WO1999044630A1

WO1999044630A1 - Preparations exemptes de proteines

Info

Publication number: WO1999044630A1
Application number: PCT/JP1999/001080
Authority: WO
Inventors: Shuji Sumida; Yasushi Sato
Original assignee: Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha
Priority date: 1998-03-06
Filing date: 1999-03-05
Publication date: 1999-09-10
Also published as: EP1060746A4; EP1060746A1; CN1264569C; US6776983B1; CN1292705A; EP1952820A2; JP3895109B2; EP1952820A3; KR20010041576A; HK1036224A1; KR100389726B1; AU749815B2; AU3275199A; TW589188B

Description

明細書

蛋白非添加製剤技術分野

本発明は顆粒球コロニー刺激因子含有製剤に関し、特に容器壁上への吸着又は会合、重合、酸化等による活性成分の損失、不活性化を防止し、安定化させた顆粒球コロニー刺激因子含有製剤に関する。

背景技術

顆粒球コロニー刺激因子（以下において、 G— C S Fということもある）は、好中球の前駆細胞に作用し、その増殖ならびに分化成熟を促進する分子量約 2万の糖タンパク質である。

本出願人によって、口腔底癌患者の腫瘍細胞から採取した細胞株を培養することにより高純度のヒト G— CSFが精製されて以来、これを契機に、ヒト G— C S F遺伝子のクローニングに成功し、現在では遺伝子工学的方法によって動物細胞で組換えヒト G— CSFを大量に生産することが可能になった。また、本願出願人はこの精製した G— CS Fの製剤化に成功し、これを感染防御剤として市場に製品を供給している（特許第 2 1 1 65 1 5号）。

G— C S Fは極めて微量で使用され、通常成人一人当たり、 0. 1〜1 000 a g (好ましくは 5〜500 g) の G— CS Fを含有する製剤を 1〜7回/週の割合で投与する。しかしながら、この G— C S Fは例えば注射用アンプル、注射器等の器壁に対し吸着性を示す。また、 G— CSFは不安定で、外的因子の影響を受けやすく、温度、湿度、酸素、紫外線等に起因して会合、重合あるいは酸化等の物理的、化学的変化を生じ、結果として大きな活性の低下を招く。

そこで安定な G_CS F製剤を市場に供給するために種々の処方設計がなされている。例えば、酢酸、乳酸、クェン酸、マレイン酸、リン酸及びその塩又はァルギニン及びその塩から選ばれる緩衝剤を含む製剤（特表平 8— 5056 10 号）等が提案されている。また、安定化剤として G— CS F 1重量部に対して 1 重量部〜 1 0, 000重量部の界面活性剤を含む G— C S F製剤がある（特開昭 63— 146826号）。この公開公報には、 G— C S F含有溶液製剤において、 G— CS Fの損失を防止し、安定化を達成するためには界面活性剤の添加量、特にその下限が臨界的であることが記載されている。

本発明の目的は、製造工程の煩雑さを少なくし、かつ長期の保存にもより安定な G— CS Fの製剤を提供することである。発明の開示

上記目的を達成するために鋭意研究した結果、本発明者らは安定化剤として極めて少量の界面活性剤を添加した場合であっても、安定な G - CS F溶液製剤となしうることを見いだし本発明を完成した。

すなわち、本発明は、顆粒球コロニー刺激因子と、顆粒球コロニー刺激因子 1 重量部に対して 0. 000 1〜1重量部の少なくとも 1種の製薬上許容される界面活性剤を含み、 PH 7以下である、安定な顆粒球コロニー刺激因子含有製剤を提供する。

本明細書中で安定化とは、 G— CS F含有溶液製剤を 25 °Cの保存条件下で 6 ヶ月保存した後の G— CSF残存率が 9 5 %以上、あるいは 40での保存条件下で 2週間保存した後の G— C S F残存率が 75 %以上保たれることを意味する。図面の簡単な説明

図 1は、 40で一 2週間加速試験を行った後の、 pHと G— C S F残存率の関係を示すグラフである。

図 2は、 40 一 2週間加速試験を行った後の、 1と0—じ3 ?糖鎖分解体生成比との関係を示すグラフである。

図 3は、充填後 24時間経過後の、 G-CSF 1重量部に対するポリソルべ一ト 20の重量部と吸着抑制率との関係を示すグラフである。発明を実施するための最良の形態

本発明の溶液製剤に使用する G— C S Fは高純度に精製されたヒト G— C S F であれば全て使用できる。具体的には、哺乳動物、特にヒトの G— C S Fと実質的に同じ生物学的活性を有するものであり、天然由来のもの、および遺伝子組換え法によって得られたものを含む。遺伝子組換え法によって得られる G— C S F には天然の G— C S Fとアミノ酸配列が同じであるもの、あるいは該アミノ酸配列の 1または複数を欠失、置換、付加したもので前記生物学的活性を有するものを含む。本発明における G— C S Fは、いかなる方法で製造されたものでもよく、ヒト腫瘍細胞の細胞株を培養し、これから種々の方法で抽出し分離精製したもの、あるいは遺伝子工学的手法により大腸菌、ィ一スト菌、チャイニーズハムスター卵巣（C H O) 細胞、 C 1 2 7細胞などに産生せしめ、種々の方法で抽出し分離精製したものが用いられる。最も好ましくは C H O細胞によって遺伝子組換え法を用いて生産されたものである。

本発明の安定な G— C S F含有製剤を得るのに使用する界面活性剤としては、非イオン界面活性剤、例えばソルビ夕ンモノカプリレート、ソルビ夕ンモノラウレート、ソルビタンモノパルミテート等のソルビタン脂肪酸エステル；グリセリンモノカプリレート、グリセリンモノミリテート、グリセリンモノステアレート等のグリセリン脂肪酸エステル；デカグリセリルモノステアレート、デカグリセリルジステアレート、デカグリセリルモノリノレート等のポリグリセリン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンソルビ夕ンモノラウレー卜、ポリオキシエチレンソルビ夕ンモノォレエート、ポリオキシエチレンソルビ夕ンモノステアレート、ントリオレエ一ト、ポリオキシエチレンソルビタントリステアレート等のポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル；ポリオキシエチレンソルビットテトラステアレート、ポリオキシエチレンソルビットテトラオレェ一ト等のポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル；ポリオキシエチレングリセリルモノステアレート等のポリオキシエチレングリセリン脂肪酸エステル；ポリエチレングリコールジステアレート等のポリエチレングリコール脂肪酸エステル；ポリオキシェチレンラウリルエーテル等のポリオキシエチレンアルキルエーテル；ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンダリコールェ一テル、ポリオキシエチレンポリオキシプロピレンプロピルエーテル、ポリォキシェチレンポリォキシプロピレンセチルエーテル等のポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル；ポリォキシェチェレンノニルフエニルエーテル等のポリオキシエチレンアルキルフエ二ルェ一テル；ポリオキシエチレンヒマシ油、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油（ポリオキシエチレン水素ヒマシ油）等のポリオキシエチレン硬化ヒマシ油；ポリオキシエチレンソルビットミッロウ等のボリォキシエチレンミツロウ誘導体；ポリオキシエチレンラノリン等のポリオキシエチレンラノリン誘導体；ポリォキシエチレンステァリン酸アミド等のポリオキシエチレン脂肪酸アミド等の H LB 6〜1 8を有するもの；陰イオン界面活性剤、例えばセチル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、ォレイル硫酸ナトリウム等の炭素原子数 1 0〜1 8のアルキル基を有するアルキル硫酸塩；ポリオキシエチレンラウリル硫酸ナトリウム等の、エチレンォキシドの平均付加モル数が 2〜 4でアルキル基の炭素原子数が 1 0〜 1 8であるポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩；ラウリルスルホコハク酸エステルナトリウム等の、アルキル基の炭素原子数が 8〜 1 8のアルキルスルホコハク酸エステル塩；天然系の界面活性剤、例えばレシチン、グリセロリン脂質；スフィンゴミエリン等のフィンゴリン脂質；炭素原子数 12〜 1 8 の脂肪酸のショ糖脂肪酸エステル等を典型的例として挙げることができる。本発明の溶液製剤には、これらの界面活性剤の 1種または 2種以上を組み合わせて添加することができる。

好ましい界面活性剤はポリオキシエチレンソルビ夕ン脂肪酸エステルであり、特に好ましいのはポリソルべ一ト 20、 2 1、 40、 60、 6 5、 80、 8 1、 8 5であり、最も好ましいのはポリソルベート 20及び 80である。

本発明の G— C S F含有製剤に添加する界面活性剤の添加量は、一般には G— CS F 1重量部に対して 0. 000 1〜1重量部であり、好ましくは G— CS F 1重量部に対して 0. 0 1〜1重量部であり、さらに好ましくは G— CS F 1重量部に対して 0. 2〜1重量部であり、さらに好ましくは G— CS F 1重量部に対して 0. 2〜0. 8重量部であり、最も好ましいのは、 G— CS F 1重量部に対して 4重量部〜 0. 8重量部である。特に、製剤量 lmL当たりの G— C S F含有量が 1 25 gあるいは 250 ^ gの場合、界面活性剤の添加量は 1 0 0 1 gが好ましい。従って、 G— C S F 1重量部当たり、 0. 4重量部又は 0. 8重量部の界面活性剤の添加量が特に好ましい。アルブミン等の夕ンパク質を安定化剤として添加しない場合には、界面活性剤の添加量が G— C S F 1重量部に対して 1重量部を越えると、長期保存後の G - C S F残存率が低下する傾向が見られた。また、界面活性剤の添加量が G— C S F 1重量部に対して 1重量部以下の場合であっても、 G— C S Fの容器への吸着を十分に抑制することができる。本発明の好ましい G— C S F含有製剤には安定化剤として実質的にタンパク質を含まない。現在市場に供給されている製品には、 G— C S Fの化学的、物理的変化を抑制するために安定化剤としてヒト血清アルブミンあるいは精製ゼラチンなどのタンパク質が添加されているものがある。しかしながら、タンパク質を安定化剤として添加することに関しては、ウィルスのコンタミを除去するために非常に煩雑な工程を必要とすることになるなどの問題がある。

本発明の G— C S F含有製剤の p Hは 7以下であり、好ましくは p Hが 5〜 7 であり、さらに好ましくは p Hが 6〜6 . 8であり、最も好ましくは p Hが 6 . 2〜6 . 8である。後述するように、 4 0 一 2週間加速試験を行った後の G— C S F残存率は p Hが 7以下で安定である。この観点からは p Hが約 7 . 0以下であることが好ましい。また、 4 0 _ 2週間加速試験後に G— C S Fの糖鎖分解体の生成比を測定したところ、 P Hが 4以下になると糖鎖分解体の含量が急速に増加することが観察された。従って、この観点からは p Hが約 5以上であることが好ましい。さらに、注射剤として投与するには人体への刺激が少ない中性に近い方が好ましく、これらを総合すると、 p Hを 6 . 2〜6 . 8とすることが最も好ましい。

本発明の G— C S F含有製剤には、希釈剤、溶解補助剤、等張化剤、賦形剤、 P H調整剤、無痛化剤、緩衝剤、含硫還元剤、酸化防止剤等を含有してもよい。例えば、等張化剤としては、ポリエチレングリコール；デキストラン、マンニト —ル、ソルビトール、イノシトール、グルコース、フラクトース、ラクトース、キシ口一ス、マンノース、マルトース、シユークロ一ス、ラフイノースなどの糖類を用いることができる。含硫還元剤としては、 N—ァセチルシスティン、 N— ァセチルホモシスティン、チォクト酸、チォジグリコール、チォエタノールアミン、チォグリセロール、チォソルビトール、チォグリコール酸及びその塩、チォ硫酸ナトリウム、グル夕チオン、並びに炭素原子数 1〜7のチオアルカン酸等のスルフヒドリル基を有するもの等が挙げられる。また、酸化防止剤としては、ェリソルビン酸、ジブチルヒドロキシトルエン、プチルヒドロキシァニソール、 α —トコフエロール、酢酸トコフエロール、 L—ァスコルビン酸及びその塩、 L— ァスコルビン酸パルミテート、 L—ァスコルビン酸ステアレート、亜硫酸水素ナトリウム、亜硫酸ナトリウム、没食子酸トリアミル、没食子酸プロピルあるいはエチレンジァミン四酢酸ニナトリウム（E D T A) 、ピロリン酸ナトリウム、メ夕リン酸ナトリウム等のキレート剤が挙げられる。賦形剤としてグリシン、システィン、スレオニン、シスチン、トリプトファン、メチォニン、リジン、ヒドロキシリジン、ヒスチジン、アルギニン等のアミノ酸を添加してもよい。さらには、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、リン酸ナトリウム、リン酸力リウム、炭酸水素ナトリウムなどの無機塩；クェン酸ナトリウム、クェン酸カリゥム、酢酸ナ卜リゥムなどの有機塩などの溶液製剤に通常添加される成分を含んでいてよい。

本発明の溶液製剤中に含まれる G— C S Fの量は、治療すべき疾患の種類、疾患の重症度、患者の年齢などに応じて決定できるが、一般には 1〜 1 0 0 0 /X g m L , 好ましくは 1 0〜8 0 0 z g Zm L、さらに好ましくは 5 0〜 5 0 0 g Zm Lである。

本発明の溶液製剤はこれらの成分をリン酸及び Z又はクェン酸緩衝液などの溶液製剤の分野で公知の水性緩衝液に溶解することによって調製できる。リン酸緩衝液は、リン酸一水素ナトリウム一リン酸二水素ナトリウム系が好ましく、クェン酸緩衝液としてはクェン酸ナトリゥムの緩衝液が好ましい。

本発明の安定化された G— C S F含有製剤は通常非経口投与経路で、例えば注射剤（皮下注、静注又は筋注）、経皮、経粘膜、経鼻、経肺などで投与されるが、経口投与も可能である。

本発明の G— C S F含有製剤は、通常密封、滅菌されたプラスチックまたはガラス容器中に収納されている。容器はアンプル、バイアルまたはデイスポーザブル注射器のような規定用量の形状で供給することができ、あるいは注射用バックまたは瓶のような大用量の形状で供給することもできる。好ましくは、バイアル、注射器用ァンプル又はプレフィルドシリンジに充填された形態の G— C S F含有製剤として供給する。

本発明の G— C S F含有製剤は後述の実施例に示すように、 40で一 2週間の加速試験あるいは 2 5°C— 6ヶ月間の保存を行った後にも、極めて良好な G— C S F残存率を示す。また、 G— C S Fは糖鎖末端に 1ないし 2個のシアル酸をもつが、長期保存中にシアル酸が分解された分解体を生じることがある。本発明の G— CS F含有製剤は、 40で— 2週間の加速試験を行った後にも、分解体の生成比を低く保つことが示された。さらに、本発明の G— C S F含有製剤は容器への吸着を十分に抑制することができ、またバイアル充填製剤、シリンジ充填製剤等の容器の形状にかかわらず、 40 一 2週間の加速試験後、及び 25で一 6ケ月の保存後に極めて良好な G— CS F残存率を示す。

本発明を以下の実施例によってさらに詳しく説明するが、本発明の範囲はこれに限定されない。実施例

試験方法

2 50mgの G— CS F、 0. 1 gのポリソルべ一ト 20、 30 gの D—マン二トールを抨量し、リン酸ナトリウム緩衝液にて、下記の第 1表に示す各種 PH となるように調整した後、全量を 1 とした。

【表 1】

各調剤液は無菌的に調製を行い、濾過を行った後、無菌的にバイアルに lmL ずつ充填、密封し、 G— CSF溶液製剤を製造した。

このようにして無菌的に調製した G— C S F 250 gZmL含有製剤を、 4 0 の恒温槽内に 2週間静置した。

バイアル中の G— CSF含有量を下記の方法 1に基づき測定した。また、バイアル中の G— CS F糖鎖分解体含量を下記の方法 2に基づき測定した。

方法 1

C4逆相カラム（4. 6mmx 250mm、 300オングストローム）を用い、純水、ァセトニトリル、トリフルォロ酢酸を移動相に用いた。逆相系高速液体ク口マトグラフィ一法により G— C S F含量を測定した。 G— CSFとして 5 g 相当量を注入し、ァセトニトリルのグラジェントにより G— C S Fを溶出させ、 21 5 nmの波長で分光学的に検出した。

本方法で測定した G_C S F含量を用い、下記の式に基づき、 40°C— 2週間加速後の残存率（％) を算出した。

(40でー2週間加速後品の0—じ3 含量）残存率（％) = X 100

(未加速品の G— CS F含量）

方法 2

陰イオン交換高速液体クロマ卜グラフィ一法により、 G— CS F糖鎖分解体 (糖鎖末端に存在するシアル酸が全て分解されたもの）、及び G— CSF (未変化体）を検出した。即ち、陰イオン交換カラム（TSKgelDEAE) を用い、 20 mMトリス— HC 1緩衝液（pH7. 4) を移動相とし、 NaC 1グラジェント (0 - 50 OmM) により溶出させ、 215 nmの波長で分光学的に検出した。本方法で測定した G— C S F糖鎖分解体と G— C S F未変化体の測定値を用い下記の式に基づき、 40で— 2週間加速後の G— CS F糖鎖分解体生成比（％) を算出した。

(G-CSF糖鎖分解体）

G-CSF糖鎖分解体生成比（％)

(G-CSF糖鎖分解体） + (G-CSF未変化体）実施例 1 ：各種 P Hの G - C S F残存率に及ぼす効果

第 1表に記載の各種 p Hで調製した溶液製剤を、 4 0 °C— 2週間加速試験を行つた後の G— C S F残存率を方法 1に記載の式により算出した。得られた結果を図 1に示す。

p Hが 7以下において G— C S F残存率は 7 5 %以上であった。実施例 2 ：各種 p Hの G— C S F糖鎖分解体生成に及ぼす効果

第 1表に記載の各種 p Hで調製した溶液製剤を、 4 0で一 2週間加速試験を行つた後の G— C S F糖鎖分解体生成比をを方法 2に記載の式により算出した。得られた結果を図 2に示す。

p Hが約 5〜7の範囲では、 G - C S F糖鎖分解体の生成比がきわめて低かつた。実施例 3 ：界面活性剤濃度の容器への G— C S F吸着に及ぼす効果

250mgの G-CSF, 5. 844gの塩化ナトリウムを添加した後，さらに下記の表 2 に示す各ポリソルべ一ト 20濃度となるように添加し，リン酸ナ卜リゥム緩衝液にて pHを 6. 5に調整し，全量を 1Lとした。

【表 2】ポリソルベート G-CSF 塩化ナトリウムリン酸ナトリウム pH

20 緩衝液

250 mg 5.844 g 15mM相当量 6.5 1 L

0.02 g 250 mg 5.844 g 15mM相当量 6.5 1 L

0.05 g 250 mg 5.844 g 15mM相当量 6.5 1 L o.i s 250 mg 5.844 g 15mM相当量 6.5 1 L

0.2 g 250 mg 5.844 g 15mM相当量 6.5 1し

0-5 g 250 mg 5.844 g 15mM相当量 6.5 1 L 無菌的に調整 ·濾過を行い製造した、表 2記載の G-CSF各調剤液は，バイァル（村瀬硝子株式会社製無処理白色ガラスバイアル（5mL) ) に対して lmLずつ充填し，充填直後，および，充填後 24時間経過後に方法 1記載の逆相系高速液体クロマトグラフィ一法により G-CSF含量を測定した。

本方法で測定した G-CSF含量を用い、下記の式に基づき，充填後 24時間経過後の吸着抑制率（％) を算出した。

(充填後 24時間経過後の G-CSF含量）

吸着抑制率（％) = X 100

(充填直後の G-CSF含量）得られた結果を表 3及び図 3に示す。

【表 3】

重量部'》吸着抑制率

0 94.5 %

0.08 95.0 %

0.2 97.5 %

0.4 97.0 %

0.8 100 %

2 99.5 % つ重量部： G-CSF 1重量部に対するポリソルべ一ト 20の重量部 G-CSF 1重量部に対するポリソルベート濃度が 1重量部以下の場合にも吸着抑制率は十分であった。実施例 4 ：バイアル又はシリンジ充填製剤の安定性

250mgの G— CSF、 0. 1 gのポリソルべ一ト 20、 7 gの塩化ナトリゥムを秤量し、リン酸ナトリウム緩衝液にて pHを 6. 5に調整した全量 1しの調剤液を無菌的に調製し、濾過を行った後、無菌的にバイアル（同上）又はシリンジ（日本べクトン 'ディッキンソン社製ハイパック S FC、 lmLロング）に lmLずつ充填、密封し、表 4に示す G— CSF溶液製剤を製造した。【表 4】

ポリソルベート i

G-CSF ！リン酸ナトリウム緩 I 割 _w

塩化ナトリウム衝剤； 53剤 pH

20 ¹ 全量

250 mg 0.1 g 7.0 g i 1 5mM j 6.5 1 しこのようにして無菌的に調製した G— C S F 2 5 0 g Zm L含有製剤を、 4 0での恒温槽内に 2週間静置、又は 2 5 の恒温槽内に 6ヶ月静置した。

バイアル中、又はシリンジ中の G— C S F含有量を方法 1に基づき測定し、 4 0で— 2週間加速後の G - C S F残存率、及び 2 5 °C - 6ヶ月保存後の G— C S F残存率を方法 1記載の式により算出した。

得られた結果を表 5に示す。

【表 5】

本発明の G— C S F製剤は、バイアル充填製剤、シリンジ充填製剤のいずれにおいても、 4 0で一 2週加速後の残存率は 7 5 %以上であり、 2 5で一 6ヶ月保存後の残存率は 9 5 %以上であり、優れた安定性を示した。産業上の利用可能性

本発明の G— S C F含有製剤は、 G— C S F 1重量部に対して 1重量部以下という極めて少量の界面活性剤を含むことにより、製剤中に微量で存在する G— C S Fの温度、湿度、酸素、紫外線等の外的因子に基づく会合、重合、あるいは酸化もしくは容器壁への吸着の結果として生じる、有効成分の損失、活性の低下等に関する問題点を効果的に解決することができる。従って、本発明は製造工程における煩雑さ、コストを少なくし、また長期保存にも安定な溶液製剤を提供するものである。

Claims

請求の範囲

1 . 顆粒球コロニー刺激因子と、顆粒球コロニー刺激因子 1重量部に対して 1 重量部以下の少なくとも 1種の製薬上許容される界面活性剤を含み、 P H 7以下である、安定な顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

2 . 界面活性剤を顆粒球コロニー刺激因子 1重量部に対して 0 . 2 ~ 1重量部の範囲内の量で含む請求項 1記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

3 . 界面活性剤を顆粒球コロニー刺激因子 1重量部に対して 0 . 2〜0 . 8重量部の範囲内の量で含む請求項 2記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

4 . 界面活性剤を顆粒球コロニー刺激因子 1重量部に対して 0 . 4〜0 . 8重量部の範囲内の量で含む請求項 2記載の顆粒球コ口ニー刺激因子含有製剤。

5 . 界面活性剤を顆粒球コロニー刺激因子 1重量部に対して 0 . 4又は 0 . 8 重量部含む請求項 2記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

6 . 安定化剤として実質的にタンパク質を含まない請求項 1記載の顆粒球コ口ニー刺激因子含有製剤。

7 . 界面活性剤が非イオン界面活性剤であるソルビ夕ン脂肪酸エステル、グリセリン脂肪酸エステル、ポリグリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビット脂肪酸エステル、ポリォキシエチレングリセリン脂肪酸エステル、ポリエチレンダリコール脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ボリォキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフエニルエーテル、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリオキシエチレンミツロウ誘導体、ポリオキシエチレンラノリン誘導体、ポリオキシエチレン脂肪酸アミド；陰イオン界面活性剤であるアルキル硫酸塩、ポリオキシエチレンアルキルエーテル硫酸塩、アルキルスルホコハク酸エステル塩；天然系の界面活性剤であるレシチン、グリセ口リン脂質、スフインゴリン脂質、ショ糖脂肪酸エステルからなる群から選択される少なくとも 1種である請求項 1記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

8 . 界面活性剤がポリソルベート 2 0及びポリソルベー卜 8 0からなる群から選択されるポリオキシエチレンソルビ夕ン脂肪酸エステルである請求項 1記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

9. p Hが 5〜 7である請求項 1記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

10. pHが 6〜6. 8である請求項 1記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

1 1. pHが 6. 2〜6. 8である請求項 1記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。

12. バイアル、注射器用アンプル又はプレフィルドシリンジに充填された請求項 1記載の顆粒球コロニー刺激因子含有製剤。