UA77935C2 - Композиція вакцини для свиней, спосіб та набір для вакцинації - Google Patents

Композиція вакцини для свиней, спосіб та набір для вакцинації Download PDF

Info

Publication number
UA77935C2
UA77935C2 UA99020959A UA99020959A UA77935C2 UA 77935 C2 UA77935 C2 UA 77935C2 UA 99020959 A UA99020959 A UA 99020959A UA 99020959 A UA99020959 A UA 99020959A UA 77935 C2 UA77935 C2 UA 77935C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
vaccine
plasmid
zeo
fragment
promoter
Prior art date
Application number
UA99020959A
Other languages
English (en)
Russian (ru)
Inventor
Жан-Крістоф Одонне
Аннабель Бушардон
Філіпп Бодю
Мішель Рівьєр
Original Assignee
Меріаль
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Меріаль filed Critical Меріаль
Publication of UA77935C2 publication Critical patent/UA77935C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/102—Pasteurellales, e.g. Actinobacillus, Pasteurella; Haemophilus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/107—Vibrio
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/23—Parvoviridae, e.g. feline panleukopenia virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/295—Polyvalent viral antigens; Mixtures of viral and bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/195—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria
    • C07K14/285—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from bacteria from Pasteurellaceae (F), e.g. Haemophilus influenza
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
    • A61K2039/53—DNA (RNA) vaccination
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • A61K2039/552—Veterinary vaccine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16722—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16711—Varicellovirus, e.g. human herpesvirus 3, Varicella Zoster, pseudorabies
    • C12N2710/16734—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14311—Parvovirus, e.g. minute virus of mice
    • C12N2750/14334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
    • C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
    • C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18611—Respirovirus, e.g. Bovine, human parainfluenza 1,3
    • C12N2760/18622—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
    • C12N2760/00011—Details
    • C12N2760/18011—Paramyxoviridae
    • C12N2760/18611—Respirovirus, e.g. Bovine, human parainfluenza 1,3
    • C12N2760/18634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/10011—Arteriviridae
    • C12N2770/10022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
    • C12N2770/24322—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/24011—Flaviviridae
    • C12N2770/24311—Pestivirus, e.g. bovine viral diarrhea virus
    • C12N2770/24334—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S424/00—Drug, bio-affecting and body treating compositions
    • Y10S424/815—Viral vaccine for porcine species, e.g. swine

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Вакцина для свиней містить плазміду (плазміди), яка (які) включає(ють) і забезпечує(ють) експресію in vivo в клітинах свині-хазяїна послідовності (послідовностей) нуклеїнової кислоти вірусу хвороби Aujeszky, що кодує(ють) білок (білки), вибраний(ні) з групи, що складається з gB, gD та gВ і gD, і фармацевтично прийнятний носій. Також запропоновано спосіб вакцинації свиней та набір.

Description

Опис винаходу
Даний винахід стосується формули вакцини, що дозволяє, зокрема, проводити вакцинацію свиней проти 2 респіраторних патологій і патологій репродукції. Він також стосується відповідної методики вакцинації.
Протягом останніх десятиліть відбулася фундаментальна зміна методів розведення свиней. Загального поширення набуло інтенсивне розведення в закритому просторі, і як наслідок, драматичний розвиток респіраторних патологій.
Симптоми респіраторних патологій свиней звичайно об'єднують під комплексною назвою респіраторного 710 захворювання свиней, із чого випливає велика різноманітність патогенних агентів, що включають як віруси, так ії бактерії і мікоплазми. Головними агентами, що викликають респіраторні порушення, є АсіїпораснШив ріеигорпешйтопіає, вірус безплідності і респіраторного синдрому (РКК), що також називають вірусом таємничої хвороби, вірус хвороби Аціез2Ку (РЕМ) і вірус грипу свиней.
Інші віруси викликають порушення репродуктивної функції що виявляються у виді викиднів, муміфікації 12 зародків і безплідності. Основними з таких вірусів є РКК5, парвовірус і вірус класичної чуми свиней (НСМ).
Крім того, такі порушення можуть викликати віруси РЕМ, грипу свиней і А. Ріеигорпештопіае. Смертність можлива у випадку А. Ріеигорпештопіае, НСМ і РЕМ.
Крім цього, у респіраторному комплексі свиней дуже важливе значення мають взаємодії між мікроорганізмами.
Дійсно, велика частина патогенних бактерій складає звичайну мікрофлору носоглоткових зон і мигдалин молодої тварини. Ці патогени виділяються свиноматкою і часто вдихаються поросятами в перші години життя, коли колостральний імунітет ще не ефективний. Організми, що живуть у верхніх відділах дихальних шляхів можуть поширюватися в нижні відділи, якщо захисні механізми дихальної системи ослаблені впливом попереднього агента, такого як Асііпорасіїшз ріеигорпептопіае або віруси. Інвазія в легені може бути дуже швидкою, зокрема, якщо попередніми патогенами є такі, як Асііпобасіїїиз ріеигорпештопідае, що виділяють сильні с цитотоксини, здатні викликати ушкодження війок клітин дихального епітелію і альвеолярних макрофагів. Ге)
Важливі вірусні інфекції, такі як грип, респіраторні коронавірусні інфекції і вірус Аціез2Ку, можуть відігравати роль у патогенезі респіраторного комплексу разом із бактеріями респіраторного тропізму і мікроплазмами.
Нарешті, деякі агенти впливають одночасно на дихальну і на репродуктивну системи. Також можуть відбутися о взаємодії в плані патології репродукції. Необхідно, отже, подбати про налагодження ефективних превентивних со методів проти головних патогенних агентів, що викликають респіраторні патології репродукції свиней.
Сполучення, які розроблені до цього часу, були одержані на основі інактивованих вакцин або живих вакцин о і у деяких випадках, сумішей таких вакцин. При їхньому застосуванні виникають проблем сумісності ча валентностей і стабільності. Так, потрібно забезпечити одночасно сумісність різних валентностей вакцини, як по відношенню різних антигенів, що використовуються, так і по відношенню самих сумішей, зокрема, якщо - використовують разом інактивовані вакцини і живі вакцини. Також виникає проблема зберігання таких комбінованих вакцин і їхньої нешкідливості, зокрема, у присутності добавок. Ці вакцини звичайно досить дорогі. У заявках УМУО-А-9011092, УУО-А-9319183, МУО-А-9421997 і МУО-А-9520660 описане використання « нещодавно розробленої технології полінуклеотидних вакцин. Відомо, що в цих вакцинах використовують плазміду, 50 що забезпечує в клітинах хазяїна експресію вбудованого антигена. Були запропоновані всі шляхи введення З с (внутрішньобрюшинний, внутрішньовенний, внутрішньом'язовий, підшкірний, внутрішньошкірний, через слизову і
І» т.д.). Також можуть бути використані різні засоби вакцинації, такі як ДНК, що вміщена на поверхню часток золота і разпорошується таким чином, що вона проникає в шкіру тварини |Тапд і ін., Маїшге 356, 152-154, 19921, і рідиннострумінні упорскувачі, що дозволяють здійснити трансфекцію одночасно в шкіру, у м'язи, у жирові тканини і у тканині молочної залози (Ригій і ін.. Апа)уїіса! Віоспетпівігу, 205. 365-368, 19921). це. У полінуклеотидних вакцинах можна використовувати як неодягнені ДНК. так і ДНК, наприклад, у складі -І ліпосом і катіонних ліпідів.
ЇМ-Е Ге Ройег і ін. (бесопа Іпіегпайопа! Зутровішт оп їйе Егадісайоп ої Аціеєз2куз Оівеазе (рзецдо о габіев) Мігиз Ацдиві бій їш 8 1995 Сореппадеп, ЮОептагк) і М. Мопіевї і ін (Наукові дні Кафедри Патології со 20 тварин. ІМКА-ЕММ. Ліонськая Державна Ветеренарна школа. 13-14 грудня 1994. Ліон, Франція)) здійснили спробу вакцинації свиней проти вірусу хвороби Аціез2Ку за допомогою плазміди. що забезпечує експресію гена дО під сл контролем сильного промотору, пізнього мажорного промотору аденовірусу типу 2. Незважаючи на хороший рівень антитільної відповіді, не було виявлено встановлення захисту. Однак, гарні результати у відношенні захисту були зафіксовані після зараження свиней рекомбінантним аденовірусом, в який був вбудований ген дО і 29 той же промотор, що доводить, що наявність глікопротеїну ЗО достатньо для встановлення захисту у свиней.
ГФ) Практика минулого не дала ніяких результатів у відношенні встановлення захисту у свиней методом полінуклеотидної вакцинації. о Завданням винаходу є розробка формули полівалентної вакцини, що дозволяє здійснити вакцинацію свиней проти певного числа патогенних агентів, що викликають, зокрема, респіраторні патології і/ або патології 60 репродукції. Іншою метою винаходу є розробка такої формули вакцини, що сполучить різні валентності, при збереженні всіх необхідних критеріїв сумісності і стабільності валентностей.
Іншою метою винаходу є розробка такої формули вакцини, що дозволяє сполучити різні валентності в одному носії. Іншою метою винаходу є розробка такої формули вакцини, яка була б простір в застосуванні і не була б дорогою. бо Ще одною метою винаходу є розробка формули вакцини і методики вакцинації свиней, яка дозволяє домогтися встановлення високоефективного довгострокового захисту, у т.ч. полівалентного, при нешкідливості і відсутності відходів. Таким чином, об'єктом винаходу є формула вакцини, зокрема, проти респіраторних патологій і/ або патологій репродукції свиней, що включає щонайменше З валентності полінуклеотидної вакцини,
Кожна з яких включає плазміду, що містить і (забезпечує його експресію іп мімо в клітинах хазяїна) ген однієї валентності патогена свиней, причому ці валентності обирають із групи, представленої вірусом хвороби Аціез2Ку (вірус РЕМ або псевдосказу | вірусом грипу свиней (5ІМ), вірусом таємничої хвороби свиней (вірус РАК), вірусом парвовірозу (вірус РЕМ), вірусом класичної чуми свиней (вірус НСМ або Нод Споїйега мігив) і бактерією, що викликає актинобацильоз (А. ріеигорпеитопіаеє), а плазміди містять для кожної валентності один або декілька 7/0 "енів, обраних із групи, поданої 98 і 90 для вірусу хвороби Аціез2Ку, НА, МР, М для вірусу грипу свиней, ОКЕ5 (Е), ОКЕЗ, ОКЕ 6 (М) для вірусу РКК5, МР для вірусу парвовірозу. Е1, Е2 для вірусу класичної чуми свиней і архі, арі! ії архіїЇ для А. ріеигорпештопіае.
Під валентністю в рамках цього винаходу розуміють щонайменше один антиген, шо забезпечує захист проти вірусу розглянутого патогена, причому валентність може містити в якості підвалентності один або декілька 7/5 Змінених природних генів одного або декількох штамів розглянутого патогена. Під геном патогенного агенту розуміють не тільки повний ген, але і різні нуклеотидні послідовності, включаючи фрагменти, що зберігають здатність індукувати захисну відповідь.
У поняття гена входять нуклеотидні послідовності, еквівалентні в точності описаним у прикладах, тобто різні, але не кодуючі один і той самий протеїн послідовності. У нього також входять нуклеотидні послідовності інших штамів розглянутого патогена, що забезпечують перехресний захист або специфічний захист від штаму або групи штамів. В нього також входять нуклеотидні послідовності, що були змінені для полегшення експресії іп мімо в організмі тваринного хазяїна, але кодуючі той же протеїн.
Краще, формула вакцини за винаходом включає валентності Аціез2Ку і грипу свиней до яких можуть бути додані інші валентності, обрані, переважно, із валентностей РККЗ і А. ріеигорпешйтопіае (актинобацильоз). сч об Можна додати інші валентності, обрані І валентностей парвовірозу і класичної чуми свиней.
Можливі, зрозуміло, усі комбінації валентностей. Однак, у рамках винаходу, перевагу віддають валентностям о);
Аціез2Ку і грипу свиней, вірусу РККЗ і А. Ріеигорпейтопіає. Для вакцинації, спрямованої більш конкретно проти респіраторних патологій у свиней, перевагу при виборі валентностей віддають Аціез2Ку, грипу свиней, РАКЗ і актинобацильозу. ю зо Для вакцинації, спрямованої конкретно проти патологій репродукції, валентності вибирають, переважно, із
РЕК, парвовірозу, класичної чуми свиней і Аціез2Ку. У відношенні валентності Аціез2кКу можна використовувати о один із генів ОВ і 90. Краще, використовують обидва гени, які у цьому випадку, вбудовують у різні плазміди Ге! або в одну плазміду.
У відношенні валентності грипу свиней, використовують, переважно, гени НА і МР. Можна використовувати ї-
Зв ОДИН із цих двох генів або обидва гени одночасно, вбудовані в різні плазміди або в одну плазміду. Переважно, ї- в одній вакцині сполучають послідовності НА більше одного штаму вірусу грипу, зокрема, штамів, що зустрічаються в даній місцевості. На відміну від цього, МР забезпечує перехресний захист і, отже, можна обмежитися використанням послідовності одного єдиного штаму вірусу.
У відношенні валентності РККЗ використовують, переважно, гени Е і ОКЕЗ або, також, М. Можна «
Використовувати ці гени окремо або в комбінації; у випадку комбінації, гени можна вбудовувати в окремі /-) с плазміди або в плазміди, що комбінують два або три з цих генів. Вигідно використовувати в одній вакцині гени, що походять від принаймні двох штамів, зокрема, від одного європейського штаму і від одного американського )» штаму.
У відношенні валентності класичної чуми свиней можна використовувати один із генів Е1 і Е2 або гени Е1 і
Е2 разом. В двох різних плазмідах або, можливо, в одній плазміді. У відношенні валентності актинобацильозу, -І можна використовувати один із трьох вище названих генів або комбінацію 2 або З із цих генів, у різних плазмідах або в складі змішаних плазмід, щоб забезпечити захист проти різних серотипів А. Ріеигорпетопіаеє. В - антигенах арх І, ІІ ї ШІ можна змінити кодуючі послідовності, щоб одержати нетоксичні антигени, зокрема, як со зазначено в прикладах.
Об'єм дози формули вакцини за винаходом може складати, у цілому, від 0,1 до 1Омл, і зокрема, від 1 до бмл о для вакцинації при внутрішньом'язовому введенні. сп Доза складає від 1Онг до мг, краще, від 10Онг до 50Омкг, ще краще - від їмкг до 250мкг на кожний тип плазміди.
Використовують, краще, неодягнені плазміди, просто вміщені у вакцинуючий носій, яким звичайно є фізіологічний розчин (0,995 Масі), ультрачиста вода, буфер ТЕ і т.п. Можна використовувати, зрозуміло, будь-які форми полінуклеотидних вакцин, описані в практиці минулого.
Ф; Кожна плазміда містить промотор, здатний забезпечити експресію залежного від нього гена в клітинах ка хазяїна. Таким промотором є сильний еукаріотичний промотор, і зокрема, ранній промотор цитомегаловірусу
СМУ-Е, що походить від людини або миші, або, можливо, від іншої тварини, такої як пацюк, свиня, морська бо свинка.
Загалом, промотор може бути як вірусного, так і клітинного походження. У якості вірусного промотора можна назвати ранній або пізній промотор вірусу 5М 40 або промотор І ТК вірусу Саркоми Руса. Це може бути також промотор вірусу, від якою походить ген. наприклад, власний промотор гена.
У якості клітинного промотору можна назвати промотор гена цитоскелету, наприклад, промотор десміну 65 ІВоїтопі і ін., доигпаІ! ої З!иртісгозсоріс Суюіоду апа Раїйоїїду, 1990, 22. 117-122; ії ЯНЕМІИІМ їі ін.. СЕМЕ, 1989, 78, 243-254) або промотор актину. Якщо одна плазміда містить декілька генів, вони можуть знаходитися в одній одиниці транскрипції або в двох різних одиницях. Комбінація різних валентностей вакцини за винаходом може бути отримана, переважно, змішуванням полінуклеотидних. плазмід, що забезпечують експресію одного або декількох антигенів кожної валентності. але можна також здійснити експресію антигенів декількох валентностей
За допомогою однієї плазміди.
Ще одним об'єктом винаходу є формули одновалентної вакцини, що включають одну або декілька плазмід, що кодують один або декілька генів одного з вірусів, обраних із групи, поданої РЕМ, РКК5, РРМ, НСМ Її А.
Ріеигорпештопіає, причому гени такі, як описано вище. За винятком одновалентного характеру, ці формули можуть мати вище перераховані характеристики в тому, що стосується вибору генів, їхніх комбінацій, композицій 70 плазмід, об'ємів доз, доз і т.д. Формули одновалентної вакцини можуть бути використані (ї) для одержання формули полівалентної вакцини, як вона описана вище, (ії) в індивідуальному порядку, проти конкретної патології, (її) в сполученні з вакциною іншого типу (суцільної живої або інактивованої, рекомбінантної, субодиничної), проти іншої патології або (ім) у якості вторинної вакцини після вакцини, описаної нижче
Дійсно, ще одним об'єктом цього винаходу є використання однієї або декількох плазмід за винаходом для 7/5 одержання вакцини, призначеної для вакцинації свиней, первинновакцинованих за допомогою першої, звичайної, вакцини з числа тих, що використовувалися в практиці минулого, а саме, обраної з групи, представленої цілісною живою вакциною, цілісною інактивованою вакциною, субодиничною вакциною рекомбінантною вакциною, причому ця перша вакцина (одновалентна або полівалентна. несе (тобто містить або забезпечує його експресію) один або декілька антигенів, що кодуються однією або декількома використовуваними плазмідами, або антигенів, що забезпечують перехресний захист. Заслуговує на увагу той факт, що полінуклеотидна вакцина спричиняє сильну дію в якості вторинної вакцини, що виявляється в посилені імунної відповіді і у встановленні довгострокового імунітету.
В цілому, вакцини для первинної вакцинації можуть бути обрані з числа вакцин, запропонованих для продажу різними виробниками ветеринарних вакцин. Ще одним об'єктом винаходу є набір для вакцинації, у який входять с вакцина для первинної вакцинації, як вона описана вище, і формула вакцини за винаходом для використання в якості вторинної вакцини. Винахід також стосується формули вакцини за винаходом з прикладеною до неї о інструкцією, у якій зазначене використання цієї формули для вторинної вакцинації після первинної вакцинації як вона описана вище.
Також об'єктом цього винаходу є методика вакцинації свиней проти респіраторних патологій і/ або о репродукції свиней, що включає введення ефективної дози формули вакцини як вона описана вище. Ця методика вакцинації включає введення однієї або декількох доз формули вакцини, причому ці дози можуть бути введені о послідовно через короткі проміжки часу і/ або послідовно через тривалі проміжки часу. Ге»)
Формули вакцини за винаходом можуть бути введені, у рамках даної методики вакцинації, різними шляхами введення, запропонованими в практиці минулого для полінуклеотидної вакцинації, і за допомогою будь-якої в
Відомої техніки введення. Зокрема, можна використовувати вакцинацію внутрішньошкірним шляхом задопомогою / р. рідкострумінного, краще, багатострумінного упорскувача, і зокрема, упорскувача 5 упорскуючою насадкою, що має декілька отворів, зокрема, від 5 до б отворів, як в апарат і Рід|їех що випускається компанією Епадозсоріїс,
Ї аопз, Франція. Об'єм дози при використанні такого апарату складає, переважно, від 0,1 до 0,Умл, зокрема, від 062 до О,бмл, краще, від 0,4 до О,б5мл, причому даний об'єм може бути введений за один або декілька разів, « 70 переважно, за два рази. ш
Гані Нарешті, об'єктом винаходу є методика вакцинації, що полягає в тому, що проводять первинну вакцинацію, як вона описана вище і вторинну вакцинацію формулою вакцини за винаходом. Відповідно до кращої форми )» здійснення способу за винаходом, спочатку тварині вводять ефективну дозу вакцини класичного типу, зокрема, інактивовану, живу, ослаблену або рекомбінантну, або субодиничну вакцину таким чином, щоб забезпечити первинну вакцинацію, і, через, переважно, 2-6 тижнів, вводять полівалентну або одновалентну вакцину за -і винаходом.
Винахід також стосується методики одержання формул вакцини, а саме, до одержання валентностей і їхніх 7 сумішей, як випливає з даного опису. (Те) Далі іде більш детальний опис винаходу за допомогою способів здійснення винаходу з посиланням на малюнки додатку. о Фігура Мо1: Плазміда рУКк1012 с Фігура Мо2: Послідовність гена РЕМ 98 (штам МІАЗ)
Фігура Ме3: Конструкція плазміди рАВО90
Фігура Ме4: Послідовність гена РЕМ 9 (штам МІАЗ)
Фігура Моб: Конструкція плазміди рРРВО98
Фігура Моб: Послідовність гена грип свиней НА (штам НІ М1)
Ф, Фігура Мо7: Конструкція плазміди рРВ143 ко Фігура Ме8: Послідовність гена грип свиней МР (штам НІ М1)
Фігура Ме9: Конструкція плазміди рРРВ142 во Фігура Мо10: Послідовність гена грип свиней НА (штам НЗ М2)
Фігура Ме11: Конструкція плазміди рРВ144
Фігура Ме12: Послідовність гена грип свиней МР (штам НЗ М2)
Фігура Ме13: Конструкція плазміди рРРВ132
Фігура Мо14: Плазміда рАВО25 65 Фігура Ме15: Плазміда рАВОО1
Фігура Ме16: Плазміда рАВО9!1
Фігура Ме17: Плазміда рАВО92
Фігура Мо18: Плазміда рАВО04
Фігура Ме19: Плазміда рАВОо69
Фігура Мо20: Плазміда рАВОб1
Фігура Мо21: Плазміда рРВ162
Фігура Мо22: Плазміда рРВ163
Фігура Мо23: Плазміда рРВ174
Фігура Мо24: Плазміда рРВ189 70 Фігура Мо25: Плазміда рРВ190
Список послідовностей ЗЕО ІО Мо
ЗЕО ІЮО Мо1: Послідовність гена РЕМ 98 (штам МІАЗ)
ЗЕО ІЮ Мо2: Олігонуклеотид АВ166
ЗЕО ІЮ Мо3: Олігонуклеотид АВ167
ЗЕО ІЮ Мо4: Олігонуклеотид АВ168
ЗЕО ІЮ Моб: Олігонуклеотид АВ169
ЗЕО ІО Моб: Послідовність гена РЕМ 90 (штам МІАЗ)
ЗЕО ІЮ Мо7: Олігонуклеотид РВ101
ЗЕО ІЮ Мо8: Олігонуклеотид РВ102
ЗЕО ІЮ Мо9: Олігонуклеотид рВ107
ЗЕО ІЮ Мо10: Олігонуклеотид РВ108
ЗЕО ІЮО Мо11: Послідовність гена грип свиней НА (штам НІМІ)
ЗЕО ІЮ Мо12: Олігонуклеотид РВО97
ЗЕО ІЮ Мо13: Олігонуклеотид РВО98 с
ЗЕО ІЮО Мо14: Послідовність гена грип свиней МР (штам НІМІ)
ЗЕО ІЮ Мо15: Олігонуклеотид РВО95 о
ЗЕО ІЮ Мо16: Олігонуклеотид РВО9б
ЗЕО ІЮО Мо17: Послідовність гена грип свиней НА (штам НЗМ2)
ЗЕО ІЮ Мо18: Послідовність гена грип свиней МР (штам НЗМ2) ю зо ЗЕО ІЮ Мо19: Олігонуклеотид АВОБ55
ЗЕО ІЮ Мо20: Олігонуклеотид АВОБ5б ме)
ЗЕО ІЮ Мо21: Олігонуклеотид АВОО1 б
ЗЕО ІЮ Мо22: Олігонуклеотид АВО02
ЗЕО ІЮ Мо23: Олігонуклеотид АВ170 -
ЗЕО ІЮ Мо24: Олігонуклеотид АВ171 М
ЗЕО ІЮ Мо25: Олігонуклеотид АВ172
ЗЕО ІЮ Мо26: Олігонуклеотид АВ173
ЗЕО ІЮ Мо27: Олігонуклеотид АВО07
ЗЕО ІЮ Мо28: Олігонуклеотид АВО10 «
ЗЕО ІЮ Мо29: Олігонуклеотид АВ126б ш с ЗЕО ІЮ Мо30: Олігонуклеотид АВ127
ЗЕО ІО Мо31: Олигонуклеотид АВІ118 )» ЗЕО ІО Мо32: Олігонуклеотид АВ119
ЗЕО ІЮ Мо33: Олігонуклеотид РВ174
ЗЕО ІЮ Мо34: Олігонуклеотид РВ189 -І ЗЕО ІЮ Мо35: Олігонуклеотид РВ190
ЗЕО ІО Мо36: Олігонуклеотид РВ175 - ЗЕО ІО Мо37: Олігонуклеотид РВ176б
Ге) ЗЕО ІЮ Мо38: Олігонуклеотид РВ191
ЗЕО ІЮ Мо39: Олігонуклеотид РВ192 і ЗЕО ІЮ Мо40: Олігонуклеотид РВ177 сп ЗЕО ІЮ Мо41: Олігонуклеотид РВ278
ЗЕО ІЮ Мо42: Олігонуклеотид РВ279
ЗЕО ІЮ Мо43: Олігонуклеотид РВ280
ЗЕО ІЮ Мо44: Олігонуклеотид РВ307
ЗЕО ІЮ Мо45: Олігонуклеотид РВЗОЗ
Ф) ЗЕО ІЮ Мо46: Олігонуклеотид РВЗОб ка ЗЕО ІЮ Мо47: Олігонуклеотид РВ304
ЗЕО ІЮ Мо48: Олігонуклеотид РВЗО5 во Приклади
Приклад 1: Культура вірусів
Віруси культивують на відповідній системі клітин до прояву цитопатичного ефекту. Системи клітин, що використовуються для кожного вірусу, добре відомі фахівцям. Коротко кажучи, клітини, чутливі до використаного вірусу, що культивуються в мінімальному необхідному середовищі Ігла (середовище "МЕМ") або в іншому 65 відповідному середовищі, заражають досліджуваним вірусним штамом, використовуючи множинність зараження 1.
Інфіковані клітини інкубують при 372С протягом часу, що необхідний для прояву повного цитопатичного ефекту ( у середньому 36 годин).
Приклад 2: Культура бактерій і екстракція бактеріальної ДНК
Штами Асііпорасіїййз ріеигорпештопіае культивують як описано А.Кусгой і ін. У Сеп. Місгобіо!Ї. 1991, 137, 561-568). ДНК із великою молекулярною масою (хромосомна ДНК) була отримана за стандартними технологіями, описаними .).ЗатбргоокК і ін. |МоїІесшаг Сіопіпд: А Іарогагу Мапиаім. 2 видання. СоЇй бргіпд
Нагбог І арогайфогу, Соїд Зргіпд Нагрог "Мем/ Могк. 1989).
Приклад 3: Екстракція геномних вірусних ДНК
Після культивування, збирають зруйновані клітки і їхні плаваючі на поверхи уламки, вірусну суспензію 7/0 Чентрифугують при 10009 ї н42С протягом 10 хвилин, щоб видалити уламки клітин. Вірусні частинки осаджують ультрацентрифугуванням при 4000009 і 42С протягом 1 години. Осад збирають у мінімальному об'ємі буферу (Ттіз 10мММ, ЕОТА 1мм; рН 8,0). Цю концентровану вірусну суспензію обробляють протеїназою К (10Омкг/мл кінц.) в присутності натрійдодецілсульфату (505) (0,595 кінц.) протягом 2 годин при 37 С. Потім вірусну ДНК екстрагують сумішшю фенол/ хлороформ, потім преципітують 2 об'ємами абсолютного етанолу. Через ніч при 7125-2090, ДНК центрифугують при 100009 і 442С протягом 15 хвилин. Осаджену ДНК висушують, потім збирають у мінімальному об'ємі стерильної ультрачистої води. Після цього вона може бути розщеплена рестрикційними ферментами.
Приклад 4: Ізолювання геномних вірусних РНК
Віруси, що містять РНК, очищали за добре відомими фахівцям технологіями. Потім ізолювали РНК геному кожного вірусу, використовуючи техніку екстракції "тіоціонат гуанідію/фенолхлороформ", що описана
ІР.Спотсгупзкі і М.Зассепі (Апаї!.Віоспет. 1987, 162, 156-159).
Приклад 5: Технології молекулярної біології
Всі плазмідні конструкції були отримані з використанням стандартних технологій молекулярної біології, описаних |У. ЗатбргооК і ін. (МоїІесшаг Сіопіпд. А Іарогаїгу Мапиаі. 2 видання. Соїй Зргіпд Нагрог с | арогаюгу. Соїд Зргіпд Нагрог Мем/ Могк. 1989)). Усі рестрикційні фрагменти, що були використані в цьому о винаході, ізолювали, використовуючи набір Сепе-сієвап (ВІО 101 Іпс. І а доїа. СА).
Приклад 6: Технологія КТ-РСК
Специфічні олігонуклеотиди ( що містять на своїх б'кінцях сайти рестрикції для полегшення клонування розширених фрагментів) були синтезовані таким чином, що вони цілюом охоплюють кодуючі ділянки генів, які о повинні бути розширені (див. Специфічні приклади). Реакцію зворотної транскрипції (ЕТ) і розширення в ланцюзі с полімеразою (РСК) проводили за стандартними технологіями (У. ЗатбргооК (МоіІесшіаг Сіопіпд: А І арогафгу
Мапциаї. 2 видання. Соїд Зргіпд Нагброг І арогаїогу. Соїд Зргіпд Нагрог. Мем Хогк. 1989))Ї. Кожну реакцію КТ-РСК ме) проводили з парою специфічних амплімерів, використовуючи в якості матриці екстраговану геномну вірусну РНК. ке
Розширену комплементарну ДНК екстрагували сумішшю фенол/хлороформ/ізоаміловий спирт (25:24:1) перед
Зо розщепленням рестрикційнними ферментами. ї-
Приклад 7: Плазміда рук1012
Плазміда рук1012 (Фігура Мо1) була отримана при Місаї! Іпс. Зап Оівдо, СА. ОА. Її конструкція була описана в (У.Напікка і ін. (Нитап Сепе Тнегару. 1996, 7, 1205-1217)|. «
Приклад 8: Конструювання плазміди рАВОЗО (ген РЕМ 98)
Плазміду рРК 2.15 |М.Кімієге і ін. У.МігоЇ. 1992. 66. 3424-3434| розщепили за допомогою Араї і Маеєї, щоб З с визволити фрагмент Ара!-Маеї (2665 рб) (фрагмент А), що містить ген, кодуючий глікопротеїн 98 вірусу хвороби у» Аціезг2Ку (Штам МІАЗ) (Фігура Мо2 ії БЕО ІЮ Мо 1).
Гібридизацією наступних 2 олігонуклеотидів:
АВ166 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мог)
БбАТОСССОСТОСТООСОСТСТІтооСсосСоСоссС 3 - АВ167 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо3) -І БАССТСТАСОООСОАССАССОССАСААДАССоСОоС ОЗ фрагмент (33 рр), що містить послідовність гена 90, від ініціального кодону АТО до сайта Араї, був ік перетворений з утворенням сайта Рзї! на 5' (фрагмент В). 2) 20 Гібрідізацією наступних 2 олігонуклеотидів:
АВ168 (45 тег) (ЗЕО ІЮ Мо4) сл БОБСАСТАССАВСОССТООАСАОСОАОБАССССОАСОСССТОТАвОо ШСЗ
АВ169 (49 тег) (ЗЕО ІО Моб)
БСАТСССТАСАСООСОТСОбОСТоСТоОСТСТоОАвоСОосСТООТАСТосСС С 59 фрагмент (45 рр), що містить послідовність гена 90. від сайта Має! до стопуючого кодона ТАС був
ГФ) перетворений з утворенням сайта Ватні на 3' (фрагмент С). Фрагменти А, В і С разом зшили з вектором рУК1012 юю (приклад 7. попередньо розщепленим за допомогою Рзії і Ватні, і одержали плазміду рАВО9О (7603 рБ) (Фігура
МоЗ).
Приклад 9: Конструювання плазміди рРВО98 (ген РЕМ д90) 6о Плазміду рРК29 |М.Кіміеге і ін. У.МігоЇ. 1992, 66, 3424-3434| розщепили за допомогою зЗаї! і Ва, щоб визволити фрагмент Заї-ВаП! (711 р) (фрагмент А), що містить 3-кінець гена, що кодує глікопротеїн дО вірусу хвороби Аціез2Ку (Штам МІАЗ) (Фігура Мо4 і ЗЕО ІО Мо 6).
Плазміду рРРК29 розщепили за допомогою Есо47ПІ і ЗаїЇ, щоб визволити фрагмент Есо47ПІ-Заї|! (498 рр), що містить 5'-кінець гена, що кодує глікопротеїн 90 вірусу хвороби Аціез2Ку (Штам МІАЗ) (фрагмент В). бо Гібридизацією наступних 2 олігонуклеотидів:
РВ101 (15 тег) (ЗЕО ІО Мо7)
БСАТОСТОСТСОСАСС 3
РВ102 (19 тег) (ЗЕО ІО Мов)
БОСТОСОАССАССАТСТОСА 3 фрагмент (55 рБб), що містить послідовність 5' гена 90, від ініціального кодона АТО до сайта Есо47|І, був перетворений з утворенням сайта Рзії на 5' (фрагмент С). Після очищення, фрагменти А, В і С разом були зшиті з вектором рукК1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою Рзії і ВаїйІЇ, і одержали плазміду рРВО98 (6076 рБб) (Фігура Моб). 70 Приклад 10: Конструювання плазміди рРВ143 (ген Грипу свиней НА штам НІМІ)
За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу грипу свиней (штам 5ІМ НІМІ "ЗМУ", отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами:
РВ107 (З32тег) (ЗЕО ІЮ Мо9)
Б"'СТТСТОСАССАСССООСАССААААССАСооСА ОЗ
РВ108 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо10)
БАТТОСООССОСТАСТАСАААСААОСОСТО ТТ 3 щоб точно ізолювати ген, який кодує протеїн НА вірусу ЗІМ НІМІ (фігура Моб ії 5ЕО ІЮО М 11), у формі фрагменту РОК (1803 рб). Після очищення, цей фрагмент зшили з вектором РСКІІ-прямої (Інвітроген МоК2000-01), щоб одержати вектор рРРВ137 (5755 рб). Вектор рРРВ137 розщепили за допомогою ЕсокМ і Моїї, щоб визволити фрагмент ЕсокМ-Мої! (1820 рбБ), що містить ген НА. Потім цей фрагмент зшили з вектором РМУК1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою ЕсокМп Мої, і одержали плазміду рРВ 143 (6726 рб) (фігура Мо7).
Приклад 11: Конструювання плазміди рРВ142 (ген Грипу свиней МР штам НІМІ)
За технологією з прикладу 6 провели реакцію. КТ-РСК із РНК геному вірусу грипу свиней (штам 51 НІМ "5МУУ), отриманої за технологією, описаною в прикладі 4, і такими олігонуклеотидами: сч
РБО97 (36 тег) (ЗЕО ІЮ Мо12)
БССОБТСБАССООБАТААТСАСТСАСТОАСТОАСАТС 0 3 і)
РВО98 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо13)
БТТОСООССОСТОТАСААДАСААСОСТАТТТТТСТ З щоб точно ізолювати ген, який кодує протеїн МР ІМ НІМІ (фігура Мов ЗЕО ІЮО Мо14), у формі фрагменту ю зо Зай-Мой. Після очищення, продукт КТ-РСК (1566 рБ) зшили з вектором РСКІІ-прямої (Інвітроген МоК2000-01), щоб одержати вектор рРВ127 (5519 рі) Вектор рРРВ127 розщепили за допомогою заї| і Мої!, щоб визволити фрагмент о заїІ-Мок (1560 рБ), що містить ген МР. Ге!
Потім цей фрагмент зшили з вектором рУВ.1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою заї і
Мої. і одержали плазміду рРВ142 (6451 рб) (фігура Мо9) ї-
Приклад 12: Конструювання плазміди рРВ144 (ген грипу свиней НА штам НЗМ2) ї-
За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу грипу свиней (штам 5ІМ НЗМ2 Согевз ди Мога 1987), отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами:
РОО095 (31 тег) (ЗЕО ІЮ Мо15)
БСТТСТОСАСОСАСООСАТААТТСТАТСААСС З «
РВО96 (36 тег) (ЗЕО ІЮ Мо16) шв с БТТОСООССОСААСОСТОТТТТТААТТАСТААТАТАС З щоб точно ізолювати ген, який кодує протеїн НА вірусу ЗІМ НЗМ2 (Фігура Мо10 ії 5ЕО ІО Мо17), у формі )» фрагменту Рзі-МоїЇ. Після очищення, продукт КТ-РСК (1765 рЬ) зшили з вектором РСКІІ-прямої (Інвітроген
МоК2000-01), щоб одержати вектор рРВ120 (5716 рб).
Вектор рРВ120 розщепили за допомогою Мої, щоб визволити фрагмент МоїйІ-Маї! (1797 рр), що містить ген НА. -І Потім цей фрагмент зшили з вектором руУкК1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою Мої!), і одержали плазміду рРВ144 (6712рЬ), що містить ген НА НЗМ2 у нормальній орієнтації в порівнянні з промотором
Ш- (Фіг. Мо11).
Ге) Приклад 13: Конструювання плазміди рРВ132 (ген грипу свиней МР штам НЗМ2)
За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу грит свиней (штам ЗІМ НЗМ2 Соїез о ди Мога 1987). що отримана за технологією, описаною в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами: с РВО97 (36 тег) (ЗЕО ІЮ Мо12)
БССОБТСБАССООБАТААТСАСТСАСТОАСТОАСАТС 0 3
РВО98 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо13)
БТТОСООССОСТОТАСАДААСААСОСТАТТТТТСТ 3 щоб точно ізолювати ген. що кодує протеїн МР вірусу ЗІМ НЗМ2 (Фігура Мо12 і ЗЕО ІО Мо18), в формі фрагменту іФ, заїІ-МоїЇ. Після очищення, продукт КТ-РСК (1564 рр) зшили з вектором РСКІІ-прямої (Інвітроген МоК2000-01), щоб ка одержати вектор рРРВ123 (5485 рб). Вектор РРВ123 розщепили за допомогою гаї! і Моїї, щоб визволити фрагмент заї! ї Мой! (1558 рр), що містить ген МР. Потім цей фрагмент зшили з вектором рмК1012 (приклад 7). попередньо бо розщепленим за допомогою заї! і Мої!, ї одержали плазміду рРВ132 (6449 рр) (фігура Мо13).
Приклад 14: Конструювання плазміди рАВО25 (ген РЕК5М ОРЕ) штам І еіувіай
За технологією з прикладу б провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу РКК5БМ (штам І еїузіаад)
ІМУ.Мешепбего і ін. Мігоїоду. 1993, 19, 62-72), отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами: 65 АВОБ5 (34 тег) (ЗЕО ІЮ Мо19)
БАСОСОТСОАСААТАТОАСАТОТТСТСАСАААТТО 3!
АВОБб (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо20)
БСОСОБАТСССОТСТАСОССТОССАТТОСТСАСС З щоб точно ізолювати ген "ОКЕ5", що кодує глікопротеїн оболонки Е (9р25) вірусу РКК5З штаму І еіузіад. Після очищення, продукт КТ-РСК (630 рі) розщепили за допомогою заї| і Ватні, щоб ізолювати фрагмент ЗаїІ-Ватні (617 рр). Цей фрагмент зшили з вектором руУкК1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою заї! |і
Ватні, і одержали плазміду рдВО25 (5486 рбБ) (фігура Мо14).
Приклад 15: Конструювання плазміди рАВО01 РККЗМ ОКЕ5 штам ОА
За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу РЕК5У (Штам АТСС-МК2332) 70 ІМ.Мипацодй і ін. Агсп. МігоІї. 1995, 140, 1451-1460), отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами:
АВОО1 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо21)
БААСТОСАСАТОТТОСАСАААТОСТТОАССО 3
АВОО2 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо22)
Б'ЄСОСАТСССТААОСАСОАССССАТТОТТСС 3" щоб точно ізолювати ген, що кодує оболонковий глікопротеїн Е (др25) вірусу РЕК5 штаму АТСС-УК2332. Після очищення, продукт КТ-РСК (620 рі) розщепили за допомогою Рзії! і Ватні, щоб ізолювати фрагмент Рей-Ватні (606 рр). Цей фрагмент зшили з вектором рМК1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою Рзі! і
Ватні, і одержали плазміду рАВОО!1 (5463 рБб) (фігура Мо15).
Приклад 16: Конструювання плазміди рАВОЗ!1 (ген РЕК5М ОКЕЗ штам І віузіад)
За технологією з прикладу б провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу РККБМ (Штам І еїузіаай) (|У.
Мешепбрегад і ін. Мігоїсду, 1993, 19, 62-72), отриманою за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами:
АВ170 (32 тег) (ЗЕО ІЮ Мо23) Га
БАААСТОСАССААТООСТСАТСАСТОТОСАСОоС ОЗ
АВ171 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо24) і9)
БСОСОБАТССТТАТСОТОАТОТАСТОСОСА 3 щоб точно ізолювати ген "ОКЕЗ", що кодує оболонковий глікопротеїн (др4і5) вірусу РКК5 штама | еїузіава.
Після очищення, продукт КТ-РСК (818 рі) розщепили за допомогою Рвзі!Ї і Ватні, щоб ізолювати фрагмент ю зо Раен-ВатнНі (802 рр). Цей фрагмент зшили з вектором руУкК1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою Рвії і Ватні, і одержали плазміду рАВО-!1 (5660 рб) (фігура Мо16). о
Приклад 17: Конструювання плазміди рАВОЗ2 (ген РРАБМ ОКЕЗ штам ЗА) Ге»!
За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу РЕК5М (Штам АТСС-МК2332)
ІМ.Мипацодй і ін. Агсп. МігоІї. 1995, 140, 1451-1460), отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з - такими олігонуклеотидами: ча
АВ172 (32 тег) (ЗЕО ІЮ Мо25)
БАААСТОСАССААТОСТТААТАОСТОТАСАТТС 3
АВ173 (32 тег) (ЗЕО ІЮ Мо2б)
БСОСОБАТСССТАТСОССОТАСОССАСТОАСОоС 3 « щоб точно ізолювати ген ОРЕЗ, що кодує оболонковий глікопротеїн (др45) вірусу РЕЕЗ штаму АТСС-МК2332. У с Після очищення, продукт КТ-РСК (785 рі) розщепили за допомогою Рвзі!Ї і Ватні, щоб ізолювати фрагмент
Ранц-ВатНі (769 рр). Цей фрагмент зшили з вектором рМкК1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за )» допомогою Рзвії і Ватні, і одержали плазміду рАВО92 (5627 рБ) (фігура Мо17).
Приклад 18: Конструювання плазміди рАВОО4 (ген парвовірусу свиней УР)
За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному парвовірусу свиней (Штам МАОІ 2) |У. -І Мазидемаснагуа і ін. Мігоїюду. 1995, 178, 611-616), отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами: і АВОО7 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо27) (Се) БААААСТОСАСААТОАСТОААААТОТОСААСААС 3"
АВО 10 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо28)
Мамі БСОСОБАТСССТАСТАТААТТТТСТТОСТАТААО 3! сл щоб розширити фрагмент (1757 рр), що містить ген, що кодує протеїн МР2 парвовірусу свиней. Після очищення, продукт КТ-РСК розщепили за допомогою Рзі! і Ватні, щоб ізолювати фрагмент Рзі-Ватні (1740 рб).
Цей фрагмент зшили з вектором руКк1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою Рзії і Ватні, і одержали плазміду рАВО04 (6601 рб) (фігура Мое18).
Приклад 19: Конструювання плазміди рАВОб9 (ген Чуми свиней НСМЕ1) о За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу чуми свиней (Нод Споїега Мігив) ко (НСМ) (Штам АКМог) (б. Меуегз і ін. Мігоїсду. 1989, 171, 18-27), отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами: во АЗ126 (36 тег) (З5ЕО ІЮ Мо29)
БАСОСОТСОАСАТОАААСТАСАААААОСОоСТОоТТОоОс 3
АВ127 (34 тег) (ЗЕО ІЮ Мо30)
БСОСОбАТССТСАТАСССОСССТТОТОоСсСсСссСОосОТте 3 щоб ізолювати послідовність, що кодує протеїн Е1 вірусу НСМ, у формі фрагмента КТ-РСК (1364 рбБ). Після 65 очищення, цей фрагмент розщепили за допомогою Ватні і ЗаїЇ, щоб одержати фрагмент ЗаїІ-Ватні (1349 рб).
Цей фрагмент зшили з вектором рМК.1012 (приклад 7), попередньо за допомогою Ватні і заї), і одержали плазміду рАВОб9 (6218 рбБ) (фігура Мо19).
Приклад 20: Конструювання плазміди рАВОб1 (ген Чуми свиней НСМ Е2)
За технологією з прикладу 6 провели реакцію КТ-РСК з РНК геному вірусу чуми свиней (Нод Споїега Мігив) (НСМ) (Штам АКМог) |ОС.Меуеге і ін. Мігоїосду. 1989. 171. 18-27), отриманої за технологією, що описана в прикладі 4, і з такими олігонуклеотидами:
АЗ118 (36 тег) (З5ЕО ІЮ Мо31)
БАСОСОСТСОАСАТОТСААСТАСТОСОТТТСТСАТТТО 3
АВ119 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо32) 70 БСОСОБАТССТСАСТОТАСАССАССАССОАОСТО 03 щоб ізолювати послідовність, що кодує протеїн Е2 вірусу НСМ, у формі фрагмента КТ-РСК (1246 рбБ). Після очищення, цей фрагмент розщепили за допомогою Ватні і ЗаїІ, щоб одержати фрагмент зЗаїІ-Ватні (1232 рБ).
Цей фрагмент зшили з вектором руУкК1012 (приклад 7), попередньо розщеплений за допомогою Ватні і заї,, і одержали плазмід) рАВОб1 (6101 рбБ) (фігура Мо20).
Приклад 21: Конструювання плазміди рРВ162 (ген Асііпо-басійив ріеигорпештопіає архі делецільований)
Ген архі (Асііпорасіїїиз ріеигорпештопіаеє) був клонований таким чином, щоб мала місце делеція ділянки амінокислот з великим вмістом гліцину (що бере участь у фіксації іона кальцію), який знаходиться між амінокислотами 719 і 846.
Провели реакцію РСК із ДНК геному Асііпобрасійи5 ріеигорпештопіае (Серотип 1) |У. Егеу і ін. Іптесі.
Іптип. 1991, 59, 3026-3032), отриманої за технологією, що описана в прикладах 2 і З, і з такими олігонуклеотидами:
РВ174 (32 тег) (ЗЕО ІЮО Мо33)
БТТОТСОАСОСТАААТАОСТААООСАСАСААСАТО 3!
РВ189 (29 тег) (ЗЕО ІЮ Мо34) сч
Б ТТОААТТСТТСТТСААСАСААТОТААТТС 3 щоб розширити частину 5 гена архі, що кодує протеїн гемолізин | (АсііпобасіїйЬ ріеигорпештопіає), У о); формі фрагменту ЗаїпІ-ЕсоКіІ. Після очищення, продукт РОК (2193 рі) розщепили за допомогою заї і ЕсоКіІ, щоб ізолювати фрагмент ЗаїІ-ЕсокК! (2183 рвБ) (фрагмент А). Провели реакцію РСК з ДНК геному Асііпобасішв ріеигорпештопіае (Серотип 1) (У.Ргеу і ін. Іптесі Іїптип. 1991, 59, 3026-3032 і з наступними олігонуклеотидами : ю зо РВ190 (31 тег) (ЗЕО ІЮО Мо35)
БТТОААТТСТАТСОСТАСАСТААОСАСТАСОоС 0/3 Ше
РВ175 (31 тег) (ЗЕО ІЮО Мо36) Ге!
БТТОБАТССОСТАТТТА7САТСТААААДАТААС 3! щоб розширити частину З гена архі. що кодує протеїн гемолізин | (Асітобасіїїшв ріеигорпеотопіаеє), у - формі фрагменту ЕсокІ-Ватні. Після очищення, продукт РОК (576 рі) розщепили за допомогою Есокі і ВайіНі. ча щоб ізолювати фрагмент ЕсоКІ-Ватні (566 рб) (фрагмент У). Фрагменти А і В зшили разом із вектором рУкК1012 (приклад 7). попередньо розщепленим за допомогою заї| і Ватні. і одержали плазміду рРВЗ3162 (7619 рБ) (Фігура
Мо21).
Приклад 22: Конструювання плазміди рРВ163 (ген Асііпорасіїив5 ріеигорпештопіає архі! делецільований) «
Ген архі! (Асііпобасіїїиз ріеигорпештопіає) був клонований таким чином, щоб мала місце делеція ділянки ше с амінокислот з великим вмістом гліцину (що бере участь у фіксації іона кальцію), який знаходиться між амінокислотами 716 і 813. )» Провели реакцію РСК з ДНК геному Асііповасіїїиз ріеигорпейтопіде (Серотип 9) М. Зтіїв і ін. Іптесіоп апа Іттипйу. 1991, 59, 4497-4504), отриманої за технологією, що описана в прикладах 2 і З, і з такими олігонуклеотидами: -І РВ176 (31 тег) (ЗЕО ІЮ Мо37)
БТТОТСБАСОСАТСААТТАТАТАААССАСАСТС 0 3 і РВ191 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо38) (Се) БТТОААТТССТСТТСААСТОАТТТОАСТОАО 3! щоб розширити частину 5' гена архії, що кодує протеїн гемолізин І! (Асііпорасіїйи5 ріеигорпештопіаеє), у о формі фрагменту ЗаїпІ-ЕсоКіІ. Після очищення, продукт РОК (2190 рі) розщепили за допомогою заї і ЕсоКіІ, щоб сл ізолювати фрагмент ЗаїІ-ЕсокКіІ (2180 рБ) (фрагмент А).
Провели реакцію РСК з ДНК геному Асііповасіїїиз ріеигорпейтопіде (Серотип 9) М. Зтіїв і ін. Іптесіоп апа Ітптипку. 1991, 59, 4497-4504 і з такими олігонуклеотидами:
РВ192 (29 тег) (ЗЕО ІЮ Мо39)
БТТОААТТСОТАААТСТТАААСАССТСАСО 3" о РВ177 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо40) іме) БТТОБАТССАССАТАССАТТОСТАТОАТТТО 3" щоб розширити частину 3 гена архіЇ що кодує протеїн гемолізин І! (Асііпорасійи5 ріепигорпештопіає) у бо формі фрагменту ЕсоКІ-Ватні. Після очищення, продукт РОК (473 рі) розщепили за допомогою Есокі і Ватні, щоб ізолювати фрагмент ЕсоКкІ-Ватні (463 рбБ) (фрагмент В). Фрагменти А і В зшили разом із вектором рУк1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою заї| і Ватні, і одержали плазміду рРВ163 (7513 рбБ) (Фігура
Мо22).
Приклад 23: Конструювання плазмід рРВ174", рРВ189 і рРВ190 (ген Асііпорасіййз ріеигорпешпопіаеє архі! 65 делецільований). Перший приклад делеції в Архії!! (плазміда рРВ174):
Ген архі! (Асііпобасіїїиз ріеигорпентопіае) був клонований таким чином, щоб мала місце делеція ділянки амінокислот з великим вмістом гліцину (що бере участь у фіксації іона кальцію), який знаходиться між амінокислотами 733 і 860.
Провели реакцію РСК з ДНК геномо Асііпобасійив ріеигорпеитопіае (Серотип 8) М. Зтіїв 1992. Мо доступу послідовності в Сепрапк-Хб68815), отриманої за технологією, що описана в прикладах 2 і 3. і з такими олігонуклеогидами:
РВ278 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо41)
БТТТОТСОАСАТОАСТАСТТОСТСААССАТО 3!
РВ279 (29 тег) (ЗЕО ІЮ Мо42) 70 БТТТАТСОАТТСТТСТАСТОАДАТОТААТТО 3" щоб розширити частину 5' гена архіїї, що кодує протеїн гемолізин І (Асііпобрасіййз ріеигорпештопіає) у формі фрагменту ЗаїІ-Сіаі. Після очищення, продукт РОК (2216 р) розщепили за допомогою заї| і Сіаі, щоб ізолювати фрагмент заїІ-Сіаї (2205 рр) (фрагмент А). Провели реакцію РСК з ДНК геному Асііпобасішв ріеигорпештопіае (Серотип 8) ІМ. тів 1992. Мо доступу послідовності в Сепрапк-Хб8815), і з такими 7/5 олігонуклеотидами:
РВ280 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо43) 5БТТТАТСОАТТТАТОТТТАТСОТТССАСТТСАСО З
РБЗЗО07 (32 тег) (ЗЕО ІЮ Мо44)
БТТОБАТССТТААОСТОСТСТАОСТАОСТТАСС 3" щоб розширити частину 3 гена архі, що кодує протеїн гемолізин ПП (Асііпобасіїїиз ріепигорпештопіає), у формі фрагменту СіаІ-Ватні. Після очищення, продукт РОК (596 рі) розщепили за допомогою Сіаї! і Ватні, щоб ізолювати фрагмент СіаІ-ВатНі (583 рр) (фрагмент В). Фрагменти А і В зшили разом із вектором рук1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою заї| і Ватні, і одержали плазміду РРВ174" (7658 рб) (Фігура
Мо23). сч
Другий приклад делеції в Архії! (плазміда рРВ189):
Ген архії! (Асііпобасіїїиз ріеигорпентопіае) був клонований таким чином, щоб мала місце делеція ділянки о); амінокислот із великим вмістом гліцину (що бере участь у фіксації іона кальцію), який знаходиться між амінокислотами 705 і 886.
Провели реакцію РСК з ДНК геному Асііпобасіїив ріеигорпеитопіае (Серотип 8) |М.Зтів 1992. Мо доступу МУ зо послідовності в Сепрапк-хб8815)|, отриманої за технологією, описаної в прикладах 2 і З, і з такими олігонуклеотидами: і,
РВ278 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо41) Ге!
БТТТОТСОАСАТОАСТАСТТОСТСААССАТО 3!
РВЗОЗ (32 тег) (ЗЕО ІЮ Мо45) - 5БТТТАТСОАТТТСТТСАССТТТАССААСАОСА 3 ї- щоб розширити частину 5' гена архі, що кодує протеїн гемолізин ПП (Асііпобасіїїиз ріепигорпештопіає), у формі фрагменту ЗаїІ-Сіаі. Після очищення, продукт РОК (2133 рБ) розщепили за допомогою заї| і Сіаі, щоб ізолювати фрагмент заїІ-Сіа!| (2122 рБ) (фрагмент А).
Провели реакцію РСК з ДНК геному Асііпорасійиз ріеигорпеитопіае (Серотип 8) М. Зтіїв 1992. Мо доступу « послідовності в Сепрапк-хХ68815) і з такими олігонуклеотидами: шв с РВЗОб (31 тег) (ЗЕО ІЮ Мо46)
БТТТАТСОАТТСТОАТТ77/ТССТТСОАТСОТОС 3 )» РВЗО7 (32 тег) (ЗЕО ІЮ Мо44)
БТТОБАТССТТААОСТОСТСТАОСТАОСТТАСС 3" щоб розширити частину З гена архіїЇ що кодує протеїн гемолізин І (Асііпобасіїніз ріейигорпештопіає), -І у формі фрагменту СіаІ-Ватні. Після очищення, продукт РОК (518 рі) розщепили за допомогою Сіаї і Ватні, щоб ізолювати фрагмент СіаІ-ВатНі (506 рр) (фрагмент В). Фрагменти А і В зшили разом із вектором рук1012
Ш- (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою заї| і Ватні, і одержали плазміду рРВ189 (7496 рб) (Фігура
Ге) Мо24).
Третій приклад делеції в АрХхІИ (плазміда рРВ190): о Ген архі! (Асііпорасіїїиз ріеигорпештопіає) був клонований таким чином, щоб мала місце делеція ділянки сп амінокислот з великим вмістом гліцину (що бере участь у фіксації іона кальцію), який знаходиться між амінокислотами 718 і 876.
Провели реакцію РСК з ДНК геному Асііпорасійиз ріеигорпеитопіае (Серотип 8) М. Зтіїв 1992. Мо доступу послідовності в Сепрапк-Хб68815), отриманої за технологією, що описана в прикладах 2 і 3. і з такими олігонуклетидами:
Ф; РВ278 (30 тег) (ЗЕО ІЮ Мо41) ка БТТТОТСОАСАТОАСТАСТТОСТСААССАТО 3!
РВЗО4 (33 тег) (ЗЕО ІЮ Мо47) во 5БТТТАТСОСАТАССТОАТТОСОСТТААТТСАТААТС З щоб розширити частину 5' гена архіїЇ, що кодує протеїн гемолізин ПП (Асііпобасіїїив ріеигорпейтопіає), у формі фрагменту ЗаїІ-Сіаі. Після очищення, продукт РОК (2172 рБ) розщепили за допомогою заї| і Сіаі, щоб ізолювати фрагмент заїІ-Сіа!| (2161 рр) (фрагмент А).
Провели реакцію РОК з ДНК геному Асііпобасіїїиз рігеигорпешптопіає) (Серотип 8) М. Зтіїв 1992. Мо доступу 65 послідовності в Сепрапк-хХ68815) і з такими олігонуклеотидами:
РВЗО5 (31 ітпег) (ЗЕО ІЮ Мо48)
БТТТАТСОАТАААТСТАСТОАТТТАСАТАААС 3"
РВЗО7 (32 тег) (ЗЕО ІЮ Мо44)
БТТОБА7ССТТААОСТОСТСТАОСТАОСТТАСС 3" щоб розширити частину 3 гена архі, що кодує протеїн гемолізин ПП (Асііпобасіїїиз ріепигорпештопіає), у формі фрагменту Сіаї! і Ватні. Після очищення, продукт РОК (548 рб) розщепили за допомогою Сіаї! і Ватні, щоб ізолювати фрагмент СіаІ-ВатНі (536 рр) (фрагмент В). Фрагменти А і В зшили разом із вектором рук1012 (приклад 7), попередньо розщепленим за допомогою заї і Ватні, і одержали плазміду рРРВ190 (7565 рб). (Фігура
Мо25). 70 Приклад 24: Одержання і очищення плазмід
Для одержання плазмід, призначених для вакцинації тварин, можна використовувати будь-яку технологію, що дозволяє одержати суспензію очищених плазмід, у більшій мірі, у надскрученій формі. Ці технології добре відомі фахівцям. Можна назвати, зокрема техніку лужного лізису з наступним дворазовим центрифугуванням у градієнті хлорид) цезію і в присутності броміду етидію, як описано .).ЗатргооК і ін. |МоіІесшаг Сіопіпд: А 7/5 Гарогаїгу Мапиаї. 2-е вид. Соїй Зргіпу Нагрог ІГарогаогу. Со Зргіпо Нагрог. Мем/ Могк. 1989). Можна також звернутися до матеріалів заявок РСТ УУО 95/21250 і РСТ УУО 96/02658, у яких описані методики одержання в промисловому масштабі плазмід для вакцинації. Для одержання вакцин (див. приклад 17), готують суспензію очищених плазмід таким чином, щоб одержати висококонцентровані розчини (22мг/мл). придатні для зберігання. Для цього готують суспензію плазмід або в ультрачистій воді, або в буфері ТЕ (Тгіз-НСІ 10ММ; ЕОТА
ММ, рН 8,0).
Приклад 25: Одержання асоційованих вакцин
Різні плазміди, необхідні для одержання асоційованої вакцини, змішують у їхніх концентрованих розчинах (приклад 16). Суміші готують таким чином, щоб кінцева концентрація кожної плазміди відповідала ефективній дозі кожної плазміди. У якості розчинів для доведення кінцевої концентрації вакцини можна використовувати або сч г розчин 0,995 Масі, або буфер РВ5.
Особливі компоненти, такі як ліпосоми, катіонні ліпіди, також можуть бути використані для одержання вакцин. іо)
Приклад 26: Вакцинація свиней
Свиней вакцинують дозами 100мкг, 250мкг або 500мкг на кожну плазміду.
Ін'єкції можна проводити за допомогою голки внутрішньом'язово. У цьому випадкл, вакцинні дози вводять в ю зо об'ємі 2мл.
Ін'єкції можна проводити внутрішньошкірно, використовуючи рідиннострумінник (без голки) ін'єкційний о апарат і вводячи дози 0,2мл в 5 точках (0,04мл у кожній точці і (наприклад, апарат "РІСУОЕТ). У цьому Ге! випадку, вакцини вводять в об'ємах 0,2 або О4мл, що відповідає, одному або двом введенням. Якщо два послідовних введення здійснюють за допомогою апарата РІСОЕТ, ці введення здійснюють таким чином, щоб в. обидві ін'єкційні зони були віддалені одна від другої на відстань біля 1-2 сантиметрів. ї-

Claims (10)

Формула винаходу «
1. Вакцина для свиней, що містить плазміду(плазміди), яка (які) включає (ють) і забезпечує(ють) експресію шв с іп мімо в клітинах свині-хазяїна послідовності (послідовностей) нуклеїнової кислоти вірусу хвороби АціезагКу, що кодує(ють) білок (білки), вибраний(ні) з групи, що складається з 98, 90 та ОВ і 90, і фармацевтично 1» прийнятний носій.
2. Вакцина за п. 1, яка відрізняється тим, що плазміда включає послідовності нуклеїнової кислоти, що Кодують як ОВ, так і 90 білки. -І З. Вакцина за п. 1, яка відрізняється тим, що плазміда включає послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує білок 28.
-
4. Вакцина за п. 1, яка відрізняється тим, що плазміда включає послідовність нуклеїнової кислоти, що о кодує білок 40.
5. Вакцина за п. 1, яка відрізняється ти, що містить першу плазміду, що включає послідовність нуклеїнової о кислоти, що кодує білок ОВ, і другу плазміду, що включає послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує білок д40.
с 6. Вакцина за п. 1, яка відрізняється тим, що експресія послідовності (послідовностей) нуклеїнових кислот знаходиться під контролем промотора, вибраного з групи, що складається з промотора СМУ-ІЕ, раннього промотора 5М40, пізнього промотора 5МУ40, промотора І ТК вірусу саркоми Рауса і промотора гена цитоскелета.
7. Вакцина за п. 6, яка відрізняється тим, що промотором є промотор СМУ-Е.
8. Спосіб вакцинації свиней, що передбачає введення вказаній свині свинячої вакцини, вибраної з групи, що (Ф) складається з цільної живої вакцини, цільної інактивованої вакцини, субодиничної вакцини і рекомбінантної ГІ вакцини; і далі введення вказаній свині вакцини за п. 1.
9. Спосіб вакцинації свиней, що передбачає введення вказаній свині вакцини за п. 1. во
10. Набір, що містить (І) вакцину за п. 1 і (ії) свинячу вакцину, вибрану з групи, що складається з цільної живої вакцини, цільної інактивованої вакцини, субодиничної вакцини і рекомбінантної вакцини. б5
UA99020959A 1996-07-19 1997-07-15 Композиція вакцини для свиней, спосіб та набір для вакцинації UA77935C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9609338A FR2751224B1 (fr) 1996-07-19 1996-07-19 Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies respiratoires et de reproduction des porcs
PCT/FR1997/001313 WO1998003658A1 (fr) 1996-07-19 1997-07-15 Formule de vaccin polynucleotidique contre les pathologies respiratoires et de reproduction des porcs

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA77935C2 true UA77935C2 (uk) 2007-02-15

Family

ID=9494450

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA200610210A UA91675C2 (uk) 1996-07-19 1997-07-15 Формула полінуклеотидної вакцини проти дихальних патологій та патологій розмноження свиней
UA99020959A UA77935C2 (uk) 1996-07-19 1997-07-15 Композиція вакцини для свиней, спосіб та набір для вакцинації

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA200610210A UA91675C2 (uk) 1996-07-19 1997-07-15 Формула полінуклеотидної вакцини проти дихальних патологій та патологій розмноження свиней

Country Status (20)

Country Link
US (2) US6207165B1 (uk)
EP (1) EP0912743B1 (uk)
JP (1) JP2001500111A (uk)
KR (1) KR100496249B1 (uk)
CN (2) CN101121023A (uk)
AR (1) AR007864A1 (uk)
AU (1) AU735291B2 (uk)
BR (1) BR9710740A (uk)
CA (1) CA2261346C (uk)
CO (1) CO4750676A1 (uk)
DE (1) DE69734284T2 (uk)
DK (1) DK0912743T3 (uk)
ES (1) ES2251030T3 (uk)
FR (1) FR2751224B1 (uk)
HU (1) HUP9903822A3 (uk)
PL (1) PL190615B1 (uk)
RU (1) RU2305559C2 (uk)
TW (1) TW589190B (uk)
UA (2) UA91675C2 (uk)
WO (1) WO1998003658A1 (uk)

Families Citing this family (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU762901B2 (en) * 1996-07-19 2003-07-10 Merial Polynucleotide vaccine formula for treating porcine respiratory and reproductive diseases
EP0863151A1 (en) * 1997-02-12 1998-09-09 Akzo Nobel N.V. "Canine parvovirus dna vaccines"
CA2223029A1 (en) * 1997-02-12 1998-08-12 Akzo Nobel Nv Canine parvovirus dna vaccines
FR2776294B1 (fr) * 1998-03-20 2001-06-22 Merial Sas Nouveaux circovirus porcins ; vaccins et reactifs de diagnostic
US7192594B2 (en) * 1997-10-03 2007-03-20 Merial Limited Postweaning multisystemic wasting syndrome and porcine circovirus from pigs
US6517843B1 (en) 1999-08-31 2003-02-11 Merial Reduction of porcine circovirus-2 viral load with inactivated PCV-2
FR2781159B1 (fr) * 1998-07-06 2000-10-06 Merial Sas Vaccin circovirus et parvovirus porcin
US7211379B2 (en) * 1997-10-03 2007-05-01 Merial Sas Prevention of myocarditis, abortion and intrauterine infection associated with porcine circovirus-2
FR2772047B1 (fr) * 1997-12-05 2004-04-09 Ct Nat D Etudes Veterinaires E Sequence genomique et polypeptides de circovirus associe a la maladie de l'amaigrissement du porcelet (map), applications au diagnostic et a la prevention et/ou au traitement de l'infection
RU2000118777A (ru) * 1997-12-11 2002-07-10 Университи Оф Саскачеван (Ca) Вирус синдрома мультисистемного истощения свиньи у поросят-отъемышей
ES2170622B1 (es) * 1999-12-03 2004-05-16 Consejo Superior De Investigaciones Cientificas Clones y vectores infectivos derivados de coronavirus y sus aplicaciones.
FR2804028B1 (fr) * 2000-01-21 2004-06-04 Merial Sas Vaccins adn ameliores pour animaux de rente
KR20030054139A (ko) * 2001-12-24 2003-07-02 학교법인 건국대학교 돼지 오제스키병 바이러스의 ｇＤ 유전자를 포함하는재조합 발현 벡터 및 이를 이용한 ＤＮＡ 백신
US7906311B2 (en) 2002-03-20 2011-03-15 Merial Limited Cotton rat lung cells for virus culture
US20060160759A1 (en) * 2002-09-28 2006-07-20 Jianzhu Chen Influenza therapeutic
EP1606419A1 (en) 2003-03-18 2005-12-21 Quantum Genetics Ireland Limited Systems and methods for improving protein and milk production of dairy herds
US7468273B2 (en) 2003-05-01 2008-12-23 Meial Limited Canine GHRH gene, polypeptides and methods of use
ES2417019T3 (es) 2003-11-13 2013-08-05 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Procedimiento de caracterización del virus de la enfermedad de la bursitis infecciosa
US7527967B2 (en) * 2003-11-25 2009-05-05 Academia Sinica Recombinant baculovirus and virus-like particle
ATE510928T1 (de) 2004-02-19 2011-06-15 Univ Alberta Leptinpromotor-polymorphismen und verwendungen davon
DK1881845T3 (da) 2005-04-25 2010-06-07 Merial Ltd Nipah-virusvacciner
US20080241184A1 (en) 2005-08-25 2008-10-02 Jules Maarten Minke Canine influenza vaccines
US7771995B2 (en) 2005-11-14 2010-08-10 Merial Limited Plasmid encoding human BMP-7
CA2629522A1 (en) 2005-11-14 2007-05-18 Merial Limited Gene therapy for renal failure
US7862821B2 (en) 2006-06-01 2011-01-04 Merial Limited Recombinant vaccine against bluetongue virus
UA100692C2 (uk) 2007-05-02 2013-01-25 Мериал Лимитед Днк-плазміди, які мають підвищену експресію та стабільність
US20080274137A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-06 Jean Christophe Francis Audonnet DNA plasmids having improved expression and stability
EP3542815A1 (en) 2008-11-28 2019-09-25 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Recombinant avian influenza vaccine and uses thereof
CN102428099B (zh) 2009-04-03 2016-03-16 梅里亚有限公司 运载新城疫病毒的禽疫苗
AR079767A1 (es) 2009-12-28 2012-02-15 Merial Ltd Antigeno ndv (virus de la enfermedad de newcastle) recombinante y usos del mismo
US20130197612A1 (en) 2010-02-26 2013-08-01 Jack W. Lasersohn Electromagnetic Radiation Therapy
AU2011224188B2 (en) 2010-03-12 2015-01-22 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Bluetongue virus recombinant vaccines and uses thereof
CN102370976B (zh) * 2010-08-09 2014-06-11 中山大学 猪流感病毒和猪口蹄疫病毒的混合病毒样颗粒、制备方法和应用
CN102373181B (zh) * 2010-08-09 2014-06-11 中山大学 猪流感病毒和猪蓝耳病病毒混合病毒样颗粒、制备方法和应用
WO2012030720A1 (en) 2010-08-31 2012-03-08 Merial Limited Newcastle disease virus vectored herpesvirus vaccines
WO2012090073A2 (en) 2010-12-30 2012-07-05 The Netherlands Cancer Institute Methods and compositions for predicting chemotherapy sensitivity
EP2694678A2 (en) 2011-04-04 2014-02-12 Netherland Cancer Institute Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
US20140296248A1 (en) 2011-04-04 2014-10-02 Stichting het Nederlands Kanker Instiuut-Antoni van Leeuwenhoek ziekenhuis Methods and compositions for predicting resistance to anticancer treatment
WO2012145577A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Merial Limited Adjuvanted rabies vaccine with improved viscosity profile
EP2701736A1 (en) 2011-04-25 2014-03-05 Advanced Bioscience Laboratories, Inc. Truncated hiv envelope proteins (env), methods and compositions related thereto
BR112013028605A2 (pt) 2011-05-07 2017-01-17 Avi Mex S A De C V Lab vetor viral, vacina recombinante contra prrs e uso de uma vacina
MX361804B (es) 2011-05-27 2018-12-17 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Vacunas genéticas contra el virus hendra y el virus nipah.
CA2837125A1 (en) * 2011-05-27 2012-12-06 Sinovet (Beijing) Biotechnology Co.,Ltd Combined vaccines for prevention of porcine virus infections
WO2012166493A1 (en) 2011-06-01 2012-12-06 Merial Limited Needle-free administration of prrsv vaccines
HUE035774T2 (en) 2011-08-12 2018-05-28 Merial Inc Biological substances, in particular vaccines, preserved by vacuum
WO2013093629A2 (en) 2011-12-20 2013-06-27 Netherlands Cancer Institute Modular vaccines, methods and compositions related thereto
CA2864119C (en) 2012-02-14 2022-05-24 Merial Limited Recombinant poxviral vectors expressing both rabies and ox40 proteins, and vaccines made therefrom
CN104203274B (zh) 2012-02-14 2017-09-08 梅里亚股份有限公司 轮状病毒亚单位疫苗及其制备和使用的方法
WO2013138776A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Merial Limited Novel methods for providing long-term protective immunity against rabies in animals, based upon administration of replication-deficient flavivirus expressing rabies g
ES2664069T3 (es) 2012-06-13 2018-04-18 Merial, Inc. Vacunas contra BTV y AHSV de genoma reordenado
CN102807989B (zh) * 2012-08-01 2014-04-23 中国人民解放军军事医学科学院军事兽医研究所 犬科和/或猫科动物疫病重组活载体疫苗的制备方法
WO2014164697A1 (en) 2013-03-12 2014-10-09 Merial Limited Reverse genetics schmallenberg virus vaccine compositions, and methods of use thereof
EP2985288B1 (en) * 2013-05-31 2019-11-13 Pulike Biological Engineering, Inc. Porcine pseudorabies virus, vaccine composition and preparation method and use thereof
WO2015048115A1 (en) 2013-09-25 2015-04-02 Zoetis Llc Pcv2b divergent vaccine composition and methods of use
CN105251000B (zh) * 2014-09-30 2018-12-14 普莱柯生物工程股份有限公司 猪伪狂犬病病毒疫苗组合物及其制备方法和应用
MX2017005687A (es) 2014-11-03 2017-08-21 Merial Inc Metodos para usar formulaciones para vacuna con microagujas para elicitar en animales inmunidad protectora contra virus de la rabia.
CA2990643C (en) 2015-06-23 2023-10-17 Merial, Inc. Prrsv minor protein-containing recombinant viral vectors and methods of making and use thereof
CN105693827B (zh) * 2015-06-29 2020-05-15 普莱柯生物工程股份有限公司 一种猪伪狂犬病病毒亚单位疫苗及其制备方法和应用
CN104998256A (zh) * 2015-07-14 2015-10-28 天津瑞普生物技术股份有限公司 一种猪用三联灭活疫苗的制备方法
CA2996143A1 (en) 2015-08-20 2017-02-23 Merial, Inc. Fcv recombinant vaccines and uses thereof
PL3355915T3 (pl) 2015-09-29 2024-03-25 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Szczepionki zawierające cząstki wirusopodobne (VLP) parwowirusa psów (CPV) i ich zastosowania
RU2714428C2 (ru) 2015-11-23 2020-02-14 Мериал, Инк. Слитые белки fmdv-e2 и их применение
TWI760322B (zh) 2016-01-29 2022-04-11 美商百靈佳殷格翰動物保健美國有限公司 重組腺病毒載體裝載之fmdv疫苗及其用途

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL8901651A (nl) * 1989-06-29 1991-01-16 Centraal Diergeneeskundig Inst Vaccin tegen pestivirusinfecties, zoals varkenspest; daarvoor bruikbare nucleotidesequenties en polypeptiden.
US6592873B1 (en) * 1992-10-30 2003-07-15 Iowa State University Research Foundation, Inc. Polynucleic acids isolated from a porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) and proteins encoded by the polynucleic acids
EP1170368B1 (en) * 1994-01-27 2010-07-28 University Of Massachusetts Medical Center Immunization by inoculation of dna transcription unit
US5516905A (en) * 1994-08-30 1996-05-14 University Of Massachusetts Medical Center Antibiotic compounds and methods to treat gram-positive bacterial and mycoplasmal infections
CA2216308A1 (en) * 1995-12-21 1997-07-03 Solvay (Societe Anonyme) Plasmid vaccine for pseudorabies virus

Also Published As

Publication number Publication date
ES2251030T3 (es) 2006-04-16
JP2001500111A (ja) 2001-01-09
CO4750676A1 (es) 1999-03-31
KR100496249B1 (ko) 2006-01-27
DK0912743T3 (da) 2006-01-30
PL331249A1 (en) 1999-07-05
CN101121023A (zh) 2008-02-13
WO1998003658A1 (fr) 1998-01-29
DE69734284T2 (de) 2006-07-13
AR007864A1 (es) 1999-11-24
UA91675C2 (uk) 2010-08-25
US6207165B1 (en) 2001-03-27
KR20000065256A (ko) 2000-11-06
HUP9903822A3 (en) 2010-01-28
AU735291B2 (en) 2001-07-05
CN1329513C (zh) 2007-08-01
RU2002133052A (ru) 2005-01-20
CA2261346C (en) 2012-01-03
RU2305559C2 (ru) 2007-09-10
AU3699197A (en) 1998-02-10
HUP9903822A2 (hu) 2000-03-28
CA2261346A1 (en) 1998-01-29
TW589190B (en) 2004-06-01
US6576243B1 (en) 2003-06-10
FR2751224B1 (fr) 1998-11-20
DE69734284D1 (de) 2006-02-09
CN1225684A (zh) 1999-08-11
PL190615B1 (pl) 2005-12-30
BR9710740A (pt) 1999-08-17
EP0912743B1 (fr) 2005-09-28
EP0912743A1 (fr) 1999-05-06
FR2751224A1 (fr) 1998-01-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA77935C2 (uk) Композиція вакцини для свиней, спосіб та набір для вакцинації
ES2343371T3 (es) Procedimientos y composiciones para la vacunacion de animales con antigenos de vsrrp con una inmunogenicidad mejorada.
AU2009303845B2 (en) Torque teno virus (TTV) isolates and compositions
UA70914C2 (uk) Вакцина для великої рогатої худоби проти респіраторних патологій, спосіб вакцинації та набір для вакцинації великої рогатої худоби
EP3199178B1 (en) Live attenuated parvovirus
AU2011222910B2 (en) Recombinant attenuated parvovirus
WO2019021305A1 (en) VACCINE AGAINST FOOT AND MOUTH DISEASE
JP2023145681A (ja) イヌライム病ワクチン
KR20150137085A (ko) 안정화된 ｆｍｄｖ 캡시드
KR101937792B1 (ko) 신규한 재조합 항원 단백질을 포함하는 구제역 백신 조성물
AU2010307250B2 (en) Infectious clones of Torque teno virus
JP2024514197A (ja) 仮性狂犬病ウイルスワクチン
US20220008532A1 (en) Multivalent feline vaccine
ES2261329T3 (es) Mutantes de pestivirus y vacunas que los contienen.
EP2457583A1 (en) Nucleic acids encoding PRRSV GP5-ecto and M protein
US20240285752A1 (en) Attenuated Porcine Epidemic Diarrhea Virus
RU2785620C2 (ru) Вакцина против болезни лайма у собак
US20140286980A1 (en) Infectious clones of torque teno virus
TW202400800A (zh) 用於預防和治療狂犬病毒感染的組合物和方法
ES2783898T3 (es) Parvovirus atenuado vivo
US8846388B2 (en) Infectious clones of torque teno virus
Deryabin et al. Obtaining classical swine fever virus E2 recombinant protein and DNA-vaccine on the basis of one subunit
AU2013204978A1 (en) Torque teno virus (TTV) isolates and compositions