WO1996003882A1 - Herbicide contenant des microbes et procede d'utilisation de celui-ci - Google Patents

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WO1996003882A1
WO1996003882A1 PCT/JP1995/001455 JP9501455W WO9603882A1 WO 1996003882 A1 WO1996003882 A1 WO 1996003882A1 JP 9501455 W JP9501455 W JP 9501455W WO 9603882 A1 WO9603882 A1 WO 9603882A1
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WO
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oil
herbicide
genus
present
silicone
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PCT/JP1995/001455
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English (en)
French (fr)
Inventor
Kenji Morita
Yoko Tanabe
Yasuko Tsujino
Yoko Fukuhara
Hiroshi Tsukamoto
Original Assignee
Japan Tobacco Inc.
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Publication date
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Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/30—Microbial fungi; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N61/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing substances of unknown or undetermined composition, e.g. substances characterised only by the mode of action
    • A01N61/02—Mineral oils; Tar oils; Tar; Distillates, extracts or conversion products thereof

Definitions

  • the present invention relates to a herbicide comprising a microorganism having a weed control ability and at least one of vegetable oil, mineral oil and silicone as an active ingredient, and a herbicide using the herbicide.
  • Collego which uses spores of the pathogenic microorganism Coll etotrichum gloeosporioides f. Sp. Aeschynomene, is commercially available for controlling legume weeds in soybean fields.
  • Lu-boa No.2 which uses Colletotorichum gloeosporioides for controlling soybean parasitoids in China, and Colletotrichum gloeosporioides f.sp. BioMal (Pilom Bios) as an active ingredient is commercially available.
  • spores that can be dried can be easily formulated as powdered wettable powders, etc.
  • An object of the present invention is to solve the problems of such conventional herbicides and herbicidal methods. Specifically, the present invention does not require dilution with water at the time of use and has excellent storage stability. It is to provide a microbial herbicide.
  • the present inventors have completed the invention based on the finding that a composition comprising oils such as vegetable oil, mineral oil, and silicone is effective in controlling weeds in paddy fields, and filed an application earlier (Japanese Patent Application Hei 5-333087).
  • the present inventors have further studied the oils, and found that microorganisms can survive for a long time in these oils, and that these oils have increased the ability to control weeds possessed by the microorganisms. It has been found that the present invention can be improved, and the present invention has been completed.
  • a first aspect of the present invention is a herbicide characterized by containing a microorganism having a weed controlling ability and at least one of vegetable oil, mineral oil and silicone as an active ingredient.
  • the microorganisms having the ability to control weeds used herein include microorganisms belonging to Exerohilam II and Calvularia II.
  • Exeguchi Hiram monoceras can be exemplified as a preferable microorganism.
  • weeds of the genus Chilli can be mentioned as the target weeds.
  • a second aspect of the present invention is a herbicidal method characterized by spraying the above herbicide on a paddy field.
  • a specific spraying method there is a method of spraying directly onto rice fields
  • the present invention will be described in detail.
  • the present invention has a composition different from that of a commercially available microbial herbicide product, and when formulated in accordance with the present invention, the herbicidal effect of the microbe itself having weed control ability is dramatically improved.
  • the microorganisms due to the properties of vegetable oils, mineral oils, and silicones, the microorganisms quickly spread the water surface of the paddy field and exert a uniform herbicidal effect over a wide area. Further, by formulating according to the present invention, long-term preservation of various microorganisms, including microorganisms having a weed control ability, becomes possible.
  • the present invention provides a microbe-containing herbicide characterized by containing at least one of the three components of vegetable oil, mineral oil, and silicone and a microorganism having a weed control ability as an active ingredient. .
  • the microorganism-containing herbicide of the present invention spreads the water surface quickly and extremely widely by spraying directly onto one or several places of the flooded paddy water surface due to the properties of these oils.
  • the herbicide exhibits a far superior herbicidal effect as compared with a cell suspension using a simple aqueous surfactant solution. This is thought to be because vegetable oil, mineral oil, or silicone itself damages the targeted weeds and promotes the effects of microorganisms having weed control ability.
  • the herbicide of the present invention since it is a liquid and can be dropped directly on the water surface, there is no danger of dusting when diluted with water during application, and the safety for workers is extremely high.
  • it contains oil it is particularly effective when spores having a hydrophobic surface are used as an active ingredient.
  • the vegetable oil, mineral oil, and silicone contained in the herbicide of the present invention float on the surface of water for a long period of time and exert their effects, so that the possibility of contamination of the surrounding water system due to dissolution in water is low, and the application rate The impact on the environment is very small due to the extremely small amount of water.
  • the drug product can be stored for long periods at room temperature.
  • Mineral oils that can be used in the present invention include, but are not limited to, spindle oil, heavy white oil, light white oil, mineral spirit, mineral terpenes, naphthenic oil, paraffin oil, agricultural chemical machine oil, and the like. It is not done.
  • Vegetable oils that can be used in the present invention include soybean oil, rapeseed oil, castor oil, cottonseed oil, palm oil, safflower oil and the like, but are not limited to these.
  • silicone oil or gay oil is generally used. Specifically, silicone oil TSF-45 10 (Toshiba Silicon Corp.), silicone oil SAG-47 (Japan The powers include, but are not limited to, these.
  • the microorganism used in the present invention is not particularly limited as long as it is a microorganism having the ability to control weeds, but it is preferable to use a microorganism belonging to the genus Exiguchi Hiram or the genus Carbraria, and particularly to a microorganism belonging to the Exeguchi Hiram 'Monoceras'. Is preferred.
  • Exercise Hiram Monoceras B026 (Exserohilum monoceras B026) (FERM BP-4215), Exercise Hiram Monoceras B232 (FERM BP-4217), Exercise Noirum Monoceras B263 (Exserohilum monoceras B263) (FERM BP- 4218), Exeronolum monoceras B267 (Exseroi lum monoceras B267) (FERM BP- 4219), Exisero mouth monoceras B276 ) (FERM BP-4220), genus Calvularia (Curvularia lunata) B-261 (FERM BP-4249), genus Calbraria (Curvularia lunata) B-236 (FERM BP-4248), genus Calvularia (Curvularia lunata) var.
  • aeria B-245 (FERM BP-4247) and the like can be exemplified as suitable strains.
  • Conidia and the like can be obtained by culturing the above microorganism on, for example, a potato glucose agar medium, an oatmeal sucrose agar medium, or the like for about 5 to 10 days.
  • the conidiospores of any of the above strains have a hydrophobic surface and are liable to cause dusting in a dry state. However, by formulating according to the present invention, such physical properties are improved and handling becomes easier.
  • the content thereof is 1 ⁇ 10 3 to 1 ⁇ 10 ′ 1 / liter, preferably 1 ⁇ 10 5 to 1 ⁇ liter. It is torr.
  • the content thereof is 1 X 10 5 ⁇ 1 10 1 5 pieces l, preferably 1 X 10 10 ⁇ 1 10 1 2 pieces l.
  • the herbicide of the present invention may further contain various additives, such as bacteria Nitrogen sources (nitrates, ammonia, amino acids, etc.) and carbon sources useful for growth, or substances that promote spore germination (carboxymethylcellulose sodium salt, sodium naphthalene sulfonate formalin condensate, polyethylene glycol, etc.),
  • Nitrogen sources nitrates, ammonia, amino acids, etc.
  • carbon sources useful for growth, or substances that promote spore germination carboxymethylcellulose sodium salt, sodium naphthalene sulfonate formalin condensate, polyethylene glycol, etc.
  • moisturizers polysaccharides such as hyaluronic acid, proteins such as collagen and lecithin, glycerin, oils and fats
  • the composition ratio of both components is as follows: mineral oil is 99.5% by weight or less, preferably 50 to 99.5% by weight, and vegetable oil is 60% by weight or less. And preferably 0.5 to 50.0% by weight.
  • the composition ratio of both components is as follows: mineral oil is 99.5% by weight or less, preferably 85 to 99.5% by weight, and silicone is 15.0% by weight. % By weight, preferably 0.5 to 15.0% by weight.
  • the composition ratio of both components is 99.5% by weight or less of vegetable oil, preferably 85 to 99.5% by weight, and 15.0% by weight of silicone. Hereinafter, it is preferably 0.5 to 15.0% by weight.
  • the composition ratio of mineral oil is 99.5% by weight or less, preferably 50 to 99.5% by weight.
  • Vegetable oil is 60.0% by weight or less, preferably 0.25 to 45.0% by weight, and silicone is 10.0% by weight or less, preferably 0.25 to 5.0% by weight.
  • the herbicidal composition of the present invention is effective against all kinds of weeds that occur in paddy fields, but is effective against grass weeds, and particularly against weeds belonging to the genus Chrysalis, such as Echinacea purpurea, Himeineubie, Hi réelleubie, and Inubiea. .
  • the growth stage of the plant to be weeded is not particularly limited, but it is particularly effective for the early growth stage in which the whole plant is submerged in paddy water. For example, in the case of nobies, the effect on the growth stage of the second leaf stage or less is great.
  • the herbicide of the present invention has no effect on the growth of rice, a useful crop in paddy fields.
  • the method of application is not particularly limited as long as the method can effectively control weeds. However, it is preferable to apply the herbicide directly to a flooded paddy field.
  • the use time of the herbicide of the present invention is not particularly limited. Therefore, it is desirable to use the herbicide in the field after plowing, preferably in the early stage after rice planting.
  • the application amount should be the amount of conidia of Hiram mononoseras 1 ⁇ 10 2 to 1 ⁇ 10 ′ 5 // 10 are, preferably 1 ⁇ 10 5 to 1 ⁇ 10 1 1 // 10 are, and the amount of conidia of Calbraria spp. Is 1 ⁇ 10 4 11 ⁇ 10 19 // 10 R, preferably 1 ⁇ 10 ′ ° to 1 ⁇ 10 13 10 R
  • each of the preparation and the control solution prepared by the above method was sealed in a 2 ml amber tube, 1 ml each, and stored at 25, and 40 ° C.
  • the conidia in a dry state were also stored in an appropriate amount in an ampule tube.
  • sampling was conducted over time to remove the oil-based composition or Triton X-100 solution. (At this time, the surface was washed with hexane to remove the oil attached to the conidia, so the conditions were adjusted.)
  • the surfaces of the conidia removed from Triton X-100 and the conidia stored dry were also washed with hexane.), The conidia were suspended in a 1% glucose solution, and 25 // 1 was dropped on the slide glass.
  • Triton X-100 aqueous solution Store at 4 ° C 0 0 0
  • Spore suspension 25 Store at 5 ° C 0 0 0
  • Process B Example 1 conidia 4 X10 4 amino Ekise mouth Hiram monoceras B026 recovered and dried in the same manner as (4 X.10 8 pieces Z are) a 0.02% Triton X-100 aqueous solution 10 / ⁇ 1 (100 mlZ) and added dropwise.
  • Process D Conidia 4 X10 4 amino Ekise mouth Hiram monoceras B026 dried recovered in the same manner as in Example 1 (4 X10 8 cells Z are), spindle oil, shed we oil, silicone oil (Toshiba Silicone Co. ) Was suspended in an oil composition 10 ⁇ 1 (100 ml / a) blended at a weight ratio of 95: 4: 1, and added dropwise. Treatments A to D were applied to pots that raised 10 seedlings respectively. The growth of Nobies was compared and observed between the pots treated for 3 weeks after the dropping treatment and the untreated pots. At this time, the degree of growth inhibition was determined as a percentage, where 0% was the case where there was no difference from the growth status of the lobster in the untreated pot, and 100% was the case where the growth was completely inhibited. The results are shown in Table 2.
  • the processing date was set to be day 0.
  • Treatment F Cultured, recovered, and dried in the same manner as Exe mouth Hiram Monoceras B026
  • Processing G spindle oil, castor oil, silicone oil (Toshiba Silicone Co., Ltd.) Of the mixture was added dropwise at a weight ratio of 95: 4: 1 to 101 (100 ml Z arel).
  • Treatment H Collected and dried Calbularia sp. B-261 conidia 1 ⁇ 10 6 (1 X 10 '° Z are) are suspended in an oil composition 10 // 1 (100 ml Z are) in which spindle oil, castor oil, and silicone oil (Toshiba Silicone Co., Ltd.) are blended at a weight ratio of 95: 4: 1. , Dripped.
  • paddy soil is used to grow 20 Nobies up to 1.5 to 2 leaf stage, and then placed in a greenhouse at 25 ° C during the day and 22 ° C at night.
  • the above-mentioned pot is submerged in a submerged pool of 75cm x 100cm (75/10000 ares).
  • the water depth is such that all the plants are submerged, and the water depth is about 5cm from the paddy soil surface to the water surface.
  • Predetermined position It was installed in.
  • a total of 4 pots were installed at a distance of 40 cm from the center on the diagonal line.
  • the composition corresponding to each treatment section was applied dropwise to the center point of these pools. After that, the plants were allowed to stand in a greenhouse for 4 weeks, and the individual plant weight of the fly remaining in each pot was measured, and the improvement of the inhibitory effect of conidia on the growth of the fly was studied.
  • the details of each process are as follows.
  • Treatment 2 7.5 ⁇ 10 5 conidiospores (10 8 ares) of Exeraceous Hiram 'Monoceras B026 recovered and dried in the same manner as in Example 1 were converted to a 0.02% Triton X-100 aqueous solution 750 / zl (lOOmlZ ares) , And added dropwise.
  • the day of the dropping treatment was designated as day 0.
  • SR Colby Calculating Synergistic and One lo According to the method of "Antagonistic Response of Herbicide Combinations" Weeds. 15/1, 19 ⁇ ⁇ 7 pp 0-22
  • the expected herbicidal effect of the cells formulated with the oil composition was calculated from the following formula, and this and the actual growth inhibition were calculated.
  • Table 4 the remaining individual fresh weight in other treatments was subtracted from the remaining individual fresh weight in treatment 1 (untreated section) in Table 4, and the ratio of the value to the remaining individual fresh weight in untreated section was expressed as a percentage. It was calculated and defined as the growth inhibitory effect of each treatment.
  • the formulation according to the present invention dramatically improved the effect of inhibiting the growth of weeds caused by plant pathogenic bacteria.
  • the composition according to the present invention spreads over the water surface by dripping at one place in a flooded paddy field, and exhibits an effect uniformly over a wide range. Treatments 1-4 did not affect rice growth at all.

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Description

明糸田 微生物含有除草剤及びその施用方法
発明の技術分野
本発明は、 雑草防除能力を有する微生物と、 植物油、 鉱物油、 シリコーンのう ち少なくとも一成分とを有効成分として含有することを特徴とする除草剤、 及び その除草剤を用いた除草方法に関する。
発明の背景技術
現在利用されている化学除草剤には、 抵抗性雑草の出現、 作物への薬害、 雑草 種の変遷による難防除多年性雑草の増加等、 種々の問題点が存在する。 また環境 保全型農業への関心の高まりから、 雑草の生物的防除へ期待が集まっている。 近 年微生物による雑草防除が検討され、 既にァメリカ合衆国においては柑橘園のガ ガイモ科雑草防除用にその病原微生物である Phytophthora palmivoraの厚膜胞 子を有効成分とした DeVine (Abbott Laboratories社） や水田と大豆圃場のマメ 科雑草防除のために病原微生物 Coll etotri chum gloeosporioides f. sp. aeschynomene の胞子を利用した Collego (Ecogen社） が市販されている。 この 他にも中国ではダイズに寄生するネナシカズラ防除のために Colletotorichum gloeosporioidesを利用した Lu- boa No.2が、 カナダではコムギ等の問題雑草 であるマルバゼニァオイ防除のために Colletotrichum gloeosporioides f . sp. malvaeを有効成分とした BioMal (Pilom Bios社） が各々市販されている。 一般に乾燥可能な胞子であれば容易に粉状の水和剤等として製剤化できるがこ の場合、 使用に際し水などで希釈する必姜があるため、 かなりの労力を要する。 例えば、 Collegoは有効成分である胞子を含有する粉体と、 それを懸濁するため のショ糖を含有する溶液とがセッ 卜で販売されており、 使用時にはこの 2成分を 混合し水で希釈する必要がある。 また、 こうした剤型は粉立ちを引き起こすもの である。 一方、 現在菌体澳縮液の形で商品化されている DeVineには、 Collegoの ような問題点はないが、 長期保存が不可能という問題点がある （Weed Science 34 CSuppl . 0 (1986) : 15〜16) 。
近年、 日本国内においても雑草を宿主とする植物病原菌を利用した微生物除草 剤の開発は盛んに試みられている。 特にノビエ用微生物除草剤の開発が進んでお り、 ノビエの病原菌を単独もしくは化学除草剤原体と混合した形で、 既存の化学 除草剤の剤型に準じて製剤化する試みが提案されている （特開平 4- 226905号、 特 開平 4- 360678号各公報） 。 しかしながら、 これらに記されている剤型は従来の化 学除草剤と同様であり、 散布時の撒きむら、 希釈時の粉立ち等の問題を依然とし て持ち合わせるものと考えられる。
発明が解決しょうとする課題
本発明の目的は、 このような従来の除草剤及び除草方法の有していた問題点を 解決することにあり、 具体的には、 使用時に水に希釈する必要がなく、 かつ保存 性に優れる微生物除草剤を提供することにある。
発明の開示
本発明者等は、 植物油、 鉱物油、 シリコーンといったオイル類からなる組成物 が水田中の雑草の防除に有効であるという知見に基づき、 発明を完成し、 先に出 願を行った （特願平 5-333087号） 。
その後、 本発明者等は、 前記オイル類について更に研究をすすめた結果、 これ らのオイル類中では微生物が長期間生存可能であること、 及びこれらのオイル類 が微生物の有する雑草防除能を飛躍的に向上させることを見いだし、 本発明を完 した。
即ち、 本発明の第一は、 雑草防除能力を有する微生物と、 植物油、 鉱物油、 シ リコーンのうち少なくとも一成分とを有効成分として含有することを特徴とする 除草剤である。 ここで用いる雑草防除能力を有する微生物としては、 ェキセロハ イラム厲又はカルブラリァ厲に属する微生物を挙げることができ、 これらの中で もェキセ口ハイラム ·モノセラスを好適な微生物として例示できる。 また、 対象 とする雑草としては、 ヒェ属の雑草を挙げることができる。
本発明の第二は、 上記記載の除草剤を、 水田に散布することを特徴とする除草 方法である。 具体的な散布方法としては、 水田に直接滴下散布する方法などがあ る 以下、 本発明を詳細に説明する。
本発明は既に市販されている微生物除草剤製品とは異なる組成を有し、 なおか つ本発明に従って製剤化することにより雑草防除能力を有する微生物自体の除草 効果が飛躍的に向上する。 また、 植物油、 鉱物油、 シリ コーンの性質により、 前 記微生物は速やかに水田水面を拡展し、 広範囲にわたり均一に除草効果を発揮す る。 また、 本発明に従って製剤化することにより、 雑草防除能力を有する微生物 をはじめとする各種微生物の長期保存が可能となる。
本発明は、 植物油、 鉱物油、 シリコーンの 3成分のうちの少なくとも 1成分と 雑草防除能力を有する微生物とを有効成分として含有することを特徴とする、 微 生物含有除草剤を提供するものである。 本発明の微生物含有除草剤は、 湛水した 水田水面の 1力所もしくは数力所に直接滴下散布することにより、 これらのオイ ル類の特性によって水面を速やかにかつ非常に広範囲に拡展し、 なおかつ単なる 界面活性剤水溶液による菌体懸濁液に比べてはるかに優れた除草効果を発揮する ものである。 これは、 植物油、 鉱物油、 あるいはシリコーン自体がターゲッ トと する雑草に傷害を与え、 雑草防除能力を有する微生物による効果を助長するため と考えられる。 また、 液状であり直接水面に滴下する剤であるため施用時に水で 希釈する際の粉立ちの危険性が無く、 作業者に対する安全性が非常に高い。 さら にオイルを含有しているため、 特に表面が疎水性である胞子を活性成分として用 いる際に有効である。 さらに、 本発明の除草剤に含有される植物油、 鉱物油、 シ リコーンは長期的に水面を浮遊し効果を発揮するため水中への溶解による周辺水 系の汚染の可能性が低いうえ、 施用量が極少量であるため環境に与える影響は非 常に少ない。 また、 本製剤は常温において長期的な保存が可能である。
本発明において用いることのできる鉱物油としては、 スピンドル油、 ヘビーホ ワイ トオイル、 ライ トホワイ トオイル、 ミネラルスピリ ッ ト、 ミネラルターペン、 ナフテン油、 パラフィン油、 農薬用マシン油等があげられるが、 これらに限定さ れるものではない。
本発明において用いることのできる植物油としては、 大豆油、 菜種油、 ひまし 油、 綿実油、 パーム油、 サフラワー油等があげられる力 これらに限定されるも のではない。 本発明において用いることのできるシリコーンとしては、 一般にシリコーン油 或いはゲイ素油が使用され、 具体的には、 シリ コーンオイル TSF-45卜 10 (東芝シ リコ一ン社） 、 シリコーンオイル SAG-47 (日本ュニカー社） 等が挙げられる力 これらに限定されるものではない。
本発明において用いる微生物としては、 雑草防除能力を有する微生物であれば 特に限定されないが、 ェキセ口ハイラム属又はカルブラリア属に属する微生物を 用いるのが好ましく、 特に、 ェキセ口ハイラム 'モノセラスに属する微生物を用 いるのが好ましい。 具体的には、 ェキセ口ハイラム ' モノセラス B026 ( Exserohilum monoceras B026) (FERM BP-4215) 、 ェキセ口ハイラム · モノ セラス B232 (Exserohilum monoceras B232) (FERM BP- 4217) 、 ェキセ口 ノヽィ ラム · モノ セラス B263 (Exserohilum monoceras B263) (FERM BP- 4218) 、 ェキセロノヽィ ラム · モノセラス B267 (Exsero i lum monoceras B267) ( FERM BP- 4219) 、 ェキセ 口ハイ ラ ム · モ ノ セ ラ ス B276 ( Exserohi lum monoceras B276) (FERM BP-4220) 、 カルブラ リァ属菌 （ Curvularia lunata) B-261 (FERM BP-4249) 、 カルブラリア属菌 (Curvularia lunata) B-236 (FERM BP-4248) 、 カルブラ リア厲菌 (Curvularia lunata var. aeria)B-245 (FERM BP-4247) 等を好適な菌株として例示することができ る。 本発明においては、 これらの微生物の分生胞子を用いるのが好ましいが、 分 生胞子の代わりに子のう胞子、 菌糸片等を利用しても何等差支えない。 分生胞子 等は、 上記微生物を例えば、 バレイシヨブドウ糖寒天培地、 オートミール蔗糖寒 天培地等で 5〜10日間程度培養することにより得られる。 上記のいずれの菌株の 分生胞子とも表面が疎水性で、 乾燥状態では粉立ちを生じ易いが、 本発明に従つ て製剤化することによりこうした物性が改良され取り扱いが容易になる。 本発明 に係わる製剤中でェキセ口ハイラム ·モノセラス分生胞子を利用する場合、 その 含有量は 1 X 103〜 1 X 10' 1個/リ ツ トル、 好ましくは 1 X105〜 1 ^ 個 リツ トルである。 一方、 カルブラリア属菌分生胞子を利用する場合、 その含有量 は 1 X 105〜 1 101 5個 リ ッ トル、 好ましくは 1 X 1010〜 1 101 2個 リ ッ トルである。
本発明の除草剤には、 以上の他に、 必要に応じて各種添加剤、 例えば菌体の生 育に有用な窒素源類 （硝酸塩、 アンモニア、 アミノ酸類等） や炭素源類、 または、 胞子の発芽を促進する物質 （カルボキシメチルセルロースナトリウム塩、 ナフタ リンスルホン酸ナトリウムホルマリン縮合物、 ポリエチレングリコール等） 、 さ らに保湿剤 （ヒアルロン酸等の多糖類、 コラーゲン、 レシチン等のタンパク類、 グリセリ ン、 油脂類等） 等を添加、 使用することは何等差支えない。
本発明においてオイル類として鉱物油と植物油を配合して用いる場合、 両成分 の組成割合は、 鉱物油が 99. 5重量％以下、 好ましくは 50〜99. 5重量％、 植物油が 60重量％以下、 好ましくは 0. 5〜50. 0重量％である。
本発明においてオイル類として鉱物油とシリコーンを配合して用いる場合、 両 成分の組成割合は、 鉱物油が 99. 5重量％以下、 好ましくは 85〜99. 5重量％、 シリ コーンが 15. 0重量％以下、 好ましくは 0. 5〜15. 0重量％である。
本発明においてオイル類として植物油とシリコーンを配合して用いる場合、 両 成分の組成割合は、 植物油が 99. 5重量％以下、 好ましくは 85〜99. 5重量％、 シリ コーンが 15. 0重量％以下、 好ましくは 0. 5〜15. 0重量％である。
本発明においてオイル類として鉱物油、 植物油、 及びシリコーンの 3成分を配 合して用いる場合、 その組成割合は、 鉱物油が 99. 5重量％以下、 好ましくは 50〜 99. 5重量％である。 また、 植物油は 60. 0重量％以下、 好ましくは 0. 25〜45. 0重量 %で、 シリコーンは 10. 0重量％以下、 好ましくは 0. 25〜5. 0重量％である。
本発明の除草用組成物は、 水田に発生するあらゆる雑草に対して効果を発揮す るが、 イネ科雑草、 特にタイヌビエ、 ヒメィヌビエ、 ヒメタイヌビエ、 ィヌビエ 等のヒェ属の雑草に対して有効である。 除草対象とする植物の生育段階について は特に制限はないが、 植物体全体が水田水中に水没した状態にある生育初期のも のに対して特に有効である。 例えば、 ノビエであれば、 2葉期以下の生育段階の ものに対する効果が大きい。 なお、 本発明の除草剤は、 水田における有用作物で あるイネの生育に対しては何等影響を与えない。
本発明の除草剤を実際の水田において施用する場合、 その施用方法は、 雑草を 有効に防除し得る方法であれば特に制限されないが、 湛水下の水田に直接滴下散 布することが望ましい。
本発明の除草剤の使用時期は特に制限されないが、 水没状態の幼植物に対し特 に効果が高いため、 代かき後、 好ましくは田植え後初期に使用するのが望ましい また、 本除草剤を圃場にて施用する場合、 その施用量はェキセ口ハイラム ·モ ノセラスの分生胞子量にして 1 X 102〜 1 X 10' 5個/ /10アール、 好ましくは 1 X 105〜 1 X 101 1個/ /10アールであり、 カルブラリァ属菌の分生胞子量にして 1 X 104〜 1 X 101 9個/ /10アール、 好ましくは 1 X 10' °〜 1 X 1013個 10アールで 実施例
以下で実施例を挙げて本発明を説明する。 但し、 本発明はこれら実施例によつ てなんら制限されるものではない。
〔実施例 1〕 長期保存試験
〔 1〕 胞子懸濁液の調製
ェキセ口ハイラム ·モノセラス B026をポテトデキストロース寒天培地上で培 養し、 形成された分生胞子を回収、 乾燥後、 スピンドルオイル：ひまし油： シリ コーンオイル （東芝シリコーン社製） =95 : 4 ： 1の組成物中に混入させ胞子濃 度 1 xiOVmlの懇濁液を調製した。 なお、 対照として、 Triton X-100 水溶液
(0.02重量％) による胞子懸濁液 （胞子濃度 1 X l07/ml) を同時に調製した。
〔2〕 胞子懸濁液の長期保存
上記の方法で調製した製剤及び対照溶液を各々 1 mlずつ 2 ml褐色ァンブル管中 に封入し 4て、 25て、 及び 40°Cにて保存した。 この際、 乾燥状態の分生胞子も適 当量アンプル管中に封入し保存した。 その後経時的にサンプリングし、 オイルか ら成る組成物あるいは Triton X-100 溶液を除去した後 （この際へキサンで表面 を洗浄することにより分生胞子に付着したオイルを除去したので、 条件を揃える ために Triton X-100 を除去した分生胞子及び乾燥状態で保存した分生胞子の表 面もへキサンで洗浄した。 ） 、 分生胞子を 1 %グルコース溶液中に懸濁し、 湿室 内のスライ ドグラス上に 25// 1 滴下した。 24時間 25 喑所で培養した後、 胞子発 芽率を測定した。 発芽率は顕微鏡下で任意の 50胞子中の発芽胞子数を計測し、 割 合を百分率で表した。 この値の 3反復の平均をとり製剤の長期保存性として評価 した。 結果を第 1表に示す。 第 1表 長期保存試験 製剤 胞子発芽率 （％)
5週保存後 8週保存後 1 2週保存後
Triton X- 100水溶液 4 °C保存 0 0 0 による胞子懸濁液 2 5 °C保存 0 0 0
4 0 °C保存 0 0 0 オイル組成物 4 eC保存 9 5 9 6 9 による胞子懸濁液 2 5 °C保存 9 1 9 8 9
4 0 °C保存 8 2 8 4 7 乾燥胞子 4 °C保存 9 4 9 9 9 3
2 5 °C保存 8 9 9 5 8 4 4 0 °C保存 7 7 2 0 このように、 本発明の除草剤は微生物の長期的な保存に非常に適していること が判明した。 特に保存温度が高温になるほど、 その他の保存方法に比べ良好な胞 子保存性を示した。
〔実施例 2〕 1/10000 アールでのノビエに対する生育阻害効果試験
〔 1〕 ェキセ口ハイラム ·モノセラス分生胞子製剤
lOcmxlOcm (1/10000) のポッ トで水田土を用いてノビエを 1.5葉期程度まで 育苗した後、 ポッ トを湛水し植物体を水没させ、 各ポッ 卜に組成物を滴下し処理 を施した。 各処理の内容は以下のとおりである。
処理 A ： 0.02 Triton X-100 水溶液のみを 10 1 (lOOmlZアール） 滴下した
(無処理区）
処理 B ：実施例 1と同様に回収し乾燥したェキセ口ハイラム ·モノセラス B026の 分生胞子 4 X104 個 （4 x.108 個 Zアール） を 0.02%Triton X-100 水 溶液 10/^ 1 (lOOmlZアール） で懸濁し、 滴下した。
処理 C ： スピンドルオイル、 ひまし油、 シリコーンオイル （東芝シリコーン社）
を重量比 95： 4 ： 1で配合したオイル類組成物を 10 1 (100mlノアー ル） 滴下した。
処理 D ：実施例 1 と同様に回収し乾燥したェキセ口ハイラム ·モノセラス B026の 分生胞子 4 X104個 （4 X108個 Zアール） を、 スピンドルオイル、 ひ まし油、 シリコーンオイル （東芝シリコーン社） を重量比 95 : 4 ： 1で 配合したオイル類組成物 10^ 1 (100ml/アール） で懸濁し、 滴下した, なお、 処理 A〜Dは 10個体ずつ育苗したポッ トに各々施したものである。 滴下処理後 3週間にわたり処理を施したポッ 卜と無処理のポッ 卜との間でノビ ェの生育状態を比較観察した。 その際、 無処理ポッ 卜におけるノビエの生育状況 と差異のなかった場合を 0 %、 生育が完全に阻害された場合を 100%とする百分 率で生育阻害度の判定を行った。 結果を第 2表に示す。
第 2表 1/10000アールスケールでの試験 （ェキセロハイラム ·モノセラス） 処理 生育阻害度 （％)
1週間後 2週間後 3週間後
A 0 0 0
B 5 0 4 0 1 0
C 6 5 5 0 3 0
D 9 0 8 0 8 0
(注） 表中数値は生育阻害度を表す。
処理日当曰を 0日目とした。
無処理のノビエは水上に伸長したのに対し処理を施したポッ トは成長に伴い水 面で本除草剤が付着し水上への伸長が著しく阻害され、 中には植物体全体が壊死 する個体もあった。 また、 本発明に従いオイル類組成物と菌体を混合し製剤化す ることによつて菌体及びォィル類組成物各々単独のノビエ生育阻害効果は飛躍的 に向上することが判明した。 なお、 処理 A〜Dは水田の有用作物であるイネの生 育に何等影響を及ぼさなかった。
〔2〕 カルブラリア属菌分生胞子製剤
上記ェキセ口ハイラム ·モノセラス分生胞子製剤と同様の試験を行った。 各処 理の内容は以下のとおりである。
処理 E ： 0. 02 %Tr i ton X- 100 水溶液のみを lO jw l ( l OOmlZアール） 滴下した c
(無処理区）
処理 F ：ェキセ口ハイラム ·モノセラス B026と同様に培養し、 回収、 乾燥した力
ルブラリァ属菌 B- 261分生胞子 1 X 106個 （ 1 X 10 1 (1個 Zアール） を、 0. 02% Tr i ton X- 100 水溶液 10 1 ( lOOml Zアール） で懸濁し、 滴下 した。
処理 G ： スピンドルオイル、 ひまし油、 シリコーンオイル （東芝シリコーン社） を重量比 95 ： 4 ： 1で配合した液体を 10 1 ( l OOml Zアール） 滴下し 処理 H ：上記と同様に回収、 乾燥したカルブラリァ属菌 B-261分生胞子 1 X 10 6 個 （ 1 X 10 ' °個 Zアール） を、 スピンドルオイル、 ひまし油、 シリコー ンオイル （東芝シリコーン社） を重量比 95： 4 ： 1で配合したオイル類 組成物 10 // 1 ( l OOml Zアール） で懸濁し、 滴下した。
なお、 処理 E〜Hは 5個体ずつ育苗したポッ 卜に各々施したものである。 前記と同様に滴下処理後 3週間にわたり処理を施したポッ 卜と無処理のポッ ト との間でノビエの生育状態を比較観察し、 生育阻害度の判定を行った。 結果を第 3表に示す。
第 3表 1 /10000アールスケールでの試験 （カルブラリア属菌） 処理 生育阻害度 （％)
1週間後 2週間後 3週間後
E 0 0 0
F 1 0 4 0 3 0
G 4 0 5 0 3 5
H 7 0 8 5 8 5
(注） 表中数値は生育阻害度を表す。
処理日当日を 0曰目とした。
ェキセ口ハイラム ·モノセラスの場合と同様に無処理のノビエは水上に伸長し たのに対し処理を施したポッ トは成長に伴い水面で本除草剤が付着し水上への伸 長が著しく阻害され、 中には植物体全体が壊死する個体もあった。 また、 本発明 に従いオイル類組成物と菌体を混合し製剤化することによつて菌体及びォィル類 組成物各々単独のノビエ生育阻害効果は飛躍的に向上することが判明した。 なお、 処理 E〜Hは水田の有用作物であるイネの生育に何等影響を及ぼさなかった。 〔実施例 3〕 ノビエに対する生育阻害効果のスケールァップ試験
l Ocm X 10cm ( 1/10000アール） のポッ 卜で水田土を用いて 20個体のノビエを 1. 5〜2葉期まで育苗した後、 昼間 25°C、 夜間 22°Cの温室内に設けられた 75cm x 100cm (75/10000アール） の湛水状態のプールに前述のポッ トを水没させ、 （水 深は植物体が全て水没する程度で、 水田土面から水面まで約 5 cm。 ) 所定の位置 に設置した。 （各々のプールにおいて対角線上の中心から 40cmの地点に 1ホッ 卜 ずつ合計 4ポッ トを設置した。 ） これらプールの中心点に各処理区に対応する組 成物を滴下施用した。 その後温室内に 4週間放置し各ポッ トに残存するノビエの 個体生重を計測し、 分生胞子のノビエ生育抑制効果の向上性を検討した。 各処理 の内容は以下のとおりである。
処理 1 ： 0.02%Triton X- 100 水溶液のみを 750t 1 (100ml/アール） 滴下した c
(処理区）
処理 2 ：実施例 1 と同様に回収し乾燥したェキセ口ハイラム 'モノセラス B026 の分生胞子 7.5x 105個 （108個 アール） を、 0.02%Triton X-100 水溶液 750 /z l (lOOmlZアール） で懸濁し、 滴下した。
処理 3 ： スピンドルオイル、 ひまし油、 シリコーンオイル （東芝シリコーン社）
を重量比 95： 4 ： 1で配合したオイル類組成物を 75 z i UOmlZァー ル） 滴下した。
処理 4 ：実施例 1と同様に回収し乾燥したェキセ口ハイラム 'モノセラス B026 の分生胞子 7.5X 105個 （108個 アール） を、 スピンドルオイル、 ひ まし油、 シリコーンオイル （東芝シリコーン社） を重量比 95 : 4 ： 1で 配合したオイル類組成物 75 1 (lOmlZアール） で懸濁し、 滴下した。 防除効果の強さ及び拡展性を併せて判定するため、 処理を施した各プールに設 置した 4ポッ ト （中心から 40cmの位置に設置した 4ポッ ト） で残存するノビエの 個体生重の平均値を算出し比較した。 結果は第 4表に示したとおりである。
第 4表 スケールアップ試験 処理 残存個体生重 （ g)
1 9， 2
2 1 1. 0
3 9. 8
4 4. 0
(注） 表中数値は各ブール中の外側 4ポッ トの数値の平均値を示す。
滴下処理日当日を 0日目とした。
これに続き、 オイル類組成物を用いて 剤化することによる菌体のノビエに対 する生育阻害効果の向上性を、 S R Colby ("Calculating Synergistic and 一 l o 一 Antagonistic Response of Herbicide Combinations" Weeds. 15/1, 19ΰ7 pp 0- 22) の方法にて、 次式よりオイル類組成物により製剤化した菌体の予想除草効果 を算出し、 これと実際の生育阻害効果を比較検討した。 第 4表中処理 1 (無処理 区） の残存個体生重から他の処理における残存個体生重を差し引き、 その値の無 処理区における残存個体生重に対する割合を百分率で算出し、 各々の処理におけ る生育阻害効果とした。
E (予想生育阻害効果） =X+Y- XY/100
(Χ=菌体のみ （第 4表における処理 2) の生育阻害効果
Υ=オイル類組成物のみ （第 4表における処理 3 ) の生育 阻害効果 ）
その結果、 処理 2 (生育阻害効果 =ー19.6%) 及び処理 3 (生育阻害効果 = - 6.5 %) の生育阻害効果より導き出される予想生育阻害効果 （即ち処理 4の予 想生育阻害効果） は- 27.4 %となり、 処理 4の実際の生育阻害効果 56.5%と比較 すると、 本発明に従い製剤化することにより菌体の生育阻害効果が飛躍的に向上 することがわかる。
このように、 本発明に従い製剤化することにより、 植物病原菌による雑草の生 育阻害効果が飛躍的に向上することが判明した。 また、 本発明に関わる組成物は 湛水下の水田の 1力所に滴下することにより水面を拡展し広範囲にわたり均一に 効果を発揮するものであることも確認できた。 なお、 処理 1〜4はイネの生育に 何等影響を及ぼさなかった。
発明の効果
本発明により、 雑草防除能力を有する微生物を高い生存率で長期的に保存し、 なおかつ該微生物の雑草防除効果を向上させることが可能となる。

Claims

請求の範囲
1 . 雑草防除能力を有する微生物と、 植物油、 鉱物油、 シリコーンのうち少なく とも 1成分とを有効成分として含有することを特徴とする除草剤。
2 . 雑草防除能力を有する微生物が、 ェキセ口ハイラム属又はカルブラリア属に 属する微生物であることを特徴とする請求項 1記載の除草剤。
3 . ェキセ口ハイラム属に属する微生物が、 ェキセ口ハイラム ·モノセラスであ ることを特徴とする請求項 2記載の除草剤。
4 . カルブラリア属に属する微生物が、 カルブラリア ·ルナ一夕であることを特 徴とする請求項 2記載の除草剤。
5 . 対象とする雑草がヒェ属の雑草であることを特徴とする請求項 1乃至 4記載 の除草剤。
6 . 請求項 1乃至 5のいずれかに記載の除草剤を水田に散布することを特徴とす る除草方法。
7 . 除草剤を湛水下の水田に直接滴下散布することを特徴とする請求項 6記載の 除草方法。
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