CN102100825B - 治疗疼痛的中药组合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种治疗疼痛的中药组合物及其制备方法，该中药组合物由以下原料药制成：红花300-1200份、桃仁300-1200份、元胡300-900份、没药300-900份、当归300-1200份、川芎300-900份、牛膝300-1200份、地龙300-900份、羌活300-600份、秦艽300-600份、香附300-600份和甘草300-900份。本发明对原料药的有效成分提取及纯化的工艺参数进行优化，采用超临界CO₂萃取技术提取挥发油和大孔树脂吸附进行药效成分的纯化和富集。本发明药物制剂具有疗效好，崩解时间短，溶出和吸收快，生物利用度高且不宜吸潮变质，质量稳定、不含生药粉等优点。

Description

治疗疼痛的中药组合物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，尤其涉及治疗疼痛的中药组合物及其制备方法，属于治疗疼痛的中药组合物领域。

背景技术

瘀血痹阻经络证最典型的特征是疼痛。疼痛是一种常见的临床病症，可见于内、外、妇、儿、骨伤、神经、五官等各科的常见病、疑难病中，在临床上往往剧烈或持续的疼痛常导致患者精神和肉体上的继发性损伤，严重地影响着患者的健康和生活质量。全世界人口三分之一以上遭受着持续或反复发作的疼痛折磨，我国目前约有1亿疼痛病人。在医院门诊就诊的病人中，三分之二曾经忍受过疼痛困扰。目前临床对抗疼痛的手段虽然包括药物、神经剥脱损毁术、经皮神经电刺激、脑内电刺激镇痛、中医针刺镇痛、按摩和安慰等多种疗法，但药物治疗仍是疼痛治疗的最基本、最常用和最有效的方法。目前用于临床的镇痛药中，西药占很大比例，但西药的副作用人人皆知。

疼痛的治疗是医学界一直关注但从未能彻底解决的问题，近年来人们对疼痛治疗的关注进一步加强，目前疼痛科正成为新兴的学科。中医学的多学科综合的整体优势在疼痛诊疗方面可以得到充分体现，中医学对疼痛的认识和诊疗历史悠久，有其独特的理论体系和丰富的治疗方法，在现代疼痛的诊疗工作中发挥了其应有的价值。中医认为导致痛证发生的原因不外虚实两端，虚为“不荣则痛”，实为“不通则痛”。气血运行障碍是疼痛产生的基础，疼痛则是气血运行障碍的外在表现之一。因此，痛证可从气血方面辨证论治。

近廿年来，中医药治疗各种疼痛病的药物研究取得了较大的进展，复方制剂如正天丸、万通筋骨片、腰痛宁胶囊、元胡止痛系列(片剂、胶囊剂、颗粒剂)、云南白药、腰痹通胶囊等在疼痛病的治疗应用中取得了较好疗效。中药复方能针对复杂证候，符合中医辨证论治原则，但其药物有效成分比较复杂，研究成功且疗效显著的较少，能在国内推广应用的防治瘀血痹阻经络证疼痛的中药复方制剂不多。因此，进一步加强防治瘀血痹阻经络证疼痛的有效中药复方制剂的研究，仍属必要。

公开号为CN1903299A的发明专利申请中公开了一种治疗肩痛、臂痛、腰痛腿痛、周身疼痛的中药组合物，该中药组合物由以下原料药制成：秦艽(1-5份)、川芎(5-9份)、桃仁(8-12份)、红花(8-12份)、甘草(5-9份)、羌活(1-5份)、没药(5-9份)、当归(8-12份)、五灵脂(炒)(5-9份)、香附(1-5份)、牛膝(8-12份)。其功能与主治为用于治疗肩痛、臂痛、腰痛腿痛、周身疼痛的治疗。该发明专利申请没有提到瘀血痹阻经络证及胶囊的剂型。

博士论文《身痛逐瘀汤及其配伍对佐剂性关节炎大鼠的实验研究》以身痛逐瘀汤为研究对象，以类风湿性关节炎为切入点，对该方的抗炎活血免疫作用及治疗类风湿性关节炎的作用机理进行了较为深入的研究并将该方进行配伍研究，探讨清热燥湿法和益气法在该方中的配伍意义。该论文只是从药效学的角度阐述了身痛逐瘀汤的抗炎免疫作用，但没有提及剂型方面的问题。

迄今为止没有上市的配方与原方相似的身痛逐瘀药物制剂。身痛逐瘀汤制剂有确切的疗效，但存在患者服用量大，服用不方便，口感不佳，生物利用度低，药材资源使用率低，制剂易霉变等缺点，使得部分患者不乐意接受。

发明内容

本发明目的之一是对现有的身痛逐瘀汤的处方进行重新优化和改进，在此基础上，提供一种治疗疼痛的中药组合物；

本发明目的之二是提供一种制备上述治疗疼痛的中药组合物的方法，尤其是将其制备成口服制剂-胶囊剂，克服现有的制剂所存在的起效缓慢，患者服用量大，服用不方便，口感不佳，生物利用度低，药材资源使用率低，制剂易吸潮霉变等缺点，对于瘀血痹阻经络所致的肩痛、臂痛、腰痛、腿痛、周身疼痛经久不愈等疾病具有显著的疗效。

本发明上述目的是通过以下技术方案来实现的：

一种治疗瘀血痹阻经络所致的肩痛、臂痛、腰痛、腿痛、周身疼痛经久不愈等疾病的中药组合物，由以下重量份的原料药制成：

红花300-1200份、桃仁300-1200份、元胡300-900份、没药300-900份、当归300-1200份、川芎300-900份、牛膝300-1200份、地龙300-900份、羌活300-600份、秦艽300-600份、香附300-600份和甘草300-900份；

优选的，各原料药的重量份是：红花900份、桃仁900份、元胡600份、没药300份、当归900份、川芎600份、牛膝900份、地龙600份、羌活300份、秦艽300份、香附300份、甘草600份。

身痛逐瘀汤出自清代王清任之《医林改错》，为五逐瘀汤之一，是典型的为痹证兼有瘀者而设的主要方剂，具有活血行气，祛风除湿，通痹止痛的功效，主治瘀血痹阻经络证，用于肩痛、臂痛、腰痛、腿痛、周身疼痛经久不愈症的治疗，如风湿性关节炎、类风湿性关节炎、坐骨神经痛、腰腿痛、急性腰扭伤等疼痛疾病。

本发明在原方基础上增加了元胡，去掉了五灵脂。方中红花、桃仁共为君药。红花辛散温通，入心肝经，有活血通经，祛瘀止痛之功，红花质轻升浮，走外达上，通经活络，长于祛在经、在上之瘀血；桃仁质重沉降，偏入里善走下焦，擅于破脏腑之瘀滞。二者相须为用，同入心肝二经，活血化瘀，祛瘀生新，消肿止痛之力增强，且入心可散血中之滞，入肝可理血中之滞，以祛全身各部瘀血。方中元胡、没药、当归、川芎共为臣药。元胡能行血中气滞，气中血滞，专治一身上下诸痛，没药辛平芳香，苦泄力强，功擅活血散瘀，行气止痛，消肿生肌，为行气散瘀止痛之要药，二药参合，共奏宣通脏腑，流通经络，活血祛瘀，消肿止痛之功。当归辛甘温润，甘温和血，辛温行散，补血养血，活血止痛，且有防止化散太过而耗伤阴血之弊，川芎辛温香窜，走而不守，上行颠顶，下达血海，外彻皮毛，旁通四肢，有活血行气，祛风止痛之功，当归与川芎相伍，以养血为主，以行气为要，相辅相成，以增养血行气，祛瘀止痛之力。四药合用，气血兼顾，助君药活血祛瘀，行气止痛之功。佐牛膝以活血通经，祛瘀止痛，且补肝肾壮筋骨。佐以地龙通经活络，祛风止痛，羌活辛苦性温，气雄而散，味薄上升，散外受之风邪，且可胜湿、通利关节止痛，长于搜风通痹，秦艽辛散苦泄而不燥，阴中微阳，可升可降，祛风除湿，舒筋活络，羌活行于上焦而理上；秦艽内达下焦而通府。二药合用，一上一下，通行经络，祛风除湿，镯痹止痛。配伍地龙则通利经络，祛风除湿，通痹止痛，驱除周身之外侵之邪气，使气血安和，疼痛自解。血不自行，随气而行，气行则血行，气滞则血滞，故方中佐辛苦香燥，理气活血，通行经络，解郁止痛之香附以行气活血。甘草性味甘平，能调和诸药，且保护胃气，以防没药伤胃，为佐使药。诸药合用，既行血分之瘀滞，又祛在络之邪气，且活血行气而不伤血，共奏活血行气，祛瘀通络，通痹止痛之功。

本发明所用的各味原料药物，规格均符合国家药典标准，都可以在医药商店购买得到。

本发明目的之二是提供一种制备上述身痛逐瘀胶囊剂的方法。

本发明目的之二是通过以下技术方案来实现的：

一种制备上述治疗疼痛的中药组合物的方法，包括：

(1)按所述重量份称取各原料药；

(2)川芎、红花、羌活、没药、当归和香附采用超临界CO₂萃取挥发油，将萃取的挥发油用环糊精采用包合水溶液法进行包合；包合物干燥，研细，过筛备用；

(3)秦艽、牛膝和元胡用乙醇回流提取，提取液滤过，滤液减压浓缩，浓缩物稀释，稀释液经过大孔树脂吸附，以30％-80％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，浓缩，干燥，粉碎成细粉，过筛备用；

(4)将桃仁、甘草、地龙与步骤(2)和(3)的药渣用水煎煮，煎液滤过，浓缩；浓缩液经过大孔树脂吸附，用50％-70％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至清膏，干燥，粉碎成细粉，过筛备用；

(5)将步骤(2)所得到环糊精包合物以及步骤(3)和(4)所得到的细粉与药物制剂辅料混均后，制成药物制剂半成品，将半成品制成颗粒剂或胶囊剂。

本发明进行了大量的实验，对上述各工艺参数进行了优化和筛选，优化后的各工艺参数能够最大限度的将原料药中的有效成分提取出来，所制备得到的药物制剂也因此具有更好的疗效。具体的，所述的优化后的各工艺参数如下：

步骤(1)中所述超临界CO₂萃取挥发油的条件优选为：萃取压力20-40MPa、萃取温度25-45℃、萃取时间60-120min、CO₂流量15-25L/h；更优选的，萃取压力为30MPa、萃取温度35℃、萃取时间120min、CO₂流量25L/h；其中，所述的固定夹带剂优选为丙酮。

步骤(2)中所述环糊精包括α-环糊精、β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、二甲基-β-环糊精、单琥珀酸-二甲基-β-环糊精、6-羧甲基-β-环糊精或γ-环糊精等多种。本发明以挥发油包合物收得率、挥发油包合率为指标，对环糊精的种类进行了筛选，实验结果发现β-环糊精作为本发明的包合剂为最佳选择，β-环糊精包合后包合物收得率为82.7％、挥发油包合率为88.4％。

为确定挥发油包合的最佳工艺参数，本发明采用饱和水溶液法，以挥发油包结率、包合物得率为考察指标，对影响包合效果的因素(挥发油和β-环糊精的比例、包合温度、包合时间)进行实验。实验结果发现，按照以下工艺参数进行包合具有最优的包合效果：挥发油与β-环糊精的比例为1∶4-8(ml/g)，包合温度30-50℃，包合时间1-3h；其中，最佳的包合条件为：挥发油与β-环糊精的比例为1∶6(ml/g)，包合温度50℃，包合时间2h；按照上述条件进行包合，包合物平均收得率为82.7％，RSD为1.2％；挥发油平均包合率为88.4％，RSD为1.6％。

步骤(3)中将秦艽、牛膝和元胡用乙醇回流提取的条件优选为：加入原料药总质量6-10倍的50％-70％乙醇回流提取3次，提取时间每次为1-3h。

秦艽、牛膝、元胡是本处方中很重要的三味药物。秦艽在临床上有祛风湿、清湿热、止痹痛的功效，现代研究发现有较强的消炎抗菌、镇静止痛、抗过敏、升血糖等作用。常用于风湿痹痛、筋脉拘挛、骨节酸痛、日脯潮热、小儿疳积发热等症。龙胆苦苷是秦艽的主要活性成分之一，为其药效物质基础。牛膝具有补肝肾，强筋骨，逐瘀通经，引血下行的功效。主要用于腰膝酸痛，筋骨无力，经闭癥瘕，肝阳眩晕等症候。皂苷是牛膝中另一类重要物质，具有多种生物活性，牛膝总皂苷具有明显的抗炎镇痛作用，是其镇痛的药效物质基础。元胡具有活血化淤，行气止痛功效，临床常用于胸胁、脘腹疼痛，经闭痛经，产后淤阻，跌扑肿痛等证。元胡中含多种生物碱，其中以延胡索甲、乙、丙素等为主。其生物碱类成分具镇痛、催眠、降低冠脉阻力及增加血流量等作用，元胡中总碱的镇痛效价约为吗啡的40％。本实验醇提工艺采用正交试验法，以提取液中龙胆苦苷、牛膝总皂苷、元胡总碱为考察指标，对影响龙胆苦苷、牛膝总皂苷、元胡总碱提取效果的因素设计试验，并进行考察得出最佳提取工艺为：加原料药8倍质量的60％乙醇，加热回流，提取3次，每次2h。在上述最佳工艺条件下，龙胆苦苷含量可达6.94mg/g，牛膝总皂苷含量可达6.21mg/g，延胡索乙素含量可达1.20mg/g。

为了使药效成分高度富集，杂质去除得更彻底，有效降低服用剂量，提高原料药的利用率，本发明采用了大孔吸附树脂吸附技术。大孔吸附树脂是一类新型的高分子分离材料，具有化学性质稳定、选择性吸附、再生简便等许多优点，在天然产物的分离纯化方面其应用日趋广泛。本发明选用AB-8、X-5、DM-301、NKA-9四种大孔吸附树脂对药效成分进行吸附特性的研究，通过4种树脂对药效成分水溶液的静态和动态吸附，比较4种树脂的吸附特性，从而为秦艽、牛膝、元胡有效成分的分离提纯提供依据。实验结果表明，在4种大孔吸附树脂中，AB-8型树脂对药效成分的吸附性能优于其他参比树脂，饱和吸附量有明显的差异，故AB-8型树脂是4种树脂中的首选吸附树脂载体。在4种大孔吸附树脂中，AB-8型树脂对药效成分的吸附性能较好，饱和吸附量有明显的差异，洗脱率较高，故选择AB-8型树脂作为4种树脂中首选吸附树脂载体。

本发明考察了不同浓度乙醇对药效成分浓缩液的解吸效率，实验发现随着乙醇浓度的提高，以龙胆苦苷、牛膝总皂苷、延胡索乙素含量为依据的药效成分的解吸量和洗脱率相应都有所提高，但是，乙醇浓度不同，药效成分的解吸量和洗脱率差异很大，因此从解吸量、洗脱率考虑，本发明确定70％乙醇为最佳的洗脱溶剂。本发明进一步进行70％乙醇对药效成分解吸用量实验，结果显示，2BV70％乙醇洗脱药效成分的累计百分含量几乎达到100％，故确定洗脱溶媒为70mL。

上样量的多少对树脂的吸附效果和再生利用有很大的影响，如果上样量过大，就会导致树脂超出其饱和吸附量，出现树脂局部中毒现象，影响树脂的再生和重复利用。本发明进行了最佳上柱量确定试验，实验结果表明，当上柱量小于50mL时时，流出液中含有微量的药效成分，超过50mL时，流出液中就纯在大量药效成分，即超过了树脂的吸附容量，因此，50mL为最佳饱和上柱量。

优选的，步骤(4)中将步骤(2)、(3)的药渣和桃仁、甘草、地龙加入原料药总质量6-10倍的水煎煮3次，每次1-3h。

步骤(3)或步骤(4)中所述的浓缩优选为浓缩至相对密度为1.15-1.20(60-70℃)的清膏；

步骤(3)或步骤(4)中所述的干燥优选为真空干燥，更优选为在温度为65-75℃，压力为-0.08MPa--0.1MPa的条件下进行真空干燥。

步骤(5)中所述药物制剂辅料为乳糖，糊精或微晶纤维素、淀粉，优选为由微晶纤维素和淀粉按任意比例所组成的混合物；其中，将半成品制成颗粒剂时，优选用挤压法制成颗粒。

本发明方法所制备得到的药物制剂与原汤剂相比，起效快速，服用、携带方便，对部分原料药材提取挥发油以及大部分药材煎煮提取，使得药材使用率高，提高了药物起效时间和药物生物利用度、在保证疗效不比汤剂差的前提下极大的减少了患者服用药物量(由每次服用100ml降到每次服用0.75g)，同时改善了药物的口感，提高了患者用药的依从性。

传统胶囊剂制备工艺采用提取浓缩物入药，服用量大，且含部分生药粉，致使生物药剂学性能低下，起效缓慢。挥发性物质多采取喷雾方式加入，损失较多，很难发挥其药效。本发明的制备工艺注重药效成分先进提取纯化技术的应用，如：挥发性物质采取超临界CO₂萃取；其它成分采用正交设计确定最佳的工艺条件，采用大孔树脂吸附纯化工艺和解析物质的真空干燥工艺。本发明将药材的挥发油用环糊精包裹，使挥发油与环糊精形成分子内囊的包合物，提高了挥发油的稳定性，使挥发油粉末化，增加了挥发油在胃内的溶解性，提高了药物的生物利用度，降低了药物的毒副作用，刺激性、掩盖了挥发油的不良气味，避免了生产时直接喷散挥发油导致混合不均匀，使药物疗效出现差异的缺陷，防止了挥发油因容易挥发而使生物利用度低，导致药物疗效下降的弊端。

本发明的制剂成型工艺采用挤缩制粒技术。挤缩制粒技术可增大颗粒堆密度，在不改变单服剂量的同时提高胶囊剂装量；制备胶囊剂时少用或不用辅料，从而达到减少胶囊剂服用粒数或缩小囊壳型号，提高患者顺应性的目的。另外，这一技术能够有效地减小颗粒比表面积，增大颗粒紧密度，从而防止吸附较多水分，达到防潮的目的。同时由于所制颗粒外观圆整，真球度高，强度大，便于进行颗粒包衣，通过包衣，能更有效地起到防潮作用。

本发明药效成分经过提取纯化后高度富集，经过真空干燥、挤出制粒等技术处理，解决内容物易吸潮变质等问题，以保证胶囊充填物的流动性、色泽的一致性、装量差异的稳定性。且本发明制剂不含生药粉，防止了霉变的发生。因此，与常规技术相比，本发明所制备的胶囊剂具有疗效好，崩解时间短，溶出和吸收快，生物利用度高且不宜吸潮变质，质量稳定的优点。

经动物试验和临床试验证明，本发明药物制剂对治疗瘀血痹阻经络所致的肩痛、臂痛、腰痛、腿痛、周身疼痛经久不愈等疾病具有较好的临床疗效。治疗过程中未发现其对心、肝、肾功能及血液系统有损害，本发明药物制剂临床应用安全。

附图说明

图1本发明中药组合物的制备工艺流程图。

具体实施方式

下面结合具体实施例来进一步描述本发明，本发明的优点和特点将会随着描述而更为清楚。但这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

实施例1胶囊剂的制备

(1)准确称取经过挑选、净制的红花900g、桃仁900g、元胡600g、没药300g、当归900g、川芎600g、牛膝900g、地龙600g、羌活300g、秦艽300g、香附300g、甘草600g；将上述原料药粉碎，备用。

(2)将川芎、红花、羌活、没药、当归和香附置于HA221-40-48型超临界CO₂萃取仪(南通市华安超临界萃取有限公司)中，采用超临界CO₂萃取挥发油，萃取条件为：萃取压力30MPa、萃取温度35℃、萃取时间120min、夹带剂为丙酮、CO₂流量25L/h，萃取后的药渣备用，收集挥发油，每毫升挥发油用6g环糊精采用饱合水溶液法包合，包合温度50℃，包合时间2h，干燥，研细，过120目筛备用；

(3)将秦艽、牛膝和元胡置于提取罐中，加入3味药材总质量8倍的60％乙醇回流提取3次，提取时间依次为2h、2h、2h，滤过，滤液合并，药渣留用；乙醇提取液在45℃，-0.1MPa条件下减压浓缩，浓缩物加蒸馏水稀释，稀释液经过处理好的AB-8型树脂(沧州宝恩化工有限公司)，以70％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至相对密度为1.15-1.20(60-70℃)的清膏，真空干燥(68℃，-0.08MPa)，粉碎成细粉，制得含有秦艽碱、元胡总生物碱、牛膝总皂苷的药效成分，过120目筛备用；

(4)将上述秦艽、牛膝、元胡、川芎、红花、羌活、没药、当归、香附9味药的药渣和桃仁、甘草、地龙置于提取罐中，加入12味药材总质量8倍的水煎煮3次，煎煮时间依次为2h、2h、1h，合并煎液，滤过，浓缩，浓缩液液经过处理好AB-8型树脂吸附，以70％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至相对密度为1.15-1.20(60-70℃)的清膏，真空干燥(68℃，-0.08MPa)，粉碎成细粉，过120目筛备用；

(5)将步骤(2)的环糊精包合物与步骤(3)和(4)所得到真空干燥细粉混均后，加入15％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，挤缩制粒，45℃干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，装入胶囊，制成1000粒，得到胶囊剂，胶囊装量每粒0.25g。

实施例2胶囊剂的制备

(1)准确称取经过挑选、净制的红花300g、桃仁300g、元胡300g、没药300g、当归300g、川芎300g、牛膝300g、地龙300g、羌活300g、秦艽300g、香附300g、甘草300g；将上述原料药粉碎，备用；

(2)将川芎、红花、羌活、没药、当归和香附置于超临界CO₂萃取仪(南通市华安超临界萃取有限公司)中，采用超临界CO₂萃取挥发油，萃取条件为：萃取压力35MPa、萃取温度30℃、萃取时间90min、夹带剂为丙酮、CO₂流量20L/h，萃取后的药渣备用，收集挥发油，每毫升挥发油用8g环糊精采用饱和水溶液法包合，包合物40℃干燥3h，研细，过120目筛备用；

(3)将秦艽、牛膝和元胡置于提取罐中，加入3味药材总质量8倍的60％乙醇回流提取3次，提取时间依次为2h、1h、2h，滤过，滤液合并，药渣留用；乙醇提取液在47℃，-0.1MPa条件下减压浓缩，浓缩物加蒸馏水稀释，稀释液经过处理好的AB-8型树脂(沧州宝恩化工有限公司)吸附，以70％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至相对密度为1.15-1.20(60-70℃)的清膏，真空干燥(70℃，-0.08MPa)，粉碎成细粉，即制得含有秦艽碱、元胡总生物碱、牛膝总皂苷的药效成分，过120目筛备用；

(4)将上述秦艽、牛膝、元胡、川芎、红花、羌活、没药、当归、香附9味药的药渣和桃仁、甘草、地龙置于提取罐中，加入12味药材总质量10倍的水煎煮3次，煎煮时间依次为2h、1h、2h，合并煎液，滤过，浓缩至适量，提取液经过处理好AB-8型树脂吸附，以65％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至相对密度为1.15-1.20(60-70℃)的清膏，真空干燥(70℃，-0.08MPa)，粉碎成细粉，过120目筛备用；

(5)参见图1所示，将步骤(2)所得到的环糊精包合物与步骤(3)和(4)的真空干燥细粉混均后，加入5％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，挤缩制粒，42℃干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，装入胶囊，制成1000粒，即得到胶囊剂，胶囊装量每粒0.25g。

实施例3胶囊剂的制备

(1)、准确称取经过挑选、净制的红花1200g、桃仁1200g、元胡900g、没药900g、当归1200g、川芎900g、牛膝1200g、地龙900g、羌活600g、秦艽600g、香附600g、甘草900g；将上述原料药粉碎，备用。

(2)、将川芎、红花、羌活、没药、当归和香附置于超临界CO₂萃取仪(南通市华安超临界萃取有限公司)中，采用超临界CO₂萃取挥发油，萃取条件为：萃取压力40MPa、萃取温度35℃、萃取时间120min、夹带剂丙酮、CO₂流量25L/h，萃取后的药渣备用，收集挥发油，每毫升挥发油用4g环糊精采用超声波法包合，包合物37℃干燥3h，研细，过120目筛备用；

(3)、将秦艽、牛膝和元胡置于提取罐中，加入3味药材总质量10倍的70％乙醇回流提取3次，提取时间依次为1h、2h、2h，滤过，滤液合并，药渣留用；乙醇提取液在50℃，-0.1MPa条件下减压浓缩，浓缩物加蒸馏水稀释，稀释液经过处理好的AB-8型树脂吸附，以70％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至相对密度为1.15-1.20(60-70℃)的清膏，真空干燥(75℃，-0.09MPa)，粉碎成细粉，即制得含有秦艽碱、元胡总生物碱、牛膝总皂苷的药效成分，过120目筛备用；

(4)、将上述秦艽、牛膝、元胡、川芎、红花、羌活、没药、当归、香附9味药的药渣和桃仁、甘草、地龙置于提取罐中，加入12味药材总质量6倍的水煎煮3次，煎煮时间依次为1h、2h、2h，合并煎液，滤过，浓缩至适量，提取液经过处理好AB-8型树脂(沧州宝恩化工有限公司)吸附，以65％乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至相对密度为1.15-1.20(60-70℃)的清膏，真空干燥(75℃，-0.08MPa)，粉碎成细粉，过120目筛备用；

(5)、参见图1所示，将步骤(2)所得到的环糊精包合物与步骤(3)和(4)所得到的真空干燥细粉混均后，加入12％微晶纤维素淀粉1∶1的辅料，挤缩制粒，40℃干燥，整粒，加入微粉硅胶混均，装入胶囊，制成1000粒，即可得到胶囊剂，胶囊装量每粒0.25g。

实验例1挥发油提取方法的最优工艺考察

本发明中药组合物的处方中川芎、红花、羌活、没药、当归、香附6味中药含有挥发油，挥发油传统方法多以水蒸气蒸馏法提取，但由于该法长时间受热，有效成分易受到破坏和丢失，其中一些热敏物质易发生氧化、聚合等反应导致变性，并且收油率低。超临界萃取法可大量保存对热不稳定及易氧化的挥发性成分，所以选择超临界萃取法提取挥发油。

1.实验方法

按照配方计量将川芎、红花、羌活、没药、当归、香附6味中药用WF-160型家用万能粉碎机进行粉碎，过20-40目筛末，混合均匀，根据HA221型超临界萃取装置(南通市华安超临界萃取有限公司生产)的操作规程进行萃取。称取一定量6种中药粉末，用适量丙酮浸泡后连同丙酮一起装入料筒，并将料筒装入萃取罐，旋紧密封垫。对萃取各条件参数进行设置，待系统升温至要求的温度，启动加压泵，将达到超临界状态的CO₂送入萃取罐，超临界状态的CO₂在与物料连续接触的过程中，有效成分被萃取到超临界流体中，通过等温降压或降温降压进入分离器。萃取物从分离器底部取出，萃取开始后20min开始收集萃取物，当不再有萃取物流出时，表明萃取已经完成。取样后的各萃取物用旋转蒸发器减压蒸馏，丙酮大量被蒸出后，再分别加入正丁醇将其溶解，再次减压蒸馏，以除去其中的水分，重复3次，水分基本全被除尽，得浸膏，迅速称量其质量，计算提取率和浸膏得率。提取率为萃取前物料重(g)和萃取后物料干重量之差(g)与萃取前物料重(g)比值，浸膏得率为提取的浸膏质量(g)与萃取的物料重(g)比值。

2.提取工艺优化的正交实验

以提取率和浸膏得率为考察指标，固定夹带剂为丙酮，选取萃取压力、萃取温度、萃取时间、CO₂流量进行4因素，3水平L₉(3)⁴正交实验。正交试验因素与水平设计见表1。

表1L₉(3)⁴正交试验因素与水平表

3.实验结果及分析

以提取率和浸膏得率之和为指标综合评价实验结果。由表2极差分析可知，在以提取率和浸膏得率之和为指标考察的四个因素中，对提取效率影响因素依次为D＞A＞B＞C，其中D、A、B因素对提取效果有显著影响；C因素对提取效果影响较小。最优组合为A₂B₂C₃D₃，即萃取有效成分的最佳工艺条件为：选取萃取压力为30MPa、萃取温度35℃、萃取时间120min、CO₂流量25L/h。在最佳工艺条件下，总挥发油的提取率可达9.98％。

表2L₉(3⁴)正交实验方案及结果

4.实验验证

按照正交设计的最佳提取条件，重新做了3次实验，以验证实验方案的可行性。结果表明总挥发油的提取率可达9.98％，本发明工艺的提取率是水蒸气蒸馏法的4倍。

实验例2秦艽、牛膝、元胡的醇提工艺考察实验

秦艽、牛膝、元胡是本发明药物组合物中很重要的三味药物。秦艽在临床上有祛风湿、清湿热、止痹痛的功效，现代研究发现有较强的消炎抗菌、镇静止痛、抗过敏、升血糖等作用。常用于风湿痹痛、筋脉拘挛、骨节酸痛、日脯潮热、小儿疳积发热等症。龙胆苦苷是秦艽的主要活性成分之一，为其药效物质基础。牛膝具有补肝肾，强筋骨，逐瘀通经，引血下行的功效。主要用于腰膝酸痛，筋骨无力，经闭癥瘕，肝阳眩晕等症候。皂苷是牛膝中另一类重要物质，具有多种生物活性，牛膝总皂苷具有明显的抗炎镇痛作用，是其镇痛的药效物质基础。元胡具有活血化淤，行气止痛功效，临床常用于胸胁、脘腹疼痛，经闭痛经，产后淤阻，跌扑肿痛等证。元胡中含多种生物碱，其中以延胡索甲、乙、丙素等为主。其生物碱类成分具镇痛、催眠、降低冠脉阻力及增加血流量等作用，元胡中总碱的镇痛效价约为吗啡的40％。

本实验醇提工艺采用正交试验法，以提取液中龙胆苦苷、牛膝总皂苷、元胡总碱为考察指标，对影响龙胆苦苷、牛膝总皂苷、元胡总碱提取效果的因素设计试验，并进行考察，达到最佳提取效果。

1.实验设计

本发明将影响提取效果的乙醇浓度、提取时间、料液比作为影响因子进行优选，以龙胆苦苷、牛膝总皂苷、元胡中延胡索乙素为评价指标，选用L₉(3⁴)正交表进行实验。因素水平详见表3。

表3醇提工艺因素水平表

2.龙胆苦苷、牛膝总皂苷、元胡总碱含量的测定

2.1龙胆苦苷含量测定的色谱条件色谱柱为Kromasil C₁₈柱(4.6mm×150mm，5阳)，甲醇-水(30∶70)为流动相，检测波长为254nm，柱温：25℃；流速：1.0mL/min。分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，计算龙胆苦苷的含量。理论塔板数按龙胆苦苷峰计算应不低于3000。

2.2总皂苷的含量测定本实验以齐墩果酸为标准品，采用香草醛-硫酸显色，比色法对牛膝总皂苷的含量进行测定。

2.3元胡中延胡索乙素含量测定的色谱条件色谱柱为Kromasil C₁₈柱(4.6mm×150mm，5μm)，甲醇-0.1％磷酸溶液(三乙胺调pH值至6.0)(55∶45)为流动相，检测波长为280nm，柱温：25℃；流速：1.0mL/min。分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，计算异嗪皮啶的含量。理论塔板数按延胡索乙素峰计算应不低于3000。

3结果与分析

3.1正交试验结果依次测得每组的龙胆苦苷、牛膝总皂苷、元胡中延胡索乙素的含量，试验方案及试验结果详见表4。

表4L₉(3⁴)正交试验方案及结果

表4结果表明在以龙胆苦苷为指标考察的4个因素中，由极差分析可知，影响龙胆苦苷的因素依次为B＞A＞C＞D，较优的工艺应为A₂B₂C₂D₂；在以牛膝总皂苷含量为指标考察的4个因素中，由极差分析可知，影响牛膝总皂苷含量的因素依次为A＞C＞B＞D，较优的工艺应为A₂B₂C₂D₃；在以延胡索乙素为指标考察的4个因素中，由极差分析可知，影响延胡索乙素含量的因素依次为A＞C＞B＞D，较优的工艺应为A₂B₂C₂D₂；从生产成本等因素综合考虑，得出最佳提取工艺为A₂B₂C₂D₂，即加生药材8倍质量的60％乙醇，加热回流，提取3次，每次2h。在最佳工艺条件下，龙胆苦苷含量可达6.94mg/g，牛膝总皂苷含量可达6.21mg/g，延胡索乙素含量可达1.20mg/g，正交设计中的9组实验结果均没有达到此数值，说明试验设计是可行的。

3.2验证实验采用优选的醇提工艺，进行3次重复实验，测定提取液中龙胆苦苷、牛膝总皂苷、延胡索乙素的含量，结果分别为6.92mg/g、6.18mg/g、1.16mg/g。研究表明建立的提取工艺路线是可行可信的。

实验例3秦艽、牛膝、元胡有效成分的纯化工艺考察

为了使药效成分高度富集，杂质去除得更彻底，有效降低服用剂量，提高原料药的利用率，本发明采用了大孔吸附树脂吸附技术。大孔吸附树脂是一类新型的高分子分离材料，具有化学性质稳定、选择性吸附、再生简便等许多优点，在天然产物的分离纯化方面其应用日趋广泛。本发明选用AB-8(沧州宝恩化工有限公司)、X-5(安徽三星树脂科技有限公司)、DM-301、NKA-9(天津市海光化工有限公司)四种大孔吸附树脂对药效成分进行吸附特性的研究，通过4种树脂对药效成分水溶液的静态和动态吸附，比较4种树脂的吸附特性，从而为秦艽、牛膝、元胡有效成分的分离提纯提供依据。

1.实验方法

1.1树脂的预处理

首先将树脂按大小和均匀度进行筛选，然后用95％酒精浸泡24h溶胀，蒸馏水洗净，以湿法在搅拌下将树脂加入到层析柱中，等树脂沉降后再将水放出，用95％的乙醇洗至洗出液加适量蒸馏水无白色浑浊现象，备用。

1.2吸附溶液的制备

根据实验例2确定的最佳工艺条件，得到无醇的含有龙胆苦苷、牛膝总皂苷、延胡索乙素等药效成分的溶液(浓度为0.36g/mL)，备用。

1.3龙胆苦苷、牛膝总皂苷、延胡索乙素含量测定方法同试验例2。

精密量取已处理好的AB-8、X-5、DM301、NKA9树脂各30g(35mL)，置100mL具塞磨口锥形瓶中，加入浓度为0.36g/mL样品液50mL，振荡20min，然后静置24h，使其达到饱和，24h后过滤并收集滤液；测定滤液中龙胆苦苷、牛膝总皂苷、延胡索乙素含量，计算饱和吸附量。

饱和吸附量＝(吸附前含量一吸附后含量)/树脂量

1.4吸附树脂对药效成分的动态吸附-洗脱试验

精密量取已处理好的含少量去离子水的4种树脂各2份，每份30g(35mL)分别置于100mL的具塞磨口锥形瓶中，每个锥形瓶中加入50mL浓度为0.36g/mL的有效成分浓缩液，同时，取50mL的无醇浓缩液做空白对照于烧杯中。将具塞磨口锥形瓶进行标记，并放于全温振荡器中，25℃振荡24h(振荡频率为220r/min)进行动态吸附实验，使其达到饱和吸附量。24h后过滤并收集滤液；将树脂浸泡在100mL70％乙醇中，25℃振荡解吸24h。24h后过滤并收集滤液。分别测定两次滤液中即吸附上清液和解吸液中药效成分的含量，计算饱和吸附量、洗脱率。

洗脱率＝解吸液中药效成分含量/(吸附前药效成分含量一吸附上清液药效成分含量)×100％

1.5不同浓度乙醇对药效成分浓缩液的解吸试验

精密量取已处理好的含少量去离子水的AB-8树脂16份(每个样品2份)，每份30g(35mL)分别置于250mL的具塞磨口锥形瓶中，每个锥形瓶中加入50mL浓度为0.36g/mL的药效成分浓缩液，同时，取50mL的无醇浓缩液做空白对照于烧杯中。将具塞磨口锥形瓶进行标记，放于全温振荡器中，25℃振荡24h(振荡频率为220r/min)进行动态吸附实验。24h后过滤并收集滤液；将收集完滤液的树脂分别浸泡在100mL30％、40％、50％、60％、70％、80％中，25℃振荡解析24h，24h后过滤并收集滤液。按照2.3的操作方法处理，分别测定两次滤液中即吸附上清液和解吸液中药效成分的含量，计算洗脱率。

1.670％乙醇对药效成分解吸用量试验

将50mL浓度为0.36g/mL的药效成分浓缩液通过柱体积为35mL的AB-8树脂柱，过柱，流出液重吸附3次，静置60min后，先用3BV蒸馏水，再用4BV70％乙醇依次洗脱，洗脱液流速为1mL/min，70％乙醇以1BV为1份，共收集4份。按测定方法，计算每份洗脱液中药效成分的含量。

1.7最佳上柱量确定试验

上样量的多少对树脂的吸附效果和再生利用有很大的影响，如果上样量过大，就会导致树脂超出其饱和吸附量，出现树脂局部中毒现象，影响树脂的再生和重复利用。分别吸取浓度为0.36g/mL的药效成分浓缩液30、40、50、60、70mL上大孔吸附树脂柱，过柱流出液重吸附3次，且静置60min，流出液单独收集，按照2.3的操作方法处理，测定流出液中药效成分的含量。

2.结果与分析

2.14种树脂静态饱和吸附量测定

4种树脂静态饱和吸附量测定试验结果见表5。

表54种树脂静态饱和吸附量测定结果

表5结果表明，在4种大孔吸附树脂中，AB-8型树脂对药效成分的吸附性能优于其他参比树脂，饱和吸附量有明显的差异，故AB-8型树脂是4种树脂中的首选吸附树脂载体。

2.24种树脂对药效成分的动态吸附-洗脱性能试验

4种树脂对药效成分的动态吸附-洗脱性能试验结果见表6和表7。

表64种树脂动态洗脱率测定结果

表6的结果表明，在4种大孔吸附树脂中，AB-8型树脂对药效成分的吸附性能较好，饱和吸附量有明显的差异，洗脱率较高，故选择AB-8型树脂作为4种树脂中首选吸附树脂载体。

2.3不同浓度乙醇对药效成分解吸试验

不同浓度乙醇对药效成分解吸试验结果见表7。

表7不同浓度乙醇对药效成分解吸试验结果

由表7可知，随着乙醇浓度的提高，以龙胆苦苷、牛膝总皂苷、延胡索乙素含量为依据的药效成分的解吸量和洗脱率相应都有所提高，但是，乙醇浓度不同，药效成分的解吸量和洗脱率差异很大，因此从解吸量、洗脱率考虑，70％乙醇为最佳的洗脱溶剂。

2.470％乙醇对药效成分解吸用量试验

70％乙醇对药效成分解吸用量试验结果见表8。

表8不同用量70％乙醇洗脱后药效成分的含量

结果显示，2BV70％乙醇洗脱药效成分的累计百分含量几乎达到100％，故确定洗脱溶媒为70mL。

2.5最佳上柱量的确定AB-8树脂最佳上柱量测定，结果见表9。

表9AB-8树脂最佳上柱量测定结果

表9结果表明，当上柱量小于50mL时时，流出液中含有微量的药效成分，超过50mL时，流出液中就纯在大量药效成分，即超过了树脂的吸附容量，因此，50mL为最佳饱和上柱量。

研究表明，本试验从4种树脂吸附解吸性能的筛选中最终确定采用AB-8型大孔吸附树脂进行药效成分的分离工艺研究，所选的树脂具有吸附快、吸附容量大、洗脱率高等优点，而且方法简单、树脂再生方便等特点。

实验例4秦艽等药渣和桃仁等所含药效成分的提取与纯化工艺研究

秦艽、牛膝、元胡、川芎、红花、羌活、没药、当归、香附9味药的药渣和桃仁、甘草、地龙等所含药效成分的提取与纯化工艺操作与实验例2和3相同，结果表明经过正交设计优选的提取工艺可以使药效成分的提取率达到最大化；提取液经过树脂吸附后可以高度富集。药材经过树脂吸附纯化后制得含有总生物碱、总皂苷、总黄酮等活性成分的真空干燥粉最终质量只是药材总重量的2％，而常规中药醇提或水提后出膏率一般为药材质量的10-30％，本发明的对比实验表明出膏率为药材质量的14％，因此药材经过纯化后无效成分去除率达12％，水溶性成分及醇溶性成分的提取率高达93％，真正实现了本发明以有效部位入药的要求。

实验例5挥发油包合工艺研究

现代药理实验已证明其挥发油具有重要的生理活性，超临界萃取的挥发油将采用β-环糊精包合技术处理。β-环糊精是制药、食品工业中的一种新型辅料，它可使药物的溶解度、稳定性等理化性质发生明显变化。

1.因素水平的选择  为确定挥发油包合的最佳工艺，采用饱和水溶液法，以挥发油包结率、包合物得率为考察指标，对影响包合效果的因素(挥发油和β-环糊精的比例、包合温度、包合时间)设计试验，各取3个水平，进行L₉(3⁴)正交试验，因素水平见表10。

表10提取工艺因素水平表

2.包合物制备方法  按正交试验表安排，精密称取β-环糊精一定量，置250mL三角瓶中，加水100mL，加热使之完全溶解，降至规定温度，挥发油用无水乙醇(1∶2)稀释后，用注射器缓慢滴加到溶液中，在恒温下搅拌至规定时间，降至室温，冰箱冷藏12h，抽滤，用少量水多次冲洗，再用30-60℃的石油醚50mL分4次洗涤，低温干燥(40-50℃)，得白色粉末状包合物，称重，计算包合物收得率、挥发油包合率。

3.评价指标  试验采用包合物收得率、挥发油包合率作为评价指标，设定其权重系数分别为0.3、0.7。计算公式如下：

包合物收得率＝包合物实际量(g)/B-环糊精量(g)+挥发油投入量(ml)×挥发油相对密度(1.07)×100％

挥发油包合率＝包合物中实际含油量(ml)/挥发油投入量(ml)×空白回收率(0.75)×100％

包合物收得率评分＝包合物收得率/最大包合物收得率×30

挥发油包合率评分＝挥发油包合率/最大挥发油包合率×70

综合评分＝包合物收得率评分+挥发油包合率评分

包合物中实际含油量的测定同药典中的甲法。

4.正交试验安排及结果  采用正交试验L₉(3⁴)表安排试验各因素水平，具体试验安排及结果见表11。由直观分析可见，影响包合效果的顺序为A＞B＞C；最佳包合工艺为A₂B₃C₂，即挥发油与β-环糊精的比例为1∶6，包合温度为50℃，包合时间为2h。

表11L₉(3⁴)正交实验方案及结果

5.验证试验  按正交试验筛选出的最佳工艺条件A₂B₃C₂进行验证，3批挥发油包含验证结果与正交试验结果相接近，包合物平均收得率为82.7％，RSD为1.2％；挥发油平均包合率为88.4％，RSD为1.6％。

实验例6本发明中药组合物镇痛药效学研究

1.镇痛实验(热板法)

将恒温水浴调至55℃，取1只500ml烧杯放置于水面，预热10min后，将质量为18-22g昆明种雌性小鼠80只，依次放入烧杯内，以小鼠放入烧杯至出现舔后足所需时间(s)为该鼠的痛阈值。凡舔后足时间小于5s或大于30s或跳跃者弃之不用。给药前先预测每只小鼠2次痛阈并求出均值。将筛选合格的小鼠60只，随机分为6组，即生理盐水组(0.2ml/10g)、阿司匹林肠溶片组(0.2ml/10g，相当于0.4g/kg)、腰痛宁胶囊组(0.2ml/10g，相当于0.4g/kg)、本发明中药组合物(实施例1所制备胶囊)高、中、低剂量组0.2ml/10g(分别相当于生药36g/kg、18g/kg、9g/kg)。按上述剂量分别灌胃，每日给药1次，连续3d，末次给药60min后，测定并记录各鼠给药后30，60，90，120，150min痛阈值。根据所测的痛阈值，按下列公式计算出用药后不同时间的痛阈提高百分率痛阈提高百分率＝[(用药后平均痛阈值-用药前平均痛阈值)÷用药前平均痛阈值]×100％。结果见表12。结果显示：本发明药物制剂(胶囊)对物理性热刺激引起的疼痛有明显镇痛作用，药后90min，镇痛作用最明显，痛阈提高百分率为68.24％，与阿司匹林肠溶片组相近(P＞0.05)，强于腰痛宁胶囊组(P＜0.05)。

表12对小鼠热刺激疼痛的影响(n＝10)

与生理盐水组比较△P＜0.05，△△P＜0.01，与腰痛宁组比较*P＜0.05

2.扭体法

取昆明种小鼠80只，体质量18-22g，雌雄各半，随机分为6组，即生理盐水组(0.2ml/10g)、阿司匹林肠溶片组(0.2ml/10g，相当于0.4g/kg)、腰痛宁胶囊组(0.2ml/10g，相当于0.4g/kg)、本发明药物(实施例1所制备胶囊剂)高、中、低剂量组0.2ml/10g(分别相当于生药36g/kg、18g/kg、9g/kg)。按上述剂量分别灌胃，灌胃1h后，腹腔注射0.5％醋酸溶液0.1ml/10g体质量，观察10min内各组小鼠扭体反应次数，按下列公式计算各药镇痛百分率。镇痛百分率＝[(对照组扭体反应次数一给药组扭体反应次数)÷对照组扭体反应次数]×100％。实验结果见表13。

表13对小鼠化学性刺激疼痛的影响(X+S，n＝10)

与生理盐水组比较△P＜0.05，△△P＜0.01，与腰痛宁组比较*P＜0.01

实验结果显示：本发明药物胶囊高剂量组对0.5％醋酸溶液腹腔注射引起的化学刺激性疼痛有一定的镇痛作用，抑制疼痛百分率为45.95％，弱于阿司匹林肠溶片，而与腰痛宁胶囊相当。

实验例7本发明中药组合物胶囊的动物急性毒性研究

选择健康昆明种小白鼠，以灌胃方法给药，观察胶囊的急性毒性反应，结果给药的最大耐受量＞15g/kg，相当于临床用药量的300倍。对照组给同等剂量的蒸馏水，连续服药7d。结果表明小白鼠的一般健康状况良好，毛色光滑，食欲正常，大便无异常，整个给药期间未出现动物死亡现象，实验结束后，给药组小白鼠平均体重增长率与对照组相同。

Claims (10)

1.一种制备治疗疼痛的中药组合物的方法，其特征在于，所述中药组合物由以下重量份的原料药制成：红花300-1200份、桃仁300-1200份、元胡300-900份、没药300-900份、当归300-1200份、川芎300-900份、牛膝300-1200份、地龙300-900份、羌活300-600份、秦艽300-600份、香附300-600份和甘草300-900份；其制备方法包括:

（1）川芎、红花、羌活、没药、当归和香附采用超临界CO₂萃取挥发油,将萃取的挥发油用环糊精进行包合；包合物干燥，研细，过筛，备用；其中，

所述超临界CO₂萃取挥发油的条件为：萃取压力20-40MPa、萃取温度25-45℃、萃取时间60-120min、CO₂流量15-25L/h、固定夹带剂为丙酮；

所述的包合是在以下条件下采用包合水溶液法包合：按照ml/g计，挥发油与β-环糊精的比例为1：4-8，包合温度30-50℃，包合时间1-3h；

（2）秦艽、牛膝和元胡用乙醇回流提取，提取液滤过，滤液减压浓缩；浓缩物稀释，稀释液经过大孔树脂吸附，以30%-80%乙醇洗脱，洗脱液减压回收，浓缩，真空干燥，粉碎成细粉，过筛，备用；其中，

所述乙醇回流提取的条件为：加入原料药总质量6-10倍的50%-70%乙醇回流提取3次，提取时间每次为1-3h；加原料药8倍质量的60％乙醇，加热回流，提取3次，每次2h；

所述的浓缩为浓缩至60-70℃测定时相对密度为1.15-1.20的清膏；

所述稀释液上大孔树脂的上样量为50mL；

（3）将桃仁、甘草、地龙与步骤（1）和（2）的药渣用水煎煮，煎液滤过，浓缩；浓缩液经过大孔树脂吸附，用50%-70%乙醇洗脱，洗脱液减压回收，继续浓缩至清膏，真空干燥，粉碎成细粉，过筛备用；其中，

所述煎煮是将步骤（1）、（2）的药渣和桃仁、甘草、地龙加入原料药总质量6-10倍的水煎煮3次，每次煎煮1-3h；

所述浓缩为浓缩至60-70℃测定时相对密度为1.15-1.20的清膏；

所述浓缩液上大孔树脂的上样量为50mL；

（4）将步骤（1）所得到环糊精包合物以及步骤（2）和（3）所得到的细粉与药物制剂辅料混均后，制成药物制剂半成品，将半成品制成颗粒剂或胶囊剂。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述超临界CO₂萃取挥发油的条件为：萃取压力为30MPa、萃取温度35℃、萃取时间120min、CO₂流量25L/h。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述环糊精包括ɑ-环糊精、β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟乙基-β-环糊精、二甲基-β-环糊精、单琥珀酸-二甲基-β-环糊精、6-羧甲基-β-环糊精或γ-环糊精。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（1）中所述的包合是在以下条件下采用包合水溶液法包合：挥发油与β-环糊精的比例为1：6，包合温度50℃，包合时间2h。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）或（3）中的大孔吸附树脂选自AB-8大孔吸附树脂、X-5大孔吸附树脂、DM-301大孔吸附树脂或NKA-9大孔吸附树脂。

6.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）或（3）中以70％乙醇为洗脱溶剂。

7.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中所述药物制剂辅料为乳糖、糊精、微晶纤维素或淀粉。

8.按照权利要求7所述的方法，其特征在于：步骤（4）中所述药物制剂辅料为由微晶纤维素和淀粉按任意比例所组成的混合物。

9.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（2）或步骤（3）中所述的真空干燥为在温度为65-75℃，压力为-0.08MPa--0.1MPa的条件下进行真空干燥。

10.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中将半成品制成颗粒剂时用挤压法制成颗粒。

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