WO2004020633A1 - ヒト抗ヒトインターロイキン−６抗体及び該抗体フラグメント - Google Patents

ヒト抗ヒトインターロイキン−６抗体及び該抗体フラグメント Download PDF

Info

Publication number
WO2004020633A1
WO2004020633A1 PCT/JP2003/010923 JP0310923W WO2004020633A1 WO 2004020633 A1 WO2004020633 A1 WO 2004020633A1 JP 0310923 W JP0310923 W JP 0310923W WO 2004020633 A1 WO2004020633 A1 WO 2004020633A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
human
antibody
chain
gene fragment
gene
Prior art date
Application number
PCT/JP2003/010923
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Kazuhisa Sugimura
Kazuyuki Yoshizaki
Toshihiro Nakashima
Takumi Sasaki
Original Assignee
Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=31972776&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=WO2004020633(A1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute filed Critical Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute
Priority to EP03791369A priority Critical patent/EP1536012A4/en
Priority to CN038203340A priority patent/CN1678744B/zh
Priority to JP2004532751A priority patent/JP4463104B2/ja
Priority to CA002496523A priority patent/CA2496523A1/en
Priority to AU2003261787A priority patent/AU2003261787B2/en
Priority to US10/526,072 priority patent/US7482436B2/en
Publication of WO2004020633A1 publication Critical patent/WO2004020633A1/ja

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/244—Interleukins [IL]
    • C07K16/248—IL-6
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/005—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies constructed by phage libraries
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/60—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments
    • C07K2317/62—Immunoglobulins specific features characterized by non-natural combinations of immunoglobulin fragments comprising only variable region components
    • C07K2317/622—Single chain antibody (scFv)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

　インターロイキン−６（ＩＬ−６）が関与する免疫異常性疾患の治療に有効な物質を提供する。ファージ抗体法を用いて、ヒトＩＬ−６に対して高い親和性を有するヒト抗ヒトＩＬ−６抗体及びヒト抗ヒトＩＬ−６抗体フラグメントを得た。当該抗体及び抗体フラグメントは、ＩＬ−６が原因となって惹起される炎症、免疫異常性疾患の治療薬として期待される。

Description

明 細 書
ヒト抗ヒトインターロイキン一 6抗体及び該抗体フラグメント
技術分野
本発明は、 ヒ トインターロイキン一 6 (以下、 I L— 6 ) に結合し、 I L一 6 とその受容体との結合を阻害するヒト抗ヒト I L一 6抗体及び該抗体フラグメン ト、 及びそれをコードする遺伝子断片に関する。 本発明の抗体及び抗体フラグメ ントは、 I L _ 6が原因となって惹起される炎症、 免疫異常 '性疾患の治療薬とし て期待される。
背景技術
I L一 6は T細胞、 マクロファージ、 锥芽細胞、 筋肉細胞などから、 マイト ジェン刺激、 ウィルス感染、 I L— 1などの刺激により産生される分子量 21, 000 の糖タンパク質である。 ヒ トでは 184アミノ酸からなり、 第 7染色体上に遺伝子 が存在する。 その生物活' I"生は多様で、 1 ) 細胞増殖誘導 （ハイプリドーマ、 T細 胞、 角質細胞、 腎メサンジゥム細胞） 、 2 ) 細胞増殖抑制 （骨髄性白血病細胞株、 悪'生黒色種細胞株） 、 3 ) 細胞分化誘導及び細胞の特異的タンパク質の産生誘導 (褐色細胞腫株の神経分化、 キラー T細胞分化、 巨核球成熟、 骨髄性白血病細胞 株のマクロファージ分化、 B細胞の抗体産生、 肝細胞の急性期タンパク質産生） などの機能を有する。 このような多様な生物活性により、 疾患との関連性も指摘 されていたが、 近年、 1 ) 慢性関節リウマチ、 心房内粘液腫、 キャッスルマン氏 病、 A I D Sなどでの高 γグロブリン血症や自己免疫症状、 2 ) メサンジゥム増 殖性腎炎、 3 ) 乾癬、 4 ) A I D S力ポジ肉腫などの発症に関与することが知ら れている。 また最近では、 運動直後に骨格筋から多量の I L— 6が産生され、 そ の視床下部を刺激して色々な神経ホルモンの分泌を促し、 免疫系に影響を与える ことが知られている （免疫学辞典第 1版、 49頁、 1993) 。
とりわけ、 I L _ 6が関与する疾患の中で慢性関節リウマチ （Rheumatoid arthritis ; RA) は日本全国で約 70万人が罹患し、 近年漸増の傾向にあり、 患 者の高齢化も進み社会問題となりつつある （Ogata A.ら、 臨床病理 1999 Apr; 47 (4) : 321-326 [Advances in interleukin-6 therapy] ) 。
慢性関節リゥマチの原因は不明であるが、 関節腔內で起こった自己免疫反応が 持続し慢性化した自己免疫疾患であり、 難治性特定疾患に指定されている。 これ まで I L— 6との関連性について調べられ、 患者の関節液中に多量に存在し、 炎 症惹起だけでなく、 滑膜繊維芽細胞の増殖にも関わっていることが明らかにされ ている。 また自己抗体の産生を促している可能性も考えられる （Nishimoto N. b、 Clinical application of interleukin-6 receptor antibody. , 日本免投子 会誌 1997; 20： 87-94) 。
したがって、 I L _ 6の生物活个生を阻害するような抗 I L— 6抗体を作れば、 R Aを含めた幾つかの免疫異常性疾患の対症療法的治療薬になる可能性があり、 実際に検討が進められている （Mihara M.ら、 Br. J. Rheumatol. 1995 Apr; 34 (4) : 321—325; Mihara M.ら、 Clin. Immunol. 2001, 98： 319-326) 。
発明の開示
(発明が解決しようとする技術的課題）
R Aでは患者の症状の進行状況に応じて、 非ステロイド系消炎鎮痛剤、 ステロ イド剤、 免疫抑制剤、 代謝阻害剤等の薬剤療法や人工関節などの外科的療法など 多種多様な治療法が疾患のステージに応じて施される。 しかしながらこれらはい ずれも R Aを根治するような治療法ではなく、 長期使用や大量使用による副作用 の問題も存在している。 I L— 6は炎症拡大という役割を果たしているため、 患 者が感じる苦痛の大きな原因となっており、 I L一 6の活性を阻害することによ り苦痛が軽減出来る可能性が指摘されていた。 そのための候捕としてヒト型化抗 I L一 6抗体が検討の対象として使われてきた （Montero-Julian F. A.ら、 Blood
1995 Feb 15; 85 (4) : 917-24; Monier S.ら、 Clin. Exp. Rheumatol. 1994 Nov - Dec; 12 (6) : 595—602; Wendling D.ら、 J. Rheumatol. 1993 Feb; 20 (2) : 259— 62) 。 一方で、 I L一 6はミエローマ細胞の増殖因子としての活性を有しており (前述：免疫学辞典第 1版、 49頁、 1993) 、 このため I L— 6と高親和力で結合 する抗体を産生するハイプリドーマが得られても、 産生された抗体によって培地 中の I L一 6が中和されてしまい増殖できなくなるので、 結果的に高親和性の抗 I L— 6抗体は得られにくいという問題もあった。 佐藤らが報告しているマウス 由来抗ヒト I L— 6抗体は llnMの高親和性を示したが、 解離速度が 3 X 10一2 secと速いものし力得られていない （Sato K.ら、 Hum. Antibodies Hybridoraas 1996 ; 7 (4)： 175-83) 。 この様な従来の方法で得られた解離速度の速い抗体を用 いて I L— 6の活性を阻害するためには高濃度を維持する必要があった。 まして や完全ヒト抗体でそのような活性を持つ抗体は知られていない。
またヒト型化抗体では、 完全ヒト抗体と異なり、 投与された患者では抗 I L一 6抗体の活性を阻害するような抗体 （P且止抗体） が作り出される可能性も否定で きなかった。
(その解決方法）
そこで、 本発明では、 ファージ抗体法を用いて、 スクリーニング系を工夫する ことにより完全ヒト抗ヒト I L— 6—本鎖 F V ( s c F V ) 分子を取得し、 その 抗体の V H鎖及び V L鎖を明らかにした。 さらに、 その性状を解析し、 当該 s c F vが、 ヒト I L— 6に対して従来得られていた各種動物由来の抗体よりも特に 解離速度が遅く （10— 3 secオーダー、 従来より約 40倍解離速度が遅い） 、 かつ従 来の抗体と同程度以上の高い親和性を有すること、 また I L— 6依存性細胞株の 増殖を濃度依存的に抑制することを明らかにした。
(従来技術より有効な効果）
このような完全にヒト由来で力つ高親和性の抗体を用いることにより、 キメラ 抗体ゃヒト型化抗体に比べて低い抗体濃度で治療効果を発揮でき、 従ってこの抗 体に対する抗ィディォタイプ抗体の産生も極めて低く抑えることが可能になり、 抗 I L— 6アンタゴニストとして、 I L一 6依存性の白血病や慢性関節リウマチ などの自己免疫疾患の治療薬として優れた治療効果を有する抗ヒト I L—6抗体 薬を提供することができると期待される。 また副作用が少なく活性が強い、 急性 の炎症の治療薬としての利用も期待できる。
図面の簡単な説明
図 1は、 IL - 6gkシリ ス、、由来の IL6gk3 - 2scFvの組換え I L _ 6、 ヒト血清アル ブミン （H S A) 、 AB型血清、 単球走化性タンパク質 1 (monocyte
chemoattractant protein - 1； MCP - 1) 、 MIP - 1 (macrophage inflammatory protein— 1 a ) との反応性を ELISAで測定した結果を示すグラフである。
図 2は、 BIA COREにより測定した IL6gk3- 2scFvの IL-6との結合親和力を測定し た結果を示すグラフである。 図 3は、 I L _ 6依存性細胞株 KT-3の I L一 6依存性の増殖応答を IL6gk3- 2scFvが抑制した結果を示すグラフである。
発明を実施するための最良の形態
健常者 20名分の末梢血 Bリンパ球より、 RT— PCR法にて、 免疫グロブリ ン重 （H) 鎖、 軽 （L) 鎖 cDNAを増幅、 更に両者をリンカ一 DNAで結合し、 健常者リンパ球由来の VH鎖と VL鎖のランダムな組み合わせによる一本鎮 F V ( s c F v) DN Aを作製した。
この scFv DNAをファージミドべクタ一 pCANTAB5Eに組込み、 109クローンからな る健常者由来 s c Fv提示ファージライブラリーを作製した。 このライブラリー を、 固相に固定化されたヒト I L— 6と結合させて回収、 濃縮し、 抗ヒト I L— 6 F V提示ファージクローンをスクリーニングした。 その結果、 スクリーニング された s c F Vクローン （IL6gk3 - 2) は、 ヒ ト I L— 6と結合する s c F v抗体 を産生した。
クローン IL6gk3- 2が産生する s c F V抗体は、 一本鎖にも拘わらず通常の完全 型抗体と同等の親和力でリガンド （I L一 6) に特異的に結合した。
クローン IL6gk3- 2が産生する s c F V抗体は、 ヒト I L一 6に依存して増殖す る細胞株 KT一 3に加えたときに I L一 6依存的増殖応答を濃度依存的に阻害し
/し o
上記阻害活性を有する s c F Vクローンの VH鎖及び V L鎖のァミノ酸配列及 びそれをコードする塩基配列を、 配列番号 1及び 2 (VH鎖） 、 及び配列番号 3 及び 4 (VL鎖） にそれぞれ示す。
さらに、 上記配列中、 VH鎖及び VL鎖の相補性決定領域 （CDR1〜3) の アミノ酸配列を下記に示す。
[VH鎖]
C D R 1 ： Lys Tyr Tyr Met Ala く配列番号 5 >
CDR 2 ： Thr lie Ser Asn Ser Gly Asp lie lie Asp Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly <配列番号 6 >
CDR 3 ： Glu Tyr Phe Phe Ser Phe Asp Val く配列番号 7 >
[VL鎖] C D R 1 ： Arg Ala Ser Gin Asp lie Arg Asn Trp Val Ala く配列番号 8 > C D R 2 ： Asp Gly Ser Ser Leu Gin Ser <配列番号 9 >
C D R 3 ： Gin Gin Ser Asp Ser Thr Pro He Thr Phe <配列番号 1 0 >
上記 VH鎖及び V L鎖のいずれかまたは両方の可変領域を有する抗体フラグメ ントは、 ヒト由来抗ヒト I L— 6抗体の可変領域を有し、 ヒト I L— 6と強く反 応して、 I L—6と I L一 6受容体間の結合に対して阻害作用を示す。
本発明で開示されるヒト抗ヒト I L _ 6抗体の VH鎖及び Zまたは V L鎖は、 ファージ抗体法を用いて s c F vの形で得られたものであるが、 開示した VH鎖 及び Zまたは V L鎖をヒト免疫グロブリンの定常部と連結した完全分子型ヒト抗 ヒ ト I L— 6抗体、 またヒ ト免疫グロブリンの定常部の一部と組み合わせた F ab、 F ab，または F (ab，）2などのヒト抗ヒト I L— 6抗体フラグメント、 さらに s c F vをヒト免疫グロブリンの定常部と結合させたヒト抗ヒト I L— 6—本鎖抗体 ( s c A b ) などの他のヒト抗ヒト I L— 6抗体フラグメント、 並びにこれら抗 体または抗体フラグメントをコ一ドする遺伝子断片をも本発明は包含する。 また、 これらの抗体及び抗体フラグメント蛋白分子に高分子修飾剤を結合させた修飾蛋 白分子も本発明に包含される。
産業上の利用の可能性
以上より、 本発明のヒト抗ヒト I L一 6抗体及び該抗体フラグメント分子は、 I L—6と I L— 6受容体との結合によって引き起こされる種々の免疫応答を阻 害することができ、 消炎鎮痛剤としてあるいは自己免疫疾患の治療及び予防のた めの薬剤として使用することができる。
さらに、 本発明のヒト抗ヒト I L一 6抗体及び該抗体フラグメント分子は、 そ の特性からヒト末梢血中または筋肉内の I L一 6発現細胞を検出或いは測定する 免疫学的測定法を提供することが可能である。
また、 本発明のヒト抗ヒト I L— 6抗体及び該抗体フラグメント分子は、 免疫 学的に不活性な吸着物質からなる免疫吸着物質と吸着させた複合体とすることに より多くの応用が可能になる。 たとえば、 ヒト末梢血中の I L— 6をィムノアフ イエテイク口マトグラフィにより精製することができる。 さらに、 遺伝子組換え 法により形質転換された培養細胞から産生される培養上清中の I L一 6の精製に 用いることが可能である。
また、 本発明のヒト抗ヒト I L— 6抗体の可変部位のペプチドまたはその誘導 体は、 それを認、識するペプチドまたは抗ィディォタイプ抗体を、 ライプラリーよ り単離する新たな手段を提供する。 得られるペプチドと抗イデオタイブ抗体、 及 びその誘導体は、 I L一 6の中和による急性炎症や自己免疫疾患の治療に有効で あることが期待できる （Vreugdenhil G.ら、 Rheumatol. Int. 1990; 10(3)： 127-30； Hirano T.ら、 Ric. Clin. Lab. 1989 Jan-Mar; 19(1)： 1-10) 。
以下、 実施例にそって本発明をさらに詳細に説明するが、 これら実施例は本発 明の範囲を限定するものではない。
《実施例 1 ：健常者からのファージライブラリ一の構築》
ファージライブラリーの構築は、 D. Marks ら （J. Mol. Biol., 222： 581- 597， 1991) により報告されている方法を参考に調製した。
健常者 20名由来末梢血より Ficolを用いた比重遠心法にてリンパ球を分離し、 PBSで充分に洗浄後、 ISOGEN (日本ジーン） で処理して、 total RNAを調製し た。 この total 醒を 4つに分割し、 ヒ ト I gG、 I gM、 κ鎖、 λ鎖の定常領 域に特異的なプライマーを使用し、 first strand cDNA synthesis kit
(Pharmacia biotech) にて、 それぞれの c DNAを作製した。 この cDNAを テンプレートにして、 Marksらが報告したのと同様に VH (γまたは μ) と JH 及ぴ V κと J K、 V と の組合せで各ジーンファミリ一に特異的なプライマ 一を用いて、 それぞれの抗体 V領域遺伝子をポリメラーゼチェインリアクション (PCR) 法にて増幅した。
更に、 VH (γまたは と V/c、 及び VH (γまたは//) と をリンカ一 DNAを用いて、 アッセンブリー PC R法 （McCafferty, J. ら： Antibody
Engineering - A Practical Approach, IRL Press, Oxford, 1996) に j;り結合 させ、 一本鎖 s c Fv DNAを作製した。 scFv DNAは更に P C Rを用いて、
Notl及び Sf il制限酵素部位を付加し、 ァガロースゲルで電気泳動後、 精製した。 精製した scFv DNAは制限酵素 Sfil (Takara) と Notl (Takara) で消化後、 ファー ジミド PCA TAB5E (Pharmacia) にクローニングした。 scFv DNAを結合させた PCA TAB5Eは VH(y)— V K、 VH(y)-V Z VH( — V K；、 VH(u)~V λ毎にェレクトロポレイシヨンにより大腸菌 TG1に導入した。 形質転換した TG1の 数から、 VH(v)— V K；、 VH(y)-V X VH(/z)— V K、 VH(/z)— V は それぞれ 1.1 x 108、 2.1 x 108、 8.4 x 107、 5.3 x 107クローンの多様性を有す ると評価された。 この形質転換した TG1から、 M13K07ヘルパーファージを用いて ファージ抗体を発現し、 健常人由来 s c Fv提示ファージライブラリーを調製し た。
〈〈実施例 2 ：パンニング》
ヒト I L—6は 0.1M NaHC03lmLに溶解し、 35mmのディッシュ （岩城） に 4°C でー晚反応させて固定化した。 0.5°/。ゼラチン ZP B Sを用いて 20°Cで 2時間プロ ッキングした後、 0. l%TVeen20- PBSで 6回洗浄した。 これに健常人由来の抗体フ ァージライブラリー （一本鎖抗体提示ファージ液） を 0.9mL (1 X 1012tu/mL) カロ え、 反応させた。
0. l%Tween20-PBSで 10回洗浄した後、 1. OmLのグリシン緩衝液 (pH2.2) を加え、 I L— 6と結合する一本鎖抗体提示ファージを溶出させた。 溶出したファージは 1M Tris (hydroxymethyl)aminoraethane-HCl, pH9.1を加えて pHを調整した後、 対数増殖期の大腸菌 TG1に感染させた。 感染後の TG1は 3000 X g， 10分で遠心分離 して、 上清を除き、 200/zLの 2 XYT培地で懸濁し、 S0BAGプレート （20/。グルコ ース、 100 /ig/ralのアンピシリン含有 S0Bプレート） に播き、 30。Cのふ卵器中で一 晚培養した。 生じたコロニーは適量の 2 XYT培地を加えスクレイパー
(Coastor) を使って懸濁、 回収した。
この TG1液 50μίを、 30mLの 2 X Y T A G培地に植え、 ヘルパーファージを 用いてレスキューし、 スクリーニング後のファージライブラリーを調製した。 健常人由来ファージライブラリー VH(y)_VK、 VH(y)— Vえ、 VH(/z) — V K、 νΗ( ）一νλ、 それぞれについて前述の I L一 6固定化プレートを用 いてパンニングを計 4回行った。 4回目のパン-ング後に、 S0BAGプレートから 任意にクローンを抽出し、 s c F Vの発現の確認、及び I L一 6 ELISAによる特異 性の確認と塩基配列の解析を行つた。
《実施例 3 ： スクリ一ニンク' I L— 6 ELISA))
分離したクローンのスクリ一二ングのための ELISAは以下のように行った。 ヒ ト I L— 6及びコントローノレ蛋白を ELISAプレートに固定化してスクリーニング に用いた。 1.25/ig/tnLのヒト組換え I L一 6、 2.5 μ g/mLのヒト血清アルブミン (HSA) 、 1.25/ig/raLのヒト単球走化性タンパク質 1 (MCP- 1) 、 ヒ ト MIP- 1ひ (macrophage inflammatory protein I- a) また fまヒト AB型血胄を 40μ L/well ELISAプレート （Nunc) に入れ、 4°Cで 16時間静置し、 固定化した。 固定化プレ 一トは、 0.5%BSA、 0.5%ゼラチン及び 5 %スキムミルクを含む PBS溶液 400 μ 1 11を入れて4°(で 2時間静置し、 ブロッキングを行った。
s c F V提示ファージを含む試料液 40 /zL/wellを入れて反応させた後、 試料液 を捨て洗浄液で 5回洗つた。 ピオチン標識した抗 M13モノクローナル抗体
(Pharmacia biotech) と反応させ、 アルカリフォスファターゼ （AP) 標識し た抗マゥス IgG抗体と反応させた。 洗浄液で 5回洗つた後、 発色基質液 ( 1 g/mL p-nitrophenyl phosphate ( ako) 、 10%ジエタノーノレアミン （Wako) を含む PBS 溶液） を 50 xL/well入れ、 遮光し、 室温〜 37°Cで、 5〜 10分発色させた。 マル チプレートォートリーダー NJ- 2001 (Inter Med) で 405nmの吸光度を測定した結 果、 評価したクローン全てが、 I L— 6に特異的であることが確認できた （図 1) 。
《実施例 4 ：クローンの配列分析》
単離したクローンの s c F V遺伝子の VH及び VLの DNA塩基配列を Dye terminator cycle sequencing Fi> Ready Reaction kit (Applied Biosystems)を 用いて決定した。 ELISA及び配列分析の結果、 単離したクローンは 4種に分類さ れた。 このうち、 クローン IL6gk3_2の VH及び VLの塩基配列をそれぞれ配列番 号 1及び配列番号 3に示す。
《実施例 5 ： s c F vの発現と回収》
可溶性 s c F Vを大腸菌 HB2151を用いて発現させ、 大腸菌ペリブラズム画分よ り回収、 粗精製した。 更に精製が必要な場合は RAPAS Purification Module
(Pharmacia Biotech)用いて、 ァフィ二ティ精製を行った。 精製した s c F v蛋 白の純度は、 SDS—ポリアクリルアミドゲル電気泳動と、 s c F v蛋白の C末 端の Etagェピトープを標的にしたウェスタンブロッテイングにより確認した。 s c F V蛋白精製品の蛋白濃度の決定には、 Protein Assayキット （BIO- RAD) を 用いた。
《実施例 6 ： S P R法による精製 s c F Vの親和 '性測定》
BIAcore (BIAcore社） を用いて、 S P R法により精製 s c F vの親和性を測定 した結果、 単離されたクローンのうち最も高い親和性を示したク口 ン IL6gk3 - 2 は、 ヒ ト I L _ 6に対して 13 X 10—9Mの解離定数を有すると評価された （図 2 ) 。
《実施例 7 ： I L一 6依存性細胞株の増殖応答に対する影響》
精製 s c F Vを用いて、 I L— 6に依存的に増殖する細胞株 KT一 3の I L— 6依存的な増殖応答に対する阻害効果について検討した。 2xl04個/ 200 1/ゥェ ルに調製した K T一 3を I L一 6 (80pg/ml) と 1. 25〜20 / g/mlのクローン IL6gk3- 2由来の精製 s c F v存在下、 4 3間培養しチミジン取り込みによる D N A合成を評価した結果、 クローン IL6gk3- 2由来 s c F Vは K T— 3細胞の增殖応 答を濃度依存的に抑制することがわかった （図 3 ) 。

Claims

請 求 の 範 囲
1. ヒ トインターロイキン一 6 (以下、 I L一 6) に結合し、 その生物活性を阻 害するヒト抗ヒト I L— 6抗体または該抗体フラグメント。
2. 少なくとも 1.0x10一8 M以下の解離定数を有する請求項 1記載のヒト抗 ヒ ト I L _ 6抗体または該抗体フラグメント。
3. ヒト I L— 6に結合し、 その生物活性を阻害するヒト抗ヒト I L一 6抗体の VH鎖をコードする遺伝子断片。
4. 当該 VH鎖の相補性決定領域 (CDR1-3) が下記のアミノ酸配列を有す る請求項 3に記載の遺伝子断片。
C D R 1 ： Lys Tyr Tyr Met Ala く配列番号 5 >
CDR 2： Thr lie Ser Asn Ser Gly Asp lie lie Asp Tyr Ala Asp Ser Val Arg Gly く配列番号 6 >
CDR 3 ： Glu Tyr Phe Phe Ser Phe Asp Val く酉己列番号 7 >
5. 当該 VH鎖が配列番号 2に記載のァミノ酸配列を有する請求項 3または 4に 記載の遺伝子断片。
6. 当該 VH鎖のアミノ酸配列において 1もしくは数個のアミノ酸が欠失、 置換 もしくは付加されて!/ヽる請求項 4または 5に記載の遺伝子断片。
7. ヒト I L— 6に結合し、 その生物活性を阻害するヒト抗ヒト I L一 6抗体の VL鎖をコードする遺伝子断片。
8. 当該 VL鎖の相補性決定領域 (CDR1-3) が下記のアミノ酸配列を有す る請求項 7に記載の遺伝子断片。
CDR 1 ： Arg Ala Ser Gin Asp He Arg Asn Trp Val Ala く配列番号 8 > CDR 2： Asp Gly Ser Ser Leu Gin Ser く配列番号 9 >
CDR 3 ： Gin Gin Ser Asp Ser Thr Pro lie Thr Phe <配列番号 10 >
9. 当該 V L鎖が配列番号 4に記載のアミノ酸配列を有する請求項 7または 8に 記載の遺伝子断片。
10. 当該 VL鎖のアミノ酸配列において 1もしくは数個のアミノ酸が欠失、 置 換もしくは付加されている請求項 8または 9に記載の遺伝子断片。
1 1. 請求項 3から 6のいずれかに記載の VH鎖をコードする遺伝子断片及び請 求項 7から 10のいずれかに記載の VL鎖をコードする遺伝子断片を結合してな る、 ヒト I L一 6に結合し、 その生物活性を阻害するヒト抗ヒト I L一 6抗体の 一本鎖 Fv (以下、 s c Fv) をコードする遺伝子断片。
12. 請求項 3から 6のいずれかに記載の VH鎖をコードする遺伝子断片及び請 求項 7から 10のいずれかに記載の VL鎖をコードする遺伝子断片を、 それぞれ ヒト抗体 CH鎖遺伝子及びヒト抗体 CL鎖遺伝子と結合してなる、 ヒ ト I L— 6 に結合し、 その生物活性を阻害するヒト抗 I L— 6抗体をコードする遺伝子断片。
13. 請求項 3から 6のいずれかに記載の VH鎖をコードする遺伝子断片及び請 求項 6から 10のいずれかに記載の VL鎖をコードする遺伝子断片を、 それぞれ ヒト抗体 CH鎖遺伝子の一部及ぴヒト抗体 CL鎖遺伝子の一部と結合してなる、 ヒト I L _ 6に結合し、 その生物活性を阻害するヒト抗 I L— 6抗体フラグメン トをコードする遺伝子断片。
14. 当該抗体フラグメントが、 Fab、 Fab'、 または F (ab' )2から選ばれる請 求項 13に記載の遺伝子断片。
15. 請求項 11に記載の s c F V遺伝子断片を、 ヒト抗体 CH鎖遺伝子の一部、 またはヒト抗体 CL鎖遺伝子の一部と結合してなる、 ヒト I L— 6に結合し、 そ の生物活性を阻害するヒト抗 I L一 6抗体フラグメントをコードする遺伝子断片。
16. 請求項 3から 15のいずれかに記載の遺伝子断片を発現ベクターに組込み、 遺伝子組換え法により発現される、 ヒト I L一 6に結合し、 その生物活性を阻害 するヒト抗ヒト I L— 6抗体または該抗体フラグメント。
17. 少なくとも 1.0 X 10一8 M以下の解離定数を有する請求項 16記載のヒ ト抗ヒト I L— 6抗体または該抗体フラグメント。
18. 請求項 1から 17のいずれかに記載のヒト抗ヒト I L— 6抗体または該抗 体フラグメントを有効成分として含有する I L一 6及び I L— 6受容体の結合活 性阻害剤。
19. 請求項 18に記載の結合活性阻害剤を用いるヒト I L一 6及ぴヒト I L一 6受容体の結合により惹起される炎症及び免疫異常性疾患の予防または治療薬。
PCT/JP2003/010923 2002-08-30 2003-08-28 ヒト抗ヒトインターロイキン−６抗体及び該抗体フラグメント WO2004020633A1 (ja)

Priority Applications (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP03791369A EP1536012A4 (en) 2002-08-30 2003-08-28 HUMAN-TYPE ANTIHUMAN INTERLEUKIN-6 ANTIBODY ANTIBODY ANTIBODY FRAGMENT
CN038203340A CN1678744B (zh) 2002-08-30 2003-08-28 人的抗人白细胞介素-6抗体以及所述抗体的片段
JP2004532751A JP4463104B2 (ja) 2002-08-30 2003-08-28 ヒト抗ヒトインターロイキン−６抗体及び該抗体フラグメント
CA002496523A CA2496523A1 (en) 2002-08-30 2003-08-28 Human antihuman interleukin-6 antibody and fragment of the antibody
AU2003261787A AU2003261787B2 (en) 2002-08-30 2003-08-28 Human antihuman interleukin-6 antibody and fragment of the antibody
US10/526,072 US7482436B2 (en) 2002-08-30 2003-08-28 Human antihuman interleukin-6 antibody and fragment of antibody

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2002-253036 2002-08-30
JP2002253036 2002-08-30

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2004020633A1 true WO2004020633A1 (ja) 2004-03-11

Family

ID=31972776

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2003/010923 WO2004020633A1 (ja) 2002-08-30 2003-08-28 ヒト抗ヒトインターロイキン−６抗体及び該抗体フラグメント

Country Status (8)

Country Link
US (1) US7482436B2 (ja)
EP (1) EP1536012A4 (ja)
JP (1) JP4463104B2 (ja)
KR (1) KR20050058486A (ja)
CN (1) CN1678744B (ja)
AU (1) AU2003261787B2 (ja)
CA (1) CA2496523A1 (ja)
WO (1) WO2004020633A1 (ja)

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2009518023A (ja) * 2005-12-09 2009-05-07 ユセベ ファルマ ソシエテ アノニム ヒトｉｌ−６に対して特異性を有する抗体分子
JP2009545319A (ja) * 2006-08-03 2009-12-24 バクシネックス，インコーポレーテッド 抗ｉｌ−６モノクローナル抗体およびその使用
JP2011201888A (ja) * 2005-04-29 2011-10-13 Centocor Inc 抗−ｉｌ−６抗体、組成物、方法および使用
US8153128B2 (en) 2006-11-30 2012-04-10 Medimmune Limited Antibodies specific for the complex of interleukin-6 and the interleukin-6 receptor
JP2012508762A (ja) * 2008-11-13 2012-04-12 フェムタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ヒト化抗ｉｌ−６抗体
US8198414B2 (en) 2006-11-30 2012-06-12 Medimmune Limited Anti-human IL-6 antibodies
WO2020223565A1 (en) 2019-05-01 2020-11-05 Corvidia Therapeutics, Inc. Anti-il-6 antibody formulation
US11203636B2 (en) 2017-02-01 2021-12-21 Yale University Treatment of existing left ventricular heart failure
US11384143B2 (en) 2018-01-05 2022-07-12 Novo Nordisk A/S Methods for treating IL-6 mediated inflammation without immunosuppression

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS52643B (en) * 2006-06-02 2013-06-28 Regeneron Pharmaceuticals Inc. HIGH AFINITY ANTIBODIES TO THE HUMAN IL-6 RECEPTOR
US8414897B1 (en) 2006-10-02 2013-04-09 The Uab Research Foundation Pathway for Th-17 cell development and methods utilizing same
US8178101B2 (en) * 2007-05-21 2012-05-15 Alderbio Holdings Inc. Use of anti-IL-6 antibodies having specific binding properties to treat cachexia
US9701747B2 (en) 2007-05-21 2017-07-11 Alderbio Holdings Llc Method of improving patient survivability and quality of life by anti-IL-6 antibody administration
US20090238825A1 (en) * 2007-05-21 2009-09-24 Kovacevich Brian R Novel rabbit antibody humanization methods and humanized rabbit antibodies
US7906117B2 (en) 2007-05-21 2011-03-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat cachexia, weakness, fatigue, and/or fever
US8252286B2 (en) 2007-05-21 2012-08-28 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
HUE043782T2 (hu) 2007-05-21 2019-09-30 Alderbio Holdings Llc IL-6 elleni antitestek és alkalmazásuk
EP2162469A4 (en) * 2007-05-21 2012-08-01 Alderbio Holdings Llc NEW METHODS OF HUMANIZING RABBIT ANTIBODIES AND HUMANIZED RABBIT ANTIBODIES
US8404235B2 (en) 2007-05-21 2013-03-26 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
US8062864B2 (en) 2007-05-21 2011-11-22 Alderbio Holdings Llc Nucleic acids encoding antibodies to IL-6, and recombinant production of anti-IL-6 antibodies
CN101796197B (zh) 2007-06-08 2014-02-12 比奥根艾迪克Ma公司 预测抗tnf响应性或无响应性的生物标志物
US20100203009A1 (en) * 2007-10-02 2010-08-12 The Uab Research Foundation Pathway for Th-17 Cell Development and Methods Utilizing Same
EP2297202B1 (en) 2008-05-13 2016-01-13 NovImmune SA Anti-il-6/il-6r antibodies and methods of use thereof
US8188235B2 (en) 2008-06-18 2012-05-29 Pfizer Inc. Antibodies to IL-6 and their uses
US9452227B2 (en) * 2008-11-25 2016-09-27 Alderbio Holdings Llc Methods of treating or diagnosing conditions associated with elevated IL-6 using anti-IL-6 antibodies or fragments
US8420089B2 (en) 2008-11-25 2013-04-16 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to raise albumin and/or lower CRP
US8323649B2 (en) 2008-11-25 2012-12-04 Alderbio Holdings Llc Antibodies to IL-6 and use thereof
US8337847B2 (en) 2008-11-25 2012-12-25 Alderbio Holdings Llc Methods of treating anemia using anti-IL-6 antibodies
MX2011005408A (es) 2008-11-25 2011-06-16 Alder Biopharmaceuticals Inc Antagonistas de il-6 para prevenir o tratar la trombosis.
US9212223B2 (en) 2008-11-25 2015-12-15 Alderbio Holdings Llc Antagonists of IL-6 to prevent or treat thrombosis
US8992920B2 (en) 2008-11-25 2015-03-31 Alderbio Holdings Llc Anti-IL-6 antibodies for the treatment of arthritis
US9775921B2 (en) 2009-11-24 2017-10-03 Alderbio Holdings Llc Subcutaneously administrable composition containing anti-IL-6 antibody
WO2011066374A2 (en) 2009-11-24 2011-06-03 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Antagonists of il-6 to prevent or treat cachexia, weakness, fatigue, and/or fever
ES2847891T3 (es) 2010-11-23 2021-08-04 Vitaeris Inc Anticuerpos anti-IL-6 para el tratamiento de la mucositis oral
MX342810B (es) * 2011-03-03 2016-10-13 Apexigen Inc Anticuerpos del receptor anti-interleucina-6 (anti-il-6) y sus metodos de uso.
ES2662020T3 (es) * 2012-10-22 2018-04-05 Fountain Biopharma Inc. Anticuerpos contra la interleucina-6 y sus usos
MX2018000778A (es) 2015-07-31 2018-08-15 Medimmune Ltd Metodos para tratar trastornos mediados por hepcidinas.
CN110283249A (zh) * 2018-03-19 2019-09-27 江苏莱博德医疗科技有限公司 一种抗白介素6的人ScFv单链抗体
CN113365663A (zh) 2018-08-30 2021-09-07 Hcw生物科技公司 单链嵌合多肽和其用途
US11672826B2 (en) 2018-08-30 2023-06-13 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
WO2020047299A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 HCW Biologics, Inc. Multi-chain chimeric polypeptides and uses thereof
CN114269903A (zh) 2019-06-21 2022-04-01 Hcw生物科技公司 多链嵌合多肽和其用途
JP2023519106A (ja) 2020-02-11 2023-05-10 エイチシーダブリュー バイオロジックス インコーポレイテッド クロマトグラフィー樹脂およびその使用
CA3169231A1 (en) 2020-02-11 2021-08-19 HCW Biologics, Inc. Methods of treating age-related and inflammatory diseases
CN115380045A (zh) 2020-02-11 2022-11-22 Hcw生物科技公司 激活调节性t细胞的方法
CA3181417A1 (en) 2020-04-29 2021-11-04 HCW Biologics, Inc. Anti-cd26 proteins and uses thereof
CA3184756A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
WO2021247003A1 (en) 2020-06-01 2021-12-09 HCW Biologics, Inc. Methods of treating aging-related disorders
WO2023168363A1 (en) 2022-03-02 2023-09-07 HCW Biologics, Inc. Method of treating pancreatic cancer

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5959085A (en) * 1993-11-23 1999-09-28 Schering Corporation Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies
EP1074268B1 (en) * 1998-03-17 2008-01-16 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Preventives or remedies for inflammatory intestinal diseases containing il-6 receptor antagonist antibodies
CA2564432A1 (en) 2004-04-27 2005-11-10 Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Human anti-amyloid .beta. peptide antibody and fragment of said antibody

Non-Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Dictionary of Immunology", 1993, pages: 49
D. MARKS ET AL., J. MOL. BIOL., vol. 222, 1991, pages 581 - 597
GEJIMA,R ET AL: "Human single-chain Fv (scFv) antibody specific to human IL-6 with the inhibitory activity on IL-6-signaling.", HUMAN ANTIBODIES, vol. 11, no. 4, 2002, pages 121 - 129, XP002974190 *
HIRANO T. ET AL., RIC. CLIN. LAB., vol. 19, no. 1, pages 1 - 10
KREBS,B ET AL.: "Recombinant Human Single Chain Fv Antibodies Recognizing Human Interleukin-6.", J. BIOL. CHEM., vol. 273, no. 5, 1998, pages 2858 - 2865, XP002921461 *
MARKS,J.D ET AL.: "By-passing Immunization Human Antibodies from V-gene Libraries Displayed on Phage.", J. MOL. BIOL., vol. 222, no. 3, 1991, pages 581 - 597, XP000670314 *
MCCAFFERTY, J. ET AL.: "Antibody Engineering - A Practical Approach", 1996, IRL PRESS
MONIER S. ET AL., CLIN. EXP. RHEUMATOL., vol. 12, no. 6, November 1994 (1994-11-01), pages 595 - 602
MONTERO-JULIAN F.A. ET AL., BLOOD, vol. 85, no. 4, 15 February 1995 (1995-02-15), pages 917 - 24
SATO K. ET AL., HUM. ANTIBODIES HYBRIDOMAS, vol. 7, no. 4, 1996, pages 175 - 83
See also references of EP1536012A4 *
VREUGDENHIL G. ET AL., RHEUMATOL. INT., vol. 10, no. 3, 1990, pages 127 - 30
WENDLING D. ET AL., J. RHEUMATOL., vol. 20, no. 2, February 1993 (1993-02-01), pages 259 - 62
WIJDENES,J ET AL.: "Human recombinant dimeric il-6 binds to its receptor as detected by anti-il-6 monoclonal antibodies.", MOLECULAR IMMUNOLOGY, vol. 28, no. 11, 1991, pages 1183 - 1192, XP002974189 *

Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8623362B2 (en) 2005-04-29 2014-01-07 Janssen Biotech, Inc. Anti-IL-6 antibodies
JP2011201888A (ja) * 2005-04-29 2011-10-13 Centocor Inc 抗−ｉｌ−６抗体、組成物、方法および使用
US11180549B2 (en) 2005-04-29 2021-11-23 Janssen Biotech, Inc. Methods of suppressing rheumatoid arthritis using an anti-IL-6 antibody
US9631016B2 (en) 2005-04-29 2017-04-25 Janssen Biotech, Inc. Pen-injector device containing anti-IL-6 antibodies
CN102924596A (zh) * 2005-04-29 2013-02-13 詹森生物科技公司 抗il-6抗体、组合物、方法及应用
US9340613B2 (en) 2005-04-29 2016-05-17 Janssen Biotech, Inc. Anti-IL-6 antibodies, compositions, methods and uses
JP2009518023A (ja) * 2005-12-09 2009-05-07 ユセベ ファルマ ソシエテ アノニム ヒトｉｌ−６に対して特異性を有する抗体分子
JP2009545319A (ja) * 2006-08-03 2009-12-24 バクシネックス，インコーポレーテッド 抗ｉｌ−６モノクローナル抗体およびその使用
US7919095B2 (en) 2006-08-03 2011-04-05 Vaccinex, Inc. Anti-IL-6 monoclonal antibodies
US8153128B2 (en) 2006-11-30 2012-04-10 Medimmune Limited Antibodies specific for the complex of interleukin-6 and the interleukin-6 receptor
US9005620B2 (en) 2006-11-30 2015-04-14 Medimmune Limited Compounds
EP2628751A2 (en) 2006-11-30 2013-08-21 AstraZeneca AB Binding members for interleukin-6 and use thereof
US8198414B2 (en) 2006-11-30 2012-06-12 Medimmune Limited Anti-human IL-6 antibodies
JP2012508762A (ja) * 2008-11-13 2012-04-12 フェムタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ヒト化抗ｉｌ−６抗体
US11203636B2 (en) 2017-02-01 2021-12-21 Yale University Treatment of existing left ventricular heart failure
US11384143B2 (en) 2018-01-05 2022-07-12 Novo Nordisk A/S Methods for treating IL-6 mediated inflammation without immunosuppression
WO2020223565A1 (en) 2019-05-01 2020-11-05 Corvidia Therapeutics, Inc. Anti-il-6 antibody formulation

Also Published As

Publication number Publication date
CN1678744B (zh) 2010-05-26
AU2003261787A1 (en) 2004-03-19
EP1536012A4 (en) 2006-03-08
JP4463104B2 (ja) 2010-05-12
US20060240012A1 (en) 2006-10-26
CN1678744A (zh) 2005-10-05
KR20050058486A (ko) 2005-06-16
US7482436B2 (en) 2009-01-27
EP1536012A1 (en) 2005-06-01
CA2496523A1 (en) 2004-03-11
AU2003261787B2 (en) 2008-11-06
JPWO2004020633A1 (ja) 2005-12-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP4463104B2 (ja) ヒト抗ヒトインターロイキン−６抗体及び該抗体フラグメント
JP5150516B2 (ja) 抗体剤ヒトｉｌ−２２およびその使用
RU2663721C1 (ru) Моноклональные антитела к человеческому il-17 и их применение
JP4914209B2 (ja) ヒトｉｌ−２１受容体に対する抗体および該抗体の使用
JP4426449B2 (ja) ヒト抗ヒトｍｃｐ−１抗体及び該抗体フラグメント
EP0364778B1 (en) Antibody against interleukin-1beta
AU2004252169A1 (en) Antibodies against interleukin-22 and uses therefor
CA2642570A1 (en) Methods of using antibodies against human il-22
CN112638946A (zh) 抗il1rap抗体组合物
AU2002320790B2 (en) Human type antihuman IgE receptor antibody and antibody fragment
Yuan et al. Construction of human nonimmune library and selection of scFvs against IL-33
KR101525919B1 (ko) 자가면역 질환 예방 및 치료를 위한 ｔｎｆｒ２를 기반으로 하는 이중 항체
Gejima et al. Human single-chain Fv (scFv) antibody specific to human IL-6 with the inhibitory activity on IL-6-signaling
TWI793503B (zh) 抗IL-1β抗體
CN118019760A (en) Anti-IL-1-beta antibodies
RU2810206C1 (ru) Il-18-связывающий белок (il-18bp) и антитела при воспалительных заболеваниях
CN113817058A (zh) 一种抗人il-17rc的单克隆抗体及其应用
WO2023044280A1 (en) Anti-il-1-beta antibodies
WO2006046613A1 (ja) Ｉｌ－１８様ペプチド、その融合ペプチド、製造方法および用途
JPH0681599B2 (ja) インターロイキン―１βに対する抗体

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AU CA CN JP KR US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IT LU MC NL PT RO SE SI SK TR

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2004532751

Country of ref document: JP

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2496523

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2003261787

Country of ref document: AU

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 1020057003095

Country of ref document: KR

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2006240012

Country of ref document: US

Ref document number: 10526072

Country of ref document: US

Ref document number: 20038203340

Country of ref document: CN

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2003791369

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2003791369

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 1020057003095

Country of ref document: KR

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 10526072

Country of ref document: US