WO2006004109A1 - リパーゼ阻害剤 - Google Patents

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WO2006004109A1
WO2006004109A1 PCT/JP2005/012392 JP2005012392W WO2006004109A1 WO 2006004109 A1 WO2006004109 A1 WO 2006004109A1 JP 2005012392 W JP2005012392 W JP 2005012392W WO 2006004109 A1 WO2006004109 A1 WO 2006004109A1
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lipase
lipase inhibitor
food
epicatechin
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Masaaki Nakai
Yuko Fukui
Sumio Asami
Fumio Hashimoto
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Suntory Limited
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    • C07D311/58—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4
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    • C07D311/62—Benzo[b]pyrans, not hydrogenated in the carbocyclic ring other than with oxygen or sulphur atoms in position 2 or 4 with aryl radicals attached in position 2 with oxygen atoms directly attached in position 3, e.g. anthocyanidins

Definitions

  • the present invention provides a lipase inhibitor containing proanthocyanidins derived from tea.
  • Obesity is one of the most serious diseases in modern society, the main factor of which is fat overdose. Moreover, it is known that excessive intake of fat causes not only obesity but also diabetes, diabetes, hyperlipidemia, hypertension, arteriosclerosis and the like caused by obesity.
  • the only appetite suppressant, Mazindol (registered trademark) has been approved in Japan as a treatment for obesity, but side effects such as roar, constipation, stomach discomfort, nausea and vomiting have been reported ( Clinical evaluation 1985; 13 (2): 419-459, clinical evaluation 1985; 13 (2): 46 to 515).
  • plant-derived lipase-inhibiting active substances have recently attracted attention, and in particular, polyphenols having lipase-inhibiting activity are derived from plant bark-derived tannin (Japanese Patent Publication No. 60-11912), leguminous plant power wallakeme Tannins and flavonoids and their glycosides contained in food (Japanese Patent Laid-Open No. 8-259557), lipid absorption-suppressing foods containing the main ingredients of green tea, epicarocatechin gallate and epicatechin gallate (Japanese Patent Laid-Open No.
  • Lipase inhibitors consisting of water extracts such as bell pepper, shimeji mushroom, pumpkin, maitake, hijiki, green tea, oolong tea, etc. (JP-A-3-219872), flavones and flavonols (JP-A-7-61927) hydroxybenzoic acids (Gallic acid) (JP-A 1-102022), triterpene compounds and derivatives thereof (JP-A 9-40689), tamarind procyanidins as active ingredients Anti-obesity agents (Japanese Patent Publication No.
  • Patent Document 1 JP-B-60-11912
  • Patent Document 2 JP-A-8259557
  • Patent Document 3 JP-A-3-228664
  • Patent Document 4 JP-A-3-219872
  • Patent Document 5 JP-A-7-61927
  • Patent Document 6 Japanese Unexamined Patent Publication No. 1-102022
  • Patent Document 7 JP-A-9-40689
  • Patent Document 8 JP-A-9-291039
  • Non-patent document 1 Summary of the 1999 National Nutrition Survey by the Ministry of Health, Labor and Welfare
  • Non-Patent Document 2 Clinical Nutrition 2001; 98 (5): 577-588
  • Non-Patent Document 3 Clinical Evaluation 1985; 13 (2): 419-459, Clinical Evaluation 1985; 13 (2): 461-515
  • Non-Patent Document 4 Lancet 1998; 352: 67-172
  • Non-Patent Document 5 J. Nutr. 1988; 128: 56-60, 1988
  • Non-Patent Document 6 Japanese Clinical Journal of Food Science 1999; 52 (2): 71-77
  • Non-Patent Document 7 Health and Nutrition Food Research 2002; 5 (3): 131-144
  • Non-Patent Document 8 J. Am. Coll. Nutr. 2000; 19 (6): 789-796
  • Non-Patent Document 9 Clin. Chim. Acta. 2001; 11 (2): 109-117
  • Non-Patent Document 10 Nutrition 2003; 19 (10): 876-879
  • Non-Patent Document 11 J. Nutr. 2002; 132: 1819-1824
  • Non-Patent Document 12 Int. J. Obes. 1999; 23: 98-105
  • Non-Patent Document 13 Japanese Nutrition ⁇ Journal of Food Science 1991; 44 (4): 251-259
  • Non-Patent Document 14 Journal of Japanese Society of Clinical Nutrition 1998; 20 (1): 83-90
  • Non-Patent Document 15 Chem. Pharm. Bull 1983; 31 (11): 3906-3914
  • Non-Patent Document 16 Chem. Pharm. Bull 1989; 37 (1): 77-85
  • the present invention provides a lipase inhibitor containing at least one proanthocyanidins originating from tea, focusing on components contained in tea with high palatability.
  • the present invention further provides foods and drinks to which the above lipase inhibitor is added, have high palatability, and aim to reduce neutral fat in blood clots and promote health.
  • the present invention further provides a pharmaceutical composition comprising the lipase inhibitor, which suppresses the absorption of diet-derived fat and suppresses an increase in blood neutral fat.
  • the lipase inhibitor of the present invention has the following formula:
  • the proanthocyanidins of the present invention are obtained from natural materials such as commercially available green tea, black tea, oolong tea, and the like, for example, Chem. Pharm. Bull. 1983; 31 (11): 3906-3914, 1983 or Chem. Pharm. Bull. 1989; 37 (1): 77-85.
  • Lipase inhibitor The proanthocyanidins of the present invention can be used alone as a lipase inhibitor without containing other components, or can be used as a lipase inhibitor together with a solvent or a solid carrier.
  • the solvent or carrier is preferably one that can be safely used as a food or medicine in consideration of the use as the following food and drink and / or medicine.
  • the lipase inhibitor of the present invention has various uses, and examples thereof include use as an active ingredient in foods and pharmaceuticals for testing and research, preventing the accumulation of neutral fat. Lipase ⁇ . Harm ⁇ Cattle measurement method
  • the lipase inhibitor of the present invention has a strong inhibitory action on lipases, particularly knee lipases.
  • the inhibitory activity can be measured by the method specifically described in Example 1.
  • a lipase inhibitor containing the proanthocyanidins of the present invention is added to food and drink as a lipase inhibitory active ingredient to prevent an undesired increase in blood neutral fat accompanying intake of fat in dietary power, And / or elevated blood neutral fat can be reduced.
  • the food and drink are food and drink taken on a daily basis, for example, green tea, barley tea, oolong tea, black tea, coffee, sports drink, drinking water, seasoning, and dressing.
  • drinks and drinks are usually soft drinks, cocktails, beer, whiskey, shochu, wine, sake, seasonings, dressing, seasoned rice, processed foods, instant foods, lemonade foods, chocolate, raw Creams, pastries, dairy products, health foods, supplements, etc.
  • the amount of the lipase inhibitor of the present invention added to food and drink is added so that the intake of proanthocyanidins per meal is 0.1 mg to 10 g.
  • the proanthocyanidins of the present invention are derived from food, there is no substantial upper limit to the amount added to foods and beverages that are very safe.
  • the lipase inhibitor containing the proanthocyanidins of the present invention is an active ingredient of a drug for suppressing the absorption of diet-derived fat, preventing and increasing Z of blood neutral fat, and lowering it.
  • a drug for suppressing the absorption of diet-derived fat, preventing and increasing Z of blood neutral fat, and lowering it can also be used.
  • Preferred drugs are those that are administered orally, such as drinks lj, tablets, capsules, granules, powders, candy, drops Agents and the like.
  • the amount of the compound of the present invention contained in the drug is 0.1 mg to 10 g per single dose
  • the pharmaceutical product of the present invention is safe even if it is taken for a long time because the lipase-inhibiting component is highly safe. Therefore, it can be taken on a daily basis to prevent or eliminate obesity as a lifestyle-related disease.
  • the purpose of the present invention is to add a lipase inhibitor containing at least one proanthocyanidins derived from tea leaves, and to have high palatability without sacrificing flavor, to reduce neutral fat, and to promote health. Can be provided.
  • beverages with enhanced active ingredients obtained from tea that should be taken with meals are significant.
  • by enhancing these ingredients it has become possible to develop tea that can reduce neutral fat.
  • FIG. 1 shows the chemical structural formula of the compound subjected to the evaluation of lipase inhibitory activity in Example 2.
  • the lipase activity was measured by using the fluorescent 4-methylumbelliferone oleate (4-UMO) as the substrate and measuring the fluorescence of the 4-methylumbelliferone produced by the reaction. Carried out.
  • the buffer solution was 13 mM Tris-HCl (p) containing 150 mM NaCl and 1.36 mM CaCl.
  • the substrate 4-UMO manufactured by Sigma
  • the lipase was porcine lipase (manufactured by Sigma) in the same manner. What was prepared as a 400 U / ml solution using the above buffer solution was subjected to enzyme measurement.
  • the enzyme reaction is 25. Under C condition, add 50 ⁇ l 4-UMO buffer solution and 25 ⁇ l distilled water (or sample aqueous solution) to 96-well microplate, mix, then add 25 ⁇ l lipase buffer solution To get started. After reacting for 30 minutes, 100 ⁇ 0.1M citrate buffer ( ⁇ 4.2) was added to stop the reaction, and it was generated by the reaction. The fluorescence (excitation wavelength: 355 nm, fluorescence wavelength: 460 nm) of the 4-methylumbelliferone was measured using a fluorescence plate reader (Fluoroskan Asent CF manufactured by Labsystems).
  • the inhibitory activity of the test sample was determined as the amount of sample I C ( ⁇ ) that gave 50% inhibition over the activity of the control (distilled water).
  • Control compounds catechin (5), epicatechin (1), gallocatechin (7), epigallocatechin (3), force techin gallate (6), epicatechin gallate (2), gallocatechin gallate (8), epigallocatechin gallate ( 4) was purchased from Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
  • proanthocyanidins of the present invention were obtained by the method described in the following paper. Chem. Pharm.
  • proanthocyanidins those having a gallate group in the structure, in particular, a dimer containing an EGCG unit, has been found to have stronger activity and lipase inhibitory activity than EGCG itself.
  • procyanrdin B-2 (9) 7.958 procyantdrn B-3 (1) 2.941 prodelphinidin A one 2 3 'one O-gallate (1 1) 0.171 prodelphinidin B-2 (12) 2.951 prodelphinidin B-2 3 -O-gallate (13 ) 1.969 prodelphinidin B-2 3,3'-di-0-ga1late (14) 0.107 prodelp injdin B-4 (15) 6.230 prodelphinidin B—4 3 -O-gallate (16) 0.223 prodelphinidin B-5 3,3 ' —Di— 0-gallate (17) 0.558

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Description

明 細 書
リパーゼ阻害剤
技術分野
[0001] 本発明は、茶由来のプロアントシァニジン類を含むリパーゼ阻害剤を提供する。
背景技術
[0002] 近年、 日本人の生活様式の欧米化に伴い、高脂肪食の摂取が増加の一途をたど つている。平成 11年国民栄養調査によると、エネルギー摂取量は年々減少している にもかかわらず、その脂質エネルギー比は適正比率である 25%を超え、中性脂肪値 やコレステロール値が高い人の割合は 60歳以上で 5〜6割に認められたとの報告があ る (厚生労働省平成 11年国民栄養調査結果の概要臨床栄養 2001 ; 98(5): 577-58 8)。
[0003] 肥満は現代社会における最も重大な疾患の 1つであるが、その主たる要因は脂肪 の過剰摂取である。また、脂肪の過剰摂取は、肥満のみならず、肥満に起因する糖 尿病、高脂血症、高血圧、動脈硬化等を発症させることが知られている。この肥満に 対する治療薬として、国内では、食欲抑制剤のマジンドール (登録商標)が唯一承認 されているが、ロ渴、便秘、胃部不快感、悪心'嘔吐等の副作用が報告されている（ 臨床評価 1985; 13(2): 419-459、臨床評価 1985; 13(2): 46ト 515)。また、海外にお いては、リパーゼ阻害活性により腸管からの脂肪吸収の抑制作用を持つゼニカル (登 録商標)が肥満改善薬として市販されているが、やはり脂肪便、排便数の増加、軟便 、下痢、腹痛等の副作用が報告され、必ずしも安全とは言いがたい（Lancet 1998; 35 2: 67-172)。
[0004] 肥満を予防するためには、食事制限により摂取カロリーを減らすことが有効な手段 ではあるものの、しつ力りとした栄養指導を受けなければならず、 日常生活において の実行は困難である場合が多い。そこで、食事由来の脂肪が体内に吸収されること を安全かつ健康的に抑制することは、肥満及びそれに関連する疾患の治療あるいは 健康増進の目的で、現実的で有用な方策であると考えられる。
[0005] このような背景のもと、安全でかつヒトに対する有効性が証明されている特定保健用 食品の開発が注目されている。今までに食後の血清中性脂肪値の上昇を抑える食 品素材としては、膝リパーゼ阻害により脂肪吸収を抑制するグロビン蛋白分解物 (J.
Nutr. 1988; 128: 56-60、 日本臨床 ·食糧学会誌 1999; 52(2): 71-77、健康 ·栄養食 品研究 2002; 5(3): 131-144)、トリァシルグリセロールとは異なる消化吸収特性を持 っジァシルグリセロール（J. Am. Coll. Nutr. 2000; 19(6): 789-796、 Clin. Chim. Acta. 2001; 11(2): 109-117)、魚油より精製されたエイコサペンタエン酸（EPA)、ドコサへ キサェン酸 (DHA)などが特定保健用食品として発売されている。
[0006] 一方、植物由来のリパーゼ阻害活性物質も最近注目されつつあり、特に、リパーゼ 阻害活性を有するポリフエノール類に関しては、植物樹皮由来のタンニン (特公昭 60 -11912)、マメ科植物力ワラケッメイに含まれるタンニン類ゃフラボノイド類およびその 配糖体 (特開平 8-259557)、緑茶中の主要な成分ェピガロカテキンガレートおよびェ ピカテキンガレートを配合した脂質吸収抑制食品（特開平 3-228664)、ピーマン、シメ ジ、かぼちゃ、まいたけ、ひじき、緑茶、ウーロン茶、などの水抽出物からなるリパーゼ 阻害剤（特開平 3-219872)、フラボンおよびフラボノール類（特開平 7-61927)ヒドロキ シ安息香酸類 (没食子酸）（特開平 1-102022)、トリテルペン類化合物およびその誘 導体（特開平 9-40689)、タマリンドのプロシア二ジンを有効成分とする抗肥満剤（特 開平 9-291039)などが報告されており、またブドウ種子抽出物のリパーゼ阻害作用 (N utrition 2003; 19(10): 876-879)、サラシァ由来ポリフエノールによるリパーゼ阻害作 用とラットの抗肥満作用 (J. Nutr. 2002; 132: 1819-1824)、ウーロン茶抽出物によるマ ウスの抗肥満作用 (Int. J. Obes. 1999; 23: 98-105)などが知られている。
[0007] し力 ながら、上に示した既報の植物由来のリパーゼ阻害剤は、効果が十分なもの とはいえない。例えば、ある植物の抽出物で効果があつたとしても、その中に含まれ る活性成分量を明確にしない限り、天然物が起源であるので、安定的にリパーゼ阻 害活性を維持させることは困難である。また、嗜好性の低い植物由来の阻害剤の場 合、飲食物として利用するには、香味に影響を及ぼすという問題がある。例えば、ゥ 一ロン茶の脂質改善効果を示した報告には、市販ウーロン茶を 1日 1330mlずつ 6週 間飲用させ、血中中性脂肪値の有意な低下が認められたとの報告（日本栄養 ·食糧 学会誌 1991; 44(4): 251-259)や、単純性肥満症の男女 102名を対照に、ウーロン茶 (2g X 4/日）を 6週間連続経口摂取させた結果、 67 %の被験者に 1kg以上の体重減 少が認められ、さらに、血中中性脂肪値が高値を示した被験者においてウーロン茶 摂取後に有意な改善効果が認められたとの報告（日本臨床栄養学会雑誌 1998; 20(
1): 83-90)がある。このようにウーロン茶の大量飲用では効果が認められているもの の、 日常生活のなかで続けていくことは難しい。また、単純に濃縮したウーロン茶を提 供したとしても、苦味'渋味が強ぐカフヱイン量も増えることより、現実的な方策として 適当ではない。
特許文献 1 :特公昭 60-11912
特許文献 2：特開平 8-259557
特許文献 3：特開平 3-228664
特許文献 4：特開平 3-219872
特許文献 5 :特開平 7-61927
特許文献 6 :特開平 1-102022
特許文献 7 :特開平 9-40689
特許文献 8：特開平 9-291039
非特許文献 1：厚生労働省平成 11年国民栄養調査結果の概要
非特許文献 2 :臨床栄養 2001; 98(5): 577-588
非特許文献 3 :臨床評価 1985; 13(2): 419-459、臨床評価 1985; 13(2): 461-515 非特許文献 4 : Lancet 1998; 352: 67-172
非特許文献 5 : J. Nutr. 1988; 128: 56-60, 1988
非特許文献 6 :日本臨床 ·食糧学会誌 1999; 52(2): 71-77
非特許文献 7 :健康 ·栄養食品研究 2002; 5(3): 131-144
非特許文献 8 : J. Am. Coll. Nutr. 2000; 19(6): 789-796
非特許文献 9 : Clin. Chim. Acta. 2001; 11(2): 109-117
非特許文献 10 : Nutrition 2003; 19(10): 876-879
非特許文献 11 : J. Nutr. 2002; 132: 1819-1824
非特許文献 12 : Int. J. Obes. 1999; 23: 98-105
非特許文献 13 :日本栄養 ·食糧学会誌 1991; 44(4): 251-259 非特許文献 14 :日本臨床栄養学会雑誌 1998; 20(1): 83-90
非特許文献 15 : Chem. Pharm. Bull 1983; 31(11): 3906-3914
非特許文献 16 : Chem. Pharm. Bull 1989; 37(1): 77-85
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
[0008] 本発明は、嗜好性が高い茶に含まれる成分に着目し、茶に起源を発するプロアント シァニジン類の少なくとも一種を含むリパーゼ阻害剤を提供する。
[0009] 本発明はさらに、上記リパーゼ阻害剤が添加され、嗜好性が高くて、かっ血中の中 性脂肪低減、健康増進を目的とした飲食料を提供する。
[0010] 本発明はさらに、上記リパーゼ阻害剤を含み、食事由来の脂肪の吸収を抑制し、 血中中性脂肪の上昇を抑える医薬組成物を提供する。
課題を解決するための手段
[0011] 上記課題を解決する手段として、茶より脂肪吸収に必須な膝リパーゼを阻害する成 分を見出し、そこに存在する種々のポリフエノールのリパーゼ阻害活性を評価し、プ 口アントシァニジン類、特にガレート基を有するプロアントシァニジン類に強いリパー ゼ阻害活性があることを突き止めた。
[0012] より具体的には、本発明のリパーゼ阻害剤は、次式：
[0013] [化 1]
Figure imgf000007_0001
[0014] (式中、 Rおよび Rはそれぞれ独立に Hまたは〇Hであり、 Rおよび Rはそれぞれ独
1 2 3 4
立に Hまたはガロイル基である）
で表される、プロアントシァニジン類の少なくとも一種を含むことを特徴とする。なお、 ガロイル基 Gの構造式は、
[0015] [化 2]
Figure imgf000007_0002
[0016] である。
[0017] 本発明のプロアントシァニジン類は、市販緑茶、紅茶、ウーロン茶等の天然材料か ら、例えば、 Chem. Pharm. Bull. 1983; 31(11): 3906-3914, 1983または Chem. Pharm . Bull. 1989; 37(1): 77-85に記載の方法で抽出 ·精製することができる。
リパーゼ阻害剤 本発明のプロアントシァニジン類は、他の成分を含まずに単独でリパーゼ阻害剤と して使用することもでき、または溶媒や固体担体とともにリパーゼ阻害剤として使用す ることが可能である。溶媒または担体は、下記飲食料および/または医薬品としての 使用を考えて、食品としてまたは医薬品として安全に使用できるものであることが好ま しい。本発明のリパーゼ阻害剤は種々の用途を有し、例えば試験研究用、中性脂肪 の蓄積を予防するための食品、医薬品の有効成分としての使用が例示される。 リパーゼ阳.害 †牛測定方法
本発明のリパーゼ阻害剤は、リパーゼ、特に膝リパーゼに対する強い阻害作用を 有する。その阻害活性は、実施例 1に具体的に記載する方法で測定できる。
1Jパーゼ阳.害剤含有飲食料
本発明のプロアントシァニジン類を含むリパーゼ阻害剤を、リパーゼ阻害活性成分 として飲食料に添加して、食事力 の脂肪分の摂取に伴う血中中性脂肪の望ましくな い上昇を防止し、および/または上昇した血中中性脂肪を低減させることができる。 飲食料の好ましい例は、 日常的に摂取する飲食料、例えば、緑茶、麦茶、ウーロン茶 、紅茶、コーヒー、スポーツドリンク、飲料水、調味料、ドレッシングである。しかし飲食 料は、通常食するものであればよぐ清涼飲料、カクテル、ビール、ウィスキー、焼酎 、ワイン、清酒、調味料、ドレッシング、味付け米、加工食品、インスタント食品、レトノレ ト食品、チョコレート、生クリーム、洋菓子、乳製品、健康食品、サプリメント等であって ちょい。
飲食料に対する本発明のリパーゼ阻害剤の添カ卩量は、 1食あたりのプロアントシァ 二ジン類の摂取量が 0.1mg〜10gとなるよう添加する。ただし、本発明のプロアントシァ 二ジン類は、食品に由来するため、安全性が非常に高ぐ飲食料に対する添加量に 実質的上限はない。
リパーゼ阳.害剤含有医薬品
本発明のプロアントシァニジン類を含むリパーゼ阻害剤は、食事由来の脂肪の吸 収を抑制し、血中中性脂肪の望ましくない上昇を防止および Zまたは低下させるた めの薬剤の有効成分としても使用できる。好ましい薬剤は、経口投与される薬剤であ り、その例として、ドリンク斉 lj、錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、キャンデー、ドロップ 剤等があげられる。薬剤に含まれる本発明の化合物の量は、 1回服用量当たり、 0.1m g〜10gである
[0019] 本発明の医薬品は、リパーゼ阻害成分の安全性が高いため、長期間にわたって服 用しても安全である。したがって、生活習慣病としての肥満の防止または解消のため に、 日常的に服用することも可能である。
発明の効果
[0020] 本発明は、茶葉に由来するプロアントシァニジン類の少なくとも一種を含むリパーゼ 阻害剤を添加し、香味を損なうことなぐ嗜好性の高くて、かつ中性脂肪低減、健康 増進を目的とした飲食料が提供できる。食事性脂肪の吸収を抑えるためには、食事 とともに摂取することが望ましぐ茶から得られた有効成分を強化した飲料は意義が 大きい。特に、これらの成分を増強する事により、中性脂肪を低減できるお茶の開発 が可能になった。
図面の簡単な説明
[0021] [図 1]実施例 2でリパーゼ阻害活性の評価に供した化合物の化学構造式を示す。
実施例
[0022] 実施例 1 リパーゼ阻害活性の測定
リパーゼ活性の測定は、基質に蛍光性の 4—メチルゥンベリフエロンのォレイン酸ェ ステル（4-UMO)を使用し、反応によって生成した 4—メチルゥンベリフエロンの蛍光 を測定することにより実施した。
[0023] 測定にあたり、緩衝液は、 150 mM NaCl、 1.36mM CaClを含む 13 mM Tris-HCl (p
H 8.0)を用いた。基質である 4-UMO (Sigma社製）は 0.1Mの DMSO溶液として調製し たものを上記緩衝液で 1000倍希釈したものを、また、リパーゼはブタ陴リパーゼ（Sigm a社製）を同様に上記緩衝液を用い 400U/ml溶液として調製したものを酵素測定に供 した。
[0024] 酵素反応は、 25。C条件下において、 96穴マイクロプレートに 50 μ 1の 4-UMO緩衝 液溶液、 25 μ ΐの蒸留水（あるいは試料水溶液）を添加し混合した後に、 25 μ ΐのリ パーゼ緩衝液溶液を添加することにより開始させた。 30分間反応を行った後に、 100 μ ΐの 0.1Mクェン酸緩衝液 (ρΗ 4.2)を添加して反応を停止させ、反応によって生成 した 4ーメチルゥンベリフエロンの蛍光（励起波長 355nm、蛍光波長 460nm)を蛍光プ レートリーダー（Labsystems社製 Fluoroskan Asent CF)を用い測定した。
[0025] 被験試料の阻害活性は、対照 (蒸留水）の活性に対して 50%阻害を与える試料量 I C ( μ Μ)として求めた。
測定サンプル
対照化合物のカテキン（5)、ェピカテキン（1)、ガロカテキン（7)、ェピガロカテキン（ 3)、力テキンガレート（6)、ェピカテキンガレート（2)、ガロカテキンガレート（8)、ェピ ガロカテキンガレート (4)は和光純薬 (株）より購入した。
[0026] 本発明のプロアントシァニジン類は下記論文に記載の方法で得た。 Chem. Pharm.
Bull. 1983; 31(11): 3906-3914， Chem. Pharm. Bull. 1989; 37(1): 77-85。概略を述べ ると、ウーロン茶葉を 80%アセトンにて抽出した後、アセトンを除去し、酢酸ェチルにて 溶媒分画を行った。酢酸ェチル層をセフアデックス LH-20 (フアルマシア社製）にて、 水、メタノール、 50%アセトンを用いて分画を行い、次いで、各分画物をダイアイオン H P-20 (三菱化学社製）に吸着させ、水 メタノール系で溶出させ、再度、セフアデッ L H-20 (フアルマシア社製）を用いて精製した。
実施例 2 カテキン類およびそれらの 2量体 (プロアントシァニジン類）のリパーゼ阻害 活性
茶の主要なポリフエノールであるカテキン類（単量体）およびカテキン類が重合した プロアントシァニジン類について、実施例 1の方法に従ってリパーゼ阻害活性を測定 した。その結果を表 1に示した。なお、図 1には評価に供した化合物の化学構造式を 記載した。茶に存在している主要なカテキン類 (8種類）のなかでリパーゼ阻害活性を 示したものは、没食子酸がエステル結合しているフラバン _3_オールであった。特に 茶に多く含まれるェピガロカテキンガレート（EGCG)は主要なカテキン類の中で最も 強い活性を示した。
[0027] プロアントシァニジン類では、構造内にガレート基を有するもの、特に EGCGユニット を含む 2量体が EGCGそのものよりも強レ、リパーゼ阻害活性を有することが判明した。
[0028] [表 1] 表 1.茶由来ポリフエノールのリパーゼ阻害作用
ボリフエノール
フラバンー3—オール
(-) -epicatechin (1 ) >2f .6
(-y-epicatechin 3-O-gallate (2) 0.271
(-) -epigallocatechin (3) >20.4
(-) -epigallocatechin 3-O-gallate (4) 0.284
(+)-catechin (5) >690
(-) -catechin 3-O-gallate (6) 0.846
(+)-gallocatechin (7) >163
(-) -gallocatechtn 3-O-gallate (8) 0.349 プロシア二ジン類
procyanrdin B - 2 (9) 7.958 procyantdrn B - 3 (1 ) 2.941 prodelphinidin A一 2 3'一 O-gallate (1 1 ) 0.171 prodelphinidin B-2 (12) 2.951 prodelphinidin B-2 3 -O-gallate (13) 1.969 prodelphinidin B-2 3,3'-di-0-ga1late (14) 0.107 prodelp injdin B - 4 (15) 6.230 prodelphinidin B—4 3 -O-gallate (16) 0.223 prodelphinidin B-5 3,3'—di— 0 - gallate (17) 0.558
(-) -epicatechin (4 β -8) (-) -epigallocatechin 3-O-gallate (18) 0.147
(-) -epicatechin 3-O-gallate (4 β -8) (-) -epigallocatechin 3-0-gaJlate (19) 0.846
(-) -epigallocatechin (4 β -8) (-) -epicatechin 3-O-gaflate (20) 0,913
(-) -epigallocatechin 3-O-gallate (4 8) epicatechin 3-O-gallate (21 ) 0.612
(+)- catechin (4 - 8) (-) -epigallocatechin (22) 7,912
(+)-catec in (4な 8) epigallocatechin 3-O-gallate (23) 0,174
(+)-gallocatechin (4 Of -8) (-) -epicatechin (24) 2.862 以上の結果より、茶には主要なカテキン類 (8種)の他にも、非常に強い活性を有す る 2量体が存在することが明らカ^なつた。

Claims

Figure imgf000012_0001
(式中、 Rおよび Rはそれぞれ独立に Hまたは〇Hであり、 Rおよび Rはそれぞれ独
1 2 3 4
立に Hまたはガロイル基である）
で表される、プロアントシァュジン類の少なくとも一種を含むリパーゼ阻害剤。
[2] プロアントシァニジン類が、
プロシア二ジン B-2、
プロシア二ジン B_3、
プロデルフィ二ジン A- 2 3，- 0 -ガレート、
プロデルフィ二ジン B- 2、
プロデルフィ二ジン B- 2 3，- 0-ガレート、
プロデルフィ二ジン B- 2 3，3'_ジ _0 -ガレート、
プロデルフィ二ジン B- 4、
プロデルフィ二ジン B- 4 3，_0-ガレート、 プロデルフィ二ジン B- 5 3，3'_ジ _0 -ガレート、
(-) -ェピカテキン (4 β -8)(_) -ェピガロカテキン 3-0-ガレート、
(-) -ェピカテキン 3-0-ガレート (4 j3 _8)(-)-ェピガロカテキン 3-0-ガレート、 (-) -ェピガロカテキン (4 β _8)(_)-ェピカテキン 3-0-ガレート、
(-) -ェピガロカテキン 3-0 -ガレート (4 /3 -8)(_) -ェピカテキン 3-0-ガレート、 (+)-カテキン (4 α - 8)(-)_ェピガロカテキン、
(+)-カテキン (4ひ _8)(-)-ェピガロカテキン 3-0-ガレート、および
(+)-ガロカテキン (4 a -8)(-)_ェピカテキン、
力もなる群から選択される、請求項 1のリパーゼ阻害剤。
[3] 請求項 1または 2記載のリパーゼ阻害剤を添加した飲食料。
[4] 飲食料が、茶飲料、清涼飲料および健康食品からなる群から選択される、請求項 3 記載の飲食料。
[5] 請求項 1または 2記載のリパーゼ阻害剤を含有する医薬組成物。
[6] 食事由来の脂肪の吸収を抑制するための、請求項 5の医薬組成物。
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