TWI325323B - Cross-linked glycopeptide-cephalosporin antibiotics - Google Patents

Description

玖、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係針對新穎瘦$撕少 叮禾、，，工夂耳外之醣肽—頭孢菌素化合物，其可 為生素使用。本發明亦針對包含此種化合物之醫藥組 «物’使用此種化合物作為抗細菌劑之方法；及製備此種 化合物之方法與中間物。 【先前技術】 不同種類之抗生素化合物係為此項技藝中已知，包括例如 少内醒胺抗生素，譬如頭孢菌素’與醣肽抗生素，孽如萬 古黴素。經交聯之抗生素化合物亦為此項技藝中已知。參 閱本例如頒予W.L.T誠之美國專利诚，791，且其標題為”抗 製備万法”；及1999年12月16日公告之w〇99/_a1 ’且其標題為”新賴抗細菌劑”。 儘管^此種化合物，仍需要具有經改良性質之新穎抗生素 丄舉例言之，係、包括增加抵抗革蘭陽性細菌之功效。特定 I之’仍需要新穎抗生素，其係高度有效抵抗細菌之抗生 素抗藥性菌種，譬如對二〒氧基苯青黴素具抗藥性之金黃 色葡萄球菌（MRSA)。 【發明内容】 本發明係提供新穎經交聯之醣肽—頭孢菌素化合物其可 作為抗生素使用。在其他性質中，已發現本發明化合物具 有令人驚訝且令人意外之抵抗革蘭陽性細菌之功效，包括 對二甲氧基苯青黴素具抗藥性之金黃色葡萄球菌㈧說)與 對二甲氧基苯青黴素具敏感性之金黃色葡萄球菌卿〜。 85466 1325323 ’其係提供式I化合物：

因此，在本發明組合物方面之—中， 或其藥學上可接受之鹽，其中 R1 為-Ya-(W)n.Yb_ ; R2為氫或_ 6燒基； 各R3係獨立選自包括Ci 6烷基、c2 6烯基、c2 6炔基、q 6 裱燒基、C6-10芳基、C2-9雜芳基、（：3_6雜環族及Ra ;或兩個 相鄰R基團係連接而形成C3·6次燒基或-CKC! _6次烷基; 其中各坟•基、次烷基、烯基及炔基係視情況被1至3個獨立 85466 1325323 選自包括ρ與π之取代基取代；且各芳基、環烷基、雜芳基 及雜環族基團係視情況被1至3個獨立選自包括妒之取代基 取代； R4為氫或（:^燒基； R5為氫或C! _ 6燒基； R6 為-Ya-(w)n-Y、； R7為氫或(^_6烷基； R8為共價鍵或-Ye _(w)n -Yd -; R9與R10之一為羥基，而另一個為氫； R11與R12係獨立為氫或甲基； R13為氫或式(i)基團： ΗΧ NH, H0 丫、 h3c 人 0^/ ) 各 w 係獨立選自包括-〇_、_N(Rd)_、_s_、s(〇)_、s(〇)2_、q 6 次環燒基、c6-10次芳基及C2-9次雜芳基；其中各次芳基、次 環燒基及次雜芳基係視情況被1至3個獨立選自Rb之取代基 取代； X1與X2係獨立為氫或氯基； 各ya與Yb係獨立aCi_5次烷基，或當w為次環烷基、次芳 基或次雜芳基時，各ya與Yb係獨立選自包括共價鍵與Ci5次 燒基；其中各次烷基係視情況被1至3個獨立選自-〇Rd、-NRdRe 、-C02 Rd、-C(0)NRd Re 及-S(0)2 NRd Re 之取代基取代； 各YC與Yd係獨立為次烷基、c3_6次環烷基、c6_1G次芳 85466 -9- 1325323 基及C2_9次雜芳基，或當w為次環烷基、次芳基或次雜芳基 時，各Yc與Yd係獨立選自包括共價鍵與Ci _ 5次烷基；其中各 次烷基係視情況被1至3個獨立選自-0Rd、-NRdRe、_c〇2Rd、-C(0)NRdRe及-S(0)2NRdRe之取代基取代，且各次芳基、次環烷 基及次雜芳基係視情況被1至3個獨立選自Rb之取代基取代； 各Ra係獨立選自包括-ORd、鹵基、_SRd、_s(〇)Rd、_S(〇)2 Rd -S(0)20Rd ' -S(0)2NRdRe > -NRdRe n -C02Rd ' -〇C(0)Rd ' -C(0)NRdRe -NRdC(0)Re ' -0C(0)NRdRe ' -NRdC(0)0Re - -NRd C(0)NRd Re ' -CF3 及-〇CF3 ; 各Rb係獨立選自包括C!_6烷基、c2_6晞基、c2_6炔基及Ra ; 各Re係獨立選自包括C3_6環烷基、C6_1()芳基、C2-9雜芳基 及C：3·6雜環族；其中各環烷基、芳基、雜芳基及雜環族基團 係視情況被1至3個獨立選自包括。—6烷基與Rf之取代基取代； 各Rd與Re係獨立選自包括氫、Ci 0烷基、C2 6婦基、Q 6炔 基、C3-6環烷基、c6_1()芳基、c2_9雜芳基及c3_6雜環族；或!^ 與Re係與彼等所連接之原子一起接合，以形成。^雜環具 有1至3個雜原子，獨立選自氧、氮或硫；其中各烷基、晞 基及块基係視情況被1至3個獨立選自包括RC與圮之取代基 取代’且各芳基' 環燒基、雜芳基及雜環族基團係視情況 被1至3個獨立選自包括Ci 6烷基與圮之取代基取代； 各Rf係獨立選自包括_〇H、-OCV6烷基、-SC^烷基、孑、_ C1、·ΝΗ2 ' -NH% 6烷基）、_N(Ci 6烷基）2、_〇c(〇)Ci 6烷基、· QOPCu 烷基、6 烷基、_c(〇)〇H、七(〇)^私、_ C(0)NHC卜 6 烷基、-CCCONCCu 烷基）2、-CF3 及-〇CF3 ; 85466 -10- 1325323 在一項較佳具體實施例中，上述方法進一步包括形成式i 化合物之藥學上可接受鹽之步驟。本發明亦針對藉由本文 中所述之任何方法所製成之一或多種產物。 本發明亦針對式I化合物或其藥學上可接受之鹽，供使用 於治療上。此外，本發明係針對式I化合物或其藥學上可接 受之鹽於製造藥劑以治療哺乳動物中之細菌感染上之用途。 發明詳述 本發明係提供新穎式I醣肽一頭孢菌素化合物或其藥學上 可接受之鹽。此等化合物具有多重對掌中心，且關於此點 ，化合物係意欲具有所示之立體化學。特定言之，化合物 之醣肽部份係意欲具有相應天然生成醣肽（意即萬古黴素、 氯基取向黴素等）之立體化學。此分子之頭孢菌素部份係意 欲具有已知頭孢菌素化合物之立體化學。但是，熟諳此藝 者應明瞭的是，具有與所示者不同立體化學之少量異構物 ，可存在於本發明之組合物中，其條件是組合物整體之利 用性，不會顯著地因為此種異構物之存在而被減縮。 此外，本發明化合物之連結部份可含有一或多個對掌中心 。典型上，分子之此部份係被製成外消旋混合物。但是， 若需要，可使用純立體異構物（意即個別對掌異構物或非對 映異構物），或可採用富含立體異構物之混合物。所有此種 立體異構物與富含之混合物，均包含在本發明之範圍内。 此外，本發明化合物含有數個酸性基團（意即羧酸基）與數 個鹼性基團（意即一級與二級胺基），因此，式I化合物可以 各種鹽形式存在。所有此種鹽形式均包含在本發明之範圍 85466 -13- 内π由於式Ϊ化合物含有讀環，故對捕基之陰離子性 ::離子可視情況存在，包括但不限於画才艮，譬如氯根； 永私根，譬如醋酸根等。 再者，熟諳此藝者應明瞭的是，由於其不安定性而缺乏任 何利用性之易變或化學上不安定之化合物，並未被包含在 本發明I範圍内1如’式〖化合物較佳係在連結部份基團 中含有至少兩個碳原子，介於任何氧⑼、氮(_Ν<)或硫⑼ 原子《間’因為當此等原子被單—碳原子分隔時，所形成 《化合物(意即含有縮醛、半縮醛、縮酮、半縮酮、胺醛' 半胺醛或硫縮酮等）在酸性條件下可能為水解上不安定。 較佳具體眘施你丨 在式I化合物中，下列取代基與意義係為較佳： 在一項較佳具體實施例中，R1*_Ya_(w)n_Yb_，其中η*0 ，意即W為-Ya-Yb_。在此具體實施例中，”與妒係獨立為&_5 次烷基，其中各次烷基係視情況被丨至3個獨立選自如本文 中定義之-ORd、视七、_〇)2Rd、·哪難化及柳㈣^之 取代基取代。較佳情況是，”與沪係獨立選自Ci 3次烷基； 且更佳為心-2次烷基。更佳情況是，”與沪係連接在一起（ 意即R1)，以形成-(CH2)2·8·基團。又更佳情況是，¥3與炉係 連接在一起’以形成-(ch2)2- ' _(CH2)3·、『Μ 、 或-(CH2 )6 -基團。在一項特佳具體實施例中，γ與0係於rJ 中連接在一起，以形成-(CH2)3-基團。 在另一項較佳具體實施例中，R，為_Ya_w_Yb_ ,意即當11為1 時。在此具體實施例中，與沪係獨立為Cid次垸基7或當 85466 -14- 1325323 w為次環烷基、次芳基或次雜芳基時，”與yb係獨立選自 包括共價鍵與c^5次烷基。在此具體實施例中，各次烷基係 視情況被1至3個選自如本文中定義之_〇Rd、、_CG)2Rd 、-C(0)NRdRe及之取代基取代。當¥3或妒為次烷 基時^人心基較佳為Q ―3次基；更佳為q _2次燒基；又更 佳為-(CH2)〗-2-基團。在一項特佳具體實施例中，ya與炉均 為-CH2·，且胃為仏-^次芳基，視情況被1至3個獨立選自如 本文中定義之妒之取代基取代；更佳情況是，*為次苯基 。在另一項較佳具體實施例中，”與炉均為_cH2cH2_，且冒 為-0- 〇 較佳R2為氫或q -3烷基。更佳R2為氫。 ^存在d時，各R3較佳係獨立選…烷基、。6環烷基、_ ORd、_SRd、_F5Va;或兩個相鄰r3基團係連接以形成^ —次 烷基。 較佳R4為氫或ci-3烷基。更佳R4為氫β R5較佳為氫或ci-3烷基。更佳R5為氫。 、較佳具體貫施例中’ R64 _Ya<W)n_Yb_， 意即R6為HY、），且Ya^Yb的1太、A M ，、T马 《 與均如本又定義。較佳情況是，Ϊ :尸/、：rY?Cl·3次燒基；且更佳為Ci，2次垸基。更㈣ ^更佳=接在-起（意即η，㈣成偶)"-基座 。又更佳情況是，Ya與Yb係 起，以形成-d、 2 3 切2 )4 _、-(CH2 )5 -或-(cjj，)< ·甚圓 ju 私㈣士 2尨飞（u：l2)6基图。在一項特佳具韻 男施例中’於R6中之ya與b 基團。 係連接在—起，以形成-(ch2)2-85466 -15· 1325323 在另一項較佳具體實施例中，r6為_ γ3 _ w_ Yb _，意即當n為 1時，且丫與0均如本文定義。在此具體實施例中，當ρ或 Yb為次烷基時，次烷基較佳為Ci3次烷基；更佳為次烷 基，又更佳為-(CH2 )】_2 -基團。在一項特佳具體實施例中，ya 與 Yb 均為-CH2 CH2 -，且 w 為-〇-。 較佳R7為氫或C!-3烷基❶更佳R7為氫。 在一項較佳具體實施例中，R8為_γ(;_(^η_γ£ΐ_，其中n為〇 ( 意即R8為-P-Yd-)，且¥。與0均如本文定義。較佳情況是， 在此具體實施例中，Y。與Yd係獨立選自Ci 3次烷基；且更佳 為<^-2次烷基。更佳情況是，^與#係連接在一起（意即rS) ，以形成-(CH2)2_10-基團。又更佳情況是，¥。與¥(1係連接在 一起，以形成-ch2-、-(ch2)2-、-(Ch2)3-、·(αί2)4-、_(Ch2)5- (CH2)6·、-(CH2)7-或-(CH2)8-基團。在一項特佳具體實施例 中，Yc與Yd係連接在一起，以形成_(CH^_基團。 在另一項較佳具體實施例中，r8為_Yc_w_Yd·，意即其中n 為1，且Y與yd均如本文定義。在此具體實施例中，當或 Yd為次燒基時，各次垸基較佳為Ci3M基；更佳為^ 2次 烷基，又更佳為-(CH2)1-2_基團。在一項特佳具體實施例中 ’ γ與Yd均為偶_，且W4c6]〇次芳基，視情況被m固 獨立選自如本文中定義之妒之取代基取代；更佳w為次苯 基。 在另項幸父佳具體實施例中，Yc與Yd均為基團； 較佳為-CH2 -基團；及w為_〇·。 在又另一項較佳具體實施例中，Yc與Yd均為C6,次芳基 85466 -16- 丄⑽323 視h況被1至3個獨立選自如本文中定義之Rb之取代基取 代；且W為-〇-、_N(Rd)…_s_、_s(〇)或_s(〇)2 _ ;更佳情況是 ，Ye與Yd均為次苯基，且w*_s(〇)2_。 於又再另一項較佳具體實施例中，丫。與Yd均為共價鍵，且 W為C6,次芳基，視情況被i至3個獨立選自如本文中定義 取代基取代；更佳w為次苯基。 在一項較佳具體實施例中，R9為羥基，且Rl 〇為氫。在另 —項較佳具體實施例中，R9為氫，且尺1()為羥基。 較佳R11為氫，且Ri2為甲基。 較佳Rl3為氫。在其他個別具體實施例中，R13為式i(a)基團 :或R13為式i(b)基團：

H〇：：X ,·3 ' NH. HO''、 H,C' i(a) * /t_\ 較佳情況是，χ1與χ2之-為氯基，而另-個為氫；或兩看 均為氯基。更佳情況4，X1與χ2均為氣基。 .在-項較佳具體實施例中’ R9為㈣；R1G為氫；R11 ，R12為甲基；R13左& . . R為虱，且χΐ與X2均為氯基（意即醣肽部 為萬古黴素卜 & 好在另-項較佳具體實施例中，r9為氫；ri。賴基；尺 及：R為甲基，Rl3為式(i)基團；且X1與X2均為氯基(意即 聽肽邵份為氣絲向黴素或纖46b)。 p 當存在時，W較佳為邮或i，4-次苯基、' _N^ 85466 -17- 1325323 s-、-s(o)-或-s(o)2-。 在-項較佳具體實施例中，m為0。在另一項較佳具體實 施例中m為1或2 ’更佳為J。在又另一項較佳具體實施例 中，m為2，且兩個R3基團係連接以形成Gw次燒基；更佳 為C3 · 4次燒基。 一組較佳式I化合物為其中R2、R4、以及尺7為氫；R9為羥 基；R10為氫；R"為氫；Rl2為甲基；Rl3為氫；χ^χ2均為 氯基HYMW)n-Yb-，其中，且Y^Yb係連接在一 起，以形成-(CH2)2_8-基團；R6為_Ya_(W)n_Yb_，其中n為〇， 且Ya與Yb係連接在一起，以形成成％)2 8基團；RS為_YC· (W)n-Yd_ ’其中n*〇，且¥。與#係連接在—起，以形成_ (CH2)2_10-基團；及”與爪係如本文中定義；或其藥學上可 接爻又鹽。在此具體實施例中，Ri (意即”與炉一起採用）較 佳為-(CH2)2·、-(CH2)3·、_(CH2)4·、基團； 更佳為-(CH2)3·; R6(意即ya與Yb 一起採用）較佳為_(ch^· ' -(ch2)3-、_(Ch2)4_、_(CH2)5_4_(CH2)6 基團；更佳為2)2_ ;圮（意即P與妒一起採用）較佳為π% h ·、_(CH2 h _、_(cH2 & _ 、仰2)5_或_(CH2)6-基圈；更佳為仰2)4;及瓜較佳為〇。 另一組較佳式“匕合物為其中圮〜尺^”及^為氫丨妒為 經基；H10為氫；R11為氫；R12為甲基；Rl3為氫；^與^均 為氣基：且心^^於及瓜係如幻中之定義’或其藥 學上可接受之鹽。 85466 -18- 1325323 表i 實例 編號 R1 R3 m R6 R8 1 -CH2CH2CH2- --- 0 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 2 -ch2ch2ch2- 2-CH3- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 3 -ch2ch2ch2- 3-CH3- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 4 -ch2ch2ch2- 4-CH3- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch,ch2- 5 -ch2ch2ch2- 2-CH30- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch,ch2- 6 -ch2ch2ch2- 3-CH30- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 7 -ch2ch2ch2- 4-CH30- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch 厂 8 -ch2ch2ch2- 2-CH3S- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 9 -ch2ch2ch2- 3-CH3S- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 10 -ch2ch2ch2- 4-CH3S- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 11 -ch2ch2ch2- 2-F- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 12 -ch2ch2ch2- 3-F- 1 _ch2ch2_ -ch2ch2ch2ch2- 13 -ch2ch2ch2- 4-F- 1 -ch2ch2- - ch2ch2ch2ch2- 14 -ch2ch2ch2- 2-C1- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 15 -ch2ch2ch2- 3-C1- 1 _ch2ch2- -ch2ch2ch2ch:- 16 -ch2ch2ch2- 4-C1- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 17 -ch2ch2ch2- 2-Ph-1 1 _ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 85466 19- 1325323 實例 編號 R1 R3 m R6 R8 18 -ch2ch2ch2- 3-Ph- 1 -ch2ch2- -CH2CH2CHjCH2- 19 -ch2ch2ch2- 4-Ph- 1 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 20 -ch2ch2ch2- 4-cyclopropyl- 1 -ch2ch2- -CHjCH2CH2CH2- 21 -ch2ch2ch2- 2,3-di-CH3- 2 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 22 -ch2ch2ch2- 3,4-di-CH3- 2 -ch2ch2_ -CHjCH2CHjCH2- 23 -ch2ch2ch2- 3,5-di-CH3- 2 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 24 -ch2ch2ch2- 3,4-di-CH30- 2 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 25 -ch2ch2ch2- 3-CH3.4-CH3O- 2 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 26 -ch2ch2ch2- 3-CH3O-4-F- 2 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 27 -ch2ch2ch2- 2,3-[-(CH2)4-] 2 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 28 -ch2ch2ch2- 2,3-[-(CH2)3-] 2 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 29 -(CH2)20(CH2)2- … 〇 -ch2ch2- -ch2ch2ch2ch2- 30 -CH2CHjCH2- -- 〇 -ch2ch2- -CH2-1,2- (-Ph-)-CH2-2 31 -ch2ch2ch2- — 0 -CHjCH2- l,3-(-Ph-)3 32 -ch2ch2ch2- -- 〇 -ch2ch2- l,4-(-Ph-)-S02- l，4-(-Ph-)4 33 -ch2ch2ch2- 0 -(CH2)20(CH2)2- l,4-(-Ph-) 34 -ch2ch2ch2- -- 0 -(CH2)2〇(CH2)2- -CH2OCH2- 1 Ph=苯基 2 l，2-(-Ph-) = 1，2-次苯基 3 l，3-(-Ph-) = 1,3-次苯基 4 l，4-(-Ph-)=l，4-次苯基 在式II中間物中： Q較佳為鹵基或所定義之p比鍵基。 P1較佳為氫或第三-丁氧羰基。 P2較佳為氫或三苯甲基。 85466 -20- p3較佳為氫或對-T氧基笮基。 包括任何較佳鼻體

Rl、R2、R3及m較佳係如本文中定義 實施例、取代基或意義。 在式III中間物中·· P1較佳為氫或第三_ 丁氧羰基。 P2較佳為氫、甲醯基或三苯甲基。 P較佳為氫、Cl_4烷基或對-甲氧基芋基。 R1與R2較佳係如本文中定義，包括任何較佳具體實施例、 取代基或意義。 定義 田私述本發明之化合物、組合#、方法及製程日寺，下述術 語具有下述意義，除非另有指出。 烷基1 一词係指單價飽和烴基，其可為線性或分枝狀。除 非另有定義，否則此種烷基典型上含有1至1〇個碳原子。代 表性烷基，舉例言之，係包括甲基、乙基、正·丙基、異丙 基、正-丁基、第二·丁基、異丁基、第三·丁基、正戊基、 正-己基、正-庚基、正·辛基、正·壬基、正_癸基等。 /入烷基"一詞係指二價飽和烴基，其可為線性或分枝狀。 除非另有定義’否則此種次烷基典型上含有1至1〇個碳原子 。代表性次烷基，舉例言之，係包括亞曱基、乙烷i，：二基（" /入乙基）、丙燒_1，2_二基、丙燒'3-二基、丁坑4,4二基、戊 烷-1，5-二基等。 "缔基”一詞係指單價不飽和烴，其可為線性或分枝狀，且 其具有至少一個’而典型上為1、2或3個礙-碳雙鍵。除非 85466 -21- 1325323 另有疋钱，否則此種埽基典型上含有2至10個碳原子。代表 F ’希基舉例έ之，係包括乙烯基 '正·丙晞基、異丙缔基、 正-丁_2·烯基、正-己-3-烯基等。 "故其” 一— 土 巧係指單價不飽和烴’其可為線性或分枝狀，且 其具有至少—個，而典型上為丨、2或3個碳-碳參鍵。除非 另有定義，否則此種炔基典型上含有2至1〇個碳原子。代表 性炔基’舉例言之，係包括乙炔基、正-丙炔基、正-丁 -2.炔 基、正_己-3-炔基等。 "芳基”一詞係指單價芳族烴，具有單環（意即苯基）或稠合 垓（意即莕）。除非另有定義，否則此種芳基典型上含有6至 10個碳％原子。代表性芳基，舉例言之，係包括苯基與萘小 基、莕-2-基等》 〜芳基一祠係指二價芳族烴，具有單環（意即次苯基）或 網合環（意即苯二基）^除非另有定義，否則此種次芳基典 型上含有6至1〇個碳環原子。代表性次芳基，舉例言之，係 包括1，2-次苯基、1，3_次苯基、丨，4_次苯基、苯·丨，5二基、莕_2,7_ 二基等。 ’ "環烷基”一詞係指單價飽和碳環族烴基。除非另有定義， 否則此種環烷基典型上含有3至1〇個碳原子。代表性環烷基 ，舉例5之，係包括環丙基 '環丁基、環戊基、環己基等。 次環燒基一闲係指二價飽和碳環族烴基。除非另有定義 ，否則此種次環烷基典型上含有3至1〇個碳原子。代表性次 環燒基，舉例s之，係包括環丙燒_ι，2·二基、環丁基_i 2_二 基、環丁基-1,3-一基、環戊基_丨，2_二基、環戊基-i，3-二基、環 85466 -22· 1325323 己基-1,2-二基、環己基ί 一 詞係指氯基1基及二基w —基寺。 雜方基”一詞係指單價芳 ，且在環中含有至少-個 團，具有單環或兩個稠合環 ，選自氮、氧或硫。除非另：子(典型上為1至3個雜原子) 上含有總共5至1G個環料定義，否則此種雜芳基典型 ^ 上 予。代表性雜芳基，舉例言之，作 L括卩比洛、味嗅、碟、 係 亏唾、呋喃、噻吩、r峙、心u 、異噚唑、異嘍唑、吡 一唑吡唑 p比嗜、塔哨：、喊咬、= 哚、苯并呋喃、苯并噻吩、 一井、吲 思太* 本并咪唾、苯并噏唑、喹啉、 異喳啉、喹唑啉、喹噚啉 堂体 <單h物種，其中連接& & + 任何可採用之碳或氮環原予處。 要站係在 "次雜芳基"一詞係指二價$ 不秩基團，具有單環或兩個 %，且在環中含有至少一個4 σ 固雜原子（典型上為1至3個雜原子 ，選自氮、氧或硫。除非另有金墓 有疋義，否則此種次雜芳基血 型上含有總共5至10個環原子。 w衣席予。代表性次雜芳基，舉例士之 ，係包括…咪吐”塞啥”号唾、吱喃違吩、三二比 吃、異以、異魂唾”比咬H答L三呼、 ㈣、苯并吱喃、苯并，塞吩、苯并味嗤、苯并遠唾”奎啉 、異峻淋”奎吐琳”奎啊等之二價物種，其中連接點係 在任何可採用之碳或氮環原子處。 "雜環基”或"雜環族"-詞係指單價飽和或不飽和（非芳族） 基團，具有單環或多重縮合環，且在環中含有至少一個雜 原子（典搜上為1至3個雜原子），選自氮、氧或硫。除非另 有定義，否則此種雜環族基團典型上含有總共2至9個環原 85466 •23· 1325323 子。代表性雜環族基團，舉例言之，係包括四氫吡咯、四 氫咪唑、四氫吡唑、六氫吡啶、丨，4_二氧陸圜、嗎福啉、硫 代馬福林’、虱p比p井、3- —氣p比洛等之單價物種，其中連接 點係在任何可採用之碳或氮環原子處。 頭孢菌素”一珂係於本文中以其技藝上認定之方式用以指 稱/5-内醯胺環系統，其具有下列通式與編號系統：

醣肽抗生素或"醣肽”一詞係於本文中以其技藝認定之 方式用以指稱被稱為醣肽或達巴肽之抗生素種類。參閱， 例如R. Nagarajan，"醣肽抗生素"，Marcd Dekker公司（1994)，及其 中引述〈參考資料。代表性醣肽包括萬古黴素、a82846a (依 瑞莫黴素）、A82846B (氯基取向黴素 A)、A82846c、pA_42867_A (取向黴素 A)、PA-42867-C、PA-42867-D 等。 ’’萬古黴素"-詞祕本文中以其技藝上認定之方式用以指 稱被稱為萬古黴素之醋肽抗生素。當在本發明化合物中採 用萬古黴素時，連結部份基團之連接點為在位置c_29處之胺 土酸（AA 7)。此位置有時亦被稱為萬古黴素之或"間苯 二酚”位置。 ”藥學上可接受之鹽"-詞，係、指對病患譬如哺乳動物之投 藥上可接受之鹽（例如對特定劑量服用法具有可接受之哺乳 動物安全性之鹽）。此種鹽可衍生自藥學上可接受之無機或 85466 ，24· 1325323 有機鹼類，及藥學上可接受之盔機 …璣或有機酸類。衍生自藥 子上可接受之無機鹼類之鹽，包 已栝鋁、銨、鈣'鋼、鐵、 亞鐵、鋰、鎂、疑、亞錳、卸、也 健钟鈉、辞等。特佳者為按、 齊、鎂、奸及納鹽。衍生自藥學上可接受之有機驗類之瞒 :包括以下物質之鹽，-級、二級及三級胺類，包括經： 代之胺類、環狀胺類、天然生成之胺類等，譬如精胺酸、 甜菜驗、咖賴、膽驗、N，N，.二爷基乙二胺、二乙胺、2_二 :胺基乙醇、2-二甲胺基乙醇、乙哮胺、乙二胺、N•乙基嗎 彻：、N-乙基六氫吡啶、葡萄糖胺、胺基葡萄糖、組胺酸 海巴胺、異丙胺、離胺酸、甲基葡萄糖胺、嗎福淋、六 氫吡啡、A氫吡啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可鹼 、二乙胺、三甲胺、三丙胺、丁三醇胺等。衍生自藥學上 可接受酸類之鹽，包括醋酸、抗壞血酸、苯磺酸、苯甲酸 、樟腦績酸、檸檬酸、乙燒績酸、反丁晞二酸、葡萄糖酸 &葡萄糖醛酸、麩胺酸、馬尿酸、氫溴酸、鹽酸、羥乙磺 鮫、乳酸、乳基生物酸、順丁烯二酸、蘋果酸、苯乙醇酸 完續酸、黏酸、莕橫酸、於驗酸、硝酸、雙鮮酸、 <私，鱗酸 '琥j白酸、硫酸、酒石酸、對-曱苯績酸等。特 佳者為擰檬酸、氫溴酸、鹽酸、順丁烯二酸 '磷酸、硫酸 及酒石酸。 s其鹽”一同係指當酸之氫被陽離子譬如金屬陽離子或有機 陽離子等置換時’所形成之化合物。此鹽較佳為藥學上可 接文《鹽’惟這·中間化合物之鹽是不需要的，其並非欲 投予病患。 85466 -25- 1325323 "治療上有效量”一詞 以達成治療之量。 係指當投予需要治療之病患時，足 於本文中使用之，，進行治療"或"治療作業”一詞，係 病患譬如哺乳動物（特別是人類或㈣動物）中之疾病^ 療症狀(譬如細菌感染)之進行治療或治療作業，其包括： ⑻預防疾病或醫療症狀發生，意即病患之預防治療；’ ⑼改善疾病或醫療症狀，意即排除病患中之疾病或醫療 症狀或造成其復原； ⑹抑制疾病或醫療症狀，意即減慢或遏制疾病或醫療症 狀在病患中之發展；或 ⑹減輕疾病或醫療症狀在病患中之徵候。 "生長抑制量I’ —詞係指足以抑制微生物之生長或複製 足以造成微生物之死亡或溶菌作用之量，Λ包括革蘭陽性 細菌。 ”細胞壁生物合成抑制量"一詞係指足以在微生物包括革蘭 陽性細菌中抑制細胞壁生物合成之量。 ，，脫離基"一詞係ϋ能基或原+，其可在減反應譬如親 核性取代反應中，被另一種官能基或原子置換。舉例言之 ，代表性脫離基包括氯基、溴基及碘基；及磺酸酯基，譬 如甲烷磺酸酯、曱笨磺酸酯、溴磺酸酯、壬烷磺酸酯等； 經活化酯基，譬如7-氮苯并三唑小氧基等；醯氧基，譬如乙 醯氧基、三氟乙醯氧基等。 其經保護之衍生物"一詞係指特定化合物之衍生物，其中 該化合物之一或多個官能基係被保護或阻斷基團保護，而 85466 •26· 1325323 免於不想要之反應。可被保護之官能基，舉例言之，係包 括羧酸基、胺基、羥基、硫醇基、羰基等。對羧酸類之代 表性保護基包括醋類（譬如對·甲氧基亨醋）、醯胺類及醯胼 ;對胺基，為胺基甲酸酯類（譬如第三-丁氧羰基）與醯胺類 ;對羥基，為醚類與酯類；對硫醇基，為硫醚類與硫酯類 ;對羰基，為縮醛類與縮酮類等。此種保護基係為熟諳此 藝者所習知，且係描述於例如τ俽(31^此與（5 M Wuts,才满舍 A _ii之获護基，第三版，Wiley, New York, 1999,及其中引述之參考 資料中。 · "胺基保護基”一詞係指適合在胺基處預防不想要反應之保 護基。代表性胺基保護基包括但不限於第三-丁氧羰基（B〇C) 、三苯曱基（Tr)、芊氧羰基（Cbz)、9_第基甲氧羰基(Fm〇c)、甲 醯基、二甲基矽烷基（TMS)、第三-丁基二甲基矽烷基（TBS) 等。 '•羧基保護基，，一詞係指適合在羧基處預防不想要反應之保 護基。代表性幾基保護基，包括但不限於醋類，譬如甲基 籲 、乙基、第三-丁基、芊基(βη)、對-甲氧基芊基、9_蔡 基甲基（Fm)、三甲基矽烷基（TMS)、第三_ 丁基二曱基矽烷基 (TBS)、二苯基甲基（二苯甲基，DPM)等。 一般合成栽年 本發明之經交聯之醋肽一頭孢菌素化合物，可使用下文一 般方法與程序’製自易於取得之起始物質。應明瞭的是， 在給予典型或較佳處理條件（意即反應溫度、時間、反應物 之莫耳比、溶劑、壓力等）之情況下，其他處理條件亦可使 85466 • 27- 1325323 與純化，譬如沉澱作用與逆相HPLC。適用於此反應之二胺 之代表性實例，包括但不限於乙二胺、1>2_二胺基丙烷、丨，3_ 二胺基丙烷、1，4-二胺基丁烷、丨，5_二胺基戊烷、丨，6_二胺基 己烷、N-甲基乙二胺' N，N，-二甲基乙二胺等。此種二胺可 市購得自Aldrich或其他商用化學品供應商。或者，此種二胺 可使用習知程序及市購可得之起始物質與試劑製備。若需 要，不對稱二胺類（意即其中尺5似7為$同）可以適當胺保護 基譬如第三-丁氧羰基（B〇C)單保護，以控制此反應之區域化 學。 適用於此反應之代表性醛類，舉例言之，係包括甲醛、乙 醛、丙醛、丁醛等。當在此反應中採用甲醛時，典型上係 將甲醛叫、加在水溶液中，例如作成在水中之π重量％溶液 ，視情況含有約5至約15重量％甲醇（意即福馬林）。 同樣地， 為市購可得 質與試劑。 在本發明化合物製備中所採用之式二羧酸類係 ，或可使用習用程序，製自市購可得之起始物 例如，適當二羧酸類，舉例言之，係包括丙二 酸、琥珀酸、甲基琥珀酸、戊二酸、3-甲基戊二酸、己二酸 、庚，酸' 辛二酸、壬二酸、癸二酸、十一烷二酸、十二 院二酸、環己垸二幾酸' U-環己燒二羧酸、1+環己燒 一羧酸鄰苯二甲酸、間苯二曱酸、對苯二甲酸、I]-笨一 醋酸、1，3_苯二醋酸、1>4.苯二醋酸、2,5〇塞吩二幾酸、& 症二甲酸、9 < . 2,6-吡哫二甲酸、二乙醇酸、（4•羧基苯基）砜等 麥久酸類可市購得自例如Aldrich或其他商用化皋。 應商。 子叩供 85466 •36· 1325323 鹽。 任何習用載劑或賦形劑，均可使用於本發明之醫藥組合物 中。特定載劑或賦形劑之選擇，或載劑或賦形劑之組合， 係依用以治療特定病患或細菌感染類型之投藥模式而定。 關於此點，對特定投藥模式之適當醫藥組合物之製備，譬 如口服、局部、吸入或非經腸投藥，係良好地在熟諳醫藥 技藝者之技術範圍内。此外，此種組合物之諸成份可市購 得自例如 Sigma，P.O. Box 14508, St. Louis, Mo 63178。藉由進一步說 明，習用調配技術係描述於及武#桌存學，Mace出版 公司，Philadelphia，PA,第 17 版（1985)與"踴代農桌學"，Marcel Dekker 公司，第 3 版（G.S. Banker & C.T· Rhodes 編著）。 本發明之醫藥組合物典型上含有治療上有效量之式I化合 物或其藥學上可接受之鹽。典型上，此種醫藥組合物係含 有約0.1至約90重量％活性劑，而更一般性地為約10至約30 %活性劑。 本發明之較佳醫藥組合物係為適用於非經腸投藥者，特別 是靜脈内投藥。此種醫藥組合物典型上包含無菌、生理學 上可接受之水溶液，其含有治療上有效量之式I化合物或其 藥學上可接受之鹽。 適用於活性劑靜脈内投藥之生理學上可接受之載劑水溶液 ，係為此項技藝中所習知。此種水溶液，舉例言之，係包 括5%右旋糖、林格氏溶液（經乳酸化之林格氏注射液、經乳 酸化之林格氏液加上5%右旋糖注射液、經醯基化之林格氏 注射液）、Normosol-M、Isolyte E 等。 85466 -38- ί325323 ，=水溶液可视情況含有共溶劑，例如聚乙二醇 例如乙二胺四醋酸；促溶劑，例 内 例如偏亞硫酸氫鈉等。 β，杬氧化劑， 各需要，本發明之含水醫藥 _ 藥之前以適當載劑重配。於 了=東，’及隨後在投 -物為―合物，其包==載:藥 及治療上有效量之式I化合物或其藥學上可接：：：載劑， 组人私山、此·*. 于工·J接文<鹽。在迚 取°較佳係包括蔗糖、甘露醇、右旋糖葡 •、乳糖或其組合。載劑 纟旋糖、葡 組合。 ’、匕括蔗糖、甘露醇或其 ^一項具體實施財，本發明之醫藥組合 。當使用於本發明之醫藥組合物中時，環糊精:：每糊精 基I環糊精或確酸基丁基趟 :佳：羧丙 糊精將佔此配方之約…重量百分比環 量百分比。此外’環糊精對活性劑之重量比，、、：至10重 蓋從約1: 1至約1〇:丨之範圍。 /、型上係涵 本發明之醫藥組合物較佳係以單位劑量… Μ I形式"係指適合病患服藥之物'早位 即各單位含有經計算以產生所要治療效果= ::，意 ，無論單獨或併用—或夕伽甘 ，、疋Τ活性劑 量形式可被包裝在益菌、夕不透Λ早位。例如，此種單位劑 【實施方式】，，，' 不透㈣封安銳瓶等之中。 下列配方係說明本择明. j尽發明<代表性醫藥組合物：

匙方實例A 85466 •39- 1325323 於製備可注射溶液之冷凌溶液，係按下述製成： 活性化合物 "' 1 —----— 賦形劑(例如右旋糖） 〇〇^5〇〇1〇 ^ ^ 注射溶液用水 先 ----一 10至100毫并 也_表性粒1 •使賦形劑（若含有時）溶於約80%注射用水

中，並添加活性化合物，及溶解。以m氨氧化韵調整pH 值到3至4.5 然後將體積以注射用水調整至最後體積之％ %。，必要騎查朗整pH{i，絲體積心射用水調 整至最後體積》接著’使此配方經過α22微米遽器殺菌過 遽，並在無菌條件下’置於無菌小玻瓶中。將小玻瓶加 蓋’貼上標籤，及儲存冷凍。

起方實例R 適用於製備可 成份 係按下述製成：

10至1000毫克 〇至50克 0至500毫克 10至100毫井 注射溶液之經凍乾粉末 賦形劑（例如甘露醇及/或薦糖） 緩衝劑（例如擰檬酸鹽） 注射用水 iL_表性红斤_.使賦形劑及/或緩衝劑（若含有時）溶於约6〇 %注射用水中。添加活性化合物，並溶解，且將阳值以 m氫氧化納調整成3至4.5,並將體積以注射用水調整至 取後體積《95%。若必要則檢查並調整pH值，並將體積 以注射用水調整至最後體積。然後，使此配方經過0.22微 米遽器殺菌㈣，並在無菌條件下，置於無菌小玻瓶中 。接著’使用適當“循環，使此配方〉東乾。將小玻瓶 85466 •40, 1325323 加蓋（視情況於部份真空或乾燥 〃 在冷凍下儲存。 、），貼上標籤，及 供靜脈内投予病患之可注射 實例B : 合硬係按下述製自上文配方 程序··將配方實例B之細凌妒丛士 , 1nnn ^ ^ <，·工/東乾粉末（例如含有10至 克：性化合物)以20毫升無菌水重配，並將所形成之 \、 毫升無菌鹽水稀釋，置於⑽毫升灌注袋中 磁.. 以㈣脈内万式’對病患投予此 稀落液。 利用性 本發明之經交聯醋肽-頭孢菌素化合物可作為抗生素使用 。例如，本發明化合物可在哺乳動物中，包括人類及其伴 信動物(意即狗、描等），用於治療或預防細菌感染及其他 細菌相關醫療症狀，其係因容易接受本發明化合物之微生 物所造成。 因此，在本發明方法之一方®，其係提供一種在哺乳動物 中治療細菌感染之方法，此方法包括對需要治療之哺乳動 物投予一種醫藥組合物，其包含藥學上可接受之載劑，及 治療上有效量之式Ϊ化合物或其藥學上可接受之鹽。 以下述作為說明，本發明化合物特別可用於治療或預防因 革蘭陽性細菌及相關微生物所造成之感染。例如，本發明 化合物係有效治療或預防因某些腸球菌屬；葡萄球菌屬， 包括凝聚酶陰性葡萄球菌屬（CNS);鏈球菌屬；利斯特氏菌 85466 -41 - 1325323 屬；梭菌屬；芽孢桿菌屬等所造成之感染。有效地以本發 明化合物治療之細菌物種之實例，包括但不限於對二甲氧 基苯青黴素具抗藥性之金黃色葡萄球菌（MRSA);對於二甲氧 基苯青黴素容易感受之金黃色葡萄球菌（MSSA);對醣肽中間 物容易感受之金黃色葡萄球菌（GISA);對二甲氧基苯青徵素 具抗藥性之表皮葡萄球菌（MRSE);對二甲氧基苯青黴素具敏 感性之表皮葡萄球菌（MSSE);對萬古黴素具敏感性之翼腸球 菌（EFSVS);對萬古黴素具敏感性之屎腸球菌;對青 黴素具抗藥性之肺炎鏈球菌（PRSP);釀膿鏈球菌等。本發明 化合物對於治療或預防因對萬古黴素與頭孢菌素兩者均具 抗藥性之細菌菌種所造成之感染，較不有效或無效。 可以本發明化合物治療或預防之感染或細菌相關醫療症狀 之代表性類型，包括但不限於皮膚與皮膚結構感染、尿道 感染、肺炎、心内膜炎、導管相關血流感染、骨髓炎等。 在治療此種症狀時，病患可能已被待治療之微生物感染或 僅只是容易受到感g，於此種情況中，活性劑係以預防方 式投予。

予之總量，典型上係由

與嚴重性， 病患之年齡與 且係依一些因素而定，譬如感染之性質 年齡與一般健康狀態，病患對活性劑之 85466 -42- 1325323 对实性’造成感染之微生物，投藥途徑等。 一般而言’適當劑量範圍係為約0 25至約10 0毫克/公斤/ 天之活性劑’較佳為约〇·5至約2毫克/公斤/天。對一般％ 公斤人類而言’這相當於每天約15至約7〇〇毫克之活性劑， 或較佳為每天約35至約15〇毫克。 此外，本發明化合物係有效抑制細菌生長。在此具體實施 例中，細菌係無論是於活體外或活體内，與生長抑制量之 式I化合物或其藥學上可接受之鹽接觸。典型上，生長抑制 量係涵盍從約0.008微克/毫升至約5〇微克/毫升之範圍；較 佳為約_8微克/毫升至約25微克/毫升· I更佳為約咖 微克/¾升至約10微克/毫升。細菌生長之抑制，典型上係

&之溶菌作用証實。 <抗細菌性質以外，亦已發現本 1乳動物安全性與可接受之水溶 除了令人料且令人意外之抗細 發明化合物具有可接受之哺乳 85466 •43- 1325323 液溶解度。此外，已發現本發明化合物具有令人驚訝且令 人意外之快速殺菌性，以抵抗某些細菌，包括對二甲氧基 苯青黴素具抗藥性之金黃色葡萄球菌（MRSA)與對二甲氧基 苯青黴素具敏感性之金黃色葡萄球菌（MSSA)。本發明化合物 之此等性質以及抗生素利用性，可使用熟諳此藝者所習知 之各種活體外與活體内檢測証實。例如，代表性檢測係進 一步詳述於下述實例中。 實例 提供下述合成與生物學實例，係為說明本發明，而非欲以 任何方式被解釋為限制本發明之範圍。在下文實例中，下 列縮寫具有下述意義，除非另有指出。未被定義於下文中 之縮寫， 具有其一般所接受之意義。 BOC = 第三-丁氧羰基 CFU = 菌落形成單位 DCM = 二氯甲烷 DIPEA = 二異丙基乙胺 DMF =Ν,Ν-二甲基甲醯胺 DMSO = 二甲亞颯 EDC =1-(3-二甲胺基丙基）-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽 EtOAc = 醋酸乙酯 HOAT =1-½基_7_氮> 苯并二嗅 HPLC = 高性能液相層析法 MIC = 取低抑制濃度 MS = 質量光譜法 85466 -44-

PMB PyBOP THF TLC TFA 鮮·甲氧基苄基 六氣磷酸苯并三唑小基氧基參四氫吡咯基鱗 四氫呋喃 薄層層析法 三氣醋酸 、下述只例中所報告之所有溫度，均以攝氏度數fC)表示 ’除非另有指ψ 相與°而且，除非另有指出，否則試劑、起始 物質及♦劑係購自市售供應商（譬如入丨把比、、沿职设等） 並使用之而無需進一步純化。萬古黴素鹽酸鹽半水合物 •、購自 P 311113 公司，FortLee NJ 07024 (Alpharma AS，Oslo, Norway) 〇 逆相册1^典型上係使用C18管柱，與（A)98%水，2%乙腈，0.1 ^ TFA，具有漸增梯度（例如〇至約7〇% )之氓）1〇%水，9〇%乙 腈，0.1% TFA進行，除非另有述及。

實例A (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5_氯基嘍唑斗基）·2·(3_胺基丙氧基亞胺基） 乙酿胺基】-3·【(1-晚啶）甲基]_3_頭黴素·4_叛酸酯雙_ 三氟醋酸鹽之合成 下述合成係部份示於上文圖式Α中。 步驟1 一θ-(第氧羰基V3-溴基丙胺（意即化合物s，A ^R1為-(CH4-，R2為氤，Ri6為B〇c，及Z1為溴基）之制立 .使3-溴基丙胺氫溴酸鹽（1〇〇克，457毫莫耳）懸浮於16升無 水THF中。使此混合物在冰/水浴中冷卻至〇°c，並激烈撥掉 ’同時添加190毫升三乙胺。於此混合物中，逐滴添加2〇〇毫 升THF中之第三-丁氧羰基酐（112.6克，516毫莫耳）。使冰浴 85466 -45- 1325323 熱至環境溫度’並將混合物授掉過夜，此時XLC顯示反應 已完成。然後，將混合物過濾，並使濾液在真空下濃縮。 將殘留油以1500毫升己烷稀釋，並於-20°C下儲存3天。接著 將混合物傾析，並使殘留固體在真空下乾燥，而得1〇1克（94 %產率）標題中間物，為結晶性白色固體。 1H NMR (DMSO-d6,300 MHz) ： δ 1.35-1.39 (s, 9Η), 1.91-1.95 (m, 2H), 2.99-3.04 (t, 2H), 3.43-3.52 (t, 2H), 6.95-6.99 (t, 1H). 步驟2 一〔Z)-2-(2-三苯甲某胺某螻唑-4_基）-2-(3-N-BOC-胺某丙 其基亞胺基）醋酸乙g旨（意即，化会物6a之乙醋，其中R1為-，R2為氫’ R14為三笨甲基，尺16為B〇c，及A為氫）之 製備 使（Z)-2-(2-三苯甲基胺基）嘧唑斗基）_2-(幾亞胺基）醋酸乙酯鹽 酸鹽（100克，202.4毫莫耳）溶於7〇〇毫升無水DMF中。於此攪 拌混合物中，添加碳酸铯（230.8克，708.5毫莫耳），接著是碘 化四丁基按（18.7克，50_6毫莫耳）。然後，於30分鐘内’逐 滴添加DMF (1〇〇毫升）中之N_B0C_3_溴基丙胺（5〇 6克，212 5毫 莫耳）。將混合物攪拌兩小時，此時HPLC顯示反應已完成。 然後將混合物過濾，並以200毫升DMF洗滌濾餅。使濾液溶 於2升醋酸乙酯中，並以7〇〇毫升1ΝΗα，接著以7〇〇毫升飽 和碳酸氫鈉水溶液，及最後以5〇〇毫升鹽水洗滌。使有機層 以硫酸鈉脫水乾燥，過濾，及在真空下濃縮。使殘留油溶 於250 ¾升沸騰乙醇中，並倒入燒杯中。一旦物質已完全冷 卻’將殘留黏土狀固體置於布氏漏斗中，並以5〇毫升預先 冷卻至-20 C之乙醇洗蘇（註：產物係中等可溶於乙醇中且 85466 -46- 1325323 使用較大量將會降低最後產物之總產率）。於風乾後，將殘 留固體於研缽與杵棒中磨成微細粉末，及在真空下乾燥， 而得117克（94%產率）標題中間物，為微細灰白色粉末。 1H NMR (DMSO-d6,300 MHz)： 5 1.01-1.1 (t, 3H), 1.31 (s, 9H), 1.60-1.70 (t, 2H), 2.94-2.99 (m, 2H), 3.95-4.04 (m, 4H), 6.77-6.81 (t} 1H), 6.95 (s, 1H), 7.16-7.38 (m, 15H), 8.80 (s, 1H). MSm/z： 615.4 [M+H]+. 步驟3 —迄)-2-(2-三苯甲某胺基嘧唑-4-某V2-n-N-BOC·胺甚而 氳基亞胺基）醋酸酯（意即化合物6a，龙中R1盖-(CRQ, -，R2為 1，R14為三苯甲基，Ri6為B0C，及A為氯λ夕制偌 使得自上文步驟2之乙酯（84.2克，137毫莫耳）懸浮於400毫 升無水乙醇中’並於油浴中加熱至80°c，及攪拌。於全部物 質均已溶解後，將氫氧化鉀（23.1克，411毫莫耳）在150毫升 乙醇中，於20分鐘内，逐滴添加至此溶液中。於添加鹼完 成後10分鐘，沉澱物開始形成，並在又10分鐘内，混合物 成為固體。將混合物自油浴移除，並在冰浴中冷卻。將醋 敗乙酯與水添加至已冷卻之混合物中，然後將其倒入分液 漏斗中。將混合物以1Ν磷酸洗滌，其會造成白色固體形成（ 註·_以較強酸譬如m hci洗滌產物，會造成產物降解）。將 水添加至分液漏斗中，以溶解此固體，然後將有機層以飽 和竣酸氫鈉水溶液及以鹽水洗滌。使有機層以硫酸鈉脫水 乾燥，過滤’及在真空下濃縮，而得標題中間物（8〇克，99 %產率），為暗黃褐色固體。 步驟4 —蓋甲某胺矣-5-慕某嘧唑-4-基V2-G-N-BOC-85466 •47· 1325323 化合物 6b， =得自上文步驟3之中間物（1〇克，17〇4毫莫耳）溶於兀毫 升氣仿中，並攪拌，同時添加固體怵氯基琥珀醯亞胺（228克 17.04毫莫耳）（註：實驗指出過量Ncs會產生不期望之副產 物）。將混合物攪拌過夜（最少15小時），此時HpLC顯示反應 已完成。然後，使混合物在真空下濃縮，並使殘留物溶於 最少量之DMF中。將此混合物添加至經激烈攪拌之水中， 以形成沉澱物，然後藉過濾收集。使固體風乾，獲得9 5克（9〇 %產率）標題中間物’為黃褐色固體。iH NMR顯示只有最少 置之號轴醯亞胺殘留（註：經氯化產物之單離，對於在下一 步驟中之成功偶合’並非是必須的，但實驗指出殘留號珀 酿亞胺會干擾後續之吡啶置換）。或者，在氯化反應完成後 ，將反應混合物以水（3x) ’鹽水洗滌，接著以無水硫酸鈉脫 水乾燥。然後，將此溶液過濾’及在真空下濃縮，而得標 題中間物（90% )，為黃褐色固體。 1H NMR (DMSO-d6,300 MHz)： δ 1.37 (s, 9H)S 1.63-1.74 (t, 2H), 2.94-2.99 (m, 2H), 3.97-4.05 (t, 2H), 6.80-6.85 (t, 1H), 7.18-7.41 (m, 15H), 8.97 (s, 1H). MSm/z： 621.3 [M+H]+. 步驟5 —(7R)-7-「(Z)-2-(2-三笨甲基胺某-5-蠢某嘧唑-4-某V2-f3-N-BOC-胺基丙氣基亞胺基）乙醯胺基1-3-氪某甲基-3-頭黴紊-4-# 酸酯對-年氳某芊酯（意即化合物8，其中R1盖，R2為 氫，R14為三笨甲基，R16為BOC，及R17為對-甲氣某芊某） 之製備 85466 -48· 1325323 使得自步驟4之中間物（0.62克，1毫莫耳）溶於6毫升無水 THF中，並於此混合物中，添加4毫升無水THF中之0.34克（0.83 宅莫耳）7-胺基-3-氯基甲基頭抱菌素酸對-甲氧基节g旨鹽酸鹽（ 意即化合物7，其中R17為PMB ;得自日本〇tsuka)。將所形成 之混合物於氮氣下攪拌，並冷卻至-35°C。於此經冷卻混合 物中’添加二異丙基乙胺（0.52毫升，3毫莫耳），接著是氯 化磷醯（0_11毫升，1.2毫莫耳）。將此混合物於-2〇。(：下授拌30 分鐘，然後，以潤濕THF使反應淬滅，並以醋酸乙酯稀釋。 將此混合物以水、IN HC1、鹽水洗滌，以硫酸鈉脫水乾燥， 過濾’及濃縮，而得0.88克（100%產率）標題中間物，為褐紅 色固體。1HNMR顯示沒有不期望之異構化作用，且沒有殘 留琥珀醯亞胺。 1 H NMR (DMSO-d6,300 MHz)： δ 1.37 (s, 9Η), 1.63-1.74 (t, 2H), 2.94-2.99 (m, 2H), 3.4-3.74 (q, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.97-4.05 (t, 2H), 4.40-4.59 (q, 2H), 5.11 -5.25 (m, 3H), 5.49-5.54 (m, 1H), 6.75-6.81 (t, 1H), 6.90-6.96 (d, 2H), 7.18-7.41 (m, 17H), 8.97 (s, 1H), 9.41-9.44 (d, 1H). MS m/2 ： 972.0 [M+H]+. (註：實驗指出當上述反應以較大規模進行時，DIPEA會造 成異構化作用。一種修正程序，其係使用2,4,6-三甲基吡啶 作為鹼，且其係保持溫度在-35°C下，歷經整個反.應過程-約10 分鐘·可避免此項問題）。 步驟6 —(7RV7-「(ZV2-(2-三笨甲基胺基-5-氯基嘧唑-4-基V2-G-N-胺基丙氩甚亞賒臬）乙醯胺基1-3-丨(1-吡啶）曱基1-3-頭黴棄-IdL酸酯對-甲氮葚芏酯（意即化合物9，其中R1為-(CH^y，R2 85466 •49- 1325323 。束乾水層’並使所形成之粉末溶於水中，及使用逆相預 備之HPLC純化。然後，使所形成之經純化水溶液凍乾，獲 得3.3克（30%產率）標題中間物。 1H NMR (DMSO-d6,300 MHz) ： (5 = 1.80-1.97 (t, 2H), 2.79-2.92 (m, 2H), 3.29-3.57 (q, 2H), 4.02-4.15 (t, 2H), 5.15-5.19 (d, 1H), 5.41-5.63 (q, 2H), 5.83-5.92 (m, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.77 (s, 3H), 8.17-8.22 (t, 2H), 8.60-8.70 (t, 1H), 9.0-9.08 (d, 2H), 9.59-9.62 (d, 1H). MSm/z： 553.1 [M+H]+. (註：上述反應亦可使用三乙基矽烷替代甲苯酸進行。此 外，產物可使用乙醚研製而單離）。

實例B (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氣基噻唑冬基)-2-(3-胺基丙氧基-亞胺基） 乙醯胺基]-3-[(2,3-環戊烯-1-吡啶）甲基】-3-頭黴素-4-羧酸酯雙- 三氟醋酸鹽之合成 使用實例A中所述之程序，並以2,3-環戊缔吡啶（得自曰本 Koei)取代步驟6中之吡啶，獲得標題中間物》 1 H NMR (DMSO-d6,300 MHz)： δ = 1.82-1.947 (t, 2H), 2.18-2.29 (m, 2H), 2.40-2.58 (m, 2H), 2.81-2.95 (m, 2H), 3.09-3.17 (t, 2H), 3.21-3.30 (t, 2H), 4.10-4.19 (t, 2H), 5.15-5.19 (d, 1H), 5.40-5.61 (q, 2H), 5.83-5.92 (m, 1H), 7.39 (s, 2H), 7.77 (s, 3H), 7.89-7.96 (t, 2H), 8.42-8.48 (d, 1H), 8.62-8.69 (d, 1H), 9.60-9.63 (d, 1H). MSm/z： 592.5 [M+H]+.

實例C (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氯基嘧唑-4-基)-2-(6~胺基己氧基亞胺基） 85466 -51- 1325323 乙醯胺基】-3-[(l-吡啶）甲基]-3-頭黴素-4-羧酸酯雙-三氟醋酸鹽之合成 使用實例A中所述之程序，並以N-B0C-6-碘基己胺取代步 驟2中之N-B0C-3-溴基丙胺（且免除碘化四丁基銨），獲得標 題中間物。 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHz) ： 5 1.2 ppm (bs, 4H), 1.3 ppm (m, 2H), 1.5 ppm (m, 2H), 2.7 ppm (m, 2H), 3.3 ppm (dd, 2H), 4.0 ppm (t, 3H), 5.1 ppm (d, 1H), 5.5 ppm (dd, 2H), 5.8 ppm (dd, 1H), 7.25 ppm (bs, 2H), 7.6 ppm (bs, 3H), 8.2 ppm (dd, 2H), 8.6 ppm (dd, 1H), 9 ppm (dd, 2H), 9.5 ppm (d, 1H). MS m/z ： 594.3 (M+).

實例D (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氣基嘍唑_4-基)-2-(2-(2-胺基乙氧基） 乙氧基亞胺基）乙酿胺基】-3-[(l-p比淀）甲基】-3-頭擻素-4·幾酸醋 雙-三氟醋酸鹽之合成 使用實例A之程序，惟下述程序係用以取代步驟2 : 步驟2 —{g)-2-(2-三笨甲基胺基4唑_4—某V2-「2-r2-N-BOC-fe其 基）乙氧基亞胺基1醋酸乙醋（意即化合物6a之乙醋，其中Ri Ad[CH2)2^iCH2}2-_ ’ R2 為氫 ’ R14 為三苽甲某，Ri6 為 Β〇Γ;， 及Α為藍,）之製備 將得自實例A中步驟1之中間物（42.5克，86毫莫耳）添加至 N-BOC-2-(2-琪基乙氧基）_乙胺（28 5克，9〇毫莫耳）（以三個步驟 製自2-(2-#至乙氧基）乙醇，意即⑴b〇C2〇k〇h，⑼Msa為N 及⑽Nal)與碳酸铯（84.1克，258毫莫耳）在DMF (300毫升）中之 經攪拌懸浮液内。將此懸浮液在室溫下攪拌16小時，此時 85466 -52- 1325323 HPLC顯示反應已冗成。然後將反應混合物過遽，並以dmp (loo 毫升）洗滌濾餅。將濾液以醋酸乙酯（1升）稀釋，並以水（3〇〇 愛升）、IN HC1 (200毫升）、飽和破酸氫銷水溶液（2〇〇毫升）及 鹽水（200毫升）洗務。使有機層以硫酸鎂脫水乾燥，過滤， 及在真空中濃縮。使殘留物藉急驟式管柱層析純化（醋酸乙 酯：己烷，1 : 1) ’而得49.7克（90%產率）標題中間物，為灰 白色固體。 1H NMR (DMSO-d6，300 MHz): 6 =2.96 (s，寬廣，2H)，3.20-3.55 (q，2H)， 3.59 (t, 2H), 3.70 (t, 2H), 4.19 (t, 2H), 5.13 (d, 1H), 5.31-5.64 (q, 2H), 5.80 (dd, 1H)，7.40 (s, 2H), 7.87 (s，寬廣，3H)，8.20 (t，2H)，8.64 (t，1H)，9.23 (d，2H)， 9.55 (d，1H)_ MSm/z ·· 503.1 [M-吡啶]+·

實例E (7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氯基p塞也-4-基)-2-(4-胺基甲基爷氧基亞胺 基）乙醯胺基]-3·【(1-吡啶）甲基]-3-頭黴素-4-羧酸酯雙- 三氟醋酸鹽之合成 使用實例Α及實例D之步驟2中所述之程序，並以N-BOC-4-( 碘基曱基）字胺（以四個步驟製自4-(胺基甲基）苯曱酸，意即 ⑴B0C20，K0H，（ii)LiAlH4，（诅）1^(：14131^及（泠)\&1)取代步驟 2 中之N-BOC-2-(2-碘基乙氧基）-乙胺3-溴基丙胺氫溴酸鹽，獲得 標題中間物。 iHNMRpMSO-dhSOOMHz): (5=3_18-3.59(q，2H)，4.00(s，寬廣，2H)， 5.13 (s, 2H), 5.15 (d, 2H), 5.40-5.64 (q, 2H)S 5.85 (dd, 1H), 7.38-7.43 (m, 6H), 8.19-8.23 (m, 4H), 8.64 (t, 1H), 9.17 (d, 2H), 9.71 (d, 1H). 85466 -53- 1325323 MS m/z : 614.1 [M+H]+ ,535.1 [Μ -吡啶]+.

實例F 29-N-(2-胺基乙基)胺基甲基萬古黴素四-TFA鹽（意即化合物2 ，其中圮，115，117，1110，圮1及圮3為氫；119為羥基；圮2為甲基 ;X1與X2為氣基；及R6為-CH2CH2-)之合成 於氮氣下，使萬古黴素鹽酸鹽（20克，13毫莫耳）溶於水（100 毫升）中，並使所形成之溶液在冰浴中冷卻。添加乙二胺（7 毫升，100毫莫耳），接著是1N氫氧化鈉（50毫升，50毫莫耳） 。然後，添加曱醛（1.3毫升，在水中之37重量％溶液，17毫 莫耳），並將反應物於4°C下，在黑暗中保持過夜。反應混合 物之HPLC分析顯示78%所要之產物，而其餘部份主要是未 反應之萬古黴素或雙-Mannich加成產物。然後，使反應混合 物在冰浴中冷卻，並以TFA酸化，以使所要之產物沉澱，藉 過濾收集。接著使沉澱物藉HPLC純化，而得〜1〇克標題中間 物。 HPLC(2-30%梯度液）：3.0分鐘 MS m/z： 1522.6 [M+H]+.

實例G 29-N-[2-(2-胺基乙氧基）乙基】胺基曱基萬古擻素（意即化合物 2，其中圮，炉，尺7，圮()，圮1及圯3為氫；妒為羥基；圮2為 甲基’ X1與X2為氣基；及R6為_CH2CH2〇CHCH )之合成 使萬古黴素（16.0克’ 11·2毫莫耳，ίο當量）溶於H2〇(1〇〇毫 升）中，並以5-胺基-3-酮基-戊基胺二鹽酸鹽（1〇〇克，56毫莫 耳，5當量）在40(30毫升）中之溶液處理，且將反應混合物 85466 •54- 1325323 在環境溫度下攪拌。然後，添加三乙胺（22毫升，160毫莫耳） ’接著是甲醛水溶液（37%，ι·〇5毫升，11.2毫莫耳），並將反 應混合物於環境溫度下攪拌一小時。將反應混合物以水/乙 腈（1 : 1 ; 200毫升）稀釋’並凍乾。使所形成之混合物溶於 &0 (50毫升）中，並使用大型HpLC (0_12%梯度液，於4〇分鐘 内）純化，於凍乾後，提供標題化合物，為白色非晶質粉末（7 2 克）。 HPLC (2-30%梯度液）：2.4分鐘 MS m/z : 1566.9 [M+H]+. 實例Η 己二酸雙-ΗΟΑΤ酯之合成 將己二酸（6.63克，45.4毫莫耳）、1_羥基·7_氮苯并三唑（15 28 克’ 99.81毫莫耳）及1-(3·二甲胺基丙基）_3·乙基碳化二亞胺鹽 酸鹽（19.13克，99.81¾莫耳），於氮氣下，在乾燥燒瓶中合併 。添加DMF (80毫升），並將反應混合物於室溫下攪拌過夜。 添加二氣甲燒（5〇〇毫升），並將此溶液以2χ 2〇〇毫升飽和 NaHC〇3水溶液及2 X 200毫升飽和NaCl溶液洗滌。使有機相以 MgS〇4脫水乾燥’過濾及濃縮，而得標題中間物，為白色固 體。使用此產物’無需進一步純化。 實例1 式 I 化合物，其中R1 為-(CH2)3·; R2,R4，R5，R7，Rl〇 Rll 及 r13 為氫，R9為羥基；R12為甲基；χΐ與Χ2為氣基；r(5為_CH2CH2_ ;r8為-(CH2)4-，及m為0(於表I中之化合物u之合成 使（7R)-7-[(Z)-2-(2-胺基-5-氯基嘍唑_4-基）_2_(3_胺基丙氧基亞胺 85466 -55- 1325323 基）乙醯胺基]吡啶）甲基]_3_頭黴素斗羧 鹽叫毫克，賴丨毫莫耳）（得自上文實例 乙基）胺基甲基萬古黴素四-TFA鹽（107毫克，〇5〇41毫莫耳）( 得自實例F)溶於2.0毫升DMF中，並冷卻至。於此溶液中 ’添加己一奴雙-HOAT @旨（20.7宅克，〇.〇541毫莫耳）（得自實例 H)與二甲基p比淀（42.9微升，0.325毫莫耳）在1毫升DMF中之預 先冷卻至0°C之溶液。將此混合物在〇°C下撥拌4小時，然後 ，以25微升三氟醋酸使反應淬滅。接著將此混合物添加至15 毫升乙醚中，離心，並將所形成之丸粒以謎洗滌，然後在 真空下乾燥。使所形成之固體溶於10毫升水中，並藉預備 之HPLC純化。凍乾所要之溶離份，而得35毫克標題化合物 ，為白色固體。 HPLC (2-40% 梯度液）：3.09 分鐘 MS m/z :計算值 2184.5381 ;發現值 2184.6 [Μ+] ; 1053·0 [[M+H]+-吡啶]/2; 1〇92.6[Μ+Η]+/2. 此外，表1中所示之化合物2-28係使用或已使用實例A與實 例1之程序，利用下列經取代之p比淀類，取代實例A步驟6 中之吡啶而製成： 實例2 —2-甲基吡啶 實例3 —3-甲基吡啶 實例4—4-曱基吡啶 實例5 —2-甲氧基p比淀 實例6 —3-甲氧基p比虎 實例7 —4-甲氧基P比咬 85466 -56- 1325323 實例8 —2-硫曱氧基吡啶 實例9—3-硫甲氧基吡啶 實例10 —4-硫甲氧基吡啶 實例11 — 2-氣基p比咬 實例12 —3-氣基p比淀 實例13 —4-氣基p比淀 實例14 —2-氯p比淀 實例15 —3-氣p比咬 實例16 —4-氯p比淀 實例17—2-苯基吡啶 實例18 —3-苯基p比淀 實例19 —4-苯基p比咬 實例20 —4-環丙基吡啶 實例21 —2,3-二甲基吡啶 實例22 —3,4-二甲基吡啶 實例23 —3,5-二甲基吡啶 實例24 —3,4-二甲氧基吡啶 實例25 —4-甲氧基-3-甲基p比咬 實例26 —4-氟基-3-甲氧基吡啶 實例27 — 2,3-環己晞吡啶 實例28 — 2,3-環戊烯吡啶 上述經取代之吡啶類係為市購可得，或可藉由文獻程序製 成。 實例29 85466 57- 1325323 式 I 化合物，其中R1 為-(ch2)2-o-(ch2)2-; r2,r4，r5，r7，r10， R11及R13為氫；R9為羥基；R12為甲基；X1與X2為氣基； R6為-CH2CH2-; R8為-(CH2)4-，及m為0(於表I中之化合物29) 之合成 使用實例1之程序，並以實例D之中間物取代實例A之中 間物，製成標題化合物。 HPLC (2-40%梯度液）：3.5分鐘 MSm/z： 1068.0 [M+H]+/2. 實例30 式 I 化合物，其中R1 為-(CH2)2-; R2，R4，Rs，R'Ri〇，RiiiRi3 為氫；R9為羥基；R12為甲基；χΐ與X2為氣基；r6為_CH2CH2_ ;R8 為-CH2 -l，2-(-Ph-)-CH2 及m 為 0(於表 I 中之化合物 30) 之合成 使用實例1之程序’並以1，2-苯二醋酸取代己二酸，製成標 題化合物。 HPLC (2-40%梯度液）：3.4分鐘 MSm/z： 1116.7 [M+H]+/2. 實例31 式 I化合物，其中R1為-(CH2)2-; r2，R4，RS，R7 Rl〇，RljRl3 為氫；R9為羥基；R12為甲基；χ1與X2為氯基；R6為_CH2CH2-;R8為l，3-(-Ph-)，及m為〇(於表j中之化合物31)之合成 使用實例1之程序，並以間苯二甲酸取代己二酸，製成標 題化合物。 HPLC(2-40%梯度液）：3.3分鐘 85466 •58- 1325323 MSm/z： 1102.4 [M+H]+/2. 實例32 式 I化合物，其中 R1 為（CH2)2-; R2，R4，R5，R7，Rl〇，Rll&Rl3 為氫；R9為羥基；R12為甲基；X1與X2為氯基；r6為-CH2CH2-;R8 為 l，4-(-Ph-)-S02 -l，4-(-Ph-);及m 為 0(於表 I 中之化合物 32) 之合成 使用實例1之程序，並以（4-羧基苯基）规取代己二酸，製成 標題化合物。 HPLC(2-40%梯度液）：3.8分鐘 MSm/z： 1172.2 [M+H]+/2. 實例33 式 I 化合物，其中R1 為-(CH2)2-; R2，R4，R5，R7，Rle，Rii&Ri3 為氫；R9為羥基；R12為甲基；X1與X2為氣基；R6為 -CH2 CH2 -0-CH2 CH2 - ; R8 為 l，4-(-Ph-);及 m 為 0(於表 I 中之化 合物33)之合成 使用實例1之程序，並以對苯二甲酸取代己二酸；且以實 例G之中間物取代實例F之中間物，製成標題化合物。 HPLC (2-40%梯度液）：3.3分鐘 MS m/z ： 1125.1 [M+H]+/2. 實例34 式 I 化合物，其中R1 為-(CH2)2; R2，R4，Rs，R7，R10，rii&r13 為氫；R9為羥基；R12為甲基；X1與X2為氣基；R6為 -CH2CH2-O CH2CH2-; R8為-CH2OCH2-;及《»為〇(於表J 中之 化合物34)之合成 85466 -59- 1325323 使用實例1之程序’並以二乙醇酸取代己二酸；且以實例 G之中間物取代實例F之中間物’製成標題化合物。 HPLC (2-40%梯度液）：3.1分鐘 MSm/z： 1107.7 [Μ+Η]+/2. 實例35 最低抑制濃度(MIC)之測定 最低抑制濃度(MIC)檢測係使用NCCLS指引中提出之培養基 微稀釋方法進行（參閱’ NCCLS. 2000. #於以需歲才式立長之 細菌之稀釋抗微生物易感染性試驗之方法；公詆得、隼-% 土 版，第20卷，第2期）。菌種係得自美國組織培養類型收集處 (ATCC)，Stanford 大學醫院（SU) ’ Kaiser Permanente 地區實驗室， 位在Berkeley (KPB)，Massachusetts综合醫院（MGH)，疾病管制中 心（CDC)，San Francisco 退伍軍人管理醫院（SFVA)或 California San Francisco大學醫院（UCSF)。對萬古黴素具抗藥性之腸球菌屬 ，係以其對提可菌素之敏感性為基礎，以Van A或Van B為表 現型。已以Van A、Van B、Van Cl或Van C2為基因型之一些對 萬古黴素具抗藥性之腸球菌屬，亦得自Mayo Clinic。 在此項檢測中，係將參考與臨床菌種之低溫保存細菌培養 物，以條紋塗在適當瓊脂培養基（意即胰酪蛋白大豆瓊脂、 具有去纖維蛋白綿羊紅血球之胰酪蛋白大豆瓊脂、腦心浸 劑瓊脂、巧克力瓊脂）上’以提供隔離。在培養以允許菌落 形成後’將此等板以帕拉膜(parafilm)密封，並冷;東儲存高達 兩週。為製備檢測接種物，並確保低變異性，將得自瓊脂 板上培養之細菌隔離物之數個菌落，以接種圈環扎刺，並 85466 •60· 1325323 以無菌方式轉移至Mueller-Hinton培養基（補充二價陽離子至所 需要之含量，以製造者之證明為基礎）。使培養基培養物在35 °C下過夜生長，在新的預先溫熱培養基中稀釋，並生長至指 數期；這相當於〇.5MacFarland標準或每毫升lxlO8個菌落形成 單位（CFU /毫升）。當混濁度相當於MacFarland標準時，由於 物種變異性，故並非所有細胞懸浮液均含有1 X 108CFU/毫升 ，因此在不同菌種之稀釋液中施行可接受之調整（以NCCLS 指引為基礎）。將接種物稀釋，以致使在經補充Mueller-Hinton 培養基之Mueller-Hinton培養基或啥血桿菌屬試驗培養基中之 100微升此培養物，當在96-井微滴定板中，層合至2倍連續 性地稀釋系列之抗生素濃度（亦在100微升相應培養基中）時 ，會造成起始細菌濃度為5 X 105CFU/毫升。然後，使板在35 。(：下培養18-24小時。MIC係以未具有細菌生長之最低濃度井 ，以目視方式讀取。細菌生長係被定義為超過三個針尖菌 落，沉殿細胞之知狀物大於2毫米直徑，或明顯混濁度。 例行性地在最初篩檢中測試之菌種，係包括對二甲氧基苯 青黴素具敏感性之金黃色葡萄球菌（MSSA)、對二甲氧基苯青 黴素具抗藥性之金黃色葡萄球菌（MRSA)、會產生青黴素酶 之金黃色葡萄球菌、對二甲氧基苯音黴素具敏感性之表皮 葡萄球菌（MSSE)、對二甲氧基苯青黴素具抗藥性之表皮葡萄 球菌（MRSE)、對萬古黴素具敏感性之屎腸球菌（EFMVS)、對 萬古黴素具敏感性之糞腸球菌（EFSVS)、亦對提可菌素具抗 藥性之對萬古黴素具抗藥性之屎腸球菌（EFMVR Van A)、對提 可菌素具敏感性之對萬古黴素具抗藥性之屎腸球菌 85466 -61 - 1325323 (EFMVR VanB)、亦對提可菌素具抗藥性之對萬古黴素具抗藥 性之糞腸球菌（EFSVR Van A)、對提可菌素具敏感性之對萬古 黴素具抗藥性之糞腸球菌（EFSVRVanB)、對音黴素具敏感性 之肺炎鏈球菌（PSSP)及對青黴素具抗藥性之肺炎鏈球菌（PSRP) 。由於PSSP與PSRP不能夠良好地在Mueller-Hinton培養基中生 長，故關於此等菌種之MIC係使用無論是補充去纖維蛋白血 液之TS培養基或嗜血桿菌屬試驗培養基測定。 對於上文所提及菌種具有顯著活性之待測化合物，係接著 在臨床隔離物之較大試驗名單中測試MIC值，包括上文列示 之物種，以及對二曱氧基苯青黴素具敏感性與抗藥性之非 專一凝聚酶陰性葡萄球菌屬（MS-CNS與MR-CNS)。此外，亦 檢測此等待測化合物對於革蘭陰性微生物之MIC，譬如大腸 桿菌、綠膿桿菌、肺炎克雷伯氏菌、陰溝腸桿菌、玻曼尼 不動桿菌、流感嗜血菌及黏膜莫拉氏菌。 表II顯示當與已知抗生素萬古黴素比較時，本發明化合物 抵抗對二甲氧基苯青黴素具抗藥性之金黃色葡萄球菌（MRSA) 與對二甲氧基苯青黴素具敏感性之金黃色葡萄球菌（MSSA)之 MIC9G數據。 85466 62· 1325323

表II 最低抑制濃度(MIC) 微生物 待測化合物 MIC2 (微克/毫升） 對二甲氧基苯青黴素具抗藥性 之金黃色葡萄球菌（MRSA) (MRSA33591)1 化合物1 <0.1 化合物28 <0.1 化合物29 <0.1 化合物30 <0.1 化合物31 <0.1 化合物32 <0.1 化合物33 <0.1 化合物34 <0.1 萬古黴素 2.0 對二甲氧基苯青黴素具敏感性 之金黃色葡萄球菌（MSSA) (MSSA 13709)1 化合物1 <0.1 化合物28 <0.1 化合物29 <0.1 化合物30 <0.1 化合物31 <0.1 化合物32 <0.1 化合物33 <0.1 化合物34 <0.1 萬古黴素 1.0 經測試之菌種 最低抑制濃度 於表II中之數據証實本發明化合物對於對二甲氧基苯青黴 素具抗藥性且對二甲氧基苯青黴素具敏感性之金黃色葡萄 球菌，具有最低抑制濃度（MIC)低於已知醣肽抗生素萬古黴 素之MIC，超過10倍。 85466 -63- 工325323 實例36 殺死時間檢測 此殺死時間檢測為一種用以度量待測化合物之殺細菌活性 速率之方法。此等程序係類似v. L〇rian，"在實驗室醫藥中之 杬生素"’第四版，Williams與Wilkins (1996)，第104-105頁中所述者 。快速殺死時間係為所期望的，以迅速地防止細菌移殖， 及減少宿主組織傷害。 細菌接種物係按實例32中關於測定MIC所述者製成。將細 菌在振盪燒瓶中，於預先溫熱之培養基中稀釋，並培養且 伴隨著振盪（200rpm，35。〇)。在〇、i、4及24小時下，自燒 瓶取出數份試樣，並藉由板計數計算細菌。於最初取樣後 ，將欲被檢測之化合物添加至振盪燒瓶培養物中。於添加 化合物之前與之後，在此等間隔下之板計數，係以圖形方 式表現在殺死時間曲線中。殺細菌活性係被定義為在細菌 之細胞數上，達24小時，對數降低（減少大於或等於999 % )。 於此項檢測中，式I化合物，意即化合物丨，在微克/ 毫升之濃度下，於4小時内，對於MSSA 13709與MRSA 33591具 殺細菌性。藉由比較，萬古黴素在4微克/毫升之濃度下， 於24小時内，對於MSSA B7〇9與MRSA 33591具殺細菌性。 實例37 在嗔中性白血球減少老鼠中之活髏内功效研究 動物（雄性CD-1老鼠，20-30克）係得自Charles珩…實驗室 (Gilroy’CA)，並使其無限制地取得食物與水。嗜中性白血球 85466 -64- 1325323 減少症係經由環磷醯胺之200毫克/公斤腹膜腔内（ιρ)注射而 被誘發，其係在細菌接種之前給予四與兩天。 所使用之生物體係為臨床上有關聯革蘭陽性病原之無論是 容易感受或抗藥性菌種，譬如對於二甲氧基苯青黴素容易 感受之金黃色葡萄球菌（MSSA 13709)與對二甲氧基苯青徽素 具抗藥性之金黃色葡萄球菌（MRSA33591)。細菌接種物濃度 為〜106CFU/毫升》以異弗喃（iS0fluran)使動物稍微麻醉，並將 50毫升細菌接種物注入前大腿中。在接種一小時後，使動 物以靜脈内方式服用媒劑或適當劑量之待測化合物。在〇小 時與24小時後處理下’使動物安樂死（c〇2窒息），並以無菌 方式收集前與後大腿。將大腿置於丨〇毫升無菌鹽水中，並 均化。將勻漿之稀釋液覆蓋於胰蛋白酶大豆瓊脂板上，使 其培養過夜。將在一特定板上之細菌菌落數，乘以稀釋因 子’除以大腿重量（克數）’並以對數CFU /克表示。對各待 測化合物估計ED5〇(在大腿滴定度上產生50%最大降低所需 要之劑量）。 在使用MRSA33591之此項檢測中，式〗化合物，意即化合 物1，具有ED5〇<〇_5毫克/公斤（靜脈内），與萬古黴素之 為9毫克/公斤（靜脈内）作比較。 實例38 水溶液溶解度之測定 本發明化合物之水溶液溶解度係使用下述程序測得。5重 量％右旋糖緩衝溶液，在ρΗ2.2下，係藉由將i毫升ιν鹽酸 (Aldrich)添加至99毫升5重量右旋糖水溶液出狀时）中而製成。 85466 -65- 1325323 然後，經由使1毫克待測化合物溶於1毫升DMSO中，製備 1毫克/毫升儲備溶液，作為校準標準物。使此溶液旋渦30 秒，然後音振10分鐘。接著，將儲備溶液以水稀釋，以製 備具有下列濃度之校準標準物：50、125、250、375及500微 克/毫升。 將各待測化合物（30毫克）稱重置於Millipore未經殺菌 Ultrafree-MC 0.1 微米濾器單元（Millipore UFC30WOO)中，並將磁 攪拌棒添加至各單元中。然後，將5重量％右旋糖緩衝溶液 (750微升）添加至各單元中，並使此等混合物旋渦5分鐘。接 著將滤器單元置於Eppendorf管件掛架中，並將管件掛架置於 磁攪拌器之上方。然後，將各單元使用1 NNaOH (VWR)調整 至pH 3，並使所形成之溶液在7000 rpm下離心5分鐘。接著， 以5%右旋糖緩衝溶液將各單元稀釋200倍，並將已稀釋之試 樣轉移至自動取樣器小玻瓶中，以供分析。 校準標準物與試樣係藉逆相HPLC，使用下列條件分析： 管柱： Luna 150 X 4.6 毫米；C18 ; 5u

流動相： A = 5/95, B = 95/5,兩者= MeCN/H20 ; 0.1% TFA 方法： 10m Lido 100 (0-100% B，在 6 分鐘内） 注射體積： 20微升 波長： 214毫微米 經由將試樣之吸收辛面積與校準曲線作比較，並乘以稀釋 因子，計算各試驗試樣之溶解度。使用上述程序與重複之 試樣製劑，發現化合物1具有溶解度為7毫克/毫升。 雖然本發明已參照其特殊具體實施例加以描述，但熟諳此 85466 -66- 1325323 藝者應明瞭的是，在未偏離本發明之真實精神與範園下， 可施行各種改變並可以等效物取代。此外，可施行許多修 正’以使特定狀況、物質、物質之組合物、方法' — 或多 個處理步驟，適應本發明之目的、精神及範圍。所有此種 修正係意欲在隨文所附申請專利範圍之範疇内。另外，於 本又中引用《所有刊物、專利及專利文件，均以其全文併 、、供參考達猶如其已個別地併於本文供參考一 相同程度。 5 m之 85466 67-

Claims (1)

1325323 第092114010號專利申請案 中文申請專利範圍替換本(96年2月）

拾、申請專利範圍： 1. 一種式I化合物：

或其藥學上可接受之鹽，其中 R1 為-Ya-(W)n-Yb-; R2為氫或Cm烷基； 各R3係獨立選自包括心^烷基、C2_6烯基、C2_6炔基、 C3-6環烷基、C6-1()芳基、C2-9雜芳基、C3-6雜環族及Ra ; 或兩個相鄰R3基團係連接以形成C3_6次烷基或-CKCu次 85466-960205.doc 1325323 烷基）-〇·;其中各烷基、次烷基、浠基及炔基係未經或經ι 至3個獨立選自包括^與把之取代基取代；且各芳基、環 k基、雜芳基及雜環族基團係未經或經1至3個獨立選自 包括Rb之取代基取代； R4為氣或Q _ 6 ；1完基； R5為氫或（ν6烷基； R6 為-Ya-(W)n-Yb-; R7為氫或CV6烷基； R8為共價鍵或-Ye -(w)n -Yd -; R與R之一為致基，而另一個為氫； R11與R1 2係獨立為氫或甲基； R13為氫或式（i)基團：

各W係獨立選自包括_〇、_N(Rd>_、_s_、_s(c))_、 、C：3·6次環烷基、（：6_1()次芳基及心·9次雜芳基丨其中各次 芳基、次環烷基及次雜芳基係未經或經丨至3個獨立選自 Rb之取代基取代； X1與X2係獨立為氫或氯基；

85466-960205.doc -2- 1325323 取代； 各Y%Yd係獨立為心」次烷基、〇:3.6次環烷基、c6_1G次 · 芳基及〇2_9次雜芳基，或當W為次環烷基、次芳基或次雜 芳基時，各¥。與Yd係獨立選自包括共價鍵與Ci5次烷基； 其中各次燒基係未經或經1至3個獨立選自-〇Rd、Re、 -C〇2Rd、-C(0)NRdRe及-S(0)2NRdRe之取代基取代，且各次芳 基、次環燒基及次雜芳基係未經或經1至3個獨立選自Rb 之取代基取代； 各Ra係獨立選自包括-〇Rd、鹵基、_SRd、_S(〇)Rd、_s(〇)2 Rd φ 、-S(〇)2〇Rd、-S(0)2NRdRe、-NRdRe、-C〇2Rd、-〇C(〇)Rd、 -C(0)NRdRe - -NRdC(0)Re > -0C(0)NRdRe χ -NRdC(0)0Re ' -NRdC(0)NRdRe、-CF3 及-〇CF3 ; 各Rb係獨立選自包括Cl_6烷基、C2-6烯基、C26炔基及 Ra ； 各Rc係獨互選自包括C3_6環烷基、C6_10芳基、c2_9雜芳 基及C3·6雜環族；其中各環烷基、芳基、雜芳基及雜環族 基團係未經或經1至3個獨立選自包括Cl6烷基與Rf之取籲 代基取代； 各“與把係獨立選自包括氫、Cl_6烷基、C2 6缔基、c2 6 炔基、c：3_6環烷基、A,芳基、A·9雜芳基及q 6雜環族 ;或以與!^係和彼等所連接之原子一起接合，以形成6 雜環，具有1至3個雜原予，獨立選自氧、氮或硫；其中 各烷基、埽基及炔基係未經或經丨至3個獨立選自包括rc 與Rf之取代基取代；且各芳基、環燒基、雜芳基及雜環族 85466-960205.doc 1325323 基團係未經或經1至3個獨立選自包括C16烷基與Rf之取 代基取代； 各^係獨立選自包括_〇H、_〇Ci 6烷基、_SCi 6烷基、_F 、_C1、_ΝΗ2、·νη((：：ι 6 烷基）、_N(Ci 6 烷基）2、_〇c(〇)Ci 6 烷 基、_C(0)0C^6烷基、-NHCXC^Cu烷基、-C⑼OH、-C(0)NH2 、-C(0)NHC卜 6 燒基、-CXONCu 燒基）2、-CF3 及-〇CF3 ; m為0、1、2或3 ;及 各η係獨立為〇或1 ; 各雜芳基及雜環族包含！至3個選自氮、氧或硫籲 的雜原子。 2.根據申請專利範圍第i項之化合物，其中Rl為 ，其中η為〇，且Ya與Yb係獨立為。…次烷基，其中各次烷 基係未經或經1至3個獨立選自_0Rd、-NRdRe、_c〇2Rd、 -C(0)NRd Re及_s(〇)2 md Re之取代基取代。 3·根據申睛專利範圍第2項之化合物，其中丫3與γ1)係連接在 一起，以形成-(CH2)2-8-基團。

4.根據申請專利範圍第3項之化合物’其中”與妒係連接在 一起，以形成-(CH2)3-基團。 5. 6. 根據申請專利範圍第丨項之化合物，其中Ri為-Ya-(w)n_Yb_ ，其中η為1，且Ya與Yb均為_CH2CH2 ，及臀為〇·。 根據申請專利範圍第1至5項中任一項之化合物，其中W 為-Ya-(W)n-Yb-，其中n4〇，且γ3與妒係獨立為& 5次燒 基，其中各次烷基係未經或經丨至3個獨立選自_〇Rd、 -NRW、_c〇2Rd ' _c(〇)NRdRe及俱服七之取代基取代。 85466-960205.doc 1325323 7. 根據申請專利範圍第6項之化合物，其中γ3與^係連接在 一起’以形成-(CH2)2-8-基團。 8. 根據申請專利範圍第7項之化合物，其中Ya與炉係連接在 一起’以形成-(CH2 )2 -基圏。 9·根據中請專利範園第1至5項中任一項之化合物，其中R6 為-Ya-(W)n-Yb-，其中1!為】，且丫3與妒均為_CH2CH2 ，及w 為 _〇-。 10·根據申請專利範圍第1至5項中任一項之化合物，其中R8 為-Yc-(W)n-Yd- ’其中n*〇，且¥。與妒係獨立為Cl·〗次烷 基，其中各次烷基係未經或經1至3個獨立選自_〇Rd、 -NRdRe、-C02Rd、_C(0)NRdRe&_s(〇)2NRdRe之取代基取代。 11. 根據申請專利範園第1〇項之化合物，其中¥<:與#係連接在 一起，以形成-(CH2)2-10•基图。 12. 根據申請專利範圍第U項之化合物，其中”與^係連接在 一起，以形成-(CH2 )4 -基團。 13. 根據申請專利範圍第i至5項中任一項之化合物，其中R8 為Y -(W)n -Y -，其中n為1，且Yc與Yd均為_CH2 _，及w為 Q-io次芳基，未經或經1至3個獨立選自妒之取代基取代。 14. 根據中請專利範圍第13項之化合物，其中％為次苯基。 15. 根據中請專利㈣第項中任_項之化合物，其中r8 為-Yc-(w)n-Yd_，其中nA1，且Y<^Yd均為偶“基團； 及W為-0-。 根據申請專利範圍第⑴項中任一项之化合物，其中R8 為-YC-(W)n-Yd- ’其中n41，且Y^Yd均為次芳基’ 85466-960205.doc 1325323 未經或經⑴個獨立選自如本文中定義之Rb之取代基取 代；及 w 為 _〇_、_N(Rd)…s_ ' _s(〇)或 _s(〇)2 … π.根據申請專利範圍第⑴項中任一項之化合物，其中圮 為-Y -(W)n-Yd_，其中nA !，且γ(^γ£ΐ均為共價鍵，及|為 C6-1Q次芳基，未經或經丨至3個獨立選自Rb之取代基取代。 18.根據中請專利範圍第…項中任—項之化合物，其中r2 為氣。 19·根據中請專利範圍第…項中任—項之化合物，其中r4 為氫。 20.根據申請專利範圍第…項中任一項之化合物，其中r5 為氫。 2L根據中請專利範圍第…項中任—項之化合物，其中r7 為氫。 22. 根據申請專利範圍第⑴項中任一項之化合物，其中_ 0 ° 23. 根據申請專利範圍第⑴項中任一項之化合物，其中瓜為 1或%且各R3係獨立選自包括燒基、C3_6環燒基、_0Rd 、-SRd、-F或-C1;或兩個相鄰R3基團係連接以形成欠 娱•基。 24. 根據申請專利範圍第！至5項中任一項之化合物，其中r9 為禮基；Ri〇為氫；rh為氫；r12為曱基；r13為氫；及义 與X2均為氣基。 25. 根據申請專利範圍第i至5項中任一項之化合物，其中r9 為氫；R10為羥基；RH為氫；Rl2為甲基；Rl3為式⑴基團 85466-960205.doc • 6 - 1325323 ;及又1與x2均為氯基。 26. 根據申請專利範圍第1項之化合物，其中R2、R4、R5&R7 為氫；R9為羥基；Rio為氫；rIi為氫；R12為甲基；r13為 氫；X1與X2均為氯基；Ri為_Ya_(w^_Yb_，其中η為〇，且¥3 與Υ係連接在一起’以形成_(CH2)2_8·基團；r6為 -Ya-(W)n-Yb- ’其中η為〇 ’且Ya與Yb係連接在—起，以形成 -(CH2)2_8-基團；R8 為-Yc_(w)n_Yd-，其中η 為〇，且^與# 係連接在一起，以形成_(Ch2)2 i〇_基團。 27. 根據申请專利範圍第1項之化合物，其中r2、r4、r5及r7 為氫；R9為羥基；R10為氫；Rll為氫；Rl2為甲基；Rl3為 氫；X1與X2均為氯基；且R1、R3、R6、圮及爪均如表1中之 定義。 28. -種用於治療細菌感染之醫藥組合物，其包含藥學上可接 受义載劑及治纟上有效量之根據中請專利範圍第丄至^項 中任一項之化合物。 其係用 29·根據申請專利範圍第1至5項中任一項之化合物 於治療細菌感染。 30.根據申請專利㈣第…項中任―項之化合物 於製造藥劑，以治療哺乳動物中之細菌感染。 85466-960205.doc