UA127455C2 - Капсид аденоасоційованого вірусу і спосіб його застосування - Google Patents

Капсид аденоасоційованого вірусу і спосіб його застосування Download PDF

Info

Publication number
UA127455C2
UA127455C2 UAA202002445A UAA202002445A UA127455C2 UA 127455 C2 UA127455 C2 UA 127455C2 UA A202002445 A UAA202002445 A UA A202002445A UA A202002445 A UAA202002445 A UA A202002445A UA 127455 C2 UA127455 C2 UA 127455C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
aam
amino acid
capsid
acid sequence
variant
Prior art date
Application number
UAA202002445A
Other languages
English (en)
Inventor
Девід Г. Керн
Девид Г. Керн
Мелісса Коттерман
Мелисса КОТТЕРМАН
Девід Шаффер
Девид Шаффер
Original Assignee
4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк.
4Д Молекьюлар Терапьютикс Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк., 4Д Молекьюлар Терапьютикс Инк. filed Critical 4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк.
Publication of UA127455C2 publication Critical patent/UA127455C2/uk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • A61K38/1719—Muscle proteins, e.g. myosin or actin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/44—Oxidoreductases (1)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/005—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from viruses
    • C07K14/01—DNA viruses
    • C07K14/03—Herpetoviridae, e.g. pseudorabies virus
    • C07K14/05—Epstein-Barr virus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C12N15/861—Adenoviral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/86—Viral vectors
    • C12N15/864—Parvoviral vectors, e.g. parvovirus, densovirus
    • C12N15/8645—Adeno-associated virus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1048—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12N9/1051—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y116/00—Oxidoreductases oxidizing metal ions (1.16)
    • C12Y116/03—Oxidoreductases oxidizing metal ions (1.16) with oxygen as acceptor (1.16.3)
    • C12Y116/03001—Ferroxidase (1.16.3.1), i.e. ceruloplasmin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y204/00—Glycosyltransferases (2.4)
    • C12Y204/01—Hexosyltransferases (2.4.1)
    • C12Y204/01001—Phosphorylase (2.4.1.1)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/0102—Alpha-glucosidase (3.2.1.20)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01022—Alpha-galactosidase (3.2.1.22)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14121—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14122—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14133—Use of viral protein as therapeutic agent other than vaccine, e.g. apoptosis inducing or anti-inflammatory
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14143—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector viral genome or elements thereof as genetic vector
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14141—Use of virus, viral particle or viral elements as a vector
    • C12N2750/14145—Special targeting system for viral vectors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2750/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssDNA viruses
    • C12N2750/00011—Details
    • C12N2750/14011—Parvoviridae
    • C12N2750/14111—Dependovirus, e.g. adenoassociated viruses
    • C12N2750/14171—Demonstrated in vivo effect

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Винахід стосується варіантів капсидних білків аденоасоційованого вірусу (AAV), які мають одну або більше модифікації амінокислотної послідовності відносно батьківського капсидного білка AAV, які, якщо вони присутні у віріоні AAV, надають йому підвищену інфекційність відносно одного або більше типів м'язових клітин порівняно з інфекційністю віріону AAV, що містить немодифікований батьківський капсидний білок AAV відносно м'язових клітин. Винахід також стосується рекомбінантних віріонів AAV і фармацевтичних композицій таких, які містять варіант капсидного білка AAV, як описано тут, способів отримання цих капсидних білків і віріонів rAAV і способів застосування цих капсидних білків і віріонів rAAV в наукових дослідженнях і в клінічній практиці, наприклад, в доставці послідовностей нуклеїнових кислот в одну або більше м'язових клітин для лікування м'язових розладів і захворювань.

Description

(54) КАПСИД АДЕНОАСОЦІЙОВАНОГО ВІРУСУ І СПОСІБ ЙОГО ЗАСТОСУВАННЯ (57) Реферат:
Винахід стосується варіантів капсидних білків аденоасоційованого вірусу (ААМ), які мають одну або більше модифікації амінокислотної послідовності відносно батьківського капсидного білка
АДАМ, які, якщо вони присутні у віріоні ААМ, надають йому підвищену інфекційність відносно одного або більше типів м'язових клітин порівняно з інфекційністю віріону ААМ, що містить немодифікований батьківський капсидний білок ААМ відносно м'язових клітин. Винахід також стосується рекомбінантних віріонів ААМ і фармацевтичних композицій таких, які містять варіант капсидного білка ААМ, як описано тут, способів отримання цих капсидних білків і віріонів гГААМ і способів застосування цих капсидних білків і віріонів ГААМ в наукових дослідженнях і в клінічній практиці, наприклад, в доставці послідовностей нуклеїнових кислот в одну або більше м'язових клітин для лікування м'язових розладів і захворювань.
Перехресне посилання на споріднені заявки
За цією заявкою запитується пріоритет відповідно до тимчасової заявки на патент США Мо 62/560901, поданої 20 вересня 2017 року, зміст якої повністю включений в даний опис за допомогою посилання.
Рівень техніки
Винахід, розкритий в даній заявці, загалом стосується галузі віріонів аденоасоційованих вірусів (АДАМ), що містять варіанти капсидних білків, і отримання таких варіантів капсидів методами спрямованої еволюції.
Вступ
М'язова тканина схильна до низки серйозних генетичних порушень. М'язова тканина є цільовою тканиною в генній терапії багатьох захворювань, що викликають м'язову дистрофію, а також може бути використана як біофабрика для виробництва секреторних факторів для лікування системних захворювань. Доставка терапевтичних генів в м'язову тканину людини, можливо, є найбільш актуальною незадоволеною потребою в лікуванні захворювань м'язової тканини.
Одним із підходів до м'язово-спрямованої доставки генів є терапія, що базується на доставці генів аденоасоційованими вірусами (ААМ), при якій рекомбінантний аденоасоційований вірус (ГААМ) використовується для доставки гена в одну або більше м'язових клітин, наприклад, для заміни відсутнього гена, виправлення домінантного дефектного гена або надання матриці для безперервної білкової терапії. Хоча клінічна генна терапія на основі ААМ стає все більш успішною, вона все ще має недоліки відносно властивостей вірусних векторів, включаючи, наприклад, націлення на бажані клітини м'язів із високою ефективністю. Відповідно, в даній галузі існує потреба в нових варіантах ААМ з поліпшеними можливостями трансдукції, що забезпечують більш ефективну доставку генів в клітини м'язів для лікування захворювання. У даній галузі існує потреба саме в тих варіантах ААМ, які мають підвищену ефективність м'язової трансдукції - у деяких випадках неспецифічної (всеохопної), а в інших випадках переважної для певних типів м'язових клітин - порівняно з ААМ дикого типу і варіантами ААМ, відомими в даній галузі техніки.
Дикий тип ААМ являє собою одноланцюжковий ДНК-вірус, що містить три відкриті рамки
Зо зчитування: гер, сар і аар. Перший ген, гер, кодує чотири білки, необхідні для реплікації геному (Кер78, Керб8, Керба2 і Кер40), другий, сар, експресує три структурні білки (МР1-3), що беруть участь в збиранні і формуванні вірусного капсиду, а третій експресує білок, що активує збирання капсиду (ААР), необхідний для збирання капсиду. ААМ залежить від присутності вірусу-помічника, такого як аденовірус або вірус герпесу, для активної реплікації. За відсутності вірусу-помічника ААМ знаходиться в латентному стані, в якому його геном підтримується епісомально або інтегрується в хромосому хазяїна в локусі ААМ51.
Методи спрямованої еволюції іп міїго і іп мімо можуть бути використані для відбору варіантів
ААМ, що демонструють поліпшену доставку генів на основі ААМ порівняно з існуючими векторами. Такі методи спрямованої еволюції вже відомі в даній галузі техніки і описані, наприклад, в публікації РСТ УМО 2014/194132 і статті Койептап 85 Зспапйег (Маїшге Кеміем/
Сепеїйіс5, АОР, опубліковано в мережі 20 травня 2014 р.; дої: 10.1038/пгд3742), включені в даний опис в повному обсязі за допомогою посилання. Спрямована еволюція - це метод капсидної біоїнженерії, що імітує природну еволюцію за допомогою ітеративних (повторюваних) циклів процесів генетичної диверсифікації і відбору, що дозволяє нагромаджувати корисні мутації, які поступово поліпшують функцію біомолекули, такої як віріон на основі ААМ. При цьому підході гени сар ААМ дикого типу диверсифікуються для створення великих генетичних бібліотек, які упаковуються з метою створення бібліотек вірусних частинок, і до яких застосовується спрямована селекція для виділення унікальних варіантів з найкращими фенотипами, націленими на подолання бар'єрів, які перешкоджають доставці генів.
Варіанти ААМ були розкриті, наприклад, в заявках на патент США 9,193,956; 9; 186; 419; 8632764; 8663624; 8927514; 8628966; 8263396; 8734809; 8889641; 8632764; 8691948; 8299295; 8802440; 8445267; 8906307; 8574583; 8067015; 7588772; 7867484; 8163543; 8283151; 8999678; 7892809; 7906111; 7259151; 7629322; 7220577; 8802080; 7198951; 8318480; 8962332; 7790449; 7282199; 8906675; 8524446; 7712893; 6491907; 8637255; 7186522; 7105345; 6759237; 6984517; 6962815; 7749492; 7259151; і 6,156,303; публікаціях США 2013/0295614; 2015/0065562; 2014/0364338; 2013/0323226; 2014/0359799; 2013/0059732; 2014/0037585; 2014/0056854; 2013/0296409; 2014/0335054 2013/0195801; 2012/0070899; 2011/0275529; 2011/0171262; 2009/0215879; 2010/0297177; 2010/0203083; 2009/0317417; 2009/0202490; 2012/0220492; 2006/0292117; і 2004/0002159; Європейських публікаціях 2692731 А1; 2383346 В1; 2359865 В1; 60 2359866 В1; 2359867 В1; і 2357010 В1; 1791858 В1; 1668143 В1; 1660678 В1; 1664314 81;
1496944 В1; 1456383 В1; 2341068 В1; 2338900 В1; 1456419 В1; 1310571 В1; 14563 83 В1; 1633772 В1; і 1135468 ВІ1; і міжнародних (РСТ) публікаціях УУО 2014/124282; УМО 2013/170078;
МО 2014/160092; МО 2014/103957; МО 2014/052789; МО 2013/174760; МО 2013/123503; МО 2011/038187; ії МО 2008/124015; УМО 2003/054197; однак в жодному з цих посилань не розкриті варіанти здійснення і/або ознаки і/або композиція значущих компонентів варіантів ААМ, розкритих в даному описі.
Всі документи і посилання, що цитуються в даному описі і в патентних документах, що згадуються в даному описі, тим самим включені в даний опис за допомогою посилання.
СУТЬ ВИНАХОДУ
Винахід стосується варіантів капсидних білків аденоасоційованого вірусу (ААМ), що мають одну або більше модифікації амінокислотної послідовності відносно батьківського капсидного білка ААМ, які, будучи представлені у віріоні ААМ, надають підвищену інфекційність відносно одного або кількох типів м'язових клітин порівняно з інфекційністю віріону ААМ, що містить немодифікований батьківський капсидний білок ААМ. Винахід також стосується рекомбінантних віріонів ААМ і їх фармацевтичних композицій, що містять варіант капсидного білка ААМ, як описано тут; способів отримання варіантів капсидних білків і віріонів гААМ і способів застосування цих капсидних білків і віріонів ГААМ в дослідженнях і в клінічній практиці, наприклад, в доставці послідовностей нуклеїнових кислот в одну або більше м'язових клітин для лікування розладів і захворювань.
У деяких аспектах розкриття винахід стосується варіантів капсидних білків аденоасоційованого вірусу (ААМ), причому ці варіанти капсидних білків ААМ несуть одну або більше модифікації амінокислотної послідовності відносно батьківського капсиду ААМ, причому їх присутність у віріоні ААМ надає підвищену інфекційність відносно одного або більше типів м'язових клітин (наприклад, клітин скелетних м'язів і/або клітин серцевого м'яза) порівняно з інфекційністю віріонів ААМ, що містять батьківський капсидний білок ААМ, що не містять модифікацій амінокислотної послідовності. У пов'язаних аспектах винаходу варіанти капсидних білків ААМ, якщо вони присутні у віріоні ААМ, також надають підвищену стійкість до нейтралізації антитілами проти ААМ.
У деяких аспектах розкриття винахід стосується рекомбінантних віріонів ААМ (ГААМ), що
Зо містять варіанти капсидного білка, як описано тут, причому ці віріони ГААМ демонструють підвищену інфекційність відносно одного або більше типів м'язових клітин (наприклад, скелетних м'язів і/або серцевого м'яза) порівняно з інфекційністю м'язових клітин, що проявляється віроном ААМ, що містить відповідний немодифікований батьківський білок капсиду ААМ. У деяких варіантах здійснення віріон ГААМ виявляє підвищену інфекційність всіх м'язових клітин порівняно з віріоном ААМ, що містить батьківський капсидний білок ААМ. У інших варіантах здійснення віріон ГААМ виявляє підвищену інфекційність певних типів саме м'язових клітин, але не інших, порівняно з віріоном ААМ, що містить батьківський капсидний білок ААМ.
Іншими словами, віріон ГААМ виявляє підвищену інфекційність для певних типів м'язових клітин, але не для інших, наприклад, ГААМ переважно демонструють підвищену інфекційність відносно одного або кількох типів клітин, вибраних зі списку: фібробласти скелетних м'язів, сателітні клітини скелетних м'язів, фібробласти серцевих м'язів, клітини-попередники серцевого м'яза, клітини гладких м'язів і/або клітини м'язів діафрагми, але не демонструє підвищену інфекційність всіх типів клітин без виключення.
У деяких варіантах здійснення віріон гГААМ містить гетерологічну нуклеїнову кислоту. У деяких таких варіантах здійснення гетерологічна нуклеїнова кислота кодує РНК, що кодує поліпептид. У інших таких варіантах здійснення гетерологічна послідовність нуклеїнової кислоти кодує РНК, яка не кодує поліпептид, наприклад гетерологічна послідовність нуклеїнової кислоти являє собою РНК-інтерференційний агент, напрямну РНК для нуклеази і т.д.
Винахід також стосується фармацевтичних композицій, що включають інфекційні віріони
ГААМ і фармацевтично прийнятний носій.
Винахід також стосується застосування віріону ГААМ, що містить варіант капсидного білка, як описано тут, в способі доставки гетерологічної нуклеїнової кислоти в клітину-мішень (таку як кардіоміоцит)у за допомогою контакту клітини-мішені з віроном гААМ. У деяких варіантах здійснення клітина-мішень знаходиться іп мімо, наприклад, у серці індивідуума, який потребує лікування серцево-судинного розладу. У інших варіантах здійснення клітина-мішень знаходиться іп міїго.
Винахід також стосується способів лікування і/або профілактики захворювання (наприклад, порушення серцевої або скелетної мускулатури) шляхом введення суб'єкту, який потребує такого лікування, ефективної кількості віріонів ГААМ, що містять варіантний білок капсиду, як бо описано тут, або фармацевтичної композиції, що містить ефективну кількість віріонів ГААМ.
Винахід також стосується виділеної нуклеїнової кислоти, що містить послідовність, яка кодує варіант капсидного білка ААМ, як описано тут, і клітини-хазяїна, що містить цю виділену нуклеїнову кислоту. Також в інших варіантах здійснення виділена нуклеїнова кислота і/або окрема клітина-хазяїн містить гААМ.
У деяких аспектах варіант капсидного білка ААМ містить вставку від приблизно 5 амінокислот до приблизно 20 амінокислот ("гетерологічний пептид" або "вставка пептиду") в
СіН-петлю капсидного білка, порівняно з відповідним батьківським капсидним білком ААМ, причому варіантний капсидний білок, якщо він присутній у віріоні ААМ, надає підвищену інфекційність відносно м'язової клітини порівняно з інфекційністю м'язової клітини віріоном ААМ, що містить відповідний батьківський капсидний білок ААМ. У деяких варіантах здійснення пептид містить або складається по суті з послідовності, вибраної з групи, що складається з
МКІОВТО (5ЕО ІО МО: 13), МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14), ТМКІСМТ (ЗЕО ІО МО: 15), СМІТКОа М (ЗЕО І МО: 16), МТУКІ 5Т (ЗЕО ІЮ МО: 17), БМТМУКАЇ (ЗЕО ІО МО: 18), АБМІТКА (5ЕО ІО МО: 19), ОМТУТА5 (5ЕО ІО МО: 20), МКІЗАКО (5ЕО ІО МО: 21), МООМТКТ (5ЕО ІЮ МО: 22),
ОАОТТКМ (ЗЕО І МО: 23), ТМАТ5РО (5ЕО ІО МО: 24), БМТТОКТ (5ЕО ІО МО: 25), АБОЗТКА (ЗЕО ІЮ МО: 26), ГГ АМКІОВТОА (5ЕО ІО МО: 27), І АМКТТМКОА (5ЕО ІО МО: 28), І АТМКІСМТА (ЗЕО І МО: 29), І АСОМ ТКОаМА (5ЕО І МО: 30), ГАМТУКІ ЗТА (5ЕО ІО МО: 31), ГАБМТУКАЇА (ЗЕО ІО МО: 32), І ААЗМІТКАА (5ЕО ІО МО: 33), ГАОМТУТАБЗА (5ЕО ІО МО: 34), | АМКІЗАКОА (ЗЕО ІЮ МО: 35), ГАМОЮМТКТА (5ЕО ІО МО: 36), І АТМКІСМТ5 (ЗЕО ІО МО: 37), І АТМКІСМТА (ЗЕО І МО: 38), ГАОАОТТКМА (5ЕО ІЮ МО: 39), ГАТМАТ5РОА (5ЕО ІО МО: 40), ГГ АБМТТОКТА (ЗЕО ІЮО МО: 41) і ГГ ААБОБТКАА (5ЕО ІЮО МО: 42). У деяких переважних варіантах здійснення пептид містить або складається по суті з послідовності, вибраної з групи, що складається з
МКІОВТО (5ЕО ІО МО: 13), МКТТМКО (5ЕО ІЮ МО: 14), ТМКІСМТ (ЗЕО ІО МО: 15), Г АМКІОВТРА (ЗЕО ІЮ МО: 27), І АМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО: 28), І АТМКІСМТА (5ЕО ІО МО: 29) і І АТМКІСМУТ5 (ЗЕО ІО МО: 37).
У деяких аспектах варіантний капсидний білок ААМ містить одну або більше амінокислотних замін відносно відповідного батьківського капсидного білка ААМ, причому варіантний капсидний білок, якщо він присутній у віріоні ААМ, забезпечує підвищену інфекційність м'язової клітини порівняно з інфекційністю м'язової клітини віріоном ААМ, що містить відповідний батьківський
Зо білок капсиду ААМ, .
У деяких варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що містить заміну
РЗ63Ї. відносно ААМа2 і, необов'язково, додатково містить заміну ЕЗ347К і/або М7081 відносно
ААУ.
У схожих аспектах варіантний капсидний білок ААМ містить вставку пептиду і одну або більше амінокислотних замін відносно відповідного батьківського капсидного білка ААМ, при цьому варіантний капсидний білок, якщо представлений у віріоні ААМ, надає підвищену інфекційність відносно м'язових клітин порівняно з інфекційністю м'язових клітин віріоном ААМ, що містить відповідний батьківський білок капсиду ААМ. У кількох варіантах здійснення надається варіант капсидного білка ААМ, що містить вставку пептиду і заміну М708І відносно
ААУ2, де вставка пептиду необов'язково вибрана з групи, що складається з МКІОКТО (ЗЕО ІЮ
МО: 13), МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14), ТМКІСМТ (ЗЕО ІЮ МО: 15), МІ ТКОаМ (5ЕО ІО МО: 16),
МТМУКІ ЗТ (5ЕО ІЮО МО: 17), 5МТМУКАЇ (5ЕО ІЮО МО: 18), АБМІТКА (ЗЕО ІЮ МО: 19), ОМТУТА5 (ЗЕО ІЮ МО: 20), МКІБАКО (5ЕО ІЮ МО: 21), МООУТКТ (5ЕО І МО: 22), ОАОТТКМ (5ЕО ІО МО: 23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО: 24), 5МІТОКТ (5ЕО І МО: 25), АБОЗТКА (5ЕО ІО МО: 26),
ГАМКІОВТОА (5ЕО ІО МО: 27), І АМКТТМКОА (5ЕО ІО МО: 28), ГГ АТМКІСМТА (5ЕО ІО МО: 29),
ГАСМІТКОаМА (ЗЕО ІО МО: 30), ГАМТУКІ ЗТА (5ЕО ІО МО: 31), ГА5МТМУКАЇА (ЗЕО ІО МО: 32),
ГААЗМІТКАА (ЗЕО ІЮ МО: 33), ГАОМТМУТАБЗА (5ЕО ІО МО: 34), І АМКІБАКОА (ЗЕО ІО МО: 35),
ГАМООУТКТА (5ЕО ІО МО: 36), ГГ АТМКІСМТ5 (5ЕО ІО МО: 37), І АТМКІСМТА (5ЕО ІО МО: 38),
ГАОАОТТКМА (5ЕО ІО МО: 39), ГГ АТМКТ5РБОА (ЗЕО ІЮ МО: 40), АБМТТОКТА (5ЕО ІО МО: 41) і
ГААБО5БТКАА (5ЕО ІЮ МО: 41) ІЮ Мо: 42); переважно з групи, що складається з МКІОКТО (ЗЕО
ІО МО: 13), МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14), ТМКІСМТ (5ЕО ІО МО: 15), ГГ АМКІОВТОА (5ЕО ІО МО: 27), ГАМКТТМКОА (ЗЕО ІЮ МО: 28), | АТМКІСМТА (5ЕО ІО МО: 29) і | АТМКІСМТ5 (5ЕО ІЮО МО: 37). У кількох варіантах здійснення надається варіант капсидного білка ААМ, що містить вставку пептиду і заміну РЗ6ЗІ. відносно ААМ2, де вставка пептиду необов'язково вибрана з групи, що складається з СМІТКОМ (ЗЕО ІЮО МО: 16), ГАЄМ ТКОМА (ЗЕО ІЮО МО: 30), ФОАОТТКМ (ЗЕО ІЮ
МО: 23) і ГАОАОЮТТКМА (5ЕО ІО МО: 39).
У деяких варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що включає гетерологічний пептид ГАМКІОКТОА (5ЕБО ІО МО: 27) і заміну М708І відносно ААМА2 і, необов'язково, додатково містить АБОЗЕ і/або 5109 і/або ТЗ3З0А і/або Е588М заміни відносно бо ААМ2. У інших варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид ГАМКІОКТОА (ЗЕО ІО МО: 27) і АЗБР заміну відносно ААМ2. У інших варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що включає гетерологічний пептид ГАМКІОКТОА (ЗЕО ІЮО МО: 27) і амінокислотні заміни М312К, М4490, М5515, Іб98М і
Ї7350 відносно ААМ/2 і, необов'язково, додатково містить заміну М708І відносно ААМ2.
У деяких варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид ГАМКТТМКОА (БО ІО МО: 28) і заміну М708І відносно ААМАа, і необов'язково, додатково включає заміни 5109 і/або М/694С і/або М/бО6С відносно ААМ2. У інших варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид ГАМКТТМКОА (5ЕБО ІЮ МО: 28) і заміну ІЄ98М відносно ААМ2. У інших варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид
ГАМКТТМКОА (ЗЕО ІЮ МО: 28) і амінокислотні заміни М312К, М4490, М5515, Іб98М і 17350 відносно ААМ/?2 і, необов'язково, додатково містить заміну М708І відносно ААМ2.
У деяких варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид ГАТМКІОМТА (5БО І МО: 29) і заміну М708І відносно ААМАаО2 і, необов'язково, додатково включає заміну М449К і/або 32225 відносно ААМ2. У інших варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що містить гетерологічний пептид
ГАТМКІСМТА (ЗЕО ІО МО: 29) і амінокислотні заміни М312К, М4490, М5515, І698М і 17350 відносно ААМ/?2 і, необов'язково, додатково містить заміну М708І відносно ААМ2.
У деяких варіантах здійснення розкритий варіант капсидного білка ААМ, що включає гетерологічний пептид, як описано тут, і заміну РЗ63ЗГІ. відносно ААМ2.
У даному описі також розкриті способи отримання і/або доставки гГААМ, що включає варіант капсиду ААМ, як описано тут. Крім того, винахід стосується наборів, що містять ГААМ, що містить варіант капсиду ААМ, як описано тут, для застосування в способах, описаних тут.
У інших варіантах здійснення віріон ААМ, що містить варіант капсидного білка, описаний в попередніх абзацах, може являти собою будь-який з попередніх або подальших розкритих варіантів здійснення. Дійсно, повинно бути зрозуміло, що певні ознаки винаходу, описані для ясності в контексті окремих варіантів здійснення, також можуть бути надані в комбінації в одному варіанті здійснення. І, навпаки: різні ознаки винаходу, які скорочено описані в контексті одного варіанта здійснення, також може бути представлені окремо або в будь-якій придатній
Зо комбінації. Всі комбінації варіантів здійснення, що стосуються винаходу, охоплюються обсягом винаходу і вважаються розкритими в даному описі так само, як якби кожна комбінація була розкрита індивідуально і детально. Крім того, всі часткові комбінації різних варіантів здійснення і їх елементів також вважаються охопленими в обсязі винаходу і вважаються розкритими в даному описі так само, як якби кожна така часткова комбінація була б індивідуально і детально розкрита в даному описі.
Короткий опис винаходу не повинен бути використаний для обмеження Формули Винаходу, а також не призначений для обмеження обсягу винаходу яким-небудь способом.
Інші ознаки і переваги винаходу, розкритого в даному описі, будуть очевидні з наступних фігур, детального опису і Формули Винаходу.
КОРОТКИЙ ОПИС ФІГУР/ХРЕСЛЕНЬ
Винахід може бути зрозумілий краще, якщо представлений нижче детальний опис був прочитаний у поєднанні з прикладеними кресленнями. Файл патенту або заявки містить як мінімум одне креслення, виконане в кольорі. Копії цього патенту або публікації патентної заявки з кольоровими фігурами/кресленням можуть бути надані по запиту, що супроводжується сплатою необхідного мита. Ми звертаємо Вашу увагу на те, що, згідно із загальноприйнятою практикою, різні аспекти фігур виконані не в масштабі. Навпаки: розміри різних елементів довільно збільшені або зменшені для ясності. У креслення включені наступні фігури.
Фігура 1 ілюструє варіанти здійснення при використанні методології спрямованої еволюції.
На Стадії (а) показане створення бібліотеки вірусних капсидів, що містить комбінації мутацій
ДНК і генів сар. Стадія (Б) зображує упаковку вірусів таким чином, що кожна вірусна частинка складається з мутантного капсиду, зібраного навколо гена сар, що кодує цей капсид, і стадію очищення, яка прослідує. Потім капсидну бібліотеку піддавали селективному тиску іп міїго або іп мімо. У цьому аспекті технології спрямованої еволюції тканини або клітинний матеріал, що становлять інтерес, збирали для виділення варіантів ААМ, що успішно інфікують конкретну мішень, таким чином отримуючи "успішні" віруси. Стадія (с) показує збагачення "успішних" клонів, відібраних на Стадії 1, проведенням повторного відбору. Стадія (4) показує збагачення вибраних на Стадії 2 сар генів, які піддають повторній диверсифікації і подальшим етапам відбору для підвищення конкурентоздатності вірусу повторним процесом відбору. На етапі (є) показані варіанти, ідентифіковані як найбільш вдалі на Стадіях відбору векторів 1 і 2, які будуть бо створені як рекомбінантні вектори ААМ і охарактеризовані за рівнем трансдукції різних типів клітин і тканин-мішеней. Оскільки варіанти, розкриті в даному описі, були отримані на основі процесу спрямованої еволюції ААМ, то вони вважаються такими, що вже продемонстрували здатність трансдукувати клітини м'язів і доставляти геном (геном, який кодує варіант гена сар) під час самого процесу відбору.
Фігура 2 показує ПЛР-ампліфікацію вірусних геномів з тканини серцевих і скелетних м'язів репрезентативного раунду селекції. Смуги всередині червоних прямокутників представляють успішну ампліфікацію вірусних геномів.
Фігури ЗА-3С показують частоту патернів послідовностей (мотивів) при аналізі секвенуванням. На Фіг. ЗА представлений аналіз секвенуванням 4-го раунду спрямованої селекції при внутрішньовенній доставці до серцевої тканини. На Фіг. ЗВ представлений аналіз послідовності 2-го раунду спрямованої селекції при внутрішньовенній доставці до серцевої тканини в присутності нейтралізуючих антитіл. На Фіг. ЗС представлений аналіз послідовності 3- го раунду спрямованої селекції при внутрішньовенній доставці до тканин скелетних м'язів. На фігурі ЗА показані наступні патерни послідовностей (мотиви): 57,40 95 | АМКІОНТОА, 16,96 95
ГАМКТТМКОА, 7,32 95 АБОЗЕ, 7,32 Фо інші, 4,88 9о М7О081І ії 4,88 90 І! АБМТМКАЇА. На Фігурі ЗВ показані наступні патерни послідовностей: 21,14 95 "інші ніж", 20,33 95 І! АОАОТТКМА, 15,45 95
ГАМКТТМКОА, 15,45 95 | ААЗМІТКАА, 15,45 95 химера ААМб/ААУ5 і 12,20 95 | АМТМУКІ ЗТА. На
Фігурі ЗС показані мотиви: 43,21 95 АБОЗЕ, 41,98 95 РЗБбЗІ і 14,81 905 "Інші".
Фігури 4А-4С. Фіг. 4А - репрезентативна тривимірна модель ААМ2, що містить випадковий гептамер, що слідує за амінокислотою 587 і заміною М7081І. На Фіг. 48 представлена типова тривимірна модель химери ААМб/ААМ5, що містить заміни М229І, А490Т і АБ5Б81Т (які відповідають амінокислотній послідовності, вказаній в ЗЕО ІЮО МО: 62). На Фіг. 4С представлена типова тривимірна модель ААМ2, що містить заміну РЗбЗ3І.
На Фігурі 5 представлено вирівнювання послідовності дикого типу ААМ 5ЕО ІЮО МО: 1-11, що показує порівняльні положенні амінокислот серед серотипів дикого типу (що зустрічаються в природі) ААМ1Т, ААМ2, ААМЗА, ААМЗВ і ААМ4-10.
На Фігурах бА-6Е представлені дані про трансдукцію кардіоміоцитів людини іп мйго рекомбінантним вірусом ААМ, що містить новий варіант капсиду ААМ ГАМКІОКТОАЖМТОВІ, новий варіант капсиду ААМ ГАМКТТМКОАжМ708І і новий варіант капсиду ААМ
Зо ГАТМКІСМТАжМ7О81І, причому кожний варіант експресує трансген СЕР під контролем промотору
САС. Фігура бА: Клітини, які диференціювалися в кардіоміоцити з лінії плюрипотентних стовбурових клітин людини, були інфіковані новим варіантом АДдУ
ГАМКІОКТОАжУ7О8І.САС.ОЕР, новим варіантом ААМ ГАМКТТМКОАМ7О8І.САС.СЕР, новим варіантом ААМ ГАТМКІСМТАжМ708І.САС. СЕР або контролями дикого типу ААМ1.САС.ОЕР,
ААМ2.САС.ОЕР і ААМО.САС.ОЕР при МОЇ 20, 100, 500 ї 2500. Імунофлуоресцентна візуалізація клітинних культур через 6 днів після інфікування при всіх МОЇ демонструє, що нові варіанти капсидів ААМ трансдукують кардіоміоцити краще, ніж капсиди дикого типу ААМІ, ААМ2 або
ААМОУ. Фігура 6В: Кількісна оцінка відсотка СЕР-позитивних кардіоміоцитів у кожній культурі з допомогою проточної цитометрії показує, що нові капсиди варіанта ААМ забезпечують значне дозозалежне збільшення кількості трансдукованих клітин порівняно з трансдукцією капсидами
ААМ'1, ААМ2 або ААМОУ дикого типу. " р «0,05. Фігури 6С-60: кількісне визначення кількості СЕР у кожній культурі з допомогою вестерн-блотингу показує, що нові варіанти капсидів ААМ забезпечують значне поліпшення експресії трансгену порівняно з капсидами ААМІ, ААМ2 або
ААМОУ дикого типу. МТ-не трансдуковано. Фігура бЕ: Клітини, які диференціювалися в кардіоміоцити з лінії плюрипотентних стовбурових клітин людини, були інфіковані новим варіантом АДАМ ГАМКІОКТОАжМ7О8І.САС.СОЕР, новим варіантом АДАМ
ГАМКТТМКОАМ7О8І.САС.ОЕР, новим варіантом ААМ ГАТМКІСМТАжМ708І.САС. або контролями дикого типу ААМІ1.САС.ОгР, ААМ2.САС.ОБЕР і ААМОУ.САС.СЕР.
Імунофлуоресцентна візуалізація клітинних культур в дні 1, 2, З і 5 після інфікування при МОЇ 500 демонструє, що нові капсиди варіанта ААМ краще трансдукують кардіоміоцити і починають експресувати трансген СЕР раніше, ніж капсиди ААМІ1, ААМ2 або ААМУ дикого типу.
На фігурах 7А-Е представлені дані про трансдукцію людських кардіоміоцитів іп мйго рекомбінантним вірусом ААМ, що містить новий варіант ААМ, що являє собою варіант химерного капсиду ААМб/ААМ5 5ЕО ІО МО: 62, що експресує трансген СЕР під контролем промотору САС. Фігура 7А: Клітини, які диференціювалися в кардіоміоцити з лінії плюрипотентних стовбурових клітин людини, були інфіковані новим капсидом ААМ, таким як химерним капсидом ААМб/ААМ5 або контролями дикого типу ААМ1.САС.ОЕР, ААМ8.САС.ОБГР і
ААМОУ.САСс.ЗЕР при МОЇ 100, 500 ї 2500. Імунофлуоресцентна візуалізація клітинних культур через 6 днів після інфікування при всіх МОЇ демонструє, що новий капсидний варіант ААМ бо трансдукує кардіоміоцити краще, ніж капсиди ААМІ1, ААМ8 або ААМОУ дикого типу. Фігура 7В:
Кількісна оцінка відсотка СЕР-позитивних кардіоміоцитів у кожній культурі з допомогою проточної цитометрії показує, що новий варіант капсиду ААМ забезпечує значне дозозалежне збільшення кількості трансдукованих клітин порівняно з трансдукцією капсидами ААМІ, ААМ8 або ААМУ дикого типу. " р «0,05. Фігури 70-70: Визначення кількості СЕР у кожній культурі з допомогою вестерн-блотингу показує, що новий варіант ДАМ забезпечує значне поліпшення експресії трансгену порівняно з капсидами ААМІ, ААМ8 або ААМУ дикого типу. Вектор-не трансдуковано. Фігура 7Е: Клітини, які диференціювалися в кардіоміоцити з «лінії плюрипотентних стовбурових клітин людини, були інфіковані новим варіантом капсиду ААМ, що являє собою химерний капсид ААМб/ААМ5 або контролем ААМ8.САС.ОЕР дикого типу.
Імунофлуоресцентна візуалізація клітинних культур на 3, 4, 5 і 6 дні після інфікування при МОЇ 2500 демонструє, що новий варіант капсиду варіанта ААМ краще трансдукує кардіоміоцити і починає експресувати трансген СЕР раніше, ніж капсид ААМ8 дикого типу.
На Фігурах 8А-С представлені дані про трансдукцію скелетних міофібрил людини іп міїго рекомбінантним вірусом ААМ, що містить новий варіант капсиду ААМ ГАМКІОКТОАЖМТОВІ, новий варіант капсиду ААМ ГАМКТТМКОАжМ7О08І ї новий варіант химерного капсиду ААМ
ААМб6/ААМ5, причому кожний варіант експресував трансген СЕР під контролем промотору САб.
Фігура 8А: Клітини, які диференціювалися в скелетні міофібрили з первинних міобластів людини, були інфіковані новим варіантом капсиду ААМ ГАМКІОКТОАжМ708І.САС.ОЕР, новим варіантом капсиду ААМ ГАМКТТМКОАжМ7О08І.САС.ЗЕР, новим химерним варіантом капсиду
ААМ ААМб/ААМ5.САС.ОЕР або контролями дикого типу ААМ8.САС.ОЕР ії ААМО.САС.ОЕР при
МОЇ 100, 500 ії 2500. Імунофлуоресцентна візуалізація клітинних культур через 7 днів після зараження при всіх МОЇ демонструє, що нові варіанти капсидів ААМ трансдукують скелетні міофібрили краще, ніж капсиди дикого типу ААМ8 або ААМУО. Фігура 88: Кількісна оцінка відсотка
СІЕР-позитивних скелетних міофібрил у кожній культурі з допомогою проточної цитометрії показує, що нові варіанти капсидів ААМ забезпечують значне дозозалежне збільшення кількості трансдукованих клітин порівняно з трансдукцією капсидами ААМ8 або ААМО дикого типу. " р «0,05. Фігура 8С: Клітини, які диференціювалися в скелетні міофібрили з первинних міобластів людини, були інфіковані новим варіантом ААМ ГАМКІОКЕТОАжМ708І.САС.ОЕР, новим химерним варіантом ААМ ААМб/ААМ5.САС.ОЕР або оконтролями дикого типу ААМ8.САСОЕР і
Зо ААМУ9.САС.ОЕР. Імунофлуоресцентна візуалізація клітинних культур на 2-7 дні після інфікування при МОЇ 2500 демонструє, що нові капсидні варіанти ААМ краще трансдукують скелетні міофібрили і починають експресувати трансген СЕР раніше, ніж капсиди дикого типу ААМ8 або
ААМО.
На Фігурах 9А-В представлені дані про трансдукцію клітин-попередників м'язової тканини людини іп мійго рекомбінантним вірусом ААМ, що містить новий варіант капсиду ААМ
ГАМКІОКТОАЖУТО81І, новий варіант капсиду ААМ ГАМКТТМКОАтКМТОВІ і новий химерний варіант капсиду ААМ ААМб/ААМ»5, кожний з яких експресує трансген СЕР під контролем промотору САС.
Фігура ЗА: Клітини, які диференціювалися в клітини м'язових попередників з лінії плюрипотентних стовбурових клітин людини, були інфіковані новим варіантом капсиду АДАМ
ГАМКІОКТОАжМУ7О8І.САС.ОЕР, новим варіантом капсиду ААМ ГАМКТТМКОАжМУ7О8І.САС.ОЕР, новим химерним варіантом капсиду ААМ ААМб/ААМ5.САС.ОЕР або контролями ААМУ.САС.ОЕР дикого типу при МОЇ 500. Імунофлуоресцентна візуалізація клітинних культур через 6 днів після інфікування при всіх МОЇ демонструє, що нові капсидні варіанти ААМ трансдукують клітини- попередники м'язів краще, ніж ААМОУ дикого типу. Фігура 9В: Кількісний аналіз відсотка СЕР- позитивних клітин-попередників м'язів у кожній культурі з допомогою проточної цитометрії показує, що нові капсидні варіанти ААМ забезпечують значне збільшення кількості трансдукованих клітин порівняно з трансдукцією ААМУ дикого типу. " р «0,05
На Фігурах 10А-В представлені дані про ступінь збільшення трансдукції кардіоміоцитів людини і скелетних міофібрил людини іп міго рекомбінантним вірусом ААМ, що містить новий варіант капсиду ААМ ГАМКІОКТОАжМ7О08І, новий варіант капсиду ААМ ГАМКТТМКОАХУТОВІ і новий варіант химерного капсиду ААМ ААМб/ААМ5, кожний з яких експресував трансген СЕР під контролем промотору САС. фігура 10А: кратне збільшення трансдукції людських кардіоміоцитів новими варіантами капсиду ААМ порівняно з дикими типами ААМ8 і ААМО, тобто серотипами, що найбільш широко використовуються в клінічних застосуваннях при м'язових захворюваннях.
Фігура 108: кратне збільшення трансдукції скелетних міофібриол людини новими варіантами капсиду ААМ порівняно з капсидами ААМ8 і ААМУ дикого типу.
На Фігурах 11А-В представлені дані про трансдукцію тканини миші іп мімо рекомбінантним вірусом ААМ, що містить новий варіант капсиду ААМ ГАМКІОКТОАМ708І, що експресує трансген люциферази під контролем промотору САС. Мишам вводили одну внутрішньовенну бо ін'єкцію через хвостову вену в кількості 2х10!! вірусних геномів на тварину. Фігура 114А:
Візуалізацією люциферази в живій миші на 14-й (зліва) і 28-й (справа) дні після введення продемонстровано, що новий варіант капсиду ААМ ГАМКІОКТОАжМТО8І здатний трансдукувати клітини миші іп мімо. Фігура 11В: активність люциферази в серці, діафрагмі і чотириголовому м'язі через 56 днів після введення демонструє, що новий варіант капсиду ААМ
ГАМКІОВТОАтТУТО8І здатний трансдукувати серцевий і скелетний м'яз мишей іп мімо.
На Фігурах 12А-В представлені дані про трансдукцію скелетних м'язів приматів, відмінних від людини, іп мімо рекомбінантним вірусом ААМ, що містить новий варіант капсиду ААМ
ГАМКІОВТОАз-М708І, що експресує трансген СЕР під контролем промотору САС. Примату, що не є людиною, вводили З внутрішньом'язові ін'єкції кількістю 107"! вірусних геномів кожна в лівий м'яз мазіи5 Іагегаїї5 і потім м'язову тканину аналізували через 4 тижні після введення. Фігура 12А: Репрезентативні зображення забарвлення гемотоксиліном і еозином (НеЕ) і антитілом проти СЕР поперечних перетинів проксимальної ділянки біопсії із збільшенням 2х, 4х і 20х демонструють, що новий варіант капсиду ААМ ГАМКІОКТОАжМУ7О08І здатний трансдукувати клітини скелетного м'яза примату іп мімо. Фігура 12В: Репрезентативні зображення забарвлення гемотоксиліном і еозином (НУЕ) і антитілом проти СЕР подовжніх зрізів дистальної ділянки біопсії зі збільшенням 2х, 4х і 20х демонструють, що новий варіант капсиду ААМ
ГАМКІОКТОАЖТУТО81І здатний трансдукувати клітини скелетних м'язів примату іп мімо.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
Перш ніж дані способи і композиції будуть описані, потрібно розуміти, що цей винахід не обмежується конкретним описаним способом або композицією і, як такий, може включати варіації. Також потрібно розуміти, що термінологія, що використовується тут, призначена тільки для опису конкретних варіантів здійснення і не призначена для обмеження винаходу, оскільки обсяг даного винаходу обмежується тільки прикладеною Формулою винаходу.
Розкритий тут винахід ілюструється фігурами і описом. Проте, хоча конкретні варіанти здійснення і показані на кресленнях, немає наміру обмежувати винахід конкретними варіантами здійснення або варіантами здійснення, проілюстрованими і/або розкритими тим або іншим способом. Навпаки, розкритий тут винахід призначений для охоплення всіх модифікацій, альтернативних конструкцій і еквівалентів, відповідних суті і обсягу винаходу. Як такі, фігури мають ілюстративну, а не обмежувальну функцію.
Зо При наданні діапазону значень мається на увазі, що кожне проміжне значення, що знаходиться між верхньою і нижньою межами цього діапазону, з точністю до десятої частки
НИЖНЬОЇ межі, якщо контекст явно не означає інше, також вважається розкритим. Кожний менший діапазон між будь-яким заявленим значенням або проміжним значенням у вказаному діапазоні і будь-яким іншим заявленим або проміжним значенням у вказаному діапазоні входить в обсяг винаходу. Верхня і нижня межі цих менших діапазонів можуть незалежно включатися або виключатися з діапазону, і кожний діапазон, де або менші, або обидві межі включені в менші діапазони, також включений у винахід при умові будь-якої спеціально виключеної межі в заявленому діапазоні значень. Якщо вказаний діапазон включає одну або обидві з меж, діапазони, що виключають один або обидва з цих включених меж, також включені у винахід.
Якщо не визначено інше, всі технічні і наукові терміни, що використовуються в даному описі, мають те ж значення, яке звичайно розуміється фахівцями в тій галузі техніки, до якої належить цей винахід. Хоча будь-які методи і матеріали, подібні або еквівалентні тим, які описані тут, можуть використовуватися при практичному застосуванні або випробуванні даного винаходу, деякі потенційні і переважні способи і матеріали описані зараз. Всі публікації, згадані в даному описі, включені в нього за допомогою посилання для розкриття і опису способів і/або матеріалів, в зв'язку з якими цитуються публікації. Повинно бути зрозуміло, що якщо спостерігається суперечність, дане розкриття має пріоритет перед будь-яким розкриттям включеної публікації в тій мірі, в якій спостерігається суперечність.
Як буде зрозуміло фахівцям в даній галузі техніки після прочитання цього розкриття, кожний з окремих варіантів здійснення, описаних і проїілюстрованих в даному описі, має окремі компоненти і ознаки, які можуть бути легко відділені або об'єднані з ознаками будь-якого з кількох інших варіантів здійснення без відступу від обсягу або суті даного винаходу. Будь-який викладений метод може бути виконаний в порядку перерахованих подій або в будь-якому іншому логічно можливому порядку.
Потрібно зазначити, що, в рамках винаходу і в прикладеній Формулі винаходу, форми однини включають форми множини, якщо контекст явно не вказує інше. Таким чином, наприклад, посилання на "рекомбінантний вірон ААМ" включає множину таких віріонів, а посилання на "клітину м'язової тканини" включає посилання на одну або більше клітин м'язової тканини і їх еквівалентів, відомих фахівцям в даній галузі, і так далі. Крім того, потрібно 60 зазначити, що Формула винаходу може бути складена таким чином, щоб виключити будь-який необов'язковий елемент. Як таке, це твердження призначене для того, щоб служити юридичною основою для використання такої "виключної" термінології, як "«дино/винятково", "тільки" і т.п., В зв'язку з переліком елементів Формули винаходу або використанням "негативного" обмеження.
Публікації, що обговорюються в даному описі, представлені виключно через їх розкриття до дати подання даної заявки. Ніщо в даному описі не повинно бути витлумачене на користь того, що даний винахід не має права передувати за часом такої публікації як винахід, зроблений раніше. Крім того, вказані дати публікації можуть відрізнятися від фактичних дат публікації, які, можливо, буде потрібно підтвердити незалежно.
ВИЗНАЧЕННЯ
Аденоасоційований вірус являє собою непатогенний парвовірус, який складається з геному одноланцюжкової ДНК розміром 4,7 т. п. н., вміщеному в безоболонковому ікосаедричному капсиді. Геном містить три відкриті рамки зчитування (ОКР), оточені інвертованими кінцевими повторами (ІТК), які служать для ініціації раунду реплікації і сигналу упаковки. Кер ОКЕ кодує чотири неструктурні білки, які грають роль у реплікації вірусу, регуляції транскрипції, сайт- специфічній інтеграції і зборці віріону. сар ОКЕ кодує три структурні білки (МР 1-3), які беруть участь в збиранні капсиду, утворюючи б0-мірний вірусний капсид. Нарешті, ОКЕ, присутній як альтернативна рамка зчитування в гені сар, продукує білок, що активує зборку (ААР), тобто вірусний білок, який локалізує капсидні білюи ААМ в ядерці і функціонально бере участь в процесі збирання капсиду.
Існує кілька серотипів, що зустрічаються в природі ("дикий тип"), і більше 100 відомих варіантів ААМ, кожний з яких відрізняється амінокислотною послідовністю, особливо в межах гіперваріабельних ділянок капсидних білків, і, як наслідок, відрізняється по своїх властивостях доставки генів. Оскільки жоден ААМ не пов'язаний з яким-небудь захворюванням людини, рекомбінантні ААМ доцільні для клінічних застосувань.
У даному описі з метою розкриття термін "АДАМ" є абревіатурою для аденоасоційованого вірусу, включаючи, без обмеження, сам вірус і його похідні. Якщо не вказано інше, термін стосується всіх підтипів або серотипів, а також здатних до реплікації і рекомбінантних форм.
Термін "ААУ" включає, без обмеження, тип ААМ 1 (ААУ-1 або ААМ'І1), тип ААМ 2 (ААМ-2 або
АДУг), тип ААМ ЗА (ААУ-ЗА або ААМУЗА), тип ААМ ЗВ (ААМУ-3В) або ААУЗВ), тип ААМ 4 (ААМ-4
Зо або ААДМ4), тип ААМ 5 (ААМ-5 або ДАМБ), тип ААМ 6 (ААУ-6 або ААМб), тип ААМ 7 (ААМ-7 або
АДУ7), тип ААМ 8 (ААУ-8 або ДАМ8), тип ААМ 9 (ААМ-9 або ААМ9), тип ААМ 10 (ААУ-10 або
ААМ10 або ААМІйп10), пташиний ААМ, бичачий ААМ, собачий ААМ, ААМ кіз, ААМ коня, ААМ приматів і не-приматів ААМ і ААМ овець. "ААМ приматів" стосується ААМ, що інфікує приматів, "ААМ не-приматів" стосується ААМ, що інфікує ссавців, які не є приматами, "ААМ биків" стосується ААМ, що інфікує велику рогату худобу, і т.д.
Геномні послідовності різних серотипів ААМ, а також послідовності нативних кінцевих повторів (ТК5), білків Кер і субодиниць капсиду відомі в даній галузі. Такі послідовності можна знайти в літературі або у відкритих базах даних, таких як СепВапк. Див., наприклад, реєстраційні номери СепВапк МС 002077.1 (ААМ1), АРО63497.1 (ААМ1), МС 001401.2 (ААУ),
АРО43303.1 (ААМ2), 901901.1 (ААМ2), 0487041 (ААМЗА), МО 001729.1 (ААМЗА), АРО28705.1 (ААУЗВ), МО 001829.1 (ААМ4), 089790.1 (ААМ4), МС 0061521 (АА5), АРО85716.1 (ААМ-5),
АРО28704.1 (ААМб), МС 0062601 (ААМ7), АЕР513851.1 (ААМ7), АЕ513852.1 (ААМ8) МС 0062611 (ААУ-8), АУ530579.1 (ААМ9), ААТА6337 (ААМ10) і ААО88208 (ААМІп10), описи яких включені в даний опис за допомогою посилання для опису послідовностей нуклеїнових кислот і амінокислот ААМ. Див. також, наприклад, 5гімізїама еї аІ. (1983) 9. Мігоїоду 45:555; Спіогіпі еї аї. (1998) У. Мігоїоду 71:6823; СпНіогіпі еї а. (1999) У. Мігоїюду 73: 1309; Вапів!-5снНааї|! еї а!. (1999) У.
Мігоіоду 73:939; Хіао еї аї. (1999) 9. Мігоїюсду 73:3994; Мигатаїйви єї аї. (1996) Мікоіоду 221:208; зпайде еї. а!. (1986) 9. Міго!. 58:921; Сіао єї аї. (2002) Ргос. Маї. Асад. сі. ОБА 99: 11854; Мотгівз єї аІ. (2004) Мігоіоду 33:375-383; міжнародні патентні публікації УМО 00/28061, УМО 99/61601, УУО 98/11244; і патент США 6,156,303.
Послідовності білків сар (сарзід), які існують у природі, асоційованих з серотипами ААМ, відомі в даній галузі техніки і включають послідовності, розкриті в даному описі як ААМ1 (ЗЕО ІЮ
МО: 1), ААМ2 (5ЕО ІО МО: 2), ААМЗА (5ЕО ІЮ МО: 3), ААМЗВ (ЗЕО ІО МО: 4), ААМА4 (5ЕО ІЮ МО: 5), ААМ5 (5ЕО І МО: 6), ААМб (ЗЕО ІО МО: 7), ААМ7 (ЗЕО ІО МО: 8), ААМ8 (ЗЕО ІО МО: 9),
ААМ9 (5ЕБЕО ІЮ МО: 10), ААМ10 (З5ЕО ІЮ МО: 11) ї ААМгп10 (5ЕО ІЮО МО: 12). Терміни "варіант капсидного білка АДАМ" або "варіант ААМ" стосуються капсидного білка ААМ, що містить амінокислотну послідовність, яка включає щонайменше одну модифікацію або заміну (включаючи делецію, вставку, точкову мутацію і порівняно 3 природно існуючими послідовностями (або послідовностями дикого типу) капсидного білка ААМ, наприклад як 60 вказано в 5ЕО ІЮО МО: 1-12 даної заявки. Варіант капсидного білка ААМ може мати приблизно
80 95 ідентичності або більше з амінокислотною послідовністю капсидного білка дикого типу, наприклад, 85 95 ідентичності або більше, 90 95 ідентичності або більше або 95 95 ідентичності або більше відносно амінокислотної послідовності капсидного білка дикого типу, наприклад 98 95 або 99 95 ідентичності капсидному білку дикого типу. Варіант капсидного білка ААМ може не являти собою капсидний білок дикого типу.
У даному описі з метою розкриття термін "віріон ААУ" або "вірусна частинка ААУ" стосується вірусної частинки, що складається щонайменше з одного капсидного білка ААМ і інкапсульованого полінуклеотиду АДАМ.
У даному описі з метою розкриття термін ""«ААМ" являє собою скорочення, яке стосується рекомбінантного аденоасоційованого вірусу. "Рекомбінантний" застосовно до полінуклеотиду означає, що полінуклеотид є продуктом різних комбінацій методів клонування, рестрикції або лігування і інших процедур, внаслідок яких виходить конструкція, відмінна від полінуклеотиду, що зустрічається в природі. Рекомбінантний вірус являє собою вірусну частинку, що містить рекомбінантний полінуклеотид. Терміни, відповідно, включають реплікати вихідної полінуклеотидної конструкції і потомство вихідної вірусної конструкції.
Термін "вектор гААМ" охоплює віріони гААМ (тобто вірусні частинки гААМ) (наприклад, інфекційний віріон гААМ), які по визначенню включають полінуклеотид гААМ; і також охоплює полінуклеотиди, що кодують гААМ (наприклад, одноланцюжковий полінуклеотид, що кодує ГААМ (55-ГААМ); дволанцюжковий полінуклеотид, що кодує гААМ (а5-гААМ), наприклад плазміди, що кодують гААМ і т.п.).
Якщо віріон ААМ містить гетерологічний полінуклеотид (тобто полінуклеотид, відмінний від геному ААМ дикого типу, наприклад, трансген, який повинен бути доставлений в клітину-мішень, агент КМАї або агент СКІ5РЕ, які повинні бути доставлені в клітину-мішень, і т.д.), то такий віріон звичайно називають "рекомбінантний віріон ААМ (ГААМ)» або "вірусна частинка гААМ". Як правило, гетерологічний полінуклеотид фланкований щонайменше однією, але, як правило, двома послідовностями, інвертованими кінцевими повторами ААМ (ІТК).
Термін "упаковка" стосується серії внутрішньоклітинних подій, що приводять до збирання і капсидування частинки ААМ. Гени "тер" і "сар' ААМ стосуються полінуклеотидних послідовностей, що кодують білки реплікації і капсидування аденоасоційованого вірусу. ААМ гер
Зо і сар згадуються тут як ААМ "пакувальні гени/ген упаковки".
Термін "вірус-помічник" ААМ стосується вірусу, який дозволяє ААМ (наприклад, ААМ дикого типу) реплікуватися і упаковуватися в клітині ссавця. У даній галузі відома множина таких вірусів-помічників ААМ, включаючи аденовіруси, герпесвіруси і поксвіруси, такі як вірус коров'ячої віспи. Аденовіруси охоплюють низку різних підгруп, хоча найчастіше використовується аденовіруси типу 5 з підгрупи С. Численні аденовіруси людини, ссавців, що не стосуються людини, і птахів відомі і доступні в таких сховищах, як АТСС. Віруси сімейства герпесів включають, наприклад, вірус простого герпесу (Н5М) і вірус Епштейна-Барра (ЕВМ), а також цитомегаловіруси (СМУ) і віруси псевдосказу (РЕМ), які також доступні в депозитаріях, таких як АТОС.
Термінологія "функція(ї) вірусу-помічника" стосується функції (функцій), що кодується геномом вірусу-помічника, які забезпечують реплікацію і упаковку ААМ (в поєднанні з іншими вимогами до реплікації і упаковки, описаними тут). Як описано в даному описі, "функція вірусу- помічника" може забезпечуватися кількома способами, зокрема шляхом надання вірусу- помічника або надання, наприклад, полінуклеотидних послідовностей, що кодують необхідну функцію), в клітині-продуценті іп їгап5. Наприклад, плазміда або інший вектор експресії, що містить нуклеотидні послідовності, що кодують один або кілька аденовірусних білків, трансфікується в клітину-продуцент разом з вектором гААМ.
Термін "інфекційний(а)» вірус/вірусна частинка - це термін, який означає правильно зібраний вірусний капсид і який здатний доставляти полінуклеотидний компонент в клітину, до якої вірусний вид виявляє тропізм. Термін не обов'язково має на увазі яку-небудь здатність вірусу до реплікації. Способи підрахунку інфекційних вірусних частинок описані в інших частинах цього опису і в даній галузі техніки. Інфекційність вірусу може бути виражена як відношення кількості інфекційних вірусних частинок до загальної кількості вірусних частинок. Способи визначення відношення інфекційних вірусних частинок до загальної кількості вірусних частинок відомі в даній галузі. Див., наприклад, Сгаіпдег еї аІ. (2005) Мої. Тег. 11: 5337 (дезсгірбіпд а ТСІО50 іптесійоив5 Шег аззау); і 2о101їШКпіп еї а. (1999) Сепе Тег. 6:973. Див. також приклади.
Термін, що використовується тут, "тропізм' стосується переважного націлення вірусом (наприклад, ААМ) на клітину-хазяїна певного виду або певні типи клітин в межах виду хазяїна.
Наприклад, вірус, який може інфікувати клітини серця, легень, печінки і м'язів, має більш бо широкий (тобто підвищений) тропізм порівняно з вірусом, який може інфікувати тільки клітини легень і м'язів. Тропізм також може включати залежність вірусу від певних типів молекул клітинної поверхні хазяїна. Наприклад, деякі віруси можуть інфікувати тільки клітини з глікозаміногліканами на поверхні, в той час як інші віруси можуть інфікувати тільки клітини з сіаловою кислотою на поверхні (така залежність може бути перевірена при використанні різних клітинних ліній, в яких відсутній певний клас молекул, як потенційних клітин-хазяїнів для вірусної інфекції). У деяких випадках тропізм вірусу описує відносні переваги вірусу. Наприклад, перший вірус може бути здатний інфікувати всі типи клітин, але бути набагато успішніший при інфікуванні клітин з поверхневими глікозаміногліканами. Другий вірус може вважатися таким, що має схожий (або ідентичний) тропізм з першим вірусом, якщо другий вірус також віддає перевагу тим же самим характеристикам клітин (наприклад, другий вірус також більш успішний в інфікуванні клітин з поверхневими глікозаміногліканами), навіть якщо абсолютні величини ефективності трансдукції не схожі між собою. Наприклад, другий вірус може бути більш ефективний, ніж перший вірус, при зараженні кожного типу клітин, що тестується, але якщо відносні переваги схожі (або ідентичні), другий вірус все ж можна вважати таким, що має аналогічний (або ідентичний) тропізм з першим вірусом. У деяких варіантах здійснення тропізм віріону, що містить варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, не змінюється відносно нативного віріону. У деяких варіантах здійснення тропізм віріону, що містить варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, є збільшеним (тобто розширеним) порівняно з тропізмом віріону, що зустрічається в природі. У деяких варіантах здійснення тропізм віріону, що містить варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, знижується порівняно з тропізмом віріону, що зустрічається в природі.
Термін "здатний до реплікації" вірус (наприклад, здатний до реплікації ААМ) стосується фенотипу вірусу дикого типу, який інфективний і в той же час здатний реплікуватися в інфікованій клітині (тобто в присутності вірусу-помічника (хелпера) або функцій вірусу- помічника). У випадку ААМ, здатність ефективно реплікуватися звичайно вимагає наявності функціональних генів упаковки ААМ. Як правило, вектори гААМУ, як описано тут, є нездатними до реплікації в клітинах ссавців (особливо в клітинах людини) через відсутність одного або кількох генів упаковки ААМ. Як правило, в таких векторах гААМ відсутні які-небудь послідовності генів упаковки ААМ для мінімізації імовірності того, що здатні до реплікації ААМ можуть бути утворені
Зо шляхом рекомбінації між генами упаковки ААМ і вхідним вектором гААМ. У багатьох варіантах здійснення препарати вектора гААМ, як описано в даному описі, являють собою ті, які містять мало, якщо взагалі містять, здатних до реплікації ААМ (гсААМ, що також називаються КСА) (наприклад, менш ніж приблизно 1 гсААМ на 102 частинок гГААМ, менш ніж приблизно 1 гсААМ на 107 гГААМ частинок, менш ніж приблизно 1 гсААМ на 10 частинок ГААМ, менш ніж приблизно 1
ГсААМ на 1072 частинок ГААМ або повністю без гсААМ).
Термін "полінуклеотид" стосується полімерної форми нуклеотидів будь-якої довжини, включаючи дезоксирибонуклеотиди або рибонуклеотиди, або їх аналоги. Полінуклеотид може містити модифіковані нуклеотиди, такі як метиловані нуклеотиди і аналоги нуклеотидів, і може уриватися ненуклеотидними компонентами. Якщо такі присутні, модифікації нуклеотидної структури можуть бути введені до або після збирання полімеру. Термін, що використовується тут, "полінуклеотид" вживається взаємозамінно до дволанцюжкових і одноланцюжкових молекул. Якщо інше не вказано або не потрібно, будь-який варіант здійснення, що включає полінуклеотид, охоплює як дволанцюжкову форму, так і кожну з обох комплементарних одноланцюжкових форм, відомих або передбачених для формування дволанцюжкової форми.
Якщо полінуклеотид або поліпептид має певний відсоток "ідентичності послідовності" з іншим полінуклеотидом або поліпептидом, то це означає, що при вирівнюванні послідовностей цей відсоток основ або амінокислот показує кількість однакових основ/амінокислот при порівнянні двох послідовностей. Схожість послідовності може бути визначена різними способами. Для визначення ідентичності послідовностей послідовності можуть бути вирівняні при використанні різних методів і комп'ютерних програм, включаючи ВГА5Т, доступних онлайн пеобі.піт.пій.дом/ВГАЗТ/. Іншим алгоритмом вирівнювання є ЕА5ТА, доступний у пакеті програм від СЗепеїййс5 Сотршийпуд Сгоир (5005), від Мадізоп, Умі5сопвіп, О5А, дочірньої компанії ОхТога
Моїесшіаг Сгоишр, Іпс., що знаходиться в повній власності. Інші способи вирівнювання описані в
Меїподз іп Епгутоіоду, мо!. 266: Сотриїег МеїШод5 ог Масготоїесшціаг зедиепсе Апаїувів (1996), ей. Оооїїше, Асадетіс Ргез5, Іпс., а дімівіоп ої Нагсошгі Вгасе 5 Со., Зап Оіедо, СаїШйогпіа, ОБА.
Особливий інтерес становлять програми вирівнювання, що дозволяють пропуски в послідовності. Зтійп-УМаїєптап - це один із типів алгоритму, що допускає пропуски у вирівнюванні послідовностей. Див. Мей. Мої. Віої. 70: 173-187 (1997). Крім того, програма САР, що використовує метод вирівнювання Мееаіетап і Ууип5сй, може використовуватися для бо вирівнювання послідовностей. Див. ). Мої. Віо!. 48: 443-453 (1970).
Термін "ген" стосується полінуклеотиду, що виконує яку-небудь функцію в клітині.
Наприклад, ген може містити відкриту рамку зчитування, здатну кодувати продукт гена. Одним із прикладів генного продукту є білок, який транскрибується і транслюється з цього гена. Іншим прикладом генного продукту є РНК, наприклад, функціональний продукт РНК, наприклад аптамер, інтерферуюча РНК, рибосомна РНК (рРНК), транспортна РНК (тРНК), некодуюча РНК (нкРНК), напрямна РНК для нуклеаз і т. д., яка транскрибується з гена, але не транслюється.
Термін "продукт експресії гена" або "продукт гена" являє собою молекулу, отриману внаслідок експресії певного гена, як визначено вище. Продукти генної експресії включають, наприклад, поліпептид, аптамер, інтерферуючу РНК, РНК-месенджер (мРНК), рРНК, тРНК, некодуючу РНК (нкРНК) і тому подібне.
Термін "агент 5іРНК" ("мала інтерферуюча" або "коротка інтерферуюча РНК" (або мігРНК)) являє собою РНК-дуплекс нуклеотидів, націлений на ген, що цікавить ("цільовий ген"). "РНК- дуплекс" стосується структури, утвореної комплементарним спарюванням між двома ділянками молекули РНК, які створюють ділянку дволанцюжкової РНК (длРНК). міРНК "націлена" на ген таким чином, що нуклеотидна послідовність дуплексної ділянки міРНК є комплементарною нуклеотидній послідовності цільового гена. У деяких варіантах здійснення довжина дуплексу міРНК становить менше 30 нуклеотидів. У деяких варіантах здійснення дуплекс може мати довжину 29, 28, 27, 26, 25, 24, 23, 22, 21, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11 або 10 нуклеотидів.
В деяких варіантах здійснення довжина дуплексу становить 19-25 нуклеотидів. У деяких варіантах здійснення, націлення на ген, здійснюване з допомогою 5ікМА, досягається за допомогою використання ДНК-спрямованої РНК-інтерференції (дДаКкМАЇ), що являє собою метод пригнічення експресії гена, в якому використовуються ДНК-конструкції для активації шляхів ендогенної РНК-інтерференції (КМАЇї) в клітинах тварин. Такі конструкції ДНК призначені для експресії самокомплементарних дволанцюжкових РНК, звичайно РНК з короткою шпилькою (5ПЕМА), які, будучи процесовані, пригнічують експресію цільового гена або генів. Експресія будь-якої РНК, включаючи ендогенні мРНК або вірусні РНК, може бути пригнічена за допомогою конструкцій, створених для експресії дволанцюжкової РНК, комплементарної бажаній цільовій
МРНК. Як така, дуплексна частина РНК агента 5іеМА може бути частиною структури з короткою шпилькою, що позначається 5ПЕМА.На доповнення до дуплексної частини, структура шпильки
Зо може містити петлеву частину, розташовану між двома послідовностями, які створюють дуплекс. Петлева структура може варіюватися по довжині. У деяких варіантах здійснення довжина петлі становить 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 або 13 нуклеотидів. Структура шпильки може також містити 3' або 5' виступаючі частини. У деяких варіантах здійснення виступ є 3' або 5' виступом з довжиною 0, 1, 2, З, 4 або 5 нуклеотидів. Як правило, рівень експресії продукту гена- мішені (наприклад, мРНК, поліпептиду і знижується за допомогою агента 5ікМА (наприклад, вікМА, 5ПКМА і т.д.), який містить специфічні дволанцюжкові нуклеотидні послідовності, що є комплементарними щонайменше сегменту довжиною 19-25 нуклеотидів (наприклад, нуклеотидною послідовністю довжиною 20-21) транскрипту гена-мішені, включаючи 5'- нетрансльовану (ШТ) ділянку, ОКЕ або 3" ОТ-ділянку. У деяких варіантах здійснення короткі інтерферуючі РНК мають довжину приблизно 19-25 нуклеотидів. Див., наприклад, заявки РСТ
МО 00/44895, МО 99/32619, МО 01/75164, МО 01/92513, МО 01/29058, МО 01/89304, МО 02/16620 ї МО 02/29858; і публікацію патенту США Мо 2004/0023390 для опису 5ікМА технологій. 5ікМА і/або 56пеЕМА можуть кодуватися послідовністю нуклеїнової кислоти, і послідовність нуклеїнової кислоти також може включати промотор. Послідовність нуклеїнової кислоти також може включати сигнал поліаденілювання. У деяких варіантах здійснення сигнал поліаденілювання являє собою синтетичний мінімальний сигнал поліаденілювання.
Термінологія "антисмислова РНК" охоплює РНК, комплементарну продукту експресії гена.
Наприклад, антисмислова РНК, націлена на конкретну мРНК, являє собою агент на основі РНК (або може бути модифікованою РНК), комплементарний мРНК, причому гібридизація антисмислової РНК з мРНК змінює експресію мРНК (наприклад, шляхом зміни стабільності РНК, зміни трансляції РНК і т.д.). Також в "антисмислову РНК" включаються нуклеїнові кислоти, що кодують антисмислову РНК.
Що стосується "агентів СКІЗРК/Са59", термін "СКІ5БРЕК" охоплює короткі паліндромні повтори, що регулярно розташовані групами/СКІЗРЕ-асоційовані (Сав5) системи, які з'явилися в процесі еволюції для забезпечення адаптивного імунітету у бактерій і архей проти вірусів і плазмід з використанням СКІЗРК РНК (сгеЕМА, сгРНК) для регуляції пригнічення експресії інвазивних нуклеїнових кислот. Білок Са59 (або його функціональний еквівалент і/або варіант, тобто Са59-подібний білок), в нормі має активність ендонуклеази ДНК, що залежить від асоціації білка з двома природними або синтетичними молекулами РНК, що позначаються як сгРНК і бо їакгтРНК (що також називається напрямними РНК). У деяких випадках обидві молекули ковалентно зв'язані з утворенням однієї молекули (що позначається "одиничною напрямною
РНК" (5ОоКкМА", 5іпдіе диіде ЕМА)). Таким чином, Са59 або Са59-подібний білок зв'язується з
ДНК-націлюючою РНК (цей термін включає як двомолекулярну конфігурацію напрямної РНК, так і конфігурацію одно-молекулярної напрямної РНК), яка активує Са59 або Са59-подібний білок і націлює білок на послідовність нуклеїнової кислоти-мішені.
Якщо Са59 або Са59-подібний білок зберігає свою природну ферментативну функцію, він розщеплює ДНК-мішень з утворенням дволанцюжкового розриву, який може привести до модифікації геному (тобто редагування: появи делеції, інсерції (в присутності донорного полінуклеотиду), заміни і т.д.), тим самим приводячи до зміни експресії гена. Деякі варіанти
Са59 (які охоплюються терміном Саз5з9-подібні) були змінені таким чином, щоб вони мали знижену активність розщеплення ДНК (в деяких випадках вони розщеплюють один ланцюг замість обох ланцюгів цільової ДНК, тоді як в інших випадках спостерігається повне зникненні активності розщеплення ДНК). Са59-подібні білки зі зниженою ДНК-розщеплюючою активністю (і навіть без ДНК-розщеплюючої активності) все ж можуть бути спрямовані до цільової ДНК для блокування активності РНК-полімерази. Альтернативно, Са59 або Са59-подібний білок можуть бути модифіковані шляхом злиття домену активації транскрипції УРбА з білком Сав59 і спільної доставки злитого білка з хелперним білюом М52-РБбБ5-НЗЕ1 і одиничною напрямною РНК, що містить аптамери РНК М52 на тетра-петлі і стовбуровій петлі для формування синергічного комплексу медіатора активації (Са59-5АМ), що активує транскрипцію в клітині. Таким чином, ферментативно неактивні Са59-подібні білки можуть бути націлені на певне місце в ДНК-мішені за допомогою ДНК-націлюючої РНК для блокування або активації транскрипції ДНК-мішені.
Термін, що використовується тут, "агенти СКІЗРК/Са59" охоплює всі форми СКІЗРК/Савз9, як описано вище або як відомо в даній галузі техніки.
Детальну інформацію відносно агентів СКІЗБРЕ можна знайти, наприклад, в (а) діпек еї. аї.,
Зсіепсе. 2012 Ацд 17;337(6096):816-21: "А ргодгаттабіе ацаІ-АМА-дцідей ОМА епадописієавзе іп адаріїме брасієгіа! іттипйу"; (5) Оі єї а!., Се. 2013 Ре 28; 152(5): 1173-83: "Веригрозіпда СВІБРА аз ап АМА-дцідеа ріанопт ог зедоепсе-зресіїййс сопігої ої депе ехргеззіоп", і в (с) заявці на патент
США Мо 13/842 859 і в заявці РСТ/О513/32589; всі з яких таким чином включені в даний опис за допомогою посилання у всій їх повноті. Таким чином, термін "агент СКІ5РЕ", що використовується в даному описі, включає будь-який агент (або нуклеїнову кислоту, що кодує такий агент), що зустрічаються в природі, і/або синтетичні послідовності, які можуть бути використані в системі на основі Сабз9 (наприклад, Са59 або Са59 подібні білки; будь-який компонент ДНК-націленої РНК, наприклад сгРНК-подібна РНК, ігактРНК-подібна РНК, одинична напрямна РНК і т. д.; донорний полінуклеотид, і тому подібне).
Під "нуклеазами цинкового пальця" (також позначені як 2ЕМ5) розуміють штучні ендонуклеази ДНК, отримані шляхом злиття ДНК-зв'язувального домену цинкового пальця з доменом розщеплення ДНК. 2ЕМ5 можуть бути сконструйовані для націлення на бажані послідовності ДНК, що дозволяє нуклеазам цинкового пальця розщеплювати унікальні послідовності-мішені. При введенні в клітину, 2ЕМ5 можуть бути використані для редагування цільової ДНК в клітині (наприклад, при редагуванні геному клітини) шляхом індукції подвійних розривів ланцюга. Для отримання додаткової інформації про використання 2ЕМ5 див., наприклад: Авигі еї аїЇ., Мої. Тег. 2012 Реб; 29(2):329-38; Вірікома еї аІ. Зсієпсе. 2003 Мау 25300(5620):764; Мооа еї а. бсіепсе. 2011 дш! 15;333(6040):307; Оспіаї еї аІ. Сепев5 СеїІв. 2010
Аца; 15(8):875-85; ТаКкази еї. а!., Іпвесі Віоспет Мої! Віої. 2010 Ос 40(10):759-65; ЕКкКег евї аї, 7ергайзн 2008 битте" 5(2): 121-3; Моципуд єї а), Ргос Май Асай 5сі ОБА. 2011 Арг 26:108(17):7052-7; Сюоїдрего еї аї, Сеїї. 2010 Маг 5:140(5):678-91; Сецнв еї аї, Зсієпсе. 2009 Оці 24:325(5939):433; НівікомеКа ві а), РГо5 Опе. 2011;:6(6):е21045. до: 10.1371ЛоигпаїІ.ропе.0021045. Ериб 2011 дип 13; Наийзспіїйа еї аї, Ргос Маї! Асай 5сі ОБА. 2011 ці 197108(29): 12013-7; і Ми еї аїЇ, СеїІ Ке5. 2011 Мом; 21(І 1): 1638-40; всі з яких включені в даний опис за допомогою посилання відносно матеріалу, пов'язаного з 2ЕМ5. Термін "агент 2ЕМ" охоплює нуклеазу() цинкового пальця і/або полінуклеотид, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує нуклеазу цинкового пальця.
Термінологія "ефекторні нуклеази, подібні активатору транскрипції" або "ТАГ ЕМ" стосується ефекторних нуклеаз, подібних активатору транскрипції (ТАГЕМ). ТАГЕМ являють собою штучні ендонуклеази ДНК, отримані шляхом злиття ТАГ. (Тгапзогірбноп асіїма(ог-ІїКе) ефекторного ДНК- зв'язувального домену з доменом розщеплення ДНК. ТАГЕМ можуть бути швидко сконструйовані таким чином, щоб зв'язувати практично будь-яку бажану послідовність ДНК, і, при введенні в клітину, ТАГЕМ можуть використовуватися для редагування цільової ДНК в клітині (наприклад, при редагуванні геному клітини) шляхом індукції подвійних розривів бо ланцюга. Для отримання додаткової інформації про використання ТАГЕМ див., наприклад:
НосКетеуєг єї а. Маї Віоїесппої. 2011 ші! 7:29(8):731-4; Мой еї а). Зсівєпсе. 2011. Уцї 15;333(6040):307; Теб55оп еї а). Маї ВіоїесппоІї. 2011 Ацу 5:29(8):695-6; і Ниапо еї. аї., Маї
Віотесппої. 2011 Аца 5;:29(8):699-700; всі з яких включені в даний опис за допомогою посилання відносно матеріалу, пов'язаного з ТАГЕМ. Термін "агент ТАГЕМ" охоплює ТАГЕМ і/або полінуклеотид, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує ТАЇ ЕМ.
Термін "контролюючий елемент" або "контролююча послідовність" стосується нуклеотидної послідовності, яка залучена у взаємодію молекул і сприяє функціональній регуляції полінуклеотиду, включаючи реплікацію, дуплікацію, транскрипцію, сплайсинг, трансляцію або деградацію полінуклеотиду. Регуляція може впливати на частоту, швидкість або специфічність процесу і може бути посилюючим або гальмуючим фактором за своєю природою. Контролюючі елементи, відомі в даній галузі, включають, наприклад, регуляторні послідовності транскрипції, такі як промотори і енхансери. Промотор являє собою ділянку ДНК, здатну в певних умовах зв'язувати РНК-полімеразу і ініціювати транскрипцію кодуючої ділянки, звичайно розташованої нижче за потоком (в 3'--напрямку) від промотору. Промотори можуть бути повсюдно діючими, тобто активними в багатьох типах клітин, як, наприклад, промотори САС або СМУ; або бути специфічними для тканини або клітини, наприклад промотор може бути тканиноспецифічним для експресії в кардіоміоцитах.
Термін "функціонально зв'язаний" або "оперативно зв'язаний" стосується такого взаєморозташування генетичних елементів, при якому елементи знаходяться у взаємозв'язку, що дозволяє їм працювати очікуваним способом. Наприклад, промотор функціонально зв'язаний з кодуючою ділянкою, якщо промотор допомагає ініціювати транскрипцію кодуючої послідовності. Між промотором і кодуючою ділянкою можуть бути присутні проміжні нуклеотидні основи при умові збереження цього функціонального взаємозв'язку.
Термін "експресійний вектор (також вектор експресії)» охоплює вектор, що містить полінуклеотидну ділянку, що кодує поліпептид, який становить інтерес, який використовується для здійснення експресії білка в передбачуваній клітині-мішені. Вектор експресії також може містити контролюючі елементи, функціонально зв'язані з кодуючою ділянкою для полегшення експресії білка в клітині-мішені. Комбінація контролюючих елементів з геном або генами, з якими вони функціонально зв'язані для забезпечення експресії, іноді згадується як "касета експресії", велика кількість яких відома і доступна в даній галузі техніки або може бути легко сконструйована з компонентів, доступних в даній галузі техніки.
Термін "гетерологічний" означає похідне від генотіпично відмінного об'єкта, іншого, ніж інші об'єкти, з якими він порівнюється. Наприклад, полінуклеотид, введений методами генної інженерії в плазміду або вектор, отриманий з іншого виду, являє собою гетерологічний полінуклеотид. Промотор, видалений з його нативної кодуючої послідовності і функціонально зв'язаний з кодуючою послідовністю, з якою він не був зв'язаний природним способом, є гетерологічним промотором. Таким чином, наприклад, гААМ, який включає гетерологічну послідовність нуклеїнової кислоти, що кодує гетерологічний генний продукт, являє собою гААМ, що включає полінуклеотид, що звичайно не міститься у ААМ дикого типу, що зустрічається в нормі, а гетерологічний генний продукт, що кодується, являє собою такий генний продукт, який звичайно не кодується природним ААМ дикого типу.
Терміни "генетична зміна" і "генетична модифікація" (і їх граматичні варіанти) використовуються тут взаємозамінно для позначення процесу, в якому генетичний елемент (наприклад, полінуклеотид) вводиться в клітину способом, відмінним від мітозу або мейозу.
Елемент може бути гетерологічним для клітини, або може бути додатковою копією або поліпшеною версією елемента, вже присутнього в клітині. Генетична зміна може бути здійснена, наприклад, шляхом трансфекції клітини рекомбінантною плазмідою або іншим полінуклеотидом за допомогою будь-якого процесу, відомого в даній галузі, такого як електропорація, осадження фосфатом кальцію або контактом із полінуклеотид-ліпосомним комплексом. Генетична зміна також може бути здійснена, наприклад, шляхом трансдукції або зараження ДНК- або РНК- вмісним вірусом або вектором на основі вірусу. Як правило, генетичний елемент вводиться у хромосому або міні-хромосому в клітині; однак будь-яка модифікація, що змінює фенотип і/або генотип клітини і її потомства, включається в цей термін.
Що стосується модифікації клітин, терміни "генетично модифікований" або "трансформований", або "трансфікований", або "трансдукований" екзогенною ДНК (наприклад, за допомогою рекомбінантного вірусу) стосуються моменту, коли така ДНК була введена всередину клітини. Присутність екзогенної ДНК приводить до постійних або тимчасових генетичних змін. Трансформуюча ДНК може бути або не бути інтегрована (ковалентно зв'язана) в геном клітини. "Клон' являє собою популяцію клітин, отриманих з однієї клітини або загального предка за допомогою мітозу. "Клітинна лінія" являє собою клон первинної клітини, здатний стабільно рости іп міго протягом багатьох поколінь.
У рамках винаходу, клітина вважається "стабільно" зміненою, трансдукованою, генетично модифікованою або трансформованою генетичною послідовністю, якщо ця послідовність виконує свою функції при культивуванні культури клітин іп міїго і/або протягом тривалого періоду часу іп мімо. Як правило, така клітина "спадково" змінена (генетично модифікована) тим, що вводиться така генетична зміна, яка успадковується потомством зміненої клітини.
Терміни "поліпептид", "пептид" і "білок використовуються тут взаємозамінно для позначення полімерів амінокислот будь-якої довжини. Терміни також охоплюють амінокислотний полімер, який був підданий змінам, таким, як, наприклад, утворення дисульфідного зв'язку, глікозилування, ліпідування, фосфорилування або кон'югація з компонентом, який мітить. Поліпептиди, такі як антиангіогенні поліпептиди, нейропротекторні поліпептиди і тому подібне, якщо вони обговорюються в контексті доставки генного продукту суб'єкту-ссавцеві, а також композиції таких, стосуються відповідного інтактного поліпептиду або будь-якого його фрагменту або його генно-інженерного похідного, які зберігають бажану біохімічну функцію інтактного білка. Аналогічно, посилання на нуклеїнові кислоти, що кодують антиангіогенні поліпептиди, нуклеїнові кислоти, що кодують нейропротекторні поліпептиди, і інші такі нуклеїнові кислоти, що використовуються при доставці продукту гена ссавцеві суб'єкту (які можуть називатися "трансгенами" для доставки в клітини реципієнта), включають полінуклеотиди, що кодують інтактний поліпептид або будь-який фрагмент, або генно-інженерне похідне, що мають бажану біохімічну функцію.
Термін, що використовується тут, "виділена/зольована" плазміда, нуклеїнова кислота, вектор, вірус, віріон, клітина-хазяїн, білок або інша речовина стосується препарату речовини, позбавленої щонайменше деяких інших компонентів, які також можуть присутні там, де речовина або речовина, подібна такій, зустрічається в природі або матеріалі, з якого вона спочатку отримана. Так, наприклад, виділена речовина може бути приготована з використанням методики очищення для збагачення її з вихідної суміші. Збагачення може бути виміряне на абсолютній основі, такій як маса на об'єм розчину, або воно може бути виміряне відносно другої, потенційно заважаючої речовини, присутньої у вихідній суміші. Збільшення ступеня
Зо збагачення у варіантах здійснення цього розкриття сприяє поліпшенню ступеня очищення елемента. Виділена плазміда, нуклеїнова кислота, вектор, вірус, клітина-хазяїн або інша речовина в деяких варіантах здійснення очищується, наприклад, від приблизно 8095 до приблизно 90 95 чистоти, щонайменше приблизно 90 95 чистоти, щонайменше приблизно 95 95 чистоти, щонайменше приблизно 98 95 чистоти або, щонайменше приблизно 99 95 чистоти або більше.
Терміни, які використовуються тут, "лікування", "застосування лікування" і тому подібне стосуються отримання бажаного фармакологічного і/або фізіологічного ефекту. Ефект може бути профілактичним з точки зору повного або часткового запобігання захворюванню або його симптому і/або може бути терапевтичним з точки зору часткового або повного лікування від захворювання і/або несприятливого ефекту, пов'язаного із захворюванням. Термін "лікування", як використовується в даному описі, охоплює будь-яке лікування захворювання у ссавця, особливо у людини, і включає: (а) запобігання виникненню захворювання (і/або симптомів, що викликаються захворюванням) у суб'єкта, який може бути схильним до захворювання або схильним до ризику захворювання, але ще не був діагностований як хворий; (б) пригнічення захворювання (і/або симптомів, викликаних захворюванням), тобто припинення його розвитку; і (с) послаблення захворювання (і/або симптомів, викликаних захворюванням), тобто індукція регресії захворювання (і/або симптомів, викликаних захворюванням), тобто послаблення захворювання і/або одного або кількох симптомів захворювання (хвороби). Наприклад, композиції і способи, що пропонуються, можуть бути спрямовані на лікування м'язового захворювання. Необмежувальні методи для оцінки м'язових захворювань і їх лікування включають вимірювання вироблення терапевтичного білка (наприклад, при проведенні біопсії м'язів з подальшим імуногістохімічним аналізом або відбором сироватки з подальшим тестом
ЕГІЗА або аналізом активності ферментів), вимірювання симптомів серцевої недостатності (наприклад, використовуючи функціональну класифікацію Нью-Йоркської асоціації кардіологів або опитувальник Міппезоїа І їміпд УМІп Неагі Раїїшге), оцінку функціонального статусу серця (наприклад, б-хвилинний тест ходьби або пікове максимальне споживання кисню), аналіз біомаркерів (наприклад, М-термінальний прогормонового мозкового натрійуретичного пептиду), оцінку функці/ремоделювання лівого шлуночка (наприклад, оцінка фракції викиду лівого шлуночка або кінцевого систолічного об'єму лівого шлуночка), оцінку м'язової сили (наприклад, бо по тестах Медіса! Кезеагсп Соипсії Зса|ез5 Сіїпіса! Іпмезіїдайоп ої Оиспеппе Оузігорпу, ручної динамометрії або максимального підняття ваги), оцінку м'язової функції (наприклад, по шкалі
Віньоса, часових функціональних тестів, шкалі Моїог Еипсіоп Меазиге зЗсаре, шкалі, що відповідає Мой 5іаг АтриїЇайгу Аз5зез5тепі, тести під час підняття об'єктів з підлоги (9 Ноїе
Ред Тез), тест нервово-м'язових розладів немовлят, розроблений в дитячій лікарні Філадельфії (Спіідгеп'є НозріїаіІ ої Рпйаадеїрніа ІпТапі Те5і ої Меиготизсшіаг Оізогаег5), оцінку симптомів м'язових захворювань (наприклад, оцінку нервово-м'язових симптомів або загальний клінічний анамнез), оцінку мітохондріальної функції (наприклад, методом магнітно-резонансної спектроскопії З1Р), оцінку якості життя на основі опитувальника, результати, що повідомляються пацієнтами, або аналіз щоденних дій.
Терміни "індивідуум", "хазяїн", "суб'єкт" і "пацієнт" використовуються тут взаємозамінно і стосуються ссавців, включаючи, але не обмежуючись людиною, приматами, що не є людьми, включаючи мавп; спортивні тваринні (ссавці), наприклад, коні; сільськогосподарські тварини (ссавці), наприклад, вівці, кози і т.д.; домашні тварини (ссавці), наприклад собаки, кішки і т.д., і гризуни, наприклад, миші, щурі і т.д.
У деяких варіантах здійснення індивідуум являє собою людину, яка раніше був піддана природному впливу ААМ і в результаті має анти-ААМ-антитіла (тобто нейтралізуючі ААМ- антитіла). У деяких варіантах здійснення індивідуум являє собою людину, якій раніше вводили вектор ААМ (Її, як наслідок, він може мати антитіла проти ААМ) і яка потребує повторного введення вектора для лікування іншого стану або для подальшого лікування того ж самого стану. На основі позитивних результатів клінічних випробувань, пов'язаних з доставкою гена
ААМ, наприклад, в печінку, м'язи і сітківку - у всі тканини, уражені нейтралізуючими антитілами проти цього вектора - існує множина таких терапевтичних застосувань/мішеней захворювання.
Термін, що використовується тут, "ефективна кількість" являє собою кількість, достатню для досягнення позитивних або бажаних клінічних результатів. Ефективна кількість може бути введена за одне або кілька введень. Для цілей даного розкриття ефективна кількість сполуки (наприклад, інфекційного віріону гААМ) являє собою кількість, що є достатньою для пом'якшення, поліпшення, стабілізації, реверсії, запобігання, сповільнення або затримки прогресування конкретного захворювання (наприклад, захворювання м'язів) і/або симптомів, пов'язаних з ним. Відповідно, ефективна кількість інфекційного віріону ГААМ являє собою
Зо кількість інфекційного віріону гГААМ, здатну ефективно доставляти гетерологічну нуклеїнову кислоту в клітину-мішень (або клітини-мішені) індивідуума. Ефективні кількості можуть бути визначені доклинічно, наприклад, шляхом виявлення в клітині або тканині генного продукту (РНК, білка), який кодується гетерологічною послідовністю нуклеїнової кислоти, з використанням методик, добре відомих в даній галузі техніки, наприклад, ЗТ-ПЛР, вестерн- блотинг, ЕГІЗА (ІФА), флуоресцентні або інші репортерні показники і тому подібне. Ефективні кількості можуть бути визначені клінічно, наприклад, при виявленні зміни на самому початку або при прогресуванні захворювання з використанням способів, відомих у даній галузі, наприклад, б-хвилинного тесту ходьби, аналізу фракції викиду лівого шлуночка, ручної динамометрії, застосування шкали Віньоса і т. п., як описано тут і як відомо в даній галузі.
Термін "м'язова клітина" або "м'язова тканина" стосується тут клітини або групи клітин, отриманих з м'язів будь-якого типу, включаючи, без обмеження, скелетний м'яз, серцевий м'яз, гладкий м'яз (наприклад, з травного тракту, сечового міхура і кровоносних судин) і м'язи діафрагми. Такі м'язові клітини можуть бути диференційованими або недиференційованими, такими як міобласти, міоцити, міотуби, кардіоміоцити і кардіоміобласти. Оскільки м'язова тканина є легко доступною для системи кровообігу, білок, продукований і секретований м'язовими клітинами і тканинами іп мімо, буде логічно потрапляти в кровотік, забезпечуючи системний ефект, забезпечуючи тим самим стійкі терапевтичні рівні секреції білка з м'язової тканини.
Термін "спрямована еволюція" стосується методології, що застосовується в інженерії капсидів іп міїго і/або іп мімо, яка імітує природну еволюцію за допомогою повторюваних циклів генетичної диверсифікації і селекції, тим самим нагромаджуючи корисні мутації, які поступово поліпшують функцію біомолекули. Спрямована еволюція часто включає метод іп мімо, який називається "біопенінг" ("Біораппіпд"), для відбору таких варіантів ААМ з бібліотеки, які мають більш ефективний рівень інфекційності типу клітини або тканини, який цікавить.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС
Аденоасоційовані віруси (ААМ) являють собою сімейство парвовірусів з геномом одноланцюжкової ДНК розміром 4,7 т. п. н., що міститься в безоболонковому капсиді. Вірусний геном ААМ, що зустрічається в природі, має 2 інвертовані кінцеві повтори (ІТК), що функціонують як вірусний сайт ініціації реплікації і сигналу упаковки - фланкуючі 2 первинні бо відкриті рамки зчитування (ОКР): гер (що кодує білки, які функціонують при реплікації вірусу,
регуляції транскрипції, сайт-специфічній інтеграції і зборці віріонів) і сар. сар ОКЕ кодує З структурні білки, які беруть участь у збиранні з утворенням б0-мірного вірусного капсиду. Було отримано багато варіантів і серотипів ААМ, що зустрічаються в природі, але жоден з них не пов'язаний із захворюваннями людини.
Рекомбінантні версії ААМ можна використати як вектори доставки генів, де маркер або терапевтичний ген, що становить інтерес, вбудовується між ІТЕ, заміщуючи гер і сар. Було показано, що ці вектори трансдукують як клітини, що діляться, так і клітини, що не діляться, іп міо і іп мімо, і можуть приводити до стабільної експресії трансгену протягом кількох років у постмітотичній тканині. Дивись, наприклад, Кпіре ОМ, Ноулеу РМ. Рієїд5' Мігоїоду. Пірріпсой
МУ Шіатв 8. МЇКіпо, РіпПааде!рніа, РА, О5А, 2007; Сао С-Р, Аміга МЕ, У/апа І, Саїседо В, доппвіоп
У, ММівоп ОМ. Момеї! адепо-аз5зосіаївд мігиве5 їот Шевиб топКеу5 аз месюгв їог питап депе
МШегару. Ргос Май Асад 5сі ОБА 2002; 99: 11854-9'Аїспівоп ВМУ, Сазію ВС, Наттоп УМ.
Адепомігив-Авзосіаїед Оеєгесіїме Мігив Рапісіе5. 5сіепсе 1965; 149: 754-6; Ноддап МО, Віаскіож
МА, ВКоме М/Р. Біцаїєз ої втаї! ОМА мігизе5 Тошипа іп магіоив адепомігив ргерагаїйопе: рпузісаї,
Біоіодіса!, апа іттипоіодіса! сНагасіегівіїс5. Ргос Маї! Асай 5сі ОБА 1966; 55: 1467-74; ВіасКкіом
МА, Ноддап МО, Воме МУР. ІзоЇайоп ої адепоміги5-аззосіаїей мігизе5 от тап. Ргос Маї! Асай зсі
БА 1967; 58: 1410-5; Вапів!-5спаа! О, 2йиг Найзеп Н. Спагасієгігайоп ої Ше ОМА ої а дегтесіїме
Ппитап рагмоміги5 ізоЇаїва їот а депіа! 5йе. Мігоїосду 1984; 134: 52-63; Мауог НО, Меї!піск У.
Зтаї! деохугірописівїс асіа-сопіаіпіпу мігизез (рісодпаміги5 агоимр). Маїиге 1966; 210: 331-2; Мотгі 5,
Умапд ГІ, ТаКеиспі Т, Капаа Т. Тмо поме! адепо-аззосіаїєд мігизе5 їйїот супотоїЇди5 топкКеу: рзецадоїуріпд спагасієгігайоп ої сарзіа ргоївїп. Мігоїоду 2004; 330: 375-83; Ріоце ТА. Сепе Шегару ргоагез5 апа ргозресів: гесотбріпапі адепо-аззосіаїєд мігив (ТААМ) месіогв. Сепе Тег 2004; 11: 805-10.
Рекомбінантний ААМ (що називається тут просто "АДУ") показав багатообіцяючі результати в зростаючій кількості клінічних випробувань. Однак існують перешкоди для доставки генів, які можуть обмежувати корисність ААМ, такі як імунні відповіді на капсид, низька трансдукція певних тканин, нездатність здійснювати цілеспрямовану доставку до певних типів клітин і відносно низька несуча здатність. У багатьох ситуаціях не вистачає механістичних знань для ефективного розширення можливостей раціонального дизайну, спрямованого на поліпшення
Зо ААМ. Як альтернатива, спрямована еволюція виникла як стратегія для створення нових варіантів ААМ, що відповідають певним біомедичним потребам. Стратегії спрямованої еволюції використовують процеси генетичної диверсифікації і селекції для того, щоб нагромадити корисні мутації, які поступово поліпшують функцію біомолекули. У даному процесі гени сар ААМ дикого типу диверсифікуються кількома методами з метою створення великих генетичних бібліотек, які упаковуються для створення бібліотек вірусних частинок, і потім застосовується селективний тиск для виділення нових варіантів, здатних подолати бар'єри доставки генів. Важливо, що механістичну основу, яка лежить в основі проблеми доставки генів, навіть не треба знати, щоб здійснити спрямовану еволюцію функції що може, таким чином, прискорити розробку поліпшених векторів.
Як правило, варіанти, розкриті в даному описі, були отримані за допомогою використання бібліотеки і/або бібліотек ААМ. Таку бібліотеку або бібліотеки ААМ генерують, мутуючи ген сар, ген, що кодує структурні білки капсиду ААМ, за допомогою низки методів спрямованої еволюції, відомих і легко доступних фахівцеві, який працює в галузі інженерії вірусних геномів. Див., наприклад, Вагієї еї аІ. Ат. ос. Сепе СеїЇ Тег. 154й Аппи. Мееї. 20, 5140 (2012); Вом/лев, 0. еї а). У. Мігої. 77, 423-432 (2003); Стау єї а. Мої. Тнег. 18, 570-578 (2010); Стітт, 0. єї аї. у). Міко!. 82, 5887-5911; Коегбрет", 9. Т. еї аі. Мої. ТНег. 16, 1703-1709 (2008); Її МУ. еї аІ. Мої. Тег. 16, 1252- 1260 (2008); Коегбрег, 4. Т. еї аі. Меїйоа5 Мо). Віо!. 434, 161-170 (2008); Коегбег, 4). Т. еї а. Нит.
Сепе ТНег. 18, 367-378 (2007); і Коегрег, У. Т. еї а. Мої. Тег. 17, 2088-2095 (2009). Такими методами, без обмеження, є наступні: ї) мутагенез з допомогою ПЛР (еггог-ргопе РСК) для введення випадкових точкових мутацій у відкриту рамку зчитування (ОКЕ) ААМ із заданою змінною швидкістю; ії) вірусна рекомбінація іп мйго або іп мімо або ДНК-шафлінг (також: перетасовування ДНК) для створення випадкових химер генів сар ААМ з метою отримання бібліотеки генів з кількома серотипами ААМ (зПпПийеа Ігагу); ії) випадкові пептидні вставки в певних місцях капсиду шляхом лігування вироджених олігонуклеотидів в сар ОКЕ; ім) визначені вставки пептид-кюодуючих послідовностей у випадкові місця сар ОКЕ ААМ з використанням транспозонного мутагенезу; м) заміна поверхневих петель капсидів ААМ бібліотеками пептидних послідовностей, спроектованих з допомогою біоінформатики з урахуванням ступеня консервації кожного амінокислотного положення серед природних серотипів і варіантів ААМ, для створення бібліотек "із заміною петель" ("оор-5улар" Іргагіеб5); мі) випадкова амінокислотна заміна у вироджених положеннях між серотипами ААМ для створення бібліотек варіантів вірусних попередників (Запііадо-Огії: еї а!., 2015); і комбінація таких методів.
ДНК-шафлінг генерує химери, що комбінують властивості батьків в унікальній і часто вигідній манері; однак деякі з них можуть бути нездатні до упаковки, що, по суті, зменшує різноманітність бібліотеки. Концентрація різноманітності бібліотеки в специфічній ділянки(ах) капсиду досягається за допомогою методів вставки пептиду, таких як, без обмеження, іїї-ім) вище. Різноманітність бібліотеки забезпечується на різноманітністю конкретної ділянки(ок) капсиду, що досягається в описаних вище методиках (таких як м)), і така концентрація різноманітності доводиться на множину гіперваріабельних ділянок, розташованих на експонованих петлях поверхні капсиду ААМ. У той час як багато методів генерують варіантні капсиди з мутацією тільки невеликої ділянки капсиду, ці методи можуть поєднуватися з додатковими стратегіями мутагенезу для модифікації всього капсиду.
Після того як бібліотека або бібліотеки ААМ створенаїйї), віруси потім упаковуються так, що кожна частинка ААМ складається з мутантного капсиду, що вміщує всередині ген сар, який кодує цей капсид, і очищується. Варіанти бібліотеки потім піддають обробці методом селективного тиску іп міїго і/або іп мімо. Методи селективного тиску відомі фахівцеві в галузі ААМ і легко доступні. Див., наприклад, Мапезнгі, М. еї аІ. Майиге Віоїесп. 24, 198-204 (2006); баїКага,
ОР. еї а. осі. Ткапві. Меа. 5, 189га76 (2013); І івомувкКі, Ї.. еї аї. Майте. 506, 382-286 (2013); Мапо, Ї.. еї аі. РМАБ5. 106, 3946-3951 (2009); Сао, Сх. еї аі. Мої. Тег. 13, 77-87 (2006); апа Веї,, Р. еї аї.
Нит. Сепе. ТНег. 22, 985-997 (2011). Наприклад, без обмеження, варіанти ААМ можуть бути вибрані з використанням ії) афінних колонок, в яких елюювання різних фракцій дає варіанти зі зміненими властивостями зв'язування; ії) первинних клітин - виділених зі зразків тканин або безсмертних клітинних ліній, що імітують поведінку клітин в організмі людини - які дають варіанти ААМ з підвищеною ефективністю і/або тканинною специфічністю; ії) моделей тварин, що імітують клінічне середовище генної терапії - які дають варіанти ААМ, що успішно інфікують цільову тканину; ім) моделей ксенотрансплантата людини, які дають варіанти ААМ, що інфікують прищеплені клітини людини; і/або поєднання таких методів відбору.
Після того як віруси вибрані, вони можуть бути виділені відомими способами, такими як, без обмеження, аденовірус-опосередкована реплікація, ампліфікація методом ПЛР, методом секвенування і клонування наступного покоління (МОБ, Мехі Сепегайоп зедиепсіпу апа сіопіпд), і тому подібних. Вірусні клони потім збагачують за допомогою повторюваних циклів методів відбору, і ДНК ААМ виділяють для відновлення вибраних варіантів генів сар, що становлять інтерес. Такі вибрані варіанти можуть бути піддані подальшій модифікації або мутагенезу і, як такі, служать новою відправною точкою для подальших етапів відбору для ітеративного підвищення ефективності вірусів ААМ. Однак в деяких випадках успішні капсиди були створені без внесення додаткових мутацій.
Варіанти ААМ, розкриті в даному описі, були отримані, щонайменше частково, за допомогою використання методології спрямованої еволюції іп мімо, відповідно до методик, описаних вище, що включають використання скринінгу серцевих і скелетних м'язів приматів після внутрішньовенного введення. По суті, капсиди варіанта ААМ, розкриті в даному описі, містять одну або більше модифікацій амінокислотної послідовності, що забезпечують більш ефективну трансдукцію м'язових клітини приматів, ніж відповідний батьківський білок капсиду ААМ. Термін, що використовується тут, "відповідний батьківський білок капсиду ААМ" стосується білка капсиду ААМ того ж серотипу ААМ дикого типу або, у випадку варіанта, того типу, що і варіантний капсидний білок ААМ об'єкта, але не містить одну або більше модифікацій амінокислотної послідовності варіанта капсидного білка ААМ, що обговорюється. У конкретних варіантах здійснення ААМ, що включає варіант капсидного білка ААМ, як описано тут, має системний тропізм до серцевого м'яза і/або множинних груп скелетних м'язів всього організму, що демонструється після системного або тканино-спрямованого введення.
У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, містить гетерологічний пептид від приблизно 5 амінокислот до приблизно 20 амінокислот, вбудований ковалентно в петлю СН капсидного білка ААМ або петлю ІМ, порівняно з відповідним батьківським капсидним білююм ААМ. Під "петлею ОН" або петлею ІМ капсидного білка ААМ мається на увазі доступна для розчинника частина, що називається в даній галузі техніки петлею ОН або петлею ІМ капсидного білка ААМ. Що стосується петлі СН/петлі ІМ капсиду ААМ, див., наприклад, мап Мібеї еї аї. (2006) Мої. Тпег. 14:809; Раадгоп еї аї. (2005) 9. МігоїЇ. 79:5047; апа
Зпеп еї а. (2007) Мої. Тег. 15:1955. Таким чином, наприклад, сайт інсерції може знаходитися в межах амінокислот 411-650 капсидного білка ААМ МР1. Наприклад, сайт інсерції може знаходитися в амінокислотах 571-612 ААМ1 МРІ1І, в амінокислотах 570-611 ААМ2 МРІ, в 60 амінокислотах 571-612 ААМЗА УРІ1, в амінокислотах 571-612 ААМЗВ МУРІ11, в амінокислотах 569-
610 ААМ4 МУРІ1, в амінокислотах 560-601 ААМ5 МР, в амінокислотах 571-612 ААМб УРІ1, в амінокислотах 572-613 ААМ7 УРІ11, в амінокислотах 573-614 ААМ8 УР'І, в амінокислотах 571-612
ААМУ МРІ або в амінокислотах 573-614 ААМ10 МРІ або відповідних за положенням амінокислотах будь-якого їх варіанта. Фахівцям в даній галузі повинно бути відомо, на основі порівняння амінокислотних послідовностей капсидних білків різних серотипів ААМ, що сайт інсерції, "відповідний амінокислотам ААМ2", буде знаходиться в капсидному білку будь-якого конкретного серотипу ААМ. Див. також Фігуру 6, де зображено вирівнювання ААМ ЗЕО ІЮ МО: 1- 11 дикого типу, і показані положення амінокислот серотипів дикого типу ААМ1, ААМ2, ААМЗА,
ААМЗА і АДАМА.
У деяких варіантах здійснення сайт інсерції являє собою сайт з однією інсерцією між двома сусідніми амінокислотами, розташованими між амінокислотами 570-614 МР1 будь-якого серотипу ААМ дикого типу або варіанта ААМ, наприклад, сайт інсерції знаходиться між двома сусідніми амінокислотами, розташованими в межах амінокислот 570-610, амінокислот 580-600, амінокислот 570-575, амінокислот 575-580, амінокислот 580-585, амінокислот 585-590, амінокислот 590-600 або амінокислот 600-614, що належать до МР1 будь-якого серотипу або варіанта ААМ. Наприклад, сайт інсерції може знаходитися між амінокислотами 580 і 581, амінокислотами 581 і 582, амінокислотами 583 і 584, амінокислотами 584 і 585, амінокислотами 585 і 586, амінокислотами 586 і 587, амінокислотами 587 і 588. амінокислотами 588 і 589 або амінокислотами 589 і 590. Сайт інсерції може знаходитися між амінокислотами 575 і 576, амінокислотами 576 і 577, амінокислотами 577 і 578, амінокислотами 578 і 579 або амінокислотами 579 і 580. Сайт вставки може знаходитися між амінокислотами 590 і 591, амінокислотами 591 і 592, амінокислотами 592 і 593, амінокислотами 593 і 594, амінокислотами 594 і 595, амінокислотами 595 і 596, амінокислотами 596 і 597, амінокислотами 597 і 598, амінокислотами 598 і 599 або амінокислотами 599 і 600. Наприклад, сайт інсерції може знаходитися між амінокислотами 587 і 588 ААМ2, між амінокислотами 590 і 591 ААМІ, між амінокислотами 588 і 589 ААМЗА, між амінокислотами 588 і 589 ААМЗВ, між амінокислотами 584 і 585 ААМ4, між амінокислотами 575 і 576 ААМ5, між амінокислотами 590 і 591 ААМб, між амінокислотами 589 і 590 ААМ7, між амінокислотами 590 і 591 ААМ8, між амінокислотами 588 і 589 ААМОУ або між амінокислотами 588 і 589 ААМ10.
У деяких варіантах здійснення розкрита тут пептидна вставка має довжину 5 амінокислот, 6 амінокислот, 7 амінокислот, 8 амінокислот, 9 амінокислот, 10 амінокислот, 11 амінокислот, 12 амінокислот, 13 амінокислот, 14 амінокислот, 15 амінокислот, 16 амінокислот, 17 амінокислот, 18 амінокислот, 19 амінокислот або 20 амінокислот. У іншому варіанті здійснення пептидна вставка, розкрита в даному описі, містить від 1 до 4 спейсерних амінокислот на амінокінці (М- кінці) або на карбоксильному кінці (С-кінці) будь-якої з пептидних інсерцій, розкритих тут.
Типові спейсерні амінокислоти включають, без обмеження, лейцин (І), аланін (А), гліцин (С), серин (5), треонін (Т) і пролін (Р). У деяких варіантах здійснення пептидна вставка містить 2 спейсерні амінокислоти на М-кінці і 2 спейсерні амінокислоти на С-кінці. У інших варіантах здійснення пептидна вставка містить 2 спейсерні амінокислоти на М-кінці і 1 спейсерну амінокислоту на С-кінці.
Розкриті тут пептидні інсерції раніше не були описані і/або не були вбудовані в капсид ААМ.
Не будучи обмеженими якою-небудь теорією, присутність будь-якої з розкритих пептидних інсерцій може знижувати спорідненість варіанта капсиду до сульфату гепарину, що може змінити позаклітинні або внутрішньоклітинні стадії в каскаді реакцій вірусної трансдукції. Крім того, розкриті тут інсерції пептиду можуть викликати підвищену трансдукцію м'язових клітин (наприклад, кардіоміоцитів) при додаванні домену, що зв'язує рецептор клітинної поверхні.
У деяких переважних варіантах здійснення пептид інсерції містить амінокислотну послідовність будь-якої з наведених нижче формул.
У деяких аспектах пептид інсерції може являти собою пептид довжиною від 7 до 10 амінокислот Формули Та:
ММ х1Ха х зХах 5Хех 73, де кожний з У1-Уз, якщо присутній, незалежно вибраний з Айа, І ем, Су, Зег, ТАг, Рго
Хі: вибраний із АІа, Авп, ТНг, Спу, Зег, Аа, Сп і Ар
Хг вибраний із І ув, Авп, ТНг, 5ег, Аа і Стп.
Хз вибраний із Іе, ТНг, І ув, І ей, Маї, Авп, Авр і Агу.
Ха вибраний із Сп, ТНг, Пе, І ув, Маї, 5ег і Туг.
Х5 вибраний із Аго, Азп, Су, І ув, І ей, ТАг, Аа, Зег і Сп.
Хв вибраний із ТНг, І уз, Маї, Спу, 5ег, Аа, Агу і Рго
Х7 вибраний із Азр, ТНг, Азп, Іе, Аа і Бе".
У деяких варіантах здійснення вбудований пептид Формули 1а містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОВТО (5ЕО 10 МО:13), МКТТМКО (5ЕО 10 МО:14), ТМКІСМТ (ЗЕО
ІО МО:15), ЯМІ ТКОаМ (5ЕО І МО:16), МТУКІ ЗТ (5ЕО 10 МО:17), 5МТМУКАЇ (ЗЕО ІЮ МО:18),
АБМІТКА (ЗЕО ІЮ МО:19), ОМТУТА5 (5ЕО ІЮ МО:20), МКІБАКО (ЗЕО 10 МО:21), МОСУТКТ (ЗЕО
ІО МО:22), ОАОТТКМ (5ЕО І МО:23), ТМАТ5РО (5ЕО ІЮ МО:24), 5МТТОКТ (5ЕО ІЮ МО:25) і
АБОБТКА (5ЕО І МО С26). У інших варіантах здійснення вбудований пептид Формули Та не містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКТТМКО (5ЕО ІЮ МО:14), ОАОТТКМ (ЗЕО ІЮ
МО:23), ТМКТ5РО (5ЕО І МО:24) і МОБУТКТ (ЗЕО ІО МО:22).
У інших аспектах вбудований пептид може являти собою пептид довжиною від 7 до 10 амінокислот Формули 16:
ММ х1Ха х зХах 5Хех 73, де кожний з У1-Уз, якщо присутній, то незалежно вибраний з Аа, І еи, Сіу, Зег, ТАг, Рго
Хі: вибраний із Тнг і Авп
Х2 вибраний із Авп і ГГ ув
Хз вибраний із І ув, Пе і ТНг
Ха вибраний із Пе, Сп ії ТНг
Х5 вибраний із Спу, Агу і Авп
Хв вибраний із Маї, ТнНг і І уз
Х7 вибраний із Тнг і А5р
У деяких варіантах здійснення вбудований пептид Формули 16 містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОКТО (5ЕО ІЮ МО:13), МКТТМКО (ЗЕО ІЮО МО:14) і ТМКІСМТ (5ЕО
ІЮ МО:15). У інших варіантах здійснення вбудований пептид Формули їа не містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (5ЕО ІЮ МО: 14).
У інших аспектах вбудований (інсерційний) пептид може являти собою пептид довжиною від 7 до 10 амінокислот Формули 1с:
ММ х1Ха х зХах 5Хех 73, де кожний з У1-Уз, якщо присутній, то незалежно вибраний з Аа, І еи, Сіу, Зег, ТАг, Рго
Хі: вибраний з Тнпг і А5п
Хг вибраний з Авп і ГГ ув
Зо Хз вибраний з І уз і Пе
Ха вибраний з Іе і Сп
Х5 вибраний з Су і Агд
Хв вибраний з Маї і Тиг
Х7 вибраний з Тпг і А5р
У певних варіантах здійснення, вбудований пептид Формули 1с містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОКТО (5ЕО ІО МО:13) і ТМКІСМТ (ЗЕО ІО МО:15).
У інших аспектах вбудований пептид може являти собою пептид довжиною від 7 до 10 амінокислот Формули 14:
ММ х1Ха х зХах 5Хех 73, де кожний з У1-Уз, якщо присутній, то незалежно вибраний з Аа, І еи, Сіу, Зег, ТАг, Рго
Хі: вибраний з Авп і ТАг
Хг вибраний з Авп і ГГ ув
Хз вибраний з І уз і ТАг
Ха вибраний з Іе і Тиг
Х5 вибраний з Су, Гуз і Тиг
Хв вибраний з І уз, Аго і Маї
Х7 вибраний з Азр, Тпг і А5п
У деяких варіантах здійснення вбудований пептид Формули 14 містить амінокислотну послідовність ТМКІСМТ (ЗЕО ІО МО: 15).
У інших варіантах здійснення, вбудований пептид містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО:13), МКТТМКО (ЗЕО ІЮО МО:14) ії ТМКІСМТ (5ЕО ІЮ МО:15). У пов'язаних варіантах здійснення вбудований пептид містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13) і ТМКІСМТ (ЗЕО ІЮ МО: 15).
У деяких варіантах здійснення вбудований пептид містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОВТО (5ЕО ІЮ МО:13), МКТТМКО (5ЕО ІЮ МО: 14), ТМКІСМТ (5ЕО ІЮ МО 15),
СМ ТКаМм (ЗЕ ІЮ МО:16), МТУКІ 57 (5ЕО 10 МО:17), БМТМУКАЇ (ЗЕО ІЮ МО:18), АБМІТКА (5ЕО
ІО МО:19), ОМТУТАБ5 (5ЕО І МОС20), МКІЗАКО (5ЕО І МО:21), МОЮСМТКТ (5ЕО ІЮ МО:22),
ОАОТТКМ (5ЕО ІЮ МО:23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО 24), БМІТТОКТ (5ЕО ІЮ МО:25) і АБОЗТКА (ЗЕО І МО 26).
У інших переважних варіантах здійснення вбудований пептид містить від 1 до З спейсерних амінокислот (М:-Уз) на аміно- і/або карбоксильному кінці амінокислотної послідовності, вибраної з МКІОВТО (ЗЕО І МО: 13), МКТТМКО (5ЕО І МО: 14), ТМКІСМТ (ЗЕО І МО: 15), СМІТКОаМ (ЗЕО І МО: 16), МТУКІ 5Т (ЗЕО ІЮ МО: 17), БМТМУКАЇ (ЗЕО ІО МО: 18), АБМІТКА (5ЕО ІО МО: 19), ОМТУТА5 (5ЕО ІО МО: 20), МКІЗАКО (5ЕО ІО МО: 21), МООМТКТ (5ЕО ІЮ МО: 22),
ОАОТТКМ (5ЕО ІО МО: 23), ТМАТ5РО (ЗЕО ІО МО: 24), БМТТОКТ (5ЕО ІО МО: 25) і АБОЗТКА (ЗЕО І МО: 26). У деяких таких варіантах здійснення вбудований пептид вибраний з групи, що складається з: | АМКІОВТОА (5ЕО ІЮ МО: 27), ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО: 28), | АТМКІСМТА (ЗЕО ІО МО: 29), ГАСМІ ТКОаМА (ЗЕО ІО МО: 30).), ГАМТУКІ ЗТА (5ЕО ІО МО: 31), ГАБМТУКАЇА (ЗЕО ІО МО: 32), І ААЗМІТКАА (5ЕО ІО МО: 33), ГАОМТУТАБЗА (5ЕО ІО МО: 34), | АМКІЗАКОА (ЗЕО ІЮ МО: 35), ГАМОЮМТКТА (5ЕО ІО МО: 36), І АТМКІСМТ5 (ЗЕО ІО МО: 37), І АТМКІСМТА (ЗЕО І МО: 38), ГАОАОТТКМА (5ЕО ІЮ МО: 39), ГАТМАТ5РОА (5ЕО ІО МО: 40), ГГ АБМТТОКТА (ЗЕО ІО МО: 41) ії ААБОБЗТКАА (ЗЕО ІО МО: 42).
У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, не містить яких-небудь інших модифікацій амінокислотної послідовності, крім пептидної інсерції від приблизно 5 амінокислот до приблизно 20 амінокислот в петлі СН або петлі ІМ. Наприклад, в деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність, вибрану з групи, що складається з МКІОВТО (ЗЕО ІО МО: 13), МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14), ТМКІСМТ (ЗЕО ІЮ МО: 15), МІ ТКОМ (ЗЕО ІЮ МО: 16), МТУКІ ЗТ (5ЕО ІО МО: 17), 5МТМКАЇ (5ЕО ІО МО: 18), АБМІТКА (5ЕО І МО: 19), ОМТУТА5 (ЗЕО ІЮО МО: 20), МКІЗБАКО (5ЕО І МО: 21), МООМТКТ (ЗЕО І МО: 22), ОАОТТКМ (ЗЕО ІО МО: 23), ТМАТ5РО (5ЕО ІЮ МО: 24), 5МТТОКТ (5ЕО ІЮО МО: 25), АБОБТКА (5ЕО ІО МО: 26),
ГАМКІОВТОА (5ЕО ІО МО: 27), | АМКТТМКОА (5ЕО ІО МО: 28), І АТМКІСМТА (5ЕО ІО МО: 29),
ГАСМІТКОаМА (5ЕО ІО МО: 30), ГГ АМТМУКІ ЗТА (ЗЕО І МО: 31), І АБМТУКАЇА (5ЕО ІО МО: 32),
ГААЗМІТКАА (ЗЕО ІЮ МО: 33), ГАОМТУТАБЗА (5ЕО ІО МО: 34), Ї АМКІЗБАКОА (5ЕО ІО МО: 35),
ГАМООУТКТА (ЗЕО І МО: 36), ГГ АТМКІСМТ5 (ЗЕО ІЮ МО: 37), ГГ АТМКІСМТА (ЗЕО І МО: 38),
ГАОАОТТКМА (5ЕО І МО: 39), І АТМАТ5РОА (5ЕО ІО МО: 40), ГГ АБМТТОКТА (5ЕО І МО: 41) і
ГААБОБТКАА (5ЕО ІЮО МО: 42), і цей варіант капсиду ААМ не містить амінокислотних замін, інсерцій або делецій (тобто варіант капсидного білка ААМ містить вказану вставку, а в іншому ідентичний відповідному капсидному білку ААМ). Іншими словами, варіант капсидного білка
ААМ, що містить вказану вставку, в іншому ідентичний батьківському капсидному білку ААМ, в який був вбудований пептид. Як інший приклад, варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність, вибрану з
МКІОВТО (5ЕО ІО МО: 13), МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14), ТМКІСМТ (ЗЕО ІО МО: 15), СМІТКОа М (ЗЕО І МО: 16), МТУКІ 5Т (ЗЕО ІЮ МО: 17), БМТМУКАЇ (ЗЕО ІО МО: 18), АБМІТКА (5ЕО ІО МО: 19), ОМТУТА5 (5ЕО ІО МО: 20), МКІЗАКО (5ЕО ІО МО: 21), МООМТКТ (5ЕО ІЮ МО: 22),
ОАОТТКМ (ЗЕО І МО: 23), ТМАТ5РО (5ЕО ІО МО: 24), БМТТОКТ (5ЕО ІО МО: 25), АБОЗТКА (ЗЕО ІЮ МО: 26), ГГ АМКІОВТОА (5ЕО ІО МО: 27), І АМКТТМКОА (5ЕО ІО МО: 28), І АТМКІСМТА (ЗЕО І МО: 29), І АСОМ ТКОаМА (5ЕО І МО: 30), ГАМТУКІ ЗТА (5ЕО ІО МО: 31), ГАБМТУКАЇА (ЗЕО ІО МО: 32), І ААЗМІТКАА (5ЕО ІО МО: 33), ГАОМТУТАБЗА (5ЕО ІО МО: 34), | АМКІЗАКОА (ЗЕО ІЮ МО: 35), ГАМОЮМТКТА (5ЕО ІО МО: 36), І АТМКІСМТ5 (ЗЕО ІО МО: 37), І АТМКІСМТА (ЗЕО І МО: 38), ГАОАОТТКМА (5ЕО ІЮ МО: 39), ГАТМАТ5РОА (5ЕО ІО МО: 40), ГГ АБМТТОКТА (ЗЕО ІЮ МО: 41) і ІГААБОЗТКАА (5ЕО ІО МО: 42), де пептидна вставка розташована між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2; між амінокислотами 588 і 589 МРІ1 капсидів
ААМЗА, ААМЗВ, ААМО або ААМ10; між амінокислотами 589 і 590 МР1 капсиду ААМ7; між амінокислотами 590-591 УР1 капсидів ААМІ, ААМб або ААМ8, між амінокислотами 584 і 585 УРІ1 капсиду ААМ4 або між амінокислотами 575 і 576 капсиду ААМ5, при цьому послідовність варіанта білка капсиду ААМ в іншому ідентична відповідній послідовності батьківського білка капсиду ААМ, наприклад, будь-якій з ФЕО ІЮ МО: 1-12.
У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ, що розглядається, крім включення пептидної інсерції в петлі СН, наприклад, як описано тут, або як відомо в даній галузі техніки, містить від приблизно 1 до приблизно 100 амінокислотних замін або делецій, наприклад від 1 до приблизно 5, від приблизно 2 до приблизно 4, від приблизно 2 до приблизно 5, від приблизно 5 до приблизно 10, від приблизно 10 до приблизно 15, від приблизно 15 до приблизно 20, від приблизно 20 до приблизно 25, від приблизно 25-50, від приблизно 50-100 амінокислотних замін або делецій порівняно з вихідним (батьківським) капсидним білком ААМ.
Таким чином, в деяких варіантах винаходу капсидний білок варіанта містить амінокислотну послідовність, що має 8595 або більше, 90 95 або більше, 95 95 або більше або 98 95 або більше, наприклад, або 99 95 ідентичності послідовності з відповідним батьківським капсидом
ААМ, наприклад, з капсидним білком дикого типу, послідовності якого представлені ЗЕО ІЮ МО: 1-12.
У наступному варіанті здійснення одна або кілька амінокислотних замін розташовані в положеннях амінокислотного залишку(ів) 35, 109, 195, 213, 222, 229, 312, 319, 330, 333, 347, 363, 427, 447, 449, 453, 490, 527, 551, 581, 585, 588, 593, 606, 649, 651, 694, 698, 708 і/або 735 капсидного білька ААМ2 МРІ1, пронумерованих до введення інсерції пептиду, або відповідних амінокислотних залишків іншого капсидного білка ААМ. У деяких таких варіантах здійснення одна або кілька амінокислотних замін вибрані з групи, що включає АЗ5Р, 5109Т, Р195І, 0213М, сСбе2225, М2291І, М312К, АЗ19Т, ТЗЗО0А, АЗ335, ЕЗА7К, РЗбЗІ, А4270, М447Бг, М4490, М449, (34538,
А490Т, К5270, М5515, АБ581Т, 5855, 8588М, АБОЗЕ, М/60О6С, Кб49Е, Аб51Н, М/694С, 1698,
МОВІ ї І 7350 МР1 капсидного білка ААМ2, пронумерованих до введення інсерції пептиду, або відповідних амінокислотних залишків іншого капсидного білка ААМ.
У переважному варіанті здійснення представлений варіант капсидного білка ААМ, що містить а) пептидну вставку в ЗН-петлю капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОМКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13), МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14) і
ТМКІСМТ (ЗЕО ІО МО: 15), і В) одну або більше з наступних амінокислотних замін порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (5ЕО ІЮ МО: 2) або подібну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ (тобто відмінному від ААМ2), де заміщена амінокислота(амінокислоти) не зустрічається в природі у відповідних положеннях: АЗОР, 5109Т, Р195І, 0213М, 52225, М2291,
МЗ12К, АЗ1І9Т, ТЗЗ0ОА, АЗ335, ЕЗ47К, РЗбЗІ, А4270, М447Р, М4490, М449К, 24538, А490Т,
КБ5270, М5515, АБ81Т, У5855, ВН5О88М, АБОЗЕ, МУбОбС, Кб649Е, А!бБІН, Му694С, Іб98М, М7О81І,
Ї7350, або комбінації таких. У деяких варіантах здійснення одна або кілька амінокислотних замін вибрані з групи, що складається з: М708І, М708І1-АБОЗЕ, М7081-5109Т, М708І-Т3З0А, АЗБР,
М708І-8588М, М708І-У606С, М708І1-МУ694С, 1ІбОВМ, М312К-М4490--45515-4І698У-1 7350,
М312К-М4490--М5515--698М--М708І-44 7350), М7081-М449К, і М7081-0242225. Переважно, сайт інсерції пептиду розташований між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, між амінокислотами 588 і 589 капсидів ААМЗА, ААМЗВ, ААМОУ або
ААМ10, між амінокислотами 589 і 590 капсиду ААМ7, між амінокислотами 590-591 капсидів
ААМ'1, ААМб або ААМв, між амінокислотами 584 і 585 капсиду ААМА або між амінокислотами 575 і 576 капсиду ААМ5.
У особливо переважному варіанті варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКІОКТО (ЗЕО ІЮО МО: 13) або включає, складається по суті з або складається з амінокислотної послідовності ГАМКІОКТОА (5ЕО ІО МО:27) між амінокислотами 587 і 588 МРІ капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ, і додатково містить амінокислотну заміну М708І в залишку 708 відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО: 2) і додатково необов'язково містить заміну АБОЗЕ мабо 5109Т, і/або ТЗЗОА, і/або Е588М відносно капсиду ААМ2, або відповідні заміни в іншому батьківському серотипі ААМ, де заміщена амінокислота (амінокислоти) в нормі не зустрічається у відповідному положенні. У іншому, особливо переважному варіанті варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКІОКТО (ЗЕБО ІО МО: 13) або містить, включає або складається по суті з амінокислотної послідовності І АМКІОВЕТОА (ЗЕО ІО МО: 27), між амінокислотами 587 і 588 МР1І капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ, і додатково містить амінокислотну заміну АЗБР в залишку 35 відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або подібну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 9565, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95, або, щонайменше приблизно 99 95 або більше ідентичність амінокислотної послідовності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, наведеною в 5ЕБЕО ІЮ МО: 2, або з послідовністю відповідного батьківського ААМ-капсиду. У особливо переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 ідентичності послідовності (або яка на 10095 ідентична) до наступної амінокислотної послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕМКМІ СРЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККРМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУЕРОЗБЗБОЗО ТаКАСООРАВКВАВІ МЕБОТИарАОБМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ГУ ЗТРИУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКА МЕКГЕМІОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55 бо ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСаЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВСОМІ АМКІО
АТОАВОАДАТАВВУМТОСМІ РОМУМОВАрУМІ ОСРІМАКІРНТОИНЕНРЗРІ МОСС ЕІ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУММРЕЮМТЗМММКІММВЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО 43)
У іншому особливо переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКІОМКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13) або включає, складається по суті з або містить амінокислотну послідовність ГАМКІОЕТОА (5ЕО ІЮО МО: 27) між амінокислотами 587 і 588 капсидного білка ААМ2 або у відповідному положенні капсидного білка іншого серотипу ААМ і містить амінокислотну заміну М312К порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО: 2) або подібну заміну в іншому батьківському серотипі
ААМ і, необов'язково, додатково містить (ї) амінокислотні заміни М4490, М5515, Іб98М і 17350 або (її) амінокислотні заміни М4490, М5515, ІЄЗ8М, І 7350 і М7081 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 або подібні, відповідні заміни в іншому батьківському серотипі
ААУ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або більше ідентичність амінокислотної послідовності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО
ІО Мо: 2. У особливо переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності послідовності (або яка на 100 95 ідентична) наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТ5ЕеСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! аТМмТМАТаЗаадаРМАЮММЕСАОСОСЯСссМЗЗИМУНОСОЗТМУМаИараемМІт ТАТА РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВСУОВІ ІМММУУСЕВРКВІ КЕКІ ЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТОТРЗІИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РаРСУВООВУЗКТЗАОМММЗЕУЗУ ТИАТКУНІ МСВОБІ ММРАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИ ТРаКОСаЗЕКТОМОІЕКУМІТОЄЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОИМІ АМКІО
АТОАВОАДАТАВВУМТОСМІ РОМУМОВАрУМІ ОСРІМАКІРНТОИНЕНРЗРІ МОСС ЕІ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТООМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕМОУТЗМУМКЗУМУМВСЕТМОТ
МОамуУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМО (ЗЕО ІО МО:44)
У іншому варіанті здійснення представлений варіант капсидного білка ААМ, що включає а) пептидну вставку, розташовану між амінокислотами 588 і 589 МР1 капсидів ААМЗА, ААМЗВ,
ААМОУ або ААМ'10, між амінокислотами 589 і 590 капсиду ААМ7, між амінокислотами 590 і 591 капсидів ААМ1, ААМб або ААМ8, між амінокислотами 584 і 585 капсиду ААМ4 або між амінокислотами 575 і 576 капсиду ААМ5, причому пептидна інсеція включає амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13) і ГАМКІОКТОА (ЗЕО ІЮ МО: 27) і Б) заміну валіну на ізолейцин в амінокислоті 709 капсиду ААМЗА або ААУЗВ, заміну аланіну на ізолейцин у положенні 709 капсиду ААМІ1 або ААДМб, заміну аспарагіну на ізолейцин в амінокислоті 707 капсиду ААМ4 або в амінокислоті 709 капсиду ААМУ або заміну треоніну на ізолейцин в амінокислоті 710 капсиду ААМ7 або в амінокислоті 711 капсидів ААМ8 або ААМ'10, або заміну глютаміну на ізолейцин в амінокислоті 697 капсиду ААМ5, причому, за винятком цих замін, цей варіант капсидного білка необов'язково ідентичний будь-якій із ЗЕБЕО ІЮО МО: 1 і 3-12. У переважних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКІОКТО (ЗЕБЕО ІЮ МО: 13) або включає, складається по суті з або містить амінокислотну послідовність ГГ АМКІОКТОА (ЗЕО ІЮ МО: 27), розташовану між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і Б) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в амінокислоті 708 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, причому варіантний білок капсиду містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін.
У ще одному варіанті здійснення варіантний капсидний білок містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13) або включає, складається по суті з або містить амінокислотну послідовності ГАМКІОКТОА (5БО ІЮО МО:27) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і Б) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в амінокислоті 708 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО ІЮО МО: 2.
У ще одному варіанті здійснення варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКІОКТО (ЗЕБЕО ІЮ МО: 13) або включає, складається по 60 суті з або містить амінокислотну послідовність ГАМКІОКТОА (5ЕБО ІЮ МО:27) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичну амінокислотній послідовності
ЗБО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичності або на 10095 ідентичну наступній амінокислотній послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМУІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕСОМІ аВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОратТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМУСИМІ ТІ ММаБОдУСНЗО
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВИМІ АМКІО
АТОАВОАДАТАВУМТОСМІ РОМУМООЮВОМУМІ ОБСРІМАКІРНТОаНЕНРЗРІ МСЕ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО 45)
У іншому, особливо переважному варіанті здійснення, варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ТМКІЗМТ (ЗЕБЕО ІЮО МО: 15) або включає, складається по суті з або містить амінокислотну послідовність ГГ АТМКІЗМТА (ЗЕО ІЮ МО: 29) або ГАТМКІСМТ5 (ЗЕБЕО ІО МО: 37) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні капсидного білка іншого серотипу ААМ і містить амінокислотну заміну
М7081 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 або відповідну їй заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, і необов'язково додатково включає заміну М449К і/або 02225 порівняно з ААМ2 або відповідну заміну в капсидному білку іншого батьківського серотипу ААМ, де заміщена амінокислота не зустрічається в нормі у відповідному положенні. У іншому переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ТМКІЗМТ (5ЕБО ІЮ МО: 15) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАТМКІЗМТА (ЗЕБО ІО МО: 29) або
Зо ГАТМКІСМТ5З (ЗЕО ІО МО: 37) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ і містить М312К, М4490, М5515, 1Іб98М і
Ї7350 їі, необов'язково, амінокислотну заміну М708І порівняно з амінокислотою послідовністю капсиду ААМ2 або відповідні заміни в іншому батьківському серотипі ААМ, де заміщена амінокислота (амінокислоти) не зустрічається в природі у відповідному положенні. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або більше ідентичність амінокислотної послідовності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО
ІО Ме:2. У особливо переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності послідовності (або на 100 95 ідентичну) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОратТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ Ті ММОаЗОАЛУСНОО
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВИМІ АТМКІ
СУМТАВОААТАВЮУМТОСМІ РОМУМОБАрУМІ ОЗБРІМАКІРНТранНеЕНнНРЗРІ МС ЕІ КНРРРОСІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУММРЕЮМТЗМММКІММВЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО 46)
У іншому варіанті здійснення представлений варіант капсидного білка ААМ, що включає а) пептидну вставку, розташовану між амінокислотами 588 і 589 МР1 капсидів ААМЗА, ААМЗВ,
ААМО або ААМ'10, між амінокислотами 589 і 590 капсиду ААМ7, між амінокислотами 590 по 591 капсидів ААМ1, ААМб або ААМ8, між амінокислотами 584 і 585 капсиду ААМ4 або між амінокислотами 575 і 576 капсиду ААМ5, причому пептидна вставка містить амінокислотну послідовність вибрану з ТМКІСМТ (ЗЕБЕО ІЮ МО: 15), ГАТМКІЗСМТА (ЗЕБЕО ІЮ МО: 29) і бо ГАТМКІСМТЗ (ЗЕО ІЮО МО: 37), і 5) заміну валіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 709 капсиду ААМЗА або ААМЗВ, заміну аланіну на ізолейцин у положенні 709 ААМІ1 або ААМб, заміну аспарагіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 707 капсиду ААМА4 або у положенні амінокислоти 709 капсиду ААМУ або заміну треоніну на ізолейцин у положенні амінокислоти 710 капсиду ААМ7 або у положенні амінокислоти 711 капсидів ААМ8 або ААМ10, або заміну глутаміну на ізолейцин у положенні амінокислоти 697 капсиду ААМ5. У переважних варіантах здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що включає амінокислотну послідовність ТМКІЗМТ (ЗЕБЕО І МО: 15) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності | АТМКІСМТА (5ЕО ІЮО МО: 29) або І АТМКІСМТ5 (ЗЕО ІЮ МО: 37) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМа і містить амінокислотну заміну валіну на ізолейцин в амінокислоті 708 (М708І) порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, де варіантний білок капсиду містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін і переважно демонструє щонайменше приблизно 85595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95595, щонайменше приблизно 9895 або більше ідентичності амінокислотної послідовності (по всій довжині) амінокислотної послідовності, вказаної в ЗЕО ІЮ
МО: 2.
У ще одному варіанті здійснення варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ТМКІСМТ (ЗЕО ІЮ МО: 15) або включає, складається по суті з або складається з амінокислотної послідовності ГАТМКІЗМТА (ЗЕБО ІЮ МО): 29) або
ГАТМКІСМТ5 (5ЕО ІЮ МО: 37) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і р) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 708 порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, а в іншому ідентичну амінокислотній послідовності ЗЕО ІЮ МО:2.
У ще одному варіанті здійснення варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ТМКІСМТ (5ЕБЕО ІЮ МО: 15) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАТМКІЗМТА (ЗЕБО ІО МО: 29) або
ГАТМКІСМТ5 (ЗЕО ІО МО: 37) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМа, а в іншому ідентичну амінокислотній послідовності зЗЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 9565, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності послідовності (або на 100 95 ідентичної) наступної амінокислотної послідовності:
Зо МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТ5ЕеСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТОКАаООРАВКВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСІГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БА ТМТРЗИаТтТтТтО5А
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВИМІ АТМКІ
СУМТАВОААТАВЮУМТОСМІ РЕОМУМОВАрУМІ ОЗБРІМАКІРНТРИаНЕНРЗБРІ МІС РОЇ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТООМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУУМРЕЮМТЗМУМКОУМУВЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО 47)
У іншому переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (ЗЕО ІЮ МО: 14) або | АМКТТМКОА (ЗЕО ІЮ
МО: 28) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і додатково містить амінокислотну заміну
МТ7ТО8І у положенні 708 відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і необов'язково додатково включають амінокислотну заміну 51097 і/або УУбе4С і/або УУбОбС порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, причому заміщена амінокислота (амінокислоти) не зустрічається в нормі у відповідному положенні. У іншому особливо переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (ЗЕБО ІЮ МО: 14) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМКТТМКОА (ЗЕО І
МО: 28) між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і додатково містить амінокислотну заміну ІЄ98М у положенні 698 відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2) або у відповідному положенні іншого капсиду ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності або велику ідентичність амінокислотної послідовності повнорозмірної амінокислотної послідовності, вказаної в ЗЕО ІЮ МО: 2 або відповідному батьківському капсиду ААМ. У особливо переважному бо варіанті здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності послідовності (або на 100 95 ідентичну) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОратТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММаЗОАЛУСНОО
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВИМІ АМКТ
ТЯКОАВОДАТАВВУМТОСМІ РЕМУМООВОМУМІ ОСРІМАКІРНТОИНЕНРЗ5БРІ МОСС КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУММРЕЮМТЗМММКІММВЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО 48)
У іншому особливо переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності | АМКТТМКОА (5ЕО ІО МО: 28) між амінокислотами 587 і 588 капсидного білка ААМ2 або у відповідному положенні капсидного білка іншого серотипу ААМ і містить амінокислотну заміну М312К порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, і, необов'язково, додатково містить амінокислотні заміни М4490, М5515, Іб98М і
Ї7350 і, необов'язково, М708І порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 або відповідні заміни в іншому батьківському серотипі ААМ. Варіант капсиду ААМ може мати щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або більше ідентичність амінокислотної послідовності (по всій довжині) амінокислотної послідовності, вказану в 5ХЕО ІЮО Мо:2. У особливо переважному варіанті здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше
Зо приблизно 98 95 ідентичності (або на 100 95 ідентичну) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМУІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕСОМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВСУОВІ ІМММУУСЕВРКВІ КЕКІ ЕМІОУКЕМТ
ОМОратТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ авзАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМУСИМІ ТІ ММаБОдУСНЗО
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТОТРЗІИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИТРаКОСаЗЕКТОМОІЕКУМІТОЄЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ АМКТ тТякКрАВОДАТАВЮУМТОСМІ РЕМУМОВАВУМІ ОВБРІМАКІРНТОИНЕНРЗРІ МСРИЇ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТООМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕМОУТЗМУМКЗУМУМВСЕТМОТ
МОамуУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМО (ЗЕО ІЮ МО:49)
У іншому варіанті здійснення представлений варіант капсидного білка ААМ, що включає а) пептидну вставку, розташовану між амінокислотами 588 і 589 МР1 капсидів ААМЗА, ААМЗВ,
ААМОУ або ААМ'10, між амінокислотами 589 і 590 капсиду ААМ7, між амінокислотами 590 і 591 капсидів ААМІ, ААМб або ААМ8, між амінокислотами 584 і 585 капсиду ААМ4, або між амінокислотами 575 і 576 капсиду ААМ5, причому пептидна вставка, що містить амінокислотну послідовність, вибрана з МКТТМКО (5ЕО ІЮ МО: 14) і ГАМКТТМКОА (ЗЕО ІО МО: 28) і Б) заміну валіну на ізолейцин в амінокислоті 709 капсиду ААМЗА або ААМЗВ, заміну аланіну на ізолейцин в положенні 709 капсидів ААМІ або ААМб, заміну аспарагіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 707 капсиду ААМА4 або у положенні амінокислоти 709 капсиду ААМО, або заміну треоніну на ізолейцин у положенні амінокислоти 710 капсиду ААМ7 або у положенні 711 капсиду
ААМВ8 або ААМ10, або заміну глутаміну на ізолейцин у положенні 697 капсиду ААМ?5 і де, необов'язково, в іншому вставка ідентична будь-якій із ЗЕО ІЮ МО: 1 ії 3-12. У переважних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (ЗЕО ІЮО МО: 14) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮО МО: 28) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і Б) заміну валіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 708 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, причому білок варіанта капсиду включає від 2 до 60 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін.
У ще одному варіанті здійснення варіант капсидного білка містить а) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (ЗЕО ІЮ МО: 14) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМКТТМКОА (5ЗЕБЕО ІО МО:28) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 і Б) амінокислотну заміну валіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 708 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності ЗЕО ІЮ МО: 2.
У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (ЗЕО ІЮ МО: 14) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМКТТМКОА (ЗЕО ІО МО: 28), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМа і в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в 5ЗЕО ІЮ
МО: 2. У деяких варіантах варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 ідентичності (або яка є на 10095 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТ5ЕеСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! аТМмТМАТаЗаадаРМАЮММЕСАОСОСЖЯСОМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІтТТАТУМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМММЗЕМЗУТаАТКУНІ МС ВОБІ ММРАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВИМІ АМКТ
ТЯКОАВКОДАТАВЮВУМТОСМІ РЕМУМООВОМУМІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНРЗРІ МСЕ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО ІЮ МО:50)
У інших варіантах здійснення надається варіант капсидного білка ААМ, що включає а) пептидну вставку в 5Н-петлю капсидного білка, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність, вибрану з ОМІТКОМ (ЗЕО ІЮО МО: 16), МТМУКІ 5Т (5ЕО ІЮ МО: 17), БМТМУКАЇ (ЗЕО
Зо ІО МО: 18), АБМІТКА (5ЕО ІЮ МО: 19), ОМТУМТА5 (5ЕО ІО МО: 20), МКІБАКО (ЗЕО І МО: 21),
МОЮМТКТ (5ЕО ІО МО: 22), ОАОТТКМ (5ЕО І МО: 23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО: 24), БМТТОКТ (ЗЕО ІО МО: 25) і АБОЗТКА (5ЕО ІО МО: 26), і В) одну або більше наступних амінокислотних замін порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або відповідних замін в іншому батьківському серотипі капсиду ААМ (тобто відмінному від ААМ2), де заміщена амінокислота (амінокислоти) не зустрічається в нормі у відповідних положеннях: АЗ5Р, 51097,
РІЗБІ, 0213М, сп2225, М229І, М312К, АЗІ19Т, ТЗЗ0ОА, АЗЗ335, ЕЗ47К, РЗбЗІ, А4270, М447Е,
М4490, М449К, 24538, А490Т, К5270, А585, МбО5 Кб49Е, Аб51Н, М/694С, Іб98МУ, М7081І, 1 7350 або комбінації таких. У деяких варіантах здійснення одна або кілька амінокислотних замін вибрані з групи, що складається з: М708І, 51097, Е651Н, АЗ19Т, Р195І, РЗБбЗ3І, ІЄ98М, 0213М,
С453К або є комбінацією таких. У деяких переважних варіантах здійснення одна або кілька амінокислотних замін включають щонайменше амінокислотну заміну М708І і/або РЗб63І або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ. Переважно сайт інсерції пептиду розташований між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні капсидного білка іншого серотипу ААМ.
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ЗМІТКОМ (ЗЕО ІЮО МО: 16) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності (АСМІТКОМА (ЗЕБО ІЮО МО: 30), розташовану між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і додатково містить одну або більше наступних амінокислотних замін відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО:2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, де заміщена амінокислота (амінокислоти) не зустрічається в природі у відповідних положеннях: М708І, М708І1-51097, Кб51ІН, АЗ19Т-РІ195І, РЗБбЗІ,
РЗб63ЗІ 47081. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ї) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МІ ТКОМ (ЗЕО ІЮО МО: 16) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАСОМ ТКОМА (5ЕБО ІО МО: 30) між амінокислотами 587 і 588 МР1 ААДУМ?2 або відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) заміну М708І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕБЕО ІЮ МО: 2) або відповідного залишку іншого капсиду ААМ і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, і в іншому ідентичний амінокислотній послідовності ЗЕО ІЮО МО: 2 або 60 відповідній батьківській послідовності білка капсиду ААМ. У інших варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ї) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ЗМІТКОМ (ЗЕО ІЮ МО: 16) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності
ГАСМІТКОМА (5ЕБО ІЮ МО: 30) між амінокислотами 587 і 588 МР1 ААМ2 або відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) заміну РЗ63ЗІ. відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО: 2) або відповідного залишку іншого капсиду ААМ і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності ЗЕО ІО МО: 2 або відповідної батьківської послідовності капсидного білка ААМ. У інших варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ЗМІТКОМ (ЗЕО ІЮО МО: 16) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАСМІТКОМА (5ЕО ІЮ МО: 30) між амінокислотами 587 і 588 МРІ ААМ2 або відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (її) заміну К651Н відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (5ЕО ІО МО: 2) або відповідного залишку іншого капсиду ААМ і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності ЗЕО ІЮ МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ЗМІТКОМ (5ЕБО ІЮО МО: 16) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАОМІТКОМА (ЗЕО І
МО: 30) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в 5ЕО ІЮ МО:С2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду
ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності (або яка є на 100 95 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕМКМІ СРЕМИаЇ ОКаИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУЕРОЗБЗБОЗО ТаКАСООРАВКВАВІ МЕБОТИарАОБМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУгаУЗ ТРУ СУ ЕВЕМАЕНСНЕЗРАУОВ ІМУММУ С ЕАРКАЇ МЕКГЕМІОУМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
Зо ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМОУ ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОБЕЕКЕЕРОБОМ ІТРЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУММІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОИаВУТ МІ ОВОМІ АСМІ.
ТКаМАНОААТАВЮУМТОСМІ РЕМУМУООАОММІ ОСРІМЖМАКІРНТОСНЕНРОРІ МОСС КНРРРОЇ І
КМТРМРАМРОТТЕЗААКЕА5ЗЕЇТОУЗТаОМ5МЕЕМ ЕЕГ ОКЕМЗКАМ МРЕІЮМТЗМУМКОМММОєТМОТ
МОамуУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (ЗЕО ІО МО:51)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ містить (і) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МІГМКІ ЗТ (5ЕО ІЮО МО: 17) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМТМКІЗТА (ЗЕО ІЮО МО: 31) між амінокислотами 587 і 588 МРІ капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М7081І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, де заміщена амінокислота (амінокислоти) не зустрічається в природі у відповідних положеннях, і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності
ЗЕО ІО МО:2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність
МТМКІ5Т (5ЕО ІЮО МО: 17) або включає, складається по суті або складається з амінокислотної послідовності ГАМТМКІ ЗТА (З5ЕО ІЮО МО: 31) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в ЗЕО ІЮ МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 ідентичності (або яка є на 10095 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕМКМІ СРЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАРАЕБРОЕВІ КЕОТ5ЕСОМІ аААМЕОСАККВМІ ЕР
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУЕРОЗБЗБОЗО ТаКАСООРАВКВАВІ МЕБОТИарАОБМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ЄМ ЗТРУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКАЇ МЕКГЕМІОУМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМСИМІ ТІ ММаБОАдУаВО
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА бо ЗНКОБЕЕКЕЕРОБОМ ІТРЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУММІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОа ВУЗ М ОВОМІАМТМ
КІ ЗТАВОААТАВЮВУМТОСМІ РЕМУМОЮВОМУМІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНРОРІ МС ЕІ КНРРРОП ІК
МТРУИРАМРОТТЕЗААКЕАЗЕІ ТОМЗТасОМеМЕЇЕМ ЕЕГ ОКЕМО5КАУМРЕЮМТОМИМКОУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО: 52)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність З»МТУКАЇ (ЗЕО ІЮО МО: 18) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАЗМТМКАЇА (ЗЕО ІЮО МО:32) між амінокислотами 587 і 588
МРІ1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М708І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і включає від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 560 1Ю МО: 2 або відповідній послідовності батьківського капсиду ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність зМТМКАЇ (ЗЕО ІЮ
МО: 18) або включає, складається по суті або складається з амінокислотної послідовності
ГАБМТМКАІА (5ЕБЕО ІЮ МО: 32), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в ЗЕО ІО МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 ідентичності послідовності (або яка є на 10095 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРИМІ РОУММІ ЕОТІ БЕСІВОММУКІ КРЕОРРРРКРАЕННКОСО5НАСЇ МІ РО УКМІ РЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНБРУЕРОЗЗВИа ТаКАСООРАВКАІ МЕСОТИрАОЗУМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ГЕТРИ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАВУМОВІ ІМУММУ СЕ АРКА МЕКГЕМОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОВСЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСаЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІАТТЯРМАТЕОМОаЗБУТМІ ОВОМІ АЗМТ
МКАІАВОДАТАВУМТОСМІ РОМУМООВОМУМІ ОБРІМАКІРНТООНЕНРБ5РІ МСС ГИ КНРРРОШІК
Зо МТРУИРАМРОТТЕЗААКЕАЗЕІ ТОМЗТасОМеМЕЇЕМ ЕЕГ ОКЕМО5КАУМРЕЮМТОМИМКОУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО: 53)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ї) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність АБМІТКА (5ЕО ІО МО: 19) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності І ААЗМІТКАА (5ЕО ІЮО МО:33) між амінокислотами 587 і 588
МРІ1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М708І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО:2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і включає від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому є ідентичним амінокислотній послідовності ЗЕО ІЮ МО:2 або відповідній білковій послідовності батьківського капсиду ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність АБМІТКА (ЗЕБЕО ІО МО: 19) або включає, складається по суті або складається з амінокислотної послідовності ГААЗМІТКАА (ЗЕО ІЮО МО: 33), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в 5ЕБО І МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 ідентичності (або яка є на 10095 ідентичною) наступній амінокислотній послідовності:
МААРИМІ РОУММІ ЕОТІ БЕСІВОММУКІ КРЕОРРРРКРАЕННКОО5НАСЇІ МІ РОУКМІ РЕМ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНБРУЕРОЗЗВИа ТаКАСООРАВКАІ МЕСОТИрАОЗУМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаЇ атм МАТаЗСАРМАЮММЕСАВСОСМОСМ55СМУНСОозТУМарАмМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ЄМ ЗТРУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКАЇ МЕКГЕМІОУМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕУОУ ТаАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОВЕЕКЕЕРОБОаМИРЯКОСЗЕКТММОІЕКУМІТОЕЕЕІАТТЯМРМАТЕОМОа ЗБУТ МІ ОВИМІ ААЗМІ
ТКААВОААТАВЮУМТОСМ РЕМУМУМОСОВОММІ ОС РІМЖМАКІРНТООНЕНРЗРІ МОСС БОЇ КНРРРОЇШІКМ
ТРМУИРАМРОТТЕЗААКЕА5ЗРІТОУЗТИаОМ5МЕЕМ ЕГОКЕМЗКАММРЕЮМ ТММ МКЗУММОгТМОоТМа
МУ5ЕРАРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО І МО:54)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОМТУТА5 (ЗЕО ІЮО МО: 20) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАОМТМТАКЗА (5ЕО ІЮО МО:34) між амінокислотами 587 і 588 МРІ капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М7081І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, і включає від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності зЕО ІЮ
МО: 2 або відповідній батьківській послідовності білка капсиду ААМ. У інших варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОМТМТК5 (ЗЕБО ІЮ МО: 20) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАОМТМТАКЗА (5ЕО ІО МО: 34) між амінокислотами 587 і 588 МУР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (її) амінокислотну заміну ІЄ98М відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕБЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, де заміщена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності зХЕО ІЮ МО: 2 або відповідній батьківській послідовності білка капсиду ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОМТУТАКЗ (ЗЕО І
МО: 20) або включає, складається по суті або містить амінокислотну послідовність
ГАЮОМТМТКБЗА (ЗЕБО ІО МО: 34) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в 5ЕО ІЮ МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 9565, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності або є на 100 95 ідентичним наступній амінокислотній послідовності:
МААРИМІ РОУММІ ЕОТІ БЕСІВОММУКІ КРЕОРРРРКРАЕННКОО5НАСЇІ МІ РОУКМІ РЕМ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМУЕРОЗЗБаТакАСООРАВКАВІ МЕСОТИрАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ЄМ ЗТРУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКАЇ МЕКГЕМІОУМКЕМТ
Зо ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗМТРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІГВОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОВЕЕКЕЕРОБОаМИЕЯКОСЗЕКТММОІЕКУМІТОЕЕЕІАТТЯРМАТЕОМОЗУЗБТМІ ОВОИаМІ Ам
МТА5АВОААТАВУМТОСМІ РЕМУМОСОВОММІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНРЗРІ МІСТЕР КНРРРОШІК
МТРУИРАМРОТТЕЗААКЕАЗЕІ ТОМЗТасмМеМЕЇЕМ ЕЕГ ОКЕМО5КАУМРЕЮМТ5МММКОУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО ІЮ МО:С55)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МКІЗАКО (ЗЕО ІЮ МО: 21) або включає, складається по суті або складається з амінокислотної послідовності Г АМКІЗАКОА (5ЕО ІЮ МО:35) між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М7081І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і включає від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності зЕО ІЮ
МО: 2 або відповідній білковій послідовності батьківського капсиду ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність
МКІБАКО (ЗЕО ІЮ МО: 21) або включає, складається по суті або складається з амінокислотної послідовності Г АМКІЗАКОА (5ЕО ІЮ МО: 35), між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в ЗЕО ІЮ МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 ідентичності (або яка є на 10095 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРИМІ РОУММІ ЕОТІ БЕСІВОММУКІ КРЕОРРРРКРАЕННКОО5НАСЇІ МІ РОУКМІ РЕМ ОКИає
РУМЕАВАААІ ЕНОКАМОНОЇ О5ИОМРМІ КИМНАВРАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОСМІ аААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНБРУЕРОЗЗВИа ТаКАСООРАВКАІ МЕСОТИрАОЗУМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5Б5БОБИАЗМОМНУ ЄМ ЗТРУ СМ ЕВ ЕМА ЕНСНЕЗРАЮУОВ ІМММУ СЕ АРКАЇ МЕКГЕМІОУМКЕМТ
Ома ТПАММІ ТТ МОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ яММаБОАЗМИаНн5О5
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕ5М ТЕРЕОМРЕНЗВМАН5БОБІ ОВІ ММРІИ ТОМІ МІ БАТМТРІСТТТО5А бо ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУМ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМ5У ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИ ТРаКОСаЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВИМІ АМКІЗ
АКОАВОАДАТАВВУМТОСМІ РОМУМОВАРУМІ ОСРІМАКІРНТОИНЕНРЗРІ МІС ЕІ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО:С56)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ містить (ї) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮМУТКТ (ЗЕО ІО МО: 22) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМОЮМУТКТА (5ЕО ІО МО:36) між амінокислотами 587 і 588 МРІ капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М7081І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і включає від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО ІЮ
МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У інших варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (і) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮМТКТ (5ЕБО ІЮО МО: 22) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМОЮУТКТА (ЗЕО ІО МО: 36) між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (її) амінокислотну заміну ІЄ98М відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕБО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ (тобто відмінному від ААМ2), в якому заміщена амінокислота не зустрічається в природних умовах у відповідному положенні і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ХЕО ІЮО МО: 2 або відповідній батьківській послідовності білка капсиду ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність МОЮМТКТ (5ЕБЕО ІО МО: 22) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАМОЮУТКТА (5БО ІЮО МО: 36) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в ЗЕО ІЮО МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 956, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності (або яка є на 100 95 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
Зо МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРААДАЇ ЕНОКАМОНОЇ О5СОМРУЇ КИМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕССОМІ !АМЕОАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! аТМмТМАТаЗСАРМАЮММЕСАВСЯСсМЗЗЕМУНСОоЗТУМаИаремМІТТЗТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ 35 ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУ РАаРСУВООВУЗКТЗАОМММЗЕУЗУ ТЕАТКУНІ МСВОБІ ММРаЕАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВ ТТМРМАТЕОМОЗУЗТМІ ОВОИМІ АМОЮ
УТКТАНОААТАВВУМТОСМІ РЕОМУМОВАрУМІ ОБРІМАКІРНТОСНЕНРУОЗРІ МСОСЕСІ КНРРРОШІК 40 МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО: 57)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОМОТТКМ (ЗЕО ІО МО: 23) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАФАЮТТКМА (5ЕО ІО МО: 39) між амінокислотами 587 і 45 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і додатково містить одну або більше наступних амінокислотних замін відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО: 2) або відповідні заміни в іншому батьківському серотипі ААМ, де заміщена амінокислота (амінокислоти) не зустрічається в природі у відповідних положеннях:
МТтО8І, 0213М, РЗб63ЗІ, 5453. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) 50 пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАЮОТТКМ (ЗЕБЕО ІО МО: 23) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності Ї АОАОТТКМА (ЗЕО ІЮ
МО: 39) між амінокислотами 587 і 588 УР1 капсиду ААМа2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) заміну М7О8І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО
ІО МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і містить від 2 до 5, від 5 55 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО ІЮ МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У інших варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОМОТТКМ (ЗЕО ІО МО: 23) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАФАЮТТКМА (ЗЕО ІЮО МО: 39) між амінокислотами 587 і бо 588 МРІ1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) заміну
РЗб63Ї. відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (5ЕБЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності «ЕО ІЮ МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У інших варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (і) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність
ОАОТТКМ (5ЕО ІЮ МО: 23) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАОФАЮТТКМА (ЗЕО ІЮО МО: 39) між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) заміну 0213М відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і включає від 2 до 5, від 5 до 10, або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО ІЮО МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У інших варіантах здійснення варіант капсиду
ААМ включає (ї) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОДОТТКМ (5ЕО ІЮ
МО: 23) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності
ГАОАОТТКМА (ЗЕО ІЮ МО: 39) між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) заміну 5453К відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО 10 МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ОАЮОТТКМ (5ЕБО ІЮО МО: 23) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності Ї АОАОТТКМА (ЗЕО ІЮ
МО: 39) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в ЗЕО ІЮО МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду
ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 9565, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності послідовності (або яка є на 100 95 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇ МІ РЕМКМІ СРЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУЕРОЗБЗБОЗО ТаКАСООРАВКВАВІ МЕБОТИарАОБМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаЇ ат" МАТаЗСаАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗаМУНСоЗТУМИрАМІТТОТАТУАГРТУММНІ УК
ОІ5ББОБИАЗМОМНУ ГОМ ТРИ СМ ЕВ ЕМАЕНСНЕЗБРАВУОВІ ТММ МУУ С ЕАРКВАВІМЕКІ ЕМОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ АВТаММЕТЕЗМТЕЕОМРЕНЗЗМАН5БОБІ ОВ ММРИГТООМІ ММ АТМ РОСТОВ
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУ РЕРСУВООВУ5КТЗАЮМММЗЕУБУ ТаАТКУНІ МОВОБІ ММРОРАМА
ЗНКОБЕЕКЕЕРОБОМ ІТРЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУММІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМИаВУ5Т М ОВОМІ АСОАО
ТТКМАВОАДАТАВЮВУМТОСМІ РЕМУМОЮВОММІ ОСРІМАКІРНТОСНЕНРОУРІ МОСС ЕІ КНРРРОШІК
МТРУИРАМРОТТЕЗААКЕАЗЕІ ТОМЗТасОМеМЕЇЕМ ЕЕГ ОКЕМО5КАУМРЕЮМТОМИМКОУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО ІЮ МО: 58)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ТМАКТ5РО (5ЕО ІЮО МО: 24) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАТМКТЗРОА (ЗЕО ІЮ МО:40) між амінокислотами 587 і 588 МРІ капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М7081І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ і включає від 2 до 5, від 5 до 10, або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності зЕО ІЮ
МО: 2 або відповідній батьківській послідовності білка капсиду ААМ. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 ідентичності послідовності (або яка є на 10095 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРСОМІ РОМ ЕОТІ 5ЗЕСІВОММКІ КРаРРРРКРАЕВНКООБАСЇІ МІ РЕМКМІ СРЕМИаЇ ОКИає
РУМЕАВАААЇ ЕНОКАМОВОЇ ОБСОМРМУІ КУИМНАВРАЕБРОЕВІ КЕОТЗЕССИМІ ААМЕОСАККВМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРУЕРОЗБЗБОЗО ТаКАСООРАВКВАВІ МЕБОТИарАОБМРОРОРІ ЧОРРАА
РЗаїЇ атм мМАТаЗСАРМАЮММЕСАВрСОМОСМЗЗСИМУУ НСТУ МаИареМІТТ5ТАТУАЇ РТУММНІ УК
ОІ5ББОБИаАЗМОМНУГаМ5ТРИ СМ ЕВ ЕМАЕНСНЕЗБРАВУОВІ ІМУММУУ С ЕАРКВАВМЕКІ ЕМОМКЕМТ
ОМОратТПАММІ ТЗТМОМЕТОБЕМОЇ РУМ абвАНОССІ РРЕРАОМЕМУРОМИМІ ТІ ММИаБОдМИаНн55
ЕМСГЕМЕРБОМІ АВТаММЕТЕЗМТЕЕОМРЕНЗЗМАН5БОБІ ОВ ММРИГТООМІ ММ АТМ РОСТОВ
ГОРБОдДаАБОЇВРОБАМУ РЕРСУВООВУ5КТЗАОМММЗЕМОУ ТЕАТКУНІ МС ВОБІ ММРО РАМА бо ЗНКОБЕЕКЕЕРОБОМ ІТРЕЕКОСЗЕКТММОТЕКУММІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОИаВБУТ М ОВОМІ АТМВА
Т5РОАВОААТАВУМТОСМІ РОМУМОВАрУМІ ОЯВБРІМАКІРНТОИаНЕНРЗРІ МСБО КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУММРЕЮМТЗМММКІММВЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТАМІ. (5ЕО ІЮ МО:59)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ містить пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність ЗМТТОКТ (ЗЕО ІО МО: 25) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГАБМТТОКТА (ЗЕО ІЮО МО: 41) між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО 10 МО: 2 або відповідній батьківській послідовності білка капсиду ААМ. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 956, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності (або яка є на 100 95 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗАИЇ МІ РОУКМІ СРЕМИЇІ ОКИаЕ
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТ5ЕеСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВИТМУМУСЕАРКВІ МЕКГ ЕМІОУКЕМТ
ОМОатТТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММАаБОАдУСаВНЗо
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОІЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ АЗМТ
ТОКТАВОААТАЮУМТОСМІ РЕМУМОВАрУМІ ОБРМАКІРНТОИаНЕНРЗРІ МСБО КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО:60)
У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ включає (ії) пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність АБОЗТКА (ЗЕО ІЮ МО: 26) або включає, містить або складається по суті з амінокислотної послідовності ГААБОБТКАА (5ЕО ІЮО МО:42) між амінокислотами 587 і 588 МРІ капсиду ААМ2 або між відповідними амінокислотами іншого капсиду ААМ і (ії) амінокислотну заміну М7081І відносно амінокислотної послідовності капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2)
Зо або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ, де заміщена амінокислота (амінокислоти) не зустрічається в природних умовах у відповідному положенні і містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому є ідентичним амінокислотній послідовності 5ЕО ІЮ МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ. У іншому варіанті здійснення варіант капсиду включає пептидну вставку, що містить амінокислотну послідовність АБОЗТКА (ЗЕО ІЮО МО: 26) або включає, складається по суті або складається з амінокислотної послідовності | ААБОБЗТКАА (5ЕО ІЮ МО: 42) між амінокислотами 587 і 588 капсиду ААМ2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в
ЗБО І МО: 2. У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 ідентичності (або є на 100 95 ідентичної) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ ЗЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАОИІ МІ РЕУКМІ СРЕМИа! ОКИає
РУМЕАРАААЇ ЕНОКАМОВОЇ О5ИОМРМІ КУМНАВСАЕРОЕВІ КЕОТЗЕСИМІ СВАМЕОАККАМІ ЕРІ.
СІ МЕЕРУКТАРаККАРМЕНЗРМЕРОЗЗБЗИа ТаКАаООРАВКАВІ МЕБОТарАОЗМРОРОРІ ЧОРРАА
Ра! атм МАТаЗадаРМАЮММЕСАрСОСХ сМЗЗИМУНСОВТМУМИарвмМІ т ТАТМАЇ РТУММНІ УК
ОІ5505.:АБМОМНУгаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНСНЕЗРАВУОВІ ІМММУУСЕАРКА МЕКЕМІОУКЕМТ
ОМОратТАММІТЗГМОМЕТОБЕМОЇ РУМ азАНОС,СІ РРЕРАОМЕМУРОМИаМІ ТІ ММОаЗОАЛУСНОО
ЕМСГЕМЕРБОМІ ВТаММЕТЕЗУТЕЕОМРЕНЗЗУАНЗОБІ ОВІ МУЯРИВОМІ МІ БАТМТРЗИаТТТОБА
ГОЕБОАСАБОЇВРОЗАМУМ РАРСУВООВУЗКТЗАОМУММЗЕМЗУТИАТКУНІ МСВОБІ ММРаАРАМА
ЗНКОРЕЕКЕЕРОБОаМИРаКОСЗЕКТММОТЕКУМІТОЕЕЕІВТТМРМАТЕОМОаЗУЗТМІ ОВОМІ ААБО
ЗТКААВОААТАВУМТОСМІ РЕМУМООВОМУМІ ОСРІМАКІРНТОСИНЕНРЗ5БРІ МОСЕСЇ КНРРРОШІК
МТРУРАМРЗТТЕЗААКЕАЗЕТОМЗТОМЗМЕІЕМЕГОКЕМЗКАУМУМРЕЮМТЗМММКЗУММОЕТМОТМ
СМУ5ЕРЕРІСТАМІ ТЕМІ. (5ЕО ІЮ МО:61).
У кількох аспектах запропонований варіант капсидного білка ААМ, що включає одну або більше амінокислотних замін відносно відповідного батьківського капсидного білка ААМ, де варіантний капсидний білок, якщо він присутній у віріоні ААМ, надає тому підвищену інфекційність відносно м'язових клітин (наприклад, клітин скелетного або серцевого м'яза) порівняно з інфекційністю віріону ААМ, що містить відповідний батьківський білок капсиду ААМ, відносно м'язових клітин.
У деяких варіантах здійснення варіантний білок капсиду ААМ містить амінокислотну заміну амінокислоти 363 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО: 2) або заміну у відповідному положенні в іншому батьківському серотипі ААМ (тобто відмінному від
ААМ2). У деяких переважних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 9595, щонайменше приблизно 9895 або, щонайменше приблизно 99595 або більше ідентичність амінокислотної послідовності повнорозмірної амінокислотної послідовності, викладену в ЗЕО ІО МО 2, і включає амінокислотну заміну в амінокислоті 363 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮО МО: 2). У деяких переважних варіантах здійснення варіантний білок капсиду ААМ містить амінокислотну заміну РЗ63І. порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО: 2), капсиду
ААМЗА (5ЕО ІЮО МО: 3) або капсиду ААМЗВ (ЗЕО ІЮО МО: 4); або амінокислотну заміну РЗб4Ї. порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМІ1 (5ЕО ІЮ МО: 1) або капсиду ААМб (ЗЕО ІО МО: 7); або амінокислотну заміну РЗ54Ї порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду АДАМА (ЗЕО ІЮ МО:5) або капсиду ААМ5 (5ЕО ІО МО: 6); або амінокислотну заміну РЗ65І. порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ7 (5ЕО ІЮ МО: 8) або капсиду ААМО (ЗЕО ІО МО: 10); або амінокислотну заміну РЗ6бІ. порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ8 (ЗЕО ІЮ МО: 9) або капсиду ААМ10 (ЗЕО ІЮО МО: 11). У деяких переважних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить заміну РЗб3ЗІ| порівняно з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ МО: 2 або відповідну заміну порівняно з будь-якою з ЗЕО
ІО МО:1 ї 3-12 ії має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 9565, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95, або, щонайменше приблизно 99 95 або більше ідентичність амінокислотної послідовності з повнорозмірною амінокислотною послідовністю, представленою в 5ЕО ІЮО МО: 2, або будь-якою з 5ЕО ІЮ МО:1 їі 3-12. У деяких переважних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну послідовність, що містить амінокислотну заміну РЗ6ЗГ,, порівняно з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮ МО: 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, вказаній в БЕО ІЮ МО: 2. У відповідних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну РЗ63Г. порівняно з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮ МО: 2 або відповідну заміну в іншому батьківському серотипі ААМ (тобто відмінному від ААМ2), де варіантний капсидний білок містить від 1 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка ААМ2, вказаною в ЗЕО ІЮ МО: 2, або порівняно з амінокислотною послідовністю капсидного білка іншого батьківського серотипу ААМ. У іншому переважному варіанті здійснення варіант капсиду включає амінокислотну заміну РЗ63ЗГ ї додатково містить амінокислотну заміну() Е347К і/або М7081 порівняно з амінокислотною послідовністю 5ЕО ІЮ
МО: 2 або відповідні заміни в капсиді іншого батьківського серотипу ААМ (тобто відмінного від
ААМ2). У іншому переважному варіанті варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну
РЗ631Ї. порівняно з амінокислотною послідовністю ЗЕО ІЮО МО: 2 або відповідну заміну в капсиді іншого батьківського серотипу ААМ і додатково містить пептидну вставку, переважно розташовану між амінокислотами 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2, амінокислотами 588 і 589 капсидів ААМЗА, ААМЗВ, ААМУ або ААМ10, амінокислотами 589 і 590 МР1І капсиду ААМ7, амінокислотами 590 і 591 МР1 капсидів ААМІТ, ААМб або ДАМ8, амінокислотами 584 і 585 МР1 капсиду ААМА4, або амінокислотами 575 і 576 капсиду ААМ5, де пептидна вставка переважно містить амінокислотну послідовність, вибрану з МКІОКТО (5ЕО ІЮ МО:13), МКТТМКО (5ЕО ІЮ
МО:14), ТМКІСМТ (5ЕО І МО: 15), МІ ТКОаМ (5ЕБО І МО16), МТУКІ ЗТ (5ЕО ІО МО:17),
ЗМТМУКАЇ (ЗЕО І МО:18), АБМІТКА (5ЕО І МО:19), ОМТУТА5 (5ЕО ІЮ МО:20), МКІБАКО (5ЕО
ІО МОС21), МОБУТКТ (5ЕО ІЮ МО:22), ОАОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:с:23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО:24),
ЗМІТОКТ (5ЕБЕО 10 МО:25), АБОБТІКА (5ЕБО 10 МО:26), ГАМКІОВТОА (5ЕБО 10 МО:27),
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:28), І АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:29), ГАМІ ТКОаМА (ЗЕО ІЮ МО:30),
ГАМТУКІ ТА (5ЕО ІЮ МО:31), ГГ АБМТУКАЇА (5ЕО ІЮ МО:32), ГААЗ5МІТКАА (5ЕО ІЮ МО':33),
ГАОМТУТАБЗА (5ЕО ІЮ МО:34), І АМКІЗБАКОА (5ЕО ІЮ МО:35), Г АМОЮМТКТА (5ЕО ІЮ МО:36),
ГАТМКІСМУТО (5ЕО І МО:37), ГГ АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:38), ГАОАОТТКМА (5ЕО І МО:39),
ГАТМАТ5РБОА (5ЕО І МО:40), ГАЗМТТОКТА (ЗЕО ІЮ МО 41), і ГГ ААЗБОЗТКАА (5ЕО ІЮ МО 42), більш переважно вибрану з ОМІТКОМ (ЗЕБО ІЮ МО: 16), ГАОМІТКОМА (ЗЕБО ІЮ МО:30),
ОАОТТКМ (ЗЕО І МО:23) і ГАОАОТТКМА (ЗЕО ІО МО':39), і необов'язково включає від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО ІЮО МО: 2 або відповідній батьківській послідовності капсидного білка ААМ.
У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну заміну в амінокислоті 593 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ МО: 2) або у бо відповідному положенні в іншому батьківському серотипі ААМ (тобто відмінному від ААМ2). У деяких переважних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну у положенні амінокислоти 593 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ
МО: 2) і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95, або, щонайменше приблизно 99 95 або більше ідентичність амінокислотної послідовності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, представленою в 5БО ІЮО МО 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, представленій в 5ХЕО ІЮ МО:2. У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну гліцину на глутамат у положенні амінокислоти 594 порівняно з амінокислотною послідовністю капсидів ААМІ1, ААМЗА, ААМб або ААМУ або у положенні амінокислоти 583 капсиду ААМ5 або амінокислоти 596 капсидів ААМ8 або ААМІ10, або амінокислотну заміну аргініну на глутамат у положенні амінокислоти 594 капсиду ААМЗВ, або амінокислотну заміну аспартату на глутамат у положенні амінокислоти 592 капсиду ААМА4, або амінокислотну заміну глутаміну на глутамат у положенні 595 капсиду ААМ7. У інших варіантах здійснення капсидний білок варіанта містить амінокислотну заміну АБУОЗЕ порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і не містить одну або більше з наступних амінокислотних замін порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2: І19М, М369А, К2бЕ, М2150, 3555, МАбА і 5196Р. У відповідних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни АБОЗЕ і М708І порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 або при щонайменше приблизно 9995 ідентичності всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, вказаній в БЕО ІЮО МО: 2. У пов'язаних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни А5УОЗЕ їі 51097 порівняно з амінокислотною послідовністю
ААМ2 і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або, щонайменше приблизно 99 95 ідентичності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в 5ЕО ІЮО МО 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, вказаній в 5ЕО ІЮ МО: 2. У відповідних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотні заміни АБОЗЕ, М708І ї 51097 порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і має щонайменше приблизно 85 95,
Зо щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або щонайменше приблизно 99 95 ідентичності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, представленою в 5ЕБЕО ІЮ МО 2, а в іншому ідентичний 5ЕО ІЮ МО:2. У інших варіантах здійснення варіант капсиду включає амінокислотні заміни А5УЗЕ, М708І ї М5515 порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або щонайменше приблизно на 99 95 ідентичності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в
ЗЕО ІЮ МО: 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, вказаній в ЗЕО ІЮ МО: 2. У інших варіантах здійснення варіант капсиду включає амінокислотні заміни А59ЗЕ, М7081І ії Кб4А9Е порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або щонайменше приблизно 99 95 ідентичності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮО МО 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, вказаній в ЗЕО
ІО МО: 2. У інших варіантах здійснення варіант капсиду включає амінокислотні заміни А5БУЗЕ,
МТ7О8І, 51097 ї К5270 порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 9565, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 або, щонайменше приблизно 9995 ідентичності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО ІЮ МО 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності, вказаній в зЗЕО ІЮО МО: 2.
У інших варіантах здійснення варіант білка капсиду ААМ містить амінокислотну заміну амінокислоти у положенні 708 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ
МО: 2) або у відповідному положенні в іншому батьківському серотипі ААМ (тобто відмінному від
ААДУМ2), причому заміщена амінокислота не зустрічається в природі у відповідному положенні.
Переважно, віріон гГААМ не містить заміни проліну на серин у положенні амінокислоти 250 порівняно з ААМ2 або у положенні відповідної амінокислоти в іншому батьківському серотипі
ААУ. У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну у положенні амінокислоти 708 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮ
МО: 2) і має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 9095, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або щонайменше приблизно 99 95 або більше ідентичність по всій довжині з амінокислотною послідовністю, представленою в 5ЕО ІЮО МО 2, а бо в іншому ідентичний 5ЕО ІО МО: 2. У переважних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить заміну валіну на ізолейцин (М708І) у положенні амінокислоти 708 порівняно з амінокислотною послідовністю капсиду ААМ2 і має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 або щонайменше приблизно 99595 або більше ідентичність амінокислотної послідовності повнорозмірної мінокислотної послідовності, представлену в 5ЕБЕО ІЮ МО 2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності 5ЕО ІО МО: 2, де варіантний білок капсиду не містить амінокислотну заміну Р2505. У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка містить заміну валіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 709 капсидів ААМЗА або ААМЗВ, заміну аланіну на ізолейцин у положенні 709 капсидів ААМІ1 або ААМб, заміну аспарагіну на ізолейцин у положенні амінокислоти 707 капсиду ААМ4 або амінокислоти 709 капсиду ААМО9, або заміну треоніну на ізолейцин у положенні амінокислоти 710 капсиду ААМ7 або амінокислоти 711 капсидів ААМ8 або ААМ'10, або заміни глутаміну на ізолейцин у положенні амінокислоти 697 капсиду ААМ5. У відповідних варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну М708І порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2, де варіант капсидного білка містить від 2 до 5, від 5 до 10 або від 10 до 15 амінокислотних замін і де варіант капсидного білка не містить амінокислотну заміну Р2505. У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка містить амінокислотну заміну М708І і також містить амінокислотну заміну АЗ335 і/або 57211. порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2. У інших пов'язаних варіантах здійснення варіант капсиду включає амінокислотну заміну М708І, а також амінокислотну заміну АЗ335 і/або 57211. порівняно з амінокислотною послідовністю ААМ2 і має щонайменше приблизно 85 95, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 9895 або щонайменше приблизно 99595 або більше ідентичність амінокислотної послідовності по всій довжині з амінокислотною послідовністю, вказаною в ЗЕО
ІО МО:2, а в іншому ідентичний амінокислотній послідовності зЕО ІЮ МО: 2.
У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність що має щонайменше 8595, щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 98 95 ідентичності з послідовністю капсиду ААМ дикого типу, вибраною з групи, що складається з ЗЕО ІЮ МО: 1,2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 10, 11 ї 12, а також містить Її) одну або більше амінокислотних замін, вибраних з групи, що складається з АЗБР, 0213М, АЗ19ТР195І, РЗ63І,
Зо РЗбБЗІ -М708І, (4538, ВАбБІН, ІбО8М, М708І, М708І1-АБОЗ3, М7081-5109Т, М708І-ТЗЗ0А,
М7081-8!588М, М708І-У694С, М708І-У6О06С, М7081-М449К, М7081-02225,
М312К-44490-М45515-1698МУ-1 7350, М312К-М4490--М5515-1698У-7081-1 7350, і/або (ії) пептидну вставку, вибрану з групи, що складається з МКІОКТО (ЗЕО ІОЮ МО:13), МКТТМКО (ЗЕО
ІО МО:14), ТМКІСМТ (5ЕО ІЮ МО:15), МІ ТКОаМ (5ЕО 10 МО:16), МТМКІ 5 (5ЕО ІЮ МО:17),
ЗМТМУКАЇ (ЗЕО І МО:18), АБМІТКА (5ЕО І МО:19), ОМТУТА5 (5ЕО ІЮ МО:20), МКІБАКО (5ЕО
ІО МОС21), МОБУТКТ (5ЕО ІЮ МО:22), ОАОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:с:23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО:24),
ЗМІТОКТ (5ЕБЕО 10 МО:25), АБОБТІКА (5ЕБО 10 МО:26), ГАМКІОВТОА (5ЕБО 10 МО:27),
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:28), І АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:29), ГАМІ ТКОаМА (ЗЕО ІЮ МО:30),
ГАМТУКІ ТА (5ЕО ІЮ МО:31), ГГ А5МТУКАЇА (5ЕО ІЮО МО:32), ГААЗ5МІТКАА (5ЕО ІЮ МО':33),
ГАОМТУТАБЗА (5ЕО ІЮ МО:34), І АМКІЗБАКОА (5ЕО ІЮ МО:35), Г АМОЮМТКТА (5ЕО ІЮ МО:36),
ГАТМКІСМУТО (5ЕО І МО:37), І АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:38), ГАОАОТТКМА (5ЕО І МО:39),
ГАТМКТЗРБОА (5ЕО ІО МО:40), ГАЗМТТОКТА (5ЕО ІО МО:41), і ГААБОЗТКАА (5ЕО ІЮО МО:42). У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ містить вказані одну або більше амінокислотних замін і/або пептидних інсерцій, а в іншому ідентичний послідовності, вибраній з групи, що складається з ЗЕО ІЮ МО: 1-12.
У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ являє собою родовий капсидний білок, що містить одну або більше пептидних інсерцій і/або амінокислотних замін, як описано тут. Під родовим капсидним білком мається на увазі еволюційний предок капсидного білка, який зустрічається в природі сьогодні, наприклад, ААМ1, ААМ2, ААМ3З, ААМ4, ААМ5, ААМб,
ААМ7, ААМ8, ААМУ9, ААМГП10, ААМ11, ААМ12, ААМТ13, і який може генеруватися іп 5йїсо шляхом випадкового амінокислотного заміщення у вироджених положеннях капсидних білків ААМ, що зустрічаються в природі в цей час.
У інших варіантах здійснення варіант капсидного білка ААМ являє собою химеру, що містить амінокислоти 130-725 капсиду ААМ5 (ЗЕО ІЮ МО: 6) або амінокислотну послідовність, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95 або щонайменше на 98 95 ідентичну такій.
У деяких аспектах варіант капсидного більюьа ААМ являє собою химеру, що містить (Її) амінокислоти 1-129 капсиду ААМб (5ЕО ІО МО:7) або амінокислотну послідовність, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95 або щонайменше 98 95 ідентичну такій, і (ії) амінокислоти 130- 725 ААМ5 (ЗЕО ІО МО: 6) або амінокислотну послідовність, щонайменше на 90 95, щонайменше 60 на 95 95 або щонайменше на 98 95 ідентичну такій, і додатково включає амінокислотні заміни
М2291І, А490Т і А5811Т ії, необов'язково, М447Е або 5855 відносно послідовності капсиду ААМ5 (ЗБЕО ІЮО МО: 6). У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності (або яка є на 100 95 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИмІ РОУМІ ЕОМІ БЕСІВЕМ М ОЇ КРЕАРКРКАМООКОВрИ ВИ МІ РИ МКМІ СРЕМИЇ ОКО
ЕРУМААВАААІ ЕНОКАМОООЇ КАСОМРМІ ВУМНАВСАЕРОЕВІ ОБОТЗЕРСОМІ аВАМЕОАККАМІ ЕР
ЕС МЕЕЄВАКТАРТаКВІООНЕРКАККАВТЕЕОЗКРЗТЗЗОАЕАИРБЗОаБООЇ ОТРАОРАБЗБОІ ССАОТМ5
АсасаРІ арММОосСАрауУуаМмАБОРУМУНСОЗПУМИаОрвВІУТКОТАТМУМІ РОМММНОМАЕІКЗОаЗУВСИа
МАМАМУРСаУ5 ТРИ, МЕВЕМАЕНЗНУУЗРАВУХОВІ ІММУУМ С ЕАРАБІ АУКІЕМІОМКЕМТМООТ ТАМ
МСТ5ТМОМЕТоррМО РИУМАМатЕаст РАЕРРОМЕТ РОМамМАТІ МАОМТЕМРТЕВНЗЗЕРСІГЕМЕР
ЗКМІ ВТаММЕеЕеЕРТУМЕЕЕМРЕНЗЗЕАРЗОМІ ЕКІ АМРІ МОМ МАЕМЗ ТЯМ ТаСМОГМКМІ АСАМАМ
ТУКМУ/ЕРАРМаВтТОСХУМІ а УМААЗУЗАЄТ ТТМАМЕГЕСАЗМОМРРОРМОМТ ММ ОСЗМТМАЇ.
ЕМТМІЕМ5ОРАМРОТТАТМІ ЕСММІИТЗЕЗЕТОРУМАМАУМУМасСОМАТММО5ОТТАРТТОаТУМІ ОЄЇ
УРаБУММЕВОУМІ ОВБРІМАКІРЕТаАНЕНРЗРАМОаСа ЕІ КНРРРММІИЇКМТРУРИЕМІТЗЕБОУРУЗ5
ЕІТОУЗТООМТМЕМЕМ/ЕЇ ККЕМЗКАУМ МРЕЮМ ТММУМОРОЕЄЕМОБГАРОЗТСОСЕМАТТАРІСТАМІ ТАРІ. (ЗЕО ІЮ МО:62)
У інших аспектах варіант капсидного білка ААМ являє собою химеру, що містить (Її) амінокислоти 1-61 ААМ2 (5ЕО ІЮ МО: 2) або амінокислотну послідовність щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95 або щонайменше 98 95 ідентичну такій, (ії) амінокислоти 62-129 ДАМУб (ЗЕО ІО МО: 7) або амінокислотну послідовність, щонайменше на 90 95, щонайменше на 95 95 або щонайменше на 98 95 ідентичну такій, і (ії) амінокислоти 130-725 капсиду ААМ5 (ЗЕО ІЮ МО: 6) і додатково містить амінокислотні заміни М2291І, А490Т ї А5З81Т відносно послідовності ААМ5 (ЗБЕО ІО МО: 6). У деяких варіантах здійснення варіант капсиду ААМ має амінокислотну послідовність що має щонайменше приблизно 8595, щонайменше приблизно 90 95, щонайменше приблизно 95 95, щонайменше приблизно 98 95 ідентичності (або яка є на 100 95 ідентичною) наступної амінокислотної послідовності:
МААРрИМмІ РОУМІ ЕОТІ БЕСІВОММУКІ КРаРРРРКРАЕВННКООЗНАИІ МІ РЕ УКМІ РЕМИа! ОКИає
РУМААРАААЇ ЕНОКАМОСОЇ КАСОМРМІ ВУМНАВАЕРОЕВ ОБОТЗЕСОМІ аВАМЕОАККАМІ ЕР Е
Зо СІ МЕЕВАКТАРТаКАВІООНЕРКАККАВТЕЕОЗКРОТЗЗОАЕАСРЗИаБООЇ ОІРАОРАББІ САОТМ5А саесаР айОММОсСАраУамМмАЗИОМНСОЗТММИаОрвВІУТКЗТАПУМІ РОУММНОУВЕКЗаЗУВССИЗМ
АМАУРаУЗТРИУСМЕВЕМАЕНЗНУЗРАВУОВИ ММ СЕВРАБІ ВУКІЕМІОМКЕУТМООЗТ ТТІАММ
ГТ5ТМОМЕТОроМОЇ РУУМаМатЕаСІ РАЕРРОМЕТІ РОМаМмАТІ МАВОМТЕМРТЕВЗОЗЕБЕСІ ЕМЕРБЗ
КМ ВЕТаММЕеЕЕТУМЕЕЕМРЕНЗЗЕАРБЗОМІ ЕК АМРІ МОМ МАВЕУЗТММТаСМОЄМКМ АС,АМАМТ
УКММУЕРОРМИаВтТОСУУуМ аЗаММААЗУЗАЄТТТМАМЕГ ЕСАЗУОУРРОРМОМТММІ ОСЗМТМАЕ
МТМІЕМ5ОРАМРОТТАТМІ ЕСММІ ІТ ЗЕЗЕТОРУМАМАУМУаСОМАТММОЗЗГТАРТТОатТУМГОБЇМ
РаБУММЕВОУМІ ОВБРІМАКІРЕТОАНЕНРЗРАМасаЕаї КНРРРММІ ІКМТРУРОЕМІ ТЕО РУБЗЕ
ІТОУ5ТаОМТМЕМЕМЕЇ ККЕМ5КАУМ МРЕІЮМ ТММУМОРОЄМОБГАРОЗТОЕМАТТАРІСТАМІ ТАРІ. (ЗЕО ІЮ МО:63)
Варіанти ААМ, розкриті в даному описі, були отримані за допомогою спрямованої еволюції іп мімо, що включає скринінг серцевих і скелетних м'язів приматів після внутрішньовенного введення. У деяких варіантах здійснення варіанти капсидних білків, розкритих в даному описі, якщо вони присутні у віріоні ААМ, демонструють підвищену трансдукцію м'язових клітин порівняно з трансдукцією м'язових клітин віріоном ААМ, що містить відповідний батьківський білок капсиду ААМ або ААМ дикого типу. Наприклад, в деяких варіантах розкриті тут варіанти капсидних білків, якщо вони присутні у віріоні ААМ, забезпечують більш ефективну трансдукцію м'язових клітин приматів, чим віріони ААМ, що містять відповідний батьківський капсидний білок
ААМ або капсидний білок ААМ дикого типу, тобто, м'язові клітини захоплюють більше віріонів
ААМ, що містять варіантний капсидний білок ААМ, чим віріонів ААМ, що містять капсидний білок батьківського ААМ або ААМ дикого типу. У деяких таких варіантах здійснення варіант ААМ віріону або варіанта гААМ демонструє збільшення трансдукції м'язової клітини, щонайменше в 2 рази, щонайменше в 5 раз, щонайменше в 10 раз, щонайменше в 15 раз, щонайменше в 20 раз, щонайменше в 25 раз, щонайменше в 50 раз або навіть більш ніж в 50 раз порівняно з трансдукцією м'язової клітини віроном ААМ дикого типу або гААМ, що містять відповідний батьківський капсидний білок ААМ. У переважних варіантах здійснення варіант віріону ААМ або варіанта ГААМ демонструє, щонайменше в 2 рази, щонайменше в 5 раз, щонайменше в 10 раз, щонайменше в 15 раз, щонайменше в 20 раз, щонайменше в 25 раз, при щонайменше в 50 раз, щонайменше в 100 раз, щонайменше в 1000 раз або більше, ніж в 1000 раз, підвищення трансдукції м'язової клітини порівняно з трансдукцією м'язової клітини віріоном ААМ8 або ААМУ9 60 дикого типу. У деяких таких варіантах здійснення варіанти капсидних білків, розкритих в даному описі, якщо вони присутні у віріоні ААМ, забезпечують більш широку трансдукцію м'язових клітин приматів, чим віріосни ААМ, що містять відповідний батьківський капсидний білок ААМ або капсидний білок ААМ дикого типу. Іншими словами, варіантним віріон ААМ трансдукує типи клітин, не трансдуковані віріонами, що містять відповідний батьківський капсидний білок ААМ, і, отже, більша кількість типів клітин в м'язах, чому відповідний батьківський віріон ААМ. У деяких варіантах здійснення віріон варіанта ААМ переважно трансдукує м'язові клітини, наприклад, віріон ГААМ інфікує м'язову клітину з 2-кратною, 5-кратною, 10-кратною, 15-кратною, 20-кратною, 25-кратною, 50-кратною або більше ніж 50-кратною специфічністю порівняно з іншою м'язовой або нем'язовой клітиною. У деяких варіантах здійснення трансдукована м'язова клітина являє собою клітину серцевого м'яза (наприклад, кардіоміоцит, серцевий фібробласт або клітина- попередник серцевого м'яза). У деяких варіантах здійснення м'язова клітина являє собою клітину скелетних м'язів (наприклад, міобласт, міотуба або сателітна клітина). Збільшення трансдукції м'язових клітин, наприклад, підвищену ефективність трансдукції, більш широку трансдукцію, більш переважну трансдукцію і т. д. можна легко оцінити іп міго або іп мімо за допомогою будь-якої кількості методів в даній галузі для вимірювання експресії генів.
Наприклад, ААМ може бути упакований разом з геномом, що містить касету експресії, що містить репортерний генів, наприклад, флуоресцентний білок під контролем універсального або тканиноспецифічного промотору і міра трансдукції може бути оцінена шляхом виявлення флуоресцентного білка з допомогою, наприклад, флуоресцентной мікроскопії. Як інший приклад, ААМ може бути упакований разом з геномом, що містить послідовність нуклеїнової кислоти з штрихом-кодом, і міра трансдукції може бути оцінена шляхом виявлення послідовності нуклеїнової кислоти з допомогою, наприклад, ПЛР. Як інший приклад, ААМ може бути упакований разом з геномом, що містить касету експресії, що містить терапевтичний ген для лікування м'язового захворювання, і міра трансдукції може бути оцінена шляхом виявлення поліпшення стану при м'язовом захворюванні у пацієнта, якому ввели ААМ.
Захворювання, які можна лікувати з використанням варіанта вектора або віріону ГААМ і/або способу, розкритого в даному описі, включають, але не обмежуються такими, моногенні захворювання, складні захворювання і травматичні пошкодження. Приклади моногенних захворювань включають, але не обмежуються такими, м'язові дистрофії, такі як м'язові
Зо дистрофії Дюшенна і Беккера, вроджена (включаючи, але не обмежуючись цим, міопатію
Бетлема, м'язову дистрофію Улріха, м'язову дистрофію тип Фукуяма, дефіцит інтегрину, м'язову дистрофію з дефіцитом мерозину і Синдром Уокера-Варбурга), дистальні дистрофії (включаючи, але не обмежуючись цим, дистрофії Гауерса-Лайнга, Мієши і Нонака), дистрофії
Емері-Дрейфуса, фасціо-капуло-плечову, дистрофію кінцівок, міотонічну і м'язову дистрофію; вроджену міотонію і вроджену параміотонію; міотубулярну міопатію; центроядерну міопатію; міофібрилярну міопатію, пов'язану з десміном; анемію; синдром Андерсена-Тавіла; немалинову міопатію; хворобу Броді; лізосомні хвороби накопичення, такі як альфа-манозидоз, аспартилглюкозамінурія, бета-манозидоз, цистиноз, хвороба Фарбера, фукозидоз, хвороба
Гоше, галактозіалідоз, гангліозидози (включаючи, але не обмежуючись такими, як варіант АБ, дефіцит активатора, дефіцит бета-галактозидази, хвороба Сандофрі, хвороба Фабрі і хвороба
Шиндлера), порушення накопичення глікогену (включаючи, крім іншого, хворобу Андерсена, хворобу Корі, хворобу Данона, хворобу Форбса, дефіцит глюкозо-6-фосфат-дегідрогенази (глюкозо-6-фосфатний дефект), хворобу Херса, дефіцит лактатдегідрогенази А, хворобу Помпе, хворобу Таруї і хворобу фон Гірке), інфантильну хворобу накопичення вільної сіалової кислоти, дефіцит ліпази лізосомної кислоти, хворобу Краббе, метахроматичну лейкодистрофію, мукополісахаридози (включаючи, але не обмежуючись цим, дефіцит гіалуронідази, синдром
Хантера, синдром Херлера, синдром Херлера-Шейє, синдром Марото-Ламі, синдром Моркіо, синдром Філіппо, синдром Шейє і синдром Слая), муколіпідоз (включаючи, але не обмежуючись цим: Сіалідоз, І-клітинну хворобу, дефіцит муколіпідину 1 і псевдо-Хурлер полідистрофію, яка також називається муколіпідозом ІІ), множинний сульфазний дефіцит, хвороба Німана-Піка, нейрональні цероїдні ліпофусцинози (включаючи, але не обмежуючись такими, як: хвороба
Баттена-Шпільмейєра-Фогта, вроджений дефіцит катепсину О, німецько-сербський пізній інфантильний ліпофусциноз, хвороба Янського-Бельщовського, хвороба Куфса (пізній інфантильний варіант), північна епілепсія, хвороба Сантавуорі-Халтіа і турецький пізній інфантильний варіант), пікнодизостоз, хвороба Саллі, дефіцит сапозину В, хвороба Тай-Саха і хвороба Вольмана; метаболічні розлади, такі як дефіцит деамінази аденозину монофосфату, алкаптонурія, дефіцит карнітину, недостатність карнітин пальмітил трансферази, розлади
Хартнапа, гомоцистинурію, хвороба кленового сиропу (лейциноз), недостатність міофосфорилази, дефіцит фосфофруктокінази, дефіцит фосфогліцераткінази, дефіцит бо фосфогліцератмутази, дефіцит фосфорилази, і хвороба Танжера; атаксію Фрідрейха; атаксію телеангіектазію; атаксію з дефіцитом вітаміну Е; періодичний параліч, такий як хвороба
Гамсторпа і гіпокаліємічний періодичний параліч; мітохондріальні захворювання, такі як синдром Барта, синдром Кірнса-Сейра, мітохондріальна міопатія, мітохондріальна енцефалопатія, лактоацидоз і епізоди, подібні інсульту, міоклонічна епілепсія з рваними м'язовими волокнами і синдром Пірсона; сімейні гіпертрофічні кардіоміопатії; дилатаційні кардіоміопатії; вроджені пороки серця в сімейній системі, такі як сімейне захворювання аортального клапана і нестиснення лівого шлуночка з вродженими пороками серця; сімейні аритмії, такі як кардіодисритмічний періодичний параліч Андерсона, дефекти міжпередсердної перегородки з дефектами АВ провідності, синдром Бругада, дефект провідності серця, катехоламінергічна поліморфна шлуночкова тахікардія і вроджена блокада серця; сімейні судинні розлади, такі як синдром артеріальної звивистості, церебральна аутосомно-домінантна артеріопатія з субкортикальними інфекціями і лейкоенцефалопатія, церебральна рецесивно- домінантна артеріопатія з субкортикальними інфекціями і лейкоенцефалопатія, аневризма аорти сімейного типу, синдром Марфана, синдром Елерса-Данлоса, вроджена арахнодактилія
Білса, синдром Лоїс-Дітца і псевдоксантома еластична; аритмогенну правошлуночкову кардіоміопатію; сімейну аритмогенну дисплазію правого шлуночка; хвороба Наксоса; нестиснення лівого шлуночка; сімейну фібриляцію передсердь; сімейну шлуночкову тахікардію; сімейний синдром Вольфа-Паркінсона-Уайта; синдром довгого інтервалу ОТ; синдром короткого інтервалу ОТ; синдроми слабкості синусового вузла; розлади ліпідного обміну, такі як абеталіпопротеїнемія і дефіцит ліпопротеїнліпази; дефіцит антитрипсину альфа-1; дефіцит фактора згортання крові МІ! (гемофілія А) або дефіцит фактора згортання крові ІХ (гемофілія
В); таласемії; прогресуючу осифікуючу фібродисплазію; ламінопатії; хвороба Хантінгтона; вроджені міастенічні синдроми; синдром Хатчинсона-Гілфорда прогерії; синдром Нунана; вроджену структурну міопатію з диспропорцією м'язових волокон; вроджений фіброз екстраокулярних м'язів; міні-с-трижнева міопатію; гіперчутливість м'язів до рушення (кавеолінопатію); синдром Шварца-Ямпеля; тубулярну агрегатну міопатію; і міопатію з накопиченням зебра-тілець. Приклади складних захворювань включають, але не обмежуються такими, як серцево-судинні захворювання (наприклад, застійна серцева недостатність, інфаркт міокарда, стенокардія, розлади тонусу коронарних артерій, ішемічна хвороба серця,
Зо кардіоміопатія); рак; цукровий діабет; і інфекції. Приклади травматичних пошкоджень включають, але не обмежуються такими, вірусну інфекцію м'язів, розрив м'язів; удар м'язів. У переважних варіантах здійснення варіантний вектор гГААМ або віріон і/або спосіб, розкриті в даному описі, застосовуються для лікування хвороби Фабрі, атаксії Фрідрейха, м'язової дистрофії Дюшенна, м'язової дистрофії Беккера, хвороби Помпе, дефіциту міофосфорилази, м'язової дистрофії плечового поясу (Тасіозсаршопитега! тизсціаг аузігорпу), дистрофії плечового і тазостегнового поясів і міотонічної дистрофії.
У іншому варіанті здійснення варіант капсиду, розкритий в даному описі, містить гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує продукт гена, такий як перераховані тут, але що не обмежується такими: інтерферуюча РНК, довга некодуюча
РНК, коротка некодуюча РНК, антисмислова РНК, аптамер, поліпептид, секретоване антитіло, одноланцюжкове антитіло, домен УНН, розчинний рецептор, афібоді, кнотин, дарпін (САЕКРІП), центурин (а сепішпгіп), шаперон, сайт-специфічна нуклеаза, що забезпечує сайт-специфічний нокдаун функції гена, або модифікована сайт-специфічна нуклеаза, що забезпечує ген- специфічну активацію транскрипції.
Варіант гААМ-варіанта віріону, розкритий в даному описі, містить гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує продукт гена. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою антисмислову РНК, мікроРНК (міРНК, тікМА), РНК з короткою шпилькою (ШРНК, 5пЕМА) або невелику інтерферуючу РНК (5іРНК, 5ікМА) або її попередника або імітатора. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою довгу некодуючу РНК. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою коротку некодуючу
РНК. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою антисмислову РНК. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою аптамер. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою поліпептид. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою секретоване антитіло. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою одноланцюжкове антитіло. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою домен
МНН. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою розчинний рецептор. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою афібоді. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою кнотин. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою дарпін (САРРІіп). У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою центурин (а сепінйгіп). У 60 деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою шаперон. У деяких варіантах здійснення продукт гена являє собою сайт-специфічну нуклеазу, що забезпечує сайт-специфічний нокдаун функції гена.
Цільове використання генного продукту включає такі цілі, але не обмежується такими, як: підвищення рівня фактора в клітині, підвищення рівня фактора в сусідній або видаленій клітині за допомогою секреції фактора, зниження рівня фактора в клітині, або зниження рівня фактора в сусідній або видаленій клітині шляхом секреції фактора. Генний продукт може бути сконструйований так, щоб доповнювати рівень дефектного або відсутнього продукту гена, зменшувати рівень дефектного або відсутнього продукту гена, вводити новий підтримуючий продукт гена, доповнювати рівень підтримуючого продукту гена, зменшувати рівень перешкоджаючого продукту гена, або одночасно зменшувати рівень перешкоджаючого продукту гена і вводити або доповнювати рівень підтримуючого продукту гена.
Генні продукти, що доставляються варіантами ААМ, що обговорюються, можна використати для зміни рівня генних продуктів або активності генних продуктів, прямо або непрямо пов'язаних з м'язовими захворюваннями і травмами. Скелетні, серцеві або гладкі м'язи, трансдуковані варіантами ААМ, що обговорюються, також можуть бути використані як біофабрика для виробництва і виділення терапевтичних білків для лікування захворювань іп їгап5 у віддалених органах. Гени, чиї генні продукти прямо або непрямо пов'язані з генетичними захворюваннями, включають, наприклад, гени, що кодують будь-який з наступних генних продуктів: дистрофін, включаючи міні- і мікродистрофіни (ОМО; е.4. СепВапк Ассезвіоп Митрег МР 003997.1; 5ЕО ІЮ
МО:64); титин (ТТН); титин-кеп (ШЩіп сар, (ТСАР), а-саркоглікан (БИаСА), В-саркоглікан (52СВ), у- саркоглікан (50400) або б-саркоглікан (502020); альфа-1-антитрипсин (А1-АТ); важкий ланцюг міозину 6 (МУНб); важкий ланцюг міозину 7 (МУН?7); важкий ланцюг міозину 11 (МУНІ1); легкий ланцюг міозину 2 (МІ2); легкий ланцюг міозину З (МІ 3); кіназа легкого ланцюга міозину 2 (ММ К2); міозин-зв'язувальний білок С (МУВРСЗ); десмін (ОЕ5); динамін 2 (ОММ2); ламінін «- (ГАМАЗ2); ламін А/С (І ММА); ламін В (І ММВ); рецептор ламіну В (ІВЕ); дисферлін (ОУ5БЕ); емерин (ЕМО); інсулін; фактори згортання крові, включаючи, але не обмежуючись такими: фактор МП ї фактор ІХ; еритропоетин (ЕПО, ЕРО); ліпопротеїнліпази (І РІ); саркоплазматичний ретикулум Са2е - АТФаза (ЗЕВСАЗ2А), кальцій-зв'язувальний білок 5100 Ат (5100А1); міотубуляр (МТМ); протеїнкіназа ОМІ (ОМРК; є.д. СепВапк Ассевзвзіоп Митрег МО 0097841; 5ЕО ІЮ МО:65); глікогенфосфорилаза І (РМСІ); глікогенфосфорилаза, зв'язана з м'язами (РМОМ; е.9. СепВапКк Ассезвіоп Митрег МР 005600.1; 5ЕО І МО:66); глікогенсинтаза 1 (351); глікогенсинтаза 2 (спу52)а-галактозидаза А (СЧбА; е.9д. СепВапк Ассевзіоп Митрег
МР 000160.1; 5ЕО ІО МО:67); а-М-ацетилгалактозамінідаза (МАСА); кисла а-глюкозидаза (САА; е.9. СепВапк Ассезвіоп Митрег МР 000143.2; 5ЕО 10 МО:68), сфінгомієліназа-фосфодіестераза 1 (ЗМРОТ); лізосомно-кисла ліпаза (ІРА); ланцюг колагену типу І «1 (СОЇ 1А1); ланцюг колагену типу І а2 (СОЇ ТА2); ланцюг колагену типу ПІ а (СОЇ ЗАТ); ланцюг колагену типу М а! (СОЇ 5АТ1); ланцюг колагену типу М а2 (СОЇ 5А2); ланцюг колагену типу МІ «1 (СОЇ 6А1); ланцюг колагену типу МІ а2 (СОЇ 6А2); ланцюг колагену типу МІ азЗ (СОЇ 6АЗ); проколаген-лізин-2-оксоглутарат-5- діоксигеназа (РІ О01); лізосомно-кисла ліпаза (ІРА); фратаксин (ЕХМ; є.4. СепВапк Ассезвіоп
Митбрег МР 000135.2; 5ЕО ІЮО МО:69); міостатин (МСТН); Д-М-ацетилгексозамінідаза А (НЕХА);
В-М-ацетилгексозамінідаза В (НЕХВ); ДВ-глюкоцереброзидаза (СВА); аденозинмонофосфат- деаміназа 1 (АМРОТ); р-глобін (НВВ); ідуронідаза (ША); ідуронат-2-сульфат (105); тропонін 1 (ТММІЗ); тропонін Т2 (ТММТ2); тропонін С (ТММС1); тропоміозин 1 (ТРМІ); тропоміозин З (ТРМ3У); М-ацетил-а-глюкозамінідаза (МАСІ ШО); М-сульфоглюкозамінсульфогідролаза (50251); гепаран-а-глюкозамінід. М-ацетилтрансфераза (НЕЗМАТ); інтегрин « 7 (ІСТА?7); інтегрин а 9 (ІСТА9); глюкозамін (М-ацетил)-б6-сульфатаза (С2М5); галактозамін (М-ацетил)-6-сульфатаза (САМ); В-галактозидаза (СІ В1); ДВ-глюкуронідаза (С2ОББВ); гіалуроноглюкозамінідаза 1 (НУАЇ 1); кисла церамідаза (АБ5АНІ); галактозилцермідаза (СА С); катепсин А (СТ5А); катепсин
О (СТ5А); катепсин К (СТУК); СМ2 гангліозидний активатор (йМ2А); арилсульфатаза А (АВ5ЗА); арилсульфатаза В (АВ5В); формілгліцин-генеруючий фермент (ЗОМЕТ1); нейрамінідаза 1 (МЕШО1Т); | М-ацетилглюкозамін-1-фосфаттрансфераза с (СМРТА); М-ацетилглюкозамін-1- фосфаттрансфераза В (СМРТВ); М-ацетилглюкозамін-1-фосфаттрансфераза у (СМРТС); муколіпін-ї (МСОЇМ1); МРС внутрішньоклітинний транспортер 1 (МРС1) МРС внутрішньоклітинний транспортер 2 (МРО2); цероїдний ліпофусциноз 5 (СІ М5); цероїдний ліпофусциноз 6 (СІ Мб); цероїдний ліпофусциноз 8 (СІ М8); пальмітоїл протеїнтіоестераза 1 (РРТІ); трипептидилпептидаза 1 (ТРРІ); батенін (СІ М3); ОМА)-білок сімейства білків теплового шоку 40 член С5 (ОМАУС5); білок 8, який містить домен суперсімейства основних посередників (ген МЕ5О8); манозидаза с клас 2В член 1 (МАМ2В1І); манозидаза В (МАМВА); аспартилглюкозамінідаза (АСА); с-І -фукозидаза (ЕОСАТ); цистинозин, лізосомний транспортер 60 цистеїну (СТБ); сіалін; сімейство розчинних носіїв 2, член 10 (5І С2А10); сімейство розчинних носіїв 17, член 5 (5 С17А5); сімейство розчинних носіїв б, член 19 (5ІСбА19); сімейство розчинних носіїв 22, член 5 (5ІС22А5); сімейство розчинних носіїв 37, член 4 (5ІС37А4); зв'язаний с лізосомами мембранний білок 2 (І АМР2); потенціал-керований натрієвий канал, «а субодиниця 4 (5СМ4А); потенціал-керований натрієвий канал, В субодиниця 4 (5СМА4В); потенціал-керований натрієвий канал, а« субодиниця 5 (5СМ5А); потенціал-керований натрієвий канал, «є субодиниця 4 (5СМ4А); потенціал-ксерований кальцієвий канал, субодиниця аїс (САСМА1С); потенціал-серований кальцієвий канал, субодиниця а15 (САСМА15); фосфогліцераткіназа 1 (РОКІ); фосфогліцерат мутаза 2 (РОАМ2); аміло-а-глюкозидаза, 4-а- глюканотрансфераза (АС); потенціал-керований калієвий канал, І5К-асоційоване підсімейство, член 1 (КСМЕТ); потенціал-керований калієвий канал, ІЗК-асоційоване підсімейство, член 2 (КСМЕ2); потенціал-керований калієвий канал, підсімейство у), член 2 (КСМУг2); потенціал- керований калієвий канал, підсімейство .), член 5 (КСМУ5); потенціал-керований калієвий канал, підсімейство Н, член 2 (КСМН2г); потенціал-керований калієвий канал, КОТ-подібне підсімейство, член 1 (КСМО1); керований циклічними нуклеотидами гіперполяризаційно- активований канал 4 (НСМ4); потенціал-серований хлоридом канал 1 (СІСМІ1); карнітин пальмітоїлтрансфераза 1А (СРТ1А); ріанодиновий рецептор 1 (ВУ); ріанодиновий рецептор 2 (ВУВ2); мостовий інтегратор 1 (ВІМ1); І АВС ксилозил- і глюкуронілтрансфераза 1 (І АВСЕТ1); стикувальний білок 7 (0ОК?7); фукутин (ЕКТМ); фукутин-зв'язаний білок (ЕКАР); селенопротеїн М (ЗЕГЕМОМ); білок О-манозилтрансферази 1 (РОМТ); білок О-манозилтрансферази 2 (РОМТ2); протеїн О-зв'язана маноза М-ацетилглюкозамінілтрансфераза 1 (РОМОМТІ); протеїн О-зв'язана маноза М-ацетилглюкозамінілтрансфераза 2 (РОМОаМТ2); протеїн-О-манозо-кіназа (РОМК); домен, який містить ізопреноїдсинтазу (ЗРО); плектин (РІ ЕС); холінергічний рецептор, нікотинова епсилон-субодиниця (СНАМЕ); холін О-ацетилтрансфераза (СНАТ); холінкіназа ВД (СНКВ); колагеноподібна "хвостова" субодиниця асиметрічної ацетилхолінестерази (СОЇ 0); зв'язаний з рецептором білок синапсу (ВНАРБМ); білок 1 "Чошг апа а найм дотаїпв" (ЕНІ-1); Д- 1,4-глюкуронілтрансфераза 1 (В4САТІ1); 0/0 Д-1,3-М-ацетилгалактозамінілтрансфераза 2 (ВЗаАЇІ М12); дистроглікан 1 (АС); трансмембранний білок 5 (ТМЕМ5); трансмембранний білок 43 (ТМЕМА43); 5ЕСІ5-зв'язувальний білок 2 (БЕСІЗВР2); глюкозамін (ШОР-М-ацетил)-2- епімераза/М-ацетилманозамінакіназа (МЕ); аноктамін 5 (АМО5); білок 1, який містить гнучкий
Зо шарнірний домен структурної підтримки хромосом (5МОСНОТ1); лактатдегідрогеназа А (ІДНА); лактатдегідрогеназа В (НОВ); кальпаїн З (САРМ3З); кавеолін З (САМ3З); білок 32, який містить тристоронній мотив 32 (ТАВІМ32); білок цинкового пальця типу ССНС, що зв'язує нуклеїнову кислоту (СМВР); небулін (МЕВ); актин, а1, скелетних м'язів (АСТАТ); актин, «1, серцевих м'язів (АСТС1); актинін а2 (АСТМ2); полі (А)-зв'язувальний ядерний білок 1 (РАВРМІ); білок 3, що містить домен І ЕМ (ГЕМОЗ3); цинкова металопротеїназа 5ТЕ24 (7МРБЗТЕ24); білок перенесення мікросомального тригліцериду (МТТР); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця а! (СНАМАТ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця 02 (СНЕАМАЗ2); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця 3 (СНЕАМАЗ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця а4 (СНАМА4); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця са5 (СНЕАМАб5); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця саб(СНАМАб); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця «а7 (СНАМА?7); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця ав (СНАМАВ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця 09 (СНЕАМАЗ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця «10 (СНАМАТ10); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця ВІ (СНЕАМВІ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця рВ2 (СНАМВ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця ВЗ (СНАМВЗ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця В4 (СНЕАМВ4); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця у (СНАМСТ); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця 2 (СНЕАМО); холінергічний нікотиновий рецептор, субодиниця « (СНАМЕЇТ); підсімейство А касети зв'язування АТФ, член 1 (АВСАТ); підсімейство С касети зв'язування АТФ, член 6 (АВССб); підсімейство А касети
БО зв'язування АТФ, член 9 (АВСС9); підсімейство Ю касети зв'язування АТФ, член 1 (АВСО1);
АТФаза 1, що транспортує Са:ьсаркоплазматичного/оендоплазматичного ретикулуму (АТРА2АТ);
АТМ серин-треонін кіназа (АТМ); білок а токоферолтрансферази (ТТРА); сімейство кінезинів, член 21А (КІЕ21А); білок раїгеад-ІКе потеоброх га (РНОХ2А); гепарансульфат протеоглікан 2 (НБРО2); молекула стромальної взаємодії 1 (ТІМ); білок поїспй 1 (МОТСНІ); білок поїсн З (МОТСНУ); дистробревін а (ДТНА); протеїнкіназа АМР-активована, некаталітична у2 (РАКАСг); багатий на цистеїн і гліцин білок З (С5АРЗ); вінікулін (МС); міозенін 2 (Муо72); міопаладин (МУРМ); джанктофілін, (ипсіорніййп) 2 (УРН2); фосфоламбан (РІМ); кальретикулін З (СА! ВЗ); нексилін Е-актин-зв'язувальний білок (МЕХМ); білок 3, зв'язування домену ГІМ З (ГО083); білок відсутності очей 4 (єуєз арзепі 4 (ЕУА4)); хантингтин (НТТ); рецептор андрогену (АК); білок 60 тирозинфосфат нерецепторного типу 11 (ргоїєїп їугозіпе рпозрпаїє поп-тесеріог їуре 11
(РТРМІ11); з'єдувальний плакоглобін (ОР); десмоплакін (О5Р); плакофілін 2 (РКР2); десмоглеїн 2 (0502); десмоколін 2 (0502); катенін «3 (СТММАЗ); МК2 гомеобокс, білок 5 (МКХ2-5); анкорний білок А-кінази 9 (АКАРОУ); анкорний білок А-кінази 10 (АКАРІ10); поліпептид 2 інгібування активності білка, що зв'язує гуанін-нуклеотид (дйапіпе писіеоїіде-Біпаїну ргоївіп а- іппірійіпу асіїмпу роїуреріїде 2 (СМА12)); анкірин 2 (АМК2); синтрофін с-1 (МТА); кальмодулін 1 (САЇ М1); кальмодулін 2 (СА М2); НТВА серинова пептидаза 1 (НТВАТ); фибрилін 1 (ЕВМТІ); фибрилін 2 (ЕВМ2); ксилозилтрансфераза 1 (ХМ Т1); ксилозилтрансфераза 2 (ХУ! 12); тафазин (ТАЗ); гомогентизат 1,2-діоксигенази (НОЮ); глюкозо-6-фосфатазна каталітична субодиниця (а6РС); 1,4-альфа-глюкановий фермент 1 (С2ВЕ1); фосфофруктокіназа, м'язи (РЕКМ); регуляторна субодиниця фосфорилазної кінази альфа 1 (РНКАТ); регуляторна субодиниця фосфорилазної кінази альфа 2 (РНКА2); регуляторна субодиниця бета фосфорилазної кінази (РНКВ); каталітична субодиниця фосфорилазної кінази гамма 2 (РНКОа2); фосфогліцерат мутаза 2 (РОАМ2); цистатіон-бета-синтаза (СВ5); метилентетрагідрофолатредуктаза (МТНЕБ); бБ-метилтетрагідрофолат-гомоцистеїнметилтрансфераза (МТК); Б-метилтетрагідрофолат- гомоцистеїнметилтрансфераза-редуктаза (МТАР); метилмалонова ацидурія і гомоцистинурія типу срБІЮ (ММАБНОС); мітохондріальна ДНК, включаючи, але не обмежуючись такими як: мітохондріально кодовану МАОН: центральну субодиницю 1 убіхіноноксидоредуктази (МТ-МОТ1); мітохондріально кодовану МАЮН: основну субодиницю 5 убіхінон-оксидоредуктази (МТ-МО5); мітохондріально кодовану тРНК глутамінової кислоти (МТІТ-ТЕ); мітохондріально кодовану тРНК гістадину (МІТ-ТН); мітохондріально кодовану тРНК лейцину 1 (МТІ-Т11); мітохондріально кодовану тРНК лізину (МТ-ТК); мітохондріально кодовану тРНК серину 1 (МТ-Т51); мітохондріально кодовану тРНК валіну (МТ-ТУ); активовану мітогеном протеїнкіназу кіназу 1 (МАРОК); протоонкоген В-Наї зв'язану серин/греонінкіназу (ВВАБК); протоонкоген гаї-1 зв'язану серин/гтреонінкіназу (ВАЕ1); фактори росту, включаючи, але не обмежуючись такими: фактор роста інсуліну 1 (І2а4Б-1); трансформуючий фактор росту ВЗ (ТОЕВЗ3); рецептор трансформуючого фактора росту В, тип І (ТОЕВР1); рецептор трансформуючого фактора росту
В, тип І (ТаЕВАг), фактор росту фібробластів 2 (ЕСЕ2), фактор роста фібробластів 4 (ЕСЕ), фактор росту ендотелія судин А (МЕСІЕ-А), фактор росту ендотелія судин В (МЕСЕ-В); фактор росту ендотелія судин С (МЕСЕ-С), фактор росту ендотелія судин Ю (МЕСЕ-О), рецептор 1
Зо фактора росту ендотелія судин (МЕСЕНІ) і рецептор 2 фактора росту ендотелія судин (МЕСЕНЗ2); інтерлейкіни; імуноадгезини; цитокіни; і антитіла.
У переважних варіантах здійснення генні продукти, що доставляються варіантами ААМ, що обговорюються, вибирають з альфа-галактозидази А (СА), фратаксину (ЕХМ), дистрофіну (ОМО), кислої альфа-глюкозидази (ЗАА) і глікогенфосфорилази м'язів (РУСМ). У деяких переважних варіантах здійснення варіант ААМ, що розглядається, містить сегмент нуклеїнової кислоти, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує (ї) поліпептид СА, що містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої в ЗЕО ІЮ МО: 67; (ії) поліпептид
ЕХМ, що містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої в ЗЕО ІЮ МО: 69; (ії) поліпептид ОМО, що включає або складається з функціонального фрагмента (наприклад, міні- або мікро-дистрофіну, що переважно містить інтактний актин-зв'язувальний домен, а також щонайменше 4 з 24 спектрин-подібних повторів і дистроглікан-зв'язувальний домен) амінокислотної послідовності, представленої в 5ХЕО ІЮ МО: 64; (ім) поліпептид САА, що містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої в 5ЕО ІЮО МО: 68, (м) поліпептид
РУСМ, що містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої в ЗЕО ІЮ
МО:66, причому (мі) або (м) амінокислотні послідовності щонайменше на 80 95, щонайменше 85 965, щонайменше 90 95 або, щонайменше 95 95 ідентичні будь-якій з «ФЕО ІЮ МО: 64 і 66-69.
У іншому переважному варіанті здійснення варіант ААМ, що розглядається, містить трансген, що кодує інтерферуючу РНК, наприклад, антисмислову РНК, тіРНК, 5пРНК або 5ігРНК, що знижують експресію ОМРК. У деяких аспектах інтерферуюча РНК знижує експресію ОМРК, що кодується нуклеїновою кислотою, що має нуклеотидну послідовність, вказану в ЗЕО ІЮО МО: 65, або послідовність, щонайменше на 80 95, щонайменше на 85 95, щонайменше на 90 95, або при мінімум на 95 95 ідентичну ЕС ІО МО: 65.
Гени, продукти яких індукують або сприяють апоптозу, називаються тут "проапоптотичними генами", а продукти цих генів (мРНК; білок) називаються "проапоптотичними генними продуктами". Проапоптотичні мішені включають, наприклад, продукти гена Вах; продукти гена
Віа; продукти гена Вак; продукти гена Вак; продукти гена Ваа; Всі-2; ВсІ-Х1. Антиапоптотичні генні продукти включають Х-зв'язаний інгібітор апоптозу.
Гени, генні продукти яких індукують або стимулюють ангіогенез, називаються тут "проангіогенними генами", а продукти цих генів (мРНК; білок) називаються "проангіогенними бо генними продуктами". Проангіогенні мішені включають, наприклад, фактор росту ендотелія судин (МЕСЕа, МЕСЕБ, МЕСЕс, МЕСГа); рецептор 1 фактора росту ендотелія судин (МЕСЕКТ); рецептор судинного ендотеліального фактора росту 2 (МЕСЕКЗ2); зв'язану з Ет5 тирозинкіназу 1 (ЕН); фактор росту плаценти (РОЕ); отриманий з тромбоцитів фактор росту (РОСРБ); ангіопоетини; 5опіс педдепод. Гени, генні продукти яких інгібують ангіогенез, називаються тут "антиангіогенними генами", а продукти цих генів (мРНК; білок) називаються "антиангіогенними генними продуктами". Антиангіогенні генні продукти включають ендостатин; тумстатин (штвеїаціп); ангіостатин; фактор, отриманий з пігментного епітелію (РЕОР), і злиті білки або антитіла, специфічні для проангіогенних мішеней і/або їх рецепторів, наприклад, МЕСБ- специфічне антитіло Амазіп М і інш.
Гени, генні продукти яких функціонують як імуномодулятори, наприклад, фактори комплементу, 01І- подібні рецептори, називаються "імуномодулюючими генами". Типові імуномодулюючі гени включають цитокіни, хемокіни і злиті білки або антитіла, специфічні для таких і/або їх рецепторів, наприклад, злитий білок анти-ІЇ-б6 Віопасері"М, специфічний до фактора комплементу Н, антитіло Іатратіитаб і інш. гени, генні продукти яких функціонують як фактори захисту м'язів, наприклад, інсулін-подібний фактор росту 1 (ІСЕ-1); трансформуючий ростовий фактор В (ТОЕ?); фактор росту фібробластів (БОБ).
У деяких випадках генний продукт, що становить інтерес, являє собою сайт-специфічну ендонуклеазу, що забезпечує сайт-специфічний нокдаун функції гена, наприклад, ендонуклеазу, що вибиває алель, пов'язаний із захворюванням м'язів. Наприклад, у випадку, якщо домінантний алель кодує дефектну копію гена, який, будучи геном дикого типу, являє собою м'язовий структурний білок і/або забезпечує нормальну функцію м'язів, то така сайт-специфічна ендонуклеаза може бути націлена на дефектний алель і, таким чином, вибивати дефектний алель.
На доповнення до вибиття/нейтралізації дефектного алеля, сайт-специфічна нуклеаза також може бути використана для стимуляції гомологічної рекомбінації з донорної ДНК, що кодує функціональну копію білка, того, який кодується дефектним алелем. Таким чином, наприклад, запропонований віріон гААМ може використовуватися для доставки як сайт-специфічної ендонуклеази, що вибиває дефектний алель, так і для доставки функціональної копії дефектного алеля, що приводить до відновлення роботи дефектного алеля, тим самим
Зо забезпечуючи виробництво функціонального м'язового білка (такого, як, наприклад, функціональний ламін А/С, функціональний фібрилін, функціональний колаген типу Мі і т.д.). У деяких варіантах здійснення віріон гААМ, розкритий в даному описі, містить гетерологічну нуклеотидну послідовність, що кодує сайт-специфічну ендонуклеазу; і гетерологічну нуклеотидну послідовність, що кодує функціональну копію дефектного алеля, де функціональна копія кодує функціональний м'язовий білок. Функціональні м'язові білки включають, наприклад, ламін А/С, фібрилін 1, СОЇ 6А1, СОЇ 6А2, СОЇ бАЗ і тому подібні.
Сайт-специфічні ендонуклеази, придатні для використання, включають, наприклад, мегануклеази; нуклеази з цинковими пальцями (2ЕМ); активатор-подібні ефекторні нуклеази транскрипції (ТАСЕМ); ії кластеризовані регулярно розташовані короткі паліндромні повтори/СКІЗРЕ-асоційовані (Са5), причому такі сайт-специфічні ендонуклеази не зустрічаються в дикій природі і є модифікованими для націлення на специфічний ген. Такі сайт- специфічні нуклеази можуть бути сконструйовані для внесення розрізу в певних місцях геному з подальшим відновленням розриву шляхом негомологічної рекомбінації з інсерцією або делецією кількох нуклеотидів. Такі сайт-специфічні ендонуклеази (що також називаються "інделами", "ІМОЕЇ 5") змінюють рамку зчитування білка, ефективно вибиваючи ген. Див., наприклад, патентну публікацію США Мо 2011/0301073.
У деяких варіантах розкритого тут варіанта вектора гААМ нуклеотидна послідовність, що кодує генний продукт, що становить інтерес, функціонально зв'язана з конститутивним промотором. Придатні конститутивні промотори включають, наприклад, цитомегаловірусний промотор (СМУМ) (Зйцп5Кі еї а. (1985) Чоигпа! ої Мігоюду 55 (2): 431-441), ранній енхансер
СММ/промотор Вр-актину курки (СВА)/интрон ВД-глобіну кролика (САС) (Міуалакі еї аї. еї аїЇ. (1989)
Сепе 79 (2): 269-277, СВ5В (ШЧасобзоп єї а). (2006) МоїІесшаг ТНегару 13 (6): 1074-1084), промотор фактора елонгації 1« людини (ЕКТо) (Кіт єї аї!. (1990) Сепе 91 (2): 217-223), промотор фосфогліцераткінази (РОК) людини (біпдег-бЗат еї а). (1984) Сепе 32 (3): 409-417, мітохондріальний промотор важкого ланцюга (І осдегіо еї аї. (2012) РМАБЗ 109 (17): 6513-6518), промотор убіквітину (М/Шй еї аї. (1990) РЕВ5 І ецег5 261: 101-105). В інших варіантах здійснення нуклеотидна послідовність, що кодує генний продукт, що становить інтерес, функціонально зв'язана з індуцибельним промотором. У деяких випадках нуклеотидна послідовність, що кодує генний продукт, що становить інтерес, функціонально зв'язана з регуляторним елементом, 60 специфічним для тканини або типу клітини. Наприклад, в деяких випадках нуклеотидна послідовність, що кодує генний продукт, що становить інтерес, функціонально зв'язана з м'язово-специфічним регуляторним елементом (наприклад, специфічним для серця промотором або специфічним для скелетних м'язів промотором), наприклад, регуляторним елементом, що забезпечує селективну експресію функціонально зв'язаного гена в м'язовій клітині. Придатні специфічні для м'язів регуляторні елементи включають, наприклад, промотор а-актину скелетних м'язів (Мизсаї апа Кеде5 (1987) Мої. СеїІ. Віої. 7: 4089-4099); а-актиновий промотор серцевого м'яза (Міпіу апа Кедез (1986) Мої. СеїІ. Вісі. 6: 2125-2136); а-актиновий промотор гладких м'язів (МакКапо еї аї. (1991) Сепе 99: 285-289); а-актиновий промотор гладких м'язів судин (Кеосдп еї а!. (1999) Сепе ТНегару 6 (4): 616-628); промотор м'язовой креатинкінази (Вапей еї аї. (1996) Сеї! Тгапз5ріапіайноп 5 (3): 411-419); промотори легкого ланцюга міозину 1 і легкого ланцюга міозину З (Зеїдеї и Агтоїа (1989) У. Віої. Снет. 264 (27): 16109-16117); промотор легкого ланцюга міозину 2м (МІ Сгм) (Зи єї аї. (2004) РМАБ5 101 (46): 16280-16285); промотор міогенного фактора 5 (Муї5) (Еціітакі еї аї!. (2004) дошгпаї ої Віоіодіса! Спетівігу 289 (11): 7399- 7412); промотор міогенного диференціювання 1 (Муод1) (7іпду еї аї. (1994) Мисівїс Асіав5
Везеагсі 22 (12): 2234-2241); промотор міогеніну (Муод) (Заї!тіпеп еї аї. (1991) Чоштаї ої Сеї
Віоіоду 115 (4): 905-917); промотор раїгед рох депе 7 (Рах7) (Миттапп еї аї. (2000) Віої Снет. 381 (4): 331-335); промотор раїгед їКе потеодотаїп З (Ріїх3) (Соціоп еї аї. (2007) уоштаї ої
Віоіодіса! Спетівігу 282: 33192-393200); промотор МНСОК? (Зама еї аї. (2007) Мої. Тег. 15 (2): 320-329); промотор МСК/5М40 (ТакКезнійа єї а!. (2007) ТаКевзніа еї а!. (2007) Іпіегпайопаї! дошгпаї ої Моїесціаг Медісіпе 19:309-315); промотор С5-12 (Ії єї а. (1999) Маїшге Віоїесппоіоду 17: 241- 245); енхансери/промотори подвійного и потрійного тандему МОСК (Улапад еї аї. (2008) Сепе
Тпегару 15: 1489-1499); промотор важкого ланцюга міозину 7 (МУН?); (Івакі та ін. (2104) Р О5
ОМЕ 9 (4): е88610); промотор важкого ланцюга міозину 6 (МУНб) (Расак еї аї. (2008) Сепеї.
Массіпе5 Тег. 6:13); промотор серцевого тропоніну Т (ТММТ2) (Рагга еї аї. (1998) 9. Мої. СеїЇ
Сагаїої. 30 (6): 1247-53); промотор а-тропоміозину (Неїїтап еї а!. (1986), МоіІесціаг апа Сеїїшаг
Віоіоду 6 (11): 3582-3595); промотор серцевого тропоніну С (ТММС1) (5спеїег еї аї. (1990) доштаї ої Віоіодіса! Спетівігу 34 (5): 21247-21253); промотор серцевого міозин-зв'язувального білка С (й єї аї. (2013) РІ о5 ОМЕ 8 (7): е69671); промотор серцевого тропоніну І (ТММІЗ) (Внаумзаг еї аї. (1996) Сепотісв 35 (1): 11-23); промотор десміну (Іі єї аї. (1991) Чдоштпаї ої Віоіодіса! Спетівігу 10 (5): 6562-6570); промотор натрієво-кальцієвого обмінника (МСХ1) (5спеїег еї аї. (1997)
Уоитаї! ої Віоіодісаї Спетівігу 273 (13): 7643-7649); промотор атріального натрійуретичного фактора (ЮигосНег єї аї. (1996), МоіІесшаг апа Сеїїшаг Віоіоду 16 (9): 4648-4655); і промотор
ЗМ2га (Кетр в! аї. (1995) Віоспетіса! доигтаї 310 (3): 1037-1043.
З метою розкриття винаходу, розкриття в даному описі надає ізольовані нуклеїнові кислоти, що містять нуклеотидні послідовності, що кодують варіанти капсидних білків ААМ, як описано вище. Ізольована нуклеїнова кислота може являти собою вектор ААМ, наприклад, рекомбінантний вектор ААМ.
Розкриття в даному описі також надає спосіб лікування м'язового захворювання, що включає введення індивідууму, який потребує цього, ефективної кількості варіанта віріону гААМ, що містить трансген, що становить інтерес, як описано і розкрито вище в даному описі.
Фахівець у даній галузі техніки зможе легко визначити ефективну кількість віріону ГААМ, що обговорюється, і те, що при лікуванні розладу застосовується тестування зміни однієї або кількох функціональних або анатомічних параметрів, такийх, як, наприклад, біопсія м'язів з подальшою імуногістохімією, відбір проб сироватки з подальшим тестуванням ІФА/ЕГІ5А або аналізом активності ферментів, тест ходьби, тест на максимальне споживання кисню, аналіз біомаркерів фракції викиду лівого шлуночка, враховується кінцевий систолічний об'єм лівого шлуночка, ручна динамометрія, максимальне підняття ваги, тимчасові функціональні тести, показник рухової моторики Хаммерсміта (Ше Натіпегетіїй Моїог АБіїйу зсоге), розрахунок часу підняття з підлоги або 9 Ноїе Ред Теві.
Необмежувальні способи оцінки м'язової функції і її змін включають оцінку тесту ходьби, пікового максимального споживання кисню, аналізу біомаркерів, фракції викиду лівого шлуночка, кінцевого систолічного об'єму лівого шлуночка, оцінки по шкалі Віньоса, тестів тимчасової функції, показника рухової моторики Хаммерсміта, розрахунок часу підняття з підлоги, шкали вимірювання рухової функції (Моїог Рипсіоп Меазиге 5саїє), амбулаторну оцінку
Мой Заг (Мопйп егаг Атриїагу Аззез5тепі), результати тесту на 9 лунок (9 Ноїеє Ред Те5)) або тесту дитячої нервово-м'язової недостатності дитячої лікарні Філадельфії (Спіїдгеп'є Нозрйцаї! ої
РПйаае!рніа Іптапі Теві ої Мештотизсшіаг Оізогаегв).
У деяких варіантах здійснення ефективна кількість віріону гААМ, що обговорюється, приводить до зниження швидкості втрати м'язової функції, анатомічної цілісності м'язів або 60 м'язової маси, наприклад, до 2-кратного, 3- кратного, 4- кратного або 5-кратного або більше зниження швидкості втрати і, таким чином, зниження швидкості прогресування захворювання, наприклад, до 10-кратного зниження швидкості втрати і, таким чином, 10-кратного зменшення в швидкості прогресування захворювання. У деяких варіантах здійснення ефективна кількість вірону гААМ суб'єкта приводить до збільшення м'язової функції, збільшення м'язової сили, збільшення м'язової маси і/або поліпшення анатомічної цілісності м'язів або показників біомаркерів, наприклад, спричиняє 2-кратне, 3-кратне, 4-кратне або 5-кратне поліпшення або більше м'язової функції, м'язової сили, м'язової маси і/або поліпшення анатомічної цілісності м'язів або біомаркерів, наприклад, 10-кратне поліпшення м'язової функції, м'язової сили, м'язової маси і/або поліпшення анатомічної цілісності м'язів або біомаркерів. Як буде зрозуміло фахівцеві в даній галузі техніки, доза, необхідна для досягнення бажаного ефекту лікування, звичайно знаходиться в діапазоні від 1 х 108 до приблизно 1 х 1015 рекомбінантних віріонів, які звичайно називаються фахівцем в даній галузі техніки як 1 х 108 до приблизно 1 х 1016 "векторних геномів" і переважно знаходиться в діапазоні від приблизно 1 х 10" до приблизно 1 х 10715 рекомбінантних віріонів.
Віріон гААМ, що обговорюється, може бути доставлений у скелетний м'яз шляхом внутрішньосудинного (внутрішньовенного або внутрішньоартеріального) введення, внутрішньочеревинного введення, перфузії кінцівок і/або прямої внутрішньом'язової ін'єкції або будь-яким іншим зручним способом або шляхом введення, що приводить до доставки віріону
ГААМ у скелетний м'яз. Віріон гААМ може бути доставлений в серцевий м'яз шляхом внутрішньосудинного (внутрішньовенного або внутрішньоартеріального) введення, прямої ін'єкції в серці (в ліве передсердя, праве передсердя, правий шлуночок і/або перегородку), антеградної або ретроградной інфузії в коронарну артерію (через ліву передню низхідну або лівосторонню о коронарну артерію), рециркуляцією, інтраперикарді«альною ін'єкцією, трансендокардіальною ін'єкцією або будь-яким іншим зручним способом або шляхом введення, що приводить до доставки віріону ГААМ в серцевий м'яз. У переважному варіанті здійснення винаходу віріон гААМ, що обговорюється, доставляється в скелетний і/або серцевий м'яз шляхом системного внутрішньовенного введення. При введенні за допомогою внутрішньовенної ін'єкції віріон ГААМ, що обговорюється, здатний переміщуватися по кровоносній системі і більш ефективно трансдукувати м'язові клітини порівняно зі здатністю віріону ААМ дикого типу або віріону ААМ, що містить відповідний батьківський капсидний білок ААМ.
Варіант капсидного білка, розкритий в даному описі, ізолюють, наприклад, очищують. У деяких варіантах здійснення варіант капсидного білка, розкритого в даному описі, включений у вектор ААМ або в рекомбінантний віріон ААМ (ГААМ). У інших варіантах здійснення такі вектори варіанта ААМ і/або віріони варіанта ААМ використовуються в способі лікування м'язового захворювання серцевих або скелетних м'язів приматів іп мімо або ех мімо.
Розкриття в даному описі додатково надає клітини-хазяїни, такі як, без обмеження такими, ізольовані (генетично модифіковані) клітини-хазяїні, що містять вказану нуклеїнову кислоту.
Клітина-хазяїн, згідно з винаходом, розкрита в даному описі, може бути ізольованою клітиною, такою як клітина, отримана з культури клітин іп міо. Така клітина-хазяїн застосовна для отримання варіанта віріону гААМ, що обговорюється, як описано тут. У одному варіанті здійснення така клітина-хазяїн стабільно генетично модифікована нуклеїновою кислотою. У інших варіантах здійснення клітина-хазяїн тимчасово генетично модифікована нуклеїновою кислотою. Таку нуклеїнову кислоту стабільно або тимчасово вводять в клітину-хазяїна, використовуючи вже відомі методи, що включають, але такими не обмежені, методи зі списку: електропорація, осадження фосфатом кальцію, ліпосом-опосередкована трансфекція і тому подібне. Для стабільної трансформації нуклеїнова кислота звичайно додатково включає селектований маркер, наприклад, будь-який з кількох добре відомих селектованих маркерів, таких як стійкість до неоміцину і тому подібне. Таку клітину-хазяїна отримують введенням нуклеїнової кислоти в будь-яку з множини клітин, наприклад, з клітин ссавців, включаючи, наприклад, мишачі клітини і клітини приматів (наприклад, клітини людини). Типові клітини ссавців включають, але не обмежуються такими, первинні клітини і клітинні лінії, де ілюстративні клітинні лінії включають, але не обмежуються такими, клітини НЕК293, клітини
НЕК293Т, клітини СО5, клітини Неїа, клітини Мего, фібробласти миші 373, СЗНІ1011/2 фібробласту, клітини СНО і тому подібні. Типові клітини-хазяїни включають, але не обмежуються такими, клітини Неї а (наприклад, Атегісап Туре Сийиге СоПесіоп (АТС) Мо.
СОЇ -2), клітини СНО (наприклад, АТСС Мо СНІ 9618, ССІ 61, СІ 9096), клітини 293 (наприклад,
АТОСС Мо. СВІ -1573), клітини Мего, клітини МІН З3Т3 (наприклад, АТС Мо СКІ -1658), клітини
Ний-7, клітини ВНК (наприклад, АТСС Мо ССІ 10), клітини РС12 (АТСС Мо СКІ 1721), клітини
СО5, Клітини СО5-7 (АТСС Мо СКІ 1651), клітини КАТІ, І -клітини миші (АТСС Мо СС 1.3), бо клітини ембріональної нирки людини (НЕК293) (АТСС Мо СНІ 1573), клітини НІ Нерсае і тому подібне. Клітина-хазяїн також може бути отримана з використанням бакуловірусу, що інфікує клітини комах (таких як клітини 519), що продукують ААМ (див., наприклад, патент США Мо 7 271 002; заявка на патент США Мо 12/297 958). У деяких варіантах здійснення генетично модифікована клітина-хазяїн включає, крім нуклеїнової кислоти, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує варіант капсидного білка ААМ, як описано вище, також нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує один або кілька гер-білків ААМ. У інших варіантах здійснення клітина-хазяїн додатково містить вектор варіанта гААМ. Варіант віріону ГААМ може бути отриманий з використанням таких клітин-хазяїнів. Способи отримання вірну гААМ описані, наприклад, в патентній публікації США Мо 2005/0053922 і патентній публікації США Мо 2009/0202490.
Розкриття в даному описі додатково надає фармацевтичну композицію, що містить: а) варіант віріону гААМ, як описано вище і розкрито в даному описі; і Б) фармацевтично прийнятний носій, розріджувач, наповнювач/ексципієнт або буфер. У деяких варіантах здійснення фармацевтично прийнятний носій, розріджувач, ексципієнт або буфер є придатними для застосування пацієнту, який є або не є людиною. Такі ексципієнти, носії, розріджувачі і буфери включають будь-який фармацевтичний агент, який можна вводити без створення надмірної токсичності. Фармацевтично прийнятні наповнювачі включають, але не обмежуються такими, рідини, такі як вода, фізіологічний розчин, гліцерин і етанол. Фармацевтично прийнятні солі можуть бути також включені, наприклад, солі мінеральних кислот, такі як гідрохлориди, гідроброміди, фосфати, сульфати і тому подібне; а також солі органічних кислот, такі як ацетати, пропіонати, малонати, бензоати і тому подібне. Крім того, в таких носіях можуть бути присутніми допоміжні речовини, такі, як змочувальні або емульгуючі агенти, поверхнево-активні речовини, ріН-буферні речовини і тому подібні. Широка різноманітність фармацевтично прийнятних наповнювачів існує і відома в даній галузі техніки і не потребує детального обговорення в даному описі. Фармацевтично прийнятні наповнювачі детально описані в різних публікаціях, включаючи, наприклад, А. Сеппаго (2000) "Нетіпдіюп: Те 5сієпсе апа Ргасіїсе ої
Рпаптасу", 201 еайоп, Іірріпсой, УМіПШатв, є УМІКіпе; Рпаппасешіса! бозаде Рогт5 апа Огид
Оеїїмегу БЗувзівтв5 (1999) Н. б. Апвеї еї аї., едв., 7 ед., Гірріпсой, УМіййатв5, 4 УМіїКіпе; апа
Напабосок ої Рпагтасецшісаї! Ехсірієпів (2000) А. Н. Ківрбе еї аї., ед5., За єд. Атег. Рнагтасецшіїсаї
Авзос.
У деяких аспектах даного винаходу даний винахід надає фармацевтичну композицію, що містить від приблизно 1 х 108 до приблизно 1 х 1015 рекомбінантних вірусів або від 1 х 108 до приблизно 1 х 1015 векторних геномів, де кожний вказаний рекомбінантний вірус містить геном, що кодує один або більше генних продуктів.
Деякі варіанти здійснення винаходу ілюструються в наступних пунктах 1-54: 1. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить пептидну вставку в
СН-петлі капсидного білка, де вставка знаходиться в ААМ2 або відповідному положенні в капсидній частині серотипу ААМ дикого типу, відмінного від ААМ2 або варіанта ААМ, і де пептидна вставка вибрана з групи, що складається з МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО:13), МКТТМКО (ЗЕО
ІО МО:14), ТМКІСМТ (5ЕО ІЮ МО:15), МІ ТКОМ (5ЕО І МО:16), МТУКІ 5Т (5ЕО ІЮ МО 17),
ЗМТМУКАЇ (ЗЕО І МО:18), АБМІТКА (5ЕО І МО:19), ОМТУТА5 (5ЕО ІЮ МО:20), МКІБАКО (5ЕО
ІО МОС21), МОБУТКТ (5ЕО ІЮ МО:22), ОАОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:с:23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО:24),
ЗМТТОКТ (5ЕБЕО 10 МО:25), АБОБТКА (5ЕБО І0О МО:26), ГАМКІОАТОА (5ЕБО І МО:27),
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:28), І АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:29), ГАМІ ТКОаМА (ЗЕО ІЮ МО:30),
ГАМТУКІ ТА (5ЕО ІЮ МО:31), ГГ А5МТУКАЇА (5ЕО ІЮО МО:32), ГААЗ5МІТКАА (5ЕО ІЮ МО':33),
ГАЮМТУТАБЗА (5ЕО ІЮ МО:34), І АМКІБАКОА (5ЕО ІЮ МО:35), ГГ АМООСМУТКТА (5ЕО І МО:З6),
ГАТМКІСМУТО (5ЕО І МО:37), ГГ АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:38), ГАОАОТТКМА (5ЕО І МО:39),
ГАТМЕТЗРБОА (5ЕО ІЮ МО:40), І АБМТТОКТА (5ЕО ІЮ МО 41), і Ї ААБОЗТКАА (ЗЕО ІЮ МО:42). 2. Варіант ААМ за п. 1, в якому капсидний білок включає одну або більше точкових мутацій відносно ААМ2 або одну або більше відповідних точкових мутацій відносно інших серотипів ААМ дикого типу або варіантів ААМ. 3. Варіант ААМ за п. 2, в якому одна або кілька точкових мутацій вибрана з групи, що складається з АЗБР, 51097, Р195І, 0213М, са2225, М2291І, МЗ312К, АЗ19Т, ТЗЗ0А, АЗ335, ЕЗА7К,
РЗбБЗІ, А4270, М447Р, М4490, М449К?, 24538, А490Т, К5270, М5515, АБ81Т, 5855, ВБ88М,
АБОЗЕ, М/бОбС, Кб49Е, Е651Н, Му694С, ІбЄ98М, М7О81І, і І 7350), і переважно вибрана з групи, що складається з М708І, М708І-АБОЗЕ, М708І-5109Т, М708І-ТЗ330А, АЗБР, М708І-8588М,
М708І-ЖМУ6О6С, М708І-У 6946, ІЄЗВУ, МЗ312К--44490--М551 5-41698М-4І 7350,
М312К-м4490-45515:-1698М--7081І 7350, М7081-М449К, і М7081-52225.
4. Варіант ААМ за п. 1, де пептидна вставка розташована після будь-якої з амінокислот в положеннях 570-671 в МР1 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні іншого серотипу ААМ дикого типу або варіанта АДАМ. 5. Варіант ААМ за п. 4, де пептидна вставка вбудована після амінокислоти 587 в МРІ1 капсиду ААМ2 або у відповідному положенні іншого серотипу ААМ. 6. Віріон інфекційного рекомбінантного аденоасоційованого вірусу (ГААМ), що містить: (а) варіант капсидного білка ААМ за будь-яким із пп. 1-5 і гетерологічну нуклеїнову кислоту. 7. ТААМ за п. 6, де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує РНК-інтерферуючий агент або поліпептид. 8. Спосіб доставки гетерологічної нуклеїнової кислоти в клітини-мішені, що включає контактування клітини-мішені з віріоном гААМ за п. 7. 9. Спосіб за п. 8, в якому клітина-мішень являє собою клітину серцевого і/або скелетного м'яза. 10. Спосіб за п. 8, в якому клітина-мішень знаходиться іп міїго. 11. Спосіб за п. 8, в якому клітина-мішень знаходиться іп мімо. 12. Ізольована нуклеїнова кислота, яка містить нуклеотидну послідовність, що кодує варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (АДАМ), що містить пептидну вставку в оН-петлі капсидного білка, де ця вставка знаходиться в ААМ2 або у відповідному положенні фрагмента капсидного білка серотипу ААМ дикого типу, відмінного від ААМ2 або варіанта ААМ, і де пептидна вставка вибрана з групи, що складається з МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО:13), МКТТМКО (ЗЕО
ІО МО:14), ТМКІСМТ (5ЕО ІЮ МО:15), МІ ТКОаМ (5ЕО 10 МО:16), МТМКІ 5 (5ЕО ІЮ МО:17),
ЗМТМУКАЇ (ЗЕО І МО:18), АБМІТКА (5ЕО 10 МО:19), ОМТУТА5 (5ЕО ІЮ МО:20), МКІЗАКО (5ЕО
ІО МОС21), МОБУТКТ (5ЕО ІЮ МО:22), ОАОТТКМ (ЗЕО ІЮ МО:с:23), ТМАТ5РО (5ЕО І МО:24),
ЗМІТОКТ (5ЕБЕО 10 МО:25), АБОБТІКА (5ЕБО 10 МО:26), ГАМКІОВТОА (5ЕБО 10 МО:27),
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:28), І АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:29), ГАСМІТКОамМА (5ЕО І МО:З0),
ГАМТУКІ ТА (5ЕО ІЮ МО:31), ГГ А5МТУКАЇА (5ЕО ІЮО МО:32), ГААЗ5МІТКАА (5ЕО ІЮ МО':33),
ГАОМТУТАБЗА (5ЕО ІЮ МО:34), І АМКІЗБАКОА (5ЕО ІЮ МО:35), Г АМОЮМТКТА (5ЕО ІЮ МО:36),
ГАТМКІСМУТО (5ЕО І МО:37), ГГ АТМКІСМТА (5ЕО ІЮ МО:38), ГАОАОТТКМА (ЗЕО ІЮ МО:39),
ГАТМЕТ5РБА (5ЕО ІЮ МО 40), | АВМТТОКТА (5ЕО ІО МО 41), і ГААБЗОБ5БТКАА (5ЕО ІЮО МО:42).
Зо 13. Ізольована клітина-хазяїн, що містить нуклеїнову кислоту за п. 12. 14. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить пептидну вставку відносно батьківського капсидного білка ААМ, розташовану між двома суміжними амінокислотами, у положенні між амінокислотами 570 і 611 МР1І в ААМ2, де вставка містить аміно кислотну послідовність Мі У2 х 1Х2 х зХа х 5Хех 7Уз, і де Хі вибраний з Т і М; Х» вибраний з М і
К; Хз вибраний з К, І і Т; Ха вибраний з І, О і Т; Хо вибраний з С, К і М; Хв вибранийз М, ТіК; і Х7 вибранийз Ті. 15. Варіант ААМ за п. 14, в якому пептидна вставка вибрана з групи, що складається з
МКІОВТО (ЗЕО ІЮ МО:13), МКТТМКО (5ЕО І МО:14) і ТМКІСМТ (5ЕО ІО МО:15). 16. Варіант ААМ за п. 15, який відрізняється тим, що пептидна вставка фланкована М- кінцевою амінокислотою ГА і С-кінцевою амінокислотою А. 17. Варіант ААМ за п. 15, де пептидна вставка знаходиться між амінокислотами 587 і 588
МРІ капсиду ААМ2 або у відповідному положенні в іншому серотипі ААМ дикого типу або варіанті АДАМ. 18. Віріон інфекційного рекомбінантного аденоасоційованого вірусу (ГААМ), що містить: (а) варіант капсидного білка ААМ за будь-яким із пп. 14-17 і гетерологічну нуклеїнову кислоту. 19. гтААМ за п. 18, де гетерологічна нуклеїнова кислота містить РНК-інтерферуючий агент або нуклеотидну послідовність, що кодує поліпептид. 20. Спосіб доставки гетерологічної нуклеїнової кислоти в клітину-мішень, що включає контактування клітини-мішені з віріоном гААМ за п. 18. 21. Спосіб за п. 20, в якому клітина-мішень являє собою клітину серцевого і/або скелетного м'яза. 22. Спосіб за п. 21, в якому клітина-мішень знаходиться іп міїго або іп мімо. 23. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що включає Її) амінокислотну послідовність ААМ, щонайменше на 90 95 ідентичну ААМ дикого типу, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮ МО: 1-10 ї 11; і ї) одну або більше амінокислотних замін, вибраних з групи, що складається з РЗбЗІ, РЗбЗІ-М708І, РЗб63ЗІ їЕ347К, М708І14А5ОЗЕ, М7081-АЗ3335,
М708І-5721ї, М708І1-АБОЗЕ--М5515, М7081-АБ59ЗЕ--КбІ9Е, М708І1-АБОЗЕ--5109Т,
МТ08І1-АБОЗЕН5109Т1-К5270, АБ9ЗЕ5109Т, і де одна або кілька замін являють собою заміни відносно ААМ2, або де одна або кілька відповідних замін зроблені відносно інших серотипів 60 ААУ.
24. Варіант ААМ за п. 23, в якому капсидний білок містить пептидну вставку. 25. Варіант ААМ за п. 24, де пептидна вставка вибрана з групи, що складається з МКІОКТО (ЗЕО 10 МО: 13), МКТТМКО (5ЕО 10 МО:14), ТМКІСМТ (5ЕБЕО Ір МОл5), МІСТКОМ (5ЕО 1
МО:16), МТУКІ ЗТ (5ЕО ІЮ МО:17) 5МТУКАЇ (5ЕО ІЮ МО:18), АБМІТКА (5ЕО ІЮ МО':19), оМТУТАБ5 (5ЕО 10 МО:20), МКІЗАКО (5ЕО ІЮ МО:с21), МОСМТКТ (5ЕО І МОс22), ОАОТТКМ (ЗЕО 10 МО:23), ТМАТОРО (5ЕО ІЮ МО: 24), 5МТТОКТ (5ЕО І МО:25), АБОБТКА (5ЕО І
МО:26), ГАМКІОВТОА (5ЕО ІЮ МО:27), ГГ АМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:28), І! АТМКІСМТА (5ЕО І
МО:29), ГАСМІ ТКаМА (5ЕО ІЮ МО:30), І АМТУКІ ЗТА (5ЕО ІЮ МО:З1), ГГ А5МТУКАЇА (5ЕО 10
МО:32), ГААЗМІТКАА (5ЕО ІЮ МО:33), ГАЮОМТУМТАБА (5ЕО ІЮО МО:34), І АМКІБАКОА (5ЕО 1
МО:35), ГАМОЮМТКТА (5ЕО ІЮ МО:36), І АТМКІСМУТ5 (5ЕО 10 МО:37), Г АТМКІСМТА (5ЕО І
МО:38), ГАОАОТТКМА (5ЕО І МО:39), ГГ АТМАТОРОА (5ЕО І МО:40), ГГ АБМТТОКТА (5ЕО 10
МО:41), і ГААБОЗТКАА (ЗЕО ІЮ МО:42). 26. Варіант ААМ за п. 23, в якому амінокислотна послідовність ААМ, щонайменше на 95 95 ідентична ААМ дикого типу. 27. Варіант ААМ за п. 23, в якому амінокислотна послідовність ААМ щонайменше на 99 95 ідентична ААМ дикого типу. 28. Варіант ААМ за п. 23, в якому капсидний білок являє собою химерний капсидний білок або являє собою родовий капсидний білок. 29. Віріон інфекційного рекомбінантного аденоасоційованого вірусу (ГААМ), що містить: (а) варіант капсидного білка ААМ за будь-яким із пп. 23-28 і гетерологічну нуклеїнову кислоту. 30. гААМ за п. 29, де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує РНК-інтерферуючий агент або поліпептид. 31. Спосіб доставки гетерологічної нуклеїнової кислоти в клітину-«мішень, що включає контактування клітини-мішені з віріоном гААМ за п. 29. 32. Спосіб за п. 31, в якому клітина-мішень являє собою клітину серцевого і/або скелетного м'яза. 33. Спосіб за п. 32, в якому клітина серцевого м'яза вибрана з групи, що складається з кардіоміоцитів, кардіоміобластів, серцевих фібробластів і клітин-попередників серцевого м'яза. 34. Спосіб за п. 31, в якому клітина-мішень знаходиться іп міїго. 35. Спосіб за п. 31, в якому клітина-мішень знаходиться іп мімо. 36. Ізольована нуклеїнова кислота, яка містить нуклеотидну послідовність, що кодує капсидний білок варіанта аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить амінокислотну послідовність щонайменше на 9095 ідентичну ААМ дикого типу, вибрану з групи, що складається з 5ЕО ІЮ МО: 1-12 або варіанта ААМ; і її) одну або більше амінокислотних замін, вибраних з групи, що складається зі РЗбЗІ, РЗбЗІ-М708І, РЗб6З3ЗІїЕ347К, М7081-4А593Е,
М708І-АЗЗ35, М7081-57211, М708І4-АБОЗЕ-М5515, М708І-АБОЗЕ--Кб49Е, М7081-АБОЗЕ 51097,
М708І-АБОЗЕ-510971-К5270, АБОЗЕ--5109Т. 37. Ізольована клітина-хазяїн, яка містить нуклеїнову кислоту за п. 36. 38. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить пептидну вставку в сеН-петлі капсидного білка і необов'язково включає одну або більше точкових мутацій, і де пептидна вставка вибрана з групи, що складається з МКІОКТО (5ЕО ІЮ Мо 13) і ГАМКІОКТОА (ЗЕО ІЮО Мо 26). 39. Варіант капсидного білка ААМ за п. 38, що включає амінокислотну заміну М7О81. 40. Варіант капсидного білка ААМ за п. 39, що включає амінокислотні заміни М708І1-А5БОЗЕ,
М708І1-5109Т, М7081-Т3З30А, М7081-8588М ог М7081-М312К--44490--М551 5--І1698М-4І 7350. 41. Варіант капсидного білка ААМ за п. 38, що містить амінокислотну заміну АЗ5Р. 42. Варіант капсидного білка ААМ за п. 38, що містить амінокислотну заміну
М312К--44490--М5515-1698У-І 7350. 43. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить пептидну вставку
БО в СН-петлі капсидного білка і необов'язково включає одну або більше точкових мутацій, причому пептидна вставка вибрана з групи, що складається з МКТТМКО (5ЕО ІО МО:14) і
ГАМКТТМКОА (5ЕО ІЮ МО:27). 44. Варіант капсидного білка ААМ за п. 43, що містить амінокислотну заміну М7О81. 45. Варіант капсидного білка ААМ за п. 44, що містить амінокислотні заміни М7081-5109Т,
М708І1-УУ694С, 70814 /У6О6С, або заміну М7081І4-М312К-м4490-45515-1І698У-І 7350. 46. Варіант капсидного білка ААМ за п. 43, що містить амінокислотну заміну Іб98М. 47. Варіант капсидного білка ААМ за п. 46, що містить амінокислотну заміну
М312К--44490--М5515-1698У-І 7350. 48. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить пептидну вставку 60 в сеН-петлі капсидного білка і необов'язково включає одну або більше точкових мутацій, і де пептидна вставка вибрана з групи, що складається з ТМКІСМТ (ЗЕО ІЮ МО: 15), | АТМКІСМТА (ЗЕО ІЮО МО: 28) і ГАТМКІСМТ5 (ЗЕО ІО МО: 36). 49. Варіант капсидного білка ААМ за п. 48, що включає амінокислотну заміну М7О81. 50. Варіант капсидного білка ААМ за п. 49, що включає амінокислотні заміни М7081--М449К,
М7081462225 або М7081-М312К-м44490--45515-1698У1І 7350. 51. Варіант капсидного білка ААМ за п. 48, що містить амінокислотну заміну
М312К--44490--М5515-1698У-І 7350. 52. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить послідовність
ЗБЕО ІЮ МО: 62 або послідовність, ідентичну такій щонайменше на 90 95, де варіантний капсидний білок ААМ містить наступні амінокислотні заміни відносно капсиду ААМ5:
М2291-А4901--АБ81Т. 53. Варіант капсидного білка ААМ за п. 52, що додатково включає амінокислотну заміну
У5855 або М447Е відносно капсиду АА5. 54. Варіантний капсидний білок аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить послідовність
ЗЕБЕО ІЮ МО: 63 або послідовність, ідентичну такій щонайменше на 90 95, і де варіантний капсидний білок ААМ містить наступні амінокислотні заміни відносно капсиду ААМб5:
М22914-А4270--А490Т-А581Т.
ПРИКЛАДИ
Наступні приклади надані з метою надання фахівцям у даній галузі техніки повного розкриття і опису того, як створити і використати даний винахід, але не призначені для обмеження обсягу суті того, що автори винаходу розглядають як власний винахід; приклади не призначені для позначення того, що наведені нижче експерименти є цілком і повністю єдиними проведеними експериментами. Хоча були вжиті заходів із забезпечення точності відносно чисел, що використовуються (наприклад, кількості, температури і т.д.), потрібно враховувати можливі експериментальні помилки і відхилення. Якщо не вказано інше, відсотки/частини являють собою частини за масою, при цьому молекулярна маса являє собою середньовагову молекулярну масу, температура виміряна в градусах Цельсія, а тиск дорівнює атмосферному або близький до нього.
Загальні методи молекулярної і клітинної біохімії можна знайти в таких стандартних
Зо підручниках, як Моїесціаг Сіопіпд: А Іарогаїгу Мапиа!ї, За Ей. (бЗатргооК єї аї., Натбог
І абогаїогу Рге55 2001); 5поп Ргоїосої5 іп Моїіесціаг Віоіоду, 4 Еа. (А!йзибеї єї а!. едв., допп УМіеу а Боп5 1999); Ргоївїп Меїнодз (ВоїІая еї а!., доп У/йеєу 6 5оп5 1996); Мопміга! Месюгв Тог Сепе
ТНнегару (У/адпег єї аї. єд5., Асадетіс Ргев55 1999); Міга! Месіогз (Каріїй 48. І оєжму ед5., Асадетіс
Ргезв 1995); Іттипоіоду Меїподе5 Мапиаї (І. І еяКомії5 єд., Асадетіс Ргез5 1997); апа СеїЇ апа 35 Тіввиє СиПиге: І арогайїгу Ргоседитгез іп Віоїеснпоіоду (Осуїє б Спінйнвь, ЧФопп У/їєу в 5оп5 1998), розкриття яких включене в даний опис за допомогою посилання. Реагенти, вектори клонування і набори для генетичних маніпуляцій, згадані в цьому розкритті, доступні від комерційних постачальників, таких як ВіоКай, 5ігагадепе, Іпмігодеп, бідта-Аїагісй і СіопТесі.
Приклад 1 40 Внутрішньовенна ін'єкція і збір тканин. Одному самцеві макаки СупотоїЇди5 (тасаса
Памісціагіб) у віці 3-10 років вагою не менше З кг вводили внутрішньовенну ін'єкцію через підшкірну вену для кожного раунду відбору. Тварині проводилася анестезія з подальшим введенням 1-5 мл бібліотеки, в деяких випадках заздалегідь інкубованої з МІС людини протягом хвилин при 37 "С (в першому раунді бібліотека складалася з варіантів, згенерованих з використанням всіх методів мутагенезу, описаних на Фіг. ТА; в кожному подальшому раунді відбору використовувалися варіанти, виділені на основі попереднього раунду).
Евтаназія була виконана ученим ветеринарним персоналом, внутрішньовенною ін'єкцією 100 мг/кг пентобарбіталу натрію в день 14-43 або в день 2153, залежно від необхідності.
Серцева і/або скелетна м'язова тканина з чотириголового м'яза була видалена, і ДНК була ізольована з тканини. У деяких випадках серцева тканина розділялася на кілька частин: передсердя, шлуночкова перегородка, лівий папілярний м'яз, правий папілярний м'яз, лівий шлуночок і правий шлуночок.
Спрямована еволюція. Процес спрямованої еволюції показаний на Фігурах ТА-1ЄЕ. Коротко, була створена бібліотека вірусних капсидів, що містить більше 20 запатентованих комбінацій мутацій ДНК і генів сар (Фіг. 1А). Потім віруси упаковували (Фіг. 18), таким чином, щоб кожна частинка складалася з мутантного капсиду, що вміщує ген сар, що кодує цей капсид, і очищували. Капсидну бібліотеку вміщували в систему селективного тиску іп мімо. Тканини або клітинний матеріал, які становлять інтерес, збирали для виділення варіантів ААМ, що успішно інфікували дану мішень, і такі "успішні" віруси витягували. Успішні клони збагачували шляхом бо повторного відбору (Стадія | - Фігура 10). Потім вибрані сар-гени піддавали повторній диверсифікації (запатентовано) і збагачували, проводячи подальші етапи відбору, підвищуючи вірусну ефективність з кожним циклом (Стадія 2 - Фігура 10). Варіанти, виявлені на Стадіях 1 і 2 відбору векторів, демонстрували здатність трансдукувати м'язові клітини приматів (Фіг. 1ЄЕ).
Результативне відновлення капсидних геномів ААМ. Капсиди, отримані після кожного раунду відбору, використали для упаковки бібліотеки, ін'єкгованої в подальшому раунді відбору.
Відновлення капсидних генів з тканини забезпечує отримання тих бібліотечних векторів, які здатні успішно впроваджуватися в тканину, що становить інтерес. Відновлення вірусних геномів із тканин серцевого і скелетного м'язів після проведення репрезентативного раунду відбору показане на Фігурі 2. Смуги всередині прямокутників означають успішне відновлення вірусних геномів.
Аналіз секвенуванням. Під час 3-4 раундів відбору, що включають селективний тиск шляхом внутрішньовенної доставки до серцевої тканини або тканин скелетних м'язів, і раундів 1-2 відбору, що включають селективний тиск шляхом внутрішньовенної доставки в присутності нейтралізуючих антитіл до серцевої тканини, проводили секвенування окремих клонів бібліотеки з метою визначення частоти варіантів у популяції. Варіанти були оцінені на присутність мотивів (певних патернів послідовності) за даними секвенування. Варіанти були згруповані по мотивах, що базуються на наявності об'єднуючої варіації (наприклад, специфічної точкової мутації або специфічної послідовності пептидної інсерції в постійно повторюваному положенні в межах білка капсиду), які зустрічалися в кількох послідовностях. Мотиви, що представляють щонайменше 5 95 секвенованої популяції в двох або більше раундах відбору або щонайменше 1095 секвенованої популяції в одному або кількох раундах відбору, представлені на Фіг. ЗА (Аналіз послідовності раунду 4 селективного тиску при внутрішньовенній доставці до серцевої тканини), Фіг. ЗВ (Аналіз послідовності раунду 2 селективного тиску при внутрішньовенній доставці в присутності нейтралізуючих антитіл до серцевої тканини) і Фіг. ЗС (наданий аналіз послідовності секвенуванням раунду З селективного тиску при внутрішньовенній доставці до скелетної м'язової тканини).
Кілька репрезентативних клонів, які були ідентифіковані як такі, що забезпечують підвищену інфекційність клітин серця і/або скелетних м'язів, перераховані в Таблиці 1 нижче (кожний клон містить ідентифіковану заміну(и) і/або пептидну вставку, а в іншому ідентичний 5ЕО ІЮО МО: 2;
Зо раунд відбору, кількість послідовностей і частота (в дужках) вказані для кожного клону):
Таблиця 1. Модифікації амінокислотної послідовності капсидного білка ААМ МРІ, що забезпечують підвищену інфекційність клітин м'язової тканини серця і/або скелетних м'язів.
Заміни, перераховані в колонці 2, показані відносно амінокислотної послідовності ААМ2 дикого типу, тобто за відсутності вбудованого пептиду. "Серцевий-МАБ" в колонці 5 вказує, що модифікації амінокислотної послідовності забезпечують підвищену стійкість до нейтралізації антитілами проти ААМ на доповнення до підвищеної інфекційності клітин серцевого м'яза. м'яз М'яз
Раунд 3: 6 , 588-1 АМКІОВТОА- Нема (86855) | Лк раунд Раунд 3: 1 (ЗЕО І МО 27) Раунд 4: 11 о. 1 (0.81 о) (1.23 95) 26.83 95 п 588-1 АМКІОВТОА» Раунд 4: 1
Увоюкоют | 000000
Раунд 3: 1 588-1 АМКІОВТОА» (1.61 95) (5ЕО 10 МО27) «вТ0ЗТУМТОВІ Раунд 4: 2 4.88 95 588-1 АМКІОВТОА» Раунд 1: 1 бвоюмогі. 00 пемете 105 ю 588-1 АМКІОВТОА» Раунд 3: 1
ОУбвоюкогі. 00 авто
Раунд 3: 13 588-1 АМКІОВТОА» РУ7ОВІ (20.97 95) Раунд 1: 1 (5ЕО ІЮ МО:27) Раунд 4: 10 (0.70 Фо) 23.26 95 , Раунд 1: 10 5887 АМКТТМКОА- Раунд 4:2 , Нема о (7.04 95) Раунд
БЕБІ не тю сотня ГТ 1
БК теемю ПИ 588-ГАМКТТМКОА- Раунд 1-1 5ЕО ІЮ МО228 тів9ву і 0.70 9 -
БОЮ МОВ | 00вовозМтоВІ ов
ЕОМ в омвовсьутві | 0-00)
Раунд 3: 6
Раунд 1: 4 588-1 АМКТТМКОА- 9.68 95 (5ЕО 10 МО:28) хУТОВІ Реунд 43 2.82 95) Раунд зна | 2:10(ви13 5)
ЗЕО 10 МО29 тУтОВІ 2.44 95 -1- й й Раунд 1: 23
СЕС МОЗ). Нема в 6.02 95) Раунд 2:21(17.07 95 588-ГАОАОТТКМА- Раунд 2: 1 5ЕО І МО:39 третм і 0.81 96 - 588-ГАОАОТТКМА- Раунд 1: 1 оса ями 1-0 т , Раунд 1: З 588-1 АОАОТТКМА- Раунд 4: 1 (5ЕО 10 МО:39) (ла ув еу 588-ГАОАОТТКМА- Раунд 1-1 оса ява | 0-0 5В8-ГАМООУТКТА- ема Раунд 1: 1
ЗЕО ІЮ МО:36 0.70 9 5В8-ГАМООУТКТА- Раунд 2: 2 5ЕО ІЮ МОЗ36 тів9ву і 1.83 96 - 5В8-ГАМООУТКТА- Раунд 1: 1 осо о «утові - 588-ГАТМАТОРОА- Раунд 2: 1
Ес моя «Утові 0-й 588-ІААЗОЗТКАА- ема Раунд 3:1
ЗЕО І МО:42 1.23 95 588-ІААЗОЗТКАА- Раунд 3:2 5ЕО ІО МО2 тУтОВІ 3.23 95 ши й й Раунд 1:2 кеш «Ше ; 2. 8(6.50 95 й й Раунд 1: 6 пи и 2:11 (8.94 95 , Раунд 1: 6 588-1 АСМІ ТКОМА- Раунд 3: 4 (5ЕО1О МО:30) (вла) и Нау
М еБЕСІО МОЗЮ 000 сс Око здізетевтяві | 0-0) 5ЕО 10 МО:30 тЕЗбзі-УТОВІ - 0.70 95 - 588-ГАСМІ ТКОМА- Раунд 2: 1 5ЕОО МО:30 тАББтА і 0.81 96 - , Раунд 1: 1 588-1 АСМІ ТКОМА- Раунд 3:2 (5ЕО1О МО:30) (ваза а 588-Т АСОМ ТКамА «РЗбЗІ. 0-01 Раундії:ї1 Ї0007--
5ЕОІЮ МОВО | (7777777717Ю7ДЛЇ177171717И7И7И1717171711 (оо Ї77с72121 й й Раунд 1: 9 о СЕОТО МОЯ). Нема (6.34 95) Раунд " 2: 6 (4.88 95 5885 АОМТУТАБА» Раунд 2: 1 й й Раунд 1: 1 о СЕОТО МОЯ). 4М7ОВІ (0.70 96) Раунд
І 2:2 (1.63 96 й й Раунд 1: З
ЕС 0 МОЗ), Нема (2.11 96) Раунд ! 2: 7 (5.69 96
ЗЕО ІЮ МО:31 ТУТОВІ і 6.50 9
Раунд 3:2 58851 АБМТМУКАЇА» Нема (3.23 Об) (ЗЕО І МО: 32) Раунд 4: 1 2.44 96 58851 АБМТМУКАЇА» Раунд 4: 1 58851 АТМКІСМТ5 Нема Раунд 4: 1
ЗЕО ІО МО:37 2.44 96 588-І АБМТТОКТА» Нема Раунд 3:2
ЗЕО ІЮ МОСАТ 2.46 95 58871 АМКІЗБАКОА» Нема Раунд 2: З
ЗЕО ІО МО:35 2.44 96 58871 АМКІЗБАКОА» Раунд 2:2
ЗЕО 0 МО:35 тУТОВІ 5 1.83 55 5-5 ниинннвири ЛВ ЛВ Я
Раунд 4:2
Раунд 1: 1
Раунд 4: 1
Нема 810975Р2355 Раунд 4: 1 5.00 Фо
Раунд 4: 1
Раунд 3: 1
Раунд 4: 1
Раунд 4: 1
Раунд 3: 34
Раунд 1: 13 (41.98 Ов)
Нема РЗБЗІ- (94595) | Раунд4: 4 20.00 95
Раунд 3: 1
Раунд 1:2
Раунд 1: 1
Раунд 3: 1
Раунд 4: 1
Раунд 4: 1
Раунд 3: 1
Раунд 3: 31
Раунд 4: З Раунд 1: 1 (38.27 Ов)
Нема АБУЗЕ (7.32 965) (07095) | Раунд4:2 10 95
Раунд 3:2
Раунд 3: 12 Раунд 1: 5 Раунд 3: 1
Нема АБЗЗЕтУТОВІ 19.35 95 3.52 95 12395
Раунд 4: 1
Раунд 3: 6 Раунд 3: 1 (9.68 95) Раунд 1: 10 (1.23 У)
Нема МТОВІ Раунд4:2 |) (70495) | Раунд4:1 4.88 95 5.00 95
Раунд 3: 1
Раунд 3: 1
Раунд 3: 1
Також були ідентифіковані як капсиди, що мають підвищену інфекційність відносно клітин серцевого м'яза і підвищену стійкість до нейтралізації антитілами проти ААМ, наступні химери:
Химера з (ії) амінокислотами 1-129 ААМб і (ії) амінокислотами 130-725 ААМ5 і що має наступні амінокислотні заміни відносно ААМ5: М229І4А490ТА581Т (послідовність БЕО ІЮО МО: бг).
Химера з (їй) амінокислотами 1-61 ААМ2, (ії) амінокислотами 662-129 ААМб і (її) амінокислотами 130-725 ААМ5 і що має наступні амінокислотні заміни відносно ААМ5:
У22911-А490ТА581Т (послідовність ЗЕО ІЮ МО: 63).
Химера з (ії) амінокислотами 1-129 ААМб і (ії) амінокислотами 130-725 ААМ5 і що має наступні амінокислотні заміни відносно ААМ5: М229І4-А490ТвА581Ть-У5855
Химера з (і) амінокислотами 1-129 ААМб і (ії) амінокислотами 130-725 ААМ5 і що має наступні амінокислотні заміни відносно АДАМ5: М229І4-А447ЕА490ТТАБ5В81Т
Віріони варіанта ААМ, розкриті в даному описі, можуть включати розумні раціональні конструктивні параметрі, особливості, модифікації, переваги і варіації, очевидні для фахівців у даній галузі техніки, в галузі конструювання вірусних векторів ААМ.
Приклад 2
Клітинний тропізм рекомбінантних віріонів ААМ, що містять нові варіанти ААМ
ГАМКІОВТОА-М708І (5БЕО 10 МО: 43) 1 АМКТТМКОА-М708І (5БО ОО МО: 48) і
ГАТМКІСМТАжМ7О08І (5ЕБО ІЮ МО: 46) для кардіоміоцитів оцінювали іп міго з використанням кардіоміоцитів, отриманих з ембріональних стовбурових клітин людини (ЕЗС).
Рекомбінантні віріосни ААМ, що містять або капсид ААМІ, або капсид ААМ2, або капсид
ААМО, або новий варіант капсиду ГАМКІОКЕТОАжМ7О08І, або новий варіант капсиду
ГАМКТТМКОАМ708І, або новий варіант капсиду ГАТМКІЗМТАжМ708 і геном, що містить трансген флуоресцентного білка (ЕСЕР), функціонально зв'язаний з промотором САС (ААМІ1.САС.ОЕСЕР, ААМ2.САС.ЕСЕР, ААМ9САС.ЕСЕР, І АМКІОВТрАч»М708І.САС.ЕСЕР,
ГАМКТТМКОБАМУ7О8І.САС.ЕСЕР, і ГАТМКІСМТАжМУ7О8І.САС.ОЕР, відповідно) були виготовлені з використанням стандартних методів. Кардіоміоцити були отримані з лінії ембріональних стовбурових клітин людини, Е5І-017, шляхом модуляції передавання сигналів МУпі при використанні малих молекул. Після 14 днів індукції серцевої мезодерми культури були додатково збагачені по кардіоміоцитах за допомогою депривації глюкози. Приблизно через 24 дні диференціювання більшість клітин експресували маркер серцевого міоциту, серцевий тропонін Т (сТпТ) ії шлуночко-специфічний маркер, МІ С-2У. Отримані кардіоміоцити оцінювали по експресії білка щілинної сполуки Соппехіп 43, флуктуації мембранного потенціалу, метеболізму кальцію і скорочувальної функції, щоб переконатися, що отримані кардіоміоцити досягли зрілого стану до початку етапу векторної характеристики.
Порівняно з ААМІ, ААМ2 і ААМ9, варіанти ГАМКІОКТОАжМ7О08І, ГАМКТТМКОАМУТОВІ і
ГАТМКІСМТАжМУ708І забезпечували значно більш високу ефективність трансдукції і експресію трансгену в культурах кардіоміоцитів людини через шість днів після зараження (як визначено методами імунофлюоресценції, Фігура бА), проточної цитометрії (Фігура 6В) і Вестерн-блот аналізу (Фігури 6С-Ю). Крім того, порівняно з ААМІ, ААМ2 ї ААМУ9, ГАМКІОКТОАЖМ7ОВ8І,
ГАМКТТМКОАМ7ТОвІ ї ГАТМКІСМТАнМУ708І забезпечували більш швидкий початок експресії генів у культурах людських кардіоміоцитів, що визначалося імунофлуоресценцією (фігура 6Е).
Порівняно з ААМ8 і ААМУ, що виявляють тропізм до клітин серця і скелетних м'язів, кількість інфекційних одиниць на введення вірусний геном було на кілька порядків вище для
ГАМКІОКТОАЖМУТОВІ ії ГАМКТТМКОАЖУТОВІ (Фіг. 10А). Це дослідження ілюструє перевершуючу здатність МКІОМКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13)-, МКТТМКО (ЗЕО ІО МО: 14)- ії ТМКІСМТ (ЗЕО ІО МО: 15)- вмісних капсидних варіантів ААМ доставляти гени в клітини серцевого м'яза.
Приклад З
Тропізм клітин рекомбінантних віріонів ААМ, що включають нову версію ААМ химери
ААМб/ААМ5 для кардіоміоцитів, оцінювали іп міго з використанням кардіоміоцитів, отриманих з ембріональних стовбурових клітин людини (Е5С).
Рекомбінантні віріони ААМ, що містять або капсид ААМІ, капсид ААМ8, капсид ААМОУ, або новий варіант капсиду ААМб/ААМ5 химера (з 5ЕО ІО МО: 62) і геном, що містить трансген зеленого флуоресцентного білка (ЕСЕР), функціонально зв'язані з промотором САС (ААМІ1.САС.ОЕСЕР, ААМ8.САС.ЕСЕР, ААМОСАС.ЕСЕР, ААМб/ААМ5 /спітега.САсС.ЕСЕР, відповідно) були виготовлені з використанням стандартних методів. Кардіоміоцити були
Зо отримані з лінії ембріональних стовбурових клітин людини, Е5І-017, шляхом модуляції передавання сигналів МУпі з використанням малих молекул. Через 14 днів після індукції серцевої мезодерми культури були додатково збагачені по кардіоміоцитах шляхом депривації глюкози. Приблизно через 24 дні диференціювання більшість клітин експресували маркер серцевого міоциту, серцевий тропонін Т (сТпТ) і шлуночко-специфічний маркер, МІ С-2У.
Сформовані кардіоміоцити оцінювали на експресію білка щілинної сполуки Соппехіп 43, флуктуацію мембранного потенціалу, обробку кальцієм і скорочувальну функцію, щоб переконатися, що згенеровані кардіоміоцити досягли зрілого стану до початку етапу характеристики векторів.
Порівняно з ААМ1, ААМ8 і ААМО химера ААМб/ААМ5 забезпечувала значно більш високу ефективність трансдукції і експресію трансгену в культурах людських кардіоміоцитів через шість днів після інфікування, що було визначено з допомогою імунофлуоресценції (фіг. 7А), проточної цитометрії (фіг. 7В).) і Вестерн-блот аналізу (фігури 7С-0). Крім того, відносно ААМ8 химера
ААМб/ААМ5 забезпечувала більш швидкий початок експресії генів в культурах кардіоміоцитів людини, що визначався по імунофлуоресценції (Фіг. 7Е). Порівняно з ААМ8 і ААМО кількість інфекційних одиниць на введений вірусний геном була на кілька порядків вище для химери
ААМб/ААМ5 (мал. 10А). Це дослідження ілюструє перевершуючу здатність 5ЕО ІЮ МО: 62- вмісних капсидних варіантів ААМ доставляти гени в клітини серцевого м'яза.
Приклад 4
Тропізм клітин рекомбінантних віріонів ААМ, що містять нові варіанти ААМ
ГАМКІОКТОАжМУ7ТОв8І, ГАМКТТМКОАХМ7О8І і химеру ААМб/ААМ5 для скелетних міофібрил, оцінювали іп міго з використанням скелетних міофібрил, отриманих із первинних міобластів людини.
Рекомбінантні вірони ААМ, що містять або капсид ААМ8, капсид ААМУ, новий варіант капсиду ГАМКІОКТОАМУ7О8І, новий варіант капсиду | АМКТТМКОБАжЖМУ7О08І або новий варіант капсидної химери ААМб/ААМ5 і геном, що містить трансген зеленого флуоресцентного білка (ЕСЕР), функціонально зв'язаний з промотором САС (ААМ8.САС.ЕСЕР, ААМ9.САа.ЕаЕР,
ГАМКІОКТОАжМУ7ТО8І.САС.ЕСЕР, ГАМКТТМКОАЖМ7О8І.САС.ЕСЕР, і ААМв/ААМ5 спітега.САС.ОЕР, відповідно) були отримані стандартними методами. Скелетні міофібрили були отримані з первинних людських скелетних міобластів, отриманих від здорового 51-річного бо чоловіка (Соок Муозійевз). Міобласти диференціювалися протягом 30 днів з утворенням зрілих багатоядерних волокон скелетних м'язів. Отримані скелетні міофібрили були оцінені на експресію важкого ланцюга міозину (МНС) і дистрофіну, щоб переконатися, що більшість отриманих скелетних міофібрил досягла зрілого стану до початку етапу характеристики векторів.
Порівняно з ААМ8 і ААМ9, химери ГАМКІОКТОАжМ7О8І, ГАМКТТМКОАжМУТОВІ ії ААМб/ААМ5 забезпечували значно більш високу ефективність трансдукції і експресію трансгену в культурах міофібрил скелетного м'яза людини через сім днів після інфікування, що було визначено з допомогою імунофлюоресценції (Фігура 8А) і проточної цитометрії (Фіг. 8У). Крім того, порівняно з ААМ8 і ААМОУ, ГАМКІОКТОАМ7О8І і ГАМКТТМКОАМ708І забезпечували більш швидкий початок експресії генів у культурах міофібрил скелетного м'яза людини, що було визначено методами імунофлуоресценції (Фіг. 8С). порівняно з ААМ8 і ААМУО, кількість інфекційних одиниць на кожний введений вірусний геном була в кілька разів вище для ІГАМКІОКЕТОАЖМТОВІ,
ГАМКТТМКОАХМ7О8І ії химери ААМб/5 (Фіг. 108). Це дослідження ілюструє перевершуючу здатність МКІОКТО (ЗЕО ІЮО МО: 13)-. МКТТМКО (5ЕО ІО МО: 14)- ії ЗЕО ІЮ МО:62-вмісних варіантів доставляти гени до міофібрил скелетних м'язів.
Приклад 5
Тропізм клітин рекомбінантних віріонів ААМ, що включають нові варіанти ААМ
ГАМКІОКТОАжМ708І, ГАМКТТМКОАХМ7О8І і ААМб/ААМ5, відносно клітин-попередників скелетних м'язів оцінювали іп міго з використанням клітин-попередників скелетних м'язів, отриманих з індукованих фібробластами плюральних клітин людини, отриманих з індукованих плюрипотентних стовбурових клітин фібробластів (ЕВ-ІРЗС) або ембріональних стовбурових клітин людини (ЕЗС).
Рекомбінантні вірісни ААМ, що містять або капсид ААМУ, новий варіант капсиду
ГАМКІОКТОАжМУТО8І, новий варіант капсиду ГАМКТТМКрАжЖМУТ7ТОв8І, або новий варіант капсиду
ААМб/ААМ5 химери і геном, що містить трансген зеленого флуоресцентного білка (ЕСЕР), функціонально зв'язаний з промотором САС (ААМ8.САС.ЕСЕР, ААМУ.САС.ЕСЕР,
ГАМКІОКТОАжМУ7ТО8І.САС.ЕСЕР, ГАМКТТМКОАжЖМУ7ТО8І. САС ЕСЕР і ААМв/ААМ5 спітега.САС.ОЕР, відповідно) були отримані з використанням стандартних методів.
Попередники скелетних м'язів були отримані з лінії ембріональних стовбурових клітин людини
Зо Е5І-017 (ЕБІ-ВІС) згідно зі стратегією диференціювання, описаною в Зпеп еї аІ. Мейод5, 2016 з невеликими змінами. Після приблизно 40 днів диференціювання звуження лінії до попередників скелетних м'язів було підтверджене експресією РАХ7 і МуоО в більшості клітин перед використанням культур для характеристики вектора.
Порівняно з ААМУ, химери ГАМКІОКЕТОАжМ7О8І, ГАМКТТМКОАЖМ7О8І ї ААМб/ААМ5 забезпечували значно більш високу ефективність трансдукції і експресію трансгену в культурах попередників скелетних м'язів людини через шість днів після інфікування, що було визначено за допомогою методів імунофлюоресценції (Фігура 9А) і проточної цитометрії (Фіг. 9В). Це дослідження ілюструє перевершуючу здатність МКІОКТО (ЗЕО ІО МО: 13)-, МКТТМКО (5ЕО І
МО: 14)- ії ЗЕО ІО МО: 62, що містять варіанти капсиду ААМ, доставляти гени в попередники скелетних м'язів.
Приклад 6
Метод спрямованої еволюції використали для виявлення нових варіантів аденоасоційованого вірусу (АДАМ), що мають перевершуючу ефективність доставки генів у клітини серцевих і скелетних м'язів після внутрішньовенного (ІМ) введення, яке має значні переваги порівняно з іншими способами доставки генів у серцеві і скелетні м'язи людини (Приклад 1). Тропізм клітин після внутрішньом'язового введення рекомбінантних віріонів ААМ, що включають новий варіант ААМ, що містить заміну М7О81І, і пептид ГАМКІОКТОА (5ЕО ІЮ МО: 27), вбудований між амінокислотами 587 і 588 (ГАМКІОКТОАМ7О8І; ЗЕО ІЮ МО: 43) оцінювався іп мімо у мишей як типовий приклад здатності віріонів ГААМ, що містять МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13) варіанти капсиду ААМ, трансдукувати м'язові клітини.
Рекомбінантні віріони ААМ, що містять новий варіант капсиду ГАМКІОКТОАХУТОВІ і геном, що містить трансген люциферази, функціонально зв'язаний з опромотором САС (ГАМКІОВТОА--М708І. САС исітєегаєє), отримували з використанням стандартних способів.
Мишам Вб АїБіпо (С57ВІ/6) проводили внутрішньовенну ін'єкцію в хвостову вену 2 х 1072 му, і трансдукцію оцінювали за життя за допомогою візуалізації люциферази і розі-тогет по активності тканинної люциферази. Візуалізация люциферази за життя на 14 день (зліва) і 28 день (справа) після ін'єкції показала, що новий варіант ААМ капсиду ГАМКІОКТОАжМ708І може трансдукувати клітини миші іп мімо (Фігура 11А). Активність люциферази в серцевому м'язі, діафрагмі і чотириголовому м'язі через 56 днів після введення демонструє, що новий варіант
ААМ капсиду ГАМКІОКТОАжМУТО8І здатний трансдукувати серцевий і скелетний м'яз миші іп мімо (Фігура 118).
Це дослідження ілюструє доставку генів варіантом, що містить МКІОКТО (5ЕО ІО МО: 13), згідно із приблизно одним з кількох клінічно прийнятних шляхів введення. Подібна ефективність досягається при використанні інших варіантів, що включають даний мотив пептидної інсерції.
Аналогічно, подібна ефективність досягається при використанні інших варіантів, розкритих в даному описі, ідентифікованих з використанням того ж підходу спрямованої еволюції.
Приклад 7
Метод спрямованої еволюції використали для виявлення нових варіантів аденоасоційованого вірусу (ААМ) з перевершуючою ефективністю доставки генів в клітини серцевих і скелетних м'язів після внутрішньовенного (ІМ) введення, яке має значні переваги порівняно з іншими способами доставки генів в серцеві і скелетні м'язи людини (Приклад 1).
Тропізм клітин після внутрішньом'язового введення рекомбінантних віріонів ААМ, що містять новий варіант ААМ, що містить заміну М7О081І ії пептид ГАМКІОКТОА (5ЕО ІЮО МО: 27), вбудований між амінокислотами 587 і 588 (ГАМКІОКТОАжМ7О8І; 5ЕБЕО ІО МО: 43), оцінювався іп мімо у примату, що не є людиною (МНР), як типовий приклад здатності варіантів ГААМ, що містять
МКІОВТО (ЗЕО ІО МО: 13)-капсидні варіантів ААМ, трансдукувати м'язові клітини.
Рекомбінантні віріони ААМ, що містять новий варіант капсиду ГАМКІОКТОАХУТОВІ і геном, що містить трансген зеленого флуоресцентного білка (СЕР), функціонально зв'язаний з промотором САС (ГАМКІЮОКТОАЖМУ7О8І.САС.ОЕР), отримували з використанням стандартних способів. Макаки СупотоЇди5 були ін'єктовані внутрішньом'язово трьома дозами вектора в ділянки мазхіи5 Іагегаїі5 1х10"! вірусних геномів (мо), і ступінь трансдукції клітин скелетних м'язів був оцінений посмертно методом імунофлуоресценції. Репрезентативні зображення забарвлення гемотоксиліном і еозином (НУЕ) і антитілами проти СЕР поперечних зрізів проксимальної ділянки біопсії із збільшенням 2х, 4х і 20х демонструють, що новий варіант ДАМ капсиду ГАМКІОКТОАжМ708І може трансдукувати клітини скелетних м'язів примату іп мімо (Фігура 12А). Репрезентативні зображення забарвлення гемотоксиліном і еозином (НЕЕ) і антитілами проти СЕР подовжніх зрізів дистальної ділянки біопсії із збільшенням 2х, 4х і 20х демонструють, що новий варіант ААМ капсиду ГАМКІОКТОАжУ7О08І здатний трансдукувати
Зо клітини скелетних м'язів примату іп мімо (Фігура 128).
Це дослідження ілюструє доставку генів варіантом, що містить МКІОКТО (ЗЕО ІЮ МО: 13), згідно із протприблизним одним із кількох клінічно прийнятних шляхів введення. Подібна ефективність досягається при використанні інших варіантів, що включають даний мотив пептидної інсерції. Аналогічно, подібна ефективність досягається при використанні інших варіантів, розкритих в даному описі, ідентифікованих з використанням того ж підходу спрямованої еволюції.
Попереднє головним чином просто ілюструє принципи винаходу. Зрозуміло, що фахівці в даній галузі техніки зможуть розробити різне аранжування, яке, хоча і не описане і не показане тут явно, все ж втілює принципи винаходу і включається в суть і обсяг винаходу. Крім того, всі приклади і умовні формулювання, наведені в даному описі, в основному призначені для того, щоб допомогти читачеві зрозуміти принципи винаходу і концепції, внесені винахідниками в розвиток техніки, і повинні розглядатися як необмежувальні конкретні приклади і умови.
Крім того, всі твердження, в яких наводяться принципи, аспекти і варіанти здійснення винаходу, а також його конкретні приклади, призначені для охоплення як його структурних, так і функціональних еквівалентів. Крім того, передбачається, що такі еквіваленти включають як відомі в цей час еквіваленти, так і еквіваленти, які можуть бути розроблені в майбутньому, тобто будь-які розроблені еквіваленти, що виконують ту ж функцію, незалежно від структури.
Отже, обсяг даного винаходу не повинен бути обмежений ілюстративними варіантами здійснення винаходу, показаними і описаними тут. Навпаки, обсяг і суть даного винаходу повинні визначаться прикладеною Формулою винаходу.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
-1105» 40 Молекулар Терап'ютікс Інкорпорейтед (МоїІесшаг Пнегарешісв Іпс.) -120» Варіанти капсидів аденоасоційованих вірусів і способи їх застосування -1305» 090400-5009 МО -1505 05 62/560,901 «1515 2017-09-20 -160» 69 «170» РаїепіНп мегвзіоп 3.5 -2105 1 «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 1 -4005 1
Меї Ага Аа Авр Сіу Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Си Авр Авп І еи Зег 1 5 10 15
Сі Спу Пе Аг Си Тгр Тгр Авр Геи Гуз Рго Сіу Аа Рго Гу Рго 20 25 Зо
Зо
Гуз Аа Авп Сп Сп Гуз Сп Авр Авр Су Аго сту Ге Маї Гей Рго
З5 сапу Туг Гуз ТугГ еи Су Рго Рне Авп Су Геи Авр Гуз Спу Сім Рго 60 маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг Азр 40 (65 70 75 80
Сіп Сп Гей Гуз Аа Спу Авр Авп Рго Туг Геи Агу Туг Авп Нів Аа 85 90 95 45
Ар Аа Спи Ріє Сіп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тпг бег Рпе Спу Су 100 105 110 50
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125 55 Геш ау ГГ єи Ма! Спи Спи Спу Аїа Гуз Тнг Аа Рго Су Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Маї Сім Сп Зег Рго Сп Спи Рго Авр 5ег Зег Зег Спу Пе Спу 60 145 150 155 160
Гуз Тиг ау Сп Сп Рго Аїа Гуз Гуз Агу І ви Авп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Сіу Авр 5ег Си Зег Маї Рго Авр Рго ап Рго І еи Спу Спи Рго Рго 180 185 190
Аа Тниг Рго Аїа Аа Маї Спу Рго Тнг Тнг Меї Аа Зег Спу Спу Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Авп Авп Си Спу Аа Азр Спу Маї Спу Авп Аа 210 215 220 зЗег Спіу Азп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАг Тр Геи Спу Авр Аго Ма! Пе (225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Аа Зег Тиг Су Аа 5ег Авп Авр Авп Ні 260 265 270
Зо
Туг Ре Саіу Туг Зег Тниг Рго Тгр Сіу Туг Рне Авр РНе Авзп Аго Ре 275 280 285
Ні5 Суз Нів Ре 5ег Рго Агу Авр Тр Сп Ага ГГ еи Пе Авзп Авп Авп 290 295 З00
Тр Слу РНе Аго Рго Гуз Агу Геи Авп Рне Гуз І ви Рне Авп Іе Сіп 305 з10 315 320 маї Гуз Сім Маї ТАиг Тнг Авп Ар ау Маї Тнг Тнг Пе Айїа Авп Авп 325 330 335
Ї єи Тиг Зег Тиг Маї Сіп Маї Рне 5ег Азр 5ег Спи Туг Сп І ви Рго 340 345 350
Туг Ма! І и Спу 5ег Аа Ні Сип Спу Сув Гей Рго Рго РНе Рго Аа 355 360 365
А5р Ма! Рне Меї Пе Рго Сіп Туг Сіу Туг ГГ еи ТАг Геи Авп Авп сіу 370 375 380 зег Сп Аа Маї Сіу Аго 5ег Зег РНе Туг Суз І єи Сім Туг Рпе Рго во 385 390 395 400 зег Сп Меї І єи Ага Тиг Спіу Авп Авп Рпе Тиг Рпє 5ег Туг Тиг Рне 405 410 415 сій Сім Маї Рго РНе Нів 5ег Зег Туг Аа Ні 5ег Сп 5ег Гей Авр 420 425 430
Аго І єи Меї Авп Рго І єи Пе Авр Сп Туг І еи Туг Туг Гей Авп Аго 435 440 445 15. ТАгаїп Авп Сп Зег Сіу Зег Аа Сп Авп Гуз Авр І єи ГГ еи Ріє 5ег 450 455 460
Аго Сіпу Зег Рго Аа Спу Меї Зег Ма! Сп Рго Гуз Авп Тр І еи Рго 465 470 475 480
Сіу Рго Суз Туг Агу Сп Сп Аго Ма! 5ег Гуз ТНг Гуз ТАг Авр Авп 485 490 495
Авп Авп 5ег Азп Ре ТНг Тгр Тниг Сіу Аа Зег Гуз Туг Авп Гей Авп 500 505 510
Зо
Сіу Аг Сіи Зег Пе Пе Авп Рго Сіу Тнг Аа Меї Аа 5ег Нів Гуз 515 520 525
Авр Азр Си Авр Гуз Ріє РНе Рго Меї 5ег СіІу Ма! Ме Ше РНне Спіу 530 535 540
Гуз Спи Бег Аа Сіу Аа б5ег Азп ТНг Аа І єи Ар Азп Маї Меї Іе 545 550 555 560
Тиг Авр Спи Спи Спи Пе Гуз АІа ТАг Азп Рго Маї Аа Тнг Сім Аго 565 570 575
Рпе Сту Тнг Маї Авіа Маї Авп Рне Сп 5ег Зег 5ег Тиг Авр Рго Аїа 580 585 590
Тиг апу Ар Маї Ніз Аа Меї Сіу Аїа І єи Рго Сіу Меї Маї Ттр Сп 595 600 605
А5р Ага Ар Маї Туг І еи Сп Спіу Рго Пе Ттр Аа Гуз Іе Рго Нів 610 615 620
ТАг Авр Су Ні РНе Нів Рго 5ег Рго І еи Меї Спіу Спу Рне Су І еи 60 625 630 635 640
Гуз Авп Рго Рго Рго Сп Іе Геи Іе Гуз Авп Тнг Рго Маї Рго Аа 645 650 655
Авп Рго Рго Аїа Сіи Ре Зег Аа Тниг Гуз Ріє Аа 5ег РНе Іе ТНг 660 665 670
Сіп Туг Зег Тиг Спу Сп Маї Зег Ма! Спи Пе Спи Тгр См Геи Сп 675 680 685
Гуз Сім Авп з5ег Гуз Ага Тр Авп Рго Сім Маї Сп Ту ТНг Зег Авп 690 695 700
Туг Авіа Гуз Зег Аіа Авп Маї Азр РНе ТНиг Маї Авр Авзп Авзп Су Гей 705 710 715 720
Туг Тиг си Рго Ага Рго Пе Спіу ТАг Агу Туг ГГ еи ТАг Агу Рго ГІ ви 725 730 735 -2105 2 «2115 735 «212» білок
Зо «213» Аденоасоційований вірус 2 «-4005 2
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег (1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго бо 50 Маї Авп Си Аа Ар Айа Аїйа Аа ГІ єи Сім Нів Авр Гуз Айїа Туг Авр 65 70 75 80
Ага ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аа 55 85 90 95
Ар Аа Спи Ріє Сп Сім Аг Гей Гуз Сі Авр Те бег Рне Сіу Спу 100 105 110 60
Азп Ге Сіу Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр 5ег Зег Зег Спу ТАг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І єи Спу Сіп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Азр Сіу Ма! Спу Авп 5ег 210 215 220
Бег ау Авп Тр Ніз Сувз Авр 5ег Тпг Ттр Меї Спу Ар Агу Маї Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТАг Тр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Авр РНе Авп Аг РнНе Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Агу І єи Азп Рне І уз І єи Рне Авзп Іе Сіп Маї 305 з10 315 з20
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 60 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380 ап Аа Маї Стіу Агу Зег 5ег Рпє Туг Суз І еи Спи Туг РНе Рго Бег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 405 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Су Аа бег Ар Іе Агу Авр Сп 5ег Ага Авп Ттр І єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сп Сспу 5ег Спи Гув Тиг Авп Маї Авр Іе Спи Гуз Ма! Меї Пе ТНг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп Гей Сп Агу Спу Авп Аг Сп Аа Аа ТНг 580 585 590 60
Аа Авр Маї Азп Тнг Сп Сіу Ма! Гей Рго Сіу Меї Маї Ттр Сіп Ар 595 600 605
Аг9 Азвр Маї! Туг І ви Сп Спу Рго Пе Тер Аа Гуз Пе Рго Ні ТНг 610 615 620
Авр Су Нів РНнє Ні Рго 5ег Рго І еи Меї Сіу Спу РНе СУ І єм Гуз 625 630 635 640
Ні Рго Рго Рго Сп Пе ГГ еи Пе Гуз Авзп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп 645 650 655
Рго ег Тит Тнг Рне зЗег Аїа Аїа Гуз Ріє Аа 5ег РНе Пе Тнг Сп 660 665 670
Туг Зег Тиг слу Сп Маї Зег Маї Сум Пе Спи Тгр Спи Гей Сп Гув 675 680 685 сій Авп 5ег Гуз Агу Тгр Авзп Рго Сі Пе Сіп Туг Тиг Зег Авп Туг 690 695 700
Авбп Гуз 5ег Ма! Азп Маї Авр Рпе ТНиг Маї Азр Тиг Азп Сту Ма! Туг 705 710 715 720 зег Сім Рго Ага Рго Пе СПу Тнг Аго Туг Геи Тиг Агу Авп ГІ єи 725 730 735 «2105» З «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус ЗА «4005 З
Меї Айва Аа Ар Су Туг Гей Рго Азвр Тр Геи Сім Авр Авп Ї ви Бег 1 5 10 15
Сім Спу Пе Аг Си Тгр Тгр Аа ГГ еи Гуз Рго Спу Маї Рго Сп Рго 20 25 Зо
Гуз Аіа Авп Сп Сп Нів СіПп Авр Авп Аг Ага ау ГІ еи Маї Гей Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Стпу Авп ау І ви Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 ап ап еи Гуз Аіа Спу А5р Авп Рго Туг І єи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Ар Аа Спи Ріє Сіп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тнг бег Рне Сіу Су 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Ага Іе Геи Спи Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Аїа Аа Гуз Тниг Аа Рго Спу Гуз Гув Спу 130 135 140
АІа Ма! Азр СіІп бег Рго Сп Сіи Рго Авр 5ег бег бег Спіу Ма! Спу 145 150 155 160
Гуз Зег Су Гуз Сп Рго Аа Ага Гуз Ага ГГ еи Авп Рпе Спу Сп ТНг 165 170 175
Сіу Авр 5ег Си Зег Маї Рго Авр Рго ап Рго Геи Сіу Спи Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго Тнг 5ег І єи Сіу бег Азп ТНг Меї Аа бЗег Сіу Спу СПу 195 200 205
З5
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Азр Сіу Ма! Спу Авп 5ег 210 215 220 зЗег Сіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег СіІп Тр І єи Спу А5р Агу Маї Іе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТАг Тр Аа Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Тгр Сіу Туг Рпе Авр Рнеє Авп Аг РнНе Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00 60
Спу Рнє Аго Рго І уз ГІ уз І єи бег РНе Гуз І еи Рне Азп ЇІе Сіп Маї 305 з10 315 з20
Ага слу Ма! Тиг Сп Авп Авр Су ТНг Тнг ТНг Пе Аа Авп Авп Гей 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 маї Геи Сіу Зег Аа Ніз СіІп Спу Сув І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сп Мен єи Агу Тнг сапу Авп Авп Ре Сп Рне 5ег Туг ТНг Ре Си 405 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Іе Авр ап Туг ГГ еи Туг Туг ГГ еи Авп Ага ТНг 435 440 445
З5
Сіп Сіу ТАК Тнг Зег Спу ТНг Тиг Авп Сп Зег Ага ГІ єи Геи Рпе 5ег 450 455 460
Сп Аа Стпу Рго Сп бег Меї 5ег І єи Сп Аа Агу Авп Ттр І єи Ро 465 470 475 480
Стпу Рго Суз Туг Агу Сп Сп Агу Гей 5ег Гуз ТНг Аа Азп Авр Авп 485 490 495
Авп Азп 5ег Азп РНе Рго Тр ТНг Айа Аа 5ег І уз Туг Нів І еи Авзп 500 505 510
Сіу Аг Авр бе" І єи Маї Авзп Рго Сіу Рго Аа Меї Аа з5ег Нів ГІ ув 515 520 525
Азр Ар Сім Сім Гув Рпе Рне Рго Меї Ні Спу Авп ГГ еи Пе Рпе Спу 530 535 540 60
Гуз Спи Спу Тнг Тнг Айва 5ег Азп Аїа Сім І єи Азр Авп Маї Меї Пе 545 550 555 560
ТАгАвр Сім Сім Спи Пе Агу Тег Тнг Авп Рго Маї Аіа Тиг Спи Сп 565 570 575
Тугачу Тниг Маї Аіа Авп Авп І єи Сіп 5ег Зег Авп ТНг Аа Рго ТНг 580 585 590
Тиг ау Тниг Маї Авп Ніз Сіп С1пу Аа Геи Рго Спу Меї Маї Тгтр Сп 595 600 605
Азр Агу Авр Маї Туг Гей Сп С1пу Рго Пе Тгр Аїа Гуз Пе Рго Нів 610 615 620
ТАг Авр Су Ні РНе Нів Рго 5ег Рго І єи Меї Спіу Спу Рне Су І єи 625 630 635 640
Гуз Ні Рго Рго Рго Сіп Пе Меї Пе Гуз Азп Тнг Рго Маї Рго Аіа 645 650 655
Авп Рго Рго Тниг Тнг РНе Зег Рго Аїа Гуз Ре Аїа 5ег РНе Пе ТНг 660 665 670
Сіп Туг Зег Тиг Спу Сп Маї Зег Ма! Спи Пе Спи Тур Спи Гей Сп 675 680 685
З5
Гуз Сім Авп 5ег І уз Ага Ттр Азп Рго Спи Пе Сп Тук Тиг Зег Авзп 690 695 700
Туг Авп Гуз 5ег Ма! Азп Маї Авр Ріє ТНг Маї Авр Тиг Авп Сту Маї 705 710 715 720
ТугЗег Сім Рго Ага Рго Пе Спу ТНг Агу Туг І еи Тнг Агу Авп Її ви 725 730 735 «210» 4 «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус ЗВ «400» 4
Меї Ага Аа Азвр Сіу Туг ГГ еи Рго Авр Тгр Геи Си Авр Авп І еи 5ег 1 5 10 15 60 Спи Сіу Пе Аг Си Тр Тр Айа І єи Гуз Рго Спу Маї Рго Сіп Рго
20 25 Зо
Гуз Аіа Авп Сп Сп Нів СіПп Авр Авп Аг Ага ау ГІ еи Маї Гей Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Стпу Авп ау І ви Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Сіп Сп Гей Гуз Аа Спу Авр Авп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аа 85 90 95
Ар Аа Спи Ріє Сіп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тнг бег Рне Сіу Су 100 105 110
Азп Геи Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Ага Пе ГГ еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Аїа Аа Гуз Тнг Аа Рго Стпу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Зо
Рго Маї Авр Сіп 5ег Рго СіІп Сім Рго Авр 5ег 5ег Зег Сіу Ма! СПу 145 150 155 160
Гуз Зег Су Гуз Сп Рго Аа Ага Гуз Ага ГГ еи Авп Рпе Спу Сп ТНг 165 170 175 ау Авр бег Си 5ег Маї Рго Ар Рго Сп Рго І еи Спу Сім Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго Тнг 5ег І єи Сіу бег Азп ТНг Меї Аа бЗег Сіу Спу СПу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Азр Сіу Ма! Спу Авп 5ег 210 215 220 зЗег Сіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег СіІп Тр І єи Спу А5р Агу Маї Іе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255 60 Туг Гуз Сп Пе 5ег Зег Сп Зег Спу Аа 5ег Авп Авр Авп Ні Туг
260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Авр РНе Авп Аг РнНе Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 З00
Спіу Рнє Агу Рго І уз І уз І еи бег РНе Гуз І еи Рне Азп ЇІе Сіп Маї 305 з10 315 з20
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
ТНгЗег ТНиг Маї Сп Маї Ре Тнг Авр 5ег Сіи Туг Сп І еи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Зо
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
З5
Сіп Меї І єи Ага ТНиг Спу Авзп Авзп Ре Сіп РНе 5ег Туг Тиг РНе Сі 405 до 415
Авр Маї Рго РНе Ні 5ег 5ег Туг Аа Нів Зег Сп Зег І еи Авр Аг9 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Іе Авр ап Туг ГГ еи Туг Туг ГГ еи Авп Ага ТНг 435 440 445
Сіп Сіу ТАК Тнг Зег Спу ТНг Тиг Авп Сп Зег Ага ГІ єи Геи Рпе 5ег 450 455 460
Сіп Аа Су Рго Сіп бЗег Меї з5ег Геи Сіп Аа Агу Авп Тр ГГ еи Рго 465 470 475 480
Стпу Рго Суз Туг Агу Сп Сп Агу Гей 5ег Гуз ТНг Аа Азп Авр Авп 485 490 495 бо Авп Авп 5ег Азп РНе Рго Тр ТНг Аа Аа 5ег Гуз Туг Нів Гей Авп
500 505 510
Сіу Аг Авр бе" І єи Маї Авзп Рго Сіу Рго Аа Меї Аа з5ег Нів ГІ ув 515 520 525
Азр Ар Сім Сім Гув Рпе Рне Рго Меї Ні Спу Авп ГГ еи Пе Рпе Спу 530 535 540
Гуз Спи Спу ТАг ТАг Ага 5ег Авп Аа Сі Геи Ар Авп Маї Ме! Пе 545 550 555 560
Тиг Авр Спи Спи Спи Пе Ага ТНиг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг Спи Сп 565 570 575
Туг сту ТНг Маї Авіа Авп Авп І ви Сп б5ег 5ег Авп ТНг Айа Рго ТНг 580 585 590
Тпиг Агу Тнг Маї Авп Азр ап Су Аа І єи Рго Спу Меї маї Тр Сіп 595 600 605
Азр Агу Авр Маї Туг Гей Сп С1пу Рго Пе Тгр Аїа Гуз Пе Рго Нів 610 615 620
Зо
ТАг Авр Су Ні РНе Нів Рго 5ег Рго І єи Меї Спіу Спу Рне Су І єи 625 630 635 640
З5
Гуз Ні Рго Рго Рго Сіп Пе Меї Пе Гуз Азп ТНг Рго Маї Рго Аа 645 650 655
Авп Рго Рго ТНпг Тиг РНе з5ег Рго Аа Гуз Рпє Аа 5ег РНеє Пе ТНг 660 665 670
Сіп Туг Зег Тиг Спу Сп Маї Зег Ма! Спи Пе Спи Тгр Спи Гей Сп 675 680 685
Гуз Сім Авп 5ег І уз Ага Ттр Азп Рго Спи Пе Сп Тук Тиг Зег Авзп 690 695 700
Туг Авп Гуз 5ег Ма! Азп Маї Азр Ріе ТНг Маї Авр ТАг Авп Сту Маї 705 710 715 720
Туг Зег См Рго Ага Рго Пе Стпу Тниг Агу Туг І єи Тниг Агу Ав Її єи 725 730 735 60 «2105 5
«2115 734 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 4 «-4005 5
Меї Тиг Азр Сту Туг ГГ еи Рго Авр Тр ГГ еи Спи Авр Авп Гей Зег Си 1 5 10 15
Сіу Ма! Аго Сім Тгр Тр Айва ГІ єи Сп Рго Сіу Айа Рго Гуз Рго ГГ ув 20 25 Зо
Аа Авп Сп Сп Нів Сіп Авр Азп Аїа Аго Су І єи Маї І єи Рго Су 35 40 45
Туг Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Спу Авп Су І еи Авр Гуз Спу Сім Рго Маї 50 55 бо
Авп Аїа Аа Азр Айа Айа Айа І еи Си Нів Авр І уз Аа Туг Авр Сп 65 70 75 80
Сіп Ї еи Гуз Аа Спу Авр Авзп Рго Туг ГГ еи Гуз Туг Авп Ні Аа Авр 85 90 95
Зо
Аа Сіи Рпе Сп Сп Аго Гей Сп Сіу Авр Тпг бег Рпе Спу СпПу Авп 100 105 110
Ї ви Спу Аго Аа Маї Рне Сіп Аа Гуз Гуз Агу Маї Гей Спи Рго ГІ еи 115 120 125
СПУ Ї єи Маї Спи С1п Аа Спу Спи ТАг Аїа Рго Су ГІ уз Гуз Агу Рго 130 135 140
Ї еи Пе Спи Бег Рго СіІп Сіп Рго Авр 5ег Зег ТНг Спу Пе Стпу ГГ ув 145 150 155 160
Гуз Слу Гуз Сп Рго Аа Г уз | уз І уз І єи Ма! Рне Сіи Авр Спи ТАг 165 170 175
Сіу Аа Стпу Авр Су Рго Рго Спи Стіу Зег ТАг Зег Спу Аа Меї Зег 180 185 190
Авр А5р бег Сім Меї Агу Аїа Аїа Аа Стпу Спу Аа Аа Маї Спи Спу 195 200 205 сСіу Сип Сіу Аіа Ар Су Маї Спіу Авп Аа 5ег Спу Ар Тр Ні Сув бо 210 215 220
Азр Зег ТНиг Тгр бег Сім СПУ Ні Ма! Тиг ТАг Тнг Зег Тиг Аг9 ТНг 225 230 235 240
Тер Маї І єи Ро Тнг Туг Азп Авп Нів Гей Туг Гуз Агу І еи Спу Спи 245 250 255 зег І ви Сп Зег Азп Тпг Туг Авп Спу Ре Зег Тнг Рго Тгтр Сіу Туг 260 265 270
Рпе Авр Ре Авп Ага РнНе Ні Суз Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр Сп 275 280 285
Ага І єи Пе Авп Авп Авп Ттр Сіу Меї Агу Рго І уз Аа Меї Ага Маї 290 295 00
Гуз Пе Рпе Авп Пе Сіп Маї Гуз Сім Маї Тиг Тиг Зег Авп Сіпу Спи 305 з10 315 з20
ТАг Тнг Маї Авіа Азп Авп І єи Тнг бег ТНг Маї Сп Пе РНе Аа Азр 325 330 335
Зо зЗег Зег Туг Си І єи Рго Туг Ма! Меї Авр Аїа Спу Сип Ст Сіу Бег 340 345 350
І еи Ріо Рго Рне Рго Авзп Ар Маї Рпе Меї Маї Рго Сп Туг Су Туг 355 360 365
Суз Су І еи Ма! Тиг Спу Ап ТАг Зег Сп Сп Сп Тиг Авр Агу Авп 370 375 380
Аа РНе Туг Суз І еи Сім Туг Рпє Рго 5ег Сп Меї І еи Ага Тиг Спу 385 390 395 400
Азп Азп РНе Сім Пе Тниг Туг Зег Рне Спи Гуз Маї Рго Ре Нів 5ег 405 до 415
Меї Туг Аа Ні бег Сп 5ег І єи Авр Ага І єи Меї Авзп Рго І єи Пе 420 425 430
Авр ап Туг І єи Тгтр Спу Гей Сп Зег ТНг Тиг Тнг Спу ТАг Тиг є 435 440 445
Азп Аїа Сіу Тиг Аа Тниг ТАг Авзп РнНе ТнНг Гуз І єи Ага Рго Тиг Авп бо 450 455 460
РНе 5ег Азп РнНе І уз І уз Авп Тр І єи Рго Су Рго 5ег Пе Гув С1п 465 470 475 480
Сіп Сіу Рпе Зег Гуз ТАг Аа Авп ап Авп Туг Гуз Пе Рго Аа ТНг 485 490 495
Спу бег Азр 5ег І и Пе Гуз Туг Спи ТНг Ні Зег ТНг Гей Авр Спу 500 505 510
Аго Тр 5ег Аа І єи Тнг Рго ау Рго Рго Меї Аа Тнг Аа Сіу Рго 515 520 525
Аа Авр 5ег Гуз РНе 5ег Авп 5ег Сп Гей Пе РНе Аа Сіу Рго Гув 530 535 540
Сіп Авп Сіу Авзп ТНг Аа Тнг Маї Рго Стпу ТАг ГГ еи Пе РНе Тнг 5ег 545 550 555 560
Сі Си Си Гей Аа Аа Тнг Авп Аа ТАг Авр Тнг Авр Меї Ттр Су 565 570 575
Зо
Авп Гей Рго Сіу Сіу Азр Сп Бег Авп 5ег Авп Геи Рго Тниг Ма! Авр 580 585 590
АгоГеи ТНг Аа Геи сту Ага Маї Рго Стпу Меї Ма! Ттр Сп Авп Аг9 595 600 605
Азр Іе Туг Туг Сп Спу Рго Іе Тр Аїа Гуз Пе Рго Ні ТАиг Азр 610 615 620
Сту Ні Рнеє Нів Рго 5ег Рго І еи Пе Сіу Спу Рне С1пу Гей Гуз Ніб 625 630 635 640
Рго Рго Рго Сп Іе РНе Іе Гуз Авзп Тнг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 645 650 655
Аа Тиг ТА Рне 5ег Зег ТАг Рго Маї Авп 5ег РНе Пе Тиг Сіп Туг 660 665 670
Зег Тиг сапу Сіп Маї Зег Ма! Сип Пе Авр Тгр Сіи Пе Сіп Г ув Спи 675 680 685
Агу Зег Гуз Агу Ттр Авп Рго Спи Маї Сип Рпе Тнг Зег Авп Туг Спу бо 690 695 700
Сіп Сп Авп 5ег І ви ГГ еи Тр АЇа Рго Ар Аїа Ага Су Гуз Тут ТНг 705 710 715 720
Сім Рго Ага Аїа Іе Спу Тниг Аг Туг І єи Тнг Ні Нів І еи 725 730 «210» 6 «2115» 724 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 5 «-4005» 6
Меї 5ег Рне Маї Авр Ні Рго Рго Авр Тгр І еи Спи Спи Маї Спу Си 1 5 10 15
Су Г єи Ага Спи Ре Геи Су І ви Спи Аа Сіу Рго Рго Гуз Рго Гув 20 25 зо
Рго Авп ап Сп Нів Сип Авр Сп Аа Аго Су І єи Маї І єи Рго Спу 35 40 45
Туг Авп Туг Геи Сіу Рго Спу Азп сту Г еи Авр Аг Сіу Спи Рго Маї 50 55 60
Азп Аго Аа Авр Сім Маї Аа Агу Сім Ні Азр Пе Бег Туг Авзп Си 65 70 75 80
Сіп Гей Сім Аа Спіу Ар Авп Рго ТугІ еи Гуз Туг Авп Ні Аа Азр 85 90 95
Аа Си Рнє Сп Си І уз Гей Аа Азр Авр ТНг бег Рне Сіу Спу Авзп 100 105 110
Ї ви Спу Гуз Ага Маї Рне Сп Аа Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго Рпе 115 120 125 сапу еи Маї Спи Спи Спу Аа Гуз ТНг Аа Рго Тниг Стпу Гуз Ага Пе 130 135 140
Азр Авр Ні Рне Рго Гуз Ага Гуз ГГ уз Аа Агу ТНг Спи Сім Авр Бег 145 150 155 160
Гуз Рго 5ег Тпг 5ег Зег А5р Аа Сім Аа Стпу Рго Зег Спу Зег Сп 165 170 175 60
Сіп Геи Сіп Пе Рго Аїа Сп Рго Аа 5ег 5ег І єи СПУ Аа Ар ТНг 180 185 190
Меї 5ег АІа Спіу Сіу Спу Спу Рго І єи Спу Авр Авп Авп Сп Стпу Аа 195 200 205
Авр Су Маї Спу Авп Аа 5ег Сіу Авр Тр Ні Суз Авр 5ег ТНиг Тр 210 215 220
Меї Сіу Азр Аго Маї Ма! Тниг Гуз Зег ТНг Агу Тниг Тгр Маї Г еи Рго 225 230 235 240 зЗег Туг Азп Авп Ні Сіп Туг Ага Сім Пе Гув 5ег СПу 5ег Ма! Азр 245 250 255
Сіу Зег Авп Аа Авп Аа Туг Рпе Стпу Туг Зег ТНг Рго Тгр Стпу Туг 260 265 270
Рпе Авр Ре Авп Ага РнНе Нів 5ег Нів Тр 5ег Рго Ага Ар Тр Сп 275 280 285
Зо Ага ГІ єи Пе Авп Авп Туг Тр Сіу Рне Аг Рго Аго зе" ГГ еи Агу Маї 290 295 00
Гуз Пе Ре Авп Іе Сіп Маї Гуз Спи Маї Тиг Маї Сп Авр Зег ТНг 305 з10 315 з20
ТАг Тнг Пе Аа Авп Авп І еи ТНг 5ег Тнг Маї Сп Маї Рне Тнг Азр 325 330 335
Азр Авр Туг Сп І єи Рго Туг Маї Маї Спу Авп Спіу Тиг Спи Спіу Суб 340 345 350
І еи Рго Айїа Ре Рго Рго Сп Маї Рпе ТнНг Геи Рго Сіп Туг СПу Туг 355 360 365
Аа ТигІ єи Авп Ага Ар Авп Тпг Сім Авп Рго ТНг Спи Агу Зег Зег 370 375 380
Ре РнНе Суз І єи Спи Туг Рне Рго 5ег Гуз Меї І еи Агу ТНг Спу Авп 385 390 395 400
Азп Ріпе Сім РНе Тнг Туг Азп РНе Сім Спи Маї Рго Ре Нів 5ег Зег 405 до 415 60
Ре Аїа Рго 5ег Сп Авп ГІ єи РНе І уз І ви Аа Авп Рго І єи Маї Азр 420 425 430
Сіп ТугІ єи Туг Агу Ре Маї Зег Тнг Авп Авп Тпг Спіу Спу Ма! Сп 435 440 445
Рпе Авп Гуз Авп Гей Аа Сіу Аго Туг Аа Авп ТНг Туг Гуз Авп Ттр 450 455 460
Рпеє Рго Сіу Рго Меї Су Аго ТАг Сіп Сіу Тгтр Авп Гей Спу Зег Спу 465 470 475 480
Маї Авп Аг Аїа 5ег Маї 5ег Аа РНе Аа Тнг Тнг Авп Агу Меї Си 485 490 495
Ї ви Спи Спу Ага 5ег Туг Сп Маї Рго Рго Сп Рго Авп Спу Меї ТНг 500 505 510
Авп Авп Гей Сп Спу Зег Азп ТНг Туг Айа І єи Спи Ап ТАг Меї Пе 515 520 525
Рпе Авп 5ег Сп Рго Аїа Авп Рго Сіу Тиг Тнг Аа Тнг Туг І еи Си 530 535 540
Сіу Азп Меї І еи Пе Тиг Зег Спи Зег Сіи ТАг Сп Рго Маї Авп Ага 545 550 555 560 маї Ага Туг Авп Маї Спу Спу Сип Меї Аа Тнг Авп Авп ап Бег Зег 565 570 575
Тиг Тиг Айва Рго Аа Тнг Спу Тнг Туг Авп Гей Сп Си Пе Маї Рго 580 585 590
Сіу Зег Маї Ттр Меї Спи Аг Азр Маї Туг І ви Сип Спу Рго Пе Тр 595 600 605
Аа ГГ уз Пе Рго Спи Тк Спу Аа Ні Рне Нів Рго 5ег Рго Аа Меї 610 615 620
Спіу Спу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Меї Меї І єи Пе Гуз Авп 625 630 635 640
Тиг Рго Маї Рго Сіу Авп Пе Тнг Зег Рне Зег Ар Маї Рго Маї зЗег 645 650 655 60 зЗег РНе Пе ТАиг Сп Туг Зег Тиг Спу Сіп Ма! Тнг Маї Спи Меї Си 660 665 670
Тр Сі Геи Гуз Гуз См Авп 5ег Гуз Агу Тр Авп Рго Спи Пе Сп 675 680 685
Туг Тиг Авп Авп Туг Авп Авр Рго СіІп Ре Маї Азр Ре Аїа Рго Азр 690 695 700 зЗег Тиг Спіу Спи Туг Агу ТНпг Тнг Агу Рго Пе Спу Тнг Агу Туг Гей 705 710 715 720
ТАг Агу Ріо І еи -2105 7 «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус б «4005 7
Меї Ага Аа Авр Сіу Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Си Авр Авп Гей Зег 1 5 10 15
Сі Спу Пе Аг Си Тгр Тгр Авр Геи Гуз Рго Сіу Аа Рго Гу Рго 20 25 Зо
З5
Гуз Аа Авп Сп Сп Гуз Сп Авр Авр Су Аго Су І еи Ма! Гей Рго 40
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго бо 45 Маї Авп Аїйа Аа Авр Аа Аїа Аа І єи Сім Ні Авр Гуз Аа Туг Азр 65 70 75 80
Сіп Сп Гей Гуз Аа Спу Авр Авп Рго Туг Геи Агу Туг Авп Нів Аа 50 85 90 95
Ар Аа Спи Ріє Сіп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тпг бег Рне Спу Спу 100 105 110 55
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125 60
Рпе Сту Г еи Маї Спи Сім Слу Аа Гуз Тнг Айїа Рго Су Гуз Гуз Аг9 130 135 140
Рго Маї Спи Сп бег Рго Сп СП Рго Авр 5ег Зег 5ег СПу Пе Су 145 150 155 160
Гуз Тиг ау Сп С1п Рго Аїа Гуз Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Сіу Авр 5ег Си Зег Маї Рго Авр Рго ап Рго І еи Спу Спи Рго Рго 180 185 190
Аа Тнг Рго Аїйа Аа Маї Спу Рго Тнг Тнг Меї Аа Зег Сіу Спу Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аїа Ар Авп Авп Спи Спу Аа Ар Сту Маї Спу Авп Аа 210 215 220
Зегаїйу Авп Тр Ніз Суз Авр 5ег Тпг Тр І єи Спу А5р Аг Маї Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Аа Зег Тиг Су Аа 5ег Авп Авр Авп Ні 260 265 270
З5
Туг Ре Саіу Туг Зег Тниг Рго Тгр Сіу Туг Рне Авр РНе Авзп Аго Ре 275 280 285
Ні5 Суз Нів Ре 5ег Рго Агу Авр Тр Сп Ага ГГ еи Пе Авзп Авп Авп 290 295 З00
Тер Счу Ріє Агу Рго Гуз Ага І еи Азп Рне І уз І єи РНе Авп Іе Сіп 305 з10 315 320 маї Гуз Сім Маї ТАиг Тнг Авп Ар ау Маї Тнг Тнг Пе Айїа Авп Авп 325 330 335
Ї єи Тиг Зег Тиг Маї Сіп Маї Рне 5ег Азр 5ег Спи Туг Сп І ви Рго 340 345 350
Туг Ма! І и Спу 5ег Аа Ні Сип Спу Сув Гей Рго Рго РНе Рго Аа 355 360 365 60
Азр Маї Рне Меї Пе Рго Сп Туг СЧу Туг І еи ТНиг ГГ еи Авп Авп Стпу 370 375 380 зЗег Сп Аа Маї Сіу Ага бег 5ег Рпеє Туг Суз І єи Спи Туг Рне Рго 385 390 395 400 зег Сп Меї І єи Ага Тиг Спіу Авп Авп Рпе Тиг Рпє 5ег Туг Тиг Рне 405 до 415
Сім Авр Маї Рго РнНе Ні 5ег 5ег Туг Аїа Нів бег Сіп 5ег І єи Азр 420 425 430
Аго І єи Меї Авп Рго І єи Пе Авр Сп Туг І еи Туг Туг Гей Авп Аго 435 440 445
ТАг ап Авп Сп бег Спу бег Аа Сіп Авп І уз Авр Гей Гей Рпе 5ег 450 455 460
Агу Спу 5ег Рго Аа Сіу Меї 5ег Маї Сп Рго Гуз Авп Ттр І єи Рго 465 470 475 480
Сіу Рго Суз Туг Агу Сп Сп Аго Ма! 5ег Гуз ТНг Гуз ТАг Авр Авп 485 490 495
Авп Авп 5ег Азп Ре ТНг Тгр Тниг Сіу Аа Зег Гуз Туг Авп І еи Авп 500 505 510
З5
Сіу Аг Сіи Зег Пе Пе Авп Рго Сіу Тнг Аа Меї Аа 5ег Нів Гуз 515 520 525
Азр Авр Гуз Авр Гуз Рпе РНе Рго Меї Зег Спіу Ма! Меї Пе Рпе Спу 530 535 540
Гуз Спи Бег Аа Сіу Аа б5ег Азп ТНг Аа І єи Ар Азп Маї Меї Іе 545 550 555 560
Тиг Авр Спи Спи Спи Пе Гуз АІа ТАг Азп Рго Маї Аіа Тнг См Аго 565 570 575
Рпе Сту Тнг Маї Ага Маї Авт І єи Стп 5ег Зег 5ег ТНг Авр Рго Аа 580 585 590
Тиг апу Ар Маї Ніз Ма! Меї Стпу Аа ГІ еи Рго Сіу Меї Маї Ттр Сп 595 600 605 60
Азр Агу Азр Маї Туг Гей Сп С1пу Рго Пе Тгр Аа Гуз Іе Рго Ніб 610 615 620
ТАгАвр ау Ні РНе Нів Рго 5ег Рго І еи Меї Спіу Спу Рне Су І єи 625 630 635 640
Гуз Ні Рго Рго Рго Сіп Пе ГГ єи Пе Гуз Азп Тнг Рго Маї Рго Аа 645 650 655
Авп Рго Рго Аа Спи Ре 5ег Аа Тиг Гуз Ріє Аа 5ег РНе Пе ТНг 660 665 670
Сіп Туг Зег Тиг Спу Сп Маї Зег Ма! Спи Пе Спи Тгр См Геи Сп 675 680 685
Гуз Сім Авп 5ег І уз Ага Ттр Азп Рго Сі Маї Сип Туг ТНг Зег Авп 690 695 700
Туг Аа Гуз 5ег Аіа Авп Маї Азр Рпє Тниг Маї Авр Авп Авп Су Гей 705 710 715 720
Туг Тиг си Рго Ага Рго Пе Спу Тиг Агу Туг Г еи ТАг Агу Рго ГІ єи 725 730 735 «210» 8 «2115 737 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 7 «-4005» 8
Меї Ада Аа Ар Су Туг Гей Рго Азвр Тр Геи Сім Авр Авп Ї ви Бег 1 5 10 15
Сі Спу Пе Аг Си Тгр Тгр Авр Геи Гуз Рго Сіу Аа Рго Гу Рго 20 25 Зо
Гуз Аа Авп Сп Сп Гуз Сп Авр Авзп ау Аго Спу Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 бо маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 60 ап Сп І єи Гуз Аа Сіу Авр Авзп Рго Туг І еи Агу Туг Авп Нів Аа
85 90 95
Ар Аа Спи Ріє Сіп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тнг бег Рне Сіу Су 100 105 110
Азп Ге Сіу Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Спу Аа Гуз Тнг Аа Рго Аа Гуз Гуз Агд 130 135 140
Рго Маї Сім Рго ЗБег Рго Сп Агу Бег Рго Авр 5ег Зег Тиг Спу Пе 145 150 155 160 ау ув Гуз Спу Сп Сп Рго Аа Ага Гуз Ага ГГ еи Авп Ре Спу Сп 165 170 175
Тиг ау Авр 5ег Сім Зег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І єи Спу СПм Рго 180 185 190
Рго Аа Аа Рго 5ег 5ег Маї Спу бЗег Спу ТНг Маї Аа Аа Спу СПУ 195 200 205
Зо
Су Аїа Рго Меї Айїа Авр Авп Авп Си Сіу Аа А5р Сіу Ма! Спу Авп 210 215 220
З5
Аа 5ег Су Авп Тр Ні Суз Авр 5ег ТАг Тгр І єи Спу Авр Агу Маї 225 230 235 240
Пе Тиг Тиг бег Тиг Аг ТАг Тгр Аа ГГ еи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Ї еи Туг Гуз Сп Пе бег Зег СПм Тниг Аа Спу Зег Тиг Азп Авр Авп 260 265 270
Тиг Туг Рпе Су Туг Зег ТНг Рго Тр Сіу Туг Ріє Авр РНе Авп Ага 275 280 285
Ре Ні Суз Ні РНе 5ег Рго Аг Азвр Тгр Сп Аг І еи Пе Авп Авп 290 295 З00
Азп Тр ау Ре Аг Рго Гуз Гуз Геи Агу РнНе Гуз ГГ еи Рне Авзп Пе 305 з10 315 320 60 ап Маї Гуз Сіи Маї ТАиг Тиг Авзп Авр Сту Маї Тит Тнг Пе Аа Авп
325 330 335
Авп І єи Тнг Зег Тпг Пе Сп Маї Рне 5ег Азр 5ег Спи Туг Сп І єи 340 345 350
Рго Туг Маї І ви Спу Зег Аа Ні Сіп Стпу Суз І еи Рго Рго РНе Рго 355 360 365
Аа Авр Маї Ріє Меї Іе Рго Сп Туг Сіу Туг Гей ТНг Геи Авп Авп 370 375 380
Сіу Зег Сп Зег Ма! Спу Аго Зег 5ег Ріє Туг Суз І еи Спи Туг Рпе 385 390 395 400
Рго бег Сіп Меї І еи Агу Тит Спу Авп Авп Ре Си Ре Зег Туг Зег 405 до 415
Рпе Спи Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп 5ег І ви 420 425 430
Азр Аг І єи Меї Авп Рго ГГ еи Пе Авр Сп Туг ГГ еи Туг Туг І еи Аа 435 440 445
Зо
Агу Тнг ап Зег Авзп Рго Спу СПу ТНг Аа Стпу Авп Ага Сі Гей Сп 450 455 460
З5
Ре Туг Сп Спіу Спу Рго Зег Тиг Меї Аа Спи Сп Аїпа Гуз Авп Ттр 465 470 475 480
Ї еи Рго Сіу Рго Сув Ріє Аг ап Сіп Агу Маї Зег Гуз ТНг Гей Авр 485 490 495
Сіп Авп Авп Авп 5ег Авп Ре Аа Тгр Тнг Су Аа ТАг Гуз Туг Ніб 500 505 510
Ї еи Авп Су Агу Авп 5ег І єи Маї Авп Рго Сіу Маї Аа Меї Аа ТНг 515 520 525
Нів Гуз Азр Авр Сім Авр Ага РНе РпПє Рго 5ег Зег Спу Маї Геи Пе 530 535 540
Рпе Стпу Гу5 Тиг ау Аа Тнг Авп Гуз ТНг ТНг І ви Спи Авп Маї І єи 545 550 555 560 60 Меї Тиг Азп Ст Спи Спи Пе Агу Рго Тнг Авп Рго Маї Аіа Тнг Сі
565 570 575
Сім Туг Спу Пе Маї 5ег 5ег Авп І єи Сіп Аа Аа Азп ТНг Аа Аа 580 585 590
Сіп ТНг Сп Маї Ма! Авп Авп Сп Спу Аа Гей Рго Спу Меї Ма! Ттр 595 600 605
Сіп Авп Агу Азр Маї Туг І ви Сп Спу Рго Іе Тр Аїа Гуз Пе Рго 610 615 620
Ні ТНг Авр сту Авп Рне Нів Рго 5ег Рго І ви Меї Сіу Спу Рпе Спу 625 630 635 640
І еи Гуз Нів Рго Рго Рго Сп Іе І єи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго 645 650 655
Аа Авп Рго Рго Сіи Маї Рне Тнг Рго Айа Гуз Рне Аа 5ег РНе Пе 660 665 670
Тиг ап Туг Зег Тиг Спу Сіп Маї Зег Маї Спи Пе Спи Тгтр СІМ Г еи 675 680 685
Зо
Сіп Гуз Сім Авп 5ег Гуз Агу Тр Авп Рго Спи Пе Сіп Туг Тиг Бег 690 695 700
З5
Азп Ре Сім Гуз Сп Тит Спу Ма! Азр Ре Аїа Маї Авр 5ег Сп Спу 705 710 715 720
Маї Тут Зег Сім Рго Агу Рго Іе Спу Тнг Аго Туг Геи ТНг Агу Авп 725 730 735
Ї еи «210» 9 -2115 738 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 8 «4005» 9
Меї Аа Аа Ар Су Туг Гей Рго Азвр Тр Геи Сім Авр Авп Ї ви Бег 1 5 10 15
Стіни Спу Пе Аг Спи Тер Тр Айва І єи Гуз Рго Су Аа Рго Гуз Рго бо 20 25 Зо
Гуз Аа Авп Сп Сп Гуз Сп Авр Авр Су Аго Спу Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 ап ап єи Сп Аа Су Ар Авп Рго Туг І єи Агу Туг Авп Нів Аа 85 90 95
Ар Аа Спи Ріє Сіп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тнг бег Рне Сіу Су 100 105 110
Азп Ге Сіу Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Спу Аа Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Аг9 130 135 140
Зо
Рго Маї Сім Рго ЗБег Рго Сп Агу Бег Рго Авр 5ег Зег Тиг Спу Пе 145 150 155 160 сту Гуз Гуз Спу Сп Сп Рго Аа Ага Гуз Ага ГГ еи Авп Ре Спу Сп 165 170 175
Тиг ау Авр 5ег Сім Зег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І єи Спу СПм Рго 180 185 190
Рго Аа Аа Рго 5ег Сіу Маї Спу Рго Авп ТАг Меї Аїа Аа Спу Спу 195 200 205
Су Аа Рго Меї Аа Авр Авп Авп Сім Спіу Аіа Азр Стпу Маї Спу бег 210 215 220 зЗег Зег Сіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТНг Тгр Г еи Сіу Азр Аго Маї 225 230 235 240
Пе Тиг Тиг бег Тиг Аг ТАг Тгр Аа ГГ еи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Ї еи Туг Гуз Сп Пе бег Авп Спу Тиг Зег Спу Спу Аа Тиг Авп Азр бо 260 265 270
Азп Тнг Туг Рне Су Туг Зег ТНиг Рго Ттр Сіу Туг Ріпе Авр Рпе Авп 275 280 285
Агу Ре Ніз Суз Ні Рпє 5ег Рго Агу Авр Тгр ап Аго І єи Пе Авп 290 295 00
Азп Авп Тр Су РНе Аг Рго Гуз Ага Геи Зег РнНе Гуз І ви Рпе Авп 305 з10 315 320
Пе Ссіп Маї Гуз Спи Ма! Тиг Сп Авп Спи Спу Тк Гуз Тйг Пе Аа 325 330 335
Авп Авп Гей Тпг Зег ТНг Пе Сп Ма! Рпе Тпг Авр Зег Спи Туг Сп 340 345 350
Ї еи Ро Туг Маї Геи Спу 5ег Аа Ні Сіп Спіу Сув І еи Рго Рго Рпе 355 360 365
Рго Аа Ар Маї Рне Ме! Пе Рго Сіп Туг Сіу Туг Геи ТАг І еи Авп 370 375 380
Зо
Азп Стпу 5ег Сіп Аа Маї Спу Ага 5ег Зег РНе Туг Суз І ви Сім Туг 385 390 395 400
Рпє Рго 5ег Сп Меї Г еи Агу Тнг Сіу Авзп Азп РНе Сп РНе Тнг Туг 4о5 до 415
Тиг Рне Сім Авр Маї Рго Рне Нів Зег Зег Туг Аа Ні Бег Сіп Зег 420 425 430
Ї еи Авр Ага І єм Меї Авп Рго І/ єи Іе Авр Сп Туг І еи Туг Туг Гей 435 440 445 зег Агу ТАг Сп ТАг Тк Спу Спу ТНг Авіа Авзп Тнг Сп ТНг Гей Спу 450 455 460
Рпе Зег Сіп Спіу Спу Рго Авп ТАг Меї Аа Авп ап Аа Гуз Авп Ттр 465 470 475 480
Ї еи Рго Су Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Агу Маї 5ег ТАг Тег Тк Спу 485 490 495
Сіп Авп Авп Авп 5ег Авп Ре Аїа Тр Тнг Аа Стпу ТАг Гуз Туг Ніб бо 500 505 510
Ї еи Авп Су Агу Авп 5ег І єи Аа Авп Рго Сіу Пе Аа Меї Аа ТНг 515 520 525
Ніз Гуз Азр Авр Спи Спи Агу Ре Рнеє Рго 5ег Азп Су Іе І єи Пе 530 535 540
Рпе Стпу Гуз Сіп Авп Аа Аїа Агу Авр Авп Аїа Азр Туг 5ег А5р Маї 545 550 555 560
Меї І еи Тнг Зег СПми Спи Спи Пе Гув ТНг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг 565 570 575
Сім СІ Тук Спу Пе Маї Аа Авр Авп І ви Сп Сп Сій Авп ТНг Аа 580 585 590
Рго Сп Пе Спу Тнг Маї Азп 5ег СіІп Спу Аа Геи Рго Спу Меї Маї 595 600 605
Тр Сп Авп Агу Ар Маї Туг Гей Сп Спіу Рго Пе Ттр Аа Гуз Пе 610 615 620
Зо
Рго Ні Тиг Авр Су Авп Ре Нів Рго 5ег Рго І еи Меї СПу СПу Рпе 625 630 635 640
СПУ Ї єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сп Іе І еи Пе І уз Авп Тнг Рго Маї 645 650 655
Рго Аа Ар Рго Рго Тниг Тнг Рне Авп Сп Зег Гуз І еи Авп 5ег Рпе 660 665 670
Пе Тиг Сп Туг Зег ТАг Спу Сип Маї бЗег Ма! Си Пе Спи Тр Сі 675 680 685
Ї еи Сп Гуз Си Авп 5ег Гуз Агу Тр Авп Рго Спи Пе Сп Туг ТНг 690 695 700 зЗег Азп Туг Туг Гуз 5ег ТНг 5ег Ма! Азр РНне Аїа Маї Азп Тнг Си 705 710 715 720 ау Маї Туг Зег Сім Рго Аг Рго Пе Спу Тниг Аго Туг І еи ТНг Ага 725 730 735
Авп І еи 60
2105» 10 «2115 736 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 9 «4005» 10
Меї Ада Аа Ар Су Туг Гей Рго Азвр Тр І еи Сім Ар Авп І ви Бег 1 5 10 15
Сім Спу Пе Аг Си Тгр Тгр Аа Г еи Гуз Рго Су Аа Рго Сіп Рго
Зо
Гуз Аіа Авп Сп Сп Нів Сп Авр Авп Аїйа Агу Су І еи Маї І єи Рго 35 40 45 20
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Сіпу Авп Су І еи Авр Гуз Спіу Спи Рго 50 55 60 25 маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Сп ап єи Гуз Аа Сіу Ар Авп Рго Туг І еи Гуз Туг Авп Ні Аа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп І єи Сіпу Агу Аа Маї РНе Сп Аїпа Гуз І уз Аку І єи Ї еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Аїа Аа Гуз Тнг Аа Рго Стпу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Маї Сім Сп Бег Рго Сп Спи Рго Авр 5ег Зег Аа Спіу Пе Спу 145 150 155 160
Гуз Зег Су Аа Сіп Рго Аїа Гуз Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Сіу Азр Тниг Ст 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго Пе Спу Спи Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго 5ег Спу Ма! Спу 5ег І еи Тит Меї Аїа 5ег Спу Спу Су 195 200 205 60
Аа Рго Маї Аіа Азр Авп Азп Си Спу Аа Авр Спіу Ма! Спу бег Бег 210 215 220 зЗег Сіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег СіІп Тр І єи Спу А5р Агу Маї Іе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег Авп 5ег Тпг Зег Сіу СПу Зег Зег Авп Авр Авп 260 265 270
Аа Туг Рпе Сту Туг Зег ТНг Рго Тр Сіу Туг Ріє Ар Рне Авп Ага 275 280 285
Ре Ні Суз Ні РНе 5ег Рго Аг Азвр Тгр Сп Аг І еи Пе Авп Авп 290 295 з00
Азп Тр ау Ре Агу Рго Гуз Ага Геи Авп Рнє Гуз І ви Рпе Авп ЇІе 305 з10 315 320
Сп Маї Гуз СП Ма! Тнг Авр Авп Авп ау Маї Гуз Тнг Пе Аа Авп 325 330 335
Авп І єи Тнг бег Тнг Маї Сп Ма! Рне Тнг Авр 5ег Авр Туг Сп І єи 340 345 350
Рго Туг Маї І ви Спу Зег Аа Ніз Спи Стпу Суз І еи Рго Рго РНе Рго 355 36о 365
Аа Авр Маї Ріє Меї Пе Рго Сп Туг Сіу Туг Гей ТНг Геи Авп Авр 370 375 380
Сіу Зег Сп Аїа Маї Спіу Агу Зег 5ег Рпе Туг Сув І еи Си Туг Рне 385 390 395 400
Рго бег Сіп Меї Г еи Агу ТНг Спу Авп Авп Рне Сп Ре Зег Туг Си 405 до 415
Ре Спи Авп Маї Рго Рне Нів 5ег 5ег Туг Аа Ні 5ег Сп 5ег І єи 420 425 430
Азр Аг І єи Меї Авп Рго ГГ еи Пе Авр Сп Туг ГГ еи Туг ТугІ еи Зег 435 440 445 60
Гуз Тиг Пе Авп Спу Зег Сіу Сип Авп Сп Сп ТНг Гей Гуз Рпе Зег 450 455 460 маї Аа Сту Рго бег Азп Меї Аїа Маї Сип Спу Ага Авп Тут Пе Рго 465 470 475 480 сапу Рго 5ег Туг Ага Сп Сп Аго Маї Зег ТАг Тнг Маї Тнг Сп Авп 485 490 495
Авп Азп 5ег Сім Рнеє Аїа Тр Рго Сіу Аа 5ег 5ег Тгр Ада Гей Ап 500 505 510
Сіу Агу Авп 5ег І ви Меї Авзп Рго Сіу Рго Аїа Меї Аа 5ег Нів ГГ ув 515 520 525
Стіни Сіу Спи Авр Ага Ре РнНе Рго І єи бег Сіу 5ег І єи Пе Ре Сіу 530 535 540
Гуз Сіп Спу Тиг Слпу Агу Авр Авп Маї Авр Аа Авр Гуз Маї Меї Пе 545 550 555 560
ТАгАвп Си Спи См Ме Гуз ТАг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг Сіи Зег 565 570 575
Туг ачу Сп Маї Аа Тниг Авп Ні Сп Зег Аа Сп Аа Сп Аа Сп 580 585 590
Тиг ау Тр Маї СіІп Авп Сп Сту Пе Геи Рго Спіу Меї Маї Тгр Сп 595 600 605
Азр Агу Азр Маї Туг Геи Сп Спу Рго Іе Тгр Аа Гуз Іе Рго Ніб 610 615 620
ТАг Авр Су Азп РнНе Нів Рго 5ег Рго І ви Меї Спу Спу Рне Сіу Меї 625 630 635 640
Гуз Ні Рго Рго Рго Сп Іе І єи Пе Гуз Азп Тнг Рго Маї Рго Аіа 645 650 655
Авр Рго Рго Тниг Аа Рне Азвп Гуз Авр Гуз І єи Авп 5ег Ре Пе Тиг 660 665 670
Сіп Туг Зег Тиг Спу Сп Маї Зег Ма! Спи Пе Спи Тгр См Геи Сп 675 680 685 60
Гуз Сім Авп 5ег І уз Ага Ттр Азп Рго Спи Пе Сп Тук Тиг Зег Авзп 690 695 700
Туг Туг Гуз Зег Авзп Авзп Маї Сім РНе Аа Маї Авп Тиг Сім Спу Маї 705 710 715 720
ТугЗег Си Рго Ага Рго Пе Сіпу ТНг Агу Туг І еи Тнг Агу Авп Її єи 725 730 735 «2105 11 -2115 738 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус 10 «4005 11
Меї Ага Аа Азвр Сіу Туг ГГ еи Рго Авр Тгр Геи Си Авр Авп І еи 5ег 1 5 10 15
Сім Спу Пе Ага Сім Тер Тр Авр ГІ єи Гуз Рго ау Аа Рго Гуз Рго 20 25 Зо
Гуз Аа Авп Сп Сп Гуз Сп Авр Авр Су Аго Спу Геи Маї Геи Рго
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Сіпу Рго Рпе Авп ау І еи Авр Гуз Спу См Рго 60
З5 маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 40
Сіп Сп Гей Гуз Аа Спу Авр Авп Рго Туг Гей Агу Туг Авп Нів Аа 85 90 95 45 Авр Аіа Си РНеє Сп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тит Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 50 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Аїа Аа Гуз Тнг Аа Рго Стпу Гуз Гуз Ага 130 135 140 55
Рго Маї Сім Рго Зег Рго Сп Агу Бег Рго Авр Зег Зег Тиг Спу Пе 145 150 155 160 60
Сіу Гуз Гуз Спу Сп Сп Рго Аа Гуз Гуз Агу І єи Азп РНе Су Сп 165 170 175
Тигапу Спи бег СПИ Зег Ма! Рго Авр Рго Сіп Рго Пе Спу Спи Рго 180 185 190
Рго Аа Сіу Рго бег Спу Геи Спіу Бег Спу Тиг Меї Аа Аїа Спіу Спу 195 200 205
Стпу Аа Рго Меї Аа Авр Авп Азп Спи Спу Аа Азр Спу Ма! Спу бег 210 215 220 зЗег Зег Сіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТНг Тгр Г еи Сіу Азр Аго Маї 225 230 235 240
Пе Тиг Тиг бег Тиг Аг ТАг Тгр Аа ГГ еи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Ї еи Туг Гуз Сп Пе Бег Азп Спу Тиг Зег Сіу Спу Зег Тит Авп Ар 260 265 270
Авп ТНиг Туг Рпе Стпу Туг Зег ТНг Рго Тр Стпу Туг Рпе Авр РНе Авп 275 280 285
Агу Ре Ніз Суз Ні Рпє 5ег Рго Агу Авр Тгр ап Аго І єи Пе Авп 290 295 00
З5
Азп Авп Тгтр Су РНе Аг Рго Гуз Ага Геи Зег РнНе Гуз І ви Рпе Авп 305 з10 315 з20
Пе СіІп Ма! Гуз Спи Ма! Тик Сп Авп Спи Спту Тк Гуз Тнг Пе Аа 325 330 335
Авп Авп ЇЇ ви ТНг Зег ТНг Пе Сп Маї Ре Тнг Ар Зег Спи Туг Сіл 340 345 350
Ї еи Ро Туг Маї Геи Спу 5ег Аа Ні Сіп Спіу Сув І еи Рго Рго Рпе 355 360 365
Рго Аа Ар Маї Рне Ме! Пе Рго Сіп Туг Сіу Туг Геи ТАг І еи Авп 370 375 380
Азп Стпу 5ег Сіп Аа Маї Спу Ага 5ег Зег РНе Туг Суз І ви Сім Туг 385 390 395 400 60
Рпеє Рго 5ег Сп Меї Г еи Агу ТНг Сіу Азп Азп Ре Спи РНе Зег Туг 405 до 415
ТАгРНе Сі Авр Маї Рго Ре Нів Зег 5ег Туг Аїа Нів 5ег Сп Зег 420 425 430
Ї еи Авр Ага І єм Меї Авп Рго І/ єи Іе Авр Сп Туг І еи Туг Туг Гей 435 440 445 зег Агу ТАг Сп Зег ТАг Спу Спіу Тиг Сип Спу ТАг Стп Сп Гей Ге 450 455 460
Рпе Зег Сіп Ага Сіу Рго АйЇа Авп Меї 5ег Аїа Сп Айа Гуз Авп Тр 465 470 475 480
Ї еи Рго Сіу Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Тит ТНг Гей Зег 485 490 495
Сп Авп Авп Авп 5ег Азп РНє Аа Тр ТАг Спу Аа Тнг Гуз Туг Нів 500 505 510
Ї еи Авп Сіу Агу Авр 5ег І єи Маї Азп Рго Сіу Маї Аіа Меї Аа ТНг 515 520 525
Нів Гуз Авр Авр Си Спи Агу Рпє Ре Рго 5ег Зег Спу Ма! Геи Меї 530 535 540
З5
Рпе Спу Гуз Сип Спу Аа Стпу Агу Авр Авзп Маї Авр Туг Зег 5ег Маї 545 550 555 560
Меї І еи Тнг Зег СПми Спи Спи Пе Гув ТНг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг 565 570 575
Си Сип Туг СПу Маї Маї Аіа Авр Авп І ви Сп Сп Аа Авп Тиг Спіу 580 585 590
Рго Іе Маї Спіу Авп Маї Авп 5ег Сп Спу Аа І єи Рго Спу Меї Маї 595 600 605
Тр Сп Авп Агу Авр Маї Туг Гей Сп Спіу Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе 610 615 620
Рго Ні Тиг Авр Су Авп Ре Нів Рго 5ег Рго І еи Меї СПу СПу Рпе 625 630 635 640 60
СПУ І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сп Іе І еи Пе Гуз Азп Тнг Рго Маї 645 650 655
Рго Аа Ар Рго Рго Тниг Тнг Рне 5ег ап Аїа ГІ уз І єи Аа бЗег Рпе 660 665 670
Пе Тиг Слп Туг Зег ТАг Спу Сіп Маї бег Ма! Спи Пе Спи Тгр Спи 675 680 685
Ї еи Сп Гуз Си Авп 5ег Гуз Агу Тр Авп Рго Спи Пе Сп Туг ТНг 690 695 700 зЗег Азп Туг Туг Гуз 5ег ТНг Авп Маї Азр Рне Аїа Маї Авп Тнг Спи 705 710 715 720
Сіу Тниг Туг Зег Сім Рго Аго Рго Пе Спу Тиг Аго Туг ГГ еи Тиг Ага 725 730 735
Авпієи -2105 12
Зо -2115 738 «212» білок «213» Аденоасоційований вірус /п10 «4005 12
З5
Меї Ага Аа Азвр Сіу Туг ГГ еи Рго Авр Тгр Геи Си Авр Авп І еи 5ег 1 5 10 15 си Спу Пе Аго Сім Тер Ттр Айва Геи Гуз Рго Сіу Аа Рго Гу Рго 20 25 Зо
Гуз Аа Авп Сп Сп Гуз Сп Авр Авр Су Аго Спу Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 60 50 маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 55
Сіп Сп Гей Гуз Аа Спу Авр Авп Рго Туг Геи Агу Туг Авп Нів Аа 85 90 95 60 Авр Аа Си Ре Сп Спи Ага Гей Сіп Спи Авр ТАг Зег Рне Сіу Спу
100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Спу Аа Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Аг9 130 135 140
Рго Маї Сім Рго Зег Рго Сп Агу Бег Рго Авр Зег Зег Тиг Спу Пе 145 150 155 160
Сіу Гуз Гуз Спу Сп Сп Рго Аа Гуз Гуз Агу І єи Азп РНе Су Сп 165 170 175
Тигаїу Авр 5ег Си 5ег Маї Рго Авр Рго Сіп Рго Пе Спу Спи Рго 180 185 190
Рго Аа Сіу Рго бег Спу Геи Спіу Бег Спу Тиг Меї Аа Аїа Спіу Спу 195 200 205
Сіу Аїа Рго Меї Айїа Авр Авп Авп Сім СтПу Аа Азр СПУ Ма! Сіу Зег 210 215 220
Зо зЗег Зег Сіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5Зег ТНг Тгр Г еи Сіу Авр Су Маї 225 230 235 240
З5
Пе Тиг Тиг бег Тиг Аг ТАг Тгр Аа ГГ еи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів 245 250 255
Ї еи Туг Гуз Сп Пе Бег Азп Спу Тиг Зег Сіу Спу Зег Тит Авп Ар 260 265 270
Азп Тнг Туг Рне Су Туг Зег ТНиг Рго Тр Сіу Туг Ріпе Авр Рпе Авп 275 280 285
Агу Ре Ніз Суз Ні Рпє 5ег Рго Агу Авр Тгр ап Аго І єи Пе Авп 290 295 00
Азп Авп Тгтр Су РНе Аг Рго Гуз 5ег Геи Азп РПє Гуз Геи Рпе Авп 305 з10 315 320
Пе Сп Маї Гуз Спи Ма! Тиг Сп Авп Спи сту Ти Гув ТАг Пе Аа 325 330 335 60 Авп Авп Гей ТНг Зег ТНг Пе Сп Маї Рне ТАг Авр Зег Спи Туг Сп
340 345 350
Ї еи Ро Туг Маї Геи Спу 5ег Аа Ні Сип Сіу Суз Гей Рго Рго Рпе 355 360 365
Рго Аа Ар Маї Рне Ме! Пе Рго Сіп Туг Сіу Туг Геи ТАг І еи Авп 370 375 380
Азп Стпу 5ег Сіп Аа Маї Спу Ага 5ег Зег Рпе Туг Суз І ви СПм Туг 385 390 395 400
Рпеє Рго 5ег Сп Меї Г еи Агу ТНг Сіу Азп Азп Ре Спи РНе Зег Туг 405 до 415 ап Рпе Спи Авр Маї Рго Рнеє Нів 5ег Зег Туг Аіа Нів 5ег Сп 5ег 420 425 430
Ї еи Авр Ага І єм Меї Авп Рго І/ єи Іе Авр Сп Туг І еи Туг Туг Гей 435 440 445 зег Агу ТАг Сп Зег ТАг Спу Сіу Тнг Аа Спу Тнг Сп Сп І єи Гей 450 455 460
Зо
Рпе 5ег Сіп Аа Стпу Рго Авп Авзп Меї 5ег Аїа Сп Аа Гуз Авп Ттр 465 470 475 480
З5
Ї еи Рго Су Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег ТАг ТНг Геи Бег 485 490 495 ап Авп Авр Авп 5ег Азп РНє Аа Тр ТАг Спу Аа Тнг Гуз Туг Нів 500 505 510
Ї еи Авп Сіу Агу Авр 56ег І єи Маї Авп Рго Сіу Маї Аа Меї Аа ТНг 515 520 525
Нів Гуз Авр Авр Си Спи Агу Рпє Ре Рго 5ег Зег Спу Ма! Геи Меї 530 535 540
Рпе Спу Гуз Сип Спу Аа Сту Гуз Авр Авп Маї Ар Туг Зег Зег Маї 545 550 555 560
Меї І еи Тнг Зег СПми Спи Спи Пе Гув ТНг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг 565 570 575 60 Спи Сп Туг Спіу Маї Ма! Аа Авр Авп І еи Сп Сп Сп Авп Аа Аа
580 585 590
Рго Іе Маї Сіпу Аїа Маї Авп 5ег СіІп Су Аа І єи Рго Спу Меї Маї 595 600 605
Тр Сп Авп Агу Ар Маї Туг Гей Сп Спіу Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе 610 615 620
Рго Ні Тиг Авр Су Авп Ре Нів Рго 5ег Рго І еи Меї СПу СПу Рпе 625 630 635 640
СПУ Ї єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сп Іе І еи Пе Гуз Азп Тнг Рго Маї 645 650 655
Рго Аа Ар Рго Рго Тниг Тнг Рне 5ег ап Аїа ГІ уз І єи Аа бЗег Рпе 660 665 670
Пе Тиг Слп Туг Зег ТАг Спу Сіп Маї бег Ма! Спи Пе Спи Тгр Спи 675 680 685
Ї еи Сп Гуз Си Авп 5ег Гуз Агу Тр Авп Рго Спи Пе Сп Туг ТНг 690 695 700
Зо зЗег Азп Туг Туг Гуз 5ег ТНг Авп Маї Азр Рне Аїа Маї Авп Тнг Азр 705 710 715 720
Сіу Тниг Туг Зег Сім Рго Аго Рго Пе Спу Тиг Аго Туг ГГ еи Тиг Ага 725 730 735
Авпієи -2105 13 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 13
Авп Гуз Пе Сіп Агу Тиг Ар 1 5 «2105» 14 «2115 7 60 «212» білок
«213» Синтетична послідовність «223» гетерологічна пептидна інсерція «400» 14
Авп Гу ТА ТНг Авп Гуз Ар 1 5 «210» 15 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 15
Тпиг Авп Гуз Пе Спу Маї ТНг 1 5 «210» 16 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 16
Сіу Авп Г єи Тпг Гуз Спу Авп 1 5 «2105» 17 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «400» 17
Авп ТАг Маї Гуз І єи 5ег ТНг 1 5 «210» 18 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» бо «223» гетерологічна пептидна інсерція
-4005» 18 зЗег Авп ТНг Маї Гуз Аїа Іе 1 5 «210» 19 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005» 19
Аа 5ег Авп Пе ТНг Гуз Аа 1 5 «210» 20 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція
Зо «4005» 20
Азр Ап ТНг Маї Тнг Ага зег 1 5 «2105» 21 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «400» 21
Авп І уз Пе 5ег Аа І уз Азр 1 5 «2105» 22 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «400» 22 60 Авп ап Авр Туг Тпг Гуз ТНг
1 5 «210» 23 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 23
Сіп Аа Азвр Тиг ТАг Гуз Авп 1 5 «210» 24 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «400» 24
Тпиг Авп Агу Тпг 5ег Рго А5р 1 5 «210» 25 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005» 25 зЗег Авп ТПг Тпг Сп Гу ТНг 1 5 «210» 26 «2115 7 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005» 26
Аа 5ег А5р 5ег ТНг Гуз Аа 1 5 60 «2105» 27
«2115» 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «400» 27
Ї еи Аа Авп Гуз Пе Сіп Агу ТНг Авр Аа 1 5 10 «210» 28 «2115» 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «-4005» 28
Ї еи Аїіа Авп Гуз ТНг ТНг Авп Гуз Ар Аа 1 5 10 «210» 29 «2115» 10
Зо «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005» 29
Ї еи Аа Тнг Авп Гуз Пе Сіу Ма! ТАг Аіа 1 5 10 -2105» 30 «2115» 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція -4005 30
Ї еи Аа Сіу Авп І єи ТНг Гуз Спіу Авп Аа 1 5 10 «2105 31 «2115» 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність 60
«223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 31
Ї еи Аіа Азп ТНг Маї Гуз Г еи Зег ТАг Аіа 1 5 10 -2105 32 «2115» 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «-4005 32
Ї еи Аа 5ег Азп ТНг Маї Гуз Аа Іе Аа 1 5 10 «2105» З3 -2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220»
Зо «223» гетерологічна пептидна інсерція «-4005 33
Ї еи Аіа Аа 5ег Авп Пе Тиг Гуз Аа Аа 1 5 10 «2105» 34 «2115» 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 34
Ї еи Аіа Азвр Авп ТНг Маї Тнг Ага 5ег Аа 1 5 10 «2105» 35 «2115» 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція бо «-4005 35
Ї еи Айва Авт І уз Іе 5ег Аа Гуз Азр Аїа 1 5 10 -2105» 36 -2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «-4005 36
Ї еи АІа Авп Сп Авр Туг ТНг Гуз ТАг Аа 1 5 10 «2105 37 -2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 37
Ї еи Аа Тнг Авп І уз Пе Сіу Ма! ТАг Зег 1 5 10 -2105» 38 -2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «-4005» 38
Ї еи Аа Тнг Авп Гуз Пе Сіу Ма! ТАг Аіа 45. 1 5 10 «2105» 39 «2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005» 39
Ї еи АІа Сп Айа Авр Тнг Тпг Гуз Авп Аа 1 5 10 60
-2105» 40 -2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005» 40
Ї еи Аіа Тниг Авп Агу ТНг Зег Рго Авр Аа 1 5 10 «2105 А -2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005 41
Ї еи Аіа 5ег Авп Тиг Тпг Сп Гуз ТАг Аа 1 5 10
Зо -2105» 42 -2115 10 «212» білок «213» Синтетична послідовність «220» «223» гетерологічна пептидна інсерція «4005» 42
Ї еи Аїа Аа 5ег Авр 5ег ТНг Гуз Аа Аа 1 5 10 -2105 43 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ -4005 43
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 зо бо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60
Маї Авп Си Аа Ар Айа Аїйа Аа ГІ єи Сім Нів Авр Гуз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Маї Сім Ні Зег Рго Маї Сім Рго Авр Зег 5ег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Рпе Стпу Сп Тйг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тниг Спу бег Су 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220
Зег ау Авп Тр Ніз Сувз Авр 5ег Тпг Ттр Меї Сіу Авр Агу Маї! Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе бег 5ег Сп 5ег Спу Аіа Зег Азп Авр Авп Нів Туг 260 265 270 60
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Ттр ап Агу ГГ еи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авп Ар Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу Зег Аа Ніз Сип Сіу Суз І єи Ріо Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380 ап Аа Маї Сіу Агу Зег 5ег Рпє Туг Суз І ви Спи Туг РНе Рго Зег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Су Аа бег Ар Іе Агу Авр Сп 5ег Ага Авп Ттр І єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510 60
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сп Спу 5ег Спи Гув ТНг Авп Маї Авр Іе Спи Гуз Ма! Меї Пе ТНг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег ТНг Авп Гей Сп Агу сту Авп І єи Айа Авп Гуз Пе 580 585 590
Сіп Ага ТАг Азр Аїйа Ага ап Аїа Аа Тнг Аа Ар Маї Авп Тнг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620 сапу Рго Іе Тр Айа Гуз Іе Рго Ні Тиг Азр Су Нів РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Спи Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Спи Авп 5ег Гуз Аго Тр 690 695 700
Авп Рго Сл Пе Сп Туг ТНг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Пе Авп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Ага Рго Пе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 60
«210» 44 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ДАМ «4005» 44
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго
Зо 20 Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 25 50 55 бо маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Зо
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
З5
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110 40 Авп еи Сту Аго Аа Маї Рне Сп Ага Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 45 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190 60 Аа Аа Рго 5ег СПУ І еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тниг Спу Бег Спу
195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Авп Спи Спу Аа Авр Стпіу Ма! Спу Азп бег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тнг Агу ТиАг Тр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І еи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Стіу Туг Рне Ар Ре Авп Аг РНє Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Гуз РнНе ГІ уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Зо
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
З5
Тпиг Зег Тиг Маї Сіп Маї Рне Тниг Авр 5ег Сім Туг Сп І еи Рго Туг 340 345 350
Ма! Геи Стпу Бег Аа Ні5 Сп Спу Суз ГГ еи Рго Рго Рне Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сп Туг Спу Туг Геи ТНг ГГ еи Авп Авп Сіу Зег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Агу Тиг спу Авзп Авзп Ре Тнг РНе 5ег Туг Тиг Ре Си 405 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430 60 Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І єи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг
435 440 445
Азр Тиг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Агу Авр 5ег І еи Маї Авп Рго Сту Рго Аа Меї Аїйа 5ег Нів Г ув Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Зег Ма! Ар Пе Стпи Гуз Ма! Меї Пе ТНг 545 550 555 560
Зо
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
З5
Сіу Зег Маї Зег ТНг Авп Гей Сп Агу сту Авп І єи Айа Авп Гуз Пе 580 585 590 ап Агу ТНг Ар Айа Аго Сп Аїйа Аа Тиг Аа Ар Маї Авп Тнг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670 60 Аа Аа Гуз Рнє Аїа 5ег РНе Іе Тнг Сп Туг Зег Тиг Спіу Сп Маї
675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Маї Сіп Туг ТНг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Ма! Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ап 740 745 «2105» 45 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005» 45
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Ага Сіп І єи Авзр бег Сіу Авр Азп Рго Туг І єи Гуз Туг Авп Ні Аа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125 60
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Зо Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр Сп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тгтр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 з20
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Аа Авп Авт І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 маї Геи Сіу Зег Аа Ніз СіІп Спу Сув Геи Рго Рго Рне Рго Аа Азр 355 360 365 60
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Сіп Аїа Маї Стпу Агу бег бег РНе Туг Сувз Геи Сім Туг РНе Рго Зег 385 390 395 400
Сп Меї єси Агу Тнг апу Авп Авп Ре ТАг РНе Зег Туг Тиг Рпе Спи 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні Зег Зег Туг Аа Нів Зег Сп Зег І еи Авр Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег Спу Тиг Тнг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре 5Бег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз Тиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Ав5р Сім Спи Сім Пе Ага Тнг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг Спи Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег ТНг Авп Гей Сп Агу сту Авп І єи Айа Авп Гуз Пе 580 585 590
Сіп Ага ТАг Азр Аїйа Ага ап Аїа Аа Тнг Аа Ар Маї Авп Тнг Сп 595 600 605 60
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640
Беї Рго Ї ви Меї Сіу Сіу Рне Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авзп Тниг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тпг ТНг Рпе 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Абр Ре Тпг Маї Азр Тнг Авп ау Маї Туг 5ег Сім Рго Ага Рго Пе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105» 46 «2115 745 4000 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005» 46
Меї Ага Аа Азвр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45 60 сапу Туг Гуз Туг І єи Спу Рго Рне Авп ау І єи Ар Гуз Спіу Спи Рго
50 55 бо маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу (145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Зо
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
З5
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Авп Авп Си Спу Аа Азр Спу Маї Спу Авп Зег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе
ДЦ225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285 60 Сув Ні Рпе 5ег Рго Агу Ар Тр Сп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр
290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тиг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп І єеи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Маї Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Сіу Туг Гей ТНг Гей Авп Авп Спу зег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег -З85 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТНиг Спу Авзп Авзп Рпе Тпг РНе 5ег Туг Тег Рпе Си 405 до 415
Зо
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
З5
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І єи Туг Туг І еи 5ег Ага ТНг 435 440 445
Авп ТАг Ріо бег Спу ТАг Тнг Тиг Сп Бег Аго Геи Сп РНе 5ег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр І єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Азп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тниг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525 60 Авр Спи Спи Губ5 Ре РНе Рго Сп Зег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гуз
530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг
Б45 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГГ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айва Тнг Авп ГГ ув 580 585 590
Пе Спу Маї ТАг Аїа Ага Сіп Аїа Аа Тнг Аа Авр Маї Авп ТАг Сп 595 600 605 ау Маї І ви Рго Спу Меї Маї Тр Сп Авр Ага Азр Маї Туг І еи Сп 610 615 в2о
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Зо
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
З5
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685
Зег МаїЇ Спи Пе Спи Тер Сіи Гей Сип Гув5 Сім Авп Зег Гуз Ага Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сіп Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Пе Авп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105» 47 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність 60
«223» капсид варіанта ААМ «4005» 47
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 спи Спу Пе Ага Сіп Тер Тер Гуз ГГ еи Гуз Рго Су Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Туг Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Рпе Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Авр Авіа Си Ре Сп Сім Агу Гей Гуз Сіи Авр Те Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220 60 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
ТугГуз Сип Пе бег Зег СІп Зег СПу Аа Зег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
ТАгЗег ТНг Маї Сп Маї Ре Тнг Авр 5ег Сіи Туг Сп І еи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сип Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Сіп Аїа Маї Стпу Агу бег бег Рпе Туг Сув І еи Сім Туг Рне Рго 5Бег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 405 до 415
Ар Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Нів 5ег Сп 5ег І еи Авр Аго 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага ГГ еи Сп РНе 5ег Сп 450 455 460 60
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гув5 ТНг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп бег Спи Туг Зег Ттр Тниг ау Аа ТАг Гуз Туг Нів Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е"! І єи Маї Авп Рго Сіу Рго Аа Меї Аа 5ег Ні Гуз Азр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сіп Спіу Зег Спи Гуз ТАг Авзп Маї Авр Пе Спи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575 сту бег Ма! Зег ТНг Авп ГГ еи Сп Ага ау Авп І єи Аа Тнг Авп Гуз 580 585 590
Пе Спу Маї ТАг Аїа Ага Сіп Аїа Аа Тнг Аа Авр Маї Авп ТАг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700 60
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105» 48 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005» 48
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тр Геи Си Авр ТНг ГГ еи 5ег 11 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз Гуз Ар Авр 5ег Ага ау ГІ еи Ма! Гей Рго
З5
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 60 40 Маї Авп Си Аа Ар Айа Айа Аа ГІ єи Сім Нів Авр Гуз Айа Туг Азр 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 45 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110 50
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125 55
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140 60 Ро Маї Сім Нів 5ег Рго Маї Сіи Рго Авр Зег Зег Зег Спу Тиг Спу
145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220
Зег ау Авп Тр Ніз Сувз Авр 5ег Тпг Ттр Меї Спу Ар Агу Маї Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Зо
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
З5
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 з20
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 маї Геи Сіу Зег Аа Ніз СіІп Спу Сув І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380 60 ап Аа Маї Сіу Агу бег Зег Рпе Туг Сувз Геи Сіи Туг Рне Рго Зег
385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТНиг Спу Авзп Авзп Рпе Тпг Рне 5ег Туг Тиг Рпе Си 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Аг ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Су Аа 5ег Ар Іе Агу Авр Сп 5ег Ага Авп Тгр Геи Рго Сіу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа ТАг Гуз Туг Нів Геи Авп Спу 500 505 510
Зо
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
З5
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп Зег Спу Ма! Геи Пе Рне Спу Гув 530 535 540 ап спу 5ег Спи Гув ТНг Авп Маї Авр Іе Спи Гуз Ма! Меї Пе ТНг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тпг ТНг Авп Рго Маї Аа ТАг Спи Сіп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГІ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айва Авп Гуз ТНг 580 585 590
Тпиг Авп Гуз Авр Аїа Аго Сп Аа Аа ТНиг Аіа Ар Маї Авзп Тнг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620 60 апу Рго Пе Ттр Аа Гуз Пе Рго Нів Тнг Авр Су Ні Ре Нів Рго
625 630 635 640 зЗег Рго І еи Меї Спу Спу РНе Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авзп Тниг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тпг ТНг Рпе 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Авп Рго Сл Пе Сіп Туг ТНг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Пе Авп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745
Зо «210» 49 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005» 49
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15
Сі Спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Су Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау І еи Авр Гуз Спіу Спи Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 60
Ага ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авп Рго Туг ГГ еи Гуз Туг Авп Нів Аа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп ЇЇ еи Сту Аго Аа Маї Рне ап Аа Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу І єи Спу ТАг Авп ТНг Меї Аїа Тниг Спу 5ег Су 195 200 205
Аа Рго Меї Аїа Ар Авп Авп Спи Спу Аа Ар Стпу Маї Спу Авп Бег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 оо
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Гуз РНе Гуз І еи Рне Азп Іе Сіп Маї 305 з10 315 320 60
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350
Ма! Геи Спу Бег Аа Ніз Сп Спу Суз ГГ еи Рго Рго Рне Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Азр Тиг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тит ап Зег Ага І ви Сип Ре 5ег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа Авр Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг Авр 5ег І еи Маї Авп Рго Сту Рго Аа Меї Аїа з5ег Нів І ув А5р 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Зег Ма! Ар Пе Спи Гуз Ма! Ме! Ше ТНг 545 550 555 560 60
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГІ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айва Авп Гуз ТНг 580 585 590
ТАг Авп Гуз Авр Айа Аго Сп Аїа Аа ТНиг Аа Ар Маї Авп Тнг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Спу Меї Маї Ттр Сп Авр Аг Азр Маї Туг І еи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
Аа Аа Гу Ріє Аа 5ег РНе Пе ТАг Сп Туг Зег ТНиг Спу Сіп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Маї Сіп Туг ТНг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Ма! Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ап 740 745 «2105 50 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005» 50 60 Меї Ага Аа Авр Су Туг ГГ еи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Гей Зег
1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сім Аг Ніз Гуз Авр Ар 5ег Аго ау ГІ еи Ма! І еи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Ар ГІ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Агу Сп еи Авр 5ег Сіу Авр Авп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сім Авр ТНг Зег Рпе СпПу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Зо
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аїа Рго Сіу Гуз Гуз Аг9 130 135 140
З5
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Спіу Сп Сіп Рго Аа Аг Гуз Аго ГГ еи Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тниг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240 бо Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи
245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Зо
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
З5
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сп Мей єси Агу Тнг сапу Авп Авп Рнпе ТАг Рне Зег Туг Тиг Рпе Спи 405 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480 60 Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп
485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Авр Спи Си Гуз Рне РнНе Рго СіІп 5ег Сіу Ма! І еи Пе Рне Су І уз 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Авр Сім Спи Сім Пе Ага Тнг ТАг Авп Рго Маї Аа ТАиг Спи Сп Тут 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГІ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айва Авп Гуз ТНг 580 585 590
Тпиг Авп Гуз Авр Аїйа Аго Сп Аа Аа Тнг Аа Ар Маї Авзп Тнг Сп 595 600 605
Зо
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
З5
Сіу Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тиг Авр Су Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640
Бе Рго Ї ви Меї Спіу Сіу Рне Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авп ТНиг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рпе Зег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз С1и Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720 60 Авр Ре Тиг Маї Авр ТНг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Аго Рго Іе
725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105 51 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005 51
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго
Зо сапу Туг Гуз ТугГ еи Су Рго Рне Авзп Су Геи Авр Гуз Спу См Рго 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 35 65 70 75 80
Ага ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аа 85 90 95 40
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110 45
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз Гуз Аг Маї Геи Спи Рго 115 120 125 50 Геш сапу Г єи Ма! Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аїа Рго Су Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Сім Рго Ар 5ег Зег Зег Спу Тиг Спу 55 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175 60
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І єи Спу Сіп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Авп Авп Си Спу Аа Азр Стпу Маї Спу Авп Зег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг Зег Тиг Агу ТАг Тер Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Ні5 РНе 5ег Рго Ага Авр Тгр аїп Ага Г єи Пе Авп Авп Авп Ттр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 маї Геи Сіу Зег Аа Ніз СіІп Спу Сув І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Маї Рпе Меї Маї Рго Сіп Туг Сіу Туг Гей ТНг Геи Авп Авп Сіу Зег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 405 до 415 60
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп ТАг Ріо бег Спіу ТАг Тнг Тиг Сіп Бег Аго Геи Сп РНе 5ег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Авр Сім Спи Гув Рпе РНе Рго Сп бег Стпу Ма! І еи Пе Ре Спу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Авзп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тнг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГІ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Аа Сіу Авп ГІ єи 580 585 590
Тиг Гуз Спу Авп Аїа Агу Сп Аа Аа ТАг Аа Авр Маї Авп Тнг Сп 595 600 605 сапу Маї І єи Рго Спу Меї Маї Тр Сп Авр Ага Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І ви Меї Сіу Спу Рне Сіу Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655 60
Ї ей Пе Гуз Авзп Тниг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тпг ТНг Рпе 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе Пе ТАг Сіп Туг Зег Тиг Спу Сп Маї 675 680 685
Зег МаїЇ Спи Пе Спи Тер Сіи Гей Стій Г ув Спи Авп Зег Гуз Аго Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Авп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Аг Авп ГГ єи 740 745 «-2105 52 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність
Зо «220» «223» капсид варіанта ААМ «-4005 52
З5
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15
Спи Спу Пе Ага Сп Тр Тр Гуз Геи Гуз Рго Су Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 60 50 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 55
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95 60 Авр Аа Си Ре Сп Спи Ага Геи Гуз Сім Авр ТАг Зег Рне Спу Спу
100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Аг9 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу Геи Авп Рпе Сіу Сіп ТНг 165 170 175 ау Авр Аа Авр 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго Гей Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аїа Тиг Спу бег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220
Зо зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТНиг Ттр Меї Сіу Азр Аго Маї! Пе 225 230 235 240
З5
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
ТугГуз Сип Пе бег Зег Сп бег СПу Аіа 5ег Азп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Ттр Сп Аг ГГ еи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335 60 ТНгЗег Тнг Маї Сіп Маї! Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг
340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 405 до 415
Авр Маї Рго РНе Ні 5ег 5ег Туг Аа Нів Зег Сп Зег І еи Авр Аг9 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Зо
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
З5
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп бег Спи Туг Зег Ттр Тниг сапу Аа ТАг Гуз Туг Нів Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575 60 сапу Зег Ма! Зег ТНиг Авп І ви Сп Агу сапу Авп Гей Аа Авп ТНг Маї
580 585 590
Гуз Геи Зег ТАг Аїа Аго ап Аа Аа Тнг Аа Ар Маї Авп Тнг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Сіу Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тниг Ар аїу Ні Ре Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І еи Меї Спу Спу РНе Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авзп ТНиг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг Тиг Рпе Зег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Спи Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Г ув Си Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Зо
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
З5
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Су Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105 53 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005 53
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 зо 60
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60
Маї Авп Си Аа Ар Айа Аїйа Аа ГІ єи Сім Нів Авр Гуз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго МаїЇ Сім Ні Зег Рго Маї Сім Рго Авр Зег 5Зег Зег Спу ТАг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Авп Спи Спу Аа Азр Спу Ма! Спу Авп 5ег 210 215 220
Зег ау Авп Тр Ніз Сувз Авр 5ег Тпг Ттр Меї Спу Ар Агу Маї Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго ТНг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270 60
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Тгр Стпу Туг Рпе Авр РНеє Авп Аго РНє Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго І уз Агу І єи Азп Рне І уз І єи Рне Авзп Іе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Г еи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380 ап Аа Маї Сіу Агу бег 5ег Рпє Туг Суз І ви Спи Туг РНе Рго Зег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Су Аа бег Ар Іе Агу Авр Сп 5ег Ага Авп Ттр І єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510 60
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сп Спу 5ег Спи Гув ТНг Авп Маї Авр Іе Спи Гуз Ма! Меї Пе ТНг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГІ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айва 5ег Авп ТНг 580 585 590 маї Гуз Аа Пе Аа Ага Сіп Аа Аа Тнг Аа Авр Маї Авп ТАг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620 сапу Рго Іе Тр Айа Гуз Іе Рго Ні Тиг Азр Су Нів РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І ви Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сіп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Авп Рго Сл Пе Сп Туг ТНг Зег Азп Туг Авп Гуз Зег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 60
«2105» 54 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005 54
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго
Зо 20 Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 25 50 55 бо маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Зо
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
З5
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110 40 Авп еи Сту Аго Аа Маї Рне Сп Ага Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 45 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190 60 Аа Аа Рго 5ег СПУ І еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу бег Су
195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Спіу Азр Ага Маї Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе бег 5ег Сип 5ег Спу Аа 5ег Азп Авр Авп Нів Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр ап Аг Г еи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Зо
Гуз Спи Маї Тиг СіІп Авзп Ар ау Тиг ТНг Те Пе Аа Авп Ав І єи 325 330 335
З5
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350
Ма! Геи Стпу Бег Аа Ніз Сп Спу Суз І еи Рго Рго Рне Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Сіп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго Зег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 405 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430 60 Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг
435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Агу Авр 5ег І еи Маї Авп Рго Сту Рго Аа Меї Аїйа 5ег Нів Г ув Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Зо
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
З5
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГГ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айа Аа 5ег Авп 580 585 590
Пе Тниг Гуз Аа Аїа Аго Сп Аа Аа Тниг Аа Ар Маї Авзп Тнг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І еи Меї Спу Спу РНе Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авзп Тниг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тпг ТНг Рпе 5ег 660 665 670 60 Аа Аа Гуз Рнє Аїа 5ег РНе Іе Тнг Сп Туг Зег Тиг Спіу Сп Маї
675 680 685 зЗег Ма! Спи Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Спи Авп 5ег Гуз Агу Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Ага Рго Пе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105» 55 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005 55
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Ага Сіп І єи Авзр бег Сіу Авр Азп Рго Туг І єи Гуз Туг Авп Ні Аа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125 60
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Зо Тиг Тиг 5ег Тнг Агу ТиАг Тр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І еи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Стіу Туг Рне Ар РНе Авп Аг РНє Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І еи Авп Рне І уз І єи РНе Авп Іе Сіп Маї 305 з10 315 з20
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тиг Маї СіІп Маї Рне Тнг Авр 5ег Сім Туг Сп І еи Рго Туг 340 345 350 маї Геи Сіу Зег Аа Ніз СіІп Спу Сув І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365 60
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Сіу Туг Геи ТНг І еи Авп Авп Сіу Зег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сп Меї єси Агу Тнг сапу Авп Авп РНе ТАг РНе 5ег Туг ТНиг РНе Сі 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І єи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Ав5р Сім Спи Сім Пе Ага Тнг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг Спи Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГІ ви Сп Агу Стпу Авп ГГ еи Аа Авр Авп Тг 580 585 590 маї Тиг Агу 5ег Аа Агу Сп Аїа Аа ТНиг Аа Ар Маї Авзп Тнг Сп 595 600 605 60
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640
Беї Рго Ї ви Меї Сіу Сіу Рне Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авзп Тниг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тпг ТНг Рпе 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Абр Ре Тпг Маї Азр Тнг Авп ау Маї Туг 5ег Сім Рго Ага Рго Пе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105 56 «2115 745 4000 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005 56
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45 60 сапу Туг Гуз Туг І єи Спу Рго Рне Авп ау І єи Ар Гуз Спіу Спи Рго
50 55 бо маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу (145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Зо
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
З5
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Авп Авп Си Спу Аа Азр Спу Маї Спу Авп Зег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе
ДЦ225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285 60 Сув Ні Рпе 5ег Рго Агу Ар Тр Сп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр
290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Аа Авп Авт І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сип Сіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Маї Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Сіу Туг Гей ТНг Геи Авп Авп Сіу Зег 370 375 380
Сіп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Сув Геи Сім Туг РНе Рго Зег -З85 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 405 до 415
Зо
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Нів Зег Сп Зег І еи Авр Ага 420 425 430
З5
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп ТАг Ріо бег Спіу ТАг Тнг Тиг Сп Бег Аго Геи Сп РНе 5ег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525 60 Авр Спи Спи Губ5 Ре РНе Рго Сп Зег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гуз
530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг
Б45 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег ТНг Авп Гей Сп Агу сту Авп І єи Айа Авп Гуз Пе 580 585 590 зЗег Аа Гуз Авр Аа Ага Сп Аа Аїа ТНг Аа Авр Маї Авп ТАг Сп 595 600 605 ау Маї І ви Рго Спу Меї Маї Тр Сп Авр Ага Азр Маї Туг І еи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Зо
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
З5
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685
Зег МаїЇ Спи Пе Спи Тер Сіи Гей Сип Гув5 Сім Авп Зег Гуз Ага Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105» 57 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність 60
«223» капсид варіанта ААМ «4005 57
Меї Ага Аа Азр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15
Спи Спу Пе Ага Сп Тер Тр Гуз Геи Гуз Рго Су Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз Гуз Авр Ар 5ег Ага ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Авр Авіа Си Ре Сп Сім Агу Гей Гуз Сіи Авр Те Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220 60 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
ТугГуз Сип Пе бег Зег СІп Зег СПу Аа Зег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
ТАгЗег ТНг Маї Сп Маї Рне Тнг Авр 5ег Сіи Туг Сп ГГ еи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп Сіу Зег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТНиг Спу Авзп Авзп Рпе Тпг Ре 5ег Туг Тег Рпе Си 405 до 415
Ар Маї Рго РНе Ні 5ег 5ег Туг Аа Нів Зег Сп Зег І еи Авр Аг9 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І єи Туг Туг І еи 5ег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460 60
Аа Сіу Ага бег Азр Іе Ага Авр Сп 5ег Агу Авп Тр І єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп бег Спи Туг Зег Тр Тниг ау Аа ТНг Гуз Туг Нів І еи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Азр Спи Сім Гу Ре РНе Рго Сіп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Спу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575 сту Зег Ма! Зег ТНг Авп І еи Сп Аго сту Авп І еи Аа Авп Сп Авр 580 585 590
Туг Тиг Гуз ТНиг Ага Аг Сіп Аїа Аа ТНиг Аа Авр Маї Авп ТАг Сп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700 60
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105 58 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005 58
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 11 5 10 15
Сі Спу Пе Аго Сп Тгр Тгтр Гуз Геи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго
З5
Сіу Тут Гуз Туг І еи Спу Рго Рпе Авп ау І еи Авр Гуз Спу См Ро 60 40 Маї Авп Си Аа Ар Айа Аїйа Аа ГІ єи Сім Нів Авр Гуз Айїа Туг Авр 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 45 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110 50
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125 55
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140 60 Ро Маї Сім Нів 5ег Рго Маї Сіи Рго Авр Зег Зег Зег Спу Тиг Спу
145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220
Зег ау Авп Тр Ніз Сувз Авр 5ег Тпг Ттр Меї Спу Ар Агу Маї Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Зо
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
З5
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 з20
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 маї Геи Сіу Зег Аа Ніз СіІп Спу Сув І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380 60 ап Аа Маї Сіу Агу бег Зег Рпе Туг Суз Геи Сім Туг Рне Рго Зег
385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні5 Зег Сіп Зег І еи Авр Аг9 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Аго ГГ еи Сп РНе 5ег Сп 450 455 460
Аа Су Аа 5ег Ар Іе Агу Авр Сп 5ег Ага Авп Ттр І єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гув5 ТНг Зег Аа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Зо
Аг9 Авр 5е"! І єи Маї Авп Рго Сіу Рго Аа Меї Аа 5ег Нів Гуз Азр 515 520 525
З5
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп бег Спіу Маї Геи Пе РНе Сіу Гув 530 535 540 ап спу 5ег Спи Гув ТНг Авп Маї Ар Іе Спи Гуз Ма! Меї Пе ТНг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТНг Авп Рго Маї Аа Тиг Сім Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГГ еи Сп Агу Су Авп ГГ еи Аа Сп Аа Ар 580 585 590
Тиг Тиг Гуз Авп Аїйа Агу Сп Аа Аа ТАг Аа Азр Маї Авзп Тнг Сіп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620 60 апу Рго Пе Ттр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Авр Су Ні Ре Нів Рго
625 630 635 640 зЗег Рго І еи Меї Спу Спу РНе Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авзп Тниг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тпг ТНг Рпе 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Авп Рго Сл Пе Сп Туг ТНг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Ма! Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745
Зо «2105» 59 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005» 59
Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тр Геи Си Авр ТНг ГГ еи 5ег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сім Аг Ніз ГГ уз Ар Ар 5ег Ага ау ГІ еи Ма! Гей Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Ага І єи Спи Ні Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 60
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Азр Аа Сіи Рне Сп Сім Ага Гей Гуз Сім Авр Тиг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп еи Сту Аго Аа Маї Рне Сп Аа Гуз Гуз Агу Маї Геи Сім Рго 115 120 125
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу І єи Спу ТАг Авп ТНг Меї Аїа Тниг Спу 5ег Су 195 200 205
Аа Рго Меї Аїа Ар Авп Авп Спи Спу Аа Ар Стпу Маї Спу Авп Бег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320 60
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350
Ма! Геи Спу Бег Аа Ніз Сп Спу Суз ГГ еи Рго Рго Рне Рго Аа Азр 355 360 365
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 4о5 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи 5ег Аг ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Сіу Ага бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр І єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Нів Геи Авп Спу 500 505 510
Аг Авр 5ег І еи Маї Авп Рго Сту Рго Аа Меї Аїйа 5ег Нів Г ув Авр 515 520 525
Азр Спи Спи Гу Ре РНе Рго Сп Зег Спу Ма! Геи Пе Ре Спу Гув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560 60
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тиг ТНг Авп Рго Маї Аа ТАг Спи Сіп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГГ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Аа Тнг Авп Ага 580 585 590
ТАг Зег Рго Авр Аїа Аг асп Аа Аа ТНг Аа Ар Маї Авзп Тнг Сіп 595 600 605
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Ттр Сп Авр Агу Азр Маї Туг І єи Сп 610 615 620
Сіу Рго Іе Тгр Аїа Гуз Іе Рго Ніз Тнг Ар Су Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї еи Пе Гуз Авп ТНг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рне 5ег 660 665 670
Аа Аа Гу Ріє Аа 5ег РНе Пе ТАг Сп Туг Зег ТНиг Спу Сіп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сіп Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Пе Авп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 -2105» 60 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «400» 60 60 Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег
1 5 10 15
Сі Спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Су Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спіу Спи Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр ГГ уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг Сп Гей Авр 5ег Сіу Авр Авп Рго Туг І еи Гуз Туг Авп Нів Аа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сіи Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї РНе сСіп Аїа Гуз Гуз Агу Маї Г еи Спи Рго 115 120 125
Зо
Ї ви Спу І єм Маї Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго Сіу Гуз Гуз Ага 130 135 140
З5
Рго Ма! Сім Ні Зег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Айа Аго Гуз Агу І ви Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175
Спу Авр Аа Авр 5ег Маї Рго Авр Рго Сіп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго бег Спу Г еи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аа Тиг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Азп Азп Спи Спу Аа Авр Стіу Ма! Спу Азп 5ег 210 215 220 зЗег Спіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАиг Тгтр Меї Сіу Авр Аго Ма! Пе 225 230 235 240 бо Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи
245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Нів Ре Зег Рго Агу Авр Тр СіІп Ага Геи Пе Авп Авп Авп Тр 290 295 оо
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 ма! І еи Стпу 5ег Аа Ніз Сп Спіу Суз І єи Рго Рго РНе Рго Аа Ар 355 360 365
Зо
Ма! Рне Меї Маї Рго Сіп Туг Спу Туг І еи ТНг ГГ еи Авп Авп сту зЗег 370 375 380
З5
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сп Мей єси Агу Тнг сапу Авп Авп Рнпе ТАг Рне Зег Туг Тиг Рпе Спи 405 до 415
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп Тпг Рго Зег СпПу Тиг ТНг Тнг ап Зег Ага І ви Сип Ре Зег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480 60 Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп
485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е"! І єи Маї Азп Рго ау Рго Аа Меї Аа 5ег Нів Гу Авр 515 520 525
Авр Спи Сі Гуз Рне РнНе Рго СіІп 5ег Сіу Ма! І еи Пе РНе Су І ув 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Спи Гуз Ма! Ме! Пе Тиг 545 550 555 560
Авр Сім Спи Сім Пе Ага Тнг ТАг Авп Рго Маї Аа Тиг Спи Сп Туг 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГІ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айва 5ег Авп ТНг 580 585 590
Тиг ап Гуз Тнг Аа Аг Сп Аїа Аа Тнг Аа Азвр Маї Авп Тнг Сп 595 600 605
Зо
Сіу Ма! Геи Рго Стпу Меї Маї Тгр Сп Азвр Аг Азр Маї Туг Геи Сп 610 615 620
З5
Су Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тнг Ар ау Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640
Беї Рго Ї ви Меї Спіу Сіу Рне Су І єи Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655
Ї ей Пе Гуз Авзп Тниг Рго Маї Рго Аа Авп Рго 5ег Тпг ТНг Рпе 5ег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тиг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685 зЗег Ма! Сім Пе Спи Тгр Спи Геи Сп Гуз Сіи Авп 5ег Гуз Аг9 Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720 60 Авр Ре Тиг Маї Авр ТНг Азп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Аго Рго Іе
725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 «2105 61 «2115 745 «212» білок 213» Синтетична послідовність «220» «223» капсид варіанта ААМ «4005 61
Меї Ага Аа Авр Су Туг ГГ еи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Зег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 20 25 Зо
Гуз Рго Аа Сім Аг Ніз Гуз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Ма! І еи Рго 35 40 45 сапу Туг Гуз ТугГ еи Су Рго Рне Авп Су Геи Авр Гуз Спу Сім Рго 50 55 60 маї Азп Спи Аа Ар Аїа Аїа Аїйа І єи Спи Ні Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Аг ап І еи Авр 5ег Сіу Авр Авзп Рго Туг Геи Гуз Туг Авп Нів Аіа 85 90 95
Азр Аа Сіи Ре Сіп Сім Ага Гей Гуз Сім Авр ТНг Зег Рпе Спу Спу 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Геш сапу І єи Ма! Спи Спи Рго Маї Гуз Тнг Аа Рго ау Гуз Гуз Ага 130 135 140
Рго Ма! Сім Ні 5ег Рго Маї Спи Рго Авр Бег Зег Зег Спу Тиг Спу 145 150 155 160
Гуз Аа Сіу Сп Сп Рго Аа Аго Гуз Аго ГГ еи Азп Ре Стпу Сп ТНг 165 170 175 60
Спу Авр Аа Ар 5ег Маї Рго Авр Рго Сп Рго І ви Спу Сп Рго Рго 180 185 190
Аа Аа Рго 5ег Сіу І єи Спу Тиг Азп ТНг Меї Аїа Тниг Спу Зег Спу 195 200 205
Аа Рго Меї Аа Авр Авп Авп Си Спу Аа Азр Спу Маї Спу Авп Зег 210 215 220 зЗег Сіу Авп Тгр Ніз Суз Авр 5ег ТАг Тгтр Меї Спіу Авр Аго Маї Пе 225 230 235 240
Тиг Тиг 5ег Тиг Агу ТиАг Ттр Айва Г єи Рго Тнг Туг Авп Авп Нів І єи 245 250 255
Туг Гуз Сп Пе Бег 5ег Сп 5ег Спу Аа бег Авп Авр Авп Ні Туг 260 265 270
Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Ттр Сіу Туг Рне Ар РнНе Авп Аг Рне Нів 275 280 285
Сув Ні5 РНе 5ег Рго Ага Авр Тгр аїп Ага Г єи Пе Авп Авп Авп Ттр 290 295 З00
Спу Рнє Агу Рго Гуз Ага І єи Авп Рне І уз І єи Рне Авп Пе Сіп Маї 305 з10 315 320
Гуз Спи Маї Тиг Сп Авзп Авр Спу Тиг ТАг ТАг Пе Ага Авп Ав І єи 325 330 335
Тпиг Зег Тнг Маї СіІп Маї Рне Тнг Ар 5ег Сім Туг Сп Геи Рго Туг 340 345 350 маї Геи Сіу Зег Аа Ніз СіІп Спу Сув І єи Рго Рго РНе Рго Аа Азр 355 360 365
Маї Рпе Меї Маї Рго Сіп Туг Сіу Туг Гей ТНг Геи Авп Авп Сіу Зег 370 375 380
Сп Аїа Маї Стпу Агу 5ег бег Рпе Туг Суз І єи Сім Туг РНе Рго 5ег 385 390 395 400
Сіп Меї І єи Ага ТАг Спу Авзп Азп Ре Тнг Ре 5ег Туг ТНг Рпе Си 405 410 415 60
Азр Маї Рго РНе Ні 5ег Зег Туг Аа Ні Зег Сіп Зег І еи А5р Ага 420 425 430
Ї еи Меї Авп Рго Геи Пе Авр ап Туг І еи Туг Туг І єи Зег Ага ТНг 435 440 445
Авп ТАг Ріо бег Спіу ТАг Тнг Тиг Сіп Бег Аго Геи Сп РНе 5ег Сп 450 455 460
Аа Сіу Аа бег Азр Іе Ага Ар Сп Зег Агу Авп Тр ГІ єи Рго Спу 465 470 475 480
Рго Суз Туг Ага Сп Сіп Аго Маї Зег Гуз ТНиг Зег Аіа А5р Авп Авп 485 490 495
Авп Зег Сім Туг Зег Тр ТНг Сіу Аа Тнг Гуз Туг Ніз Геи Авп Спу 500 505 510
Аг9 Авр 5е! І єи Маї Азп Рго Су Рго Аа Меї Аа 5ег Ні ГГ уз Авр 515 520 525
Авр Сім Спи Гув Рпе РНе Рго Сп бег Стпу Маї І еи Пе Рне Спу Гуз 530 535 540
Сіп Сіу Зег Си Гуз ТАг Азп Маї Авр Пе Сіи Гуз Ма! Мей Пе Тиг 545 550 555 560
Азр Спи Спи Спи Пе Агу Тит ТАг Авп Рго Маї Аа ТАг Спи Сп Тут 565 570 575
Сіу Зег Маї Зег Тиг Авп ГГ еи Сп Агу Спу Авп ГГ еи Айа Аа 5ег Авр 580 585 590 зЗег ТП Гуз Аїа Аа Аг Сп Айа Аа Тнг Аа Авр Маї Авзп Тнг Сп 595 600 605 сапу Маї І єи Рго Спу Меї Маї Тр Сп Авр Ага Азр Маї Туг І еи Сп 610 615 620
Сіу Рго Іе Тгр Аа Гуз Пе Рго Ні Тиг Авр Су Ні РНе Нів Рго 625 630 635 640 зЗег Рго І єи Меї Сіу Спіу Рне Су Гей Гуз Нів Рго Рго Рго Сіп Пе 645 650 655 60
Ї ей Пе Гуз Авзп ТНиг Рго Маї Рго Айїа Авп Рго 5ег Тиг ТНг Рпе Зег 660 665 670
Аа Айа Гуз РНе Аа Зег РНе ІПе Тниг Сп Туг Зег ТАг Спу Сп Маї 675 680 685
Зег МаїЇ Спи Пе Спи Тер Сім Гей Стій Гу5 Спи Авп Зег Гуз Аго Тр 690 695 700
Азп Рго Сім Пе Сип Туг ТАг Зег Азп Туг Авп Гуз 5ег Маї Азп Маї 705 710 715 720
Азр Ре Тнг Маї Авр Тнг Авп Сту Маї Туг Зег Спи Рго Агу Рго Іе 725 730 735
Сіу Тиг Аго Туг Гей ТАг Агу Авп ГГ єи 740 745 -2105» 62 «2115 725 «212» білок 213» Синтетична послідовність
Зо «220» «223» капсид варіанта ААМ, химерний «-4005» 62
З5
Меї Ага Аа Азвр Сіу Туг ГГ еи Рго Авр Тгр Геи Си Авр Авп І еи 5ег 1 5 10 15
Спи Спу Пе Ага Сім Тер Тр Авр Г єи Гуз Рго Су Аа Рго Гуз Рго 20 25 Зо
Гуз Аа Авп Сп Сп Гуз Сп Авр Авр Су Аго Спу Геи Маї Геи Рго 35 40 45
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау Геи Авр Гуз Спу Спи Ріо 60 50 маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80 55
Сіп Сп Гей Гуз Аа Спу Авр Авп Рго Туг І еи Аг Туг Авп Нів Аа 85 90 95 60 Авр Аа Си Ре Сп Спи Ага Гей Сіп Спи Авр ТАг Зег Рне Сіу Спу
100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аа Гуз Гуз Аго Маї Геи Спи Рго 115 120 125
Рпе Сту Геи Маї Си Спи Спу Аа Гуз Тниг Аа Рго Тнг Стпу Гуз Ага 130 135 140
Пе Ар Авр Ні РпПє Рго Гуз Ага Гуз Гуз Аа Аго Тиг Сім Спи Ар 145 150 155 160 зег Гуз Рго Зег Тиг Зег 5ег Ав5р Аїа Спи Аа Стпу Рго 5ег СПу Бег 165 170 175
Сп Сп І ви Сп Пе Рго Аїа Сіп Рго Аа бег 5ег І ви Спіу Аіа А5р 180 185 190
Тпиг Меї Зег Аіа Спу Спу СПу Спу Рго Геи Спу Авр Авп Авп Сп Спу 195 200 205
Аа Авр Сіу Маї Спу Авп Аїа бег Спу Авр Тр Ні Суз Авр 5ег ТНг 210 215 220
Зо
Тр Меї Сіу Азвр Ага Іе Маї Тиг Гуз 5ег ТАг Аго ТАг Тр Ма! І єи 225 230 235 240
З5
Рго Зег Туг Авп Авп Ні Сп Туг Агу Сім Пе Гуз бег СПу 5ег Маї 245 250 255
Авр ау бег Авп Аа Авп Аа Туг Рпе Стпу Туг Зег ТАг Рго Тгр Су 260 265 270
Туг Ріпе Авр Рнє Авзп Аг РнНе Нів 5ег Нів Тр 5ег Рго Агу Авр Тр 275 280 285
Сіп Ага Гей Пе Авп Авп Туг Тгр Сіу Рпе Аго Рго Агу з5ег І ви Ага 290 295 З00 маї Гуз Пе РНе Авп ЇІІе Сіп Ма! Гуз Спи Маї Тиг Маї Сіп Авр Зег 305 з10 315 з20
Тиг Тиг ТА Пе Аа Авп Авт І єи Тнг Зег ТНиг Маї СіІп Маї Ре Тнг 325 330 335 60 Авр Авр Авр Туг Сіп І єи Рго Туг Маї Ма! Спу Авп Сіу Тиг СПм Спу
340 345 350
Сув І єи Рго Аа Рне Рго Рго Сіп Маї РНе ТАг ГГ еи Рго Сип Туг СПу 355 360 365
Туг Аіа Тиг І еи Авп Агу Авр Авп Тнг Спи Авп Рго Тпиг Сім Ага Зег 370 375 380 зЗег Рпе РНе Суз І ви Спи Туг Рпе Рго Зег Гуз Меї І еи Агу Тиг Спу 385 390 395 400
Авп Азп РНе Сім РНе Тнг Туг Азп РНе Сім Спи Маї Рго РНе Нів 5ег 4о5 до 415
Бег Ре Аа Рго 5ег Сіп Авп Г єи РНе Гуз І єи Аа Авп Рго І єи Маї 420 425 430
Азр Сп Туг ГГ еи Туг Ага РНе Маї Зег Тиг Азп Азп ТНг Спу Спіу Маї 435 440 445
Сіп Рне Авп Гуз Авп І ви Аа Спу Агу Туг Аа Авп ТНиг Туг Гув Авп 450 455 460
Зо
Тер Ре Рго Сту Рго Меї Сіу Агу Тиг Сп Стпу Тгтр Авп Геи Спу Зег 465 470 475 480
З5
Сіу Ма! Азп Ага Аа 5ег Маї Зег Аа Рпе Тниг Тит Тнг Авп Ага Меї 485 490 495 сш єи Спи Стпу Аа бег Туг Сп Маї Рго Рго Сп Рго Азп Спіу Меї 500 505 510
Тпиг Авп Авп Г ви Сп Спу Зег Азп Тиг Туг Аа Геи Спи Авп Тит Меї 515 520 525
Пе Ре Авп з5ег Сп Рго Аа Авп Рго Сіу Тег Тнг Аа Тиг Туг Гей 530 535 540
Сім Сіу Азп Меї І єи Пе Тнг Зег Сіи бег СПи ТАг Сп Рго Маї Авп 545 550 555 560
Аг Маї Аа Туг Азп Маї Сіу Спу Сіп Меї Аа Тниг Авп Авп сп Зег 565 570 575 60 0 Бег Тит ТНг Аа Рго ТАг Тит Спу Тнг Туг Авп ГГ еи Сп Спи Пе Маї
580 585 590
Рго Сту Зег Ма! Тр Меї Сім Агу Авр Маї Туг І еи Сп Спу Рго Пе 595 600 605
Тер Айва Гуз Пе Рго Спи Тиг Спу Аїа Ні Рпє Нів Рго Зег Рго Аа 610 615 620
Меї Спу Спіу Ріє Сту Геи Гуз Нів Рго Рго Рго Меї Меї І єи Пе Г ув 625 630 635 640
Азп Тнг Рго Маї Рго Сіу Авп Пе ТНг Зег РНе 5ег Ар Маї Рго Маї 645 650 655
Зег 5ег Рпе Пе Тнг ап Туг Зег Тиг Спу Сип Ма! Тиг Ма! Сіи Меї 660 665 670
Сім Тр Сі Гей Гуз Гуз Спи Авп Зег Гуз Аго Тгр Авп Рго Сім Пе 675 680 685
Сіп Туг Тк Авп Авп Туг Азп Авр Рго Сп РНе Маї Авр Ре Аа Рго 690 695 700
Зо
Азр Зег Тиг Спу Спи Туг Агу Тнг Тнг Ага Рго Пе Спу Тиг Агу Туг 705 710 715 720
З5
Ї єи ТНиг Ага Ро І еи 725 40 «2105» 63 «2115 725 «212» білок 213» Синтетична послідовність 45 «220» «223» капсид варіанта ААМ, химерний «4005» 63 50 Меї Ага Аа Авр Су Туг Геи Рго Авр Тгр Геи Спи Авр ТНг Геи Бег 1 5 10 15 сій спу Пе Аго Сп Тгр Тгр Гуз І єи Гуз Рго Сіу Рго Рго Рго Рго 55 20 25 зо
Гуз Рго Аа Сіи Аг Ніз І уз Авр Ар 5ег Аго ау Геи Маї Геи Рго 60
Сіу Тут Гуз Туг ГГ еи Спу Рго Ре Авп ау ГГ еи Авр Гуз Спу См Рго 50 55 бо маї Авп Аїа Аа Азвр Аїйа Айа Аа І еи Сім Нів Авр І уз Аа Туг А5р 65 70 75 80
Сп Сип єи Гуз Аа Суу Ар Авп Рго Туг І єи Аго Туг Авп Нів Аа 85 90 95
Ар Аа Спи Ріє Сіп Сім Агу Гей Сп Спи Авр Тнг бег Рне Сіу Су 100 105 110
Авп Гей Су Агу Аїа Маї Рне ап Аїа Гуз І уз Агу Маї І еи Спи Ро 115 120 125
Рпе Сту Геи Маї Си Спи Спу Аа Гуз Тниг Аа Рго Тнг Стпу Гуз Ага 130 135 140
Пе Ар Авр Ні РНє Рго Гуз Ага Гуз Гуз Аа Агу Тиг См Си Авр 145 150 155 160
Бег Гуз Рго Зег ТНг Зег Зег Авр Аа Сім Аа Спу Рго Бег Спу Зег 165 170 175
Сп Сій І ви Сп Пе Рго Аїа Сіп Рго Аа 5ег 5ег І єи Спу Аа Азр 180 185 190
Тпиг Меї Зег Аіа Спу Спу СПу Спу Рго Геи Спу Авр Авп Авп Сп Спу 195 200 205
Аа Ар Су Маї Спіу Авп Аа 5ег Сіу Авр Тр Ніз Суз Авр 5ег ТНг 210 215 220
Тр Меї Сіу Азвр Ага Іе Маї Тиг Гуз 5ег ТАг Аго ТАг Тр Ма! І єи 225 230 235 240
Рго Бег Туг Авп Авп Ні Сп Туг Агу Сім Пе Гуз Зег Спіу Зег Маї 245 250 255
Азр Стпу 5ег Авп Айа Авзп Аа Туг Рне Спу Туг 5ег ТНиг Рго Ттр Спу 260 265 270
Туг Рне Авр Рнеє Авп Аг Рне Нів 5ег Ні Тгр 5ег Рго Аг Авр Тр 275 280 285 60
Сіп Ага Гей Пе Авп Авп Туг Тгр Сіу Рпе Аго Рго Агу з5ег І ви Ага 290 295 00 маї Гуз Пе РНе Авп ЇІе Сп Ма! Гуз Спи Маї Тиг Маї Сп Авр Бег 305 з10 315 з20
Тиг Тиг ТА Пе Аа Авп Авт І єи Тнг Зег ТНиг Маї СіІп Маї Ре Тнг 325 330 335
Азр Ар Авр Туг ап Г єи Рго Туг Маї Ма! Сіу Авп Сіу Тиг Сім Спу 340 345 350
Сув І єи Рго Аа Рне Рго Рго Сіп Маї РНе ТАг ГГ еи Рго Сип Туг СПу 355 360 365
Туг Аіа Тниг ГГ еи Авп Агу Авр Авп Тнг Сім Авп Рго Тпиг Спи Ага Зег 370 375 380 зЗег Рпе РНе Суз І ви Спи Туг Рпе Рго Зег Гуз Меї І еи Агу Тиг Спу 385 390 395 400
Зо Авп Азп Ріє Сім РНе Тнг Туг Азп Рнеє Сім Спи Маї Рго Рне Нів 5ег 405 до 415 зЗег Рпе Аїа Рго 5ег СіІп Авп Геи РнНе Гуз І ви Аа Авп Рго І еи Маї 420 425 430
Азр Сп Туг ГГ еи Туг Ага РНе Маї Зег Тиг Азп Азп ТНг Спу Спіу Маї 435 440 445
Сіп Рне Авп Гуз Авп І ви Аа Спу Агу Туг Аа Авп ТНиг Туг Гув Авп 450 455 460
Тер Ре Рго Сту Рго Меї Сіу Агу Тиг Сп Стпу Тгтр Авп Геи Спу Зег 465 470 475 480
Стпу Ма! Азп Ага Аїйа 5ег Ма! Зег Аіа Рне Тнг Тнг ТНг Азп Агу Меї 485 490 495 сій Геи Спи Стпу Аа Зег Туг Сип Маї Рго Рго Сип Рго Азп СПу Меї 500 505 510
Тпиг Авп Авп Г ви Сп Спу Зег Азп Тиг Туг Аа Геи Спи Авп Тит Меї 515 520 525 60
Пе Ре Авп з5ег Сп Рго Аа Авп Рго Сіу Тег Тнг Аа Тиг Туг Гей 530 535 540
Сім Сіу Азп Меї І єи Пе Тнг Зег Сіи бег СПи ТАг Сп Рго Маї Абп 545 550 555 560
Аго Маї Аа Туг Авп Маї Спу СПу Сп Меї Аїа Тнг Авп Авп Сп Зег 565 570 575 зЗег ТПг Тнг Аа Рго Тиг ТАг Спу Тнг Туг Авп ГГ еи Сп Спи Пе Маї 580 585 590
Рго Сту Зег Ма! Тр Меї Сім Агу Авр Маї Туг І еи Сп Спу Рго Пе 595 600 605
Тр Айва Гуз Пе Рго Спи Тиг Спу Аїа Ні Рне Нів Рго 5ег Рго Аа 610 615 620
Меї Сіу Спу РНе СУ І єи ГІ ув Ні Рго Рго Рго Меї Меї І єи Пе І ув 625 630 635 640
Авп ТАг Рго Маї Рго Спу Авп Пе Тниг Зег РНе 5ег Авр Маї Рго Маї 645 650 655 зЗег Зег Рпе Пе ТАг Сп Туг Зег Тиг Спу Сіп Ма! Тнг Ма! Сім Меї 660 665 670
Сім Тр Сім Гей Гуз Гуз Спи Авп ет Гуз Аг Тгр Авп Рго Сім Пе 675 680 685
Сіп Туг Тк Авп Авп Туг Азп Авр Рго Сп РНе Маї Авр Ре Аа Рго 690 695 700
Азр Зег Тиг Спу Спи Туг Агу Тит Тнг Ага Рго Пе Спу Тиг Аго Туг 705 710 715 720
Ї єи ТНиг Ага Ро І еи 725 «210» 64 «2115» 3685 «212» білок «213» Ното зарієп5 «4005» 64 60
Меї І єм Тр Тр Спи Си Маї Си Азр Суз Туг Си Агу Си Авр Маї 1 5 10 15 ап Гуз Губ5 ТНг Рпе Тпг Гуз Тр Маї Авп Аа Сіп Рне 5ег Гув Рпе 20 25 Зо
Сіу Гуз Сп Нів Пе СП Авп Геи РНе 5ег Авр І єи Сіп Ар Сіу Ага 35 40 45
Аг Г еи ГГ еи Авр Г еи Геи Спи Спу Гей ТАг Спу Спп Гуз І еи Рго Гуз 50 55 бо
Сі Гуз Су Зег ТАг Агу Маї Ні Ада І еи Авп Авп Маї Авп І уз Аіа 65 70 75 80
Ї еи Агу Маї І еи Сп Авп Авп Авзп Маї Азр І єи Маї Авп Пе Сіу Зег 85 90 95
ТНг Авр ЇІе Маї Авр ау Авп Нів Гуз І єи ТАг ГГ еи СпУу Гей Пе Ттр 100 105 110
Азп Іе Іе Геи Нів Тгтр Сп Ма! Гуз Авп Маї Меї Гуз Азп Пе Меї 115 120 125
Аа СУ І єи Сп Сп Те Авп бег Спи Гуз Пе І єи І єи Бег Тгр Ма! 130 135 140
З5
Аг Сп Зег ТАг Агу Авп Туг Рго Сіп Маї Авп Ма! Пе Авп Рне ТНг 145 150 155 160
Тпиг Зег Тр Зег Авр Су І єи Аа І єи Авп Аїа І єи Іе Ні Зег Нів 165 170 175
Ага Рго Азр І єи РНе Авр Тгтр Авп 5ег Маї Ма! Сув Сіп Сп бег Аа 180 185 190
ТАиг ап Ага І еи Спи Ні Аа Рне Азп Іе Аа Агу Туг Сп І єи Спу 195 200 205
Пе Спи І ув І єи Ї єи Авр Рго Спи Авр Маї Азр ТНг ТНг Туг Рго Ар 210 215 220
Гуз Гуз 5ег Пе Геи Меї Туг Пе Тнг Зег І еи Рне Сп Маї І еи Рго 225 230 235 240 60
Сіп Сп Маї Зег Пе Спи Аа Пе Сіп Спи Ма! Сіи Меї І еи Рго Ага 245 250 255
Рго Рго Гуз Маї Тит І уз Спи Спи Ні Рне Сп Гей Ні Ніз Сип Меї 260 265 270
Ні Туг Зег Сп Сп Пе Тнг Ма! Зег І ви Аа Сип Спу Туг Спи Аг9 275 280 285
Тпиг Зег Зег Рго Гуз Рго Агу РНе Гуз Зег Туг Аіа Туг Тиг Сп Аа 290 295 00
Аа Туг Маї Тниг ТАг Зег Авр Рго ТНг Агу Зег Рго Рне Рго 5ег Сп 305 з10 315 320
Ні Г еи Сі Аа Рго Сім Авр І уз Зег Рпе Стпу бег 5ег І еи Меї Сіи 325 330 335 зег Сім Маї Авп І єи Ар Агу Туг Сп ТНг Аа Геи Сіи Спи Ма! І еи 340 345 350 зЗег Пр ГГ еи Геи Зег Аіа Спи Авр ТНг ГГ еи Сп Аа Сіп СПу Спи Пе 355 360 365 зЗег Авп Авр Маї Спи Маї Ма! Гуз Ар Сп Ре Ні ТАг Ніз Спи Спу 370 375 380
З5
Туг Меї Меї Авр Геи Тнг Аїа Ні Сіп Сіу Агу Маї Спу Авп Пе І єи 385 390 395 400
Сіп Геи Спу Зег Гуз І еи Пе Спу ТАиг Стпу Гуз І еи Бег СП Авр Си 405 410 415 ам Тиг спи Маї Спп Спи Сп Меї Авп І єи Геи Авп 5ег Аг Тгр Си 420 425 430
Суз І єи Агу Маї Аа 5ег Меї Сім Гуз Сп Зег Авп ГГ еи Ніз Ага Маї 435 440 445
Ї еи Меї Авр ГГ еи Сп Авп ап Гуз І еи Гуз См Гей Авп Авр Тгр Гей 450 455 460
Тиг Гув Тиг Спи Сім Агу ТНг Ага Гуз Меї Сім Спи Спи Рго Гей Сіу 465 470 475 480 60
Рго Авр І єи Си Авр І єи Гуз Аг Сіп Маї Сип Сп Нів ГІ уз Маї! І еи 485 490 495 ап спи Авр Гей Спи Сп Спи Сп Маї Агу Маї Авп з5ег І ви Тнг Ніб 500 505 510
Ме! Маї Маї Маї Маї Авр Сім Зег Зег Спу Авр Ні Аа Тнг Аа Аа 515 520 525
Ї ви Спи Спи Сп І еи Гуз Ма! І еи Спу Авзр Агу Тр Айва Азп Пе Суз 530 535 540
Аг9 Тр Тнг Сім Ар Ага Тр Ма! І єи Геи Сп Авр Іе Г еи ГГ еи Гув 545 550 555 560
Тр Сп Аго Геи ТАг Спи Спи Сп Суз ГГ еи Рпе 5ег Аа Тгр Геи 5ег 565 570 575
Сім Гуз Спи Авр Аа Маї Авп Гуз Іе Нів Тит ТНг Спу Ре Гуз А5р 580 585 590
Сіп Азп Спи Меї І еи 5ег 5ег І еи Сп Гуз І еи Аа Маї І єи І уз Аа 595 600 605
Азр Гей Си Гуз Гуз Гув Сип 5ег Меї Сіу Гуз І єи Туг Зег І еи Гув 610 615 620
З5
Сіп Авр І єи Геи Зег ТАг І єи Гуз Авп Гуз 5ег Ма! Тиг Сп Гу ТНг 625 630 635 640
Сім Айа Тгр Геи Авр Авзп Ре Аїа Ага Суз Тгр Авр Авп Геи Маї Сп 645 650 655
Гуз І єи Спи Гуз бег ТНг Аа Сіп Пе бег Сіп Аа Ма! Тнк ТНг ТНг 660 665 670
Сіп Рго 5ег Гей ТНг Сип ТНг Тиг Ма! Меї Спи Тнг Ма! Тнгк Тнг Маї 675 680 685
Тиг Тиг Ага сти Сп Пе Гей Маї Гуз Ні Аіа Сип Спи Спи ГГ еи Рго 690 695 700
Рго Рго Рго Рго Сп Гуз Гуз Ага Сіп Пе ТАг Маї Азр Зег Спи Пе 705 710 715 720 60
Ага Гуз Аг І єи Ар Маї Ар Іе Тнг Сім Геи Нів 5ег Тр Пе ТНг 725 730 735
Ага Бег Си Аа Маї І єи Сп 5ег Рго См Рпє Аа Іе РНе Ага Гув 740 745 750
Сіи Спу Авп Рпє Зег Азр І єи Гуз Спи Гуз Маї Авп Аїа Іе СПм Аго 755 760 765
Сім Гуз Аа Сти Гу Ре Ага Гуз І ви Сп Авр Аа 5ег Агу 5ег Аа 770 775 780
Сп Айа І єм Маї Сім Сіп Меї Маї Авп Сіи Спу Маї Авп Аа Авр 5ег 785 790 795 800
Пе Гуз Сп Аа бег Спи Сп І еи Авзп 5ег Агу Тр Пе Сім Ре Суз 805 810 815
СІпГец ви Бег Сім Аго І єи Авп Ттр ГГ еи Спи Туг Сп Авп Авп Їе 820 825 830
Пе АїІа Рне Туг Азп Сп І еи Сп Сп Гей Си Сп Меї Тнг Тне ТАг 835 840 845
Аа Сім Авп Тр І єи Гуз Пе Сіп Рго Тнк Тнг Рго бег Сім Рго ТНг 850 855 860
З5
Аа Пе Гуз 5ег Сп І еи Гуз Пе Суз Гуз Авр Сім Маї Авп Аг І єи 865 870 875 880 зег Спіу І ви Сип Рго Сп Пе Спи Ага І єи Гуз Пе Сп Бег Пе Аа 885 890 895
Ї ви Гуз Спи Гуз Спу Сп Спу Рго Меї РнНе І єи Авр Аа Ар РНе Маї 900 905 910
Аа Рне ТНг Авп Ні Рпе Гуз Сіп Маї Рне Зег Ар Маї Сп Аа Аг 915 920 925
Сі Суз Пи Гей Сіп Тк Пе Рне Авр ТНг ГГ еи Рго Рго Меї Ага Туг 930 935 940
Сіп Сім ТАг Меї 5ег Аїа Іе Аг ТАг Тгр Маї Сп Спп Зег СПИ ТНг 945 950 955 960 60
І уз І єи Зег Пе Рго Сіп І еи бег Ма! Тнг Азр Туг Спи Пе Меї Сіи 965 970 975 ап Аго Геи Спу Сім Г еи Сп Аа ГГ еи Сп Зег Зег І ви Сіп СП Сп 980 985 990
Сіп Зег Спу Г еи Туг Тугі єи Зег Тиг ТАг Ма! Гуз Спи Меї Зег Гуз 995 1000 1005
Гуз АІа Рго бег Сіи Пе бег Аг Гуз Туг Сіп Зег. Сіи Рне Си 1010 1015 1020 сій Ме Спи СТу Агу Ттр Гуз Гуз І еи Зег Зег Сп Г еи Маї Спи 1025 1030 1035
Ніз Суз Сп узі ви Сі Сі Сп Меї Авп Гуз Гей Ага Гуз Пе 1040 1045 1050
Сп Авп Нів Пе Сіп ТАгі єеи Гуз Гуз Тгтр Меї Аа Сім Маї А5р 1055 1060 1065
Ма! Рне Геи Гуз Спи СТи Тур Рго Аа ГГ еи Спіу Ар. Зег Сім Пе 1070 1075 1080
Їеи Гуз Гуз СіПп Геи Гу5 Сіп Суз Агу ГГ еи І еи Ма! Зег Авр Пе 1085 1090 1095
Сп ТАг Пе Сіп Ро 5егіІеи Авп 5ег Ма! Азп Сі Спу Спу Сп 1100 1105 1110
Гуз Пе Гуз Авп Сім Аа Спи Рго Спи РНе Аа бег Аг9 еи Си 1115 1120 1125
ТАигаїм Ге Гуз Сі Її еи Азп. ТНг Сп Тгр Авр Ніб Меї Суз Сп 1130 1135 1140
Сіп Ма! Туг АІа Аго І уз Сім Аа Її єи І уз Спу Спу І єи Спи ГГ ув 1145 1150 1155
Тиг Ма! Зег Геи Сп Гуз Авр І єи Бег Спи Меї Ні. Сіи Ттр Меї 1160 1165 1170
ТАигаїп Аа Сіи Сі Сі Тук Гей СІ Агу Азр Ре Си Туг Гуз 1175 1180 1185 бо
Тиг Рго Авр Си ГГ еи С1п Гув Аїа Маї Спи Сім Меї Гуз Аго Аа 1190 1195 1200
Гуз сім Спи Аа Сп Сп ув Спи Айва Гуз Маї Гуз Геи І єи ТНг 1205 1210 1215
Сі Зег Маї Авп 5ег Маї Пе Аїа Сіп Аа Рго Рго Маї Аа Сіп 1220 1225 1230
Сім Ада І єи Гуз Гуз СПИ ЇЇ єи Спи ТНгі єи Те ТАг Авп Туг Сп 1235 1240 1245
Тр єи Суз ТНг Ага І єи Азп ау Гуз Суз І уз ТНг І ви Спи Спи 1250 1255 1260 маї Ттр Аа Суз Тгр Ніз Спи Геї єеи Бег ТугІ еи Спи Гуз Аа 1265 1270 1275
АвпГув ТгрГеи Авп Сіи Ма! СП Рпе Гуз Геи Гув. ТНг ТНг Си 1280 1285 1290
Авп Пе Рго Спу СПу Аа Сій Спи Пе Зег Си Ма! І и Ав5р 5ег 1295 1300 1305
Ї еи Спи Авп І єи Меї Агу Ніб Зег Сіи Авр Авп Рго Авп аїп Пе 1310 1315 1320
З5
Ага Пе І єи АІа Сп ТигіГеи Тнг Азр Сіу Сіу Ма! Меї Азр Си 1325 1330 1335
Їеи Пе Авп Спи Сі Гей СПИ ТНг Рпе Авп 5ег Ага Ттр Ага Си 1340 1345 1350
Геи Нів Сім Си Аа Ма! Агу Агд Сп Гуз Геи Гей Спи Сіп Зег 1355 1360 1365
Пе Сп Зег АІа Сип Спи Ти Спи Гуз Зег І єи Ні Гей Пе Сп 1370 1375 1380
Сі Зег Геи ТНг РНе Пе Азр Гуз Сп І еи Аа Аа Тут Пе Аа 1385 1390 1395
Ар Гуз Маї Авр Аа Аа Сіп Меї Рго СіІп Спи Аа Сп Гуз Пе 1400 1405 1410 60
Сіп Зег Авр Гей Тпиг Бег Ніз Спи Пе 5ег Гей Си СПми Меї Гуз 1415 1420 1425
Гуз Ніз. Авп Сп Спу Гуз Сім АїЇа Аа Сіп Агу Ма! І єи бег Сп 1430 1435 1440
Пе Ар Маї Аа Сіп Гуз Гу Гей Сп Авр Ма! 5ег Меї Гуз Рпе 1445 1450 1455
Аг9 Геи РнНе ап Гуз Рго Аа Авп Ріє Си Сип Агу ГІ еи Сп Спи 1460 1465 1470 зЗегі ув Ме! Пе І єи Азр Си Маї Гуз Меї Нів Геи Рго Аа І єи 1475 1480 1485
Сім ТАг Гуз бег Маї Си Сіпй Си Маї Ма! Сіп бег Сп І еи Авп 1490 1495 1500
Ні5 Суб Маї Ап Геи ТугГув зег І ви Зег СПи Ма! Гув 5ег Спи 1505 1510 1515 маї Спи Меї Ма! Пе Гуз Тит Спу Агу Сіп Пе Ма! Сп Гуз Гув 1520 1525 1530
Сіп ТАиг Спи Авп Рго Гуз Си ей Авр Спи Агу Ма! Тнг Аа І еи 1535 1540 1545
З5
Гуз Геи Нів Туг Ап Спи ЇЇ еи С1пу Айа Гуз Ма! Тиг Спи Ага Гув 1550 1555 1560
Сп Сій Ї єи Спи Гуз Суз Гей І узі ви бег Ага Гуз Меї Аг ГГ ув 1565 1570 1575
Сім Меї Авп Маї І єи Тиг Сім Тр Гей Аа Аа Тиг Авр Меї Спи 1580 1585 1590
Ї еи Тиг Гуз Агу 5ег Аіа Ма! СПи Спу Меї Рго 5ег Авп І еи Авр 1595 1600 1605 зег Сім Маї Аа Тгтр Спу Гуз Аа Тиг Сіп Гуз Спи Пе Спи Гув 1610 1615 1620
Сіп Гуз Маї Ніз Геи Гуз Зег Пе ТАг Спи Ма! Спіу Спи Аа Гей 1625 1630 1635 60
Гуз Тиг Маї Геи Спу Гуз Гуз Спи Тиг єи Ма! Спи Авр Гуз І ви 1640 1645 1650 зегГеи Гей Азп 5ег Авп Ттр Пе Аа Маї Тнг Зег Агу Аа Спи 1655 1660 1665 сій Тр Гей Азп Гей єи Гей Спи Туг Сп Гуз Ні Меї Спи ТНг 1670 1675 1680
Рпе Авр ап Авзп Маї Авр Нів Пе Тпг Гуз Тгр Пе Пе Сп Аа 1685 1690 1695
Азр Тиг Ге ГГ еи Авр См Зег Спи Гуз Гуз Гуз Рго Сп Сп Гув 1700 1705 1710 сій Авр Маї І єи Гуз Аго Гей Гуз Аа Спи І еи Абп Авр ЇІе Ага 1715 1720 1725
Рго Гуз Маї Авр 5ег Тиг Агд Авр ап Аа Аа Авп І єи Меї Аа 1730 1735 1740
Азп Агу апу Авр Ніз Суз Аго Гуз еи Маї Спи Рго Сп Пе Зег 1745 1750 1755
Сі Гей Авп Ні Ага РНе Аїа Аїа Іе 5ег Ніз Агу Пе Гув ТНг 1760 1765 1770
З5
Спіу Гуз Аа бе Пе Рго І еи Гуз Сіи Ї ви Сі Сій Рне Авп 5ег 1775 1780 1785
Ар Пе Сіпі узі ецйі ей Си Рго Ї єи Сіш Аа Ши Пе Сп Сіп 1790 1795 1800 ау Маї Авп І ви Гуз Спи СПИ Авр РНе Азп Гуз А5р Меї Авп Си 1805 1810 1815
Азр Ап Сти Спу Тиг Ма! Гуз Сі Гей Гей Сп Ага Спу А5р Авп 1820 1825 1830
Їеи Сп Сп Ага Пе Тиг Авр. Си Ага Гуз Ага Сім Спи Пе Гув 1835 1840 1845
Пе Гуз Сіп Сіпі еиЇ ви Сп ТА Гуз Ні Авп Аїа І єи Гуз Ар 1850 1855 1860 60
Їеи Агу 5ег Сп Аг Ага Гуз Гуз Аа Гей Спи Пе Зег Нів Сп 1865 1870 1875
Тер Туг сп Туг Гуз Агу Сп Аа Авр А5р Ген єи Гуз Суб І еи 1880 1885 1890
Азр Ар Пе Спи Гуз Гуз І еи Аа 5ег І єи Рго Спи Рго Агу Авр 1895 1900 1905 сій Ага Гуз Пе Гуз Спи Пе Авр Ага Спи Гей Сп Гуз Гуз Гув 1910 1915 1920
Сі Сім Гей Авп Аа Маї Агу Ага Сіп Аа Сіи Спіу Гей Бег Си 1925 1930 1935
Азр Стпу Аїа Аа Меї Аа Ма! СПм Рго Тиг Сіп Пе Сп Геи 5ег 1940 1945 1950
Гуз Аг9 Ттр Агу Спи Пе Сіи 5ег І уз Рпє Аа Сіп Рнє Агу Ага 1955 1960 1965
Їеи Азп РнНеє Аїа Сіп Пе Ні ТНг Ма! Агу Сіи Сіи ТАг Меї Меї 1970 1975 1980 маї Меї Тиг Сіи Авр Меї Рго І єи Спи Пе 5ег Туг Маї Рго Зег 1985 1990 1995
З5
Тиг Туг Геи ТАг Спи Пе Тиг Ні Маї Зег Сп Ага І єи Гей Спи 2000 2005 2010 ма! Сім Сп І си Ге Авзп Аа Рго Авр І еи Суз Аа І уз Авр РіНе 2015 2020 2025 сі Авр Геи Рпе Гуз СПп Сіи Спи ЗегіІ еи Гув Азп Пе Гуз Авр 2030 2035 2040 зегієеи Сіп Сіп Зег Зег Сіу Ага Пе Ар Пе Пе Нів Зег Гуз 2045 2050 2055
Гуз Тниг Аїа Айа І еи Сіп бег Аа Тнг Ро Маї Сіи Агу Маї І ув 2060 2065 2070
Ї ви Сп Спи Аа І єи бЗег Сп І єи Авр РНе Сіп Тгтр Си Гуз Маї 2075 2080 2085 60
Азп Гув Меї Туг Гуз Авр Агу Сп Спіу Агу Рпе Азр Аг з5ег Маї 2090 2095 2100 ам Гуз Тгр Агу Аго Ре Ні Туг Авр Іе Гуз Пе РНе Авп ап 2105 2110 2115
ТірГеи ТНг Ссіи Аа Сі Сіп РНе Геи Агу Гуз Тиг Сп Пе Рго 2120 2125 2130
Сіи Авп Тр Сі Ні Аа Гуз Туг Гуз Тр Тугі єи Гуз Спи І єи 2135 2140 2145
Сіп Ар. Сту Пе Сіу Сип Агу Сп ТАг Маї Ма! Аг9у Тнг ГГ еи Авп 2150 2155 2160
Аа Тиг Спіу Спи Си Пе Пе Сп СіІп Зег ЗегГ уз ТНг Азр Аа 2165 2170 2175 зепПе Геи Сіп Сіи ув Гей Спіу Зегі єи Абп Гей Агу Тгр Сп 2180 2185 2190
Спи Ма! Суз Гуз Сіп І єи бег Авр Аго | уз Гуз Ага І ей СП Спи 2195 2200 2205
Сіп Гуз Авп Іе І еи Зег Сі РНе СіІп Агу Ав5р І еи. Авзп Си Ре 2210 2215 2220
З5
Ма! Геи Тр ем Сім СПм Аа Авр Авп Іе Аа 5ег Пе Рго Ї еи 2225 2230 2235
Сіи Рго Спу Гув СПи Си біп Гей Гуз Сі ув Гей Спи Сп Маї 2240 2245 2250
ГувГеи Ге Маї Спи Спи Ге Рго Гей Агу Сіп Спу Пе І еи Гув 2255 2260 2265
Сіп Гей Авп Спи ТНг СПу Счу Рго Маї І єи Маї Зег Аїа Рго Іе 2270 2215 2280 зЗег Рго Сім СПм СПп Ар Гуз Геи Си Авп Гуз Гей Гуз Сіп ТАг 2285 2290 2295
Азп Гей ап Тр Пе Гуз Ма! Зег Агу Аа І еи Рго Спи Гу Сіп 2300 2305 2310 60
Сіу Спи Пе Спи Аа Сп Пе Гуз Авр Геи Спу Сіп Геи Сім Гув 2315 2320 2325
ТГуві єм Сіш Авр І єи Си Сім Сп еи Авп Нів І єи І и ЇЇ єи Тр 2330 2335 2340
Ї еи Зег Рго Іе Агу Авп Сп Геи Сіи Пе Туг Абзп ап Рго Авп 2345 2350 2355
Сіп Сі Спу Рго Рпе Авр Ма! Сіп Сіи Тк Спи Пе Аїа Маї Сіп 2360 2365 2370
Аа Гуз ап Рго Азр МаїЇ Сіи См Пе Гей ЗегіІ уз Спіу Сп Нів 2375 2380 2385
Ї еи Туг Гуз Спи Гуз Рго Аіа. ТНг Сип Рго Маї Гуз Аг Гуз І ви 2390 2395 2400
Си Авр Геи 5ег 5ег Сім Ттр Гуз Аа Маї Авп Аго І єи Геи Сп 2405 2410 2415
Сі еи Аг Аа Гуз Сіп Рго Авр І єи Аа Рго Спу І єи ТНг ТНг 2420 2425 2430
Пе Спу Аа бег Рго Тиг Сп ТНг Ма! Тиг Гей Ма! Тнг Сп Рго 2435 2440 2445
З5 маї Ма! ТАг Гуз Спи Тит Аа Пе Зег Гуз Геи Си Меї Рго Зег 2450 2455 2460 зегі єи Меї І еи Спи Маї Рго Аа еи АїЇа Азр Рпе Авп Аг Аїа 2465 2470 2475
Тер Тиг Сі ЇЇ еи ТНг Авр Тр І єи бегі ей Гей Ар. Сп Маї! Пе 2480 2485 2490
Гуз Зег Сп Агу Ма! Меї Ма! Спу Авр Геи Спи Авр Пе Авп Си 2495 2500 2505
Меї Пе Пе Гуз Сп Гуз Аіа ТНг Меї Сип Азр Гей. Спи стіп Агу 2510 2515 2520
Агу Рго ап ей Спи Сі Ї еи Пе Тнг Аа Аіа Сп Авп Геи Гув 2525 2530 2535 60
Авп Губв ТНг Зег Азп Сп Спи Аа Агу ТНг Пе Пе ТНг Авр Аг9 2540 2545 2550
Пе Сім Аг Пе Сіп Авзп Сп Тгтр Авр Спи Маї Сип Спи Нів І єи 2555 2560 2565
Сіп Авп Ага Ага Сп Сп Гей Авп Сіи Мей єеи Гуз Авр 5ег ТНг 2570 2575 2580
Сіп Тр Ге Спи Аа Гуз Спи Спи Аа Спи Сп Ма! Гей Спіу Сп 2585 2590 2595
Аа Агу Аа Гуз І еи Спи Бег Ттр Гуз Спи Спу Рго Туг Тнг Маї 2600 2605 2610
Азр Аа Іе Сп Гуз Гуз Пе Тиг Сім ТАг Гуз Сіп І єи Аа Гуз 2615 2620 2625
Авріеи Аг Сп Ттр Сп ТАг Авп Маї Авр Маї Аа Авп Авр Гей 26530 2635 2640
Ада Гей Гуз Гей ГГ еи Агу Азр Туг Зег Аіа А5р Авр. ТНг Аг ГГ ув 2645 26550 2655 ма! Ніз. Мей Ше Тнг Сі Авп Пе Авп Аа 5ег Тгтр Ага 5ег Пе 26560 2665 2670
З5
Ні5 Гуз Ага Маї Зег Спи Агу Сім Аа Аа Геи Спи Спи ТАг Нів 2675 2680 2685
Ага І єи І єи Сп Сп Рне Рго Гей Авр І еи Сі Гуз. РНе І еи Аа 26590 2695 2700
Прі ей Тпг Си Аа Спи Тит Тнг Аа Азп Маї Геи Сп Авр Аа 2705 2710 2715
ТАг Агу Гуз Спи Ага Гей ви Спи Авр бег І уз Сіу Маї Гуз Сім 2720 2725 2730
Ї єм Меї Гуз Сіп Тр Сп Авр І єи Сп Спу Спи Пе Спи Аїйа Ніб 2735 2740 2745
Тиг Авр Маї Тут Ні Авп І еи Авр Си Авп 5ег Сіп Гуз Пе І еи 2750 2755 2760 60
Аг Бег І ви Сіи Спіу 5Бег А5р Авр Аа Ма! Геи Геи Сп Агу Ага 2765 2770 2775
Гей Авр Авзп Меї Авп Ре Гуз Тр бег Сім Гей Агу Гуз Гув5 Бег 2780 2785 2790
Ї еи Азп Пе Агу 5ег Ніз Геи Си Аа бег Зег Авр Сп Ттр Гуз 2795 2800 2805
Ага Г еи Нів Геи БегіІ еи Сп. Спи Геи ГГ еи Ма! Тер Г єи Сп І єи 2810 2815 2820
Гуз А5р Авр Сім Геи Зег Агу ап Аа Рго Пе Сіу Спіу Азр Ріе 2825 2830 2835
Рго АІа Маї Сіп Гуз Сип Абп Авр Маї Ніз Ага Аіа РнНе Гуз Агд 2840 2845 2850
Сі ей Гуз ТНг Гуз Спи Рго Маї! Ме Меї Зег ТНг І ви Спи ТНг 2855 2860 2865 маї Ага Пе Рне Гей Тиг Сім Сп Рго Гей СШи Спіу Гей Си Гуз 2870 2875 2880
Ї єи Тук Сп Си Рго Агу Сім Гей Рго Рго Сім Сім Ага Аа Сп 2885 2890 2895
З5
Азп Ма! ТНг Агу Гей ГГ еи Агу Гуз Сп Аа Спи Стій Маї Авп Тпг 2900 2905 2910
Сіи Тр сі Гув Геи АвзпГеи Ні 5ег Аа Авр Тгтр ап Аго Гуз 2915 2920 2925
Пе Азр Сім ТНгГ ей Спи Аг ГГ еи Сп Сі Її єеи сій Си Аа ТНг 2930 2935 2940
Азр Си ГГ еи Авр Гей Гуз Геи Ага ап Аа Спи Ма! Пе Гуз Спу 2945 2950 2955 зЗег Тр ап Рго Маї Спу Авр Геи Гей Пе Авр 5ег І єеи Сп Авр 2960 2965 2970
Ні Геи ати Гуз Маї Гуз Аа Гей Агу Сіу Сім Пе Аа Рго І єи 2975 2980 2985 60
Гуз Спи Авзп Маї 5ег Ні Ма! Авп Азвр І еи Аа Ага ап Геи ТНг 2990 2995 000
ТАгГєи сіу Пе Сіп ГГ еи 5ег Рго Туг Абп Їеи Бег ТНг Гей Спи 005 010 3015
Азр Геи Авп ТиАг Агу Тгр Гуз І еи ГГ еи Сп Маї Аа Маї Сім Авр зо020 3025 030
Ага Ма! Ага Сп І ей Ніз Сім Аїа Ні Ага Авр Рпє ау Рго Аа 3035 3040 3045 зег Сп Ні РНе І єи 5ег Тиг Зег Ма! Сип СпПу Рго Тр Сім Ага 3050 3055 3060
Аа Пе Зег Рго Авп Гуз Ма! Рго Туг Тут Пе Авп Нів Сім ТНг 3065 3070 3075
Сп Тиг Тнг Суз Тр Авр Нів Рго Гуз Меї Тиг Сім Геи Туг Сп 080 3085 090 зегі єи АїЇа Авр Гей Азп Азп Маї Агу Рпе Зег Аа Туг Ага ТНг 3095 100 3105
Аа Меї Гуз І еи Агу Ага І и Сп Гуз Аа Геи Су І ви А5р Гей 3110 3115 3120
З5
Ї еи Зег ГІ єи Зег Аа Аа Сувз Азр Аа І єи Авр Сп Нів Ав І єи 3125 3130 3135
Гуз Сип Авп Авр Сп Рго Меї Авзр ЇІе Геи Сп Пе Пе Авп Суб 3140 3145 3150
Їеи Тиг ТТН Пе Туг Авр Агу Гей Спи Сіп Спи Нів Авп Авп Гей 3155 3160 3165 маї Азп Маї Рго І єи Суз Ма! Авр Меї Суз І єи Азп Ттрі ей еи 3170 3175 3180
Азп Ма! Туг Азр Тнг Спу Агу ТНг Су Аго Пе Агу Маї І еи Зег 3185 3190 3195
Рпе Гуз. Тнг Спу Пе Пе 5ег І єи Суз І уз Аа Нів І єи Спи Авр 3200 3205 3210 60
Гуз Туг Ага Туг І єи Рпе Гуз ап Маї Аа Зег Зег. Тиг Сіу Ре 3215 3220 3225
Суз Азр Сп Аг Агу І єи Спіу Гей Гей Гей Ні Азр. бе" Пе Сп 3230 3235 3240
Пе Рго Аг9 Сп Ї єи Сіу СМіи Маї Аіа б5ег Рпе Спу Спу Зег Авп 3245 3250 3255
Пе СІМ Рго Зег Ма! Агуд Зег Су Ріе Сіп Рне Аа Авп Авп Гуз 3260 3265 3270
Рго Си Пе Си Аа Аіа ей Рне І єи Авр Тр Меї Аг Її єи Си 3275 3280 3285
Рго Сп 5ег Меї Маї Тр Геи Рго Маї Геи Ні Агу Маї Аа Аіа 3290 3295 300
Аа Сі ТНг Аа Гуз Ні Сіп Аїа Гуз Сув Авп Пе Сувз І уз СПИ 3305 3310 3315
Сув Рго ПІПе Пе Спу Рне Аго Туг Аг Зег еи Гув Нів Рпе Авп 3320 3325 3330
Туг Азр Пе Суз Сіп Зег Суб РНе Ре 5ег Сіу Агу Маї Аа Гуз 3335 3340 3345
З5
Стпу Ні5 Гуз Меї Нів Туг Рго Меї Маї Сіи ТугСув ПТН Рго ТНг 3350 3355 3360
ТигЗег Сспу Спи Авр Маї Агу Авр Рне Аїа Гуз Ма! ГІ еи Гув Авп 3365 3370 3375
Гуз Рпе Ага Тпг Гуз Аго Туг Ре Аа Гуз Ні Рго Аг Меї Спу 3380 3385 3390
ТугГеи Рго Маї Сіп Тиг Ма! Гей Сіи Сіу Авр Азп Меї Сім ТНг 3395 3400 3405
Рго Ма! ТНг Геи Пе Авзп Ріє Ттр Рго Маї Авр 5ег Аа Рго Аа 3410 3415 3420 зЗегЗег Рго Сп еи 5ег Ні Авр Авр Тпг Ні бег Ага Пе Си 3425 3430 3435 60
Ні Туг Аа 5ег Ага Геи Аа Спи Меї Сім Авп 5ег Авп Спу 5ег 3440 3445 3450
Тугеи Авзп Авр Бе Пе 5ег Рго Авзп Спи Бег Пе Авр Ар Сі 3455 3460 3465
Ніз І еи ГГ еи Пе Сп Ні Туг Сув Сіп 5егІ еи Авп Сп Авр 5ег 3470 3475 3480
Рго Геи Зег Сп Рго Агу 5ег Рго Аа Сіп Пе І еи Пе 5ег Гей 3485 3490 3495
Сі Зег СПм СПи Агу Сіу Спи Гей Спи Аго Пе Геи Аїа Авр Гей 3500 3505 3510
Сі іш СП Авп Аго Авп Гей Сп Авіа Спи Туг Авр. Ага ГГ еи Гуз 3515 3520 3525
СІп ап Нів СПм Ніз Гуз Сіу Геи Зег Рго І ви Рго 5ег Рго Рго 3530 3535 3540
Сіи Меї Меї Рго Тнг 5ег Рго ап 5ег Рго Агу Азр Аїа Сі І єи 3545 3550 3555
Пе АІа Спи Аа Гуз ей ей Аг ап Ніз Гуз СПу Аг Гей Сім 3560 3565 3570
З5
Аа Ага Меї Сіп Пе Гей СтПи Авр Ні Авп І уз Сіп І ви Спи 5ег 3575 3580 3585
Сіп' еи Нів Аго Гей Агу Сп Гей Гей Спи Сіп Рго Сп Авіа Спи 3590 3595 3600
Аа Гуз Маї Авп Сіу ТНиг Тиг Маї бег 5ег Рго Зег ТНг 5ег Гей 3605 3610 3615
Сіп Ага 5ег А5р 5ег 5ег Сп Рго Меї ГГ єи І єи Ага Маї Ма! Спу 3620 3625 3630
Зег Сп ТНг бег Азр бег Меї Спіу Спи Спи Авр І єи Ії єи Зег Рго 3635 3640 3645
Рго Сіп Авр Тпг Зег Тиг Сіу Геи Сі Спи Ма! Меї. Спи Спп І еи 3650 3655 3660 60
Ап Азп 5бег Ре Рго бег бег Агу Сіу Агу Азп Тиг Рго Су Гуз 3665 3670 3675
Рго Меї Агд Сіи Авр Тиг Меї 3680 3685 «2105» 65 10. «2115» 19841 «2125 ДНК «213» Ното зарієп5 «4005» 65 шесіасії даадссідас діадіааада ісдддададао днадасада їіасадіддіс бо сссаассак!ї Ппддсассад ддасддісі іїаїддаадас адішісса садасіна 120 дЧадддаїддї Шоддаїда аассонсід ссісідаїса ісадаюцна дансіааїа 180 7 аддадсдсас ассіадаїсс сісдсаїдса їаднсада доонсос асіснасда 240 адандаа аюдсосідсі ссддіаддад одсіддосіса досідіаа ссідсісдсс 300 сассасісас сіссідсідс адссідді Іссіаасадо ссасддасса сіасідйсс 360 аддсссдда ддандаддас сссдадаїас аддасааїйс ідідосааодсаддасідієс 420 ссісдссааа даддоддасаї судаддсіссі ї(ддадсассс ідіддссасс Ндсадсадс 480 7 сісїідшес ссадвшес адассідсді діссаїсіді сіссссаді пдодаасі 540 сісіссдада аддассідду ссіддчідаща сассідсіді даїдадсодад ссаїдіссаа 600 сддсснен дададасшо даїсдадаад аадісідсс дддіншасіоссИсісс 660 саассссаса сідісісссс ддсадсдаї даїсдасаа дассааддід асаїаісіда 720 аддяоасідсс дадісддад адссіднос юдсаїсаса сдссадідудс сассідіасс 780 7 Щіасаасді садссасссс Ідсдссіс99 ссссдсссса діасадссід сідаадсада 840 дсдачдадсії сісідісіаї дсідссаада дсааддсасс ссдсаасссод сіддссаадії 900 дадсдаюодо даддооссс сісаасдаді Іісдсснсіс дсссдаюдс сдасассідд 960 ссіддщад ссаддащдас їдссідсоса іспссасії сдасіссаїд сіссідсоїд 1020 додсісаюаа дадсіасіїї дддадссідс зшої919 сіддадсссі дасадссоЯсі 1080 7 асяададащас адаїдосодаа дадассща ісассоїдід дісснсасс дадддссодсод 1140 даїосісд аддссададс сасаадіссї дддісаасодс іїодссц дассссіаса 1200 ссасаадддс ададдадосу дсдасадсад ссддідсіда даддадсод адсоддсдаад 1260 аддаддадда ддадсссдад дсідсоадоса саддсісддс сдадодсосс ссосісісіс 1320 сасідсссаа досіддсісс айаснасс дсшоадсіс ддсддодссад дасасасаді 1380 60
ІстдссіІд доассісасі даадасдідс ісіасссдса ссссссссід дсссдсассс 1440 дсасссіссс Іддсасассі ддасассасос сассддссос садсадсісд аддадіддсо 1500 адссіддссс аддсссссід ссісдсісос ідісссдсіс саасадісіс ссдсасссад 1560 сіддсда999 саадасоадас дассс9даю ддсдоасада дссіддсаса ссайсадса 1620 пдоссасії сдссасосіс асасідсадд адсдасоадда ссддддадса дадааддадс 1680
"7 асаадсдсіа ссасадссід дасаасаїса дссдддаїа садіддсддс адіддсадід 1740 дюдададаа дсссадсдас ссідійсссс дсадссоссі ддассссдсс ааддюсідд 1800 дсасідсодсі аїдсссдсдс аїссасдадао дссссідсі ддадссссії дідідсаада 1860 адаїсдссса ддадсдасіс асадіссісс їдйссідда ддасідсаїс аїсасідссі 1920 дссаддадодад ссісаїсідс ассідддссс дассдадсаа ддсдощадідодссссасас 1980
7 садссідссд дддассіддс аддассцшс аїдддаадад осаддсацо дсадададад 2040 дсшойцо сідісасадс сісіддсісс дюдоаодад ддааадссад ддааайєсна 2100 дідісісаді асаадассіс іІсадаїссії ададщаздад ододісіадсссіаддсадсад 2160 дсадсадааа дчададаїюдао дідададсс адсіаддааї додосаїсс аадоасіддсес 02220 дісюдааддд садсадаїдод дссссасаїд дссаддісії асідссідіс асісдаасса 2280
7 дааїсіай! сідндааса ісідІи аааісаїдаа асшшоа діаснсадд 2340 ссаааасіад дддсдадсіс ааодссідідд дсащасідс саодссіддоаї сідддасіса 2400 ддаїсідадс сіссідсіда аддасасаддс юдддааїссс аддссіддді їссадіссса 2460 сісссісіді дасссіддас аадісасідс ссссісщас сіссаасіса ісассісца 2520 даасададсс шіаддаїда дсадщааа дащідсна ссіссіддаї ддусіюодс 02580
7 диндадаадя ісаіадіаду сдааїісадас сіддсаїсії діаасйсодд адсісдієн 2640 ддаіцісіса дсиснада аспддасіс адндсссад доіссіддад дссдідасії 2700 донссісаяд аїссісадії нддааїсої ададіссюда дісссіадаа спдададса 2760 садісюаді дасісадада саададідаї чадашода дадісідодії дадісєссіааа 2820 ададассссі сідісіссдї адйсасада сдаддадасс даддсссада саддадааду 2880
7 ааднддссс аддісассса дсаадісаді даїададаоїа ддасідісссідаднеш 2940 ссссадсасс Ісадддіссс Ісссаадіна даадададсі ссадшссс ссісссосісс 3000 сассснасс сЦассссаї ддісісасіс аддаїссдсс ааддасшо айаносоаї 3060 дааадідсід асідссадда саддаадсіа дсіаадацс аадіїсссад ссіададсад 3120 щассісща ддодісіаду дсддасссаа ддасааддсс адддідасад садсшода 3180
60 дасісіддадс іддсісссіс сссндасас Іддсідаадс ссадаідодіс ісіаасссосі 3240 сссаїсісіс ссісісаїсі Іссссадддс аїсіссіссс аассадосаа сіссссдаді 3300 ддсасавдідо ююдаасдсса іддаїаїісо99 дсссссссаа ссссаїдссс ссадссіссї 3360 адссаїаасс сісссідсід ассісасада іІсаасдіай аасаадасіа ассаїдадд 3420 аддасідсі ссадіссссс сассідсаса ааашодо9до дссссссада сіддсссдда 3480 "7 сасддасодаї діааіадссс Наїддссіс адссіїдісс сссасссасі дссаадіаса 3540 аюдассісії ссісідааас аїсадшщцйа сссісаїссс ідіссссадс ашідасічад 3600 їсасіссідд ддададасіс сссдссссід ссасаададс сссадчоісід садідідссс 3660 сісадндад ддосададс саддодідаї ссадсссісо сссддссссс ассссадсід 3720 сссндстаї щісщідсі шдаададі онааацаї ддаадссссі саддіссіс 3780 7 ссідісссдс аддассісії ашаїасіа ааойсссід Шісісадс додісідісс 3840 ссісддада адашдаїйціа даддассідії дідідтасіс шіодісіа ддсадіссдс 3900
Шшессссада ддаддацдідс аддссідсіс ссадсссадс дссісссасс ссійсайа 3960 дсаддаааад ссддадссса дддадоддаас ддассідсда дісасасаас іддідассса 4020 сассадсдас юдадсадда сссісндда дадаададса іссідсссос адссадддсс 4080 7 ссісаїсааа діссісдаїд шшаааї іаїсадаасі дсссаддасс асдшссса 4140 ддсссідссс адсддодасі ссісддіссі гдссіссіад Шсісадас сіддсссісї 4200
З5 сааддсссад дсассссадду ссдойподад ассссдасії ссасісюда даассдієса 4260 сссіддааад аададсісад айссісну дсісісддад ссосаддаадідідісєнсс 04320 сдсдссассс Іссасссссс дааашдннніс їШсіааї сссадссіда асаддааюі 4380 7 дусіссссду ссададосса аддаадсіай Пдддаісіс дшосссад ддадоадсно 4440 дсіссассас Шссісссс садссшда асадсаддіс ассссіднс адосісїдад 4500 дудсссссі ссіддіссід іссісассас сссцсссса ссіссіддда аааааааааа 4560 аааааааааа аагаадсідаї аїааадсада дадссідада асіаааша асідіссдад 4620
Ісддааїсса ісісідадіє асссаадаад сідсссіддс сісссдіссс спсссадудс 4680 7 сісаассссі Цсісссасс садссссаас ссссадсссі сасссссіад сссссадіїс 4740 дааасцої сдддадсаад авдадідоно сіасідддіс асісадссіс аайдусссі 4800 дшсадсаа ддосавдаї сісндааа Нсаїсасас сідіддсис сісідідсіс 4860 їассинша пПаодадщас адіідасаяд сідадансі ссаїдсайнс сссосіасісї 4920 адсасідаад чайсідаад дасссіддаа ддаддаадаасі ддодаасія дсподадчоа 4980 60
99Наадосі 999299с999 24999999сі9 дассаад999 9999292а29 999299299с 5040 сісддссддс сдсададада адіддссада даддсссаду ддасадссад ддасаддсад 5100 асаюдсадсс адддсіссад ддссіддаса дддоасідсса додсссідщда саддаддасс 5160 ссдадссссс ддсссддода дадоссаща юсідссіді ссаасаїдіє адссдадаю 5220 сддасідадас досіссадса дсіддоно дасссддасі Іссідодосі ддадссссід 5280 "7 сісдасснс Іссіддасаї ссассаддад сідддсуссі ссдаасіддс ссаддасаад 5340 тасдщассо асіїсідса дддаащад юссіасссі сдддасіссі дсададюд9д 5400 щюо99о9ід9о дсаддадаса ддісіддоса сададодссід дсіднодод додсаддаю 5460 дсаддадюдао саддаддада іссісссаїс сіддддсіса дадіоіддас сіддудсссід 5520 ддоасаасаїй! ісісідіссі аїдссассас Ісюдадо9до сададіааду ісадсададда 5580 7 сіададіддс юдасісад адссаддсі їІаддадісас адсаддсіад дсідссааса 5640 дссісссаїд дссісісідс ассссдссіс аддаїсадодод ісададісаї дсідддаясі 5700 сесісіссіа ддасссіссс сссаааація досісіаїдд сссісісссс ддшссід 5760 юоссід999 саадссадда дддссадсаї ддддсадсід ссаддддасус адссдасадд 5820 саддщіїсд дсдссадссі сіссадсідс сссаасадді дсссаддсас ідддадоддсоя 5880 7 дюасісасд сдддсссіді дддадаасса дсшосада саддсудссас садідссссс 5940
Іссісідсда Іссаддадду асаасшод онснсіда аїдідісісс ПсішЯта 6000 дуансдсас ссасссссас ссссадсссс ааацдісісда Нссіаїдад ссоідіддаї 6060 садссассаї Ісссдосасс ссддчдісссі дсаїссшШа дисіссідд сссададссі 6120 ссаасснеос адсідіссса саааассссі Іспдсааду дсшШссада дссідддудсес 6180 7 аддоасіддаа ддаддаїсі Іссдсисід ссадсідссі Ідісідссса ссіссісссс 6240 аадсссадда сісдддсіса сіддісасід дшсШшса йсссадсас ссідссосіс 6300 щдассеїгсаї аїдісіддсс сісадідас!і ачаїдщшадЧі щодо ссід ідідіаасаа 6360 асідідідід асаснай ссідшсіс сдосісссс їдсцссісі дідіссаїс 6420 їсшсдас ссаддссідду ПосШесс іссіссіссс ашсасада юоддаадою 6480 7 дадассаада аддассаддс сайсадссі сіддааааас сіїсісссаа ссісссасад 6540 ссссіааща сісіссіддс сісссшад їададааюа аднодано дсаддаїааа 6600 сідадассоад чідддаїгада одісіддсдс Ісссддададо адсасіссії Поїдассосу 6660 адсюсаїсі сдсддссссі ссссідссад дссідддаса ддодаддадо ссаддунсс 06720 тдсідссна ааадддсіса аїдіснодс ісісіссісс сісссссдіс сісадсссід 6780 60 осідайсої сссідсіддс ссасісіссс ддаасссссс ддаасссосісісШосісс 6840 адаасссасі дісіссісіс сісссіссс сісссаїасс саїсссісіс Іссаїссідс 6900 сіссаснсі Іссасссссу ддадіссадад ссісссідіс сссасадісс сідадссаса 6960 адссіссасс ссадсіддіс ссссасссад дсідсссаді Паасансс їадісаадда 7020 ассндасії сідададдсс Файодісаї сідіаааіаа дддаїаддасіааадсасіс 7080 "7 сіссіддаду асідададаї дддсіддасс ддадсасіцо адісідоадаї аідассаї 7140 дсіассщшо ісісссідіс сіойссце сссосадсссс аааїссадду Шссааад 7200 тдщдайсаа даассассею саїсідааїс іададаїасі ддаїасаасс ссасдісюда 7260 дссунассс аддасаїйсі асададаас дідддааї9 досссідодсі дсассідаас 7320 їщдісассда адісадддю дааддаюдаа даасідддіс Нашсс сісссснЯаї 7380 7 їсшацдаоді сідісснсі дсадасіссу Нассссасс сіаассаїсс дсасасосі 7440 ддадсссіс юдоссааїд сссідісссуд саааддасії сісаддсаїс Ісассісїаї 7500 ддчаддодсаї (ШОдаосссс садаассна сасдаюш агдіддодаа дссссюдда 7560 адсадасаді сстаддаїда адсюададу садададаад дададасада сададоадяіду 7620 дусшессс сндісісса дідсссцс дддщасссі сдуднони ссссосассас 7680 7 ссссссадсоу дадсссаїсо аїдадосі їІааддадчаціс сдасідсада дддасдаси 7740 сдадайсід аадаїдаїсод дасдсдддас айсадсдад діаадссдаа ссддасяаддаа 7800
З5 дссюасна асісдідаю ддсдадаоасаї ададоно9да дсдадоссії адааайдаї 7860 дааїдассда дсспадаас сіадддсеюда асюдадосо ддасндода ссаадаоася 7920 юдідіюддса 9919999с99 99ссасодсі дадідсадаа дсодоіюдазд Нодоісю9 7980 7 дсдадсссії НДїшесс дссдісісса сісідісіса сіаісісдас сісаддіадс 8040 ддааадаад аїдаадсада сдддссадаої діадссаї аадаїсада асаадіддда 8100 садсідаад адддасаадао дачдадасід ддсддаса доаддоасша аддаїссодсд 8160 сессдісісс ддсідсадсі ссіссддаю сссюсадаої дісдідснс сущдаддада 8220 ддчасащії даїдаагддо дассддсдаї ддаїсасоса осідсасно дсснсосада 8280 7 ададаасіа ссюдідадс Ііссдддссда ддідасіадуд аададддаса ададсссоаїд 8340 сідісасща асдаддадої ддадачадда адсістадда Пододаїдсіосссоддааа 8400 саїсттювда ааацчісюю їдсдаїаада ддоіціса даїддаюдаад ддоссійссс 8460 тїаїстадас ддддчащаїо іссіїсасід сссдшеї9 дадідаїсід ддадасісїї 8520 агааадащші сісщіодсо дадааїсісі їассіддааї дадаїаддіс псаддаай 8580 60 сіаасдаддс сасідссіад ддааддадід Ісщдоадассі айсісіддо ода 8640 ссісіддай сісшссса даасаїсіса дддададіда аїсідсссад Шасаїссса 8700 даааадні Шошою Шо ададасо9999 асададоссо саддідаїсї 8760 сіщдашодс ссддсадаїс іІстаоцйа ісісідддсі дадасідсад дісісідссс 8820 ааддащюааа ідісістдду аддаднадіс ссадссаїсс дідаїддаїс аддудссісад 8880 "7 дддасіасса ассасссаюд асдаассссі Ісісадіасс ддісада діайасою 8940 додсддадасс ідсідасасі дсідадсаад Шаддаадс дданссдодс сдададсу 9000 сдснегасс ддсоддадаї щісадасс агадасісду дсассоадсі щдосіасоїд 9060 сасадащад дсадсаща ссдаддоддаї адсаадсно Нсссіддсс ддойснЯд 9120 ааддісадад сссадададод ссададссід дадададасс НПсідоно дадсссассу 9180 7 ддчадідссії дддавіадодд дісадаасід їадаадсссі асаддадос9д9 аасссдадда 9240 адддодаісс саддддсас ідсссддадча дасоададссі ддідддасса садаадддад 9300 дисашаї сссасссне ісішссіс сдідсаддда саїсааассс дасаасаїсс 9360 тдсіддассо сідіддссас аїссдссідд ссдаснсода сіспдссіс аадсідсдуда 9420 садаюддаас ддідадссад ідсссіддсс асададсаас ддодсідсі дададодаї 9480 7 ддааддсаса дадіящаода дсодддасічд ашодадчод даааададаі дашідассс 9540 адодснааді аідсаїсідї дщдасоддасді апйадассад дсададддад ддосіаадса 9600 шадададі чайддаадо адддасссада дсіддідадс ссададоаддаі ддодсссаадс 9660 сісдсісідс Іссішоаї ссадаїсоо ісдсдаща сідіддосас сссадасіас 9720 сідісссссо адаїссідса дасідідддс адіддодссід ддасаддсад сіасдддссс 9780 7 дадчіщасі дадасосі ддоащайс одссіаїдааа щісіаїдод дсадасдссс 9840 пстасдсда айссасоддс ддадассіаї ддсаадаїсяо Іссасіасаа даїдадсасд 9900 дссдсадодда дассіддссі сісссддіад дсодсісссад дсіаїсодссі ссісісссіс 9960
Іадсаддад сассісісіс їІдссдсідаї ддасдааддяа аїсссідадо адоасісдада 10020 сисайнсад садіосіді дісссссдда дасасоддсід ддссддадія дадсаддсда 10080 7 спссддаса саїссснсі ІсСшОддссі сдасідддаї даїсіссдду асадсаїдсс 10140 ссссШаса ссддацшісяо ааддідссас сдасасащдс аасисдасі дададда 10200 сдддсісасі ассадащда дсддаао9с9а даадаасс ідіддссссі дсісддсідс 10260 дддаассісс ссаїдсіссс Іссаїаааві ддадіаадо асадіюдссіа ссіисіддая 10320
Іссідааїса сісайсссс ададсассід сісідідссс аїсіасіасі дааддасссад 10380 60 садщюассіа даснасаді ссадідадд9 аасасададс адісйсада садіааддсос 10440 ссададідаї садддсюдаяд асааддаді дсадддаа дододасіссі дасісадсаа 10500 даааоддіссії ададдасій сіддадчідчо дасдсіаїсід адсідадасі юдадодаю 10560 адаадсадда даддасіссі ссіссснад дссодісісіс псассдіді аасаадсіді 10620 садасаїас Посісддсі сідддідссс Ішщосідаа сааїасідоад даїссадсас 10680 "7 ддассадайд адсісіддіс ссідсссіса Іссадноса дістададаа Цададаай 10740 аддадацдчід ддсаддідс ссідаадода адсаасадда іасаадаааа аададюсоод 10800 ссаддсасодяд ддсісасдс сідіаасссс адсаашоо саддссдаад юододчдай 10860 дсидадссс аддаднсда дассадссід ддсаацідоа дадассссс дісісіасаа 10920 ааащціша ааааноаії дддсоідоаю асосаїдссі діагасісад сіасіаддді 10980 7 ддссдасаїд доспдадсс саддададіса аддсідсаді дадсідщаї щідссасід 11040 сасіссадсс Ідддсаасдо адададасіс ідісісаааа аїаадагааа сідааайаа 11100 аааатаддсі ддасіддссо досоюої9а сісасдссід гааісісадс асшоддад 11160 дссдадас9до діддаїсаса аддісаддаяд аїсдадасса Іспддсіаа сасддідааа 11220 ссссаїсісі ссіаааааіа саааааацна дссаддсаою аідодсдоадсо ссідіадієс 11280 7 садсіасіса ддаддсюад асаддадааї ддсддаасс сдддаддсад адшосаді 11340 дадссдадаї сдідссасід сасіссадсс ддодсдасад адсдадасіс ідісісадаа 11400 аааааааааа аааааааааа аааїаддсід дассдсддсс ддасасідіюд дсісаїдссі 11460 діааїсссад сасшоддда діссааддсс дащддаїсаї дадаїсадда ашідадас 11520 тадосіддсс аасасддіда аассссдісі сіасіааааа іасаадаааа Наодсідддаї 11580 7 юдісіс9до дідссідіаа Нссадїнас дддааадсі даддасаддадааноснда 11640 ассідддадо сададшіодс аддасдссаа даїсаюдсса сіасасісса дісіддода 11700 сададщада сісщісіса аааааааааа ааааааааад дданодосаа ддадісас 11760 дссщіааїс ссадаасії дддадосіда ддсаддсада іІсасіддаад ісаддадіс 11820 аадассадсс ддссаасаї ддідааассс щіщдісіасі аааааїасаа аашадсса 11880 7 досндаща сатдссід іааідссадс їасісаддад дсідаддсад дадаасусі 11940 щайодаасс додадодсад адшосасдї дддсіддаді дідссасід сасістадас 12000 тададасад саадасісса іІсіааааааа ааааасадаа сіддосідду сасадідасі 12060 таташоіа аїсссадсас Шдададдс дадаойнода даасідсно адсссададі 12120 пдоадасіас аасадсщая діаддсддаї сасідадої садаадаїду адассадссії 12180 60 ддссадсодїд дсдааасссс дісістасса аааагаїааа ааацадсса дасаїддіад 12240 ааддасодссід іааїсісадс їасісаддас дсютадодсад дадааісосс Юаассіддд 12300 аддсддадаї (дсадідадс щшадайцоса ссасідсасі ссадссіда9д їаасададся 12360 адасіссдіа Ісааадаааа адаааааада аааааїсід даддадссас Шадаїаад 12420 сссщадна ддосіддай ддадодааса щіаадссаа даїсааааад садічададо 12480 "7 сссдсссіда сдасідсідс їсасаїсіді дідісносу саддадасас ідісддасаї 12540
Ісддааадодї дсдссдсіад доддіссассї дссішою оддсіасіссї асіссідсаї 12600 досссісада іІаадсасідс ссіддасоддс сіссаддддс сасдадасід сідадсіс 12660 сіддаїссід сіссйддса дссаададаєд посадааїс адісйддаа ссцасідн 12720 пддасссаа адасіссіаа дадассадад пададдасс Паааніс адаїсіаі 12780 7 асінсааааї днадайоа аїшаааас сісададіса садасідддс Псссадааї 12840 сцпдіаасса йаасіша сдісідіаді асасададсс асаддаснс адаасйдда 12900 аааіадаад Шадасц іасааїсаді щіаааадаа юсааайсі Ндааїсадс 12960 саїаіаасаа іааддссаїй їІаааадіай аашадаса ддссосодід дсісасдссі 13020 діааїссіад састддда ддссаадодса адіддаїсаї дадаїсадда даїсдадасс 13080 7 аїссідосіа асасддідаа ассссдісіс їасіааааа!ї асаааааааі іадссдаддса 13140 дашо9с999 сосндсодаї сссадсіасі ідададосда ддсаддадаа їддсадаас 13200 ссддчадосо дадсндсад дадссдада ісадссасі дсасіссадс сідддасдаса 13260 дадсаадасі ссдісісааа аааааааааа ааааадіай їашаддсс ддащідоїю 13320 дсісасодссі діаайссад ІзОсшодода ддаюадвоїо доаюдаїсас сідаддісад 13380 7 дадіїсдада ссадссідас саасдіддад ааассісаїс Ісіасіаааа аасаааайца 13440 дссадасоїд діддсаїаїа ссідіааїсс садсіасіса ддадосідад дсаддадааї 13500 садаасссад дзаддадаада пощащшад сідадаїсої дссаносаї іссадссідд 13560 дсаасаадад ааасіса ісісаааааа аааааааааа аадіасіааї Цасаддсід 13620 додсащдаїщда сісасдсно дааїсссадс асшоддад одсідаадіда асддацдсі 13680 7 Ісадсссадд адіїсаадас садссщадс аасаїаатюа дасссідісії сіасаааааа 13740 пдааааааї сдідссаддс адоаоасі аідссюсад іссіадсіас Іісаддадієї 13800 даадіаддад ааїсасіїда дссіддадії ідаддснса дідадссаїд аїадайсса 13860 дссіадасаа сааадщада ссіддісіса асаааацдіаї Іаанасаса ааіаадсаї 13920 тдснаїсас аадіаааца дааааїасад аїааддаааа ддаадідаї аїсісдідад 13980 60 сісассадаї ддсадіддіс ссіддсісас асаїдіасід асасацн ааагадідда 14040 даасадаіді ШШОди ННщше сссцссіса дстасшао ісіаададаа 14100 саддаш ісіадісадс ІШацнасі ддасаасаї! асасаїасіа іасснНаїса 14160
Нпаашдаасі ссадснодаї ісідаассдс дсодддассі даасодоючоао їсадданда 14220 асссаїссіс тайадаасс саддсдсаїд іссаддатад сіаддісєсід адссоіднс 14280 "7 ссасаддадао дасідсюда Кодаддаодда садссасіїс аїассссадо дзаддаосіді 14340 сесссссса садсідадчід дадідідсІд ассісаадії дссаїсноду даїсссаїдс 14400 ссадіснад дассасаїсі дюддадаоїда ссададссаа осадісіссс саїсаддієд 14460 дссісссіді ссідаддассс Фадаададао додісідсадс даїсасащі саадддадда 14520 дададсіда сссіадааса дддодісід дассссаааді сссідсадаа даШадааа 14580 7 дадсадсісс саддддссса аддссаддад адддасадодд сішссіаа ясададдада 14640 додстайдадс сіассіддда сісіднсіс Нсасісідс ідсіссссії ссісаааїса 14700 ддаддісно даадсадсід ссссіассса садассадаа дисіднс їссассадад 14760 ааїсадсай сідісісссі ссссасіссс іссіссісіс сссадддаса дідаддісєсс 14820 аддссссаса сссаддаас юдаддссда дсадсідсії дадссасасод дсаадсдсос 14880 7 садссіддад сссісодіді ссссасадда Юааасадіа ааідоаідда ддаодадодод 14940
Іссдісадду асаанддда дадаааадої дадддснсос сдадідосої дсасідіада 15000
З5 дсссісіадда дасійссіда асадаадсад асадааасса сддададасод адднасинс 15060 адасадаода содісісідї аднасадю додсанааяд їаадодідіо дідносід 15120 дддаїсідад аадісдаїсі Ндадсюдаяд сосіддідаа ддадааасаа дссаїддаад 15180 7 даааддідсс аадіодісад дсдададссі ссадддсааа ддссндоддс аддаідддаааї 15240 ссщащшиої Ііссідааада їаашодсі дааїсайсс Ідадааддсі ддададасса 15300 дсаддаааса ааасссадса аддссіщо Ісдідаддас айадддадсіддадодан 15360 пдадсадса дадддасаїа вданаюцва діднодадс ассадсссіс їддісссіді 15420 діадашад аддассадас ісадддаїа досідаддда датадддаад ддададооасі 15480 7 дааїсацо саддадсіаї ддддансса даааноа ддддасддад дадіададда 15540
ТІааасаадда йссіадссі ддаассадід сссаацдіссі дадіснсса ддадссасад 15600 дсадсснаа дссіддіссс саїасасада сюаадіддс адіссадсо дсідісссід 15660 сддасададдс дадассдад дідасдсідс дададсісса ддаадсссід даддаддадя 15720
Ідсісасссу дсададссід адссдддада ддадоссаї ссдсасддас аассадаасі 15780 60
Ісдссаддіс дддаїсоддаа ссдадосс99 дассодддаї сддоссодод дсаасссня 15840 дсаїссссіс ісдіссддсс сддасоддасі сассадіссії ассіссссас адісаасіас 15900 дсдадасада досісддаас сдддассіад адасасасої ссдасадід саддадсдда 15960 юдаавісі дсаддсадад ддадссасад дідадісссі саїдідіссс спссссдда 16020 ддассаддад дадаодаосс дісідсіссуд сддддсоіді аїадасассі ддаддаддда 16080 "7 адддасссас дсідддасас дссдсдссас сдсссіссії сдососісса сдсдссстаї 16140 дссісщшеї Ісіссноса дсідісасда додіссссад Іссссдуддсс асоддаїссас 16200 спсссаїді аадассссіс Ісшссссі дссісадасс ідсідсссаї ісїідсадаїє 16260 сесісссідо сіссіддісі ссссдіссад азйагаддодсі сасссіасді сшддсдасі 16320 пададддса даадсссій айсадсссс адаїсісссї ссоайсадодс сісассадаї 16380 7 Ісссіссдду аїсісссіад аїіаассіссс саассісдаї іссссісдсі дісісісдсос 16440 ссассдсіда адчдосідддсі дддсіссдаї соддодїсассі дісссіїсіс ісіссадсіа 16500 дащдассссс сддссоюадс ідддссад їдсссосдо ддддссада ссссаїдсас 16560 сдссдссасс Ідсідсіссс їдссададіа сдіссддсід сссасдсссс ссіссдссуї 16620 сдсдссссдс дсіссасссу ссссіїдсса сссдеНадс дсодсаша сдддосідад 16680 7 сссасддсад дчадддсддаї сисдддсад ссааїсааса садассосіа ддаадсадсс 16740 аадасдаді Іісддасддда Нсдаддсої дсдадіюдас іаасаасадс щіадосідчі 16800 ю9999с9099 осодоососа д99аада9ію содосссасс їаїдоосоїа досододсоа 16860 дісссаддад ссааїсадад дсссаїдссд ддіднодасс Ісдсссісіс сссдсаддіє 16920 ссіаддссю ассіаїсдда ддсудсшесс сідсіссіді ІсассоНої ісідісісді 16980 7 дссдссдссс дддсюдсаї ддонадію дсссасодссяа дссаасісас сдсадісідда 17040 сдссдсссад дадссдсссод сдсісссіда асссіадаас ідіснодас іссдадодссс 17100 сонпддаада сідадідссс ддаддсасддс асадаадсся сдсссассодс сідссадіс 17160 асаассдсіс сдадсоюда ісіссдссса дсіссадісс шідаїссдд дсссдсссос 17220 їадсадссоа9 ддадададоад дссодддіссаЯ сдассдасда асдддосіся ааддаїссі 17280 7 діадссоддда адсосідс їасіосідсі двсідсідес сідсідсідс їдсідсідсі 17340 осідсідсід сіддддддаї сасадассаї Пошец сддссадасі даддсссіда 17400 содаадод сааасюсад дссюддаад дсадсаадсс дддссдіссо дйссаїсс 17460
Іссасдсасс сссассіаїс чндайсодс ааадідсааа дес дсаюасдсес 17520 сідсісюдда дадсадіса содсдаїсісї дссідснас Іісдддааан дсішдсс 17580 60 ааасссдсії Шсддддаї сссдсдсссс ссіссісасі Ідсосідсіс ісЯдадссос 17640 адссдасісс дсссаснсаЯа дсдашода їашаноа ссісдіссіс сдасісдсід 17700 асаддсіаса ддасссссаа саассссааї ссасдішо дадсасіда дассссдаса 17760 пссісддіа Шайцісі діссссассі аддассссса сссссдассс іІсдсдаайаа 17820 ааддсссісс аїсідсссаа адсісіддас іссасадідї ссдсдаша сайдіддус 17880 "7 сддадасісс дсадсдддсс ааїссддадао соідідчаада сддссдаадо їсададда 17940 дсіадсоадда Ідсдаадсод ссдааїсадчу дспададодад даааадссас дддосоддаас 18000 шадсдісс ддссааіадуд адддсдадсу дассассс9ду аддсассдсс сссдсссадс 18060 тдщдасссад сідідссасс дадсдісдад аададдадос їддосіддса дсоасоасоасоЯад 18120 ссаїссіссі Ііссасідсдс сідсдсасос сасдсдсаїс сдсіссідду асдсаадсіс 18180 7 дадаааацдії дсідсааасі Псіадсссд Носссдссс сіссіссс99 ссадасссдс 18240 ссссссюдсо дадссдддаа йссдаддда сададсодсад дссдадаїда ддаашідод 18300 доссідсада ддасссідда чзасддадосод юдсадаадсі садісісддуд дсяддадосії 18360 сдсдсссца діссіссідд асддсссдії ассіїсідсу ндісссдаї ддоддааасід 18420 аддсссідад ссадаадсас асасідддда дчаддсадааа дсасодссад аддсддадод 18480 7 аааасааадд дадааїсаса дасадасдду адддддасо99д асасасасаа ддддасадад 18540 асссдадідд ададсіддаї сісдсснсс сддсодіддаа сасадодісд дссадааада 18600 адаїсоадаа даосододад юододосоаа ааодододас аодіоооода ддадосідод 18660 дааадсссда дддадааада дчадададдда доааасійссс ааадносаа аасаїддсіа 18720 сспдссюдс ддадссдадс 9с9999сс99 сд9сід99999 99299с9919 9с99с99с99 18780 7 сддсдассда ададдаддад даддаадсодс дссадсісії дсадасшо саддсддссу 18840 адодідадос дчосоддсоосо дссодооссо доаосодосос аодсоосіосо додаосідачо 18900 дсссдддаїс сссдадсдіс сссдддісдс сссссдаддс сдсіссдаа ссдсссасдуд 18960 дссіссдсії сісдсссдад садаїдасої дсдісідсда дососідсіс саддсдддсес 19020 асодссдассд сідадссдс Нссідддсо сасідссссс дассдадсос сіасдіддса 19080 7 дсдасссдаї дапосодсодсо сддасссід9 їддссісса дсддадсдад іасдссдадс 19140
Іїстассддсі асісдададс сдссссЦсс ссдссдссса ссасдссійс сідсаддасс 19200
Іїстассідсу сасосасіас саїдаддссу адсдддссса сддссдсодсо спдудсудсад 19260 ддасаацдіа ісдасідсос аадааднсс сдсідсссаа дассаїсідд дасдасдадчо 19320 адасадіста сідснсаад дадсодсіссс дсдсадсодсі сааддссідсіассдсддса 19380 60 ассдсіассс сасдссддас дадаадсдсс дссддссас асісассддс сідісдсіса 19440 сдсаддісад саасіддне аадаассддс дасадсдсда ссддасс9д99 дссддадосу 19500 дсодсосссід саададдащда ададссіс9д9 дсддсодсааяд іІссадсісіс ссддадасаї 19560 сссдіссасс адсссісйс ссссаїдссс асідсіддду ссддсоасдсс дададіссісд 19620 дасаїсіссс дддассадсі сасааїсіса ддсдсссдсду ддоасосоддаа асіаадіою 19680 дасдддасад дсасссдссс дддсссісіс сссодсасоса ісіссісцс садсддсіосс 19740 айссдадсі ссінсссааа ісссаїсдаї дпддддааї сасасідсод9 дддосасіад 19800 адддасщдад даааааддас адддссідід дссасіссас І 19841 «210» 66 «2115 842 «212» білок «213» Ното зарієп5 «400» 66
Меї Зег Агу Рго Гей Зег Ар Сп Спи Гуз Аг Гуз Сп Пе Зег Маї 1 5 10 15
Аго Сту Геи Аа Сіпу Маї Спи Авп Маї Тиг Спи Геи Гуз Гуз Авп Рпе 20 25 Зо
Авп Агу Нів І ви Ні Ре ТНг Гей Маї Гуз Азр Агу Азп Маї Аїа ТНг 35
Рго Агу Азр Туг Туг Рне Аа І єи Аа Ні Тнг Маї Агу Авр Ніз І єи бо 40 маї сіу Ага Тр Іе Аго Тиг Сп Сп Нів Туг Туг Спи Гуз Авр Рго 65 70 75 80 45 Гуз Ага Іе Туг ТугГеи Зег І єи Спи РНе Туг Меї Сіу Агу Тиг Гей 85 90 95
Сіп Азп Тнг Меї Маї Авп І єи Аа І еи Спи Авзп Аа Суз Авр Сім Аа 50 100 105 110
Тиг Туг сп Гей Спу Геи Авр Меї Спи Спи ГГ еи сти Си Пе СПи Спи 115 120 125 55
Азр Аїа Су ГІ еи СпПу Авп Сіпу Сіу І еи Спу Ага ГГ еи Аа Аа Суз Рпе 130 135 140 бо
Ї еи Авзр 5ег Меї Аа ТпАг І єи С1у І еи Аа Аа Туг Спу Туг Спу Пе 145 150 155 160
Ага Туг Ссіш Ре Спу Пе Рпє Авп ап Гуз Пе Зег СПу СпПу Ттр Сп 165 170 175
Меї Спи Сім Аїа Азр Азр Ттр І єи Аго Туг Спу Авп Рго Тгр Спи Гуз 180 185 190
Аа Ага Рго Си Рне ТнНг І єи Рго Маї Ні Рне Туг Сіу Ні Маї Спи 195 200 205
Ні Тниг Зег Сп Сіу Аа Гуз Тр Маї А5р Тнг Сіп Маї Ма! Геи Аіа 210 215 220
Меї Рго Туг Авр Тнг Рго Маї Рго Стпу Туг Агу Авп Авзп Маї Маї Авп 225 230 235 240
Тиг Меї Аг Г єи Тгр Зег Аа Гуз Аа Рго Авзп Авр РНе Авп І ви ГГ ув 245 250 255
Азр Рпе Авп Маї Спу Спу Туг Пе Сп Аа Ма! І еи Авр Агу Авп Гей 260 265 270
Аа Сі Авп Пе 5ег Агу Маї І єи Туг Рго Авп Авр Ап Рпе РНеє Сі 275 280 285
З5
СПУ Гуз Спи Ї єи Аго І єи Гуз Сіп Спи Туг Рне Маї Маї Аїа Аа ТНг 290 295 З00
І еи Сп Авр Іе Пе Аго Аго Ре Гуз Зег Зег Гуз Рне Спіу Суз Аг9 305 з10 315 320
Ар Рго Маї Ага Тпг Азп Рнеє Азр Аїа Рнеє Рго Азр Гуз Маї Аїа Пе 325 330 335
Сіп Гей Авп Авр Тнг Нів Рго 5ег І єи Аа Іе Рго Си І еи Меї Ага 340 345 350
Пе Геи Маї Авр Геи Сім Агу Меї Азвр Тр Ар Гуз Аа Тгр Авр Маї 355 360 365
Тнг Маї Агу ТАг Суз Аа Туг ТНг Авп Ніз ТАг Маї Геи Рго Сім Аа 370 375 380 60
Ї еи Спи Агу Ттр Рго Маї Ні І еи І єи Сім ТАг Гей ГГ еи Рго Ага Ніб 385 390 395 400
Гей Сп Пе Пе Туг СПм Пе Авп Сп Ага РнНе Геи Авп Агу Маї Аа 405 до 415
Аа Аїа Ре Рго Сіу Авр Маї Авр Ага І єм Агу Аг Меї зе" ГІ еи Маї 420 425 430
Сім СП Спу Аа Маї! І уз Агу Пе Авп Меї Аїа Ніз І єи Суз Пе Аа 435 440 445
Сіу Зег Ні Аа Маї Азп Су Маї Аїа Ага Іе Ні Зег Сім Іе І ей 450 455 460
Гуз Гуз Тпг Пе Ре Гуз Ар РНе Туг Си І еи Сім Рго Ні Гуз Рпе 465 470 475 480
Сп Азп Гу ТНг Авп Су Пе Тнг Рго Аго Аг Ттгр І єм Ма! І еи Су 485 490 495
Азп Рго Су І єи Аа Спи Маї! Пе Аа Спи Ага Пе Сіу Спи Авр Рпе 500 505 510
Пе Бег А5р Г еи Азвр ап І еи Ага Гуз Геи І ви 5ег Ріє Маї Авр Азр 515 520 525
З5
Сім Аїа Ріє Іе Аг Азр Маї Аїа Гуз Ма! Гуз Сіп См Авп Гуз ей 530 535 540
Гуз РНе Аїа Аа Туг І еи Сім Агу Спи Туг Гуз Маї Нів Пе Авп Рго 545 550 555 560
Авп 5егіеи РНе Авр Іе Сіп Маї Гуз Ага Іе Ні Сіи Туг Гуз Аг9 565 570 575
Сіп Гей Гей Авп Суз І єи Ніз Ма! Пе ТНг І еи Туг Азп Ага ПІе І уз 580 585 590
Агу Си Рго Авп Гуз Рпє РпПє Маї Рго Аго Тнг Ма! Меї Пе СПу Спу 595 600 605
Гуз Аа Айїа Рго Сіу Туг Ні Меї Аїа ГІ уз Меї Іе Іе Аг Г еи Маї 610 615 620 60
Тиг Айва Пе Сіу Азвр Маї Маї Авп Ніз Авр Рго Аїа Маї Спіу Авр Ага 625 630 635 640
Гей Аг9у Ма! Ме РНе Геи Сім Авп Туг Аг Маї 5ег І еи Аа Сім Гув 645 650 655 ма! Іе Рго Айа Ага Авр І еи Зег Сім Сіп Пе Зег ТНг Аа СІу ТНг 660 665 670
Сім Аа Зег Спу Тиг Спу Азп Меї Гуз Ріє Меї І еи Авп Су Аа І ви 675 680 685
Тпиг Пе Стпу Тнг Меї Азр Су Аїа Азп Маї Сім Меї Аа Спи Сім Аа 690 695 700 сСіу Спи Си Авп РНе Ре Пе Рпє Стпу Меї Ага Маї Сіи Авр Маї А5р 705 710 715 720
Гуз Геи Авр Сп Аго Спу Туг Авп Аа Сп Спи Туг Туг Азр Ага Пе 725 730 735
Рго Си І ви Ага Сп Маї Пе Спи Сп Гей БЗег Зег Сіу Рпе Ріє Зег 740 745 750
Рго Гуз СіІп Рго Авр І єи РНе Гуз Азр Іе Маї Авп Меї І єи Меї Нів 755 760 765
З5
Ні Авр Аго Рне Гуз Маї РНе Аїа Авр Туг Спи Ар Туг Пе Гуз Сув 770 775 780
Сіп Спи Гуз Маї бег Аа Геи Туг Гуз Азп Рго Аго Си Тгтр ТНг Ага 785 790 795 800
Меї маї Іе Аго Авп Іе Аїа Тниг 5ег СПу Гуз Рпе Зег 5ег Азр Ага 805 810 815
Тит Пе Аїйа Сіп Туг АІа Аг Си Пе Тгр Сіу Ма! Сім Рго 5ег Ага 820 825 830
Сіп Ага Геи Рго Аа Рго Ар Сім Аїйа Іе 835 840 «2105» 67 «211» 429 «212» білок 60 0 «213» Ното зарієп5
«4005» 67
Меї ап І єи Агу Авп Рго Си І єи Ніз І єи Спіу Суз Ада І еи Аа І єи 1 5 10 15
Аг Рне І єи Аа І єи Маї Зег Тгр Азр Іе Рго Сту Аа Аг Айа І єи 20 25 Зо
Азр Авп ау Г еи Аа Ага Тнг Рго Тиг Меї Сту Тр Гени Нів Тр Сі 35 40 45
Ага РНне Меї Суз Авзп І єи Азр Суз Сп Спи Сіш Рго Авр 5ег Суз Пе 50 55 60
Зегайм Гуз І еи Рпе Меї Спи Меї Аїа Сім І еи Меї Маї Зег Спи СІу 65 70 75 80
Тер Гуз Авр Аа Спу Туг Спи ТугіІ єи Суз Пе Авр Азр Суз Ттр Меї 85 90 95
Аа Рго Сп Агу Авр Зег Спи СпПу Ага Гей Сп Аа Авр Рго Сп Ага 100 105 110
Зо
РНе Ріо Ніз Стпу Пе Ага Сп І ей Аа Азп Туг Маї Нів 5ег І уз Спу 115 120 125
З5
Ї еи Гуз І ви Спу Пе Туг Аіа Ар Маї Спу Авп Гуз Тиг Суз Аа Су 130 135 140
Рпе Рго Сіпу Зег Рне Сту Туг Туг Авр Пе Авр Аїа Сп ТНг Рпє Аа 145 150 155 160
Ар Тр Сіу Маї Авр І єи І єи І уз Рпе Азр Сіу Суз Туг Сув Авр 5ег 165 170 175
Ї еи Спи Авп І єи Аа Авр Су Туг І уз Ні Меї 5ег І єи Аа І єи Авп 180 185 190
Агу Тнг сапу Агу зе" Пе Маї Туг Зег Суз Спи Тр Рго Гей Туг Меї 195 200 205
Тер Рго РНе Сп Гуз Рго Авп Туг Тиг Сім Пе Агу Сп Туг Суб Авп 210 215 220 бо Ні Тгтр Агу Авзп Ре Аїа Азр Іе Авр Авр 5ег Тр Гуз 5ег Пе Г ув
225 230 235 240 зег Пе Г еи Ар Тр ТНг Зег Ре Авп Сп Спи Агу Пе Маї Авр Маї 245 250 255
Аа Сіу Рго Спіу Спу Тгтр Азп Авр Рго Ар Меї І єи Ма! Пе Сіу Авп 260 265 270
Рпе Су Гей 5ег Тгтр Авп Сп Сі1Іп Ма! Тнг Сп Меї Аа Гей Тр Аа 275 280 285
Пе Меї Аїйа Аїа Рго І еи Рне Меї 5ег Авп Авр І ви Ага Нів Пе Зег 290 295 00
Рго Сп Аа Гуз Аа І єи І еи Сп Авр Гуз Авр Маї Іе Аа Пе Авп 305 з10 315 з20
Сіп Авр Рго ГГ еи Спу Гув Сіп СПу Туг Сп Гей Аго Сп Спу А5р Авп 325 330 335
Рпє Стпи Маї Тер Сі Ага Рго ГГ еи Зег Спу І єи Аа Тгр Аа Маї Аа 340 345 350
Зо
Ме! Пе Авп Агд Сіп Спи Пе СПу СпПу Рго Ага 5ег Туг ТАг Пе Аа 355 360 365
З5 маї Аа 5ег І еи Сіу І уз Спіу Маї Аіа Суз Азп Рго Аа Суз РНе Пе 370 375 380
ТАигаїп Геи І єи Рго Маї Гуз Агу Гуз І еи Сіу Рне Туг Сіи Тер ТНг 385 390 395 400 зЗег Аго І еи Агу 5ег Нів Пе Азп Рго ТНиг Спу ТАг Ма! І ей Ї еи Сп 405 до 415
Ї еи Спи Азп Тнг Меї Сіп Меї 5ег І еи І уз Азр І єи Ї еи 420 425 «2105» 68 «2115 952 «212» білок «213» Ното зарієп5 «4005» 68
Меї Сіу Маї Ага Ні Рго Рго Суз 5ег Нів Агу І єи Гей Аа Маї Су 601 5 10 15
Аа І єи Маї Зег І еи Аа Тнг Аа Аа І єи І єи Спу Нів Пе І єи І єи 20 25 зо
Ні Авр РнНе Іі єи І єи Маї Рго Ага Сі І єи Зег Сіу Зег 5ег Рго Маї 35 40 45
Їеи Спи Сім ТА Нів Рго Аїа Ніз Сип Сп Спу Аа 5ег Агу Рго Спіу 50 55 60
Рго Аг Азвр Аїа ап Аїа Ні Рго Сіу Ага Рго Аго АїЇа Маї Рго ТНг 65 70 75 80
Сіп Суз Авр Маї Рго Рго Авп 5ег Ага Ре Авр Суз Аїа Рго Азвр ГГ ув 85 90 95
Аа Пе Тиг Сіп Спи Стій Суз Спи АІа Агу Спу Сувз Суз Туг Пе Ро 100 105 110
Аа Гуз СіІп Спу Гей Стіп Спу Аа Сп Меї Спу Сп Рго Тгтр Суб Рпе 115 120 125
Зо
РНе Ртоо Рго 5ег Туг Ро 5ег Туг Гуз І еи Сім Авп І еи бег Зег Зег 130 135 140 сій Мег Сіу Туг Тнг Авіа ТНг І єи Тиг Аг ТАиг Те Рго Те Рпе Ріе 145 150 155 160
Рго Гуз Азр Пе Гей ТНг І єи Ага І єи Авр Ма! Меї Меї Сім Тнк Си 165 170 175
Азп Ага ГГ єи Ні Ре ТНг Пе Гуз Ар Рго Аа Азп Ага Ага Туг Сі 180 185 190 маї Рго І єи Сіи Тне Рго Ні Маї Ні 5ег Ага Аа Рго 5ег Рго І єи 195 200 205
Туг Зег Ма! Сім Рпе Зег Спи Сім Рго РНе Сіу Маї Пе Маї Агу Ага 210 215 220
Сіп Гей Ар Сіу Агу Маї І ей І ви Азп Те Тнг Маї Аа Рго І єи Рне 225 230 235 240
Рпє Аїа Ар СіІп РНе Г ви Сп І еи Зег ТНг Зег І ви Рго Зег Сіп Туг бо 245 250 255
Пе Тиг Слу ГГ еи Аа Сім Нів І єи бег Рго Геи Меї Геи Зег ТАг Зег 260 265 270
Тер Тнг Ага Пе Тнг І єи Тгтр Авп Ага Азр І єи Аа Рго Тниг Рго Спу 275 280 285
Аа Авп І єм Туг Сіу 5ег Ні Рго Рне Туг І єи Аа І єи Спи Авзр Спу 290 295 00
Стпу бег Аа Ніз Сіу Маї Рне І єи І єи Азп 5ег Азп Аа Меї Азр Маї 305 з10 315 з20
Ма! І еи Сіп Рго Зег Рго Ага І єи 5ег Ттр Агу 5ег ТНг Сіу СПУ Пе 325 330 335
Ї еи Авр Маї Туг Пе Рне І єи СіІу Рго Сім Рго І уз 5ег Ма! Ма! Сип 340 345 350
Сіп ТугІ еи Авр Маї Маї Спу Туг Рго Рпє Меї Рго Рго Туг Ттр СПУ 355 360 365
Зо
Ї еи Спу Ре Ніз І еи Су Агу Тгр Стпу Туг Зег Зег ТНг Аа Пе ТНг 370 375 380
Аго Сп Маї Ма! Сім Авп Меї ТНг Агу Аїа Ні Рне Рго Геи Азр Маї 385 390 395 400
Сіп Тр Авп Авр І єи Авр Туг Меї Авр 5ег Агу Агу Авр Рпе ТАг Рпе 405 до 415
Авп Гуз Азр Су РНе Агу Авр РНе Рго Аїа Меї Маї Сіп Спи І еи Нів 420 425 430
Сіп Спіу Сіу Агу Аго Туг Меї Меї Пе Маї Авр Рго Аїа Іе Зег Зег 435 440 445 зЗег Сіу Рго Аа Спу 5ег Туг Агу Рго Туг Азр Спи Сіу Г еи Ага Ага 450 455 460 ау Ма! РНе Пе Тнг Авп Сім Тиг Спу Сп Рго Гей Пе Спу Гуз Маї 465 470 475 480
Тер Рго Сту Зег ТНг Аа РНе Рго Авр Ре Тнг Авп Рго Тнг Аа ГІ єи бо 485 490 495
Аа Тр Тр Си Азр Меї Маї Ага Сім Рпє Нів Авр Сп Маї Рго Рпе 500 505 510
Азр Стпу Меї Ттр Пе Ар Меї Авп ами Рго Зег Авп РНе Пе Агу Спу 515 520 525 зЗег СІ Авзр Сіу Суз Рго Авп Азвп Си І ей Си Авп Рго Рго Туг Маї 530 535 540
Рго Стпу Маї Маї Спу Спу ТНиг ГГ еи Сп Аа Аа Тпг Пе Суз Аа 5ег 545 550 555 560 зег Ні Сп РнНе І єи 5ег ТНг Ні Туг Авп Г єеи Ні Авп І єи Туг Спу 565 570 575
Ї еи Тиг Си Апа Іе Айа 5ег Ні Аго Аа І ви Ма! Гуз Аа Агу Спу 580 585 590
Тпиг Агу Рго Ре Ма! Пе 5ег Агу 5ег Тиг РНе Аїа Су Ні Сіу Аг9 595 600 605
Зо
Туг Аіа Сіу Ні Ттр ТНг Сту Азр Маї Тр 5ег Зег Ттр Спи Сп І еи 610 615 620
Аа бег 5ег Ма! Рго Сіш Пе І еи Стіп Рпе Авп Геи І еи Сіпу Маї Рго 625 630 635 640
Ї еи Маї Спу Аїа Азвр Маї Суз Сіу РНе І ви Спу Авп ТАг Зег СПм Спи 645 650 655
Ї еи Суз Маї Ага Тр ТАг Сп ГГ еи Стпу Аа Рне Туг Рго Рне Меї Аг 660 665 670
Авп Нів Авзп 5егіІ єи І єи Бе" І ви Рго Сіп СП Рго Туг бег РНе 5ег 675 680 685
Сім Рго Аїа Сп Сіп Ага Меї Аг Гуз Аа ГІ єи ТНг І еи Агу Туг Аа 690 695 700
І еи І єм Рго Ніз Гей Тут ТНг Геи Ре Нів Сіп Аїйа Ні Маї Аіа Спу 705 710 715 720
Сім Тнг Маї Ага Агу Рго ГІ еи Ре ГГ єи Сім РНе Рго Гуз Авр 5ег 5ег бо 725 730 735
Тиг Тер Тпг Маї Авр Ніз Сп І еи Гей Ттр Спу Спи Аа Г еи І єи Пе 740 745 750
Тиг Ріо Маї І ви Сип Аа Спу Гуз Аіа Спи Маї Тиг Спу Туг Рне Рго 755 760 765
Ї ви Спу Тнг Тгтр Туг Авр ГГ єи Сп Тнг Маї Рго Маї Сім Аа І и Спу 770 775 780 зегГеи Ріо Рго Рго Рго Аїйа Аа Рго Ага Си Рго Аїа Пе Нів Зег 785 790 795 800
Спи Спу Сп Тер Маї ТНг І єи Рго Аа Рго Гей Авр ТНг Пе Авп Маї 805 810 815
Нів І еи Аго Аа сту Туг Пе Пе Рго Гей Сп СПу Рго С1пу І еи ТНг 820 825 830
ТА Тнг Спи Зег Агу Сп Сп Рго Меї Айа І еи Аа Маї Ага І ви ТНг 835 840 845
Зо
Гуз Спу Спу Сім Аа Агу Сіпу Спи Ї еи Ре Тгр Авр Авр Стпу Спи бег 850 855 860
Ї ви Спи Маї Геи Сім Ага Спу Аа Туг Тиг Сіп Ма! Пе РНе Геи Аіа 865 870 875 880
Ага Авп Азп Тпг Пе Маї Азп Сім І єи Маї Агу Ма! Тнк бег Спи Су 885 890 895
Аа СТУ І еи Сп І єи Стп Гуз Маї Тнг Маї І еи Сту Маї Аа Тнг Аа 900 905 910
Рго Сп Сп Ма! Геи Зег Авп Су Маї Рго Маї 5ег Авзп РНе ТАг Туг 915 920 925 зЗег Рго Азр ТНг ПІ уз Маї І єи Авр Пе Суз Маї 5ег І єи І єи Меї Спу 930 935 940 ам Сп Ріє І єм Маї 5ег Тр Сув 945 950 «210» 69 60 0о«2115» 210
«212» білок 213» Ното зарієп5 «4005» 69
Меї Ттр ТНг І єи Спу Агу Ага Аїйа Маї Аа Су І еи І еи Аа 5ег Рго 1 5 10 15
ЗБег Рго Аа СіІп Аа Сіп ТНг ГГ еи Тнг Агу Маї Рго Аго Рго Аїа Си 20 25 Зо
Ї еи Аіа Рго І єи Суз Сіу Агу Аго Су І еи Ага ТНг Авр Пе Авр Аа 35 40 45
Тиг Сувз Тнг Рго Аг Ага Айа бег Зег Авп Сп Агу Спу Гей Авп Сп 50 55 60
Пе Тр Авп Маї Гуз Гуз Сіп Зег Ма! Туг ГГ еи Меї Авп Гей Ага Гуз 65 70 75 80 зег Сіу Тит єи Стпу Ні Рго Сіу Зег І еи Авр Спи Тиг ТНг Туг Спи 85 90 95
Аго Гей Авіа Сіи Спи ТНг І еи Авр 5ег І ви Аа Сім Рне Ре Сім Ар 100 105 110
Ї еи Аа Авр Гуз Рго Туг Тит Ріє Спи Авр Туг Авр Маї 5Зег Рпе Стпу 115 120 125 зЗег Спіу Ма! І еи ТАг Ма! Гуз Геи Спіу Спу Авр І еи Спу Тиг Туг Маї 130 135 140
Пе Авп Гуз Сп ТНг Рго Авп Гуз Сіп Пе Тер І єи Зег Зег Рго Бег 145 150 155 160 зЗег Сіу Рго Гуз Агу Туг Авр Тр Тиг Сіу Гуз Авп Тр Маї Туг 5ег 165 170 175
Ні Авр Сіу Маї 5егІ еи Ні Сім І єи І єи Айва Аа Сі І єи ТНг Гуз 180 185 190
Ага Гей Гуз Тиг Гуз І єи А5р І ви Зег Зег І єи Аа Туг Зег Спу Гув 195 200 205
Ар Аа 210 60

Claims (45)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Варіант капсидного білка аденоасоційованого вірусу (ААМ), що містить пептидну вставку в СН-петлю капсидного білка відносно відповідного батьківського капсидного білка ААМ, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (ЗЕО ІЮ МО: 14) або містить амінокислотну послідовність МКІОКТО (БО ІО МО: 13), де сайт інсерції розташований між двома сусідніми амінокислотами у положенні між амінокислотами 570 і 611 МР1 капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО: 2) або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААУ.
2. Варіант капсидного білка ААМ за п. 1, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність УУ2МКТТМКОМз або містить амінокислотну послідовність У: м2МКІОВТОУ», де кожний з У1-Уз незалежно вибраний з Аа, І еи, су, 5ег, ТНг і Рго.
З. Варіант капсидного білка ААМ за п. 2, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність ГАМКТТМКОА (ЗЕБЕО І МО: 27) або містить амінокислотну послідовність ГАМКІОВТОА (5ЕО ІО МО: 26).
4. Варіант капсидного білка ААМ за будь-яким із пп. 1-3, де сайт інсерції розташований між амінокислотами, які відповідають амінокислотам 587 і 588 МР1 капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО: 2), або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ.
5. Варіант капсидного білка ААМ за будь-яким із пп. 1-4, де капсидний білок ААМ містить одну або більше амінокислотних замін відносно МР1 капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮО МО: 2) або відповідних замін у капсидному білку іншого серотипу ААМ.
б. Варіант капсидного білка ААМ за п. 5, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність МКТТМКО (ЗЕО ІЮО МО: 14), і де капсидний білок ААМ містить амінокислотну заміну М708І відносно МР1І капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ.
7. Варіант капсидного білка ААМ за п. 6, де капсидний білок ААМ додатково містить одну або більше амінокислотних замін: амінокислотну заміну 51097, амінокислотну заміну М/694С і амінокислотну заміну МУбО6С відносно МР1 капсиду ААМ2 (ЗЕО ІЮ МО: 2) або у відповідному(их) положенні(ях) в капсидному білку іншого серотипу ААМ.
8. Варіант капсидного білка ААМ за п. 6, де капсидний білок ААМ містить амінокислотну послідовність, щонайменше на 90 95 ідентичну повнорозмірній амінокислотній послідовності, представленій в ЗЕО ІЮ МО: 48.
9. Варіант капсидного білка ААМ за п. 8, де капсидний білок ААМ містить амінокислотну послідовність, представлену в ЗЕО ІЮ МО: 48.
10. Варіант капсидного білка ААМ за п. 5, де пептидна вставка містить амінокислотну послідовність МКІОКТО (5ЕО ІЮ МО: 13), і де капсидний білок ААМ містить амінокислотну заміну МТО8І відносно МР1 капсиду ААМ2 (5ЕО ІЮО МО: 2) або у відповідному положенні в капсидному білку іншого серотипу ААМ.
11. Варіант капсидного білка ААМ за п. 10, де капсидний білок ААМ додатково містить одну або більше амінокислотних замін: амінокислотну заміну 51097, амінокислотну заміну К588М і амінокислотну заміну АБ5У9ЗЕ відносно УР1 капсиду ААМ2 (ЗЕО ІО МО: 2) або у відповідному(их) положенні(ях) капсидного білка іншого серотипу ААМ.
12. Варіант капсидного білка ААМ за п. 10, де капсидний білок ААМ містить амінокислотну послідовність, щонайменше на 90 95 ідентичну повнорозмірній амінокислотній послідовності, представленій в ЗЕО ІЮ МО: 43.
13. Варіант капсидного білка ААМ за п. 12, де капсидний білок ААМ містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої в ЗЕО ІЮО МО: 43.
14. Варіант капсиду ААМ за будь-яким із пп. 1-13, де капсидний білок надає інфекційному віріону ГААМ підвищену інфекційність м'язової клітини порівняно з інфекційністю м'язової клітини віріону ААМ, що містить капсидний білок ААМ дикого типу. БО
15. Варіант капсидного білка ААМ за будь-яким із пп. 1-14, де капсидний білок додатково надає інфекційному віріону гААМ підвищену стійкість до нейтралізації нейтралізуючим антитілом порівняно з ААМ, що містить відповідний батьківський білок капсиду АДАМ.
16. Виділена нуклеїнова кислота, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує варіант капсидного білка ААМ за будь-яким із пп. 1-15.
17. Інфекційний рекомбінантний віріон ААМ (ГААМ), який містить варіант капсидного білка АДАМ за будь-яким із пп. 1-15.
18. Віріон гААМ за п. 17, який додатково містить гетерологічну нуклеїнову кислоту, що містить нуклеотидну послідовність, що кодує продукт гена.
19. Віріон гААМ за п. 18, де продукт гена являє собою білок, малу інтерферуючу РНК, бо антисмислову РНК, мікроРНК, коротку шпилькову РНК або малу інтерферуючу РНК.
20. Віріон гААМ за п. 19, де віріон ГААМ містить гетерологічну нуклеїнову кислоту, що кодує продукт гена, вибраний з альфа-галактозидази А (СГ А), фратаксину (ЕХМ), дистрофіну (МО) або його функціонального фрагмента, кислої альфа-глюкозидази (САА) і глікосенфосфорилази м'язів (РУОМ).
21. Віріон гААМ за п. 20, де варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 99595 ідентичності послідовності з амінокислотною послідовністю, представленою в 5ЕО ІЮ МО: 48, ї де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує білок альфа- галактозидази А (СІ А).
22. Віріон гААМ за п. 21, де варіант капсидного білка ААМ містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої БЕО ІЮО МО: 48, і де нуклеотидна послідовність, що кодує СГА, функціонально зв'язана з промотором САС.
23. Віріон гААМ за п. 20, де варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 99595 ідентичності амінокислотної послідовності з амінокислотною послідовністю, представленою в 5ЕО ІЮ МО: 48, і де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує білок глікосенфосфорилази м'язів (РУСМ).
24. Віріон гААМ за п. 23, де варіант капсидного білка ААМ містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої БЕО ІЮО МО: 48, і де нуклеотидна послідовність, що кодує глікогенфосфорилазу м'язів (РУСМ), функціонально зв'язана з промотором САС.
25. Віріон гААМ за п. 20, де варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 99595 ідентичності амінокислотної послідовності з амінокислотною послідовністю, представленою в ЗЕО ІЮО МО: 48, і де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує білок дистрофіну або його функціонального фрагмента.
26. Віріон гААМ за п. 20, де варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 99595 ідентичності амінокислотної послідовності з амінокислотною послідовністю, представленою в 5ЕО ІЮ МО: 48, і де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує білок Зо фратаксину.
27. Віріон гААМ за п. 26, де варіант капсидного білка ААМ містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої в 5ЕО ІЮ МО: 48, і де нуклеотидна послідовність, що кодує білок фратаксину, функціонально зв'язана з промотором СА.
28. Віріон гААМ за п. 20, де варіант капсидного білка ААМ містить амінокислотну послідовність, яка має щонайменше 9095, щонайменше 9595 або щонайменше 99595 ідентичності амінокислотної послідовності з амінокислотною послідовністю, представленою в 5ЕО ІЮО МО: 48, і де гетерологічна нуклеїнова кислота містить нуклеотидну послідовність, що кодує білок САА.
29. Віріон гААМ за п. 28, де варіант капсидного білка ААМ містить або складається з амінокислотної послідовності, представленої БЕО ІЮО МО: 48, і де нуклеотидна послідовність, що кодує білок САА, функціонально зв'язана з промотором СВА.
30. Фармацевтична композиція, яка містить віріон гААМ за будь-яким із пп. 18-29 і фармацевтично прийнятний ексципієнт.
31. Спосіб доставки іп міго гетерологічної нуклеїнової кислоти в м'язову клітину, що включає введення в м'язову клітину вірну гААМ за будь-яким із пп. 18-29 або фармацевтичної композиції за п. 30.
32. Спосіб за п. 31, де м'язова клітина являє собою клітину серцевого і/або скелетного м'яза.
33. Застосування віріону гААМ за будь-яким із пп. 19-29 або фармацевтичної композиції за п. 30 для виробництва лікарського засобу.
34. Застосування віріону гААМ за п. 21 або 22 або фармацевтичної композиції, що містить віріон ГААМ за п. 21 або 22, для виробництва лікарського засобу для лікування хвороби Фабрі.
35. Застосування віріону гААМ за п. 23 або 24 або фармацевтичної композиції, що містить віріон ГААМ за п. 23 або 24, для виробництва лікарського засобу для лікування дефіциту міофосфорилази (хвороби Макардла).
36. Застосування віріону гААМ за п. 25 або фармацевтичної композиції, що містить віріон ГААМ за п. 25, для виробництва лікарського засобу для лікування м'язової дистрофії Дюшенна.
37. Застосування віріону гААМ за п. 26 або 27 або фармацевтичної композиції, що містить віріон ГААМ за п. 26 або 27, для виробництва лікарського засобу для лікування атаксії Фрідрейха.
38. Застосування віріону гААМ за п. 28 або 29 або фармацевтичної композиції, що містить віріон ГААМ за п. 28 або 29, для виробництва лікарського засобу для лікування хвороби Помпе. бо
39. Застосування віріону ГААМ або фармацевтичної композиції за будь-яким із пп. 34-38, де вірон гААМ або фармацевтична композиція призначені для введення за допомогою внутрішньовенної і/або внутрішньом'язової ін'єкції.
40. Застосування терапевтично ефективної кількості вірну гААМ за п. 21 або 22 або фармацевтичної композиції, що містить віріон гГААМ за п. 21 або 22, для лікування хвороби Фабрі.
41. Застосування терапевтично ефективної кількості вірну гААМ за п. 23 або 24 або фармацевтичної композиції, що містить віріон гААМ за п. 23 або 24, для лікування дефіциту міофосфорилази (хвороби Макардла).
42. Застосування терапевтично ефективної кількості віріону ГААМ за п. 25 або фармацевтичної композиції, що містить віріон гААМ за п. 25, для лікування м'язової дистрофії Дюшенна.
43. Застосування терапевтично ефективної кількості вірну гААМ за п. 26 або 27 або фармацевтичної композиції, що містить віріон гААМ за п. 26 або 27, для лікування атаксії Фрідрейха.
44. Застосування терапевтично ефективної кількості віріону гААМ за п. 28 або 29 або фармацевтичної композиції, що містить віріон гГААМ за п. 28 або 29, для лікування хвороби Помпе.
45. Застосування за будь-яким із пп. 40-44, де віріон ГААМ або фармацевтична композиція вводяться за допомогою внутрішньовенної і/або внутрішньом'язової ін'єкції. і ІЕМ, ан кори Я пан ши ООВЖ ЕС КВ о ВЕ ПОВЕ ЗОМ Запатентавані піюбдютеюи їв ІФ - Дазаоюу Вид прощмчиивй ї Нидиш пектоння м я Я В іх о вектора р уто і Нноюд векторах туго я бю Стаздіх | | Стадія З ше о в Ин . а ше ен Бр М а аа Сн. 8 ХОСЕ ВВ. МКК м т ВК . З КК не в Феронн о е В шнн и е ей Ж се в В ЕТ В ОКХ о до си Сп С ч Я ще БК о Ма 7 о Ме дн Ех ки соВ о векторів ж с и І векторів КВ Ї Нанашти капелі ДАМУ І (е
Фвт.і о В МБ 55 5 ОВ В в в о о М с я ВЕН НН и о и МО о ПИТИ до А в ОВ М М и МН Ом Ме ор о и я МОМ ММ ня о ох з М М В ЗМ ММ В У М о ур з с ОО ОХ ВО МОМ МО ово КОНВЕВ ОО ОО КН М : о ОО В В КО КК о Ми ОО : М М о ОО ОО У ОО М ра ПО М ОО В В о ВК в о о В я ОХ Ме НК В МО В У ОО в В ОВ ХОМ ОО М М М а Оу НК В КХ ОО В ОО МИ ОВО в В мим ОМ М о НН "ХО В КО МО в М он ши а ОО ММ М М ОХ БИОДНО НК М ОО НК В Х М М ММ в В ПО в ОК я М ОМ БВ М п ВМ о ММ М ОХ о ОХ ЕОМ ЗО МО М ОО о МО М УВО ОО УП ОО
Фіг. М
Ін Б Б Сен ил ЕН о, а Я М МЕДОМ ША: ГИЛИИШ МІ п 0: пи СИ ШО ТК АВАКОВ ших о ІМ, ин З га я ТТЛ М и о НН. ПИ МІЕМ МІПТЕАККАНКНЕХ МИ КІАНМ пи ЧЕТ дер вно о і: о Т.О ЕЛ ЖИТТІ ТІНИ ЕНН Ей НІНО ІК КО М ли я ПОЗІ ЛИ І ИМО ПИЛИ ЛИХ у ПЕД ДВ ІД КВК МТК я МИТІ ЛІЛІЇ МЕЖ СІШЕ ТИ ОПТ УТ ОККО о ЗЛИЛИ ТИЛ, ПН ШИ ПИТ ї Ом ши ПИ МОМ ТУТ, Степ ПЕ ПИШИ ОК З ОПТИКИ ЖХ я шо ІП ТЛ ОТТО У ТТИТИ То ДЖЕ, ПДТУ М ПИ у ЛІК І ТИПИ ДИ,
ПП. шо о ВХ ПІШЛЄМЛТІТО ІЛ ЕТИКИ ШИ и ПИ ИЕЕТ ЖИТ МУКИ СК Ід МІК пд Та а Кі Пешинм мІ ПИІЕІИ ІИИТИН МІ ДНІ З В НН о НН Кен в Ми МЛМ ВЕ ІМ ШІОІШЕ ТВ й С п с пиОдит ИЙ пт ДИбю ЗК. ня ди т ЖЕО ПК и МОВАМ, шу о ООН о ПК СО п б. а М ко а Б с В С о : я 5 я Ес і . і нн. МЕ ОО ще о Мн ще па с ПММ КК Ки ЕЕ, пев о о Мо ОВ КОХ ще ОХ ПА ВО ТО СБК е кі. ОК и ОК вх У о МК о Ов ти ЕД Пе БО ще ЕЕ ЗИ о КК ОВО ЕН В СОЯ ПМК КН ЗК о ХК і ВВ МАО Кон сн я ТЕ АН 3 ОО, я ПН Ко По о я п В МО ООН Я СНО Ех ПСЕПОЄН. НІКИ 5 о с о ОМшИто а ОМ М ВИ ; і с їх х КО ВК КН НН - я о о п Х ОК о. ПЕК : еВ 0 ДН Ми ВІ ОККО ДУ У ж КИ ОО ПК КО а в в ОК я У я У В ши я о ЗД ОК СО ОО й МЕ 5 ОК МОХ КО ПК а й МО Я о ею КО З Я А А С У о ПЕН ОЛИНКиИ ре ек ву Же лень -3 ту що ДОчяе акотне ОБ 0 ЗЕ ВотНе НЖЯ мотев 7 ет рі я т т ; ре сїе Ас дя :лдоМмікдА т. ГТЕЕНКОВТ ВА хорі БАНК ПКОК мети БОС АСАНТ ТК МА мотив СЯ ТАКТ УКАА Яотив ВХ ЕААЕМ КАВИ рожа с . ех хо ст ШІ ЦАЮТУКЬОТАетна ВО химера ААУЧІАКУЯ В зт КЕ
Фр. ЗВ Фр.
я. ЯА Щ Ві В ВХ ОО о
В. с шо ОО УК М, РМ о МКК. М с КК ОК Б с ОХ ОО КОМ : о КО ЗОВ пк с с КЕКВ ОО З о о ї с о Ох ЗК о. сх п Ох о - с: с Я КК с о жк о п - 0: п и МАК о КК ОО шен ОК, о. й п ОК ОБО ОВ о по КЕ п ї с хо о п ще соч ВОВК і Ух - Ж ее в я ДЕК ще -- ВН ТОК шо ? . ПАК КК ОО Сх м а В ЗО ОК о КК БЕ Й де п о ОО М КК КВ МО ОК ОО ОО КО КК ЕК ; їі о. ОК КК ОКОМ С ККУ ЗАКО В ж (- Ох З ЕК оо ЕКО Ще с і що шо ТЕЖ
4 хе щ хе вх КАТІ кавретивовеЕонисокосвеннсвкгеввкВЕВоКоВВа ак назвах неиосІаиоІКОонисиКеОЕрЕЕгАВЕВКВоО ев ВлЕсеІРеньЕВнЬоВеІвВКививосвоККАВОвиоВ В а кави виовесіІвкикакІКкеиаКаои ме к.ДТциІжрвеКововниквукІнВаА ові: АХ клЕчУвиЕвомЕкЕ-УсЕсьиВЕвовМЕиЕВи Ви ЕКВВІННОІ В АЖ каапсхрІпввивинвІвсІвиновокваврЕВнКЕЕВОоохоВКИ ат вваисжхвЕЗовивІввІВКнВовиведгКвЕВ КО КОТ Віх АЖ ваазсотоКгикковесвсКиинаькосВккаВовоКОою КК нави гриоисниІвІнЕниквовокиизЗоВОвиХх Асі вакрсзквоновсзи:івосвениооноЕкиА ВОВК Ве ТЕ їй х- ще як чхпьиввохкзееекнсійкохвУкавАБатиВвЕВУВоВвКЕ Аж Всьо рЮТЕТЕСВЕНСЬОСКСКкВУВЕанваавКвЕВоКЕВиОВИО за ЕЛ ьТБЕСІУКХІ:СсСЕаВОоОБОсВсЕвІЗКАВвАанвиНнОоКАХВОоОвКвЕ змі ом ВЕВІКТвивоВемоихеВикІвнвАвоиниКА ВО ваїї виїжетихвТВогомМовизсвевЕавесанвивіІваиоьЕ АК вовки оокаЕвснАсевинОоК ВОК ке вЕшБІсЕнІКІвеОарасвиксивУнаАсВвЕадЕвЕноВАиВвЕ аж Все пРОТЕЖЕОБЕМІВОКОВЕчВАВрАВАьНИНИКА ХВО ща воски веожКжроВинавохсквунааваааьЕиТя А У ТЬХ зачи; вЗьеевохЕжно ЕМО Вега авьививиа я век ще М ЖІ: ВЕ вах: ВвивирІвихаВВАОЗЕВКОКХВеКОоВстЕКсвнВнВАУКОеВ ВК ЗА впонхеІскЕнцнсаккОовлькевситсовриваткоакКн о ща ашвочзЕТЬЕКВНАЗаРОВХООВоІЗЗООсЬВаАУВОВЕВВІЬ «аж даси вЕхИКаАвАВРОВКВОоВОВІавесВоиАКВОВЕНКІ ат хопкЕвІскІВаАпВивОоснЕВВЕвксаеКвовоиКЕВ БЖ Іс: жуки окекІоигиЕсаноекаЕокЕЕВО Ка хемЕкЕтиКЕПНАВЕІЦЕКЬсСКИпЕКеОВоКАКВЕККЕКЕ ха вант ІннаоІнрОкЗВОоВеговсавиаВвУжсаЕкВи В хви всвивукІннайвкрЕОокисоЕОтеЕКасивИВАтКОвАККиЕ В ДМ «вен ІЮкуКкИикАКЕисЕНьЕКовЕсиивииУкиа кине кажи вазах вЕхвнкввІковвровиакзачивааМоакиМ ' ІЖ; я в ОО зажі ЖРОсБУКВсдЕзаРоКнрУвокво- вро сіситевивХ «м: жВЕестЕВрУкТАвСсКЕВсТВВІВУ ЕВОВОоВсТЕЕАОвОВА а ЕВ: ЕшЛдАКтАВсЖКсатпОопвОо ков ЕВВСсУЄКЕСКОКА зак крос ртЕваажтввахКваковво- Кави нення вх АХ ЕКС» КОоВсЕтсККнЕОІКвОо шини сІвККиКеХ КАБ ЕврРОБеУрЕВвактавтивіврЕЕКиКиВ В --- шви ща пек УВЕсаКарРсЕКВврокОКр-Щ КРОКІВ ІВХВЕСОВВ за шко тввакЕкеУВрисовВвововеввІсЕкаовОо ВХ аж шк еаІакСАКвУвИВЕшЕІЕЕОВиА «їв жор иУКЕиАакАвиккВижвіговавВа іно Вх ЯчгоЗ
КД де шив у ВАХ ек м ше і. му ВЖЕ кал тиа ветуввевУвтв ї кація ЖЕ х Би Ваши з: ЗУки ве татетва я ї и КІ а У ус в ЕТ 5 хакі я кишок тині касети : щи вЕВЕЕ кОм КоКя ЕЕ У ВЕ що хна ше гтивавее ами ЕЕ ПТК ЖЕ Й МОЖ У ОКОМ КО ЗУ о ще ме чтк о ВЕ пк жк дк «еп в: БОКАХ КЕ мишу АКИВУЕ я ЕК звЕВЖВЕВ ооо вав -твашВ вна дже лю ШК ян ВК Бей ЕХ "МІК Ох й. їх екОВ Неї ки гих ОКА ва жив овал ЗРТКО ВУХ М вешЕтнанися тет нин пише Вейн в - кави Ж КЕЗиКИХУ кат ТЕЯКТ я» мес ВЕК ами А кВ : БУ; ЖЕ. Еко пиво Баш ОК міх ях виВКжаня в ккЕрЕке: В. у в В Б хх М У З ми кі пес типеких пера ПЕ ВН с якВЕжЕе зтивак зоре БЕК А зо ВЕ В БОЮ як виш нЕе піжкютх дк; ОК ух ШО Аля ОВК МК ЖК поживи мем Е РАВ ваше Аи я але ХК еое друк ЛІ Б.-І КК АМа ше ХК ТУ дях ЦЯ ВУЖ ВК КК ай их З ше «жів АВК МА В ВІ ща жа ва ех вн Е віршу ЗСЖ оз п як в ПЕК Менше нава х МК пив АЕ щи ААУ ння ВЖЕ А - БИК, КАТ О сиг жу код нор ту БОЖЕ : ї ВЖ «ЕЕ щЗ КАКК ЕВ АКК М ан ККа Ева иВиВ 7 ня ВАВ я МВ я,
У. Види с ЩЕ ПЛЯМА зай хЕнаря зеавочиВхниВ х те КРОВИ УЮ хи аЕвимни а "иа Ії УКХ ї ВВА МУ я : сі ке жк ее р. соте АЖ км. КБ М МІВ ВЕвЕТЕ СЕ м вла венавчннске зве меИВ ВЕБ Ав як зов венах » як висевиле ще ОО а Є МЕТИ ТАКЕ до хе геВНОеМЕ спини мевитЕтевтвея я за ААТ-КЛЕЙ вІвлеввит нг песе Ів п аа НЕ стик ОМ ВХ ОХОКЕ ДКОМИ Кох Ж хе. КИ Кл лМ АХ КЕ ; так же пока ТКОМ Ж ХВОЯ КМУ Мп вет вк дк шрОШТНя павгивжоване и ковоовьовяо її тотетнАК Ко вик пива нвинимЕя ЗВЕТІЕТЕТ на ка вве темах плих «МЕ ета що їх вид: ПРЕ ти МВ ЕВ я ї пк виш В хи хе А тет вк ккнасимЕнАй субтатовевсратеновиу» зЕлЕваняЬЕ : хви вав тек ме рн ен вижене тв им, я врнатинЕо, вису ШОВ Ера УМ Ка жим жи КОНЯ ЕК УТЕВ кт їв
ЖК . МК КЕ ВВІВ КК КОЖ ДО лах о ша І ДК ОМА зу ок МОДА В. о т АХ Миша щі ВУАН ИВ інт ВВЕ А жу ТЕМИ кзавпвисЕвх ОН Б ТНСУВМ лНХ З тІБТЕТНАт км вЕнапчнЕЗ питание ВОМУ ШОКУ ТВ Ів? клхх ЖЖ ДК УЖ КМ ІЕЕ кажи отвои Ук Ії тЕтвтка я зара вахо де вожьавнУ т певна ші - ВЕ ши хе ТЕТКт КА ВАЖЕ ЕМ й мий ВЕЖ МК КК не що же зош жи в і й ше ВЖЕ вки і ва- дво її й ха ажМиМХ дія тому ї їх ме і воннЕ КВ кр - ОКУ. ЖАХ БУ кути о я ЯК тик й - ВВ ВІВ ПІСтТЕНОХІВиКИ м з т ВЕЖ Ж кою о шив ОАМОЖЕМАОАОСУ з ЕЖ б лх т УМ тЖЕщЕї Іво иа Еш мих КЕ МИ УМ ишВ зи -иваниБих де рие и ЕЕ ЕК В, ще дже ІБК ще малМЕНЕУЕЕ в ЕЕ РЕЕТЕС У Км ЖОВ Ди А НТК таня хна пек мимакня " иа ТВЕН ЕК Мо ЖЕ ХЕ кож МК Я Канни Я мишки сх тУВуБИТне їх до ХО МЕ ак х села І БОКИ, в сх кю 5 ІТ кЕкен пет шах де «робити М ГЕ ме тттнко тк ек оди ве БИБнЕшяє вита ТРЕКИ вувикІОУКИ СЕК в ен ВВІВ ВЕ жи ж зар тт міжкОІВЕх ОМ шик Как ЕЕ шити Ж жити. ВА вт АКА МК дтнатКий ха ЕТ УЖЕ ВВ тиви твтвяє угогнатЕ з дУУЕ теУикилух хе ше ек сира тат енакнся сх ин жар МО КЕІМ Ех ТРЕТІ ВЕБЕК се вх тек МБО Іван ЖЕ осв вжтЕеХ пре чеки же такої й ЕЕ дО ЯМ в: п МЕ ов СМ их. Вл с шЕ ОМ шо мах си тХ ханів ЕВ МЕ еко тришипЕ паКнся кишки ВВ виш икАЕ КОТІВ ЕВ ЖЕ ве Енея падежу НЕ РАся пи : ОКО ж ЖЕК я шию Є ТЕХ В вих х п ин неви шЕЖижСлЕНинЕВ демії скксва : що " ЖЕ КН ВЖК ЖсВЕ ЖЖ А ВЕ ЖЕ зУтКвиЕЕ ее - "лек з сввіних дих пад чехи ДАЖЕ кУвишЕ З МЕМБОВБКК зи шо кара поли ших стат пвиЕОЕКОКи пі вдуза жи мл вій Х шешнихЕ цк кю де ка ВВ Ес цях ж ОЖОВюО М ВЕК КІ КОКО МАЕ ткани тикханакиЕкЕк по ХеЕКІВКЕ шви неотт: жах пк ЖИ КЕ ЕМВ м охкх ак дже сів ТІЇ дух «явив Еш ща лю жна Ватт хх сек пезвьинеВ ВУ ЖеМ ек Коня хи хк5 ВЕвЕпВЕОК «жива АЖЕ КЕЖЕІТ ЕМ сват о ярі свокеІЖхУни В й как г ВАК ТІ и Ку МАУ шими ЕЕКБЖжВЕВЖЇ Іжа КВ біси я Ме її СЕЧА НУВЕТаНІя З ак м ЕШЖШ ТЕМИ дк кеш чзевБаеиаЕаих горе Ж Ве кети Я х шим Ал пАСАКО СА МОУ АХ МКК ке як В ВА шт. ЖОВ ЗА Ж пщшеии В. пиши ке ке таввомсовеїиВ ин «тож иУ тов ті й ЕВВОКОХОІЙ поети я Те ее о, я таких. пиши УнЕХ Ів БЕМІТЯН 1 зкоза ВЕБВ шпик я КО ЕКЕКХ о увктте отих ж зе У вв щи; ЖЕКи КЕ коту хв ше НВ Ох сих ЕК У мк кою А аю ВАВ т шт уж ВУтонЕкЕ ЕН НЯ Мп Вищим жк ки МО аг. давження щу Б ще МЕ ; їх с зкуї дЕнрОИВеоКаВЕВТоврІсТЬОАВОссОВВЕВАВУРНІВЕ ще вЕнКВЕТОСтУВВОЕВІсЕВІСвоАВОосссЕВЕВАвВЕВнУВО зе вині татсауктвсихЗветІсвдиасьоавоЕвЕнНови за: БЕБІ ЕІзУсУЕатвевзаврхТКкаакОопсоввЕрЕОВЕВВиВе -о дЕшеЕтткЕКОоУваВснвасеиьивеива Вико зе ЕЕнСстТаРУОМЕВВВОХОаБКТУОоКОотЕССВЕВКЕВТЕТвКО МАУС. ВКЕНЕТЕТУОУЕВКОЕОБКІУБЕВВНОВСЬКРЕРАВУЕНІВО зу? аЕнЕжВТІсиварІВХОБНисТвІАНООсСЬВВЕВАВЕВІВО -У: вив тІотТвтнннтитеоавеоревевОУМмІво ках ВищІТЕІВТОоУХТвІаВвВ Інна сівеуввВинІво ЗУ ВЕН ТЕТІСОУБТОВЕЕХОСРЕІТЕСВНОССЬЕРЕВАВУЕМ ІВ сх яв о 348 В дАУХ тсжхріеви--шов-озагсоваскуськІТВвВОнБЕОнВвТЕ важ зи ЕВЕВ- - Ви: - осока сову Зам етос твитТвесоговкав сьо тини за товки хе ТЕВ ВСЕ ВнЕвиХ ВЕ тихими АЕС КвоонЕВоКиКвИХ АХ таке ее есвих;аЕсвихикОноивиВВ да хо н-ВеЗ оБуУлиВарЕсЕаХувРвоОвои ач Оо г хау же жевжее- -с ве зо аваетеоехввисноатавивсева ваті жати - пай епУсанвитс,иУревокии таке В о « я хо: ФфРЕБІвВрЕнЕВІВнІОовсовьаниВІВОТЬІТЬОоВ-ВТВИКО зскза лЕШЖВУБІНВвЕтАНаЕОоЗсиВЕМивЬІВОТЬЕУЮВИ Та «аж фЕВроІврасвЗанвсвьиінивоІвохеи вав товенв Кк «тки свахакванівІввонвіІвозьавва вва мае ЕЕ ренкхакАВВОВсЕВІанВЕТВОотУВЕатМВиДн Я айв жену рКихВтА нави Тьни оо хво: жиру ВЕнанІВвНносзІвоВЕнитТьЬІвОвІТЬАиоваВвО за: ТтЕВШтУвЕНсВЕУВНоОоВКиВьаВВВІВОВІ КОКО еВ ваз шжшнУкТнЗихвВаЗвОВьиВІ НОВЕ ТІ юне ка ВЕВОоУ фев станини Іва вІиико ще
ХЕ. Б ОКХ ХЕ зе вового ьвове сови ТЕО» каже: вшТтаАтЇТЕУТІКИиИКІцКаЕвЕКВЕСВОоВви косо КтаноМЕ ЗАУЕ жом схе ВВЕ КЕВАСснЕанЕжЕВИввівнсвтовиВ ва з ВжичЕВЕвБІВсрРАСВЯсСОоВвиВВоВевитЕвовикЕТивава ме: випав вовІосеватниаводканько ство ВОЮ зх ВизОзгствОсвиитнансавиВвва ВІВ В я мое спиштоссМЕшвохоравнсасахиковорствооии ато жи. Ззіпродовження)
ВІ ще МІХ ШЕ КА ст--ЩВЕЖВЕТВВСсАВКВВИВИКІІВНО ТАМ ВЕВК о «ек» сАККІВЕВОВОВоВвИиВКаАКпОоВвЕЕ ЗУ ««"«МЕйЕеветваАскІнснсВповенеокАНАШЕКОВЕВЕЕ ЯКІВ --«е«МЕВЕКЕВТтВАнЕНУКОоКваАБУкесраАанинКнВЕВКЕ Зкща хІБЕтТОВНІЗБІКІВІНОВОпОВЕиЗВБІБОвІхаАТАНВАБВАКя АХ сне"««АЕОТШЕЕАТІХЕМЕВЕШВОВДЕХОЖрІОВНОнтТННВьОоОВОяЕ КАЖЕ се «ВЕЕВЕЖВІсв КЕН МсКЕІВвтІКрИІАНАВЕКОИВЕВКЕ АЖ х«х«ЩВЕВЕВИтТадтЕВЕМодКЕвУвлУвнАнКвОВВАХУХ Аяжй ««е«ЩВИВВЕТанКВстЕТНЕМОоВВІВМОсІнКЕиВККОВСКВВ ЖАВ о --«ЩиВЕтТаВІсАКтНьНоВовУнрІ вана Екон Е що Бо ж ке вах увеноскіг скВнаоваа тав - виМмІКВХЕВІВАТВИА аа жваве -Щововавтави- ВЕ МІТтИВЕІВ ВВЕ В, Ж жено зеІК сЕКИТТІВОВАКЬ ВнУКІГТОКЕКВІВТТВВиА.
УЖ вБЕМНеноІт скит иа ВВІВ КВУ й -«-вВишеІгастЕ сни -твІТТа ЕВ А В ВХ закЕжхтмікиЕ Иван тивинмрІТІВІВТеи ВВ че кре УНЕК-ЦсКЕАСАЗНВАБ ВНУКІВ ВЕУ ЗЕ ЕВІЕВОФбЕІК- Ева - ЕВУБНІНВЕБІВВМНВКВ ка жкаВоІвіКк-сконававдвх ВВІВШИ ав весасавІК-скаптсВииТив - пу, ЛУ вет нЕ- сова саВнгоу- УМОВІ Рих
Ж дих ЖЕ: Кл БЯ ам жвоатвечанноьспавтаоеивсвсссвовснзовивУ ква леї тео ксевовнаноетУвввІвса коники КУ хво; тЕнкив ета огІнеУоиВниВиеО ее зЕЕтТОотТуУуВьсиВвЕТтИвКсрУВннсваешнувоВна КВ ке? твеесіІстахВБОоВвантавІЗоиМисиоенУковнивО ке Еш вІсВвИНвоОсонакото гово нуУвиВА ВВ яку сЕОХЩСТтАВнЕОовАВтТСРвІ КВУ ВООсаАКВОНІКОоМВИжКЬИ
У Ех о ХХ вк звІНнНоЕЗВизВоВЕсВаВоМоВЕВоЕнВВеоі ТЕН ВВУВІВ Ж шЕтЕВКІВЦВОСВЕНРВЕРЕОоВвОсБКНРВРОІКІНЕТЕТЮАВ кед вінка ктІрЕтВИІВЕВВаВЬКкссВиьІвЕВшіІВіІВвтВе Ка «ке вБЕІКаКІВВЗОВСсСЕВКНРАрьнсквиноВрсІКІКВВУрвАВ 53 шЕІКАЖхІЗНтТВСКЕНВВВиьІсшЕуврЕнВНЕВОоХКІВВтиквА В ще йжІКАКІВНКтІАКЛЕНКаВУМІстоаЮЕВЕЕБЕМоІКННЯВИВИВ кк-Щ- ВІ ВАКІККТВвоВеВВИВовОосЕсВИІВВВвОоІВНІвиВАВ акт ЧшвІБАКІВВВоВИВІВсхІвовВсвоезІІКВВЕТВВВ ее: авіІБЕАХІВНІТОВСсЕВИиВиИВьКЗвинькиВвБоавевіІЖКВТВВАВ ме БЕІШшЗЕХЕВрсИиКЕВвЕВоксИвОоВЕвІависІвІКиавАВ БУВР ун ВЕТНЕВУКВОМоВВОЕВВВУИІВІВНІВУ ВВ пошу Фчрг. 5 (продовження)
Я прю пух Кя ЖИЖ С Ів
МОХ. ХХ 7 : щ Ко с к. солуж я гу т де ІктвОгІГОВЕТООХВУвІіІЕнНЕоОКЕКЕВЖКВНВВИУ в вва щит ХОМ МОАА ОЖОК У В ЗО ЕХ ДО Я ЕЕ сх п ТЕДДОНА ТЕКТИ пов ТЕКИ зеЕКЕКеВНЕ УКВ о фряж шум и ие ВХ ДЕ ЖУ де КВ КО КИ Ух ДА с еж зак: вві чеВЕВЕЮ ЖК вЕВжтТІкЗвигваВІВО УТ я ВК ТЕВЕНЕЕЕАКЕНА СЕ: : с вх. вкаже Еш аж : Я вит КЕ Ки Кк» шк и МЖК КОЖ ЖЕК Е ЖКХ 7 о "жЖІшЕВЕсОКЕВаАКВЕМИК : з вик ІРТКЕтТссУУшІЕВЕІСОККЕВІаКкВЕнВЕ ку врЕстрЕнитВииК их СЕУхЕКА КИМ ак КК Кі ся пе вже стю тактів сіІВВАкВИиКоиУ км гас вУчсвіІто ат Уві іохЕВа ин ша ЕВ ВИК КК Ж КУ КК Кв КН ШКО ЩА Ж Б Ох А ех я . що Башта тетуваокутоуатев УКХ і яко ІВИЕЛИСоУникІВИТОВОоОСТуЄВнВЕОЕЕкаКВВВВ ках ЕК М Ж ХО КУ КВ І я Мк ой жовч ти ж МО ЕК Ск З МЕ ше Мох же А зж Ж М Кб Ж я й оон дае СХ вт ш КУ : «ро жі секр Ех доки очи ня З ВЕ втийкЕаВКЕ Ток Овик ЕК ВОВКК ; вк вв ,ВКІТИУВТСОСВУКІВНКБСКиВОКЕНИКЕ дО ТВЕН ЕКОщІКІТОТВУОоВЕІВМЕ ВЕ ? аА веЕттЕКаВКОниКІТОВа ГО скл в оЕ МА й У я со КЕ «чувиетесвівнинакВ шиї ХХ - кому в ше зими дж БО ЖОВ ШК и КК К Х МКК ЗТ У Ек А ВІК ВХ З З ми: везатниЗкімовІтитаоо "КАЖИВЕ: МА БЕЕл ММК У й зтвсктшнвивкикиквими я З шжтЕвсвЕоАиЕТсВВТсОУ ниви МАЙ ВЕУ те МУК ОХ БОС :. чо 0 Ж ПЕЖОкиХ ХО Ж ЖЕ ТУЖОтЯ ка те вк нати с Ж да МІУ Ку ДВК Теж ія хоусек ми имя до Ж Сея СЕТИ АКХАНУВИТСЕНБЕИТЕВВоІеВЕЬІ ї. пої МКК СК ОК «ЕК в Ко КЕ в В ЯК Ж ТУ ЕОМ, КЕКВ ЕМ В ВК ВВ ВЕ ВК з ХУ ОТТО УМОВЕУЄТНсУУвЕсВВІЄТЕУСТЕКЕ МАКИ ЗЕ а шк У У їх: | : : пиві МКРе зи ШК ВО КО квіжх ке лує спи пил чек зветажих ж шток ча же а ск щи ЗУ. Ка ЕЕ В ВЕСТ т У ЩЕ ОХ ЖЕК х ї : Кая шити ; Кх пт кт ВАХ НК ОМ ХХ шечвтспичовве ву ря Що її є ; с шт у п м уж вх КАМ ЕК ТЕ Ж с г є у. квУувсдвкечвиииВЕКЕ ЕЕ В КВ и прквамх е а МЕС Ж ові мае М КК Ж А я ОКО МО Б З ; ЖАХ сив ма ОКХ сх Вт шроти я м 5 ЕЕ лек як їх пек ТУТ В кр птн, жк чЕВТЕВІВБсЕВсиАКиКЕИВАХ СТБ ТНЕВ ВУХ Мк ех їх УКХ зов шешиеКе вив Зк : пери тсшеатнеге ви е я пути воше дива Ї
МК. МЕ ВХ М ю їх кни кія мое Уа аж Вел кл М ДК В Ки ; я пута чУуптІЗиниЗиЕВКрІстиОеТив КЕ МЕЖ КО М ХК МК АХ ХК ЩЕ ; : се о дет ОТТЕНРЕКОТО? пПЕДТОВІОпУУВЕВВІЙТВ ТВ ВХ ку ЕК КО ТК ЕХ ПОВИ МОСК Ж КОЖ КОЖ УК, шк шок ще. МИ х і З й Мо й ї ав яри ій я ОВ я Но и З Я Ох не ХІТ ІІКУККУВНАУМТІКВЕКВІ ЕВ АВЕЯ кдд чпЕвЩшИВІсКАНКвКАВКХ З по й ша КУ М ЖЖ се й жде св зу зх ти слу ЗЕВЕ вт зе т же х т; х : хи дев У о МО ОК Б ЗК КО Е оба ай і я УМ М Я Кк В же МЕ кв жах ср шт шорт М КЕ х ех хв а ЖЕК ОК КК Ще КЕ І ще МОВО ОВ КВ МЕЖ ЗУЦЕ ЕТ ЕЧУБЕАТЕСКЕВВЕ. З УКХ Кк М я З
Фіг. З (продовження) ост ЕСЕВОАРІ - ЧЕН сднитукюка || Метеювретке жАже панни кх санкттаКогк ЯК . Ул І УЖ р дм ло пенні) З звохих МЕТО пн Що МО МО НО ОО ОО В пох МО с а о. М
В . . А п с а І ее о ОК ВИКО У в ш м я ПО ОО ОХ «к МЕ М В в В КУ М я ПО КО 5. вх шк ЗОМ В -к С МО ОО УК М др жо ще ВИОВаНВНОМННЯ Ен Є косою о КОКО Во век ОО ВЯ тн х МБО ОКО ко ооо ВО Ох ОО ВЕБ п НО ож . ек Ох М В с ях и М У ОА Сх ПО М о МАМО ОХ КК п. ок п з І с ТК Ох о о ООН ОО ЗА М ОО на Я МН М с пої 8: а Ми В ОО М Китеь ВВЕ ЖИМ кн оо Ми М В ла б ня не шпор ЕЕ Моне степ В я ММ М ОКО в в о й. в о и В а ВО МО и КК У ши По ОН ж п і о 5. и. . с. я ВО В ОВ КК ОО. п о оо ТО МО я о а ЕК НВ СК, ОК ща ох 0 п я шо ОО Ма М Я не о В Й ЕК ОО ВО я ск Мо ВО М о РН й ! нериннивнни фен білки онов ея Ж ; ОМ у и су ЗАКО лек ее хи ик ех од ше ке ОМ МО М ВИК щ КВ я 5 Зх а КОКО ВКЕ ООН, КН ох М о А о що. най. п с я ей З АХ те ОО БІВ Ми не ох я ши вв
5. БМ ом Ох зав нм М в Он в ВВ ПДМ в зжио а 0. о В В я Му ВК А ОКХ І МО БО а МО п и В я : о и о о я Б о В МИ А МО Я ня мя те 5 ЕВ ші ня КО В Я с І шлязнінкУу «кляті Час після знфікування: 5 днів «ріг. КА
(- х, х х о ї х АК ик т юки : В дк У ння Й ідтикттко - : Т жи си х ши . Ган пої й ий Шин» ї -- Во : шо як пе ВАХ до еренкаях ях К я г. : МИМО со м 7 7 7 Я йо МН ТТедх и В пен ко ще . З х й с их х я іа Гнат В питому дн ВХ. : одне живіт КТ соди ВАМ? ту ї ХХ Алл КТК ТТ Кох их уктідю ж УК Ж иТ ут . . чо зо а... 500 2500 в пео Середнє значення Ж ЗМ Дясстеронні ї-тести "ред три. ОВ Ст ОБО От і ж БО РЕЖ У діт ЖІ БЕ ак С Кум вв НЯНИ НН : МЕ іх п ПКП ЕТ і Ж і ! в і Ж Н нини: СЯ і 5 і І З | СЕ дека пек одє сти мае єеметкмечисткктємижиє 11131141 3 ОКО . . гелккнкнкоклтнннкнектнн Зілляхі Кляйн с о їм би мА о ідо А ЗВ гай щкй жд МО ж овБб БО шо во ЗО БОЮ БО МЕ іоодеоажя дя зад свод овтид аеро лах пишна, СЕ В ЕЕ МЕ ша ПКТ ЕЕ тт тити АЙ як паж кт и вк в вк уп нн нан ПК Ве в даррнив ана ков ек есе кевнення емо нн п в р о я РОКИ о вн п о іа З ВН МЕ о нон оо в ВОК о оо ШИН оон ОХ ШО ев зв РІДКІ КН ЕК ж фе в Витримка (експозншя) Зб секунд
Фік.аЄ Кількісна озпнка інтенсивності смуги Ж ї ях І де їх : З : щ- ЖК ОЗ ї ш 5 : ж : С се ТЯ : ня с : ЖІ Ж: 5 5 . я 5 : З км щю шо В не ще ЩО ХМК ЯНА ЖІ доме Ж ХВ ХК МО В : : БАМИ ВОВА ИМЕНИ, каса ВАМ ХАТЯКНТе ВАТА МС шибтинх ен У ши миня пеня еко буженини Витримка (екопозиція) 9 секунд
Фк.
шою х зх я уж День о вАЖІ ААЖУ 000 ААУ? | Аезовтове зАВКТІМКОг» | затнюрутах ; М Т і Май, т щу ВЗ 35 ВС НВ ОК и и М и М Се ХО : и М м В ШУ Пон ї ОО ВО ММ ОМ В Й й Ж ЛИ КИ Мр МО М ВИНИК Не нн Он М и и о ВИН НН М ОН М МО В МИ В: ОКО МВ ОН ва З о ПОХО О Вино кон КО Е. нен ВО ОВ у и ен УВК ння В МОН М Во Ко то Я я З я в Мао ОН І М ОО ИН В. З ВО СН ВМО ЗОБУ ОХ мех НН 2 ВМО нення М З НЕ аНиввнннаея о ШИН В В по ВО ПИ Вени о о о ВМО В СН МЕН МОМ А ВИМ МН: ЧИННА уодопеоввасаподовтевав репсоовановдесвовчиня: Знов мо М КиМУ КИ ВИМОВИ ВВВЕВЯ о Во ННЯ ох М щ у ХО ІОВ Он ОВ МС о ЗК Я ОК НН Я о Ко Ко хх п я з Вин МНН МО М т В ОХ я Ви ОО с ВО и В щ ке КБ о я МИ В ВИД У МК В МОЄ КО оо Пе х МВ МОВО ЗО. Вино ох ОО Мая МИХ. БИ 5 МОХ Кк ОКУ он руно нини Ме ови и Винна СОДИ поки. Ву в вве ООН ОО М Ос НН ОО Но МОВО ВО и С В ЗНО п Я ах ОК о КОХ По них ШКО Дон ОК Кр нее Б ВОК Ж ВВ КК нео Ко СО ОН і в о В Ах пок ПО я М М и НН М ОО Кк с МКК они М Не С ОО и та о уАКО ОБЖ ВК М В НН о З БО УКОХ х о я ВО ПО я ПЕД МАКОх ЗХ я УЧ Ме ще СН Фіг БЕ же ОЗШХ КИ ХУ Е Ку тів й КЕ МТА ІВ КУК х Ії х З Е ї кон ЕН ; сх Ї сш 5) ААУ їх МОВА 0 ААМЕО 00 Аа 00 ВАХ ме; ї їх Я 8. ха ХЕ ї те У Е ОК про АКЯО ХиМеря ІОН М В ОО МН МО и М ОО о Не ОО МО І М АН ВМ І М. 5 УНН М МОМ НІ ММ ОО Х МО 5 ЗБ КО В ОО Ох В В А МА ОКО ОКО ІЕЕ ОМ о Е.О: о МНН я В МОМ КО ЗОВ ЗОМ ОО М І ММ М ОХ МО и СОМ ММ М КХ ОХ ОН МОБ ВОВК Ох а А ОН Б. ОКХ Не КК ОК М и ВО СИ ХК НК ше о КК с ооо нена МОВ МО ВК КК ВОВНИ ДОВ ро ово орое о оовкеков ОО ОО ВО ВО В МО ВА пк Уа МОХ ЗОНУ їх о ОВК ВМ. ХК ВМО ХОМ ОХ: ОКО ОКО М МО М: ше и МО ІМ МО В В КН У ЗО А ОО ОК МО КО ОК МОХ ОО МО В НН Ж ОК ВИК М ОВ. хз У Ох ЗО МО ОХ ЩІ Ве КО Ан ВЕ ДИКЕ т В МО о В М ОО З Я и КОХ ОА МОМ М МО о Уж ша КО В А КК ОО ОК ВО І ОМ М М І М М С: ЕК МОН ОН, В М КК І КК КН КО п Ме З ОО о я я СОЮ НО о М Ко Ов А М ВН и І УМХ охо ооомовнио ККД о ОМ В ОБ и МОЯ Б ВОМ Со Кс г ПУ КК З М Мед У ЗИ КОМ МОХ ЗК МО УКХ ХХ МБО ОК с ОО 5 о. 5 ОМ ЗОМ ВО КО СИ ши и М В М М В В о ХМ ОМ ОХ МАКИ а я с и 3 0. вим МО ОК МОМ НАМ У КУ СКЗ ЗЕ. Як Ж о: ОО х КА МК ОО ше У о - НЕ о о Ох пе МО НЯ М І МАМО МО ВК В ОО В ОП НВ ОКО І ВП М Я о ХУ Я ММ М МІ ОО КО ОО ОО ОО и М М ОКХ М ЗМ ОК КО ВХ пий нн НАННЯ нн теку кухт сттуйк кт - тяжі Часпіспя інфікування: боднів на т:
т. ЗА
ЖЕ КЯ Ж З важка д : се ЖХинора -ї о ш о « їх ЕЕ: ЩЕ (ак: 1. Шк о КЕ ке ТЯ во : й це ТЕО я : : . в ання ще ан Ж дах Во шення» й нн піни годи лінк МЕКА ТИМ дитинки дян дення Ше Коло мет ек КК Тк ВЖИ пеї МОВ . ід Середнє значення Ж З Двосторонні Т-тести ФфіроОтВ;
щу Вількісна сНнКа ву Ж : інІгенснимОот гМАТЕ та е о 7 у -о ТЕХ «з СХ Б -- Ще ; ТБ Ки ут . Я: і Об ення істубулно жо : КОКО ково или вені 5 : КИШЕНЯ ОЛЯ КО ПНПИ ИН ВШ в 8. й 7 т. ОХ о піти ттииииии тити ти тини ти тиитинииї оно ПП М ПИ р в ЕВ ах Ех б ов як -- Кк : ки КОНІ п ї- ві о кт а ст : У : вон ЕСКР ЩЕ : З лит тю : : ч : МмОогазов | іх ше Мухи ТК "жду ку кине . шк ФС АДУМАКУЄ да носій хи ї ЕСЕВ Фі: ї тех Ядро! ЗАВ. І ВАША я шо с ПО ОХ шен 1000 ЕН а ох ВИН Ні ЗВ оВво вва вів оо в ВО Но и он АН не. 5-5 Мф о " ПТИППШИИЦИ КК АОЛИКНИ ШИ ТЕ о В Є Ма МК: ПИБОНО ВАНН кома МО ак В: М о оо я ОН У що ОК ОО а " МЕ ОО КУ нн ПК нн о : я М оте Міозня, важкий ланцюг МНОМААМЕСЕРЮАРІ г. 1 є: -Ж-656.- 6.7.7... З... ТІЙ Й... ЙЙЗЦШВЮНШЦЮТНЮНЮНТЯЗЇ ОО дАхХ : вах І ІКМЖНЗІНАСКТО | ОАМХТІМКВЕ УТ АБМШКААМУЄ ХИМеВВ. МН МО Є шої Меню ВИМ С вв воОе и о ШИ в и я з-д МН я Нв ОН М М и іо На а З ши нн кн Й Н В і и не о З ВИН НН и М КО НИ ша 5 ВИЯВ повно вен меню само Пес ВС Все ов Б ОО с с п и о и М. с М В и п нн в і о в ПО ВИЯВ Я Вин о Я ОНКО ОО ким но вис см писк кн о а Ми в Нх м а а нн а ОВО І Не ее в В в НН В о М Ко КО З я Он ши соя о о нн и ОО Ек М в НН о Мен и ня вен М ож У МАННА МАЯ Частеля інфікування: 7 днів вн. А
- и ш в їх ОО: пн 7 Ж : « : « якої ; ї с ; БО ння птн плоти пн ІК ВВАТ РВК ОА УТ Ж Ме ДИ пану КЕНЕ ПАУУХ 3 : Ше ї ден є е я на її жи хм ЯК но , до «НЯ під ня . а ве ит ШО ОД зе» Пий нини дня с КУБ АКУХ, тиморе метшх ї М ин х : т ся зу ї и ША пня пед мене» Ріанни нання
До . ел . хи г кох де ва ве щоб пе мс Ех де . сп СереднеЕ значення жк «Кв ет ев, Двосторонні ї-тести ват ва Фіг В Дт птн тт тт ! КОНКУ ХТТА ВЕН МН І М М МО п М М ОО Ох МО ОХ МО М и М М В І М М В Я Ве НН М М ММ М Ми ВАМ М М А М І ВОМ І СМ ВОМ ООН ОО МН І І М ВО и и В и Мои М М В ВОМ КН В В ОХ Мо ОХ і БАНЕРНА ВЕ. ! рен ооо Сов ТВ ПоСООО ВО В ВОВК 3 ше и я М М М М ВОМ М ВО М В Мн М и МО М М ОХ ши Мом Во и М ВО ОО и КО пе в пл А А А АЛ А АЛЛА Ат А АААААллллллллллллллля ! ЗДУ. ДАУВ Б Б В о ПО ВО п ВО МОМ ОХ В ОХ ВО ОО В МО У ОО Чиагоєо ша КІ дх мг КВУ ВААНООГНМАР ни ТЕ пай М зн Я зн в зам ск кока 11 геераіювя ких ' к - Н дач? | ЗАНЕНИМ ВАМ 01 КАНКТЕНКОВ УМ | ААУВІААУ химора ! ОН Он М и М В По М В В и Ом о Со МО и ВОНО ОО и ен с ВОМ І ОКХ п в У ПО и ОК Кн М НОМ ОО оо су КН МО и ОН Мн ММ І М М М М МІ МО М ММ І МО М І ММ І М М М и БО / г ОО ОХ ЗОВ МУ ВО ОО п с ох о В МОМ и МОМ В МОМ ОХ НН М ОН ВО І МО М МН ОО М, М У У 3 о ВО МОМ ОХ па Во не я КК В ВК с ВОМ МО ПО м КО п МОМ ПН НОМ МНЕ НН МОМ ВУ Часпюля зніфікування: б дв Що Кай ких
Фк. ЗА у ин щ в Ж г ши шо Вк : 5 - КАщЕ з . їх м. . і я у ЩО М БК й : : 5 : ВУ ох : з Ох й МЖК. ; МАМУ 500003 «ВХ ї й й « її ко чи - се ШО ще Я вяй : чи пе Середнє значення КО ДЛвосторонні Е-тестн "в«005 зір. ЯН Е ! т : в і в з, : жк т. 5 а : Ук КІМ : тк ВУЄ Фо і1ЗА
Ж ! у ! Б че ж . щоФ : м д : Би ши ї їх є х ЕЕ : «о ; С : пе ох є соооо ЕНЄ - зни я . ях . : то Б Я їх Ж, Бя : й 5 че т я 8. ї тя ня хх. : їду т 2, : щ З моя ке ре т : дл їх жк у щк їх : че ія 7 Б 5 Ж : х ту тв їх х а, : ху ся ноя Ку ря хе : Б Я я ла : жен, . шк оАЄХ Фі/їЗв Експресія лишиферззи (у живих тваринах! 14 днів лнсля введення 25 шінвлистя введення МОХ ОХ: ХЕ ОО Ки Сх ч МКК Я Тир де а о т ЗО в І МО щу и І щ Ох ОО сок ех щ я ВО А с ПО Ж ж х ВОМ ОО ЩО ОМ ОО я М М УКХ ОО А ММ М В як її о. с. п о ОО дику МВ ВАХ : ЛК І ХМК В:
І. ОК М Я 5. о в пок » о о КО в Поу Н У БО КЕ КІМ ОН У ВО ОХ пи З о ни в п о пе оди Кддхх кінний
Фе. НА т -х м, г. г. х гі Вова с ай «Поциферязний експеримент у певних тканинах і - : ї : : в ОКО ОО Е КОХ ОМ - о о п - ОКО ОО ВО «г С о о ді МЕ ЗО СО й о. о Б З МО В о я ЗОМ ОКХ З ОХ т КО МОХ ВО ОО ох ПОЖКООХ КО о. МО ОО ОО ККУ ОО ХО В КК УМХ ох ОХ МАМО ОХ Я сатті: Під Чотирнголевнії Сердце Авкфрагма - М'яз
Фи. ІВ
Проксимальна бівнсія - паонеречний переріз о и М В о З о о с о с НЕ КО ОХ ж х УКХ З с ПК КОХ М ЕХ 55 ОО хх ОО о в ОК З КО. ПО а 5 МК ПН ОН ККХОКК їх КИ ТЕ ще о я ЖИ З КО ще КН п ЗХ КУ ОО ХУ ХВ а ох с о КО ПИСК М МО ж КК Х ї пи в ве КЕ | о МО ! и 5 а ох о 5 о о СО КО А А Пе З 5 ЗО 0 Ох З вс о 0 В . ХХ о. а и у КН В Б В ОХ а 5 п. ж п М і І У ЩЕ КО НО ПИПІНИТНИМНИ ИН КИ НИ АК Кр ОККО М їх МОКОКОО в Я с с ПЕНІ НК и ОО о хх МКК Х МЕ ши с и с ПІД в в ПО о СОС а я С. с Пе в в с І ПЕ А ОК В МК ПКУ ОН п те ОВ ши : мн нн
Фіг. 17А Днетальна біопсія - позловжнів зріз є с о с ПО о ОО Я що с п . ПН КО о. ОО КЕ М ОО с ОВ З с ОО Ме 5 и с о і С МО . :
С у. В о ОА с с З г З о ХО М о х ; в г . с с с шШИШ о ї о ОКХ М М и и М п ОК М и Я є 0 о. с с с Ми Он с о о. шо нн
Фи.БІВ
UAA202002445A 2017-09-20 2018-09-19 Капсид аденоасоційованого вірусу і спосіб його застосування UA127455C2 (uk)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762560901P 2017-09-20 2017-09-20
PCT/US2018/051812 WO2019060454A2 (en) 2017-09-20 2018-09-19 CAPSID VARIANT ADENO-ASSOCIATED VIRUSES AND METHODS OF USE

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA127455C2 true UA127455C2 (uk) 2023-08-30

Family

ID=65810888

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA202002445A UA127455C2 (uk) 2017-09-20 2018-09-19 Капсид аденоасоційованого вірусу і спосіб його застосування

Country Status (25)

Country Link
US (4) US11118192B2 (uk)
EP (2) EP3684423B1 (uk)
JP (1) JP6825167B2 (uk)
KR (2) KR20200052333A (uk)
CN (1) CN111836649A (uk)
AU (1) AU2018337833B2 (uk)
BR (1) BR112020005436B1 (uk)
CA (1) CA3076348A1 (uk)
CL (1) CL2020000728A1 (uk)
CO (1) CO2020004738A2 (uk)
CR (1) CR20200165A (uk)
DK (1) DK3684423T3 (uk)
ES (1) ES2948902T3 (uk)
FI (1) FI3684423T3 (uk)
IL (1) IL273261A (uk)
MX (1) MX2020003176A (uk)
NZ (1) NZ763018A (uk)
PE (1) PE20201264A1 (uk)
PH (1) PH12020550094A1 (uk)
PT (1) PT3684423T (uk)
RU (1) RU2770922C2 (uk)
SG (1) SG11202002276VA (uk)
UA (1) UA127455C2 (uk)
WO (1) WO2019060454A2 (uk)
ZA (1) ZA202001679B (uk)

Families Citing this family (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3635009A1 (en) 2017-06-07 2020-04-15 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for internalizing enzymes
UA127455C2 (uk) * 2017-09-20 2023-08-30 4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк. Капсид аденоасоційованого вірусу і спосіб його застосування
EP4219695A3 (en) 2017-11-27 2024-01-17 4D Molecular Therapeutics Inc. Adeno-associated virus variant capsids and use for inhibiting angiogenesis
CA3111076A1 (en) 2018-08-30 2020-03-05 Tenaya Therapeutics, Inc. Cardiac cell reprogramming with myocardin and ascl1
AU2019346447A1 (en) 2018-09-26 2021-04-29 California Institute Of Technology Adeno-associated virus compositions for targeted gene therapy
US20220184232A1 (en) * 2019-03-25 2022-06-16 The Regents Of The University Of California Methods of treating tnni3-mediated cardiomyopathy
CN114450411A (zh) * 2019-04-01 2022-05-06 特纳亚治疗股份有限公司 具有工程化衣壳的腺相关病毒
US20230137971A1 (en) 2019-07-11 2023-05-04 Tenaya Therapeutics Inc. Cardiac cell reprogramming with micrornas and other factors
AU2020369570A1 (en) * 2019-10-23 2022-05-12 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Compositions for DRG-specific reduction of transgene expression
WO2021102234A1 (en) * 2019-11-22 2021-05-27 The Children's Hospital Of Philadelphia Adeno-associated viral vector variants
AU2021218411A1 (en) 2020-02-13 2022-10-06 Tenaya Therapeutics, Inc. Gene therapy vectors for treating heart disease
AU2021251845A1 (en) * 2020-04-08 2022-11-24 University Of Utah Research Foundation Methods for rehabilitating heart failure using gene therapy
EP4103211A4 (en) 2020-04-27 2023-08-23 4D Molecular Therapeutics Inc. CODON OPTIMIZED GLA GENES AND USES THEREOF
US11900272B2 (en) 2020-05-13 2024-02-13 Factset Research System Inc. Method and system for mapping labels in standardized tables using machine learning
KR20230022175A (ko) 2020-05-13 2023-02-14 보이저 테라퓨틱스, 인크. Aav 캡시드의 향성 방향변경
EP4149519A4 (en) * 2020-05-14 2024-06-12 Univ Pennsylvania COMPOSITIONS FOR THE TREATMENT OF POMPE DISEASE
WO2022006058A1 (en) * 2020-06-30 2022-01-06 Children's National Medical Center Use of recombinant human acid sphingomyelinase to improve skeletal myofiber repair
US20230313186A1 (en) * 2020-07-24 2023-10-05 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Trophin genome editing for treating duchenne muscular dystrophy (dmd)
CN113717248B (zh) * 2020-09-30 2022-07-08 广州派真生物技术有限公司 腺相关病毒突变体及其应用
US11781156B2 (en) 2020-10-09 2023-10-10 Tenaya Therapeutics, Inc. Plakophillin-2 gene therapy methods and compositions
AU2021378270A1 (en) * 2020-11-10 2023-06-15 Avirmax Biopharma Inc. Engineered viral capsids and methods of use
CN112725342B (zh) * 2021-02-02 2024-05-17 中国科学院深圳先进技术研究院 一种启动子pCALM2及其应用
US20230062110A1 (en) * 2021-03-26 2023-03-02 Adverum Biotechnologies, Inc. Intravitreal dosing for delivery of polynucleotides to retinal cones
EP4322974A2 (en) * 2021-04-13 2024-02-21 Capsida, Inc. Adeno-associated virus compositions having increased brain enrichment
CN113121653B (zh) * 2021-04-19 2021-11-19 上海信致医药科技有限公司 肌肉和视网膜特异性的新型腺相关病毒衣壳蛋白
EP4347621A1 (en) * 2021-06-03 2024-04-10 Dyno Therapeutics, Inc. Capsid variants and methods of using the same
CN113480615B (zh) * 2021-07-30 2022-05-31 上海信致医药科技有限公司 高视网膜亲和性的新型腺相关病毒衣壳蛋白及其应用
WO2023005906A1 (zh) * 2021-07-30 2023-02-02 上海信致医药科技有限公司 新型腺相关病毒血清型介导的血管生成抑制剂及其应用
WO2023028567A2 (en) * 2021-08-25 2023-03-02 Canbridge Pharmaceuticals, Inc. Aav particles comprising a liver-tropic capsid protein and acid alpha-glucosidase (gaa) and their use to treat pompe disease
WO2023108157A1 (en) * 2021-12-10 2023-06-15 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Methods and compositions for treating mybpc3 related hypertrophic cardiomyopathy with a viral vector
WO2023172873A2 (en) * 2022-03-07 2023-09-14 4D Molecular Therapeutics Inc. Adeno-associated virus variant capsids with improved lung tropism and uses thereof
WO2023200742A2 (en) * 2022-04-11 2023-10-19 Tenaya Therapeutics, Inc. Capsids for plakophillin-2 gene therapy
WO2024054864A1 (en) 2022-09-06 2024-03-14 Tenaya Therapeutics, Inc. Cardioprotective heart disease therapies
WO2024073735A2 (en) * 2022-09-30 2024-04-04 University Of Massachusetts Oligonucleotides targeting s6k1
CN115960177B (zh) * 2022-10-09 2023-07-07 广州派真生物技术有限公司 腺相关病毒突变体及其应用
CN115838399B (zh) * 2022-12-08 2023-08-11 广州派真生物技术有限公司 腺相关病毒突变体及其应用
CN116041443B (zh) * 2022-12-30 2023-09-22 广州派真生物技术有限公司 腺相关病毒突变体及其应用

Family Cites Families (93)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030215422A1 (en) 1996-09-11 2003-11-20 John A. Chiorini Aav4 vector and uses thereof
US6156303A (en) 1997-06-11 2000-12-05 University Of Washington Adeno-associated virus (AAV) isolates and AAV vectors derived therefrom
US7323179B2 (en) 1997-12-19 2008-01-29 Naomi Balaban Methods and compositions for the treatment and prevention of Staphylococcus and other bacterial infections
US6506559B1 (en) 1997-12-23 2003-01-14 Carnegie Institute Of Washington Genetic inhibition by double-stranded RNA
ATE402254T1 (de) 1998-05-28 2008-08-15 Us Gov Health & Human Serv Aav5 vektoren und deren verwendung
US6984517B1 (en) 1998-05-28 2006-01-10 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services AAV5 vector and uses thereof
US6759237B1 (en) 1998-11-05 2004-07-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Adeno-associated virus serotype 1 nucleic acid sequences, vectors and host cells containing same
JP4573437B2 (ja) 1998-11-05 2010-11-04 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア アデノ随伴ウイルス血清型１核酸配列、ベクターおよび同一物を含有する宿主細胞
WO2000028004A1 (en) 1998-11-10 2000-05-18 The University Of North Carolina At Chapel Hill Virus vectors and methods of making and administering the same
DE19956568A1 (de) 1999-01-30 2000-08-17 Roland Kreutzer Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens
CA2386270A1 (en) 1999-10-15 2001-04-26 University Of Massachusetts Rna interference pathway genes as tools for targeted genetic interference
EP2345742B1 (en) 2000-03-30 2014-06-11 The Whitehead Institute for Biomedical Research RNA sequence-specific mediators of RNA interference
AU2001264862B2 (en) 2000-05-23 2006-03-30 University Of Rochester Method of producing herpes simplex virus amplicons, resulting amplicons, and their use
ATE513910T1 (de) 2000-05-30 2011-07-15 Johnson & Johnson Res Pty Ltd Methoden zur gensuppression mithilfe von rnai verstärkenden faktoren
CN1311081C (zh) 2000-08-19 2007-04-18 爱克斯澳迪亚有限公司 干细胞分化
WO2002029858A2 (en) 2000-09-29 2002-04-11 Infineon Technologies North America Corp. Deep trench etching method to reduce/eliminate formation of black silicon
US6962815B2 (en) 2001-01-05 2005-11-08 Children's Hopital Inc. AAV2 vectors and methods
US7749492B2 (en) 2001-01-05 2010-07-06 Nationwide Children's Hospital, Inc. AAV vectors and methods
WO2003042361A2 (en) 2001-11-09 2003-05-22 Government Of The United States Of America, Department Of Health And Human Services Production of adeno-associated virus in insect cells
NZ600121A (en) 2001-11-13 2013-12-20 Univ Pennsylvania A method of detecting and/or identifying adeno-associated virus (aav) sequences and isolating novel sequences identified thereby
AU2002360291A1 (en) 2001-12-17 2003-06-30 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Adeno-associated virus (aav) serotype 8 sequences
AU2002359284A1 (en) 2001-12-17 2003-06-30 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Adeno-associated virus (aav) serotype 9 sequences, vectors containing same, and uses therefor
WO2003054197A2 (en) 2001-12-21 2003-07-03 Medigene Ag A library of modified structural genes or capsid modified particles useful for the identification of viral clones with desired cell tropism
AU2003253595A1 (en) 2002-04-05 2003-11-03 The Children's Hospital Of Philadelphia Methods for the production of chimeric adeno-associated virus (aav) vectors, compositions of chimeric aav vectors, and methods of use thereof
US20060292117A1 (en) 2002-04-17 2006-12-28 Loiler Scott A Improved rAAv vectors
NZ561656A (en) 2002-05-01 2009-03-31 Univ Florida Improved rAAV expression systems for genetic modification of specific capsid proteins
US20040023390A1 (en) 2002-08-05 2004-02-05 Davidson Beverly L. SiRNA-mediated gene silencing with viral vectors
AU2003265855A1 (en) 2002-08-28 2004-03-19 University Of Florida Modified aav
WO2004083441A2 (en) * 2003-03-19 2004-09-30 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Random peptide library displayed on aav vectors
US7186522B2 (en) 2003-03-31 2007-03-06 Cytyc Corporation Papanicolau staining process
WO2004106360A2 (en) 2003-05-23 2004-12-09 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Viral vectors with improved properties
EP1486567A1 (en) 2003-06-11 2004-12-15 Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts Improved adeno-associated virus (AAV) vector for gene therapy
US8071028B2 (en) 2003-06-12 2011-12-06 Abbott Diabetes Care Inc. Method and apparatus for providing power management in data communication systems
PL1633772T3 (pl) 2003-06-19 2016-10-31 Wiriony AAV o zmniejszonej immunoreaktywności i ich zastosowanie
US9233131B2 (en) * 2003-06-30 2016-01-12 The Regents Of The University Of California Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof
US9441244B2 (en) 2003-06-30 2016-09-13 The Regents Of The University Of California Mutant adeno-associated virus virions and methods of use thereof
JP5054975B2 (ja) 2003-09-30 2012-10-24 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア アデノ随伴ウイルス（ａａｖ）の同源系統群、配列、それらを含有するベクターおよびそれらの用途
EP2149583B1 (en) 2004-09-24 2015-10-28 Novartis AG Modified VP1-capsid protein of parvovirus B19
AU2005316476A1 (en) 2004-12-15 2006-06-22 University Of Florida Research Foundation, Inc. Chimeric vectors
JP5702519B2 (ja) 2005-04-07 2015-04-15 ザ・トラステイーズ・オブ・ザ・ユニバーシテイ・オブ・ペンシルベニア Ａａｖベクターの機能を上げる方法
WO2006119432A2 (en) 2005-04-29 2006-11-09 The Government Of The U.S.A., As Rep. By The Sec., Dept. Of Health & Human Services Isolation, cloning and characterization of new adeno-associated virus (aav) serotypes
EP2311967B1 (en) 2005-10-20 2017-09-20 UniQure IP B.V. Improved AAV vectors produced in insect cells
US7867484B2 (en) 2006-01-27 2011-01-11 University Of North Carolina At Chapel Hill Heparin and heparan sulfate binding chimeric vectors
WO2007120542A2 (en) 2006-03-30 2007-10-25 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Aav capsid library and aav capsid proteins
US20090317417A1 (en) 2006-04-28 2009-12-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Modified AAV Vectors Having Reduced Capsid Immunogenicity and Use Thereof
WO2008124015A1 (en) 2007-04-09 2008-10-16 The Regents Of The University Of California Methods for purifying adeno-associated virus virions
EP3492596A1 (en) 2007-04-09 2019-06-05 University of Florida Research Foundation, Inc. Raav vector compositions having tyrosine-modified capsid proteins and methods for use
EP2158211B1 (en) 2007-05-31 2016-08-10 Medigene AG Mutated structural protein of a parvovirus
EP2012122A1 (en) 2007-07-06 2009-01-07 Medigene AG Mutated parvovirus structural proteins as vaccines
EP3121190A1 (en) 2007-07-14 2017-01-25 University of Iowa Research Foundation Methods and compositions for treating brain diseases
US20090215879A1 (en) 2008-02-26 2009-08-27 University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for adeno-associated virus (aav) with hi loop mutations
US8632764B2 (en) 2008-04-30 2014-01-21 University Of North Carolina At Chapel Hill Directed evolution and in vivo panning of virus vectors
US20110171262A1 (en) 2008-06-17 2011-07-14 Andrew Christian Bakker Parvoviral capsid with incorporated gly-ala repeat region
JP2010002479A (ja) 2008-06-18 2010-01-07 Crossfor:Kk メガネレンズ用装飾体およびメガネ用装飾体装着具
EP2342567A1 (en) 2008-09-19 2011-07-13 Charité Universitätsmedizin Berlin Identification and characterisation of recombinant viral gene therapy vectors
WO2010093784A2 (en) 2009-02-11 2010-08-19 The University Of North Carolina At Chapel Hill Modified virus vectors and methods of making and using the same
WO2010138263A2 (en) 2009-05-28 2010-12-02 University Of Massachusetts Novel aav 's and uses thereof
WO2010141706A1 (en) 2009-06-03 2010-12-09 Cedars-Sinai Medical Center Effective vector platform for gene transfer and gene therapy
WO2011038187A1 (en) 2009-09-25 2011-03-31 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Controlled adeno-associated virus (aav) diversification and libraries prepared therefrom
US8299295B2 (en) 2009-10-15 2012-10-30 Johnson Matthey Public Limited Company Polymorphs of bromfenac sodium and methods for preparing bromfenac sodium polymorphs
US8263396B2 (en) 2010-04-01 2012-09-11 Weidong Xiao Methods and compositions for the production of recombinant virus vectors
EP2826860B1 (en) 2010-04-23 2018-08-22 University of Massachusetts CNS targeting AAV vectors and methods of use thereof
US8628966B2 (en) 2010-04-30 2014-01-14 City Of Hope CD34-derived recombinant adeno-associated vectors for stem cell transduction and systemic therapeutic gene transfer
US8927514B2 (en) 2010-04-30 2015-01-06 City Of Hope Recombinant adeno-associated vectors for targeted treatment
CA2798988C (en) 2010-05-17 2020-03-10 Sangamo Biosciences, Inc. Tal-effector (tale) dna-binding polypeptides and uses thereof
US8663624B2 (en) 2010-10-06 2014-03-04 The Regents Of The University Of California Adeno-associated virus virions with variant capsid and methods of use thereof
WO2012064960A2 (en) 2010-11-10 2012-05-18 Fred Hutchinson Cancer Research Center Compositions and methods for generating adeno-associated viral vectors with undetectable capsid gene contamination
CA2826273C (en) 2011-02-10 2021-11-02 The University Of North Carolina At Chapel Hill Viral vectors with modified transduction profiles and methods of making and using the same
CA2827375C (en) 2011-02-14 2022-07-19 The Children's Hospital Of Philadelphia Improved aav8 vector with enhanced functional activity and methods of use thereof
ES2724800T3 (es) 2011-02-17 2019-09-16 Univ Pennsylvania Composiciones y métodos para alterar la especificidad de tejido y mejorar la transferencia génica mediada por AAV9
RS60207B1 (sr) * 2011-04-22 2020-06-30 Univ California Adeno-povezani virioni virusa sa varijantama kapsida i postupci za njihovu primenu
US9169299B2 (en) 2011-08-24 2015-10-27 The Board Of Trustees Of The Leleand Stanford Junior University AAV capsid proteins for nucleic acid transfer
WO2013096955A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Case Western Reserve University Targeted gene modification using hybrid recombinant adeno-associated virus
ES2752191T3 (es) 2012-02-17 2020-04-03 Childrens Hospital Philadelphia Composiciones y métodos con vectores de AAV para la transferencia de genes a células, órganos y tejidos
IN2014DN08812A (uk) 2012-04-18 2015-05-22 Philadelphia Children Hospital
EP2660325A3 (en) 2012-05-02 2014-02-12 Christian Medical College AAV vectors and corresponding nucleotide sequences and methods
US9677088B2 (en) 2012-05-09 2017-06-13 Oregon Health & Science University Adeno associated virus plasmids and vectors
WO2013174760A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Deutsches Krebsforschungszentrum Optimized aav-vectors for high transduction rates in dendritic cells
EP2692731A1 (en) 2012-07-31 2014-02-05 Paul-Ehrlich-Institut Bundesamt für Sera und Impfstoffe Recombinant Adeno-Associated virus (AAV) vector particles displaying high-affinity ligands for cell-type specific gene delivery
WO2014052789A1 (en) * 2012-09-28 2014-04-03 The University Of North Carolina At Chapel Hill Aav vectors targeted to oligodendrocytes
US9938541B2 (en) 2012-12-25 2018-04-10 Takara Bio Inc. AAV variant
EP2954051B1 (en) 2013-02-08 2019-03-27 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Modified aav8 capsid for gene transfer for retinal therapies
WO2014160092A1 (en) 2013-03-13 2014-10-02 The Children's Hospital Of Philadelphia Adeno-associated virus vectors and methods of use thereof
US11136557B2 (en) 2013-05-31 2021-10-05 The Regents Of The University Of California Adeno-associated virus variants and methods of use thereof
EP3062884B1 (en) 2013-10-29 2020-12-02 President and Fellows of Harvard College Compositions for use in the treatment of retinitis pigmentosa
SG10201810150UA (en) 2014-03-17 2018-12-28 Adverum Biotechnologies Inc Compositions and methods for enhanced gene expression in cone cells
AU2016226289B2 (en) 2015-03-02 2021-04-29 Adverum Biotechnologies, Inc. Compositions and methods for intravitreal delivery of polynucleotides to retinal cones
ES2860712T3 (es) 2015-03-24 2021-10-05 Univ California Variantes de virus adenoasociados y métodos de uso de las mismas
WO2017096164A1 (en) * 2015-12-02 2017-06-08 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Novel recombinant adeno-associated virus capsids with enhanced human skeletal muscle tropism
CN109476707B (zh) * 2016-05-13 2022-12-02 4D分子治疗有限公司 腺相关病毒变体衣壳和其使用方法
JP7071332B2 (ja) * 2016-07-29 2022-05-18 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 変異カプシドを有するアデノ随伴ウイルスビリオン及びその使用方法
UA127455C2 (uk) 2017-09-20 2023-08-30 4Д Молекьюлар Терапьютикс Інк. Капсид аденоасоційованого вірусу і спосіб його застосування
EP4103211A4 (en) * 2020-04-27 2023-08-23 4D Molecular Therapeutics Inc. CODON OPTIMIZED GLA GENES AND USES THEREOF

Also Published As

Publication number Publication date
RU2020113681A3 (uk) 2022-04-04
US11118192B2 (en) 2021-09-14
FI3684423T3 (fi) 2023-06-15
WO2019060454A3 (en) 2019-05-09
CR20200165A (es) 2020-06-05
WO2019060454A2 (en) 2019-03-28
SG11202002276VA (en) 2020-04-29
KR20200052333A (ko) 2020-05-14
US20200248205A1 (en) 2020-08-06
US11613766B2 (en) 2023-03-28
PE20201264A1 (es) 2020-11-19
JP2020537508A (ja) 2020-12-24
US20230279435A1 (en) 2023-09-07
ZA202001679B (en) 2021-07-28
NZ763018A (en) 2023-02-24
PT3684423T (pt) 2023-06-09
EP4218828A2 (en) 2023-08-02
CL2020000728A1 (es) 2020-07-31
EP3684423A4 (en) 2021-06-30
EP3684423A2 (en) 2020-07-29
ES2948902T3 (es) 2023-09-21
RU2020113681A (ru) 2021-10-20
AU2018337833A1 (en) 2020-04-16
AU2018337833B2 (en) 2020-06-25
KR20220070075A (ko) 2022-05-27
PH12020550094A1 (en) 2020-09-14
RU2770922C2 (ru) 2022-04-25
EP3684423B1 (en) 2023-03-29
CN111836649A (zh) 2020-10-27
IL273261A (en) 2020-04-30
US20220251145A1 (en) 2022-08-11
BR112020005436A2 (pt) 2020-09-24
JP6825167B2 (ja) 2021-02-03
DK3684423T3 (da) 2023-06-12
EP4218828A3 (en) 2023-09-27
BR112020005436B1 (pt) 2022-08-02
CO2020004738A2 (es) 2020-05-05
US20210380643A1 (en) 2021-12-09
US11840704B2 (en) 2023-12-12
CA3076348A1 (en) 2019-03-28
MX2020003176A (es) 2020-08-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA127455C2 (uk) Капсид аденоасоційованого вірусу і спосіб його застосування
US20230263910A1 (en) Aav vectors targeted to the central nervous system
US9670507B2 (en) Directed evolution and in vivo panning of virus vectors
UA127831C2 (uk) Капсид аденоасоційованого вірусу та його застосування для інгібування ангіогенезу
EP4114941A2 (en) Improved methods and compositions for modulating a genome
EP3403675B1 (en) Adeno-associated virus virion for use in treatment of epilepsy
Blazeski et al. Engineered heart slice model of arrhythmogenic cardiomyopathy using plakophilin-2 mutant myocytes
Orbanz et al. Generation of recombinant European bat lyssavirus type 1 and inter-genotypic compatibility of lyssavirus genotype 1 and 5 antigenome promoters
WO2023231778A1 (zh) 用于治疗粘多糖贮积症iiia型的转基因表达盒
KR20200141435A (ko) 망막 질환 치료를 위한 조성물 및 방법
Mita et al. Amino acid at position 95 of the matrix protein is a cytopathic determinant of rabies virus
WO2023283571A1 (en) Methods and compositions for diagnosis and treatment of metabolic disorders
US20230024301A1 (en) Treatment of diseases caused by frame shift mutations
JP2022513618A (ja) 血液脳関門の標的化に有用な組成物および方法
US20230126157A1 (en) Mirna-485 inhibitor for gene upregulation
US20240093202A1 (en) Suppression-Replacement Gene Therapy
US20230074198A1 (en) Viral vector particle based on AA V2 for gene therapy
TW202229321A (zh) 核酸構築體、病毒載體及病毒顆粒
Bilal Cardiac Chamber-Specific Promoters Enhance Tissue and Cell-Type Selectivity of AAV9-Mediated Transgene Expression in the Heart
CA3197316A1 (en) Neurod1 and dlx2 vector
Blyth Function of Interferon Inducible Transmembrane Proteins (IFITMs) in the White Pekin Duck