TWI290052B - Emulsion vehicle for poorly soluble drugs - Google Patents

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 __B7__ 五、發明說明（1 ) 發明之領域 本發明爲藥學試劑之領域。特別地，本發明關於其中使 用一或更多種母生育酚作爲主要溶劑之藥學試劑。 發明之背景 每年可發現數百種醫學可用化合物，但是這些藥物之臨 床用途僅在發展將其運輸至其人體中治療目標之藥物輸送 載體時爲可能的。此問題對需要靜脈内注射以達到其治療 目標或劑量但爲不水溶性或低水溶性之藥物特別重要。對 於此種疏水性化合物，直接注射爲不可能的或高度危險 性，而且可造成溶血、靜脈炎、過敏性、器官衰竭及/或 死亡。此種化合物被藥學家稱爲”親脂性疏水性"、或 最具爭議性形式之”兩疏媒性”。 這些種類之治療物質之幾個實例爲異丁苯丙酸、苯甲二 氮萆、灰黃黴素、環抱素（cyclosporin)、可的松 (cortisone)、普羅盧金（proleukin)、伊多波糖化物 (etoposide)、派克羅塔克索（paclitaxel)。Kagkadis，KA等人 之（1996) PDA J Pharm Sci Tech 50(5):3 17-323; Dardel，0· 之 1976 o Anaesth Scand 20:221-24 0 Sweetana，S與MJU Akers 之（1996) PDA J Pharm Sci Tech 50(5):330-342。 對於無法配製成水溶液之藥物，乳液一般爲最節省成本 且對施藥者最溫和，雖然使其滅菌且無内毒素使得其可藉 靜脈注射而施藥爲嚴重之問題。一般用於藥學乳液之油包 括得自三甘油酯族之可皂化油，例如，大豆油、芝麻籽 油、棉子油、紅花子油等。Hansrani，PK等人之（1983) J. -4- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注音3事項再填寫本頁) 裝--------訂--------- 鲁· 1290052 A7 B7 五、發明說明（2 )

Parenter Sci· Technol 37:145_15〇。使用—或更多種界面活 性劑將乳液安定，而且加入賦形劑以使乳液更生物相容 性、安定及較不毒性。得自蛋黃或大豆之卵磷脂爲常用之 界面活性劑。滅菌製造可藉由在製造前將所有成份絕對滅 菌，繼而在所有之製造階段使用絕對無菌技術而完成。然 而，製造及滅菌力確定之改良容易度可在衛生製造後之最 終滅菌藉熱或過濾得到。不幸地，並非所有之乳液適合熱 或過濾處理。 已顯示安定性受乳液之大小及均勻度影響。較佳乳液包 括具有不大於200奈米平均滴徑之次微米顆粒之懸浮液。 此大小範圍之安定分散液不易得到，但是具有預期在血流 中循環較久之益處。此外，此大小範圍之安定分散液較不 易被網狀内皮系統未特定地呑噻。結果，此種藥物較易到 達其治療目標。因此，較佳之藥物乳液設計爲被目標細胞 或器官有效地吸收，而且鎖定RES以外之目標。 維生素E在乳液中之用途爲已知的。除了數百個在乳液 中使用少量（例如，低於1 %，Lyons, R.T·,之Pharm Res 13(9):S-226, (1996) MFormulation development of an injectable oil-in-water emulsion containing the lipophilic antioxidants a -tocopherol and -carotene”）維生素 E 作爲抗 氧化劑之實例，最初之可注射維生素E乳液本質爲 Hidiroglou所製造用於綿羊之飲食補充及對維生素e與其衍 生物之藥學熱力學研究。Hidiroglou M.與Karpinski K.之 (1988) Brit J Nutrit 59:509-518 〇 -5- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝--------訂--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 Α7 Β7 五、發明說明（3 )

Kato與同事製造用於老鼠之可注射形式之維生素£。

Kato Y·，等人之（1993) Chem Pharm Bull 41(3):599-604。其 以Tween 80、Brij 58及HCO-60配製膠微粒溶液。使用異丙 醇作爲共溶劑’然後眞空蒸發而去除；將殘渣油玻璃振動 溶於水中成爲膠微粒懸浮液。亦藉由以大豆磷脂酸酯膽礆 (卵嶙脂）與大豆油溶解維生素E而製備乳液。將水加入且 超音波振盪而製備乳液。 在1983年引入用於初生兒之維生素E補充之維生素E乳液 E-Ferol。Alade S.L·等人之（1986) Pediatrics 77(4):593-597。 接受此產品之結果，在數個月内有3 0個嬰兒死亡，此產品 立即以FDA命令撒消。用於E-Ferol以乳化25毫克/毫升維 生素E之界面活性劑混合物包括9 %之Tween 80及1 %之 Tween 20。在所使用含量之這些界面活性劑最終似乎應爲 不幸之死亡負責。此經驗描述及改良配方之需求及選擇適 當生物相容性界面活性劑且小心地監測其在非經腸胃乳液 中之含量之重要性。 一種溶解低水溶性化合物之替代方法爲在非水性環境中 直接溶解，例如，醇（如乙醇）、二甲基亞砜或三乙脂。 PCT申請案WO 95/1 1039中之實例敘述維生素E與維生 衍生物TPGS組合乙醇與免疫抑制劑分子環泡素之用法'。 美國專利5,689,846揭示派克羅塔克索之各種醇溶液。美國 專利5,573,781揭示派克羅塔克索在乙醇、丁醇與己醇中^ 溶解，及在丁醇與己醇中輸送時比較乙醇之派克羅塔克$ 抗腫瘤活性增加。可小心地將含醇溶液施藥， 一 μ -疋一般使 --：---------裝--------訂---------- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) -6 -

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用靜脈點滴以避免伴隨這些溶液之填塞注射之疼痛、血管 刺激及毒性。 美國專利4,439,432揭示製備黃體酮在生育酚中之高濃度 溶液。可由這些溶液製備乳液以用於系統性黃體酮:乏二 皮膚治療’治療如牛皮癖之局冑皮膚病況或陰道應用。此 溶液亦可封包以用於口服施藥。 EP申叩案〇〇1，851 (Akzo N.V.)揭示雌烷、雄烷、與（19_ ηο㈠孕烷系列（其包括在正常溫度爲液態之母生育酚與母 生育纷衍生物）之類固醇之高濃縮溶液。 〃 PCT公告WO 95/21217 (Dumex有限公司）揭示生育酚可作 爲實質上不溶於水之藥物之溶劑及/或乳化劑，特別是用 於局部配方之製備。在此説明書中提及維生素e_tpgs在 含高含量α -生育酚配方中作爲乳化劑之用途（第7_8與12 頁）。實例1至5揭示用於局部施藥之配方，其包含低於配 方之25% w/w之脂質層生育酚）、藥物與維生素ε_ TPGS作爲乳化劑。 PCT公告wo 97/03651 (Danbiosyst UK有限公司）揭示脂 質藥物輸送組合物，其含至少五種成份：治療藥物、維生 素E、落解藥物與維生素E之油、安定劑（磷脂、卵磷脂、 或聚氧化乙浠-聚氧化丙烯共聚物之波羅沙體（p〇1〇xamer)) 與水。揭示之治療藥物爲itrac〇naz〇le與派克羅塔克索。，， 治療乳液"組合物在治療藥物停留之分散相中需要兩種 油，維生素E及另一種油，其一般爲如大豆油之三甘油 酯。派克羅塔克索之唯一之作業例，實例16，亦含維生素 -7-本紙張尺度適用中關家標準（CNS)A4規格\21G X 297公釐 1290052 A7 B7 五、發明說明（5 ) E及大豆油。 WO 97/03 65 1亦揭示附帶地揭示具有維生素E活性之母生 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 育酚衍生物及生育三烯酚類視爲在此公告中使用之”維生 素E”之定義内。 PCT公告WO 97/22358 (Sherman)揭示溶於溶劑系統中之 環泡素之微乳液預濃縮物，其包括選自母生育纷、生育 酚、生育二晞纷類、及其衍生物之親水性成份。除了 α _ 生育酚，此公告亦提及Θ -生育酚-β -與r -生育酚，及“ -、A ·、d與生育三烯酚類或其混合物。這些組合物 亦包括親水性溶劑，較佳爲丙烯碳酸酯或具有小於丨〇〇〇之 平均分子量之聚乙二醇。Sherman之第二個PCT公告（WO 98/30204)揭示環泡素之微乳液預濃縮物，其中溶劑系統可 包含兩種疏水性溶劑，其一選自母生育酚、生育酴、生育 三烯酚類、及其衍生物。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 商標名稱PharmosolveTlv^N -甲基·2-ρ比哈淀酉同（NMP)可用 以改良低溶性藥物在藥學配方中之溶解度且在近來之文獻 中出現用於獸醫醫學且即將應用於人體。此外，水性可注 射基液之1至5% (w/v)濃度之商標名稱p0Vid0neTMi聚乙晞 基吡咯啶酮（PVP)，其具有2,500至100,000之分子量，可與· NMP作爲基溶解劑。美國專利5,726,181揭示包含NMP與高 親脂喜樹礆之抗腫瘤組合物及懸浮液。 聚乙二醇（PEGs)與PVP爲兩種常用以修改藥物（包括派克 羅塔克索）之溶解度行爲之水溶性聚合物之實例。雖然派 克羅塔克索在兩種溶劑中之溶解度相當高，在適合非經腸 -8 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（6) 胃施藥之稀水溶液中，藥物之溶解度低且稀釋時藥物沉澱 之可能性高。在含50-100% PEG 400之PEG 400與水之摻和 物中，派克羅塔克索之溶解度各爲0.2至175毫克/毫升。因 此.，在使用較大量之水時派克羅塔克索溶解度相當低，例 如，在水中爲35% PEG 400及30% PVP各爲0.03毫克/毫升 及 S 0.3 毫克 / 毫升。丨丨Solubility of paclitaxel in Polyethylene Glycol 400/Water Mixtures’’ （Straubinger， R.M.之 Biopharmacuitics of paclitaxel (Taxol); Formulation, activity and pharmacokinetics ，第 244 頁，Taxol，Science and Applications(編者 M. Suffness)，CRC Press，紐約，1995)。 PEG-400之用途不限於派克羅塔克索且可應用於其他在聚 乙二醇中呈現溶解度之治療劑（例如，伊多波糖化物）。衍 生物形式之派克羅塔克索，包括聚乙二醇衍生物，揭示於 美國專利5,614,549。 除了藥學配方與界面活性劑在如醇（乙醇、異丙醇、苄 醇等）之非水性溶劑中之低溶解度及藥物沉澱之可能性， 另外之問題爲這些溶劑自其容器萃取毒性物質之能力，例 如，塑性劑。例如，抗癌性藥物派克羅塔克索之現今商業 配方包括羥化蓖麻油與乙醇之混合物，並且自常用之靜脈. 浸注管與袋快速地萃取塑性劑，如二-(2·乙基己基）-g太酸 酯。已報告塑性劑之負面反應，如呼吸痛苦、需要額外之 費用及時間使用特別之浸注系統。Waugh等人之（1991) Am J. Hosp. Pharmacists 48:1520 0 關於這些問題，可見到理想乳液載體爲不昂貴、本身非 -9- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ·1!!1 訂·--— — — — — — 1290052 A7 五、發明說明（ 刺激性或甚至營養的盥 曰 ^ , 脣的與、k和的、最終可藉熱或過濾滅菌、 在控制儲存條件下φ金 、 y1年、適$廣泛之不水溶性與 :溶性：物、、及實質上無醇。除了親脂性且溶於油之藥 :需要安定且以乳液之形式負載在脂質及水中爲 性（樂物之載體。 發明之概要 夕爲了符合這些需求，本發明有關藥學組合物，其包括： 和或更夕種母生育紛，有或無水相，加入共溶劑及治療 劑之界面活性劑或界面活性劑之混合物。本發明之組合物 可爲乳液、膠微粒溶液或自動乳化藥物輸送系統之形式。 母生育酚(或生育酚)分子較佳爲--生育酚。本發明之組 合物通常實質上無任何單羥基醇。 共溶劑可包括水溶性聚合物，較佳爲聚乙二醇或聚乙缔 基吡各啶酮，有或無N _甲基—2_吡咯啶酮。具有1⑼至 H)，000之分子量之聚乙二醇（PEGs)爲最佳之共溶劑。最佳 爲大於配方之1重量％之量之ΡΕ〇_4〇〇。 藥學組合物可藉各種兩親媒性分子之加成而安定，其包 括陰離子性、非離子性、陽離子性、與兩性離子性界面活 性劑。較佳爲，這些分子爲pEG化界面活性劑且最適爲 PEG化α -生育驗。 兩親媒性分子進一步包括界面活性劑，如抗壞血基棕 櫊酸酯；硬脂胺；蔗糖脂肪酸酯、聚乙二醇化磷脂、各種 母生育酚衍生物及聚氧化丙晞·聚氧化乙埽非離子性嵌段 共聚物。可用之界面活性劑亦包括波羅沙體、tetr〇nies、 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 單裝--------訂--------- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -10- 1290052

五、發明說明（8 伽、硬脂酸麩胺醋、聚乙二醇化單與二甘油酿、丙二 醇單-/二酯、聚甘油酯、索盧妥(s〇i福i)Hs_i5、磷脂、 印鱗脂、m乙二醇化嶙脂、聚乙二醇化類固醇、聚乙二醇 ，膽固醇、及其他之母生育酚酯、蔗糖酯、脂肪酸、膽汁 酸與共扼膽汁酸、非離子性與陰離子性界面活性劑。 治療劑可爲化學治療劑、抗生素(抗病毒、抗細菌、驅 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 蟲、殺原蟲'或抗眞菌）、止痛劑、抗抑修劑'抗精神病 劑、激素、類固醇、血管強化劑、血管生成抑制劑、細胞 樂或細胞分裂素。 、適合用於本發明之藥物型式之更廣泛但非限制性表列含 於 PCT 申請案 WO 98/30205。 、在用以輸送心肌血管或癌症治療藥時，具有協同生物與 治療效果之母生育酚爲主乳液特別有利。 、用於輸迗化子療藥之粒狀乳液之附加優點爲用於乳液 (界面活性劑之廣爲分散性質藉由抑制Ρ.糖蛋白（結合薄 膜藥物運送體）而克服多抗藥性。 在乳液或膠微粒溶液形式時，本發明之乳液可包含水性 μ nt^各種添加物以幫助安定乳液或使配方爲 生物相容性。 在-種形式’本發明係關於一種藥學組合物，其包含從 -生/酚，選自塔克類固醇(taxoids)、紫杉蠄㈣―)與塔 克杉（ha·)之化學治療藥，纟及1^_生育酴聚乙二醇 人:〇琥珀酸酉曰。在另一種形丨，本發明係關於一種藥學組 ^ ’其包含am，共溶劑，—或更多種界面活性 -11- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) · ! ! ! I 訂—ί! &張尺度適用中國國家標準(CN-S)A4規格(21? X 297 ) 1290052 A7 B7 五、發明說明（9 劑，水相及治療劑，其中組合物爲乳液或膠微粒溶液之形 式，而且溶液實質上無任何單羥基醇。 在較佳格式中，共溶劑可爲聚乙二醇、N-甲基吡咯 咬嗣、聚乙烯基p比洛淀酮或其混合物。 在較佳格式中，界面活性劑爲α ·生育酚衍生物且聚乙 —醇具有100至10,000，最佳爲約200至約1〇〇〇之分子量。 在較佳格式中，治療劑爲選自塔克類固醇、紫杉鹼與塔 克杉之化學治療劑。 本發月之藥予組合物一般藉由將治療劑溶於共溶劑以形 成治療劑溶液’·然後將一或更多種母生育酚及一或更多種 界面活丨生剑加入治療劑溶液以形成治療劑在親水性共溶劑 中之油/合液而形成。然後將油溶液摻合水相以形成預乳 液爲了1 V輸送，將預乳液進一步均化以形成細乳液。爲 了口服輸运，治療劑在共溶劑與界面活性劑中之油溶液一 般封包於膠囊中。 在本發明方法之較佳形式中，治療劑直接溶於聚乙二醇 或母生育酚油中，如此可避免使用單#基醇作爲溶劑。 式之簡要説明 本發明參考圖式而較佳地了解，其中： 、圖1 A顯不在7。。隨時間經過之派克羅塔克索乳液⑴) 之粒度； 、：？顯示在25r隨時間經過之派克羅塔克索乳液(qwa) 私度， 圖2爲顯示派克羅塔克索在如實例5所述乳液中之整體性 化張尺度適时_ —準（CNS)A4 -12- ϋ公釐Γ — — — — — — — — — — ^_W1 - — — — — 111 ^ ---— I!--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 1290052 五、發明說明（10 ) 之HPLC層析圖； 之隨時間經過之派克羅塔克索乳液⑴戰) 《派克羅％克索濃度，· 、顯：在25r隨時間經過之派克羅塔克索乳液(QWA) <派克羅塔克索濃度； 圖1顯示隨時間由三種乳液釋放之派克羅塔克索百分 比。符號•表示隨時間由商業得自Bristol Myers Squibb之乳 液釋放之派克羅塔克索百分比。符號▲表示隨時間由如實 幻 '斤^ . 口 6笔克/亳升派克羅塔克索之本發明乳液（qWa) 釋放之派克羅塔克索百分比。符號◊表示隨時間由如實例 7所迟。7笔克/笔升派克羅塔克索之本發明乳液（qWb) 釋放之派克羅塔克索百分比。 圖5顯示pEG-400/維生素E/派克羅塔克索乳液在老鼠中 對抗B16黑素瘤之效率。 發明之詳細説明 爲了確定完全了解本發明，提供以下之定義： 生^炎•生育酚爲天然與合成化合物之族，其亦以母生 育酚或維生素E之通稱而眾所周知。沒_生育酚爲此類化合 物之最豐冨及活性形式，而且其具有以下之化學結構（圖 I): CH, H〇^ X ia 1，h3 Cf3 ch3 ch3 T CHVl _____ -13- ^紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐 CH： 1290052 A7

項 再 填 寫 本 頁

裝 I 訂 1290052 Α7 Β7 五、發明說明（12) 生育酚類之成員可提供額外之優點且滿足特定之生物功 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 此外，使用這些生育酚可生成具有較低黏度之乳液，因 此較易製造及/或處理。 此組之較佳成員包括但不限於d-厂與d-d _生育酚、d-/? -、d- 6 -與d- r -生育三晞紛。 母生育酚：在此以廣義使用’’母生育酚’’表示生育酚及生 育三烯酚及其衍生物之族，因爲所有之生育酚及生育三烯 酉令爲最簡單生育酚6-羥基-2-甲基-2-植基克羅曼（有時稱爲 ”母生育酚"）之基本衍生物。母生育酚亦包括生育酚或生 育三晞驗衍生物，其包括在克羅曼環上之6 -經基酯化之常 見衍生物。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 界面活性劑:表面活化種類之兩親媒性分子，其藉化學 方法或由天然來源或過程純化而製造。其可爲陰離子性、 陽離子性、非離子性、及兩性離子性。典型界面活性劑敘 述於 Paul Becher之Emulsions: Theory and Practice，佛羅里 達州 Malabar之Robert E. Krieger Publishing, 1965; Martin Μ. Rigear之Pharmaceutical Dosage Forms: Dispersed Systems 第 I卷，Surfactants，及美國專利5,595,723，其讓渡給本發明· 之受讓人Sonus Pharmaceuticals。這些參考資料均在此併 入作爲參考。 TPGS : TPGS或PEG化維生素E爲其中聚乙二醇次單位在 維生素E分子之環羥基連接琥珀酸丄酯之維生素E衍生 物。TPGS表示D- α -生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯 -15- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7_ 五、發明說明（13) (MW=15 13)。TPGS爲具有圖III之結構之非離子性界面活性 劑（HLB=16-18): (ΠΙ)

維生素E TPGS之各種化學衍生物，其包括各化學部份 之酯與醚键聯，包括於維生素E TPGS之定義内。 聚乙二醇:聚乙二醇（PEG)爲親水性聚合形式之乙二 醇，其包括化學結構一（CH2-CH2-0-)之重複單位。聚乙二 醇之通式爲 HOCH2(CH2OCH2)nCH2OH或H(OCH2CH2)nOH。 分子量範圍爲200至10,000。其各種形式敘述爲PEG-200、 PEG-400 等。 N-甲基-2-吡咯啶酮：N-甲基-2-吡咯啶酮（NMP)爲具有以 下化學結構之有機分子： (VI) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 以商標Pharmasolve™得到GMP級之此種化合物且用以改 良低溶性藥物在藥學配方中之溶解度。特定藥物之增強溶 解度有助於與分子之氮及羰基反應性中央之錯合作用。 聚乙烯基吡咯啶酮:聚乙烯基吡咯啶酮（PVP)或聚烯吡 -16- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 _五、發明說明（14) 酮爲水溶性聚合物，其包括以下化學結構之重複單位：

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 其平均MW可爲2500至3X106。可得特定等級之無焦精聚 烯p比酮以用於非經腸胃施藥。可使用至多5% w/v之濃度作 爲低溶性藥物之共溶劑。 波羅沙體或普勒拉尼克（Pluronics):其爲具有以下通式 之環氧乙烷與環氧丙烷之合成嵌段共聚物： OH(OCH2CH2)a(OCH2CH2CH2)b(OCH2CH2)aH 基於a與b之値之以下變體以商標名稱普勒拉尼克商業得 自 BASF Performance Chemicals 公司（紐澤西州 Parsippany)， 而且其包括CTFA命名代號爲波羅沙體108、188、217、 237、238、288、338、407、101、105、122、123、124、 181、182、183、184、212、231、282、331、401、402、 185、215、234、23 5、284、333、334、33 5、與403之界面活 性劑。對於最常用之波羅沙體124、188、237、338與407， a與b 之値各爲 12/20、79/28、64/37、141/44 與 101/56。 索盧妥HS-15 :其爲BASF公司（紐澤西州Parsippany)製造 之聚乙二醇660羥基硬脂酸酯。除了自由聚乙二醇及其單 酯，亦可偵測到二酯。依照製造者，索盧妥HS-1 5之典型 批料含約30%之自由聚乙二醇及70%之自由聚乙二醇酯。 -17- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) t裝------- —訂--------- 1290052 A7 B7 五、發明說明（15 ) 用於本發明之其他界面活性劑包括 抗壞血基_6-棕搁酸酯（紐澤西州NutleyiR〇ehe vitamins公 -------------V-裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 司）、硬脂胺、及蔗糖脂肪酸酯（三菱化學公司）。習用界 面活性劑包括具極性親水頭部與疏水性尾部之化合物，如 ^含鍵結聚麩胺酸酯連接環羥基之肽之維生素£衍生物及 聚乙二醇化植物類固醇。其他之肽亦可鍵結至維生素E。 聚乙二醇化磷脂亦爲有用之界面活性劑。聚乙二醇化磷脂 〈實例包括磷脂醯乙醇胺之PEG 2000*PEG 5000同系物， 其中脂肪醯基鏈含C0_C24脂肪酸，其可爲飽和、不飽和、 其混合物。 :用以指引界面活性劑之實驗式。 其値爲1-45且在非離子性界面活性劑之情形爲約丨_2〇。通 常’對於親脂性界面活性劑，HLB小於1 0，及對於親水性 者，HLB大於1 〇。 ··在活組織内可以可接受之方式實行功能而 無不當之毒性或生理或藥理影響。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 單羥基醇:具有小於約1 ·〇% (w/v)單輕基 醇之早#工基醇濃度之組合物。在此使用之名詞’’單輕基，，醇 爲含一個羥基之醇，例如但不限於乙醇、丁醇、異丙醇。· 名’多喪基醇’’或’’多元醇”爲含二或更多個幾基之醇，例 如但不限於乙二醇、丙二醇或聚乙二醇（PEG)。PEG亦稱 爲•’聚二醇”，其以乙二醇爲聚合單位。在此使用之其他適 泛之夕备基醇包括但不限於乙二醇（2-OH基）、甘油（3·〇η 基）、花楸醇（6_〇H基）及甘露醇（6-OH基）。 -18- 本紐尺度適用中國Hi^s)A4規格⑽公爱 1290052 A7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（16 ) IkA :兩種滴形式之不互溶、、存麵.陂触γ /合履晅ι膠體分散液，並亩 通常爲0.1至3.0微米且其" ς 及連續相之折射率相符。此種系統呈現有限之安 通常以應用或相關參考系統定 /、 疋我具了精由兩親媒性分子 或黏度增強劑之加成而增強。 兩種不互溶液體之熱動力學安定各向同性透明 分散液，如油與水，其藉界面活性劑分予之界面膜而安 定。微，液具有小於200 nm，通常爲1〇_5〇nm之平均滴 徑。在無水存在下，油與非離子性界面活性劑之混合物形 成已知爲自動乳化藥物輸送系統（SEDDS)之透明且各向同 性落液，而且其已成功地用以改良親脂性藥物溶解及口服 吸收。 里:聚乙二醇化或乙氧化表示聚乙二醇次單位 經化學鍵聯連接特定化合物。 —介1·:可含藥學可接受添加物（如酸化、鹼化、緩 衝、鉗合、錯合與溶解劑、抗氧化劑與殺微生物防腐劑、 保濕劑、懸浮劑及/或黏度修改劑、張力與濕潤或其他生 物相容材料）之含水液體。 鱼:任何天然或合成化合物，其具有生物活性，溶 於油相且具有至少2之辛醇-緩衝液分配係數（Log Ρ)以確定 治療劑較佳地溶於油相而非水相。其包括肽、非肽與核嘗 酸。水溶性分子之疏水性衍生物，如脂肪酸與脂共軛體/ 前藥，在治療劑之範圍内。 也··有效對抗一或更多種形式之癌症之任何天 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 零-裝 « — — — — — — I — # 19- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格⑽X 297公釐） 1290052 A7 五、發明說明（17 ) 然或合成分子，特別是稍微或完全親脂性或可修改成親脂 性之分子。此定義包括其作用機構爲細胞毒性（抗癌劑）、 模擬免疫系統（免疫模擬劑）之分子與血管生成調節劑。在 任何情形之結果爲減緩癌症細胞之生長。 化學治療藥包括派克羅塔克索及概略地稱爲塔克類固 醇、紫杉礆與塔克杉之相關分子。派克羅塔克索之結構示 於下圖中（圖V I)。 (VI) 〇

------------麵-裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 對基本環結構（塔克類固醇核）之各種修改及連接包括於 塔克類固醇”之定義内，其可證明有效降低癌症細胞生長 及將其分配至油（液相）中而且其可藉熟悉此技藝者已知之 有機化學技術構成。其包括但不限於派克羅塔克索之苯甲 酸酉旨衍生物’如2-去苯甲醯基芳醯基及c_2-乙醯氧基_ C 4冬甲故酯派克羅塔克索、7_de〇Cytax〇i、c-4。丫淀派克 、羅塔克索’特別是派克羅塔克索之碳酸甲酯衍生物，其亦 以BMS-188797而眾所周知，及各種具有天然及合成聚合物 之派克羅塔尤索共軛物，特別是具有脂肪酸、磷脂、與甘 '由酉曰及丨，2·二醯氧基丙烷_3_胺。Docetaxel (Taxotere)亦爲 ί紙張尺度適用中^^家標準 -20- 297公爱) 290052 A7 B7 五、發明說明（18 )

較佳之塔克杉。塔克類固醇核之結構示於圖VII (VII) 與派克羅塔克索共享結構類似性之天然產物亦包括於本 發明之範圍内，即，其加入提議用於微管安定劑之常用藥 學基團。這些化合物包括但不限於epothilone A與B、 discodermolide、nonataxel與eleutherobin (Chem. Eng· News 1999, 77(17):35-36” 化學治療藥包括podophyllotoxins及其衍生物與同系物。 這些分子之核心環結構示於下圖（圖VIII): (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 訂：

OH 經濟部智慧財立局員工消費合作社印製 用於本發明之化學治療藥之另一種重要種類爲喜樹礆， 其常見環結構示於下圖，其包括保留效率且保存下示分子 之親脂性特徵之任何衍生物及對此基本結構之修改（圖 -21- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） [290052 A7 B7 五、發明說明（19 ) IX)。

(IX) 用於本發明之化學治療藥之另一種較佳種類爲親脂性蒽 環淋（anthracyclines)，其基本環結構示於下圖（圖X):

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) (X) 圖X之適合之親脂性修改包括在環羥基或糖胺基之取 代。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 化學治療藥之另一種重要種類爲親脂性或可藉熟悉此技 藝者已知之分子化學合成修改而變成親脂性之化合物，例 如，藉組合化學及藉分子模型，而且選自以下之表列： Taxotere，Amonafide，Illudin S，6-經基甲基醯基富晞 Bryostatin 1，26-坡珀 St 基 bryostatin 1，椋櫚酸基 Rhizoxin ，DUP 941 、Mitomycin B ，Mitomycin C ， -22- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 _B7____ 五、發明說明（20 )

Penclomedine，干擾素沈2b，血管生成抑制劑化合物， Cisplatin疏水性錯合物，如具氯化舶之2 -耕-4,5·二氫-1H-咪唑及具氯化鉑之5-胼·3,4-二氫-2Η-吡咯，維生素A，維 生素E及其衍生物，特別是生育酚琥珀酸酯。 其他可用於本發明之化合物包括：1，3·貳（2_氯乙基）_1_亞 硝基脲（'’carmustinen或nBCNU’’），5-氟尿喊淀，阿黴素 (’’adriamycin丨，），epirubicin，aclarubicin、Bisantrene(武（2-咪 唆琳-2 -基肼）_9，10·蒽二瘦醛，mitoxantrone，胺甲喋呤， edatrexate，muramyl三肽，muramyl二肽，脂聚糖化物，9-1^-阿拉伯糖吱喃腺嗓吟（％丨(^以13丨1^’'）及其2-氟衍生物， 白梨蘆醇，視黃酸及視黃醇，Carotenoids，及它莫西芬。 可用於本發明之應用中之其他化合物包括·· Decarbazine，Lonidamine，Piroxantrone，Anthrapyrazoles， 伊多波糖化物，喜樹驗，9 -胺基喜樹驗，9 -硝基喜樹驗， 喜樹生僉-11 (丨丨Irinotecan")，Topotecan，Bleomycin，Vinca生 物生会及其同系物[Vincristine，Vinorelbine，Vindesine， Vintripol，Vinxaltine，Ancitabine]，6-胺基篇，及 navelbine 〇 可用於本發明之應用中之其他化合物爲taxol、 eleutherobins、sarcodictyins、discodermolides 與 epothiolones 之 類似物。可用於本發明之其他化合物爲微管導向劑。微管 導向劑結合稱爲微管蛋白之蛋白質，如此防止微管聚合。 代表性微管結合劑包括epothilones、elutherobin與 discodermolide 0 -23- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） --------—— -^ιρ-^i I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) · 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 B7_ 五、發明說明（21 ) 亦可使用丙戊酸，tacrolimus，雷伯黴素，clarithromycin， 紅黴素，新黴素，桿菌肽，促甲狀腺激素，生長激素抑制 素，睪丸素，黃體S同，可的松，polyketides爲一類，。奎p若 酮爲一類，環丙弗黴素（ciprofloxacin)，benzodiazepines 爲 一類，苯甲二氮革，妈三醇，氣氮平，androcephin。 考慮這些定義，本發明有關實質上無乙醇溶劑之乳液、 膠微粒溶液或自動乳化藥物輸送系統形式之藥學組合物。 本發明組合物之治療劑起初可溶於共溶劑中。在油相製 備時使用乙醇作爲處理溶劑時之情形，去除乙醇且形成實 質上無乙醇組合物。乙醇濃度小於1 % (w/v)，較佳爲小於 0.5%，而且最佳爲小於0.3%。治療劑亦可溶於甲醇、丙 醇、氯仿、異丙醇、丁醇及戊醇。這些溶劑亦在使用前去 除。 在較佳具體實施例中，本發明組合物之治療劑可起初溶 於非揮發性共溶劑中，如苄醇、苯甲酸苄酯、二甲基亞颯 (DMSO)、二甲基醯胺（DMA)、丙二醇（PG)、聚乙二醇 (PEG)、N -甲基_2_吡咯啶酮（NMP)及聚乙烯基吡咯啶酮 (PVP) 〇 NMP或如PEG或PVP之水溶性聚合物（表1 )特佳。 使用PEG-400而非醇溶解治療劑之主要優點/改良爲，揮. 發性溶劑不必在治療劑施藥之前去除或稀釋。乳液中之最 終聚乙二醇含量可爲1-50%，較佳爲1-25%而且更佳爲1-10% (w/w)。適合之聚乙二醇溶劑爲具有200至600，較佳爲 300至400之平均分子量者（表1 )。在口服用自動乳化系統 之情形，亦可包括高分子量PEGs (1，000-10,000)作爲固化 -24- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 11--I-----装--- (請先閱讀背面之注咅3事項再填寫本頁) 訂！ 1290052 Α7 Β7 五、發明說明（22) 劑以形成可充填至硬膠囊中之半固體配方。 表1 ·低分子量聚乙二醇之物理性質 物理性質 PEG 200 PEG 300 PEG 400 PEG 600 分子量 190-210 285-315 380-420 570-630 黏度（mPas) 46-53 66-74 85-95 130-150 折射率（2 5 °C ) 1.459 1.463 1.465 1.467 寒固點（°C ) -50 -16 to -12 -3 to 8 15 to 25 本發明治療劑在聚乙二醇或其他較揮發性共溶劑（PVP、 NMP)中之溶解避免將本發明治療劑溶於如乙醇之單羥基 醇或其他揮發性溶劑之必要性。使用聚乙二醇或N -甲基_ 2-峨洛淀酮排除在治療上使用乳液之前去除溶劑之需要。 乳液中之最終聚乙二醇含量可爲，較佳爲丨_25%而 且更佳爲1-10% (w/w)。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -------------裝·— (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明之組合物含生育酚（較佳爲α -生育酚）作爲治療 藥物之載劑，其經血管内、口服、肌下、皮膚及皮下路徑 對動物或人類施藥。特別地，乳液可經以下任何路徑給 予：腹部内、心房内、關節内、囊内、子宮頸内、顧7 硬膜内、組織内、小房内、腰髓内、壁内、眼内、手術 ?、腦頂區内、腹膜内、胸膜内、肺内、脊椎内、胸内、 氣管内、鼓室内、子宮内、及心室内或腦内。本發明之乳 液可使用此技藝已知用於肺部輸送親脂性化合物之# 溶膠推進劑喷霧。 乳 在其第-種狀態，本發明有關生育酚作爲含不水溶性、 -25- 1290052 A7 B7 五、發明說明（23 $水溶性治療劑、已修改成較不水溶性之水溶性或其混合 物的乳液之疏水性分散相之用途。在較佳具體實施例中， 使用^生育酚。亦稱爲"維生素E，，之生育盼並非典型 H油。其具有比大部份脂質油高之極性，特別是三甘 油酯，而且無法&化。其實際上不溶於水。 訂 在第二種㈣τ ’本發明爲自動乳化系統形式之生育紛 乳液，其中系統用於所希望之不水溶性（或低水溶性或修 :…交不水溶性之水溶性試劑或其混合物)藥物之口服施 藥。在此具體實施例中，將具界面活性劑與藥物或藥物混 合物之油相封包於柔軟或硬膠囊中。可加入適合之固化 劑，其具有40至6 (TC範園之熔點，如高分子量聚乙二醇 (MW>1000)，及甘油酯，如以商標名稱^丨狀丨叫法國加 Pdest之Gattefose公司）得到者，以在高溫將配方充填至硬 膠囊中。在皇溫平衡時形成半固體配方。在明膠在胃及十 一扣％中溶解時，油釋放且自發地形成具2 _ 5微米滴徑之 細乳液。乳液然後被腸之微絨毛吸收且釋放至血流中。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在第三種狀態，本發明包含含一或更多種母生育酚（較 佳爲生育酚）之微乳液。微乳液指次類之乳液，其中乳 液懸浮液爲本質上透明的，而且因分散其中之極小油/藥 物微凝集體而無限地安定。 在本發明之第四種狀態中，使用PEG化維生素E (TPGS) 在維生素E之乳液中作爲主要界面活性劑。利用pEG化維 生素E在維生素E之乳液中作爲主要界面活性劑、安定劑 及補充溶劑。聚乙二醇（PEG)亦可在本發明乳液中作爲共 -26- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 五、發明說明（24 溶劑。特別有用爲聚乙二醇200、300、400或其混合物。 α -生育驗及/或其他母生育紛在本發明乳液中之濃度可 爲約1至約20 % w/w。在TPGS存在於組合物中時，生育酉分 對TPGS之比例最適爲約1 : 1至約20:1。 本發明之乳液可進一步包括界面活性劑，如抗壞血基_6_ 棕櫚酸酯、硬脂胺、聚乙二醇化磷脂、蔗糖脂肪酸酯、各 種母生育酚衍生物，及非離子性合成界面活性劑混合物， 如聚氧化丙晞-聚氧化乙烯非離子性嵌段共聚物。 本發明之乳液可包含水性介質。水相通常具有約3〇〇 mOsrn之滲透性，而且可包括氯化鈉、花楸醇、甘露醇、 I乙二醇、丙二醇白蛋白、多肽及其混合物。此介質亦可 含各種添加物以幫助安定乳液或使配方爲生物相容性。可 接雙之添加物包括酸化劑、鹼化劑、殺微生物防腐劑、抗 氧化劑、緩衝劑、鉗合劑、懸浮劑及/或黏度增加劑、及 張力劑。較佳爲，包括控制pH、張力及增加黏度之試劑。 最適爲，以亦增加黏度之試劑得到至少25〇m〇sm之張力， 如花楸醇或蔗糖。 用於靜脈注射之本發明乳液具有i 0至5〇〇 nm，較佳爲i 〇 至200 nm而且最佳爲1〇至1〇〇 nm之粒度（平均滴徑）。對於 ,脈乳液’脾臟及肝臟排除大小大於500 nm之顆粒。 索 維 本喬明之較佳形式包括派克羅塔克索，一種用於子宮癌 治療及其他癌症之非常不水溶性之細胞毒素。本發明之乳 1組合物包含以至多2 0毫克/毫升之濃度含派克羅塔克 (其爲目前處方可得之四倍）及生物相容性界面活性劑之 -27- 297^17 本紙張尺度iiTiii標準（CNS)A4規格 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 __B7_ 五、發明說明（25 ) 生素E溶液，使得乳液微滴小於0.2微米且最終可藉過濾滅 菌。 較佳之可注射組合物含·· 0.1-1.0%之派克羅塔克索（1-10 毫克/毫升）；1-10%之PEG 400 ; 1-20%之維生素E ; 1-10% 之TPGS與0.5-2.5%之波羅沙體407。另一種較佳組合物含： 1.0%之派克羅塔克索（1 0毫克/毫升），6%之PEG 400，8% 之維生素E，5%之TPGS，1 %之普勒拉尼克F 127與80%之 水溶液。 用於自動乳化系統之較佳配方如下：0.1-20%之派克羅塔 克索，10-90%之維生素E，10-90%之PEG 400或N-甲基-2_ 吡咯啶酮，5-50%之TPGS，5-50%之第二親水性界面活性 劑，如Polysorbates (Tween 80)、普勒拉尼克（普勒拉尼克 F127)或 Cremophor EL/RH40、索盧妥 HS-15。油相（維生素 E )可視情況地含聚乙晞基p比洛淀酮，甘油與丙二醇S旨，如 單-/二-/三甘油酯及丙二醇之單-二酯。此外，可包括高 分子量PEGs (1，000-10,000 MW)及高熔點甘油醋以提供配 方半固態稠度。 本發明之進一步具體實施例爲治療癌症之方法，其包含 藉由在數週之治療期間每日靜脈注射一次或每兩天一次， 而非經腸胃施藥維生素E乳液中之填塞劑量之派克羅塔克 索，有或無PEG化維生素E。此種方法可用於乳癌、肺 癌、皮膚癌及子宮癌之癌症之治療。 參考以下之非限制實例可更完全地了解本發明之一般原 理。 -28- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 1290052

實例 實例1 . 泛-生育酚中之派克羅塔克索溶解 由Sigma化學公司（密蘇里州St Louis)得到由植醇製備之 95%純度合成dl-沒-生育酚形式之“ ·生育酚。油爲琥珀色且 非常黏。自Hauser Chemical Research公司（科羅拉多州 Boulder)購得派克羅塔克索，而且以HPLC得到99.9%純 度。2 0 0毫克之派克羅塔克索溶於6毫升之無水絕對乙醇 (加州 Gardenia之 Spectrum Chemical Manufacturing Corp)且 加入1克之α -生育酚。乙醇然後在4 2。(：眞空去除直到殘 渔爲固定重量。獨立研究顯示乙醇含量小於〇.3〇/〇 (w/v)。 生成溶液爲透明的，琥珀色且非常黏，具有2〇〇毫克/克 (w/w)之派克羅塔克索於沈-生育酚公稱濃度。更高濃度之 派克維塔克索（至多400毫克/克，w/w)可溶於沒-生育紛。 實例2 . 用以製備α ·生育酚乳液之陰離子性界面活性劑 藉以下之方法以棕櫚酸抗壞血酯乳化如實例丨所述而製 備之2克之派克羅塔克索於10克之從-生育酚成爲三乙醇 胺鹽。以二乙醇胺作爲自由驗將包括抗壞血酸mjy[之溶 液緩衝至pH 6.8以形成2 X緩衝液。將5 0毫升之2 X緩衝液 置於Waring摻合器中。加入〇·5克之抗壞血基_6_棕櫊酸酯 (紐澤西州 Nutley之Roche Vitamins and Fine Chemicals公司） 陰離子性界面活性劑且溶液在氬下在4 〇 t以高速摻合2分 鐘。含派克羅塔克索之α ·生育酚然後與界面活性劑及缓 — — — — — — 1 — 丨 — — _ i I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) il· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

本紙張尺度· τ國國家標準（CNS)A4規格⑽χ挪 1290052 A7 B7_ 五、發明說明（27 ) (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 衝液加入摻合器中。在氬下持續攪拌直到得到粗、乳狀預 乳液，其在4 0 °C約爲1分鐘後。然後加入注射用之水，使 最終體積爲100毫升。 將預乳液轉移至Microfluidizer 110Y型進料容器（麻州 Newton之Microfluidics Inc)。將此單位浸於浴中以在均化 時維持約6 0 °C之處理溫度，並且在使用前以氬沖洗。注入 後，乳液在通過交互作用頭爲約18 kpsi之壓力梯度通過均 化器連續再循環1 〇分鐘。流速爲約300毫升/分鐘，顯示結 果通過均化器約2 5次。 生成之派克羅塔克索於α -生育驗載體之乳液在氬下裝 入琥珀色小瓶中且在7 °C及2 5 °C冷凍儲存。在不同之時間 間隔取樣作粒度及化學分析。 以 Nicomp 370 型 Submicron Particle Sizer(加州 Santa Barbara之Particle Sizing Systems Inc)得到之數據顯示乳液 具有280 nm之平均顆粒直徑。 實例3. PEG化維生素E (TPGS)之用法 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 構成α ·生育酚、PEG化維生素E (TPGS，維生素E聚氧 化乙二醇-1000琥珀酸酯，得自田納西州Kingsport之 Eastman化學公司）、與水之三相圖。TPGS首先在42 °C熔 化且以1至100% TPGS，其餘爲α -生育酚之各種比例重量 分析地混合α -生育驗。混合物在所有之濃度均互溶。然 後以最終水濃度由零逐步增加至97.5%之方式，將水加入 各混合物。在各步驟，觀察混合物之相行爲。在適當之處 -30- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 相o/w乳 A7 五、發明說明（28) 可藉振動及超音波實行混合，而且混合物加熱或離心以幫 助其相組合。 在鬲於80%之水濃度發現適合非經腸胃施藥 液之廣泛區域。形成之乳液爲以非離子性界面活性劑安 足’含分散α -生育紛微粒之乳白狀白由流動液體。亦在 此區域觀察到在高於約1 : 1之TPGS對油比例可能適合作爲 藥物載劑之微乳液。在較低水含量，注意到含透明θ膠（反 乳液）之廣泛區域。將兩個區域分開爲由不透明良狀液晶 組成之區域。 可以類似之方法製備從·生育酚與界面活性劑組合，例 如，TPGS與非離子性、陰離子性或陽離子性共界面活性 劑（例如，硬脂酸麩胺酯、棕櫚酸抗壞血酯或普勒拉尼克 F-68)，或藥物之相圖。 實例4 . ii裝 iI (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂： 經濟部智慧財產局員Η消費合作社印製 用於靜脈輸送派克羅塔克索之 製備以下組合物之配方： 從-生育酚乳液 派克羅塔克索 1.0 克％ 江-生育酉分 3.0 克 ％ TPGS 2.0 克％ 抗壞血基-6-棕搁酸酯 〇.25克％ 花楸醇 5.0 克 ％ 三乙醇胺 至pH 6.8 水 其餘至Ί00毫升 I備方法如下：將合成泛-生育紛（紐澤西州NUtleyi -31- 1290052 A7 _B7_ 五、發明說明（29 )

Roche Vitamins公司）、派克羅塔克索（科羅拉多州Boulder 之Hauser公司）、抗壞血基_6-棕櫚酸酯（威斯康辛州 Milwaukee之Aldrich化學公司）及TPGS加熱至40_45°C而溶 於1 0倍體積之無水未變性乙醇（加州Gardenia之Spectrum Quality Products公司）。然後眞2抽取乙醇直到殘留不超 過0.3重量％。 溫和攪捽加入含生物相容性滲透質及緩衝液之預溫水溶 液且立即形成白色乳狀。此混合物藉由在40-45°C持續加 溫且溫和轉動1 0分鐘而進一步改良。此約pH 7之預混合 物然後如下所述進一步乳化。 40-45°C之預混合物在Avestin C5均化器（加拿大渥太華之 Avestin公司）在4 4 °C以26 Kpsi均化1 2分鐘。得到之生成混 合物含具有約200 nm平均大小之沒-生育酚微粒。以三乙 醇胺（Spectrum Quality Products公司）之驗性1 Μ溶液進行 pH之進一步調整。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 — — — — — — — — — — 1^^— · I I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 爲了避免TPGS在乳化之早期階段膠化，所有之操作在高 於4 0 °C實行並且小心覆蓋含混合物之所有容器以避免溶液 暴露於冷空氣。其次，在預乳化前低於2 %之TPGS應逐漸 溶於α -生育酚油，其餘之TPGS在製備預乳液之前首先溶· 於水性緩衝液。溶液在高於2%之TPGS濃度膠化。 然後藉由在4 °C及2 5 °C儲存多個小管而檢驗乳液之物理 安定性。經過數個月，定期地抽取小管分析粒度大小。如 Nicomp 370 型（力口州 Santa Barbara之Particle Sizing Systems 公司）測定之兩種儲存溫度之平均粒度示於圖1。粒度分布 -32- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7

五、發明說明（3〇) 爲雙型。 實例5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 派克羅塔克索於α ·生育酚乳液之化學安定性 乳化後，在Phenosphere CN管柱（5微米，150X4.6毫米） 分析實例4之配方之派克羅塔克索。移動相包括甲醇/水梯 度’其爲1.0毫升/分鐘之流速。使用設定爲23〇 nm之UV偵 檢器偵檢及將派克羅塔克索定量。偵檢到單峰（圖2)，其 具有停留時間且質譜與得自Hauser Chemical公司（科羅拉 多州Boulder)之原生參考派克羅塔克索一致。 在儲存時以HPLC檢驗實例4之乳液之化學安定性。圖3 之數據證明無關儲存溫度，派克羅塔克索在乳液中保持安 定至少3個月之期間。圖2與3之數據一起證明在4 X：儲存 至少3個月之期間時，成功地保留藥物效力及乳液安定 性。 實例ό

派克羅塔乞索乳液配方QWA 如實例4所述製備1 〇毫克/毫升派克羅塔克索.之靜脈藥物 輸送用乳液，其具有以下之組合物。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 派克羅塔克索 1.0克％ 從-生育紛 3.0克％ TPGS 1.5克 ％ 抗壞血基-6-棕搁酸酯 0.25克％ 花楸醇 4.0克％ 三乙醇胺 至pH 6·8 水 其餘至100¾升 -33- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 1.0 克 ％ 3.0 克 ％ 1.5 克％ 1.0 克％ 4.0克％ 至pH 6.8 其餘至100毫升 Olive之BASF公司之產品 五、發明說明（31 實例7

派克羅塔克索乳液配方qWB ㈣=4所迷製備1 G *克/毫升派克羅塔1索之靜脈藥物 則迗用罘一乳液，其具有以下之組合物。

派克羅塔克索 α -生育酚 TPGS 索盧妥HS-15 花楸醇 三乙醇胺 水 索盧妥HS_15爲紐澤西州M〇unt 實例8 . 1 〇亳克/毫升之派克羅塔克索乳液配方QWc 3下使用波維沙體4〇7(紐澤西州parsippany之basf公司 作馬共界面活性劑製備1 〇毫克/毫升派克羅塔克索之第i 乳液配方。 ------------裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

派克羅塔克索 α -生育酚 TPGS 波羅沙體407 花楸醇 三乙醇胺 水 1.0 克 ％ 6.0克％ 3.0 克％ 1.0 克 ％ 4.0 克 ％ 至pH 6.8 其餘至100亳升 -34- 1290052

在此實例中，1·〇克之波羅沙體407及1·〇克之派克羅塔克 索溶於6.0克之α -生育酚與1 〇倍體積之乙醇且溫和加熱。 然後眞空去除乙醇。藉由將3.0克之TPGS與4.0克之花楸醇 溶於9 0亳升注射用水之最終體積而分別地製備水性緩衝 液。油與水溶液均加溫至4 5 °C且超音波混合以製造預乳 液。在均化前使用眞空自預乳液去除過量空氣。 均化在已敘述之Avestin C5實行。通過均化閥之壓力差 爲25 kpsi且頭溫爲42。_45。(：。使用冷凍器以確定離開均化 卷之產物不超過5 0 °C之溫度。在均化時得到5 〇亳升/分鐘 之流速。在再循環模式通過約20次之後，乳液變成半透明 的。均化持續20分鐘。收集樣品且如前所述密封於小管。 得到用於靜脈輸送派克羅塔克索之細α -生育驗乳液。乳 液心平均顆粒直徑爲77 nm。經0.22微米Durapore濾器（麻 州Bedford之Millipore公司）滅菌過濾之後，乳液充填於小 管中且在4 °C儲存直到用於靜脈注射。 實例9 . 5亳克/亳升之派克羅塔克索乳液配方qWc 如實例8所述製備派克羅塔克索之額外乳液，但是加入$ 而非1 〇亳克/毫升之藥物。乳液之組合物如下·· — — — — — — —— — — — · I I (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Λό· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 派克羅塔克索 0-5 克 ％ 沈-生育酚 6.0 克 ％ TPGS 3.0 克 ％ 波羅沙體407 1.0 克％ 花楸醇 4 · 0 克 ％ 35- 1290052 A7 B7_五、發明說明（33 ) 三乙醇胺 至pH 6.8 水 其餘至100毫升 如實例8所述均化之後，得到α -生育酚與派克羅塔克索 之稍微半透明乳液，其具有52 nm之平均顆粒直徑。經0.22 微米Durapore滤器（麻州Bedford之Millipore公司）滅菌過濾 之後，乳液充填於小管中且在4 °C儲存直到用於靜脈注 射。過濾之藥物損失小於1 %。 實例1 0 . 派克羅塔克索乳液配方QWD 如下製備用於靜脈施藥之派克羅塔克索之α -生育酚乳 液： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 派克羅塔克索 0.5 克％ α -生育酉分 6 · 0 克 ％ TPGS 3.0 克 ％ 波羅沙體407 1.5克％ 單乙二醇200 0.7 克 ％ 花楸醇 4.0 克％ 三乙醇胺 至pH 6.8 水 其餘至100毫升 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 得自Roche Vitamins公司（紐澤西州Nutley)之合成α -生 育酚USP-FCC用於此形成。聚乙二醇200 (PEG-200)得自 Sigma化學公司。 均化之後，得到具有60 nm之平均顆粒直徑之稍微半透 明乳液。經0.22毫米Durapore濾、器（麻州Bedford之Millipore -36- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

1290052 五、發明說明（34) 公司）之0.22"減菌過濾之後，乳液充填於小管中且在 儲存直到用於靜脈注射。過濾之藥物損失小於1 %。 實例1 1 . 派克羅塔克索於TPGS之溶解及膠微粒溶液之製備 在每1.0克之TPGS爲約100毫克之藥物觀察到派克羅塔克 索在TPGS之良好溶解度。如下製備含派克羅塔克索之 TPGS膠微粒溶液。藉由在4 5。(：以乙醇（其然後眞空去除） 將9 0毫克之派克羅塔克索溶於1〇克之TpGs而製造痕克羅 格克索於TPGS之原料溶液。然後藉由以額外之TpGS稀釋 派克羅塔克索原料而製備連續稀釋，以得到〇.1、i、5、 10、25、50、75與90毫克/毫升之派克羅塔克索於TpGS 濃度。使用新鮮試管將100毫克之各派克羅塔克索於11>〇8 濃度溶於0.9毫升之水。所有之試管在4 5〇c藉振動及藉超 音波混合。得到派克羅塔克索在水中之最終膠微粒溶液， 其對應 0.01、0.1、0.5、1.0、2.5、5_0、7.5與9.0亳克/ 亳升之 最終派克羅塔克索濃度。 使用 Nicomp 370 型雷射 Particle Sizer(加州 Santa Barbara 之Particle Sizing Systems公司）檢驗溶液。得到1〇 nm級數 之粒度’其與TPGS及派克羅塔克索之膠微粒存在一致。 含至多2.5愛克/毫升派克羅塔克索之派克羅塔克索於 TPGS之膠微粒溶液安定至少24小時，而在5〇、75與9 〇毫 克/毫升爲不安定的，而且快速地及不可逆地形成藥物結 晶。這些觀祭暗示派克羅塔克索僅在乳液顆粒内富“ _生 育酚域存在下保持溶解。因此，需要生育酚對11>(}8之 —1----------裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -37- 1290052

取適比例以製造可安定較高派克羅塔克索濃度之乳液。 — — — — — — — — — — · 11 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) —在調整至適當之張力及阳時，膠微粒溶液可用於派克羅 塔克索對癌症病人之慢速Iv點滴，雖然預期AUC爲低的。 TPGS在^生育驗乳液中之用途爲數種所需特徵之協同 作用。首先，其本㈣派克羅塔克索有親和力，大概由組 成其分子結構之疏水性部份〜生育酚所造成。其次， 水中TPGS與α-生育酚之界面張力爲約1〇達因/公分，並 足以將自由生育酚乳化，特別是在與共界面活性劑;; 起使用時。第1，如此技藝所已知，如Tp(js之聚氧化乙 基化界面活性劑藉由戲劇性地減少顆粒被肝臟及脾臟捕捉 而對可注射顆粒良好地建立優異之性質，如，，鞘套，，。但是 乂 TPGS作爲從-生同紛乳液之界面活性劑之意料外及獨特 發現爲在單一分子中發現所有三種希望之特徵。TPGS之 額外優點爲其在混合物中與油及溶劑（如丙二醇與聚乙二 醇）形成安定自動乳化系統之事實，其建議在與生育酚 用於口服輸送時之協同作用。 在調整至適當之張力及，膠微粒溶液可用於派克羅 塔克索對癌症病人之1¥點滴施藥，雖然預期AUC爲低的。 實例1 2 . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2 0毫克/毫升之派克羅塔克索乳液配方 藉實例4所述之方法，僅增加濃度，以$ %之沈-生育紛 及5 %之TPGS得到含2 0毫克/毫升之派克羅塔克索於“ _生 育紛之粗乳液。因爲臨床上可用之非經腸胃乳液不需進一 步增加而未試驗較高濃度。 -38- 本紙張尺度適用中關家標準（CNS)A4規格（21G X 297公-------- 1290052 A7 B7_ 五、發明說明（36) 實例1 3 . 其他PEG界面活性劑於α -生育酚乳液之用途 各種其他之聚乙二醇化界面活性劑，例如，Triton X-10.0、PEG 25聚丙二醇硬脂酸酯、Brij 35 (Sigma化學公 司）、Myrj 45、52 與 100、Tween 80 (Spectrum Quality Products公司）、PEG 25甘油三油酸酉旨（維吉尼亞州 Hopewell之Goldschmidt化學公司），已用於將以-生育酉分乳 化。 然而，一些其他聚乙二醇化界面活性劑之實驗無法令人 信服地安定α -生育酚乳液中之派克羅塔克索。爲了證明 TPGS之獨特用途，如實例9所述製備三種乳液，但是在分 別之乳液中以Tween 80及Myrj 52取代TPGS作爲主要界面 活性劑。因爲Tween 80及Myrj 52具有本質上等於TPGS之 HLB値且製造合理地良好之α -生育酚乳液而選擇此兩種 界面活性劑。然而，在5毫克^毫升包括於配方中時，在預 乳液製備後非常快地注意到藥物結晶，而且Tween 80及 Myrj 52之經處理乳液特徵爲粗的，含長度至多數微米之棒 狀顆粒，其與派克羅塔克索結晶一致。不似TPGS乳液， 其可快速地通過0.22微米濾器且僅有少於1 %之藥物損失， Tween 80及Myrj 52乳液因爲此結晶藥物材料之存在而無法 過濾。 對於具有TPGS之沒-生育酚派克羅塔克索乳液之意料外 改良有許多可能之解釋。此藥物在TPGS具有良好之溶解 度，至多約100毫克/毫升。安定藥物與載劑之錯合物最可 -39· 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

1 ϋ I ϋ I^OJI ϋ n i-i ϋ ϋ ϋ I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 B7 五、發明說明（37 ) 能爲TPGS分子中具有從-生育酚酚環平面結構之派克羅塔 克索卞基側鍵親和力之強度。此外’ α -生育紛與peg尾部 之間之琥轴酸鍵聯劑爲此分子之新頑特點，由此區別其会士 構及試驗之其他PEG化界面活性劑。 實例1 4 . 波羅沙體爲主之α -生育酴乳液 從-生育酚 波羅沙體407 掠搁酸抗壞血酉旨 花楸醇 三乙醇胺 水 6 _ 0 克 ％ 2.5 克％ 0.3 克％ 6.0 克 ％ 至pH 7.4 其餘至100亳升 丨-！丨！---裝--- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 使用波羅沙體407 (BASF公司）作爲主要界面活性劑製備 以-生育酚。白色乳狀預混合物在C 5均化器（加拿大渥太 華之Avestin公司）在45°C之進料溫度以25 Kpsi均化1〇分 鐘，而且產物出口之急冷迴圈設爲丨5。(：。生成α _生育紛 微顆粒之細、可滅菌過濾乳液。然而，在以派克羅塔克索 製造此配方時，在冷凍器中儲存過夜後注意到派克羅塔克 索之沉澱，其再度劣於TPGS作爲主要界面活性劑之優異 用途。實例1 5 . 束乾乳液配方 對實例1 4之乳液在水中加入Mahrin Μ100(愛荷華 Muscatine之Grain Processing公司）作爲2 X原料。等份量 州 -40- 1290052 A7

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後在儲存冰箱中冷;東且在眞空下純。在以水重組時，回 復成細乳液。 、 凍乾配方在無限儲存壽命之凍乾製品較佳時具有用途。 亦可製備含其他醣甞（如甘露醇、白蛋白或得自密蘇里州 St· Louis之Sigma化學公司之p〇lyPep)之可凍乾配方。實例1 6 . 派克羅塔克索自“-生育酚乳液之試管中釋放 薬物輸送載體之所需特徵之一爲提供所加入藥物之持續 釋放，其爲經常有關改良藥學熱力學及效率之特徵。特別 地，派克羅塔克索之長期循環乳液可改良藥物對身體中癌 症位置之輸送。已令人驚奇地發現，在比較現今派克羅塔 克索之唯一 FDA許可配方[紐澤西州Princet〇niBrist〇1 Myers Squibb (BMS)公司之Taxol⑧]時，本發明之乳液不提 供派克羅塔克索之持續釋放。製備具有6亳克/毫升（qwa) 及7毫克/亳升（QWB)濃度之派克羅塔克索之乳液。爲了比 較，Taxol含6毫克/毫升之派克羅塔克索溶於乙醇： cremophore EL 1··1 (Wv)。使用對派克羅塔克索爲可自由地 滲透之滲析薄膜（1 〇仟道耳頓之M W遮斷）監測派克羅塔克 索自不同配方至37 °C之磷酸鹽緩衝鹽水（pbs)溶液中之試 管中釋放。以HPLC實行藥物在滲析前後樣品之定量。產 生有關隨時間釋放之派克羅塔克索之釋放百分比及濃度之 藥物放外形。如由圖4之數據可見到，經2 4小時自乳液涂 析低於5 %之派克羅塔克索，而在滲析袋外部自上市之 BMS配方回收約12%。其表示來自乳液之藥物釋放相對商 -41- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) i I I I I I I ^ · I I I !

P 1290052 A7 B7 五、發明說明（39 ) 業可得溶液甚爲緩慢。 實例1 7 . 含派克羅塔克索之α 生育酚乳液之生物相容性 實行急性單一劑量毒性研究。購買各20-25克之老鼠且使 其在許丐之動物設備中適應。老鼠組（η=3)接受含如實例6 所述而製備，30至90毫克/公斤之派克羅塔克索於從-生 育紛乳液之配方劑量。所有之注射藉尾部靜脈填塞物而靜 脈施藥。 雖然所有之注射強行以填塞物I V施藥，在任何劑量並未 觀察到死亡或立即之毒性，甚至在9〇毫克/公斤。體重之 結果示於表2。在注射後經過1 〇天之期間，在最高之組之 重量損失爲17%，但是所有之組，甚至是9 〇毫克/公斤， 恢復或增加體重。 亦完成載體毒性研究。接受無藥物乳液之動物快速地生 長，並且比接受鹽水或未注射之動物增加稍多之體重。其 乃歸因於配方之維生素及熱量程度。 已觀察到大於9 0毫克/公斤之派克羅塔克索最大可容忍 劑量（MTD)(表2 )’而未注意到負面反應。其超過所報告 最佳文獻値之兩倍，其中在遠低之劑量觀察到死亡。吾人 著手重複之發現，FDA許可之配方塔克索⑧在1〇毫克/公斤 之填塞物靜脈劑量造成老鼠死亡。在老藏中，塔克索⑧在 吾人所試驗之所有之稀釋及劑量體制同樣地致命。相對 地，實例6之組合物在老鼠中極可容忍，甚至比Tax〇tere (Rhone-Poulenc R0rer公司類似地商業上市之較無毒性派克 -42- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 · 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 B7 五、發明說明（40 ) 羅塔克索）改良。 對於高藥物容忍度之一種可能之解釋爲，乳液對藥物之 行爲如慢速釋放倉庫，如實例1 6之試管中釋放數據所建 議。 表2 以派克羅塔克索乳液治療之老鼠之平均體重變化 治療 (劑量，mg/kg) 動物數量 BW變化(gm) 第2天 第7天 鹽水 4 1.0 3.4 載體 4 1.2 3.5 派克羅塔克索乳液 (QWA) (36.3) 2 -1.0 2.2 派克羅塔克索乳液 (QWA) (54.4) 4 -1.8 1.7 派克羅塔克索乳液 (QWA) (72.6) 4 -1.5 1.6 派克羅塔克索乳液 (QWA) (90.7) 1 -1.6 實例1 8 · 派克羅塔克索乳液之效率評估 亦評估實例6之派克羅塔克索乳液在裸鼠對抗分期B 16黑 素瘤腫瘤之效率且數據示於表3。再度使用上市產品塔克 -43- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） iu---.------裝·II (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂·· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 五、發明說明（41 ) 索⑧作爲參考配方。對腫瘤細胞皮下施藥且治療藉由在腫 瘤施藥4日後以所示劑量行程之尾部靜脈注射開始。效率 以全部壽命之增加百分&(%ILS)表示。 由表3之數據得到以下之結論：a)藉由以1 〇亳克/公斤 Q2Dx4之塔克索⑧施藥得到約10%之全部壽命增加，b)藉由 較高MTD可能之劑量程度3〇、40或50亳克/公斤q2Dx4之 派克羅塔克索之泛-生育酚乳液施藥將❻/〇ILS値改良至3〇_ 50%，〇在乳液以30、50與70毫克/公斤Q4Dx3施藥時觀 察到完美之劑量反應，在7 0毫克/公斤觀察到約8〇%之 %ILS ’及d)即使僅在第4日以9 0毫克/公斤之劑量施藥一 次，得到約36%ILS。這些數據清楚地描述本發明乳液實質 上改良派克羅塔克索效率之可能性。 實例1 9 . 派克羅塔克索乳液之效率評估 比較實例6、7與8之乳液（各爲QWA、QWB與QWC)在老 鼠對抗B16黑素瘤之效率；再度使用塔克索®作爲參考配 方。使用與實例1 8本質上相同之方法。得自此研究之數據 歸納於表3。效率表示爲：a)腫瘤生長抑制％ (%T/C，其 中T與C各表示經治療及對照動物）；^)腫瘤生長延遲値 (T-C)，及C)細胞死亡對數，其定義爲經過3·32χ腫瘤倍增 時間之T-C値比例。此特定腫瘤模型之後者參數計算爲 1.75日。如由表4之結果所見到，所有之效率測量··腫瘤生 長抑制、腫瘤生長延遲及細胞死亡對數均證明沈_生育酚 乳液作爲藥物輸送載體超越塔克索⑧之優異效率，特別是 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -44- 1290052 A7 B7 五、發明說明（42 ) (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 在乳液以每日7 0毫克/公斤之劑量施藥時。如實例1 6所解 釋，此增加效率同樣地爲改良之藥物生物相容性及/或持 續釋放之結果。 表3 經QWA與Taxol®治療之B16腫瘤老鼠存活 治療組別及行程 平均存活時間，天數 (平均土 S.E.Ma) %ILSb(相對載體） (平均土 S.E.M) 載體對照(第4，8，12天） 13·2±0·9 — 鹽水對照(第4，8，12天） 15·8±1_2 19.7±8·6 Taxol⑧(10mg/kg)(第4，6，8，10天） 16·4±0·7 24.2 ±5.4 QWA(30mg/kg)(第4，6，8天） 19.2土1_4 45·4±10.3 QWA (40 mg/kg)(第4，6，8天） 21·3±1·4 61·4±10·3 QWA(50mg/kg)(第4，6，8天） 18·8±0·7 42_4±5·7 QWA(30mg/kg)(第4，8，12天） 15·3±0·8 15.9±6·4 QWA(50mg/kg)(第4，8，12天） 20.7 土 1.3 56_8±9.5 QWA(70mg/kg)(第4，8，12天） 24.2 ±0.9 83.3 ±6.4 QWA (90 mg/kg)(僅第 4 天） 18·0±0.6 36.4±4.4 aSEM=標準平均誤差 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 b%ILS=全部壽命增加％=[(T-C)/C]X100,其中： T =經治療之平均存活 C =對照之平均存活 依照NCI標準，大於50%之ILS値表示顯著之抗腫瘤活性。 -45- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 五、發明說明（43 ) 表4 3種派克羅塔克索乳液與Taxol對抗早期B16黑素瘤之比較 試驗物品 劑i mg/kg/ 天數 劑量行程 (天數） 總劑量 (mg/kg) 第15日之 腫瘤重量 中位數 (mg) 第18日之 腫瘤重量 中位數 (mg) % T/C 第15天 T-C (天數） 細胞死亡 總數對數 對照 0 4,6,8,10 0 836 2139 塔克索⑧ 20 4,6,8,10 80 383 1217 46 2 0.34 QWA 20 4,6,8,10 80 381 1197 46 2 0.34 QWA 40 4,6,8,10 160 104 306 12 7 1.2 QWA 70 4,8,12,16,20 350 15 11 ~2 QWB 20 4,6,8,10 80 197 653 24 5 0.86 QWB 30 4,6,8,10 120 139 449 17 5 0.86 QWB 40 Toxic QWC 20 4,6,8,10 80 319 848 34 3 0.52 QWC 40 4,6,8,10 160 53 194 6 8 1.4 QWC 70 4,8,12,16,20 350 33 66 4 >15 >2.6 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 腫瘤倍增時間計算爲1.75曰。 %T/C=腫瘤生長抑制（第1 5日）=(經療之腫瘤重量中位數/ 對照之腫瘤重量中位數）X 100 T-C=腫瘤生長延遲値=治療組（Τ)與對照組（C )腫瘤達到預 定大小（通常爲750-1000毫克）之時間中位數 細胞死亡對數=(T-C値）/ (3 ·32 X腫瘤倍增時間） -46- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） A7

1290052 五、發明說明（44) 實例2 0 . α -生育紛/Tagat TO混合物之自動乳化 戊生育酉分2.0克及Tagat TO(維吉尼亞州Goldschmidt化學 公司）800毫克一起溶解。將約80毫克之油狀混合物轉移至 試管中然後加入水。以手溫和攪摔立即發生富乳狀乳液， 其與提議作爲藥物輸送系統之π自動乳化系統，，一致，其中 界面活性劑-油混合物在暴露於水性介質時自發地形成乳 液。 實例2 1 . 含派克羅塔克索之自動乳化配方 藉實例1所述之方法在從-生育酚中製備5 〇毫克/亳升之 派克羅塔克索。加入Tagat TO 20% (w/w)。生成混合物爲 透明的，黏性的且顏色爲琥珀色。將1 〇〇毫克量之油狀混 合物轉移至試管。搖動混合而加入1毫升之水時，生成細 乳液。 實例2 2 . 派克羅塔克索之自動乳化配方 藉實例1所述之方法在沈·生育酚中製備5 0毫克/毫升之 痕克羅塔克索。在眞空去除乙醇之後，甚至重量比加入 20% TPGS及10%聚氧化乙二醇200 (Sigma化學公司）。然後 精由在37 C將20¾升之去離子水加入1〇〇毫克之油狀混合 物而實行此系統之自動乳化力之證明。在溫和混合時形成 白色稀乳液，其包括以Malvern Mastersizer(麻州Worcester 之Malvern Instruments公司）證明具有2微米平均大小之細 -47- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 B7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 五、發明說明（45) 乳液顆粒，而且其累積分布90%小於丨〇微米。 實例2 3 . 從-生育酚中之伊多波糖化物乳液配方 伊多波糖化物4亳克（Sigma化學公司）溶於以下之界面活 性劑-油混合物： 伊多波糖化物 4毫克 從-生育酚 300毫克 TPGS 50毫克 波羅沙體407 50毫克 使用乙醇及溫和攪拌以形成藥物在油中之透明琥珀色溶 液。乙醇然後在眞空下去除。 藉由在4 5 °C加入4·5毫升之含4%花楸醇及1〇〇毫克TPGS 之水且超音波振盪而形成預乳液。藉由在Emulsiflex 1〇〇〇 (加拿大渥太華Avestin公司）中處理而進一步降低粒度。 Emulsiflex 1〇〇〇主體裝有一對5毫升針筒且在使用前將全 邵裝置加熱至4 5 C。然後手動使5亳升乳液通過約丨〇次。 生成伊多波糖化物在α _生育酚載體中之自由流動實際乳 液。 注意到藉由採用以上實例之方法，伊多波糖化物在沈· 生月紛之各解形式亦可作爲口服藥劑形式。 實例2 4 . 異丁苯丙酸或Griseofulvin在沈-生育酚中之溶解 異丁苯丙酸爲疼痛特效藥，而且如果有藥物刺激胃部之 危險，在需要時可藉注射施藥。以下之異丁苯丙酸於 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 -48- 1290052 A7 B7 五、發明說明（46 ) 生育紛中之溶液可乳化以用於非經腸胃施藥。 ‘和揽摔12¾克之異丁苯丙酸（sigma化學公司）結晶無 溶劑溶於120毫克之α -生育g分中。生成之異丁苯丙酸於維 生素Ε之10%溶液可藉實例4、6、7、8或2 2所述之方法乳 化。 1 2毫克之抗興鹵化合物grise〇fuivin首先溶於3¾升之無 水乙醇中；然後加入18〇亳克之沈-生育酚，而且在眞空下 和加熱而去除乙醇。生成之grise〇fuivin於沒-生育紛中 之溶液爲透明的且可藉實例4、6、7、8或2 2所述之方法 乳化。 實例2 5 . 維生素Ε琥珀酸酯乳液配方 維生素Ε琥拍酸酯已被建議作爲治療淋巴瘤與血癌及癌 症之化學預防之治療劑。以下爲維生素Ε琥珀酸酯在沈-生 育紛中乳化之組合物及方法。蔗糖酯S1170爲曰本東京之 二菱化學食w公司之產品。由俄亥俄州Aurora之ICN Biomedicals公司得到泛白色粉末之如自由酸之維生素E琥 ί白酸酯。以類似之方法有或無治療劑製備加入如普勒拉尼 克之其他界面活性劑，及TPGS與α -生育酚與α -生育酚琥 珀酸酯之乳液。 α -生育酚8毫克及維生素Ε琥珀酸酯〇·8毫克在圓底燒瓶 中一起溶於乙醇。去除乙醇後，加入丨00毫升之水性緩衝 液。鹼性緩衝液包括2 %之甘油、ί 〇 mM之三乙醇胺、及 0 · 5克％之蔑糖醋S117 0。混合2分鐘後，將預乳液轉移至 -49- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 裝

ϋ I — ϋ^eJ IV ϋ ϋ 1 ϋ ϋ I I 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 ______________ B7 _____ 五、發明說明（47 )

Avestin C-5型均化器且均化在5 8 t之處理進料溫度持續約 1 2分鐘。交互作用頭之壓力差爲2 5至26 kpsi。在均化 時，小心地監視pH，並且如所需調整至pH 7 〇。在處理時 小心地排除氧。生成細乳液。 實例2 6 . 酯中之α -生育酚含量 由販賣者提供或以HPLC測定從-生育驗在商業可得酯中 之含量··生育酚-乙酸酯、-琥珀酸酯、菸撿酸酯、-磷酸 酿及TPGS。這些溶液中自由α -生育酚濃度低於i 〇〇/〇，通 常低於0.5%。 實例2 7 . 白藜蘆醇乳液配方 白藜蘆醇爲一種癌症化學預防藥，其首先如葡萄皮萃取 物而發現。其已提議作爲飲食補給。 •白藜產醇得自Sigma化學公司。雖然其在乙醇中爲低溶 性，在加入10毫克之白藜蘆醇、1〇〇毫克之從-生育酚、 100¾克之TPGS與乙醇時，快速地形成透明容液。在去除 乙醇時，殘留透明琥珀色油。 白藜蘆醇之油狀溶液可藉以上實例之各種方法配製成用 於口服輸送之自動乳化系統。 實例2 8 · 胞壁基二肽配方 胞壁基二肽衍生自分枝菌且爲胞壁基肽、分枝菌酸與脂 聚醣甞類之有效之代表性免疫刺激劑。例如，其可藉由刺 -50- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 · 1290052 A7

五、發明說明（48 ) 激目標之免疫系統及去除癌症而用於癌症治療，特別是關 於抗癌症疫苗。近來’已提議以muroctasir^ —種合成類似 物）降低細菌壁萃取物之非特定副作用。 N -乙醯基胞壁基-6-0-硬脂醯基丙胺基異越胺購自 Sigma化學公司且1〇毫克溶於1〇〇毫克之從-生育酚與8〇亳 克之TPGS。使用乙醇作爲共溶劑以幫助二肽之溶解，但 是其藉眞空下蒸發而去除，留下從-生育酚與界面活性劑 之透明溶液。 此藥物之油溶液可藉以上實例之各種方法乳化以用於非 經腸胃施藥。 實例2 9 . 含醇乳液 在嚐試改變PCT WO 95/1 1039專利之敎示作爲派克羅塔 克索之口服施藥時，製造以下配方。 派克羅塔克索 β -生育紛 TPGS 乙醇 0.125 克 0.325 克 0.425 克 0.125 克 (請先閱讀背面之注杳2事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 如前，派克羅塔克索溶於α _生育酚及TPGS與乙醇（其然 後在眞空下去除）中。依照乾燥重量，殘餘乙醇低於3毫克 (0·3°/〇 w/w)。然後將新鮮之無水乙醇0J25克加回配方中。 混合後，藉以下之實驗模擬口服施藥之配方（如在膠囊中） 之適合度。在37 °C將100毫克之自由流動油等份量加入20 毫升之水中且以搖動混合器溫和地混合。生成細乳液。但 -51- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 χ 297公釐） 1290052 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 __ ______Β7 ____ 五、發明說明（49 ) 是在2 0分鐘後，顯微鏡顯示有大量玫瑰形結晶生長，其爲 派克羅塔克索沉澱之特徵。結論爲此配方不適合派克羅塔 克索之口服施藥，因爲大量藥物在進入十二指腸時爲結晶 形式’其在此因其物理形式而不被吸收。由此配方推測過 量乙醇組合高比例之TPGS對沈-生育酚造成觀察到藥物結 晶。 實例3 0 . 含醇α -生育酚乳液 在嗜試改變PCT WO 95/1 1039專利之敎示作爲派克羅塔 克索之皮下施藥時，嫂造以下配方。 派克羅塔克索 0.050克 “-生育酚 0.100克 卵磷脂 0.200克 乙醇 0.100克 丁醇 0.500克 如削’派克羅塔克索溶於α -生育酚及TpGS與乙醇（其然 後在具2下去除）中。依照乾燥重量，殘餘乙醇低於2毫克 (0.5% w/w)。然後將新鮮之無水乙醇〇 1〇〇克及正丁醇〇 5〇〇 克加口配方中。生成透明油。藉由鹽水捧和物之標準學實 務試驗注射濃縮物在施藥時之生物相容性。將約2〇〇毫克 之油置入20亳升之鹽水中且混合。立即發生大片不溶材料 且最大量之材料濃密地沉積在試管壁上。混合物顯然不適 合任何路徑之非經腸胃施藥，而且推測完全無關配方中所 含藥物之身份。藉試湊法得知卵磷脂因其低HLB(約作 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 裝 -52- 1290052 A7 """"""' ' ----------------- 五、發明說明（SO ) 爲〇-生育酚之界面活性劑爲不良之選擇。其他在此所述 適合非經％ 3施藥之細乳液之成功實例均以高HLB界面活 性劑製造。這些界面活性劑包括TPGS (HLB約丨7 )、波羅 沙體407 (HLB約2 2)及Tagat TO (HLB約14.0)。通常發現從 •生育盼乳化以HLB> 10，較佳爲大於1 2之主要界面活性劑 最佳地實行。卵嶙脂並非此類，雖然其可作爲共界面活性 劑。比較下’典型三甘油酯之o/w乳液爲以HLb爲7至1 2之 界面活性劑製造，證明沈·生育紛因泛-生育紛之極性及極 爲疏水性而爲獨特種類，此因素亦有利於親脂性及微親脂 I*生藥物在沈-生育紛中之溶解度。參見Emulsions: Theory 龃止Practice，第 2 版，第 248 頁（1985)。 實例3 1 如下製備可用於本發明之各種配方（表5 ): (請先閱讀背面之注音2事項再填寫本頁) 裝 .

經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 本、，氏張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 五、發明說明（51 ) 表5 可注射派克羅塔克索 乳液之組合物 A (分離界面活性劑） B (油中全部界面活性劑） 重量 (g) 重量 (%) 重量 (g) 重量 (%) 油相 派克羅塔克索 0.50 0.51 0.53 0.52 PEG 400 6.02 6.04 6.38 6.30 TPGS 3.78 3.80 5.32 5.25 普勒拉尼克 F127 1.07 1.05 維生素E 8.04 8.07 8.51 8.40 水相 TPGS 1.25 1.26 普勒拉尼克 F127 1.01 1.01 水 79.00 79.31 79.50 78.48 總共 99.60 100.00 101.30 100.00 配方A -分離界面活性劑 (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1 ) 1.25克之TPGS及1.01克之普勒拉尼克F127藉加熱及攪· 拌溶於79.00克之注射用水。 2 ) 0.533克之派克羅塔克索在7 5 °C藉混合（低切力）溶於 6.354 克之 PEG 400。 3)在45°C加入及混合（低切力）3.992克之TPGS及8.490克 之維生素E直到TPGS熔化且混合物爲目視均質的。此 -54- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 ________B7___ 五、發明說明（52 ) 油相表示稍微過量而解釋步驟4之不完全轉移。 4 )將水相（步驟1 )加熱至4 5 °c且在中切力（實驗室混合馬 達）混合，同時經1分鐘倒入4 5 Ό油相（步驟2 + 3 )。混 合持續超過2分鐘以形成粗乳液。 5 )乳液在Avestin C5中在22 Kpsi最大衝程壓力以連續循 環模式均化1小時。 6)針對步驟4時之油相不完全轉移修正表中所示之實際 量及百分比。 此種利用分離界面活性劑之方法可用於特定界面活性劑 在油相中之溶解度有限之情形。 配方B -油相中之全部界面活性劑 1 ) 1.066克之派克羅塔克索在7 5 °C藉混合（低切力）溶於 12.887克之PEG 400。 2) 在50-60 °C加入及混合（低切力）10.739克之TPGS及 2· 157克之普勒拉尼克F127直到兩種界面活性劑均完全 熔化/溶解。 3) 在45·50°C加入及混合（低切力）17·176克之維生素E直 到混合物爲目視均質的。 4) 經1分鐘將21.8克之步驟1-4製造之油相加入79.5克之水 中同時在中切力（實驗室混合馬達）混合。混合持續總 共3分鐘以形成粗乳液。 5 )乳液在Avestin C5中在22 Kpsi最大衝程壓力以連續循 環模式均化3 0分鐘。 由處理觀點，使所有之界面活性劑均在油相中爲有利 -55- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公爱） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁} 裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 —__Β7 _ _ 五、發明說明（53 ) 的。預乳液之分散及後續均化均有利的，而且可避免高溶 點界面活性劑（如TPGS)之可能使膠化。 實例3 2 . 伊多波糖化物乳液 如下製備加入2毫克/毫升之伊多波糖化物之維生素e乳 液（6.0%之維生素 E、3.5%之TPGS、6.0%之PEG 400、8%之 普勒拉尼克F-127): 1 ) 0.1044克之伊多波糖化物溶於3.1435克之PEG 400(在 65°〇5分鐘）。 2)加入及混合2.0447克之TPGS及3.1563克之維生素E直到 完全溶解。 3 )油相在44 °C混合42.4克之注射用水，其中加入〇·5克之 普勒拉尼克F-127(水相在與油相混合前藉沸騰脱氣）且 藉簡單超音波振盪形成預乳液。 4 ) 在Avestin C5以22_24 Kpsi均化時形成細乳液。 實例3 3 . 伊多波糖化物乳液 如下製備加入2亳克/毫升之伊多波糖化物之含PEG 300 之沈-生育酚乳液： 伊多波糖化物首先溶於PEG-300(在72°C 1 0分鐘）。然後 將TPGS與維生素E加入藥物溶液中。水相（含波羅沙體407 之WFI)在使用前藉沸騰脱氣。藉由在4 5 °C將5克之油相加 入4 5克之水中而製備預乳液。在3分鐘混合後，預乳液以 25 Kpsi均化3 0分鐘以製造細乳液。乳液之最終組合物示 -56- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格⑽x 297公爱） (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 裝 訂· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 A7 _B7 五、發明說明（54) 於以下： 成份 組合物（％，w/w) 伊多波糖化物 0.2 維生素E 3.0 TPGS 1.5 PEG-300 3.0 波羅沙體407 1.0 WFI(注射用水） 92.3 實例3 4 . 另外之注射用派克羅塔克索乳液示於表6。 -57- (請先閱讀背面之注音2事項再填寫本頁) 裝 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）

1290052 五、發明說明（55 表6 ·可注射派克羅塔克索乳液之組合物 可注射派克羅塔克索 乳液之組合物 C (分離界面活性 劑） D (油中所有界面活 性劑） E (油中所有界面活 从盎，1、 重量 (2) 重量 (%) 重量 重量 (%) —--- 重量 (g) 重量 ί〇Δ\ 油相 派克羅塔克索 2.0 0.4 0.55 1.1 0.5 \/〇) 〇 ς PEG 400 32.0 6.4 3.36 6.7 10.0 1〇 〇 TPGS 18.85 3.77 2.60 5.2 4.3 4.3 普勒拉尼克 F127 0.52 1.0 5.1 1.1 維生tE 40.5 8.1 4.19 8.4 7.2 7.2 水相 TPGS 6.4 1.28 普勒拉尼克 F127 5.0 1.0 水 395.25 79.05 41.0 82.0 79.5 79.5 磚共 500.0 100.0 52.2 104.4 102.6 102.6 ----------—裝--- (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) . 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 實例3 5 . 用於本發明之各種自動乳化乳液之組合物示於表7。 -58- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 五、發明說明（56) 表7 .自動乳化乳液 自動乳化乳液 SEFP-1 SEFP-2 之組合物 重量 重量 重量 重量 (g) (%) (g) (%) 派克羅塔克索 0.255 5.11 0.258 5.14 維生素E 1.989 19.88 2.242 44.70 TPGS 0.992 19.99 0.765 15.25 PEG 400 1.502 30.11 0.999 19.92 普勒拉尼克F127 0.250 5.01 索盧妥HS15 0.752 14.99 總共 4.988 100.00 5.016 100.00 如下合成表7中所述之乳液。 SEFP-1 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製

將派克羅塔克索與PEG 400—起加熱至60-67°C且攪拌直 到藥物溶解於PEG中（15分鐘）。然後加入TPGS與普勒拉尼 克F127且在70°C攪捽10·15分鐘以溶解界面活性劑。最 後，加入維生素Ε(從-生育酚）且在55 °C混合5-10分鐘直到. 混合物爲透明及均質的。在以水相稀釋時，得到細乳液。 SEFP-2 派克羅塔克索與PEG 400首先在65-75°C加熱4 5分鐘，加 入TPGS且在持續攪拌3 0分鐘以完全溶解三種成份且製造 透明溶液。最後，加入索盧妥HS-15及維生素E且在5 5 °C -59- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 _ B7 _ 五、發明說明（57 ) 混合約5分鐘以得到透明及均質之液體。在以水相稀釋 時，得到細乳液。 實例3 6 . 另外之派克羅塔克索自動乳化乳液之組合物示於表8。 表8 .自動乳化乳液 (請先閱讀背面之注音3事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 藉由首先在60-70°C以低切力混合將派克羅塔克索溶解於 索盧妥HS-15+PEG 400 (<30 分鐘）而製備 SEFP-3 與 SEFP-4，然後加入TPGS及江生育酚且簡單地混合以形成透明. 溶液。在室溫可觀察到TPGS固化但是在3 7 °C保持爲透明 液體。 如下測定SEFP-3與SEFP-4在稀釋時之乳液粒度：0.2毫升 之SEFP-3或SEFP-4在3 7 °C在100毫升之磷酸鹽緩衝鹽水中 使用攪拌棒藉低切力混合5分鐘而稀釋。快速地形成乳 -60- 自動乳化乳液 SEFP-3 SEFP-4 之組合物 重量 重量 重量 重量 (g) (%) (8) (%) 派克羅塔克索 0.10 2 0.05 1 生育紛 1.40 28 0.50 10 TPGS 1.00 20 0.95 19 PEG400 1.00 20 1.00 20 索盧妥HS_15 1.50 30 2.50 50 總共 5.00 100 5.00 100 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 五、發明說明（58 ) 液，以 Malvern Mastersizer測量其粒度。sefp_3*sefp 4 之體積平均直徑各發現爲2.49與1.55/^ m。 對於有效之自動乳化系統，生成乳液之平均滴徑應小於 10 β m且較佳爲小於5 // m。 實例37 加入聚乙二醇化磷脂之派克羅塔克索乳液 製備加入DMPE-PEG2〇00(二肉豆蔻醯基嶙脂醯乙醇胺.聚 乙二醇2000)之乳液（表9)。在存在時，派克羅塔克索首先 在7 5 °C藉低切力混合溶於PEG 400。加入其他成份且簡單 地混合（在溶化TPGS後，而且在DMPEG-2之情形爲p 407) 以形成透明溶液。在乳化前施加眞空以將油相脱氣，而且 使油相爲4 5 °C。將水沸騰1 5分鐘以脱氣，然後亦爲4 5 °C。二相在4 5 °C以低至中切力混合以形成預液。對於配方 DMPE_PEG-P2、DMPE-PEG-P3 與DMPE-PEG-P4，其藉由僅 將溫水加入油相且以手及超音波攪摔而完成。藉由將油相 倒入水中同時以實驗室混合馬達攪捽而製備DMPE-PEG2之 預乳液。預乳液立即在Avestin C5均化器中以20-22K psi最 大衝程壓力均化，以製造具有200 nm之平均滴徑及99%累 積分布之細乳液。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -61- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7

五、發明說明（59 ) 表9 ·加入聚乙二醇化磷脂之派克羅塔克索乳液 DMPE PEG-1 DMPE-PEG-2 (g)」 (%) (g) (%) (g) (σ) (%) 派克羅塔克索 0.53 U 0.96 1.0 Vo/ \/uJ \BJ PEG 400 3.07 6.1 5.77 5.8 1.8 6.0 1.84 6.1 TPGS 2.59 5.1 4.62 4.7 1.51 5.0 1.22 4.1 DMPE-PEG2000 0.53 1.1 0.20 0.2 0.30 1.0 0.62 2.1 波羅沙體407 0.96 1.0 維生素E 4.11 8.2 7.71 7.8 2.42 8.1 2.14 7.2 水 39.50 78.5 79.00 79.6 24.0 79.9 24.1 80.5 總共 50.33 100.0 99.23 100.0 30.03 100.0 29.92 100 實例3 7 效率數據 -----------裝--- (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 如實例1 8與1 9所述，評估配方D (表6 )在它鼠對B16黑素 瘤之效率，而且數據歸納於圖5。比較性效率數據示於表 10 〇 -62- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 _B7 五、發明說明（6〇) 表1 0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) B16黑素瘤腫瘤模型之比較性效率：塔克索®相對SONUS派 克羅塔克索乳液”卩…8184" 試4 物件 劑量 (mg/kg /天數） 行程 (天數） 總劑量 (mg/kg) 天數之腫瘤重量中位數 % 死亡率 (第17 天） % T/C 第13天 T-C (曰數） 細胞 死亡 對數 1 4 7 10 13 17 鹽水 80當量 q4dx5 — 8 245 1271 1800 2916 14114 60 — —— -… 0 塔克索® 20 qdx5 100 6 123 331 2 2192 4901 20 75 5 0.9 9 配方D 60 q3dx5 300 1 106 221 234 400 400 60 14 13 2.3 0 8 %T/C=腫瘤生長抑制（經療之腫瘤重量中位數/對照之腫瘤 重量中位數）X 100 T-C=腫瘤生長延遲値（治療組（T )與對照組腫瘤（C )達到預 定大小（>750毫克）之時間中位數 細胞死亡對數= (T-C値）/(3.32 X腫瘤倍增時間）腫瘤倍增時 間計算爲1.75曰。 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 與表4之腫瘤生表抑制、腫瘤生長延遲及細胞死亡對數 數據一致之效率評定表示使用配方D比塔克索®大爲改 良。 實例3 8 · 物理安定性數據 以儲存時之可能粒度變化評定配方D之物理安定性且數 -63- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 五、發明說明（61 ) 據示於表1 1。 表1 1 配方D之物理安定性 儲存天數 (2-8°C) 體積〜重量粒度(nm) 平均滴徑 粒之99%分布 2 71.3 154.6 69.3 151.; 67.7 151.6 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 15 69.8 150.; 28 66.3 152.3 30 66.9 150.3 訂， 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 使用川(：〇11^ 370次微米粒度分析儀測量粒度。如由表11 之數據所見到，在顆粒之平均粒度或99%累積分布未觀察 到重大之變化。後者參數經常作爲顆粒黏聚及生長之指 標。此外，在儲存時未觀察到沉澱或其他總變化。長期安 定性正進行中。 實例3 9 化學安定性 使用實例5之步驟以HPLC監測配方D之化學安定性（表 6)，而且數據示於表12。HPLC用以將派克羅塔克索及降 解劑之濃度定量。在表1 2中，藥物濃度等於藥物效力。 -64- 1290052 A7 __B7五、發明說明（62 ) 表1 2 .配方D之化學安定性 儲存天數 藥物濃度 (2-o°C) (mg/ml) 0 9.53 10 9.54 19 9.39 32 9.54 由此數據顯然可知，配方D之藥物效力在這些儲存條件 下保持不變。 此外，在儲存時間時未觀察到藥物降解。 實例4 0 . 含PEG 300或NMP之乳液 含PEG 300或NMP (N-甲基-2-吡咯啶酮）且加入1 0毫升/ 毫克之派克羅塔克索之α -生育酚乳液示於表1 3。 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -65- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 五、發明說明（63 表1 3 成份 PEG 300 NMP 重量 重量 重量 重量 ------ _ (g) % (g) % 派克羅塔克索 0.05 1.0 0.05 1.0 PEG 300 0.32 6.2 ΝΜΡ (Ν-曱基-2-吡咯啶酮） 0.18 3.6 TPGS 0.25 4.9 0.25 5.0 波羅沙體 0.05 0.9 0.05 1.0 407 維生素Ε 0.40 7.9 0.43 8.7 水 4.00 78.9 4.00 80.7 總共 5.07 100.0 4.96 100.0 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工湞費合作社印製 (PEG 300或NMP)中。對PEG 300使用加熱至6 〇χ以加速线 解，而對ΝΜΡ配方，在室溫數分鐘足以溶解藥物。然後力 入剩餘之成份（除了水），而且混合物以低切力混合加熱S 60-65 C以熔化固態界面活性劑且製造均質透明溶液。右 溶液爲45 °C，然後加入45。(：之水。生成混合物在中切> 下處理以製造濃、白色粗乳液，其外觀非常類似配方D 4 預乳液（表6)。這些乳液可進一步在高壓均化以製造細孕 液0 -66- 紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 五、發明說明（64 ) 實例4 1 配方D (QW 8 1 84)之大规模製備 使用類似先前實例所述之步驟，以9 、 z x 2公升之小批 模地製造具有以下組合物（陰影區域类_ 大規 丄人 ^ 表不組合物之油及走 相含量）之配方D (表6 ): 久水 表1 4

(請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 訂· · 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 對於預乳液之製備，416.8克之小批1油相及413.2克之小 批2油相混合1580克之注射用水（在46 °C 5分鐘）。在均化 時，製造具有約70 nm之平均滴徑之細乳液，即，非常類 似小規模之配方D(表1 1 )。此放大配方進一步藉由經〇.2微 米濾器而滅菌。 實例4 2 無藥物乳液之溶血活性評估 如實例4 1所述製備具有以下組合物之大規模（2·5公升） 之無派克羅塔克索配方D : -67- ‘紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（21〇 x 297公釐） 1290052 A7 B7 ?; 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 、發明說明（65 ) 表1 5 成份 油相中之量（g) 重量％ PEG400 154.5 5/97 α -生育紛 206 7.96 TPGS 128.8 4.97 波羅沙體407 25.8 1.00 油相總量 515.1 19.89 對於預乳液之製備，496.7克之油相混合2〇00克之注射用 水（在4 6 °C 5分鐘）。在均化及濾器減菌時，使用以下之步 驟評估此配方與人血之總溶血反應： 藉Vacutainer棒以肝素收集自願者之健康血液。血漿起 初爲草莓色且溶血爲陰性。數滴全血及無藥物乳液在覆片 下接觸在一起且以顯微鏡觀察數分鐘。在接觸時，紅血細 胞（RBCs)保持爲正常紅細胞。未注意到乳液顆粒之顯著凝 結。未注意到血小板或WBC形態之總變化。然後全血及載 體在試管中以1:1及5:1 v/v混合。至於對照，全血混合注射 射用鹽水1 : 1。所有之混合物在3 7 °C培養且在1 〇及3 〇分 叙檢查。在所有三個管中之上清液爲草莓色及透明的。由 此研究得到結論爲乳液載體與血液之間並無立即之總溶血 反應。相對於界面活性劑謗發RBc溶血之文獻中之許多報 告’其建議紅細胞膜之形態未被存在於乳液中之界面活性 劑擾亂。 實例4 3 ____ -68- 本紙張尺度適財^^準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 裝 .. 1290052 A7 B7 五、發明說明（66 ) 物理安定性數據 ------------装--- (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 表1 6顯示實例4 1之放大配方在4 °C或2 5 °C儲存9個月之 長期安定性。顯然至少在此儲存時間，平均滴徑及99〇/〇累 積分布均未由其約6 5與15 0 nm之起初値重大地改變，而且 乳液維持在規格内。 表16· QW8184之物理安定性 儲存時間 平均滴徑，nm 99%累積分布，nm (月數） (平均土 sd) (平均+ sd) 4°C 25〇C 4°C 25〇C 0.0 64±0·8 63 ±2.1 150 土 0.7 150 + 0.7 0.5 67 土2.9 63±2·5 152 土 2.8 149土2.5 1.1 64 土 2·5 65 土2·5 149土2.0 152 + 2.1 3.1 66 土 1 ·2 62 土 2.0 150 土 1.2 148 + 2.5 6.1 63±1.2 64±3.1 150±1·5 152 + 4.0 9.2 64 ± 2.1 62±1.〇 152 士 2.1 153+0.7 12.3 65 土2.1 63±0.5 151±0.7 151±〇·7 18.3 65 土2.3 61 ±2.7 152±1·5 151+2.7 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 實例4 4 化學安定性 已知降解劑 。如由這些 重大變化， 實例4 1之放大配方關於派克羅塔克索效力及 之含量之9個月化學安定性數據示於表17與18 結果所見到，藥物效力或已知降解劑含量並無 而且產物在兩種儲存溫度均保持在規格内。 -69- 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 -----Β7 五、發明說明（67 ) 表1 7 ·在4 °C之派克羅塔克索效力及降解劑 儲存時間 派克羅塔克索 效力 降解劑 ~ (%，平均土sd5 η=3) (月數） 平均土sd，η=3 (mg/ML) 7-Epi-派克羅 塔克索 Baccatin-3 10-去乙驗基- 派克羅塔克索 0.0 8.22±0·64 0.17 ±0.01 0.12 士 0.01 〇·15 土 0·01 0.5 9·48±0·08 0.32 土 0.05 0.15±0.00 0.16 土 0.00 1.1 8·79±0·53 0.31土0.03 0.17 土 0.00 0·17±0·00 3.1 9.50 土 0.07 0.61 土 0.03 0.20±0.00 0.20±0.00 6.1 9·27±0·17 0.28土0.02 0.17 土 0.01 〇.18±0.02 9.2 9·21±0·12 0.36 土 0.02 0.17 土 0.00 0.18±0.01 12.3 8·80 土 0·30 0.30土0.04 0.21 土 0.04 0.20 土 0.03 18.3 9.00 土 0.10 0.29 土 0.02 0.17 土 0.01 0.16 士 0.01 表1 8 .在2 5 °C之派克羅塔克壹效 儲存時間 派克羅塔克索 效力 降解劑 (%，平均土sd，η=3) (月數） 平均土sd，n=3 (mg/ML) 7-Epi-派克羅 塔克索 Baccatin-3 10-去乙醯基- 派克羅塔克索 0.0 8.22 士 0.64 0.17 土 0.01 0.12 土 0.01 0.15 士0.01 0.5 9·10±0·65 0.33 土0.00 0.17 土 0.00 0.17 土 0.01 1.1 8.06 土 0.75 0.32 土 0.04 0.17 土 0.00 0.17 土 0.01 3.1 9.19 土 0.79 0.65 土0.05 0.22 土 0.00 0.22 土 0.00 6.1 9·11±0·71 0.33 土 0.02 0.16±0.02 0.15 土 0.03 9.2 9.02±0.68 0·36 土 0.02 0.18土0.01 0·18±0·01 12.3 8·30 土 0.80 0.35 土 0.07 0.21 土 0.04 0.21 土 0.04 18.3 8.60 土 0.76 0_28 土 0.02 0·18±0·00 0.16 土 0.01 實例4 5 效率評估 -70- (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 裝 tr

本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 五、發明說明（68) 如實例1 8、1 9與3 7所述，評估實例4 1之配方對抗Β 16 黑素瘤之效率，而且結果歸納於表1 8。 表1 9 . QW8184在Β16黑素瘤模型相對Taxol®之抗腫瘤活性 試驗 物件 劑量 mg/kg n=8 行程 天數 存活 (平均土 SD) 天數 %T/Ca 第20曰 %TGIb 第20曰 T-Cc 天數 細胞死 亡對數d 鹽水 對照 q3dx5 17±2 細 _ 載體 對照 q3dx5 20 土 1 93 3 3 塔克索® 20 q3dx5 19 士 5 77 23 3 0.5 QW8184 20 q3dx5 28±7 11 89 10 1.8 QW8184 40 q3dx5 33 士 5 0 100 17 3.0 :%T/C = (經療之腫瘤重量中位數/對照之腫瘤重量中位數） 請 先 閱 讀 背 面 之 注 意 事 項 再 填 Μ 本 頁 裝 訂 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 X 100 b ： %TGI=100-(%T/C) c : T-C=腫瘤生長延遲値（治療組（T)與對照組（C )腫瘤達 到預定大小（> 750毫克）之時間中位數） d :細胞死亡對數二（T-C値）/(3·32Χ腫瘤倍增時間） 在所有之效率終點之前，QW8184以包括或超過塔克索® 之MTD但仍可容忍之劑量在老鼠呈現優異之抗腫瘤活性。 此效果未以派克羅塔克索之先前可注射乳液報告過。MTD 爲由急性毒性研究得到之最大容忍劑量。 實例4 6 效率評估 -71- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 B7 五、發明說明（69 ) QW8184(實例41)對抗人類卵巢異種移植物^Rov—丨之 抗腫瘤活性，其使用上市產品塔克索®作爲參考配方。裸 鼠以套針皮下移植由裸鼠宿主之皮下生長腫瘤培養之 IGROV-1人類卵巢癌。在腫瘤大小爲約5 χ 5毫米時，動物 配對組成治療及對照組，每組含9隻耳朵有標籤之帶腫瘤 老鼠。QW8184以20、40與60毫克/公斤以q3dx5、q4dx5、 及qdx5行程靜脈施藥。塔克索®以其最大容忍劑量2〇毫克/ 公斤以相同之行程靜脈施藥。老鼠每週稱重兩次，並且由 第1曰起以圓規取得腫瘤測量且轉化成腫瘤重量毫克數。 在對照腫瘤達到約1克時中止實驗，並且將腫瘤切片及稱 重且計算各組之平均腫瘤重量。數據歸納於表2〇。 (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -72- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 _B7_ 五、發明說明（7〇 ) 表2 0. QW8184在IGROV-1人類卵巢腫瘤異種移植物相對 塔克索®之抗腫瘤活性 組別 行程 劑量 最終腫瘤重量 %TGI 完全收縮 (mg/kg) (平均土 SEM，mg) 之老鼠 鹽水 q3dx5 對照 874_8 土 178.6 _ 0 QW8184 q3dx5 載體 839.9 土 80.4 4.4 0 QW8184 q3dx5 20 115·9±39·1 93.4 2 QW8184 q3dx5 40 0.1 士 0.1 8 QW8184 q3dx5 60 0.0 土 0.0 画 7 QW8184 q4dx5 20 69.2 土 28.4 99.9 3 QW8184 q4dx5 40 0.0 土 0.0 赚 9 QW8184 q4dx5 60 4.9 土 4.9 8 QW8184 qdx5 20 158.2 土 56.7 88.7 3 塔克索® q3dx5 20 22.3 ±14.2 3 塔克索® q4dx5 20 24.0 ±11.5 麵 3 塔克索® qdx5 20 16.7土9.6 議 2 QW8184在20、40與60毫克/公斤在q3dx5或q4dx5行程之 施藥在所有之劑量生成接近100%腫瘤生長抑制，其各具有 2、8與7及3、9與8個完全腫瘤反應。比較下，塔克索@之 施藥在兩種行程均生成3個完全腫瘤反應。在qdx5行程， QW8184及塔克索®之抗腫瘤活性類似。然而，QW8184被 較佳地容忍且無毒性死亡，而在塔克索®注意到六個毒性 死亡。QW8184以劑量有關方式對抗IGROV-1人類卵巢異種 -73- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 - B7 五、發明說明（71 ) 移植物模型爲高度有效，不論劑量行程如何，而 ^ 克索®較佳地容忍。 匕塔 實例4 7 藥學熱力學研究 在老氣以單次1 〇毫克/公斤靜脈施藥測定實例4 i之配方 (QW8184)之藥學熱力學，其使用塔克索⑧作爲參考配方了 以3小時浸注（Taxol”或填塞物劑量（QW8184)對雄鼠或雌 鼠靜脈施藥。在劑量施藥後〇_72小時收集血液樣品，藉 離心製備血漿且使用高性能液相層析術（HpLc)法及 LC/MS/MS偵檢分析派克羅塔克索濃度。使用模型獨立法 以平均複合血漿濃度-時間外形實行藥學熱力學分析。推 衍之藥學熱力學參數示於表21。如下測定藥學熱力學表 數： … 多

Tmax :達到最咼血漿含量（cmax)所需之時間 Cm ax ·樂物之取南血裝濃度 AUC0-t ·在血漿丨辰度-時間曲線下由時間零至時間t (血裝 樣品收集結束）之非外插區域 AUC^ :在血漿濃度-時間曲線下由時間零至無限大之外插 區域

Ke ··排除速率常數 T1/2 :排除半生期 vd :分布體積 C L :血漿清澈度

Vss :穩定狀態之分布體積 -74- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4规格（210 X 297公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 訂·· 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 1290052 A7 B7 五、發明說明（72 ) 表2 1 . QW8184或塔克索@以10毫克/公斤（70毫克/平方米） 對老鼠靜脈施藥後之派克羅塔克索推衍之藥學熱力學參數 藥學熱力學參數 QWi Π84 Taxol® 雄性 雌性 雄性 雌性 Tmax(hr) 0.083 0.083 3 3 Cmax(ng/mL) 58950 53900 5867 7227 AUC〇.t(ng.hr/mL) 35504 32761 18138 22701 AUCoJng.hr/mL) 35551 32829 18347 23002 Keihr·1) 0.0940 0.1375 0.1283 0.0754 Ti/2(hr) 7.38 5.04 5.40 9.20 Vd(L/kg) 2.99 2.22 4.25 5.77 CL (L/hr/kg) 0.281 0.305 0.545 0.435 Vss(L/kg) 0.228 0.242 1.44 1.09 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 QW8184之靜脈填塞物施藥後之Cmax及AUC：。値均遠比塔克 0—〇〇 索®之靜脈浸注後之對應値高。派克羅塔克索在血漿中之 終止T1/2對於兩種治療爲類似的。塔克索®之組織結合比 QW8184廣泛，如在穩定狀態之分布體積（Vss)之差異所 示。雄性與雌性動物之間未觀察到派克羅塔克索之藥學熱 力學參數之重大差異。 實例4 8 用於靜脈施藥之派克羅塔克索之生育三烯酚乳液 製備以下之生育三晞酚乳液，其含5毫克/毫升之派克羅 塔克索且適合在老鼠用於靜脈癌治療。 -75- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 _B7_ 五、發明說明（73 ) (請先閱讀背面之注音？事項再填寫本頁) 由 Golden Jomalina Food Industries公司（馬來西亞之 Kuala Lumpur)得到Gold Tri-E®生育三晞紛濃縮物。泛紅棕色油 之HPLC檢驗顯示四個主要峰。吾人估計油之α TE爲〜0.3， 主要由於約20%之殘餘d- α -生育酚含量。其以2份之d -生 育酚（Sigma化學公司）稀釋以將αΤΕ調整至0.1。藉由首先 將派克羅塔克索以熱及超音波溶於PEG-400而製備藥物油 溶液。然後加入TPGS及生育三烯酚油。最後，加入波羅 沙體且在7 2 °C熔化而產生均勻透明琥珀色油。混合物在 rotevap在眞空下脱氣且保持在4 5 °C直到使用。 成份 油相中之重量 最終百分比（％) PEG-400 3.10 gm 6.0% 派克羅塔克索 0.25 gm 0.5% TPGS 2.52 gm 5.0% 生育三烯酚油混合物 4.03 gm 8.0% 波羅沙體 0.50 gm 1.0% 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在加成前使包括4 0毫升之5 mM擰檬酸TEA緩衝液，pH 6.8之水相升至4 5 °C。在加成時，生成混合物劇烈地混合 以鬆開燒瓶壁上之任何黏附油。懸浮液然後置於進料容器 中且在C 5均化器（加拿大渥太華之Avestin公司）中以連續 循環處理1 0分鐘。處理條件爲45 °C進料溫度，20 kpsi處 理壓力，120毫升/分鐘流速。將設爲2 2°C之熱交換器置於 出口以去除均化器產生之過量熱。在穩定狀態均化時，進 料容器中之溫度測量爲4 4 X：。 76- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 五、發明說明（74) 處理後，收集產物且冷卻至室溫。乳液然後最後經心m 濾、器過濾而滅菌，而且在Nicomp 370光子校正井雄斜卜制 量時具有〜70 nm之平均粒度。爲了處理之方便起見，加入 Ge.ntamycin 1 5 " g/亳升作爲防腐劑。 其低黏度之結果，使用冨生育三烯酚部份（G〇ld Tri_E)使 乳液比以d，l-沈-生育酚（R0Che Vitamins公司）作爲油相之類 似乳液實質上更易處理。 實例4 9 用於靜脈施藥之派克羅塔克索之d -生育驗乳液· 小規模混合物在配方發展中具有價値。在此實例中，由 Sigma化學公司得到90%純度之具有〜〇.〇之沈TE含量之d-d-生育酚。依照下表製備各混合物之藥物溶液： (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 裝 系統 派克羅塔克索(mg) d -生育酚(mg) A 8.5 83.2 B 12.0 81.4 C 20.2 84.4 訂： 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 首先使用脱水乙醇溶解藥物結晶。樣品然後在rotevap置於 眞空下直到乙醇去除，如重量分析所測定。冷卻及檢驗所 有之樣品。各樣品包括派克羅塔克索在j -生育酚之深琥 拍色油中之溶液且爲光學上透明的。計算之派克羅塔克索 於油中濃度示於以下。 -77- 卜紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 五、發明說明（75 系統 羅塔克索濃度 A B 12.8 gm% C gm%_ “口啊Τ加入50¾克之TPGS及10毫克之 波羅體407作爲界面活性劑。加入pEG_4〇〇⑼毫克作爲 滲透質。混合物以熱溶解以形成金色油。如果視情況地選 擇TPGS界面活性劑，這些油之從te含量爲〇〇^te單位， 而且如果僅使用生育酚油相測量則爲〇 〇從ΤΕ單位。 此油藥物濃縮物然後濃縮至45Ό且加入85叫L之溫 =使用微尖超音波笛製備粗預乳液。顯微鏡檢驗顯示實 驁上小於1 〇 A m直徑之顆粒之稠懸浮液，其在均化器中進 步處理，调整pH及滲透強度，並且最終減菌過遽而適合 非經腸胃注射。 實例5 0 用於靜脈>王射施藥之派克羅塔克索（BMS_18879乃之碳酸甲 酯衍生物之乳液配方 画-188797首先溶於乙醇中然後加入^生育紛、⑽ 9-45(如果存在）、TPGS、波羅沙體4〇7、及pEG *⑻，且在 高溫約6(TC)混合。然後在高溫在眞空下去除乙醇以產生 加入藥物之透明油相。其繼而在45〇c混合注射用水以製備 預乳液。藉由在Avestin C5均化器中以19_2〇 Kpsii溫度維 持在35至45 °C而將預乳液均化1〇-15分鐘而製備最終乳 液。一些代表性乳液之組合物示於下表。這些乳液之平均 (請先閱讀背面之注杳？事項再填寫本頁) 裝 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 -78- 1290052 A7 _B7_ 五、發明說明（76 ) (請先閱讀背面之注咅？事項再填寫本頁) 滴徑及99%累積分布測定爲各小於0.1至0.2" m。這些乳液 爲可過濾滅菌的，在室溫爲安定的，而且在動物中極可容 忍及有效。 配方組合物 A B C (% w/w) (% w/w) (% w/w) BMS-188797 0.32 0.5 0.5 a-生育酚 8.0 15.0 10.0 Myvacet 9-45 (蒸餾之乙醯化 單甘油酯） 麵 細 5.0 TPGS 5.0 7.5 6.5 波羅沙體407 1.0 2.5 1.0 PEG 400 6.0 6.0 6.0 水 79.7 68.5 71.0 實例5 2 可拉里斯若黴素之乳液配方 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 由Wockhardt公司（印度Delhi)得到如自由驗之可拉里斯若 黴素，一種大環内醋抗生素。由Eastman(田納西州 Freeport)得到維生素Ε ί虎ί白酸酯（VESA)。由Abitec公司（威 斯康辛州Janesville)得到Capmul MCM ;由BASF公司（紐澤 西州Parsippany)得到波羅沙體F127 ;由Spectrum化學公司 (加州Gardenia)得到PEG-400，及由Sigma化學公司（密蘇里 州St Louis)得到d_ d -生育酚。使用2份d -生育酚製備包括 -79- 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 1290052 A7 Γ Β7 五、發明說明（77 d-d-生育驗及Capmixl MCM之油相。油相之αΤΕ爲〇·〇。然 後如下表所示加入界面活性劑及可拉里斯若黴素。在7 〇 使用無水乙醇溶解成份且乙醇然後在眞空下去除。 成份 油相中之重量 最終百分比（％) β -生育酚 2.53 gm 5.0%

Capmul MCM (Cg/ClQ早-/二甘油酉旨） 波羅沙體F127 可拉里斯若黴素 維生素E琥珀酸酯 1.28 gm 2.5% 2.98 gm 0.53 gm 0.45 gm 3.0% 0.5% 0.9% (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 在加成前使包括40毫升之5 mM檸檬酸TEA緩衝液，pH 6 · 8之水相升至4 5 °C。在加成時，生成混合物劇烈地混合 以鬆開燒瓶壁上之任何黏附油。懸浮液然後置於進料容器 中且在C5均化器（加拿大渥太華之Avestin公司）中以連續 循環處理3分鐘。處理條件爲4 5 °C進料溫度，20 kpsi處理 壓力’ 120毫升/分鐘流速。將設爲22 °C之熱交換器置於出 口以去除均化器產生之過量熱。在穩定狀態均化時，進料 容器中之溫度測量爲4 4 °C。 處理後，收集產物且冷卻至室溫。乳液然後最後經〇2e m 滤器過滤而滅菌，而且在Nicomp 370光子校正光譜計上測 量時具有52 nm之平均粒度。 -80-

Claims (1)

1. I290Q5〇g1〇9925號專利申請*—中文申請鼻利笳圚替掄申你年g $ A8 B8 C8 Μ 8· 3 〇 申請專利範園

   1· 一種藥學組合物，其包含： 約0.1%至約20%之一或更多種化學治療劑，其選自 塔克杉（taxanes)、紫杉鹼（taxines)、塔克類固醇（tax〇ids) 與微管導向劑所組成之群， 約1 %至約9 0 %之生育酉分， 共溶劑，及 約1%至約90 〇/〇之生育酚聚乙二醇琥珀酸酯，其中該 化學治療劑先溶於該生育酚或該共溶劑中，且其中該= 合物係實質上無單羥基醇。 2.根據申請專利範圍第丨項之藥學組合物，其中該共溶劑 係選自二甲基亞砜、二甲基醯胺、乙二醇、苄醇、苯曱 酸苄酯、丙二醇、甘油、花楸醇、甘露醇、聚乙二醇、 N-甲基-2-吡咯啶酮、與聚乙烯基吡咯啶酮。 3·根據申請專利範圍第2項之藥學組合物，其中該聚乙一 醇具有約100至約1〇,〇〇〇之分子量。 4.根據申請專利範圍第1項之藥學組合物，其中該生育配、 係選自α ·生育酚、5 生育.酚、7 -生育酚、冷·生育二 烯酚、5 _生育三烯酚、r_生育三埽酚、去甲基生^ ^ 婦酚與二去甲基生育三烯酚。 土 ㈢— 5·根據申請專利範圍第丨、3或4項之藥學組合物，其進一 步包含水相且為乳液、微乳液或膠微粒溶液之形式。 6·根據申請專利範圍第丨、3或4項之藥學組合物，其係自 動乳化。 μ 7.根據申請專利範圍第6項之藥學組合物，其封包於膠囊 中。 ^ 64358-960830.doc 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210X 297公釐） 1290052 A8 B8 C8 D8 六、申請專利範圍 ~ 8.根據申請專利範圍第1項之藥學組合物，其中化學治療 劑選自派克羅塔克索（paclitaxel)及派克羅塔克索之同系 物。 9·根據申請專利範圍第1項之藥學組合物，其中化學治療 劑選自派克羅塔克索、派克羅塔克索之碳酸甲酯衍生 物、2 -去苯甲醯基-2-芳醯基及C-2-乙醯氧基-C-4-苯甲 敗酿派克維塔克索、7 _去氧塔克索（7 - deoxytaxol)、C-4 p丫淀派克羅塔克索，及派克羅塔克索與天然或合成聚合 物、脂肪酸、磷脂、或1,2-二醯氧基丙烷-3_胺之共輛 物。 10·根據申請專利範圍第1項之藥學組合物，其中化學治療 劑包含派克羅塔克索。 11 ·根據申請專利範圍第1項之藥學組合物，其中化學治療 劑包含多西塔克索（docetaxel)及多西塔克索之同系物。 12.根據申請專利範圍第1項之藥學組合物，其中化學治療 劑選自艾伯什隆（epothilone) A與B、得恩可得摩利 (discodermolide)、弄塔克索（nonataxel)、及艾羅什略比 (eleutherobin) ° 13 ·根據申請專利範圍第1、3或4項之藥學組合物，其中該化 學治療劑具有大於約2之辛醇/水分配係數。 14·根據申請專利範圍第1、3或4項之藥學組合物，其中該 生育紛聚乙二醇琥珀酸酯為α -生育酚聚乙二醇琥珀酸 酉旨。 15.根據申請專利範圍第1項之藥學組合物，其中生育酚對 生育酴聚乙二醇琥珀酸酯之比例為約1 :丨至約2〇: i ^張尺度適财_冢標準(CNS) A鐵格(⑽χ撕公董) — ------ 129〇〇52

   W/^v 〇 16，根攄由 甲#專利範圍第1、3或4項之藥學組合物，其進一 _ I含第二界面活性劑，其選自聚氧化丙烯-聚氧化乙 、非離子性嵌段共聚物、脂肪酸酯、脂防酸胺、甘油與 丙—醇酿、聚乙二醇酯、蔗糖脂肪酸酯、磷脂及聚乙二 醇化磷脂。 17味 艮據申請專利範圍第1 6項之藥學組合物，其中第二界面 活丨生劑選自波羅沙體（P〇l〇xamer) 407、聚乙二醇660經基 硬脂酸酿、卵磷脂及二肉豆蔻醯基磷脂醯乙醇胺·聚乙 二醇。 18.根據申請專利範圍第丨、3或4項之藥學組合物，其中實 質上所有之治療劑或化學治療劑在油相中。 19·根據申請專利範圍第丨、3或4項之藥學組合物，其為乳 液 < 形式或其形成具有約1 0至約500 nm之粒度之乳液。 2〇·根據申請專利範圍第丨、3或4項之藥學組合物，其為乳 液之形式或其形成具有約1 0至約1〇〇 nm之粒度之乳液。 21. 根據申睛專利範圍第1、3或4項之藥學組合物，其中該 單經基醇為乙醇。 22. 根據申請專利範圍第1、3或4項之藥學組合物，其進一 步包含一或更多種乙醯化甘油酯。 23. 根據申請專利範圍第2 2項之藥學組合物，其中乙醯化甘 油酯包含蒸餾之乙醯化單甘油酯。 24. 根據申請專利範圍第丨、3或4項之藥學組合物，其係用 於治療人類或動物體之方法中。 25. —種製備含派克羅塔克索/生育酚溶液之方法，其包含 64358-960830.doc_ · 3 · 本紙張尺度適财® ®家鮮(CNS) A4規格(210 X 297公釐) --- 1290052 έβ8 C8 D8 六、申請專利範圍 a) 結合派克羅塔克索與聚乙二醇，以提供一第一含派 克羅塔克索溶液； b) 添加生育酚/聚乙二醇共軛物至該第一含派克羅塔克 索溶液中，以提供第二含派克羅塔克索溶液；及 c) 添加生育酚至該第二含派克羅塔克索溶液中，以提 供第三含派克羅塔克索溶液。 26. —種製備含派克羅塔克索/生育酚乳液之方法，其包含 a)結合派克羅塔克索與聚乙二醇，以提供一第一含派 克維塔克索溶液， b )添加生育酚/聚乙二醇共軛物至該第一含派克羅塔克 索溶液中，以提供第二含派克羅塔克索溶液； c) 添加生育酚至該第二含派克羅塔克索溶液中，以提 供第三含派克羅塔克索溶液； d) 將該第三含派克羅塔克索溶液與一水相摻混，以形 成一預乳液；及 e) 均勾化該預乳液以形成一乳液。 64358-960830.doc -- 本紙張尺度適用中國國家標準(CNS) A4規格(210 X 297公釐)