TWI724542B - 基於硫酸化玻尿酸之水凝膠及含彼之藥學組成物 - Google Patents

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Abstract

本發明係關於基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其係藉由交聯包括選自由其中玻尿酸之一些醇羥基(alcoholic hydroxyl group)經硫酸根取代之硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之至少一者的交聯單體與交聯劑而形成。

Description

基於硫酸化玻尿酸之水凝膠及含彼之藥學組成物
本發明係關於基於硫酸化玻尿酸之水凝膠及含彼之藥學組成物。
玻尿酸為具有相當高黏彈性質之多醣分子。玻尿酸存在於關節腔作為滑液的基本組分，於其中發揮潤滑及吸震劑的作用，且保護軟骨細胞免受發炎細胞激素影響(Asari等人，Arch Histol Cytol, 1995, 58:65-76；Brun等人，Osteoarthr Cartil, 2003, 11:208-16；Stove等人，J Orthop Res, 2002, 20:551-5)。玻尿酸本身或其衍生物形式長久以來已作為「黏液補充劑(viscosupplement)」或潤滑劑用以治療退化性骨關節炎。
硫酸化玻尿酸及其衍生物以其抗發炎、抗VEGF功效聞名。然而，為使用硫酸化玻尿酸作為具有實際功效之藥物，其應具有於體內之高殘留率以及適於該用途的物理性質。先前已知之硫酸化玻尿酸聚合物溶液的缺點為：其於體內迅速降解且不容易根據用途控制其物理性質。
因此，需要研發展現抗發炎及抗VEGF功效且具有抗降解性，因此可於體內長時間維持其功效且可針對各用途控制物理性質的基於硫酸化玻尿酸之材料。
技術問題
本發明係提供用以延長硫酸化玻尿酸於體內之功效且控制其於各用途所需之物理性質的新穎基於硫酸化玻尿酸之水凝膠。
此外，本發明係提供含有該基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分之抗發炎或抗血管生成的藥學組成物。專利先前技術 WO2002-032407技術方案
本發明提供基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其係藉由交聯包括選自由其中玻尿酸之一些醇羥基經硫酸根取代之硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之至少一者的交聯單體與交聯劑而形成。
此外，本發明提供包括基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分之抗發炎或抗血管生成的藥學組成物。
此外，本發明提供用於預防或治療關節炎之藥學組成物、用於預防或治療眼部疾病之藥學組成物、或抗癌藥學組成物，該藥學組成物包括該基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分。有利效果
根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠具有抗發炎或抗血管生成功效，且可抑制其於體內之降解以使長時間維持抗發炎及抗血管生成功效，以及可容易控制針對其用途的凝膠物理性質。
根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可有效用作用於預防或治療關節炎、眼部疾病等等之劑、以及抗癌劑。
下文將更詳細說明本發明以助暸解本發明。說明及請求項中所使用之用語及用字不應解釋為限於一般或字典意義，而是應基於本發明人可適當界定用語的概念以最佳方式解釋其發明的原則，將該等用語及用字解釋為與本發明之技術觀念一致的意義及概念。
本發明提供基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，包括選自由硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之至少一者。本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠係藉由交聯包括選自由其中玻尿酸之一些醇羥基經硫酸根取代之硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之至少一者的交聯單體與交聯劑而形成。
習知硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽以其抗發炎、抗VEGF功效聞名，但包括該硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽之聚合物溶液等等具有缺點為：其於體內迅速降解且不容易根據用途控制其物理性質。因此，本發明提供基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其係藉由交聯包括選自由其中玻尿酸之一些醇羥基經硫酸根取代之硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之至少一者的交聯單體與交聯劑而形成，從而抑制硫酸化玻尿酸於體內降解，以延長其於體內之功效以及使能容易針對凝膠之用途來控制其物理性質。根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠具有抗發炎或抗血管生成功效以及可有效用作用於預防或治療關節炎、眼部疾病等等之藥劑、以及抗癌藥劑。
硫酸化玻尿酸意指玻尿酸之醇羥基中之至少一者經硫酸根取代，而硫酸化玻尿酸衍生物意指其他化學改質之硫酸化玻尿酸或經取代硫酸化玻尿酸。例如，硫酸化玻尿酸衍生物可由由下列所組成之群組中之一或多者組成：硫酸化玻尿酸-泊洛沙姆(poloxamer)衍生物、硫酸化玻尿酸-聚乙二醇衍生物、硫酸化玻尿酸-(CH2)n-CH3衍生物、硫酸化玻尿酸-苄基酯衍生物、硫酸化玻尿酸-聚葡萄胺糖衍生物、硫酸化玻尿酸-PLGA衍生物、硫酸化玻尿酸-明膠或硫酸化玻尿酸-膠原衍生物。硫酸化玻尿酸鹽可由下列所組成之群組中之一或多者組成：硫酸化玻尿酸鈉、硫酸化玻尿酸鈣、硫酸化玻尿酸鎂、硫酸化玻尿酸鋅、硫酸化玻尿酸鈷或硫酸化玻尿酸四丁基銨。或者，硫酸化玻尿酸可以，例如，下式表示：
[式]
Figure 02_image001
其中，R1 及R2 可各自獨立地為SO3H或H，且n為1或更大之整數。
選自由硫酸化玻尿酸、其衍生物、及鹽所組成之群組中之至少一者的重量平均分子量(Mw)可為800至5,000 kDa。更佳係，其可為1,000至4,000 kDa，又更佳係，為1,200至3,000 kDa。藉由使用在該重量平均分子量範圍內之硫酸化玻尿酸、其衍生物或鹽，可增強其與交聯劑之反應性以及水凝膠之製備容易度，以及可改善所製備之水凝膠的物理性質。
下文，為求方便，除非另外說明，否則用語「硫酸化玻尿酸」係指全部硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽。
慣用硫酸化玻尿酸中，參與交聯反應之-OH基係經硫酸根取代，因此難以採用使用硫酸化玻尿酸作為交聯單體的慣用方法形成基於硫酸化玻尿酸之水凝膠。
因此，本發明提供新的基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其係藉由交聯包括選自由藉由控制玻尿酸之醇羥基之硫酸根取代比所製備的硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之至少一者的交聯單體而形成。
玻尿酸總共具有四個-OH基，除一個主-OH基以外，包括三個次要-OH基。於硫酸根取代反應期間，反應性較高之主-OH基先經硫酸根取代，隨著反應進一步進行，次要-OH基可經硫酸根取代。玻尿酸之全部-OH基經硫酸根取代時，總取代比可為400%。本發明使用包括選自由其中玻尿酸之四個羥基中之一些經硫酸根取代的硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之至少一者的交聯單體；更具體而言，交聯單體可為其中玻尿酸之醇羥基的30至120%經硫酸根取代的硫酸化玻尿酸。此處，取代比為100%或更高之硫酸化玻尿酸可為其中反應性較高之主-OH基先經硫酸根取代然後次要-OH基亦經硫酸根取代者。由於主-OH基為高反應性且可及，於交聯期間其首先而且主要反應，因此主-OH基之硫酸根取代程度對交聯而言相當重要。三個其餘次要-OH基反應性較低，但這不意味著彼等不反應。即使硫酸根取代比大於100%，但硫酸化玻尿酸亦交聯形成水凝膠的情況可如下：1)(主要是主-OH基先經硫酸根取代，但)次要-OH基於一些未經硫酸根取代之主-OH基存在下經硫酸根取代的情況，或2)(雖然交聯期間次要-OH基之反應性較低)一些次要-OH基交聯之情況。
根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可使用其中一些(更佳係僅30至120%之)玻尿酸之醇羥基經硫酸根取代的硫酸化玻尿酸，即，部分硫酸化玻尿酸(HA)作為交聯單體。更佳係，根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可使用其中50至90%之玻尿酸之醇羥基經硫酸根取代的交聯單體。又更佳係，根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可使用其中60至80%之玻尿酸之醇羥基經硫酸根取代的交聯單體。藉由使用其中進行上述範圍之硫酸根取代之部分硫酸化玻尿酸作為交聯單體，可最大化硫酸化玻尿酸之抗發炎或抗血管生成功效，以及可良好地形成水凝膠及可增加於體內之滯留時間，以及可能控制物理性質以適合應用目的。
此處，所使用之交聯劑可為使用玻尿酸之-OH基形成交聯者。具體而言，為形成根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，交聯劑可為選自由例如下列所組成之群組：1,4-丁二醇二環氧丙基醚(BDDE)、聚(乙二醇)二環氧丙基醚、雙酚A二環氧丙基醚、甘油二環氧丙基醚、乙二醇二環氧丙基醚、聚(丙二醇)二環氧丙基醚、二乙烯碸、聚(乙二醇二硫醇)、桂皮酸、碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓及二碳二亞胺。最佳係可使用1,4-丁二醇二環氧丙基醚。
因此，根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠具有抗發炎或抗血管生成功效。此外，根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可藉由減緩於體內之降解速率而延長抗發炎或抗血管生成功效。因此，根據本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可有效用作預防或治療關節炎、眼部疾病、以及抗癌藥劑等等。
此外，本發明提供包括基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分之抗發炎或抗血管生成的藥學組成物。根據本發明之藥學組成物可用於預防或治療關節炎、眼部疾病、以及用於抗癌治療。
「藥學組成物」可包括本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠及其他化學組分，諸如稀釋劑、載劑等。因此，藥學組成物可視需要包括藥學上可接受之載劑、稀釋劑、賦形劑或其組合。藥學組成物有助於將化合物投予生物。存在用於投予化合物之各種不同且包括但不限於口服、注射、氣溶膠、非經腸及局部投予。
此外，本發明提供藉由投予作為活性成分之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠來預防或治療哺乳動物之關節炎之方法。此處，基於硫酸化玻尿酸之水凝膠較佳可呈注射製劑投予。就代表性實例而言，本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可用於治療骨關節炎或類風濕性關節炎、或其他發炎性關節炎，諸如痛風或焦磷酸鈣二水合物沉積症，或者其可用於減少或預防手術後可能形成之黏連。本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠特別可用於治療慢性或急性發炎。
此處，用語「治療」意指使出現疾病之症狀的對象之疾病進程停止、延緩或改善。用語「預防」意指使即使其未出現症狀但具有出現疾病之症狀風險的對象之疾病徵象停止、延緩或改善。
介紹下列實例為本領域具有通常知識者提供本文所提供的化合物、組成物及方法如何製造及評估之完整的揭示及敘述，且用意純為範例說明。因此，實施例絕無意限制本發明人認定其發明之範圍。有眾多反應條件之變化及組合，例如，可用以最佳化產品特性(諸如純度、產率等等)之組分濃度、所希望之溶劑、溶劑混合物、溫度、壓力及其他反應參數及條件。此等亦被視為在本申請案之範圍。除非另外說明或者與內容明確抵觸，否則上述要素之全部可能變化的任何組合包括在本發明內。
[ 製備例 1] -部分硫酸化玻尿酸(HA)之合成
將其中將TBA引入HA之HA-四丁基銨鹽(TBA)衍生物溶解於為有機溶劑之二甲基甲醯胺(DMF)，濃度為3 mg/mL。於其中添加為HA-TBA衍生物單體之10莫耳倍數的三氧化硫吡啶錯合物。然後於氮氣之下以5°C反應2小時之後，進行乙醇沉澱以產生經純化之硫酸化玻尿酸衍生物。
[ 製備例 2 至 6]
製備例2至6之硫酸化玻尿酸衍生物係以與製備例1相同方式，但分別添加為HA-TBA衍生物單體之10.3、10.3、10.6、15、及30莫耳倍數的三氧化硫吡啶錯合物而獲得。
[ 實驗例 1 ：部分 SHA 之取代比之測定 ]
製備例1至6中所製備之部分硫酸化玻尿酸(pSHA)及玻尿酸(HA)的硫酸根取代程度係經由1H NMR及元素分析測定。結果示於圖1及表1。
參考圖1之NMR資料，從圖1中之資料仍留有一些於3.4 ppm之峰的事實，發現製備例1中所製備之硫酸化玻尿酸(SHA)為其中一些主-OH基(即，玻尿酸之C6位點)經硫酸根取代的部分硫酸化HA。從元素分析，發現製備例1中所製備之部分硫酸化HA具有取代比為約44%，取代比為玻尿酸之氮與硫酸化硫之比。
亦以此方式測定製備例2至6之取代比，且結果示於下表1。
表1
   SHA取代比(%)
製備例1 44
製備例2 86
製備例3 98
製備例4 110
製備例5 141
製備例6 241
每玻尿酸單體之硫酸根取代程度可藉由硫酸根取代反應期間之三氧化硫吡啶錯合物的莫耳倍數控制。製備例1至3中，發現僅一些C6位點(為主-OH基之位點)經硫酸化。製備例4至6中，發現C6位點100%經取代，然後次要-OH基進一步經硫酸根取代，因此製備例4至6具有取代比分別為110%、141%、及241%。
實施例 1
將製備例1中所製備之部分硫酸化玻尿酸(pSHA)溶解於NaOH成20wt%，且於其中添加相對於硫酸化玻尿酸單體為5莫耳%之BDDE。反應係於30℃進行一夜以製備水凝膠。
實施例 2 至 4
以與實施例1相同方式，但部分硫酸化玻尿酸(pSHA)、反應溶液濃度、及交聯劑之含量改為如表2所示，而製備基於硫酸化玻尿酸之水凝膠。
表2
   硫酸根取代比(%) 反應溶液濃度(wt%) 交聯劑(莫耳%)
實施例1 44(製備例1) 20 5
實施例2 86(製備例2) 20 5
實施例3 98(製備例3) 20 3
實施例4 110(製備例4) 20 4
比較例 1 及 2
以與實施例1相同方式，但部分硫酸化玻尿酸(pSHA)、反應溶液濃度、及交聯劑之含量改為如表3所示，而製備基於硫酸化玻尿酸之水凝膠。
表3
   硫酸根取代比(%) 反應溶液濃度(wt%) 交聯劑(莫耳%)
比較例1 141 (製備例5) 20 4
比較例2 241 (製備例6) 20 4
其中硫酸根取代比超過140%之比較例1至2未膠凝，甚至於反應完成之後，仍保持溶液形式，因此無法分析物理性質。
[ 實驗例 2 ：基於硫酸化玻尿酸之水凝膠之識別 ]
經由1H NMR分析識別實施例3中所製備的基於硫酸化玻尿酸之水凝膠。結果示於圖2。
參考圖2之NMR資料，實施例3中所製備之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠中，從圖2中之資料產生於1.52 ppm之峰。因此，確認製備與BDDE交聯之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠。
[ 實驗例 3 ：水凝膠之黏彈性測量 ]
實施例1至4及比較例1及2中所製備之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠的黏彈性係藉由配備25 mm鋼板的MCR 302流變計，以25℃、4%應變以及2.5 Hz測量。此外，實施例1至4及比較例1及2中所製備之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠係於高壓釜中以121℃高壓蒸汽滅菌，然後測量黏彈性變化。結果示於表4。
表4
   滅菌前 滅菌後
G'(Pa) G"(Pa) G'(Pa) G"(Pa)
實施例1 883 971 776 836
實施例2 1521 656 253 37
實施例3 267 33 165 25
實施例4 274 36 189 28
比較例1 56 10 X X
比較例2 凝膠形成X
參考上表4，發現實施例1至4中所製備之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠可根據應用目的製備成具有廣範圍之黏彈性，從硬至軟物理性質。此外，參考實施例1至4，發現基於硫酸化玻尿酸之水凝膠即使於如需要經由濕式或乾式滅菌進行最終滅菌之後，亦可具有所希望範圍之黏彈性。
[ 實驗例 4 ：滅菌之後的高溫安定性評估 ]
實施例2及3中所製備之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠以及Synovian係於121℃滅菌達表5之G'所指定的時間以成為200至300 Pa。於55℃兩週及四週之後，測量物理性質變化以判定安定性。結果示於下表5及圖3。
表5
   Synovian 實施例2 實施例3
乾式滅菌(分鐘) 40 120 10
0週 G'(Pa) 285 253 165
G"(Pa) 46 37 25
│η*│(Pa·S) - 16271 10589
pH - 6.89 7.31
2週 G'(Pa) 145 206 129
G"(Pa) 30 28 21
│η*│(Pa·S) - 13247 8329
pH - 6.85 7.32
4週 G'(Pa) 111 121 118
G"(Pa) 26 18 20
│η*│(Pa·S) - 7771 7609
pH - 6.87 7
參考上表5及圖3，實施例2及3於滅菌之後在55℃之嚴苛條件中儲存時，顯示黏彈性及複數黏度之維持率為50%或更高，因此展現優於Synovian之安定性。
[ 實驗例 5 ：細胞毒性評估 ]
使用基於硫酸化玻尿酸之水凝膠(pSHA凝膠)、玻尿酸(HA)及實施例1及2之硫酸化玻尿酸(SHA)評估兩種細胞(軟骨細胞及纖維母細胞樣滑膜細胞(Fibroblast like synovicyte，FLS))中之細胞毒性。
將兩種細胞(FLS及軟骨細胞)分別以8.0×103及3.4×104細胞/孔種入96孔盤，然後生長一夜，且以1 mg/ml之各樣本處理之。軟骨細胞係經實施例1之樣本處理，而FLS係經實施例2之樣本處理。再培養24小時之後，藉由刃天青(resazaurin)鑑定測量細胞之存活率。結果示於圖4。
參考圖4，相較於未經任何樣本處理之對照組，基於硫酸化玻尿酸之水凝膠(pSHA凝膠)、玻尿酸(HA)、及實施例1及實施例2之硫酸化玻尿酸(SHA)之全部樣本分別導致兩種細胞(FLS及軟骨細胞)之存活率為80%或更高。因此，發現全部樣本均無細胞毒性。
[ 實驗例 6 ：抗發炎功效評估 ]
兩種細胞(軟骨細胞及FLS)中之抗發炎功效評估係使用基於硫酸化玻尿酸之水凝膠(pSHA凝膠)、玻尿酸(HA)及實施例1及2之硫酸化玻尿酸(SHA)進行。
將兩種細胞(軟骨細胞及FLS)分別以3.4×104及8.0×103 細胞/孔種入96孔盤，且以10 ng/ml及1 ng/ml之TNF-α處理以活化細胞一夜。軟骨細胞係經5 mg/ml之實施例1處理，而FLS係經1 mg/ml之實施例2處理。於樣本處理後培養24小時之後，使用ELISA測量介質中之細胞的細胞激素分泌。結果示於圖5(軟骨細胞)及圖6(FLS)。
參考圖5及圖6，相較於未經任何樣本處理之對照組，實施例1及2之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠(pSHA凝膠)使軟骨細胞之IL-6分泌減少至61%或更低，且FLS細胞之IL-6及IL-8分泌減少至40%或更低。因此，可確認抗發炎功效。
[ 實驗例 7 ：抗凝血反應評估 ]
因子IIa及因子Xa之活性抑制係藉由顯色鑑定使用基於硫酸化玻尿酸之水凝膠(pSHA凝膠)、肝素、及實施例2之硫酸化玻尿酸(SHA)測量。結果示於表6。
表6
   抗IIa活性[單位/mg] 抗Xa活性[IU/mg]
肝素 209 209
SHA 0.0 0.05
實施例2 0.0 0.03
參考上表6，硫酸化玻尿酸(SHA)及實施例2之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠(pSHA凝膠)的抑制因子IIa及因子Xa之活性比肝素低7000倍。因此，確認幾乎無抗凝血反應發生。
[ 實驗例 8 ：抗酶性之評估 ]
比較實施例2之pSHA凝膠的抗酶性與 Synovian且顯示於圖7。
使1 g之水凝膠與10 ul之500單位/g之為玻尿酸降解酶的玻尿酸酶溶液混合。然後，藉由具備25 mm鋼板之MCR 302流變計，以37℃、4%應變、及2.5 Hz測量黏彈性。結果示於圖7。
參考圖7，於Synovian之情況，凝膠隨時間快速降解。同時，於實施例2之pSHA凝膠中，發現顯著改善因降解酶所導致之物理性質惡化。
[ 實驗例 9 ： HUVEC 抗血管生成功效之判定 ]
使用經VEGF處理之HUVEC細胞樣本組及未經VEGF處理之HUVEC細胞樣本組的Matrigel，源自3D培養產生的血管生成(管形成)顯示於圖8。
經VEGF處理組/未經VEGF處理組中，將HUVEC細胞種入經matrigel塗布的96孔盤，且培養16小時之後，經由光學顯微鏡判定血管(管(tube))之形成。此外，為評估各樣本之抑制血管生成(管形成)的功效，將HUVEC細胞種入經matrigel塗布的96孔盤，然後以特定濃度之VEGF、接著以實施例2之硫酸化玻尿酸水凝膠(pSHA凝膠)處理HUVEC細胞。培養16小時之後，經由光學顯微鏡觀察血管(管)之形成。結果示於圖8。
參考圖8，相對於未經該樣本處理之對照組，於經實施例2之pSHA凝膠處理之組中發現血管生成抑制。
[圖1] 為識別部分硫酸化玻尿酸(pSHA)之硫酸化取代的1H NMR結果。
[圖2] 為識別本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠的1H NMR結果。
[圖3] 顯示圖示本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠的安定性評估之圖。
[圖4]為圖示本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠的細胞毒性評估之圖。
[圖5]及[圖6] 為圖示本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠的抗發炎功效評估之圖。
[圖7] 為圖示本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠的抗酶性評估之圖。
[圖8]顯示觀察經VEGF處理之HUVEC細胞樣本及未經VEGF處理之HUVEC細胞樣本中的管形成之光學顯微照片，以及觀察本發明之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠(pSHA凝膠)處理對於經VEGF處理之HUVEC細胞樣本中的管形成之抑制功效的光學顯微照片。

Claims (9)

  1. 一種基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其係藉由交聯包括選自由其中玻尿酸之一些醇羥基(alcoholic hydroxyl group)經硫酸根取代之硫酸化玻尿酸、及其鹽所組成之群組中之至少一者的交聯單體與交聯劑而形成；其中，該交聯單體為其中玻尿酸之30%至120%之醇羥基係經硫酸根取代者；以及該交聯劑為其中使用玻尿酸之-OH基形成交聯者。
  2. 如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其中，該交聯劑為選自由下列所組成之群組中之至少一者：1,4-丁二醇二環氧丙基醚、聚(乙二醇)二環氧丙基醚、雙酚A二環氧丙基醚、甘油二環氧丙基醚、乙二醇二環氧丙基醚、聚(丙二醇)二環氧丙基醚、二乙烯碸、聚(乙二醇二硫醇)、桂皮酸、碘化2-氯-1-甲基吡啶鎓及二碳二亞胺(bicarbodiimide)。
  3. 如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其中，選自由硫酸化玻尿酸、其衍生物及鹽所組成之群組中之該至少一者的重量平均分子量(Mw)範圍為800至5,000kDa。
  4. 如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠，其係用於抗發炎或抗血管生成。
  5. 一種抗發炎或抗血管生成之藥學組成物，其包含如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分。
  6. 一種用於預防或治療關節炎之藥學組成物，其包含如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分。
  7. 一種用於預防或治療眼部疾病之藥學組成物，其包含如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分。
  8. 一種抗癌藥學組成物，其包含如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠作為活性成分。
  9. 一種如請求項1之基於硫酸化玻尿酸之水凝膠用於製備治療哺乳動物之關節炎的組成物之用途。
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