WO2004005327A1 - Neue tubulysinanaloga - Google Patents

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WO2004005327A1
WO2004005327A1 PCT/EP2003/007419 EP0307419W WO2004005327A1 WO 2004005327 A1 WO2004005327 A1 WO 2004005327A1 EP 0307419 W EP0307419 W EP 0307419W WO 2004005327 A1 WO2004005327 A1 WO 2004005327A1
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group
compounds according
alkyl
formula
hydrogen atom
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PCT/EP2003/007419
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French (fr)
Inventor
Alexander Doemling
Bernd Henkel
Barbara Beck
Katrin Illgen
Sukumar Sakamuri
Sanjay Menon
Original Assignee
Morphochem Ag Komb Chemie
Alexander Doemling
Bernd Henkel
Barbara Beck
Katrin Illgen
Sukumar Sakamuri
Sanjay Menon
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/021—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)n-C(=0)-, n being 5 or 6; for n > 6, classification in C07K5/06 - C07K5/10, according to the moiety having normal peptide bonds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Definitions

  • the present invention relates to new tubulysin analogues and the use of these compounds for the treatment of cancer.
  • Tubulysins were first isolated by the Höfle and Reichenbach group (GBF Braunschweig) from a culture broth of strains of the Myxobacterium Archangium gephyra (F. Sasse et al. J. Antibiot. 2000, 53, 879-885; W09813375; DE 10008089). These compounds have a very high cytotoxic activity against mammalian cell lines with IC 50 - er in the picomolar range and are therefore of great interest as potential cancer drugs.
  • Tubulysins (I) are tetrapeptides that contain three unusual amino acids, which make their synthesis a challenge for organic synthetic chemistry.
  • the aim of the present invention was to provide new tubulysin analogs which have a higher potency or better pharmacological properties than the natural products.
  • the present invention relates to compounds of the general formula (II)
  • A is an optionally substituted 5- or 6-membered heteroarylene radical
  • X is an oxygen atom, a sulfur atom or a group of the formula NR 13 or CR 14 R 15 ;
  • Y is an oxygen atom, a sulfur atom or a group of the formula NR 16 and
  • R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 6 , R 7 , R 8 , R 9 , R 10 , R 11 , R 12 , R 13 , R 14 , R 15 and R 16 independently from each other a hydrogen atom, an alkyl, alkenyl, alkynyl, heteroalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkyl, alkylcycloalkyl, hetero- alkylcycloalkyl, heterocycloalkyl, aralkyl or a heteroaralkyl radical, or two of the radicals together are part of a cycloalkyl or heterocycloalkyl ring system,
  • tubolysins A, B, C, D, E and F are excluded.
  • alkyl or alk refers to a saturated, straight-chain or branched hydrocarbon group which has 1 to 20 carbon atoms, preferably 1 to 12 carbon atoms, particularly preferably 1 to 6 carbon atoms, e.g. the methyl, ethyl, propyl, isopropyl, isobutyl, n-butyl, tert-butyl, n-hexyl, 2, 2-dimethylbutyl or n-octyl group.
  • alkenyl and alkynyl refer to at least partially unsaturated, straight-chain or branched hydrocarbon groups which have 2 to 20 carbon atoms, preferably 2 to 12 carbon atoms, particularly preferably 2 to 6 carbon atoms, e.g. B. the ethenyl, allyl, acetylenyl, propargyl, isoprenyl or hex-2-enyl group.
  • Alkenyl groups preferably have one or two (particularly preferably one) Double bonds or alkynyl groups have one or two (particularly preferably one) triple bonds.
  • alkyl, alkenyl and alkynyl refer to groups in which one or more hydrogen atoms are replaced by a halogen atom (preferably F or Cl), such as, for. B. the 2, 2, 2-trichloroethyl, or the trifluoromethyl group.
  • halogen atom preferably F or Cl
  • heteroalkyl refers to an alkyl, an alkenyl or an alkynyl group in which one or more (preferably 1, 2 or 3) carbon atoms are replaced by an oxygen, nitrogen, phosphorus, boron, selenium, Silicon or sulfur atom are replaced (preferably oxygen, sulfur or nitrogen).
  • heteroalkyl also refers to a carboxylic acid group or a group derived from a carboxylic acid, such as, for. B. acyl (alkyl-CO-), acylalkyl, alkoxycarbonyl, acyloxy, acyloxyalkyl, carboxyalkylamide or alkoxycarbonyloxy.
  • heteroalkyl groups are methoxy, trifluoromethoxy, ethoxy, n-propyloxy, iso-propyloxy, tert-butyloxy, methoxymethyl, ethoxymethyl, methoxyethyl, methylamino, ethylamino, dimethylamino, diethylamino, iso-propylethylamino, methylaminomethyl, di-isaminomethyl Propylaminoethyl, enol ether, dimethylaminomethyl, dimethylaminoethyl, acetyl, propionyl, butyryloxy, acetyloxy, methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, N-ethyl-N-methylcarbamoyl or N-methylcarbamoyl.
  • heteroalkyl groups are nitrile, isonitrile, cyanate, thiocyanate, isocyanate,
  • cycloalkyl refers to a saturated or partially unsaturated (e.g. cycloalkenyl) cyclic group which has one or more rings (preferably 1 or 2) which have a total of 3 to 14 ring carbon atoms, preferably 3 to 10 (especially 3 , 4, 5, 6 or 7) contain ring carbon atoms.
  • B. cyclic ketones such.
  • cycloalkyl groups are the cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, spiro [4,5] decanyl, norborny, cyclohexyl, cyclopentenyl, cyclohexadienyl, decalinyl, cubanyl, bicyclo [4.3.0] - Nonyl, tetralin, cyclopentylcyclohexyl, fluorocyclohexyl or the cyclohex-2-enyl group.
  • heterocycloalkyl refers to a cycloalkyl group as defined above in which one or more (preferably 1, 2 or 3) ring carbon atoms are represented by an oxygen, nitrogen, silicon, selenium, phosphorus or sulfur atom (preferably oxygen, Sulfur or nitrogen) are replaced.
  • a heterocycloalkyl group preferably has 1 or 2 rings with 3 to 10 (in particular 3, 4, 5, 6 or 7) ring atoms.
  • Examples are the piperidyl, morpholinyl, urotropinyl, pyrrolidinyl, tetrahydrothiophenyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrofuryl, oxacyclopropyl, azacyclopropyl or 2-pyrazolinyl group and also lactams, lactones, cyclic imides and cyclic anhydrides.
  • alkylcycloalkyl refers to groups which, in accordance with the above definitions, contain both cycloalkyl and also alkyl, alkenyl or alkynyl groups, e.g. B. alkylcycloalkyl, alkylcycloalkenyl, alkenylcycloalkyl and alkynylcycloalkyl groups.
  • An alkylcycloalkyl group preferably contains a cycloalkyl group which has one or two ring systems which contain a total of 3 to 10 (in particular 3, 4, 5, 6 or 7) ring carbon atoms and one or two alkyl, alkenyl or alkynyl groups with 1 or 2 to 6 carbon atoms.
  • heteroalkylcycloalkyl refers to alkylcycloalkyl groups, as defined above, in which one or more (preferably 1, 2 or 3) carbon atoms are represented by an oxygen, nitrogen, silicon, selenium, phosphorus or sulfur atom (preferably oxygen, sulfur or Nitrogen) are replaced.
  • a heteroalkylcycloalkyl group preferably has 1 or 2 ring systems with a total of 3 to 10 (in particular 3, 4, 5, 6 or 7) ring atoms and one or two alkyl, alkenyl, alkynyl or heteroalkyl groups with 1 or 2 to 6 carbon atoms.
  • Examples of such groups are alkyl heterocycloalkyl, alkyl heterocycloalkenyl, alkenyl heterocycloalkyl, alkynyl heterocycloalkyl, heteroalkyl cycloalkyl, heteroalkyl heterocycloalkyl and heteroalkyl heterocylcloalkenyl, the cyclic groups being saturated or mono-, di- or trisaturated.
  • aryl or Ar refers to an aromatic group which has one or more rings which have a total of 6 to 14 ring carbon atoms, preferably contain 6 to 10 (especially 6) ring carbon atoms.
  • aryl (or Ar) also refers to groups in which one or more hydrogen atoms have been replaced by fluorine, chlorine, bromine or iodine atoms or OH, SH, NH 2 or NO 2 groups. Examples are the phenyl, naphthyl, biphenyl, 2-fluorophenyl, anilinyl, 3-nitrophenyl or 4-hydroxyphenyl group.
  • heteroaryl refers to an aromatic
  • heteroaryl also refers to groups in which one or more hydrogen atoms have been replaced by fluorine, chlorine, bromine or iodine atoms or OH, SH, NH 2 or NO 2 groups.
  • Examples are 4-pyridyl, 2-imidazolyl, 3-phenylpyrrolyl, thiazolyl, oxazolyl, triazolyl, tetrazolyl, isoxazolyl, indazolyl, indolyl, benzimidazolyl, pyridazinyl, quinolinyl, purinyl, Carbazolyl, acridinyl, pyrimidyl, 2, 3 'bifuryl, 3-pyrazolyl and isoquinolinyl groups.
  • aralkyl refers to groups which, according to the above definitions, contain both aryl and also alkyl, alkenyl, alkynyl and / or cycloalkyl groups, such as, for. B. arylalkyl, arylalkenyl, arylalkynyl, arylcycloalkyl, arylcycloalkenyl, alkylaryl cycloalkyl and alkylarylcycloalkenyl groups.
  • aralkyls examples include toluene, xylene, mesitylene,
  • Dihydronaphthalenes indanone, phenylcyclopentyl, cumene, cyclohexylphenyl, fluorene and indane.
  • An aralkyl group preferably contains one or two aromatic ring systems
  • heteroaralkyl refers to an aralkyl group as defined above, in which one or more (preferably 1, 2, 3 or 4) carbon atoms are represented by an oxygen, nitrogen, silicon, selenium, phosphorus, boron or sulfur atom ( preferably oxygen, sulfur or nitrogen) are replaced, ie on groups which, according to the above definitions, are both aryl or heteroaryl and also alkyl, alkenyl, alkynyl and / or heteroalkyl and / or cycloalkyl and / or heterocyclo - contain alkyl groups.
  • a heteroaralkyl group preferably contains one or two aromatic ring systems (1 or 2 rings) with a total of 5 or 6 to 10 ring carbon atoms and one or two alkyl, alkenyl and / or alkynyl groups with 1 or 2 to 6 carbon atoms and / or a cycloalkyl group with 5 or 6 ring carbon atoms, 1, 2, 3 or 4 of these carbon atoms being replaced by oxygen, sulfur or nitrogen atoms.
  • Examples are alkenylheterocycloalkyl- Arylheteroalkyl-, Arylheterocycloalkyl-, Arylheterocycloalkenyl-, Arylalkylheterocycloalkyl-, aryl, Arylalkinylheterocyclo alkyl, Arylalkylheterocycloalkenyl-, heteroarylalkyl, hetero arylalkenyl, heteroarylalkynyl-, Heteroarylheteroalkyl-, Heteroarylcycloalkyl-, Heteroarylcycloalkenyl-, hetero- arylheterocycloalkyl -, Heteroarylheterocycloalken-yl-, Heteroarylalkylcycloalkyl-, Heteroarylheterocycloalken-yl-, Heteroarylalkylcycloalkyl-, Heteroarylalkylheter
  • This expression also relates to groups which exclusively or additionally contain unsubstituted C 6 -C 6 alkyl, C 2 -C 6 alkenyl, C 2 -C 6 alkynyl, C 1 -C 6 heteroalkyl, C 3 -C 10 cycloalkyl, C 2 -C 9 heterocycloalkyl, C 6 -C ⁇ 0 aryl, -C-C 9 heteroaryl, C 7 -C 12 aralkyl or C 2 -C n heteroaralkyl groups are substituted.
  • Compounds of formula (II) may contain one or more centers of chirality due to their substitution.
  • the present invention therefore encompasses all pure enantiomers and all pure diastereomers, as well as their mixtures in any mixing ratio.
  • the present invention also includes all cis / trans isomers of the compounds of the general formula (II) and mixtures thereof.
  • the present invention further encompasses all tautomeric forms of the compounds of the formula (II).
  • A is preferably an optionally substituted thiazole ring;
  • X is furthermore preferably a CH 2 group.
  • Y is more preferably an oxygen atom.
  • R 1 is preferably a Cx-C ⁇ alkyl group.
  • R 4 is preferably a hydrogen atom or a methyl group.
  • R 5 is more preferably a hydrogen atom.
  • R 6 is preferably a C ! -C 6 alkyl, a C 3 -C 6 cycloalkyl or a C 4 -C alkylcycloalkyl group, in particular R 6 corresponds to the side chain of eucine, isoleucine or valine.
  • R 7 is more preferably a hydrogen atom or a methyl group.
  • R 8 is again preferably a group of the formula CH 2 OCOR 17 , where R 17 is a C 6 -C 6 alkyl or a C 6 C alkenyl group.
  • R 9 is further preferably a C 1 -C 6 alkyl group.
  • R 10 is more preferably a hydrogen atom or a methyl group.
  • R 12 is furthermore preferably a group of the formula
  • R 18 is a hydrogen atom or a
  • R 19 is an aralkyl or heteroaralkyl group.
  • R 1 is a C 1 -C 4 alkyl group
  • R 6 is a C 1 -C 6 alkyl group
  • R 9 is a C 1 -C 6 alkyl group
  • R 17 is a C 1 -C 6 alkyl or a C! -C 6 alkenyl group
  • R 19 is an aralkyl or a heteroaralkyl group
  • R 20 is a C 1 -C 4 alkyl group and m is 1 or 2.
  • R 19 particularly preferably has the following structure:
  • R 21 is an OH, NH 2 , alkyloxy, alkylamino or a dialkylamino group
  • R 22 is a halogen atom, an OH, N0 2 , NH 2 , alkyloxy, alkylamino or a dialkylamino group and p is 0, 1, 2 or 3 is.
  • Examples of pharmacologically acceptable salts of the compounds of the formula (II) are salts of physiologically acceptable mineral acids such as hydrochloric acid, sulfuric acid and phosphoric acid or salts of organic acids such as methanesulfonic acid, p-toluenesulfonic acid, lactic acid, acetic acid, formic acid, trifluoroacetic acid, citric acid, succinic acid, Fumaric acid, maleic acid and salicylic acid.
  • Compounds of formula (II) can be solvated, in particular hydrated. The hydration can occur, for example, during the manufacturing process or as a result of the hygroscopic nature of the initially anhydrous compounds of formula (II).
  • compositions according to the present invention contain at least one compound of the formula (II) as an active ingredient and optionally excipients and / or adjuvants.
  • the pro-drugs which are also the subject of the present invention, consist of a compound of formula (II) and at least one pharmacologically acceptable protective group which is split off under physiological conditions, e.g. an alkoxy, aralkyloxy, acyl or acyloxy group, e.g. an ethoxy, benzyloxy, acetyl or acetyloxy group.
  • the present invention furthermore comprises conjugates which comprise at least one compound of the formula (II) and an antibody such as, for. B. oligosaccharides, monoclonal antibodies, lectins, PSA (prostate specific antigen) or peptide vectors and optionally contain a linker.
  • linker refers to a group that is suitable for connecting molecules to the antibody.
  • a linker can be an alkyl, heteroalkyl, aryl, heteroaryl, cycloalkyl, heterocycloalkyl, aralkyl or a heteroaralkyl group.
  • the use of these active ingredients in the manufacture of medicines for the treatment of cancer is also Object of the present invention.
  • the present compounds are useful in the prevention and / or treatment of rheumatoid arthritis, inflammatory diseases, immunological diseases (e.g. type 1 diabetes), autoimmune diseases, other tumor diseases and for surface modification (e.g. impregnation) of plastic and metal implants (e.g. stents) of great interest. They can also be used in the prevention and / or treatment of fungal diseases, ie as antifugal agents.
  • compounds of formula (II) are administered using known and acceptable modes, either individually or in combination with any other therapeutic agent.
  • Such therapeutically useful agents can be administered in one of the following ways: orally, for example as dragées, coated tablets, pills, semi-solids, soft or hard capsules, solutions, emulsions or suspensions; parenterally, eg as an injectable solution; rectally as suppositories; by inhalation, for example as a powder formulation or spray, transdermally or intranasally.
  • the therapeutically usable product can be mixed with pharmacologically inert, inorganic or organic drug carriers, for example with lactose, sucrose, glucose, gelatin, malt, silica gel, starch or Derivatives thereof, talc, stearic acid or its salts, dry skimmed milk and the like.
  • pharmacologically inert inorganic or organic drug carriers
  • pharmaceutical carriers such as vegetable oils, petroleum, animal or synthetic oils, wax, fat, polyols can be used.
  • liquid solutions and syrups can be carried out using excipients such as water, alcohols, aqueous saline, aqueous dextrose, polyols, glycerin, vegetable oils, petroleum, animal or synthetic oils.
  • excipients such as water, alcohols, aqueous saline, aqueous dextrose, polyols, glycerin, vegetable oils, petroleum, animal or synthetic oils.
  • pharmaceutical carriers such as vegetable oils, petroleum, animal or synthetic oils, wax, fat and polyols can be used.
  • Compressed gases suitable for this purpose such as oxygen, nitrogen, noble gases and carbon dioxide, can be used for aerosol formulations.
  • the pharmaceutically usable agents can also contain additives for preservation, stabilization, emulsifiers, sweeteners, flavorings, salts for changing the osmotic pressure, buffers, coating additives and antioxidants.
  • Combinations with other therapeutic agents may include other agents that are commonly used to treat cancer.
  • Building block (IV) can in turn be produced by peptide coupling from commercially available amino acids or those described in the literature.
  • Module (V) can, for. B. be prepared via a multicomponent reaction from compounds of the formulas (VII), (VIII) and (IX).
  • PG is a conventional amine protecting group such as.
  • Compound can be converted into building block (V) with R 17 COOCH 2 Cl or with H 2 CO and R 17 COOH or with H 2 CO, TMS-Cl and R 17 COONa (I. Kornonen et al. Acta Chem. Scand.
  • the tert-butyldiphenylsilyl protective group is split off from (8) (9) 3.91g (8) (6.43mmol) in abs. 30ml of tetrahydrofuran. solved. Then 2.223 ml of tetrabutylammonium fluoride solution (IM in THF) (7.72 mmol) are added dropwise and the mixture is stirred at room temperature for 2 hours. Then it is hydrolyzed with 8 ml of water and the tetrahydrofuran is spun off. The solution is neutralized and extracted five times with ethyl acetate. The combined organic extracts are still Shaken twice with saturated NaCl solution and dried over sodium sulfate.
  • IM in THF tetrabutylammonium fluoride solution
  • Compounds of formula (IX) z. B. can be prepared via an ⁇ -aminoalkylation from isobutyraldehyde, ammonium acetate or a primary amine or its hydrochloride and malonic acid: no OR 9 O
  • Example 35 The compound from Example 35 (0.1 mmol) is dissolved in 2 ml of dichloromethane (DCM) and 0.1 ml of trifluoroacetic acid (TFA) and stirred for 1 h at room temperature. The DCM / TFA mixture is then removed in vacuo and the residue is purified by HPLC.
  • DCM dichloromethane
  • TFA trifluoroacetic acid
  • Example 39 The compound from Example 37 (0.1 mmol) is dissolved in 2 ml dichloromethane (DCM) and 0.1 ml trifluoroacetic acid (TFA) dissolved and stirred for 1 h at room temperature. The DCM / TFA mixture is then removed in vacuo and the residue is purified by HPLC.
  • DCM dichloromethane
  • TFA trifluoroacetic acid
  • Example 41 -Butoxycarbonyl-methyl-amino) -1-hydroxy-4-methyl-pentyl] thiazole-4-carboxylic acid methyl ester (Example 41) are dissolved in 5 ml of DCM and slowly added dropwise with a syringe. The reaction mixture is allowed to warm to RT and stirred for a further 4 h. The reaction solution is concentrated a little in vacuo and the precipitated urea is filtered off. 1 ml of trifluoroacetic acid is added to the filtrate and the mixture is stirred at RT for 1 h, after which the mixture is rotated in completely. The residue is taken up in 1 ml of dichloromethane, mixed with 1 ml of triethylamine and stirred at RT for 1 h. The Solvent is removed completely. The rearranged coupling product is cleaned by HPLC.
  • (2S)-2-Phthalimido-3-phenyl-propanol To a mixture of 1, -phenylalaninol (1.0 g, 6.61 mmol) and Na 2 CO 3 (1.05 g, 9.92 mmol) in a 1: 1 mixture of THF ( 10 mL) and H 2 0 (10 mL) W-carbethoxyphthalimide (1.74 g, 7.94 mmol) were added and the mixture was stirred at RT for 4 h. EtOAc (20 mL) was added to the reaction mixture and the organic phase was separated off. The aqueous phase was extracted twice with 15 mL EtOAc and the combined organic phases with sat.
  • the desired product was purified by column chromatography with 25% EtOAc in hexane. Yield: 0.149 g (70%). The diastereomers were determined using preparative thin layer chromatography separated, whereby the desired product was obtained with an excess of 8: 2.
  • tubulysin derivatives were also prepared using the synthesis instructions described here:
  • R 1 methyl, ethyl
  • R 6 isopropyl, isobutyl, ethyl, cyclopropyl, CH 2 -cyclopropyl, CH (CH 3 ) CH 2 CH 3 ;
  • R 9 isopropyl, trifluoromethyl, chloromethyl, isobutyl, ethyl, cyclopropyl, CH 2 -cyclopropyl, CH (CH 3 ) CH 2 CH 3 , cyclopentyl, cyclohexyl;
  • R 17 methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl,
  • CH C (CH 3 ), cyclopropyl, cyclobutyl, cyclohexyl;
  • R 20 methyl, ethyl, propyl, isopropyl, phenyl;
  • R 19

Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft Tubulysinderivate mit cytostatischer Wirkung der allgemeinen Formel (II).

Description

Neue Tubulysinanaloga
Die Vorliegende Erfindung betrifft neue Tubulysinanaloga sowie die Verwendung dieser Verbindungen zur Behandlung von Krebserkrankungen.
Die Tubulysine wurden erstmals von der Gruppe von Höfle und Reichenbach (GBF Braunschweig) aus einer Kulturbrühe von Stämmen des Myxobakteriums Archangium gephyra isoliert (F. Sasse et al . J. Antibiot. 2000, 53, 879-885; W09813375; DE 10008089) . Diese Verbindungen haben eine ausgesprochen hohe cytotoxische Aktivität gegenüber Säugetierzellinien mit IC50- erten im picomolaren Bereich und sind daher in als potentielle Krebsmedikamente von grossem Interesse. Tubulysine (I) sind Tetrapeptide, die drei ungewöhnliche Aminosäuren enthalten, was ihre Synthese zu einer Herausforderung für die organische Synthesechemie mach .
Figure imgf000002_0001
Tubulysin A: R' CH2CH ( CH3 ) 2 ; R " = OH Tubulysin B: R' CH2CH2CH3 ; R " = OH Tubulysin C: R' CH2CH3 ; R" = OH Tubulysin D: R' CH2CH (CH3 ) 2 ; R " = H Tubulysin E: R' = CH2CH2CH3; R' ' = H Tubulysin F: R' = CH2CH3; R' ' = H
Ziel der vorliegenden Erfindung war es, neue Tubulysinanaloga bereitzustellen, die eine höhere Wirksamkeit bzw. bessere pharmakologische Eigenschaften als die Naturstoffe aufweisen.
Die vorliegende Erfindung betrifft Verbindungen der allgemeinen Formel (II)
Figure imgf000003_0001
wobei
A ein gegebenenfalls substituierter 5- oder 6-gliedriger Heteroarylenrest ist;
X ein Sauerstoffatom, ein Schwefelatom oder eine Gruppe der Formel NR13 oder CR14R15 ist;
Y ein Sauerstoffatom, ein Schwefelatom oder eine Gruppe der Formel NR16 ist und
die Reste R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15 und R16 unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, ein Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Heteroalkyl- , Aryl-, Heteroaryl-, Cycloalkyl-, Alkylcycloalkyl- , Hetero- alkylcycloalkyl- , Heterocycloalkyl- , Aralkyl- oder ein Heteroaralkylrest , oder zwei der Reste gemeinsam Teil eines Cycloalkyl- oder Heterocycloalkylringsystems sind,
wobei Verbindungen der Formel (I) , worin R ein Wasserstoffatom, eine Alkyl-, eine Alkenyl,- eine Aryl- oder eine Heteroarylgruppe und R" gleichzeitig ein Wasser- stoffatom, eine OH- eine Alkyl-, eine Aryl- oder eine Heteroarylgruppe ist, ausgenommen sind,
oder ein pharmakologisch akzeptables Salz, Solvat, Hydrat oder eine pharmakologisch akzeptable Formulierung derselben. Insbesondere werden die Tubolysine A, B, C, D, E und F ausgenommen.
Der Ausdruck Alkyl oder Alk bezieht sich auf eine gesättigte, geradkettige oder verzweigte Kohlenwasser- stoffgruppe, die 1 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 1 bis 12 Kohlenstoffatome, besonders bevorzugt 1 bis 6 Kohlenstoffatome aufweist, z.B. die Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Isopropyl-, Isobutyl-, n-Butyl-, tert-Butyl, n-Hexyl-, 2 , 2-Dimethylbutyl- oder n-Octyl-Gruppe .
Die Ausdrücke Alkenyl und Alkinyl beziehen sich auf zumindest teilweise ungesättigte, geradkettige oder verzweigte Kohlenwasserstoffgruppen, die 2 bis 20 Kohlenstoffatome, vorzugsweise 2 bis 12 Kohlenstoffatome, besonders bevorzugt 2 bis 6 Kohlenstoffatome aufweisen, z. B. die Ethenyl-, Allyl-, Acetylenyl-, Propargyl-, Isoprenyl- oder Hex-2-enyl-Gruppe . Bevorzugt weisen Alkenylgruppen eine oder zwei (besonders bevorzugt eine) Doppelbindungen bzw. Alkinylgruppen eine oder zwei (besonders bevorzugt eine) Dreifachbindungen auf.
Des weiteren beziehen sich die Begriffe Alkyl, Alkenyl und Alkinyl auf Gruppen, bei der ein oder mehrere Wasserstoffatome durch ein Halogenatom (bevorzugt F oder Cl) ersetzt sind wie z. B. die 2, 2, 2-Trichlorethyl- , oder die Trifluormethylgruppe.
Der Ausdruck Heteroalkyl bezieht sich auf eine Alkyl-, eine Alkenyl- oder eine Alkinyl-Gruppe, in der ein oder mehrere (bevorzugt 1, 2 oder 3) Kohlenstoffatome durch ein Sauerstoff-, Stickstoff-, Phosphor-, Bor-, Selen-, Silizium- oder Schwefelatom ersetzt sind (bevorzugt Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoff) . Der Ausdruck Heteroalkyl bezieht sich des weiteren auf eine Carbonsäuregruppe oder eine von einer Carbonsäure abgeleitete Gruppe wie z. B. Acyl (Alkyl-CO-), Acylalkyl, Alkoxycarbonyl , Acyloxy, Acyloxyalkyl, Carboxyalkylamid oder Alkoxycarbonyloxy.
Beispiele für Heteroalkylgruppen sind Gruppen der Formeln Ra-0-Ya-, Ra-S-Y8-, Ra-N(Rb) -Ya-, Ra-C0-Ya-, R-0-CO-Ya- Ra-CO-0-Ya-, Ra-C0-N(Rb) -Ya-, Ra-N (Rb) -C0-Ya- Ra-0-CO-N(Rb) -Ya-, Ra-N (Rb) -C0-0-Ya- , Ra-N (Rb) -CO-N (Rc) -Ya- Ra-0-CO-O-Ya-, Ra-N(Rb) -C(=NRd) -N(RC) -Ya-, Ra-CS-Ya- Ra-0-CS-Ya-, Ra-CS-0-Ya-, Ra-CS-N(R) -Ya-, Ra-N (Rb) -CS-Ya- Ra-0-CS-N(Rb) -Ya-, Ra-N(Rb) -CS-0-Y3-, Ra-N (Rb) -CS-N (Rc) -Ya- Ra-0-CS-0-Ya-, Ra-S-CO-Ya-, Ra-C0-S-Ya-, Ra-S-CO-N (Rb) -Ya- Ra-N(Rb) -C0-S-Ya-, Ra-S-CO-0-Ya-, Ra-0-C0-S-Ya-
Ra-S-CO-S-Ya Ra-S-CS-Ya R -CS-S-Y3 Ra-S-CS-N(Rb) -Ya- Ra-N(Rb) -CS-S-Y3-, Ra-S-CS-0-Ya-, Ra-0-CS-S-Ya- , wobei Ra ein Wasserstoffatom, eine Ci-Ce-Alkyl- , eine C2-C6-Alkenyl- oder eine C2-C6-Alkinylgruppe; Rb ein Wasserstoffatom, eine Cι-C6-Alkyl-, eine C2-C6-Alkenyl- oder eine C2-C6- Alkinylgruppe ; Rc ein Wasserstoffatom, eine Cι-C6-Alkyl- , eine C2-C6-Alkenyl- oder eine C2-C6-Alkinylgruppe; Rd ein Wasserstoffatom, eine Cι-C6-Alkyl- , eine C2-C6-Alkenyl- oder eine C2-C6-Alkinylgruppe und Ya eine Bindung, eine Ci- C6-Alkylen-, eine C2-C6-Alkenylen- oder eine C2-C6- Alkinylengruppe ist, wobei jede Heteroalkylgruppe mindestens ein Kohlenstoffatom enthält und ein oder mehrere Wasserstoffatome durch Fluor- oder Chloratome ersetzt sein können. Konkrete Beispiele für Heteroalkylgruppen sind Methoxy, Trifluormethoxy, Ethoxy, n-Propyloxy, iso-Propyloxy, tert-Butyloxy, Methoxymethyl, Ethoxymethyl , Methoxyethyl , Methylamino, Ethylamino, Dimethylamino, Diethylamino, iso-Propylethylamino, Methyl- aminomethyl, Ethylaminomethyl, Di-iso-Propylaminoethyl, Enolether, Dimethylaminomethyl , Dimethylaminoethyl, Acetyl, Propionyl, Butyryloxy, Acetyloxy, Methoxycarbonyl, Ethoxy-carbonyl, N-Ethyl-N-Methylcarbamoyl oder N- Methylcarbamoyl . Weitere Beispiele für Heteroalkylgruppen sind Nitril-, Isonitril, Cyanat-, Thiocyanat-, Isocyanat-, Isothiocyanat und Alkylnitrilgruppen.
Der Ausdruck Cycloalkyl bezieht sich auf eine gesättigte oder teilweise ungesättigte (z. B. Cycloalkenyl) cyclische Gruppe, die einen oder mehrere Ringe (bevorzugt 1 oder 2) aufweist, die insgesamt 3 bis 14 Ring-Kohlenstoffatome, vorzugsweise 3 bis 10 (insbesondere 3, 4, 5, 6 oder 7) Ring-Kohlenstoffatome enthalten. Der Ausdruck Cycloalkyl bezieht sich weiterhin auf derartige Gruppen, bei denen ein oder mehrere Wasserstoffatome durch Fluor-, Chlor-, Brom- oder Jodatome oder OH, =0, SH, =S, NH2, =NH oder N02-Gruppen ersetzt sind also z. B. cyclische Ketone wie z. B. Cyclohexanon, 2-Cyclohexenon oder Cyclopentanon. Weitere konkrete Beispiele für Cycloalkylgruppen sind die Cyclopropyl- , Cyclobutyl-, Cyclopentyl-, Spiro[4,5]- decanyl- , Norborny- , Cyclohexyl- , Cyclopentenyl - , Cyclohexadienyl- , Decalinyl-, Cubanyl-, Bicyclo [4.3.0] - nonyl-, Tetralin-, Cyclopentylcyclohexyl- , Fluorcyclo- hexyl- oder die Cyclohex-2-enyl-Gruppe .
Der Ausdruck Heterocycloalkyl bezieht sich auf eine Cycloalkylgruppe wie oben definiert, in der ein oder mehrere (bevorzugt 1, 2 oder 3) Ring-Kohlenstoffatome durch ein Sauerstoff-, Stickstoff-, Silizium-, Selen-, Phosphor- oder Schwefelatom (bevorzugt Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoff) ersetzt sind. Bevorzugt besitzt eine Heterocycloalkylgruppe 1 oder 2 Ringe mit 3 bis 10 (insbesondere 3, 4, 5, 6 oder 7) Ringatomen. Der Ausdruck Heterocycloalkyl bezieht sich weiterhin auf derartige Gruppen, bei denen ein oder mehrere Wasserstoffatome durch Fluor-, Chlor-, Brom- oder Jodatome oder OH, =0, SH, =S, NH2, =NH oder N02-Gruppen ersetzt sind. Beispiele sind die Piperidyl-, Morpholinyl- , Urotropinyl- , Pyrrolidinyl- , Tetrahydrothiophenyl- , Tetrahydropyranyl- , Tetrahydro- furyl-, Oxacyclopropyl-, Azacyclopropyl- oder 2- Pyrazolinyl-Gruppe sowie Lactame, Lactone, cyclische Imide und cyclische Anhydride. Der Ausdruck Alkylcycloalkyl bezieht sich auf Gruppen, die entsprechend den obigen Definitionen sowohl Cycloalkyl- wie auch Alkyl-, Alkenyl- oder Alkinylgruppen enthalten, z. B. Alkylcycloalkyl-, Alkylcycloalkenyl- , Alkenylcyclo- alkyl- und Alkinylcycloalkylgruppen. Bevorzugt enthält eine Alkylcycloalkylgruppe eine Cycloalkylgruppe, die einen oder zwei Ringsysteme aufweist, welche insgesamt 3 bis 10 (insbesondere 3, 4, 5, 6 oder 7) Ring-Kohlenstoff- atome enthält und eine oder zwei Alkyl-, Alkenyl- oder Alkinylgruppen mit 1 oder 2 bis 6 Kohlenstoffatomen.
Der Ausdruck Heteroalkylcycloalkyl bezieht sich auf Alkylcycloalkylgruppen, wie oben definiert, in der ein oder mehrere (bevorzugt 1, 2 oder 3) Kohlenstoffatome durch ein Sauerstoff-, Stickstoff-, Silizium-, Selen-, Phosphor- oder Schwefelatom (bevorzugt Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoff) ersetzt sind. Bevorzugt besitzt eine Heteroalkylcycloalkylgruppe 1 oder 2 Ringsysteme mit insgesamt 3 bis 10 (insbesondere 3, 4, 5, 6 oder 7) Ringatomen und eine oder zwei Alkyl, Alkenyl, Alkinyl oder Heteroalkylgruppen mit 1 oder 2 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispiele derartiger Gruppen sind Alkylheterocycloalkyl, Alkylheterocycloalkenyl, Alkenylheterocycloalkyl, Alkinyl- heterocycloalkyl, Heteroalkylcycloalkyl, Heteroalkyl- heterocycloalkyl und Heteroalkylheterocylcloalkenyl, wobei die cyclischen Gruppen gesättigt oder einfach, zweifach oder dreifach ungesättigt sind.
Der Ausdruck Aryl bzw. Ar bezieht sich auf eine aromatische Gruppe, die einen oder mehrere Ringe hat, welche insgesamt 6 bis 14 Ring-Kohlenstoffatome, vorzugsweise 6 bis 10 (insbesondere 6) Ring-Kohlenstoffatome enthalten. Der Ausdruck Aryl (bzw. Ar) bezieht sich weiterhin auf derartige Gruppen, bei denen ein oder mehrere Wasserstoffatome durch Fluor-, Chlor-, Brom- oder Jodatome oder OH, SH, NH2, oder N02-Gruppen ersetzt sind. Beispiele sind die Phenyl-, Naphthyl-, Biphenyl-, 2-Fluorphenyl, Anilinyl-, 3-Nitrophenyl oder 4 -Hydroxy-phenyl-Gruppe .
Der Ausdruck Heteroaryl bezieht sich auf eine aromatische
Gruppe, die einen oder mehrere Ringe hat, welche insgesamt
5 bis 14 Ringatome, vorzugsweise 5 bis 10 (insbesondere 5 oder 6) Ringatome enthalten und ein oder mehrere
(bevorzugt 1, 2, 3 oder 4) Sauerstoff-, Stickstoff-, Phosphor- oder Schwefel-Ringatome (bevorzugt O, S oder N) enthält. Der Ausdruck Heteroaryl bezieht sich weiterhin auf derartige Gruppen, bei denen ein oder mehrere Wasserstoffatome durch Fluor-, Chlor-, Brom- oder Jodatome oder OH, SH, NH2, oder N02-Gruppen ersetzt sind. Beispiele sind 4-Pyridyl-, 2-Imidazolyl- , 3-Phenylpyrrolyl- , Thiazolyl-, Oxazolyl-, Triazolyl-, Tetrazolyl-, Isoxazolyl-, Indazolyl-, Indolyl-, Benzimidazolyl- , Pyridazinyl- , Chinolinyl-, Purinyl-, Carbazolyl-, Acridinyl-, Pyrimidyl-, 2, 3 '-Bifuryl- , 3-Pyrazolyl- und Isochinolinyl- Gruppen.
Der Ausdruck Aralkyl bezieht sich auf Gruppen, die entsprechend den obigen Definitionen sowohl Aryl- wie auch Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl- und/oder Cycloalkylgruppen enthalten, wie z. B. Arylalkyl-, Arylalkenyl- , Aryl- alkinyl-, Arylcycloalkyl-, Arylcycloalkenyl- , Alkylaryl- cycloalkyl- und Alkylarylcycloalkenylgruppen. Konkrete
Beispiele für Aralkyle sind Toluol, Xylol , Mesitylen,
Styrol, Benzylchlorid, o-Fluortoluol, lH-Inden, Tetralin,
Dihydronaphthaline, Indanon, Phenylcyclopentyl, Cumol, Cyclohexylphenyl , Fluoren und Indan. Bevorzugt enthält eine Aralkylgruppe ein oder zwei aromatische Ringsysteme
(1 oder 2 Ringe) mit insgesamt 6 bis 10 Ring-Kohlen- stoffatomen und ein oder zwei Alkyl-, Alkenyl- und/oder
Alkinylgruppen mit 1 oder 2 bis 6 Kohlenstoffatomen und/oder eine Cycloalkylgruppe mit 5 oder 6
Ringkohlenstoffatomen .
Der Ausdruck Heteroaralkyl bezieht sich auf eine Aralkylgruppe wie oben definiert, in der ein oder mehrere (bevorzugt 1, 2, 3 oder 4) Kohlenstoffatome durch ein Sauerstoff-, Stickstoff-, Silizium-, Selen-, Phosphor-, Bor- oder Schwefelatom (bevorzugt Sauerstoff, Schwefel oder Stickstoff) ersetzt sind, d. h. auf Gruppen, die entsprechend den obigen Definitionen sowohl Aryl- bzw. Heteroaryl- wie auch Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl- und/oder Heteroalkyl- und/oder Cycloalkyl- und/oder Heterocyclo- alkylgruppen enthalten. Bevorzugt enthält eine Hetero- aralkylgruppe ein oder zwei aromatische Ringsysteme (1 oder 2 Ringe) mit insgesamt 5 oder 6 bis 10 Ring- Kohlenstoffatomen und ein oder zwei Alkyl-, Alkenyl- und/oder Alkinylgruppen mit 1 oder 2 bis 6 Kohlenstoffatomen und/oder eine Cycloalkylgruppe mit 5 oder 6 Ringkohlenstoffatomen, wobei 1, 2, 3 oder 4 dieser Kohlenstoffatome durch Sauerstoff-, Schwefel- oder Stickstoffatome ersetzt sind. Beispiele sind Arylheteroalkyl- , Arylheterocycloalkyl-, Arylheterocycloalkenyl- , Arylalkylheterocycloalkyl- , Aryl- alkenylheterocycloalkyl- , Arylalkinylheterocyclo-alkyl- , Arylalkylheterocycloalkenyl-, Heteroarylalkyl- , Hetero- arylalkenyl-, Heteroarylalkinyl-, Heteroarylheteroalkyl- , Heteroarylcycloalkyl-, Heteroarylcycloalkenyl- , Hetero- arylheterocycloalkyl- , Heteroarylheterocycloalken-yl- , Heteroarylalkylcycloalkyl- , Heteroarylalkylheterocyclo- alkenyl-, Heteroarylheteroalkylcycloalkyl- , Heteroaryl- heteroalkylcycloalkenyl- und Heteroarylheteroalkylhetero- cycloalkyl-Gruppen, wobei die cyclischen Gruppen gesättigt oder einfach, zweifach oder dreifach ungesättigt sind. Konkrete Beispiele sind die Tetrahydroisochinolinyl- , Benzoyl-, 2- oder 3-Ethyl-indolyl- , 4-Methylpyridino- , 2-, 3- oder 4-Methoxyphenyl- , 4-Ethoxyphenyl- , 2-, 3- oder 4-Carboxyphenylalkylgruppe .
Die Ausdrücke Cycloalkyl, Heterocycloalkyl, Alkylcycloalkyl, Heteroalkylcycloalkyl, Aryl, Heteroaryl, Aralkyl und Heteroaralkyl beziehen sich auch auf Gruppen, in denen ein oder mehrere Wasserstoffatome solcher Gruppen durch Fluor-, Chlor-, Brom- oder Jodatome oder OH, =0, SH, =S, NH2, =NH oder N02-Gruppen ersetzt sind.
Der Ausdruck "gegebenenfalls substituiert" bezieht sich z.B. auf Gruppen, in denen ein oder mehrere Wasserstoffatome durch Fluor-, Chlor-, Brom- oder Jodatome oder OH, =0, SH, =S, NH2, =NH oder N02-Gruppen ersetzt sind. Dieser Ausdruck bezieht sich weiterhin auf Gruppen, die ausschließlich oder zusätzlich mit unsubstituierten Cι-C6 Alkyl-, C2-C6 Alkenyl-, C2-C6 Alkinyl-, Cι-C6 Heteroalkyl-, C3-C10 Cycloalkyl-, C2-C9 Heterocycloalkyl-, C6-Cι0 Aryl-, Cι-C9 Heteroaryl-, C7-C12 Aralkyl- oder C2-Cn Heteroaralkyl-Gruppen substituiert sind.
Schutzgruppen sind dem Fachmann bekannt und z. B. in P. J. Kocienski, Protecting Groups, Georg Thieme Verlag, Stuttgart, 1994 sowie in T. W. Greene, P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1999 beschrieben, und sind hier unter Bezugnahme aufgenommen. Gängige Aminoschutzgruppen sind z. B. t-Butyloxycarbonyl- (Boc) , Benzyloxycarbonyl- (Cbz, Z) , Benzyl- (Bn) , Benzoyl- (Bz) , Fluorenylmethyloxycarbonyl - (Fmoc) , Allyloxycarbonyl - (Alloc) , Trichlorethyloxy- carbonyl- (Troc) , Acetyl- oder Trifluoracetylgruppen.
Verbindungen der Formel (II) können aufgrund ihrer Substitution ein oder mehrere Chiralitätszentren enthalten. Die vorliegende Erfindung umfasst daher sowohl alle reinen Enantiomere und alle reinen Diastereomere, als auch deren Gemische in jedem Mischungsverhältnis. Des weiteren sind von der vorliegenden Erfindung auch alle cis/trans-Iso eren der Verbindungen der allgemeinen Formel (II) sowie Gemische davon umfasst. Des weiteren sind von der vorliegenden Erfindung alle tautomeren Formen der Verbindungen der Formel (II) umfasst.
Bevorzugt ist A ein gegebenenfalls substituierter Thiazolring; besonders bevorzugt weist A die folgende Struktur auf :
Figure imgf000012_0001
Des weiteren bevorzugt ist X eine CH2-Gruppe.
Weiter bevorzugt ist Y ein Sauerstoffatom.
Wiederum bevorzugt ist R1 eine Cx-C^ Alkylgruppe .
Des weiteren bevorzugt sind R2 und R3 zusammen eine Gruppe der Formel (CH2)n mit n = 2, 3, 4 oder 5.
Wiederum bevorzugt ist R4 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe .
Weiter bevorzugt ist R5 ein Wasserstoffatom.
Des weiteren bevorzugt ist R6 eine C!-C6 Alkyl-, eine C3-C6 Cycloalkyl oder eine C4-C Alkylcycloalkylgruppe, insbesondere entspricht R6 der Seitenkette von eucin, Isoleucin oder Valin.
Weiter bevorzugt ist R7 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe .
Wiederum bevorzugt ist R8 eine Gruppe der Formel CH2OCOR17, wobei R17 eine Cι-C6 Alkyl oder eine Cι-C6 Alkenylgruppe ist.
Des weiteren bevorzugt ist R9 eine Cι-C6 Alkylgruppe.
Weiter bevorzugt ist R10 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe. Wiederum bevorzugt ist R11 ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe der Formel - (C=0) - (Cι- )Alkyl .
Des weiteren bevorzugt ist R12 eine Gruppe der Formel
NR18R19, wobei R18 ein Wasserstoffatom oder eine
Methylgruppe ist und R19 eine Aralkyl- oder eine Heteroaralkylgruppe ist.
Besonders bevorzugt sind Verbindungen der Formel (III )
Figure imgf000014_0001
wobei R1 eine Cι-C4 Alkylgruppe ist, R6 eine Cι-C6 Alkylgruppe ist, R9 eine Cι-C6 Alkylgruppe ist, R17 eine Cι-C6 Alkyl oder eine C!-C6 Alkenylgruppe ist, R19 eine Aralkyl oder eine Heteroaralkylgruppe ist, R20 eine Cι-C4 Alkylgruppe ist und m gleich 1 oder 2 ist.
Insbesondere bevorzugt weist R19 die folgende Struktur auf:
Figure imgf000015_0001
wobei R21 eine OH, NH2, Alkyloxy-, Alkylamino oder eine Dialkylaminogruppe ist, R22 ein Halogenatom, eine OH, N02, NH2, Alkyloxy-, Alkylamino oder eine Dialkylaminogruppe ist und p gleich 0, 1, 2 oder 3 ist.
Beispiele für pharmakologisch akzeptable Salze der Verbindungen der Formel (II) sind Salze von physiologisch akzep- tablen Mineralsäuren wie Salzsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäure oder Salze von organischen Säuren wie Methansulfonsäure, p-Toluolsulfonsäure, Milchsäure, Essigsäure, Ameisensäure, Trifluoressigsäure, Zitronensäure, Bernsteinsäure, Fumarsäure, Maleinsäure und Salicylsäure . Verbindungen der Formel (II) können solvatisiert, insbesondere hydratisiert sein. Die Hydratisierung kann z.B. während des Herstellungsverfahrens oder als Folge der hygroskopischen Natur der anfänglich wasserfreien Verbindungen der Formel (II) auftreten. Wenn die Verbin- düngen der Formel (II) asymmetrische C-Atome enthalten, können sie entweder als Diastereomeren-Gemische, Gemische von Enantiomeren oder als optisch reine Verbindungen vorliegen. Die pharmazeutischen Zusammensetzungen gemäß der vorliegenden Erfindung enthalten mindestens eine Verbindung der Formel (II) als Wirkstoff und fakultativ Trägerstoffe und/oder Adjuvantien.
Die Pro-Drugs, die ebenfalls Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind, bestehen aus einer Verbindung der Formel (II) und mindestens einer pharmakologisch akzeptablen Schutzgruppe, die unter physiologischen Bedingungen abgespalten wird, z.B. einer Alkoxy-, Aralkyloxy-, Acyl- oder Acyloxy-Gruppe, wie z.B. einer Ethoxy-, Benzyloxy- , Acetyl- oder Acetyloxy-Gruppe. Des weiteren umfasst die vorliegende Erfindung Konjugate, die mindestens eine Verbindung der Formel (II) und einen Antikörper wie z. B. Oligosaccharide, monoklonale Antikörper, Lectine, PSA (Prostata spezifisches Antigen) oder peptidische Vektoren sowie gegebenenfalls einen Linker enthalten. Der Ausdruck Linker bezieht sich auf eine Gruppe, die dazu geeignet ist, Moleküle mit dem Antikörper zu verbinden. Ein Linker kann eine Alkyl-, Heteroalkyl-, Aryl-, Heteroaryl-, Cycloalkyl-, Heterocycloalkyl-, Aralkyl- oder ein Heteroaralkylgruppe sein.
Die therapeutische Verwendung der Verbindungen der Formel (II) , ihrer pharmakologisch akzeptablen Salze bzw. Solvate und Hydrate sowie Formulierungen und pharmazeutischen Zusammensetzungen liegt ebenfalls im Rahmen der vorliegenden Erfindung.
Auch die Verwendung dieser Wirkstoffe zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung von Krebserkrankungen ist Gegenstand der vorliegenden Erfindung. Des weiteren sind die vorliegenden Verbindungen bei der Vorbeugung und/oder Behandlung von rheumatoider Arthritis, entzündlichen Erkrankungen, Immunologisch bedingten Krankheiten (z. B. Diabetes Typ 1) , Autoimmunkrankheiten, weiteren Tumorerkrankungen sowie zur Oberflächenmodifikation (z. B. Imprägnierung) von Kunststoff- und Metallimplantaten (z. B. Stents) von großem Interesse. Auch sind sie bei der Vorbeugung und/oder Behandlung von Pilzerkrankungen, d.h. als antifugale Mittel einsetzbar. Im allgemeinen werden Verbindungen der Formel (II) unter Anwendung der bekannten und akzeptablen Modi, entweder einzeln oder in Kombination mit einem beliebigen anderen therapeutischen Mittel verabreicht. Solche therapeutisch nützlichen Mittel können auf einem der folgenden Wege verabreicht werden: oral, z.B. als Dragees, überzogene Tabletten, Pillen, Halbfeststoffe, weiche oder harte Kapseln, Lösungen, Emulsionen oder Suspensionen; parenteral, z.B. als injizierbare Lösung; rektal als Suppositorien; durch Inhalation, z.B. als Pulverformulierung oder Spray, transdermal oder intranasal. Zur Herstellung solcher Tabletten, Pillen, Halbfeststoffe, überzogenen Tabletten, Dragees und harten Gelatinekapseln kann das therapeutisch verwendbare Produkt mit pharmakologisch inerten, anorganischen oder organischen Arzneimitteltragersubstanzen vermischt werden, z.B. mit Lactose, Sucrose, Glucose, Gelatine, Malz, Sili- cagel, Stärke oder Derivaten derselben, Talkum, Stearinsäure oder ihren Salzen, Trockenmagermilch und dgl . Zur Herstellung von weichen Kapseln kann man Arzneimittelträ- gerstoffe wie z.B. pflanzliche Öle, Petroleum, tierische oder synthetische Öle, Wachs, Fett, Polyole einsetzen. Zur Herstellung von flüssigen Lösungen und Sirups kann man Arzneimittelträgerstoffe wie z.B. Wasser, Alkohole, wäßrige Salzlösung, wäßrige Dextrose, Polyole, Glycerin, pflanzliche Öle, Petroleum, tierische oder synthetische Öle verwenden. Für Suppositorien kann man Arzneimittel- trägerstoffe wie z.B. pflanzliche Öle, Petroleum, tierische oder synthetische Öle, Wachs, Fett und Polyole verwenden. Für Aerosol-Formulierungen kann man komprimierte Gase, die für diesen Zweck geeignet sind, wie z.B. Sauerstoff, Stickstoff, Edelgase und Kohlendioxid einsetzen. Die pharmazeutisch verwendbaren Mittel können auch Zusatzstoffe zur Konservierung, Stabilisierung, Emul- gatoren, Süßstoffe, Aromastoffe, Salze zur Veränderung des osmotischen Drucks, Puffer, Umhüllungszusatzstoffe und Antioxidantien enthalten.
Kombinationen mit anderen therapeutischen Mitteln können weitere Wirkstoffe beinhalten, die gewöhnlich zur Behandlung von Krebserkrankungen eingesetzt werden.
Zur Synthese von Verbindungen der Formeln (III) werden Verbindungen der Formeln (IV) , (V) und (VI) (gegebenenfalls mit gängigen Schutzgruppen versehen) als Bausteine hergestellt. Diese können anschliessend mittels Peptidkupplungen mit an sich üblichen Kupplungsreagenzien wie z. B. Hydroxybenzotriazol (HOBt) und Diisopropyl- carbodiimid (DIC) bzw. Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) verknüpft werden.
Figure imgf000019_0001
Baustein (IV) kann wiederum durch Peptidkupplung aus kommerziell erhältlichen bzw. in der Literatur beschriebenen Aminosäuren hergestellt werden.
Baustein (V) kann z. B. über eine Multikomponentenreaktion aus Verbindungen der Formeln (VII) , (VIII) und (IX) hergestellt werden.
Figure imgf000019_0002
(VII) (vill) ° (IX)
Dabei ist PG eine an sich übliche Aminschutzgruppe wie z.
B. tert-Butyloxycarbonyl (Boc) . Die dabei hergestellte
Verbindung kann mit R17COOCH2Cl oder mit H2CO und R17COOH oder mit H2CO, TMS-Cl und R17COONa in den Baustein (V) umgewandelt werden (I. Kornonen et al . Acta Chem. Scand.
Ser. B 1982, 36(7), 467-474; R. Moriera et al . Tetrahedron
Lett. 1994, 35(38), 7107-7110; R. W. A. Luke, Tetrahedron
Lett. 1996, 37(2), 263-266). Bausteine (VI) mit folgender Formel:
Figure imgf000020_0001
können stereoselektiv über eine Evans-Reaktion hergestellt werden .
Alternativ zu den klassischen Peptidkupplungen können Verbindungen der Formeln (III) auch nach folgendem Schema hergestellt werden:
Figure imgf000020_0002
Beispiele
Figure imgf000021_0001
Synthese von N-Methyl-ß-R, S-valin (1)
33.8g Isobutyraldehyd (0.47mol) werden in 200ml Ethanol gelöst. Dann werden 58.8ml (0.47mol) einer 8M Methylamin- Lösung in Ethanol langsam zugetropft unter Eiskühlung. Anschließend werden 50ml THF zugegeben und diese Mischung lh am Rückfluß erhitzt. Danach wird 48.91g (0.47mol) Malonsäure in kleinen Portionen zugegeben und weitere 5h am Rückfluß erhitzt. Nach dem Abkühlen wird der entstandene Niederschlag abfiltriert, mit THF gewaschen und im Hochvakuum getrocknet. Ausbeute: 50.34g N-Methyl-ß- R, S-valin. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 145.2; gefunden: m/z (M+H)+ = 146.1.
Synthese von N-Methyl-ß-R, S-valinol (2) Zu einer Lösung von 150ml IM Lithiumaluminiumhydrid in THF (0.15mol) werden zunächst 135ml absolutes THF und 14.5g (O.lmol) N-Methyl-ß-R, S-valin in kleinen Portionen unter Eiskühlung gegeben. Diese Mischung wird dann 4h am Rückfluß gekocht. Anschließend wird noch über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Danach wird hydrolisiert mit 4ml 12%iger KOH-Lösung und 4ml Wasser. Der entstandene Feststoff wird abfiltriert und zweimal mit je 80ml THF am Rotationsverdampfer ausgekocht. Die Filtrate werden vereint und zur Trockne einrotiert. Das erhaltene Öl wird mittels Destillation fraktioniert (Kp.: 48°C bei 0.5mbar). Ausbeute: 8.28g N-Methyl-ß-R, S-valinol . Massen- spektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 131.2; gefunden: m/z (M+H)+ = 132.2.
Synthese von N-Methyl-ß-R, S-valinolyl-tert . -butyldiphenyl- silylether (3)
2g N-Methyl-ß-R, S-valinol (15.24mmol) werden in 20ml absolutem Dichlormethan gelöst zusammen mit 465.5mg Dimethylaminopyridin (3.81mmol) und 2.66ml Triethylamin (19.05mmol). Anschließend werden 4.61ml tert . - Butyldiphenylsilylchlorid (lθmmol) zugegeben und diese Mischung über Nacht gerührt. Nun werden 20ml Wasser und 20ml Dichlormethan zugegeben und die Phasen getrennt. Die wässrige Phase wird noch zweimal mit Dichlormethan extrahiert und die vereinten organischen Extrakte über Natriumsulfat getrocknet. Das Trockenmittel wird abfiltriert und das Lösungsmittel abgezogen. Der Rückstand wird mittels Säulenchromatographie gereinigt (Eluent: Ethylacetat/Ethanol = 8:2). Ausbeute: 3.94g N-Methyl-ß- R, S-valinolyl-tert . butyldiphenylsilylether . Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 369.6; gefunden: m/z (M+H) + = 370.5.
Figure imgf000023_0001
Darstellung des Dipeptids (R) -N-Boc-HomoPro- (S, S) -Ile-OBzl (4)
Zu einer Lösung von 5g (R) -N-Boc-Homoprolin (21.81mmol) in 40ml trockenem DMF werden 7g 2- (lH-Benzotriazol-1-yl) - 1,1, 3,3-tetramethyluronium Tetrafluoroborat (TBTU) (21.81mmol) sowie 2.4ml N-Methylmorpholin (21.81mmol) gegeben. Nach 10 Minuten werden 7.21g (S, S) -H-Ile-OBzl Tosylat (18.32mmol) und 2ml N-Methylmorpholin (18.32mmol) zugesetzt. Diese Mischung wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann 40ml Essigester zugegeben. Die organische Phase wird nun mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung extrahiert. Die wässrige Phase wird noch zweimal mit Essigester extrahiert. Die vereinten organischen Extrakte werden mit gesättigter NaCl -Lösung gewaschen und über Natriumsulfat getrocknet.
Zum Schluß wird das Lösungsmittel abgezogen, wobei das
Produkt rein anfällt. Ausbeute 5.54g (R) -N-Boc-HomoPro-
(S,S) -Ile-OBzl. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 432.6; gefunden: m/z (M+H)+ = 433.6.
Boc-Abspaltung von (R) -N-Boc-HomoPro- (S,S) -Ile-OBzl (5)
(R) -N-Boc-HomoPro- (S, S) -Ile-OBzl wird in 60ml wasserfreiem THF gelöst und unter Eiskühlung 120ml 4M HCl in Dioxan zugesetzt. Man läßt die Mischung auf Raumtemperatur kommen und rührt noch weitere 5h. Das Lösungsmittel wird evaporiert und das erhaltene Rohprodukt direkt weiterverarbeitet. Ausbeute: 4.1g (R) -H-HomoPro- (S, S) -Ile- OBzl . Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 332.5; gefunden: m/z (M+H) + = 333.6.
Reduktive Aminierung von (R) -H-HomoPro- (S, S) -Ile-OBzl (6)
4.1g (R) -HomoPro- (S,S) -Ile-OBzl (12.3mmol) werden in 20ml Methanol gelöst und mit 10ml 37%iger Formalinlösung (123mmol) versetzt. Mit Essigsäure wird pH 5-6 eingestellt und 1.932g Natriumcyanoborhydrid (30.75mmol) portionsweise zugesetzt. Es wird 16h bei Raumtemperatur gerührt und dann die Reaktion mit konz . HCl angesäuert. Das Lösungsmittel wird abgezogen und Wasser zugesetzt. Mit festem NaOH wird pH 12 eingestellt und dreimal mit Dichlormethan extrahiert. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet und anschließend das Lösungsmittel abgezogen. Das resultierende Öl wird mittels Säulenchromatographie gereinigt (Eluent: Ethylacetat : n-Heptan = 1:1). Ausbeute: 3.9g (R) -N-Methyl-HomoPro- (S, S) -Ile-OBzl . Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 346.5; gefunden: m/z (M+H) + = 347.4.
Hydrierung von (R) -N-Methyl-HomoPro- (S, S) -Ile-OBzl (7)
3.9g (R) -N-Methyl-HomoPro- (S,S) -Ile-OBzl (11.26mmol) werden in 30ml Methanol gelöst und 1.2g Pd (10% auf C) zugesetzt. Die Mischung wird zunächst mit Stickstoff gespült und anschließend 10 Minuten Wasserstoff durch die Suspension geleitet. Es wird noch weitere 2h unter Wasserstoff gerührt (Wasserstoffballons) und dann der Katalysator über Celite abfiltriert, welches zweimal mit Methanol nachgewaschen wird. Nach der Evaporation des Lösungsmittels wird ein Öl erhalten, das nach Lyophilisation ein weißes Pulver ergibt. Ausbeute: 2.7g (R) -N-Methyl-HomoPro- (S, S) -Ile-OH. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 256.4; gefunden: m/z (M+H)+ = 257.4.
Figure imgf000025_0001
Kupplung von (R) -N-Methyl-HomoPro- (S,S) -Ile-OH mit N- Methyl-ß-R, S-valinolyl-tert.butyldiphenylsilylether (8)
3.522g (R) -N-Methyl-HomoPro- (S,S) -Ile-OH (13.74mmol) werden in 15ml absolutem DMF gelöst und 2.104g Hydoxybenzotriazol (13.74mmol) sowie 2.151ml Diisopropylcarbodiimid (13.74mmol) zugesetzt. Nach 15minütigem Rühren werden 4.232g N-Methyl-ß-R, S-valinolyl- tert .butyldiphenylsilylether (11.45mmol) zugegeben und die Mischung 16h bei Raumtemperatur gerührt. Der ausgefallene Diisopropylharnstoff wird abfiltriert und dann die Lösung zur Trockne einrotiert. Rückstand wird in Dichlormethan aufgenommen und restlicher Harnstoff abfiltriert. Die Dichlormethan-Lösung wird mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung ausgeschüttelt und anschließend über Natriumsulfat getrocknet. Das Trockenmittel wird abgetrennt und und das Lösungsmittel abgezogen. Der Rückstand wird mittels präparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 3.91g. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 608.0; gefunden: m/z (M+H) + = 609.0.
Abspaltung der tert.Butyldiphenylsilyl-Schutzgruppe von (8) (9) 3.91g (8) (6.43mmol) werden in 30ml Tetrahydrofuran abs. gelöst. Dann werden tropfenweise 2.223ml Tetrabutylammoniumfluorid-Lösung (IM in THF) (7.72mmol) zugegeben und 2h bei Raumtemperatur gerührt . Danach wird mit 8ml Wasser hydrolisiert und Tetrahydrofuran abrotiert. Die Lösung wird neutralisiert und fünfmal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinten organischen Extrakte werden noch zweimal mit gesättigter NaCl -Lösung ausgeschüttelt und über Natriumsulfat getrocknet. Nach dem Abtrennen des Trockenmittels wird zur Trockne einrotiert. Das Rohprodukt wird dann direkt weiterverarbeitet . Ausbeute wurde nicht bestimmt, da sich noch Diphenyltert .butylsilanol im Gemisch befindet. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 369.6; gefunden: m/z (M+H) + = 370.5.
Swern-Oxidation von (9) zu (10) 0.665ml Oxalylchlorid (7.75mmol) werden einem 250ml-Kolben unter Stickstoff in 25ml absolutem Dichlormethan gelöst und auf -70°C runtergekühlt. Dann werden langsam 1.188ml Dimethylsulfoxid (16.73mmol) in 5ml Dichlormethan zugetropft (Temperatur nicht über -60°C) und noch weitere 30 Minuten bei tiefer Temperatur gerührt. Anschließend wird eine Lösung (6ml) von (9) (6.43mmol) in Dichlormethan zugetropft (Temperatur nicht über -60 °C) . Es wird nochmals 30 Minuten gerührt und bei tiefer Temperatur 4.459ml Triethylamin (32.17mmol) zugegeben. Sobald die Mischung Raumtemperatur erreicht hat, werden 15ml Wasser zugegeben und noch weitere 10 Minuten gerührt. Die Phasen werden getrennt und die wässrige Phase noch zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird zur Trockne einrotiert. Das erhaltene Rohprodukt wurde im nächsten Schritt weiterverarbeitet, Ausbeute konnte deshalb nicht bestimmt werden. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 367.6; gefunden: m/z (M+H)+ = 368.5.
Figure imgf000028_0001
Thiazolsynthese (11)
0.695ml Methylamin-Lösung (33% in Ethanol) (7.72mmol) werden zu (10) in 20ml absolutem Methanol gegeben und lh bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend werden 991.3mg 3-Dimethylamino-2-isocyano-acrylsäuremethylester (6.43mmol) und 0.457ml Thioessigsäure (6.43mmol) zugegeben und 16h bei Raumtemperatur gerührt. Das Lösungsmittel wird dann abgezogen und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 1.294g. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 565.8; gefunden: m/z (M+H) + = 566.7.
Figure imgf000028_0002
Verseifung von (11) zu (12)
1.294g (11) (2.29mmol) werden in 20ml Tetrahydrofuran gelöst und 220mg LiOH (9.16mmol) in 20ml Wasser zugegeben. Diese Mischung wird 16h bei Raumtemperatur gerührt und dann mit 2N HCl neutralisiert. Anschließend wird das Lösungsmittel abgezogen und der Rückstand mittels praparativer HPLC von LiCl befreit (Reversed Phase-C18- Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 1.14g. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 551.8; gefunden: m/z (M+H) + = 552.7.
Figure imgf000029_0001
Figure imgf000030_0001
Kupplung von (12) mit α-Aminodiphenylmethan (13)
49.5mg (12) (0.09mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 18.6mg 6-Chlorhydroxybenzotriazol (O.llmmol) sowie 0.014ml Diisopropylcarbodiimid (O.llmmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 0.062ml α-Aminodiphenylmethan (0.36mmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 35mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 717.0; gefunden: m/z (M+H)+ = 718.1.
Kupplung von (12) mit 3, 3-Diphenylpropylamin (14) 49.5mg (12) (0.09mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 18.6mg 6-Chlorhydroxybenzotriazol (O.llmmol) sowie 0.014ml Diisopropylcarbodiimid (O.llmmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 76mg 3 , 3-Diphenylpropylamin (0.36mmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 31mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 745.0; gefunden: m/z (M+H)+ = 746.1.
Kupplung von (12) mit S-Phenylalanintert .butylester (15)
49.5mg (12) (0.09mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 18.6mg 6-Chlorhydroxybenzotriazol (O.llmmol) sowie 0.014ml Diisopropylcarbodiimid (O.llmmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 24.3mg S-Phenylalanintert .butylester (O.llmmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 26mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 755.0; gefunden: m/z (M+H) + = 756.2.
Kupplung von (12) mit S-Tyrosin-O-tert . -butylether-tert . - butylester (16)
49.5mg (12) (0.09mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 18.6mg 6-Chlorhydroxybenzotriazol (O.llmmol) sowie 0.014ml Diisopropylcarbodiimid (O.llmmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 32.3mg S-Tyrosin-O-tert . -butylether-tert . -butylester (O.llmmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 28mg. Massen- spektrometrie : Gesuchtes Molekulargewicht 827.1; gefunden: m/z (M+H)+ = 828.0.
Entschützung von (15) zu (17) 26mg (15) (0.034mmol) werden in 2ml absolutem Dichlormethan gelöst und dann 2ml Trifluoressigsäure zugegeben. Diese Mischung wird lh bei Raumtemperatur gerührt und dann unter Zusatz von n-Heptan zur Trockne einrotiert. Produkt fällt rein an.. Ausbeute: 20mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 698.9; gefunden: m/z (M+H) + = 699.5.
Entschützung von (16) zu (18)
28mg (16) (0.034mmol) werden in 2ml absolutem Dichlormethan gelöst und dann 2ml Trifluoressigsäure zugegeben. Diese Mischung wird lh bei Raumtemperatur gerührt und dann unter Zusatz von n-Heptan zur Trockne einrotiert. Produkt fällt rein an. Ausbeute: 18mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 714.9; gefunden: m/z (M+H) + = 715.6.
Kupplung von Benzyloxycarbonyl-S-phenylalaninol mit Bromessigsäure-tert. -butyl-ester (19)
1.141g Benzyloxycarbonyl-S-phenylalaninol (4mmol) werden mit 160mg Natriumhydrid-Dispersion (60%ig in Mineralöl) in 20ml absolutem THF umgesetzt. Nach beender Wasserstoffentwicklung werden 1.182ml Bromessigsäure- tert . -butylester (8mmol) zugegeben und 48h bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird zur Trockne einrotiert und das Produkt mittels praparativer HPLC gereinigt. (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser +0.5% Essigsäure). Ausbeute: 805mg.
Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 399.5; gefunden: m/z (M+H)+ = 400.3.
Abspaltung der Benzyloxycarbonyl-Schutzgruppe von (19) (20)
805mg (19) (2.02mmol) werden in 15ml Methanol unter Inertgas gelöst und 800mg Palladium auf Aktivkohle (10%) zugestzt. Kolben wird mit einem Septum verschlossen und mit zwei Wasserstoffballons verknüpft. Es wird 16h bei Raumtemperatur gerührt und danach der Katalysator über Celite abfiltriert und mehrmals mit Methanol nachgewaschen. Zum Schluß wird das Lösungsmittel abgezogen. Ausbeute: 482mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 265.4; gefunden: m/z (M+H)+ = 266.3.
Kupplung von (12) mit (20) (21) 49.5mg (12) (0.09mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 16.8mg Hydroxybenzotriazol Hydrat (O.llmmol) sowie 0.014ml Diisopropylcarbodiimid (O.llmmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 29.2mg (20) (O.llmmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt
(Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure
/ Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 22mg.
Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 799.1; gefunden: m/z (M+H)+ = 800.2. Entschützung von (21) zu (22)
22mg (21) (0.028mmol) werden in 2ml absolutem Dichlormethan gelöst und dann 2ml Trifluoressigsäure zugegeben. Diese Mischung wird lh bei Raumtemperatur gerührt und dann unter Zusatz von n-Heptan zur Trockne einrotiert. Produkt fällt rein an. Ausbeute: 16mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 757.0; gefunden: m/z (M+H)+ = 758.2.
Kupplung von (12) mit Methylamin (23)
49.5mg (12) (0.09mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 18.6mg 6-Chlorhydroxybenzotriazol (O.llmmol) sowie 0.014ml Diisopropylcarbodiimid (O.llmmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 0.22ml Methylamin-Lösung (2M in THF) (0.44mmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 14mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 564.8; gefunden: m/z (M+H)+ = 565.7.
Kupplung von (12) mit R-Phenylalanintert .butylester (24)
49.5mg (12) (0.09mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 16.8mg Hydroxybenzotriazol (O.llmmol) sowie 0.014ml Diisopropylcarbodiimid (O.llmmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 24.3mg R-Phenylalanintert .butylester (O.llmmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 23mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 755.0; gefunden: m/z (M+H)+ = 756.2.
Entschützung von (24) zu (25)
23mg (24) (0.03mmol) werden in 2ml absolutem Dichlormethan gelöst und dann 2ml Trifluoressigsäure zugegeben. Diese Mischung wird lh bei Raumtemperatur gerührt und dann unter Zusatz von n-Heptan zur Trockne einrotiert. Produkt fällt rein an. Ausbeute: 18mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 698.9; gefunden: m/z (M+H) + = 699.5.
Figure imgf000035_0001
Synthese von N-Formyl-S-valinol (26)
10g S-Valinol (97mmol) werden in 50ml Ethylformiat gelöst und lh am Rückfluß gekocht. Das Lösungsmittel wird abrotiert und der Rückstand im Vakuum destilliert (Kp.: 153°C bei 0.5mbar) . Ausbeute: 8.4g. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 131.2; gefunden: m/z (M+H) + = 132.3. Synthese von N-Methyl-S-valinol (27)
8.4g N-Formyl-S-valinol (64mmol) werden in 40 ml absolutem Tetrahydrofuran gelöst und tropfenweise zu einem Gemisch aus 5.7g Lithiumaluminiumhydrid (150mmol) in 200ml absolutem Tetrahydrofuran gegeben. Diese Mischung wird nun 16h bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend werden portionsweise 30g Natriumsulfat Decahydrat und 18ml Wasser zugesetzt und für weitere 3h bei Raumtemperatur gerührt. Der Feststoff wird nun abfiltriert und das Filtrat zur Trockne einrotiert. Der resultierende Rückstand wird im Vakuum fraktioniert (Kp.: 93°C bei 54mbar) . Ausbeute: 3.7g. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 117.2 gefunden: m/z (M+H) + = 118.1.
Synthese von N-Methyl-S-valinolyl-tert .butyldiphenylether (28)
1.64g N-Methyl-S-valinol (14mmol) werden in 10ml absolutem Dichlormethan gelöst und 427mg Dimethylaminopyridin (3.5mmol) sowie 2.44ml Triethylamin (17.5mmol) zugegeben. Anschließend werden 4.3ml tert .Butyldiphenylsilylchlorid zugesetzt und 16h bei Raumtemperatur gerührt. Dann werden jeweils 10ml Wasser und Tetrahydrofuran zur Mischung gegeben und die Phasen getrennt. Die wässrige Phase wird noch zweimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinten organischen Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet und danach die Lösung zur Trockne einrotiert. Der Rückstand wird mittels Säulenchromatographie gereinigt (Eluent: Ethylacetat/Ethanol = 8:2). Ausbeute: 3.16g. Massen-spektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 355.6 gefunden: m/z (M+H) + = 366.6.
Figure imgf000037_0001
Kupplung von (R) -N-Methyl-HomoPro- (S, S) -Ile-OH mit N- Methyl-S-valinolyl-tert.butyldiphenylsilylether (29)
1.54g (R) -N-Methyl-HomoPro- (S,S) -Ile-OH (6mmol) werden in 10ml absolutem DMF gelöst und 1.02g 6- Chlorohydroxybenzotriazol (6mmol) sowie 0.939ml Diisopropylcarbodiimid (6mmol) zugesetzt. Diese Mischung wird 15 Minuten gerührt und dann 2.56g N-Methyl-S- valinolyl-tert .butyldiphenylether (7.2mmol) zugegeben. Es wird 16h bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wird das Lösungsmittel evaporiert und der Rückstand mittels praparativer HPLC getrennt (Reversed Phase-C18 -Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 1.06g. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 593.9 gefunden: m/z (M+H) + = 594.8.
Abspaltung der tert . -Butyldiphenylsilyl-Schutzgruppe von (29) zu (30)
1.06g (29) (1.79mmol) werden in 10ml absolutem Tetrahydrofuran gelöst und 2.15ml Tetrabutylammoniumfluorid-Lösung (IM Lösung in Tetrahydrofuran) (2.15mmol) zugetropft. Es wird 16h bei Raumtemperatur gerührt und anschließend mit 3ml Wasser hydrolisiert . Tetrahydrofuran wird abrotiert und der Rückstand fünfmal mit Ethylacetat ausgeschüttelt . Die vereinten organischen Extrakte werden mit NaCl-Lösung ausgeschüttelt und dann über Natriumsulfat getrocknet. Das Trockenmittel wird abfiltriert und das Lösungsmittel evaporiert. Rohausbeute: 1.05g (enthält noch abgespaltene Silylschutzgruppe) . Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 355.5 gefunden: m/z (M+H) + = 356.5.
Swern-Oxidation von (30) zu (31)
In einem lOOml-Kolben unter Stickstoff werden 0.316ml Oxalylchlorid (1.98mmol) in 3ml wasserfreiem Dichlormethan vorgelegt und auf -70°C abgekühlt. Man tropft dann langsam eine Mischung von 0.305ml Dimethylsulfoxid (4.29mmol) in 0.6ml Dichlormethan zu (Gasentwicklung, Temperatur nicht über -60°C) und rührt dann noch 30 Minuten. Dann tropft man eine Lösung von 587mg (30) (1.65mmol) in 2ml Dichlormethan zu (Temperatur nicht über -60°C) . Es wird nochmal 30 Minuten gerührt und dann bei tiefer Temperatur 1.146ml Triethylamin (8.25mmol) zugegeben. Dann läßt man die Mischung zur Raumtemperatur kommen und tropft 10ml Wasser zu und läßt dann noch 10 Minuten rühren. Die Phasen werden dann getrennt und die wässrige Phase noch zweimal mit Dichlormethan ausgeschüttelt. Die vereinten organischen Phasen werden über Natriumsulfat getrocknet. Das Trockenmittel wird abfiltriert und die resultierende Lösung zur Trockne einrotiert. Ausbeute: 636mg Rohprodukt. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 353.5 gefunden: m/z (M+H)+ = 354.5.
Figure imgf000039_0001
Thiazolsynthese (32)
636mg (31) (l.lδmmol) werden mit 0.173ml Methylamin- Lösung (33% in Ethanol) (1.38mmol) in 3ml absolutem Methanol lh bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend werden 185mg 3-Dimethylamino-2-isocyano- acrylsäuremethylester (1.2mmol) und 0.086ml Thioessigsäure
(1.2mmol) zugegeben und 16h bei Raumtemperatur gerührt.
Das Lösungsmittel wird dann abgezogen und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18- Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 150mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 551.8; gefunden: m/z (M+H)+ = 552.7.
Figure imgf000039_0002
Verseifung von (32) zu (33)
61g (32) (O.llmmol) werden in 2ml Tetrahydrofuran gelöst und 10.6mg LiOH (0.44mmol) in 2ml Wasser zugegeben. Diese Mischung wird 16h bei Raumtemperatur gerührt und dann mit 2N HCl neutralisiert. Anschließend wird das Lösungsmittel abgezogen und der Rückstand mittels praparativer HPLC von LiCl befreit (Reversed Phase-C18 -Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 50mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekulargewicht 537.7; gefunden: m/z (M+H)+ = 538.7.
Figure imgf000040_0001
Kupplung von (33) mit α-Aminodiphenylmethan (34) 49.5mg (33) (0.093mmol) werden in 3ml absolutem DMF gelöst und 14.2mg Hydroxybenzotriazol (0.093mmol) sowie 0.012ml Diisopropylcarbodiimid (0.093mmol) zugegeben. Diese Mischung wird 15 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann 0.064ml α-Aminodiphenylmethan (0.372mmol) zugesetzt. Es wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, die Lösung dann filtriert und der Rückstand mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol +0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure). Ausbeute: 30mg. Massenspektrometrie: Gesuchtes Molekular- gewicht 703.0; gefunden: m/z (M+H) + = 704.1. Allgemeine Arbeitsvorschrift zur Synthese von Thiazolen:
1 mmol der Carbonylverbinung (IX) wird unter einer Stickstoffatmosphäre in 3 ml abs. THF gelöst und 1 mmol Bortrifluoridetherat zugegeben. Diese Mischung wird nach 10 min mit 1 mmol des Isonitrils (VIII) und 1 mmol der Thiocarbonsaure (VII) versetzt und die Mischung 72h gerührt. Zur Aufarbeitung wird Wasser zugegeben und gegebenenfalls über Celite abfiltriert. Dann wird zur Trockne einrotiert, in Ethylacetat aufgenommen und zweimal mit Wasser ausgeschüttelt. Nach dem Trocknen der organischen Phase über Natriumsulfat wird zur Trockne einrotiert. Der Rückstand wird mittels praparativer HPLC gereinigt (Reversed Phase-C18-Phase, Eluent Methanol+0.5%Essigsäure / Wasser+0.5% Essigsäure).
Verbindungen der Formel (IX) können z. B. über eine α-Aminoalkylierung aus Isobutyraldehyd, Ammoniumacetat oder einem primären Amin bzw. dessen Hydrochlorid und Malonsäure hergestellt werden: n o O R9 O
NH„Ac ►
HO ^ O OHH ,Λ H H„N Λ l OH
Die dabei entstehende ß-Aminosäure wird anschliessend gegebenenfalls N-alkyliert (z. B. durch Reduktive Aminierung) und anschliessend mit einer Schutzgruppe (z. B. t-Butyloxycarbonyl, Boc) versehen. Danach wird die Säuregruppe nach Standartvorschriften (z. B. durch Reduktion zum Alkohol mit LiAlH4 und anschliessender Swern Oxidation zum Aldehyd) in den Aldehyd überführt (siehe z. B. R. C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH Publishers, New York, 1989) . Alternativ kann die ß-Aminosäure auch über eine Arndt-Eistert-Reaktion aus Valin hergestellt werden.
Beispiel 35:
Figure imgf000042_0001
C19H30N2O6S (414.5248) MS (ESI) : 415 [M+H]
Beispiel 36:
Figure imgf000042_0002
C24H32N206S (476 . 5964 ) MS (ESI ) : 477 [M+H] Beispiel 37
Figure imgf000043_0001
C28H47N3θ8S ( 585 . 7661 ) MS ( ESI ) : 586 [M+H]
Beispiel 38:
Die Verbindung aus Beispiel 35 (0.1 mmol) wird in 2 ml Dichlormethan (DCM) und 0.1 ml Trifluoressigsäure (TFA) gelöst und 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Anschliessend wird das DCM/TFA-Gemisch im Vakuum entfernt und der Rückstand mittels HPLC gereinigt .
Figure imgf000043_0002
Ci4H22N204S (314.4064) MS (ESI) : 315 [M+H]
Beispiel 39: Die Verbindung aus Beispiel 37 (0.1 mmol) wird in 2 ml Dichlormethan (DCM) und 0.1 ml Trifluoressigsäure (TFA) gelöst und 1 h bei Raumtemperatur gerührt. Anschliessend wird das DCM/TFA-Gemisch im Vakuum entfernt und der Rückstand mittels HPLC gereinigt.
Figure imgf000044_0001
C18H3ιN304S (385.5295) MS (ESI) : 386 [M+H]
Beispiel 40
Figure imgf000044_0002
CiβHsβNzOβS (400 . 4977 ) MS (ESI ) : 401 [M+H]
Beispiel 41 :
1 mmol der Verbindung aus Beispiel 40 wird in 1 ml Methanol aufgenommen und mit 1 ml einer 4 M Ammoniak Lösung in Methanol versetzt . Nach 2h rühren bei Raumtemperatur wird das Lösungsmittel im Vakuum entfernt.
Figure imgf000045_0001
C16H26N2O5S (358.4600) MS (ESI) : 381 [M+Na]
Beispiel 42 und 43 :
Esterkupplung des Hydroxythiazols (Beispiel 41) mit
Dipeptid (7) und anschließender AcylWanderung :
2 mmol (512 mg) 3-Methyl-2- [ (l-methyl-piperidin-2- carbonyl) -amino] -pentansäure (7) werden in einem Schlenkkolben vorgelegt, evaporiert und mit Stickstoff geflutet . Die Carbonsäure wird in 5 ml trockenem Dichlormethan suspendiert und im Eisbad auf 0°C gekühlt. 2 mmol (252 mg) N, N -Diisopropylcarbodiimid (DIC) und 0,2 mmol (24 mg) DMAP werden in je 2,5 ml DCM gelöst und zugetropft. Man lässt die Mischung 5 min bei 0°C rühren. 1 mmol (372 mg) 2- [3- ( ert . -Butoxycarbonyl-methyl-amino) -1- hydroxy-4-methyl-pentyl] -thiazol-4-carbonsäuremethylester (Beispiel 41) werden in 5 ml DCM gelöst und langsam mit einer Spritze zugetropft. Man lässt die Reaktionsmischung auf RT erwärmen und weitere 4 h rühren. Die Reaktionslösung wird im Vakuum etwas eingeengt und der ausfallende Harnstoff abfiltriert. Das Filtrat wird mit 1 ml Trifluoressigsäure versetzt und 1 h bei RT gerührt, anschließend wird der Ansatz komplett einrotiert. Der Rückstand wird in 1 ml Dichlormethan aufgenommen, mit 1 ml Triethylamin versetzt und 1 h bei RT gerührt. Das Lösungsmittel wird vollständig abgezogen. Das umgelagerte Kupplungsprodukt wird mittels HPLC gereinigt.
2- (3- (tert. -Butoxycarbonyl-methyl-amino) -4-methyl-l- {3- methyl-2- [ (l-methyl-piperidin-2-carbonyl) -amino] - pentanoyloxy} -pentyl) -thiazol-4-carbonsäure-methylester (42) :
Figure imgf000046_0001
C3oH5oN407S (610,82) MS (ESI) : 611 [M+H] ; 633 [M+Na]
2- [l-Hydroxy-4 -methyl -3- (methyl- {3 -methyl- 2- [ (1-methyl- piperidin-2-carbonyl) -amino] -pentanoyl} -amino) -pentyl] • thiazol-4-carbonsäuremethylester (43) :
Figure imgf000046_0002
C25H42N405S (510,70) MS (ESI) : 511 [M+H] ; 533 [M+Na] Beispiel 44 und 45:
Umsetzung von (43) mit Phenylethylamin und anschließender Acetylierung 0,14 mmol (72 mg) 2- [l-Hydroxy-4-methyl-3- (methyl- {3- methyl-2- [ (l-methyl-piperidine-2-carbonyl) -amino] -pentan- oyl} -amino) -pentyl] -thiazol-4-carbonsäure-methylester (43) werden mit 100 μl Phenylethylamin versetzt und 12 h bei RT gerührt. Der gesamte Reaktionsansatz wird durch eine Kieselgelschicht filtriert und mit Ethylacetat nachgewaschen. Das Eluat wird komplett eingeengt und mit 40 μl Essigsäureanhydrid und 10 μl Pyridin versetzt. Man lässt die Reaktionsmischung 2 h bei RT rühren. Anschließend wird ein Drittel des Reaktionsansatzes auf der analytischen HPLC gereinigt .
l-Methyl-piperidin-2-carbonsäure- [1- ( {l- [2-hydroxy-2- (4- phenethylcarbamoyl-thiazol-2-yl) -ethyl] -2 -methyl-propyl} - methyl -carbamoyl) -2-methyl-butyl] -amid (44)
Figure imgf000047_0001
C32H549N504S (599,84) MS (ESI) : 600 [M+H] ; 622 [M+Na]
Essigsäure-4-methyl-3- (methyl- {3-methyl-2- [ (1-methyl- piperidine-2-carbonyl) -amino] -pentanoyl } -amino) -1- (4- phenethylcarbamoyl-thiazol-2-yl) -pentylester (45)
Figure imgf000048_0001
C34H5iN505S (641,88) MS (ESI) : 642 [M+H] ; 664 [M+Na]
Synthese von Baustein (VI) mit einer Evans- Synthese :
Figure imgf000048_0002
Figure imgf000048_0003
Figure imgf000049_0001
(2S) -2-Phthalimido-3-phenyl-propanol : Zu einem Gemisch aus 1,-Phenylalaninol (1.0 g, 6.61 mmol) und Na2C03 (1.05 g, 9.92 mmol) in einer 1:1 Mischung aus THF (10 mL) und H20 (10 mL) wurde W-Carbethoxyphthalimid (1.74 g, 7.94 mmol) gegeben und 4 h bei RT gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit EtOAc (20 mL) versetzt und die organische Phase abgetrennt. Die wassrige Phase wurde 2 mal mit je 15 mL EtOAc extrahiert und die vereinigten organischen Phasen mit ges. Kochsalzlösung gewaschen, über Na2S0 getrocknet und einrotiert. Das gewünschte Produkt wurde mittels Säulenchromatographie mit 2% MeOH in CH2C12 gereinigt . Ausbeute: 1.41 g (76%); MS (ESI) 282 [M+H]; H NMR (300 MHz, CDC13) : δ 7.82-7.76 (m, 2H) , 7.73-7.66 (m, 2H) , 7.24- 7.12 (m, 5H) , 4.70-4.58 (m, 1H) , 4.12-4.02 (m, 1H) , 3.98- 3.88 (m, 1H) , 3.20 (d, J = 12.5 Hz, 2H) , 2.80-2.72 (m, 1H) .
(2 S) -1-Trifluoromethanesulfonyl-2-phthalimido-3 -phenyl propanoat : Zu einer Lösung von (25") -2-Phthalimido-3- phenylpropanol (0.42g, 1.49 mmol) in trockenem CH2C12 (5 mL) wurde bei -78 °C Pyridin (146 μL, 1.79 mmol) zugegeben und 20 min gerührt. Zu dieser Mischung wurde innerhalb von 3 min Trifluoromethansulfonsäure Anhydrid (264 μL, 1.57 mmol) gegeben und 1 h bei -78°C gerührt. Die Reaktionsmischung wurde mit 3 ml gesättigter Kochsalzlösung gequenched und die organische Phase abgetrennt. Die wässrige Phase wurde nochmals mit 5 mL of CH2C12 extrahiert, die vereinten organischen Phasen mit 5 ml gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, über Na2S04 getrocknet und einrotiert. Das gewünschte Produkt wurde mittels Säulenchromatographie mit 20% EtOAc in Hexan gereinigt. Ausbeute: 0.41 g (66%). MS (ESI) 414 [M+H] ;
XH NMR (300 MHz, CDC13) : δ 7.84-7.77 (m, 2H) , 7.75-7.68 (m, 2H) , 7.28-7.14 (m, 5H) , 5.18 (t, J = 13.0 Hz, 1H) , 5.00- 4.85 (m, 1H) , 4.55-4.30 (m, 1H) , 3.40-3.25 (m, 2H) .
Evans Alkylierung: Unter Argon wurde {AR) -3-propanoyl-4- benzyl-2-oxazolidinon (0.100 g, 0.43 mmol) in 2 ml trockenem THF gelöst und auf -40°C gekühlt. LiHMDS
(1M/THF) (0.47 mL, 0.47 mmol) wurde zugegeben und 45 min gerührt. Anschliessend wurde (2S) -1-Trifluoromethan- sulfonyl-2-phthalimido-3-phenylpropanoat (0.266 g, 0.64 mmol) in trockenem THF (2 mL) zugegeben. Die Reaktionsmischung wurde 4h bei -40 °C gerührt und anschliessend durch Zugabe von 3 ml gesättigter Kochsalzlösung gequenched. Die organische Phase wurde abgetrennt und die wässrige Phase 2 mal mit je 5 ml EtOAc extrahiert. Die vereinten organischen Phasen wurden mit 3 ml gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, über Na2S04 getrocknet und einrotiert. Das gewünschte Produkt wurde mittels Säulenchromatographie mit 25% EtOAc in Hexan gereinigt. Ausbeute: 0.149 g (70%). Die Diastereomeren wurden mittels praparativer Dünnschichtchromatographie getrennt, wobei das gewünschte Produkt mit einem Überschuss von 8:2 erhalten wurde.
(2'S, 4'R, 4R, ) -3- (2 'Methyl-4,phthalimido-5' phenyl pentanoyl) -4-benzyl-l, 3-oxazolidin-2-on (Hauptprodukt) : MS (ESI): 497 [M+H]; XH NMR (300 MHz, CDCl3) : δ 7.77 (t, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.63 (t, J = 8.4 Hz, 1H) , 7.55 (t, J = 8.4 Hz, 1H) , 7.42 (d, J = 8.5 Hz, 2H) , 7.37-7.22 (m, 6H) , 7.10 (d, J= 8.6 Hz, 2H) , 5.08 (q, J = 9.6 and 16.1 Hz, 1H) , 4.56-4.42 (m, 2H) , 4.20-4.00 (m, 4H) , 3.45 (dd, J = 10.7 and 16.1 Hz, 1H) , 3.12-2.98 (m, 2H) , 2.34 (dd, J = 12.8 and 13.9 Hz, 1H) , 1.62 (d, J = 8.6 Hz, 3H) . (2'R, 4'R, 4R, ) -3- (2 'Methyl-4 ' phthalimido-5 ' phenyl pentanoyl) -4-benzyl-1, 3 -oxazolidin-2-on (Nebenprodukt) : MS (ESI): 497 [M+H]; XH NMR (300 MHz, CDCl3) : δ 8.12 (d, J = 8.6 Hz, 1H) , 7.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H) , 7.63 (t, J = 8.6 Hz, 1H) , 7.53 (t, J = 8.5 Hz, 1H) , 7.40-7.20 (m, 10H) , 5.10 (q, J = 7.5 and 15.0 Hz, 1H) , 4.94-4.84 (m, 1H) , 4.54-4.42 (m, 1H) , 4.36-4.08 (m, 4H) , 3.46-3.30 (m, 2H) , 3.12 (dd, J = 9.6 and 11.8 Hz, 1H) , 2.88 (dd, J = 9.5 and 12.8 Hz, 1H) , 1.00 (d, J = 9.6 Hz, 3H) .
Abspaltung des Oxazolidinons : Evans et. al . , J. Am. Chem. Soc. 1982, 104, 1737-1739.
Entschützung des Phthalimids: mittels Hydrazine/EtOH bei Raumtemperatur: Sasaki, T. et. al . , J. Org. Chem. 1978, 43 , 2320; Khan, M. N. et. al . , J. Org. Chem. 1995, 60, 4536.
Mit den hier beschriebenen Synthesevorschriften wurden ausserdem noch weitere Tubulysinderivate hergestellt:
Figure imgf000052_0001
Dabei wurden folgende Reste verwendet : m = 0, 1, 2, 3;
R1 = Methyl, Ethyl;
R6 = Isopropyl, Isobutyl, Ethyl, Cyclopropyl, CH2-Cyclo- propyl , CH (CH3) CH2CH3 ; R9 = Isopropyl, Trifluormethyl , Chlormethyl, Isobutyl, Ethyl, Cyclopropyl, CH2-Cyclopropyl, CH (CH3) CH2CH3, Cyclopentyl, Cyclohexyl; R17 = Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl,
CH=C(CH3), Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclohexyl; R20 = Methyl, Ethyl, Propyl, Isopropyl, Phenyl; R19 =
Figure imgf000052_0002
Figure imgf000053_0001

Claims

Patentansprüche
1. Verbindungen der allgemeinen Formel
Figure imgf000054_0001
wobei
A ein gegebenenfalls substituierter 5- oder 6- gliedriger Heteroarylenrest ist;
X ein Sauerstoffatom, ein Schwefelatom oder eine Gruppe der Formel NR13 oder CR14R15 ist;
Y ein Sauerstoffatom, ein Schwefelatom oder eine Gruppe der Formel NR16 ist und
die Reste R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R10, R11, R12, R13, R14, R15 und R16 unabhängig voneinander ein Wasserstoffatom, ein Alkyl-, Alkenyl-, Alkinyl-, Heteroalkyl-, Aryl-, Heteroaryl-, Cycloalkyl-, Alkylcycloalkyl-, Heteroalkylcycloalkyl-, Heterocycloalkyl-, Aralkyl- oder ein Heteroaralkylrest, oder zwei der Reste gemeinsam Teil eines Cycloalkyl- oder Heterocycloalkylringsystems sind, oder ein pharmakologisch akzeptables Salz, Solvat, Hydrat oder eine pharmakologisch akzeptable Formulierung derselben;
wobei Verbindungen der Formel (I) ,
Figure imgf000055_0001
worin R~ ein Wasserstoffatom, eine Alkyl-, eine Alkenyl-, eine Aryl- oder eine Heteroarylgruppe und R" ein Wasserstoffatom, eine OH- eine Alkyl-, eine Aryl- oder eine Heteroarylgruppe ist, ausgenommen sind.
2. Verbindungen nach Anspruch 1, wobei A die folgende Struktur aufweist:
Figure imgf000055_0002
3. Verbindungen nach Anspruch 1 oder 2, wobei X eine CH2-Gruppe ist.
4. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei Y ein Sauerstoffatom ist.
5. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 4, wobei R1 eine Cι-C4 Alkylgruppe ist.
6. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei R2 und R3 zusammen eine Gruppe der Formel (CH2)n mit n gleich 2, 3, 4 oder 5 sind.
7. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 6, wobei R4 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe ist.
8. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 7, wobei R5 ein Wasserstoffatom ist.
9. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 8, wobei R6 eine Cι-Cδ Alkyl-, eine C3-C6 Cycloalkyl oder eine C4-C7 Alkylcycloalkylgruppe ist.
10. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 9, wobei R7 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe ist.
11. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 10, wobei R8 eine Gruppe der Formel CH2OC0R17 ist, wobei R17 eine Cι-C6 Alkyl oder eine Cι-C6 Alkenylgruppe ist.
12. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 11, wobei R9 eine Cι-Ce Alkylgruppe ist.
13. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 12, wobei R10 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe ist.
14. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 13, wobei R11 ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe der Formel - (C=0) - (Cι-4)Alkyl ist.
15. Verbindungen nach einem der Ansprüche 1 bis 14, wobei R12 eine Gruppe der Formel NR18R19 ist, wobei R18 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe ist und R19 eine Aralkyl- oder eine Heteroaralkylgruppe ist.
16. Pharmazeutische Zusammensetzung, die eine Verbindung nach einem der Ansprüche 1 bis 15 und fakultativ Trägerstoffe und/oder Adjuvanzien enthält.
17. Verwendung einer Verbindung oder einer pharmazeutischen Zusammensetzung nach einem der
Ansprüche 1 bis 16 zur Behandlung von Tumorerkrankungen, immunologisch bedingten Krankheiten, Autoimmunkrankheiten, entzündlichen Erkrankungen und rheumatoider Arthritis sowie zur Oberflächen- modifikation von Kunststoff- und Metallimplantaten.
18. Verwendung einer Verbindung oder einer pharmazeutischen Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 16 zur Behandlung von Krebs- erkrankungen .
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Cited By (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2008112873A2 (en) * 2007-03-14 2008-09-18 Endocyte, Inc. Binding ligand linked drug delivery conjugates of tubulysins
WO2008138561A1 (en) * 2007-05-10 2008-11-20 R & D Biopharmaceuticals Gmbh Tubulysine derivatives
EP2028185A1 (de) * 2002-11-21 2009-02-25 Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung GmbH Tubulysine und Tubulysin-Mittel
US7968586B2 (en) 2005-11-10 2011-06-28 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates
EP2354163A2 (de) 2005-09-26 2011-08-10 Medarex, Inc. Konjugate von Duocarmycin und Anti-CD70 oder Anti-PSMA Antikörpern
EP2409983A1 (de) 2010-07-19 2012-01-25 Leibniz-Institut für Pflanzenbiochemie (IPB) Tubulysinanaloga
US8399403B2 (en) 2004-05-19 2013-03-19 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
EP2708243A1 (de) 2012-09-17 2014-03-19 OntoChem GmbH Rezeptor-Ligand-verbundene zytotoxische Moleküle
US9090563B2 (en) 2004-07-23 2015-07-28 Endocyte, Inc. Bivalent linkers and conjugates thereof
WO2015127685A1 (en) 2014-02-28 2015-09-03 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Charged linkers and their uses for conjugation
US9138484B2 (en) 2007-06-25 2015-09-22 Endocyte, Inc. Conjugates containing hydrophilic spacer linkers
WO2015151081A2 (en) 2015-07-12 2015-10-08 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd Bridge linkers for conjugation of a cell-binding molecule
WO2015157592A1 (en) 2014-04-11 2015-10-15 Medimmune, Llc Bispecific her2 antibodies
US9187521B2 (en) 2007-10-25 2015-11-17 Endocyte, Inc. Tubulysins and processes for preparing
WO2016138288A1 (en) 2015-02-25 2016-09-01 William Marsh Rice University Desacetoxytubulysin h and analogs thereof
US9505747B2 (en) 2012-03-29 2016-11-29 Endocyte, Inc. Processes for preparing tubulysin derivatives and conjugates thereof
US9662402B2 (en) 2012-10-16 2017-05-30 Endocyte, Inc. Drug delivery conjugates containing unnatural amino acids and methods for using
EP3210627A1 (de) 2012-07-12 2017-08-30 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Konjugate aus zellbindungsmolekülen mit zytotoxika
US9877965B2 (en) 2007-06-25 2018-01-30 Endocyte, Inc. Vitamin receptor drug delivery conjugates for treating inflammation
US10080805B2 (en) 2012-02-24 2018-09-25 Purdue Research Foundation Cholecystokinin B receptor targeting for imaging and therapy
US10131682B2 (en) 2012-11-24 2018-11-20 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Hydrophilic linkers and their uses for conjugation of drugs to a cell binding molecules
WO2019025983A1 (en) 2017-08-01 2019-02-07 Medimmune, Llc CONJUGATED MONOCLONAL ANTIBODY-MEDICINE DIRECTED AGAINST BCMA
US10232051B2 (en) 2015-07-15 2019-03-19 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
EP3719039A1 (de) 2015-11-10 2020-10-07 Medimmune, LLC Für asct2 spezifische bindemoleküle und verwendungen davon
WO2021000067A1 (zh) 2019-06-29 2021-01-07 杭州多禧生物科技有限公司 一种细胞结合分子-Tubulysin衍生物偶联物及其制备方法
WO2021013999A1 (en) 2019-07-24 2021-01-28 Ontochem Gmbh Receptor-targeting peptide-drug conjugates
EP3888691A1 (de) 2016-11-14 2021-10-06 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Konjugationslinker, zellbindende molekül-wirkstoffkonjugate mit den linkern, verfahren zur herstellung und verwendung solcher konjugate mit den linkern
US11229708B2 (en) 2015-12-04 2022-01-25 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
US11274124B2 (en) 2017-11-29 2022-03-15 William Marsh Rice University Tubulysin analogues as anticancer agents and payloads for antibody-drug conjugates and methods of treatment therewith
WO2022053650A1 (en) 2020-09-11 2022-03-17 Medimmune Limited Therapeutic b7-h4 binding molecules
WO2023105248A1 (en) 2021-12-11 2023-06-15 Cancer Research Technology Limited Immunotherapy for cancer
WO2023169896A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Astrazeneca Ab BINDING MOLECULES AGAINST FRα
US11793880B2 (en) 2015-12-04 2023-10-24 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7875612B2 (en) 2001-04-24 2011-01-25 Purdue Research Foundation Folate mimetics and folate-receptor binding conjugates thereof
US7129261B2 (en) 2001-05-31 2006-10-31 Medarex, Inc. Cytotoxic agents
ATE426414T1 (de) * 2002-05-15 2009-04-15 Endocyte Inc Vitamin-mitomycin-konjugate
TWI367096B (en) 2003-01-27 2012-07-01 Endocyte Inc Vitamin-receptor binding drug delivery conjugates and pharmaceutical compositions
CN101175757B (zh) * 2005-03-16 2012-11-14 恩多塞特公司 蝶酸及其缀合物的合成和纯化
US7714016B2 (en) 2005-04-08 2010-05-11 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates with cleavable substrates
KR20130113543A (ko) 2005-08-19 2013-10-15 엔도사이트, 인코포레이티드 복수-약제 리간드 공액체
US20080280937A1 (en) * 2005-08-19 2008-11-13 Christopher Paul Leamon Ligand Conjugates of Vinca Alkaloids, Analogs, and Derivatives
ES2375843T3 (es) 2005-10-26 2012-03-06 Medarex, Inc. Procedimientos y compuestos para la preparación de an�?logos de cc-1065.
TWI412367B (zh) 2006-12-28 2013-10-21 Medarex Llc 化學鏈接劑與可裂解基質以及其之綴合物
WO2008101231A2 (en) * 2007-02-16 2008-08-21 Endocyte, Inc. Methods and compositions for treating and diagnosing kidney disease
WO2008103693A2 (en) * 2007-02-21 2008-08-28 Medarex, Inc. Chemical linkers with single amino acids and conjugates thereof
WO2008106080A2 (en) * 2007-02-27 2008-09-04 University Of Pittsburgh - Of The Commonwealth System Of Higher Education Synthesis of desacetoxytubulysin h and analogs thereof
US8476451B2 (en) * 2007-07-20 2013-07-02 The Regents Of The University Of California Tubulysin D analogues
IT1394860B1 (it) * 2009-07-22 2012-07-20 Kemotech S R L Composti farmaceutici
US8394922B2 (en) 2009-08-03 2013-03-12 Medarex, Inc. Antiproliferative compounds, conjugates thereof, methods therefor, and uses thereof
ES2581207T3 (es) * 2009-11-12 2016-09-02 Tube Pharmaceuticals Gmbh Inhibidores de la tubulina
MX2013001402A (es) 2010-08-06 2013-08-29 Endocyte Inc Proceso para preparar tubulisinas.
ES2622578T3 (es) 2011-06-10 2017-07-06 Mersana Therapeutics, Inc. Conjugados de proteína-polímero-fármaco
US9981046B2 (en) 2012-05-15 2018-05-29 Concortis Biosystems, Corp., a wholly owned Subsidiary of Sorrento Therapeutics, Inc. Drug-conjugates, conjugation methods, and uses thereof
BR112015011118B1 (pt) 2012-11-15 2022-12-13 Endocyte, Inc Conjugado; composição farmacêutica; e uso de um conjugado
JP6334553B2 (ja) 2012-12-10 2018-05-30 メルサナ セラピューティクス，インコーポレイティド タンパク質−高分子−薬剤コンジュゲート
US9872918B2 (en) 2012-12-12 2018-01-23 Mersana Therapeutics, Inc. Hydroxyl-polymer-drug-protein conjugates
RS56169B1 (sr) 2013-02-14 2017-11-30 Bristol Myers Squibb Co Jedinjenja tubulisina, metode pripreme i primena
US20140249315A1 (en) 2013-03-01 2014-09-04 Endocyte, Inc. Processes for preparing tubulysins
CN103333133B (zh) * 2013-06-13 2016-06-08 西北师范大学 一种Tubulysin家族化合物关键中间体TUV的合成方法
US10077287B2 (en) 2014-11-10 2018-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Tubulysin analogs and methods of making and use
US10106560B2 (en) 2016-06-16 2018-10-23 Bristol-Myers Squibb Company Process and intermediates for making tubulysin analogs

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998013375A1 (de) 1996-09-23 1998-04-02 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Verbindungen mit antimykotischer und cytostatischer wirkung, herstellungsverfahren, mittel und dsm 11 092
DE10008089A1 (de) 2000-02-22 2001-10-31 Biotechnolog Forschung Gmbh Syntheseverfahren zur Herstellung von Tubulysinen

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE10254439A1 (de) * 2002-11-21 2004-06-03 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Tubulysine, Herstellungsverfahren und Tubulysin-Mittel

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1998013375A1 (de) 1996-09-23 1998-04-02 GESELLSCHAFT FüR BIOTECHNOLOGISCHE FORSCHUNG MBH (GBF) Verbindungen mit antimykotischer und cytostatischer wirkung, herstellungsverfahren, mittel und dsm 11 092
DE10008089A1 (de) 2000-02-22 2001-10-31 Biotechnolog Forschung Gmbh Syntheseverfahren zur Herstellung von Tubulysinen

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
EVANS, J. AM. CHEM. SOC., vol. 104, 1982, pages 1737 - 1739
F. SASSE ET AL., J. ANTIBIOT., vol. 53, 2000, pages 879 - 885
KHAN, M. N., J. ORG. CHEM., vol. 60, 1995, pages 4536
SASAKI, T., J. ORG. CHEM., vol. 43, 1978, pages 2320

Cited By (59)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2028185A1 (de) * 2002-11-21 2009-02-25 Helmholtz-Zentrum für Infektionsforschung GmbH Tubulysine und Tubulysin-Mittel
US8399403B2 (en) 2004-05-19 2013-03-19 Medarex, Inc. Chemical linkers and conjugates thereof
US9550734B2 (en) 2004-07-23 2017-01-24 Endocyte, Inc. Bivalent linkers and conjugates thereof
US10647676B2 (en) 2004-07-23 2020-05-12 Endocyte, Inc. Bivalent linkers and conjugates thereof
US9090563B2 (en) 2004-07-23 2015-07-28 Endocyte, Inc. Bivalent linkers and conjugates thereof
EP2354163A2 (de) 2005-09-26 2011-08-10 Medarex, Inc. Konjugate von Duocarmycin und Anti-CD70 oder Anti-PSMA Antikörpern
US7968586B2 (en) 2005-11-10 2011-06-28 Medarex, Inc. Cytotoxic compounds and conjugates
WO2008112873A2 (en) * 2007-03-14 2008-09-18 Endocyte, Inc. Binding ligand linked drug delivery conjugates of tubulysins
WO2008112873A3 (en) * 2007-03-14 2009-09-11 Endocyte, Inc. Binding ligand linked drug delivery conjugates of tubulysins
US9555139B2 (en) 2007-03-14 2017-01-31 Endocyte, Inc. Binding ligand linked drug delivery conjugates of tubulysins
EP2481427A1 (de) * 2007-03-14 2012-08-01 Endocyte, Inc. Folat-Tubulysin Konjugate
EP2489372A3 (de) * 2007-03-14 2013-01-02 Endocyte, Inc. Bindende ligand-verbundene Wirkstofffreisetzungskonjugate aus Tubulysinen
US8980833B2 (en) 2007-05-10 2015-03-17 R&D-Biopharmaceuticals Gmbh Tubulysine derivatives
EP2532673A3 (de) * 2007-05-10 2014-01-08 R & D Biopharmaceuticals Gmbh Tubulysinderivate
US20120129779A1 (en) * 2007-05-10 2012-05-24 R&D-Biopharmaceuticals Gmbh Tubulysine derivatives
WO2008138561A1 (en) * 2007-05-10 2008-11-20 R & D Biopharmaceuticals Gmbh Tubulysine derivatives
US10500204B2 (en) 2007-06-25 2019-12-10 Endocyte, Inc. Vitamin receptor drug delivery conjugates for treating inflammation
US9138484B2 (en) 2007-06-25 2015-09-22 Endocyte, Inc. Conjugates containing hydrophilic spacer linkers
US10738086B2 (en) 2007-06-25 2020-08-11 Endocyte Inc. Conjugates containing hydrophilic spacer linkers
US9877965B2 (en) 2007-06-25 2018-01-30 Endocyte, Inc. Vitamin receptor drug delivery conjugates for treating inflammation
US9745341B2 (en) 2007-10-25 2017-08-29 Endocyte, Inc. Tubulysins and processes for preparing
US9187521B2 (en) 2007-10-25 2015-11-17 Endocyte, Inc. Tubulysins and processes for preparing
WO2012010287A1 (en) 2010-07-19 2012-01-26 Leibniz-Institut Für Pflanzenbiochemie Tubulysin analogues
US9371358B2 (en) 2010-07-19 2016-06-21 Leibniz-Institut fur Pflanzenbiochemie Tubulysin analogues
EP2409983A1 (de) 2010-07-19 2012-01-25 Leibniz-Institut für Pflanzenbiochemie (IPB) Tubulysinanaloga
US10765756B2 (en) 2012-02-24 2020-09-08 Purdue Research Foundation Cholecystokinin B receptor targeting for imaging and therapy
US10080805B2 (en) 2012-02-24 2018-09-25 Purdue Research Foundation Cholecystokinin B receptor targeting for imaging and therapy
US11344623B2 (en) 2012-02-24 2022-05-31 Purdue Research Foundation Cholecystokinin B receptor targeting for imaging and therapy
US9505747B2 (en) 2012-03-29 2016-11-29 Endocyte, Inc. Processes for preparing tubulysin derivatives and conjugates thereof
EP3210627A1 (de) 2012-07-12 2017-08-30 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Konjugate aus zellbindungsmolekülen mit zytotoxika
EP3348280A1 (de) 2012-07-12 2018-07-18 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Konjugate aus zellbindenden molekülen mit zytotoxika
EP2708243A1 (de) 2012-09-17 2014-03-19 OntoChem GmbH Rezeptor-Ligand-verbundene zytotoxische Moleküle
US9662402B2 (en) 2012-10-16 2017-05-30 Endocyte, Inc. Drug delivery conjugates containing unnatural amino acids and methods for using
US10131682B2 (en) 2012-11-24 2018-11-20 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Hydrophilic linkers and their uses for conjugation of drugs to a cell binding molecules
US10464955B2 (en) 2014-02-28 2019-11-05 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Charged linkers and their uses for conjugation
WO2015127685A1 (en) 2014-02-28 2015-09-03 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd Charged linkers and their uses for conjugation
US10683314B2 (en) 2014-02-28 2020-06-16 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Charged linkers and their uses for conjugation
US10696699B2 (en) 2014-02-28 2020-06-30 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Charged linkers and their uses for conjugation
US10696700B2 (en) 2014-02-28 2020-06-30 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Charged linkers and their uses for conjugation
US10160812B2 (en) 2014-04-11 2018-12-25 Medimmune, Llc Bispecific HER2 antibodies
WO2015157592A1 (en) 2014-04-11 2015-10-15 Medimmune, Llc Bispecific her2 antibodies
US10808007B2 (en) 2015-02-25 2020-10-20 William Marsh Rice University Desacetoxytubulysin H and analogs thereof
CN107529754A (zh) * 2015-02-25 2018-01-02 威廉马歇莱思大学 去乙酰氧基微管溶素h及其类似物
WO2016138288A1 (en) 2015-02-25 2016-09-01 William Marsh Rice University Desacetoxytubulysin h and analogs thereof
WO2015151081A2 (en) 2015-07-12 2015-10-08 Suzhou M-Conj Biotech Co., Ltd Bridge linkers for conjugation of a cell-binding molecule
US10293055B2 (en) 2015-07-15 2019-05-21 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
US10232051B2 (en) 2015-07-15 2019-03-19 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
US10328157B2 (en) 2015-07-15 2019-06-25 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Acetylenedicarboxyl linkers and their uses in specific conjugation of a cell-binding molecule
EP3719039A1 (de) 2015-11-10 2020-10-07 Medimmune, LLC Für asct2 spezifische bindemoleküle und verwendungen davon
US11229708B2 (en) 2015-12-04 2022-01-25 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
US11793880B2 (en) 2015-12-04 2023-10-24 Seagen Inc. Conjugates of quaternized tubulysin compounds
EP3888691A1 (de) 2016-11-14 2021-10-06 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Konjugationslinker, zellbindende molekül-wirkstoffkonjugate mit den linkern, verfahren zur herstellung und verwendung solcher konjugate mit den linkern
WO2019025983A1 (en) 2017-08-01 2019-02-07 Medimmune, Llc CONJUGATED MONOCLONAL ANTIBODY-MEDICINE DIRECTED AGAINST BCMA
US11274124B2 (en) 2017-11-29 2022-03-15 William Marsh Rice University Tubulysin analogues as anticancer agents and payloads for antibody-drug conjugates and methods of treatment therewith
WO2021000067A1 (zh) 2019-06-29 2021-01-07 杭州多禧生物科技有限公司 一种细胞结合分子-Tubulysin衍生物偶联物及其制备方法
WO2021013999A1 (en) 2019-07-24 2021-01-28 Ontochem Gmbh Receptor-targeting peptide-drug conjugates
WO2022053650A1 (en) 2020-09-11 2022-03-17 Medimmune Limited Therapeutic b7-h4 binding molecules
WO2023105248A1 (en) 2021-12-11 2023-06-15 Cancer Research Technology Limited Immunotherapy for cancer
WO2023169896A1 (en) 2022-03-09 2023-09-14 Astrazeneca Ab BINDING MOLECULES AGAINST FRα

Also Published As

Publication number Publication date
DK1523493T3 (da) 2013-12-02
US20050239713A1 (en) 2005-10-27
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US7816377B2 (en) 2010-10-19

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