WO1999003465A1

WO1999003465A1 - Antibiotiques contenant des derives indole

Info

Publication number: WO1999003465A1
Application number: PCT/JP1998/003112
Authority: WO
Inventors: Yuto Kamei; Seiichi Araki; Mamoru Suzuki; Naoaki Watanabe; Yasushi Nagai; Yumi Yokoyama; Kumiko Kishi
Original assignee: Eisai Co., Ltd.
Priority date: 1997-07-16
Filing date: 1998-07-10
Publication date: 1999-01-28
Also published as: AU8128898A

Description

明細書ィンドール誘導体を含む抗生剤

発明の詳細な説明

発明の属する技術分野

本発明はインドール锈導体を有効成分とする細菌、真菌、ウィルスの感染症予防治療剤に関する。従来の技術

抗菌剤、抗真菌剤などの抗生物質が.. 種々の感染症に対して有効であることは古くから知られおり、現在まで臨床の場で広く使用されている。これらの抗生剤は細菌や真菌が生成するものを抽出したり、化学的に合成することによつて得ることができる。

植物や海藻などの天然物に含まれる成分として同定され、現在も使用されている物質の例としては、ヒノキ（Chamaecyparis obtusa) に含まれるヒノキチオール、ァカキナノキ（Cinchona succirubra) に含まれるキニン、クスノキ (Cinnaniomuin camphora) に含まれるカンフル、マクリ（Digenea simplex) に含まれるカイニン酸など挙げられる。ヒノキチオールは日常生活用品や化粧品に抗菌剤、防臭剤とし X、キニンはヒトゃ家畜の解熱鎮痛薬として、カンフルは強心剤とし！、カイニン酸は回虫駆除薬としてそれぞれ使用されている。また、ぺニシリウム ·グリセオフルバム（Penicillium griseofulvum) が産生するグリセオフルビンは抗真菌薬、ぺニシリウム · クリソゲナム（Penicilli um chrysogenura) が産生するペニシリンは抗グラム陽性菌薬として使用されている。

しかし、現在までにインドール誘導体が ^菌、抗真菌、抗ウィルス作用等の抗生作用を有することは知られていない。

近年、抗生物質に対する耐性菌の問題が指摘されるようになってきている。これは同一系統の抗菌剤、抗真菌剤を長期間反復して使用することにより、これらの抗生物質に対して細菌や真菌が耐性を獲得して、その結果、薬剤を投与しても効果が発現できなくなる現象である。卑近な例としては、メチシリンに耐性を蒹得した黄色ブドウ球菌（MR S A) などがある。

また、感染源がインフルエンザウイルスや肝炎ウィルスのようなウィルスである場合には、細菌とは異なって一般の抗生物質は無効である場合が多く、. ヮクチンによる感染予防に頼らざるを得ない。しかし、ウィルスは代を重ねることによって、抗原として認識される部位の搆造が変化する場合があることが知られている。このようなときには、既存のワクチンは全く無効となり、世界的規模でウィルス感染が流行することもある。したがって、上記のような耐性を獲得した菌にも効果があり、また、ウィルスにも効果を発揮できる新しい薬剤の開発が常に待たれている。

これまで土壌中の細菌や真菌が産生する物質を抽出し、医薬品にする試みが盛んに行われてきたが、現在までにほぼ出尽くした感があり、新規物質を発見するのは徐々に困難な状況になっている。

—方、海底に棲息する海藻など未だ研究が十分にはなされていない天然物も多数存在する。これらの天然物から有用な物質が得られる可能性は大きく、さらなる検討が待たれている。本発明の開示

本発明者らは、これらの背景に基づき鋭意研究を進めた結果、海藻の一種であるソゾノハナ（Laurenc i a brongn i at i i) から得られた抽出物が、優れた抗生作用を示すことを見出した。さらに、この抽出物を精製し、抗生作用を示す物質がィンドール誘導体であることを見出し本発明を完成させた。

すなわち、本発明は一般式

ί式中 R ' ~ R ⁷は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、シクロアルキル基、低級アルキルチオ基、下記一般式で表される基、

(式中 R ¹¹および R ¹²は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、置換基を有していてもよい低級アルキル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよいァリール基、または置換基を有していてもよぃァリールアルキル基を表す。さらに、 R '¹および R ¹²は置換されていてもよい環を形成していてもよく、環中に 1または 2個のへテロ原子を有していてもよい。）、または、下記一般式で表される基、

【式中 R²¹および R"は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、スルホ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、カルボキシル基を表す。さらに、 R"と R"で低級アルコキシィミノ基、ヒドロキシィミノ基、カルボキシ低級アルコキシイミノ基を形成してもよい。 R ^{2 3}および R ²⁴は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、置換されていてもよいァリール基、置換されていてもよいァリールアルキル基、置換されていてもよいへテロアリール基、置換されていてもよいへテロアリールアルキル基、置換されていてもよいへテロァリ一ルチオ低級アルキル基、置換されていてもよいアルコキシカルボ二ロキシアルコキシ基、または式

— CO OR²⁵

(式中 R ²⁵は水素原子、アルカリ金属原子または低級アルキル基を表す。）を表す。 ]を表す。ただし、 R '〜R ⁷の全てが水素原子である場合を除く。 } で示されるインドール誘導体（ I ) 、分子內塩もしくはその薬理学的に許容される塩またはそれらの水和物を有効成分とする抗生剤、該抗生剤を含む感染症予防治療剤、およぴ該抗生剤を含む家畜または養殖魚用飼料である。

本発明はまた上記のインドール誘導体（ I ) 、分子内塩もしくはその薬理学的に許容される塩またはそれらの水和物の有効量を人または動物に投与することによりその抗生作用に基づき感染を予防、治療または改善する方法である。本発明は更に上記インドール誘導体（ I ) 、分子內塩もしくはその薬理学的に許容される塩またはそれらの水和物の有効量および薬理学上受容される担体を含む抗生剤組成物である。また本発明は、上記化合物の抗生剤への用途である。本発明は式（I)中 R¹は水素原子、ハロゲン原子または低級アルキル基を示し、 R²〜R⁷は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、シクロアルキル基または低級アルキルチオ基を示し、ただし、 R ¹〜 R ⁷の全てが水素原子である場合を除く態様を含む。

本発明においては上記の一般式で示される化合物を使用することができるが、好ましくは 2, 4， 6—トリブロモ 3—メチルチオ一 1 H—インドール、 4, 6—ジブ口モー 2， 3—ビスメチルチオ一 1 H—インドール、または 2， 4， 5， 6—テトラブロモー 3—メチルチオ一 1 H—インドール、または 4， 5, 6—トリプロモー 2， 3 -ビスメチルチオ一 1 H—ィンドールである。

上記一般式の中の R¹ R²、 R³、 R⁴、 R⁵、 R⁶、 R⁷、 R^l R¹²、 R²¹、 R²²、 R²³, R²⁴および R²⁵の定義にみられるハロゲン原子とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、ヨウ素原子などを意味する。

R'、 R R R\ R⁵、 R⁶、 R⁷、 R¹¹, R¹²、 R²¹、 R²²、 R²³、 R²⁴ および R²⁵の定義中にみられる低級アルキル基とは、炭素数 1から 6の直鎖または分枝状のアルキル基を意味する。たとえばメチル基、ェチル基、 n—プロピル基、イソプロピル基、 n—ブチル基、イソブチル基、 sec—ブチル基、 tert 一ブチル基、 n—ペンチル基、 1 , 1ージメチルプロピル基、 1 , 2—ジメチノレプロピル基、 2, 2—ジメチノレプロピノレ基、 2—ェチノレプロピノレ基、 n—へキシル基、 1 , 2—ジメチルブチル基、 1， 3—ジメチルブチル基、 2， 2 - ジメチルブチル基、 2, 3—ジメチルブチル基、 3, 3—ジメチルブチル基、 1 , 1ージェチルプロピル基、 1， 2—ジェチルプロピル基、 2 , 2—ジェチルプロピル基、 1—ェチル— 2—メチルプロピル基、 1一メチル— 2—ェチルプロピル基、 1 , 1—ジェチルェチル基等を挙げることができる。

R¹, R²、 R³、 R⁴、 R⁵、 R⁶、 R⁷、 R²¹、 R²²、 R ²³および R ²⁴の定義にみられる低級アルコキシ基とは、炭素数 1から 6の直鎖または分枝状のアルコキシ基を意味する。たとえば、メトキシ基、ェ卜キシ基、 n—プロポキシ基、イソプロポキシ基、 n—ブトキシ基、 sec—ブトキシ基、 tert—ブトキシ基、 n —ペンチルォキシ基、 1， 1ージメチルプロピルォキシ基、 1， 2—ジメチルプロピルォキシ基、 2, 2—ジメチルプロピルォキシ基、 2—ェチルプロピルォキシ基、 n—へキシルォキシ基、 1， 2—ジメチルブチルォキシ基、 1， 3 —ジメチルブチルォキシ基、 2, 2—ジメチルブチルォキシ基、 2 , 3—ジメチルブチルォキシ基、 1ーェチルー 2—メチルプロピルォキシ基、 1一メチル一 2—ェチルプロピルォキシ基等を挙げることができる。

R R²、 R³、 R⁴、 R⁵、 R⁶、 R⁷、 R'\ R ¹²の定義にみられるシクロアルキル基とは、炭素数 3から 8の環状のアルキル基を意味する。たとえば、シクロプロピル基、シクロブチル基、シクロペンチル基、シクロへキシル基、シクロへプチル基、シクロォクチル基などを挙げることができる。

R¹ R 1 2、 R 23および R 24の定義にみられるァリール基とは、フエニル基、

1一ナフチル基、 2—ナフチル基やアントラセニル基などを意味する。

R²³および R²⁴の定義にみられるヘテロァリール基とは、硫黄原子、酸素原子または窒素原子が 1から 4個含まれている単環または縮合環から誘導される基を意味する。例えば、チェニル基、フリル基、ベンゾチェ二ルキ基、ベンゾフラニル基、イソべンゾフラニル基、ピロリル基、イミダゾリル基、ビラゾリル基、イソチアゾリル基、イソキサゾリル基、ピリジル基、ビラジニル基、ピリミジル基、ピリダジニル基、インドリジニル基、インドリル基、イソインドリル基、キノリル基、イソキノリル基、フタラジニル基、キノキサリニル基、ナフチリジニル基、キナゾリニル基、ァクリジニル基、フラザニル基などを意味する。

R ²³および R ²⁴の定義にみられるアルコキシカルボ二ロキシアルコキシ基とは、メトキシカルポ二口キシメトキシ基、エトキシカルボ二口キシメトキシ基、 1一 [(イソプロボキシ）力ルポ二口キシ]エトキシ基、 2— [(2—メチルプロボキシ）力ルポ二口キシ]ブトキシ基等を意味する。

R\ R²、 R³、 R⁴、 R⁵、 R⁶および R⁷の定義にみられる低級アルキルチオ基の中の低級アルキルとは、前記低級アルキル基と同様に炭素数 1から 6の直鎖または分枝状のものを意味する。

また、 R R²、 R³、 R⁴、 R^s、 R⁶、 R⁷、 R²³および R²⁴の定義にみられるァリールアルキル基、ヘテロァリールアルキル基、ヘテロァリ一ルチオ低級アルキル基中のアルキルとは、低級アルキレンを意味し、例えばメチレン基、エチレン基、プロピレン基、ブチレン基等である。

R²¹および R²²の定義にみられるスルホ基とは、式 - S0₃Hで表される基 (Sulio基)を示す。

R²¹および R²²の定義にみられる低級アルコキシィミノ基、カルポキシ低級アルコキシィミノ基、 R²³および R²⁴の定義にみられる低級アルコキシ基とは、前記低級アルコキシ基と同様のものを意味する。

R R²、 R³、 R⁴、 R⁵、 R⁶、 R⁷、 R²³、 R ²⁴および R ²⁵の定義にみられるァリールアルキル基中のァリール、 R²³および R ²⁴の定義にみられるァリールアルキル基、ヘテロァリールアルキル基、ヘテロァリールアルキル基、へテロアリ一ルチオ低級アルキル基中のァリールとは、前記ァリール基と同様のものを意味する。

上記定義中の置換基を有していてもよいの置換基とは、低級アルキル基、低級アルコキシ基、ハロゲン原子、水酸基、ヒドロキシアルキル基、アルコキシアルキル基などを意味する。

本発明における薬理学的に許容される塩とは、ナトリゥム塩などのアル力リ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩などのアルカリ土類金属塩、塩酸塩、臭化水素塩、硫酸塩、リン酸塩などの無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、酒石酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、 p—トルエンスルホン酸塩などの有機酸塩、またはァスパラギン酸やグルタミン酸などのアミノ酸との塩などを意味する。

化合物によっては光学異性体が存在する場合もあるが、これらの異性体も本発明の範囲に含まれる。また、水和物が存在する場合についても同様である。本発明において抗生剤とは、抗菌、抗真菌およびまたは抗ウィルス剤を意味する。

本発明に係る抗生剤が有効な細菌の例としては、シユードモナス ·ァエルギノ一ザ (Pseudomonas aeruginosa) 、 P. マレイ（mallei) 、 P. フリレオレセンス（fluorescens) 等のシユードモナス属、ボルデテラ · ブロンキセプチ力

(Bordetella bronchisept ica) 、 B. ペルツシス（pertussis) 等のポルデテラ属、種々の病原性大腸菌を含むエツシェリシァ · コライ（Escherichia col i) 、サルモネラ 'ティフィムリウム（Salmonella typhimur ium) 、 S. ティフィ（typhi) 、 S. パラティフィ（paratyphi) 、 S . ェンテリティディス（ent eritidis) 、 S . コレラスイス（cholerasuis) 、 S . ガリナルム（gallinaru m) 、 S. アポル夕セクイ（abortaseciui) 、 S. ァボルタソビス（abortasovi s) 、 S. ダブリン（dublin) 等のサルモネラ属、シゲラ ·ソネィ（Shigella s onnei) 、 S. ディセンテリ（dysenteriae) 、 S. フレクスネリ（ilexneri) 、 S. ボイディ（boydii) 等のシゲラ属、セラチア 'マルセセンス（Serratia ma rcescens) 、 S. ルビダイ（rubidaea) 等のセラチア属、ビブリオ ' コレラィ

(Vibrio cholerae) 、 V. パラへモリテイクス（parahaemolyticus) 等のビブリオ属、スタフイロコッカス ·ァウレウス（Staphylococcus aureus) 、 S. ェピデルミディス（epidermidis) 等のブドウ球菌属、クロストリジゥム ·パーフリンゲンス（Clostridium perfingens) 、 C . ショべィ（chauvoei) 、 C . ポッリナム（botulinum) 、 C. テ夕ニ（tetani) 、 C. セプチカム（septicum) 等のクロストリジゥム属、キャンピロパクター · フィ一タス（Ca即 ylobacter f etus) 、 C. スプトルム（sputorum) 、 C. フィ一力リス（faecalis) 等のキヤンピロパクター属、エルシニア .ぺステイス（Yersinia pestis) 、 Y. シュ —ドッペルクロシス（pseudotuberculosis) 、 Y. ェンテロコリチカ（enteroc olitica) 等のエルシニア属、ェンテロパクター · クロアカイ（enterobactor c loacae) 等のェンテロバクタ一厲、シトロパクター · フレゥンディ（ trobact er freundi i) 等のシトロバクター厲、ェンテロコッカス ·セリオリシダ（Ente rococcus seriol icida) 等のェンテロコッカス厲（マクロライド耐性菌を含む）、プロテウス属（Proteus) 、バクテロイデス属（Bacteroides) 、フソバクテリゥム属（Fusobacterium) などが挙げられるが、本発明は細菌の種類によつて限定されるものではない。

同様に有効な真菌の例としては、ァスペルギルス · フミガタス（Aspergillus fumigatus) 、 A. フラバス（flavus) 、 A. テレウス（terreus) 、 A. ニジエール（niger) 等のァスペルギルス属、カンジダ ·アルピカン（Candida albi cans) 、 C. トロピカリス（tropical is) 、 C. クルセィ（kurusei) 、 C. シユードトロピカリス（pseudotropicalis) 等のカンジダ属、ヒス卜プラズマ，カフスラタム (Histoplasma capusulatum) 、 H. フラシミノサム (f raciiinos um) 等のヒストプラズマ属、ミクロスポラム ·力ニス（Microsporum canis) 、 M. デイストルタム（distortum) 、 M. ナナム（nanam) 等のミクロスポラム属、トリコフィトン ·ガリナイ（Tricophyton gallinae) 、 T. ルブラム（rub rum) 、 T. ェキナム（eQuinum) 等のトリコフィトン属、コクシディオイデス

-イミティス（Coccidioides immitis) 等コクシディオイデス属、ブラストミセス ·デルマタイテイス（Blastomyces dermatitis) 等のブラストミセス属、クリプトコッカス ·ネオフォルマンス（Cryptococcus neoformans) 等のクリプトコッカス属などが挙げられるが、本発明は真菌の種類によって限定されるものではない。

同様に有効なウィルスの例としては、牛痘ウィルス、ェク卜ロメリアウィルス、伝染性膿疱性皮膚炎ウィルス、ゥシ丘疹性口内炎ウィルス、鶏痘ウィルス、ヒトイボウィルス等のボックスウィルス科、単純へルぺスウィルス、水痘帯状疱疹ウィルス、ヒトサイトメガロウィルス、サル Bウィルス、イービ一（E B) ウィルス、仮性狂犬病ウィルス、ゥシ伝染性鼻気管炎ウィルス、トリ喉頭気管炎ウィルス、マレック病ウィルス、ィヌヘルぺスウィルス、ネコへルぺスウィルス、ブ夕封入体鼻炎ウィルス、コィボックス病ウィルス、オンコリンクトリぺス卜ウィルス、ブ夕インフルエンザウイルス等のオルソミクソウィルス科、流行性耳下線炎ウィルス、ムンブスウィルス、麻疹ウィルス、ニューカツスル病ウィルス、パラインフルエンザウイルス、ィヌジステンパーウィルス、アールエス（R S ) ウィルス等のパラミクソウィルス科、狂犬病ウィルス、水胞性口炎ウィルス、ゥシ流行熱ウィルス、伝染性造血器壊死症ウィルス、ヒラメラブドウィルス等のラブドウィルス科、マールブルグウィルス、エボラウイルス等のフイロウィルス科、ヒトカゼコロナウィルス、マウス肝炎ウィルス、ブ夕伝染性胃腸炎ウィルス、トリ伝染性気管支炎ウィルス、ネコ伝染性腹膜炎ウィルス等のコロナウィルス科、腎症候性出血熱ウィルス、カリフォルニア脳炎ウィルス等のブニヤウィルス科、ゥマ脳炎ウィルス、ムレー渓谷脳炎ウィルス、風疹ウィルス、ゥマ動脈炎ウィルス等のトガウィルス科、黄熱病ウィルス、日本脳炎ウィルス、デングウィルス等のフラビウィルス科、リフトヴアレー熱病ウィルス、アカバネ病ウィルス等のブニヤンゥエラウィルス科、二ヮ卜リ白血病ウィルス、ニヮトリ網膜内皮症ウィルス、ネコ白血病ウィルス、ネコ後天性免疫不全症ウィルス等のレトロウイルス科、リンパ嚢種ウィルス、マダイイリドウィルス症ウィルス等のイリドウィルス科、ゥマ伝染性貧血ウィルス、ミンクァリユーシャン病ウィルス、ブ夕生殖器呼吸器症候群ウィルス等が挙げられるが、本発明はウィルスの種類によって限定されるものではない。

本発明はまた、上記の細菌、真菌およびウィルスによる感染症の予防治療剤である。発明の実施の形態

本発明に係る抗生剤の投与方法としては、投与目的、症状等の条件によって異なるが、経口、筋肉内、静脈内、皮内、皮下、経皮、点眼、腹腔内投与等が挙げられる。

人や動物において、細菌、真菌、ウィルス等の感染が成立していない時または治癒後に投与する場合には予防剤としての形態であり、感染後および発症中に投与する場合には治療剤としての使用である。投与量はその目的、対象動物、疾患の種類、病態によって異なるが、経口投与の場合には 1 〜1000mg/kg、好ましくは 5 〜500mg/kg、さらに好ましくは 10〜 100mg/kgである。また、筋肉内投与の時には 0. l〜 100mg/kg、好ましくは 1 〜50mg/kgである。静脈内投与の時には 0. 0ト 50mg/kg、好ましくは 0. l〜 10mg/kgである。本発明に係る抗生剤は、そのまま投与してもよく、また通常用いられる製剤用担体によって、公知の方法により固形剤とすることも液剤とすることもでき、また、食品や飼料、飲水等に混合することもできる。

経口用固形製剤を調製する場合には、主薬に賦形剤、結合剤、粘結剤、崩壊剤、滑沢剤、着色剤、矯味矯臭剤、抗酸化剤、溶解補助剤などを加えた後、常法により錠剤、被覆錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤などとする。

上記賦形剤としてはデンプン、コーンスターチ、デキストリン、小麦粉、小麦ミドリング、ふすま、米ぬか、米ぬか油かす、大豆かす、大豆粉、大豆油かす、きな粉、ブドウ糖、乳糖、白糖、マルトース、植物油、動物油、硬化油、高級飽和脂肪酸、脂肪酸、酵母、マンニトール、結晶セルロース、二酸化珪素、無水珪素、珪酸カルシウム、珪酸、リン酸一水素カルシウム、第二リン酸カルシゥム、リン酸三カルシウム、リン酸カルシウム、リン酸第二水素カルシウムなどが用いられる。

結合剤としてはポリビニルピロリドン、ェチルセルロース、メチルセル口一ス、アラビアゴム、トラガント、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、カゼインナトリウム、力ルポキシメチルセルロースナトリウム、プロピレングリコール、ポリアクリル酸ナトリウムなどが用いられる。

滑沢剤としてはステアリン酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸などが用いられる。

着色剤、着香料としては医薬品、飼料に添加することが許可されているものであればよく、特に限定されない。抗酸化剤としてはァスコルビン酸、 α—トコフエロール、エトキシキン、ジブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシァニソ一ル等医薬品や飼料に添加することが許可されているものであればよレ。また、錠剤、顆粒剤は必要に応じてコーティングすることは差し支えない。注射製剤を製造する場合には、必要に応じて主薬に ρ Η調整剤、緩衝剤、懸濁化剤、溶解補助剤、安定化剤、等張化剤、抗酸化剤、保存剤などを添加し、常法により製造することができる。この際必要に応じ、凍結乾燥剤とすることも可能である。この注射剤は静脈内、皮下、筋肉内等に投与することができる 99 034 懸濁化剤としては例えば、メチルセルロース、ポリソルベート 8 0、ヒドロキシェチルセルロース、アラビアゴム、トラガント末、カルポキシメチルセル口一スナトリウム、ポリォキシエチレンソルビ夕ンモノラウレートなどを挙げることができる。

溶解補助剤としては、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、ポリソルベート 8 0、ニコチン酸アミド、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレートなどが用いられる。

保存剤としてはパラォキシ安息香酸メチル、パラォキシ安息香酸ェチル、ソルビン酸などが用いられる。図面の簡単な説明

図 1は、 2 , 4 , 6 —トリブロモー 3—メチルチオ— 1 H—インドールの各種ウィルスに対する活性を示した図である。

図 2は、 2 , 4， 6 —トリブロモ— 3—メチルチオ— 1 H— ^ f ンドールの黄色ブドウ球菌およびカンジダ ·アルビカンに対する活性を示した図である。

図 3は、 2 , 4 , 6 —トリブロモ _ 3—メチルチオ— 1 H—インドール、 4， 6 —ジブロモ— 2， 3—ビスメチルチオ一 1 H—インドール、 2， 4 , 5 , 6 —テトラブロモー 3—メチルチオ一 1 H—インドールおよび 4 , 5 , 6—トリプロモー 2 , 3—ビスメチルチオ一 1 H—ィンドールの細胞毒性試験の結果を示した図である。

次に、本発明に係る化合物の抗生剤としての作用に関する薬理実験例を示す。薬理実験例 1 2 , 4， 6 —トリプロモー 3—メチルチオ— 1 H—インドールの家畜由来一般細菌に対する抗菌活性

標記化合物の家畜由来の細菌に対する抗菌活性を、平板寒天希釈法によって調べた。比較対照薬としてァモキシリンを使用した。その結果、 2， 4 , 6 - トリプロモー 3 —メチルチオ一 1 H—インドールは、幅広い細菌に作用し、特にグラム陽性菌に対して強い抗菌活性を示した（表 1、 2 ) 。 2, 4, 6—トリブロモ—3—メチルチオ一 1H—インドールおよびァモキシリンの家畜由来一般細菌に対する抗菌活性

化合物 A： 2, 4, 6 -トリプ Dモ- 3-メチルチオ- 1Η -インド -ル表 2

2 , 4， 6—トリプロモー 3—メチルチオ— 1 H—インドールおよびァモキシリンの家畜由来一般細菌に対する抗菌活性

化合物 A ： 2, 4, 6-トリブ口モ- 3 チ Jほ才- 1H -インド-ル薬理実験例 2 2 , 4 , 6 —トリプロモー'.' 3 —メチルチオ一 1 H—インドールのマクロライド耐性プリ由来連鎖球菌に対する抗菌活性

標記化合物のプリ由来連鎖球菌に対する抗菌活性を.、平板寒天希釈法によつて調べた。比較対照薬としてエリスロマイシンを使用した。その結果、エリスロマイシンに耐性を示した菌株に対しても 2 , 4 , 6 —トリプロモー 3—メチルチオ一 1H—インドールは抗菌活性を示した（表 3、 4) 表 3

2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1H— インドールのマクロライド耐性プリ由来連鎖球菌に対する抗菌活性

化合物 A： 2, 4, 6 -トリフ' Dモ- 3 チルチオ- 1H-インド -ル '表 4

2, 4, 6—トリブ口モー 3—メチルチオ一 1H—

ィンドールのマク口ライド耐性プリ由来連鎖球菌に

対する抗菌活性

化合物 A： 2, 4, 6 -トリフ' oモ- 3-ヌチルチオ- 1H -インド -ル薬理実験例 3 マウス黄色ブドウ球菌菌血症モデルにおける 2 , 4， 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1 H—インドール、 4, 6—ジブ口モー 2, 3—ビスメチルチオ一 1 H—インドール、 2 ' 4, 5, 6—テトラブロモー 3—メチルチオ一 1 H—インドール、または 4, 5 , 6—トリプロモー 2, 3—ビスメチルチオ一 1 H—インドール投与時の生存率

各群 10例の雄マウスに黄色ブドウ球菌 (Staphylococcus aureus OB-72) 6.7 xl0⁷CFU/mouseを 0.2mlの生理食塩液に懸濁させて尾静脈内に投与した。その 30 分後に標記 4化合物、それぞれ 50mg/kgを 0.5mlの 0.5%カルボキシメチルセル口ースナトリウム水溶液に懸濁して経口投与し、 7日後のマウスの生存率を算出した。対照群には同容量の媒体を投与し、また、比較対照薬としてァモキシリンを使用した。

その結果、表 5に示した結果が得られた。表 5

マウス黄色ブドウ球菌菌血症モデルにおける効果試験群生存数（％) 対照群 0/1 0 (0) 化合物 A 50mg/kg 6ノ1 0 (6 0) ァモキシリン 50mg/kg 6/1 0 (6 0)**

試験群生存数（％) 対照群 0/ 1 0 (0) 化合物 B 50mg/kg 7/ 1 0 (7 0)** ァモキシリン 50mg/kg 5/1 0 (5 0) * 試験群生存数（％) 対照群 0/10 (0) 化合物 C 50mg/kg 7/10 (70)** ァモキシリン 50mg/kg 5/10 (50)*

試験群. 生存数（％) 対照群 0/1 0 (0) 化合物 D 50mg/kg 9/10 (90)** ァモキシリン 50mg/kg 4/10 (40)* 化合物 A： 2, 4, 6-トリフ' 0モ -3 チルチオ - 1H-インド-ル

化合物 B ： 4, 6 -シ'プ Dモ- 2, 3 -ビス觸才 - 1H -インドール

化合物 C： 2, 4, 5, 6- Ϊトラフ'ロモ -3 -層ォ- 1H-インド-ル

化合物 D： 4, 5, 6-トリプモ- 2, 3-ビスヌチルチオ- 1H-インド -ル

χ²検定、 ** ： P<0. OK *： P<0.05 薬理実験例 4 マウス連鎖球菌（エリスロマイシン耐性菌）菌血症モデルにおける 2, 4 , 6—トリブロモ— 3—メチルチオ— 1 H—インドールおよびエリスロマイシン投与時の生存率

各群 10例の雄マウスに、エリス口マイシンに耐性を獲得したプリ由来の連鎖球菌（S eptococcus spp. E89166) 1. Ox 10^sCFU/mouseを 0.2mlの生理食塩液に懸濁させて尾静脈内に投与した。その 30分後に 2, 4, 6—トリプロモー 3— メチルチオ— 1 H—インドール 50mg/kgを 0.5mlの 0.5%カルポキシメチルセル口ースナトリウム水溶液に懸濁して経口投与し、 7日後の生存率を算出した。対照群には同容量の媒体を投与し、また、比較対照薬としてエリスロマイシンを使用した。

その結果、対照群、 2, 4, 6—トリプロモー 3 メチルチオ一 1 H—インドール群およびエリスロマイシン群の 7日後生存率は、それぞれ 0 70および 3 0%であった（表 6) 表 6

マウス連鎖球菌. （Iリス t ?イシン耐性菌）菌血症モデル

における 2, 4, 6-トリブ口モ- 3-メチルチオ - 1H-インド -ルおよび

エリス Dマイシン投与時の生存率

化合物 A： 2, 4, 6 -トリプ□モ- 3 -ヌチルチオ- 1H-イント' -ル

： % ² - tesし Pく 0.01 薬理実験例 5

(1) 2 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1 H—インドールの伝染性造血器壊死症ウィルス ChAb株（ I HNV) 、オンコリンクスマソゥウィルス 00- 7812 株（OMV) 、ヒラメラブドウィルス 840卜 H株（HRV) に対する作用コンフル一ェントな状態の CHSE-214細胞 ¾、 24穴タイタープレートのゥエルにまいて 18でで 24時間培養した。標記化合物を DMS Oに溶解後、 E-RDF培地 (極東社製）で 50、 25、 12.5、 6.25および 3.13 g/m】の濃度に希釈し、そのうち 100/ilをそれぞれ 200PFU/ID1の濃度に調製したウィルス液と混合し、 18 でで 1時間培養した。この混合液 IOO Iを CHSE-214細胞に添加して、 18でで 1 時間培養し細胞にウィルスを吸着させた。その後、 0.8%メチルセルロースを含む E- RDF培地でゥ'エルを重層し、 18 で 7日間培養した。細胞を 10%ホルマリン液で固定後、 0.1%クリスタルバイオッレトで染色し、形成されたブラ一クを計数した。

その結果、標記化合物はいずれのウィルスに対しても、 25 g/mlの濃度でプラーク形成を 80%以上抑制した（図 1) 。

(2) 2, 4, 6—トリブロモ— 3—メチルチオ一 1H—インドールのインフルェンサ A型ウィルス [Orthomyxoviridae ini luenzavirus A/yainagata (HlNl^) ] に対する作用

コンフルーェントな状態の MDCK細胞を、 24穴夕イタ一プレートのゥエルにま -いて 34でで 24時間培養した。標記化合物を DMS0で溶解後、 E-RDF培地で 50、 25、 12.5、 6.25および 3.13 g/mlの濃度に希釈し、そのうち 100 1を 200PFU/mlの濃度に調製したウィルス液 100 1と混合し、 34でで 45分間培篓した。この混合液 1 OO Iを MDCK細胞に添加して、 34*Cで 45分間培蹇し細胞にウィルスを吸着させた。その後、 0.8%メチルセルロースを含む E-RDF培地でゥエルを重層し、 34でで 2 日間培養した。細胞を 10%ホルマリン液で固定後、 0. 1%クリスタルバイオッレ '卜で染色し、形成されたプラークを計数した。

その結果、標記化合物はプラーク形成を、 25 tg/mlで約 50%、 50 g/nilで約 7 0%抑制した（図 1) 。

薬理実験例 6 2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1 H—インドールの細菌および真菌に対する抗菌作用

標記化合物の抗菌活性を日本化学療法学会法に準じて、寒天培地希釈法によつて調べた。細菌および真菌をブレインハー卜インフユ一ジョン（Brain heart infusion, 以下 BH I ) ブロス培地（Diico社製）で一夜前培養した後、標記化合物を含む BH I寒天培地（Diico社製）に種し、 35でで 24時間培養後、最小発育阻止渙度（Minimum inhibitory concentration, MI C) を判定した。比較対照薬としてイミぺネムおよびアンホテリシン Bを使用した。その結果、 2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1H—インドールは細菌、真菌の両者に対して抗菌作用を示した（表 7) 。表 7

2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ— 1H—インドール、

I PMおよびアンホテリシン Bの細菌および真菌に対する抗菌活性

MIC( g/ml) 化合物 A I PM AMPH

Staphylococcus aureus 209P JC-1 3.13 0.012 >100

Staphylococcus aureus E31224 3.13 25 〉100

Staphylococcus aureus TK784 1.56 25 〉100

Staphylococcus epidermidis ATCC12228 6.25 0.025 〉100

Streptococcus pneumoniae I1D552 50 0.012 〉100

Streptococcus agalactiae 1ID1621 〉50 0.025 〉100

Enterococcus iaecalis ATCC19433 6.25 1.56 〉100

Micrococcus luteus PCJ1001 3.13 0.025 〉100

Bacillus subtilis ATCC6633 3.13 0.025 >100

Moraxella catarrhal is E60009 >50 0.20 〉100

Haemophilus inf luenzae I ID1638 ·'. 〉50 1.56 >100

Escherichia col i NIHJ JC-2 12.5 0.20 〉100

Serrat ia marcescens IF03736 〉50 1.56 〉100

Proteus rairabil is ATCC21100 >50 1.56 >100

Pseudomonas aeruginosa PA01 〉50 1.56 >100 Candida albicans MCY8622 12.5 〉100 • 0.10

Candida glabrata MCY86111 6.25 〉100 0.10

Candida krusei E91001 12.5 >100 0.20

Aspergillus iumigatus TIMM0069 12.5 〉100 0.10 化合物 A : 2, 4, 6—トリブ口モー 3—メチルチオ一 1 H—インドール I PM ：イミぺネム

A PH：アンホテリシン B 薬理実験例 7 2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1 H— ^ Γンドールのメチシリン耐性黄色ブドゥ球菌およびカンジダ菌に対する殺菌作用

メチシリン耐性黄色ブドウ球菌（Meticilin resistant Staphylococcus aure us、 MRS A) およびカンジダ菌（Candida albicans MCY8622) を B H Iプロス培地（Diico社製）で一夜前培養した後、 BH Iブロス培地（Diico社製）に -接種し、 30でで培養を続け、対数期中期となった時点で標記化合物を添加した。添加濃度は薬理実験例 6でもとめた MI Cおよびその 4倍の濃度とした。その後、 0.5、 1、 2、 4および 8時間後にそれぞれ菌液を採取し生菌数を調べた。その結果、 2, 4, 6—トリブロモ—3—メチルチオ一 1 H— ^ Γンドールは M RS Aおよびカンジダ菌の発育を明らかに抑制し、特に MI Cの 4倍濃度では 0. 5時間後にはすべての菌が死滅した（図 2) 。

薬理実験例 8 2, 4, .-6—トリブロモ— 3—メチルチオ— 1 H—インドールの真菌に対する作用

標記化合物を 100%DMS〇に溶解し、 8rag/mlの溶液を調製原液とし、適宜 DMS〇で希釈して使用した。なお、最小発育阻止濃度（M I C) の測定には、 2000 ^g/diskから 0.125 g/d iskの 2段階希釈系列のベーパ一ディスクを用いた。ァスペルギルス 'フミガ夕ス（Aspergillus iumigatus) およびトリコフィトン 'ルブラム（Trichophyton rubrura) の培養には、それぞれモルトェクストラクト培地（2.0%麦芽エキス、 2.0%グルコース、 0.1%ペプトン、 1.5%寒天、蒸留水、 ρΗ6·0) およびコーンミールァガー（日水製薬社製）を用いた。

また、各供試真菌株の液体培養には、各々の培地から寒天成分を除いた培地を使用した。 Aspergillus iumigatusおよび Trichophyton rubrum株を、それぞれの液体培地に 1白金耳づっ接種し、 3〜 5日間振盪培養し二重寒天培地を作製した。各段階に希釈した標記化合物をペーパーディスク 1枚ごとに 50^1づっ浸み込ませ、風乾後、各供試培地上に並べた。供試真菌株が寒天培地の表面に完全に出現するまで 36 :で培養し、ペーパーディスクの周囲に阻止円を形成した最小の濃度を、最小発育阻止濃度（MI C) とした。その結果を表 8に示した。表 8

2, 4, 6-トリフ'口モ- 3 チルチオ- 1H-インド -ルの真菌に.対する作用

(*)：気菌糸薬理実験例 9 2, 4， .6—トリブロモ— 3—メチルチオ— 1 H— ^ Γンドール、 4, 6—ジブ口モー 2, 3—ビスメチルチオ一 1 H—インド一ル、 2, 4, 5, 6—テトラブロモー 3—メチルチオ— 1 H—インドールおよび 4, 5, 6—トリプロモー 2 , 3—ビスメチルチオ一 1 Hニインドールのメチシリン耐性黄色ブドウ球菌に対する抗菌作用

標記化合物の抗菌活性を日本化学療法学会法に準じて、寒天培地希釈法によつて調べた。細菌をトリブティックソイブロス（Tryptic soy broth, TS B) 培地（Diico社製）で一夜前培狻した後、標記化合物を含むトリブティックソィァガー（Tryptic soy agar、 TS A) 培地（Diico社製）に接種し、 36でで 24時間培養後、最小発育阻止濃度（Minimum inhibitory concentration^ MI C) を判定した。比較対照薬としてペニシリン G、メチシリン、アンピシリン、ァモキシリン、セファゾリン、エリスロマイシン、カナマイシン、ストレブ卜マイシン、バンコマイシンを使用した。その結果を表 9に示した。

to

MRS Aに対する最小発育阻止滾度 (単位： jug/disk) 細菌名 A B C D' PC D' PPC ABPC A PC C.EZ EM KM SM VCM

M bA I卜 Ul OUJO 3 13 6.25 3.13 6.25' <0.78 く 0.78 く 0.78 〈0.78 · <0.78 <0.78 6.25 12.5 1.6

RSA GIFU12361 3 13 6.25 3.13 12.5 0.78 >100 0.78 0.78 0.78 〉100 >100 6.25 1.6

RSA GIFU12364 11 >100 ςη 1 nn si nn si nn 1 ft

MRSA 7B29 6 25 6.25 6.' 25 6.25 100 〉100 >100 〉100 >100 >100 〉100 >100 1.6

MRSA E31224 6 25 12.5 6.25 6.25 25 〉100 25 25 >100 >100 〉100 •6.25 0.78

MRSA E31237 3 13 6.25 3.13 6.25 50 〉100 100 50 >100 >100 >100 3.13 1.6

MRSA E31243 6. 25 6.25 6.25 6.25 ' 50 〉100 50 50 〉100 >100 〉100 6.25 0.78

MRSA E31256 6. 25 6.25 6.25 6.25 25 >100 50 25 >100 >100 〉100 3.13 1.6

MRSA E31271 6. 25 6.25 6.25 6.25 〉100 〉100 〉100 >100 〉100 >100 >100 6.25 1.6

MRSA E31280 6. 25' 6.25· 6.25 6.25 . 50 >100 25 50 >100 •>100 >100 12.5 1.6

MRSA E31283 6. 2.5· 6.25 6.25 6.25 25 >100 50 25 〉100 >100 〉100 3.13 0.78

A : 2, 4, 6 -卜リフ'□モー 3 -メチルチオ— 1H -インール B .: 4, 6-シ'フ' Πΐ-2, 3 -ビスメチォ -1Η -イン —ル

C ： 2, 4, 5, 6 -亍卜ラフ'。モ- 3-メチル #-1H-イン -ル D ： 4, 5, 6-卜リ Πΐ-2, 3-fスメチォ- 1H-インール

SSA : メチシリン感受性黄色ブドウ球菌 MRSA：メチシリン耐性黄色ブドウ球菌

PC : ペニシリン G DMPPG : メチシリン ABPC：アンピシリン AMPG：ァモキシリン GEZ セファゾリン

E ：エリスロマイシン KM：カナマイシン SM : ストレプトマイシン VGM :バンコマイシン

9 5 薬理実験例 10 毒性試験

本発明に係る化合物である 2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ— 1H 一インドールのマウスに対する腹腔内投与による急性毒性試験を実施したところ、最高用量の 50mg/kgでも^!ら変化は認められなかった。また、同化合物による復帰突然変異試験を実施したところ、結果は陰性であった。

薬理実験例 11 細胞毒性試験

2, 4, 6—トリブロモ— 3—メチルチオ一 1 H Γンドール、 4, 6—ジブロモ—2, 3—ビスメチルチオ— 1H— ^ Γンドール、 2， 4, 5, 6—テトラブロモー 3—メチルチオ— 1 H— ^ f ンドールおよび 4, 5, 6—トリブロモ - 2, 3—ビスメチルチオ一 1 H—インドールの 4化合物について細胞毒性試験を実施した。

ヒト正常線維芽細胞 HDF (森永生科学研究所）、 1X10^S ceUs/mlを 96 wel 1のマイクロプレートに ΙΟΟμ 1ずつ分注し、標記化合物を終濃度 100~1.6 g/ml となるように 2.5ずつ添加して、 5 %の CC下で 37でで 4日間培養した。培地としては E- RDF培地（極東製薬）を使用した。この際、対照区としてメタノールおよび滅菌した蒸留水 2.5 1を添加し、同様の条件で培養した。

細胞毒性試験は 3-[4, 5-dimethylthiazo卜 2- yl]- 2, 5-diphenyl tetrazolium b romide (Sigma社、以下 MTT) を基質とした MTTアツセィ法を用いた。すなわち、上記添加細胞を培養後、培養液に 10 xlの MTT溶液ほ g/ml)を添加し、 37 で 4時間反応させた。次いで、 ΙΟΟμΙの 10%ドデシル硫酸ナトリウム（Sodi um dodecyl sulfate, 以下 SDS) を添如して、 37でで一昼夜反応させ、溶解したホルマザンをマイクロブレートリーダー（モデル 450、 Biorad社製）によって、 570nm並びに 655 の波長で測定し、前者の吸光値から後者の吸光値を差し引いた値を細胞増殖の指標とした。細胞毒性の強弱は、標記化合物無添加対照区の吸光値を、化合物添加区の吸光値で割った値、すなわち増殖率で評価した。その結果を図 3に示した。

以上の結果から、本発明に係る化合物は抗菌、抗真菌、抗ウィルス作用を有することが明らかになった。

本発明の化合物の製造方法は特に限定されず、通常行なわれる方法で海藻などの植物から抽出すればよく、また、容易に入手可能な化合物から合成して得ることもできる。

製造例 1 2, 4, 6—トリブ口モー 3—メチルチオ一 1H—インド一ル、 4, 6—ジブ口モー 2, 3—ビスメチルチオ一 1H—インドール、 2, 4, 5, 6 ーテトラブロモー 3—メチルチオ一 1H—インドールおよび 4, 5, 6—トリプロモー 2, 3—ビスメチルチオ一 1H—インドール

採取したソゾノハナ .(Laurencia brongniatii) 湿重量 1.5kgを細かく刻み、計 6リットルとなるようにリン酸緩衝液（pH7.0) を加え、ミキサーで細粉してリン酸緩衝液抽出液を調^した。次いで、遠心分離後、沈殿物に計 6リットルとなるようにメタノールを加え、同様にミキサーで細粉してメタノール抽出液を調製した。残渣に対して 2度同様なメタノール抽出を行い、抽出液をプールした。このメタノール抽出液を口一タリ一エバポレーターで濃縮し、抽出液 100 Omlを得た。

濃縮メタノール抽出液 1000mlに対して 2倍量の蒸留水と 3倍量の n—へキサン Zク口ホルム（7:3)を加え、分液口一トでへキサン/夕ロロホルム層と水層に分配した。水層に対して同様の操作を 3回行い、抗 MRS A活性を有するへキサンクロロホルム画分を以下のク αマ卜グラフィ一に供した。

上記へキサン/クロ口ホルム画分をロー夕リ一エバポレー夕一で乾固させ、その固形物をへキサン/クロ口ホルム（7:3)で再溶解した。次いで、へキサンノクロ口ホルム (7： 3)で平衡化したシリ力ゲル 60 (Merck)充填カラム（ Φ 4.5 x 50cm) に抽出物をのせ、へキサン Zクロ口ホルム（7:3、 200ΰιη1), へキサンクロロホルム（6:4、 1000ml)およびクロ口ホルム（100%、 1000ml)と、順次、溶出溶媒を変えてシリカゲルク口マトグラフィーを行い、 UY250nmにおいて吸光値を測定し溶出パターンを確認した。

さらに、色素等と分離した抗 MRS A画分を回収 '濃縮した後、それぞれ 300 mlのへキサン Zエーテル（4:1)、（7:3)、（3:2)および（1:1)によるシリカゲルク口マトグラフィ一（Φ3.0X50cm)を行った。このとき、抗 MR SA活性を示した第 1 ~3のピークをそれぞれ、活性画分 A、 B、 Cとした。

活性画分 Aはへキサン/エーテル（4: 1)で再溶解した後、へキサン /エーテル (4:1、 900ml)および (7.5:2.5、 300ml)の溶^系でシリカゲルラム（φ 3.0x50c m)に供したところ、 2つのビークが得られた。活性画分 Bも同様に、へキサン /エーテル (4:1、 400ral)、（7:3、 400ml)および（3:2、 200ml)を用いたシリカゲルカラム（ Φ 3.0 X 50cni)に供した。活性画分 Cはへキサン_/ /エーテル（7： 3)で再溶解後、へキサン/エーテル（7:3、 600ml) (3:2、 300ml). (1:1、 300ml)およびメタノール（100%、 300ml)の溶媒系によるシリカゲルクロマトグラフィ一（Φ 3. OX 50cm)を行った。

上記の操作で得られた活性画分は濃縮後、シリカゲル薄層プレート（Kiese g el60、 Merck) を用いた薄層クロマトグラフィー（TLC) に供し、抗 MRS A 物質の単離を行った。 TLCはへキサンエ一テル (4:1)、（1:1)または（1:9)で展開させて行った。. 各種呈色反応を検討した結果、ローダミン呈色反応に陽性を示した各活性バンドを搔き取り、エーテルで溶出して分離させた。さらに、これらの画分を高速液体クロマトグラフィー（HPLC) (Inertsil SILカラム、 25Χ250ηπι, G Lサイエンス社）で最終的に精製した。その結果、活性画分 A からは 2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1 H—インドールおよび 2， -4, 5, 6—テトラブロモー 3—メチルチオ— 1 H— ^ Γンドールがそれぞれ 475. 8mg、 49.6mg得られた。また、活性画分 Bからは 4, 6—ジブ口モー 2, 3—ビスメチルチオ一 1H—インドール 135.4mgが得られた。活性画分 Cからは 4, 5, 6 -トリプロモー 2 , 3—ビスメチルチオ一 1 H— ^ Γンドール 26.8mgが得られた。実施例

次に実施例を挙げて本発明を説明するが、本発明はこれらの実 ½例に限定されるものではない。

実施例 1

2 , 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1 H— ^ ίンドール 20mgと乳糖（1 00M) 540mg, 乳糖（200M) 400mg、流動パラフィン 10mgおよびカープレックス 30 ragを混和し 2 %散剤とした。これを市販の豚用飼料に、主剤として体重 l kg当たり 5〜50mgとなるように混合した。実施例 2

2 , 4 , 6—トリプロモー 3—メチルチオ一 1 H— ^ Γンドール 200mg、カルメロースナトリゥム 200mg、小麦グルテン 200mgおよび乾燥酵母の適量を混合したこれを市販の'魚類用飼料に、主剤として体重 1 kg当たり 50mgとなるように混合した。

Claims

請求の範囲

1.一般式

{式中 R"〜R⁷は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、シクロアルキル基、低級アルキルチオ基、下記一般式で表される基、

(式中 R¹¹および R¹²は同一または相異なる水素原子、八ロゲン原子、置換基を有していてもよい低級アルキル基、置換基を有していてもよいシクロアルキル基、置換基を有していてもよいァリール基、または置換基を有していてもよいァリールアルキル基を表す。さらに、 R¹¹および R¹²は置換されていてもよい環を形成していてもよく、環中に 1または 2個のへテロ原子を有していてもよい。）、または、下記一般式で表される基、

[式中 R²¹および R"は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、アミノ基、スルホ基、低級アルキル基、低級アルコキシ基、力ルポキシル基を表す。さらに、 R²¹と R"で低級アルコキシィミノ基、ヒドロキシィミノ基、カルボキシ低級アルコキシィミノ基を形成してもよい。 R ²³および R ²⁴は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、置換されていてもよいァリール基、置換されていてもよいァリールアルキル基、置換されていてもよいへテロアリール基、置換されていてもよいへテロアリールアルキル基、置換されていてもよいへテロァリ一ルチオ低級アルキル基、置換されていてもよいアルコキシ力ルポ二ロキシアルコキシ基、または式

— COOR²⁵

(式中 R"は水素原子、アルカリ金属原子または低級アルキル基を表す。）を表す。 ]を表す。ただし、！^〜 ⁷の全てが水素原子である場合を除く。 } で示されるインドール誘導体（I ) 、分子内塩もしくはその薬理学的に許容される塩またはそれらの水和物の有効量を人または動物に投与することによりその抗生作用に基づき感染を予防、治療または改善する方法。

2.インドール誘導体が、般式

(式中 R ¹は水素原子、ハロゲン原子または低級アルキル基を示す。 R ²~R ⁷は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子、低級アルキル基、低級アルコキシ基、シク□アルキル基または低級アルキルチオ基を示す。ただし、 R ' ~R ⁷ の全てが水素原子である場合を除く。）で示される請求項 1に記載した方法。

3. R 'が水素原子または低級アルキル基であり、 R ²~R ⁷は同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子または低級アルキルチオ基である請求項 1または 2に記載した方法。

4. R 'が水素原子であり、 R ²〜R ⁷が同一または相異なる水素原子、ハロゲン原子または低級アルキルチオ基である請求項 1または 2に記載した方法。

5. R ¹が水素原子であり、 R ²および R ³がハロゲン原子またはメチルチオ基であり、 R 〜R ⁷が水素原子またはハロゲン原子である請求項 1または 2に記載した方法。

6.化合物が、

1) 2, 4, 6—トリプロモー 3—メチルチオ— 1H—インドール、

2) 4, 6—ジブ口モー 2, 3—ビスメチルチオ一 1H—インド一ル、

3) 2, 4, 5, 6—テトラブロモー 3—メチルチオ一 1H— ^ Γンドールまたは

4) 4, 5, 6—トリプロモー 2, 3—ビスメチルチオ一 1H— ^ Tンドールのいずれかである請求項 1または 2に記載した方法。

7.家畜または養殖魚に投与する請求項 1に記載した方法。

8.請求項 1に記載したインドール誘導体（I) 、分子内塩もしくはその薬理学的に許容される塩またはそれらの水和物の有効量および薬理学上受容される担体を含む抗生剤組成物。