TWI304062B

TWI304062B - N-(pyridin-2-yl)-sulfonamide derivatives

Info

Publication number: TWI304062B
Application number: TW095121409A
Authority: TW
Inventors: Sajiv Krishnan Nair; Michael Siu; Wendy Dianne Taylor
Original assignee: Pfizer
Priority date: 2005-06-16
Filing date: 2006-06-15
Publication date: 2008-12-11
Also published as: JP4250675B2; DE602006010546D1; MX2007016319A; BRPI0611853A2; CA2610903A1; US20070072914A1; MA29550B1; NL1031976A1; KR20080016649A; NO20080164L; TNSN07476A1; US7462634B2; JP2008543825A; AU2006257646A1; ES2334518T3; ATE449094T1; GT200600258A; EP1893609A1; EA200702498A1; PE20070136A1

Description

1304062 九、發明說明： t"^明/^屬々頁:¾】本申请案係申明補充美國暫時專利申嗜宰號 6〇/691，35〇，提申於2〇〇5年6月Μ曰，以及美國暫時專利申 5請案號6〇/748,778，提申於2005年9月9日，其内容在此併入本案以為參考資料。本發明係相關於一種新穎之化合物、一種包含該化合物、其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物之醫藥組成物，以及一種使用該化合物作為藥物，並用於製備可作用於人 10類ll-β-羥基類固醇脫氫酶第1型酵素（11PHSD1)之藥物之用途。 I：先前技術3 發明背景超過半世紀以來，我們已經知道醣皮質素在糖尿病中 15扮演重要角色。例如，自糖尿病動物中移除腦垂體或腎上腺，可減輕糖尿病最嚴重之症狀，並降低血糖(L〇ng，c. D. and F· D· W. Leukins (1936) 五冲· Med 63: 465-490; Houssay，B· A. (1942) 30: 884-892)。此外，亦已知醣皮質素使肝臟中之昇醣素可作用。nj3HSDl作為 20局部醣皮質素效用之重要調節劑，因而調節肝醣之產生，目鈾已有證據支持（請見如Jamieson et al. (2000) ⑽/· 165: ρ· 685-692)。肝臟胰島素敏感度在經非特異性11 pHSD 1抑制劑甘伯酸(carbenox〇i〇ne)處理之健康自願者體内有增進現象。此外，預測之機制係以不同小鼠與 1304062 大鼠實驗而建立。這些研究顯示該二肝臟醣類產生之重要酵素之活性與mRNA量係明顯降低，亦即，醣生成作用之速率決定酵素，磷酸烯醇丙酮酸羧基激酶(PEPCK)，以及葡萄糖-6·去磷酸酶(G6Pase)，會催化醣生成與糠分解之最後 5 一個共通步驟。最後，血糖值與肝糖產生係於具有11PHSD1 基因缺失之小鼠中降低。由此模式獲得之資料亦確認了 11PHSD1之抑制不會導致低血糖症，如預期的，由於PEpcK 與G6Pase基本量之調節與糖皮質素無關（K〇televtsev，Y·，et . al·，（1997) 々似/·似似 94: 14924-14929)。 1〇腹部肥胖症與葡萄糖耐受不良、高胰島素血症、高三酸甘油脂血症與其他俗稱為新陳代謝症候群之因素有密切關係（如血壓升高、HDL降低與VLDL升高）（Montague & O’Rahilly，潜灰病49: 883-888, 2000)。肥胖症為新陳代謝症候群與大部分(>80%)第2型糖尿病之一重要因素，網膜脂肪 15顯示具有關鍵重要性。前-脂肪細胞（基質細胞）中酵素之抑 _ 制顯示可降低脂肪細胞之分化速率。此預測可導致網膜脂肪沉積擴張情況減少（可能是縮減），並降低中央肥胖症 (Bujalska, I.J.5 Kumar, S.? and Stewart, P.M. (1997； Lancet 349: 12UM213)。 20 【發明内容】發明概要本發明之化合物可使用作為UpHSD1抑制劑。就一觀點而言，本發明提供分子式⑴之化合物： 6 1304062 R1

OH R2 其中 • R1為H或(CrC4)烧基； 5 R2為H或(CrCO烷基； R3為H、鹵基、（CrC6)烷基，或(Q-C6)烷氧基；以及，當化合物為不對稱化合物時，該化合物為（+)鏡像異構物，或其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物。於一實施例中，本發明係有關於一種化合物、其藥學 10 上可接受鹽類、水合物或媒合物，其中R1為Η。於另一實施 - 例中，本發明係有關於一種化合物、其藥學上可接受鹽類、 ® 水合物或媒合物，其中R3為Η或CH3。於另一實施例中，本發明係有關於一種化合物、其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物，其中R2為-CH2CH3。 15 就另一觀點而言，本發明提供分子式I之化合物，其選自於下列族群：

1304062

其中當該化合物為不對稱化合物時，該化合物為(+)鏡像異構物，或其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物。於另一觀點而言，本發明提供一化合物，具分子式II

或其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物。就另一觀點而言，本發明提供一種醫藥組成物，包含有效劑量之上述式I爽II之化合物，或其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物，以及一藥學上可接受之載體。就另一觀點而言，本發明提供一種治療一疾病、症狀或病症（如糖尿病第2型），其以11PHSD1抑制劑治療而獲益，之方法，該方法包含投予一哺乳動物有效劑量之上述式I或II化合物、其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物。就另一觀點而言，本發明提供一種治療新陳代謝症候群、胰島素抗性症候群、肥胖症、青光眼、高脂血症、高血糖症、高胰島素血症、骨質疏鬆症、動脈硬化症、癡呆症、憂#症，或以肝臟為目標器官之疾病之方法，其中該 8 1304062 方法包括投予一哺乳動物有效劑量之上述式丨或^化合物、其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物。就另一觀點而言，本發明提供治療青光眼之方法，該方法包括投予一哺乳動物有效劑量之上述式1或11化合物、 5其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物，並結合一類前列腺素受體協同劑，其中該協同劑為樂通舒特(latan〇pr〇st)。就另一親點而言，本發明提供具分子式I或η之化合物，或其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物，使用作為藥劑。 10 就另一觀點而言，本發明提供使用具分子式之化合物，或其藥學上可接受龍、水合物或媒合物，以製造可治療一疾病、症狀或病症，其以upHSDl抑制劑治療而獲益，之藥物之用途。定義 15 減使用之術語“包含，，及“包括，，，其以開放地、無限制之意義使用。於此使用之術語“烷基，，，除非另有指出，其意指飽和單價碳氫化合物自由基，其為直鏈或支鏈片段。於此使用之術語“稀基，，，除非另有指出，其意指至少 20具有一個碳-碳雙鍵之烷基片段，其中烷基係如上定義，並包括上述稀基片段之E與Z異構物。於此使用之術語“炔基”，除非另有指出，其意指至少具有一個碳-碳三鍵之烧基片段，其中烷基係如上定義。於此使用之術語“烷氧基，，，除非另有指出，其意指氧_ 9 1304062 烧基，其中烧基係如上定義。於此使用之術語“胺基”，除非另有指出，其意指-nh2 自由基，及任何氮原子之取代。於此使用之術語“鹵素”及“鹵基”，除非另有指出，其 5 意指氣、氣、>臭及/或峨。於此使用之術語“三氟曱基”，除非另有指出，其意指 -CF3 基。於此使用之術語“三氟甲氧基”，除非另有指出，其意 ί 指-OCF3 基。 10 於此使用之術語“氰基”，除非另有指出，其意指-CN基。於此使用之術語“Ms”，除非另有指出，其意指甲基磺酸基(-S02CH3)。於此使用之術語“Me”，除非另有指出，其意指甲基。於此使用之術語“MeOH”，除非另有指出，其意指甲醇。 15 於此使用之術語“Et”，除非另有指出，其意指乙基。於此使用之術語“Et20”，除非另有指出，其意指乙醚。 I 於此使用之術語“EtOH”，除非另有指出，其意指乙醇。於此使用之術語”Et3N”，除非另有指出，其意指三乙基胺。 20 於此使用之術語“TEA”，除非另有指出，其意指三乙基胺。於此使用之術語“EtOAc”，除非另有指出，其意指乙酸乙酯。於此使用之術語“AlMe2Cl”，除非另有指出，其意指氣 10 1304062 化二甲基鋁。於此使用之術語“Ac”，除非另有指出，其意指乙醯基。於此使用之術語“TFA”，除非另有指出，其意指三氟乙 - 酸。 . 5 於此使用之術語“HATU”，除非另有指出，其意指 τν,τν, 四甲基脲六氟磷酸。於此使用之術語“THF”，除非另有指出，其意指四氫呋喃。 • 於此使用之術語“TlOH”，除非另有指出，其意指氫氧 10 化銳（I)。於此使用之術語“TIOEt”，除非另有指出，其意指乙氧基鉈⑴。於此使用之術語“PCy3”，除非另有指出，其意指三環己基膦。 15 於此使用之術語“Pd2(dba)3”，除非另有指出，其意指 * 三（二亞苄基丙酮）二鈀(0)。 ® 於此使用之術語“Pd(OAc)2”，除非另有指出，其意指乙酸把(II)。於此使用之術語“Pd(PPh3)2Cl2”，除非另有指出，其意 20 指二(三苯基膦）二氯化鈀(II)。於此使用之術語“Pd(PPh3)4”，除非另有指出，其意指四（三苯基膦）鈀(0)。於此使用之術語“Pd(dppf)Cl2”，除非另有指出，其意指二氯（1，Γ-雙（二苯基膦)-二茂鐵)鈀(II)，與二氯甲烷（1:1) 11 1304062 之錯合物。於此使用之術語“G6P”，除非另有指出，其意指葡萄糖 -6-構酸。於此使用之術語“MDDM”，除非另有指出，其意指非 5 胰島素依賴型糖尿病。於此使用之術語“NADPH”，除非另有指出，其意指腺二核苷磷酸菸草醯胺還原型。於此使用之術語“CDC13或CHLORFORM-D”，除非另有 > 指出，其意指氘氣仿。 10 於此使用之術語“CD3OD”，除非另有指出，其意指氘甲醇。於此使用之術語“CD3CN”，除非另有指出，其意指氘乙腈。於此使用之術語“DEAD”，除非另有指出，其意指偶氮 15 二魏酸二乙醋。於此使用之術語“TsCH2NC”，除非另有指出，其意指 I 對甲基苯磺酸甲基異腈酯。於此使用之術語“ciso3h”，除非另有指出，其意指氯績酸。 20 於此使用之術語“DMSO-d6或DMSO-D6，”，除非另有指出，其意指氘二甲基亞砜。於此使用之術語“DME”，除非另有指出，其意指1,2-二甲氧基乙烧。於此使用之術語“DMF”，除非另有指出，其意指W- 12 1304062 二甲基甲醯胺。於此使用之術語“DMSO”，除非另有指出，其意指二甲基亞諷。於此使用之術語“DIPEA”，除非另有指出，其意指二 5 異丙基乙胺。於此使用之術語“DI”，除非另有指出，其意指去離子化。於此使用之術語“KOAc”，除非另有指出，其意指乙酸钟。 10 於此使用之術語“neat”，除非另有指出，其意指無溶劑存在。於此使用之術語“mmol”，除非另有指出，其意指毫莫耳。於此使用之術語“equiv”，除非另有指出，其意指當量。 15 於此使用之術語“mL”，除非另有指出，其意指毫升。於此使用之術語“U”，除非另有指出，其意指單位。於此使用之術語“mm”，除非另有指出，其意指毫米。於此使用之術語“g”，除非另有指出，其意指公克。於此使用之術語“kg”，除非另有指出，其意指公斤。 20 於此使用之術語“h”，除非另有指出，其意指小時。於此使用之術語“min”，除非另有指出，其意指分鐘。於此使用之術語、L”，除非另有指出，其意指微升。於此使用之術語“μΜ”，除非另有指出，其意指微莫耳濃度。 13 1304062 於此使用之術語“μπι”，除非另有指出，其意指微米。於此使用之術語“Μ”，除非另有指出，其意指莫耳濃度。於此使用之術語“Ν”，除非另有指出，其意指當量濃度。，於此使用之術語“nm”，除非另有指出，其意指奈米。 . 5 於此使用之術語“nM”，除非另有指出，其意指奈莫耳濃度。於此使用之術語“amu”，除非另有指出，其意指原子質量單位。 • 於此使用之術語“°0”，除非另有指出，其意指攝氏。 10 於此使用之術語“m/z”，除非另有指出，其意指質量/ 電荷比例。於此使用之術語“wt/wt”，除非另有指出，其意指重量/ 重量。於此使用之術語“v/v”，除非另有指出，其意指體積/ 15 體積。 ‘ 於此使用之術語“mL/min”，除非另有指出，其意指毫鲁升/分鐘。於此使用之術語“UV”，除非另有指出，其意指紫外光。於此使用之術語“APCI-MS”，除非另有指出，其意指 20 大氣壓化學離子化質譜。於此使用之術語“HPLC”，除非另有指出，其意指高效能液相層析。於此使用之術語“LC”，除非另有指出，其意指液相層析。 14 1304062 於此使用之術語“LCMS”，除非另有指出，其意指液相層析質譜。於此使用之術語“SFC，”，除非另有指出，其意指超臨界流體層析法。 5 於此使用之術語“sat”，除非另有指出，其意指飽和。於此使用之術語“aq”，除非另有指出，其意指水溶液的。於此使用之術語“ELSD”，除非另有指出，其意指揮發性光散射偵測器。 10 於此使用之術語“MS”，除非另有指出，其意指質譜。於此使用之術語“HRMS (ESI)”，除非另有指出，其意指高解析度質譜（電噴灑離子化）。於此使用之術語“Anal.”，除非另有指出，其意指分析的。 15 於此使用之術語“Calcd”，除非另有指出，其意指經計算的。於此使用之術語“NT”，除非另有指出，其意指未測試。於此使用之術語“NA”，除非另有指出，其意指未測試。於此使用之術語“RT”，除非另有指出，其意指室溫。 20 於此使用之術語“Mth.”，除非另有指出，其意指方法。於此使用之術語“Celite®”，除非另有指出，其意指一白色固體之矽藻土過濾劑，其為商業上可購得自World Minerals，位於Los Angeles，California USA 〇於此使用之術語“ΚΓ’，除非另有指出，其意指酵素抑 15 其意指表觀

基 13〇4〇62 制常數值。於此使用之術語“Ki app”，除非另有指出之酵素抑制常數值(Κ〇。於此使用之術語“IC%，，，除非另有指出，其意指使至少 5〇%酵素抑制所需之濃度。夕於此使用之術語“取代，，，除非另有指出，其意指特定基團或片m妓多之取代基取代。術語“未取代，^ 指特定基團無取代基取代。 ^ 於此使用之術語“選擇性地取代，，，除非另有指出，其 10意指特定基團未經取代，或可以一個或更多之取代基取代為與慣例-致，於此之結構分子式，該碳原子與其相鍵結之氫原子之描繪並未特別指出，例如，％代表一甲基’代表-乙基’ 0代表—環戊基等等。於此使用之術語“環院基，，，除非另有指出，其意指一非 15芳香族、鮮或部分飽和、單《融合、_絲融合雙環或三環之碳氫化合物，於此討論係包含3至10個碳原子，適當地為5至8個碳原子所形成之環。示範性環烧基包括由3至 1〇個碳料所形成之環，如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基，及金剛烧基。於此使用之術語“芳香族經基，，或“(Μ。）芳香族經基，，，除非另有指出’其意指衍生自芳香族碳氫化合物之有機自由基，將其移除—個氫原子所形成的，例如苯基或萘 16 20 1304062 於此使用之術語“雜環基，，或“(5·1〇)_元雜環& 有指出，其意指含有1至4個選自〇、s，及处二二“ 香基’其中每-雜環基分物.原子於其環方但書為該基團之環不包含兩相連接之〇或3原子。誃雜包括苯並融合之環系統。5元雜環基之範例㈣^ ^ 環之範例az_y卜以及1G元雜環基之範例為嗤从。雜= 之其他範例為吼咬基、㈣基、，定基、π比唾基、二坐美 °比嗪基、四嗤基"夫喃基、嘴嗯基、異‘二：、、 10 15 °惡嗤基、異射基、対基、糾基、騎料1縣、苯並味嗤基、苯並吱喃基、dn_nyh d㈣基1啤滿ς、献唤基、料酮基、三嗪基、異啊基、蝶趙士令ς、。惡二唾基1二錄、t丫基、苯並対基、笨並嗟吩基、苯並噻唑基、苯並噁唑基、喹唑啉基、喹噁基、 naphthyridiny卜以及呋喃吡啶基。除非另有指出，術語“氧基，，，其意指=〇。於此使用之本發明之化合物，意指包括具分子式則以之化合物之媒合物、水合物，及藥學上可接受之鹽類及其特定之實施例。於此使用之術語“媒合物，，，#意指_特定化 2〇學上可接受媒合物形式，其保有該化合物之生物效用。該媒合物之範例包括本發明之化合物與水、異丙醇、乙醇、甲醇、DMSO (二甲基硬）、乙酸乙酉旨、乙酸或乙醇胺結合。於此使用之術語“藥學上可接受鹽類”，除非另有指出，其包括含酸基或驗基之鹽類，其可出現於所申請之化 17 1304062 合物中。所申請之化合物本質為驗性，可與各種無機酸及有機酸形成飾。本發明之㈣將更進—步描述於下。於此使用之術語“以肝臟為目標器官之疾病”，除非另有指出，其意指糖尿病、肝炎、肝纖維化’及廬疾。 5 於此使用之術語“新陳代謝症候群，，，除非另有指出，其意指牛皮癖、糖尿病、傷口癒合、炎症、神經退化性疾病、半乳糖血症、楓糖尿症疾病、苯酮尿症、高肌胺酸血症、胸腺嘴咬脲t定尿、sulfinuria、異戍酸血症、酵母丙氨酸尿症、4_經基丁酸尿症、葡萄糖六填酸鹽去氫酵素缺i 1〇症，及丙酮酸鹽脫氫酶缺乏症。於此使用之術語“治療，，，除非另有指出，其意指改善、減輕、抑制，或預防病症或症狀之進展。於此使用之術語“治療法，除非另有指出，其意指治療之行為，正如上述“治療之定義。 15 於此使用之術語“調節，，或“正在調節”，係指類固醇/曱狀腺素超級《«之調節劑之能力，不論是直接(藉由作二、配位基結合至χ |§)或間接(作為配位基之前驅物或誘發 =其可驅動由前驅物產生配位基），於贺爾蒙表現控制下 _發基因之表現’或於此種控制下維持抑制基因現。目於此使用之術語“眼科疾病，，，除非另有指出，其意指 =部疾病，並不侷限於#純，尚包括老年黃斑病變，其包括濕性(wet AMD)及乾性(dry AMD)、脈絡膜血管增生、么、同骐病變，如糖尿病視網膜病變、視網膜色素變性及早 18 1304062 產兒視網膜病變、糖尿病黄斑水腫、視網膜炎、葡萄膜^ 囊樣水腫、青光眼，以及其他眼部疾病或症狀。、义、 =使用之術語“肥胖症，，或“肥胖的,,，通常意指個 = 年齡、性別、身高之平均體重至少則Q%。技術= a ’ 2肥胖的”之定義，對肢而言，係個體體重指數大於响’及對女性而言，係個體體重指數大於27.3kg/m2。* 習該領域者應理解本發明之方法不條於上述之標準。喊

正說來’本發明之方法亦有益實踐於其落於傳統:準外: 個體’例如易於肥胖之個體。 1〇於此使用之術語“發炎病症，，，除非另有指出，盆_ 病症，如風濕性關節炎、僵直性脊椎炎、乾癖性關節^ 牛皮癖、軟骨麻症、減、發炎性腸道疾病、潰癌腸炎、克隆氏病、纖維變性肌痛，及惡病質。於此使用之術語“治療有效劑量，，，除非另有指出，其 15意指藥物或醫療試劑之劑量，可引起組織、系統H、或人類之生物或醫療反應，其為研究者、獸醫，或醫邮所尋求。 -~ 於此使用之術語“降低血糖之有效劑量，，，除非另有抨出，其意指化合物量足以提供夠高之循環濃度，可完成所 20要求之效果。一般而言，該濃度落於約10 ηΜ至2 μΜ之範圍；而較佳濃度為約100 ηΜ至500 ηΜ之範圍。如前所述，由於上述不同之化合物之活性會有可觀之變化，及由於個體雙试者存在有疾病嚴重度之廣變化範圍，因此係由醫師決定個體治療之反應，並依此變化該劑量。 19 1304062 於此使用之術語“胰島素抵抗性，，，除非另有指出，其意指全身或個體組織，如骨骼肌組織、心肌組織、脂肪組織或肝組織之騰島素活動之減受性。胰島素抵抗性發生於許多患有橋尿病或未患有糖尿病之個體。於此使用之術語“胰島素抵抗性症候群”，除非另有指出，其意指一組症狀，包括胰島素抵抗性、高胰島素血症、 NIDDM、動脈型高血壓、中央型（内臟型）肥胖症，及血脂異常。

本發明化合物之某些官能基可經生物等空間性基團 H) (bioisosteric groups)取代，其意指，該官能基具有相似於母官能基之空間或電子要求，但展現相異或經改良之物化或其他性質。適當之範例為熟習該領域者所熟知，包括，但不侷限於，描述於Patini et ai Ό αΑ·，Lhem. Rev. 1996，96 3147-3176，及於此提出之參考資料之官能基。 15 树明之之經同位素標記化合物，-般可經揭露於下述流程及/或範狀程序來完成，其以—立即可得之經同仇素標記之試劑取代一未經同位素樑記之試劑。本發明之其他觀點、優點及特色，將以下列發明而更臻清楚。 20 【實施方式】較佳實施例之詳細說明下列流程係詳細說明本發明化合物之製備。流程1 20 1304062

參考上述流程1，式A化合物可藉由將式B化合物與Ar_ 磺基鹵化物或Ar·磺酸鹽反應，在適當之鹼，如於適當溶劑中之胺，存在下而製備。適當之溶劑包括吡啶、二氯甲烷或 5 THF。前述之反應可引入於室溫下（約2〇。〇或加熱一段適當時間後，如2至16小時，取決於所使用之溶劑系統。在反應實質上完全後，該鹼可真空移除，所得之殘餘物可使用一般純化技術進行純化。任何上述式I之化合物皆可被轉換為其他之類似物，以 10標準化學操作。所有起始物質、試劑與溶劑皆為商業上可購得，並為此技術領域者熟知，除非另有指出。這些化學操作為此技術領域者所熟知，並包括(a)移除保護基，方法描述於 T· W· Greene and P.G.M· Wuts，“Protective Groups in Organic Synthesis”，Second Edition，John Wiley and Sons, 15 New York，1991;(b)以一級或二級胺、硫或醇置換離去基（鹵素、甲磺酸鹽、甲苯酸鹽等），分別形成二級或三級胺、硫醚或醚類；（c)以異氰酸酯、氣酸（或其他經活化之羧酸衍生物）、烷基/芳基氯化甲酸酯或磺基氯，處理一級或二級胺，以付相對應之尿素、醢胺、安基甲酸g旨或續醯胺；（d)使用 20 醛類將一級或二級胺進行還原胺化反應。本發明化合物可具有不對稱碳原子。非鏡像混合物可 21 1304062 依據其物理化學性w “分離出個狀非鏡像異構物，以此技術領域者所知之方法，例如，層析或分液結晶法。鏡像異構物可藉由將鏡像混合物轉換為非鏡像混合物由與適當之光學活性化合物(如醇類)反應，分離該非鏡像^ 構物，並轉換(如謂)該_之非麟異構物為相對: 鏡像異構物。除非另有指出，所有此類鏡像異構物，包括非鏡像混合物與純鏡像異構物，皆列人本發明中。

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本^明化合物之本質為為驗性，可與各種無機酸與有機酸形成不同之鹽類。雖然此種鹽類必須為藥學上可接受投予動物體者，通常在實施時，—開始由反應中分離出: 本毛月化σ物為藥學上無法接受之鹽類，之後再簡單轉換為自由驗化合物’以驗性試劑處理，之後再將該自由驗簡單轉換為藥學上可接*之酸添加鹽類。本發明驗性化合物之&L/+加鹽類，可立即將該驗性化合物以實質上當量之石庚物或有機酸，在適當之水介質中或適當之有機溶:里如^ 醇或乙醇巾處理。仔細將溶劑紐後，便可獲得所希望之固體鹽類。所希望之酸性鹽類亦可沉澱自自由驗之有機溶中藉由加入一適當之礦物或無機酸至該溶液中。而那些本質為酸性之化合物可與各種藥學上可接受之 20陽離子形成驗性鹽類。此種鹽類之範例包括驗金屬或驗土金屬鹽類，尤其是，鈉鹽與鉀鹽。這些鹽類皆由一般技術製備。使用作為製備本發明之藥學上可接受鹽類之試劑之化學鹼，為可與本發明酸性化合物形成無毒性鹼鹽者。此種無毒性鹼鹽包括衍生自藥學上可接受之陽離子，如鈉、 22 1304062 鮮喝興鎮荨。這些鹽類可輕易地以含有所希可接受之陽離子處理該相對應之酸性化合物而得所狀溶液蒸發乾燥，較佳在減壓環境下。此外，它們亦可藉由將該酸性化合物之低級醇類溶液與所希望之驗烷氧化物混合在-起，之後以前述同樣方式將所得溶液蒸發乾無。在任-情況下，較佳使用化學計量式之試劑，以確保反應完全，與最終希望之產物之最大產率。 10 15 本發明之化合物可作為叫删之調節劑。本發明化合物可卿由寧SD1媒介之過程，即生物性、生理性、内分泌性與其他體内過程，其經由受器與受器結合物所媒介，其反應於此所述之llpHSD1抑制劑(如糖尿病、高脂也症、肥胖症、葡萄糖财受性不良、高血壓、脂肪肝、糖尿:併發症(如視網膜病變、腎病變、精神官能症、白内障，以及冠狀動脈疾病，及其類似病症）、動脈硬化、域糖尿病多㈣巢症候群、心血管疾病（如缺血性心臟病及類= 病）、細胞受損(例如由中風引起之大腦受損，及其類似物^ 由動脈硬化症或缺血性，病、痛風、發炎麵（如骨關節炎、疼痛、發熱、風濕性關節炎、腸炎、座瘡、囉傷、 2乾癖、濕療、過敏症(allergosis)、氣喘、GI潰癌、惡體^、 20自體免疫疾病、胰臟炎，及其類似病症）、癌症、骨質疏梦症與白内障。此過程之調節可於體外或體内完成。節可於廣範圍之個體中進行，如人類1齒類1羊、豬周母牛，及其類似物。、本發明之化合物可用於數種涉及npHSDl酵素調節之 23 1304062 指標中。因此，本發明之化合物可用於對抗癡呆症（請見 WO97/07789)、骨質疏鬆症（請見 Canalis E 1996, ^Mechanisms of Glucocorticoid Action in Bone: Implications to Glucocorticoid-Induced Osteoporosis’’，Journal of Clinical 5 Endocrinology and Metabolism，81，3441-3447)，且可用於免疫系統之病症（請見Franchimont，et· al，“Inhibition of Thl Immune Response by Glucocorticoid: Dexamethasone Selectively Inhibits IL-12-induced Stat 4 Phosphorylation in T Lymphocytes,,5 The Journal of Immunology 2000^ Feb 15, 10 vol 164 (4)，pages 1768-74)，且落於上述所列之指標中。在分離出之胰臟β-細胞中，lipHSDl之抑制會增進經葡萄糖-刺激之胰島素分泌(Davani，B.，et al. (2000) J.及W.

Nov. 10, 2000; 275(45)·· 34841-4)。葡萄糖皮質素已知可降低體内胰臟胰島素之釋放(Billaudel，B. and B. C. J. 15 Sutter (1979)价隱 Μ灿Z).及认 ii: 555-560)。因此， llpHSDl之抑制係預期可產生其他糖尿病治療之有益作用，除了對於肝臟與脂肪之作用外。最近的數據顯示，葡萄糖皮質素目標受器與npHSDl 酵素之含量決定了青光眼之可能罹病率（St〇kes，j·，et al·， 20 (2000)’謂从〇Phthalmol· 41:1629· 1638)。此外，llpHSDl 之抑制最近發展為降低眼内壓的一種新方法(Walker Ε. Α·, al5 poster P3-698 at the Endocrine society meeting Jun. 2 15, 1999, San Diego)。攝入甘伯酸(carben〇x〇i〇ne)，一種非特異性lipHSDl抑制劑，係顯示可降低正常個體中眼内 24 1304062 壓鄉。在眼中，11PHSD1之表現係询限於角膜上皮之基底細胞’以及角膜之無色素沉積上皮(水樣液產生處）、睫狀肌二及虹膜之擴張肌。相反地，遠端同功酶u &經基固醇脫氫酶第2型，在無色素睫狀上皮與角膜内皮中有高度表 5現。無酵素發現於小樑網狀組織，排水處。因此，叫耶⑴ 被認為在水樣液產生中扮演重要角色，但目前尚未知是藉由干擾葡萄糖皮質素或是礦物質皮質素受器之活化，或二者皆是。膽酸會抑制ll-β-羥基固醇脫氫酶第2型。此會導致體内 10平衡傾向於可體松類脂醇（c〇rtis〇l)，而非可體松 (cortisone) ’如同有關於尿液代謝物比例之研究所顯示 (Quattropani C5 Vogt B5 Odermatt A5 Dick B? Frey B M5 Frey F J. 2001. j cim Invest. Nov; 108(9): 1299-305. ^Reduced Y of 11 beta-hydroxysteroid dehydrogenase Patients 15 with Cholestasis”）。由於選擇性抑制劑造成丨丨pHSD丨在肝中之活性降低’係預期可逆轉此種不平衡，可緊急消除症狀如南血壓，當等待手術治療移除膽堵塞物時。本發明之化合物亦可用於治療其他與葡萄糖利用不良與胰島素抵抗性之代謝性病症，包括NIDDM主要晚期併發 2〇症如糖尿病血管病變、動脈硬化症、糖尿病腎病變、糖尿病神經病變與糖尿病眼部併發症，如視網膜病變、白内障形成與青光眼’以及許多其他與NIDDM相關之病症，包括血脂異常葡萄糖皮質素誘發之胰島素抵抗性、血脂異常、夕囊性卵巢症、肥胖症、高血糖症、高脂血症、高膽固醇 25 1304062 症、咼二酸甘油脂血症、高胰島素血症，以及高血壓。這些症狀之簡單定義為可於任一醫學字典中獲得，例如， X 施必⑶/7 (1〇th 如）。 11 pHSD 1活性之抑制 5 11 3HSDlg»^M^ llpHSDl試驗係於100爪“三乙醇胺緩衝液pH 8 〇，含有200 mM NaCl、0.02% η·十二烷基_|3_D_麥芽糖苷、5%甘油、5ηιΜβ-巯基乙醇中進行。典型決定Ki_之反應可於室溫下之Corning%u6_孔盤中進行，描述如下：叫耶⑴ 10酵素(5 nM，最終濃度）係預靜置於含有抑制劑與NADpH (500 μΜ，最終濃度)之試驗緩衝液中至少％分鐘。當預靜置元成日守’ 5亥反應係以加入再生系統(2 mM葡萄糖-6-麟酸鹽，1 U/mL葡萄糖_6_磷酸鹽脫氫酶，以及6 mMMgCl2,所有濃度皆為緩衝液中之最終濃度），以及3H-可體松 15 (cortisone) (200 nM，最終濃度）而啟動。60分鐘後，60 之試驗混合物係轉移至第二96-孔盤中，並與等體積之二甲基颯混合，以停止反應。反應混合物之15 pL分液係加入 C-18管柱中（Polaris C18-A，50 X 4.6mm，5 μ，180 Angstrom from Varian)，連結至自動化高效能液相層析儀，由cohesive 2〇 Technologies發展，商業上可獲得自 Franklin，Massachusetts USA ’搭配β-RAM模式3放射線-HPLC偵測器，得自IN/US，商業上可獲得自Tampa，Florida USA。受質與產物尖峰係分離出，使用43:57甲醇比水(v/v)之等梯度混合物，流速為1.〇 mL/分鐘。 26 1304062 初始反應速率係經測量，於反應60分鐘時停止，並藉由測量在各濃度之抑制劑存在或不存在下之產物形成區域。Kiapp值係使用緊密結合型抑制劑之方程式測量，由

Morrison，JF.發展（Morrison JF· 5幻c/nVw dcia· 1969; 5 185: 269-86)：

vz_ (/ + Ε + Κί)^ΛΙ(Ι + Ε + Κ^)2-UE v0 2./ ) 其中Vi與v。為可體松類脂醇(cortis〇l)形成之速率，分別在抑制劑存在或不存在之情況下，I為抑制劑濃度，以及E 為試驗緩衝液中llpHSDl之濃度。所有報導之濃度皆為試 10 驗緩衝液中之最終濃度。亦凊參照 Morrison，J.F·，“Kinetics of the reversible inhibition of enzyme-catalysed reactions by tight-binding inhibitors，” 1969; 185: 269-86。本發明化合物對於lipHSDl酵素之Kiapp值一般介於約 15 10 nM與約10 之間。本發明化合物經測試，皆於上述至少一 SPA试驗中具有Kiapp值小於1 μΜ，較佳小於1〇〇 ηΜ。某些較佳之化合物族群對於各種Hj—HSD具有不同之選擇性。一較佳之化合物族群對於npHSDl具有選擇性活性，而非lip-HSD-2。另一較佳之化合物族群則對於^ pHSD-2 20具有選擇性活性’而非11 pHSDl。（Morrison JF· 5/oc/n·所 BiophysActa. 1969; 185: 269-86) ° 抑制百分比係於1〇〇乙醇胺緩衝液，pH 8.0，200 mM NaCn’ 0·02°/〇 η-十二烷 |D_麥芽糖苷與5 mM β-ΜΕ。 27 1304062 典型反應係進行於Corning® u-底-96-孔盤中決定，並描述如下：11 PHSD1酵素(5慮，最終濃度）係預靜置於含有抑制劑與NADPH (500 _，最終濃度）之試驗緩衝液中至少3〇分鐘。當預靜置完成時，該反應係以加入再生系統(2 mM 5葡萄糖-6-磷酸鹽，1 u/mL葡萄糖-6-磷酸鹽脫氫酶，以及6 mMMgCl2 ’所有濃度皆為緩衝液中之最終濃度），以及3H_ 可體松(cortisone) (200 nM，最終濃度）而啟動。60分鐘後， 60 pL之試驗混合物係轉移至第二96-孔盤中，並與等體積之二甲基職混合，以停止反應。反應混合物之15 μί分液係 10 加入C-18 管柱中（Polaris C18-A，50 X 4.6 mm，5 μ，180 Angstrom from Varian)，連結至自動化高效能液相層析儀，由Cohesive Technologies發展，商業上可獲得自Franklin， Massachusetts USA，搭配β-RAM模式3放射線-HPLC偵測器’得自IN/US，商業上可獲得自Tampa，Florida USA。受質與產物尖峰係分離出，使用43:57甲醇比水(v/v)之等梯度混合物，流速為1.0 mL/分鐘。抑制百分比係以下列方程式計算：（100 -(含抑制劑之 3H-可體松類脂醇(cortis〇i)尖峰面積/不含抑制劑之3H可體松類脂醇(cortisol)尖峰面積）X 100)。某族群之化合物對於 20 各種ii^_hsd酵素具有不同之選擇性。某一群化合物對於 11PHSD1具有選擇性活性，而非iip_HSD-2。而另一群之化合物則對於11 PHSD-2具有選擇性活性，而非11 pHSDl。 [1，2-3H]-可體松（cortisone)可商業上購自 American Radiolabeled Chemicals Inc. of St. Louis, Missouri USA. 28 1304062 NADPH，而葡萄糖_6_磷酸鹽與葡萄糖各磷酸鹽脫氫酶，係購自 Sigma®。 Η1293_11 βΗ^ρΐ/GRE-螢光酶細胞-基磔試驗 11 PHSD1酵素活性之抑制亦使用人類腎臟HEK293穩 5定轉染細胞測量，其過度表現人類lipHSDl，以及含有經葡萄糖皮質素-活化葡萄糖皮質素受器（GRE)特異辨識之 DNA序列之報導子質體’使用類似於Bujaiska et al，Human 1 Ιβ-hydroxysteroid dehydrogenase: Studies on the stably transfected isoforms and localization of the type 2 isozyme 10 within renal tissue, Steroids, 62(1)，1991，77-82 中所描述之方法。這些序列可融合至螢光酶報導子基因（Luc)，使^ PHSD1酵素調節可定量。llpHSDl可反應於將無活性葡萄糖皮吳素轉換為具活性（於人體中可體松(cortisone)會轉換為可體松類脂醇(cortisol))。可體松類脂醇(cortisol)(但非可 15 體松(cortis〇ne))結合至並活化葡萄糖皮質素受器（GR)，其導致螢光酶之活化，並發光(試驗讀出）。具有抑制npHSDl 月匕力之化合物可降低螢光酶之訊號，與可體松（cortisone) 控制組相較(酵素受質）。細胞係植於384孔平底白色聚苯乙烯經TC-處理之微 20 盤，20,000細胞/孔，體積為4〇 μΐ/孔，於不含血清之DME 培養液中。培養盤係靜置於37°C，5%C02至隔日，在加入抑制劑化合物之前。不同濃度之抑制劑化合物係加入10〇/〇 (v/v)之一甲基石風(5 μΐ^/孔），之後加入3 μΜ可體松(cortisone) (5 μΙ7孔），且細胞靜置於37°C (5% C02)六小時。靜置完畢 29 1304062 之後，25 μί/孔之SteadyLiteHTS加入，培養盤於室溫搖晃器上靜置10分鐘。之後將培養盤置於Top Count上讀取，使用384HSD1程式。導致50%發光訊號抑制之抑制劑化合物濃度係經由客製化Excel Macro決定。所有結果係與1〇〇%活化 5 控制組比較，即，僅以可體松(cortisone)處理之細胞（未添加抑制劑）。人類Fa2N-4不朽化細胞基礎試驗

Fa2N-4為衍生自人類肝細胞之細胞株，由MultiCell

Technologies，Inc·發展（美國專利號6，1〇7，(Μ3)，購自Xen〇 10 Tecl1 LLC，經由獨占性執照。這些細胞獨特地，在形態學與功能性上，類似於初代培養物，因而具有許多正常人類肝細胞之特徵，因此提供實質上無限制，且可再生之細胞以支持藥物發現。lipHSDl酵素活性之抑制係以此細胞模式坪估，藉由測量可體松類脂醇(c〇rtis〇l)(酵素產物）堆積 15之下降，於與可體松(cortisone)(酵素受質）與潛在酵素抑制劑之細胞培養物中。可體松類脂醇(cortisol)訊號係定量性地於經處理細胞之懸浮液中定量，使用關聯性_酵素免疫試驗（EIA)™ 可體松類脂醇（cortis〇1)套組（Assay Designs， Inc.) 〇 '〇細胞置於96孔平底經膠原蛋白塗佈之微盤中，20,000 細胞/孔，於200 μΐ/孔MFE™ (多功能性強化llc) 培養液，含有抗生素(盤尼西林.鏈黴素），補充有1〇%之熱去活化胎牛血清。培養盤靜置於3rc，5%c〇2下整夜。隔日’在加入可體松(Cortisone)與抑制劑化合物之前，培養 30 1304062 液係變更為肝細胞基礎培養液(HBM-Cambrex Bio Science Walkers Ville，Inc)，僅含有抗生素。與各種抑制劑化合物(20 μΧ/孔）預靜置二十分鐘後’加入5 μΜ可體松(cortisone) (20 μί/孔），且細胞培養於37°C，5% C02至隔日。靜置後，100 5 每一懸浮液係分析可體松類脂醇(cortisol)含量，使用可體松類脂醇(cortisol)-EIA套組，購自Assay Designs，依據使用手冊。培養盤係於微盤讀取機上，於4〇5nm讀取(Spectra MAX PLUS - Molecular Devices Corporation)，於580nm校正。所有結果皆與100%活化控制組相較，即，細胞僅以可 10 體松(cortisone)處理（不添加抑制劑）。醫藥組成物/配方、劑次斑投華模式所申請化合物之藥學上可接受鹽類包括其酸添加與鹼性鹽類。適當之酸添加鹽類為形成自可形成無毒性鹽類之酸 15者。範例包括，醋酸鹽、己二酸鹽、天門冬胺酸鹽、苯曱酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、樟腦磺酸鹽 '檸檬酸鹽、環磺酸鹽、乙二磺酸鹽、esylate、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡萄糖鹽、六氟鱗酸鹽、hibenzate、氫氯酸/氯 20鹽、氫溴酸/溴鹽、氫碘酸/碘鹽、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲石黃酸鹽、甲基石黃酸鹽、萘酸鹽、2-萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸/磷酸氫鹽/二氫磷酸鹽、焦榖胺酸鹽、蔗糖酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、丹寧 31 1304062 酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽、三氟醋酸鹽與xinofoate。適當之鹼性鹽類為形成自可形成無毒性鹽類之鹼者。範例包括，銘、精胺酸、benzathine、#5、膽驗、二乙基胺、二乙醇胺、甘胺酸、離胺酸、錤、meglumine、酮胺 5 (olamine)、鉀、鈉、胺基丁三醇與鋅鹽。亦可形成酸與驗之半鹽類，例如，半硫酸與半約鹽類。若要回顧適當之鹽類，請見Handbook of

Pharmaceutical Salts: Properties，Selection，and Use，Stahl 與 Wermuth所著(Wiley_VCH，2002)。 10 所申請化合物之藥學上可接受鹽類可以下列三種方法之一或多種製備： (i)藉由將所申請之化合物與所希望之酸或驗反應； (II) 藉由將酸-或鹼-不穩定保護基由申請化合物之適當前驅物上移除，或藉由適當環狀前驅物，如内酯或内醯 15胺，之開環反應使用所希望之酸或鹼，而得；或 (III) 藉由將所申請化合物之一鹽類轉換為另一鹽類，藉由與適當之酸或鹼反應，或藉由離子交換樹脂。此三種反應一般皆於溶液中進行。所得之鹽類可沉澱出，或經過濾收集，或將溶劑揮發而回收。所得鹽類之離 20子化程度可由完全離子化變化至大部分非離子化。本發明化合物具有連續之固體狀態，範圍自完全非晶形，至完全晶體。術語“非晶形，，係指―狀態，其中該物質缺乏分子層級之長範圍秩序，以及，取決於溫度，可具有固體或液體之物理性質。-般而言，此種物質並不具有明 32 1304062 顯的χ-光繞射圖樣，以及，當具有固體性質時，更常被描述為液體。加熱後，係由固體轉變為液體性質，特徵為狀態之改變，一般為二級(‘玻璃態轉換’）。術語“結晶”係指一固體狀態，其中該物質具有一分子層級之規則内部結構， 5 並具有獨特之X-光繞射圖樣，具有已定義之尖峰。此種物質，當加熱足夠時，亦具有液體性質，但由固體改變至液體之特徵為相之改變，一般為一級(“熔點”）。本發明化合物亦具有未媒合與媒合形式。使用於此之術語“媒合物”係描述於一分子錯合物，包含本發明之化合 10 物與一或更多藥學上可接受之溶劑分子，例如，乙醇。術語“水合物”係使用，當該溶劑為水。目前可接受之有機水合物分類系統為其定義為獨立位置、通道或金屬-離子配位水合物者，請見 in Pharmaceutical Solids 5 K. R. Morris (Ed. H. G. Brittain, 15 Marcel dekker，1995)。獨立位置水合物為其中水分子獨立而不與每一參與之有機分子直接接觸者。通道水合物中，水分子位於晶格通道中，緊接著另一個水分子。在金屬-離子配位水合物中，水分子鍵結於金屬離子上。當溶劑或水緊密結合時，該錯合物具有一良好定義之 20 化學計量，與渔度無關。然而，當溶劑或水為弱鍵結時，如通道媒合物與吸濕性化合物，該水/溶劑含量係取決於濕度與乾燥情況。在此情況下，非化學計量形式為正常現象。本發明之化合物亦存在有多成分錯合物（除了鹽類與媒合物)形式，其中該藥物與至少一其他成分以化學計量或 33 1304062 非化學計量含量存在。此種形式之錯合物包括晶籠物（藥物 -主體内涵體錯合物），以及共晶體。後者一般定義為中性分子組成物之晶體錯合物，其經由非共價鍵作用鍵結在一 - 起’但亦可為中性分子與鹽類之錯合物。共晶體亦可以熔 • 5 融結晶製備，自溶劑中再結晶，或藉由共同物理性研磨各成分_請見C⑽腦”，17，1889-1896，0· Almarsson與 M.J· Zaworotko (2004)所著。就一般性多成分錯合物之回顧文獻而言，請見J. PAarm· h·，64 ⑻，1269-1288，Haleblian Φ (1975年8 月）。 10 本發明化合物亦存在有一半晶形狀態（中間相或液晶），當置於適當之條件下。半晶形態為真正結晶狀態與真正一體狀態（不論是熔融物或溶液)之間的過渡階段。半晶形化之增加為溫度改變之結果，描述為“熱向性 (thermotropic)”，而由於第二成份，如水或另一溶劑，之加 15 入，稱之為“液向性，，。具有可形成液向性中間相之化合物係描述為“兩性”，並由具有離子性(如_C〇〇_Na+、-COCTK+，籲或-S〇3-Na+)或非離子性(如-N_N+(CH3)3)極性頭部基團。若要知道更多’睛見 ⑽d ， Ν· Η· Hartshnme與A. Stuart，第4也版(Edward Arnold，1970> 20 之後若提及所申請之化合物包括鹽類、媒合物、多成份錯合物與其液晶，以及其鹽類之媒合物、多成份錯合物與液晶。本發明化合物包括所申請之化合物，如前述定義，包括其所有多晶形與晶習（crystal habits)、其前驅藥物與異構 34 1304062 物（包括光學、空間與互變異構物），如此後所定義，以及所申請化合物之經同位素標記之化合物。如此所指出，一般稱為式⑴化合物之“前驅藥物，，亦落於本發明範疇中。因此，某些式(I)化合物之衍生物，其本 5身具有些許或無藥學活性，當投藥於人體時，可轉換為具所希望活性之式(I)化合物，例如，藉由水解性切割。此種衍生物稱之為“前驅藥物”。使用前驅藥物之其他資訊請見於 Prodrugs as Novel Delivery Systems，Vol_14，ACS Syposium Series (T. Higuchi與 W. Stella)，以及价orever幻 10 Carriers in Drug Design, Pergamon Press, 1987 (Ed. E. B. Roche, American Pharmaceutical Association) ° 本發明之前驅藥物可，例如，由將存在於式⑴化合物之適當官能基置換為此技術領域者所熟知作為“前驅片段，，之某些片#又而產生’ ^田述於如£)⑶识，H. 15 Bundgaard (Elsevier, 1985) ° 本發明前驅藥物之某些範例包括 (1)其中所申請之化合物含有一羧酸官能基(_c〇〇H)、其酯類，如，一化合物其中所申請化合物羧酸官能基之氫置換為(CrC8)烷基； 20 (11)其中所申請之化合物包含—醇類官能基(-OH)、其酯類，如，一化合物中所申請化合物醇類官能基之氫置換為(CrC6) 烷醇基氧基甲基；以及 (111)其中所申請化合物含有一級與二級胺基官能基 (-NH2或-NHR，其中R#H)、其醯胺，例如，一化合物，其中 35 1304062 該式（I)化合物胺基官能基之一或二個氫置換為（crc1G)烷醇基。前述範例之置換族群範例，與其他前驅藥物形式之範 • 例，可見於前述參考文獻中。 . 5 此外，所申請之某些化合物本身即可作為其他申請化合物之前驅藥物。本發明範疇亦包含申請化合物之代謝物，意即，投以該藥物後體内形成之化合物。本發明代謝物之某些範例包括： • (i)申請化合物包含一甲基時，為其羥基甲基衍生物 10 (-CH3 -> -CH2OH)； (ii) 申請化合物包含一烷氧基時，為其羥基衍生物 (OR -> -OH); (iii) 申請化合物包含一第三胺基時，為其二級胺基衍生物(-NWR2 -> -NHR1 或-NHR2); 15 (iv)申請化合物包含一第二胺基時，為其一級胺基衍生物(-NHR1 -〉-NH2); ® (v)申請化合物包含一苯基時，為其酚基衍生物(-Ph-> -PhOH);以及 (vi)申請化合物包含一醯胺基時，為其羧酸衍生物 20 (-C0NH2 -> -COOH)。含有一或多個不對稱碳原子之所申請化合物，可具有二或更多之空間異構物。其中所申請化合物含有一烯基或亞烯基，亦可能為空間順/反（或Z/E)異構物。其中該結構異構物可經過低能量障礙而互相轉換，可發生互變體異構化 36 1304062 (互變化”）。此可發生於所申請化合物含有亞胺基、酮基或肪基之質子互變化形式時，或在含有芳香族片段之化合物中俗稱之價互變體。結果為該單一化合物可具有一種以上之互變體。 5 本發明範疇包括所有申請化合物之空間異構物、幾何異構物與互變體，與其藥學上可接受之鹽類、媒合物或衍生物(如此所定義），包括具有一種以上之互變體形式，及其一或多種混合物。亦包括酸添加物或鹼鹽，其中該相對離子為光學活性，如，心乳酸鹽或/_離胺酸，如，以_酒石酸鹽 10或心_精胺酸。順/反異構物可以此技術領域者所熟知之一般技術分離’如層析法與分液結晶。用於製備/分離各鏡像異構物之—般技術包括非對稱合成，自適當之光學純前驅物，或外消旋物（或外消旋物之 15鹽類或衍生物）之拆分(resolution)，使用，如，非對稱性液相層析法(HPLC)。此外，該外消旋物（或外消旋前驅物）可與具適當光學活丨生之化合物，如醇類，反應，其中所申請之化合物含有 >〇一酸性或鹼性片段，鹼或酸如卜苯基乙胺或酒石酸。所得非鏡像混合物可以層析法及/或結晶法分離出，且該非鏡像混合物之一可轉換為相對應之純鏡像異構物，以此技術領域者所知之方法。 ^本發明之不對稱化合物（與其不對稱前驅物）可獲得自每含鏡像異構物之形式，使用層析法，尤其是HpLC，在不 37 1304062 對稱樹脂上，動相由碳氫化合物組成，一般為庚烷或己烷，含有〇至50%體積之異丙醇，一般自2%至20%，以及〇至5% 體積之烷基胺，一般為0.1%之二乙基胺。沖提液之濃度提供了濃縮之混合物。 5 當外消旋物結晶時，可能出現兩種不同形式之晶體。第一種形式為上述所稱之外消旋化合物（真正外消旋），其中一晶體之均質形式係產生，含有等莫耳量之二鏡像異構物。弟一種形式為外消旋混合物或聚集物(conglomerate)，其中二種形式之結晶係以等莫耳量形式產生，每一者皆含 10 有單一鏡像異構物。當一晶體形式存在於外消旋混合物時，具有相等之物理性質’它們與真正外消旋物相較，具有不同之物理性質。外消旋混合物可以一般此技術領域者已知之技術分離出_ 亲 I ’ 如 Stereochemistry of Organic Compounds by Έ. h. 15 Eliel and S. H. Wilen (Wiley, 1994) 〇本發明包含所有藥學上可接受之本發明結晶型，包括申明化合物之同位素-標記形式。在同位素-標記形式中，或多個原子被一或多個具有相同原子數，但原子量或質量數不同於自然界主要之原子量或質量數之原子取代。 2〇適用於包含本發明化合物之適當同位素包括氫之同位素，如Η與3h ;碳之同位素，如uc、13c與14C ;氮之同位素’如13N與15n ;氧之同位素，如丨5〇、丨7〇與丨8〇 ;以及硫之同位素，如35s。某些經同位素-標記之化合物，如加入放射性同位素 38 13〇4〇62 ’可使用作為藥物，及/或受質組織分佈研究。放射性同位素氣’即，3H，以及碳_14，即14c，特別常用於此目的，由於其容易加入，且偵測裝置可立即使用。以較重同位素如氘，即2H取代，可提供某些醫療上之 <點’源自於較佳之代謝穩定性，如增加體内半生期，或降低所需之劑量，因此在某些情況下為較佳。乂正子發射同位素，如nC、18F、5〇與13N取代，則可正子斷層掃描(PET)研究，檢驗受質受體佔有率。 10 15 20 經同位素-標記之申請化合物可以此技術領域者所知邊又方法，或類似於描述於後述範例與製備中之方法製一用適^之經同位素-標記試劑’取代先前所使用之未經標記試劑。曰—本發明之藥學上可接受媒合物包括其中結晶化之溶劑同位素取代者，如D2〇、d6-丙酮、d6-DMSO。物亦落於本發明範疇中者為所申請化合物之中間化合 ^ 士之月丨〗所疋義，其所有鹽類、媒合物與錯合物，其鹽 ^所有媒合物與錯合物皆如同先前所巾請化合物之化合勿疋義。本發明包括前述物f之所有多晶形與其晶習。當依據本發明製備申請化合物時，可開放給此技術領 =者常規性地選擇化合物形式，提湘於此目的特徵之最合。此種特徵包括㈣、溶解度、加工性，與中間形式之產率，以及產物分離純化之容易度。藶物產物又所申請之化合物應評估立〜 1古，、生物樂學性質，如溶解度與 39 1304062 溶液穩定度(橫越各pH值）、通透性等，以選擇最適當之劑量形式與投藥路徑，以治療假定之病徵。本發明化合物用於醫藥用途，可投以結晶或非晶形產物。它們，如固體栓劑、粉末或薄膜形式，可藉由沉澱、 5結晶、冷凍乾燥、喷霧乾燥或蒸發乾燥等方法獲得。微波或無線電頻乾燥亦可用於本發明。匕們可單獨或與本發明一或多種其他化合物組合，或與一或多種其他藥物組合（或其任一組合物)投藥。可用於組合物中之醫藥活性試劑之範例包括抗感染劑，包括，但不 10侷限於，抗生素、抗病毒劑與抗黴菌劑；抗過敏劑與巨細胞穩定劑；固醇類與非固醇類抗發炎試劑（如奈帕吩安 (nepafenac));環氧酶抑制劑，包括，但不侷限於，c〇xI與 Cox II抑制劑；抗感染劑與抗發炎劑之組合；消充血劑；抗 -青光眼劑，包括，但不侷限於，腎上腺、点，腎上腺阻斷劑、 15心腎上腺協同劑、副交感神經模擬劑、膽酯酶抑制劑、碳 ^夂酐酶抑制劑，以及前列腺素；抗青光眼試劑組合物；抗气化背1，營養補充劑；治療黃斑囊樣水腫之藥物，包括， ^不侷限於，非固醇類抗發炎劑；用於治療與年紀相關之加汽斑退化之藥物，包括非滲出性(乾燥A·)與渗出性（濕潤 )匕括，但不侷限於，血管新生抑制劑，包括會抑制蛋白激酶受器包括㈣代器之血管新生抑制劑，·以及營養、、J ’用於冶療肝感染與CMV眼部感染之藥物；用於治療增生性破璃體視網膜病變之藥物，包括，但不揭限於，抗代謝物與纖維蛋白溶解藥；傷口調節劑，包括，但不侷 40 1304062 限於，生長因子；抗代謝物；神經保護藥物，包括，但不侷限於，伊地羅力（diprodil);以及血管固醇（angi〇static stennd)，用於治療後段26之疾病或病症，包括，但不侷限於，與年紀相關之黃斑退化，包括非滲出性(乾燥AMD)與 5滲出性（濕潤AMD)、脈絡膜血管增生、視網膜病變、視網膜炎、葡萄膜炎、黃斑水腫，以及青光眼。此種血管固醇係完全揭示於美國專利號5,679,666與5,770,592。用於治療黃斑囊樣水腫之非固醇類抗發炎藥物為奈帕吩安 (nepafenac) 〇 0 一般而言，本發明之醫藥組成物可投以與一或多種藥學上可接受之輔藥結合之配方。術語，輔藥，使用於此係描述除了本發明化合物外之任何成分。輔藥之選擇大部份依據因素，如特定投藥模式、輔藥對於溶解度與穩定度之影塑，以及藥劑形式之本質。 5 適用於傳送本發明化合物之醫藥組成物，以及其製備方法，為此技術領域者立即可知。此種組成物與其製備方法可見於，如，Remington's Pharmaceutical Sciences，19th 版（Mack Publishing Company，1995) 〇 E服投藥〇本發明化合物可口服投藥。口服投藥係涉及呑嚥，因此化合物會進入腸胃道，及/或經口、經舌或舌下投藥，而使化合物直接由口部進入血液。適用於口服投藥之配方包括固體、半固體與液體系統，如藥錠；軟或硬膠囊，含有多重·或奈米-顆粒、液體或 41 Ϊ304062 粉末；菱形錠（包括液體填充）；口嚼錠；凝膠；快速分散藥劑形式；薄膜；卵型劑；喷霧；以及經口 /黏膜附著貼布。液體配方包括懸浮液、溶液、糖漿與酿劑。此種配方可使用作為或硬膠囊（由，如明膠或羥基丙基甲基纖維素） 5 之填充劑，且一般包含一載體，如水、乙醇、乙二醇、丙二醇、甲基纖維素，或一適當之油類，以及一或多種乳化劑，及/或懸浮劑。液體配方亦可由固體，如藥袋中，重新配製。本發明化合物亦可使用快速溶解、快速分解之藥劑形 10 式，如描遂於Expert Opinion in Therapeutic Patents，1X16)， 981-986，Liang與Chen所著（2001) 0 就藥錠形式而言，取決於劑量，該藥物可製造為1%重至80%重之藥劑形式，更佳為5%重至60%重之藥劑形式。除了藥物之外，藥錠一般包含分解劑。分解劑之範例包括 15 澱粉乙醇酸鈉、羧基甲基纖維素鈉、羧基甲基纖維素約、交聯羥甲纖維素鈉、交聯聚乙烯吡咯烧酮、聚乙烯基ϋ比哈酮、甲基纖維素、微結晶纖維素、經低級烷基取代之經基丙基纖維素、殿粉、預明膠化殿粉與海藻膠鈉。一般而言，分解劑包含1%重至25%重，較佳5%重至20%重之劑量形式。 2〇黏著劑一般用於提供藥錠配方之黏著特性。適當之黏著劑包括微結晶纖維素、明膠、糖類、聚乙二醇、天然與合成膠、聚乙稀基0比洛_、預明膠化殿粉、經基丙基纖維素與·基丙基甲基纖維素。藥旋亦可包含稀釋劑，如乳糠 (單水合物、喷霧乾燥單水合物、無水物及其類似物）、山梨 42 1304062 糖醇、木糖醇、葡萄醣、山梨糖醇、微結晶纖維素、殿粉與二驗基碟酸鈣二水合物。藥鈦亦可選擇性地含有界面活性劑，如十二烷基硫酸鈉與聚山梨醣酯80，以及助流劑如二氧化矽與滑石。若存 5在’藥疑中可包含0·2%重至5%重之界面活性劑，以及0·2% 重至1 %重之助流劑。藥錠一般亦可包含潤滑劑，如硬脂酸鎂、硬脂酸鈣、硬脂酸鋅、硬脂酸基富馬酸鈉，以及硬脂酸鎂與十二烷基硫酸鈉之混合物。藥旋中一般包含〇·2%重至1〇%重之潤滑 10劑，較佳為〇·5%重至3%重之潤滑劑。其他可能之成份包括抗氧化劑 '增色劑、香味劑、防腐劑與遮味劑。示範性之藥錠包含至多約80%藥物，約10%重至約9〇% 重之黏著劑，約0%重至約85%重之稀釋劑，約2%重至約1〇% 15 重之分解劑，約0.25%重至約10%重之潤滑劑。藥疑摻合物可直接壓縮或藉由滾輪壓縮，形成藥鍵。藥錠摻合物或摻合物之一部分可為濕式_、乾式_，或熔融_ 顆粒化、熔融凝結化，或製錠前擠出。最終之配方可包含一或多層，且可為經包覆或未包覆；甚至可包於膠囊中。 20 藥錠之配方係討論於外，第 1 冊，H. Lieberman 與 L.Lachman (Marcel Dekker，New York，1980) o 人類或獸醫用消耗性口服薄膜一般可為柔軟水溶性或水膨潤性薄膜藥劑形式，其可快速溶解或黏膜附著，一般 43 1304062 包含申請化合物、薄膜成形聚合物、黏著劑、溶劑、濕潤劑、塑型劑、穩定劑或乳化劑、黏度—修飾劑與溶劑。該配方之某些成分具有大於一種功能。所申請化合物可為水溶性或非水溶性。水溶性化合物 5 一般包含1%重至80°/°重，較佳20%重至50。/。重之溶質。較不可溶之化合物可包含較大部份之組成物，—般為至多88% 重之溶質。此外，式(I)化合物可為多重顆粒微珠形式。

薄膜成形聚合物可選自天然多醣、蛋白質或合成之水膠體，且一般存在量為0.01%至99%重，更常見為3〇%至8()% 10 重。其他可能之成份包括抗氧化劑、增色劑、香味劑與香味增強劑、防腐劑、唾腺刺激劑、冷卻劑、共溶劑（包括、、由）、軟化劑、成塊劑、抗發泡劑、界面活性劑與遮味劑。本發明之薄膜一般係將塗佈至可撕下之背塾或紙上之 15薄水性膜，進行揮發乾爍而製備。此可於乾燥箱或塔中進行，一般為組合式塗佈乾燥機，或藉由冷凍乾燥或真空製備0 口服投藥之固體配方可配製為立刻及/或經修傅釋放。經修飾釋放配方包括延遲-、持續_、暫停_、經控制、 2〇標靶式-與程式化-釋放。用於本發明目的之適當經修飾釋放配方係描述於美國專利號6，106,864，在此併入本案以作為參考資料。其他適當之釋放技術細節，如高能量分散與滲透與經包覆顆粒， ^Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14^ yer 44 1304062 等人(2001)，在此併入本案以作為參考資料。使用口嚼錠以達成經控制釋放係描述於WO 00/35298。非經腸胃投藥 - 本發明化合物亦可直接投藥至血液中、肌肉中或内部 . 5 器官。適當之非經腸胃投藥包括靜脈内、動脈内、腹膜内、囊内、室内、子宮内、胸骨内、頭蓋骨内、肌内、滑液内與皮下。非經腸胃投藥之適當裝置包括針（包括微針)注射、無針注射器與灌入技術。 • 非經腸胃之配方一般為水溶液，其可包含輔藥如鹽 10 類、碳水化合物與緩衝試劑(較佳pH 3至9)，但，在某些應用中，其更可適當地配製成無菌之非水性溶液，或乾燥形式，與一適當載劑結合，如無菌、無致熱原水。在無菌條件下，如冷凍乾燥，製備非經腸胃配方，可立即完成，使用此技術領域者所知之標準製藥技術。 15 用於製備非經腸胃溶液之申請化合物溶解度可增加，藉由適當之配方技術，如加入溶解增進劑。 ^ 非經腸胃之配方可配製為立即及/或經修飾釋放。經修飾釋放配方包括延遲-、持續-、暫停-、經控制-、標靶式-與程式化-釋放。因此，本發明化合物可配製為懸浮液或固 20 體、半固體或觸變性液體投藥，作為植入性儲存站，提供活性化合物之經修飾釋放。此配方之範例包括經藥物包覆之支架，以及半固體或懸浮液，包含藥物載入之聚(dl-乳酸 -共甘醇)酸(PGLA)微球體。局部投藥 45 1304062 本發明化合物亦可局部、皮膚（内），或經皮投藥至皮膚或黏膜。用於此目的之一般配方包括凝膠、水膠、乳液、溶液、乳霜、油膏、粉末、敷藥、泡沫、薄膜、皮膚貼布、糯米紙、植入物、海綿、纖維、繃帶與微乳化物。亦可使 5 用微脂體。一般之載體包括酒精、水、礦物油、液態蠟、白堪、甘油、聚乙二醇與丙二醇。亦可加入穿透增強劑，請見，如，J· Pharm Sci，88Π0), 955-958，Finnin與Morgan 所著（1999年10月）。其他局部投藥之方法包括電破法、離子導入法、聲子 10 導入法、超音波導入法與微針或無針注射(如Poderject™、 BiojectTlv^)傳送。用於局部投藥之配方可配製為立即及/或經修飾釋放。經修飾釋放配方包括延遲_、持續-、暫停_、經控制_、標靶式-與程式化-釋放。 15 及入/鼻内措鏟本發明化合物亦可鼻内投藥，或藉由吸入，一般以乾燥粉末吸入器中之乾燥粉末形式（不論是單獨、混合物如與乳糖之乾燥掺合物，或混合成分顆粒，如與磷脂質如磷醯基膽鹼混合），加壓容器、幫浦、喷霧器、霧化器（較佳該霧 2〇化器使用電水動力學產生微細氣霧）或噴霧器中之氣霧喷劑’使用或未使用推進劑，如四氟乙烷或 1，1，1，2,3,3,3-七氟丙烷，或鼻滴劑。就鼻内用途而言，該粉末可包含生物黏附劑，如幾丁質或環糊精。該加壓容器、幫浦、噴霧器、霧化器或喷霧器，含有 46 1304062 本赉明化a物之溶液或懸浮液，包含，如乙醇、水性乙醇，或適當之替代試劑，用於分散、溶解或延長活性試劑之釋放、作為溶劑之推進劑，以及一選擇性之界面活性劑，如 - 三油酸山梨_酯、油酸或寡乳酸。， 5 在使用乾燥粉末或懸浮配方之前，該藥物產物係微小化至適合用於吸入傳送之尺寸（一般小於5微米）。此可藉由任一適當之研磨方法達成，如螺旋喷射研磨、流體床噴射研磨、超臨界流體製程，以形成奈米顆粒、高壓均質化， ® 或喷霧乾燥。 10 用於吸入器或吹藥器之膠囊（如由明膠或羥基丙基甲基纖維素製成）、氣泡罩與卡匣，可配製成含有本發明化合物、適當粉末基底如乳糖或澱粉，以及表現度修飾劑，如 /-焭氨酸、甘露醇或硬脂酸鎂，之粉末混合物。乳糖可為無水物，或單水合物形式，較佳為後者。其他適當之辅藥包 15括葡聚糖、葡萄醣、麥芽醣、山梨醣醇、木醣醇、果醣、 ^ 蔗醣與漏蘆醣。用於霧化器，其使用電水動力學以產生微細氣霧，之適當溶液配方可包含本發明化合物1 至20 mg，每次動作，且動作體積可為1 W至刚μ卜-典型配方可包含申請己物丙一醇、無囟水、乙醇與氯化納。可用於取代丙二醇之替代試劑包括甘油與聚乙二醇。適當之香味劑’包括薄荷醇、左薄荷醇，或甜味劑如糖精或糖精納，可加入本發明用於吸入/鼻内投藥之配方中。 47 1304062 用於吸入/鼻内投藥之配方可配製為立即及/或經修飾釋放，使用如PGLA。經修飾釋放配方包括延遲-、持續-、暫停-、經控制-、標粗式-與程式化-釋放。直腸/陰道内投藥 5 本發明化合物可直腸或陰道投藥，如以栓劑、陰道藥栓、陰道環或灌腸形式。可可亞油為傳統栓劑基底，但可使用各種適當之替代物。直腸或陰道投藥配方可配製為立即及/或經修飾釋放。經修飾釋放配方包括延遲-、持續-、暫停-、經控制-、 10 標靶式-與程式化-釋放。眼部/耳部投藥就眼部投藥而言，本發明化合物可於藥學上可接受之眼用載劑傳送，使得該化合物維持於與眼球表面接觸足夠時間，以使化合物可穿透角膜及/或鞏膜與眼睛内部區域， 15 包括，例如，前房、後房、玻璃體、水樣液、玻璃狀液、角膜、虹膜/眼睫、水晶體、脈絡膜/視網膜與鞏膜。藥學上可接受之眼用載體可為油膏、蔬菜油或經包覆材料。本發明化合物亦可直接注射至玻璃狀液或水樣液中。此外，該化合物亦可以已知、可接受之方法，如 20 subtebnon及/或結膜下注射。角膜與Tenon’s囊定義出眼球之外部區域。就治療ARMD、CNV、視網膜病變、視網膜炎、葡萄膜炎、黃斑囊樣水腫(CME)、青光眼，以及眼部後區之疾病或病症而言，較佳係直接置放一特定量之眼用可接受醫藥活性試劑儲存物，於鞏膜之外表面與Tenon’s囊下 48 1304062 方。此外，若為ARMD與CME，最佳係直接置放該儲存物於鞏膜之外表面與Tenon’s囊下方，且一般位於黃斑上方。除了上述之配方之外，該化合物亦可配製為儲存物製 - 劑。此種長效作用配方可以植入方式投藥（例如，皮下或 • 5 肌内）、肌内注射或上述之subtenon或玻璃體内注射。在特定實施例中，該化合物可製備為局部投藥，於生理食鹽水中（與一般用於眼用製劑之防腐劑與抗菌劑之一結合）’並投以眼滴劑形式。該溶液或懸浮液可製備為純化 • 形式，且每日投藥數次。此外，本發明之組成物，如上述 10 製備，亦可直接投藥至角膜。此外，活性成分可為粉末形式，可以適當載體如無菌無致熱原水重製，在使用前。在其他實施例中，該組成物係與可結合至角膜之黏性_ 附著聚合物一同製備。因此，例如，該化合物可以適當之 15聚合性或疏水性材料（例如，在可接受油中之乳化物）或離 ^ 子交換樹脂，或難溶性衍生物如難溶性鹽類，配製。在其他實施例中，本發明組成物可利用作為傳統類固醇治療之輔助。用於疏水性化合物之醫藥载劑為共溶劑系統，包含苯 2〇甲醇、非極性介面活性劑、水_可混溶有機聚合物，以及水相。3亥共溶劑系統可為一VPD共溶劑系統。乂扣為抓MV 苯甲醇、8% w/v非極性介面活性劑聚山梨聽醇賴，以及 65% w/v聚乙二醇300，接近絕對乙醇體積之溶液。該vpD 共溶劑系統(WD:5W)含有VPD稀釋1:1，具有5%葡萄糖之 49 ^304062 生低Γ °此共洛谢系統會溶解疏水性化合物，其本身會產變化讀，在系統性投藥之後。共溶劑系統之比例可大幅八’而不會破壞其溶解性與毒性特徵。此外，共溶劑成 5可田4目同度可料：例如，其他低毒性雜性界面活性劑 π用於取代聚山梨_細；聚乙二醇之分液體積可變 η ^其他生物可相容聚合物可取代聚乙二醇，如聚乙烯基比°各綱；以及其他麵或多麵可用於取代葡萄糖。此外，其他用於疏水性醫藥化合物之傳送系統亦可使田。微脂體與乳化物為已知之疏水藥物傳送載劑或載體。 10某些有機溶劑如二甲基砜，亦可使用，雖然通常要付出毒随車又大之代價。此外，該化合物可使用持續釋放系統傳送，如含有醫療試劑之固體疏水性聚合物之半通透基質。各種持續釋放之材料已建立，並為此技術領域者已知。持續釋放之膠囊可，取決於其化學性質，釋放化合物至數週至超 15 過Μ0日。取決於醫療試劑之化學性質與生物穩定性，其他蛋白質穩定之策略亦可使用。該醫藥組成物亦包含適當之固體或凝膠相載體或辅藥。此種載體或輔藥之範例包括碳酸約、鱗酸#5、糖類、澱粉、纖維素衍生物、明膠，以及聚合物如聚乙二醇。 20 盖座技直本發明化合物可與可溶性巨分子體結合，如環糊精與其適當之衍生物，或含聚乙二醇之聚合物，以增進其溶解度、溶解速率、遮味性、生物可獲得性，及/或穩定性，用於上述之投藥模式。 50 1304062 樂物-¾糊精錯合物，你I 士 . 1歹J如’係發現一般可用於大部分藥劑形式與投藥途徑中。内涵性或非内涵性錯合物皆可使用。除了直接與藥物錯合之外，該環糊精可使用作為辅助添加物’即作為-載劑、稀釋劑或溶解劑。最常用於這 5些目的者為α_、β-與γ-環糊精，範例可參考國際專利申請案號WO 91八 1172、WO 94/02518 與觸 98/55148。套組部份由於希望投以活性化合物之組合物，舉例而言，用於治療特定疾病或病症，本發明範疇中包含二或更多之醫藥 1〇組成物，其中至少一者含有本發明化合物，可方便地與適用於組成物共投藥之套組形式結合。因此，本發明套組包含二或更多單獨之醫藥組成物，其中至少一者包含本發明所申請之化合物，以及單獨保存該組成物之裝置，如一容器、分開之瓶或分開之鋁箔包裝。 15此種套組之一範例為常用之氣泡罩包裝，用於包裝藥鏡、膠囊及其類似物。本發明套組特別適用於投以不同之劑量形式，如，口服或非經腸胃，用於在不同投藥間隔投以單獨之組成物，或滴定該單獨組成物與另一組成物。為了增加順從度，該 20 套組一般包含用藥指示，並可提供所謂的記憶輔助物。

Mi 投藥於人類病患時，本發明化合物之每日總劑量一般範圍為0.5 mg/kg體重至約1〇〇 mg/kg，取決於，當然，投藥模式。較佳之投藥速率係介於30 mg/kg體重至約10〇 mg/kg 51 1304062 體重。每日總劑量可單次或多次投藥，且可，在醫師指示下，落於在此堤供之範圍外。這些劑量係以人類個體，具有平均體重60kg至70kg為基準。醫師可立即決定投予個體之劑量，若體重落於此範 5 圍之外，如嬰兒與年長者。為了避免疑慮，於此所稱之“治療，，係包括治癒、減輕及預防治療。範例下列提供之範例、方法及製備，係用於詳細說明與示 10範本發明之化合物及其製備方法。於此應理解本發明之範圍不侷限於下列範例與製備。下列範例中，具一不對稱中心之分子，除非特別註明，其以外消旋混合物存在。具兩個或以上不對稱中心之分子，除非特別註明，其以非鏡像異構物之外消旋混合物存在。單一鏡像異構物/非鏡像異 15構物可經由熟習該領域者之方法獲得。該化合物之結構經元素分析或NMR確定，其標題化合物之特定質子波峰將呈現於適當位置。NMR位移(δΗ)以内參考標準品低場百萬分之一 (ppm)表示。本發明將描述於下列範例之參考資料。該範例不應被 20視為限制本發明之範圍，僅作為一說明。方法A 甲基吡啶-2-基)·2_ί4-氦茉基甲某喧吹醯胺 52 1304062

i.製備第三丁基(6-胺基-4-曱基吡啶-2-基)胺基甲酸酯

於〇°C 下，於4-甲基-吼°定_2,6-二胺(2.13 g，17.3 mmol， 1當量）之四氫呋喃（18 mL)溶液中，加入雙(三甲基甲硅烷基) 醯胺鋰(34.6 mL，1 M)。30分鐘後，將雙第三丁基碳酸氫鈉 (3.78 g，17.3 mmol)力口入該反應混合液。完成之後，該反應回溫至24°C，並於真空濃縮(〜25 mm Hg)。將一 1:1飽和氯化銨水溶液及鹽水（100 mL)加入所得之固體中。所得之混合物以乙酸乙S旨（3 X 100 mL)萃取。經高效能快速層析法之純化（0—30%於己烷之乙酸乙酯）提供胺基甲酸酯中間體 (1.94 g，50%)。iH NMR (CDC13，400 ΜΗζ)，δ : 7.12 (s，1 Η)，7.09 (br s，1 Η)，6·02 (br s，2 Η)，2·23 (s，3 Η)，1.51 (s， 9 Η) ; LRMS (ESI) m/z : 224.2。 ii.製備第三丁基[6-({[2-(乙醯胺基)-4-甲基-1，3-噻唑 -5-基]石黃酿}胺基)-4-甲基0比咬-2-基]胺基甲酸酉旨

53 !304062 於第二丁基(6-胺基-4-甲基吡啶-2-基）胺基曱酸酯（1.2 g，6_0 mmol)之吡唆(3〇 mL)溶液中

，加入2-乙酿胺基-4-甲基噻唑磺醯氯（1·5 g，6.0 mmol)中。所得之混合物於24 C下授拌16小時。該反應於真空濃縮(〜25 mm Hg)。經高效忐快速層析法之純化(0—5%於二氯甲烷之曱醇）提供一中間體(2.1 g，80%)。巾 NMR (400 MHz, CDC13)，δ : 7.43 (br s，1 Η)，6.99 (s，1 Η)，5.31 (s，1 Η)，2_34 (s，3 Η)，2.31 (s， 3 Η)，2·22 (s，3 Η)，1.54 (s，9 Η) ; LRMS (ESI) m/z : 342 [M-C02C(CH3)3]+。 iii.製備第三丁基(6-{[(2-胺基-4-甲基-1,3-噻唑-5-基) 磺醯]胺基}-4-甲基吡啶-2-基)胺基甲酸酯

ch3 ch3 h2n 將第三丁基[6-({[2-(乙醯基胺基）·4-甲基-1，3-噻唑-5-基]石頁酿}胺基）-4-甲基π比α定·2_基]胺基甲酸g旨（2_1 g，4.8 15 mm〇1，1當量），及1N氫氧化鈉水溶液(7.2 mL)之甲醇(30 rnL) 溶液加熱至50°C，持續48小時。冷卻至24°C之後，該反應混合物真空濃縮（〜25 mm Hg)。將所得之固體溶於水(20 mL)。經高效能快速層析法之純化(〇_>5%於二氣甲烷中之甲醇)提供一中間體(2·1 g，80%)。該溶液以濃鹽酸中和至 20 pH：= 7。所得之固體經過濾收集，以水(30 mL)及乙醚(2 X 30 mL)(1.59 g，83%)清洗。NMR (400 MHz，CDC13)，δ : 8.29 (br s，1 η)，7.48 (s，1 Η)，6.91 (s，1 Η)，2.40 (s，3 Η)，2·33 54 1304062 (s，3 Η)，1 52 (s，9 Η) ; LCMS (ESI) m/z : 400.2 〇 iv·製備第三丁基（6-{[(2-漠-4-甲基-1，3-^σ坐-5-基)石黃醯]胺基卜4-甲基σ比啶_2-基)胺基甲酸®旨

5 於第三丁基（6-{[(2-胺基-4-曱基-1，3-π塞吐-5·基）績醯] 胺基}_4_曱基。比淀-2-基)胺基曱酸酯（1.59 g，3.98 mmol，1 當量），及溴化銅（11) (0.55 g ’ 2·47 mmo1 ’ 0.62 equiv)之乙腈（30 mL)溶液中，於65°C下’加入第三丁基亞硝酸(〇·71 mL，5.97 mmol，1.5 equiv)。可觀察到該反應混合物自綠 10色轉變為紅色，以及氣體釋出。1〇分鐘之後，當氣體停止釋出，將該反應混合物冷卻至24°C，並真空濃縮(〜25 mm Hg)。將所得之固體溶於乙酸乙酯（30 mL)，所得之溶液以經硫酸(0·5 mL)酸化之水(30 mL)清洗。該收集之有機物以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及濃縮。經高效能快速層析 15 法之純化(〇~>1·5%於二氣甲烷中之甲醇)提供一上述之中間體(0.96 g，52%)。LRMS (ESI) m/z : 463。 ν·製備第三丁基[6-({[2-(4-氰苯基)_4_甲基噻唑 5_基]磺醯卜胺基M-曱基吡啶基]胺基甲酸酯

NC 55 1304062 將第三丁基(6-{[(2_溴-4-甲基-1，3-噻唑-5-yl)磺醯]胺基}冰甲基吡啶_2_基)胺基曱酸酯（0.96 g，2_08 mmol，1當量）、4-氰苯基硼酸(0.330 g，2.29 mmol，1·1 equiv)，以及碳酸絶(2.03 g，6.24 mmol，3 equiv)之2:1 -一甲乳基乙烧/ • 5 水(30 mL)溶液，以氮氣清洗15分鐘。之後加入二氯雙(二苯基膦）二茂鐵]把(II)氯(0.068 g，〇·〇8 mmol，0.〇4當量），所得之混合物再以氮氣清洗15分鐘。該反應加熱至80 °C，持續1小時。之後冷卻至24°C，將該溶液真空濃縮(〜25 _ mm Hg)。該結果之水溶液混合物以乙酸乙酯（60 mL)萃取。 10 收集之有機物以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及濃縮。經高效能快速層析法之純化(0—10% 於己烷中之乙酸乙酯）提供一中間體(0.334 g，33%)。4 NMR (400 MHz，CDC13)， δ : 7.97 (d，8·3 Hz，2 Η)，7·73 (d，·/= 8·3 Hz，2 Η)，7.63 (br s，1 Η)，7.43 (s，1 Η)，6.90 (s，1 Η)，2.65 (s，3 Η)，2·32 15 (s，3 Η)，1.50 (s，9 Η) ; LRMS (ESI) m/z: 486」。 vi·製備Ν-(6-胺基-4·甲基吡啶-2·基）-2-(4-氰苯基）-4- • ¥基-1，3-°塞唾-5-石黃酉藍胺於第三丁基[6-({[2-(4-氰苯基>4-甲基-1，3-噻唑-5-基] 磺醯}胺基）-4·甲基吡啶-2-基]胺基甲酸酯（0.334 g，0.68 20 mmol，1當量）之二氯甲烷(3 mL)溶液中，加入三氟乙酸(0.21 mL，4 equiv)中。該反應混合物於24。(：下攪拌48小時。該溶液以飽和碳酸氫鈉水溶液中和，將所得之溶液以二氯甲烷 (3 X 20 mL)萃取。該收集之有機物以無水硫酸納乾燥，之後過濾’及濃縮。經高效能快速層析法之純化(0—1%於二 56 1304062 氣甲烷中之甲醇)提供標題所述之化合物N-(6-胺基-4-甲基啦啶-2-基）-2-(4-氰苯基）-4-甲基-1，3-噻唑-5-磺醯胺（0.22 g，81%)。咕 NMR (400 MHz，DMSO〇，δ : 12.08 (br s，1 - Η)，8.09 (d，《/= 8·3 Hz，2 Η)，7.95 (d，8·3 Hz，2 Η)，6.62 , 5 (br s，2 Η)，6.12 (s，1 Η)，5·79 (s，1 Η)，2.59 (s，3 Η)，2.08 (s，3 Η); HRMS (ESI):計算值 C17H16N502S2 m/z 386.0740 ; 觀測值：386.0745 ;分析計算C17H15N502S2 ·· C，52.97 ; H， 3.92 ; N，18.17 ;觀測值：C，52.75 ; H，3·76 ; N，18.03。

• 方法B 10 範例2 :

氰基羥基乙基）吡啶-2-基1聯笨基-4-磺醯胺 A (―氰基-Ν-「6·Π-羥基乙基介比啶-2-基1聯茉基-4-磺醯胺

15 i.製備N-[6-(l-羥基乙基)吡啶-2-基]-2,2-二甲基丙醯胺

於7V-(6-甲醯基吡啶-2-基）-2,2-二甲基丙醯胺（4.0 g， 19.4 mmol)之四氫吱喃（30 mL)冰浴溶液中，滴加入氯甲基鎮（13.6 mL，40.7 mmol，3 M in THF)。2小時之後，該反應 20 以飽合氣化銨溶液（10 mL)中止，並以乙酸乙酯（50 mL)稀釋。該混合物以飽合NaHC03水溶液(2x50mL)清洗。有機 57 1304062 層以無水琉酸鈉乾燥，之後過濾，及濃縮。所得之殘餘物經高效能快速層析法之純化(2:1己烷/EtOAc)提供一透明油狀之中間體(0.56 g，49%)。NMR (400 MHz，CDC13)， δ : 8.14 (d，/= 8·1 Hz，1 Η)，8.00 (br s，1 Η)，7·70 (t，/= 7.8 5 Ηζ，1 Η)，7.00 (d，7.5 Ηζ，1 Η)，4·82 (m，1 Η)，3·81 (d， /= 5·0 Ηζ，1 Η)，1.49 (d，/=6·5 Ηζ，3 Η)，1·35 (s，9Η); LRMS (ESI) : m/z : 223·2。 ii·製備1-(6-胺基°比σ定-2·基）乙酵

10 於尽[6_(1-羥基乙基）°比啶-2-基]-2,2-二甲基丙醯胺 (2.0 g，9·6 mmol)之二噁烷(20 mL)溶液中，加入9 N HC1水溶液（10 mL)。將該反應混合物回溫至i〇〇°c，並持續24小時。冷卻至25°C之後，該溶液以固體NaOH中和至pH = 9，並以EtOAc (50 mL)稀釋。所得之混合物以飽和NaHC03水 15溶液(2 x如mL)清洗。有機層以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及濃縮。將所得之殘餘物溶於二氯曱烷（10 :卜5 mL)。再加入乙醚（10 mL)後，該溶液維持此狀態24小時。將所得之晶體經過濾，並以乙醚(2 X 1〇 mL)清洗後，提供一上述標題之白色固體之中間物(0_65 g，49%)。hNMR (400 MHz，

20 CDC13)，δ : 7·43 (t，7.5 Hz，1 Η)，6.59 (d，/= 7.3 Hz，1 H)，6.39 (d，《/= 8.1 Hz，1 H)，4.72 (q，/= 6.3 Hz，1 H)，4.43 (bs，2 Η)，4·21 (bs, 1 H)，1.45 (d，6.3 Hz，3 H) ; LRMS (ESI) : w/z : 139 i 〇 58 1304062 iii.⑴-4，-氰基-Ν·[6•⑴經基乙基^基]聯苯基冰磺醯胺，及㈠_4，-氰基-Ν·[6-(1•經基乙基)t定么基]聯苯基冰續醯胺 5 於H6·胺基。比啶_2_基）乙醇(〇.2〇 g，I.4 mmol)，及二異丙基乙基胺(0.22 mL’ 1.8 mmol)之二氣甲烷(5 mL)溶: 中’加入氯基(三甲基)石夕烧(0.48 mL，2.9 mm〇1)。H、時之後’將該反應混合物濃縮，再將所得之殘餘物溶於二氯甲烷(2 mL)及吡啶(2 mL)中。之後再將4，-氰基聯苯基_4_磺醯 10氣(0·43 g ’ 1.53 mmol)加入該反應混合物。3小時之後，該反應混合物以真空濃縮。所得之殘餘物以乙酸（1 mL)及甲醇（1 mL)稀釋’並攪拌〇.5小時。之後該反應混合物以乙酸乙酯（50mL)稀釋，並以飽合碳酸氫鈉水溶液(2x3〇mL)清洗。將有機層濃縮之後，所得之殘餘物以高效能快速層析 15 法（1:1己烷/乙酸乙酯）純化。所得外消旋產物轉變為溶於乙醚(5 mL)之氫氯酸鹽類，之後加入HC1 (1 N於EhO)，提供標題所述之外消旋產物，其為白色固體(0.21 g，37%)。ιΗ NMR (400 MHz，CD3OD)，δ : 8.01 (d，8.3, 2 Η)，7.96 (t ·/= 8.1，1 Η) ’ 7.81 (d，/= 8.6 Hz，2 Η)，7.78-7.73 (m，4 Η)， 20 7.21-7.16 (m，2 Η)，4.86 (q，J = 6.6 Hz，1 H)，1.38 (d，j = 6·6 Hz，3 H)。HRMS (ESI):計算值 C20H18N3O3S m/z : 380.1069 ;觀測值·· 380.1061 ;分析計算C2GH17N303S· HC1 : c，57.76 ; H，4·36 ; N，10.10 ;觀測值：C，57.87 ; H，4.58 ; N，9.88。 59 1304062 該外消旋游離鹼經由製備級鏡像異構物分離法分離，其使用超臨界二氧化碳移動相之超臨界流體層析法（SFC) 技術。該不對稱鏡像異構物之分離與離析可經Berger SFC Multiram 純化糸統(Mettler Toledo AutoChem, Inc)達成。用於分離鏡像異構物之製備級層析法之條件包括Chiralpak AD-H (澱粉醣三-(3,5_二甲基苯基氨基甲酸酯））250 X 21mm，5 μ半製備級管柱，以此為不對稱固定相（chiral

Technologies，Inc·)。管柱溫度維持35°C。移動相乃使用超臨界C〇2，以40%甲醇為修飾劑，並各自維持5〇mL/min流速，及100巴恆定壓力。鏡像異構物 1 [a]D (MeOH) = -66.67。。鏡像異構物2 [a]D (MeOH) = +1〇〇。。範例3 : 氰基經基丙基]比咕-2-某1聯苯基-4- 遂酿胺，及C±1-4T-氰基善[6-(1羥某良基)吼啶_2_基1聯笨基 -4-確酿胺

上述標題之外消旋混合物乃依上述範例2製備程序製造，除了以溴乙基鎂代替氣乙基鎂。該外消旋混合物維持一游離驗型式’並不轉變為一鹽類。經高效能快速層析法之純化（15—>60% EtOAc於己烧中）提供一產物（〇·267 g， 83%)。4 NMR (400 MHz，CDC13)，δ : 8·〇5 (d，/= 8.3 Hz，2 H)，7.76 (m，2 H)，7.58-7.71 (m，6 H)，7.15 (d，8.3 Hz， 1304062 1 Η)，6.81 (d，J=7.6Hz，1 H)，4 Η)，1.60-1.87 (m，2 Η)，〇·89 (t y > 7.25 4.9 Ηζ? 1

(ESI): m/z ： 394.0 〇 …7.5 ΗΖ，3 Η) ; LRMS 該製備級鏡像異構物分離法 5

10

之方法。用於分離鏡像異構物之製於上迷範例2所使用 Chimlpak AD-H(殿粉醣三_(3,5_ 、及!折法之條件包括 250x21mm，5 μ半製備級管柱基本基氨基曱酸_)) τ , , . τ 此為不對稱固定相（Chiml

Technologies，lnc·)。管柱溫度維 L。移動相乃使用超臥界C〇2，以45%甲醇為修飾劑，並各曰、、隹待55 mL/min流速，及140巴恒定壓力。將該樣本溶於咏丨吁芝100 mg/mL，官柱負载能力達到每注人1 mL有5G mg。每—次注入所需之 w執行期為6· 1分鐘。第一個鏡像異構物㈠之滯留時間為4 〇勿知，第二個自管柱沖提出之鏡像異構物(+)為5分鐘。比旋光度，[a]D，對於㈠及⑴分別為-17.34。及+22 29。。鏡像異構物1:㈠-4’-氰基羥基丙基)吼啶_2_基] 聯笨基-4-磺醯胺。[a]D (MeOH) = -19.77。；分析計算 c2iH19N3〇5s.〇.17 h2〇 : c，63.61 ; H，4_92 ; Ν，ΐ〇·6〇。觀測值· c，63.59 ; Η，4.93 ; Ν，1〇·6〇。鏡像異構物2 : (+)-4’_氰基^經基丙基定_2_ 20基]聯本基-4_續醯胺。[a]D (MeOH) = +18.92。；分析計算 C2lHl9N3〇5s.0.14 H20 : C, 63.70 ; H，4.91 ; N，1〇 6卜觀測值：c，63.68 ; H，4.92 ; Ν，1〇·45。氰某-NKiA^^l^k^a^l-3-甲基聯胺，及基）吡啶·2- 1304062 基1-3-王.義L聯笨基-4-確基·醯胺

试劑4-演基-2-甲基-7V-(6-{l-[(三甲基甲石圭燒基）經基] 乙基}吡啶-2-基）苯磺醯胺(0.11 g，0.3 mmol)，乃依上述範 5 例2所*ί田述4’-氮基-N-[6-(l-|^基乙基）吼咬-2-基]聯苯基_4_ 磺醯胺之製備程序製造。將該磺醯胺試劑加入夂氰苯基石朋酸(0·087 g，〇·59 mmol)、Pd(PPh3)4 (0.034，0.03 mm〇1)、碳酸納（0.1 g，1.18 mmol)、DMF (2 mL)及水（1 mL)中，該混合物置於一微波試管中，以20(TC微波加熱30分鐘。該混合 10 物以乙酸乙酯稀釋，並以飽合碳酸氫鈉水溶液、水及鹽水清洗。該有機層以無水硫酸納乾燥。經高效能快速層析法之純化（15—70% EtOAc於己烧中），提供上述標題之產物 (0.081g，74%)。巾 NMR (400 MHz, CDC13)，δ : 8.19 (d，J = 8·1 Hz，1 Η)，7·70-7·77 (m，2 Η)，7·63-7·69 (m，2 Η)，7.57 15 (t，·/= 8.0 Ηζ，1 Η)，7·46-7·53 (m，2 Η)，7·00 (m，1 Η)，6.81 (m，1 Η)，4.78 (m，1 Η)，2·78 (s，3 Η)，1.44 (d，6.6 Ηζ，3 Η) ; HRMS (ESI) m/z計算值C21H20N3O5S 394.1220，觀測值為 394.1215 ; 該製備級鏡像異構物分離法相似於上述範例2所使用 20 之方法。用於分離鏡像異構物之製備級層析法之條件包括 Chiralcel OJ-H(纖維素三-(4-甲基苯甲酸)）250 X 21mm，5μ 半製備級管柱，以此為不對稱固定相（Chiral Technologies， 62 1304062

Inc·)。管柱溫度維持35°C。移動相乃使用超臨界c〇2，以25〇/0 異丙醇為修飾劑，並各自維持5〇mL/min流速，及140巴恆定壓力。鏡像異構物1 ··㈠·4’-氰基-N_[6-(l-羥基乙基）17比啶-2-5基甲基聯苯基磺醯胺。[a]D (MeOH)二-12_12。；分析計算C21H19N3〇5S*〇.21 H2〇 : C，63.49 ; Η, 4·93 ; N, 10.58。觀測值：C，63.45 ; H，4.73 1〇·54。鏡像異構物2: (+)_4L氰基-N-[6_(l-羥基乙基)°比啶-2-基]冬甲基聯苯基-4-績醯胺。[a]D (Me〇H) = +11.43。；分析 10 計算C21H19N3〇5S*〇 2〇 H2〇 : c，63.52 ; H，4.92 ; N，10.58。觀測值：C，63.55 ; H，4.85 ; N，10.51。範例5 : 士 (6 ·胺基吡啶-2 -基)_土氯-L氟-5 _甲某苯旙醯胺

15 於2,6_二胺基°比淀（178 mg，1·6 mmol，2.2當量）之0比啶(7 mL)溶液中，於24°C下，加入4-氣基_2_氟基_5_甲基笨磺醯氯（188 mg，0.735 mmol，1當量）。18小時之後，該反應混合物於真空濃縮。所得之殘餘物以飽和氯化銨水溶液 (20 mL)及乙酸乙酯（20 mL)分溶。其有機層被分離，而水溶 20液層以乙酸乙酯（2 X 20 mL)萃取。收集之有機物以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及濃縮。經製備級HPLC純化提供一產物(69 mg，27%)。4 NMR (400 MHz，CDC13)，δ : 7.80 (d， 63 1304062 J = 7.6 Hz，1 Η)，7·42 (t，J = 8.3 Hz，i H)，7·〇8 (d，j = 9 4 Hz 1 H) ’ 6.83 (d，J - 8.3 Hz，1 H)，6.00 (d，j = 8.3 Hz，1 H)， 5.91 (s，2 H) ’ 2.38 (s，3 H);計算值Ci2Hi2N3〇2C1FS 316.0318,觀測值· 316.0322,分析計算Ci2HnN3〇2C1FS.〇.27 5 CH3C02H · C，45.37 ’ H，3.67 ; N, 12.66 ;觀測值：C，45.08 ; H，3.67 ; N，12.65。範例9: 4’-氰基_:尽『6-(經基甲基^定士基]聯装某_4_碏醯胺 10 14.9 mmol)之甲醇（10 mL)溶液中，加入硼氫化鈉（ΐ·37 g， 37.1 mmol)，並攪拌3小時。該混合物以乙酸乙酯（50 mL) 癱稀釋。該混合物以鹽酸溶液(2 X 30 mL，0.1N)及飽和碳酸 15 氫鈉(2 X 50 mL)清洗。該有機層以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及濃縮後，提供上述標題之中間物，其為白色固體 (2.49 g，80%)。4 NMR (400 MHz，CDC13)，δ : 8.16 (d，= 8.3 Hz，1 Η)，8.00 (br s，1 Η)，7.71 (t，7.8 Hz，1 Η)，7.12 (d，J= 7·5 Hz，1 H)，4.05-3.96 (m，2 Η)，1·35 (s，9H); LRMS 20 (ESI) : m/z: 209.2。 ii·製備（6-胺基吡啶-2-基）甲醇 HO、入·文3s//〇

製備N-[6-(l-羥基乙基)吡啶_2_基]_2,2_二曱基丙醯胺

N Η 〇

於TV-(6-甲醯基吡啶-2_基）-2,2-二甲基丙醯胺（3.0 g 64 1304062

於二噁烷（15 mL)溶液中加入N-[6-(l-羥基乙基）吡π定 2基]-2,2-一甲基丙酿胺（1 ·5 g，7.2 mmol)及氫氣酸水溶液 (6N，15 mL)，將該混合物於9〇°C下攪拌14小時。該溶液冷 5 卻至〇C ’以乙驗(2x30 mL)研磨後，將水溶液層以氫氧化納中和至約pH 8。該混合物以氯仿/IPA (10:1，50 mL)稀釋。該混合物再以飽和鹽水(2 X 50 mL)清洗。該有機層以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及濃縮後，提供上述標題之中間物，其為白色固體(0.86 g，96%)。HPLC : Rt 0.628分鐘。 10 (99·5°/。區域）。4 NMR (400 MHz，CDC13)，δ: 7.48 (t，7.4

Hz，1 Η)，6.66 (d，7.3 Hz，1 Η)，6.50 (d，/= 8.4 Hz，1 H)，4.58 (s，2 Η)，4·23 (bs，2 H)。LCMS (ESI): m/z : 125.2。 iii·製備6-({[第三-丁基(二甲基）甲硅烷基]氧基}曱基) 吡啶_2_胺

於二氯甲烷（15 mL)溶液中加入(6-胺基吡啶-2-基）甲醇 (0.72 g，5.8 mmol)、第三丁基（氯基)二甲基石夕院（ΐ·〇5 g， 6·95 mmol)，及三乙基胺（1.05 mL，7.53 mmol)。將該混合物攪拌24小時，並以飽和碳酸氫鈉溶液(2 x 30 mL)，及發 2〇酸水溶液(2 X 30 mL，0·1Ν)清洗。該有機層以無水硫酸納乾燥，之後過濾，及真空濃縮。經矽膠層析法完成純化，其以己烷：乙酸乙酯（1:1)沖提，並結合分餾，及濃縮，以 65 1304062 提供標題所述之白色固體產物（1.06 g，70%)°HPLC:Rt2.58 分鐘（96.5% 區域）c1HNMR(400 MHz，CDCl3)，5:7.34(t， J= 7.6 Hz? 1 H)? 6.75 (d? J= 7.6 Hz? 1 H)5 6.25 (d? J = 8.1 Hz，1 H)，4.54 (s，2 H)，4.27 (bs，2 H)，0.84 (s，9 H)，0.11 (s， 5 6 H) ; LRMS (ESI): m/z: 239.2。 iv·製備TV-[6-({[第三丁基（二曱基）甲硅烷基]氧基}甲基)π比唆-2-基]-4’-氣基聯苯基_4_績酿胺

於二氯甲烷(3 mL)溶液中加入6-({[第三丁基（二甲基） 10 甲硅烷基]氧基}甲基)吡啶-2·胺(0.15 g，0.63 mmol)、4’-氰基聯苯基·4_磺醯氯(0.18 g，0.63 mmol)，及°比唆（1.0 mL)。將該混合物攪拌3小時，並以飽和碳酸氫鈉溶液(2 X 30 mL)，及鹽酸水溶液(2 X 30 mL，0.1N)清洗。該有機層以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及真空濃縮。經矽膠層析法完 15 成純化，其以己烷：乙酸乙酯（1:1)沖提，並結合分餾，並濃縮，以提供上述標題之白色固體中間物（0.21 g，76%)。 HPLC : Rt 4.236 分鐘（81% 區域）。4 NMR (400 MHz， CDC13)j5：7.89 (d,J= 8.3 Hz? 2 H)? 7.60 (d, J = 8.3 Hz? 2 H)? 7.52-7.49 (m，4 H)，7.43 (t，·/= 7.6 Hz，1 H)，6.87 (d，《/= 8.6 20 Hz，1 H)，6.59 (d，7.3 Hz，1 H)，6.22 (d，8.0 Hz，1 H)， 4.55 (s，2 H)，0.82 (s，9 H)，0.05 (s，6 H); LRMS (ESI): m/z: 480」。 66 1304062 V·製備4’-氰基-7V-[6_(羥基甲基)吼啶-2-基]聯苯基-4-磺醯胺於乙醇（5mL)溶液加入N-[6-({[第三丁基（二甲基）甲硅 ▲ 烷基]氧基}甲基）吼啶-2-基]-4f_氰基聯苯基-4-磺醯胺(0.21 . 5 g，0.44 mmol)，及鹽酸水溶液（1.0 mL，1 N)。將該混合物攪拌2小時後，再以乙酸乙酯（40 mL)稀釋。該混合物以飽和碳酸氫納溶液(2 X 30 mL)，及鹽酸水溶液(2 X 30 mL， 0.1N)清洗。該有機層以無水硫酸鈉乾燥，之後過濾，及真 • 空濃縮。經矽膠層析法完成純化，其以己烷：乙酸乙酯（1:1) 10 沖提，並結合分德純化，及濃縮。該殘餘物自乙酸乙酯再結晶，並真空乾燥以提供上述標題之白色結晶固體產物 (0.13 g，79%)。HPLC ·· Rt 2.450分鐘(99.5%區域）。bNMR (400 MHz，CD3OD)，δ : 7.92 (d，8.6 Hz，2 H)，7.71-7.66 (m，6 H)，7.53 (t，/= 8·1 Hz，1 H)，6.94(d，8.6 Hz，1 H)， 15 6.83 (d? J= 8.1 Hz5 1 H)5 4.39 (s5 2 H) ； HRMS (ESI): m/z: 計算值(C19H16N303S) : 366.0912 ;觀測值·· 366.0914。

® 方法C 範例6 · N_(6-月安基-4-曱基口比口定-2-基)_4-亂基·2_乱基-5-曱基笨磺醯胺

於24°C下，於第三丁基(6_胺基-4-甲基吡啶-2-基）胺基甲酸醋（146 mg，0.652 mmol，1 equiv)之°比咬（3 mL)溶液 67 1304062 中’加入4·氯基-2-氟基_5_甲基苯磺醯氯(200 mg，0.782 mm〇l ’ 1·2 equiv)。24小時之後，該反應混合物於真空濃縮 (〜25 mm Hg)。該殘餘物以飽和氯化銨水溶液（1〇 mL)稀釋，所得之溶液以乙酸乙酯χ 5 mL)萃取。該收集之有機 5物以無水硫酸鈉乾燥、過濾，及濃縮。於24 C下’於粗產物之二氯甲院(3 mL)溶液中加入三氟乙酸（1 mL)。16小時之後，該反應混合物以真空濃縮(〜25 mm Hg)。經高效能快速層析法之純化(〇·5—3%曱醇/二氣甲烧)提供所述之化合物（212 mg，98%)。4 NMR (400 MHz， 10 DMS0^6) , δ ： 12.00 (br s5 1 H)? 7.82 (d? J = 7.8 Hz? 1 H)?

7.49 (d，9.6 Hz，1 H)，6.51 (br s，2 H)，6.03 (s，1 H)，5.74 (s，1 H)，2.34 (s，3 H)，2.05 (s，3 H);計算值C13H14N302C1FS m/z: 330.0474 ;觀測值：330 〇47〇。籃例7 : N-(6·胺基吡嗦·？_基)_4-丁氧篡苯旙醯脸

將4-丁氧基笨續醯氯（16〇 μιη〇ι，2 〇叫，4〇〇叫，〇 4〇 M 於無水吡啶），及第三丁基(6_胺基吡啶_2_基)胺基甲酸酯（8〇 μηκ)1，1.0 eq，400吣，0·20 Μ於無水吡啶），加入一裝有攪摔棒之試官中（75 X 1〇 mm，使用前於11(Γ(：下加熱乾燥16 20小時）。該試管以石堪包覆，於室溫下麟24小時。該溶劑卜比旬於真空下揮發。將三銳乙酸(320此，52·〇 eq·，過量，純)加入該試管。誠管加蓋後，於室溫下旋小時。將過量之TFA真空移除，而殘餘物溶於DMs〇(i 34〇mL)，並 68 1304062 以 HPLC 純化。4 NMR (500 MHz，DMSO-Α) δ : 7.73 (d，《/ = 7·7 Hz，2 H)，7.21 (t，/= 7·2 Hz，1 H)，6.96 (d，/= 6·9 Hz，1 H)，6.10 (d，6.1 Hz，1 H)，5.92 (d，5.9 Hz，1 H)，3.96 (t，= 6·6 Hz，1 H)，1.64 (m，2 H)，1.37 (m，2 H)，0.87 (t，J = 5 7.4 Hz，3 H)。LRMS m/z: 322.0。

方法D 範例8:4’-氰基乙基胺基)吡啶-2-基1聯苯基-4-磺醯胺

於N-(6-胺基吡啶-2-基)-4’-氰基聯苯基_4_磺醯胺（0.08 10 g，0.23 mmol)之甲醇（1 mL)懸浮液中，加入乙酸（0.02 mL，0.34 mmol)，之後再加入分子篩（4人）。將所得之懸浮液擾拌30分鐘後，再加入氰石朋氫化納（0.043 g，0.70 mmol)。 6小時之後，該反應混合物以飽和碳酸氫納水溶液稀釋，而水溶液層以二氯甲烷(2 X 10 mL)萃取。該結合之有機層以 15 鹽水清洗，並以硫酸鈉乾燥。經高效能快速層析法之純化 (25% EtOAc，於己烷中）提供一產物（0.055g，63%)。^NMR (400 MHz，CDC13)，δ ·· 8.03 (d，/=8.6 Hz，2 H)，7.73 (d，/=8.6 Hz，2 H)，7.65 (d，/=8.6 Hz，2 H)，7.62 (d，/=8.6 Hz，2 H)， 7.40 (t，/=8.3 Hz，1 H)，6.64 (d，/=8.1 Hz，1 H)，5.88 (d， 20 /=8.3 Hz，1 H)，3.10 - 3.21 (m，2 H) 1.23 (t，《7=7.2 Hz，3 H) ; LRMS (ESI) m/z ·· 379.12 ;分析計算C20H18N4O2S : C， 63.47; H，4.79; N，14.80。觀測值：C，63.11; H，4.82; N， 69 1304062 14.63。此外，剩餘之範例顯示於表丨，可使用適當之起始材料，經由以上範例所述之該領域方法製備。表1

範例編號結構 Kilim %inh @0.1 uM Mtd 'HNMR MS (m/z) 1 ch3 入 N 入 NH2 Vs Η P NC Ν·(6-胺基4-曱基吡啶-2-基)-2-(4-氰苯基>4-曱基-1，3-噻唑-5-磺醯胺 1.8 100 A (400 MHz, DMSO-i/6), δ: 12.08 (brs,lH), 8.09 (d,J= 8.3 Hz, 2 H), 7.95 (d,J= 8.3 Hz, 2 H), 6.62 (br s, 2 H), 6.12 (s, 1 H), 5.79 (s, 1 H), 2.59 (s,3H), 2.08 (s,3H) 386.0745 2(+) (+)_4，_氰基-N-[6-(l -羥基乙基)吡啶 -2-基]聯苯基4-續醯胺 19 85 B (400 MHz, CD3OD), δ: 8.01 (d，/= 8.3, 2 H)，7.96 (t,J= 8.1,1H), 7.81 (d,J= 8.6 Hz, 2 H), 7.78-7.73 (m, 4 H), 7.21-7.16 (m, 2 H), 4.86 (q, J = 6.6 Hz, 1 H), 1.38 (d,7= 6.6 Hz, 3 H) 380.1 2〇㈠_4，_氰基-Ν·[6·(1·羥基乙基户比啶 -2_基]聯苯基斗磺醯胺 ΝΑ 53 B (400 MHz, CD3OD), δ: 8.01 (d, 8.3,2 H), 7.96 (t,J=8.1,lH), 7.81 (d,J= 8.6 Hz, 2 H), 7.78-7.73 (m, 4 H), 7.21-7.16 (m, 2 H), 4.86 (q, J = 6.6 Hz, 1 H), 1.38 (d,7= 6.6 Hz, 3 H) 3(-) 〇w〇 °H ㈠卓氰基-N-[6-(l-經基丙基户比啶 -2-基]聯苯基*4-磺醯胺 ΝΑ 59 B (400 MHz, CDCI3), δ: 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2 H), 7.76 (m, 2 H), 7.58-7.71 (m, 6 H), 7.15 (d, 7= 8.3 Hz, 1 H), 6.81 (d5 J = 7.6 Hz, 1 H), 4.62 (dd, J = 7.2, 4.9 Hz, 1 H), 1.60-1.87 (m? 2 H), 0.89 (t,y= 7.5 Hz,3H) 70 1304062

範例編號 3㈩結構 Kitim %inh @0.1 uM Mtd ^NMR MS (m/z) V jTI 入n^Y^ch3 工^ OH (+M’_氰基·Ν-[6-(1-羥基丙基户比啶 -2-基]聯苯基4-續酿胺 5.19 97.9 B (400 MHz, CDC13), δ: 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 2 H), 7.76 (m, 2 H), 7.58-7.71 (m, 6 H), 7.15 (d, 7= 8.3 Hz, 1 H), 6.81 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 4.62 (dd, J = 12, 4.9 Hz, 1 H), 1.60-1.87 (m, 2 H), 0.89 (t, 7= 7.5 Hz,3H) 4(-) ㈠-4’-氰基-Ν-[6-(1·羥基乙基)吡啶 -2-基]-3-曱基聯苯基斗磺醯胺 ΝΑ 84 B (400 MHz, CDCI3), δ: 8.19 (d,y=8.1 Hz, 1 H), 7.70-7.77 (m, 2 H), 7.63- 7.69 (m, 2 H), 7.57 (t, /= 8.0 Hz, 1 H), 7.46-7.53 (m, 2 H), 7.00 (m, 1 H), 6.81 (m, 1 H), 4.78 (m, 1 H), 2.78 (s, 3 H), 1.44 (d, J = 6.6 Hz, 3 H). 4㈩ (+Μ’-氰基-N-[6-(l-羥基乙基)吡啶 -2-基]-3-曱基聯苯基-4-續酿胺 2.7 100 B (400 MHz, CDCI3), δ: 8.19 (d, 7= 8.1 Hz, 1 H), 7.70-7.77 (m, 2 H), 7.63-7.69 (m, 2 H), 7.57 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 7.46-7.53 (m, 2 H), 7.00 (m, 1 H), 6.81 (m, 1 H)? 4.78 (m, 1 H), 2.78 (s, 3 H)? 1.44 (d, J = 6.6 Hz,3H). 5 HC ^%°J0L 3 丫人N人NH2 N~(6-胺基。比咬·^-基)-4-氣基-2_ 氟基-5-甲基苯磺醯胺 9.7 93 B (400 MHz, CDCI3), δ: 7.80 (d, J=7.6 Hz, 1 H), 7.42 (t, J = 8.3 Hz, 1 H), 7.08 (d,/= 9.4 Hz, 1 H), 6.83 (d, J= 8.3 Hz, 1 H), 6.00 (d, 8.3 Hz, 1 H), 5.91 (s,2H), 2.38 (s, 3 H) 316.0322 6 ch3 HC 3 、!^Ν入ΝΗ2 ci AAf h N-(6-胺基冰甲基吡啶-2·基)·4_ 氯基-2-氟基-5 -曱基苯續酿胺 2.8 98 C (400 MHz, DMSO-J6), δ: 12.00 (brs,lH), 7.82 (d,J= 7.8Hz,lH), 7.49 (d,7= 9.6 Hz, 1 H), 6.51 (br s, 2 H), 6.03 (s, 1 H), 5.74 (s, 1 H), 2.34 (s, 3 H), 2.05 (s,3H) 330.0470 71 1304062 ------- 範例編號結構 ------ Kiiim %inh @0.1 uM Mtd !hnmr MS (m/z) 7 j〇^^NH2 N-(6-胺基吡啶_2_基)冰丁氧基苯續醯胺 3.8 100 C (500 MHz，DMSO〇 δ: 7.73 (d,y= 7.7 Hz, 2H), 7.21 (t, 7=7.2 Hz, 1 H), 6.96 (d,7= 6.9 Hz, 1 H), 6.10 (d,J= 6.1 Hz, 1 H), 5.92 (d, 7=5.9 Hz, 1 H), 3.96 (t, J = 6.6 Hz, 1 H), 1.64 (m, 2 H), 1.37 (m, 2 H), 0.87 (t, 7= 7.4 Hz, 3 H) 322.0 8 v η 4L氰基-N-[6_(乙基胺基)n比α定_ 基]聯苯基·4·磺醯胺 4.8 88 D (400 MHz, CDC13), 6:8.03 (d, 7=8.6 Hz,2H), 7.73 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 7.65 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 7.62 (d, J=8.6 Hz, 2 H), 7.40 (t, J=8.3 Hz, 1 H), 6.64 (d, /=8.1 Hz, 1 H), 5.88 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.10-3.21 (m,2H) 1.23(t, J=7.2 Hz, 3H) 379.12 9 4’-氰基-Ν-[6-(羥基曱基)。比啶基] 聯苯基4_磺醯胺 2.8 100 B (400 MHz, CD3OD), δ: 7.92 (d?J= 8.6 Hz, 2H), 7.71-7.66 (m, 6 H), 7.53 (t, /= 8.1 Hz, 1H), 6.94(d,J = 8.6 Hz, 1H), 6.83 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 4.39 (s,2H) 480.1

於表1中，“min”意指分鐘；“MS”意指質譜；m々意指質量/電荷比例；“HPLC”意指高效能液體層析法；“Ki”意指對抗lipHSDl之活性，經由上述測試所測得；N/A意指未測試。 72 1304062 表2

範例編號結構 HEKECso nM Fa2N-4 nM 比較範例A* ^Y^nXX^oh 氣基-聯苯基-4-石黃酸[6-(2-¾基-乙基)_ 吡啶-2-基]-醯胺* 423 77.7 2㈩ ^PnXVCH3 (+)-4’_ 氣基-N-[6-(l 經基乙基)ϋΛσ^~2-基] 聯苯基-4-續酿胺 160 56 3㈩ (+)-4’·氣基-N~[6-(l -經基丙基丨吼咬-之-基] 聯苯基-4-磺醯胺 50.7 11.6 4㈩ ^^；Η3 (+)-4’-鼠基-Ν~[6-( 1 -經基乙基)^比°定-2-基]-3-甲基聯苯基-4-磺醯胺 23.1 7.86 9 Η0-Χ^Ν^γ^ 59 21.8 4’-氰基-N-[6-(羥基曱基)吡啶-2-基] 聯苯基-4-確龜胺 *比較範例A係來自W02005-0148631A1之範例117。 73 1304062 本發明之各實施例已於上述，但熟習該領域者更可理解小部份之改變亦屬本發明之範疇。本發明之範圍與廣度並不侷限於上述任一示範之實施例，僅依據下列申請專利 - 範圍及其等效物。 5 【圖式簡單說明】 (無）【主要元件符號說明】 (無） 74

Claims

95121409號專利申請案申請專利範圍修正本 97.06. 3\6.斧1日修止‘ 十、申請專利範圍：----^ 1· 一種式(I)之化合物、其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合物（solvate):

其中 R1為Η或(CrC4)烷基； R2為Η或(CrC4)烷基； R3為H、鹵基、（CrC6)烷基，或(CrC6)烷氧基；且，當該化合物為對掌化合物時，該化合物為(+)鏡像異構物。 2. 如申請專利範圍第1項之化合物、其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合物，其中R1為Η。 3. 如申請專利範圍第1項之化合物、其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合物，其中R3為Η或CH3。 4. 如申請專利範圍第1項之化合物、其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合物，其中R2為-CH2CH3。 5. —種化合物或其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合 75 1304062 物，該化合物選自於由：

十ch3 OH 組成之族群，

其中當該化合物為對掌化合物時，該化合物為(+)鏡像異構物。 6. —種具式(II)之化合物或其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合物

7. —種醫藥組成物，其包含一有效量之如申請專利範圍第 1、2、3、4、5或6項中任一項之化合物、其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合物，以及一藥學上可接受之載體。 76 1304062 8. —種如申請專利範圍第1、2、3、4、5或6項中任一項之化合物、其藥學上可接受之鹽類、水合物或媒合物用於製造一藥物的用途，該藥物係用以治療以lipHSDl抑制 .劑治療而獲益之疾病、症狀或病症。 5 9.如申請專利範圍第8項之用途，其中該疾病、症狀或病症係為糖尿病第2型。 10.如申請專利範圍第8項之用途，其中該疾病、症狀或病

10 15

症為選自於新陳代謝症候群、胰島素抵抗性症候群、肥胖症、青光眼、高脂血症、高血糖症、高胰島素血症、骨質疏鬆症、動脈硬化症、癡呆症、憂鬱症，或以肝臟為目標器官之疾病。 11. 如申請專利範圍第10項之用途，其中該疾病、症狀或病症係青光眼，並且該藥物係組合一類前列腺素受體促動劑加以投藥，其中該促動劑為樂通舒特(latanoprost)。 12. 如申請專利範圍第1、2、3、4、5或6項中任一項之化合物、其藥學上可接受鹽類、水合物或媒合物，其係使用作為一藥物。 77