TWI544929B - 蚯蚓乾燥粉末製造方法 - Google Patents
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Description
本發明係有關一種將經糞土去除處理之蚯蚓作為原料製造蚯蚓乾燥粉末之蚯蚓乾燥粉末製造方法。
成為作為保健食品和藥劑使用之蚯蚓乾燥粉末的原料之蚯蚓係在由泥土構成之養殖床上，除泥土以外另將牛糞和食品廢棄物等作為餌料進行供給來養殖的。通常，泥土中繁殖著大腸桿菌和一般細菌，另外，還包含不少砷和重金屬等有害物質，並且，向蚯蚓供給之餌料中亦包含不少砷和重金屬等有害物質。因此，蚯蚓藉由在其培育過程中吞食泥土和餌料而在體內逐漸積蓄細菌和有害物質。因此，在製造蚯蚓乾燥粉末時，需要從蚯蚓中去除細菌和有害物質以免對人體帶來不良影響。
以往，作為製造去除細菌和有害物質之蚯蚓乾燥粉末之方法，已知有如下方法：藉由從蚯蚓體內去除蚯蚓體內的糞土及含有有害物質之體腔液來從蚯蚓中去除細菌和有害物質，並將該蚯蚓作為蚯蚓乾燥粉末的原料。
例如，已知有如下方法：藉由在明亮處長時間放置蚯蚓的活體之製程及將檸檬酸等酸的粉末撒在蚯蚓上或在該酸的水溶液中浸泡蚯蚓之製程，來從蚯蚓體內去除糞土、體腔液，隨後，粉碎蚯蚓，冷凍乾燥其粉碎物，藉此製造去除細菌和有害物質之蚯蚓乾燥粉末(參閱專利文獻1)。
並且，還已知有藉由對製造出之蚯蚓乾燥粉末進行加熱殺菌來進一步去除細菌的方法(參閱專利文獻2)。
專利文獻1：日本專利第4808822號公報
專利文獻2：日本專利第4886017號公報
作為保健食品和藥劑的蚯蚓乾燥粉末的藥理作用係基於蚯蚓之酶的作用者，蚯蚓乾燥粉末的酶活性越高其藥理作用越高，因此對所製造之蚯蚓乾燥粉末要求較高的酶活性。
但是，若如以往進行加熱殺菌，則由於酶一般不耐熱，因此不可避免地造成酶活性下降。
鑑於該情況，本發明的主要課題在於藉由採用合理的殺菌處理方法來提供一種不僅沒有蚯蚓的酶活性
下降之虞，而且可以使所得到之蚯蚓乾燥粉末的酶活性增大之蚯蚓乾燥粉末的製造方法。
本發明的第1特徵構成涉及一種蚯蚓乾燥粉末製造方法，其特徵在於，該方法係將經糞土去除處理之蚯蚓作為原料製造蚯蚓乾燥粉末，其中，對經糞土去除處理之蚯蚓的活體或其粉碎物，進行在10~500MPa的壓力條件且0~70℃的溫度條件下的加壓處理，並將該加壓處理後的蚯蚓或其粉碎物作為前述蚯蚓乾燥粉末的原料。
亦即，依本構成，能夠藉由加壓處理來對經糞土去除處理之蚯蚓或其粉碎物進行更可靠的殺菌，因此不同於存在酶活性下降之虞之加熱殺菌，沒有酶活性下降之虞，不僅如此，還能夠藉由加壓處理使蚯蚓或其粉碎物的酶活性增大。
並且，藉由基於加壓處理之蚯蚓酶活性的增大而促進蚯蚓的自家消化，藉此蚯蚓的表皮在加壓處理期間藉由自家消化而溶解，因此能夠省去以往在加工成蚯蚓乾燥粉末之前必須進行之藉由過濾等去除蚯蚓表皮的製程，隨之，還能夠避免由過濾等表皮去除製程而引起之有效成份的損失和提取蚯蚓乾燥粉末之上清液的收率下降等問題。
另外，藉由加壓處理亦能夠有效地降低在從
蚯蚓的粉碎等製程至加工成乾燥粉末的過程中產生之蚯蚓的臭氣，還能夠優化工作環境。而且，由於在上述溫度條件下進行前述加壓處理，因此能夠在酶活性不會因加熱而下降之溫度條件下更加有效地進行蚯蚓的殺菌。此外，加壓處理的壓力條件100~200MPa更為佳。
本發明的第2特徵構成為適於實施第1特徵構成的構成，其特徵在於，
作為前述糞土去除處理進行如下處理：藉由對蚯蚓進行加熱器之熱線照射來從蚯蚓的體內去除糞土，並對該糞土去除後的蚯蚓的活體或其粉碎物進行前述加壓處理。
亦即，蚯蚓有以下習性：當表皮變得乾燥時，為了使身體免受乾燥的影響而從體內排洩糞土等。針對於此，依上述構成，能夠使蚯蚓的表皮因加熱器之熱線照射而變得乾燥，從而促進蚯蚓排出糞土，另外，隨著加熱器的照射，蚯蚓的體溫上升，藉此運動變活躍而能夠進一步提高糞土排出效率。藉此，能夠在極短時間內有效地從蚯蚓的體內去除糞土。
亦即，依本構成，能夠如此在短時間內去除冀土，因此在去除糞土時能夠減小對蚯蚓之損傷，藉此能夠有效地抑制伴隨對蚯蚓的損傷之酶活性下降。
本發明的第3特徵構成為適於實施第2特徵構成的構成，其特徵在於，交替進行如下處理：對蚯蚓進行前述加熱器之熱線照射；及藉由該熱線照射去除蚯蚓排洩之糞土，或者去除培
育蚯蚓之培育床的表層床材。
亦即，藉由加熱器之熱線照射，蚯蚓將自己排洩的糞土纏在身上，或者鑽進培育蚯蚓的培育床的床材，藉此加熱器之熱線照射受到糞土或表層床材的妨礙。針對於此，依上述構成，對蚯蚓交替進行加熱器之熱線照射、及纏在蚯蚓上的糞土的去除、或鑽進之蚯蚓上方表層床材的去除，因此加熱器之熱線照射不會受到糞土或表層床材的妨礙，從而能夠更加有效地從蚯蚓的體內去除糞土。
亦即，依本構成，能夠如此更加有效地去除糞土，因此在去除糞土時能夠減小對蚯蚓之損傷，藉此能夠更加有效地抑制伴隨對蚯蚓的損傷之酶活性下降。
本發明的第4特徵構成為適於實施第1~第3特徵構成的構成，其特徵在於，作為前述糞土去除處理進行如下處理：藉由使蚯蚓暴露在氣化之揮發性有機溶劑中而從蚯蚓的體內去除冀土及體腔液，並對該糞土及體腔液去除後的蚯蚓的活體或其粉碎物進行前述加壓處理。
亦即，依上述構成，藉由將使用揮發性有機溶劑進行了糞土/體腔液的去除處理之蚯蚓作為蚯蚓乾燥粉末的原料，與將未進行該處理之蚯蚓作為原料之方法相比，能夠得到酶活性(亦即藥理作用)較高的蚯蚓乾燥粉末。
並且，依上述構成，藉由與檸檬酸等酸相比
對蚯蚓的傷害較少的揮發性有機溶劑對蚯蚓賦予刺激，藉此還能夠從蚯蚓的體內安全地去除糞土及體腔液。
另外，依該構成，使揮發性有機溶劑氣化並使蚯蚓暴露在其中，因此與使其浸漬在液體揮發性有機溶劑中之情況相比，不會使蚯蚓的體溫大幅下降，因此，不會因蚯蚓的體溫下降而招致蚯蚓的糞土/體腔液的排出效率下降，還能夠有效地從蚯蚓的體內去除糞土及體腔液。
此外，若在揮發性有機溶劑中選用具有殺菌作用的溶劑，則能夠藉由本構成進行糞土/體腔液的去除處理，同時還能夠進行蚯蚓的殺菌。
本發明的第5特徵構成為適於實施第1~第3特徵構成的構成，其特徵在於，作為前述糞土去除處理進行如下處理：藉由將蚯蚓浸漬在鹼性溶液中而從蚯蚓的體內去除糞土及體腔液，並對該糞土及體腔液去除後的蚯蚓的活體或其粉碎物進行前述加壓處理。
亦即，依上述構成，藉由將使用鹼性溶液進行了糞土/體腔液的去除處理之蚯蚓作為蚯蚓乾燥粉末的原料，與將未進行該處理之蚯蚓作為原料之方法相比，能夠得到酶活性(亦即藥理作用)較高的蚯蚓乾燥粉末。
並且，藉由與檸檬酸等酸相比對蚯蚓的傷害較少的鹼性溶液對蚯蚓賦予刺激，藉此還能夠從蚯蚓的體內安全地去除糞土及體腔液。
此外，若在鹼性溶液中選用具有殺菌作用之
溶液，則能夠藉由本構成進行糞土/體腔液的去除處理，同時還能夠進行蚯蚓的殺菌。
第1圖係表示在培育專用床上培育之蚯蚓的一般細菌數量及大腸桿菌數量之表。
第2圖係表示藉由氣化之揮發性有機溶劑的暴露來進行糞土/體腔液去除處理之蚯蚓的酶活性變化之表。
第3圖係表示藉由浸漬在鹼性溶液中來進行糞土/體腔液去除處理之蚯蚓的酶活性變化之表。
第4圖係表示由加壓處理引起之蚯蚓的一般細菌數量及大腸桿菌數量變化之表。
第5圖係表示由加壓處理引起之蚯蚓的酶活性變化之表。
本發明的蚯蚓乾燥粉末的製造方法分為蚯蚓的養殖製程、蚯蚓的糞土去除處理製程、蚯蚓乾燥粉末的製造製程，以下分別對此進行說明。此外，在本例中，蚯蚓使用屬於Lumbricidae科的赤子愛勝蚓。
在本發明中，將蚯蚓區分為產卵之繁殖用蚯蚓和作為
蚯蚓乾燥粉末原料之培育用蚯蚓來進行培育。而且，在繁殖專用床上飼養繁殖用蚯蚓並使其產卵，並且在培育專用床上飼養培育用蚯蚓來進行蚯蚓的養殖。
繁殖專用床係將床材鋪在容器內來製作的，該床材並沒有特別限定，可以與習知之蚯蚓養殖同樣地由泥土構成。
並且，培育專用床係將植物性纖維材料作為床材並將其鋪在容器內來製作的。此外，作為植物性纖維材料能夠採用椰子、菠蘿、椰子果、泥炭蘚、花生殼、廢紙漿等各種纖維材料。
在製造將該植物性纖維材料作為床材之培育專用床時，首先，粉碎植物性纖維材料，隨後，使其含有維生素和鈣等礦物質成份，並將粉碎物浸漬在調整為適於蚯蚓的生育環境之中性程度pH值之處理液中，藉此使其含有礦物質成份，同時進行粉碎物的pH調整。而且，乾燥該粉碎物來調整含水量，並由最終得到之乾燥物製造培育專用床。
作為培育專用床原料之植物性纖維材料的細菌少於泥土。而且，藉由將植物性纖維材料的粉碎物浸漬在上述處理液中之製程，使粉碎物中的砷和重金屬在處理液中溶出，藉此作為粉碎物的植物性纖維材料成為砷和重金屬等有害物質被分離去除的纖維材料。而且，由於將該細菌較少且有害物質被去除的植物性纖維材料作為原料，因此培育專用床中，細菌、有害物質較少。因此，能夠藉
由該培育專用床在清潔的環境中飼養培育用蚯蚓。
在本發明中之蚯蚓的養殖製程中，在繁殖專用床上對繁殖用蚯蚓另行供給餌料進行飼養，使其產卵，並將繁殖用蚯蚓產的卵移到培育專用床，在培育專用床上使其孵化，或者，將在繁殖專用床上孵化之蚯蚓移到培育專用床。而且，將培育專用床上之蚯蚓作為培育用蚯蚓，不另行供給餌料進行飼養。
產卵時需要鈣、蛋白質和有機分解物等養分，因此繁殖專用床上之繁殖用蚯蚓的飼養中，為了供給這種養分使其有效地產卵而供給餌料的同時進行。此外，作為餌料，能夠採用燒酒的渣滓、磨碎的咖啡豆、蘑菇的廢菌床等各種餌料。
並且，在培育專用床上之培育用蚯蚓的飼養中，培育專用床將細菌較少且有害物質被分離去除之植物性纖維材料作為原料，因此能夠有效地抑制細菌和有害物質積蓄在培育用蚯蚓的體內。
亦即，一般在繁殖著細菌且還包含不少砷和重金屬等有害物質的泥土中培育蚯蚓時，蚯蚓在其培育中吞食泥土而在體內逐漸積蓄細菌和有害物質。相對於此，在培育專用床上對培育用蚯蚓進行培育時，培育用蚯蚓將作為培育專用床的床材之植物性纖維材料作為餌料來吞食，由於該植物性纖維材料中細菌較少且有害物質被分離去除，因此能夠有效地抑制細菌和有害物質積蓄在培育用蚯蚓的體內。
並且，培育用蚯蚓並不以產卵為目的，因此可以不供給產卵所需的養分，另外，培育用蚯蚓藉由吞食植物性纖維材料就可以充份生長，因此在培育專用床上之培育用蚯蚓的培育中，與繁殖用蚯蚓不同，不另行供給餌料。藉此，避免包含於餌料中的不少的砷和重金屬等有害物質經由餌料積蓄在蚯蚓中；及藉由餌料促進植物性纖維材料的細菌繁殖，從而能夠更加有效地抑制細菌和有害物質積蓄在培育用蚯蚓的體內。
此外，培育用蚯蚓所吞食之植物性纖維材料中藉由上述處理液浸漬製程而含有作為營養成份的礦物質成份，因此能夠避免培育用蚯蚓因營養不足而生長不良等問題。
第1圖表示藉由本製程得到之在培育專用床上以20-25℃飼養3個月之蚯蚓的一般細菌數量及大腸桿菌數量。本例中之培育專用床將椰子纖維作為原料。具體而言，培育專用床利用市售的粉碎機粉碎椰子纖維，並利用通過滅菌用過濾器之自來水充份清洗而去除所附著之污垢，接著，在使其含有維生素和鈣等礦物質成份而調整為中性程度的pH值之處理液中將椰子纖維的粉碎物浸漬約20小時，從而使其含有礦物質成份，同時進行粉碎物的pH調整，隨後，將該粉碎物以20-40℃長時間低溫乾燥而成的材料鋪在容器中，藉此製作培育專用床。此外，在第1圖中，對在由泥土構成之養殖床上另行供給餌料進行飼養之以往方法的蚯蚓的一般細菌數量及大腸桿菌數量進行
比較。對於藉由本製程得到之蚯蚓和以往方法的蚯蚓，分別取5只，利用均質器對每只進行粉碎，不追加進行殺菌製程，就進行細菌數量檢查。
細菌數量檢查中，一般細菌數量檢查藉由如下進行：將蚯蚓粉碎溶液的原液和利用滅菌水稀釋之蚯蚓粉碎溶液1mL塗布於3M Petrifilm AC板(Sumitomo 3M Limited製造，3M及Petrifilm為註冊商標)上，在設定為30℃之恆溫箱中將該板培養48小時之後，測量菌落數。大腸桿菌數量檢查藉由如下進行：將蚯蚓粉碎溶液的原液和利用滅菌水稀釋之蚯蚓粉碎溶液1mL塗布於3M Petrifilm RCC板(Sumitomo 3M Limited製造)上，在設定為35℃之恆溫箱中將該板培養24小時之後，測量菌落數。
如第1圖所示，以往方法的蚯蚓中，均無法測定一般細菌及大腸桿菌。這是因為無法測量10億以上的細菌數量，亦即，表示以往方法的蚯蚓中積蓄著大量細菌。相對於此，在培育專用床上飼養之藉由本製程得到之蚯蚓中，一般細菌及大腸桿菌均落在可測定範圍內，亦即，與以往方法的蚯蚓相比，藉由本製程能夠有效地抑制細菌積蓄在體內。尤其，關於大腸桿菌，若考慮以往方法的蚯蚓至少為10億以上的值，則可得知其數量減少6位數以上。如此，與以往方法的蚯蚓相比，在培育專用床上飼養之藉由本製程得到之蚯蚓能夠有效地抑制細菌積蓄在體內。
該蚯蚓的糞土去除處理製程分為：(1)藉由加熱器的照射而進行之糞土去除製程、隨後的(2-1)藉由露在氣化揮發性有機溶劑中而進行之殘留糞土/體腔液去除製程、或(2-2)藉由浸漬在鹼性溶液中而進行的殘留糞土/體腔液去除製程。
(1)藉由加熱器的照射而進行的糞土去除製程
在本製程中，利用當表皮變得乾燥時為了使身體免受乾燥的影響而排洩糞土等並將糞土纏在身上之這種蚯蚓的習性，藉由加熱器之熱線照射使蚯蚓的表皮乾燥，從而促進蚯蚓的糞土排出。而且，隨著加熱器的照射，蚯蚓的體溫上升，藉此運動變活躍而進一步提高冀土排出效率，從而能夠有效地進行培育用蚯蚓的糞土去除。
作為具體的製程，首先，將培育用蚯蚓飼養一定期間的培育專用床移動到處理室，隨後，對在培育專用床上露在明亮環境中之培育用蚯蚓(換言之，在明亮環境中出現在培育專用床表面的培育用蚯蚓)，從上方進行紅外線加熱器等加熱器之熱線照射。
若如此，則由於培育用蚯蚓討厭加熱器之熱線照射，在排洩糞土的同時鑽進床材中，因此暫時停止加熱器的照射，從培育專用床剝離床材，直至培育用蚯蚓被露在培育專用床的表面(出現在表面)上，隨後，再次對
露在培育專用床的表面上的培育用蚯蚓從上方進行加熱器的照射。
藉由交替反覆進行該加熱器的照射和床材的剝離，能夠直接對培育用蚯蚓進行加熱器的照射，藉此能夠使其有效地排洩冀土，同時，能夠使培育用蚯蚓逐漸鑽進培育專用床下方。而且，反覆進行該操作，直至成為床材從培育專用床上幾乎消失且培育用蚯蚓聚集在培育專用床的底部之狀態。
而且，若在培育用蚯蚓聚集在該培育專用床的底部之狀態下仍進行加熱器的照射，則沒有可鑽進的床材，因此培育用蚯蚓將排洩的糞土纏在身上，防止加熱器的照射。因此，暫時停止加熱器的照射，從培育用蚯蚓上剝離糞土，再次對培育用蚯蚓從上方進行加熱器的照射。
藉由將該加熱器的照射和糞土的剝離反覆交替進行2~3次，藉此可以有效地從培育用蚯蚓的體內去除糞土。
如此，在本製程中，僅剝離培育用蚯蚓所鑽進部份的床材，或者剝離纏在培育用蚯蚓上的糞土，隨後，對培育用蚯蚓進行加熱器之熱線照射，藉此加熱器之熱線照射不會受到床材或糞土的妨礙，即可以有效地從培育用蚯蚓的體內去除糞土。
並且，在本製程中，從培育專用床取出培育用蚯蚓，無需費時費力區分培育用蚯蚓和床材，就能夠藉由加熱器的照射而從培育用蚯蚓去除糞土，同時，區分培
育用蚯蚓和床材，因此省時省力，處理有效。
此外，蚯蚓若體溫上升某一程度則會死亡，因此在本製程中，為了防止培育用蚯蚓的體溫過度上升，將藉由加熱器照射之熱量限制在蚯蚓不會死亡的程度，並且，間歇地使用加熱器而不是長時間連續使用。
(2-1)藉由暴露在氣化揮發性有機溶劑中而進行之殘留糞土/體腔液去除製程
本製程如下進行：使清洗藉由加熱器的照射而進行了糞土去除製程後的表皮的培育用蚯蚓暴露在氣化之揮發性有機溶劑中而對培育用蚯蚓賦予刺激，藉此從培育用蚯蚓中去除殘留糞土及體腔液。
由於體腔液中包含蚯蚓體內的砷和重金屬等有害物質，因此藉由去除體腔液，能夠從培育用蚯蚓的體內去除有害物質。
暴露在氣化之揮發性有機溶劑中係藉由如下進行：例如，將包含揮發性有機溶劑之脫脂棉放入瓶中，使揮發性有機溶劑在瓶內氣化，並藉由安裝於瓶上之噴嘴等噴射機構，向培育用蚯蚓噴吹出該氣化之揮發性有機溶劑。
如此使揮發性有機溶劑氣化並使蚯蚓暴露在其中，藉此與浸漬在液體揮發性有機溶劑中的情況相比，不會使蚯蚓的體溫大幅下降，因此不會招致由蚯蚓的體溫下降引起之蚯蚓的糞土/體腔液的排出效率下降。
並且，藉由將使用揮發性有機溶劑進行了糞土/體腔液的去除處理之蚯蚓作為蚯蚓乾燥粉末的原料，與將未進行該處理的蚯蚓作為原料之方法相比，能夠得到酶活性(亦即藥理作用)較高的蚯蚓乾燥粉末。
在本製程中使用之揮發性有機溶劑沒有特別限定，可以為乙醇、甲醇、己烷、三乙胺、乙酸甲酯、氯仿等任意溶劑，但從毒性和安全性方面考慮，乙醇尤為佳。
並且，若使用乙醇作為揮發性有機溶劑，則能夠去除殘留糞土、體腔液，同時還能夠進行蚯蚓表面的殺菌。
第2圖表示藉由本製程去除糞土、體腔液的培育用蚯蚓的酶活性變化。具體而言，首先，對在培育專用床上飼養之培育用蚯蚓，與(1)的製程同樣地藉由加熱器的照射而去除糞土，在(2-1)的殘留冀土/體腔液去除製程中，使用乙醇作為揮發性有機溶劑，將培育用蚯蚓暴露在於50℃下氣化之乙醇中而去除殘留糞土、體腔液。而且，隨後，利用均質器粉碎培育用蚯蚓，利用純水使其粉碎物懸浮，測定藉由離心分離機從該懸浮液中抽取之上清液的活性。此外，為了求出比活性，還測定蛋白質量。並且，作為比較對象，還測定從未進行氣化乙醇的暴露處理之蚯蚓中抽取之上清液的活性。
在酶活性的測定中，使用纖溶酶基質(S-2251：SEKISUI MEDICAL CO.,LTD.製造)，t-PA(tissue
plasminogen activator)基質(S-2288：SEKISUI MEDICAL CO.,LTD.製造)作為纖溶活性基質，測定纖溶酶活性、t-PA活性。將在1分鐘內1μmol的pNA(對硝基苯胺)游離之量作為1unit，使用CORONA GRATING MICROPLATE READER SH-9000(CORONA ELECTRIC CO.,LTD.製造)在37℃下測定405nm的吸收波長。反應溶液組成為0.25mM基質、50mM Tris-HCl、適量的酶液。
藉由Bradford法測定蛋白質量。具體而言，使用Bio-Rad公司的Bio-Rad protein assay試劑，使用CORONA GRATING MICROPLATE READER SH-9000(CORONA ELECTRIC CO.,LTD.製造)在波長595nm下定量。在製作檢量線時，使用牛血清白蛋白(BSA)。
如第2圖所示，與未進行氣化乙醇的暴露處理之蚯蚓相比，暴露在氣化乙醇中之蚯蚓的纖溶酶活性、t-PA活性的總活性略低於2倍，比活性均能夠提高至2倍以上。如此，本發明中藉由氣化揮發性有機溶劑的暴露而進行殘留糞土/體腔液去除製程，藉此不僅能夠去除殘留冀土、體腔液，還能夠提高培育用蚯蚓的酶活性。
(2-2)藉由浸漬在鹼性溶液中而進行之殘留糞土/體腔液去除製程
本製程如下進行：使清洗藉由加熱器的照射進行了冀土去除製程後的表皮之培育用蚯蚓浸漬在鹼性溶液中來對
培育用蚯蚓賦予刺激，藉此從培育用蚯蚓中去除殘留糞土及體腔液。
並且，將使用鹼性溶液進行糞土/體腔液的去除處理之蚯蚓作為蚯蚓乾燥粉末的原料，藉此與將未進行該處理之蚯蚓作為原料之方法相比，能夠得到酶活性(亦即藥理作用)較高的蚯蚓乾燥粉末。
在本製程中使用之鹼性溶液的溶質沒有特別限定，可以為次氯酸鈉、氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、磷酸氫二鈉、乙酸鈉、檸檬酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉、氯化鈣等任意溶質，但次氯酸鈉尤為佳。這是因為，次氯酸鈉作為食品添加物已被認可，且安全性較高，其溶液的體腔液去除效果較高，具有較強的殺菌作用。
第3圖表示藉由本製程去除糞土、體腔液之培育用蚯蚓的酶活性變化。具體而言，首先，對在培育專用床上飼養之培育用蚯蚓，與(1)的製程同樣地藉由加熱器的照射而去除糞土，在(2-1)的殘留糞土/體腔液去除製程中，使用次氯酸鈉(NaClO)及氯化鈉(NaCl)作為鹼性溶液的溶質，在調整為0.05%、0.1%、0.25%或0.5%的次氯酸鈉溶液或調整為10%的氯化鈉溶液中將培育用蚯蚓浸漬10分種，去除殘留糞土、體腔液。而且，在利用純水清洗該培育用蚯蚓之後，利用均質器粉碎浸漬在各溶液中之培育用蚯蚓，並利用純水使該粉碎物懸浮，測定藉由離心分離機從該懸浮液中抽取之上清液的活性。此外，為了求出比活性，還測定蛋白質量。並且，作為比較
對象，還測定從未進行溶液浸漬處理之蚯蚓中抽取之上清液的活性。
與第2圖中的測定同樣地進行酶活性測定及蛋白質量測定。
如第3圖所示，與未進行溶液浸漬處理的蚯蚓相比，浸漬在各溶液中之蚯蚓的纖溶酶活性、t-PA活性的總活性、比活性均能夠得到提高。而且，與氯化鈉溶液相比，次氯酸鈉溶液亦即使在極低的濃度下亦能夠提高酶活性，亦即使在0.1%濃度的次氯酸鈉溶液中亦存在與10%氯化鈉溶液相同程度的酶活性的提高效果。如此，本發明中藉由浸漬在鹼性溶液中而進行殘留冀土/體腔液去除製程，藉此不僅能夠去除殘留糞土、體腔液，還能夠提高培育用蚯蚓的酶活性。
在本製程中，首先，利用均質器等公知機構粉碎藉由蚯蚓的糞土去除處理製程去除糞土、體腔液之培育用蚯蚓，並利用純水使其粉碎物懸浮。隨後，將該懸浮液放入薄膜等容器中，藉由適當的加壓裝置進行加壓處理，對懸浮液進行殺菌。而且，藉由離心分離機從加壓處理後的懸浮液中抽取上清液，對該上清液實施冷凍乾燥處理，從而製造蚯蚓乾燥粉末。
在製造蚯蚓乾燥粉末時，不僅去除蚯蚓的糞土、體腔液，還對蚯蚓進行殺菌處理，藉此能夠得到進一
步對人體無害的蚯蚓乾燥粉末。因此，在本製程中，藉由加壓處理對培育用蚯蚓實施殺菌處理。
作為殺菌處理已知有加熱處理，但加熱處理存在酶活性因該加熱而下降之虞。相對於此，在藉由該加壓處理進行之殺菌中，無需進行如酶活性下降的加熱就能夠可靠地殺菌，進而通過加壓處理能夠使酶活性增大。
並且，藉由基於加壓處理之酶活性增大而促進蚯蚓的自家消化，藉此，蚯蚓的表皮在加壓處理期間藉由自家消化而溶解。因此，藉由進行加壓處理，能夠省去原本需進行之藉由過濾等的蚯蚓表皮的去除製程。以往，存在隨著表皮的去除而有效成份損失及進行乾燥而成為蚯蚓乾燥粉末之上清液的收率下降之虞，但藉由採用加壓處理，能夠避免該問題。
另外，還存在藉由該加壓處理還能夠降低從蚯蚓的粉碎至加工成乾燥粉末時產生之蚯蚓臭氣之優點。
在本製程中的加壓處理中，其壓力條件10~500MPa為較佳，100~200MPa更為佳，並且，關於加壓時間，0.5~48小時為較佳，1~2小時更為佳。
並且，溫度條件沒有特別限定，0~70℃為較佳，40~50℃更為佳，藉由在該溫度條件下進行加壓處理，能夠更加有效地進行殺菌。此外，若為該溫度，則亦不會有酶活性降低之情況。
並且，在本製程中，亦可以代替培育用蚯蚓的粉碎物的懸浮液，將培育用蚯蚓的活體與純水一同封入
薄膜中進行加壓處理。在這種情況下，亦可以得到與在培育用蚯蚓的粉碎物的懸浮液中進行加壓處理相同的效果。而且，在加壓處理後，粉碎表皮溶解之培育用蚯蚓，使用與培育用蚯蚓一同封入薄膜中之純水得到粉碎物的懸浮液等即可。
第4圖、第5圖表示本製程中進行加壓處理時的培育用蚯蚓的菌數量的變化及酶活性變化。進行測定的蚯蚓為去除糞土、體腔液的培育用蚯蚓，在去除糞土、體腔液之後利用純水進行清洗，接著，使用均質器粉碎，並使粉碎物懸浮在純水中。而且，隨後，將35ml的懸浮液封入塑料薄膜的容器中，在100MPa、50℃下處理1~2小時，並測定藉由離心分離機從該加壓處理後的懸浮液中抽取之上清液的活性及菌數量。並且，作為比較對象，還測定從未進行加壓處理的蚯蚓中抽取的上清液的活性及菌數量。
細菌數量檢查中，一般細菌數量檢查藉由如下進行：將利用滅菌水稀釋之蚯蚓粉碎溶液1mL塗布於3M Petrifilm AC板(Sumitomo 3M Limited製造)上，在設定為30℃之恆溫箱中將該板培養48小時之後，測量菌落數。大腸桿菌數量檢查藉由如下進行：將利用滅菌水稀釋之蚯蚓粉碎溶液1mL塗布於3M Petrifilm RCC板(Sumitomo 3M Limited製造)上，在設定為35℃的恆溫箱中將該板件培養24小時之後，測量菌落數。
與第2圖中之測定同樣地進行酶活性測定及
蛋白質量測定。
如第4圖所示，在未進行加壓處理之情況下檢測出大量一般細菌及大腸桿菌，但在進行1小時加壓處理之情況下，一般細菌數量變得極少，關於大腸桿菌數量，為陰性。另外，在進行2小時加壓處理之情況下，一般細菌數量及大腸桿菌數量均為陰性。如此，藉由進行加壓處理，能夠有效地進行殺菌。
如第5圖所示，若進行加壓處理則蛋白質沈澱，因此蛋白質濃度減少，但纖溶酶活性、t-PA活性的總活性增高，比活性亦增高。如此藉由進行加壓處理，不僅能夠殺菌，還能夠提高酶活性。
在前述實施形態中，在製造蚯蚓乾燥粉末時，蚯蚓使用赤子愛勝蚓，但本發明並不限定於此，可以使用例如紅蚯蚓等以保健食品用、藥劑用途使用之各種蚯蚓。
在前述實施形態中之蚯蚓的養殖製程中，在製造用於飼養培育用蚯蚓之培育專用床時，將作為床材之植物性纖維材料的粉碎物的pH值調整為中性程度，但本發明並不限定於此，粉碎物的pH值可以依據目的調整為各種值。
在前述實施形態中之蚯蚓的養殖製程中，在製造用於飼養培育用蚯蚓之培育專用床時，示出了對於作為床材之植物性纖維材料的粉碎物，使其含有礦物質成份
並且進行pH調整之情況，但本發明並不限定於此，亦可以不使植物性纖維材料的粉碎物含有礦物質成份並且不進行pH調整。並且，床材既可以不用粉碎，亦可以不利用減菌水清洗。
在前述實施形態中藉由加熱器的照射進行之糞土去除製程中，示出了無需從培育專用床取出培育用蚯蚓即可從培育專用床的上方對培育用蚯蚓進行加熱器的照射之情況，但本發明並不限定於此，亦可以從培育專用床取出培育用蚯蚓並對該培育用蚯蚓進行加熱器的照射。
在前述實施形態中藉由暴露在氣化揮發性有機溶劑中而進行的殘留糞土/體腔液去除製程中，作為氣化機構，將包含揮發性有機溶劑之脫脂棉放入瓶中，並使揮發性有機溶劑在瓶內氣化之情況，但本發明並不限定於此，可以使用另一種氣化機構。
在前述實施形態中，作為殘留糞土/體腔液去除製程，示出了將培育用蚯蚓浸漬在鹼性溶液中之情況，但亦可以在氣化之鹼性溶液中暴露培育用蚯蚓來去除殘留糞土、體腔液。
在本發明的實施中，對培育用蚯蚓的加壓處理的溫度條件、時間條件、壓力條件、其他條件能夠採用各種條件。
在前述實施形態中，在蚯蚓的養殖製程中對在培育專用床上飼養之培育用蚯蚓進行加熱器的照射而去除糞土、藉由暴露在氣化揮發性有機溶劑或藉由浸漬在鹼
性溶液中而去除殘留糞土、體腔液、以及藉由加壓處理進行殺菌處理來製造了蚯蚓乾燥粉末，但本發明並不限定於此，亦可以藉由與前述實施形態不同的方法進行蚯蚓的養殖和糞土/體腔液去除處理，並藉由加壓處理對該蚯蚓進行殺菌處理來製造蚯蚓乾燥粉末。
本發明的蚯蚓乾燥粉末製造方法能夠用於製造在各種領域中用於各種用途之蚯蚓乾燥粉末。
Claims (9)
- 一種蚯蚓乾燥粉末製造方法，其係將經糞土去除處理之蚯蚓作為原料製造蚯蚓乾燥粉末之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其特徵為以將蚯蚓區分為產卵之繁殖用蚯蚓與作為經糞土去除處理之前述蚯蚓乾燥粉末之原料的培育用蚯蚓的狀態飼養，作成繁殖專用床與培育專用床，於前述繁殖專用床上飼養前述繁殖用蚯蚓並使其產卵，於前述培育專用床上將從前述繁殖用蚯蚓產的卵孵化之蚯蚓作為前述培育用蚯蚓飼養。
- 如申請專利範圍第1項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，作為前述培育專用床的床材，係使用植物性纖維材料。
- 如申請專利範圍第2項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，於前述植物性纖維材料係含有礦物質成份。
- 如申請專利範圍第3項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，前述培育專用床係藉由使粉碎前述植物性纖維材料之粉碎物含有礦物質成份，且浸漬在調整為中性附近之pH值的處理液中，使其含有礦物質成份的同時並進行粉碎物的pH調整，然後，藉由乾燥前述粉碎物調整含水量所得之乾燥物來製造。
- 如申請專利範圍第2至4項中任一項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，將前述繁殖用蚯蚓在前述繁殖專用床上另行供給餌料進行飼養，將前述培育用蚯蚓在前述培育專用床上不另行供給餌料進行飼養。
- 如申請專利範圍第1或2項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，作為前述糞土去除處理，係對於以前述培育專用床飼養之前述培育用蚯蚓，藉由進行因加熱器導致之熱線照射，從前述培育用蚯蚓體內去除糞土，將此糞土去除處理後的前述培育用蚯蚓作為前述蚯蚓乾燥粉末的原料。
- 如申請專利範圍第1或2項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，作為前述糞土去除處理，係藉由將於前述培育專用床飼養之前述培育用蚯蚓暴露在氣化之揮發性有機溶劑中，從前述培育用蚯蚓體內不僅去除糞土亦去除體腔液，將此冀土及體腔液去除處理後的前述培育用蚯蚓作為前述蚯蚓乾燥粉末的原料。
- 如申請專利範圍第1或2項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，作為前述糞土去除處理，係藉由將於前述培育專用床飼養之前述培育用蚯蚓浸漬在鹼性溶液中，從前述培育用蚯蚓體內不僅去除糞土亦去除體腔液，將此糞土及體腔液去除處理後的前述培育用蚯蚓作為前述蚯蚓乾燥粉末的原料。
- 如申請專利範圍第1或2項之蚯蚓乾燥粉末製造方法，其中，對於將於前述培育專用床飼養經前述糞土去除處理之前述培育用蚯蚓或其粉碎物，進行加壓處理，並將此加壓處理後的前述培育用蚯蚓或其粉碎物作為前述蚯蚓乾燥粉末的原料。
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