UA51622C2 - Лікарський засіб для регулювання мейозу - Google Patents
Лікарський засіб для регулювання мейозу Download PDFInfo
- Publication number
- UA51622C2 UA51622C2 UA96124771A UA96124771A UA51622C2 UA 51622 C2 UA51622 C2 UA 51622C2 UA 96124771 A UA96124771 A UA 96124771A UA 96124771 A UA96124771 A UA 96124771A UA 51622 C2 UA51622 C2 UA 51622C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- fact
- application according
- carbon atoms
- represent
- hydrogen
- Prior art date
Links
- 230000021121 meiosis Effects 0.000 title claims abstract description 45
- 239000003814 drug Substances 0.000 title claims description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 title claims description 3
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 16
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 8
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 34
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 28
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 26
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 26
- -1 nicotinoyl Chemical group 0.000 claims description 20
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 7
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 claims description 6
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims description 6
- RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N Cyclopentane Chemical compound C1CCCC1 RGSFGYAAUTVSQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 claims description 4
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000001476 phosphono group Chemical group [H]OP(*)(=O)O[H] 0.000 claims description 4
- 125000000020 sulfo group Chemical group O=S(=O)([*])O[H] 0.000 claims description 4
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- YQTCQNIPQMJNTI-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpropan-1-one Chemical group CC(C)(C)[C]=O YQTCQNIPQMJNTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000004063 butyryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N heptamethylene Natural products C1CCCCCC1 DMEGYFMYUHOHGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 2
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 claims description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 claims 2
- 125000005041 acyloxyalkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000004744 butyloxycarbonyl group Chemical group 0.000 claims 1
- 125000001511 cyclopentyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C1([H])[H] 0.000 claims 1
- 238000012876 topography Methods 0.000 claims 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 19
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 abstract description 9
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 abstract description 7
- 150000003432 sterols Chemical class 0.000 abstract description 7
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 abstract description 7
- 210000001733 follicular fluid Anatomy 0.000 abstract description 5
- 210000003794 male germ cell Anatomy 0.000 abstract description 4
- 244000309464 bull Species 0.000 abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 46
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 27
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 19
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 14
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 description 10
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 8
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 8
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 6
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 6
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000003433 contraceptive agent Substances 0.000 description 5
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N Progesterone Chemical compound C1CC2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H](C(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RJKFOVLPORLFTN-LEKSSAKUSA-N 0.000 description 4
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 4
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 4
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 4
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 4
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 4
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 4
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 4
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 4
- WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N Acetic anhydride Chemical compound CC(=O)OC(C)=O WFDIJRYMOXRFFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine Natural products O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 3
- BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N butan-2-ol Chemical compound CCC(C)O BTANRVKWQNVYAZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 230000002254 contraceptive effect Effects 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000002710 gonadal effect Effects 0.000 description 3
- 230000033458 reproduction Effects 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N (3beta,5alpha)-4,4-Dimethylcholesta-8,24-dien-3-ol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21 CHGIKSSZNBCNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CHGIKSSZNBCNDW-QGBOJXOESA-N 14-demethyllanosterol Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@H]21 CHGIKSSZNBCNDW-QGBOJXOESA-N 0.000 description 2
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 2
- UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N Dehydrocholesterol Natural products C1C(O)CCC2(C)C(CCC3(C(C(C)CCCC(C)C)CCC33)C)C3=CC=C21 UCTLRSWJYQTBFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 2
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DDIPOTFOPZLXDX-JKSOKBOYSA-N [(10s,13r,14r,17r)-15-hydroxy-4,4,10,13-tetramethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-1,2,3,5,6,7,11,12,14,15,16,17-dodecahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] benzoate Chemical compound C([C@]1(C)C2=C(CCC1C1(C)C)[C@@H]3C(O)C[C@@H]([C@]3(CC2)C)[C@H](C)CCCC(C)C)CC1OC(=O)C1=CC=CC=C1 DDIPOTFOPZLXDX-JKSOKBOYSA-N 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N borane Chemical compound B UORVGPXVDQYIDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- UCTLRSWJYQTBFZ-DDPQNLDTSA-N cholesta-5,7-dien-3beta-ol Chemical compound C1[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@@]3([C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC[C@H]33)C)C3=CC=C21 UCTLRSWJYQTBFZ-DDPQNLDTSA-N 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 2
- 229940124558 contraceptive agent Drugs 0.000 description 2
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 210000004420 female germ cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 2
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 2
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 2
- 230000027758 ovulation cycle Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N phosphoryl trichloride Chemical compound ClP(Cl)(Cl)=O XHXFXVLFKHQFAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004508 polar body Anatomy 0.000 description 2
- 239000000186 progesterone Substances 0.000 description 2
- 229960003387 progesterone Drugs 0.000 description 2
- 239000000583 progesterone congener Substances 0.000 description 2
- 229940095055 progestogen systemic hormonal contraceptives Drugs 0.000 description 2
- 230000031877 prophase Effects 0.000 description 2
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 2
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 2
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 230000002381 testicular Effects 0.000 description 2
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 1
- BPHVHMBNGQRCNN-UHFFFAOYSA-N 2,3-dihydroxybutanedioic acid;potassium Chemical compound [K].OC(=O)C(O)C(O)C(O)=O BPHVHMBNGQRCNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OGQJUYXFIOFTMA-PBJLWWPKSA-N 4,4-dimethyl-8,14-cholestadien-3beta-ol Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC=C21 OGQJUYXFIOFTMA-PBJLWWPKSA-N 0.000 description 1
- 241000416162 Astragalus gummifer Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 239000004484 Briquette Substances 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 101000939500 Homo sapiens UBX domain-containing protein 11 Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N Malonic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N Nerifoliol Natural products CC12CCC(O)C(C)(C)C1CCC1=C2CCC2(C)C(C(CCC=C(C)C)C)CCC21C CAHGCLMLTWQZNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 229920001615 Tragacanth Polymers 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 1
- 102100029645 UBX domain-containing protein 11 Human genes 0.000 description 1
- ZHGNFAXKDDMBSG-KHYKQYHXSA-N [(10s,13r,17r)-4,4,10,13-tetramethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-1,2,3,5,6,7,11,12,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] acetate Chemical compound C([C@@]12C)CC(OC(C)=O)C(C)(C)C1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)CCCC(C)C)CC=C21 ZHGNFAXKDDMBSG-KHYKQYHXSA-N 0.000 description 1
- NNIVXCLYMRREHT-PKGYEJRXSA-N [(10s,13r,17r)-4,4,10,13-tetramethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-1,2,3,5,6,7,11,12,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] benzoate Chemical compound C([C@]1(C)C2=C(CCC1C1(C)C)C3=CC[C@@H]([C@]3(CC2)C)[C@H](C)CCCC(C)C)CC1OC(=O)C1=CC=CC=C1 NNIVXCLYMRREHT-PKGYEJRXSA-N 0.000 description 1
- SIISXZWOWKHLSZ-ZEVDNLDKSA-N [(3s,5s,10s,13r,17r)-10,13-dimethyl-17-[(2r)-6-methylheptan-2-yl]-2,3,4,5,6,7,11,12,16,17-decahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl]-pyridin-4-ylmethanone Chemical compound O=C([C@H]1CC[C@]2(C)C3=C(CC[C@H]2C1)C1=CC[C@@H]([C@]1(CC3)C)[C@H](C)CCCC(C)C)C1=CC=NC=C1 SIISXZWOWKHLSZ-ZEVDNLDKSA-N 0.000 description 1
- PUIDLBOGPALAES-WZKVZTQXSA-N [(8r,9r,10s,13r,14r,17r)-8,10,13,14-tetramethyl-17-[(2r)-6-methylhepta-4,6-dien-2-yl]-2,3,4,5,6,7,9,11,12,15,16,17-dodecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-3-yl] acetate Chemical compound C1CC(OC(C)=O)CC2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@H]([C@@H](CC=CC(C)=C)C)[C@@]4(C)CC[C@@H]3[C@]21C PUIDLBOGPALAES-WZKVZTQXSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- SMZOGRDCAXLAAR-UHFFFAOYSA-N aluminium isopropoxide Chemical compound [Al+3].CC(C)[O-].CC(C)[O-].CC(C)[O-] SMZOGRDCAXLAAR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N benzoyl chloride Chemical compound ClC(=O)C1=CC=CC=C1 PASDCCFISLVPSO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N bis(2-methylpropyl)aluminum Chemical compound CC(C)C[Al]CC(C)C SIPUZPBQZHNSDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007664 blowing Methods 0.000 description 1
- 229910000085 borane Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 244000144987 brood Species 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000019994 cava Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 229940110456 cocoa butter Drugs 0.000 description 1
- 235000019868 cocoa butter Nutrition 0.000 description 1
- 229910000365 copper sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001771 cumulus cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;methanol Chemical compound OC.CCOCC MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 210000003195 fascia Anatomy 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000003325 follicular Effects 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000002149 gonad Anatomy 0.000 description 1
- 229940094892 gonadotropins Drugs 0.000 description 1
- 210000002503 granulosa cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003313 haploid nucleated cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- BNTRVUUJBGBGLZ-UHFFFAOYSA-N hydron;pyridine-4-carbonyl chloride;chloride Chemical compound Cl.ClC(=O)C1=CC=NC=C1 BNTRVUUJBGBGLZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- CAHGCLMLTWQZNJ-BQNIITSRSA-N lanosterol Chemical compound C([C@@]12C)C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]1CCC1=C2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@@H](CCC=C(C)C)C)CC[C@]21C CAHGCLMLTWQZNJ-BQNIITSRSA-N 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000014380 magnesium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 230000005906 menstruation Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002394 ovarian follicle Anatomy 0.000 description 1
- 230000016087 ovulation Effects 0.000 description 1
- 230000000624 ovulatory effect Effects 0.000 description 1
- 125000004430 oxygen atom Chemical group O* 0.000 description 1
- 230000008775 paternal effect Effects 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N potassium tert-butoxide Chemical compound [K+].CC(C)(C)[O-] LPNYRYFBWFDTMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 239000013014 purified material Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000018046 regulation of meiosis Effects 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- HBEFYGYBMKPNSZ-UHFFFAOYSA-N s-phenyl chloromethanethioate Chemical compound ClC(=O)SC1=CC=CC=C1 HBEFYGYBMKPNSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 1
- 230000014639 sexual reproduction Effects 0.000 description 1
- 238000003307 slaughter Methods 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000011343 solid material Substances 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002328 sterol group Chemical group 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 239000012485 toluene extract Substances 0.000 description 1
- 239000000196 tragacanth Substances 0.000 description 1
- 235000010487 tragacanth Nutrition 0.000 description 1
- 229940116362 tragacanth Drugs 0.000 description 1
- DBGVGMSCBYYSLD-UHFFFAOYSA-N tributylstannane Chemical compound CCCC[SnH](CCCC)CCCC DBGVGMSCBYYSLD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001665 trituration Methods 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J43/00—Normal steroids having a nitrogen-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton
- C07J43/003—Normal steroids having a nitrogen-containing hetero ring spiro-condensed or not condensed with the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not condensed
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
- A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J53/00—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by condensation with a carbocyclic rings or by formation of an additional ring by means of a direct link between two ring carbon atoms, including carboxyclic rings fused to the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton are included in this class
- C07J53/001—Steroids in which the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton has been modified by condensation with a carbocyclic rings or by formation of an additional ring by means of a direct link between two ring carbon atoms, including carboxyclic rings fused to the cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton are included in this class spiro-linked
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Gynecology & Obstetrics (AREA)
- Pregnancy & Childbirth (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Cosmetics (AREA)
Abstract
Деякі стерини, екстраговані з бичачих сім’яників та з фолікулярної рідини людини, а також хімічно споріднені до них стерини можуть використовуватись для регулювання мейозу в статевих клітинах.
Description
Опис винаходу
Область техники, к которой относится изобретение 2 Настоящее изобретение относится к некоторьім производньм стерина и к их применению в качестве лекарственньїх средств.
В частности, бьіло обнаружено, что некоторье производнье стерина могут бьіть использованьі! для регулирования мейоза.
Предпосьілки создания изобретения
Мейоз - зто исключительное важное собьітие у половьїх клеток, на котором основано половое размножение.
Мейоз содержит два мейотических деления. Во время первого деления происходит обмен между материнскими и отцовскими генами, прежде чем парьі хромосом разделятся на две дочерние клетки. Они имеют только половитну количества(1п) хромосом и 2с ДНК. Второе меотическое деление происходит без синтеза ДНК. Зто деление, таким образом, приводит к образованию гаплоидньх половьїх клеток только с 1с ДНК. 19 Мейотические собьтия одинаковьіь у мужских и женских половьїх клеток, но временная программа и процессь! дифференцировки, приводящие к образованию яйцеклеток и сперматозоидов, совершенно различнь.
Все женские половьіе клетки входят в профазу первого мейотического деления в начале жизни, часто до рождения, но задерживаются в развитиий в виде ооцитов на более позднем зтапе профазь(диктиатное состояние) вплоть до овуляции после наступления половой зрелости. Таким образом в начале жизни самка имеет запас ооцитов, которьй расходуется, пока не будет исчерпан. Мейоз у самок не заканчиваєтся до самого оплодотворения и в результате дает только одну зрелую яйцеклетку и два недоразвитьїх полярньїх тельца на половую клетку. В противоположность зтому лишь некоторье из мужских половьїх клеток входят в мейоз с момента наступления половой зрелости и уходят из родовой популяции половьїх клеток на протяжений всей жизни. Раз начавшись, мейоз у мужской клетки продолжается без существенной задержки и дает 4 с 22 сперматозоида. Го)
Лишь немного известно о механизмах, которне управляют возникновением мейоза у самцов и самок. Новье исследования показьшвают, что ответственньмми за остановку мейоза могут бьіть фолликулярнье пуринь! - гипоксантин или аденозин |Оомупв5, 85. т. екаі. ЮОем. Віої 82(1985) 454.458; Еррій, 9. 9. еї. аїЇ. Оеум. Віо). 119(1986) 313 321; и Оом/пв, 5. М. Мої. Кермоа. Юеу. 35(1993) 82 - 94) с
Наличие диффундируемого мейоз - регулирующего вещества первоначально бьло описано (Ву Вузкомеїа| си в связи с культуральной системой из половьїх желез плодньїх мьішей |ВузкКом, А. 0. еї. а. Оем Віої. 52(1976) 193 -200) ее,
Яичником плодной мьши, в котором проходил мейоз, бьло скретировано мейоз - индуцирующее «ше вещество(МІ5), а из морфологически дифференцированного семенника с оставшимися, немейотическими 32 половьіми клетками бьло вьіделено мейоз - предотвращающее вещество(МРО). Бьіло предположено, что о относительнье концентрации МІ5 и МР5 регулировали начало, остановку и возобновление мейоза в мужских и женских половьїх клетках |ВузКом, А. 0. еї. а). іп (бе РПузіоїоді ої Кергодисіоп(едв. Кпобрії, Е. апа Меїї,
У. О., Камеп Ргезз, Мем Магк(1994)|. «
Очевидно, что если мейоз можно регулировать, что можно управлять размножением. К сожалению до сих З пор невозможно идентифицировать мейоз - индуцирующеє вещество. с Краткое изложение существа изобретения з» Неожиданно бьло обнаружено, что некоторье стеринь), известнье как промежуточнье продукть! в биосинтезе холестерина и некоторье новье, структурно родственнье синтетические стеринь! могут бьть использованьї для регулирования мейоза. сл 45 Таким образом, настоящее изобретение относится к соединению общей формульк(1) 7 а Е (22) - ма 70 3 ; 3 г й
Ко) , сао, 0) «ЕК, о йо рай к ке в пе? во где К! и К? независимо вьібраньі из группьі, содержащей водород, неразветвленньій или разветвленньй
С.-Св алкил, которьій может бьіть замещен галогеном или гидрокси, или КЕ и 82 вместе с углеродньім атомом, к которому они присоединень, образуют циклопентановое или циклогексановое кольцо;
ВЗ и вк?! вместе представляют дополнительную связь между углеродньмми атомами, к которьім они присоединень, и в зтом случає ЕР представляет водород и КЗ и ВК" либо представляют водород, либо вместе бо представляют дополнительную связь между углеродньіми атомами, к которьім они присоединень, или
В? и в! вместе представляют дополнительную связь между углеродньми атомами, к которьім они присоединень,, и в зтом случає ЕЗ представляет водород и КЗ и ВК" либо представляют водород, либо вместе представляют дополнительную связь между углеродньіми атомами, к которьім они присоединень, или
Вл и вк? вместе представляют дополнительную связь между углеродньмми атомами, к которьім они присоединень, и в зтом случае ВУ, 2? и В! все представляют водород,
ВЗ и КУ? представляют водород или вместе представляют дополнительную связь между углеродньми атомами, к которьім они присоединеньї, и 0 ВО представляєт либо водород, либо ацильную группу, включающую фосфоногруппу или сульфогруппу, или КО представляет группу, которая вместе с остальной частью молекуль! образует простой зфир, для применения в качестве лекарственного средства.
Настоящее изобретение касаєтся также новьїх соединений общей формульк1).
В настоящем контексте вьіражение "регулирование мейоза" понимается как означающее то, что соединения могут бьіть использованьї для стимуляции мейоза іп мігго, іп мімо, и ех мімо.
Таким образом, более конкретно настоящее изобретение касается применения соединения приведенной вьіше общей формульк1) в регулирований мейоза.
И еще настоящее изобретение относится к способу регулирования мейоза в половой клетке млекопитающего, включающему введение зффективного количества соединения приведенной вьіше общей формуль(1) в половую клетку, нуждающуюся в таком лечении.
Подробное описание изобретения
Бьіло обнаружено, что мейоз - индуцирующие вещества, зкстрагированньсе как из бьічьих семенников, так и из фолликулярной жидкости человека, способнь! вьізьівать возобновление мейоа в культурированньїх социтах мМьіши(ооцитньй тест), а также стимулировать мейоз в мужских половьїх клетках культурированньїх семенников сч плодной мьіши(гонадньій тест). Мейоз - индуцирующее вещество вьірабатьваєтся зрельми семенниками различньїх млекопитающих, включая мужчину, а также обнаружено в зрельїх яичниковьїх фолликулах некоторьх о видов млекопитающих, включая женщину. Из примеров 1 и 2 видно, что мейоз - индуцирующим веществом, найденньім в бьічьих семенниках, является 4,4-диметилзимостерин, а мейоз - индуцирующим веществом, обнаруженньім в фолликулярной жидкости человека, - 4,4-диметил-5о-холеста-8, 14, 24-триен-Зр-ол. сч зо О существований мейоз - индуцирующих веществ известно уже некоторое время. Но до сих пор ничего не известно об идентификации мейоз - индуцирующего вещества или веществ. Насколько известно создателям с настоящего изобретения, до сих пор еще соединения общей формульк1) не нашли практического применения в «о медицине. В частности, соединения общей формульц(1і) до сих пор еще не бьли использовань! в качестве лекарственньїх средств для регулирования мейоза. -
Существует несколько видов влияния на мейоз. В соответствий с предпочтительньм вариантом ю осуществления настоящего изобретения соединения общей формульк(1) используют для стимуляции мейоза. В соответствии с другим предпочтительньмм вариантом настоящего изобретения соединения общей формульк1) используют для стимуляции мейоза у людей. Так, соединения формульк1) много обещают как новне средства регулирования плодовитости без обьічньїх побочньїх зффектов на соматические клетки, которне известнь! из « 0 Мспользования до настоящего времени гормональньїх контрацептивов, изготовленньїх на основе зкстрагенов - с и/или гестагенов. При применении в качестве противозачаточного средства у самок мейоз - индуцирующее вещество может бьіть введено, чтобь! вьізвать преждевременное возобновление мейоза в доцитах, когда они з еще находятся в растущем фолликуле, до овуляционного пика гонадотропинов. У женщинь! возобновление мейоза может, например, бьіть, вьізвано через неделю после прекращения предьідущей менструации. Будучи овулировань,, полученнье перезрельсе ооцить найболее вероятно не будут оплодотворень!. с Нормальньй менструальньй цикл, видимо, не будет осуществлен. В зтой связи важно отметить, что присутствие мейоз - индуцирующего вещества не влияет на биосинтез прогестерона в культурированньх - зернистьїх клетиках(ісоматические клетки фолликула) человека, тогда как зстрогень! и гестагеньі, используемье
Ф в до сих пор применяемьх гормональньх контрацептивах, оказьвают вредное влияние на биосинтез 5р прогестерона. ко В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения мейоз - индуцирующее вещество общей кз формульк1) может бьіть использовано для лечения некоторьїх случаев бесплодия у самок, включая женщину, путем введения его самкам, которне вследствие недостаточного собственного вьірабатьвания МІЗ не способнь продуцировать зрелье ооцить. Кроме того, при осуществлений оплодотворения іп міго лучшие результать Ддостигаются при добавлений к среде, в которой содержатся социтьі, мейоз - индуцирующего вещества общей формульк1). (Ф) Кроме того, при бесплодии у самцов(включая мужчин), вьзванном недостаточньм собственньм ко вьрабатьшанием мейоз - индуцирующего вещества, введение мейоз - индуцирующего вещества общей формульц(1) может смягчить проблему. во Введение композиций, содержащих соединение формульк1), может бьїть осуществлено любьм способом, зффективно обеспечивающим транспортировку активного соединения к месту его действия.
Так, при необходимости введения млекопитающему соединений по настоящему изобретению их удобно изготавливать в виде фармацевтической композиции, содержащей по крайней мере одно соединение общей формуль(1) в сочетаний с фармацевтически приемлемьм носителем. Для перорального применения такие 65 Композиции изготавливают в форме капсул или таблеток.
Из сказанного вьіше понятно, что требуемая схема введения композиции зависит от того состояния, которое нужно вьілечить. Так, при лечении бесплодия введение может бьть только разовое или в течение ограниченного периода, например до наступления беременности. При использований в качестве контрацептива мейоз - индуцирующее вещество общей формуль(1) принимают либо непрерьівно, либо периодически. Когда
Женщина принимает его в качестве контрацептива не непрерьвно, то важно соблюдать согласование во времени относительно менструального цикла.
Фармацевтические композиции могут содержать о носители, наполнители, усилители всасьівания, консерванть!, буферьі, вещества для регулирования осмотического давления, вещества для улучшения распадаемости таблеток и другие компоненть!, которне традиционно используют в данной области техники. 7/0 Примерами твердьх носителей являются карбонат магния, стеарат магния, декстрин, лактоза, сахар, тальк, желатин, пектин, трагакант, метилцеллюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, низкоплавящиеся воски и масло какао.
Жидкие композиции включают стерильньсе растворьї, суспензии и змульсии. Такие жидкие композиции могут бьїть пригодньіми для иньекции или для использования в связи с оплодотворением ех мімо и іп міго. Жидкие 7/5 Композиции могут содержать другие компоненть, традиционно используемье в данной области техники, некоторніе из которьїх упомянуть! в приведенном вьіше перечислении.
Далее, композиция для чрезкожного введения соединения по настоящему изобретению может бьть изготовлена в форме пластьіря, а композиция для введения через нос - в виде азрозоля в жидкой или порошкообразной форме.
Применяемая доза соединения по настоящему изобретению определяется лечащим врачом и зависит, кроме всего прочего, от конкретного используемого соединения, от способа введения и от цели применения.
Предпочтительньми соединениями формуль! (1) являются следующие:
Холест-7-ен-3р-ол, 4-Метилхолест-7-ен-3 р-ол, с 4-Зтилхолест-7-ен-3 р-ол, 4,4-Диметилхолест-7-ен-3 р-ол, о 40-Метил-4р-зтилхолест-7-ен-3р-ол, 4а-Зтил-4р-метилхолест-7-ен-3 р-ол, 4,4-Дизтилхолест-7-ен-3 Д-ол, с 4-Пропилхолест-7-ен-3 р-ол, сч 4-Бутилхолест-7-ен-З3 р-ол, 4-Изобутилхолест-7-ен-З3 р-ол, і-й 4,4-Тетраметиленхолест-7-ен-З р-ол, ч з 4,4-"Пентаметиленхолест-7-ен-З р-ол, ою
Холест-8-ен-3р-ол, 4-Метилхолест-8-ен-3 р-ол, 4-Зтилхолест-8-ен-3 р-ол, 4,4-Диметилхолест-8-ен-3 р-ол, « 40-Метил-4р-зтилхолест-8-ен-3 р-ол, - с 4а-Зтил-4р-метилхолест-8-ен-3 р-ол, ч 4,4-Дизтилхолест-8-ен-3 р-ол, » 4-Пропилхолест-8-ен-З Д-ол, 4-Бутилхолест-8-ен-3 р-ол, 4-Изобутилхолест-8-ен-3 р-ол, і-й 4,4-Тетраметиленхолест-8-ен-З р-ол, -ї 4,4-"Пентаметиленхолест-8-ен-3 р-ол, бу Холест-8(14)-ен-3 Д-ол, 4-Метилхолест-8(14)-ен-3 р-ол, де 4-Зтилхолест-8(14)-ен-3 р-ол, з 4,4-Диметилхолест-8(14)-ен-З3 рД-ол, 40-Метил-4р-зтилхолест-8(14)-ен-3 Д-ол, 40-Зтил-4р-метилхолест-8(14)-ен-3 р-ол, 4,4-Дизтилхолест-8(14)-ен-3 р-ол, о 4-Пропилхолест-8(14)-ен-3 р-ол, 4-Бутилхолест-8(14)-ен-3 р-ол, о 4-Изобутилхолест-8(14)-ен-3 р-ол, 4,4-Тетраметиленхолест-8(14)-ен-3 р-ол, бо 4,4-Пентаметиленхолест-8(14)-ен-3 р-ол,
Холеста-8,14-диен-3 Д-ол, 4-Метилхолеста-8,14-диен-3 р-ол, 4-Зтилхолеста-8,14-диен-3 Д-ол, в5 4,4-Диметилхолеста-8,14-диен-3 р-ол, 40-Метил-4р-зтилхолеста-8,14-диен-З р-ол,
4а-Зтил-4р-метилхолеста-8,14-диен-З р-ол, 4,4-Дизтилхолеста-8,14-диен-З р-ол, 4-Пропилхолеста-8,14-диен-З р-ол, 4-Бутилхолеста-8,14-диен-З р-ол, 4-Изобутилхолеста-8,14-диен-З3 р-ол, 4,4-Тетраметиленхолеста-8,14-диен-З р-ол, 4,4-Пентаметиленхолеста-8,14-диен-З р-ол,
Холеста-8,24-диен-3З Д-ол, 70 4-Метилхолеста-8,24-диен-3 р-ол, 4-Зтилхолеста-8,24-диен-З р-ол, 4,4-Диметилхолеста-8,24-диен-3 р-ол, 40-Метил-4р-зтилхолеста-8,24-диен-З р-ол, 40-Зтил-4р-метилхолеста-8,24-диен-З Д-Ол, 4,4-Дизтилхолеста-8,24-диен-З р-ол, 4-Пропилхолеста-8,24-диен-3 р-ол, 4-Бутилхолеста-8,24-диен-З р-ол, 4-Изобутилхолеста-8,24-диен-З р-ол, 4,4-Тетраметиленхолеста-8,24-диен-З р-ол, 4,4-Пентаметиленхолеста-8,24-диен-З р-ол,
Холеста-8,14,24-триен-3 р-ол, 4-Метилхолеста-8,14,24-триен-З р-ол, 4-Зтилхолеста-8,14,24-триен-З р-ол, с 29 4,4-Диметилхолеста-8,14,24-триен-3 р-ол, Ге) 40-Метил-4р-зтилхолеста-8,14,24-триен-З р-ол, 40-Зтил-4р-метилхолеста-8,14,24-триен-3 Д-ол, 4,4-Дизтилхолеста-8,14,24-триен-3 Д-ол, сч зо 4-Пропилхолеста-8,14,24-триен-3 р-ол, 4-Бутилхолеста-8,14,24-триен-З р-ол, с 4-Изобутилхолеста-8,14,24-триен-З р-ол, Ге) 4,4-Тетраметиленхолеста-8,14,24-триен-З р-ол, 4,4-Пентаметиленхолеста-8,14,24-триен-3 Д-ол - и их сложньве и простье зфирь. ІФ)
Предпочтительньми сложньмми зфирами формуль(1) являются те, в которьїх В 19 представляет ацильную группу карбоновой кислоть!, которая может бьіть разветвленной или неразветвленной или циклической и может содержать необязательно замещенную аминогруппу и/или 1 или 2 атома кислорода в дополнение к « карбонильному кислороду сложнозфирной группь), которьій связьіваєт В 19 со стериновьм скелетом. Когда К19 представляєт ацильную группу, она содержит предпочтительно от 1 до 20 углеродньх атомов, болеє не) с предпочтительно от 1 до 12 углеродньїх атомов, еще более предпочтительно от 1 до 10 углеродньїх атомов и "з еще более предпочтительно от 1 до 7 углеродньїх атомов. Кислота, от которой произведен радикал БО, может бьіть дикарбоновой кислотой. Примерами К/О являются: ацетил, бензоил, пивалойил, бутирил, никотиноил, 15 изоникотиноил, гемисукциноил, геминлутароил, гемималоил, гемифталойил, бутилкарбамоил, фенилкарбамоил, сл бутоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил, зтоксикарбонил, 4-диметиламинометилбензоил, 4-дизтиламинометилбензоил, 4-дипропиламинометилбензоил, 4--(морфолинометил)-бензоил, - 4-(4-метил-1-пиперазинилметил)-бензоил, З-диметиламинометилбензоил, З-дизтиламинометилбензоил,
Фу З-дипропиламинометилбензойл, З-(морфолинометил)бензоил, 3-(4-метил-1-пиперазинилметил)бензойил, сульфо(в зтом случає(1) означает сложньій зфир или соль - сульфат) или фосфоно(в зтом случає(1) означаєет ко 50 сложньй зфир или соль -фосфат).
ГІ Предпочтительньми простьмми зфирами формуль(1) являются те, в которьх В. 9 представляєт метильную, метоксиметильную, бензильную или пивалоилоксиметильную группу.
Соединения по настоящему изобретению, встречающиеся в природе, могут бьіть полученьі из природньх Мсточников известньіми сами по себе способами. В соответствии с другим вариантом их можно - подобно родственньм структурно синтетическим стеринам по настоящему изобретению - получить путем синтеза (Ф. известньїми как таковьіми способами. ко Далее настоящее изобретение проиллюстрировано на следующих примерах, которье не следует считать ограничивающими обьем защитьї. Признаки, раскрьтье в предшествующем описаний, и в следующих далее бо примерах, могут служить - раздельно или в любом их сочетаний - материалом для реализации изобретения в различньїх его видах.
Примерь!
Пример 1.
Вьіделение, очистки и идентификация мейоз - индуцирующего вещества(МІ5) из бьічьих семенников 65 Семенники шестилетнего старого бька(Оапізп І апагасе) бьіли извлеченьі сразу же после убоя. Удалив белочную оболочку, текстикулярную ткань поместили на сухой лед и хранили при -80"С, Замороженную тестикулярную ткань(92г) измельчали на кусочки менее 1мм и подвергали лиофильной сушке(вьімораживанием) в темноте до полного вьісьїхания(приблизительно 90ч). Лиофилизированную ткань зкстрагировали 400мл н-гептана (І іспгозоїм, Мегск 4390, Германия) под азотом с перемешиванием в течение 24ч при 2070. Суспензию фильтровали и твердьй материал зкстрагировали еще раз так же, как описано вьіше.
Обьединеннье органические фазьі упаривали досуха на роторном испарителе при комнатной температуре, получив в результате 981мг зкстрагированного материала. Зтот материал растворяли в н-гептане и распределяли по 15 пробиркам, из которьїх виіпаривали н-гептан. Пробирки хранили под азотом при 4"С в темноте. 70 Для зкстрктов использовали трехслойную очистку путем ВОЗЖХ(вьісокозффективная жидкостная хроматография):
На первой остадиий содержимое оодной опробирки орастворяли в БОмкл 50956-ного(обьем/обьем) тетрагидрофурана(ТГФ) в воде и переносили на колонку для обращенно - фазовой ВЗЖХ(І іспго Зрпег 100 КР-8, заглушенная, 5мкм 250 х 4мм вн. диаметр, МегсК). Злюирование осуществляли при 40"С с использованием линейного градиента ТГФ, проходящего от 5095 до 10095 за 15мин(расход: Тмл/мин). Собирали 18 фракций по 1мл и испьїітьівали их на МІ - активность.
На второй стадии фракции с первой стадии, которье бьли найдень активньми при социтном тесте, растворяли в 50 - 100мкл 7095-ного ТГФ и переносили на колонку, аналогичную той, что бьіла использована на первой стадии. Злюирование осуществляли при 40"С с использованием линейного градиента ТГФ, проходящего 2о от 60965 до 7895 за 1бминут(Расход: Тмл/мин). Собирали 8 фракций по 1мл и испьітьівали их на МІ5 - активность.
На третьей стадии фракции с второй стадии, которье бьли найденьй активньми при социтном тесте, растворяли в 17ООмл смеси и н-гептан: 2-пропанол(98 : 2, обьем/обьем) и переносили на колонку для полупрепаративной ВОЖХ(Снпгот БЗрпег 5і бмкм, 250 х 7Омм вн. диаметр, Спготраск) Злюирование осуществляли при комнатной температуре с использованием подвижной фазьії, состоящей из смеси н-гептан: с дб г-пропанол, 98: 2(обьем/обьем) (расход: бмл/мин). Собирали 5 фракций по 2,5мл и испьітьівали их на МІЗ - о активность.
На всех стадиях злюирование контролировали УФ - детектированием при 22Онм.
Материал, прошедший через описанную вьше процедуру трехстадийной очистки, использовали для исследования молекулярной структурьі активного соединения путем спектрометрии ядерного магнитного с зо резонанса(ЯМР) и путем масс - спектрометрии.
Для получения ЯМР - спектра приблизительно мг очищенного материала растворяли в 0,бмл с дейтерохлороформа. Расщепленньй ЯМР - спектр на протоне "ЗС-1Н-ЯМР - спектр(с увеличением разрешения (Те) или без) и 20 ТОС5М - спектр бьіли записаньі на ЯМР - спектрометре ОгиКег АМХ2 400, снабженном инверсной широкополосной 5мм головкой с градиентной катушкой. Химические сдвиги 136-ЯМР в м.д.(5) для вьіделенного -
МІЗ дань в таблице 1 для сравнения с соответствующими данньїми для зимостерина |Таціог. М. ї. еї. а. 9. Пріа ІФ)
Кез. 22(1981) 171) и ланостерина |Еттопв, 0. Т. еї. а). Мадп. Кевз. Спет. 27(1989) 10121). ншишшш ч и з с з» : 4 о, р звв| во ва - врояаво; 0 пзмаово
Ф пз зва извв ю їз зв о ю во б5 25| 130,6 130,9 130,9
17111 вя ва 7917 тв тв в 17
Мас - спектрометрию осуществляли с использованием прибора о Ттіо 1000 для ЖХ и МС с интерфейсом
ЇМО для пучка частиц и программой І АВ-ВАЗЕ 2.1(Різопз Іпвігитепів) и с системой ВЗЖХ, содержащей 70 колонку(Спготраск), СпготерНпег 5і, Змкм, 100 х 4,6бмм. ВЗЖХ осуществляли при комнатной температуре с использованием смеси н-гептан: 2-пропанол, 98 : 2(обьем/обьем) в качестве подвижной фазьк(расход:
О,бмл/мин). Образец вводимого МІЗ растворяли в н-гептане. Масс - спектрометр работал в режиме злектронного удара. Результать дань! в таблице 2, где относительньсе вьісоть! пиков для вьіделенного продукта сравниваются с данньми для 4,4-диметилзимостерина из ссьілки 1. Под ссьілкой 2 "-" означаєт, что о /5 боответствующем пике сообщено также в зтом исследований. "-" под ссьІлкой 1 или 2 означаєт, что о соответствующем пике в зтих исследованиях не сказано.
Таблица 2
Ммоненюрі мя ме й 02300 сч з Меса? 033 о
Зо сч
ЗО - боковая цепь, СоНуз - положения 16 и 17, СзНе - положения 15, 16 и 17.
Ссьїлка 1: Вайосн еї. а). Рпоїоспетівігу 23(1984) 2219. (Те)
Ссьілка 2: Могітой еї. аї. Гірідв Апп. Спет. 708(1967) 230. - - «-
На основа "ЗС-ЯМР-спектра и молекулярной массь! 412, определенной путем масс - спектроскопий(МО), бьло предположено, что структура МІ5, вьіделенного из бьчих семенников, представляет собой ІС) 4,4-диметил-5о-холесте-8,24-диен-3 Д-ол, также обозначенньй как 4,4-диметилзимостерин(ОМ2). Химические сдвиги отдельньїх углеродньїх атомов МІ5 активного материала с третьей стадий очистки путем ВЗОЖХ сравнивали с химическими сдвигами структурно очень близко родственньх соединений ланостерина и « зимостерина. Наблюдаемьсе протоннье химические сдвиги, константьі взаимодействия и ТОС У-корреляции окончательно подтверждают, что вьіделенное соединение является 4,4-диметилзимостерином. о, с Пример 2 "» Вьіделение, очистка и идентификация мейоз - индуцирующего вещества(МІ5) из человеческой " фолликулярной жидкости.
Человеческую фолликулярную жидкость(ЕЕ) получали из фолликулов, отсосанньїх для сбора доцитов при лечений бесплодия путем оплодотворения іп мйго. Жидкость лиофилизировали и зкстрагировали н-гептаном и о зкстакт очищали, используя такие же продуктьї, как описаннье в примере 1. Соединение активного пика имело - молекулярной йон с от/2 - 410 и масс - спектр показал, что химическая структура молекуль! ЕЕ-МІ5 - 4,4-диметил-б5о(-холеста-8,14,24-триен-З р - ол.
Ме Методь!і: Масс - спектрометрию осуществляли с использованием прибора УС- Тгіо 1000 для ЖХ и МС с
ГІ 20 интерфейсом Ї1МС для пучка частиц и программой І АВ-ВАЗЕ 2.1(Різопе Іпзігитепів), соединенного с системой прямофазной ВЗЖХ, содержащей колонку(Спготраск), Спготе5рпег 5і, Змкм, 100 х 4мм в.д. и смесь н-гептан: г» 2-пропанол: метанол: аммиак(б8 : 30:02 : 0,2) в качестве подвижной фазь(расход: 0,бмл/мин). Образец вводимого МІЗ растворяли в н-гептане. Масс - спектрометр работал в режиме злектронного удара. Результать дань! в таблице 3.
ГФ! Таблица З ко Интерпретация
ІМІ М для ЕЕ-МІВ) бо 381 М-129|(М-80-Н2О17 (8С 5 111)
ЗО - боковая цепь.
Пример З
Получение 4р-метилзимостерина путем ферментации.
Стадия А
Штамм дрожжей КіІшпугеготусез риЇдагісиз АЗ410 засевали на скошенньїй агар УРО и вніращивали Здня при
З0"С в термостатированном инкубаторе. Добавляли в скошенньй агар 5мл стерильной средьі УЕ и дрожжевье колоний суспендировали в жидкой среде путем взбалтьвшания пробирки на вихревом смесителе. Затем суспензию клеток засасьвали в бмл стерильньій шприц и вводили в колбу для взбалтьшвания с двумя 19 отражателями на дне. Колба содержала 200мл средь 72УМ.
Колба закрепляли на вращающемся столе и обеспечивали размножение дрожжей в течение 24часов при 250об/мин, 30"С. Добавляли в колбу О04мл стерильного профильтрованного раствора амфотерицина В и продолжали размножение еще 25часов. Дрожжевье клетки собирали путем центрифугирования(Модель 6
Бекмана, 5"С, 1Омин, 4000об/мин) и промьівали один раз в воде. Суспензию клеток закривали в небольшом пластмассовом контейнере и хранили при -182С до окончательной зкстракции стеринов.
Упомянутьсе вьіше питательньсе средь и раствор амфотерицина В имели следующий состав:
Агар УРО
Дрожжевой зкстракт Аг се
КНоРОХ 1г Ге)
МазОд-7Нго ОБГ
Глюкоза 15г
Агар 20г
Дейонизированная вода 1000 мл сч сч рН регулировали до 5,8 перед автоклавированием при 1217С, 20мин. (Се)
Среда УЄЕ -
Дрожжевой зкстракт 1ог 3 Дейонизированная вода 1000Омл іс)
Автоклавирование 1217С, 20мин
Среда 7УМ
Дрожжевой зкстракт, Ойсо 20г «
Пептон, Васіо 1ог с 40 Водопроводная вода 1000мл З "» рН регулировали до 6,5 - 6,6 перед автоклавированием при 1217С, 20мин. Глюкоза(добавляли отдельно " после автоклавирования) бог.
Раствор амфотерицина В 1мг Фунгизона(лиофилизированньій брикет из 5ХОмг амфотерицина В, 41мг дезоксихолата натрия и 20,2мг о фосфата натрия производства ф. "ЗдицїрбрБ") растворяли в їмл дейонизированной водні. - Стадия В
Культивированньюе клетки со стадий А суспендировали в їОмл водьі и добавляли 1О0мл 4095-ного КОН в ме) метаноле. Смесь нагревали с обратньм холодильником в течение 4часов, оставляли на ночь при комнатной
Ге 20 температуре и затем дваждь! зкстрагировали 20мл н-гептана. Обьєединеннье зкстракть! промьівали 1095-нь/м раствором хлорида натрия и затем водой до нейтральной реакции(пять раз) и вьісушивали. После испарения ще растворителя осталось 40мг неочищенньх стеринов.
Стадия С
Неочищенньє стеринь! со стадии В растворяли в 1мл смеси н-гептана: 2-пропанол(98 : 2) и взбалтьівали на вихревом смесителе, центрифугировали при 5000об/мин в течение 1Омин и затем подвергали ВОЖХ:
ГФ! Колонка: ГГ ісп мо Зогр БІО. 1Омкм, 250 х 4мм внут. диаметр(Мегск)
Злюент: смесь н-гептан:2-пропанол(98 : 2) ко Расход: 1,мл/мин, 207
Детектирование: УФ при 220нм бо От нескольких проходов собирали пиковьіе фракции после б,амин злюйирования. Собраннье фракции обьединяли и вьшаривали растворитель, что дало остаток, которьій подвергали масс - спектрометрий и социтному тесту.
Даннье масс - спектра, приведеннье в таблице 4, идентичньї с данньми для 4В-метилзимостерина, зарегистрированньіми в библиотеке Национального бюро стандартов. б5
Таблица 4 нн ме! | 77771711 Мнтерпретация я 19 ЗО - боковая цепь.
Пример 4 Получение 4,4-диметилхолеста-8,14-диен-Зр-ола
Зто соединение бьіло получено так, как описано ру Зспгоеріег еї а); Спет; Змпгу апа РПузісв ої І іріаз 47(1988) 187, и показали такие физические константь, какие описань! в литературе.
Пример 5
Получение 4,4-диметилхолест-8-ен-Зр-ола
Стадия А
В 20мл пиридина растворяли при 0"С 2,48г 4,4-диметилхолеста-8,14-диен-3 Д-ола(пример 4). К полученному раствору добавляли 1,7г бензоилхлорида и смесь перемешивали при окружающей температуре всю ночь. сч ре После упаривания досуха добавляли 25мл толуола и после стандартной водной обработки, упаривания и растирания с ацетоном получили 2,3г(7495) кристаллического бензоата. (о)
ТН-ЯМР-спектр(СО Сіз, 5) показал характеристическиє сигнальі при: 8,1(д, 2Н), 7,55(т, 1Н), 7,(т, 2Н),
Б,А(с, широкий, 1Н), 4,2(дд, 1Н).
Стадия В с
В БОмл ТГФ растворяли 2,04г З-бензоилокси-4,4-диметилхолеста-8,14-диена(стадия А) и добавляли по каплям при 07"С Збомл 1М раствора борана в ТГФ. Смесь перемешивали при окружающей температуре всю с ночь, охлаждали до 0"С и добавляли к ней по каплям 14О0мл водьі, а затем добавляли Збомл 1095-ного Ге) гидроксида натрия и З78мл З090-ного пероксида водорода. После перемешивания в течение УОминут к смеси добавляли 1О00О0мл дизтилового зфира и водную фазу дваждь зкстрагировали дизтиловьм зфиром. -
Обьединеннье органические фазьі! промьівали два раза раствором бисульфита натрия и затем водой. После му упаривания продукт очищали путем хроматографии на 51О5(290-ньій дизтиловьй зфир в толуоле) и в результате получили 0,62г З-бензоилокси-4,4-диметилхолест-8-ен-15-ола. МС(молекулярньй ион): 534 4.
ТН-ЯМР-спектр(СО Сіз, 5) показал характеристические сигнальи при: 8,0(д, 2Н), 7,5(т, 1Н), 7,А(т, 2Н), « 4,75(м, 1Н), 4,1(м, 1Н).
Стадия С - с В 2,7мл пиридина при 0"С растворяли 0,54г 3-бензоилокси-4,4-диметилхолест-8-ен-15-ола и к полученному а раствору осторожно добавляли ЗЗмг диметиламинопиридина и 287мг фенилхлортиоформиата. Смесь "» перемешивали 20часов при окружающей температуре. После добавления 25мл дизтилового зфира смесь промьівали браз насьіщенньім раствором сульфата меди, водой, дваждь! 1095-ньім гидроксидом натрия, водой и рассолом и упаривали с получением О,бвг неочищенного 1 З-бензоил-4,4-диметилхолест-8-ен-15-фенилтиокарбоната, которьій дополнительно обрабатьшали путем - растворения в 20мл толуола и обработки 370мг гидрида трибутилолова и 20мг азоизобутиронитрила. Смесь нагревали при 907"С в течение 20минут и повторяли ту же самую обработку. После упаривания смесь (о) подвергали грубой очистке путем хроматографии на ЗіОо(гептан : метиленхлорид - 70: 30) и в результате т 50 получили 150мг сього / З-бензоилокси-4,4-диметилхолест-8-ена с о примесью соответствующего 8,14-диена(стадия А).
Ко) Стадия Ю
В 2мл метиленхлорида, охлажденного до 0"С, растворяли 150мг смеси, полученной на стадии С. Добавляли по каплям О0,7мл диизобутилалюминийгидрида и через 15минут осторожно добавляли 0,15мл водьі. Затем добавляли 25мл дизтилового зфира и органическую фазу промьівали насьищщенньім раствором виннокислого калий-натрия два раза, водой и рассолом и упаривали с получением 13Омг смеси, которую подвергали о хроматографии на смеси АоМОз5/5105 02 |полученной так, как описано в Спет. 2 РПуз. ОЇ Ііріаз 63(1992) 1151 іме) с злюированием толуолом. Кристаллизация из смеси зфир-метанол дала 49мг целевого соединения.
Температура плавления: 154 - 15570. МС(молекулярньй ион): 414 4. 60 130-ЯМР-спектр(СО Сіз 100,6МГЦц) показал характеристические сигнальй при: 78,49(С3), 127,49(Св), 135,35(Со).
Пример 8
Получение З-ацетокси-4,4-диметилхолеста-8,14-диена
В 7,Бмл пиридина и 7,5мл уксусного ангидрида растворяли 1,3г 4,4-диметилхолеста-8,14-диен-З-ола 65 |ЗсПпгоеріег еї а); Спет; віги апа РНуз ої І іріаз 47(1988) 187)| и раствор перемешивали при 237"С всю ночь.
Смесь упаривали в вакууме, десорбировали два раза толуолом и очищали путем флзш - хроматографии на зіОо(толуол). Первне ЗО00мл злюата упаривали и продукт кристаллизовали из дизтилового зфира с получением 140мг З-ацетокси-8,14-диметилхолестадиена.
Температура плавления: 120 - 125"С(с разложением). МС(молекулярньй ион): 454 4.
Т"Н-ЯмМр-спектр(СО Сі з 5) ооказал характеристические сигналь! при: 5,4(с, широкий, 1Н), 4,5(дд, 1Н), 2,0(с, зн).
Пример 7
Получение холеста-8,14-диен-З3В-ола
В смеси 2,7мл бензола, 19мл зтанола и 2,7мл концентрированной хлороводородной кислоть! растворяли 70. 77Омг дегидрохолестерина и раствор нагревали при температуре кипения с обратньім холодильником в течение
Зчасов. Смесь охлаждали на ледяной бане, получив в результате первьій сбор(11Омг) кристаллов. Вьіпаривание фильтрата досуха и кристаллизация из смеси зфир/метанол дали второй сбор(220мг) кристаллов, которьй обьединяли с первьім сбором и хроматографировали на смеси АоМО з/5іОо(полученной так, как описано в примере 5, стадия Ю) с злюированием 2,590-ньимм ацетоном в толуоле, получив в результате 94мг чистого 75 холеста-8,14-диен-3В-ола. Температура плавления: 113 - 114,5" МС(молекулярньй йон): 384,4.
Т"Н-ЯМР-спектр(СО СІ з, 5 ) ородукта показал характеристические сигналь! при: 5,35(с, широкий, 1Н), З,б(м, 1н). 13ЗС-ЯМР-спектр(СО Сіз 50,3МГц) показал характеристические сигнальь при: 70,99(С3), 117,42(Св), 123,1(Св), 140,8(Со), 151,1(С.4).
Пример 8
Получение 4,4-тетраметиленхолеста-8,14-диен-З-ола
Стадия А
В 15Бмл 2-бутанола растворяли 1,15г дегидрохолестерина, добавляли 0,34г изопропоксида алюминия и смесь нагревали при температуре кипения с обратньім холодильником в течнене 75минут. Охладив смесь на с 29 ледяной бане, добавляли 1бмл в 2 н.хлороводородной кислотьі, разделяли фазь и органическую фазу Ге) промьшвали два раза 7,б5мл 2 н.хлороводородной кислоть. Водную фазу зкстрагировали толуолом и обьединеннье органические фазьі промьівали водой и рассолом, сушили и упаривали с получением 1,18г неочищенного холеста 5,7-диен-З-она в виде вязкого масла. зо Т"Н-ЯМР-спектр показал характеристические сигналь! при: 5,8(с, 1Н), 5,2(м, 1Н), З,2(д, 1Н), 2,7(д,д, 1Н). см
Стадия В с
В 1бмл трет-бутанола при 45"С растворяли 0,67г трет-бутоксида калия, добавляли 0,57г (Се) холеста-5,7-диен---она и смесь перемешивали ЛОминут. Добавляли 0,47г 1,4-димодбутана и смесь перемешивали ЗОминут. Вьіпаривали растворитель, остаток вновь растворяли в толуоле и воде и добавляли «- немного рассола, чтобь! вьїізвать разделение фаз. Органическую фазу промьмвали четьре раза водой и ою обьединеннье воднье фазьї зкстрагировали один раз толуолом. Обьединеннье толуоловье зкстракть! сушили и упаривали с получением 0,45г вспененного материала, которьій после кристаллизации из смеси дизтиловьй зфир-метанол дал 0,35г кристаллического 4,4-тетраметиленхолета-5,7-диен-З-она. МС(молекулярньй он): 436,4. « дю 1Н-ЯМР-спектр(СО СІ з 5) ооказал характеристические сигналь! при: 5,75(д, 1Н), 5,5(м, 1Н). -
Стадия С с В бмл ТГФ суспендировали 13Омг Гі АН) и к суспензий добавляли по каплям в течение ЗбОминут 1,97г :з» 4,4-тетраметиленхолеста-5,7-диен-З-она, растворенного в 40мл ТГФ. Спустя 15минут после окончания добавления все еще оставалась некоторая часть непрореагировавшего исходного материала(ТСХ) и потому 415 добавляли еще б5мг ГІАІН у. После перемешивания в течение ЗОминутОреакция закончилась, после чего сл добавляли по каплям 0О,Умл водьі, растворенной в бмл ТГФ. После ЗОминут перемешивания добавляли избьіточное количество сульфата магния и смесь перемешивали еще ЗОминут, фильтровали и упаривали -й досуха. Остаток растворяли в 25мл дизтилового зфира и 25мл метанола и зфир осторожно удаляли в вакууме. бо После перемешивания на протяжениий ночи, вьіделяли путем фильтрования 1,75г кристаллического 4,4-тетраметиленхолеста-5,7-диен-З-ола. іме) Ме(молекулярньй ион): 438,4.
Із ТН-ЯМР-спектр показал характеристические сигналь! при: 5,8(д, 1Н), 5,5(м, 1Н), 3,5(м, 1Н).
Стадия Ю
В смеси 2,3в8мл бензола, 17,5мл зтанола и 2,3в8мл концентрированной хлороводородной кислоть! растворяли 77Омг соединении, полученного на стадиий С, и раствор нагревали с обратньм холодильником в течение 16часов и упаривали в вакууме. Остаток вновь растворяли в 5мл толуола, фильтровали и хроматографировали (Ф) на колонке среднего давления с АОМО з/5іОо(гептан : толуол - 10 : 90) получив в результате З5мг ка 4,4-тетраметиленхолеста-8,14-диен-З-ола. МС(молекулярньй ион): 438,4.
Т"Н-ЯМР-спектр(СО СІ з 5) ородукта показала характеристические сигналь! при: 5,35(с, широкий, 1Н), З,З(дд, 6о ЛН). 13С-ЯМР-спектр(СО Сіз, 100,6МГЦц) показал характеристические сигнальй при: 79,0(С3з), 117,4(Сів), 122,9(С8), 141,5(Со), 151,1(С.5).
Пример 9
Получение 4,4-диметилхолест-8(14)-ен-3В-ола 65 В 20О0мл дизтилового зфира и 20мл уксусной кислоть! растворяли 580мг 4,4-диметилхолест-8-ен-З3В,-ола.
Добавляли бомг 1095-ного Ра/С катализатора и смесь оставляли при перемешиваний на ночь под водородом при З,5атм. Удаляли катализатор и фильтрат концентрировали до 1Омл, в результате чего началась кристаллизация. Добавляли 1Омл метанола и через 1бчасов собирали кристалльі. Перекристаллизация из метанола дала 23Омг материала, которьй, как показали "Н- и "ЗС-ЯМР-спектрьі бьл смесью 8(9)- и 8(14)-изомеров.
Смесь вновь растворяли в 10мл дизтилового зфира и 1Омл уксусной кислотьі. Добавляли 75мг 590о-ного РУС катализатора и смесь обрабатьвали всю ночь водородом при атмосферном давлении. Удалив катализатор, вьшпаривали растворитель и кристаллический остаток растирали с 5мл метанола, получив в результате 190мг чистого 4,4-диметилхолест-8(14)-ен-3В-ола. МС(молекулярньй ион): 414,4. 70 13С-ЯМР-спектр(СО Сіз 100,6МГц) показал характеристические сигнальь при: 79,24(С3а) ! 126,11(Св), 142,29(С. 4).
Пример 10
Испьітание мейоз - индуцирующего вещества в ооцитном тесте,
Животнье
Недоразвитьїх мьішей - самок(«ВбО 2-Е1, линия С57В1/2)) держали при регулируемьїх освещеницй(14ч света, 10ч темнотьї) и температуре с употреблением пищи и водьі по желанию. Когда животнье достигли массь 13 - 16г(что соответствует возрасту 20 - 22дня отроду), им сделали одну иньекцию(внутрибрюшинно) человеческого менолаузального гонадотропина(Нитедоп, Огдапоп, Мегпегіапаз), содержащего приблизительно 20 МЕД ЕЗ
Н(фолликулостимулирующий гормон) и 20 МЕД |Н(лютеинизирующий гормон) (Люере, ЗпПеї аї, Нит. Кегод 8(1993) 385 - 88). Спустя вчасов животньїх убивали путем цервикального(шейного) смещения.
Сбор и культивирование ооцитов
После извлечения ямчников помещали их в НХ - среду(смотри ниже) и освобождали от инородной ткани.
Среда для сбора и культивирования состояла из минимально необходимой средь Иглеса(Ріож, США), содержащей 4 мМ гипоксантина, Змг/мл бьічьего сьівороточного альбемина, 0,23мММ пирувата натрия, 2ММ с глутамина, Л00ЕД/мл пенициллина и 100мкг/мл стрептомицина(все Зідта, США). Зту среду назьшвают НХ - о средой. Такую же среду, но без НХ использовали в качестве контрольной средь.
Антральнье фолликульї яичников прокальвали под препаровальной лупой иглой калибра 27. Отбирали заключеннье в кумулус(совокупность оболочек) клеткі(СЕО) одинакового размера и промьівали их три раза-в свежей НХ - среде. с
Ооцитьі, освобожденнье от клеток кумулуса, т.е. денудированньієе(оголеннье) социть(О0О) получали путем осторожной продувки СЕО через ротовую пипетку с отверстием очень малого диаметра СЕО и ро см культивировали в тарелках с 4 ячейками(Мипсіоп, Дания), содержащих 0,5мл НХ - средьі, кроме контрольньмх, (Се) которье культивировали в контрольной среде. Каждая ячейка содержала 35 - 50 ооцитов. Культурь! для испьітания бьіли приготовлень с разньіми концентрациями испьітуемьїх соединений, как указано в таблице 5. --
Культурь! приготавливали при 377С и 100956-ной влажности с 595 СО» в воздухе. Время культивирования ІС о) составляло 24 часа.
Проверка социтов
По окончаний периода культивирования подсчитьшвали число ооцитов с ядром(ОМ) или с разрушением « ядра(ЗУвВО) и ооцитов с полярньмм тельцем (РВ) под инвертационньм микроскопом с дифференциальной интерференционно - контрастной аппаратурой. Вьічисляли процент ооцитов с ОМВО от общего числа ооцитови /-- с процент ооцитов с РВ от УВО. Результать! для БО и СЕО, вьічисленньсе в виде единиц активности МІ5, дань в а таблице 5. Одну единицу активности МІ5 определяют как: ни ОМВО кр: 2 и число единиц активности МІ5 вьічисляють как:
Мн уко вот. -й БОУВО контр. (22) ку з роко рояля яз, ово вою о прово о 011011 4йдиметмлвАхолеста 06 231.././.ЙИрИЮИ0оз во ровом ооо ровом б5 4,4-Диметилхолест-8-ен-ЗВ-ол. 0,81 12,8 0,03 дао диметилхолеста-в 4 диен-вол |225| 0.777777 зо
Пример 11 Испьттание мейоз - индуцирующего вещества в гонадном тесте
Гонадньй тест вьіполняли, по существу, так, как описано бу ВузКом,А.. еї аІ Мої. Кермод, Юем.34(1993) 47 - 52. Результать! приведеннье в таблице 6, оценивали полуколичественно, как описано Бу У/езіегдаага, |. еї аї
Еепії 2бегії 41(1984) 377 - 84. нн ді
Пример 12
Получение моно (5А-холеста-8,14-диен) -ЗВ-сукцината
В їОмл ТГФ растворяли О0,50г 5А-холеста-8,14-диен-3ЗВ-ола, а затем 0,39г янтарного ангидрида и 1бмг 4-диметиламинопиридина. Раствор нагревали с обратньм холодильником всю ночь и затем упаривали досуха.
Остаток суспендировали в 10мл водьї и осадок отфильтровьвали и промьівали водой и вьісушивали, получив в результате 0,48г целевого соединения, которое можно бьіло дополнительно очистить путем растворения в смеси водного раствора гидрокарбоната натрия и зтанола, добавить хлороводородную кислоту до рН и затем концентрировать раствор с получением осадка.
Температура плавления: 128 - 13173 МС(молекулярньй ион): 484 4
Т"Н-ЯМР-спектр(СО Сіз 65) ородукта показал характеристические сигналь при: 5,36б(с, 1Н), 4,75(м, ІН), 2,67(м, 2Н), 2,6(М, 2Н) см 13С-ЯМР-спектр(СО Сіз 100,6МГЦ) показал характеристические сигнальі при: 73,4, 117,1, 122,7, 140,0, (о) 150,5, 171,2, 177,2.
Пример 13
Получение ЗВ-зтоксикарбонилокси-5А-холеста-8,14-диена с зо В смеси бмл толуола и бБбмл опиридина растворяли с оохлаждением в ледяной бане 0,50г 5В-холеста-8,14-диен-3В-ола. Добавляли в течение бмин 2,3мл зтилхлорформиата, растворенного в бмл с толуола. Через ЗОминут ледяную баню убирали и продолжали перемешивать 20часов при комнатной «со температуре и затем 2часа при 60"С. Реакционную смесь упаривали досуха в вакууме и остаток растирали с 10бмл зтанола, получив в результате 0,505г целевого соединения, которое может бьіть дополнительно очищено /-х7 з5 путем перекристаллизации из зтанола. Температура плавления: 101 - 1067"С МС(молекулярньй ион): 456,3 ю
Т"Н-ЯМР-спектр(СО Сіз 65) ородукта показал характеристические сигнальі при: 5,30(с, 1Н), 4,50(м, 1Н), 4,12(кв, 2Н), 1,24К(т, ЗН). 13. С-ЯМР-спектр(СО Сіз 100,6МГуЦ) показал характеристические сигналь при: 62,6, 116,6, 122,2, 1394, « 150,0, 153,6.
Пример 14 - с Получение ЗВ-фосфоноксо-4,4-диметил-5А-холеста-8,14-диена а В'Омл сухого пиридина растворяли 2,00г 4,4-диметил-5А-холеста-8,14-диен-3В-ола и полученньій раствор "» добавляли к раствору 1,6бмл оксихлорида фосфора в течение 5минут при охлаждений в ледяной бане. После перемешивания при комнатной температуре в течение ЗОминут осадок отфильтровьівали и промьівали сухим ацетоном. Остаток суспендировали в 7Омл водьі и нагревали с обратньмм холодильником в течение 1 1/4часа. 1 После охлаждения при комнатной температуре осадок отфильтровьвали, промьтвали водой и вьісушивали с - получением 0,93г неочищенного продукта. 0,70г неочищенного продукта растворяли в 7/бмл 0,1М водного раствора гидроксида калия и раствор фильтровали через 10г смоль! Амберлит ІК-120(Н) и упаривали в вакууме
Ге) досуха. Остаток растирали с 1Омл водь и, отфильтровав осадок, промьівали его водой и внісушивали, получив юю 50 в результате 0,48г целевого соединения. Температура плавления: 183 - 18570 "Н-ЯМР-спектр(СОСІ з - 2капли СО3О0О) продукта показал характеристические сигнальі при: 5,36б(с, 1Н), о) 3,89(м, 1Н). 13С-ЯМР-спектр(СОСІ з - 2капли СОЗОО, 100,6МГЦ) продукта показал характеристические сигналь! при: 85.1, 116,9, 122,3, 140,9, 150,5.
Пример 15 Получение ЗВ-изоникотиноил-5А-холеста-8,14-диена
Ф! В бмл пиридина растворяли 0,Б5Ог БА-холеста-8,14-диен-ЗВ-ола, а затем 1,16г изоникотиноилхлоридгидрохлорида. Суспензию нагревали с обратньм холодильником всю ночь и затем де упаривали досуха. Остаток суспендировали в 10О0мл водьй при охлаждениий в ледяной бане. Осадок отфильтровьівали, промьівали водой и вьсушивали, получив в результате 0,97г неочищенного продукта, 60 которьій перекристаллизовьівали из смеси ацетон - вода с получением 0,40г целевого соединения.
Температура плавления: 129 - 13176
Т"Н-ЯМР-спектр(СО Сіз 5) ородукта показал характеристические сигнальи при: 8,77(д, 2Н), 7,84(д, 2Н), 5,39(с, 1Н), 4,49(м, 1Н). б 13б-ЯМР-спектр(СО Сіз 50,3МГЦ) показал характеристические сигнальі при: 75,0, 117,7, 122,8, 123,3, 138,0, 140,3, 150,5, 150,9, 164,6.
Claims (34)
1. Применение соединения общей формульі (І) ва ЩО) во о ОД во і ВЕ В ва где В" и В? независимо вьібрань; из группьї, включающей водород, неразветвленньй или разветвленньй
С.-Св алкил, которьій может бьіть замещен галогеном или гидрокси, или В и В? вместе с атомом углерода, к которому они присоединень, образуют циклопентановое или циклогексановое кольцо, ВЗ и Кк? вместе представляют собой дополнительную связь между атомами углерода, к которьім они сч присоединень, и в зтом случае КЕ? представляєт собой водород, а КЗ и КЕ либо представляют собой водород, либо вместе представляют дополнительную связь между атомами углерода, к которьім они присоединень, о или 2? и В" вместе представляют собой дополнительную связь между атомами углерода, к которьім они присоединень, и в зтом случае ВЗ представляєт собой водород, а ВЗ и 2" либо представляют собой водород, либо вместе представляют дополнительную связь между атомами углерода, к которьім они присоединень,, или с 25 и 7 вместе представляют собой связь между атомами углерода, к которьім они присоединень,, и в зтом с случае ВЗ, ВЗ и В" все представляют собой водород, ВЗ и КУ представляют собой водород или вместе представляют собой дополнительную связь между ї-о атомами углерода, к которьім они присоединеньї, и «- ВО представляєт собой водород или ацильную группу, сульфогруппу, фосфоногруппу, или группу, которая ю вместе с остальной частью молекульь образует простой зфир в качестве лекарственного средства для регулирования мейоза в половой клетке млекопитающего.
2. Применение по п. 1, отличающееся тем, что К! представляет собой водород или метил.
3. Применение по п. 1, отличающееся тем, что КЕ! вьібран из группьі, содержащей зтил и неразветвленньй и « разветвленньй С1-Св алкил. -
с
4. Применение по п. 1, отличающееся тем, что В! представляет собой неразветвленную или разветвленную а гидроксиалкильную группу, содержащую до шести атомов углерода. ня
5. Применение по п. 1, отличающееся тем, что КЕ! представляет собой неразветвленную или разветвленную с - гидроксиалкильную группу, содержащую до шести атомов углерода.
6. Применение по п. 1, отличающееся тем, что В! представляет собой неразветвленную или разветвленную і-й алкильную группу, замещенную галогеном.
- 7. Применение по п. 1, отличающееся тем, что 22 представляет собой трифторметил.
б 8. Применение по п. 1, отличающееся тем, что ЕК? представляеєт собой водород или метил.
9. Применение по п. 1, отличающееся тем, что К2 вьібран из группьі, включающей зтил, неразветвленньй и ко разветвленньїй Сі-Се алкил. з
10, Применениє по п. 1, отличающеєся тем, что БК? представляєт собой неразветвленную или разветвленную гидроксиалкильную группу, содержащую до шести атомов углерода.
11. Применение по п. 1, отличающееся тем, что КК? представляет собой неразветвленную или разветвленную є -гидроксиалкильную группу, содержащую до шести атомов углерода.
12. Применение по п. 1, отличающееся тем, что КК? представляет собой неразветвленную или о разветвленную алкильную группу, замещенную галогеном. ю
13. Применение по п. 1, отличающееся тем, что В? представляєт собой трифторметил.
14. Применениє по п. 1, отличающееєся тем, что Б' и БК? вместе с атомом углерода, к которому они 60 присоединень;, образуют циклопентановое кольцо.
15. Применение по п. 1, отличающееся тем, что Б' и БК? вместе с атомом углерода, к которому они присоединеньї, образуют циклогексановое кольцо.
16. Применение по п. 1, отличающееся тем, что ВЗ и 27 вместе представляют собой дополнительную связь де между атомами углерода, к которьм они присоединень, а В? представляет собой водород.
17. Применение по п. 1, отличающееся тем, что ВЗ и 27 вместе представляют собой дополнительную связь между атомами углерода, к которьм они присоединень, а З представляєт собой водород.
18. Применение по п. 1, отличающееся тем, что 25 и В" вместе представляют собой дополнительную связь между атомами углерода, к которьм они присоединень, а ВУ, В? и В! представляют собой водород.
19. Применение по п. 1, отличающееся тем, что вбив представляют собой водород.
20. Применение по п. 1, отличающееся тем, что 25 и В вместе представляют собой дополнительную связь между атомами углерода, к которьім они присоединень.
21. Применение по п. 1, отличающееся тем, что еЗи во представляют собой водород. 70
22. Применение по п. 1, отличающееся тем, что З и 2? вместе представляют собой дополнительную связь между атомами углерода, к которьім они присоединень.
23. Применение по п. 1, отличающееся тем, что в'я представляет собой водород.
24. Применение по п. 1, отличающееся тем, что КО представляет собой ацильную группу, производную от кислотьії, содержащей от 1 до 20 атомов углерода.
25. Применение по п. 24, отличающееся тем, что КО представляєт собой ацильную группу, вьібранную из группьї, включающей ацетил, бензоил, пивалоил, бутирил, никотиноил, изоникотиноил, гемисукциноийил, гемиглутароил, бутилкарбамоил, фенилкарбамоил, бутоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил и зтоксикарбонил.
26. Применение по п. 1, отличающееся тем, что К'9 представляет собой алкильную, аралкильную, алкилоксиалкильную или алканоилоксиалкильную группу, содержащую в сумме до 10 атомов углерода, предпочтительно до 8 атомов углерода, которая вместе с остальной частью молекуль! образует простой зфир.
27. Применениє по п. 26, отличающееєся тем, что К'9 представляєт собой метоксиметильную или пивалоилоксиметильную группу.
28. Применение по п. 1, отличающееся тем, что В 9 представляєт собой сульфогруппу.
29. Применение по п. 1, отличающееся тем, что ВЗ представляєт собой фосфоногруппу. сч
30. Применение по п. 1, отличающееся тем, что соединение общей формуль! (І) представляет собой о 4,4-диметил-5 є -холеста-8,14,24-триен-З Д -ол.
31. Применение по п. 1, отличающееся тем, что соединение общей формуль! (І) представляет собой 4,4-диметил-5 2 -холеста-8,24-диен-З й -ол. Ге
32. Применение по п. 1 отличающееся тем, что половой клеткой является ооцит. с
33. Применение по п. 1, отличающееся тем, что соединение обшей формульі (І) вводят в ооцит ех мімо.
34. Применение по п. 1, отличающееся тем, что половой клеткой является мужская половая клетка. ісе) «- Офіційний бюлетень "Промислоава власність". Книга 1 "Винаходи, корисні моделі, топографії інтегральних мікросхем", 2002, М 12, 15.12.2002. Державний департамент інтелектуальної власності Міністерства освіти і о науки України.
-
. и? 1 - (о) іме) Ко) іме) 60 б5
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK75394 | 1994-06-23 | ||
| DK24195 | 1995-03-09 | ||
| PCT/DK1995/000265 WO1996000235A1 (en) | 1994-06-23 | 1995-06-23 | Sterol derivatives used for regulation of meiosis |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA51622C2 true UA51622C2 (uk) | 2002-12-16 |
Family
ID=26063596
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UA96124771A UA51622C2 (uk) | 1994-06-23 | 1995-06-23 | Лікарський засіб для регулювання мейозу |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5716777A (uk) |
| EP (1) | EP0767798B1 (uk) |
| JP (1) | JP3987105B2 (uk) |
| KR (1) | KR100408369B1 (uk) |
| CN (1) | CN1068333C (uk) |
| AT (1) | ATE248852T1 (uk) |
| AU (1) | AU694240B2 (uk) |
| BG (1) | BG101067A (uk) |
| BR (1) | BR9508074A (uk) |
| CA (1) | CA2192941C (uk) |
| CZ (1) | CZ289407B6 (uk) |
| DE (1) | DE69531682T2 (uk) |
| DK (1) | DK0767798T3 (uk) |
| ES (1) | ES2204955T3 (uk) |
| FI (1) | FI117159B (uk) |
| HU (1) | HUT76343A (uk) |
| IL (1) | IL114294A (uk) |
| IS (1) | IS4404A (uk) |
| MX (1) | MX9700174A (uk) |
| NO (1) | NO314534B1 (uk) |
| PL (1) | PL186688B1 (uk) |
| RU (1) | RU2194510C2 (uk) |
| SI (1) | SI9520077A (uk) |
| SK (1) | SK165596A3 (uk) |
| UA (1) | UA51622C2 (uk) |
| WO (1) | WO1996000235A1 (uk) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| HUP9800731A3 (en) * | 1995-03-06 | 2000-03-28 | Novo Nordisk As | Stimulation of meiosis |
| ATE254628T1 (de) * | 1995-06-23 | 2003-12-15 | Novo Nordisk As | Meiose regulierende verbindungen. |
| AU6122696A (en) * | 1995-06-23 | 1997-01-22 | Novo Nordisk A/S | Meiosis regulating compounds |
| US6645953B2 (en) * | 1995-06-23 | 2003-11-11 | Novo Nordisk A/S | Meiosis regulating compounds |
| ATE238339T1 (de) | 1996-12-20 | 2003-05-15 | Novo Nordisk As | Verbindungen zur regulierung der meiose |
| AU726016B2 (en) * | 1997-05-16 | 2000-10-26 | Akzo Nobel N.V. | 20-aralkyl-5alpha-pregnane derivatives |
| TR199902873T2 (xx) * | 1997-06-04 | 2000-04-21 | Akzo Nobel N.V. | Miyozun mod�lasyonu i�in 17�-aliloksi(tiyo)alkil-androstan t�revleri. |
| DE69806640T2 (de) * | 1997-12-18 | 2003-03-13 | Akzo Nobel N.V., Arnheim/Arnhem | 17beta-aryl(arylmethyl)oxy(thio)alkyl-androstanderivative |
| CN1326461A (zh) * | 1998-05-13 | 2001-12-12 | 诺沃挪第克公司 | 减数分裂调控化合物 |
| KR20010043558A (ko) | 1998-05-13 | 2001-05-25 | 한센 핀 베네드, 안네 제헤르, 웨이콥 마리안느 | 감수분열 조절 화합물 |
| KR20010043828A (ko) * | 1998-05-26 | 2001-05-25 | 에바-마리아 시마-메이어, 얼설라 멜져, 마거, 하르트만 | ｃＡＭＰ-증강 화합물 단독 또는 감수분열-자극 화합물하나 이상과의 조합에 의한 불임 치료 방법 |
| CA2335329A1 (en) * | 1998-06-19 | 1999-12-29 | Novo Nordisk A/S | Meiosis regulating compounds |
| AU759344B2 (en) * | 1998-12-11 | 2003-04-10 | Akzo Nobel N.V. | 22S-hydroxycholesta-8, 14-diene derivatives with meiosis regulating activity |
| AU3118200A (en) | 1998-12-14 | 2000-07-03 | Merck & Co., Inc. | Hiv integrase inhibitors |
| WO2000047604A1 (en) * | 1999-02-10 | 2000-08-17 | Schering Aktiengesellschaft | Unsaturated cholestane derivatives and their use for the preparation of meiosis regulating medicaments |
| WO2000050066A1 (en) | 1999-02-24 | 2000-08-31 | Novo Nordisk A/S | Treatment of infertility |
| ATE361091T1 (de) * | 1999-02-24 | 2007-05-15 | Novo Nordisk As | Behandlung von unfruchtbarkeit |
| JP2002537801A (ja) * | 1999-02-26 | 2002-11-12 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | 着床率を増大させる減数分裂活性化ステロール |
| JP2002539134A (ja) * | 1999-03-09 | 2002-11-19 | アクゾ・ノベル・エヌ・ベー | 減数分裂の阻害のための２２ｒ−ヒドロキシコレスタ−８，１４−ジエン誘導体 |
| RU2263516C2 (ru) * | 1999-09-16 | 2005-11-10 | Ново Нордиск А/С | Композиция для оплодотворения in vitro |
| EP1127890A1 (en) | 2000-02-22 | 2001-08-29 | Schering Aktiengesellschaft | Steroid derivatives with an additional ring annulated to ring A and use of these derivatives for the preparation of meiosis regulating medicaments |
| AU3376501A (en) * | 2000-02-25 | 2001-09-03 | Novo Nordisk A/S | Improvement of implantation rate |
| AU2001240624A1 (en) * | 2000-02-25 | 2001-09-03 | Novo-Nordisk A/S | Improvement of implantation rate |
| WO2001088098A2 (en) * | 2000-05-18 | 2001-11-22 | Schering Aktiengesellschaft | Fertilization of aged oocytes |
| EP1245572A1 (en) | 2001-03-26 | 2002-10-02 | Schering Aktiengesellschaft | Aminosterol compounds, their use in the preparation of meiosis-regulating medicaments and method for their preparation |
| AU2003203145A1 (en) * | 2002-02-22 | 2003-09-09 | Novo Nordisk A/S | A transducer of mas signalling |
| WO2012044817A2 (en) * | 2010-10-01 | 2012-04-05 | Indiana University Research And Technology Corporation | Process for preparing delta-7,9(11) steroids from ganoderma lucidum and analogs thereof |
| US9165822B2 (en) | 2013-03-11 | 2015-10-20 | Taiwan Semiconductor Manufacturing Company, Ltd. | Semiconductor devices and methods of forming same |
| EA024619B1 (ru) * | 2014-11-21 | 2016-10-31 | Эльвин Гаджи оглы Керимли | ФРАКСИНОСТЕРИН - 24β-ЭТИЛХОЛЕСТА-20-КАРБОКСИ-6(7),8(9)-ДИЕН 3β-ОЛА И ЕГО ПРОИЗВОДНОЕ |
-
1995
- 1995-05-23 US US08/448,217 patent/US5716777A/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-23 UA UA96124771A patent/UA51622C2/uk unknown
- 1995-06-23 MX MX9700174A patent/MX9700174A/es not_active IP Right Cessation
- 1995-06-23 DE DE69531682T patent/DE69531682T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-23 ES ES95922448T patent/ES2204955T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-23 AU AU27343/95A patent/AU694240B2/en not_active Ceased
- 1995-06-23 AT AT95922448T patent/ATE248852T1/de not_active IP Right Cessation
- 1995-06-23 SK SK1655-96A patent/SK165596A3/sk unknown
- 1995-06-23 CZ CZ19963725A patent/CZ289407B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1995-06-23 EP EP95922448A patent/EP0767798B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-23 CA CA002192941A patent/CA2192941C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-23 DK DK95922448T patent/DK0767798T3/da active
- 1995-06-23 SI SI9520077A patent/SI9520077A/sl unknown
- 1995-06-23 IL IL11429495A patent/IL114294A/en not_active IP Right Cessation
- 1995-06-23 KR KR1019960707361A patent/KR100408369B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-23 PL PL95317830A patent/PL186688B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1995-06-23 CN CN95193731A patent/CN1068333C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1995-06-23 RU RU97101087/14A patent/RU2194510C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1995-06-23 BR BR9508074A patent/BR9508074A/pt not_active IP Right Cessation
- 1995-06-23 HU HU9603584A patent/HUT76343A/hu not_active Application Discontinuation
- 1995-06-23 WO PCT/DK1995/000265 patent/WO1996000235A1/en not_active Ceased
- 1995-06-23 JP JP50272496A patent/JP3987105B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1996
- 1996-12-18 BG BG101067A patent/BG101067A/xx unknown
- 1996-12-20 NO NO19965516A patent/NO314534B1/no unknown
- 1996-12-20 FI FI965144A patent/FI117159B/fi active IP Right Grant
- 1996-12-23 IS IS4404A patent/IS4404A/is unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA51622C2 (uk) | Лікарський засіб для регулювання мейозу | |
| EP0857173B1 (en) | Meiosis regulating compounds | |
| US6645953B2 (en) | Meiosis regulating compounds | |
| DE60000978T2 (de) | 22r-hydroxycholesta-8,14-diene derivate zur hemmung der meiose | |
| US20050222098A1 (en) | Regulation of meiosis | |
| RU2289587C2 (ru) | Стероидные соединения, способы их получения, фармацевтическая композиция, способы регуляции и совершенствования воспроизведения, промежуточные соединения | |
| DE69903346T2 (de) | 22s-hydroxycholesta-8,14-dien derivate mit meiose regulierende aktivität | |
| KR20020013541A (ko) | 14β-Ｈ-스테롤, 그를 포함하는 제약 조성물, 및 감수분열조절 약제 제조에 있어서 그의 유도체의 용도 | |
| US3475537A (en) | Steroid esters | |
| KR20010101820A (ko) | 불포화 콜레스탄 유도체 및 감수분열 조절 약제 제조에있어서 그의 용도 | |
| MXPA98000123A (en) | Compounds that regulate the meio |