好ましくは０．５〜１０ｍｇ／ｋｇである。なお、
２種以上を投与する場合にはその合計量で考慮する。ま
た、ヒト以外の各種動物等に投与することもでき、投与
量は適宜設定すればよい。

【００２９】

【実施例】以下に、実施例により、本発明をさらに具体
的に説明するが、本発明はこれらにより何ら限定される
ものではない。なお、以下では、便宜上、「リットル」
を単に「Ｌ」と記すことがある。−実施例１−「コラー
ゲンおよび／またはゼラチンの黄色コウジカビ由来プロ
テアーゼ加水分解物から得られるペプチドからのアンジ
オテンシンＩ変換酵素阻害作用を有するペプチドの精
製」豚皮由来コラーゲンの熱変性物であるゼラチンの黄
色コウジカビ由来プロテアーゼ加水分解物の溶液１０ｍ
Ｌ（乾燥重量２ｇを１０ｍＬの水に溶解させたもの）
を、セファデックスＬＨ−２０カラム（２６×９００ｍ
ｍ；ファルマシア社製）に負荷し、３０％メタノール水
溶液で溶出した。９ｍＬ／フラクションで分画し、ＡＣ
Ｅ阻害活性を有する画分「Ａ」（フラクションＮｏ．２
７、および２８）を回収した。なお、本実施例では、Ａ
ＣＥ阻害活性の測定を、後述の試験例１に記載の測定法
により実施した。この操作をさらに２回繰り返し計３０
ｍＬの試料を分画した。このＡＣＥ阻害活性画分「Ａ」
をまとめて減圧濃縮したのち、ＤＥＡＥトヨパール６５
０Ｍカラム（１６×６５０ｍｍ；東ソー社製）に負荷
し、蒸留水で溶出される活性画分「Ａ−１」を回収し
た。活性画分「Ａ−１」は濃縮後、ＳＰトヨパール６５
０Ｍカラム（１６×６５０ｍｍ；東ソー社製）に負荷
し、蒸留水で溶出される活性画分「Ａ−１−１」を回収
した。さらに、０〜１ｍｏｌ／Ｌの塩化ナトリウム水溶
液の直線濃度勾配により溶出を行ない、それぞれ０．
３、０．４ｍｏｌ／Ｌの塩化ナトリウム水溶液で溶出さ
れる活性画分「Ａ−１−２およびＡ−１−３」を回収し
た。

【００３０】前記各活性画分「Ａ−１−１、Ａ−１−２
およびＡ−１−３」を、それぞれ、μＢｏｎｄａｓｐｈ
ｅｒｅ ５μＣ₁₈ ３００Åカラム（３．９×１５０ｍ
ｍ；ウォーターズ社製）を用いたＨＰＬＣで、０．１％
トリフルオロ酢酸を含む０〜３２％のアセトニトリル水
溶液の直線濃度勾配溶出（流速１ｍＬ／ｍｉｎ，０〜３
２％の勾配を１８分間で行なう）により分画した。活性
画分「Ａ−１−１」を分画することにより、１３．７分
の保持時間に溶出される活性画分「Ａ−１−１−１」を
得、６．５分の保持時間に溶出される活性画分「Ａ−１
−１−２」を得た。活性画分「Ａ−１−２」を分画する
ことにより、４．２分の保持時間に溶出される活性画分
「Ａ−１−２−１」を得た。活性画分「Ａ−１−３」を
分画することにより、２．２分の保持時間に溶出される
活性画分「Ａ−１−３−１」を得、４．７分の保持時間
に溶出される活性画分「Ａ−１−３−２」を得た。

【００３１】このようにして精製した５種の各ペプチド
の構造は、プロテインシークエンサー４９１型（アプラ
イドバイオシステムズ社製）により解析したところ、活
性画分「Ａ−１−１−１」のペプチドは配列番号１で表
されるアミノ酸配列からなるペプチドであり、活性画分
「Ａ−１−１−２」のペプチドはＩｌｅ−Ａｌａで表さ
れるアミノ酸配列からなるペプチドであり、活性画分
「Ａ−１−２−１」のペプチドはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇで表されるアミノ酸配列からなるペプチドであり、活
性画分「Ａ−１−３−１」のペプチドはＡｌａ−Ａｒｇ
で表されるアミノ酸配列からなるペプチドであり、活性
画分「Ａ−１−３−２」のペプチドはＶａｌ−Ａｒｇで
表されるアミノ酸配列からなるペプチドであることが判
明した。

【００３２】次に、これら５種のペプチドと同一の配列
を有するペプチドを化学合成し、これらの化学合成ペプ
チドのＨＰＬＣピークの保持時間を、コラーゲンの黄色
コウジカビ由来プロテアーゼ加水分解液から得られたペ
プチドの保持時間と比較した。なお、ＨＰＬＣは、カラ
ムとして、μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ ５μＣ₁₈ ３０
０Åカラム（３．９×１５０ｍｍ；ウォーターズ社製）
を使用し、溶出液として、０．１％トリフルオロ酢酸を
含む０〜３２％のアセトニトリル水溶液の直線濃度勾配
（１８分間）を使用し、流速１ｍＬ／ｍｉｎの条件で、
２１０ｎｍの紫外部吸収を検出することにより、実施し
た。その結果、化学合成したそれぞれのペプチドの保持
時間は、精製したそれぞれのペプチドの保持時間と一致
した。

【００３３】−実施例２−「コラーゲンおよび／または
ゼラチンのブロメライン加水分解物を醗酵させることに
より得られるペプチドからのアンジオテンシンＩ変換酵
素阻害作用を有するペプチドの精製」豚皮由来のコラー
ゲンの熱変性物であるゼラチンのブロメライン加水分解
物を醗酵させることにより得たペプチド混合物の溶液１
０ｍＬ（乾燥重量２ｇを１０ｍＬの水に溶解させたも
の）を、実施例１と同様にセファデックスＬＨ−２０カ
ラム（２６×９００ｍｍ；ファルマシア社製）に負荷
し、３０％メタノール水溶液で溶出した。９ｍＬ／フラ
クションで分画し、ＡＣＥ阻害活性を有する画分「Ｂ」
（フラクションＮｏ．２６、および２７）を回収した。
この操作をさらに２回繰り返し計３０ｍＬの試料を分画
し、この活性画分をまとめて減圧濃縮した。次にＳＰト
ヨパール６５０Ｍカラム（１６×６５０ｍｍ；東ソー社
製）に負荷し、蒸留水で溶出される活性画分「Ｂ−１」
を回収した。さらに、０〜１ｍｏｌ／Ｌの塩化ナトリウ
ム水溶液の直線濃度勾配により溶出を行ない、０．５５
ｍｏｌ／Ｌの塩化ナトリウム水溶液で溶出される活性画
分「Ｂ−２」そして０．６ｍｏｌ／Ｌの塩化ナトリウム
水溶液で溶出される活性画分「Ｂ−３」を回収した。活
性画分「Ｂ−１」については濃縮後、ＤＥＡＥトヨパー
ル６５０Ｍカラム（１６×６５０ｍｍ；東ソー社製）に
負荷し、蒸留水で溶出される活性画分「Ｂ−１−１」を
回収した。

【００３４】前記各活性画分「Ｂ−１−１、Ｂ−２およ
びＢ−３」を、それぞれ、μＢｏｎｄａｓｐｈｅｒｅ
５μＣ₁₈ ３００Åカラム（３．９×１５０ｍｍ；ウォ
ーターズ社製）を用いたＨＰＬＣで、０．１％トリフル
オロ酢酸を含む０〜３２％のアセトニトリル水溶液の直
線濃度勾配溶出（流速１ｍＬ／ｍｉｎ，０〜３２％の勾
配を１８分間で行なう）により分画した。活性画分「Ｂ
−１−１」を分画することにより、１２．５分の保持時
間に溶出される活性画分「Ｂ−１−１−１」を得た。活
性画分「Ｂ−２」を分画することにより、６．１分の保
持時間に溶出される活性画分「Ｂ−２−１」を得、５．
２分の保持時間に溶出される活性画分「Ｂ−２−２」を
得た。また、活性画分「Ｂ−３」を分画することによ
り、２．４分間の保持時間に溶出される活性画分「Ｂ−
３−１」を得た。

【００３５】このようにして精製した４種の各ペプチド
の構造は、プロテインシークエンサー４９１型（アプラ
イドバイオシステムズ社製）により解析したところ、活
性画分「Ｂ−１−１−１」のペプチドは配列番号１で表
されるアミノ酸配列からなるペプチドであり、（実施例
１における活性画分「Ａ−１−１−１」と同一である
が、使用したＣ₁₈カラムのロットが異なるため、保持時
間は実施例１とは異なる）活性画分「Ｂ−２−１」のペ
プチドはＶａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配
列からなるペプチドであることが判明した。また、活性
画分「Ｂ−２−２」のペプチドはＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇで表されるアミノ酸配列からなるペプチドと同一であ
り（実施例１における活性画分「Ａ−１−２−１」と同
一であるが、使用したＣ₁₈カラムのロットが異なるた
め、保持時間は実施例１とは異なる）、活性画分「Ｂ−
３−１」のペプチドはＡｌａ−Ａｒｇで表されるアミノ
酸配列からなるペプチドと同一であることが判明した
（実施例１における活性画分「Ａ−１−３−１」と同一
であるが、使用したＣ₁₈カラムのロットが異なるため、
保持時間は実施例１とは異なる）。

【００３６】このようにして得られた上記４種のペプチ
ドと同一のアミノ酸配列を有するペプチドを化学合成
し、これら化学合成ペプチドのＨＰＬＣピークの保持時
間と、コラーゲンおよび／またはゼラチンのブロメライ
ン加水分解物を醗酵させることにより得たペプチドから
精製された上記ペプチドの保持時間とを、実施例１と同
じ方法で比較した。その結果、化学合成したそれぞれの
ペプチドの保持時間は、精製したそれぞれのペプチドの
保持時間と一致した。−試験例１−ＡＣＥ阻害活性の測
定は、下記の方法により行なった。

【００３７】すなわち、ウサギ肺由来ＡＣＥ（シグマ社
製）を、２２ｍｍｏｌ／Ｌホウ酸緩衝液（ｐＨ８．３）
に溶解し、６０ｍＵ／ｍＬの酵素溶液とした。また、Ｈ
ｉｐ−Ｈｉｓ−Ｌｅｕ（Ｈｉｐｐｕｒｙｌ−Ｌ−ｈｉｓ
ｔｉｄｙｌ−Ｌ−ｌｅｕｃｉｎｅ；株式会社ペプチド研
究所製）および塩化ナトリウムを、前記ホウ酸緩衝液に
溶解し、それぞれの濃度が７．６ｍｍｏｌ／Ｌおよび６
０８ｍｍｏｌ／Ｌ（反応液中での終濃度は、それぞれ、
５ｍｍｏｌ／Ｌおよび４００ｍｍｏｌ／Ｌになる）であ
る基質溶液を調製した。０．５ｍＬ容量のプラスチック
チューブに、試料溶液１５μＬと前記酵素溶液５０μＬ
とを入れ、３７℃で５分間保温した後、前記基質溶液１
２５μＬを加えてよく混合し、３７℃で３０分間の反応
を行なった。その後、１０％トリフルオロ酢酸２０μＬ
を添加することにより、反応を停止させた。反応停止
後、酵素反応により遊離した馬尿酸をＨＰＬＣにより定
量した。なお、ＨＰＬＣは、カラムとして、μＢｏｎｄ
ａｓｐｈｅｒｅ ５μＣ₁₈３００Åカラム（３．９×１
５０ｍｍ；ウォーターズ社製）を使用し、溶出液とし
て、０．１％トリフルオロ酢酸を含む０〜６３％のアセ
トニトリル水溶液の直線濃度勾配（２０分間）を使用
し、流速１ｍＬ／ｍｉｎの条件で、２２８ｎｍの紫外部
吸収を検出することにより、実施した。

【００３８】なお、コントロールとして、試料溶液１５
μＬ、酵素溶液５０μＬ、および基質溶液１２５μＬを
混合する代わりに、水１５μＬ、酵素溶液５０μＬ、お
よび基質溶液１２５μＬを混合したこと以外は、前記操
作を繰り返した。ＡＣＥの阻害率は、下記式：阻害率
（％）＝［（Ａ−Ｂ）／Ａ］×１００（上記式中、Ａ
は、コントロールにおける馬尿酸のピーク面積であり、
Ｂは、試料溶液添加の場合の馬尿酸のピーク面積であ
る。）により算出した。また、前記阻害率が５０％にな
るペプチド濃度をＩＣ₅₀値で表した。その結果、各ペプ
チドについて得られたＩＣ₅₀値を表１に示す。

【００３９】

【表１】

【００４０】

【発明の効果】本発明によれば、血管内への吸収性およ
び吸収後の安定性がより高く、しかも、食品由来である
ことにより安全かつ安価に生産可能な、新規なアンジオ
テンシンＩ変換酵素阻害剤を提供することができ、高血
圧治療や予防のための医薬品、あるいは、特定保健用食
品の素材として有効に利用することができる。また、本
発明によれば、今までにない新規なペプチドまたはその
塩を提供することができ、前述したような作用効果によ
り種々の用途に用いることができる。なかでも特に、ア
ンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤として、もしくはその
有効成分として有効に用いることができる。

【００４１】

【配列表】 ＳＥＱＵＥＮＣＥ ＬＩＳＴＩＮＧ ＜１１０＞ 新田ゼラチン株式会社（Ｎｉｔｔａ Ｇｅｌａｔｉｎ Ｉｎｃ．） ＜１１０＞ 独立行政法人産業技術総合研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉ ｔｕｔｅ ｏｆ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ） ＜１２０＞ アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤（Ａｎｇｉｏｔｅｎｓｉｎ Ｉ −Ｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇ Ｅｎｚｙｍｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ） ＜１３０＞ ０２０５６ＪＰ ＜１６０＞ １０ ＜２１０＞ １ ＜２１１＞ ５ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜２２０＞ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （３） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜４００＞ １ Gly Phe Pro Gly Pro 1 5 ＜２１０＞ ２ ＜２１１＞ １０ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ ＜４００＞ ２ Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Phe His Leu 1 5 10 ＜２１０＞ ３ ＜２１１＞ ８ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ ＜４００＞ ３ Asp Arg Val Tyr Ile His Pro Phe 1 5 ＜２１０＞ ４ ＜２１１＞ ９ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜２００＞ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （３） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （９） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜４００＞ ４ Gly Pro Pro Gly Thr Asp Gly Ala Pro 1 5 ＜２１０＞ ５ ＜２１１＞ ６ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜２００＞ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （３） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （６） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜４００＞ ５ Gly Pro Pro Gly Ala Pro 1 5 ＜２１０＞ ６ ＜２１１＞ ６ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜２００＞ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （３） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （６） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜４００＞ ６ Gly Pro Pro Gly Pro Pro 1 5 ＜２１０＞ ７ ＜２１１＞ ６ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜２００＞ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （６） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜４００＞ ７ Gly Pro Ala Gly Ala Pro 1 5 ＜２１０＞ ８ ＜２１１＞ ６ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜２００＞ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （６） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜４００＞ ８ Gly Pro Pro Gly Ala Pro 1 5 ＜２１０＞ ９ ＜２１１＞ ９ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜２００＞ ＜２２１＞ ＨＹＤＲＯＸＹＬＡＴＩＯＮ ＜２２２＞ （９） ＜２２３＞ ４Ｈｙｐ ＜４００＞ ９ Gly Pro Ile Gly Ser Val Gly Ala Pro 1 5 ＜２１０＞ １０ ＜２１１＞ ９ ＜２１２＞ ＰＲＴ ＜２１３＞ Ｓｕｓ ＜４００＞ １０ Gly Pro Ala Gly Ala Pro Gly Ala Ala 1 5

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） // Ｃ１２Ｐ 21/06 Ａ６１Ｋ 37/02 (72)発明者 大塚 龍郎 大阪府八尾市二俣２丁目22番地 新田ゼラ チン株式会社大阪工場内 (72)発明者 山下 栄一 大阪府八尾市二俣２丁目22番地 新田ゼラ チン株式会社大阪工場内 (72)発明者 梶原 葉子 大阪府八尾市二俣２丁目22番地 新田ゼラ チン株式会社大阪工場内 Ｆターム(参考） 4B064 AG21 CA01 CA21 CB02 CC01 CD20 DA01 DA10 4C084 AA02 AA06 BA01 BA14 BA15 BA23 BA44 CA59 DA40 NA14 ZA422 ZC202 4H045 AA10 AA20 AA30 BA13 BA14 BA15 CA40 DA57 EA23 FA70 FA73

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】配列番号１、Ｉｌｅ−Ａｌａ、Ｇｌｙ−Ｐ
   ｒｏ−Ａｒｇ、Ａｌａ−Ａｒｇ、Ｖａｌ−Ａｒｇおよび
   Ｖａｌ−Ａｒｇ−Ｇｌｙで表されるアミノ酸配列からな
   るペプチドおよびその塩からなる群より選ばれる少なく
   とも１つを有効成分として含む、アンジオテンシンＩ変
   換酵素阻害剤。
2. 【請求項２】コラーゲンおよび／またはゼラチンを黄色
   コウジカビ由来プロテアーゼにより加水分解して得られ
   るペプチドを含んでなる、アンジオテンシンＩ変換酵素
   阻害剤。
3. 【請求項３】コラーゲンおよび／またはゼラチンのブロ
   メライン加水分解物を発酵させて得られるペプチドを含
   んでなる、アンジオテンシンＩ変換酵素阻害剤。
4. 【請求項４】配列番号１、Ａｌａ−ＡｒｇおよびＶａｌ
   −Ａｒｇ−Ｇｌｙのいずれかで表されるアミノ酸配列か
   らなるペプチドまたはその塩。