WO2005063291A1 - 抗体を含有する安定な水性医薬製剤 - Google Patents

抗体を含有する安定な水性医薬製剤 Download PDF

Info

Publication number
WO2005063291A1
WO2005063291A1 PCT/JP2004/019259 JP2004019259W WO2005063291A1 WO 2005063291 A1 WO2005063291 A1 WO 2005063291A1 JP 2004019259 W JP2004019259 W JP 2004019259W WO 2005063291 A1 WO2005063291 A1 WO 2005063291A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
antibody
aqueous pharmaceutical
pharmaceutical preparation
preparation according
stable
Prior art date
Application number
PCT/JP2004/019259
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Tomoyoshi Ishikawa
Akihiro Ueno
Satoru Kimura
Yosuke Ueki
Original Assignee
Kirin Beer Kabushiki Kaisha
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=34736431&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=WO2005063291(A1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Kirin Beer Kabushiki Kaisha filed Critical Kirin Beer Kabushiki Kaisha
Priority to JP2005516616A priority Critical patent/JPWO2005063291A1/ja
Priority to US10/584,249 priority patent/US20070184050A1/en
Priority to EP04807616.0A priority patent/EP1712240B1/en
Priority to ES04807616.0T priority patent/ES2553987T3/es
Publication of WO2005063291A1 publication Critical patent/WO2005063291A1/ja

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the present invention relates to a stable aqueous pharmaceutical preparation containing an antibody.
  • proteins have a large molecular weight and a complicated three-dimensional structure, and therefore, to stably store such proteins while maintaining their biological activity, their physical properties must be improved. Special techniques are required. Formulations that maintain a stable protein must protect many different functional groups contained in the protein and maintain the higher-order structure involved in the activity. Antibodies are one of the useful proteins for medical use.
  • W098 / 56418 has previously been lyophilized.
  • glutamic acid or citric acid is suitable as a buffer for maintaining pH.
  • Patent No. 2547556 discloses a ⁇ -globulin preparation containing an acetate buffer and sorbitol. However, this does not state that the buffer that maintains the pH contains glutamic acid or citric acid. Nor does it suggest that the addition of a surfactant is suitable.
  • WO 97/04801 discloses a lyophilized formulation that is reconstituted and suitable for subcutaneous administration. However, it also states that this is a non-lyophilized formulation and that the buffer that maintains the pH uses glutamic acid or citric acid with a pH of 5.0-6.0! /, Na! / ,.
  • a “stable formulation” is defined as a formulation that does not contain a component that is toxic to the patient to whom the formulation is administered, and that contains additives other than active ingredients that do not disrupt the patient's homeostasis as much as possible.
  • the active ingredient therein retains chemical and / or physical and / or biological stability upon storage.
  • “An additive other than an active ingredient that does not disrupt the patient's homeostasis as much as possible” refers to a substance that has been confirmed to be sufficiently safe by past treatment results or that has not been administered before. Even if there is toxicity evaluation for cells and animals, it means that the safety is sufficiently predicted by other methods.
  • ⁇ preserving the patient's homeostasis '' means that additives other than the active ingredient do not have unacceptable biological activity in the patient and / or if possible, are isotonic (essentially with human blood). Have the same osmotic pressure).
  • the stability of a protein is measured by various analytical methods. For example, the theory and practice of new protein purification methods are outlined in RK ⁇ Corpus, Springer's Fairmark Tokyo Press. "Chemical stability" can be assayed by detecting and quantifying the chemically altered state of a protein. Chemical changes can be assessed, for example, by size modifications such as clipping that can be assessed by size exclusion chromatography or SDS-PAGE, changes in charge that can be assessed by ion exchange chromatography (eg, resulting from deamide), and hydrophobic chromatography. Includes changes in the hydrophilic / hydrophobic state (eg, resulting from acidification). “Physical stability” refers to visual inspection of color and / or transparency and / or size.
  • Biological stability can be evaluated, for example, by assaying the binding activity to an antigen that can be evaluated by a size exclusion chromatography ELISA.
  • Proteins useful for therapeutic use include antibodies. Antibodies bind to proteins expressed on the cell surface and cause cell death to cells! /, And attempts have been made to use antibodies having an effect of inducing cytotoxicity for the treatment of cancer and the like.
  • monoclonal antibodies such as a chimeric antibody (Rituximab) targeting CD20, a receptor present on the cell membrane, and a human i-dani antibody targeting Her2 / neu, are used as targets for malignant tumors. The effect has been recognized. Also published in WO2003 / 033538 !, monoclonal antibodies against HLA-DR (anti-HLA-DR antibody), a kind of class II major histocompatibility complex (MHC) molecule, are considered to be useful.
  • HLA-DR anti-HLA-DR antibody
  • MHC major histocompatibility complex
  • Antibodies have the feature of high specificity for antigens having a long half-life in blood, and are particularly useful as antitumor agents. For example, if an antibody targets a tumor-specific antigen, the administered antibody is expected to accumulate in the tumor, so complement-dependent cytotoxicity (CDC) and antibody-dependent cellular cytotoxicity Activity (ADCC) can be expected to attack the immune system against cancer cells.
  • CDC complement-dependent cytotoxicity
  • ADCC antibody-dependent cellular cytotoxicity Activity
  • the bound drug can be efficiently delivered to the tumor site, and at the same time, non-specific binding to other tissues can be achieved. By reducing the amount of the drug delivered, side effects can be reduced.
  • Administer antibodies with agonistic activity if the tumor-specific antigen has activity to induce cell death, and neutralize if the tumor-specific antigen is involved in cell growth and survival By administering an antibody having activity, accumulation of tumor-specific antibodies and arrest or regression of tumor growth due to antibody activity are expected.
  • Antibodies are considered suitable for application as anti-tumor agents due to their characteristics as described above.
  • MHC major histocompatibility complex
  • Th cells helper cells
  • Monoclonal antibodies specific for class II MHC molecules provide a very potent selection of Th cell immune responses in the mouth (See Baxevanis CN, et. Al., Immunogenetics (1980), 11, 617-625). Since the discovery of such monoclonal antibodies, they have been considered as potential drugs for the selective immunosuppressive treatment of autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis.
  • immunosuppressants such as cyclosporin A and FK506 are used clinically to suppress rejection during organ transplantation, but the problem with these immunosuppressants is that they suppress nonspecific immune responses. Strong side effects occur.
  • a monoclonal antibody (anti-HLA-DR antibody) against HLA-DR, a kind of Class II major histocompatibility complex (MHC) molecule, is immunized through HLA-DR. It is considered to be very useful because it specifically suppresses the activity. Based on the above, antibodies are considered to be suitable for application as immunosuppressants with few characteristic effects.
  • Patent Document 1 W098 / 56418
  • Patent Document 2 Japanese Patent No. 2547556
  • Patent Document 3 WO97 / 04801
  • Non-patent document 1 Therapeutic Drug Carrier System vol.10, No.4, 1993, pp307-377 Problems the invention is trying to solve
  • An object of the present invention is to provide a stable aqueous pharmaceutical preparation containing an antibody. Specifically, an object of the present invention is to provide a stable aqueous pharmaceutical preparation containing a therapeutically effective amount of an antibody in a glutamate buffer solution and / or a citrate buffer solution and having a pH of 4.0 to 6.0.
  • the present inventors have conducted intensive studies on a stable aqueous pharmaceutical preparation containing a therapeutically effective amount of an antibody. As a result, the present inventors have succeeded in stabilizing the antibody in an aqueous pharmaceutical preparation containing the antibody, and have succeeded in the present invention. It was completed.
  • the present invention provides a stable aqueous pharmaceutical preparation containing a therapeutically effective amount of an antibody, glutamic acid and / or citrate that maintains the pH at 4.0 to 6.0.
  • the formulation is at least cold
  • the present invention also provides an article of manufacture comprising a container holding a therapeutically effective amount of an antibody, a stable aqueous pharmaceutical formulation containing a glutamic acid or citrate buffer maintaining the pH at 4.0 to 6.0. About.
  • the present invention further stabilizes the antibody in an aqueous pharmaceutical formulation by combining a therapeutically effective amount of the antibody, glutamate, which maintains the pH at 4.0 to 6.0, with citrate buffer. About the method.
  • the invention relates to a method for treatment, prevention or diagnosis by administering to a mammal a therapeutically effective amount of the aqueous pharmaceutical preparations disclosed herein.
  • diseases include tumors (including leukemia (including chronic lymphocytic leukemia and acute lymphocytic leukemia)), lymphomas (non-Hodgkin's lymphoma, Hodgkin's lymphoma, T-cell lymphoma, and B-cell lymphoma).
  • Lymphoma Burkitt lymphoma, malignant lymphoma, diffuse lymphoma, including follicular lymphoma
  • prevention, treatment or diagnosis of myeloma including multiple myeloma
  • immunosuppression during organ transplantation spleen island Prophylaxis or treatment of rejection and GVHD during transplantation of the liver, kidney, liver, heart, etc.
  • autoimmune diseases eg, rheumatism, anti-arteriosclerotic drugs, multiple sclerosis, systemic lupus erythematosus, idiopathic platelets
  • Decline black
  • the present invention provides prevention or treatment of remedies for allergy such as asthma.
  • the preparation containing the antibody of the present invention is stored at 25 ° C or 40 ° C for 1 month, the antibody polymer, degraded product, deamide product, etc. It was confirmed that the antibody was stable without increasing the number of oxidants and oxidized form, and that the biological activity of the antibody was maintained.
  • the pH of the aqueous pharmaceutical preparation is adjusted to 4.0 to 6.0, the antibody in the preparation is stably maintained at a normal storage temperature of 25 ° C. or lower.
  • FIG. 1 is a graph showing changes in the amount of polymer when each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-HLA-DR antibody was stored at 40 ° C. at 25 ° C. The amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. Shows that the glutamate and citrate buffer formulations are stable.
  • FIG. 2 is a graph showing a change in the amount of a polymer when each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-HLA-DR antibody was stored at 25 ° C. or 40 ° C. The amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. This shows that the glutamate buffer solution is stable at pH 4.0 to pH 6.0.
  • Fig. 3 is a graph showing changes in the amount of degraded products when each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-HLA-DR antibody was stored at 25 ° C or 40 ° C. Degradates were measured by size exclusion HPLC
  • FIG. 4 is a graph showing changes in the amount of deamide when each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-HLA-DR antibody was stored at 25 ° C. or 40 ° C. The amount of deamide was measured by cation exchange HPLC.
  • FIG. 5 is a graph showing changes in the amount of Fc-site oxidized product when each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-HLA-DR antibody was stored at 25 ° C. or 40 ° C.
  • the amount of oxidized Fc site was measured by hydrophobic HPLC. It shows that the glutamate buffer formulation is stable from pH 4.0 to pH 6.0.
  • FIG. 6 is a graph showing changes in the amount of polymer after repeated freezing and thawing of each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-HLA-DR antibody.
  • the amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. This shows that the preparation using sorbitol as a tonicity agent is stable.
  • FIG. 7 is a graph showing changes in the amount of polymer when each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-CD40 antagonist antibody was stored at 25 ° C.
  • the amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. It shows that the glutamate buffer solution is stable at pH 4.0 to pH 6.0.
  • Fig. 8 is a graph showing changes in the amount of degradation products when preserved in each aqueous pharmaceutical preparation containing an anti-CD40 antagonist antibody. Degradation products were measured by size exclusion HPLC. The results show that the daltamate buffer formulation is stable from pH 4.0 to pH 7.0.
  • aqueous pharmaceutical preparation included in the present patent is a form in which an active ingredient that is an antibody having a medicinal effect is dissolved in an aqueous solution, and the active ingredient is clearly effective throughout the solution.
  • This is a form that does not contain any additional components that may disrupt the homeostasis of the patient to whom the preparation is administered.
  • “making the active ingredient clearly effective” means that the contained active ingredient maintains its activity and does not lose its pharmaceutical effect.
  • an additive other than the active ingredient refers to a substance whose safety has been sufficiently confirmed by past therapeutic results or a substance for which no past administration has been performed. ⁇ Especially, toxicological evaluation to cells and animals means that the safety is sufficiently predicted by other methods. That is, the aqueous pharmaceutical preparation of the present invention may contain an active ingredient that is an antibody having a pharmaceutical effect and other pharmaceutically acceptable additives.
  • “preserving the patient's homeostasis” means that additives other than the active ingredient are unacceptable to the patient, do not have biological activity, and / or are isotonic if possible (essentially with human blood). Have the same osmotic pressure).
  • a “stable formulation” is one in which the active ingredient retains chemical and / or physical and / or biological stability during storage. Preferably stable for at least one year at low temperatures (2 ° C to 8 ° C), i.e. preferably for at least 3 months at 25 ° C and / or for at least 1 month at 40 ° C, It is stable against melting, light irradiation and vibration. Protein stability can be determined by various analytical methods Is measured by "Chemical stability” can be assayed by detecting and quantifying the chemically altered state of a protein.
  • Chemical changes can be assessed, for example, by size modification such as clipping, which can be assessed by size exclusion chromatography or SDS-PAGE, by changes in charge (e.g., as a result of deamide), which can be assessed by ion exchange chromatography, and by hydrophobic chromatography. Includes possible changes in hydrophilic / hydrophobic state (eg, resulting from acidification).
  • Physical stability includes the absence of insoluble contaminants and / or turbidity and / or aggregates, which can be assessed by visual inspection of color and / or transparency and / or by size exclusion chromatography.
  • Biological stability can be evaluated, for example, by assaying the binding activity to an antigen that can be evaluated by size exclusion chromatography or ELISA.
  • an antibody retains biological stability if it has not undergone any chemical or physical changes. Therefore, if the antibody in a formulation retains chemical stability and physical stability, the formulation is said to be stable. That is, whether or not the preparation is stable can be determined by measuring the presence or absence of a change in the chemical and physical properties of the contained antibody.
  • the polymer, decomposed product, deamide form, oxidized form and the like of the antibody do not increase so as to decrease the medicinal effect of the preparation during storage, and no insoluble foreign matter or turbidity is observed.
  • the stable formulation of the present invention may be stored for at least one year at low temperature (2 ° C to 8 ° C), or for at least three months at 25 ° C, or for one month at 40 ° C.
  • the antibody polymer, decomposed product, deamide form, or oxidized form does not increase so as to reduce the pharmaceutical effect of the preparation.
  • the polymer of the antibody in the stable formulation of the invention does not increase during storage, e.g., as measured by size exclusion HPLC after storage at 25 ° C or 40 ° C for one month, as compared to the antibody in the product. It is desirable that the proportion of the polymer is small.
  • the decomposition product of the antibody in the stable preparation of the present invention does not increase significantly during storage.
  • the ratio of the decomposition product to the antibody in the preparation even after storage at 25 ° C or 40 ° C for one month Is preferably small.
  • the amount of the deamide form of the antibody in the stable preparation of the present invention does not greatly increase during storage. It is desirable that the ratio of the amide is small.
  • the Fc portion of the antibody in the stable formulation of the invention The oxidized form does not increase significantly during storage.For example, even if stored at 25 ° C or 40 ° C for 1 month, it is desirable that the ratio of the Fc-site oxidized form to the antibody in the drug product is small. ,.
  • the "therapeutically effective amount” of the antibody in the present invention refers to an amount effective for prevention or treatment of a disease for which the antibody is effective for treatment.
  • Disease is any condition that would benefit from treatment with the antibody. This includes chronic and acute diseases or illnesses, including pathological conditions predisposing to diseases in mammals.
  • the therapeutically effective amount of the antibody present in the formulation will be determined, for example, taking into account the desired dose and the mode of administration.
  • About lmg / mL to about 200mg / mL, preferably about 5mg / mL to about 50mg / mL, most preferably about 10mg / mL and / or about 20mg / mL are exemplary antibody concentrations in the formulation.
  • the "antibody” included in the present patent is used in the broadest sense, and particularly includes a monoclonal antibody, a polyclonal antibody, a multispecific antibody, and an antibody fragment as long as it retains a desired biological activity.
  • the present invention relates to a stable aqueous pharmaceutical preparation containing an antibody.
  • Antibodies in the formulation are prepared using techniques available in the art for producing antibodies. That is, (1) purification of biological macromolecules to be used as an immunogen and / or preparation of cells overexpressing an antigen protein on the cell surface, and (2) injection of an antigen into an animal to release it. After the immunization, blood is collected and its antibody titer is tested to determine the timing of removal of the spleen and the like, and then antibody preparation cells are prepared.
  • Monoclonal antibodies include heavy and / or light chains having an amino acid sequence in which one or several amino acids have been deleted, substituted or added in the amino acid sequence of each of the heavy and / or light chains constituting the antibody. Also included are monoclonal antibodies.
  • a partial modification of the amino acid as described above is introduced by partially modifying the base sequence encoding the amino acid sequence. can do.
  • This partial modification of the nucleotide sequence can be introduced by a conventional method using a known site-specific mutagenesis method (Proc Natl Acad Sci USA., 1984 Vol 81: 5662).
  • the term antibody refers to a gene encoding an immunoglobulin in which all regions including the heavy chain variable region and the heavy chain constant region, and the light chain variable region and the light chain constant region, constitute the immunoglobulin. It is an immunoglobulin derived from.
  • the antibodies included in this patent also include antibodies having different immunoglobulin classes and isotypes.
  • the antibody may be a modified antibody having a different subclass, or an IgGlSer or the amino acid at position 331 in the heavy chain constant region EU (see Sequences of proteins of immunological interest, NIH Publication No. 91-3242). Includes modified antibodies as IgG2Ser.
  • radionuclides such as eodo, yttrium, indium, and technetium (JWGoding, Momoclonal Antibodies: principles and practice., 1993 Academic Press)
  • bacterial toxins such as Pseudomonas aeruginosa toxin, diphtheria toxin, ricin, and methotrexate and mitomycin.
  • chemotherapeutic agents such as calicheamicin (DJKmg, Applications and Engineering of Monoclonal Antibodies., 1998 TJlnternational Ltd .; MLGrossbard., Monoclonal Antibody—Based Therapy of Cancer., 1998 Marcel Dekker Inc), and prodrugs such as Maytansinoid (Chari et al, Cancer Res., 1992 Vol. 52: 127; Liu et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1996 Vol. 93: 8681), and the like, thereby treating the therapeutic effects of diseases such as cancer. Also include those with further enhancements.
  • the term “functional fragment” also includes a functional fragment of an antibody, and a “functional fragment” refers to a part (partial fragment) of an antibody that retains one or more actions of an antibody on an antigen.
  • a “functional fragment” A fragment of the body that can bind to an antigen.
  • the antibody to be formulated is preferably essentially pure and desirably essentially homogeneous (ie, free of contaminating proteins and the like).
  • essentially pure antibody is meant a composition containing at least about 90% by weight of the antibody, preferably at least about 95% by weight, based on the total weight of the composition.
  • essentially homogeneous antibody is meant a composition containing at least about 99% by weight of the antibody, based on the total weight of the composition.
  • the antibody included in the present patent is preferably a human antibody, a humanized antibody or a chimeric antibody, preferably IgG, and more preferably one of IgG1, IgG2, and IgG4.
  • the IgG may be an IgG in which a part of the amino acid sequence of the constant region has been deleted by amino acid deletion and / or substitution and / or insertion by genetic modification.
  • a human monoclonal antibody against HLA-DR even more preferably
  • the hybridomas producing HD4, HD6, HD8 and HD10 were FERM BP-7771, FERM BP-7772, FERM BP-7773, and FERM BP-7774, respectively, as of October 11, 2001. It has been deposited internationally at the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (Patent Organism Depositary) (1-1 Tsukuba East, Ibaraki Prefecture, Japan, 1-1-1, Chuo No. 6).
  • Hybridomas producing HD3 and HD7 have been deposited internationally with the Center on October 31, 2003 as FERM BP-08534 and FERM BP-08536, respectively.
  • this patent also includes a human monoclonal antibody against CD40, preferably an anti-CD40 antagonist antibody described in WO2002-088186, KM281-1-10, KM281-2- 10-1-2, KM283-5, KM225-2-56, KM292-1-24, KM341-6-9, 4D11, 5H10, 11E1, 5G3, 3811, 3411, 3417, F4-465, anti-CD40 antibody, KM302- 1, KM341-1-19, KM643-4-11, 2053, 2105, 3821, 3822, 285, 110, 115, Fl-102, F2-103, F5-77, F5-157.
  • hybridoma clones KM 302-1, KM 281-1-10 and KM 281-2-2-10-1-2 were identified on May 9, 2001 as FERM BP-7578, FERM BP-7579, and FERM BP- Clone KM341-1-19 and 4D11 as 7580, FERM BP-7759 and FERM BP-7758 as of September 27, 2001, respectively, and clone 2105 as 2002 FERM BP-8024 on April 17, 2008, was deposited internationally under the Budapest Treaty at the National Institute of Advanced Industrial Science and Technology (AIST), 1-1-1 Tsukuba East, Ibaraki Pref. ing.
  • AIST Advanced Industrial Science and Technology
  • plasmids having the variable regions of the heavy and light chains of F2-103, F5-77, and F5-157 were released on April 19, 2001 as ATCC PTA-3302 (F2-103 heavy chain) and ATCC PTA- 3303 (F2-103 light chain), ATCC PTA-3304 (F5-77 heavy chain), ATCC PTA-3305 (F5-77 light chain), ATCC PTA-3306 (F5-157 heavy chain) and ATCC PTA-3307
  • the "additive" included in the present invention includes all components contained in an aqueous pharmaceutical preparation other than the active ingredient, such as a buffer, a pH adjuster, an isotonic agent, a stabilizer, and a surfactant. , Preservatives, suspending agents, emulsifiers and the like. In addition, one additive component that exhibits two or more effects is also included.
  • Buffer refers to an additive that moderates the change in pH by the action of an acid-base conjugated component.
  • the buffer of the present invention preferably has a pH range of about 4.0 to about 6.0, more preferably about 4.5 to about 6.0, more preferably about 4.0 to about 5.0, more preferably about 4.5 to about 5.0, or about 5.0 to about 6.0.
  • any antibody is stable at 25 ° C or lower, which is the normal storage temperature of pharmaceutical preparations.
  • the stable pH range may change at higher temperatures, for example, at 40 ° C.
  • the buffer solution when an anti-HLA-DR antibody is used as the antibody, the buffer solution preferably has a pH of about 5.0 to 6.0, more preferably pH 5.2 to pH 5.8, and even more preferably about 5.5.
  • the buffer solution preferably has a pH in the range of about 4.0 to 6.0, more preferably about 4.5 to 6.0, and more preferably about 4.0 to about 5.0.
  • buffers that adjust the pH to this range include glutamate (eg, sodium glutamate), acetate (eg, sodium acetate), succinate (eg, sodium succinate), dalconate, citrate, citrate. Salt, ascorbate (e.g. Sodium ascorbate) and other organic acid buffers.
  • the buffer is preferably not phosphate. In the present invention, glutamate or citric acid is preferred, and glutamate is most preferred.
  • the buffer concentration is about 50 mM, preferably 5 mM to 20 mM, most preferably about 10 mM, depending on its buffer capacity and / or the desired osmotic pressure.
  • Isotonicity agent refers to one that adjusts the osmotic pressure so that the formulation of interest has essentially the same osmotic pressure as human blood.
  • An isotonic formulation has an osmotic pressure of about 250 to 350 mOsm, and an osmotic pressure ratio of about 1 to 1 for physiological saline is desirable.
  • salts and / or polyols are used as the tonicity agent.
  • the tonicity agent of the invention is preferably essentially salt-free and the tonicity agent of the invention preferably comprises a polyol.
  • Polyol is a substance having a plurality of hydroxyl groups, and includes sugars (reducing and non-reducing sugars), sugar alcohols and sugar acids. Suitable polyols herein have a molecular weight that is less than about 600 kD (eg, in the range of about 120 kD force and about 400 kD). “Reducing sugars” include hemiacetal groups that can covalently react with lysine in force proteins that can reduce metal ions and other amino groups, and “non-reducing sugars” include those of reducing sugars.
  • reducing sugars are fructose, mannose, maltose, ratatose, arabinose, xylose, ribose, rhamnose, galactose and glucose.
  • Non-reducing sugars include sucrose, trehalose, sorbose, melezitose and raffinose. Mannitol, xylitol, erythritol, threitol, sorbitol and glycerol are examples of sugar alcohols.
  • Sugar acids include L-dalconic acid and its metal salts.
  • Non-reducing sugars are preferred, as they do not chemically affect the antibody in solution, and are polyols. If it is desired that the preparation be stable on freeze-thaw, the antibody in the preparation may be unstable. Those that do not crystallize at a freezing temperature (for example, ⁇ 20 ° C.) at which they become crystalline are suitable. Sorbitol is preferred because it has excellent solution stability.
  • surfactants include nonionic surfactants such as polysorbates (eg, polysorbates 20, 80, etc.) or poloxamers (eg, poloxamers 188).
  • the amount of surfactant added is such that it reduces aggregation of the formulated antibody and / or minimizes the formation of particles in the formulation and / or reduces adsorption.
  • the surfactant preferably comprises polysorbate, preferably polysorbate 80.
  • the surfactant may be present in the formulation in an amount of preferably 0.02 mg / mL to 0.10 mg / mL, most preferably about 0.05 mg / mL.
  • stabilizer refers to an additive carohydrate that further enhances the chemical and / or physical and / or biological stability of the active ingredient during storage with a small amount of additive, preferably 10 mM or less. It is.
  • the preparation of the present invention may contain a stabilizer, for example, glycine, methionine, cysteine hydrochloride, leucine, lysine hydrochloride, arginine hydrochloride, aspartic acid, ascorbic acid, EDTA and salts thereof. More choice.
  • Formulations used for in vivo administration must be sterile. This is facilitated by filtration through a sterile filtration membrane before or following preparation of the formulation.
  • the formulation can be administered to a mammal, preferably a human, in need of treatment with the antibody by known methods, for example, intravenous administration as a bolus or by continuous infusion over a period of time, intramuscular, intraperitoneal, intracerebral, subcutaneous. It may be administered intra-articularly, intrathecally, intrathecally, orally, topically, or by the inhalation route.
  • the formulation is administered to a mammal by intravenous administration.
  • the formulation is injected, for example, using a syringe or via an intravenous drip line.
  • an article of manufacture comprising a container containing the aqueous formulation of the present invention, optionally providing instructions for its use.
  • Suitable containers include, for example, bottles, vials, ampules, and syringes.
  • the container can be formed of various materials such as glass or plastic.
  • An exemplary container is a 3-20 mL glass vial.
  • the container holds the drug product, and the label on or associated with the container indicates directions for use.
  • the article of manufacture may include other buffers, diluents, filters, needles, syringes, and package inserts with instructions for use, and may further include other materials if desired from a commercial and user perspective. Well, you can.
  • the reagents used in this study were anti-HLA-DR antibody (about 18 mg / mL, prepared at Kirin Brewery Pharmaceutical Production Headquarters Production Technology Center according to the method described in WO2003-0033538), sodium L-glutamate monohydrate Japanese product (Japanese Pharmacopoeia), L-histidine (Japanese Pharmacopoeia), sodium citrate monohydrate (Japanese Pharmacopoeia), ascorbic acid (Japanese Pharmacopoeia), D-sorbitol (Japanese Pharmacopoeia) , D-mantol (Japanese Pharmacopoeia), hydrochloric acid (Japanese Pharmacopoeia), polysorbate 80 (Japanese Pharmacopoeia) and water for injection (Japanese Pharmacopoeia).
  • Each of the preparation samples had a 0.22 ⁇ m filter (Millipore) in a clean bench, was subjected to aseptic filtration, and was kept in a clean bench in a 5 mL glass vial (compatible with the Japanese Pharmacopoeia) by lmL. Filling was performed. Further, a solution (placebo) containing no anti-HLA-DR antibody was subjected to aseptic filtration in a clean bench using a 0.22 ⁇ m bottle top filter (manufactured by Nalgen) for dilution of the analysis sample and analysis blank.
  • Thermal stability test Stored in an incubator (manufactured by TABAI ESPEC) controlled at 40 ° C or 25 ° C for 1 month.
  • Size exclusion HPLC assay Polymer content and degradation product content were calculated by size exclusion high performance liquid chromatography. Samples were diluted to lmg / mL as needed and a 15 L injection was performed at ambient temperature. Separation was carried out using a TSKgel G3000 SWXL 30 cm X 7.8 mm (manufactured by Tosoichi Co., Ltd.) column, using 20 mM sodium phosphate and 500 mM sodium chloride pH 7.0 at a flow rate of 0.5 mL / min for 30 minutes, Detection was performed at 215 nm. Those eluted before the main peak were defined as polymers, and those eluted after were defined as degraded products.
  • SEC Size exclusion HPLC assay
  • Cation exchange HPLC assay The content of the deamide compound was calculated by the cation exchange high performance liquid chromatography method. 60 L of a sample appropriately diluted to 5 mg / mL was injected. Detection was performed at 280 nm using TSKgel BIOAssist S (manufactured by Tosoichi) as a separation column. Using 20 mM tartaric acid pH 4.5 for A and 20 mM tartaric acid, 1 M sodium chloride pH 4.5 for B as the mobile phase, the analysis was performed under optimal gradient conditions. The degraded product eluted ahead of the main peak was defined as a deamide.
  • Hydrophobic HPLC assay The content of Fc-site oxidant was calculated by a hydrophobic chromatography method. Add 250 mM sodium phosphate, 12.5 mM L-cysteine, pH 7.0 aqueous solution (20 ⁇ L) and 2.5 mg / mL papain solution (2.5 ⁇ L) to 250 / z L of sample diluted appropriately to lmg / mL, and add 37 ⁇ C For 2 hours to prepare an Fc fragment sample.
  • SDS-PAGE assay The sample solution was diluted to 200 Pg / mL as needed. Specimen solution A half of the SDS sample treatment solution (Daiichi Pure Chemicals) was added to obtain a non-reduced sample solution. Also, add 1/2 volume of Tris SDS
  • Insoluble foreign matter and turbidity The presence of insoluble foreign matter and turbidity was examined with the naked eye at a brightness of about 5000 lux immediately under a white light source.
  • Osmotic pressure ratio The osmotic pressure was measured using an automatic osmotic pressure measuring device (OSMO STATION OM-6050 manufactured by Arkley), and the ratio of the measured osmotic pressure to the osmotic pressure of physiological saline was calculated at the same time.
  • PH pH was measured using an automatic pH measuring device (such as MP-230 manufactured by METTLER TOLEDO). At the start of measurement, calibration was performed using pH4, pH7, and pH9 standard solutions, followed by measurement.
  • an automatic pH measuring device such as MP-230 manufactured by METTLER TOLEDO.
  • Figure 1 shows the change in the amount of polymer when each aqueous pharmaceutical preparation was stored at 25 ° C or 40 ° C.
  • the amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. It shows that the glutamate buffer solution and the citrate buffer solution are stable.
  • ascorbate buffer was unstable in other analysis items (degradation products, amides, and oxidized Fc sites), while glutamate buffer and citrate buffer were stable.
  • the preparation containing the ascorbate buffer solution was colored yellowish brown after storage.
  • Glutamic acid and citrate buffer solutions were stable with no change before and after storage. The amount of insoluble fine particles was slight in all samples, and no change was observed before and after storage. Also, when stored at 25 ° C or 40 ° C, the pH should be as low as that of the ascorbic acid buffer. / There was a tendency to shift to a lower pH side. Glutamate and citrate buffer formulations were stable with no change before and after storage
  • the osmotic pressure ratio was about 1 for all samples, and no change was observed before and after stress loading.
  • glutamic acid and citric acid are suitable as buffers for stabilizing antibodies.
  • glutamic acid is used as a buffer.
  • Example 2 Aqueous preparation containing anti-HLA-DR antibody (pH study)
  • Thermal stability test Stored for one month in an incubator (manufactured by TABAI ESPEC) controlled at 40 ° C or 25 ° C.
  • Freezing and thawing test Samples were repeatedly frozen and thawed three times by alternately storing in a -20 ° C freezer and a 4 ° C low-temperature freezer. The sample is completely frozen by visual inspection at each cycle. Confirmed that it had melted.
  • the test was performed for 20 minutes under the vibration condition of 40 mm to prepare a specimen.
  • Figure 2 shows the change in the amount of polymer when each aqueous pharmaceutical preparation was stored at 25 ° C or 40 ° C.
  • the amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. It shows that the glutamate buffer solution is stable from pH 4.0 to pH 6.0.
  • FIG. 3 shows the change in the amount of degradation products when each aqueous pharmaceutical preparation was stored at 25 ° C. or 40 ° C. Degradation products were measured by size exclusion HPLC. It shows that the glutamate buffer solution is stable at pH 4.0 to pH 7.0 when stored at 25 ° C. Furthermore, electrophoretic images were obtained by SDS-PAGE analysis, which showed the same tendency as the results obtained by size exclusion HPLC.
  • FIG. 4 shows the change in the amount of the deamide compound when each aqueous pharmaceutical preparation was stored at 40 ° C. at 25 ° C.
  • the amount of deamide was measured by cation exchange HPLC. It shows that the glutamate buffer solution is stable from pH 4.0 to pH 7.0 when stored at 25 ° C.
  • FIG. 5 shows the change in the amount of the Fc-site acid group when each aqueous pharmaceutical preparation was stored at 25 ° C. or 40 ° C.
  • the amount of oxidized Fc site was measured by hydrophobic HPLC. This shows that the glutamate buffer solution is stable from pH 4.0 to pH 6.0. Foreign matter and turbidity, insoluble foreign matter, osmotic pressure ratio and pH were almost unchanged before and after stress loading, and were stable.
  • the amount of the polymer, the decomposed product, the amide compound, and the Fc-site oxidized product was found to increase in the shifted sample after the light irradiation.
  • the change can be suppressed by shading with a paper box. Therefore, it can be stored stably by taking some shading treatment during storage. No changes were observed before and after freeze-thaw and vibration stress loading in any of the analysis items, and the results were stable.
  • FIG. 6 shows the change in the amount of polymer after repeated freezing and thawing of each aqueous pharmaceutical preparation.
  • the amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. This shows that the preparation using sorbitol as an isotonic dandruff is stable. Sorbitol does not crystallize even when frozen, whereas mannitol crystallizes when frozen, which suggests that antibody molecules may be physically destroyed during freezing. It has been proved that a polyol which does not crystallize upon freezing, such as sorbitol, is more preferable as the polyol used for the tonicity agent. There was no difference in stability under other test conditions.
  • the inventors have conducted a preliminary study to compare salts (salt sodium) or sugar (sorbitol) as an isotonic agent, and found that a polymer, a decomposed product, and a deamide product were formed in a heat stability test. It has been found that the amount is more stable when saccharides are used.
  • the tonicity agent of the present invention is preferably a polyol which is essentially free of salts, preferably a non-reducing sugar which does not chemically affect the antibody in solution, and is preferably a polyol. If the preparation is desired to be stable on freeze-thaw, it is preferable that the preparation does not crystallize at a freezing temperature (for example, ⁇ 20 ° C.) that destabilizes the antibody in the preparation. Sorbitol is an excellent solvent Preferred for having liquid stability.
  • the present inventors have also used polysorbate 80 as a surfactant, and are studying the effect of the concentration on antibody stability. Agglomeration of the formulated antibody was reduced by the addition of a surfactant. It was observed that the amount of Fc-site oxidized antibody in the antibody tended to be increased by adding 0.20 mg / mL or more of added syrup while applying force.
  • the surfactant is preferably present in the formulation in an amount of 0.02 mg / mL to 0.10 mg / mL, most preferably about 0.05 mg / mL.
  • the present inventors have conducted preliminary studies, and in addition to the examples described above, in addition to the examples described above, the stabilizer added kamu (daricin, methionine, cysteine hydrochloride, leucine, lysine hydrochloride, arginine hydrochloride, aspartic acid, ascorbic acid) , EDTA).
  • kamu daricin, methionine, cysteine hydrochloride, leucine, lysine hydrochloride, arginine hydrochloride, aspartic acid, ascorbic acid
  • EDTA EDTA
  • glycine-added syrup has a further effect of suppressing insoluble fine particles
  • methionine has an effect of suppressing the formation of oxidized bodies. Therefore, the present invention may include these stabilizers.
  • the antibody used in the present invention (HD3, HD4, HD6, HD7, HD8, HD10, HD4G1, HD4G2Ser, HD4G4, HD8G1, HD8GlSer, HD8G2, HD8G2Ser, HD8G4) is transformed with a gene encoding the antibody to express and produce the antibody.
  • composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD3 B Composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD4
  • D-sorbitol 47.73mg D-sorbitol 47.73mg polysorbate 80 0.05 mg polysorbate 80 0.05% distilled water for injection (lmL) distilled water for injection (lmL)
  • composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD6 Composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD7
  • composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD8 F Composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD10 Recommended lOmg HD10 lOmg Sodium glutamate monohydrate 1.87mg 1.87mg Sodium glutamate monohydrate 1.87mg Japanese
  • composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD4G1 H Composition of aqueous pharmaceutical preparation containing HD4G2ser
  • the aqueous pharmaceutical preparation thus obtained is sterilized using a sterile filtration membrane, filled into a vial that has been sterilized roughly using an automatic filling machine or the like under sterile control, and stoppered with a rubber stopper. Then, a sterile antibody-containing aqueous pharmaceutical preparation is obtained by tightening an aluminum cap.
  • Example 5 Aqueous preparation containing anti-CD40 antibody
  • This example describes an aqueous formulation containing an antibody against CD40 (anti-CD40 antagonist antibody) published in WO 02-088186.
  • the reagent used in this study was an anti-CD40 antagonist antibody (about 15 mg / mL, prepared at the Production Technology Center of Kirin Brewery Pharmaceutical Production Division according to the method described in WO 02-088186), sodium L-glutamate monohydrate Japanese product (Non-Japanese Pharmacopoeia), D-sorbitol (Japanese Pharmacopoeia), sodium hydroxide (Japanese Pharmacopoeia), hydrochloric acid (Japanese Pharmacopoeia), polysorbate 80 (Japanese Pharmacopoeia), water for injection (Japan) Pharmacopoeia).
  • Each preparation sample was subjected to aseptic filtration using a 0.22 ⁇ m filter (Millipore) in a clean bench, and lmL each was placed in a 5mL glass vial (Fuji Glass Co., Ltd. White U-KB2CS (uncoated)). Filling was performed while maintaining sterility in a clean bench.
  • a solution (placebo) containing no anti-CD40 antagonist antibody was subjected to aseptic filtration using a 0.22 ⁇ m bottle-top filter (manufactured by Nargen) in a clean bench for dilution of the analysis sample and analysis blank.
  • Thermal stability test placed in an incubator (manufactured by TABAI ESPEC) controlled at 40 ° C or 25 ° C. Saved for months.
  • Size exclusion HPLC assay Polymer content and degradant content were calculated by size exclusion high performance liquid chromatography. Samples were diluted to lmg / mL as needed and a 15 L injection was performed at ambient temperature. Separation was carried out using a TSKgel G3000 SWXL 30cm X 7.8mm (manufactured by Tosoh I), 20mM sodium phosphate, 500mM sodium chloride pH7.0 as the mobile phase at a flow rate of 0.5mL / min for 30 minutes. Detection was at 215 nm. Those eluted before the main peak were defined as polymers, and those eluted after were defined as decomposed products.
  • SDS-PAGE assay The sample solution was diluted to 200 g / mL as needed. One-half volume of Tris SDS sample treatment solution (manufactured by Daiichi Kagaku) was added to the sample solution to obtain a non-reduced sample solution. Also, add 1/2 volume of Tris SDS ⁇ ME sample treatment solution (Daiichi Pure Chemicals) to the product diluted as necessary, and heat at 65 ° C for 15 minutes to obtain a reduced sample solution. . The electrophoresis tank was filled with Tris / glycine / SDS buffer for electrophoresis (manufactured by BioRad).
  • Osmotic pressure ratio The osmotic pressure was measured using an automatic osmotic pressure measuring device (OSMO STATION OM-6050, manufactured by Arkley), and the ratio to the osmotic pressure of physiological saline measured at the same time was calculated.
  • OSMO STATION OM-6050 automatic osmotic pressure measuring device
  • pH The pH was measured using an automatic pH measurement device (such as MP-230 manufactured by METTLER TOLEDO). At the start of measurement, calibration was performed using pH4, pH7, and pH9 standard solutions, followed by measurement.
  • an automatic pH measurement device such as MP-230 manufactured by METTLER TOLEDO.
  • FIG. 7 shows the amount of polymer when each aqueous pharmaceutical preparation was stored at 25 ° C.
  • the amount of polymer was measured by size exclusion HPLC. It shows that it is stable from PH4.0 to 6.0.
  • Figure 8 shows each water doctor. Shows the amount of degraded product when the drug preparation is stored at 40 ° C. Degradants were measured by size exclusion HPLC. The amount of decomposition products was very small regardless of pH. The pH when stored at 25 ° C. or 40 ° C. was stable for all samples, with no change observed before and after storage. The osmotic pressure ratio was about 1 for all samples, and no change was observed before and after stress loading.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

　抗体を含有する安定な水性医薬製剤の提供。 　グルタミン酸緩衝液および/又はクエン酸緩衝液中に、治療上有効な量の抗体を含み、pHが4.0～6.0である安定な水性医薬製剤。

Description

明 細 書
抗体を含有する安定な水性医薬製剤
技術分野
[0001] 本発明は抗体を含有する安定な水性医薬製剤に関するものである。
背景技術
[0002] 近年の生物工学の進展に伴って、組換え DNA技術を駆使し医療用途のタンパク質 を大量に純度良く造りだすことが可能となった。し力しながら、タンパク質は従来の化 学合成分子と異なり、分子量が大きくその三次元構造も複雑であるため、そのような タンパク質を生物活性を保ったまま安定に保存するには、その物性を考慮した特別 な技術が必要となる。タンパク質を安定に保った製剤は、タンパク質に含まれる多数 の異なった官能基を保護し、また活性に関与している高次構造を保つ必要がある。 医療用として有用なタンパク質の一つとして抗体がある。抗体を安定化する方法とし ての一つとして、例えば特表 2001/503781 (W098/22136)にあるように凍結乾燥を 行いタンパク質の安定ィ匕を行う方法が挙げられている。し力しながら、臨床現場にお いて凍結乾燥製剤は投与準備が煩雑であるため医療従事者にとって作業が精神的 Z時間的な負担となり、また手技による細菌混入の危険性も懸念される。凍結乾燥 製剤に対して、溶液製剤では投与前の準備作業は単純であり、それゆえ細菌混入の リスクも低減するので、医療現場においては溶液状態において安定なタンパク質製 剤が望ましいと考えられる。
[0003] 溶液状態で安定なタンパク質製剤に関して以下の文献がある。
[0004] Clelandら The Development of Stable Protein Formulation: A close Look at Protein
Aggregation, Deamination and Oxidation (Therapeutic Drug Carrier System vol.10, No.4, 1993, pp307-377)はタンパク質分解に関する一般的な概説およびタンパク質 分解を低減する方策に対する見解を提供する。しかし、この文献は抗体の水性医薬 製剤につ ヽて塩を含まず、 pH5.0-6.0のグルタミン酸緩衝液ある ヽはクェン酸緩衝液 を使用することは提示して ヽな 、。
[0005] W098/56418は前もって凍結乾燥を受けて ヽな ヽ治療上有効な抗体と酢酸緩衝液 と界面活性剤とポリオールを含有する水性医薬製剤に関して記述している。しかし、 pHを維持する緩衝剤としてグルタミン酸あるいはクェン酸が好適であることも提示し ていない。
[0006] 特許 2547556号公報は酢酸緩衝液とソルビトールを含有する γ -グロブリン製剤を 開示している。しかし、これは pHを維持する緩衝剤がグルタミン酸あるいはクェン酸を 含むことに関しては提示していない。また、界面活性剤の添加が好適であることも提 示していない。
[0007] WO97/04801は再構成されて皮下投与に好適な凍結乾燥製剤を開示している。し かし、これは凍結乾燥されていない製剤であることも、 pHを維持する緩衝剤が ΡΗ5.0-6.0のグルタミン酸あるいはクェン酸を使用することも提示して!/、な!/、。
[0008] 「安定な製剤」は、その製剤を投与される患者に対して毒性がある成分を含まず、ま た患者の生体恒常性をできる限り崩さない活性成分以外の添加物を加えることにより 、その中の活性成分が保存時において化学的および/又は物理的および/又は生物 学的安定性を保持するものである。「患者の生体恒常性をできる限り崩さない活性成 分以外の添加物」とは過去の治療実績により十分に安全性が確認されたもの、ある いは過去の投与実績がな 、物質にぉ ヽても細胞、動物への毒性評価ある 、はその 他方法により安全性が十分に予測されるものを言う。また「患者の生体恒常性を保つ 」とは、活性成分以外の添加剤が患者に許容できない生物活性を有さないこと、およ び/又は可能であれば等張 (ヒトの血液と本質的に同じ浸透圧を有していること)であ ることなどが含まれる。
[0009] タンパク質の安定性は、様々な分析方法により測定される。例えば新 ·タンパク質精 製法理論と実際、 RK^コープス著、シュプリンガー'フエアラーク東京出版に概説され ている。「化学的安定性」はタンパク質の化学的に変化した状態を検出し定量するこ とにより検定することができる。化学的変化は例えばサイズ排除クロマトグラフや SDS-PAGEにより評価でき得るクリッピングなどのサイズ修飾や、イオン交換クロマトグ ラフにより評価でき得る電荷の変化 (例えばデアミドの結果生じる）および疎水クロマト グラフにより評価でき得る親水性/疎水性状態の変化 (例えば酸ィ匕の結果生じる）な どを含む。「物理的安定性」は色および/又は透明性の目視検査時および/又はサイ ズ排除クロマトグラフにより評価でき得る、不溶性異物および/又は濁りおよび/又は 凝集体を生じないことなどを含む。「生物的安定性」は例えばサイズ排除クロマトダラ フゃ ELISAなどにより評価可能な抗原への結合活性を検定することにより評価可能で ある。
[0010] 治療用途に有用なタンパク質には抗体が含まれる。抗体は細胞表面に発現する蛋 白質に結合し、細胞に対して細胞死ある!/、は傷害性を誘導する作用を有する抗体を 癌などの治療に用いることが試みられている。現在、細胞膜上に存在するレセプター である CD20を標的としたキメラ抗体（Rituximab)、 Her2/neuを標的としたヒトイ匕抗体な どのモノクローナル抗体が、悪性腫瘍を対象疾患として使用されており、その治療効 果が認められて 、る。また WO2003/033538に公開されて!、るようにクラス II主要組織 適合遺伝子複合体 (MHC)分子の一種である HLA-DRに対するモノクローナル抗体 ( 抗 HLA-DR抗体)なども有用であると考えられる。抗体は、血中半減期が長ぐ抗原 への特異性が高いという特徴を持ち、抗腫瘍剤として特に有用である。例えば、腫瘍 特異的な抗原を標的とした抗体であれば、投与した抗体は腫瘍に集積することが推 定されるので、補体依存性細胞傷害活性 (CDC)や抗体依存的細胞性細胞傷害活 性 (ADCC)による、免疫システムの癌細胞に対する攻撃が期待できる。また、その抗 体に放射性核種や細胞毒性物質などの薬剤を結合しておくことにより、結合した薬 剤を効率よく腫瘍部位に送達することが可能となり、同時に、非特異的な他組織への 該薬剤到達量が減少することで、副作用の軽減も見込むことができる。腫瘍特異的 抗原に細胞死を誘導するような活性がある場合はァゴニスティックな活性を持つ抗体 を投与することで、また、腫瘍特異的抗原が細胞の増殖および生存に関与する場合 は中和活性を持つ抗体を投与することで、腫瘍特異的な抗体の集積と、抗体の活性 による腫瘍の増殖停止又は退縮が期待される。抗体は、上記のようにその特徴から 抗腫瘍剤として適用するのに適切であると考えられる。
[0011] また、クラス II主要組織適合遺伝子複合体 (MHC)分子は、抗原ペプチド断片に結 合し、これらの抗原ペプチド断片をヘルパー (CD4+) T細胞（「Th」細胞）に提示する（ Babbin B. et al., Nature (1985) , 317, 359- 361参照）。クラス II MHC分子に特異的な モノクローナル抗体は、インビト口において Th細胞の免疫応答の非常に強力な選択 的阻害剤であることが報告されている（Baxevanis CN, et. al.， Immunogenetics (1980 ) , 11, 617-625参照)。このようなモノクローナル抗体は発見されて以来、慢性関節リ ゥマチなどの自己免疫疾患の選択的免疫抑制治療に使用できる可能性のある薬物 として考えられている。初期のインビボにおける研究により、これらモノクローナル抗 体が Th細胞性異種および自己免疫応答に対して与える有用な影響が明らかにされ た（Rosenbaum JT. et al, J. Exp. Med. (1981) , 154, 1694—1702; Waldor MK. et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1983) , 80, 2713-2717; Jonker M. et al" J. Autoimmun. (1988) , 1, 399-414; Stevens HP. et. al" Transplant. Proc. (1990) , 22, 1783- 1784参 照)。さらに霊長類における研究により、同種移植における移植片対宿主反応を抑制 することが明らかにされた（Billing R. & Chatterjee S. (1983) , Transplant. Proc, 15, 649-650; Jonker M. et. al., Transplant Proc. (1991) , 23, 264—265)。現在臨床的に は臓器移植時の拒絶反応の抑制には、シクロスポリン Aや FK506といった免疫抑制剤 が用いられて 、るが、これらの免疫抑制剤の問題点は免疫反応を非特異的に抑制し てしまうため強い副作用が起こる。例えば WO2003-033538に公開されているようにク ラス II主要組織適合遺伝子複合体 (MHC)分子の一種である HLA-DRに対するモノク ローナル抗体 (抗 HLA-DR抗体）は HLA-DRを介した免疫活性を特異的に抑制する ため、非常に有用であると考えられる。以上より、抗体はその特徴力も副作用の少な い免疫抑制剤として適用するのに適切であると考えられる。
以上のように、治療用途に好適な多くの抗体が研究、開発、実用化され、医療現場 で頻繁に使用されるようになった現状においては、投与準備の操作が簡便で、細菌 混入の危険性も低い、安定な水性医薬製剤が必要とされている。特に、抗 HLA-DR 抗体のような治療用途に好適な抗体を含有する安定な水性医薬製剤が当該分野で 必要とされている。
特許文献 1： W098/56418
特許文献 2：特許 2547556号公報
特許文献 3： WO97/04801
非特許文献 1 : Therapeutic Drug Carrier System vol.10, No.4, 1993, pp307- 377 発明の開示 発明が解決しょうとする課題
[0013] 本発明は、抗体を含有する安定な水性医薬製剤の提供を目的とする。具体的には グルタミン酸緩衝液および/又はクェン酸緩衝液中に、治療上有効な量の抗体を含 み、 pHが 4.0-6.0である安定な水性医薬製剤の提供を目的とする。
課題を解決するための手段
[0014] 本発明者らは治療上有効な量の抗体を含む安定な水性医薬製剤を鋭意研究した 結果、抗体を含む水性医薬製剤中にお!ヽて抗体の安定化に成功し本発明を完成す るに至った。
[0015] 本発明では、治療上有効な量の抗体、 pHを 4.0から 6.0に維持するグルタミン酸およ び/又はクェン酸を含有する安定な水性医薬製剤を提供する。製剤は少なくとも低温
(2°Cから 8°C)において 1年以上安定であり、すなわち少なくとも 25°Cにおいて 3箇月 間および/又は 40°Cにおいて 1箇月間安定であり、製剤の凍結融解および振動に安 定である。
[0016] 本発明はまた治療上有効な量の抗体、 pHを 4.0から 6.0に維持するグルタミン酸ある いはクェン酸緩衝液を含有する安定な水性医薬製剤を保持する容器を具備してなる 製造品に関する。
[0017] さらに本発明は治療上有効な量の抗体、 pHを 4.0から 6.0に維持するグルタミン酸あ ¾ ヽはクェン酸緩衝液を組み合わせることにより、水性医薬製剤中にお 、て抗体を 安定化する方法に関する。
[0018] なお異なる側面では、本発明はここで開示した水性医薬製剤の治療上有効な量を 哺乳動物に投与することよる治療、予防あるいは診断方法に関する。抗体が抗 HLA-DR抗体である場合は、疾患の例として腫瘍（白血病（慢性リンパ性白血病、急 性リンパ性白血病を含む）、リンパ腫 (非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、 T細胞 系リンパ腫、 B細胞系リンパ腫、バーキットリンパ腫、悪性リンパ腫、びまん性リンパ腫 、濾胞性リンパ腫を含む)、骨髄腫 (多発性骨髄腫を含む)など)の予防、治療又は診 断、臓器移植時における免疫抑制 (脾島や腎臓、肝臓、心臓などの移植時における 拒絶反応、 GVHDの予防又は治療）、あるいは自己免疫疾患 (例えば、リウマチ、動 脈硬化治療薬、多発性硬化症、全身性エリトマト一デス、特発性血小板減少症、クロ ーン病など)治療、喘息などアレルギー治療剤の予防又は治療を提供する。
[0019] 本発明のこれらの側面は当業者には明らかであろう。
発明の効果
[0020] 実施例に示したように、本願発明の抗体を含む製剤は、 25°Cまたは 40°Cで 1ヶ月保 存しても、保存期間中に抗体の重合体、分解物、デアミド体、および酸化体が増加す ることなぐ安定であり、また抗体の生物学的活性も保持されていることが確認された 。実施例に示したように、水性医薬製剤の pHを 4.0— 6.0にすることにより、通常の保 存温度である 25°C以下で該製剤中の抗体が安定に保たれる。
[0021] 本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願 2003-431400号の明細書 および/または図面に記載される内容を包含する。
図面の簡単な説明
[0022] [図 1]図 1は抗 HLA-DR抗体を含む各水性医薬製剤を 25°Cある ヽは 40°Cで保存した ときの重合体量の変化を示す図である。重合体量はサイズ排除 HPLCにより測定した 。グルタミン酸緩衝液製剤およびクェン酸緩衝液製剤が安定であることを示す。
[図 2]図 2は抗 HLA-DR抗体を含む各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40°Cで保存した ときの重合体量の変化を示す図である。重合体量はサイズ排除 HPLCにより測定した 。グルタミン酸緩衝液製剤が pH4.0から pH6.0で安定であることを示す。
[図 3]図 3は抗 HLA-DR抗体を含む各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40°Cで保存した ときの分解物量の変化を示す図である。分解物量はサイズ排除 HPLCにより測定した
[図 4]図 4は抗 HLA-DR抗体を含む各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40°Cで保存した ときのデアミド体量の変化を示す図である。デアミド体量は陽イオン交換 HPLCにより 測定した。
[図 5]図 5は抗 HLA-DR抗体を含む各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40°Cで保存した ときの Fc部位酸ィ匕体量の変化を示す図である。 Fc部位酸化体量は疎水 HPLCにより 測定した。グルタミン酸緩衝液製剤が PH4.0から pH6.0で安定であることを示す。
[図 6]図 6は抗 HLA-DR抗体を含む各水性医薬製剤を凍結および融解を繰り返した 後の重合体量の変化を示す図である。重合体量はサイズ排除 HPLCにより測定した。 等張化剤としてソルビトールを用いた製剤が安定であることを示す。
[図 7]図 7は抗 CD40アンタゴニスト抗体を含む各水性医薬製剤を 25°Cで保存したとき の重合体量の変化を示す図である。重合体量はサイズ排除 HPLCにより測定した。グ ルタミン酸緩衝液製剤が PH4.0から pH6.0で安定であることを示す。
[図 8]図 8は抗 CD40アンタゴニスト抗体を含む各水性医薬製剤で保存したときの分解 物量の変化を示す図である。分解物量はサイズ排除 HPLCにより測定した。ダルタミ ン酸緩衝液製剤が PH4.0から pH7.0で安定であることを示す。
発明を実施するための最良の形態
[0023] 以下、本発明を詳細に説明する。
[0024] 本特許に含まれる「水性医薬製剤」とは、医薬効果を有する抗体である活性成分が 水性溶液に溶解した形態であり、溶液中にぉ ヽて活性成分を明確に効果的であるも のとする形態であり、製剤が投与される患者に対して生体恒常性を崩す可能性があ る更なる成分を含まないものをいう。ここで「活性成分を明確に効果的であるものとす る」とは、含まれる活性成分がその活性を維持しており、医薬効果を失っていないこと をいう。
[0025] 「患者の生体恒常性をできる限り崩さな!/、活性成分以外の添加剤」とは過去の治療 実績により十分に安全性が確認されたもの、あるいは過去の投与実績がない物質に ぉ ヽても細胞、動物への毒性評価ある 、はその他方法により安全性が十分に予測さ れるものを言う。すなわち、本発明の水性医薬製剤は、医薬効果を有する抗体である 活性成分と医薬的に許容できるその他の添加剤を含み得る。また「患者の生体恒常 性を保つ」とは、活性成分以外の添加剤が患者に許容できな 、生物活性を有さな ヽ こと、および/又は可能であれば等張 (ヒトの血液と本質的に同じ浸透圧を有している こと）であることなどが含まれる。
[0026] 「安定な製剤」とはその中の活性成分が保存時において化学的および/又は物理 的および/又は生物学的安定性を保持するものである。好ましくは少なくとも低温 (2 °Cから 8°C)において 1年以上安定であり、すなわち好ましくは 25°Cにおいて少なくとも 3箇月間および/又は 40°Cにおいて少なくとも 1箇月間安定であり、製剤の凍結融解、 光照射および振動に安定であることをいう。タンパク質の安定性は、様々な分析方法 により測定される。「化学的安定性」はタンパク質の化学的に変化した状態を検出し 定量することにより検定することができる。化学的変化は例えばサイズ排除クロマトグ ラフや SDS-PAGEにより評価でき得るクリッピングなどのサイズ修飾や、イオン交換ク 口マトグラフにより評価でき得る電荷の変化 (例えばデアミドの結果生じる）および疎 水クロマトグラフにより評価でき得る親水性/疎水性状態の変化 (例えば酸ィヒの結果 生じる）などを含む。「物理的安定性」は色および/又は透明性の目視検査時および/ 又はサイズ排除クロマトグラフにより評価でき得る、不溶性異物および/又は濁りおよ び/又は凝集体を生じないことなどを含む。「生物的安定性」は例えばサイズ排除クロ マトグラフや ELISAなどにより評価可能な抗原への結合活性を検定することにより評 価可能である。抗体が化学的または物理的な変化を受けていない場合、その抗体は 生物的安定性を保持している。従って、製剤中の抗体が化学的安定性および物理 的安定性を保持している場合、その製剤は安定であると言える。すなわち、製剤が安 定であるかどうかは、含まれる抗体の化学的および物理的特性の変化の有無を測定 することによりわかる。安定な製剤は、抗体の重合体、分解物、デアミド体、酸化体等 が保存中に製剤の医薬効果を減じるほど増加することがなぐまた不溶性異物や濁り も認められない。本発明の安定な製剤は、少なくとも低温 (2°Cから 8°C)において 1年 以上保存しても、あるいは少なくとも 25°Cにおいて 3箇月間保存しても、あるいは 40°C において 1箇月間保存しても、抗体の重合体、分解物、デアミド体、酸化体が製剤の 医薬効果を減じるほど増力 tlしない。また、製剤を凍結融解してもまたは振動を与えて も、抗体の重合体、分解物、デアミド体、酸ィ匕体が製剤の医薬効果を減じるほど増加 しない。本発明の安定な製剤中の抗体の重合体は、保存中に増加することはなぐ 例えば 25°Cまたは 40°Cで 1箇月保存した後にサイズ排除 HPLCで測定した場合、製 剤中の抗体に対する重合体の割合は小さいことが望ましい。また、本発明の安定な 製剤中の抗体の分解物は、保存中に大きく増加することはなぐ例えば 25°Cまたは 40 °Cで 1箇月保存しても、製剤中の抗体に対する分解物の割合は小さいことが望ましい 。また、本発明の安定な製剤中の抗体のデアミド体の量は、保存中に大きく増加する ことはなぐ例えば 25°Cまたは 40°Cで 1箇月保存しても、製剤中の抗体に対するデァ ミド体の割合は小さいことが望ましい。さらに、本発明の安定な製剤中の抗体の Fc部 位酸化体は、保存中に大きく増加することはなぐ例えば 25°Cまたは 40°Cで 1箇月保 存しても、製剤中の抗体に対する Fc部位酸ィ匕体の割合は小さ 、ことが望ま 、。
[0027] 本発明における抗体の「治療上有効な量」とは、治療に抗体が有効である疾患の 予防又は治療に有効な量を指す。「疾患」とは抗体での治療による利益がある任意 の症状である。これは、哺乳類の疾患の素因になる病理的状態を含む慢性および急 性疾患又は疾病を含む。製剤中に存在する抗体の治療上有効な量は、例えば望ま しい用量および投与形態を考慮に入れて決定される。約 lmg/mLから約 200mg/mL 、好ましくは約 5mg/mLから約 50mg/mL、最も好ましくは約 10mg/mLおよび/又は約 20mg/mLが製剤中の例示的な抗体濃度である。
[0028] 本特許に含まれる「抗体」とは最も広い意味において使用され、特にモノクローナル 抗体、ポリクローナル抗体、多重特異性抗体、また所望の生物活性を保持する限りは 抗体断片を含む。
[0029] 本発明は抗体を含有する安定な水性医薬製剤に関するものである。製剤中の抗体 は、抗体を産生するために該当分野で利用できる技術を使用して調製される。すな わち、（1)免疫原として使用する、生体高分子の精製および/又は抗原タンパク質を 細胞表面に過剰に発現している細胞の作製、（2)抗原を動物に注射することにより免 疫した後、血液を採取しその抗体価を検定して脾臓等の摘出の時期を決定してから 、抗体産生細胞を調製する工程、（3)骨髄腫細胞 (ミエローマ)の調製、（4)抗体産生 細胞とミエローマとの細胞融合、（5)目的とする抗体を産生するハイプリドーマ群の選 別、（6)単一細胞クローンへの分割（クローニング）、（7)場合によってはモノクローナ ル抗体を大量に製造するためのハイプリドーマの培養、又はハイプリドーマを移植し た動物の飼育、 (8)場合によってはハイプリドーマ等の抗体産生細胞力もヒトモノクロ ーナル抗体をコードする遺伝子をクロー-ングし、適当なベクターに組み込んで、こ れを宿主 (例えば哺乳類細胞細胞株、大腸菌、酵母細胞、昆虫細胞、植物細胞など )に導入し、遺伝子組換え技術を用いて産生させた組換え型抗体の調製、（9)このよ うにして得られた抗体の精製（10)このようにして製造されたモノクローナル抗体の生 理活性およびその認識特異性の検討、あるいは標識試薬としての特性の検定、等で ある。 モノクローナル抗体には、抗体を構成する重鎖および/又は軽鎖の各々のアミノ酸 配列において、 1又は数個のアミノ酸が欠失、置換若しくは付加されたアミノ酸配列を 有する重鎖および/又は軽鎖力 なるモノクローナル抗体も包含される。本発明の抗 体のアミノ酸配列中に、前記のようなアミノ酸の部分的改変 (欠失、置換、挿入、付カロ )は、そのアミノ酸配列をコードする塩基配列を部分的に改変することにより導入する ことができる。この塩基配列の部分的改変は、既知の部位特異的変異導入法 (site specific mutagenesis)を用いて定法により導入することができる（Proc Natl Acad Sci USA., 1984 Vol81:5662)。ここで、抗体とは、ィムノグロブリンを構成する重鎖可変領 域および重鎖定常領域、並びに軽鎖の可変領域および軽鎖の定常領域を含む全て の領域が、ィムノグロブリンをコードする遺伝子に由来するィムノグロブリンである。本 特許に含まれる抗体には、 、ずれのィムノグロブリンクラスおよびアイソタイプを有す る抗体をも包含する。抗体には、サブクラスを組替えた改変抗体、又はさらに重鎖定 常域の EUナンノ リングンスアム (Sequences of proteins of immunological interest, NIH Publication No.91-3242を参照）における 331番目のアミノ酸を Serに置き換え IgGlSerもしくは IgG2Serとした改変抗体をも含む。さらに、ョード、イットリウム、インジ ゥム、テクネチウム等の放射性核種（J.W.Goding, Momoclonal Antibodies: principles and practice., 1993 Academic Press)、緑膿菌毒素、ジフテリアトキシン、リシンのよう な細菌毒素、およびメトトレキセート、マイトマイシン、カリキアマイシンなどの化学療 法剤 (D.J.Kmg, Applications and Engineering of Monoclonal Antibodies., 1998 T.J.lnternational Ltd.; M.L.Grossbard., Monoclonal Antibody— BasedTherapy of Cancer., 1998 Marcel Dekker Inc)、さらに、 Maytansinoid等のプロドラッグ（Chari et al, Cancer Res., 1992 Vol.52:127; Liu et al, Proc. Natl. Acad.Sci. USA, 1996 Vol.93:8681)などを結合させることにより癌などの疾患の治療効果をさらに増強したも のも包含する。また抗体の機能的断片も含み、「機能的断片」とは、抗体の一部分（ 部分断片)であって、抗体の抗原への作用を 1つ以上保持するものを意味し、具体的 に ίま F (ab') 、 Fab'、 Fab、 Fv、ジスノレフイド結合 Fv、一本鎖 Fv (scFv)、ダイァボディ、
2
およびこれらの重合体等が挙げられる（D.J.King., Applications and Engineering of Monoclonal Antibodies., 1998 T.J.lnternational Ltd)。あるいは、「機能的断片」は、抗 体の断片であって抗原と結合しうる断片である。製剤化される抗体は好ましくは本質 的に純粋であり、望ましくは本質的に均質である (すなわち、汚染タンパク質等を含ま ない)。「本質的に純粋な」抗体とは、組成物の全重量に対して、少なくとも約 90重量 %の抗体、好ましくは少なくとも約 95重量％の抗体を含有する組成物を意味する。「 本質的に均質な」抗体とは、組成物の全重量に対して少なくとも約 99重量％の抗体 を含有する組成物を意味する。
本特許に含まれる抗体は、好ましくはヒト抗体、ヒト型化抗体又はキメラ抗体であり、 好ましくは IgGであり、好ましくは IgGのサブクラス力 IgGl、 IgG2、 IgG4のいずれかで ある。また IgGが、定常領域のアミノ酸配列の一部に遺伝子改変により、アミノ酸の欠 失、および/又は、置換、および又は、挿入が行われた IgGであっても良い。また、より 好ましくは HLA-DRに対するヒトモノクローナル抗体、さらに好ましくは
WO2003- 033538に記載されている抗 HLA-DRヒトモノクローナル抗体、 HD3, HD4, HD6, HD7, HD8, HD10, HD4G1, HD4G2Ser, HD4G4, HD8G1, HD8GlSer, HD8G2, HD8G2Ser, HD8G4である。このうち、 HD4, HD6, HD8および HD10を産生 するハイプリドーマは、それぞれ FERM BP- 7771、 FERM BP- 7772、 FERM BP- 7773、 FERM BP-7774として、 2001年 10月 11日付で独立行政法人 産業技術総合研究所 特許生物寄託センター (日本国茨城県つくば巿東 1丁目 1番地 1 中央第 6)に国際 寄託されている。また、 HD3および HD7を産生するハイブリドーマは、それぞれ FERM BP-08534および FERM BP-08536として、 2003年 10月 31日付で同センターに国際寄 託されている。さらに、本特許には CD40に対するヒトモノクローナル抗体も含まれ、好 ましくは WO2002-088186に記載されている抗 CD40アンタゴ-スト抗体、 KM281-1-10 、 KM281- 2- 10- 1- 2、 KM283- 5、 KM225- 2- 56、 KM292- 1- 24、 KM341- 6- 9、 4D11、 5H10、 11E1、 5G3、 3811、 3411、 3417、 F4- 465、抗 CD40ァゴ-スト抗体、 KM302- 1、 KM341-1-19, KM643-4-11, 2053、 2105、 3821、 3822、 285、 110、 115、 Fl-102、 F2- 103、 F5- 77、 F5- 157である。このうち、ハイプリドーマクローン KM 302-1、 KM 281- 1-10および KM 281- 2- 10- 1-2は 2001年 5月 9日付でそれぞれ FERM BP- 7578、 FERM BP- 7579、 FERM BP- 7580として、クローン KM341- 1- 19および 4D11は 2001年 9月 27日付でそれぞれ FERM BP-7759、 FERM BP-7758として、クローン 2105は 2002 年 4月 17日付で FERM BP-8024として、独立行政法人産業技術総合研究所特許生 物寄託センター (茨城県つくば巿東 1丁目 1番地 1中央第 6)にブダペスト条約に基づ き国際寄託されている。さらに、 F2-103、 F5-77および F5-157の重鎖および軽鎖の可 変領域を有するプラスミドは 2001年 4月 19日付でそれぞれ ATCC PTA-3302 (F2-103 重鎖）、 ATCC PTA-3303 (F2- 103軽鎖）、 ATCC PTA- 3304(F5- 77重鎖)、 ATCC PTA-3305 (F5-77軽鎖）、 ATCC PTA- 3306 (F5- 157重鎖）および ATCC PTA- 3307 (F5-157軽鎖）として、ハイプリドーマクローン F1- 102および F4- 465は 2001年 4月 24 日付でそれぞれ ATCC PTA- 3337および ATCC PTA- 3338として、（American Type Culture Collection, 10801 University Blvd., Manassas, Virginia,USA)(アメリカ国立菌 培養収集所、アメリカ合衆国ヴァージ-ァ州 20110-2209マナサス 10801ュ-バー シティブルバード)にブダペスト条約に基づき国際寄託されている。
[0032] 本発明に含まれる「添加剤」とは活性成分以外の水性医薬製剤に含まれる全ての 成分を含み、例えば緩衝剤、 pH調整剤、等張化剤、安定化剤、界面活性剤、防腐剤 、懸濁剤、乳化剤などが含まれる。また一種類の添加剤成分において二種類以上の 効果を示すものも含まれる。
[0033] 「緩衝剤」は酸塩基共役成分の作用により pHの変化を穏やかにする添加剤を指す 。本発明の緩衝液は好ましくは約 4.0から約 6.0の pH範囲、より好ましくは約 4.5から約 6.0、より好ましくは約 4.0から約 5.0、より好ましくは約 4.5から約 5.0、あるいは約 5.0から 約 6.0、 pH5.2から pH5.8、約 5.5の pHを有している。この範囲の pHを有している緩衝 液を用いた場合、いかなる抗体も通常の医薬製剤の保存温度である 25°C以下で安 定である。なお、抗体の種類によっては、より高温、例えば 40°Cで安定な pH範囲が変 わってくる場合もある。例えば、抗体に抗 HLA-DR抗体を用いた場合の緩衝溶液は、 約 5.0から 6.0、より好ましくは pH5.2から pH5.8、さらに好ましくは約 5.5の pHを有してい るのが好ましぐ抗体に抗 CD40アンタゴニスト抗体を用いた場合の緩衝溶液は、約 4.0から 6.0の pHの範囲、より好ましくは約 4.5から 6.0、より好ましくは約 4.0から約 5.0を 有していることが好ましい。 pHをこの範囲に調節する緩衝剤の例には、グルタミン酸 塩 (例えばグルタミン酸ナトリウム）、酢酸塩 (例えば酢酸ナトリウム）、コハク酸塩 (例え ばコハク酸ナトリウム）、ダルコン酸塩、クェン酸、クェン酸塩、ァスコルビン酸塩（例え ばァスコルビン酸ナトリウム）および他の有機酸バッファーが含まれる。凍結融解上安 定な製剤が望まれる場合は、緩衝剤は好ましくはリン酸塩ではない。本発明におい て好ましくはグルタミン酸塩又はクェン酸であり、最も好ましくはグルタミン酸塩である
。緩衝剤濃度はその緩衝能力および/又は所望の浸透圧に応じて約 ImM力ゝら約 50mM、好ましくは 5mMから 20mM、最も好適なのは約 10mMである。
[0034] 「等張化剤」は対象の製剤がヒトの血液と本質的に同じ浸透圧を有するよう浸透圧 を調製するものを指す。等張製剤は約 250から 350mOsmの浸透圧を有し、生理食塩 水の浸透圧を 1とした浸透圧比は約 1であることが望ましい。等張化剤は一般に塩類 又は/およびポリオールが用いられる。本発明の等張化剤は好ましくは本質的に塩を 含まず、本発明の等張化剤は好ましくはポリオールを有している。
[0035] 「ポリオール」は複数のヒドロキシル基を有する物質であり、糖 (還元および非還元 糖)、糖アルコールおよび糖酸を含む。ここで好適なポリオールは、約 600kD未満 (例 えば約 120kD力 約 400kDの範囲）である分子量を有する。「還元糖」は、金属イオン を低減することができる力タンパク質中のリジンと他のアミノ基と共有的に反応できる へミアセタール基を含むものであり、「非還元糖」は、還元糖のこれらの性質を有さな いものである。還元糖の例はフルクトース、マンノース、マルトース、ラタトース、ァラビ ノース、キシロース、リボース、ラムノース、ガラクトースおよびグルコースである。非還 元糖は、スクロース、トレハロース、ソルボース、メレジトースおよびラフイノースを含む 。マンニトール、キシリトール、エリスリトール、スレイトール、ソルビトールおよびグリセ ロールが糖アルコールの例である。糖酸については、 L -ダルコン酸とその金属塩が 含まれる。溶液中にぉ 、て抗体に化学的影響を与えな 、非還元糖が好ま U、ポリオ ールであり、製剤が凍結融解上安定であることが望まれる場合は、製剤中の抗体を 不安定化させるような凍結温度 (例えば- 20°C)で結晶化しな 、ものが好適である。ソ ルビトールが優れた溶液安定性を有して 、るため好まし 、。
[0036] 「界面活性剤」には、ポリソルベート（例えばポリソルベート 20、 80など）又はポロキサ マー（例えばポロキサマー 188)のような非イオン性界面活性剤が含まれる。添加され る界面活性剤の量は、製剤化された抗体の凝集を低減し、および/又は製剤中の粒 子の形成を最小化し、および/又は吸着を低減するような量である。本発明において 界面活性剤として好ましくはポリソルベートを含み、好ましくはポリソルベート 80を含む 。界面活性剤は製剤中に、好ましくは 0.02mg/mLから 0.10mg/mL、最も好ましくは約 0.05mg/mLの量で存在しうる。
[0037] 「安定化剤」とは、少量の添加、好ましくは 10mM以下の添カ卩により保存時において 活性成分の化学的および/又は物理的および/又は生物的安定性をより高める添カロ 剤である。本発明の製剤には安定化剤が含まれていても良ぐ例えばグリシン、メチ ォニン、塩酸システィン、ロイシン、塩酸リジン、塩酸アルギニン、ァスパラギン酸、ァ スコルビン酸、 EDTAおよびそれらの塩など力 なる群より選択される。
[0038] インビボ投与に使用される製剤は無菌でなければならない。これは、製剤の調製前 又はそれに続 、て、無菌濾過膜を通過させる濾過により容易になされる。
[0039] 製剤は、抗体での治療を必要としている哺乳動物、好ましくはヒトに、既知の方法、 例えばボーラスとしてもしくは一定時間にわたる連続注入による静脈内投与、筋肉内 、腹腔内、大脳内、皮下、関節内、滑液包内、くも膜下腔内、経口、局所的、又は吸 入経路により、投与される。好適な実施態様では、製剤は静脈内投与により哺乳動 物に投与される。このような目的には、製剤は、例えばシリンジを使用して、又は点滴 静注ラインを介して注入される。
[0040] 本発明の他の実施態様にぉ ヽて、本発明の水性製剤を収容する容器を具備した 製造品が提供され、場合によってその使用のための指示を提供する。好適な容器に は、例えば、ビン、バイアル、アンプルおよびシリンジが含まれる。容器はガラス又は プラスチックのような様々な材料で形成することができる。例示的な容器は 3-20mLの ガラス製バイアルである。容器は製剤を収容し、容器上又は容器に伴うラベルは使用 上の指示が示されている。製造品は、他の緩衝剤、希釈剤、フィルター、針、シリンジ 、および使用指示書を伴うパッケージ挿入物を含んでいても良ぐ市販および使用者 の観点力 望まし 、他の材料を更に含んで 、てもよ 、。
実施例
[0041] 本発明は次の実施例を参照すれば更に十分に理解されるであろう。しかし、これら 実施例は、発明の範囲を制限するものではない。全ての文献と特許は出典を明示し てここに取込む。 [0042] 実施例 1 抗 HLA-DR抗体を含有する水性製剤 (緩衝剤の検討）
この実施例は WO2003/033538に公開されて!、る HLA-DRに対する抗体（抗
HLA-DR抗体)を含有する水性製剤を記述する。
[0043] 本実施例では表 1に示した製剤を調製し、緩衝剤の種類が抗体の安定性に与える 影響につ 1、て評価を行った。
[表 1]
本研究に供した製剤一覧
Figure imgf000016_0001
[0044] (1) 製剤検体の調製
本検討に使用した試薬は、抗 HLA- DR抗体（約 18mg/mL、 WO2003-0033538に記 載されている方法に従ってキリンビール社医薬生産本部生産技術センターにて調製 )、 L-グルタミン酸ナトリウム一水和物（日本薬局方外医薬品規格)、 L-ヒスチジン（日 本薬局方）、クェン酸ナトリウム一水和物（日本薬局方）、ァスコルビン酸（日本薬局方 )、 D-ソルビトール（日本薬局方）、 D-マン-トール（日本薬局方）、塩酸（日本薬局方 )、ポリソルベート 80 (日本薬局方）、注射用水（日本薬局方)であった。
[0045] 各製剤検体はあらかじめ原薬を含まな 、プラセボ溶液を作製し、抗 HLA-DR抗体 溶液を NAPカラム (フアルマシアバイオテク社製)をもち、、て製剤プラセボ溶液と置換 することにより調製した。またタンパク濃度は OD280nm吸光度係数 ε =1.4を用い換算 し濃度を調整した。
[0046] 各製剤検体はクリーンベンチ内で 0.22 μ mフィルター（ミリポア社製)をもち、、無菌濾 過を行い、 5mLガラスバイアル（日本薬局方に適合）に lmLずつクリーンベンチ内で 無菌を保って充填を行った。さらに分析検体の希釈および分析のブランクのため抗 HLA-DR抗体を含まない溶液（プラセボ）をクリーンベンチ内で 0.22 μ mボトルトップフ ィルター（ナルゲン社製）を用い無菌濾過を行った。
[0047] (2)試験条件
本実施例にぉ ヽて安定性評価を行うため、以下の条件に従 ヽ各製剤検体にストレ スを与免た。
[0048] 熱安定性試験： 40°C又は 25°Cに制御されたインキュベータ（TABAI ESPEC社製）に 1 箇月間保存した。
[0049] また、各検体は各ストレス負荷後分析開始まで 4°Cに制御された低温庫に保存した
[0050] (3)分析方法
サイズ排除 HPLC検定 (SEC)：重合体含量および分解物含量はサイズ排除高速液 体クロマトグラフ法により算出した。必要に応じて検体を lmg/mLに希釈し 15 Lの注 入を雰囲気温度で行った。分離は TSKgel G3000 SWXL 30cm X 7.8mm (東ソ一社製 )カラムを使用し、移動相として 20mMリン酸ナトリウム、 500mM塩化ナトリウム pH7.0を 用い 0.5mL/分の流量で分析時間は 30分、検出を 215nmで行った。なお主ピークより 前に溶出するものを重合体、後に溶出するものを分解物と定義した。
[0051] 陽イオン交換 HPLC検定 (IEC)：デアミド体含量は陽イオン交換高速液体クロマトグ ラフ法により算出した。 5mg/mLに適宜希釈を行った検体を 60 L注入した。分離カラ ムとして TSKgel BIOAssist S (東ソ一社製）を用い 280nmで検出を行った。移動相とし て Aに対して 20mM酒石酸 pH4.5、 Bに対して 20mM酒石酸、 1M塩化ナトリウム pH4.5を 用い、最適なグラジェント条件を用い分析を行った。なお、主ピークより前方に溶出し た劣化物をデアミド体と定義した。
[0052] 疎水 HPLC検定 (HIC)： Fc部位酸ィ匕体の含量は疎水クロマトグラフ法により算出し た。 lmg/mLに適宜希釈を行った検体 250 /z Lに対し 250mMリン酸ナトリウム、 12.5mM L-システィン、 pH7.0水溶液 20 μ Lと 2.5mg/mLのパパイン溶液 2.5 μ Lを加え 37°Cで 2時間酵素処理を行 、Fcフラグメント検体を調製した。調製した Fcフラグメント検体を 15 μ L注入し、分離カラムとして TSKgel ButyFNPR 3.5cm X 4.6mm (東ソ一社製）を用 い 215nmで分析および検出を行った。移動相は Aとして 20mM Tris (hydroxymethyl) aminomethane、 pH7.0、 Bとし飞 20mM Tris (hydroxymethyl) aminomethane、 2M硫酸 アンモ-ゥム、 pH7.0を用い、最適なグラジェント条件を用い分析を行った。なお、主 ピークより前方に溶出した劣化物を酸ィ匕体と定義した。
[0053] SDS-PAGE検定：必要に応じて検体溶液を 200 μ g/mLに希釈した。検体溶液にトリ ス SDSサンプル処理液 (第一化学薬品社製)を 2分の 1容加え、非還元検体溶液とし た。また、本品を必要に応じて希釈したものにトリス SDS |8 MEサンプル処理液 (第一 化学薬品社製)を 2分の 1容加え、 65°Cで 15分間加熱し、還元検体溶液とした。泳動 槽に電気泳動用トリス/グリシン/ SDS緩衝液 (BioRad社製)を満たした。試料溶液 5 μ Lを 4- 20%ポリアクリルアミドゲル (第一化学薬品社製）にアプライし、電気泳動を約 20mA定電流で、試料溶液に含まれるブロモフエノールブルーの青色がゲルの下端 付近に移動するまで行った。泳動終了後のゲルを銀染色し検出した。なお検体およ び劣化体のおおよその分子量を判定するために分子量マーカー（200kDa,
116.2kDa, 66.3kDa, 42.4kDa, 30.0kDa, 17.2kDaのタンパク質を含む）を同時に泳動 した。
[0054] 不溶性異物および濁り：白色光源の直下、約 5000ルクスの明るさの位置で、肉眼で 不溶性異物および濁りの有無を調べた。
[0055] 浸透圧比：自動浸透圧測定装置（アークレー社製 OSMO STATION OM-6050)を 用いて浸透圧測定を行!、、同時に測定した生理食塩水の浸透圧に対する比を計算 した。
[0056] pH：自動 pH測定装置 (メトラー ·トレド社製 MP-230など）を用いて pH測定を行った。測 定開始時に pH4、 pH7および pH9の標準溶液を用い校正を行った後測定を行った。
[0057] (4)結果
図 1は各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40°Cで保存したときの重合体量の変化を示 す。重合体量はサイズ排除 HPLCにより測定した。グルタミン酸緩衝液製剤およびク ェン酸緩衝液製剤が安定であることを示す。また、その他の分析項目（分解物、デァ ミド体、 Fc部位酸化体）においてもァスコルビン酸緩衝液は不安定であり、一方でグ ルタミン酸緩衝液製剤およびクェン酸緩衝液製剤は安定であった。
[0058] 肉眼による目視検査ではァスコルビン酸緩衝液を含む製剤では保存後黄色ある ヽ は褐色に着色した。グルタミン酸、クェン酸緩衝液製剤では保存前後で変化は認め られず安定であった。不溶性微粒子はいずれの検体においても僅かであり、また保 存前後での変化は認められず安定であった。また 25°Cあるいは 40°Cで保存したとき の pHはァスコルビン酸緩衝液製剤にお！/ヽて低 pH側にシフトする傾向が認められた。 グルタミン酸、クェン酸緩衝液製剤では保存前後で変化は認められず安定であった
。浸透圧比は全ての検体で約 1であり、ストレス負荷前後における変化は認められな かった。
[0059] ァスコルビン酸緩衝液を用 V、た製剤は測定した多くの劣化指標にお 、て大きな値 を示し非常に不安定であることが明らかとなった。
[0060] 本実施例により抗体を安定ィ匕させる緩衝剤としてグルタミン酸、クェン酸が好適であ ることが判明した。最も好ましくは緩衝剤として、グルタミン酸を用いることが望ましい。
[0061] 実施例 2 抗 HLA-DR抗体を含有する水性製剤 (pHの検討）
この実施例は WO2003/033538に公開されて!、る HLA-DRに対する抗体（抗
HLA-DR抗体)を含有する水性製剤を記述する。
[0062] 本実施例では表 2に示した製剤を調製し、好適な製剤 pHの詳細な評価を行った。
[表 2]
Figure imgf000019_0001
[0063] (1)材料と方法
本実施例に用いた材料および分析方法は実施例 1に示したものと同様である。
[0064] (2)試験条件
本実施例にぉ ヽて安定性評価を行うため、以下の条件に従 ヽ各製剤検体にストレ スを与免た。
[0065] 熱安定性試験： 40°C又は 25°Cに制御されたインキュベータ (TABAI ESPEC社製） に 1箇月保存した。
[0066] 凍結融解試験: -20°C冷凍庫および 4°C低温庫に交互に保存することにより凍結融 解を 3回繰り返して検体とした。なおサイクル毎に目視により検体が完全に凍結あるい は融解したことを確認した。
[0067] 強制振動試験：振動試験機 (大洋科学工業社製 RECIPRO SHAKER SR-II)を用い 300rpm、
40mm振動条件で 20分間行い、検体を調製した。
[0068] 光安定性試験:約 4000ルクスに制御した白色蛍光灯下、 120万ルクス時となるように 検体を光照射した。
[0069] (3)結果
図 2は各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40°Cで保存したときの重合体量の変化を示 す。重合体量はサイズ排除 HPLCにより測定した。グルタミン酸緩衝液製剤が pH4.0 から PH6.0で安定であることを示す。また、図 3は各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40 °Cで保存したときの分解物量の変化を示す。分解物量はサイズ排除 HPLCにより測 定した。グルタミン酸緩衝液製剤が 25°Cで保存したときに pH4.0から pH7.0で安定で あることを示す。さらに SDS-PAGE分析にぉ ヽてもサイズ排除 HPLCで得られた結果と 同様の傾向が認められる泳動像が得られた。図 4は各水性医薬製剤を 25°Cある!/、は 40°Cで保存したときのデアミド体量の変化を示す。デアミド体量は陽イオン交換 HPLCにより測定した。グルタミン酸緩衝液製剤が 25°Cで保存したときに pH4.0から PH7.0において安定であることを示す。また、図 5は各水性医薬製剤を 25°Cあるいは 40°Cで保存したときの Fc部位酸ィヒ体量の変化を示す。 Fc部位酸化体量は疎水 HPLCにより測定した。グルタミン酸緩衝液製剤が pH4.0から pH6.0で安定であること を示す。目視による異物および濁り、不溶性異物、浸透圧比および pHはストレス負荷 前後における変化はほとんど認められず、安定であった。
[0070] 光安定性試験の結果、光照射後に!、ずれの検体にお 、ても重合体、分解物、デァ ミド体、 Fc部位酸ィ匕体量の増加が認められたものの、これら変化は紙箱による遮光に より抑制可能である。従って、保存時に何らかの遮光処置をとることで安定に保管可 能である。なお、凍結融解および振動ストレス負荷前後における変化はいずれの分 析項目においても認められず、安定であった。
[0071] 実施例 3 抗 HLA-DR抗体含有製剤 (等張化剤の検討）
この実施例は WO2003/033538に公開されて!、る HLA-DRに対する抗体（抗 HLA-DR抗体)を含有する水性製剤を記述する。
本実施例では表 3に示した製剤を調製し、製剤の等張化剤が製剤の安定性に与え る影響を評価した。
[表 3]
Figure imgf000021_0001
[0073] (1)材料と方法
本実施例に用いた材料および分析方法は実施例 1に示したものと同様である。
[0074] (2)試験条件
実施例 2に示した方法と同様に検体へストレスを負荷した。
[0075] (3)結果および考察
図 6は各水性医薬製剤を凍結および融解を繰り返した後の重合体量の変化を示す 。重合体量はサイズ排除 HPLCにより測定した。等張ィ匕剤としてソルビトールを用いた 製剤が安定であることを示す。ソルビトールは凍結時においても結晶化しないのに対 して、マンニトールは凍結時に結晶化することから、凍結時に抗体分子を特に物理的 に破壊する可能性が考えられる。等張化剤に用いるポリオールとしてソルビトールの ような凍結時に結晶とならないものがより好適であると証明された。その他試験条件 において安定性に差異は認められな力 た。また発明者は予備的な検討により等張 ィ匕剤として塩 (塩ィ匕ナトリウム)あるいは糖 (ソルビトール)を比較した試験を行っており 、熱安定性試験において重合体、分解物、デアミド体生成量に関して糖類を用いた 場合により安定である知見を得て 、る。
[0076] 従って、本発明の等張化剤は好ましくは本質的に塩を含まず、好ましくは溶液中に ぉ 、て抗体に化学的影響を与えな 、非還元糖が好まし 、ポリオールであり、製剤が 凍結融解上安定であることが望まれる場合は、製剤中の抗体を不安定化させるような 凍結温度 (例えば- 20°C)で結晶化しな 、ものが好適である。ソルビトールが優れた溶 液安定性を有して 、るため好ま 、。
[0077] また本発明者は界面活性剤としてポリソルベート 80を用い、その濃度が抗体の安定 性に与える影響についても研究している。界面活性剤の添カ卩により製剤化された抗 体の凝集が低減された。し力しながら、 0.20mg/mL以上の過剰量の添カ卩により抗体 の Fc部位酸ィ匕体量が増加する傾向が認められた。従って、界面活性剤は製剤中に 好ましくは 0.02mg/mLから 0.10mg/mL、最も好ましくは約 0.05mg/mLの量での存在が 良い。
[0078] また発明者は予備的な検討により、これまでの実施例に加えて安定化剤添カ卩 (ダリ シン、メチォニン、塩酸システィン、ロイシン、塩酸リジン、塩酸アルギニン、ァスパラ ギン酸、ァスコルビン酸、 EDTA)の検討を行った。例えばグリシン添カ卩により不溶性 微粒子のさらなる抑制効果が認められ、またメチォニンは酸ィ匕体生成抑制の効果が 得られている。従って、本発明にはこれら安定化剤を含んでいても良い。
[0079] またさらに、 HSAに対する組換え完全ヒト IgGl抗体 (抗 HSA抗体）を用い同様の検 討を行っており、本発明は抗体種類によらず成立することを確認している。また、抗 HSA抗体を用いた水性医薬製剤の検討では抗体濃度 Img/mLから lOOmg/mLまで検 討を行っており、本発明で明らかになった方法は抗体濃度によらず成り立つことが明 らかとなつている。
[0080] 実施例 4 抗体含有医薬製剤の調製
抗体を含有する安定な水性医薬製剤の調製例を以下に記載する。
[0081] 本発明に用いる抗体（HD3, HD4, HD6, HD7, HD8, HD10, HD4G1, HD4G2Ser, HD4G4, HD8G1, HD8GlSer, HD8G2, HD8G2Ser, HD8G4)をコードする遺伝子で 形質転換され該抗体を発現産生し得る CHO細胞の培養上清から、 WO2003-033538 に示されている方法で該抗体を精製する。この精製抗体を約 lOmg/mLに濃縮後、限 外濾過膜を用いて 10mMグルタミン酸緩衝液、 262mM D-ソルビトール、 pH=5.5バッフ ァ一に置換する。バッファー置換後の回収液中に含まれる抗体濃度を 20mg/mLに濃 縮および調製した後、ポリソルベート 80を 0.05mg/mLとなるように添加し抗体を 20mg/mL含む水性医薬製剤を得る。また上記 20mg/mL抗体製剤を抗体の含まれて いない水性医薬製剤（10mMグルタミン酸緩衝液、 262mM D-ソルビトール、 0.05mg/mLポリソルベート 80溶液）で希釈 -ることにより任意の抗体濃度の水性医薬 製剤を調製する。以下の表 4の Aから Nに ί体を lOmg/mL含有する水性医薬製剤 lmLあたりの組成例を示す。
[表 4]
A HD3含有水性医薬製剤の組成 B HD4含有水性医薬製剤の組成
HD3 10mg HD4 グルタミン酸ナトリゥム一水 1. 87mg グルタミン酸ナトリゥム一水 1. 87mg 和物 和物
塩酸 0. 057mg 塩酸 0. 057mg
D-ソルビトール 47. 73mg D -ソルビトール 47. 73mg ポリソルベート 80 0. 05mg ポリソルベート 80 0. 05mg 注射用蒸留水 (lmL) 注射用蒸留水 (lmL)
C HD6含有水性医薬製剤の組成 D HD7含有水性医薬製剤の組成
HD6 lOmg HD7 lOmg グルタミン酸ナトリゥム一水 1. 87mg グルタミン酸ナトリ ウム一水 1. 87mg 和物 和物
塩酸 0. 057mg 塩酸 0. 057mg
D ソルビトール 47. 73mg D-ソルビトール 47.73mg ポリソルべ一ト 80 0.05mg ポリソルベー卜 80 0. 05mg 注射用蒸留水 (lmL) 注射用蒸留水 (lmL)
E HD8含有水性医薬製剤の組成 F HD10含有水性医薬製剤の組成 薦 lOmg HD10 lOmg グルタミン酸ナトリゥム一水 1. 87mg グルタミン酸ナトリゥム一水 1. 87mg 和物 和物
塩酸 0. 057mg 塩酸 0. 057mg
D-ソルビトール 47. 73mg D-ソルビトール 47. 73mg ポリソルベート 80 0. 05mg ポリソルベート 80 0. 05ng 注射用蒸留水 (lmL) 注射用蒸留水 (lmL)
G HD4G1含有水性医薬製剤の組成 H HD4G2ser含有水性医薬製剤の組成
HD4G1 lOmg HD4G2ser lOmg グノレタミン酸ナトリウム一水 1. 87mg グルタミン酸ナトリ ゥム一水 1. 87mg 和物 和物
酸 0. 057mg 塩酸 0. 057mg
D ソルビトール 47. 73mg D-ソルビト一ル 47. 73mg ポリソルベート 80 0. 05mg ポリソルベー卜 80 0. 05mg 注射用蒸留水 (lmL) 注射用蒸留水 (lmL) [0082] I HD4G4含有水性医薬製剤の組成 J HD8G1含有水性医薬製剤の組成
Figure imgf000024_0001
Figure imgf000024_0002
[0083] このようにして得られた水性医薬製剤は無菌濾過膜を用い無菌とし、無菌管理され た自動充填機などを用いて、あら力じめ滅菌されたバイアルに充填し、ゴム栓で施栓 、アルミキャップを卷締めすることで無菌の抗体含有水性医薬製剤を得る。
[0084] 実施例 5 抗 CD40抗体を含有する水性製剤
この実施例は WO 02-088186に公開されて 、る CD40に対する抗体 (抗 CD40アンタ ゴニスト抗体)を含有する水性製剤を記述する。
[0085] 本実施例では表 1に示した製剤を調製し、 pHが抗体の安定性に与える影響につい て評価を行った。
[表 5] 本研究に供した製剤一覧
Figure imgf000025_0001
[0086] 製剤検体の調製
本検討に使用した試薬は、抗 CD40アンタゴニスト抗体（約 15mg/mL、 WO 02-088186に記載されている方法に従ってキリンビール社医薬生産本部生産技術セ ンターにて調製)、 L-グルタミン酸ナトリウム一水和物（日本薬局方外医薬品規格）、 D-ソルビトール（日本薬局方)、水酸ィ匕ナトリウム（日本薬局方)、塩酸（日本薬局方） 、ポリソルベート 80 (日本薬局方）、注射用水（日本薬局方)であった。
[0087] 各製剤検体はあらカ^め原薬を含まないプラセボ溶液を作製し、抗 CD40アンタゴ 二スト抗体を NAPカラム (フアルマシアバイオテク社製)をもち ヽて製剤プラセボ溶液と 置換することにより調製した。またタンパク濃度は OD280nm吸光度係数 ε =1.65を用 い換算し濃度を調整した。
[0088] 各製剤検体はクリーンベンチ内で 0.22 μ mフィルター（ミリポア社製）をもちい無菌濾 過を行い、 5mLガラスバイアル（不二硝子 (株）白 U- KB2CS (コーティングなし））に lmLずつクリーンベンチ内で無菌を保って充填を行った。さらに分析検体の希釈およ び分析のブランクのため抗 CD40アンタゴ-スト抗体を含まな 、溶液 (プラセボ）をクリ ーンベンチ内で 0.22 μ mボトルトップフィルター（ナルゲン社製）を用い無菌濾過を行 つた o
[0089] 試験条件
本実施例において安定性評価を行うため、以下の条件に従い各製剤検体にストレ スを与免た。
[0090] 熱安定性試験： 40°C又は 25°Cに制御されたインキュベータ（TABAI ESPEC社製）に 1 箇月間保存した。
[0091] また、各検体は各ストレス負荷後分析開始まで 4°Cに制御された低温庫に保存した [0092] 分析方法
サイズ排除 HPLC検定 (SEC)：重合体含量および分解物含量はサイズ排除高速液体 クロマトグラフ法により算出した。必要に応じて検体を lmg/mLに希釈し 15 Lの注入 を雰囲気温度で行った。分離は TSKgel G3000 SWXL 30cm X 7.8mm (東ソ一社製）力 ラムを使用し、移動相として 20mMリン酸ナトリウム、 500mM塩化ナトリウム pH7.0を用い 0.5mL/分の流量で分析時間は 30分、検出を 215nmで行った。なお主ピークより前に 溶出するものを重合体、後に溶出するものを分解物と定義した。
[0093] SDS- PAGE検定:必要に応じて検体溶液を 200 g/mLに希釈した。検体溶液にトリス SDSサンプル処理液 (第一化学薬品社製)を 2分の 1容加え、非還元検体溶液とした。 また、本品を必要に応じて希釈したものにトリス SDS β MEサンプル処理液 (第一化学 薬品社製)を 2分の 1容加え、 65°Cで 15分間加熱し、還元検体溶液とした。泳動槽に 電気泳動用トリス/グリシン/ SDS緩衝液 (BioRad社製)を満たした。試料溶液 5 Lを 4- 20%ポリアクリルアミドゲル (第一化学薬品社製）にアプライし、電気泳動を約 20mA 定電流で、試料溶液に含まれるブロモフエノールブルーの青色がゲルの下端付近に 移動するまで行った。泳動終了後のゲルを銀染色し検出した。なお検体および劣化 体のおおよその分子量を判定するために分子量マーカー（200.0kDa, 116.2kDa, 66.3kDa, 42.4kDa, 30.0kDa, 17.2kDaのタンパク質を含む）を同時に泳動した。
[0094] 浸透圧比：自動浸透圧測定装置（アークレー社製 OSMO STATION OM-6050)を用 V、て浸透圧測定を行 、、同時に測定した生理食塩水の浸透圧に対する比を計算し た。
[0095] pH：自動 pH測定装置 (メトラー ·トレド社製 MP-230など）を用いて pH測定を行った。測 定開始時に pH4、 pH7および pH9の標準溶液を用い校正を行った後測定を行った。
[0096] 結果および考察
図 7は各水性医薬製剤を 25°Cで保存したときの重合体量を示す。重合体量はサイ ズ排除 HPLCにより測定した。 PH4.0から 6.0で安定であることを示す。図 8は各水性医 薬製剤を 40°Cで保存したときの分解物量を示す。分解物はサイズ排除 HPLCにより 測定した。分解物量は pHに関わらず微量であった。また 25°Cあるいは 40°Cで保存し たときの pHは全ての検体にぉ 、て保存前後で変化は認められず安定であった。浸 透圧比は全ての検体で約 1であり、ストレス負荷前後における変化は認められなかつ た。
本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本 明細書にとり入れるものとする。

Claims

請求の範囲
[I] グルタミン酸緩衝液および/またはクェン酸緩衝液中に、治療上有効な量の抗体を 含み、 pH力 .0— 6.0である安定な水性医薬製剤。
[2] 緩衝液濃度が、 ImM— 50mMである請求項 1記載の水性医薬製剤。
[3] 等張化剤を含む、請求項 1または 2に記載の水性医薬製剤。
[4] 等張化剤として塩を含まない請求項 1から 3のいずれか 1項に記載の水性医薬製剤。
[5] 等張化剤がポリオールである請求項 3または 4に記載の水性医薬製剤。
[6] ポリオールがソルビトールである請求項 5記載の水性医薬製剤。
[7] 浸透圧が、 250mOsm— 350mOsmである、請求項 3から 6のいずれ力 1項に記載の水 性医薬製剤。
[8] 界面活性剤を含む、請求項 1から 7のいずれか 1項に記載の水性医薬製剤。
[9] 界面活性剤力 ポリソルベート 80である請求項 8記載の水性医薬製剤。
[10] 界面活性剤濃度が、 0.02mg/mL— 0.10mg/mLである、請求項 8または 9に記載の水 性医薬製剤。
[II] 抗体が、ヒト抗体、ヒト型化抗体又はキメラ抗体である請求項 1から 10のいずれ力 1項 に記載の水性医薬製剤。
[12] 抗体が、モノクローナル抗体である請求項 1から 11のいずれか 1項に記載の水性医 薬製剤。
[13] 抗体が、 IgGである請求項 1から 12のいずれ力 1項に記載の水性医薬製剤。
[14] IgGのサブクラス力 IgGl、 IgG2、 IgG4のいずれかである請求項 13記載の水性医薬 製剤。
[15] IgGが、定常領域のアミノ酸配列の一部に遺伝子改変により、アミノ酸の欠失、置換 および/又は挿入が行われた IgGである、請求項 13または 14に記載の水性医薬製剤
[16] 抗体が、 HLA-DRに対する抗体である、請求項 1から 15のいずれ力 1項に記載の水 性医薬製剤。
[17] 抗体が、 CD40に対する抗体である、請求項 1から 15のいずれか 1項に記載の水性医 薬製剤。
[18] 抗体の濃度が、約 1から 200mg/mLである請求項 1から 17のいずれか 1項に記載の水 性医薬製剤。
[19] グルタミン酸緩衝液中に、治療上有効な量の抗体とともに、等張化剤としてソルビトー ルを、界面活性剤としてポリソルベート 80を含み、 pHが 4.0— 6.0である安定な水性医 薬製剤。
[20] グルタミン酸緩衝液中に、治療上有効な量の抗体とともに、等張化剤としてソルビトー ルを、界面活性剤としてポリソルベート 80を含み、 pHが 4.5— 6.0である安定な水性医 薬製剤。
[21] グリシン、メチォニン、塩酸システィン、ロイシン、塩酸リジン、塩酸アルギニン、ァスパ ラギン酸、ァスコルビン酸、 EDTAおよびそれらの塩力 なる群より選択される少なくと も 1種の安定化剤を含む請求項 1から 20のいずれ力 1項に記載の水性医薬製剤。
[22] 請求項 1から 21のいずれか 1項に記載の水性医薬製剤の製造方法。
[23] 請求項 1から 22のいずれか 1項に記載の組成に従って、治療上有効な量の抗体とグ ルタミン酸緩衝液および/又はクェン酸緩衝液と等張化剤と界面活性剤を組み合わ せることにより抗体を安定化させる方法。
PCT/JP2004/019259 2003-12-25 2004-12-22 抗体を含有する安定な水性医薬製剤 WO2005063291A1 (ja)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2005516616A JPWO2005063291A1 (ja) 2003-12-25 2004-12-22 抗体を含有する安定な水性医薬製剤
US10/584,249 US20070184050A1 (en) 2003-12-25 2004-12-22 Stable water-based medicinal preparation containing antibody
EP04807616.0A EP1712240B1 (en) 2003-12-25 2004-12-22 Stable water-based medicinal preparation containing antibody
ES04807616.0T ES2553987T3 (es) 2003-12-25 2004-12-22 Preparación farmacéutica de base acuosa estable que contiene anticuerpo

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2003431400 2003-12-25
JP2003-431400 2003-12-25

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2005063291A1 true WO2005063291A1 (ja) 2005-07-14

Family

ID=34736431

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2004/019259 WO2005063291A1 (ja) 2003-12-25 2004-12-22 抗体を含有する安定な水性医薬製剤

Country Status (6)

Country Link
US (1) US20070184050A1 (ja)
EP (1) EP1712240B1 (ja)
JP (1) JPWO2005063291A1 (ja)
ES (1) ES2553987T3 (ja)
TW (1) TW200526247A (ja)
WO (1) WO2005063291A1 (ja)

Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006138181A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
WO2007089445A2 (en) 2006-01-27 2007-08-09 Amgen Inc. Ang2 and vegf inhibitor combinations
WO2007124082A2 (en) * 2006-04-21 2007-11-01 Amgen, Inc. Buffering agents for biopharmaceutical formulations
WO2008079290A3 (en) * 2006-12-21 2008-12-04 Amgen Inc Stable buffered formulations containing polypeptides
JP2010505852A (ja) * 2006-10-06 2010-02-25 アムジエン・インコーポレーテツド 安定な抗体製剤
JP2010511665A (ja) * 2006-12-05 2010-04-15 クルセル ホランド ベー ヴェー 液体抗狂犬病抗体製剤
JP2011504933A (ja) * 2007-11-28 2011-02-17 メディミューン，エルエルシー タンパク質製剤
US7951368B2 (en) 2007-06-25 2011-05-31 Amgen Inc. Compositions of specific binding agents to hepatocyte growth factor
WO2012111762A1 (ja) 2011-02-17 2012-08-23 協和発酵キリン株式会社 抗ｃｄ４０抗体の高濃度製剤
JPWO2011090088A1 (ja) * 2010-01-20 2013-05-23 中外製薬株式会社 安定化抗体含有溶液製剤
JP2013129673A (ja) * 2006-04-21 2013-07-04 Novartis Ag 拮抗剤抗ｃｄ４０抗体薬学的組成物
US8883151B2 (en) 2010-01-15 2014-11-11 Kirin-Amgen, Inc. IL-17 receptor antibody formulation
JP2015530372A (ja) * 2012-08-17 2015-10-15 インターベット インターナショナル ベー． フェー． 不活化レプトスピラ細菌の免疫原性組成物
JP2016065079A (ja) * 2007-12-27 2016-04-28 中外製薬株式会社 高濃度抗体含有溶液製剤
WO2017164349A1 (ja) * 2016-03-25 2017-09-28 アステラス製薬株式会社 ＰＥＧ化抗ヒトＮＧＦ抗体Ｆａｂ'フラグメント含有医薬組成物
US10208122B2 (en) 2006-10-02 2019-02-19 Amgen K-A, Inc. IL-17 receptor A antigen binding proteins
EP4209499A1 (en) 2015-08-13 2023-07-12 Amgen Inc. Charged depth filtration of antigen-binding proteins

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20160279239A1 (en) 2011-05-02 2016-09-29 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of anti-cd74 antibody for systemic lupus erythematosus and autoimmune disease
US20160355591A1 (en) 2011-05-02 2016-12-08 Immunomedics, Inc. Subcutaneous anti-hla-dr monoclonal antibody for treatment of hematologic malignancies
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
US8420081B2 (en) * 2007-11-30 2013-04-16 Abbvie, Inc. Antibody formulations and methods of making same
NZ606283A (en) * 2008-11-28 2014-08-29 Abbvie Inc Stable antibody compositions and methods for stabilizing same
SG10201401995UA (en) * 2009-05-04 2014-08-28 Abbvie Biotechnology Ltd Stable high protein concentration formulations of human anti-tnf-alpha-antibodies
US20120294866A1 (en) * 2010-01-19 2012-11-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical formulation for proteins
CN107693791B (zh) 2010-02-26 2022-06-07 诺沃—诺迪斯克有限公司 包含稳定抗体的组合物
KR101807894B1 (ko) 2010-03-01 2017-12-12 바이엘 헬스케어 엘엘씨 조직 인자 경로 억제제 (ｔｆｐｉ)에 대한 최적화된 모노클로날 항체
AU2011257219B2 (en) 2010-05-28 2014-12-04 Novo Nordisk A/S Stable multi-dose compositions comprising an antibody and a preservative
CA2815689C (en) 2010-11-11 2016-11-22 Abbvie Biotechnology Ltd. Improved high concentration anti-tnf.alpha. antibody liquid formulations
EP2471554A1 (en) * 2010-12-28 2012-07-04 Hexal AG Pharmaceutical formulation comprising a biopharmaceutical drug
CA2831572C (en) 2011-05-02 2019-11-26 Immunomedics, Inc. Ultrafiltration concentration of allotype selected antibodies for small-volume administration
UY34105A (es) * 2011-06-03 2012-07-31 Lg Life Sciences Ltd Formulación líquida estable de etanercept
US9592297B2 (en) 2012-08-31 2017-03-14 Bayer Healthcare Llc Antibody and protein formulations
US8613919B1 (en) 2012-08-31 2013-12-24 Bayer Healthcare, Llc High concentration antibody and protein formulations
BR112015004984A2 (pt) * 2012-09-07 2017-07-04 Coherus Biosciences Inc formulações aquosas estáveis de adalimumab
CN106390115A (zh) * 2015-07-29 2017-02-15 上海君实生物医药科技股份有限公司 一种人源化单克隆抗体的稳定制剂
US11229702B1 (en) 2015-10-28 2022-01-25 Coherus Biosciences, Inc. High concentration formulations of adalimumab
WO2017184880A1 (en) 2016-04-20 2017-10-26 Coherus Biosciences, Inc. A method of filling a container with no headspace
SG11201908091QA (en) * 2017-03-06 2019-10-30 Merck Patent Gmbh Aqueous anti-pd-l1 antibody formulation
WO2018187074A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Immunomedics, Inc. Subcutaneous administration of antibody-drug conjugates for cancer therapy
BR112019022873A8 (pt) 2017-05-02 2023-04-11 Merck Sharp & Dohme Formulação, e, vaso ou dispositivo de injeção.
JOP20190260A1 (ar) 2017-05-02 2019-10-31 Merck Sharp & Dohme صيغ ثابتة لأجسام مضادة لمستقبل الموت المبرمج 1 (pd-1) وطرق استخدامها
BR112021015034A2 (pt) 2019-02-18 2021-10-05 Eli Lilly And Company Formulação de anticorpo terapêutico

Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63192724A (ja) * 1987-02-06 1988-08-10 Green Cross Corp:The ｒ−グロブリンの液状製剤
JPH0565233A (ja) * 1991-03-08 1993-03-19 Mitsui Toatsu Chem Inc モノクローナル抗体含有凍結乾燥製剤
JPH05178719A (ja) * 1991-12-26 1993-07-20 Kanebo Ltd 抗体の安定化方法及び水性組成物ならびに化粧料
JPH07502497A (ja) * 1991-10-28 1995-03-16 ザ・ウエルカム・ファウンデーション・リミテッド 安定化抗体
WO1999037329A1 (en) * 1998-01-22 1999-07-29 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation comprising an antibody and a citrate buffer
WO2000066160A1 (fr) * 1999-04-28 2000-11-09 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Composition medicamenteuse parenterale a fragment d'anticorps monoclonal humanise et procede de stabilisation
WO2001047554A1 (fr) * 1999-12-28 2001-07-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Compositions d'anticorps stables et preparations pour injection
JP2002504907A (ja) * 1997-06-13 2002-02-12 ジェネンテク，インコーポレイテッド 抗体製剤
WO2002096457A2 (en) * 2001-05-31 2002-12-05 Novartis Ag Stable liquid formulations of antibodies
WO2003018056A1 (fr) * 2001-08-29 2003-03-06 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preparations stabilisees contenant un anticorps
WO2003068259A1 (en) * 2002-02-14 2003-08-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody-containing solution pharmaceuticals
US20040033228A1 (en) * 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5397703A (en) * 1992-07-09 1995-03-14 Cetus Oncology Corporation Method for generation of antibodies to cell surface molecules
US6171586B1 (en) * 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
AU5588099A (en) * 1998-08-28 2000-03-21 Dendreon Corporation Selective apoptosis of neoplastic cells by an hla-dr specific monoclonal antibody
WO2001024814A1 (en) * 1999-10-04 2001-04-12 Chiron Corporation Stabilized liquid polypeptide-containing pharmaceutical compositions
US6875432B2 (en) * 2000-10-12 2005-04-05 Genentech, Inc. Reduced-viscosity concentrated protein formulations

Patent Citations (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS63192724A (ja) * 1987-02-06 1988-08-10 Green Cross Corp:The ｒ−グロブリンの液状製剤
JPH0565233A (ja) * 1991-03-08 1993-03-19 Mitsui Toatsu Chem Inc モノクローナル抗体含有凍結乾燥製剤
JPH07502497A (ja) * 1991-10-28 1995-03-16 ザ・ウエルカム・ファウンデーション・リミテッド 安定化抗体
JPH05178719A (ja) * 1991-12-26 1993-07-20 Kanebo Ltd 抗体の安定化方法及び水性組成物ならびに化粧料
JP2002504907A (ja) * 1997-06-13 2002-02-12 ジェネンテク，インコーポレイテッド 抗体製剤
WO1999037329A1 (en) * 1998-01-22 1999-07-29 Astrazeneca Ab Pharmaceutical formulation comprising an antibody and a citrate buffer
WO2000066160A1 (fr) * 1999-04-28 2000-11-09 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Composition medicamenteuse parenterale a fragment d'anticorps monoclonal humanise et procede de stabilisation
WO2001047554A1 (fr) * 1999-12-28 2001-07-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Compositions d'anticorps stables et preparations pour injection
WO2002096457A2 (en) * 2001-05-31 2002-12-05 Novartis Ag Stable liquid formulations of antibodies
WO2003018056A1 (fr) * 2001-08-29 2003-03-06 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preparations stabilisees contenant un anticorps
WO2003068259A1 (en) * 2002-02-14 2003-08-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody-containing solution pharmaceuticals
US20040033228A1 (en) * 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
See also references of EP1712240A4 *

Cited By (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3351269A1 (en) 2005-06-14 2018-07-25 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
WO2006138181A2 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
EP3673919A1 (en) 2005-06-14 2020-07-01 Amgen Inc. Self-buffering protein formulations
WO2007089445A2 (en) 2006-01-27 2007-08-09 Amgen Inc. Ang2 and vegf inhibitor combinations
WO2007124082A2 (en) * 2006-04-21 2007-11-01 Amgen, Inc. Buffering agents for biopharmaceutical formulations
WO2007124082A3 (en) * 2006-04-21 2008-05-15 Amgen Inc Buffering agents for biopharmaceutical formulations
US8945564B2 (en) 2006-04-21 2015-02-03 Novartis Ag Antagonist anti-CD40 antibody pharmaceutical compositions
JP2013129673A (ja) * 2006-04-21 2013-07-04 Novartis Ag 拮抗剤抗ｃｄ４０抗体薬学的組成物
US11180564B2 (en) 2006-10-02 2021-11-23 Amgen K-A, Inc. IL-17 Receptor A antigen binding proteins
US10208122B2 (en) 2006-10-02 2019-02-19 Amgen K-A, Inc. IL-17 receptor A antigen binding proteins
US11858999B2 (en) 2006-10-02 2024-01-02 Amgen K-A, Inc. IL-17 receptor A antigen binding proteins
JP2010505852A (ja) * 2006-10-06 2010-02-25 アムジエン・インコーポレーテツド 安定な抗体製剤
JP2010511665A (ja) * 2006-12-05 2010-04-15 クルセル ホランド ベー ヴェー 液体抗狂犬病抗体製剤
JP2013216659A (ja) * 2006-12-21 2013-10-24 Amgen ポリペプチドを含有する安定な緩衝化された製剤
JP2010513522A (ja) * 2006-12-21 2010-04-30 アムジエン・インコーポレーテツド ポリペプチドを含有する安定な緩衝化された製剤
WO2008079290A3 (en) * 2006-12-21 2008-12-04 Amgen Inc Stable buffered formulations containing polypeptides
US7951368B2 (en) 2007-06-25 2011-05-31 Amgen Inc. Compositions of specific binding agents to hepatocyte growth factor
JP2011504933A (ja) * 2007-11-28 2011-02-17 メディミューン，エルエルシー タンパク質製剤
JP2014139194A (ja) * 2007-11-28 2014-07-31 Medimmune Llc タンパク質製剤
US9308257B2 (en) 2007-11-28 2016-04-12 Medimmune, Llc Protein formulation
JP2016065079A (ja) * 2007-12-27 2016-04-28 中外製薬株式会社 高濃度抗体含有溶液製剤
US10072085B2 (en) 2010-01-15 2018-09-11 Kirin-Amgen, Inc. Method of treating psoriasis using an IL-17 receptor antibody formulation
US11505612B2 (en) 2010-01-15 2022-11-22 Amgen K-A, Inc. Method of treating diseases using an IL-17 receptor antibody formulation
US10808033B2 (en) 2010-01-15 2020-10-20 Amgen K-A, Inc. IL-17 receptor antibody formulation
US8883151B2 (en) 2010-01-15 2014-11-11 Kirin-Amgen, Inc. IL-17 receptor antibody formulation
JP5939799B2 (ja) * 2010-01-20 2016-06-22 中外製薬株式会社 安定化抗体含有溶液製剤
JP2016117756A (ja) * 2010-01-20 2016-06-30 中外製薬株式会社 安定化抗体含有溶液製剤
US11612562B2 (en) 2010-01-20 2023-03-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Solution preparation containing stabilized antibody
US10022319B2 (en) 2010-01-20 2018-07-17 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Stabilized antibody-containing liquid formulations
JPWO2011090088A1 (ja) * 2010-01-20 2013-05-23 中外製薬株式会社 安定化抗体含有溶液製剤
JP5458188B2 (ja) * 2011-02-17 2014-04-02 協和発酵キリン株式会社 抗ｃｄ４０抗体の高濃度製剤
US9125893B2 (en) 2011-02-17 2015-09-08 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Highly concentrated anti-CD40 antibody pharmaceutical preparation
WO2012111762A1 (ja) 2011-02-17 2012-08-23 協和発酵キリン株式会社 抗ｃｄ４０抗体の高濃度製剤
JP2015530372A (ja) * 2012-08-17 2015-10-15 インターベット インターナショナル ベー． フェー． 不活化レプトスピラ細菌の免疫原性組成物
EP4209499A1 (en) 2015-08-13 2023-07-12 Amgen Inc. Charged depth filtration of antigen-binding proteins
JPWO2017164349A1 (ja) * 2016-03-25 2019-02-07 アステラス製薬株式会社 ＰＥＧ化抗ヒトＮＧＦ抗体Ｆａｂ’フラグメント含有医薬組成物
JP2022023223A (ja) * 2016-03-25 2022-02-07 アステラス製薬株式会社 ＰＥＧ化抗ヒトＮＧＦ抗体Ｆａｂ’フラグメント含有医薬組成物
JP7215555B2 (ja) 2016-03-25 2023-01-31 アステラス製薬株式会社 ＰＥＧ化抗ヒトＮＧＦ抗体Ｆａｂ’フラグメント含有医薬組成物
WO2017164349A1 (ja) * 2016-03-25 2017-09-28 アステラス製薬株式会社 ＰＥＧ化抗ヒトＮＧＦ抗体Ｆａｂ'フラグメント含有医薬組成物

Also Published As

Publication number Publication date
EP1712240A4 (en) 2012-08-22
TWI353253B (ja) 2011-12-01
EP1712240B1 (en) 2015-09-09
TW200526247A (en) 2005-08-16
US20070184050A1 (en) 2007-08-09
JPWO2005063291A1 (ja) 2007-07-19
ES2553987T3 (es) 2015-12-15
EP1712240A1 (en) 2006-10-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2005063291A1 (ja) 抗体を含有する安定な水性医薬製剤
US12054555B2 (en) Anti-BAFFR antibody formulations and methods of use thereof
KR102397713B1 (ko) 안정한 액체 약제학적 제제
US20210340248A1 (en) Stabilized antibody compositions
CN106999591B (zh) 一种抗pd-1抗体制剂及其在医药上的应用
AU2015342815B2 (en) Stable protein solution formulation containing high concentration of an anti-VEGF antibody
RU2690850C2 (ru) Составы на основе биспецифических антител к il-4/il-13
TW201347791A (zh) 抗體調配物
JP2014505682A (ja) 生物薬剤を含む医薬製剤
JPWO2008029908A1 (ja) 抗体を含有する安定な凍結乾燥医薬製剤
US20230414760A1 (en) Pharmaceutical formulation
CN114286690A (zh) 稳定的低粘度抗体配制品及其用途
AU2003247686A1 (en) A novel stable formulation
US20220202946A1 (en) Ceacam5 antibody-drug conjugate formulation
CN111683681B (zh) 包含抗ox40抗体的制剂、其制备方法及其用途
CN116157115A (zh) 稳定的药物制剂
KR20230167968A (ko) 점도 감소 부형제 조성물 및 이를 포함하는 저점도 고농축 단백질 제형

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NI NO NZ OM PG PH PL PT RO RU SC SD SE SG SK SL SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): GM KE LS MW MZ NA SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IS IT LT LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

DPEN Request for preliminary examination filed prior to expiration of 19th month from priority date (pct application filed from 20040101)
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2005516616

Country of ref document: JP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 10584249

Country of ref document: US

Ref document number: 2007184050

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

WWW Wipo information: withdrawn in national office

Country of ref document: DE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2004807616

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2004807616

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 10584249

Country of ref document: US