WO2005107769A1 - 口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤 - Google Patents

口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤 Download PDF

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oral
gandarioside
food
bacteria
antibacterial
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Hiroshi Kawakami
Nobuhiro Hanada
Susumu Imai
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Snow Brand Milk Products Co., Ltd.
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    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses

Definitions

  • the present invention relates to an oral microflora improving agent, an antibacterial agent, and a growth promoting agent containing gandarioside as an active ingredient.
  • the present invention relates to a food or drink or feed containing a gandarioside for improving the oral flora, for antibacterial use, and for promoting growth.
  • Antibacterial ingredients that prevent caries include bactericides such as chlorhexidine, antibiotics, and non-on (non-ionic) di-on (anionic) surfactants.
  • Literatures 1 to 4 refer.
  • antimicrobial component is also intended to combine the side effects such as toxicity, also or exhibit an unpleasant bitter taste upon oral intake, the disadvantage of teeth and mouth ⁇ film is colored Some have.
  • ingredients used as foods such as tea catechins and polyphenol-containing compounds derived from various plants, are used as active substances.
  • Streptococcus mutans SWhens y / 'nkino ⁇ sus (Streptococcus anginosus), Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus) and the like are known, and useful bacteria such as Streptococcus mitis (Streptococcus mitis) are known.
  • Streptococcus sobrinus (Streptococcus sobrinus) is known as a cariogenic bacterium, and its harm is a bacterium that is regarded as a problem in the clinical field as a cause of caries that is stronger than Streptococcus mutans (Streptococcus mutans). is there.
  • Streptococcus anginosus is often detected in the oral cavity of esophageal cancer patients, suggesting that it may be a causative organism of esophageal cancer.
  • Staphylococcus aureus (Staphylococcus aureus), which is widely known as a pathogen of various abscesses, causes complications such as reduced immunity and pneumonia associated with viral infections such as influenza. It is said that it can directly cause seriousness and death.
  • Streptococcus mitis is a resident bacterium that is generally resident in the oral cavity, and is said to make up 80% of the oral bacterium. It is known to be an important bacterial species.
  • the present invention relates to an oral flora-improving agent and a food, drink, or feed for improving oral flora comprising gandarioside as an active ingredient.
  • Gandarioside is known to protect against infection by antagonistically inhibiting the attachment of viruses, bacteria, bacterial toxins, etc. to the mucous membranes of the trachea and gastrointestinal tract.
  • gandarioside itself has an antibacterial action, and even more, it has an antibacterial action against harmful bacteria in the oral cavity and a growth promoting effect on useful bacteria in the oral cavity. The combination is based on entirely new knowledge.
  • the present inventors have filed an invention for obtaining a prophylactic and ameliorating effect on periodontal disease using a compound having a sphingosine skeleton as an active ingredient. See Reference 5. 0 )
  • This compound having a sphingosine skeleton also contains gandarioside.
  • the present invention has found that a compound having a sufingosine skeleton has an effect of inhibiting the bone resorption action of osteoclasts, and has an effect of preventing periodontal disease by suppressing alveolar bone loss.
  • gandriside has an antibacterial effect, further has an antibacterial effect against harmful bacteria in the oral cavity, and has a growth promoting effect on resident useful bacteria in the oral cavity. It is different from the oral flora improving agent that we have.
  • the aforementioned bactericides, antibiotics and surfactants having an antibacterial active ingredient suppress the growth of almost all bacteria present in the oral cavity, and have an excellent bactericidal effect.
  • Recent research has also revealed the problem of severely destroying. When the growth of useful oral bacteria, which is usually predominant in the oral flora, is inhibited, the oral flora becomes unstable, which often leads to the growth of oral harmful bacteria.
  • bactericide with a broad antibacterial spectrum against various bacteria, it is possible to bring about a desirable effect on the living body by allowing all oral bacteria to be present in the oral cavity rather than killing them. Bacteria need to be useful as they are.
  • a mildly useful antibacterial agent is required for useful oral bacteria, which has an antibacterial activity against harmful bacteria in the oral cavity but has a growth promoting effect without inhibiting the growth of useful oral bacteria.
  • Patent document 1 JP-A-09-286712
  • Patent Document 2 Japanese Patent Application Laid-Open No. 11-147814
  • Patent Document 3 JP-A-09-240816
  • Patent Document 4 JP 2001-064163 A
  • Patent Document 5 Japanese Patent Application Laid-Open No. 2001-158735
  • Non-patent Document 1 Hiroshi Ishikawa et al., The Japanese Society of Periodontology, Vol. 45, No. 1, pp. 105-112, 2003
  • the present invention has an antibacterial effect on bacteria in oral cavity that do not kill all oral bacteria but are not desirable in terms of diseases such as caries and periodontal disease. It is an object of the present invention to provide an oral bacterial flora improving agent which forms a preferred bacterial flora in the oral cavity and has a food and drink for improving oral bacterial flora, which has a growth promoting effect on oral bacteria to be retained. . Another object of the present invention is to provide an antibacterial agent having an antibacterial activity against undesirable bacteria in the oral cavity, and an antibacterial food and drink. Another object of the present invention is to provide an oral bacterial growth promoter which has an oral bacterial growth-promoting action for oral bacteria to be retained, and an oral bacterial growth-promoting food or drink.
  • the present inventors have found that among oral bacteria, the ability to treat diseases such as dental caries and periodontal disease is desirable.
  • gandarioside which has been isolated and purified from mammalian milk, has such an effect, and completed the present invention.
  • gandarioside protects against infection by competitively inhibiting attachment of viruses, bacteria, bacterial toxins and the like to mucous membranes of the trachea and digestive tract.
  • gandarioside itself has an antibacterial effect, and even more, it has an antibacterial effect against harmful bacteria in the oral cavity and a growth promoting effect on useful bacteria in the oral cavity.
  • the combination is based on new knowledge.
  • the harmful bacteria in the oral cavity streptomycin Lactococcus. Sobrinus (Streptococcus sobrinus), Streptococcus Anginosa scan (Streptococcus anginosus), Staph Gray Lactococcus ⁇ , Wa les 1 É1 ⁇ 2 (Staphylococcus aureus), etc. are known
  • Streptococcus mitis Streptococcus mitis and the like are known.
  • the present invention relates to an oral bacterial flora improving agent containing gandarioside as an active ingredient.
  • the present invention relates to a food or drink or feed for improving oral bacterial flora, which contains gandarioside.
  • the present invention relates to an antibacterial agent having an antibacterial action against undesirable bacteria in the oral cavity, and a food and drink or feed for antibacterial use, comprising gandarioside as an active ingredient.
  • the antibacterial agent of the present invention and the food and drink or feed for antibacterial have an antibacterial action against harmful bacteria in the mouth 1S Since it has no antibacterial activity against useful bacteria in the oral cavity, it is extremely effective as an antibacterial agent and as a food or feed for antibacterial use.
  • the present invention relates to a growth promoting agent, which comprises a gandarioside as an active ingredient, and has a growth promoting action against oral bacteria to be left in the oral cavity, and a food or drink or feed for growth promotion.
  • the growth promoter of the present invention and the food / drink or feed for growth promotion have a growth promoting effect on useful bacteria in the oral cavity, but do not have a growth promoting effect on harmful bacteria in the oral cavity. Since it has an antibacterial effect, it is extremely effective as a growth promoter and a food or drink for growth promotion or feed.
  • gandarioside suppresses the growth of such harmful bacteria and promotes the growth of resident useful bacteria is extremely effective for maintaining the oral flora well, and is caused by oral bacteria. It can be linked to the prevention of various diseases. Therefore, it is possible to provide an oral bacterial flora improver containing ganarioside as an active ingredient, which has the effect of suppressing the growth of harmful bacteria and promoting the growth of resident useful bacteria by formulating ganariosides into a formulation. it can.
  • a food or drink or feed for improving oral bacterial flora can be provided by adding gandarioside to the food or drink.
  • the present invention can provide an antibacterial agent having an antibacterial activity against unwanted bacteria in the oral cavity, and a food and drink or feed for antibacterial use, comprising gandarioside as an active ingredient.
  • the present invention can provide a growth promoter which has a gandarioside as an active ingredient, and has a growth promoting effect on oral bacteria to be left, and a food or drink or feed for growth promotion.
  • the origin of the gandarioside according to the present invention is not particularly limited, but the oral flora improving agent or the oral flora improving food or drink or feed of the present invention, the antibacterial agent or the antibacterial food or drink or feed, Further, as a substance to be used as a growth promoter, a food or drink for growth promotion or a feed, it is desirable to use milk as a raw material in view of safety. Milk contains a large amount of gandarioside GD3. milk The method for preparing gandarioside or concentrating it to increase its content is not particularly limited. For example, it can be prepared as a fat globule membrane component by a method such as dialysis, ammonium sulfate fractionation, gel filtration, or isoelectric point precipitation. In addition,
  • a gandarioside-rich material can be prepared by preparing a digestion solution with a protease and performing gel filtration or ultrafiltration. Alternatively, it can be prepared by using a microfiltration membrane having a pore size of 0.1 m or less, or by treating with an ultrafiltration membrane having a molecular weight cut off of 100,000 Da or more (Japanese Patent Laid-Open No. 5-269353). Further, ganglioside GM3 can be prepared by hydrolyzing ganglioside GD3 (Japanese Patent Application Laid-Open No. 5-279379), or ganglioside GM3 can be prepared by allowing sialidase to act on ganglioside GD3.
  • an oral bacterial flora improving agent or a food or drink or feed for improving oral bacterial flora, an antibacterial agent or an antibacterial food or drink or feed, and a growth promoter or a growth promoting food or drink or food or feed.
  • gandarioside GD3 and gandarioside GM3 can be used as a mixture of both without any particular need.
  • the gandarioside-rich fraction containing gandarioside GT3 in addition to gandarioside GM3 and gandarioside GD3 is used as the oral flora-improving agent or the food / beverage or feed for improving oral flora of the present invention, and the antibacterial agent or antibacterial. It is preferable to use it for food and drink or feed, and for a growth promoter or a food and drink or feed for growth promotion in view of labor and cost for purification.
  • the oral bacterial flora improving agent, antibacterial agent and growth promoting agent of the present invention are used as a pharmaceutical
  • the form is not particularly limited, and the administration method and the type, shape and existence of the disease to be applied are not limited.
  • Various forms such as tablets, capsules, powders, granules, and drinks can be appropriately selected depending on conditions such as the site. Therefore, the oral microbiota improving agent, antibacterial agent and growth promoting agent of the present invention as described above can be used as a medicament as they are, and if necessary, various commonly used additives such as carriers and diluents. (Eg, sugars, starches, alcohols, etc.).
  • the oral flora improving agent, antibacterial agent and growth promoting agent according to the present invention include dentifrices such as toothpaste, powdered toothpaste, liquid dentifrice, mouthwash, gargle, oral pasta, and gingival mass. It can be prepared and used in various forms applied to the oral cavity, such as dicream, gargle tablets, troches and the like.
  • a paste-like composition such as toothpaste, sodium carboxymethinoresenololose, methinoresenololose, canoleboxy methinoles hydroxyethinoresenololose sodium, hydroxyethyl cellulose, sodium alginate, carrageenan, Binders such as gum arabic, xanthan gum, gum tragacanth, gum karaya, polybutyl alcohol, sodium polyacrylate, carboxybutyl polymer and polybutylpyrrolidone are usually added in an amount of 0.3 to 5%.
  • viscous materials such as polyethylene glycol, ethylene glycol, sorbitole, glycerin, propylene glycol, 1,3-butylene glycolone, xylit, multilit and lactit
  • the agents are usually incorporated in amounts of 10-70%.
  • essential oils such as peppermint and spearmint
  • flavoring materials such as 1-menthol, carvone, eugenol, and anethole
  • sweeteners such as saccharin sodium, stepioside, neohesveridyl dihydrochalcone, glycyrrhizin, perillartin, and ⁇ -methoxycinnamic aldehyde
  • saccharin sodium stepioside
  • neohesveridyl dihydrochalcone glycyrrhizin, perillartin, and ⁇ -methoxycinnamic aldehyde
  • preservative and a preservative are appropriately blended.
  • mutanase sorbic acid, alexidine, hinokitiol, cetylpyridi-dimethyl chloride, alkyl glycine, alkyl diaminoethyl glycine salt, allantoin, ⁇ -aminocaproic acid, tranexamic acid, azulene, vitamin ⁇
  • an active ingredient such as a second phosphate, a quaternary ammonium compound, sodium salt, a crude drug extract and the like can be added.
  • the foods and drinks for improving the oral bacterial flora, for antibacterial use, and for promoting growth according to the present invention include candies, chewing gums, soft drinks, milk drinks, fermented milk, ice cream, whipped varieties. It can be prepared and used in various aspects applied in the oral cavity, such as a dome.
  • gandariosides may be directly added to the main ingredient of foods and drinks, Gandarioside may be mixed with water and added to food or drink such as candy, chewing gum, soft drink, milk drink, fermented milk, cheese food, confectionery, bread, snack food and the like.
  • the feed for improving the oral bacterial flora, the antibacterial activity, and the growth promotion according to the present invention can be prepared and used in a mode usually given to animals, such as pet food.
  • Gandarioside can be added to the feed to make the oral flora improving, antibacterial, and growth-promoting feed of the present invention.
  • gandarioside can be directly added to the main raw material of the feed. May be mixed with water and added to feed such as pet food!
  • the ingestion or dosage of the oral bacterial flora improver, the antibacterial agent, and the growth promoter according to the present invention cannot be specified unconditionally depending on the type of oral bacterial, etc., but in the case of an adult with a body weight of 60 kg, it is usually used per day. 0.1 to 100 mg, preferably 1 to 100 mg.
  • the amount of gandarioside in the food is usually 0.1 mg to 10 g / 100 g, preferably 1 mg to lg / 100 g.
  • the effect is weak if less than 0.1 mg / 100 g. Even if it exceeds 10 g / 100 g, the effect does not change much.
  • % display is based on weight%.
  • the effect of gandarioside on oral bacteria was examined by the Radial Diffusion Assay method. That is, 3 mg of Tryptic Soy medium (Difco), 20 ⁇ l of Tween 20 and lOOmg of agarose were dissolved in 10 ml of ultrapure water and sterilized. After 100 ⁇ l of a bacterial solution having an OD620 of 0.2 (5 ⁇ 10 7 cfo / ml) was added to the sterilized medium, the medium was coagulated at room temperature by dispensing into a petri dish.
  • Tryptic Soy medium Difco
  • 20 ⁇ l of Tween 20 and lOOmg of agarose were dissolved in 10 ml of ultrapure water and sterilized. After 100 ⁇ l of a bacterial solution having an OD620 of 0.2 (5 ⁇ 10 7 cfo / ml) was added to the sterilized medium, the medium was coagulated at room temperature by dispensing into a petri dish.
  • a hole with a diameter of about 2.5 mm is pierced into the solidified medium, and 5 ⁇ l of each of ganglioside GM3 or gandlioside GD3 derived from milk for evaluating antibacterial action is added, and the mixture is incubated at 37 ° C for 1 hour. Pete. Furthermore, a sterilized medium obtained by dissolving 0.6 g of Tryptic Soy medium and 10 mg of agarose in 10 ml of ultrapure water is layered on a solidified medium, left to stand at room temperature, and then solidified, and then allowed to stand in an incubator at 37 ° C. The culture was performed. After 18 hours, the diameter of the clear zone formed around the hole formed in the medium was measured.
  • the length obtained by subtracting the diameter (mm) of the hole formed in the medium from the diameter (mm) of the clear zone formed by the inhibition of bacterial growth was defined as the antibacterial activity.
  • the length obtained by subtracting the diameter (mm) of the hole was defined as the growth promoting activity.
  • the strains subjected to the test were, as harmful bacteria in the oral cavity, Streptococcus' sobrinus (Streptococcus sobrinus) 6715, Streptococcus anginosus ATCC33397 strain and Staphylococcus aureus (using Staphylococcus aureus, Staphylococcus aureus).
  • Streptococcus agalactiae ATCC46448 strain and Actinomyces naeslundii JCM8349 strain are used as resident bacteria in the oral cavity, and useful bacteria are Streptococcus mitis GTC495 Streptococcus mitis ATCC6249 strain and Streptococcus mitis ATCC903 strain were used.
  • Bacitracin an antibacterial component isolated from Bacillus subtilis, was used, and those having an antibacterial activity of 2.0 mm or more were regarded as positive (having antibacterial activity).
  • the growth promoting action those having a growth promoting activity of 1.0 mm or more were regarded as positive (having growth promoting activity).
  • Table 1 shows the results. As a result of the test, those to which Bacitracin was added as a positive control showed antibacterial activity against all the tested strains. On the other hand, any of the solutions prepared by adding each of the solutions of gandarioside G M3 or gandarioside GD3 to the solution were all harmful bacteria Streptococcus sobrinus 6715 strain, Streptococcus' anginosus ATCC33397 strain and Staphylococcus strain.
  • a ganglioside derived from milk was prepared according to a known method for preparing a ganglioside (JP-A-63-269992).
  • the proteolytic enzyme trypsin is allowed to act on a milk substance containing gandarioside at 40 ° C. for 15 hours to decompose the protein, and the resulting protein decomposed solution is dialyzed with a 10,000 molecular weight membrane. A fraction containing high gandariosides was obtained.
  • the fraction containing high gandarioside content After freeze-drying the fraction containing high gandarioside content, it is dissolved in a methanol solution of formaldehyde (1: 1), and this solution is passed through an anion exchange resin (DEAE-Sephadex: manufactured by Pharmacia) to remove gandarioside. Adsorbed. Then, the anion exchange resin was washed with a methanol solution of formaldehyde (1: 1) in a mouth, and then gandarioside was eluted with a 0.1 M aqueous sodium acetate / methanol solution. The eluate was dried under reduced pressure, dialyzed, desalted, and freeze-dried.
  • an anion exchange resin DEAE-Sephadex: manufactured by Pharmacia
  • Gandarioside GD3 and Gandarioside GM3 can be used as a mixture of both without the need to separate them. In this case, this Gandarioside fraction A is used.
  • fraction A was fractionated. That is, Fraction A was suspended in a methanol solution of form mouth (8: 8 (v / v)), added to a silica gel column (Beat mouth beads: manufactured by Geatron Laboratories, Inc.), and treated with 8: 2 (v / v). / v) Gradient eluted with a formaldehyde-methanol solution up to 2: 8 (v / v), gandarioside GM3 fraction (fraction B), gandarioside GD3 fraction (fraction C) and gandarioside GT3 fraction (Fraction D). When each of the thus obtained gandarioside fractions was detected by thin-layer chromatography, the purity was 95% or more.
  • Example 1 Production of powder for improving oral microbiota
  • an antibacterial powder for the undesirable oral bacteria of the present invention was produced.
  • Example 2 According to the same formulation and method as in Example 1, a powder for promoting growth against oral bacteria of the present invention was produced.
  • the raw materials were mixed according to the composition shown in Table 2, and compressed by a compression tablet machine (Fuji Pharmaceutical Co., Ltd. Y-5010-Q) (conditions: l to 4 tons) to produce tablets for improving the oral flora of the present invention. .
  • the raw materials were mixed in the composition shown in Table 3, sterilized by heating, and filled in a container to produce a fruit juice beverage for improving oral microbiota of the present invention.
  • the raw materials were mixed according to the formulation shown in Table 4 and emulsified at an emulsification temperature of 85 ° C to produce a process cheese for improving oral microbiota of the present invention.
  • the kneaded product obtained by mixing the raw materials with the composition shown in Table 5 was filled in a container to produce a dentifrice for an oral flora improving agent of the present invention.
  • Example 7 According to the same formulation and method as in Example 7, a dentifrice for promoting growth of desired bacteria in the oral cavity of the present invention was produced.
  • the raw materials are mixed according to the formulation shown in Table 6 to produce a mouthwash for improving the oral flora of the present invention. did.
  • the raw materials were mixed according to the formulation shown in Table 7, and molded by a conventional method to produce the gum for improving oral microflora of the present invention.
  • Example 11 According to the same composition and method as in Example 11, a growth-promoting gum for desired bacteria in the oral cavity of the present invention was produced.
  • the raw materials were mixed according to the formulation shown in Table 8, and sterilized at 120 ° C. for 4 minutes to produce a dog food for improving oral microbiota of the present invention.
  • the agent for improving oral microflora, the antibacterial agent and the growth promoter of the present invention can be used as a medicine as it is, and if necessary, combined with various commonly used additives such as a carrier and a diluent. It comes out.
  • gandarioside may be directly added to the main raw material of the food or drink, or gandarioside may be mixed with water, and this may be candy, chewing gum, soft drink, It can be prepared in various forms applied to the oral cavity, such as milk drinks, fermented milk, ice cream, whipped cream, etc., and used as a food or drink for improving the oral flora, for antibacterial use and for promoting growth.
  • gandarioside may be directly added to the main raw material of the feed. It can be used as feed for improving the oral flora, for antibacterial use and for promoting growth.

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Abstract

　口腔内で好ましい細菌叢を形成する口腔内細菌叢改善剤、及び口腔内細菌叢改善用飲食品を提供する。 　ガングリオシドを有効成分とする口腔内細菌叢改善剤及びガングリオシドを配合した口腔内細菌叢改善用飲食品又は飼料は、う蝕や歯周病などの疾病の観点からは望ましくない口腔内の有害菌に対しては抗菌作用を示し、かつ残存させるべき口腔内の有用菌に対しては生育促進作用を示す。また、ガングリオシドを有効成分とすると、抗菌剤あるいは抗菌用飲食品又は飼料及び生育促進剤あるいは生育促進用飲食品又は飼料としても有効である。

Description

口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤
技術分野
[0001] 本発明は、ガンダリオシドを有効成分とする口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生 育促進剤に関する。また、ガンダリオシドを配合した口腔内細菌叢改善用、抗菌用及 び生育促進用飲食品又は飼料に関する。
背景技術
[0002] ヒトの口腔内には消化管内と同様に数多くの細菌が住みついており、その数は種 類にして約 300〜400種、数にすると 60億を超えると言われている。これらの細菌は口 腔内でコロニーとなって、口腔内細菌叢（口腔内フローラ)を形成している。歯科領域 のニ大疾患に挙げられるう蝕（虫歯)や歯周病は、これら口腔内の悪玉菌によって引 き起こされる細菌感染症である。これらの細菌は、唾液中はもちろん口腔内細菌の塊 ともいえるプラーク（歯垢）の中に多く存在し、歯の表面や、歯と歯茎の隙間に付着し ている。口腔内細菌が引き起こす疾患に関しては、従来から主にう蝕（虫歯)や歯周 病が注目され、う蝕性細菌や歯周病細菌を静菌あるいは殺菌する成分に関する研究 が盛んに行われてきた。う蝕を防ぐ抗菌成分としてはクロールへキシジンなどの殺菌 剤、抗生物質、ノ-オン系 (非イオン系)ゃァ-オン系（陰イオン系）の界面活性剤な どがある（例えば、特許文献 1〜4参照。 )0しかし、こうした抗菌成分は毒性などの副 作用を併せ持つものもあり、また、経口摂取した際に不快な苦味を呈したり、歯や口 腔粘膜が着色するという欠点を有しているものもある。一方、最近では茶のカテキン や各種植物由来のポリフエノールイ匕合物など、食品として摂取している素材成分を有 効物質として利用するという知見もある。し力しながら、その有効性に関しては通常の 食品摂取力 では実現困難な量が必要になるなど解決すべき課題が残っており、そ の有効性を高めるために、う蝕性細菌に対する特異抗体を同時に摂取しなくてはな らないなど、実用性の点で解決すべき課題が多い。また、近年では、う蝕性細菌だけ ではなぐ歯周病や口臭、口腔衛生の観点でも口腔内細菌をコントロールする必要 性が求められており、主な歯周病菌であるボルフイロモナス*ジンジバリス菌（ Porphyromonas gingivalis)ゃプレホアフ'インテノレメディア菌 (Prevotella intermedia )などの生育を阻害する成分も報告されている。（例えば、非特許文献 1参照。 ) o
[0003] 口腔内フローラを形成する細菌の中には、病原性を持つ有害なもの（悪玉菌)もい れば、無害で有益なもの（善玉菌)もいる。口腔内の有害菌に関しては、ストレプトコッ カス ·ソブリヌス（Streptococcus sobrinus)、ストレプトコッカス ·ミュータンス (
Streptococcus mutans)、ストレフ。トコッ yス · /'ンキノ ~~サス (Streptococcus anginosus)、スタフイロコッカス ·ァゥレウス（Staphylococcus aureus)などが知られて おり、有用菌に関してはストレプトコッカス'ミチス（Streptococcus mitis)などが知られ て 、る。ストレプトコッカス ·ソブリナス (Streptococcus sobrinus)はう蝕性細菌として知 られており、その有害性に関してはストレプトコッカス'ミュータンス（Streptococcus mutans)よりも強ぐ虫歯の原因として臨床の分野では問題視されている細菌である。 また、ストレプトコッカス ·アンギノーサス（Streptococcus anginosus)は、食道癌患者 の口腔力 検出されることが多いことから、食道癌の原因菌としての可能性が示唆さ れている。さらに、スタフイロコッカス'ァゥレウス（Staphylococcus aureus)については 、各種膿瘍の病原菌として広く知られているだけでなぐ免疫力の低下やインフルェ ンザなどのウィルス感染にともなう肺炎などの合併症を引き起こし、疾患の重篤化や 死亡の直接原因になりうるといわれている。 一方、ストレプトコッカス'ミチス（ Streptococcus mitis)は、一般的に口腔内に定住している常在菌であり、口腔内細 菌の 80%を占めるといわれており、一定の菌叢を形成する上で重要な細菌種である ことが知られている。
[0004] 本発明は、ガンダリオシドを有効成分とする口腔内細菌叢改善剤および口腔内細 菌叢改善用飲食品又は飼料に関するものである。ガンダリオシドに関しては、ウィル ス、細菌、細菌毒素などが気管や消化管の粘膜に付着するのを拮抗的に阻害するこ とにより感染を防御することが知られている。し力しながら、ガンダリオシド自体が抗菌 作用を持つことは現在までに知られておらず、ましてや口腔内有害菌に対しては抗 菌作用を持ち、口腔内有用菌に対しては生育促進効果をあわせ持つことに関しては 、まったく新規の知見に基づくものである。本発明者らはスフインゴシン骨格を有する 化合物を有効成分とする歯周病の予防及び改善効果を得る発明を出願している (特 許文献 5参照。 ) 0このスフインゴシン骨格を有する化合物にはガンダリオシドも含まれ ている。し力しながら、この発明は、スフインゴシン骨格を有する化合物が破骨細胞の 骨吸収作用を阻害する効果を見出し、歯槽骨の減少を抑制することによる歯周病の 予防に効果があることを発明したものであり、本発明のように、ガンダリオシドが抗菌 作用を持つこと、さらには、口腔内有害菌に対しては抗菌作用を持ち、常在する口腔 内有用菌に対しては生育促進効果をあわせ持つ口腔内細菌叢改善剤とは異なって いる。
前述した抗菌活性成分を持つ殺菌剤、抗生物質、界面活性剤は、口腔内に存在 する殆んどすベての細菌の生育を抑えてしまい、殺菌効果としては優れている力 口 腔内細菌叢を大きく破壊してしまうという問題が最近の研究力も明らかとなった。口腔 内細菌叢で通常は優勢な口腔内有用菌の生育が阻害されると、口腔内細菌叢が不 安定となり、口腔内有害菌の増殖につながる恐れも多い。
したがって、様々な細菌に対して広い抗菌スペクトルをもつ殺菌剤を利用して、す ベての口腔内細菌を殺菌してしまうのではなぐ口腔内に存在させることで生体に望 ましい作用をもたらす細菌はそのまま残すことの有用性が求められる。
また、口腔内の有害菌に対して抗菌作用を持つが、口腔内有用菌の生育を阻害し ないで生育促進効果を持つ、口腔内有用菌には穏和な抗菌剤が求められる。
特許文献 1：特開平 09-286712号公報
特許文献 2：特開平 11-147814号公報
特許文献 3：特開平 09-240816号公報
特許文献 4：特開 2001-064163号公報
特許文献 5：特開 2001-158735号公報
非特許文献 1 :石川裕榭 外 4名， 日本歯周病学会会誌，第 45卷，第 1号， 105〜112 頁， 2003年
発明の開示
発明が解決しょうとする課題
本発明は、すべての口腔内細菌を殺菌してしまうのではなぐ口腔内細菌の中で、 う蝕や歯周病などの疾病の観点力 は望ましくない細菌に対しては抗菌作用を持ち 、残存させるべき口腔内細菌には生育促進作用を示す、口腔内で好ましい菌叢を形 成する口腔内細菌叢改善剤、及び口腔内細菌叢改善用飲食品を提供することを課 題とする。また、本発明は、口腔内の望ましくない細菌に対しては抗菌作用を持つ抗 菌剤、及び抗菌用飲食品を提供することを課題とする。また、本発明は、残存させる べき口腔内細菌には生育促進作用を示す口腔内細菌生育促進剤、及び口腔内細 菌生育促進用飲食品を提供することを課題とする。
課題を解決するための手段
本発明者等は口腔内細菌の中で、う蝕や歯周病などの疾病の観点力 は望ましく な 、細菌に対する抗菌作用を持ち、口腔内に好まし 、菌叢を形成するために残存さ せるべき口腔内細菌には生育促進作用を示す食品成分について鋭意研究を重ねた 結果、哺乳類の乳力 分離精製したガンダリオシドにこのような作用があることを新た に見出し、本発明を完成するにいたった。ガンダリオシドに関しては、ウィルス、細菌 、細菌毒素などが、気管や消化管の粘膜に付着するのを拮抗的に阻害することによ り感染を防御することが知られている。し力しながら、ガンダリオシド自体が抗菌作用 を持つことは現在までに知られておらず、ましてや口腔内有害菌に対しては抗菌作 用を持ち、口腔内有用菌に対しては生育促進効果をあわせ持つことに関しては、ま つたく新規の知見に基づくものである。前述のように、口腔内の有害菌としては、スト レプトコッカス .ソブリヌス（Streptococcus sobrinus)、ストレプトコッカス ·アンギノーサ ス (Streptococcus anginosus)、スタフイロコッカス · ,ヮレ1ノス (Staphylococcus aureus )などが知られており、有用菌としては、ストレプトコッカス'ミチス（Streptococcus mitis)などが知られている。こうした口腔内細菌に関して牛乳力も精製したガンダリオ シドの作用を調べたところ、いずれのガンダリオシドも有害菌に対しては抗菌作用を 示し、かつ有用菌に対しては生育促進作用を示すことを明らかにした。すなわち、本 発明は、ガンダリオシドを有効成分とする口腔内細菌叢改善剤に関する。また本発明 は、ガンダリオシドを配合した口腔内細菌叢改善用飲食品又は飼料に関する。
さらに、本発明は、ガンダリオシドを有効成分とする、口腔内の望ましくない細菌に 対しては抗菌作用を持つ抗菌剤、及び抗菌用飲食品又は飼料に関する。本発明の 抗菌剤、及び抗菌用飲食品又は飼料は、口腔内有害菌に対しては抗菌作用を持つ 1S 口腔内有用菌に対しては抗菌作用を持たないので、抗菌剤、及び抗菌用飲食 品又は飼料として極めて有効である。
さらに、また、本発明は、ガンダリオシドを有効成分とする、口腔内の残存させるべき 口腔内細菌に対しては生育促進作用を示す生育促進剤、及び生育促進用飲食品 又は飼料に関する。本発明の生育促進剤、及び生育促進用飲食品又は飼料は、口 腔内有用菌に対しては生育促進作用を持つが、口腔内有害菌に対しては生育促進 作用を持たず、逆に抗菌作用を持つので、生育促進剤、及び生育促進用飲食品又 は飼料として極めて有効である。
発明の効果
[0007] ガンダリオシドが、こうした有害菌の生育を抑え、常在する有用菌の生育を促進する ということは、口腔内細菌叢を良好に保っために、極めて有効であり、口腔内細菌に 起因する様々な疾患の予防にもつなげることができる。したがって、ガンダリオシドを 配合して製剤化することにより、有害菌の生育を抑え、常在する有用菌の生育を促進 する作用のあるガンダリオシドを有効成分とする口腔内細菌叢改善剤を提供すること ができる。また、ガンダリオシドを飲食品に配合することにより、口腔内細菌叢改善用 飲食品又は飼料を提供することができる。
さらに、本発明は、ガンダリオシドを有効成分とする、口腔内の望ましくない細菌に 対しては抗菌作用を持つ抗菌剤、及び抗菌用飲食品又は飼料を提供することができ る。
さらに、また、本発明は、ガンダリオシドを有効成分とする、残存させるべき口腔内 細菌には生育促進作用を示す生育促進剤、及び生育促進用飲食品又は飼料を提 供することができる。
発明を実施するための最良の形態
[0008] 本発明に記載のガンダリオシドの由来は特に限定されないが、本発明の口腔内細 菌叢改善剤もしくは口腔内細菌叢改善用飲食品又は飼料、また抗菌剤もしくは抗菌 用飲食品又は飼料、さらには生育促進剤もしくは生育促進用飲食品又は飼料の素 材として利用されるものとしては、牛乳を原料としたものが安全性の点で望ましい。牛 乳にはガンダリオシド GD3が多く含まれて 、ると 、うことも望ま 、理由となる。牛乳 力 ガンダリオシドを調製したり、あるいは濃縮して含量を高める場合には、特に方法 は限定されない。例えば、バターミルクカゝら透析、硫安分画、ゲル濾過、あるいは等 電点沈殿するなどの方法により脂肪球皮膜成分として調製できる。また、特開昭
63-269992号公報に開示されたように、タンパク質分解酵素によって分解液を調製し 、ゲル濾過や限外濾過を行うことでガンダリオシド高含有素材が調製できる。あるい は、ポアサイズ 0.1 m以下の精密濾過膜を利用したり、分画分子量 100,000Da以上 の限外濾過膜で処理する方法によっても調製できる (特開平 5-269353号公報)。さら にはガンダリオシド GD3を加水分解してガンダリオシド GM3を調製すること (特開平 5-279379号公報）やガンダリオシド GD3にシァリダーゼを作用させてガングリオシド G M3を調製することも可能である。
本発明により口腔内細菌叢改善剤あるいは口腔内細菌叢改善用飲食品又は飼料 、また抗菌剤あるいは抗菌用飲食品又は飼料、及び生育促進剤あるいは生育促進 用飲食品又は飼料を提供することができる。また、本発明においては、ガンダリオシド GD3とガンダリオシド GM3は特に分ける必要性はなぐ両者の混合物として利用で きる。ガンダリオシド GM3やガンダリオシド GD3の他にガンダリオシド GT3などをも含 んだガンダリオシド高含有画分を、本発明の口腔内細菌叢改善剤あるいは口腔内細 菌叢改善用飲食品又は飼料、また抗菌剤あるいは抗菌用飲食品又は飼料、及び生 育促進剤あるいは生育促進用飲食品又は飼料に用いることは、精製に力かる労力、 コストの面からみて好まし 、。
[0009] 本発明の口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤を医薬品として用いる場 合、その形態は特に制限されるものではなぐ投与方法や適用される疾患の種類、形 状および存在部位などの条件に応じて、錠剤、カプセル、散剤、顆粒剤、ドリンク剤 などの種々の形態を適宜選択することができる。従って、上記したような本発明の口 腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤をそのまま医薬として用いることができ るほか、必要に応じて担体、希釈剤など通常用いられる種々の添加物（例えば糖類、 デンプン類、アルコール類など）と組合せることができる。
[0010] 本発明に係る口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤は、練歯磨、粉歯磨 、液状歯磨などの歯磨類、マウスゥォッシュ、うがい液、口腔用パスタ、歯肉マッサ一 ジクリーム、うがい用錠剤、トローチなど、口腔内に適用される様々な態様に調製して 使用することができる。
[0011] 本発明による口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤と混合する他の成分 としては、使用目的、使用態様などに応じて適宜な成分を用いることができる。例え ば、粉歯磨の調製には、第 2リン酸カルシウム · 2水和物、第 2リン酸カルシウム '無水 物、第 1リン酸カルシウム、第 3リン酸カルシウム、炭酸カルシウム、ピロリン酸カルシゥ ム、不溶性メタリン酸ナトリウム、非晶質シリカ、結晶質シリカ、アルミノシリケート、酸ィ匕 アルミニウム、水酸ィ匕アルミニウム、第 3リン酸マグネシウム、炭酸マグネシウム、硫酸 マグネシウム、酸化チタン及びレジンなどの研磨剤を通常 5〜95%、好ましくは 15〜 60%の量で配合する。練歯磨のようなペースト状組成物の調製には、カルボキシメ チノレセノレロースナトリウム、メチノレセノレロース、カノレボキシメチノレヒドロキシェチノレセノレ ロースナトリウム、ヒドロキシェチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、カラギーナン、 アラビアガム、キサンタンガム、トラガカントガム、カラャガム、ポリビュルアルコール、 ポリアクリル酸ナトリウム、カルボキシビュルポリマー及びポリビュルピロリドンなどの粘 結剤を通常 0. 3〜5%の量で配合する。練歯磨及びマウスゥォッシュのようなペース ト状及び液状組成物の調製には、ポリエチレングリコール、エチレングリコール、ソル ビトーノレ、グリセリン、プロピレングリコール、 1, 3 ブチレングリコーノレ、キシリット、マ ルチット及びラクチットなどの粘稠剤を通常 10〜70%の量で配合する。更に、必要 に応じてペパーミント、スペアミントなどの精油、 1—メントール、カルボン、オイゲノー ル、ァネトールなどの香料素材、サッカリンナトリウム、ステピオサイド、ネオヘスベリジ ルジヒドロカルコン、グリチルリチン、ペリラルチン、 ρ—メトキシシンナミックアルデヒド などの甘味剤や防腐剤を適宜配合する。なお、本発明においては、ムタナーゼ、ソ ルビン酸、ァレキシジン、ヒノキチオール、セチルピリジ-ゥムクロライド、アルキルグリ シン、アルキルジアミノエチルグリシン塩、アラントイン、 ε アミノカプロン酸、トラネ キサム酸、ァズレン、ビタミン Ε、水溶性第一もしくは第二リン酸塩、第四級アンモ-ゥ ム化合物、塩ィ匕ナトリウム、生薬抽出物などの有効成分を配合することもできる。
[0012] 本発明に係る口腔内細菌叢改善用、抗菌用及び生育促進用飲食品としては、キヤ ンディー、チューインガム、清涼飲料、乳飲料、発酵乳、アイスクリーム、ホイップタリ ームなど、口腔内に適用される様々な態様に調製して、使用することができる。
ガンダリオシドを飲食品に配合して本発明の口腔内細菌叢改善用、抗菌用及び生 育促進用飲食品とするには、例えば、飲食品の主原料にガンダリオシドを直接添カロ してもよく、また、ガンダリオシドを水と混合して、これをキャンディー、チューインガム 、清涼飲料、乳飲料、発酵乳、チーズフード、菓子、パン、スナック食品などの飲食品 に添カ卩してもよい。
本発明に係る口腔内細菌叢改善用、抗菌用及び生育促進用飼料としては、ペット フードなど、通常動物に与える態様に調製して使用することができる。ガンダリオシド を飼料に配合して本発明の口腔内細菌叢改善用、抗菌用及び生育促進用飼料とす るには、例えば、飼料の主原料にガンダリオシドを直接添加してもよぐまた、ガンダリ オシドを水と混合して、これをペットフードなどの飼料に添加してもよ!/、。
[0013] 本発明による口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤の摂取もしくは投与量 は、口腔内細菌の種類などにより一概に言えないが、体重 60Kgの成人の場合、 1日 当たり通常 0.1〜 1 OOmg好ましくは 1〜 1 Omgである。
[0014] 本発明にお 、て、一般食品中に配合する場合は、食品中、ガンダリオシドの量とし て通常 0.1mg〜10g/100g、好ましくは lmg〜lg/100gである。 0.1mg/100gに満たない と効果が弱ぐ 10g/100gを超えて配合しても効果はさほど変わらない。
なお、本明細書において、％表示は特に断りのない限り、重量％基準である。
[0015] 以下の試験例、実施例により本発明を更に詳細に説明するが、本発明はこの試験 例、実施例によって限定されるものではない。
試験例 1
[0016] (抗菌活性測定）
ガンダリオシドの口腔内細菌に及ぼす影響を、 Radial Diffusion Assay法により調 ベた。すなわち、 Tryptic Soy培地（Difco社） 3mg、 Tween20 20 μ 1、およびァガロー ス lOOmgを超純水 10mlに溶解して滅菌した。 OD620=0.2(5 X 107cfo/ml)の菌液 100 μ 1 を滅菌培地に加えた後、シャーレに分注して培地を室温で凝固させた。直径約 2.5mmの穴を固化した培地に穿孔し、抗菌作用を評価するための牛乳由来のガング リオシド GM3又はガンダリオシド GD3の各溶液 5 μ 1を添カ卩し、 37°Cで 1時間インキュ ペートした。さらに、 Tryptic Soy培地 0.6gとァガロース lOOmgを超純水 10mlに溶解し た滅菌済の培地を、固化培地に重層し、室温で放置して固まった後に、 37°Cのイン キュベータ一内で静置培養した。 18時間後、培地に開けた穴の周囲に形成されるク リアゾーンの直径を測定した。細菌の生育が阻害されたことで形成されるクリアゾーン の直径 (mm)から、培地に開けた穴の直径 (mm)を差し引いた長さを抗菌活性とした 。一方、培地に開けた穴の周囲に細菌のコロニーが形成され、白濁したゾーンが観 察される場合は、生育促進が起こっているものとし、白濁ゾーンの直径 (mm)から、培 地に開けた穴の直径 (mm)を差し引いた長さを生育促進活性とした。試験に供した菌 株は、口腔内の有害菌として、ストレプトコッカス 'ソブリヌス（Streptococcus sobrinus ) 6715株、ストレプトコッカス ·アンギノーサス (Streptococcus anginosus) ATCC33397 株及びスタフイロコッカス'ァウレウス（Staphylococcus aureus) Cowan I株を用い、口 腔内の常在菌として、ストレプトコッカス'ァガラタチア（Streptococcus agalactiae) ATCC46448株及びァクチノマイセス ·ネスランディ (Actinomyces naeslundii) JCM8349株を用い、有用菌として、ストレプトコッカス'ミチス（Streptococcus mitis) GTC495株、ストレプトコッカス ·ミチス（Streptococcus mitis) ATCC6249株及びストレ プトコッカス ·ミチス（Streptococcus mitis) ATCC903株を用いた。
陽性対照としてバチルス ·ズブチリス (Bacillus subtilis)より分離された抗菌成分で あるバシトラシン (Bacitracin)を用い、抗菌活性が 2.0mm以上のものを陽性 (抗菌活 性あり）とした。生育促進作用については、生育促進活性が 1.0mm以上のものを陽性 (生育促進活性あり）とした。
[表 1]
Bacitracin GM3 GD3 ス トレプトコッカス · ソブリヌス 6715
(Streptococcus sobrinus 6715)
ス トレプトコッカス ·アンギノーサス ATCC33397
(Streptococcus anginosus ATCC33397)
スタフイロコッカス -ァウレウス Cowan I
(Staphylococcus aureus Cowan 丄)
ス トレプトコッカス · ミチス GTC495 *
(Streptococcus mitis GTC495)
ス トレプトコッカス . ミチス ATCC6249 *
(Streptococcus mitis ATCC6249)
ス トレプトコッカス . ミチス ATCC903 氺
(Streptococcus mitis ATCC903)
ストレプトコッカス ·ァガラクチア
(Streptococcus agalactiae ATCC46448)
(Actinomyces naeslundn JCM8349)
+：抗菌活性あり、 ：抗菌活性なし、 *：生育促進活性あり
結果を表 1に示す。試験の結果、陽性対照としてバシトラシン (Bacitracin)を添加し たものは、供試した菌株すべてに対し抗菌活性が見られた。一方、ガンダリオシド G M3又はガンダリオシド GD3の各溶液を添カ卩したものは何れも、有害菌であるストレ プトコッカス.ソブリヌス（Streptococcus sobrinus) 6715株、ストレプトコッカス'アンギノ ーサス（Streptococcus anginosus) ATCC33397株及びスタフイロコッカス ·ァゥレウス（ Staphylococcus aureus) Cowan I株に対して抗菌活性が見られ、ストレプトコッカス' ァガラタチア（Streptococcus agalactiae) ATCC46448株及びァクチノマイセス ·ネスラ ンディ (Actinomyces naeslundii) JCM8349株に対しては抗菌活性も生育促進活性も 見られず、無作用であった。ガンダリオシド GD3又はガンダリオシド GM3の各溶液を 添カ卩したものは有用菌であるストレプトコッカス'ミチス（Streptococcus mitis)の 3菌株 の各菌株に対しては逆に生育促進活性が見られた。 以上の結果から、牛乳力 精製したガンダリオシド GM3又はガンダリオシド GD3は 、いずれも有害菌に対しては抗菌作用を示し、かつ有用菌に対しては生育促進効果 を示すことが明らかとなった。
参考例 1
(牛乳由来ガンダリオシドの調製）
公知のガンダリオシドの調製法 (特開昭 63-269992号公報）に従い、牛乳由来のガ ングリオシドを調製した。すなわち、ガンダリオシドを含む乳性物質に蛋白質分解酵 素のトリプシンを 40°Cで 15時間作用させて蛋白質を分解した後、得られた蛋白質分 解溶液を分子量分画 10,000の膜で透析して、ガンダリオシド高含有画分を得た。この ガンダリオシド高含有画分を凍結乾燥した後、クロ口ホルム メタノール（1： 1)溶液に 溶解し、この溶液を陰イオン交換榭脂 (DEAE-Sephadex:フアルマシア社製)に通液し てガンダリオシドを吸着させた。次 、で陰イオン交換榭脂をクロ口ホルム メタノール（ 1： 1)溶液で洗浄した後、 0.1M酢酸ナトリウム水溶液一メタノール溶液でガンダリオシ ドを溶出した。そして、溶出液を減圧乾固した後、透析して脱塩し、凍結乾燥した。こ のようにして得られたガンダリオシド画分 (画分 A)を薄層クロマトグラフィー（レゾルシ ノール法）で検出したところ、ガンダリオシド GM3：ガンダリオシド GD3：ガンダリオシド GT3 = 10 : 90 : 1であった。本発明の口腔内細菌叢改善剤あるいは口腔内細菌叢改 善用飲食品又は飼料、抗菌剤あるいは抗菌用飲食品又は飼料、及び生育促進剤あ るいは生育促進用飲食品又は飼料にぉ 、ては、ガンダリオシド GD3とガンダリオシド GM3は特に分ける必要性はなぐ両者の混合物として利用できるが、その場合には 、このガンダリオシド画分 Aを用いる。
さらに、画分 Aを分画した。すなわち、クロ口ホルム メタノール（8 : 8 (v/v) )溶液に 画分 Aを懸濁し、シリカゲルカラム (ィアト口ビーズ:ィァトロンラボラトリーズ社製)に添 カロして、 8： 2 (v/v)力 2： 8 (v/v)までのクロ口ホルム一メタノール溶液でグラジェント溶 出し、ガンダリオシド GM3画分 (画分 B)、ガンダリオシド GD3画分 (画分 C)及びガン ダリオシド GT3画分 (画分 D)に分画した。このようにして得られた各ガンダリオシド画 分を薄層クロマトグラフィーで検出したところ、純度は 95%以上であった。
実施例 1 [0020] (口腔内細菌叢改善用散剤の製造）
第 13改正日本薬局方解説書製剤総則「散剤」の規定に準拠し、牛乳由来のガング リオシド GD3 (参考例 1のガンダリオシド画分 C) 1.0重量％を、ラタトース（日局） 59.0 重量％及びバレイショデンプン（日局) 40.0重量％と均一に混合し、本発明の口腔内 細菌叢改善用散剤を製造した。
実施例 2
[0021] (抗菌用散剤の製造）
実施例 1と同様の配合、方法により、本発明の望ましくない口腔内細菌に対する抗 菌用散剤を製造した。
実施例 3
[0022] (生育促進用散剤の製造）
実施例 1と同様の配合、方法により、本発明の望ましい口腔内細菌に対する生育促 進用散剤を製造した。
実施例 4
[0023] (錠剤の製造）
表 2に示す配合で原材料を混合し、圧縮錠剤機 (富士薬品機械 Y-5010-Q)により 圧縮して (条件： l〜4ton)、本発明の口腔内細菌叢改善用の錠剤を製造した。
[0024] [表 2] 原材料名
含水結晶ブドウ糖 93. 0
カルシウム 5. 0
シュガーエステノレ 1. 0
牛乳由来ガングリオシド GM 3
(参考例 1のガンダリオシド画分 B ) 0. 5
香料 0. 5
100. 0 実施例 5 [0025] (果汁飲料の製造）
表 3に示す配合で原材料を混合し、加熱殺菌して容器に充填し、本発明の口腔内 細菌叢改善用果汁飲料を製造した。
[0026] [表 3] 原材料名
混合異性化糖 15. 0
果汁 10. 0
0. 5
クェン酸 0. 5
香料 0. 2
牛乳由来ガンダリオシド
(参考例 1のガングリオシド画分 A) 0. 1
水 73. 7
100. 0 実施例 6
[0027] (プロセスチーズの製造）
表 4に示す配合で原材料を混合し、乳化温度 85°Cで乳化して、本発明の口腔内細 菌叢改善用プロセスチーズを製造した。
[0028] [表 4] 原材料名
ゴーダチーズ 43. 0
チェダーチーズ 43. 0
クェン酸ナトリウム 2. 0
牛乳由来カルシウム 1. 0
牛乳由来ガンダリオシド
(参考例 1のガングリオシド画分 A) 0. 5
水 10. 5
100. 0 実施例 7
[0029] (歯磨き剤の製造）
表 5に示す配合で原材料を混合した混練物を容器に充填し、本発明の口腔内細菌 叢改善剤用歯磨き剤を製造した。
[表 5] 原材料名 重量0 /0
グリセリン 55. 0
二酸化ケィ素 20. 0
第 2リン酸カルシウム 2水和物 10. 0
牛乳由来ガンダリオシド
(参考例 1のガンダリオシド画分 A) 5. 0
キサンタンガム 1. 0
ぺノ 一ミントフレーバー 1. 0
二酸化チタン 0. 7
フツ 匕ナトリウム 0. 3
蒸留水 7. 0
100. 0 実施例 8
[0031] (歯磨き剤の製造）
実施例 7と同じ配合、方法により、本発明の口腔内の望ましくない細菌に対する抗 菌用歯磨き剤を製造した。
実施例 9
[0032] (歯磨き剤の製造）
実施例 7と同じ配合、方法により、本発明の口腔内の望ましい細菌に対する生育促 進用歯磨き剤を製造した。
実施例 10
[0033] (うがい液の製造）
表 6に示す配合で原材料を混合し、本発明の口腔内細菌叢改善用うがい液を製造 した。
[0034] [表 6] 原材料名
ェチ/レアノレコ—ノレ 8.0
ソルビトール 5.0
プロピレンダリコーゾレ 5.0
牛乳由来ガンダリオシド
(参考例 1のガングリオシド画分 A) 5.0
香料 1.0
蒸留水 ― 76.0 実施例 11
[0035] (口腔内細菌叢改善用ガムの製造）
表 7に示す配合で原材料を混合し、常法により、成形して、本発明の口腔内細菌叢 改善用ガムを製造した。
[0036] [表 7] 原材料名
ガムべース 20.0
コーンシロップ 10.0
デキストロース' 1水和物 10.0
ラク トース 5.0
グリセリン 5.0
牛乳由来ガンダリオシド
(参考例 1のガングリオシド画分 A) 1.0
水 一 49.0
100.0 実施例 12
[0037] (抗菌用ガムの製造) 実施例 11と同じ配合、方法により、本発明の口腔内の望ましくない細菌に対する抗 菌用ガムを製造した。
実施例 13
[0038] (生育促進用ガムの製造）
実施例 11と同じ配合、方法により、本発明の口腔内の望ましい細菌に対する生育 促進用ガムを製造した。
[0039] (口腔内細菌叢改善用ドッグフードの製造）
表 8に示す配合で原材料を混合し、 120°Cで 4分間殺菌して、本発明の口腔内細菌 叢改善用ドッグフードを製造した。
[表 8] 原材料名 重量0 /0
脱脂粉乳 14. 0
大豆粕 12. 0
パーム油 23. 2
大豆油 4. 0
コーン油 2. 0
セノレロース 2. 8
ミネラル混合物 2. 0
牛乳由来ガンダリオシド
(参考例 1のガンダリオシド画分 A) 1. 0
39. 0
100. 0 産業上の利用可能性
[0041] 本発明の口腔内細菌叢改善剤、抗菌剤及び生育促進剤をそのまま医薬として用 いることができるほか、必要に応じて担体、希釈剤など通常用いられる種々の添加物 と糸且合せることがでさる。
また、本発明によれば、飲食品の主原料にガンダリオシドを直接添加してもよぐま た、ガンダリオシドを水と混合して、これをキャンディー、チューインガム、清涼飲料、 乳飲料、発酵乳、アイスクリーム、ホイップクリームなど、口腔内に適用される様々な 態様に調製して、口腔内細菌叢改善用、抗菌用及び生育促進用飲食品として使用 することができる。
さらに、例えば、飼料の主原料にガンダリオシドを直接添加してもよぐまた、ガング リオシドを水と混合して、これを、通常動物に与える態様に調製してペットフードなど の飼料に添加して口腔内細菌叢改善用、抗菌用及び生育促進用飼料として使用す ることがでさる。

Claims

請求の範囲
[1] ガンダリオシドを有効成分とする口腔内細菌叢改善剤。
[2] ガンダリオシド力 ガンダリオシド GD3及び/又はガンダリオシド GM3である請求項
1記載の口腔内細菌叢改善剤。
[3] ガンダリオシドを配合した口腔内細菌叢改善用飲食品又は飼料。
[4] ガンダリオシドを有効成分とするストレプトコッカス ·ソブリヌス（Streptococcus
sobrinus)、ストレプトコッカス ·アンギノーサス (Streptococcus anginosus)及びスタフィ ロコッカス ·ァゥレウス（Staphylococcus aureus)に対する抗菌剤。
[5] ガンダリオシドを有効成分とするストレプトコッカス ·ミチス（Streptococcus mitis)に 対する生育促進剤。
[6] ガンダリオシドを配合したストレプトコッカス ·ソブリヌス（Streptococcus sobrinus)、ス トレプトコッカス .アンギノーサス（Streptococcus anginosus)及びスタフイロコッカス ·ァ ウレウス（Staphylococcus aureus)に対する抗菌用飲食品又は飼料。
[7] ガンダリオシドを配合したストレプトコッカス ·ミチス（Streptococcus mitis)に対する 生育促進用飲食品又は飼料。
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